MXPA03004717A - Compuestos especificos para el receptor a1, a2 y a3 de adenosina y usos de los mismos. - Google Patents

Abstract

La invencion pertenece a compuestos que inhiben de manera especifica a los receptores A1, A2A y A3 de adenosina y al uso de estos compuestos para tratar una enfermedad asociada con los receptores A1, A2A y A3 de adenosina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapeuticamente efectiva de los compuestos.

Description

COMPUESTOS ESPECIFICOS PARA EL RECEPTOR Ai, ASA Y A3 DE ADENOSINA Y USOS DE LOS MISMOS A lo largo de esta solicitud, se hace referencia a compuestos que se unen de manera específica a i) receptores Ai de adenosina, (tales como las páginas 4-76, 130-175 y 257-287 entre otras) , ii) receptores A2a de adenosina (tales como las páginas 176-201 y las páginas 288-293 entre otras) , y los receptores A3 de adenosina (tales como las páginas 202-256 y 294-300 entre otras) .

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La adenosina es un modulador ubicuo de numerosas actividades fisiológicas, en particular dentro de los sistemas cardiovascular y nervioso. Los efectos de la adenosina parecen ser mediados por proteínas receptoras de superficie celular específicas. La adenosina modula diversas funciones fisiológicas incluyendo la inducción de sedación, vasodí 1 atac i ón , supresión de la velocidad y de la contractilidad cardiaca, inhibición de la capacidad de agregación plaquetaria, estimulación de gluconeogéne s i s y la inhibición de lipólisís.

Además de sus efectos sobre la adenilato ciclasa, se ha demostrado que la adenosina abre los canales de potasio, reduce el flujo a través de los canales de calcio, e inhibe o estimula el recambio de f o s f o inos i i do a través de mecanismos mediados por receptor (véase por ejemplo, C.E. Muller y B. Stein "Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutic Aplications, "Current Pharmaceutical Design, 2:501 (1996) y C.E. Muller "Ai-Adenos ine Receptor Antagonists," Exp . Opín. Ther. Patente 7(5) : 419 (1997) ) . Los receptores de adenosina pertenecen a la superfamilia de receptores de purina los cuales actualmente están subdivididos en receptores Pi (adenosina) y receptores P2 (ATP, ADP, y otros nucleótidos) . Hasta el momento se han clonado cuatro subtipos de receptor para el nucleósido adenosina a partir de varias especies incluyendo humanos. Dos subtipos de receptor (A] y A2a) presentan afinidad para la adenosina en el intervalo nanomolar mientras que los otros dos subtipos conocidos A2b y A3 son receptores de baja afinidad, con una afinidad para la adenosina en el intervalo micromolar bajo. La activación del receptor Ai y A3 de adenosina puede conducir a una inhibición de la actividad de la adenilato ciclasa, mientras que la activación de A2a y A2b ocasiona una estimulación de la adenilato ciclasa. Se han desarrollado unos cuantos antagonistas para AL para el tratamiento de enfermedad cognitiva, insuficienci renal y arritmias cardiacas. Se ha sugerido que los antagonistas de A2 pueden ser benéficos para pacientes que padecen de orbus Parkinson (enfermedad de Parkinson) . En particular, en vista del potencial para suministro local, los antagonistas del receptor de adenosina pueden ser valiosos para el tratamiento de inflamación y asma alérgica. La información disponible (por ejemplo, Nyce & Metzger "DNA antisense Therapy for Asthma in an Animal Model" Nature (1997) 385: 721-5) indica que en este contexto f i s iopat ol óg i co , los antagonistas de Ai pueden bloquear la contracción de músculo liso subyacente al epitelio respiratorio, mientras que los antagonistas del receptor A2b ° A3 pueden bloquear la desgranulación de los mastocitos, mitigar la liberación de histamina y otros mediadores de inflamación. Los receptores A2b han sido descubiertos a lo largo del tracto gastrointestinal, especialmente en el colon y en el epitelio intestinal . Se ha sugerido que los receptores A2b son mediadores en la respuesta al AM?c (Strohmeier et al. , Bio. Chem. (1995) 270 : 2387 -94 ) . También se ha demostrado que los receptores de adenosina están presentes en las retinas de diversas especies de mamíferos incluyendo las especies bovina, porcina, monos, ratas, cobayos, ratones, conejos y humanos (véase Blazynski et al. , Di serete Di stributions of Adenosine Receptors in Mammalian Retina, Journal of Neurochemi s tr , volumen 54, páginas 648-655 (1990) ; Woods et al. , Charac teri zation of Adenosine ??-Receptor Binding Sites in Bovine Retinal Me branes, Experimental Eye Research, volumen 53, páginas 325-331 (1991) ; y Braas et al . , Endogenous adenosine and adenosine receptors local i zed to gangl ion cells of the retina, Proceedings of the National Academy of Science, volumen 84, páginas 3906-3910 (1987) ) . Recientemente, Williams reportó la observación de sitios de transporte de adenosina en una línea celular de retina de humano en cultivo (Williams et al. , Nucleoside Transport Sites in a Cultured Human Retinal Cell Line Established By SV 40 T Antigen Gene, Current Eye Research, volumen 13, páginas 109- 118 (1994) ) . Anteriormente se han sugerido compuestos que regulan la absorción de adenosina como agentes terapéuticos potenciales para el tratamiento de daño a la retina y a la cabeza del nervio óptico. En la patente E.U.A. No. 5,780,450 para Shade, Shade discute el uso de inhibidores de absorción de adenosina para el tratamiento de trastornos oculares. Shade no describe el uso de inhibidores del receptor A3 específicos. El contenido completo de la patente E.U.A. No. 5,780,450 se incorpora en la presente invención para referencia. Son necesarios antagonistas del receptor de adenosina adicionales como herramientas farmacológicas y son de interés considerable como fármacos para los estados y/o condiciones patológicas antes mencionadas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se basa en compuestos que se unen de manera selectiva al receptor Ax de adenosina, con lo cual se trata una enfermedad asociada con el receptor Ai de adenosina en un individuo, administrando al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de tales compuestos. La enfermedad que será tratada está asociada con enfermedad cognitiva, insuficiencia renal, arritmias cardiacas, epitelio respir torio, liberación de transmisor, sedación, vasoconst icci n, bradicardia, inotropia y dromotropia cardiaca negativa, bronqui ocons t r i ce i ón , quimiotaxis de neutrófilo, condición de reflujo, o condición ulcerante. La presente invención se basa, por lo menos en parte, en el descubrimiento que se pueden utilizar ciertas 7 - de s a zapur ina s N-6 sustituidas, descritas más adelante, para tratar un estado que responda a 7 -desazapurina N-6 sustituida. Los ejemplos de tales estados incluyen aquellos en los cuales se incrementa la actividad de los receptores de adenosina, por ejemplo, bronquitis, trastornos gastrointestinales o asma. Estos estados se pueden caracterizar porque la activación del receptor de adenosina puede conducir a la inhibición o estimulación de la actividad de adenilato ciclasa. Las composiciones y métodos de la invención incluyen 7 - de sa zapu i ñas N-6 sustituidas enantioméricamente o di a s t ereomé ri c ament e puras. Las 7 -desazapurinas N-6 sustituidas preferidas incluyen aquellas que tienen una porción acetamida, carboxamida, ciclohexilo sustituido, por ejemplo c i c 1 ohexanol , o una porción urea unida al nitrógeno N-6 a través de una cadena de alquíleno. La presente invención pertenece a métodos para modular un receptor o receptores de adenosina en un mamífero, administrando al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7-desazapurina N-6 sustituida, de modo tal que se presente la modulación de la actividad del receptor de adenosina. Los receptores de adenosina apropiados incluyen las familias de Ai, A2 o A3. En una modalidad preferida, la 7 -desazapurina N-6 sustituida es un antagonista del receptor de adenosina. La invención también pertenece a métodos para tratar trastornos de 7 - de s z apurina N-6 sustituida, por ejemplo, asma, bronquitis, rinitis alérgica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, trastornos renales, trastornos gastrointestinales y trastornos oculares, en un mamífero administrando al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7 -desazapurina N-6 sustituida, de tal manera que se presente el tratamiento del trastorno en el mamífero. Las 7 - de sa zapu i ñas N-6 sustituidas apropiadas incluyen aquellas ilustradas por la fórmula general I. y las sales farmacéut camente aceptables de la misma. Ri y R2 son cada uno de manera independiente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida o juntos forman un anillo heteroc í el ico sustituido o no sustituido. R3 es una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida. R4 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida. R5 y R6 son cada uno de manera independiente un átomo de halógeno, por ejemplo, cloro, flúor, o bromo, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida, o R5 es carboxilo, ésteres de carboxilo, o carboxamidas , o R4 y R5 o R5 y R6 forman juntos un anillo het e roc í c 1 i co o carbocíclico sustituido o no sustituido.

En algunas moda idades, R1 y R2 pueden ser cada uno, de manera independiente, porciones cicloalquilo o he e roari 1 al qui 1 o sustituidas o no sustituidas. En otras modalidades, R3 es un átomo de hidrógeno o una porción heteroarilo sustituida o no sustituida. Incluso en otras modalidades, R4 , Rs y R6 pueden ser cada uno, de manera independiente, porciones heteroarilo. En una modalidad preferida, Ri es un átomo de hidrógeno, R2 es un ciclohexanol , por ejemplo ans - cic lohexanol , R3 es fenilo, R4 es un átomo de hidrógeno, RE es un grupo metilo y g es un grupo metilo. Incluso en otra modalidad, R± es un átomo de hidrógeno, R2 es R3 es fenilo, R4 es un átomo de hidrógeno y R5 y R5 son grupos metilo. La invención también pertenece a composiciones f rmacéuticas para tratar un estado que responda a 7 - desa zapurina N-6 sustituida en un mamífero, por ejemplo, asma, bronquitis, rinitis alérgica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, trastornos renales, trastornos gastrointestinales y trastornos oculares. La composición farmacéutica incluye una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7 - desazapurina N-6 sustituida y un vehículo f rmacéuticamente aceptable. La presente invención también pertenece a composiciones f rmacéuticas empacadas para tratar un estado que responda a 7 -desazapurina N-6 sustituida en un mamífero. La composición farmacéutica empacada incluye un contenedor que contiene una cantidad terapéu ic mente efectiva de por lo menos una 7 - de s a zapu i a N-6 sustituida e instrucciones para utilizar la 7 -desazapurina N-6 sustituida para tratar un estado que responda a 7-desazapurina N-6 sustituida en un mamífero. La invención también pertenece a compuestos de la fórmula I en la cual : Ri es hidrógeno; R2 es cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquilo sustituido o no sustituido, o i y R2 forman juntos un anillo he t eroc í c 1 i co sustituido o no sustituido; R3 es arilo no sustituido o sustituido; R4 es hidrógeno; y R5 y Re son cada uno, de manera independiente, hidrógeno o alquilo, y las sales f rmacéuticamente aceptables de los mismos. Las desazapurinas de esta modalidad pueden ser, en forma conveniente, antagonistas selectivos del receptor A3. Estos compuestos pueden ser útiles para numerosos usos terapéuticos tales como, por ejemplo, el tratamiento de asma, insuficiencia renal asociada con insuficiencia cardiaca, y glaucoma. En una modalidad articularmente preferida, la desazapurina es un profármaco soluble en agua que puede ser metabolizado in vivo hasta un fármaco activo mediante, por ejemplo, hidrólisis catalizada por esterasa. Incluso en otra modalidad, la invención presenta un método para inhibir la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo A3) en una célula, poniendo en contacto la célula con 7-desazapurina N-6 sustituida (por ejemplo, de preferencia, un antagonista del receptor de adenosina) . En otro aspecto, la invención presenta un método para tratar daño al ojo de un animal (por ejemplo, un humano) administrando al animal una cantidad efectiva de una 7 -desazapurina N-6 sustituida de la fórmula I. De preferencia, la 7-desazapurina N-6 sustituida es un antagonista de los receptores A3 de adenosina en las células del animal. El daño está en la retina o en la cabeza del nervio óptico y puede ser agudo o crónico. El daño puede ser el resultado de, por ejemplo, glaucoma, edema, isquemia, hipoxia o trauma. La invención también presenta una composición farmacéutica que comprende un compuesto N-6 sustituido de la fórmula I. De preferencia, el preparado farmacéutico es una formulación oftálmica (por ejemplo una formulación para inyección periocular, retrobulbar o intraocular, una formulación sistémica, o una solución para irrigación quirúrgica) . Incluso en otra modalidad, la invención presenta un compuesto que tiene la fórmula II: en la cual X es N o CRS ; Rx y R2 son cada uno de manera independiente hidrógeno, o alcoxi, aminoalqui lo , alquilo, arilo o alquilarilo sustituido o no sustituido, o juntos forman un anillo heterocíclico sustituido o no sustituido, con la condición que tanto Ri como R2 no sean ambos hidrógeno; R3 es alquilo, arilalquilo, o arilo sustituido o no sustituido; R4 es hidrógeno o alquilo de Ci-C6 sustituido o no sustituido; L es hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, o R4 y L forman juntos un anillo he t e roe í c 1 i co o carbocíclico sustituido o no sustituido; e es hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, o halógeno; Q es CH2 , O, S, o NR7 , en la cual R7 es hidrógeno o alquilo de Ci-C6 sustituido o no sustituido; y W es alquilo, c i c 1 oa 1 qui 1 o , arilo, arilalquilo, biarilo, heteroarilo sustituido o no sustituido, carbonilo sustituido, tiocarbonilo sustituido, o sulfonilo sustituido; con la condición que si R3 es pirrolidino, entonces R4 no es metilo. La invención también pertenece a sales y profármacos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la invención. En una modalidad conveniente, X es CR6 y Q es CH2, 0, ?, o NH en la fórmula II, en la cual R6 es como se definió anteriormente. En otra modalidad de la fórmula II, X es N. La invención también pertenece a un método para inhibir la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo un receptor de adenosina A2b) en una célula poniendo en contacto la célula con un compuesto de la invención. De preferencia, el compuesto es un antagonista del receptor. La invención también pertenece a un método para tratar un trastorno gastrointestinal (por ejemplo, diarrea) o un trastorno respiratorio (por ejemplo, rinitis alérgica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica) en un animal administrando a un animal una cantidad efectiva de un compuesto de la fórmula II (por ejemplo, un antagonista de A2b) · De preferencia, el animal es un humano. Esta invención también presenta un compuesto que tiene la estructura: (IV) en la cual : Rx es trans-4 -hidroxiciclohexilo , 2-met i lamino-carbonil amino -ciclohexilo, 2-metilamino-carboni 1 amino - c icl ohexi 1 o , acetamido - et i lo , o metilamino-carbonilamino-etilo; en la cual Ar es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido.

En una modalidad del compuesto, Ar es fenilo, pirrol, tiofeno, furano, tiazol, imidazol, pirazol , 1 , 2 , 4 - t ri a z ol , piridina, 2 ( 1H) -piridona , ( 1H ) - p i r idona , pirazina, i r imi di n , piridazina, isotiazol, ÍBoxazol, oxazol, tetrazol, naftaleno, tetralina, naftiridina, benzofurano, benzotiof eno , indol, 2 , 3 - dihidroindol , lH-indol, indolina, benzo i ra zol , 1 , 3 -benzodioxol , benzoxazol, purina, cumarina, cromona, quinolina, tetrahidroquinol ina isoquinol ina , bencimidazol , quinazolina, pirido[2,3-b]pirazina, pirido{3,4-b]pirazina, pirido(3,2-c]piridazina, purido[3,4-b] -piridina, lH- i ra zol [ 3 , 4 - d] i r imidina , pteridina, 2(1H)~ quinolona, 1 ( 2H) - isoquinolona , 1 , 4 - enc i soxa z ina , benzotiazol, quinoxalina, quinol ina-N- óxido , i soqu inol in - - ó ido, quinoxal ína-N-óxído, quinazol ina-N- óxido , benzoxazina, ftalazina, cinolina. o tiene una estructura: en la cual Y es carbono o nitrógeno; en la cual R2 y R2 : son de manera independiente H, alquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, halógeno, metoxi, metilamino, o metiltio; en la cual R3 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en la cual dicho alquilo sustituido es -C(R7) (RS)XR5, en la cual X es O, S, o NRS , en la cual R7 y Rfi son cada uno de manera independiente H o alquilo, en la cual R5 y R6 Bon cada uno de manera independiente alquilo o cicloalquilo , o R5 , R6 y el nitrógeno forman juntos un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones; en la cual R4 es H, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, o una sal f rmacéuticamente aceptable, o un derivado de profármaco, o un metabolito biológicamente activo; con la condición que cuando R sea ace t i 1 aminoe t i lo , Ar no sea 4-piridilo. Esta invención también pertenece a un compuesto que tiene la estructura: V en la cual Ri es arilo, arilo sustituido, o heteroarilo ; en la cual R2 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloalquilo ; en la cual R3 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en la cual dicho alquilo sustituido es -C(RS) (R )NR4R5, en la cual R6 y R7 son cada uno H o alquilo, en la cual R4 y R5 son cada uno alquilo o cicloalquilo, o R4 , R5 y el nitrógeno forman juntos un sistema de anillo que tiene entre 4 y 7 eslabones . Esta invención también presenta un método para inhibir la actividad de un receptor Ai de adenosina en una célula, el cual comprende poner en contacto dicha célula con los compuestos antes menc ionados .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCION A continuación se describen y se indican de manera más particular en las reivindicaciones, las características y otros detalles de la invención. Se debe entender que las modalidades particulares de la invención se presentan a manera de ilustración y no como limitaciones de la misma. Se pueden utilizar las características principales de esta invención en diversas modalidades sin alejarse del campo de la invención. La presente invención pertenece a métodos para tratar un estado que responda a 7 - de s a zapuri na N-6 sustituida en un mamífero. Los métodos incluyen administración al mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7 -desazapurina N-6 sustituida, descrita más adelante, de modo tal que se presente el tratamiento del estado que responda a 7 - desazapurina N-6 sustituida en el mamífero. La frase "estado que responda a 7-desazapurina N-6 sustituida" pretende incluir un estado o condición patológica c racterizada por su capacidad de respuesta al tratamiento con una 7-desazapurina N-6 sustituida de la invención como la descrita más adelante, por ejemplo, el tratamiento incluye una reducción significativa de por lo menos un síntoma o efecto del estado patológico, que se obtiene con una 7 -desazapurina N-6 sustituida de la invención. Típicamente, tales estados están asociados con un incremento de adenosina dentro de un hospedero de modo tal que el hospedero con frecuencia experimenta síntomas fisiológicos que incluyen, pero no se limitan a, liberación de toxinas, inflamación, coma, retención de agua, ganancia de peso o pérdida de peso, pancrea itis, enfisema, artritis reumatoide, osteoartritis , insuficiencia de órganos múltiples, síndrome de tensión respiratoria en infantes y en adultos, rinitis alérgica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, trastornos oculares, trastornos gas rointestinales, promoción de tumor de piel, inmunodef iciencia y asma. (Véase por ejemplo, C.E. uller y H. Stein "Adenosine Receptor Antagonista : Structures and Potential Therapeutic Applications", Current Pharmaceuti cal Design, 2:501 (1996) y C.E. Muller "Ai -Adenos ine Receptor Antagonista 11 , Exp . Opin. Ther. Patenta 7(5) :419 (1997) e I. Feoktistove, R., Polosa, S. T. Holgate e I. Biaggioni "Adenosine A2B receptora: a novel therapeutic target in asthma?" TiPS 19:148 (1998)) . Los efectos asociados con frecuencia con tales síntomas incluyen, pero no se limitan a, fiebre, respiración corta, náusea, diarrea, debilidad, dolor de cabeza, e incluso muerte. En una modalidad, un estado que responda a 7 - de zapurina N-6 sustituida incluye aquellos estados patológicos que son mediados por la estimulación de los receptores de adenosina, por ejemplo, Ai, A2a, A2h , A3 , etc. , de modo tal que se modulan las concentr ciones de calcio en las células y/o la activación de PLC ( fosf olipasa C) . En una modalidad preferida, un estado que responda a 7 - de sa z apur i na N-6 sustituida está asociado con el receptor o receptores de adenosina, por ejemplo, la 7-desazapurina N-6 sustituida actúa como un antagonista. Los ejemplos de estados que presentan respuesta apropiados, los cuales pueden ser tratados con los compuestos de la invención, por ejemplo, los subtipos de receptor de adenosina los cuales median efectos biológicos, incluyen efectos en el sistema nervioso central (SNC) , efectos cardiovasculares, efectos renales, efectos res iratorios, efectos inmunológicos , efectos gastrointestinales y efectos metabólicos. Se puede asociar la cantidad relativa de adenosina en un individuo con los efectos indicados más adelante; es decir los niveles incrementados de adenosina pueden inducir un efecto, por ejemplo, una respuesta fisiológica no deseada, por ejemplo, un ataque de asma. Los efectos en SNC incluyen liberación reducida de transmisor (Ai) , sedación , actividad del aparato locomotor reducida (A2a) , actividad an i convul s i ant e , estimulación de quimiorreceptor (A2) e hipera 1 ge s i a . Las aplicaciones terapéuticas de los compuestos de la invención incluyen el tratamiento de demencia, enfermedad de Alzheimer y mejoramiento de la memo r i . Los efectos cardiovasculares incluyen vasodi latación (A2a) , (A2b) y (A3) , vasoconstricción (Ai) , bradicardia (Ax) , inhibición plaquetaria (A2a) < inotropia y dromotropia cardiaca negativa (Ai) , arritmia, taquicardia y angiogénesi s . Las aplicaciones terapéuticas de los compuestos de la invención incluyen, por ejemplo, la prevención de dificultades del corazón inducidas por isquemia y cardiotónicos , protección del tejido del miocardio y restablecimiento de la función cardiaca. Los efectos renales incluyen GFR reducida (Ai) , contracción de células mesangiales (Aj.) , ar.t i d iure s i s (Ai) e inhibición de liberación de renina (Ai) . Las aplicaciones terapéuticas apropiadas de los compuestos de l invención incluyen el uso de los compuestos de la invención como agentes diuréticos, natriurét icos , agentes para economizar potasio, para prote ción/prevención del riñon contra insuficiencia renal aguda, an ihipert ens i o a , ant i - edematosos y antinefríticos . Los efectos respiratorios incluyen broncodi 1 at a c i ón (A2) , bronqu i ocons t r i ce i ón (Ai) , enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, secreción de moco y depresión respiratoria (A2) . Las aplicaciones terapéuticas apropiadas para los compuestos de la invención incluyen aplicaciones ant i - a sraát i cas , tratamiento de enfermedad del pulmón después del trasplante y trastornos respiratorios. Los efectos inmunológí eos incluyen inmunosupres ión (A2) , quimiotaxis de neutrófilos (??) , generación de superóxido de neutrófilos (A2a) y desgranulación de mastocitos (A2b y A3 ) . Las aplicaciones terapéuticas de los antagonistas incluyen inflamación alérgica y no alérgica, por ejemplo, liberación de histamina y otros mediadores de la inflamación. Los efectos gastrointestinales incluyen inhibición de secreción de ácido (AjJ . La aplicación terapéutica puede incluir condiciones de reflujo y ulcerantes. Los efectos gas rointestinales también incluyen enfermedad intestinal del colon y enfermedad diarréica, por ejemplo, enfermedad diarréica asociada con inflamación intestinal (A2b) . Los trastornos oculares incluyen daño a la retina y a la cabeza del nervio óptico y trastornos relacionados con trauma (A3) . En una modalidad preferida, el trastorno ocular es glaucoma. Otras aplicaciones terapéuticas de los compuestos de la invención incluyen tratamiento de obesidad (propiedades lipolíticas) hipertensión, tratamiento de depresión, sedantes, ans iol í t i cas , como antilépticos y como laxantes, por ejemplo, para afectar la motilidad sin ocasionar diarrea. El término "estado patológico" pretende incluir aquellas condiciones ocasionadas por, o asociadas con, niveles no deseados de adenosina, de actividad de adenilil ciclasa, actividad fisiológica incrementada asociada con la estimulación aberrante de los receptores de adenosina y/o un incremento en AMPc . En una modalidad, el estado patológico es, por ejemplo, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, bronquitis, trastornos renales, trastornos gastrointestinales, o trastornos oculares. Los ejemplos adicionales incluyen bronquitis crónica y fibrosis quística . Los ejemplos apropiados de enfermedades inflamatorias incluyen leucemia no linfocítica, isquemia del miocardio, angina, infarto, isquemia f cerebrovascular, claudicación intermitente, r isquemia crítica de extremidad, hipertensión 5 venosa, venas varicosas, ulceración venosa y arte iosclerosis. Los estados de reperfusión dificultados incluyen, por ejemplo, cualquier trauma post -quirúrgico , tal como la cirugía reconst uctiva, trombólísis o angioplast í a . 10 Las frases "t atamiento de un estado que responda a 7 - desazapurina N-6 sustituida" o "tratar un estado que responda a 7 -desazapurina N-6 sustituida" pretenden incluir cambios en un estado o condición patológica, como los descritos 15 anteriormente, de modo tal que se puedan minimizar o disminuir signific ivamente los síntomas fisiológicos en un mamífero. Las frases también incluyen control, prevención o inhibición de síntomas o efectos fisiológicos asociados con una 20 cantidad aberrante de adenosina. En una modalidad preferida, el control del estado o condición patológica es tal que se erradica el estado o condición patológica. En otra modalidad preferida, el control es selectivo, de tal manera que se 25 controlan los niveles aberrantes de actividad del receptor de adenosina mientras que otros sistemas y parámetros fisiológicos no se ven afectados. El término " 7 -desazapurina N-6 sustituida" es reconocido en la técnica y pretende incluir aquellos compuestos que tienen la fórmula I: El término " 7 - desazapurina N- sus t i tuida " incluye sales farmacéuticamen e aceptables de la misma, y, en una modalidad, también incluye ciertas purinas N-6 sustituidas descritas en la presente invención . En algunas modalidades, la 7 -desazapurina N-6 sustituida no está sustituida con N-6 bencilo o N-6 feniletilo. En otras modalidades, R4 no está sustituido con bencilo o feniletilo. En las modalidades preferidas, i y R2 no son ambos átomos de hidrógeno. Incluso en otra modalidad preferida, R3 no es un átomo de hidrógeno. La frase "cantidad terapéuticamente efectiva" de una 7 -desazapurina N-6 sustituida, descrita más adelante, es la cantidad de un compuesto terapéutico necesaria o suficiente para efectuar su función pretendida dentro de un mamífero, por ejemplo, para tratar un estado que responda a 7 - desazapurina N-6 sustituida, o un estado patológico en un animal. Una cantidad efectiva de un compuesto terapéutico puede variar de conformidad con factores tales como la cantidad del agente causante de antemano presente en el mamífero, la edad, sexo, y peso del mamífero, y la capacidad de los compuestos terapéuticos de la presente invención para afectar un estado que responda a 7 -desazapurina N-6 sustituida en el mamí f ero . Un experto en la técnica podrá estudiar los factores antes mencionados y hacer una determinación con respecto a la cantidad efectiva del compuesto terapéutico sin experimentación indebida. También se puede utilizar una prueba in vitro o in vivo para determinar una "cantidad efectiva" de los compuestos terapéuticos descritos más adelante. El experto en la técnica puede seleccionar una cantidad apropiada del compuesto terapéutico para ser utilizada en la prueba antes mencionada o como un tratamiento terapéutico.

Una cantidad terapéuticamente efectiva de preferencia reduce por lo menos un síntoma o efecto asociado con el estado o condición que responda a 7 -desazapurina N-6 sustituida que está siendo tratado por lo menos en un 20% aproximadamente, (más preferido por lo menos en un 40% aproximadamente, incluso más preferido por lo menos en un 60% aproximadamente, y todavía más preferido por lo menos aproximadamente en un 80%) con relación a los individuos sin tratamiento. El experto en la técnica puede diseñar pruebas para medir la reducción de tales síntomas y/o efectos. Se pretende que cualquier prueba reconocida en la técnica que pueda medir tales parámetros quede incluida como parte de esta invención. Por ejemplo, si el estado que está siendo tratado es asma, entonces se puede medir el volumen de aire emitido desde los pulmones de un individuo antes y después del tratamiento para medir un incremento en el volumen utilizando una técnica reconocida en el campo. De igual manera, si el estado que está siendo tratado es inflamación, entonces se puede medir el área inflamada antes y después del tratamiento para medir la reducción en el área inflamada utilizando una técnica reconocida en el c ampo . El término "célula" incluye células tanto procariotas como eucariotas. El término "animal" incluye cualquier organismo que tenga receptores de adenosina o cualquier organismo susceptible de presentar un estado que responda a 7 - de s a z apurina N-6 sustituida. Los ejemplos de animales incluyen levaduras, mamíferos, reptiles y aves. En este también se incluyen los animales transgéni eos . El término "mamífero" es reconocido en la técnica y pretende incluir un animal, de preferencia un animal de sangre caliente, más preferido vacas, ovejas, cerdos, caballos, perros, gatos, ratas, ratones y humanos. Por ejemplo, como parte de esta invención se incluyen los mamíferos susceptibles de presentar un estado que responda a 7 -desazapurina N-6 sustituida, inflamación, enfisema, asma, condiciones del sistema nervioso central, o síndrome de dificultad respiratoria aguda . En otro aspecto, la presente invención pertenece a métodos para modular un receptor o receptores de adenosina en un mamífero administrando al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7 - de s z apurina N-6 sustituida, de modo tal que se presente la modulación del receptor de adenosina en el mamífero. Los receptores de adenosina apropiados incluyen las familias Ai, A2 , o A3. En una modalidad preferida, la 7 -desazapurina N-6 sustituida es un antagonista del receptor de adenosina. La frase "modular un receptor de adenosina" pretende incluir aquellos casos en los cuales un compuesto interactúa con un receptor o receptores de adenosina, ocasionando actividad fisiológica incrementada, reducida o anormal asociada con un receptor de adenosina o una cascada posterior de efectos que resultan de la modulación del receptor de adenosina. Las actividades fisiológicas asociadas con los receptores de adenosina incluyen inducción de sedación, vasodilatación, supresión de la frecuencia y capacidad de contracción cardiaca, inhibición de la capacidad de agregación plaquetaria, estimulación de gluconeogénesi s , inhibición de lipólisis, abertura de los canales de potasio, reducción del flujo de los canales de calcio, etc. Los términos "modula", "modular" y "modulación" pretenden incluir la prevención, erradicación o inhibición del incremento resultante de la actividad fisiológica no deseada asociada con la estimulación anormal de un receptor de adenosina, por ejemplo, en el contexto de los métodos terapéuticos de la invención. En otra modalidad, el término "modula" incluye efectos tipo antagonista, por ejemplo, reducción de la actividad o producción de mediadores de alergia e inflamación alérgica que resultan de la sobre-estimulación del receptor o receptores de adenosina. Por ejemplo, las de s a z apurina s terapéuticas de la invención pueden interactuar con un receptor de adenosina para inhibir, por ejemplo, la actividad de adenilato ciclasa. La frase "condición caracterizada por actividad aberrante del receptor de adenosina" pretende incluir aquellas enfermedades, trastornos o condiciones que están asociadas con la estimulación aberrante de un receptor de adenosina, en el sentido que la estimulación del receptor ocasiona una cadena bioquímica y/o fisiológica de eventos que están asociados en forma directa o indirecta con la enfermedad, trastorno o condición. Esta estimulación del receptor de adenosina no necesariamente tiene que ser el único agente causante de la enfermedad, trastorno o condición, sino únicamente es responsable de ocasionar algunos de los síntomas típicamente asociados con la enfermedad, trastorno o condición que está siendo tratado. La estimulación aberrante del receptor puede ser el único factor o por lo menos puede estar implicado algún otro agente, en el estado que está siendo tratado. Los ejemplos de condiciones incluyen aquellos estados patológicos antes listados, incluyendo inflamación, trastornos gastrointestinales y aquellos síntomas manifestados por la presencia de actividad incrementada del receptor de adenosina. Los ejemplos preferidos incluyen aquellos síntomas asociados con asma, rinitis alérgica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfisema, bronquitis, trastornos gastrointestinales y glaucoma. La frase "tratar o tratamiento de una condición caracterizada por actividad aberrante del receptor de adenosina" pretende incluir el alivio de, o la reducción de, por lo menos un síntoma típicamente asociado con la condición. El tratamiento también incluye el alivio o reducción de más de uno de los síntomas. De preferencia, el tratamiento cura, por ejemplo, elimina sustancialmente, los síntomas asociados con la condición . La presente invención pertenece a compuestos, 7 - de sa zapur inas N-6 sustituidas, que tienen la fórmula I: en la cual Ri y R2 son cada uno de manera independiente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida o juntos forman un anillo heterocíclico sustituido o no sustituido; R3 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida; R4 es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida. R5 y R6 son cada uno de manera independiente un átomo de halógeno, por ejemplo, cloro, flúor o bromo, un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida o R4 y R5 o 5 y Rg juntos forman un anillo hete ocíclico o carbocíclico sustituido o no sustituido. También se incluyen las sales farmacéuticamente aceptables de las 7 - de s z pur inas N-6 sustituidas. En algunas modalidades, Ri y R2 pueden ser cada uno de manera independiente porciones cicloalquilo o heteroarilalquilo sustituido o no sustituido. En otras modalidades, R3 es un átomo de hidrógeno o una porción heteroarilo sustituida o no sustituida. Incluso en otras modalidades, R4 , R5 y Rs pueden ser cada uno de manera independiente una porción heteroarilo. En una modalidad, Ri es un átomo de hidrógeno, R2 es una porción ciclohexano, c i c 1 opent i 1 o , ciclobutilo o ciclopropano sustituida o no sustituida, R3 es una porción fenilo sustituida o no sustituida, R4 es un átomo de hidrógeno y R5 y Rs son ambos grupos metilo. En otra modalidad, R2 es un c i c 1 ohexanol , un ciclohexanodiol , una ciclohexilsulfonamida, una ciclohexanamida , un c i c 1 ohexi 1 é s e r , un ciclohexeno, un c iclopentanol , o un ciclopentanodiol y R3 es una porción fenilo. Incluso en otra modalidad, Rx es un átomo de hidrógeno, R2 es un ciclohexanol , R3 es una porción fenilo, piridina, furano, ciclopentano o tiofeno sustituida o no sustituida, R4 es un átomo de hidrógeno, una porción alquilo, arilo o arilalquilo sustituida, y R5 y R6 son cada uno de manera independiente un átomo de hidrógeno, o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida. Incluso en otra modalidad, Rx es un átomo de hidrógeno, R2 es alquilamina, arilamina o a 1 q i 1 ari 1 ami na sustituida o no sustituida, una alquilamida, arilamída o al q i 1 ari 1 ami da sustituida o no sustituida, una 1 qui 1 sul fonamida , ari 1 aul fonamida o alquilarilsulfonamida sustituida o no sustituida, una alquilurea, arilurea o alquilarilurea sustituida o no sustituida, un alquilcarbamato , arilcarbamato o alquila ilcarbamato sustituido o no sustituido, un ácido 1 qu i 1 c a rboxí 1 i co , ácido ar i 1 carboxí 1 i co o ácido a lqui 1 ari 1 carboxí 1 ico sustituido o no sustituido, R3 es una porción fenilo sustituida o no sustituida, R4 es un átomo de hidrógeno y Rs y Rs son grupos metilo. Incluso en otra modalidad, R2 es guanidina, una guanidina modificada, cianoguanidina , una tiourea, una tioamida o una amidina . En una modalidad, R2 puede ser: en la cual R.2a-R2c son cada uno de manera independiente un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo saturada o no saturada y R2d es un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo saturada o no saturada, NR2eR2f > ó 0R2g, en las cuales 2e-R2g son cada uno de manera independiente un átomo de hidrógeno o porciones alquilo, arilo o alquilarilo saturadas o no saturadas. De manera alternativa, R2a y R2b pueden formar juntos un anillo carbocíclico o he t e roe í c 1 i co que tenga un tamaño de anillo entre 3 y 6 eslabones aproximadamente, por ejemplo, grupos ciclopropilo , c i c 1 opent i 1 o , ciclohexilo. En un aspecto de la invención, ambos R3 y R6 no son grupos metilo, de preferencia, uno de R5 y R6 es un grupo alquilo, por ejemplo, un grupo metilo, y el otro es un átomo de hidrógeno. En otro aspecto de la invención, cuando R4 sea 1 - f enileti lo y Ri sea un átomo de hidrógeno, entonces R3 no es fenilo, 2 - c 1 orof en i 1 o , 3-clorofenilo, 4 - clorof eni lo , 3 , 4 -diclorof eni lo , 3-metoxifenilo o 4 - metoxí f enilo o cuando R4 y Ri sean 1 - f e ni 1 e i 1 o , entonces R3 no es un átomo de hidrógeno o cuando R4 sea un átomo de hidrógeno y R3 sea un fenilo, entonces Ri no es feniletilo. En otro aspecto de la invención, cuando R5 y R6 juntos forman un anillo carbocí el ico , por e j emplo , o pirimido [4 , 5 - 6] indol , entonces R3 no es fenilo cuando R4 sea 1- (4-metilfenil) etilo, fenilisopropilo, fenilo o 1-feniletilo o cuando R3 no es un átomo de hidrógeno cuando R4 es 1-feniletilo. El anillo carbocíclico formado por R5 y RS puede ser aromático o alifático y puede tener entre 4 y 12 átomos de carbono, por ejemplo, naftilo, fenilciclohexilo, etc. , de preferencia entre 5 y 7 átomos de carbono, por ejemplo, ciclopentilo ó ciclohexilo. De manera alternativa, B y R-s juntos pueden formar un anillo he - e roe í c 1 i c o , tal como aquellos descritos más adelante. Los anillos heteroc í el icos típicos incluyen entre 4 y 12 átomos de carbono, de preferencia entre 5 y 7 átomos de carbono, y pueden ser ya sea aromáticos o alifáticos. El anillo he e roc í c 1 i c o puede estar sustituido en forma adicional, incluyendo la sustitución de uno o más átomos de carbono de la estructura del anillo con uno o más heteroátomos . Incluso en otro aspecto de la invención, Ri y R2 forman un anillo heterocí clico . Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, aquellos anillos he t eroc í c 1 icos listados más adelante, tal como morfolino, piperazina y similares, por ejemplo, 4 -hidroxipiperidinas , 4-aminopiper idinas . En el cual Ri y R2 juntos forman un grupo piperazino, en el cual R7 puede ser un átomo de hidrógeno o una porción alquilo, arilo o alquilarilo sustituida o no sustituida. Incluso en otro aspecto de la invención R4 y R5 pueden formar juntos un anillo he t eroc í c 1 i co , por e j emplo , en el cual el anillo heterocí el ico puede ser ya sea aromático o alifático y puede formar un anillo que tenga entre 4 y 12 átomos de carbono, por ejemplo, naftilo, enilciclohexilo, etc. y puede ser ya sea aromático o alifático, por ejemplo, ciclohexilo, ciclopentílo . El anillo het eroc í c 1 i co puede estar sustituido adicionalmente, incluyendo la sustitución de átomos de carbono de la estructura del anillo con uno o más heteroátomos . De manera alternativa, R4 y R5 pueden formar juntos un anillo heterocí el ico , tal como aquellos descritos más ad 1 ante. En algunas modalidades, la 7 - de sa z apurina N-6 sustituida no está sustituida con N-6 bencilo o N-6 feniletilo. En otras modalidades, R4 no está sustituido con bencilo o feniletilo. En las modalidades preferidas, Rx y R2 no son ambos átomos de hidrógeno. Incluso en otras modalidades preferidas, 3 no es H. Los compuestos de la invención pueden comprender profármacos solubles en agua los cuales se describen en el documento WO 99/33815, Solicitud internacional No. PCT/US 98 / 04595 , presentada el 9 de marzo de 1998 y publicada el 6 de julio de 1999. El contenido completo del documento WO 99/33815 se incorpora expresamente en la presente invención para referencia. Los profármacos solubles en agua se metabolizan in vivo hasta un fármaco activo, por ejemplo, mediante hidrólisis catalizada por es erasa. Los ejemplos de profármacos potenciales incluyen desazapurinas con, por ejemplo, R2 como cicloalquilo sustituido con -OC(O) (Z)NH2, en la cual Z es una cadena secundaria de un aminoácido de origen natural o no natural, o un análogo del mismo, un a, ß, ? ó ? aminoácido, o un dipéptido. Las cadenas secundarias de aminoácido preferidas incluyen aquellas de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, lisina, a-metilalanina , ácido amínoc i c 1 opropancarboxí 1 i co , ácido azetidin-2-carboxilico, ß-alanina, ácido ?-aminobutí rico , a 1 ani na - al an i na , o gl i c ina - l ni na . En una modalidad adicional, la invención presenta desazapurinas de la fórmula (I) , en la cual R1 es hidrógeno; R2 es cicloalquilo sustituido o no sustituido, alquilo sustituido o no sustituido, o Ri y R2 juntos forman un anillo het e roe í c 1 i co sustituido o no sustituido; R3 es arilo sustituido o no sustituido; R es hidróqeno; y R5 y Re son cada uno de manera independiente hidrógeno o alquilo, y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. Las de sa zapu i na s de esta modalidad pot ene i a lment e pueden ser antagonistas selectivos del receptor A3. En una modalidad, R2 es cicloalquilo sustituido (por ejemplo, sustituido con hidroxi ) o no sustituido, En una submodalidad conveniente, Ri y R4 son hidrógeno, R3 es fenilo sustituido o no sustituido, y R5 y R6 son cada uno alquilo. De preferencia R2 es mono - hi droxi c i c 1 open i 1 o o mono-hidroxiciclohexilo . R2 también puede estar sustituido con -NH-C(=0)E, en la cual E es alquilo de Ci-C4 sustituido o no sustituido (por ejemplo, alquilamina, por ejemplo, etilamina) . Ri y R2 también pueden formar juntos un anillo heterocíclico sustituido o no sustituido, el cual puede estar sustituido con un grupo amina o acet amido . En otro aspecto, R2 puede ser -A-NHC ( =0) B , en la cual A es alquilo de C1-C4 no sustituido (por ejemplo, etilo, propilo, butilo) , y B es alquilo de Ci-C4 sustituido o no sustituido (por ejemplo, metilo, ami noa 1 qui 1 o , por ejemplo, aminometilo o aminoetilo, alquilamino, por ejemplo, metilamino, etilamino) , de preferencia cuando Ri y R4 son hidrógeno, R3 es fenilo sustituido o no sustituido, y Rij y Rg son cada uno alquilo. B puede ser cicloalquilo sustituido o no sustituido, por ejemplo, ciclopropilo o 1 - mino - c i c 1 op op i 1 o . En otra modalidad, R3 puede ser fenilo sustituido o no sustituido, de preferencia cuando R5 y R6 son cada uno alquilo. De preferencia, R3 puede tener uno o más sust ituyentes (por ejemplo, o-, m-ó p- clorof enilo , o-, m- ó p - f 1 uoro f eni 1 o ) . De manera conveniente, R3 puede ser heteroarilo sustituido o no sustituido, de preferencia cuando R5 y R6 sean cada uno alquilo. Los ejemplos de grupos heteroarilo incluyen piridilo, pirimidilo, iridazinilo, pirazinilo, pirrolilo, triazolilo, tioazolilo, oxazolilo, oxad i a zol i 1 o , furanilo, me t i 1 endi oxi f en i 1 o y tiofenilo. De preferencia, R3 es 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo o 3 -pirimidilo . De preferencia en una modalidad, R5 y R6 son cada uno hidrógeno. En otra, RB y Re son cada uno met i lo . En una modalidad par icula mente preferida, las desazapurinas de la invención son profármacos solubles en agua que pueden ser met abo 1 i zados in vivo hasta un fármaco activo, por ejemplo, mediante hidrólisis catalizada por esterasa. De preferencia el profármaco comprende un grupo R2 el cual es cicloalquilo sustituido con -0C(O) (Z)NH2/ en la cual Z es una cadena lateral de un aminoácido de origen natural o no natural, un análogo del mismo, un , ß, ? ó ? aminoácido, o un dipéptido. Los ejemplos de cadenas laterales preferidas incluyen las cadenas laterales de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, Usina, -me i lalanina , ácido ami noc i c 1 opropanc a boxí 1 i c o , ácido azetidin-2-carboxílico, ß-alanina, ácido ? - aminobut í r ico , al aniña - al aniña , o gl icina-alanina . En una modalidad particularmen e preferida, Z es una cadena lateral de glicina, R2 es ciclohexilo, R3 es fenilo, y Rs y Rs son metilo. En otra modalidad, la desazapurina es 4-(cis-3-hidroxiciclopentil) amino-5 , 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] irimidina . En otra modalidad, la desazapurina es la sal de ácido t ri f luoroacé t i co de 4 - (cis-3 - (2-aminoacetoxi ) c ic 1 opent i 1 ) amino -5 , 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . En otra modalidad, la desazapurina es 4- (3-acetamido) iperídinil-5 , 6- dimet i l-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d] pirimidina. En otra modalidad, la desazapurina es 4-(2-N ' -metilureapropil) am no -5,6 - dimet il-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . En otra modalidad, la desazapurina es 4- (2-ace amidobut il) mino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d ] irimidina . En otra modalidad, la desazapurina es 4- (2-N' -metilureabutil) amino -5,6- dime til-2-fenil-7H-pirrólo [2 , 3d] irimidina . En otra modalidad, la desazapurina es 4- (2-aminociclopropilacetamidoetil) amino -2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d] pirimidina. En otra modalidad, la desazapurina es 4- (trans-4-hidroxiciclohexil) amino -2- (3-clorofenil) -7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . En otra modalidad, la desazapurina es 4- (trans-4-hidroxiciclohexil) amino-2- (3-fluorofenil) -7H-pirrolo [2 , 3 d] irimidina . En otra modalidad, la desazapurina es 4- (trans-4-hidroxiciclohexil) amino-2- (4-piridil) -7H-pirrolo [2 , 3d] p i r i m i dina . Incluso en otra modalidad, la invención presenta un método para inhibir la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo, Ai , A2A/ A2B, O de preferencia, A3 ) en una célula, poniendo la célula en contacto con 7 -desazapurina N-6 sustituida (por ejemplo, de preferencia, un antagonista del receptor de adenosina) . En otro aspecto, la invención presenta un método para tratar daño al ojo de un animal (por ejemplo, un humano) administrando al animal una cantidad efectiva de una 7 -desazapurina N-6 sustituida. De preferencia, la 7 - de sa zapur i na N-6 sustituida es un antagonista de los receptores A3 de adenosina en células del animal. El daño es a la retina o a la cabeza del nervio óptico y puede ser agudo o crónico. El daño puede ser el resultado de, por ejemplo, glaucoma, edema, hipoxia o trauma. En una modalidad preferida, la invención presenta una desazapurina que tiene la fórmula II, anterior, en la cual X es N o CRe Ri y R2 son cada uno de manera independiente hidrógeno, o alcoxi, arainoalqui lo , alquilo, arilo, o alquilarilo sustituido o no sustituido, o juntos forman un anillo heterocícl ico sustituido o no sustituido, con la condición que tanto Ri como R2 no sean ambos hidrógeno; R3 es alquilo, arilalquilo o arilo sustituido o no sustituido; R4 es hidrógeno o alquilo de C1-C3 sustituido o no sustituido; L es hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, o R4 y L juntos forman un anillo he t e ro c í c 1 i co o carbocíclico sustituido o no sustituido; Rs es hidrógeno, alquilo sustituido o no sustituido, o halógeno; Q es CH2 , O, S, o NR7 , en la cual R7 es hidrógeno o alquilo de Ci-C6 sustituido o no sustituido; y W es alquilo sustituida o no sustituido, cicloalquilo , alquinilo, arilo, arilalquilo, biarilo, heteroarilo, carbonilo sustituido, tiocarbonilo sustituido, o sulfonilo sustituido, con la condición que si R3 es pirrolidino, entonces R4 no es metilo. En una modalidad, en los compuestos de la fórmula II, X es CR6 y Q es CH2 , 0, S, o NH . En otra modalidad, X es N. En una modalidad adicional de compuestos de la fórmula II, es arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo de 5 o 6 eslabones, o biarilo. puede estar sustituido con uno o más sustituyentes. Los ejemplos de sus ituyentes incluyen: halógeno, hidroxi, alcoxi, amino, aminoa 1 qui 1 o , aminocarboxiamida , C , CF3, C02Re, CONHRg , CONR6Rg , SORB, S02R8, y S02NR8Rg , en los cuales RB y R9 son cada uno de manera independiente hidrógeno, o alquilo, cicloalquilo , arilo, o arilalquilo sustituido o no sustituido. De preferencia, W puede ser fenilo sustituido o no sustituida, por ejemplo, metiiendioxifenilo. W también puede ser un anillo heteroarilo de 5 eslabones sustituido o no sustituido, por ejemplo, pirrol, pirazol, oxazol, imidazol, triazol, tetrazol, furano, tiofeno, tiazol, y oxadiazol. De preferencia, W puede ser un anillo heteroarilo de 6 eslabones, por ejemplo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo , pirazinal, y tiofenilo. En una modalidad preferida, es 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2 - i rimi di 1 o , 4 - p i rimidi 1 o , o 5-pi r imidi lo . En una modalidad conveniente de compuestos de la fórmula II, Q es NH y W es un anillo 3-pirazolo el cual no está sustituido o está N-sustituido con alquilo, cicloalquilo, arilo o arilalquilo sustituido o no sustituido. En otra modalidad de compuestos de la fórmula II, Q es oxígeno, y W es un anillo 2-tiazolo el cual no está sustituido o está sustituido con alquilo, cicloalquilo, arilo o arilalquilo sustituido o no sustituido. En otra modalidad de compuestos de la fórmula II, es alquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo por ejemplo, ciclopentilo , o arilalquilo. Los ejemplos de sustituyen es incluyen halógeno, hidroxi, alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo sustituido o no sustituido, o H R i o , en el cual R i o es hidrógeno, o alquilo, cicloalquilo, arilo o arilalquilo sustituido o no sust ituido . Incluso en otra modalidad, la invención presenta una desazapurina de la fórmula II en la cual W es - ( CH2 ) a- C ( =0) Y ó - ( CH2 ) a - C ( =S ) Y , y a es un número entero de 0 a 3 , Y es arilo, alquilo, arilalquilo, cicloalquilo, heteroarilo, alquinilo, NHR 1 1 R1 2 , o, con la condición que Q sea NH, O 13 , en la cual Rn, 12 y 13 son cada uno de manera independiente hidrógeno, o alquilo, arilo, arilalquilo o cicloalquilo sustituido o no sustituido. De preferencia, Y es un anillo heteroarilo de 5 o 6 eslabones. Además, W puede ser - ( CH2 ) - s ( =0 ) j Y , en la cual j es 1 ó 2, b es 0, 1, 2, ó 3, Y es arilo, alquilo, arilalquilo, c i c 1 oal qu i 1 o , alquinilo, heteroarilo, NH i4R15 , con la condición que cuando b sea 1, Q sea CH2 , y en la cual Ri4 , , Ri5, y Ri6 son cada uno de manera independiente hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo o cicloalquilo sustituido o no sustituido. En otra modalidad, R3 se selecciona del grupo que consiste de fenilo, piridilo, pirimidilo, p i i da z i ni 1 o , pirazinal, pirrolilo, triazolilo, tioazolilo, oxazolilo, oxadi azol i 1 o , pirazolilo, furanilo, me t i 1 endi oxi feni 1 o y tiofenilo sustituido y no sustituido. Cuando R3 es fenilo, éste puede estar sustituido con, por ejemplo, hidroxilo, alcoxi (por ejemplo metoxi) , alquilo (por ejemplo tolilo) , y halógeno (por ejemplo, o-, m- , ó p-fluorofenilo u o-, m- , ó - c 1 oro feni 1 o ) . De manera conveniente, R3 puede ser 2-piridilo, 3-piridilo o 4-piridilo o 2-pirimidilo o 3 -pirimidilo . La invención también pertenece a una desazapurina en la cual R6 es hidrógeno o alquilo de Cx-Cs. De preferencia, R6 es hidrógeno. La invención también incluye desazapurinas en las cuales Ri es hidrógeno, y R2 es alquilo o alcoxi sustituido o no sustituido, alquilamina, arilamina o 1 qui 1 ar i 1 ami na sustituida o no sustituida, aminoal qui lo , aminoarilo o ami noa 1 qui 1 a i 1 o sustituido o no sustituido, alquilamida, arilamida o al qui 1 ari 1 mi da sustituida o no sustituida, alqu 1 sul fonamida , ar i 1 sul f onamida o alquilarilsulfonamida sustituida o no sustituida, alquilurea, arilurea o alquilarilurea sustituida o no sustituida, alquilcarbamato , ar i 1 carbamato o a 1 qu i 1 i 1 carbaraat o sustituido o no sustituido, o ácido a 1 qui 1 carboxí 1 i c o , ácido ar i 1 carboxí 1 i co o ácido al qu i 1 ari 1 c arboxí 1 i co sustituido o no sustituí do . De preferencia, R2 es cicloalquilo sustituido o no sustituido, por ejemplo, ciclohexilo o ciclopentilo monohidroxi - sust ituido o dihidroxi - sust ituido (de preferencia, ciclohexilo monohidroxi - sust i tuido o ciclopentilo monohidroxi -sust ituido ) . De manera conveniente, 2 puede ser de la siguiente fórmula: en la cual A es alquilo de Ci-C6, cicloalquilo de C3-C7, una cadena de uno a siete átomos, o un anillo de tres a siete átomos, sustituido en forma opcional con alquilo de Ci-C6/ halógenos, hidroxilo, carboxilo, tiol o grupos amino; en la cual B es metilo, N(Me)2, N(Et)2, NHMe , NHEt , (CH2)rNH3+, NH(CH2)rCH3, (CH2)rNH2, ( CH2 ) rCHCH2MH2 , ( CH2 ) rNHMe , (CH2)rOH, CH2CN, (CH2)mC02H, CHRi8Ri9, o CHMeOH , en los cuales r es un número entero de 0 a 2, m es 1 o 2, Ríe es alquilo, R19 es NH3+ o C02H o R1B y Ri9 juntos son: en la cual p es 2 o 3; y R17 es alquilo de Ci-C6/ cicloalquilo de C3-C7, una cadena de uno a siete átomos, o un anillo de tres a siete átomos, sustituido en forma opcional con grupos alquilo de Ci-C6, halógenos, hidroxilo, carboxilo, tiol o amino . De manera conveniente, A es alquilo de Ci-C6 no sustituido o sustituido. B puede ser alquilo de Ci-Cs no sustituido o sustituido. En una modalidad preferida, R2 es de la fórmula -A- NHC ( =0 ) B . En una modalidad par icularmente ventajosa, A es -CH2CH2- y B es met i 1 o .

Los compuestos de la invención pueden comprender profármacos solubles en agua, los cuales se metabolizan in vivo hasta un fármaco activo, por ejemplo, mediante hidrólisis catalizada por esterasa. Los ejemplos de profármacos potenciales incluyen de s a z apuri na s con, por ejemplo, R2 como cicloalquilo sustituido con -0C(0) (Z)NH2, en la cual Z es una cadena lateral de un aminoácido de origen natural o no natural, un análogo del mismo, un a, ß, ? o «aminoácido o un dipéptido. Las cadenas laterales de aminoácido preferidas incluyen aquellas de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, lisina, o - me t i 1 ami na , ácido aminoc i c lopropancarboxí 1 ico , ácido azetidin-2-carboxílico, ß-alanina, ácido ? - aminobut i r i co , al ani na - al aniña o gl i ciña - al aniña . En otra modalidad, RL y R2 juntos son: en la cual n es 1 o 2, y en la cual el anillo puede estar sustituido opcionalmente con uno o más grupos hidroxilo, amino, tiol, carboxilo, halógeno, CH2OH, CH2NHC ( =0) lquilo , o CH2NHC ( =0 ) NH - a 1 qui 1 o . De preferencia, n es 1 ó 2 y dicho anillo está sustituido con -NHC (=0) alquilo. En una modalidad conveniente, Ri es hidrógeno, R2 es alquilo de C^-Cg sustituido o no sustituido, R3 es fenilo sustituido o no sustituido, R4 es hidrógeno, L es hidrógeno o alquilo de Ci-C6 sustituido o no sustituido, Q es O, S o NR7 , en la cual R7 es hidrógeno o alquilo de Ci-Ce sustituido o no sustituido, y W es arilo sustituido o no sustituido. De preferencia, R2 es -A-NHC (=0) B, en la cual A y B son cada uno de manera independiente alquilo de C1-C4 no sustituido o sustituido. Por ejemplo, A puede ser CH2CH2. B puede ser, por ejemplo, alquilo (por ejemplo, metilo) , o aminoalquilo (por ejemplo, aminomet i 1 o ) . De preferencia, R3 es fenilo no sustituido y L es hidrógeno. R6 puede ser metilo o de preferencia, hidrógeno. De preferencia, Q es 0, S, o NR en la cual R7 es hidrógeno o alquilo de Ci-C6 sustituido o no sustituido, por ejemplo, metilo. W es fenilo no sustituido o sustituido (por ejemplo, sustituido con alcoxi, halógeno) . De preferencia, W es p-fluorof enilo , p- clorofenilo , o p-metoxi fenilo . W también puede ser heteroarilo, por ejemplo, 2-piridilo . En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 - acet i 1 aminoe t i 1 ) ami no - 6 -f enoxime i 1-2-f enil-7H-pirrolo [ , 3 d] pirimidin . En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 - ce t i 1 ami noe t i 1 ) ami no - 6 - ( -f luorof enoxi) metil-2-f enil-7H-pirrolo [2, 3 d] -pirimidina . En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 - ace t i 1 aminoe t i 1 ) ami no - 6 - ( 4 -clorofenoxi) metil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] -pirimidina. En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 - acet i 1 aminoe t i 1 ) amino - 6 - ( 4 -me t oxi f enoxi ) me t il-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] -pi r imidina . En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 - cet i 1 aminoet i 1 ) amino - 6 - ( -piridiloxi) meti l-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3 d ] -pi r imidina . En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 - acet i 1 minoet i 1 ) amino - 6 - ( -fenilamino)metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] -pirimidina . En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 - ace t i 1 aminoe t i 1 ) mi no - 6 - ( -metil - N - fenilamino) me il -2 - fenil - 7H-pirrolo [2 , 3 d] -pirimidina . En una modalidad particularmente preferida, la desazapurina es 4 - ( 2 -N ' - met i lureaet i 1 ) amino- 6 -fenoximetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . La invención también pertenece a un método para inhibir la actividad de un receptor de adenosina (por ejemplo, un receptor A2b de adenosina) en una célula poniendo en contacto la célula con un compuesto de la invención. De preferencia, el compuesto es un antagonista del receptor . La invención también pertenece a un método para tratar un trastorno gastrointestinal (por ejemplo diarrea) en un animal administrando a un animal una cantidad efectiva de un compuesto de invención (por ejemplo, un antagonista de A2b) · De preferencia, el animal es un humano. En otra modalidad, la invención se refiere a una composición farmacéutica que contiene una 7-desazapurina -6 sustituida de la invención y un vehículo f rmacéuticamente aceptable. La invención también pertenece a un método para tratar un estado que responda a 7 - de s a zapuri na N-6 sustituida en un animal, administrando a un mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una desazapurina de la invención, de modo tal que se presente el tratamiento de un estado que responda a 7 - de sa zapurina N-6 sustituida en el animal. De manera conveniente, el estado patológico puede ser un trastorno mediado por adenosina. Los ejemplos de estados patológicos preferidos incluyen: trastornos del sistema nervioso central, trastornos cardiovasculares, trastorno renales, trastornos inflamatorios, trastornos alérgicos, trastornos gastrointestinales, trastornos oculares y trastornos respi atorios. El término "alquilo" se refiere al radical de grupos alifáticos saturados, incluyendo grupos alquilo de cadena recta, grupos alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo ( a 1 i c í c 1 i eos ) , grupos cicloalquilo sustituidos con alquilo y grupos alquilo sustituidos con cicloalquilo. El término alquilo también incluye grupos alquilo, los cuales también pueden incluir átomos de oxígeno, nitrógeno, azufre o fósforo que remplacen uno o más átomos de carbono de la estructura base del hidrocarburo, por ejemplo, átomos de oxígeno, nitrógeno, azufre o fósforo. En las modalidades preferidas, un alquilo de cadena recta o cadena ramificada tiene 30 o menos átomos de carbono en su estructura base (por ejemplo, C^-C^o para cadena recta, C3-C30 para cadena ramificada) , y de manera más preferida 20 o menos átomos de carbono. De igual manera, los c i c 1 oal qui 1 o s preferidos tienen desde 4 hasta 10 átomos de carbono en su estructura de anillo, y más preferido aún tienen 5, 6 o 7 átomos de carbono en la estructura del anillo. Además, el término alquilo tal como se utiliza a través de la especificación y en las reivindicaciones pretende incluir tanto "alquilos no sustituidos" como "alquilos sustituidos", de los cuales el último se refiere a porciones alquilo que tienen suatituyentea que remplazan un hidrógeno en uno o más átomos de carbono de la estructura base del hidrocarburo. Tales sus ituyentes pueden incluir, por ejemplo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxí, arilcarboniloxi, alcoxicarboni loxi , ariloxicarboniloxi, carboxilato, a 1 qu i 1 c rboni 1 o , al c oxi carboni 1 o , aminocarbonilo , a 1 qui 11 i oc rbon i 1 o , alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino , arilamino, diarilamino y a 1 qu i 1 ri 1 mino ) , acilamino (incluyendo a 1 qui 1 c arbon i 1 mino , arilcarbonilarnino, carbamoilo y ureido) , amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio. ariltio, ioc arboxi 1 to , sulfatos, sul fonatos , sulfamoilo, sulfonamido, nitro, t ri f 1 uorome i 1 o , ciano, azido, he t eroc i c 1 1 o , alquilarilo, o una porción aromática o heteroarom tica. Los expertos en la técnica entienden que las porciones sustituidas en la cadena de hidrocarburo pueden por sí mismas estar sustituidas, si fuera apropiado. Los c i el oal qui los también pueden estar sustituidos, por ejemplo, con los su s t i tuyent e s antes descritos, Una porción "alquilarilo" es un alquilo sustituido con un arilo (por ejemplo, fenilmetilo (bencilo)) . El término "alquilo" también incluye grupos alifáticos no saturados análogos en longitud y en las sustituciones posibles a los alquilos antes descritos, pero que contienen por lo menos un doble o triple enlace respectivamente. El término "arilo" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere al radical de grupos arilo, incluyendo grupos aromáticos de un solo anillo de 5 y 6 eslabones que pueden incluir desde cero hasta cuatro heteroátomos , por ejemplo, benceno, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, benzoxazol, benzotiazol, triazol, tetrazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina y pirimidina, y similares. Grupos arilo también incluye grupos aromáticos policíclicos fusionados tales como naftilo, quinolilo, indolilo y similares. También se puede hacer referencia a aquellos grupos arilos que tengan heteroátomos en la estructura de anillo como " ar i 1 he t eroc i c 1 os " , " he t e roa i 1 o s " o "heteroaromáticos" . El anillo aromático puede estar sustituido en una o más posiciones de anillo contrario sust i tuyent e s como los descritos anteriormente, como por ejemplo, halógeno, hidroxilo, alcoxi, alqui 1 carboni loxi , a i 1 ca boni 1 oxi, alcoxicarboniloxi, a i 1 oxi carboni 1 oxi , carboxilato, a 1 qui 1 c rboni 1 o , alcoxicarboni lo , aminocarboni lo , a 1 qu i 11 ioc arboni 1 o , fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dial qui 1 amino , arilamino, diarilamino y al qui 1 ari 1 amino ) , acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino , arilcarbonilamino , carbamoilo y ureido) , amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, t iocarboxi lato , sulfatos, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trif luorometilo , ciano, azido, heterociclilo , alquilarilo, o una porción aromática o heteroaromát ica . Los grupos arilo también pueden estar fusionados o puenteados con anillos alicíclicos o het ero í c 1 i eos que no sean aromáticos para poder formar un policiclo (por ejemplo tetralina) . Los términos "alquenilo" y "alquinilo" se refieren a grupos alifáticos no saturados análogos en longitud y en las posibles sustituciones a los alquilos antes descritos, pero que contienen por lo menos un doble o triple enlace respec ivamente. Por ejemplo, la invención contempla los grupos ciano y propargilo . A menos que el número de átomos de carbono se indique de alguna otra manera, el término "alquilo inferior" tal como se utiliza en la presente invención significa un grupo alquilo, como el definido anteriormen e, pero que tiene de uno a diez átomos de carbono, más preferido desde uno hasta seis átomos de carbono en su estructura base, incluso más preferido de uno a tres átomos de carbono en su estructura base. De igual manera, los términos "alquenilo inferior" y "alquinilo inferior" tienen longitudes de cadena similares. Los términos " 1 coxi 1 qu i 1 o " , " ol iaminoal qui lo " y "tioalcoxialquilo" se refieren a grupos alquilo, como los descritos anteriormente, los cuales también incluyen átomos de oxígeno, nitrógeno o azufre que reemplazan a uno o más átomos de carbono de la estructura base del hidrocarburo, por ejemplo, átomos de oxígeno, nitrógeno o azufre. Los términos " ol i c i c 1 i lo " o "radical policíclico" se refieren al radical de dos o m s anillos cíclicos (por ejemplo, c i c 1 oa 1 qu i los , c i c 1 oa 1 queni 1 os , c icloalquini los , arilos y/o heterocicl ilos ) en los cuales dos o más átomos de carbono son comunes a dos anillos adyacentes, por ejemplo, los anillos son "anillos fusionados". Los anillos que están unidos a través de átomos no adyacentes se denominan como anillos "con puente". Cada uno de los anillos del policiclo puede estar sustituido con sustituyentes tales como los descritos anteriormente, como por ejemplo, halógeno, hidroxilo, a lqui 1 c arbon i 1 oxi , arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi , ar i 1 oxi carboni 1 oxi , carboxilato, alqui 1 carboni lo , 1 coxi c arboni 1 o , aminocarbonilo , a lqui 1 t íocarboni 1 o , alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dial qui 1 mino , arilamino, diarilamino y alquilaril mino ) , acilamino (incluyendo al qui 1 c arbon i 1 ami no , arilcarboni lamino , carbamoilo y ureido) , amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, t i ocarboxi la o , sulfatos, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, t i f 1 uorome t i 1 o , ciano, azido, he t e roe i c 1 i 1 o , alquilo, alquílarilo, o una porción aromática o he t e oaromá i c a . El término " het e roátorno " tal como se utiliza en la presente invención significa un átomo de cualquier elemento diferente al carbono o al hidrógeno. Los heteroátomos preferidos son nitrógeno, oxígeno, azufre y fósforo. El término "aminoácidos" incluye aminoácidos de origen natural y no natural encontrados en las proteínas, tales como glicina, alanina, valiña, cisterna, leucina, isoleucina, serina, treonina, metionina, ácido glutámico, ácido aspártico, glutamina, asparagina, lisina, arginina, prolina, histidina, f eni 1 a 1 ani na , tirosina y triptófano. Los análogos de aminoácido incluyen aminoácidos con cadenas laterales más largas o más cortas o variantes de cadenas laterales con grupos funcionales apropiados. Aminoácidos también incluye los e s t e reo i sómeros D y L de un aminoácido cuando la estructura del aminoácido permita formas e stereo i somé r i cas . El término "dipéptido" incluye dos o más aminoácidos ligados juntos. De preferencia, los dipéptidos son dos aminoácidos ligados a través de un enlace tipo péptido. Los dipéptidos preferidos de manera particular incluyen, por ejemplo, al ani na - 1 ani na y glicina-alanin . Cabe mencionar que la estructura de algunos de los compuestos de esta invención incluye átomos de carbono asimétricos y por lo tanto se presentan como racematos y mezclas racémicas, enantiómeros individuales, mezclas diastereoméricas y di as tereoi someros individuales. Todas de dichas formas isoméricas de estos compuestos se incluyen expresamente en esta invención. Cada átomo de carbono estereogénico puede ser de la configuración R o S. Por consiguiente se debe entender que los isómeros que surgen de dicha asimetría (por ejemplo todos los enantiómeros y diastereómeros ) quedan incluidos dentro del campo de esta invención, a menos que se indique de otra manera. Tales isómeros se pueden obtener en forma sustancialmente pura utilizando técnicas de separación clásicas y síntesis e s t e reoqu ími c ament e controlada. La invención también pertenece a composiciones farmacéuticas para tratar un estado que responda a 7 - de sa zapuri na N-6 sustituida en un mamífero, por ejemplo, trastornos res iratorios (por ejemplo asma, bronquitis, trastorno pulmonar obstructivo crónico, y rinitis alérgica) , trastornos renales, trastornos gastrointestinales y trastornos oculares. La composición farmacéutica incluye una cantidad terapéuticamente efectiva de una 7 - de s a z purina N-6 sustituida, descrita anteriormente, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Se debe entender que todas las desazapurinas descritas anteriormente se incluyen para tratamiento terapéutico. También se debe entender que las desazapurinas de la invención se puede utilizar solas o en combinación con otras desazapurinas de la invención o en combinación con compuestos terapéuticos adicionales, tales como antibióticos, anti - inflamatorios o agentes contra el cáncer, por ejemplo. El término "antibiótico" es reconocido en la técnica y pretende incluir aquellas sustancias producidas por mic oorganismos en desarrollo y los derivados sintéticos de los mismos, los cuales eliminan o inhiben el crecimiento de patógenos y son tóxicos de manera selectiva a los patógenos, mientras que al mismo tiempo producen efectos dañinos mínimos o ningún efecto en el individuo hospedero infectado. Los ejemplos apropiados de antibióticos incluyen, pero no se limitan a, las clases principales de ami nog lucós i do s , cef alosporinas , cloranf enicoles , ácidos fusídicos, macrólidos, penicilinas, polimixinas, tetracicl inas y estreptomicinas. El término " ant i inflamatorio " es reconocido en la técnica y pretende incluir aquellos agentes que actúan sobre los mecanismos corporales, sin antagonizar directamente al agente causante de la inflamación, tales como glucocort i coides , aspirina, ibuprofen, NSAID, etc. El término "agente contra el cáncer" es reconocido en la técnica y pretende incluir aquellos agentes que reducen, erradican o previenen el crecimiento de células cancerosas, de preferencia, sin afectar de manera adversa otras funciones fisiológicas. Los ejemplos representativos incluyen cisplatina y ciclofosfamida . Cuando los compuestos de la presente invención se administran como fármacos a humanos y mamíferos, estos se pueden administrar como tal o cerno una composición farmacéutica que contenga, por ejemplo, 0.1 a 99.5% (más preferido, 0.5 a 90%) de ingrediente activo en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable. La frase "vehículo farmacéuticamente ace table" tal como se utiliza en la presente invención significa un material, composición o vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como un material de relleno sólido o líquido, diluyente, excipiente, solvente o material para encapsulación, implicado en portar o transportar un compuesto o compuestos de la presente invención dentro de o hacia el individuo para que éste pueda efectuar su función pretendida. Típicamente, tales compuestos son llevados o transportados desde un órgano, o porción del cuerpo, hacia otro órgano, o porción del cuerpo. Cada vehículo debe ser "aceptable", en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial para el paciente. Algunos ejemplos de materiales que pueden servir como vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen: azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones, tales como almidón de maíz y almidón de papa; celulosa y sus derivados, tales como carboximet ilcelulosa de sodio, etilcelulosa y acetato de celulosa; tragacanto pulverizado; malta; gelatina; talco excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorios; aceites, tales como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón, aceite de cártamo, aceite de ajonjolí, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de fríjol de soya; glicoles tales como propi 1 engl i col ; polioles tales como glicerma, sorbitol, manitol y pol i e t i 1 engl i col ; ésteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; agar; agentes reguladores de pH, tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; ácido algínico; agua libre de pirógenos; solución salina isotónica; solución de Ringer; alcohol etílico; soluciones reguladoras de fosfato y otras sustancias no tóxicas compatibles utilizadas en formulaciones farmacéuticas. Como se indicó anteriormente, algunas modalidades de los compuestos de la presente invención pueden contener un grupo funcional básico, tal como un grupo amino o alquilamino, y por lo tanto, pueden formar sales farmacéuticamente aceptables con ácidos farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables" en este sentido, se refiere a las sales acidas de adición inorgánicas y orgánicas relativamente no tóxicas, de los compuestos de la presente invención. Estas sales se pueden preparar in si tu durante el aislamiento y purificación finales de los compuestos de la invención, o haciendo reaccionar por separado un compuesto puro de la invención en su forma de base libre con un ácido orgánico o inorgánico apropiado, y aislando la sal formada de esta manera. Las sales representativas incluyen las sales bromhidrato, clorhidrato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptanoato , 1 ac t ob i onat o , y 1 au i 1 sul f onat o y similares. (Véase, por ejemplo, Berge et al. (1977) " Pharmaceut i c al Salts", J. Pharm. Sci. 66:1-19) . En otros casos, los compuestos de la presente invención pueden contener uno o más grupos funcionales ácidos y, por lo tanto, pueden formar sales farmacéu icamente aceptables con bases farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables" en estos casos se refiere a las sales básicas de adición inorgánicas y orgánicas relativamente no tóxicas, de los compuestos de la presente invención. De igual manera estas sales se pueden preparar in situ durante el aislamiento y purificación final de los compuestos, o haciendo reaccionar por separado el compuesto puro en su forma de ácido libre con una base apropiada, tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión metálico farmacéuticamente aceptable, con amoniaco, o con una amina primaria, secundaria o terciaria orgánica farmacéuticamente aceptable. Las sales de metal alcalino o metal al ca 1 inotérreo representati as incluyen las sales de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y aluminio y similares. Las aminas orgánicas representativas útiles para formar las sales básicas de adición incluyen etilamina, dietilamina, et i 1 endi mi n , etanolamina, di et anol amina , piperazina y similares. El término "ásteres farmacéuticamente aceptables" se refiere a los productos esterif icados rel tivamente no tóxicos, de los compuestos de la presente invención. Estos ésteres se pueden preparar in situ durante el aislamiento y purificación final de los compuestos, o haciendo reaccionar por separado el compuesto puro en su forma de ácido libre o hidroxilo con un agente para es; e i f icac i ón apropiado. Los ácidos carboxílicos se pueden convertir en ésteres mediante tratamiento con un alcohol en presencia de un catalizador. Los derivados que contienen hidroxilo se pueden convertir en ésteres mediante tratamiento con un agente para esterificación tal como los halogenuros de alcanoilo. El término pretende incluir también grupos hidrocarburo inferiores que puedan ser solvatados bajo condiciones fisiológic s, por ejemplo, ésteres de alquilo, ésteres metílicos, etílicos y propílicos. (Véase, por ejemplo, Berge et al . , supra) . La invención también contempla el uso de profármacos que se conviertan in vivo en los compuestos terapéuticos de la invención (véase, por ejemplo, R.B. Silverman, 1992, "The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action", Academic Press, capítulo 8) . Tales profármacos se pueden utilizar para alterar la biodistribuc ión (por ejemplo, para permitir que entren compuestos que típicamente no entran al sitio reactivo de la proteasa) o los parámetros farmacocinéticos del compuesto terapéutico. Por ejemplo, se puede esterificar un grupo de ácido carboxílico, por ejemplo, con un grupo metilo o un grupo etilo para obtener un éster. Cuando el éster se administra a un individuo, el éster se disocia, en forma enzímática o no enzimática, reductiva o hi drol í t ic ment e , para revelar el grupo aniónico. Un grupo aniónico puede estar esterificado con porciones (por ejemplo, ésteres ac i 1 oximet i lo ) que se disocian para revelar un compuesto intermediario el cual se descompone posteriormente para dar el compuesto activo. En otra modalidad, el profarmaco es una forma reducida de un sulfato o sulfonato, por ejemplo, un tiol, el cual se oxida in vivo hasta el compuesto terapéutico. Además, una porción aniónica puede estar esterificada a un grupo que es transportado de manera activa in vivo, o el cual es absorbido en forma selectiva por los órganos objetivo. El éster se puede elegir para permitir la selección específica de blancos de las porciones terapéuticas a sitios reactivos pa ticulares, como se describe más adelante para las porciones portadoras . En las composiciones también pueden estar presentes agentes humectantes, emulsif icantes y lubricantes, tales como lauri 1 sul f to de sodio y estearato de magnesio, así como agentes colorantes, agentes para liberación, agentes para revestimiento, agentes edulcorantes, saborízantes y de perfume, conservadores y antioxidantes.

Los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: ant i oxi dan e s solubles en agua, tales como ácido ascórbico, clorhidrato de cisteína, bisulfato de sodio, me t bi sul f i to de sodio, sulfito de sodio y similares; antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato de ascorbilo, h i droxi ni sol butilado (BHA) , hidroxitolueno butilado ( ( BH ) , lecitina, galato de propilo, a-tocoferol y similares; y agentes quelantes de metal, tal como ácido cítrico, ácido etilendiamintetra acético (EDTA) , sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico y similares. Las formulaciones de la presente invención incluyen aquellas apropiadas para administración por vía oral, nasal, tópica, t ansdérmi c , bucal, sublingual, rectal, vaginal y/o parenteral . Las formulaciones se pueden presentar de manera conveniente en formas de dosificación unitaria y se pueden preparar utilizando cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica f rmacéutica. La cantidad de ingrediente activo que se puede combinar con un material de vehículo para producir una forma de dosificación individual por lo general será la cantidad del compuesto que produzca un efecto terapéutico. En general, partiendo de un 100%, esta cantidad variará desde aproximadamente 1% hasta aproximadamente 99% de ingrediente activo, de preferencia desde 5% aproximadamente hasta 70% aproximadamente, más preferido desde 10% aproximadamente hasta 30% aproximadamente. Los métodos para preparar estas formulaciones o composiciones incluyen el paso de mezclar un compuesto de la presente invención con el vehículo y, de manera opcional, uno o más ingredientes adicionales. En general, las formulaciones se preparan mezclando de manera uniforme e íntima un compuesto de la presente invención con vehículos líquidos, o vehículos sólidos finamente divididos, o ambos, y después, si fuera necesario, se configura el producto. Las formulaciones de la invención apropiadas para administración oral pueden estar en forma de cápsulas, cachets, pildoras, tabletas, pastillas (utilizando una base con sabor, normalmente sacarosa y acacia o tragacanto) , polvos, gránulos, o como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso, o como una emulsión líquida aceite en agua o agua en aceite, o como un elixir o jarabe, o como pastillas (utilizando una base inerte, tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y acacia) y/o como enjuagues bucales y similares, y cada una contiene una cantidad predeterminada de un compuesto de la presente invención como un ingrediente activo. También se puede administrar un compuesto de la presente invención como un bolo, jarabe medicado o pasta . En las formas de dosificación sólidas de la invención para administración oral (cápsulas, tabletas, pildoras, grageas, polvos, gránulos y similares) , el ingrediente activo se mezcla con uno o más vehículos farmacéuticamen e aceptables, tales como citrato de sodio o fosfato dicálcico, y/o cualquiera de los siguientes: materiales de relleno o extensores, tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y/o ácidos silícico; aglutinantes, tales como, por ejemplo, carboximet i 1 ce lulosa , alginatos, gelatina, pol i ini Ip i r ol idona , sacarosa y/o acacia; humectantes, tales como glicerol; agentes desintegrantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o mandioca, ácido algínico, algunos silicatos, y carbonato de potasio; agentes retardantes de disolución, tal como parafina; aceleradores de absorción, tales como los compuestos de amonio cuaternario; agentes humectantes, tales como, por ejemplo, alcohol cetílico y monoestearato de glicerol; absorbentes, tales como caolín y arcilla bentoníta ; lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polie ilenglicoles sólidos, 1 uri 1 su 1 fato de sodio, y mezclas de los mismos; y agentes colorantes. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, las composiciones farmacéuticas también pueden comprender agentes reguladores de pH . También se puede utilizar composiciones sólidas de un tipo similar como materiales de relleno para llenar cápsulas de gelatina dura y suave utilizando excipientes tales como lactosa o azúcares lácteos, así como polietilenglicoles de peso molecular elevado y similares. Una tableta se puede elaborar mediante compresión o moldeo, opc i ona 1 ment e con uno o más ingredientes adicionales. Las tabletas comprimidas se pueden preparar utilizando aglutinante (por ejemplo gelatina o hidroxipropilmetilcelulosa) , lubricante, diluyente inerte, conservador, desintegrante (por ejemplo, glicolato de almidón sódico o carboxime ilcelulosa de sodio entrecruzada) agentes tens ioact i os o dispersantes.

Las tabletas moldeadas se pueden preparar mediante moldeo, en una máquina apropiada, de una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Las tabletas, y otras formas de dosificación sólidas de las composiciones f rmacéuticas de la presente invención, tales como grageas, cápsulas, pildoras y gránulos, se pueden estriar opc ionalmente o se pueden preparar con revestimientos y cubiertas, tales como revestimientos entéricos y otros revestimientos bastante conocidos en la técnica de formulación farmacéutica. Estas también se pueden formular de tal manera que provean la liberación lenta o controlada del ingrediente activo en la misma utilizando, por ejemplo, h droxipropilmetilcelulosa en proporciones variables para proveer el perfil de liberación deseado, otras matrices po 1 imér i cas , liposomas y/o microes feras . Estas también se pueden esterilizar mediante, por ejemplo, filtración a través de filtros que retengan bacterias, o incorporando agentes para esterilización en forma de composiciones sólidas estériles que se puedan disolver en agua estéril, o algún otro medio para inyección estéril inmediatamente antes de utilizarlos. Estas composiciones también pueden contener, de manera opcional, agentes opacantes y podrían ser del tipo de composiciones que liberen el ingrediente o ingredientes activos únicamente, o en forma preferente, en una cierta porción del tracto gastrointestinal, de manera opcional, en una forma retardada. Los ejemplos de composiciones para incrustación que se pueden utilizar incluyen sustancias pol iméricas y ceras. El ingrediente activo también puede estar en forma de microcápsulas , si fuera apropiado, con uno o más de los excipientes antes descritos. Las formas de dosificación líquidas para administraci n oral de los compuestos de la invención incluyen emulsiones, microemulsiones , soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además del ingrediente activo, las formas de dosificación líquidas pueden contener diluyentes inertes utilizados en forma común en la técnica, tales como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes para sol ub i 1 i z ac i ón y emul s i f i cant e , tales como alcohol etílico, alcohol i sopro í 1 i co , carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propi 1 engl i col , 1,3-but ? 1 engl i c o 1 , aceites (en particular aceites de semilla de algodón, cacahuate, maíz, germen, oliva, ricino y ajonjolí) , glicerol, alcohol t e rahidrofurí 1 i co , polie ilenglicoles y ésteres de ácido graso de sorbitán, y mezclas de los mismos. Además de los diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes tales como agentes humectantes, agentes emul s i f icant es y suspensores, agentes edulcorantes, sabor i zant e s , colorantes, esencias y conservadores. Las suspensiones, además de los compuestos activos, pueden contener agentes suspensores tales como, por ejemplo, alcoholes i soe s t e arí 1 i eos etoxilados, polioxietilensorbitol y ésteres de sorbitán, celulosa microcristalin , metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, y mezclas de los mismos. Las formulaciones de las composiciones farmacéuticas de la invención para administración rectal o vaginal se pueden presentar como supositorios, los cuales se pueden preparar mezclando uno o más compuestos de la invención con uno o más excipientes o vehículos no irritantes apropiados que comprenden, por ejemplo, manteca de cacao, polie ilenglicol, una cera o un salicilato para supositorios, y los cuales son sólidos a temperatura ambiente, pero líquidos a la temperatura corporal y, por lo tanto, se funden en la cavidad rectal o vaginal y liberan el compuesto act ivo . Las formulaciones de la presente invención que son apropiadas para administración vaginal también incluyen formulaciones para óvulos, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o aspersión que contienen tales vehículos, los cuales como se sabe en la técnica, son apropiados. Las formas de dosificación para administración tópica o transdérmica de un compuesto de esta invención incluyen polvos, aspersiones, ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, soluciones, parches e inhaladores. El compuesto activo se puede mezclar bajo condiciones estériles con un vehículo farmacéuticamente aceptable, y con cualquiera de los conservadores, agentes reguladores, o propelentes que pudieran ser requeridos . Los ungüentos, pastas, cremas y geles pueden contener, además de un compuesto activo de esta invención, excipientes, tales como grasas y aceites de origen animal y vegetal, ceras, parafinas, almidones, tragacanto, derivados de celulosa, pol i e t i 1 engl ico les , silicones, bentonitas, ácido silícico, talco y óxido de zinc, o mezclas de los mismos. Los polvos y aspersiones pueden contener, además de un compuesto de esta invención, excipientes tales como lactosa, talco, ácido silícico, hidróxido de aluminio, silicatos de calcio y polvo de poliamida, o mezclas de estas sustancias. Las aspersiones pueden contener, de manera adicional, propelentes acostumbrados, tales como clorofluorohidrocarburos e hidrocarburos volátiles no sustituidos, tales como butano y propano . Los parches transdérmicos tienen la ventaja adicional de proveer el suministro controlado de un compuesto de la presente invención al cuerpo. Tales formas de dosificación se pueden preparar disolviendo o dispersando el compuesto en el medio apropiado. También se pueden utilizar fomentadores de absorción para incrementar el flujo del compuesto a través de la piel. La velocidad de dicho flujo se puede controlar ya sea suministrando una membrana para control de velocidad o dispersando el compuesto activo en una matriz o gel pol i m rico. Las formulaciones oftálmicas, ungüentos oftálmicos, polvos, soluciones y similares, también se contemplan dentro del campo de esta invención. De preferencia, el preparado farmacéutico es una formulación oftálmica (por ejemplo una formulación para inyección periocular, retrobulbar o infraocular, una formulación sistémica, o una solución para irrigación quirúrgica) . Las formulaciones oftálmicas de la presente invención pueden incluir una o más desazapurinas y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Se pueden utilizar varios tipos de vehículos. Estos vehículos por lo general serán de naturaleza acuosa. Por lo general se prefieren soluciones acuosas, tomando como base la facilidad de formulación, así como la capacidad del paciente para administrar de manera fácil tales composiciones por medio de instilación de una o dos gotas de las soluciones en los ojos afectados. Sin embargo, las desazapurinas de la presente invención también se pueden incorporar fácilmente en otros tipos de composiciones, tales como suspensiones, geles viscosos o semi -viscosos u otros tipos de composiciones sólidas o semi-sólidas. Las composiciones oftálmicas de la presente invención también pueden incluir algunos otros ingredientes, tales como agentes reguladores, conservadores, co-solventes y agentes que suministren viscosidad. Se puede agregar un sistema regulador apropiado (por ejemplo, fosfato de sodio, acetato de sodio o borato de sodio) para evitar cambios en el pH bajo las condiciones de almacenamiento. Los productos oftálmicos típicamente se empacan en forma de dosis múltiples. Por lo tanto se requieren conservadores para evitar la contaminación microbiana durante el uso. Los conservadores apropiados incluyen: cloruro de benzalconio, timerosal, c 1 orobut anol , met i lparabeno , propilparabeno, alcohol f eni le í lico , edetato disódico, ácido sórbico, pol i cuaternio - 1 , u otros agentes conocidos por los expertos en la técnica. Tales conservadores típicamente se utilizan a un nivel desde 0.001 hasta 1.0% peso/volumen ("% p/v" ) . Cuando las desazapurinas de la presente invención se administran durante procedimientos quirúrgicos intraoculares , tales como mediante inyección retrobulbar o periocular y perfusión o inyección infraocular, se prefiere en gran manera el uso de soluciones salinas balanceadas para irrigación como vehículos. La Solución para Irrigación Estéril BSS® y la Solución para Irrigación Intraocular Estéril BSS Plus® (Alcon Laboratories, Inc., Forth Worth, Texas, EE.UU) son ejemplos de soluciones para irrigación intraocular fisiológicamente balanceadas. El último tipo de solución se describe en la patente E.U.A. No. 4,550,022 (Garabedian, et al.) cuyo contenido completo se incorpora en la presente invención para referencia. Las inyecciones re t robul ba e s y perioculares son conocidas por los expertos en la técnica y se describen en numerosas publicaciones incluyendo, por ejemplo, Oph almic Surgery: Principies of Practice , Ed . G. L, Spaeth. W. B. Sanders Co . , Filadelfia, PA . , E.U.A, páginas 85-87 ( 1990 ) . Como se indicó anteriormente, el uso de desazapurinas para evitar o reducir el daño a los tejidos de la retina y de la cabeza del nervio óptico a nivel celular, es un aspecto particularmente importante de una modalidad de la invención. Las condiciones oftálmicas que se pueden tratar incluyen, pero no se limitan a, ret i no a t í a s , degeneración macular, isquemia ocular, glaucoma y daño asociado con lesiones a los tejidos oftálmicos, tales como daños isquémicos por reperfusión, daños fotoquímicos y daños asociados con cirugía ocular, en particular lesiones a la retina o a la cabeza del nervio óptico por exposición a la luz o a instrumentos quirúrgicos. Los compuestos también se pueden utilizar como un auxiliar para la cirugía oftálmica, tal como mediante inyección al vitreo o a la subconj unt iva después de la cirugía oftálmica. Los compuestos se pueden utilizar para el tratamiento agudo de condiciones temporales, o se pueden administrar en forma crónica, en especial en el caso de una enfermedad degenerativa. Los compuestos también se pueden utilizar de manera profil ctica, en especial antes de la cirugía ocular o de procedimientos oftálmicos no invasivos, u otros tipos de cirugía. Las composiciones farmacéuticas de esta invención apropiadas para administración parenteral comprenden uno o más compuestos de la invención en combinación con una o más soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas, isotónicas, estériles, o polvos estériles farmacéuticamente aceptables, los cuales se pueden reconstituir como soluciones o dispersiones inyectables estériles justo antes de utilizarlas, las cuales pueden contener an ioxidantes, agentes reguladores, bacteriostét icos , solutos que hagan que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor pretendido o con agentes suspensores o espesantes . Los ejemplos de vehículos acuosos y no acuosos apropiados que se pueden utilizar en las composiciones farmacéuticas de la invención incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, prop 1 engl icol , polietilenglicol y similares) , y mezclas apropiadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva, y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. Se puede mantener la fluidez apropiada, por ejemplo, utilizando materiales de revestimiento, tales como lecitina, manteniendo el tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones, y utilizando agentes tens ioact ivos . Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tales como conservadores, agentes humectantes, agentes emul s i f i c ant e s y agentes dispersantes. Se puede asegurar la prevención de la acción de microorganismos incluyendo varios agentes antibacterianos y ant i fúngi eos , por ejemplo. parabeno, clorobutanol , ácido fenol - sórbico , y similares. También podría ser deseable incluir en las composiciones, agentes isotónicos tales como azúcares, cloruro de sodio y similares. Además, se puede obtener la absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable incluyendo agentes que retrasen la absorción tales como monoestearato de aluminio y gelatina. En algunos casos, con el fin de prolongar el efecto de un fármaco, es deseable reducir la absorción del fármaco desde la inyección subcutánea o intramuscul r. Esto se puede lograr utilizando una suspensión líquida de material cristalino o amorfo que tenga una baja solubilidad en agua. Entonces la velocidad de absorción del fármaco depende de su velocidad de disolución la cual, a su vez, puede depender del tamaño de cristal y de la forma cristalina. Como alternativa, se obtiene la absorción retardada de un fármaco administrado por vía parenteral disolviendo o suspendiendo el fármaco en un vehículo oleoso. Las formas inyectables para depósito se preparan formando matrices microencapsuladas de los compuestos de la presente invención en polímeros biodegradables tales como poliláctido-pol igl í cól ido . Dependiendo de la relación del fármaco a polímero, y de la naturaleza del polímero particular utilizado, se puede controlar la velocidad de liberación del fármaco. Los ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen pol i ( ort oé s t ere s ) y pol i ( anhídridos ) . Las formulaciones inyectables para depósito también se preparan atrapando el fármaco en liposomas o mi c roemul s i one s que sean compatibles con el tejido corporal . Las preparaciones de la presente invención se pueden administrar por vía oral, parenteral, tópica o rectal. Desde luego éstas se administran utilizando formas apropiadas para cada vía de administr ción. Por ejemplo, éstas se administran en forma de tabletas o cápsulas, mediante inyección, inhalación, loción ocular, ungüento, supositorios, etc., se administran mediante inyección, infusión o inhalación; por vía tópica mediante lociones o ungüentos; y por vía rectal mediante supositorios. Se prefiere la administración por vía oral Las frases "administración parenteral" y "administrado por vía parenteral" tal como se utilizan en la presente invención significan modos de adminis ración diferentes de la administración por vía entérica y tópica, normalmente mediante inyección, e incluyen, sin limitación, inyección e infusión intravenosa, intramuscular, intra-arterial, intratecal, intracapsular , intraorbital , in acardi acá , in radérmica , intraperitoneal, a través de la tráquea, subcutánea, subcut icula , i nt a - art i cu 1 r , subcapsular, subaracnoide , intraespinal e i n rae st e rnal . Las frases "adminis ación sistémica", "administrado en forma sistémica", "administración periférica" y "adminis do en forma periférica" tal como se utilizan en la presente invención significan la administración de un compuesto, fármaco u otro material diferente a la administ ación directa en el sistema nervioso central, de modo tal que éste entra al sistema del paciente, y, por lo tanto, es susceptible a metabolismo y otros procedimientos similares, por ejemplo, administración subcutánea. Estos compuestos se pueden administrar a humanos y otros animales para terapia mediante cualquier vía de administ ación apropiada, incluyendo administración por vía oral, nasal, tal como, por ejemplo, una aspersión, por vía rectal, por vía intravaginal , por vía parenteral , , por vía intraciaternal y por vía tópica, tal como mediante polvos, ungüentos o gotas, incluyendo las vías bucal y sublingual. Sin tomar en cuenta la vía de administración elegida, los compuestos de la presente invención, los cuales se pueden utilizar en una forma hidratada apropiada, y/o las composiciones f rmacéuticas de la presente invención, se formulan como formas de dosificación farmacéuticamente aceptables utilizando métodos convencionales conocidos por los expertos en la técnica . Se pueden variar los niveles de dosificación reales de los ingredientes activos en las composiciones armacéuticas de esta invención para obtener una cantidad del ingrediente activo que sea efectiva para lograr la respuesta terapéutica deseada para un paciente, composición, y modo de administración particular sin que sean tóxicos para el paciente. El nivel de dosificación seleccionado dependerá de una variedad de factores incluyendo la actividad del compuesto particular de la presente invención utilizado, o el éster, sal o amida del mismo, la vía de administración, el tiempo de administración, la velocidad de excreción del compuesto particular que está siendo utilizado, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos y/o materiales utilizados en combinación con el compuesto particular utilizado, la edad, sexo, peso, condición, salud general e historial médico previo del paciente que está siendo tratado, y de factores similares bien conocidos en los campos médicos. Un médico o veterinario con habilidad normal en la técnica puede determinar y prescribir fácilmente la cantidad efectiva de la composición farmacéutica requerida. Por ejemplo, el médico o veterinario puede iniciar dosis de los compuestos de la invención utilizados en la composición farmacéutica a niveles menores que el requerido con el fin de obtener el efecto terapéutico deseado e incrementar gradualmente la dosificación hasta que se obtenga el efecto deseado. En general, una dosis diaria apropiada de un compuesto de la invención será aquella cantidad del compuesto que sea la dosis efectiva más baja para producir un efecto terapéutico. Dicha dosis efectiva por lo general dependerá de los factores antes descritos. Por lo general, las dosis intravenosas y subcutáneas de los compuestos de esta invención para un paciente, cuando se utilizan para los efectos analgésicos indicados, variará desde aproximadamente 0.0001 hasta aproximadamente 200 mg por kilogramo de peso corporal por día, de manera más preferida desde aproximadamente 0.01 hasta aproximadamente 150 mg por kilogramo por día, e incluso más preferido desde aproximadamente 0.2 hasta aproximadamente 140 mg por kilogramo por día. Si se desea, la dosis diaria efectiva del compuesto activo se puede administrar como dos, tres, cuatro, cinco, seis o más sub-dosis administradas por separado a intervalos apropiados durante el día, opcionalmente , en formas de dosificación unitaria. Aunque es posible administrar un compuesto de la presente invención sólo, se prefiere administrar el compuesto como una composición farmacéutica. La presente invención también pertenece a composiciones farmacéuticas empacadas para tratar un estado que responda a 7 - de s zapur i na N-6 sustituida, por ejemplo, actividad de receptor de adenosina incrementada no deseable en un mamífero.

Las composiciones farmacéuticas empacadas incluyen un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos una desazapurina como las descritas anteriormente, e instrucciones para utilizar la desazapurina para tratar el estado que responda a desazapurina en el mamí f ero . Las desazapurinas de la invención se pueden preparar utilizando métodos normales para síntesis orgánica. Las desazapurinas se pueden purificar mediante HPLC de fase inversa, cromatog fí , re cr i s t al i zaci ón , etc., y se puede confirmar sus estructuras utilizando análisis de espectro de masas, análisis elemental, espectroscopia IR y/o RMN . Típicamente, la síntesis de los intermediarios así como de las desazapurinas de la invención se efectúa en solución. La adición y eliminación de uno o más grupos protectores también es una práctica típica y es conocida por los expertos en la técnica. Los esquemas de síntesis típicos para la preparación de los intermediarios de desazapurina de la invención se indican más adelante en el esquema de reacción I. Esta invención también provee un compuesto que tenga la estructura (IV) : (IV) en la cual Ri es t rana - 4 - hidroxic i c lohexi lo , 2-metilaminoca bonilaminociclohexilo, 2-metilamino-carboni 1 aminoc ic 1 ohexi lo , acetamidoet lio , o me tilamino c arbon i laminoetilo; en la cual Ar es un anillo que tiene de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido, fenilo, pirrol, tiofeno, furano, tiazol, imidazol, pirazol, triazol, piridina, 2 ( 1H) -piridona , 4 (1H) -piridona, pirazina, pirimidina, piridazina, isotiazol, isoxazol, oxazol, tetrazol, naftaleno, tetralina, naftiridina, benzofurano, benzot iof eno , indol , 2 , 3 - dihidroindol , lH-indol, indolina, ben zop i r a zol , 1 , 3 - benzodi oxo 1 , benzoxazol, purina, cumarina, cromona, quinolina, tet hidroquinol ina isoquinolina bencimidazol , quinazolina, pirido[2, 3-bjpirazina, pi r i do [ 3 , 4 - b ] i r a z ina , pirido[3,2-c ] piridazin , puri do [ 3 , 4 - ] - p i r i d i na , 1H-pirazol [3 , -d] irimidin , pteridina, 2 (1H) -quinolona, 1 (2H) - isoquinolona, 1,4-bencisoxazina, benzotiazol, quinoxal ina , quinolina-N- óxido, isoquinolina-N-óxido, qui noxal ina-N-óxido, qui na zo 1 in - - óxi do , benzoxazina, ftalazina, cinolina, o tiene una estructura: en la cual Y es carbono o nitrógeno; en la cual R2 y R2' son de manera independiente H, alquilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, halógeno, metoxi, metilamino, o metiltio; en la cual R3 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en la cual dicho alquilo sustituido es -C(R ) (R5)XR6, en la cual X es O, S, o NRS, en la cual R7 y R8 son cada uno de manera independiente H o alquilo, en la cual R5 y Rs son cada uno de manera independiente alquilo o c i c 1 oalqui 1 o , o NR5R6 y el nitrógeno forman juntos un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones,- en la cual R4 es H, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo , o una sal farmacéutic mente aceptable, o un derivado de profármaco, o un metabolito biológicamente activo; con la condición que cuando Ri sea ace i 1 aminoe i lo , Ar no sea 4-piridilo. En una modalidad del compuesto que tiene la estructura IV, NR5Rs es un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones el cual se selecciona del grupo que consiste de: en la cual m es 0, 1, o en la cual n es 0, 1, 2, o 3; en la cual R8 es hidrógeno, -OH, -CH20H, - C ( =0 ) R9Rx 0 , NHRn ; en la cual Rn es -C(=0)CH3, o -S02Me, o en la cual R es H, alquilo, o arilo. En otra modalidad del compuesto que tiene la estructura IV, Ar tiene la estructura: en la cual Y es carbono o nitrógeno; en la cual R2 es H, o halógeno, grupo - O - a 1 qu i 1 o , grupo amina, o grupo sulfuro; en la cual R3 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en la cual dicho alquilo sustituido es -C(R7) (Re)NR5R6F en la cual R7 y R8 son cada uno de manera independiente H o alquilo, en la cual R5 y R6 son cada uno de manera independiente alquilo o cicloalquilo , o R5 , R6 y el nitrógeno forman juntos un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones. En otra modalidad del compuesto, Y es carbono . En otra modalidad del compuesto, R2 es hidrógeno . En otra modalidad del compuesto, R4 es h i drógeno . En otra modalidad del compuesto, R3 es hidrógeno , En otra modalidad del compuesto, R3 y R4 son cada uno metilo. En otra modalidad del compuesto, R3 es -C(R7) (R8)NR5R6, en la cual R7 y R8 son cada uno de manera independiente H o alquilo, en la cual R5 y R6 son cada uno de manera independiente alquilo o c i c 1 oa 1 qui 1 o , o R5 y Rs y el nitrógeno forman juntos un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones. En otra modalidad del compuesto, R2 es hal ógeno . En otra modalidad del compuesto, Y es nitrógeno . Incluso en otra modalidad del compuesto, R2 es hidrógeno . En una modalidad adicional del compuesto, R3 y R4 son cada uno hidrógeno. Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura (V) V en la cual R-i es arilo, arilo sustituido, o heteroarilo ; en la cual R2 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloalquilo; en la cual R3 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en la cual dicho alquilo sustituido es -C(RS) (R7)NR4R5, en la cual R6 y R7 son cada uno H o alquilo, en la cual R4 y R5 son cada uno alquilo o cicloalquilo, o R4 , R5 y el nitrógeno forman juntos un sistema de anillo que tiene entre 4 y 7 e s 1 bone s . En una modalidad del compuesto que tiene la estructura V, R4 y R7 son cada uno H ; en la cual R4 es H y R5 es -R1ZC ( =0 ) Ri3. En otra modalidad del compuesto que tiene la estructura V, R4 y R7 son cada uno H; en la cual el sistema de anillo es morfolino, t iomorfol ino , piperazino N - 4 -sustituido, piperazina 2 - sust i tuida , o pirrolidino RB - sust ituido , piperadina, en la cual R8 es H, OH, CH20H, - C ( =0 ) NR9Rx 0 , NRn, en la cual n es -C(=0)CH3, -S02Me. En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la siguiente estructura: En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura : En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1318-a) En otra modalidad del compuesto , el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1318-b) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1319 En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1320) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1321) Un compuesto que tiene la estructura en la cual R2 es un anillo aromático de 5-6 eslabones; en la cual R3 y R4 son de manera independiente H, o alquilo. En una modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1500) En una modalidad del compuesto , el compuesto tiene la estructura En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto 1500, el compuesto tiene la estructura: En una modalidad adicional del compuesto, el compuesto tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura Vil en la cual R2 es un anillo aromático de 5-6 eslabones; en la cual R3 y R4 son de manera independiente H, o alquilo; alquilo; con la condición que R2 no sea 4-piridilo. En una modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1501) Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: vm en la cual R2 es un anillo aromático de 5-6 eslabones sustituido; en la cual R3 y R4 son de manera independiente H, o alquilo. En una modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1520) Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: en la cual R2 es un anillo aromático de eslabones; en la cual X es oxígeno, o azufre. En una modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1503) Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura en la cual R2 es un anillo aromático de 5-6 eslabones; en la cual X es oxígeno, o azufre. En una modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1504) Esta invención también provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor Ai de adenosina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto que tiene la fórmula IV, V, VI, VII, VIII, IX o X. En una modalidad del método, el individuo es un mamífero. En otra modalidad del método, el mamífero es un humano. En otra modalidad del método, el receptor Ai de adenosina está asociado con enfermedad cognitiva, insuficiencia renal, arritmias cardiacas, epitelio respiratorio, , liberación de transmisor, sedación, vasoconstricción, bradicardia, inotropia y dromotropia cardiaca negativa bronqu i oconst r i c c ión , quimiotaxis de neutrófilo, condición de reflujo, o condición ulcerante .

Esta invención también provee una terapia de combinación para el asma, que comprende los compuestos IV y V, y un esteroide, agonista \i2 , glucocorticoide, antagonista de lucotrieno, o un agonista ant i col i nérg i co . Las enfermedades asociadas con los receptores Ai, A2a, A2b y A3 de adenosina se describen en los documentos WO 99/06053 y O-09822465, WO-09705138, WO-09511681, WO-09733879, JP-09291089, PCT/US 98 / 16053 y patente E.U.A. No. 5,516,894 cuyos contenidos completos se incorporan totalmente en la presente invención para referencia . Esta invención también provee un profármaco soluble en agua de un compuesto que tiene la estructura IV, V, VI, VII, VIII, IX, o X, en el cual dicho profármaco soluble en agua es metabolí zado in vivo hasta un fármaco activo el cual inhibe de manera selectiva al receptor Ax de adenosin . En una modalidad del profármaco, dicho profármaco es metabolizado in vivo mediante hidrólisis catalizada por esterasa. Esta invención también provee una composición farmacéutica que comprende al profármaco y un vehículo farmacéuticamente aceptable . Esta invención también provee un método para inhibir la actividad de un receptor Ai de adenosina en una célula, el cual comprende poner en contacto dicha célula con un compuesto que tenga la estructura IV, V, VI, VII, VIII, IX o X. En una modalidad del método, el compuesto es un antagonista de dicho receptor Ai de adenosina. Esta invención también provee un método para tratar un trastorno gastrointestinal en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad efectiva de un compuesto que tiene las estructuras IV, V, VI, VII, VIII, IX, o X. En una modalidad del método, dicho trastorno es diarrea. En otra modalidad del método, el individuo e s un humano . En otra modalidad del método, el compuesto es un antagonista de los receptores Ai de adenosina. Esta invención también provee un método para tratar trastorno respiratorio en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad efectiva de un compuesto que tiene las estructuras IV, V, VI, VII, VIII, IX, O X. En una modalidad del método, dicho trastorno es asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, o un trastorno del tracto superior respiratorio. En otra modalidad del método, el individuo es un humano . En otra modalidad del método, dicho compuesto es un antagonista de los receptores Ax de ade nos i na . Esta invención también provee un método para tratar daño al ojo de un individuo que comprende administrar a dicho individuo una cantidad efectiva de un compuesto que tiene las estructuras IV, V, VI, VII, VIII, IX, o X. En una modalidad del método, dicho daño comprende daño a la retina o a la cabeza del nervio ópt ico. En otra modalidad del método, dicho daño es agudo o crónico. En otra modalidad del método, dicho daño es el resultado de glaucoma, edema, isquemia, hipoxia o trauma . En otra modalidad del método, el individuo e s un humano . En otra modalidad del método, el compuesto es un antagonista de los receptores Ai de adenosina.

Esta invención también provee una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto que tiene las estructuras IV, V, VI, VII, VIII, IX, o X, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En otra modalidad de la composición f rmacéutica, dicha cantidad terapéuticamen e efectiva es efectiva para tratar un trastorno respiratorio o un trastorno gas rointestinal. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicho trastorno gastrointestinal es diarrea . En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicho trastorno respiratorio es asma, rinitis alérgica, o enfermedad pulmonar obstructiva crónic . En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación oftálmica. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o infraocular . Incluso en otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica. En una modalidad adicional del preparado f rmacéutico, dicha composición farmacéutica es una solución para irrigación quirúrgica. Esta invención también provee una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor Ai de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto específico para el receptor Ai de adenosina; y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para el tratamiento de dicho enfermedad en un individuo. Tal como se utiliza en la presente invención, "Un compuesto es selectivo de Ai" significa que un compuesto tiene una constante de unión para el receptor Ai de adenosina por lo menos 10 veces más alta que para los receptores A2a, A2b, o A3 de adenosina. Esta invención también provee un método para preparar el compuesto que tiene la estructura IV, que comprende los pasos de: a) hacer reaccionar para proveer en la cual P es un grupo protector que puede ser el íminado ; b) tratar el producto del paso a) bajo condiciones de delación para proveer c) tratar el producto del paso b) bajo condiciones apropiadas para proveer d) tratar el producto clorado del paso c) con NH2Ri para proveer en la cual Ri es t rans - 4 - h i droxi -ciclohexilo, 2 - me ilamino-carbonilamino-ciclohexilo, acetí lamino-etilo , o metilamino-carbonílamino-etilo; en la cual Ar es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido; en la cual R4 es H, alquilo, alquilo sustituido, c i c loalqui 1 o ; o una sal farmacéuticamente aceptable, o un derivado de profármaco, o un metabolito biológicamente activo; con la condición que cuando Ri sea acetil minoetiio, Ar no sea 4-piridilo. Esta invención también provee un método para preparar el compuesto que tiene la estructura V, que comprende los pasos de a) hacer reaccionar para proveer en la cual P es un grupo protector que puede ser el imi nado ; b) tratar el producto del paso a) bajo condiciones de ciclación para proveer c) tratar el producto del paso b) bajo condiciones apropiadas para proveer y d) tratar el producto clorado del paso c) con para proveer en la cual Ri es arilo, arilo sustituido, heteroarilo ; en la cual R2 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloalquilo; en la cual R3 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en la cual dicho alquilo sustituido es -C(RS) (R7)NR4R5, en la cual Re y R7 , son cada uno H o alquilo, en la cual R4 y R5 son cada uno alquilo o cicloalquilo, o NR4R5 es un sistema de anillo que tiene entre 4 y 7 eslabones. Los compuestos representados por las fórmulas VI, VII, y VIII pueden ser sintetizados mediante cualquiera de los esquemas de reacción I- VIII. Los compuestos representados por las fórmulas IX, y X se pueden preparar utilizando el esquema de reacción I . La invención se ilustra también mediante los siguientes ejemplos los cuales, en ninguna manera, deben ser considerados como limitaciones adicionales. Los contenidos de todas las referencias, solicitudes de patente pendientes y solicitudes de patente publicadas, citadas a través de esta solicitud, incluyendo aquellas a las que se hace referencia en la sección de antecedentes de la invención, quedan incluidas para referencia en la presente invención. Se debe entender que los modelos utilizados a través de los ejemplos son modelos aceptados y que la demostración de la eficacia en estos modelos puede pronosticar la eficacia en humanos. Esta invención se entenderá mejor a partir de la siguiente sección de detalles experimentales. Sin embargo, un experto en la técnica apreciará fácilmente que los métodos y resultados específicos discutidos son únicamente ilustrativos de la invención tal como se describe con mayor detalle en las reivindicaciones que siguen después de ésta.

Detalles experimentales Las de s a z apu inas de la invención se pueden preparar utilizando métodos normales para síntesis orgánica. Las desazapurinas se pueden purificar mediante HPLC de fase inversa, cromatografí , recristalización, etc., y se puede confirmar sus estructuras utilizando análisis de espectro de masas, análisis elemental, espectroscopia IR y/o RMN . Típicamente, la síntesis de los intermediarios así como de las desazapurinas de la invención se efectúa en solución. La adición y eliminación de uno o más grupos protectores también es una práctica típica y es conocida por los expertos en la técnica. Los esquemas de síntesis típicos para la preparación de los intermediarios de desazapurina de la invención se indican más adelante en el esquema de reacción I.

ESQUEMA DE REACCIÓN I en la cual 3 , R5 y Rg son como se definieron an eriormente. En general, se puede tratar un compuesto protegido 2 - mino - 3 - c iano -pi rrol con un halogenuro de acilo para formar un carboxi ami do - 3 - c i no - p i rrol el cual se puede tratar con metanol ácido para efectuar el cierre de anillo hasta una i rro 1 o [ 2 , 3 d] p i r imidi n- 4 ( 3 H ) - ona (Muller , C.E. et al. , J. Med. Chem. 40:4396 (1997) ) . La eliminación del grupo protector pirrólo seguido por tratamiento con un reactivo para cloración, por ejemplo, oxicloruro de fósforo, produce 4-cloro-7H-pi rro 1 o [ 2 , 3 d ] i r imidi as sustituidas o no sustituidas. El tratamiento de la c 1 orop i r imidi na con aminas permite obtener 7 -desazapur inas . Por ejemplo, como se muestra en el esquema de reacción I, se trata un N - (1-dl-feniletil) - 2 -amino - 3 - ci no - p i rrol con un halogenuro de acilo en piridina y di c 1 oromet ano . El N- ( 1 - di - feni 1 et i 1 ) - 2 -f eni 1 carboxi ami do - 3 - c iano - i rrol resultante se trata con una mezcla 10:1 de metanol /ácido sulfúrico para efectuar el cierre de anillo, dando como resultado una di - 7H - 7 - ( 1 - f en i 1 et i 1 ) p i r rol o [ , 3 d] i rimidin - 4 ( 3H ) - on . La eliminación del grupo feniletilo mediante tratamiento de la pirimidina con ácido pol i f o s f ór i co (PPA) seguido por P0C13 permite obtener un intermediario clave, la -cloro-7 H - p i rolo [ 2 , 3 d ] p i imi di na . El tratamiento adicional de la 4 - c 1 or o - 7H - p i r r o 1 o [ 2 , 3 d ] i imidi na con diversas aminas listadas en el cuadro I permite obtener los compuestos de las fórmulas (I) y (II) .

CUADRO 1 Un método general para preparar pirróles 6-sustituidos se muestra en el siguiente esquema de reacción (esquema de reacción II) .

ESQUEMA DE REACCION II en el cual Ri hasta R5 son como se definieron anteriormente . La tr nses erif cación y alquilación de cianoacetato de etilo con una a - hal ogenocet ona permite obtener un éster cetometí lico . La protección de la cetona seguido por tratamiento con un clorhidrato de amidina (por ejemplo, alqui 1 midina , arilamidina o alquilarilamidina) produce la pirimidina protegida con cetal resultante. La eliminación del grupo protector, seguido por delación y tratamiento con oxicloruro de fósforo permite obtener el intermediario clorado el cual se puede tratar también con una amina para obtener un pirrol 6-sustituido con amina. De manera adicional, se puede obtener la alquilación del nitrógeno del pirrol bajo condiciones reconocidas en la técnica.

Un método general para preparar pirróles sustituidos se muestra en el siguiente esquema reacción (esquema de reacción III) . en el cual Ri hasta R6 son como se definieron anteriormente y R es un grupo protector que puede ser eliminado. La condensación de malononitrilo y un exceso de una cetona seguido por bromación del producto permite obtener una mezcla de material de partida, productos mono - bromado s y di-bromados, los cuales se tratan con una a 1 qui 1 arni na , arilamina o a 1 qu i 1 r i 1 mi na . El producto amina resultante se acila con cloruro de ácido y el pirrol monoacilado se cicliza en presencia de ácido para obtener la pirimidina correspondiente. El grupo protector del pirrol se elimina con ácido polif osf órico y se trata con oxicloruro de fósforo para producir un producto clorado. El pirrol clorado podría ser tratado posteriormente con una amina para producir un pirrol 5-sustituido con amino. La alquilación del nitrógeno del pirrol se puede obtener bajo condiciones reconocidas en la técnica. Los esquemas de reacción IV y V muestran métodos para preparar las desazapurinas 1 y 2 de la invenc i ón . en las cuales R5 y R6 son como se describieron anteriormente, por ejemplo, CH3.

Preparac ión específica _de 6 - me t i 1 -pirrolopirimidinas La reacción clave hacia las 6-me ~ i lpi rro 1 op i r imi dinas (1) [R5 = CH3] es la ciclación de un cianoacetato con benzamidina hasta una pirimidina. Se cree que el ciano acetato de metilo se ciclará de manera más eficiente con benzamidina hasta una pirimidina que al éster etílico correspondiente. Por lo tanto, la t ranses t er i f i c ac ión y alquílación de cianoacetato de etilo en presencia de NaOMe y de un exceso de una porción a-halogenoacetilo, por ejemplo, c 1 oroacetona , da el éster metílico (3) deseado con un rendimiento de 79% (esquema de reacción IV) . El cetoéster (3) se protege en la misma manera que el acetal (4) con 81% de rendimiento. Se obtiene un nuevo método de ciclación hasta la pirimidina (5) con un clorhidrato de amidina, por ejemplo, clorhidrato de benzamidina, con 2 equivalentes de DBU para obtener el compuesto 5 con un rendimiento de 54% aislado. Este método mejora el rendimiento desde un 20% utilizando las condiciones publicadas, el cual utiliza NaOMe durante la ciclación con guanidína. La ciclación hasta el pí rrol - p i rimi dina (6) se obtiene mediante desprotección del acetal en HC1 acuoso con 78% de rendimiento. La reacción de (6) con oxicloruro de fósforo a reflujo permite obtener el derivado 4-cloro correspondiente (7) . La copulación con t rans - 4 - ami noc i c 1 ohexano 1 en sulfóxido de dimetilo a 135°C permite obtener (1) con 57% a partir de (7) . Un experto en la técnica apreciará que la elección de los reactivos permite una mayor flexibilidad para elegir al sustituyente 5 deseado .

ESQUEMA DE REACCIÓN IV Preparación específica de 5 -met i 1 -pirrolopirimidinas La condensación de Knoevenagel de mal ononi t r i 1 o y un exceso de cetona, por ejemplo, acetona en benceno a reflujo permite obtener 8 con 50% de rendimiento después de la destilación. La bromación de 8 con N-bromosuccinimida en presencia de peróxido de benzoilo en cloroformo da una mezcla de material de partida, productos monobromados (9) , y di-bromados (5/90/5) después de la destilación (70%) . La mezcla se hace reaccionar con una a-me t i 1 1 qui 1 amina o a -me t i 1 a i 1 amina , por ejemplo, - me t i 1 benc i 1 amina , para suministrar el aminopirrol (10) . Después de pasar a través de una columna corta de gel de sílice, la amina parcialmente purificada (31% de rendimiento) se acila con un cloruro de ácido, por ejemplo, cloruro de benzoilo para suministrar pirróles monoacilados (11) , y diacilados (12) , los cuales se separan mediante cromatogr fí de vaporización instantánea. La hidrólisis en medio ácido del pirrol disustituido (12) genera un rendimiento combinado de 29% para el acilpirrol (11) · Las ciclación en presencia de ácido sulfúrico concentrado y DMF da (13) (23%) , el cual se desprotege con ácido pol i f o s fó i co para obtener (14) . La reacción de (14) con oxicloruro de fósforo a reflujo dará el derivado -cloro (15) correspondiente. La copulación con trans-4-ami noc i c 1 ohexano 1 en sulfóxido de dimetilo a 135°C permite obtener (2) [Re = CH3] en un 30% a partir de (14) (Véase Esquema de reacción V) . Un experto en la técnica apreciará que la elección de los reactivos permite una mayor flexibilidad para elegir al sustituyente Rs deseado.

ESQUEMA DE REACCION V NC 15 Ruta de síntesis alternativa para pirróles R6 - su s t ituidos , por erj em lo 5 - me t i lpirrolo-pirimidinas Esta ruta alternativa para pirróles R6-sustituidos, por ejemplo, 5 - me t i lpi rrolo -pirimidinas, implica la transesterificación y alquilación de cianoacetato de etilo hasta (16) (Esquema de reacción VI) . La condensación de (16) con clorhidrato de benzamidina con 2 equivalentes de DBU permite obtener la pirimidina (17) . La delación hasta el pirrol -pirimidina (14) se obtiene mediante desprotección del acetal en HC1 acuoso. La reacción de (14) con oxicloruro de fósforo a reflujo da el derivado 4-cloro correspondiente (15) . La copulación con trans-4-ami noc i c 1 ohexanol en sulfóxido de dimetilo a 135°C permite obtener 2. Este procedimiento reduce el número de reacciones de síntesis hasta el compuesto objetivo (2) de 9 a 4 pasos. Además, el rendimiento se mejora en forma dramática. De nuevo, un experto en la técnica apreciará que la elección de los reactivos permite una mayor flexibilidad para elegir al sustituyente Rs deseado.

ESQUEMA DE REACCIÓN VI Un método general para preparar des-metil pi rro 1 se muestra en el siguiente esquema de reacción (Esquema de reacción VII) ESQUEMA DE REACCIÓN en el cual Ri hasta R3 son como se definieron anteriormente . La alquilación de un cianoacetato de alquilo con dietilacetal en presencia de una base permite obtener un c i anod i e t i 1 a c e t a 1 el cual se trata con una sal de amidina para producir un precursor met i 1 - p i o1op i r imi di na . El precursor se clora y se trata con una amina para formar el compuesto de s - met i lp i rro 1 op i rimi di na objetivo como se demostró anteriormente. Por ejemplo, el esquema de reacción VIII muestra la síntesis del compuesto (18) .

ESQUEMA DE REACCION VIII Se alquila el cianoacetato de metilo comercialmente disponible con dietilacetal de bromoacetaldehí do en presencia de carbonato de potasio y Nal para obtener (19) . La ciclación hasta la pirimidina (20) se obtiene en dos pasos. I ni c i lment e , se forma el compuesto pirimidina-acetal mediante reacción de (19) con clorhidrato de benzamidina con 2 equivalentes de DBU . El compuesto i r imi din - ac e t a 1 resultante se desprotege sin purificación con HC1 1N acuoso y el aldehido resultante se cicla hasta la pirrolo-pirimidina (20) , la cual se aisla mediante filtración. La reacción de (20) con oxicloruro de fósforo a reflujo permite obtener el derivado 4-cloro correspondiente (21) . La copulación del derivado clorado con t rans - 4 - aminoc ic lohexanol en DMSO a 135°C permite obtener el compuesto (18) a partir del compuesto (21) . Los esquemas de reacción II-VIII demuestran que es posible agregar un grupo funcional a las posiciones 5 y 6 del anillo de pirrolopi rimidina . Mediante el uso de diferentes reactivos de partida y modificaciones leves de los esquemas de reacción anteriores, se pueden introducir diversos grupos funcionales en las posiciones 5- y 6- en las fórmulas (I) y (II) . El cuadro 2 ilustra algunos e emplos .

CUADRO 2 Lista selecta de pirrolopirimidinas sustituidas en las posiciones 5- y 6- Reactivo de inicio Rs H CUADRO 2 (cont.) Un experto en la técnica sabe que el metabolismo de los compuestos descritos en la presente invención en un individuo produce ciertos metabolitos biológicamente activos que pueden servir como fármacos. La invención se ilustra también mediante los siguientes ejemplos los cuales, en ninguna manera, deben ser considerados como limitaciones adicionales . Los contenidos de todas las referencias, solicitudes de patente pendientes y solicitudes de patente publicadas, citadas a través de esta solicitud, incluyendo aquellas a las que se hace referencia en la sección de antecedentes de la invención, quedan incluidas para referencia en la presente invención. Se debe entender que los modelos utilizados a través de los ejemplos son modelos aceptados y que la demostración de la eficacia en estos modelos puede pronosticar la eficacia en humanos.

EJEMPLOS Preparación 1 Se utiliza una modificación del método de alquilación de Seela y Lüpke1. A una solución enfriada con hielo (0°C) de cianoacetato de etilo (6.58 g, 58.1 mmoles) en MeOH (20 mi) se agrega lentamente una solución de NaOMe (25% p/v; 58.1 mmoles) . Después de 10 minutos, se agrega lentamente cloroacetona (5 mi; 62.8 mmoles) . Después de 4 horas, se elimina el solvente. El aceite de color café se diluye con el EtOAc (100 mi) y se lava con H20 (100 mi) . La fracción orgánica se seca, se filtra y se concentra hasta un aceite de color café (7.79 g ; 79%) . El aceite (3) (esquema de reacción IV) es una mezcla de productos de ésteres de metilo/etilo (9/1), y se utiliza sin purificación adicional. XH RMN (200 MHz, CDC13) d__4.24 (q, J = 7.2 Hz, OCH2) , 3.91 (dd, 1H, J = 7.2, 7.0 Hz, CH) , 3.62 (s, 3H, OCH3) , 3.42 (dd, 1H, J = 15.0, 7.1 Hz, 1 x CH2) ; 3.02 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0 Hz, 1 x CH2) ; 2.44 (s, 3H, CH3) , 1.26 (t, J = 7.1 Hz , éster-CH3) . 1 Seela, F . ; Lüpke , U. Chem. Ber. 1977, 110 , 1462- 1469.

Preparación 2 Se utiliza el procedimiento de Seela y Lüpke1. Por lo tanto, la protección de la cetona (3) (esquema de reacción IV; 5.0 g, 32.2 mmoles) con etilenglicol (4 mi, 64.4 mmoles) en presencia de TsOH (100 mg) permite obtener (4) como un aceite (esquema de reacción IV; 5.2 g, 81.0) después de la cromatografía de vaporización instantánea (Si02; 3/7 EtOAc/Hex, Rf 0.35) . Todavía contiene 5% de éster etílico . XH RMN (200 MHz, CDCl ) d_4.24 (q, J = 7.2 Hz, OCH2) , 3.98 (s, 4H, 2 x acetal-CH2) , 3.79 (s, 3H, OCH3) , 3.62 (dd, 1H, J = 7.2, 7.0 Hz, CH) , 2.48 (dd, 1H, J = 15.0, 7.1 Hz, 1 x CH2 ) , 2.32 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0 Hz, 1 x CH2) ; 1.35 (s, 3H, CH3 ) , 1.26 (t, J = 7.1 Hz, éster-CH3) .

MS (ES) : 200.1 (M+ +l ) . 1 Seela, F . ; Lüpke , U. Chem. Ber. 1977, 110 , 1462 - 1469.

Preparación 3 Se calienta una solución de acetal (4) (esquema de reacción IV, 1 g, 5.02 mmoles) , benzamidina (786 mg , 5.02 mmoles) , y DBU (1.5 mi, 10.04 mmoles) en DMF seca (15 mi) hasta 85°C durante 15 horas. La mezcla se diluye con CHC13 (30 mi) y se lava con NaOH 0.5 N (10 mi. ) y H20 (20 mi) . La fracción orgánica se seca, se filtra y se concentra hasta un aceite de color café. Se intenta la cromatografía de vaporización instantánea (Si02; 1/9 EtOAc/CH2Cl2 , Rf 0.35) , pero el material se cristaliza en la columna. El gel de sílice se lava con MeOH. Las fracciones que contienen el producto (5) (esquema de reacción IV) se concentran y utilizan sin purificación adicional (763 mg , 54.3%) . 1U RMN (200 MHz, CDC13) 6 8.24 (m, 2H, Ar-H) , 7.45 (m, 3H, Ar-H) , 5.24 (br s, 2H, NH2) , 3.98 (s, 4H, 2 x acetal-CH2) , 3.60-3.15 (m, 2H, CH2) , 1.38 (S , 3H, CH3) . MS (ES) : 288.1 (M++l) .

Preparación del compuesto (20) ( esquema de reacción VI I I ) Se calienta una solución de acetal (19) (4.43 g, 20.6 minóles) \ clorhidrato de benzamina (3.22 g, 20.6 mmoles) , y DBU (6.15 mi, 41.2 mmoles) en DMF seca (20 mi) hasta 85°C durante quince horas. La mezcla se diluye con 100 mi de CHCl3, y se lava con H20 (2 x 50 mi) . La fracción orgánica se seca, se filtra y se concentra hasta un aceite de color café oscuro. El aceite de color café oscuro se agita en HC1 1N (100 mi) durante 2 horas a temperatura ambiente. La suspensión resultante se filtra para obtener la sal HC1 de (20) como un sólido de color canela (3.60 g, 70.6%) . XH RMN (200 MHz, D S0-d6) 11.92 (s 1H) , 8.05 (m, 2H, Ar-H) , 7.45 (m, 3H, Ar-H) , 7.05 (s, 1H , pirrol - H ) , MS (ES ) : 212. 1 (M++l ) .

Preparación 4 Se agita una solución de acetal (5) (700 mg, 2.44 mmoles) en HC1 1N (40 mi) durante 2 horas a temperatura ambiente. La suspensión resultante se filtra para obtener la sal HCl de 2 - f eni 1 - 6 -me t i 1 -7H - p i olo [ 2 , 3 d] p i r imidin- 4 ( 3H) - ona como un sólido de color canela (498 mg , 78.0%) . U RMN (200 MHz , DMSO-d6) d 11.78 (s, 1H) , 8.05 (m, 2H, Ar-H) , 7.45 (ra, 3H, Ar-H) , 6.17 (s, 1H, pirrol-H) , 2.25 (s, 3H, CH3 ) . MS (ES) : 226 .1 ( ++l) .

Preparac ion 5 Se utiliza una modificación del método de ciclación de Chen et al1. A una solución enfriada con hielo (0°C) del bromuro (9) , (esquema de reacción V; 20.0 g, 108 turnóles; 90% pureza) en alcohol isopropílico (60 mi) se agrega lentamente una solución de - me t i 1 benc i 1 ami na (12.5 mi, 97.3 mraolea) . La solución de color negro se deja calentar hasta temperatura ambiente y se agita durante 15 horas. La mezcla se diluye con EtOAc (200 mi) y se lava con NaOH 0.5 N (50 mi) . La fracción orgánica se seca, se filtra y se concentra hasta una resina de color negro (19.2 g ; 94%) . El residuo se purifica parcialmente mediante cromatografía de vaporización instantánea (Si03; 4/96 MeOH/CH2Cl2 , Rf 0.35) hasta un sólido de color negro (6.38 g, 31%) como el compuesto dl-l- (l-feniletil) -2-amino-3-ciano-4 -met i l i r rol . MS (ES) : 226.1 (M++l) . 1 Chen, Y. L . Mansbach, R. S . ; Winter, S. M . ; Brooks, E . Collins, J. ; Gorman, M. L . ; Dunaiskis, A. R . ; Faraci, W. S . ; Gallaschun, R. J . ; Schmidt , A . ; Schulz, D. W. , J. Med . Chem. 1997, 40, 1749-1754.

Preparación 6 A una solución de di - 1 - ( 1 - feniletil ) - 2 -araino - 3 - ci ano - 4 , 5 - dimet i l i rrol 1 (14.9g, 62.5 inmoles) y piridina (10.0 mi) en diclorometano (50.0 mi) se agrega cloruro de benzoílo (9.37 g, 66.7 inmoles) a 0°C. Después de agitar a 0°C durante 1 hora, se agrega hexano (10.0 mi) para ayudar a precipitar el producto. El solvente se elimina al vacío y el sólido se recristaliza con EtOH/H20 para obtener 13.9 g (65%) de di - 1 - ( 1 - f eni 1 e t i 1 ) - 2 -f en i 1 carbón i laraino-3 -ciano-4 , 5- dime tilpirrol . P.f. 218-221°C. 1H RMN (200 MHz, CDCl3) d_1.72 (s, 3H) , 1.76 (d, J = 7.3 Hz, 3H) , 1.98 (s, 3H) , 5.52 (q, J = 7.3 Hz, 1H) , 7.14-7.54 (m, 9H) , 7.68- 7.72 (dd, J = 1.4 Hz, 6.9 Hz , 2H) , 10.73 (s, 1H) . MS (ES) : 344.4 (M++l ) . 1 Liebigs Ann. Chem. 1986, 1485-1505. Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar.

Preparación 6A di - 1 - (1-feniletil) -2- (3 -píridil ) carbonil -amino-3-ciano-4,5 - dimet i lp i r rol . LH RMN (200 MHz, CDC13) d__1.83 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 2.02 (s, 3H) , 2.12 (s, 3H) , 5.50 (q, J = 6.8 Hz, 1H) , 7.14-7.42 (m, 5H) , 8.08 (m, 2H) , 8.75 (m, 3H) . MS (ES) : 345.2 (M++l) . di - 1 - (1-feniletil) -2- (2- furil ) carbonil -amino-3 -ciano-4 , 5 - dime t i lp irrol . 1U RMN (200 MHz , CDCl3) d 1.84 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 1.92 (s, 3H) , 2.09 (s, 3H) , 5.49 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 6.54 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H) , 7.12-7.47 (m, 7H) . MS (ES) : 334.2 (M†+l) , 230.1. di -1- (1-feniletil) -2- (3-furil) carbonil -amino-3 -ciano-4 , 5- dimet i lp i rrol . :H RMN (200 MHz, CDC13) d 1.80 (d, J = 7 Hz 3H) , 1.89 (s, 3H) , 2.05 (s, 3H) , 5.48 (q, J = 7 Hz, 1H) , 6.59 (s, 1H) , 7.12-7.40 (m, 6H) , 7.93 (s, 1H) . MS (ES) . 334.1 (M++l) , 230.0. di - 1 - (1-feniletil) -2-ciclopentilca bonil-amino-3-ciano-4 , 5- dimet i Ip i r ro 1. LH RMN (200 Hz, CDC13) d 1.82 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 1,88 (S, 3H) , 2.05 (s, 3H) , 1.63 - 1.85 (m, 8H) , 2.63 (m, 1H) , 5.43 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 6.52 (s, 1H) , 7.05- 7.20 (m, 5H) . MS (ES) : 336.3 (M'' 1) . di - 1 - (1-feniletil) -2- (2-tienil) carbonil-amino-3-ciano-4,5 - dime t i Ip ir ol . 1R RMN (200 MHz, CDC13) 6 1.82 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 1.96 (S, 3H) , 2.09 (s, 3H) , 5.49 (q, J = 6.B Hz, 1H) , 7.05-7.55 (m, 8H) . MS (ES) : 350.1 (M++l) , 246.0. di - 1 - (1-feniletil) -2- (3-tienil) ca bonil-amino-3 -ciano-4 , 5 - dimet i lp irrol . H RMN (200 MHz, CDC13) 6 1.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 1.99 (s, 3H) , 2.12 (s, 3H) , 5.49 (q, J = 7.0 Hz, 1H) , 6.90 (m, 1H) , 7.18-7.36 (m, 6H) , 7.79 (m, 1H) . MS (ES) : 350.2 (M++l) , 246.1. dl-l - (1-feniletil) - 2- (4-fluorofenil) -c arboni 1 mi no - 3 - c i ano -4 , 5-dimetilpirrol .

XH RMN (200 MHz, CDC13) 6 1.83 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 1.96 (s, 3H) , 2.08 (s, 3H) , 5.51 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 7.16-7.55 (m, 9H) . MS (ES) : 362.2 (M++l) , 258.1. dl-1- (1-feniletil) -2- (3-fluorofenil) -carbonil amino - 3 - c i ano -4 , 5 - di me tilpirrol . lH RMN (200 MHz, CDC13 ) ñ 1.83 (d, J = 7.4 Hz 3H) , 1.97 (s, 3H) , 2.10 (s, 3H) , 5.50 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 7.05-7.38 (m, 7H) , 7.67-7.74 (m, 2H) . MS (ES) : 362.2 (M++l) , 258.1. dl-l~ (1-feniletil) -2- (2-fluorofenil) -carbonilamino-3-ci ano -4,5- dime tilpirrol . *H RMN (200 MHz, CDC13 ) d 1.85 (d, J = 7.2 Hz, 3H) , 1.94 (s, 3H) , 2.11 (s, 3H) , 5.50 (q, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.12-7.35 (m, 6H) , 7.53 (m, 1H) , 7.77 (m, 1H) , 8.13 (m, 1H) . MS (ES) : 362.2 (M++l) , 258.0. dl-1- (1-feniletil) - 2 - i sopro i 1 carboni 1 -amino-3-ciano-4 , 5 - dimet ilpirrol . 1U RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.19 (d, J = 7.0 Hz, 6H) , 1.82 (d, J = 7.2 Hz, 3H) , 1.88 (s, 3H) , 2.06 (s, 3H) , 2.46 (m, 1H) , 5.39 (m, J = 7.2 Hz, 1H) , 6.64 (s, 1H) , 7.11 -7.36 (m, 5H) . S (ES) : 310.2 (M+ + l) , 206.1 En el caso de acilación de dl-l-(l-feniletil) -2 -amíno-3 -ciano-4 -metí lpirrol , se obtienen dl-1- ( 1 - f eni le t i 1 ) - 2 - be nz oi 1 mi no - 3 - c i ano -4 - díme t i lpi rrol monoac i 1 ado y el pirrol diacilado dl-l- ( 1 - feniletil ) - 2 - dibenzo i 1 amino - 3 - c iano - 4 -met i lpi rrol . Pirrol monoacilado: XH RMN (200 MHz, CDCl3) d-7.69 (d, 2H, J = 7.8 Hz, Ar-H) , 7.58-7.12 (m, 8H, Ar-H) , 6.18 (s, 1H, pirrol-H) , 5.52 (q, 1H, J = 7.2 Hz, CH-CH3) , 2.05 (s, 3H, pirrol-CH3) , 1.85 (d, 3H, J = 7.2 Hz, CH-CH3) . MS (ES) : 330.2 (M+ +l) . Pirrol diacilado: XH RMN (200 MHz, CDC13) d_7.85 (d, 2H, J = 7.7 Hz, Ar-H) , 7.74 (d, 2H, J = 7.8 Hz, Ar-H) , 7.52 -7.20 ( m , 9H, Ar-H) , 7.04 (m, 2H, Ar-H) , 6.21 (s, 1H, pirrol-H) , 5.52 (q, 1H, J = 7.2 Hz, CH-CH3) , 1.77 (d, 3H, J = 7.2 Hz , CH-CH3) , 1.74 (s, 3H, pi rol - CH3 ) . MS (ES) : 434.1 (M+ + l) .

Preparac i ?? _7 A una solución de di - 1 - ( 1 - feni 1 e i 1 ) - 2 -f eni 1 c arboxi amido - 3 - c i ano - 4 , 5 - dime t i lp i rro 1 (1.0 g, 2.92 inmoles) en metanol (10.0 mi) se agrega ácido sulfúrico concentrado (1.0 mi) a 0°C. La mezcla resultante se somete a reflujo durante 15 horas y se enfría hasta temperatura ambiente. El material precipitado se filtra para obtener 0.48 g (48%) de dI-5,6-dimetil-2-fenil-7H-7- (1-feniletil) -pirrólo [2,3d]pirimidin-4 (3H) -ona. 1H RMN (200 Hz, CDCl3) d_2.02 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 2.04 (s, 3H) , 2.41 (s, 3H) , 6.25 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 7.22 - 7.50 (m, 9H) , 8.07-8.12 (dd, J = 3.4 Hz, 6.8 Hz, 2H) , 10.51 (s, 1H) . MS (ES) : 344.2 (M++l) . Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la de la preparación 7: di -5, 6 -di me il - 2 - (3-piridil) -7H-7- ( 1 -feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4 (3H) -ona. 1K RMN (200 MHz, CDC13) d_2.03 (d, J = 7.2 Hz, 3H) , 2.08 (s, 3H) , 2.42 (s, 3H) , 6.24 (q, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.09 - 7.42 (m, 5H) , 8.48 (m, 2H) , 8.70 (m, 3H) . MS (ES) : 345.1 (M++l) . dl-5,6-dimetil-2- (2-furil) - 7H- 7 - ( 1 -feniletil) pirrólo [2, 3d] pirimidin-4 (3H) -ona. 1H RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.98 (d, J = 7.8 Hz, 3H) , 1.99 (s, 3H) , 2.37 (s, 3H) , 6.12 (q, J = 7.B Hz, 1H) , 6.48 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H) , 7.17-7.55 (m, 7H) , 9.6 (s, 1H) . MS (ES) : 334.2 (M++l) . dI-5,6-dimetil-2- (3-furil) -7H-7 - ( 1 -feniletil) pirrólo [2,3d] irimidin-4 ( 3H) -ona. 1U RMN (200 MHz, CDC13) 8 1.99 (d, J = 7 Hz, 3H) , 2.02 (s, 3H) , 2.42 (s, 3H) , 6.24 (q, J = 7 Hz, 1H) , 7.09 (s, 1H) , 7.18-7.32 (m, 5H) , 7.48 (s, 1H) , 8.51 (S , 1H) . S (??) : 334.2 ( + + l) . dl-5, 6-dimetil-2-ciclopentil-7H-7 - ( 1 -feniletil) pirrólo [2, 3d] pirimidín-4 (3H) -ona. XH RMN (200 Hz, CDC13) d 1.95 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 2.00 (s, 3H) , 2.33 (s, 3H) , 1.66-1.88 (m, 8H) , 2.97 (m, 1H) , 6.10 (q, J - 7.4 Hz, 1H) , 7.16-7.30 (m, 5H) , 9.29 (s, 1H) . MS (ES) ; 336.3 (M+ + l) . dl-5,6-dimetil-2- (2-tienil) -7H-7 - (1-feniletil) irrólo [2 , 3 d] pirimidin-4 (3H) -ona. LU RMN (200 MHz, CDC13) d, 2.02 (d, J = 7.2 Hz, 3H) , 2.06 (s, 3H) , 2.41 (s, 3H) , 6.13 (q, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.12 (dd, J = 4.8, 2.3 Hz, 1H) , 7.26-7.32 (m, 5H) , 7.44 ( d , J = 4.8 Hz, 1H ) , 8.01 (d, J = 2.8 Hz, 1H) , 11.25 (s, 1H) . MS (ES) : 350.2 (M++l) . dI-5,6-dime il-2- (3-tienil) -7H-7 - ( 1 -feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4 ( 5 H ) -ona. XH RMN (200 MHz, CDC13) d 2.00 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 2.05 (s, 3H) , 2.43 (s, 3H) , 6.24 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 7.24 -7.33 (m, 5H) , 7.33 - 7.39 (m, 1H) , 7.85 (m, 1H) , 8.47 (m, 1H) , 12.01 (s, 1H) . MS (ES) : 350.2 (M++ l) . dl-5,6-dime il-2- (4-fluorofenil) -7H-7- ( 1 -feniletil) irrólo [2 , 3 d] pirimidin-4 (3H) -ona . H RMN (200 MHz, CDC13) ó 2.01 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 2.05 (s, 3H), 2.42 (s, 3H) , 6.26 (q, J = 6.8 Hz, 1H) , 7.12-7.36 (m, 7H) , 8.23-8.30 (m, 2H) , 11.82 ( s , 1H) . MS (ES) : 362.3 (M++l) . di -5, 6-dimetil-2-(3-fluorofenil)-7H-7-(l-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4 (3H) -ona. 1H RMN (200 MHz , CDC 13 ) Ó 2.02 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 2.06 (s, 3H) , 2.44 (s, 3H) , 6.29 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 7.13 -7.51 (m, 7H) , 8.00 - 8.04 (m, 2H) , 11.72 (s , 1H) . MS (ES) : 362.2 (M++l) . dl -5, 6-dimetil-2- (2-fluorofenil) -7H-7 - ( 1 -feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidin-4 ( 3 H) -ona. JH RMN (200 MHz, CDC13) 5 2.00 (d, J = 7.2 Hz, 3H) , 2.05 (s, 3H) , 2.38 (s, 3H) , 6.24 (q, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.18-7.45 (m, 8 H ) , 8.21 (m, 1H) , 9.54 ( s , 1H) . MS (ES) : 362.2 ( +l) . dl-5 , 6-dimetil-2-isopropil-7H-7- ( 1 -feniletil) irrólo - [2,3d]pirimidin-4 (3H) - ona . XH RMN (200 MHz, CDC13) d 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 1.32 (d, J = 7.0 Hz , 3H) , 2.01 (s, 3H) , 2.34 (s, 3H) , 2.90 (m, 1H) , 6.13 (m, 1H) , 7.17-7.34 (m, 5H) , 10.16 ( s , 1H) . MS (ES) : 310.2 (M++l ) .

Preparación 8 Se agita una solución de dl-l- (l-feniletil) -2-benzoilamino-3-ciano-4-dimetilpirrol (785 mg , 2.38 mmoles) con H2S04 concentrado (1 ml ) en DMF (13 ml ) a 130°C durante 48 horas. La solución de color negro se diluye con CHC13 (100 ml ) y se lava con NaOH 1N (30 ml ) , y salmuera (30 ml) . La fracción orgánica se seca, se filtra, se concentra y se purifica mediante cromatografía de vaporización instantánea (Si02; 8/2 EtOAc/Hex, Rf 0.35) hasta un sólido de color café (184 mg , 24%) como dl-5-metil-2-f enil-7H-7- (1-f eniletil) -pirrólo [2, 3d]pirimidin-4 (3H) -ona . XH RMN (200 MHz , CDC13) d_8.18 (m, 2H, Ar-H) , 7.62 -7.44 (m, 3H, Ar-H) , 7.40-7.18 (m, 5H, Ar-H) , 6.48 (s, 1H, pirrol-H) , 6.28 (q, 1H, J = 7.2 Hz, CH-CH3) , 2.18 (s, 3H, pirrol-CH3) , 2.07 (d, 3H, J = 7.2 Hz , CH-CH3 ) . MS (ES) : 330.2 (M++l) .

Preparación 9 Se somete a reflujo una mezcla de dl-l-(l-feniletil) -2~amino-3-ciano-4(5-dimetilpirrol (9.60 g, 40.0 mmoles) y de ácido fórmico (50.0 ml , 98%) durante 5 horas. Después de enfriar hasta temperatura ambiente y de raspar las paredes del matraz, se forma un precipitado abundante y se filtra. El material se lava con agua hasta que los lavados muestran pH neutro para obtener dl-5,6-dimetil-7H-7- (1-feniletil) irrólo [2 , 3d]pirimidin-4 ( 3H ) - ona . ?H RMN (200 MHz, CDC13) d 1.96 (d, J = 7.4 Hz, 3H) , 2.00 (s, 3H) , 2.38 (s, 3H) , 6.21 (q, J -7.4 Hz, 1H) , 7.11-7.35 (m, 5H) , 7.81 (s, 1H) , 11.71 (s, 1H) . ?? (ES) : 268.2 (M+ + l) .

Preparación 10 Se suspende di - 5 , 6 - dime t i 1 - 2 - f eni 1 - 7H - 7 - ( 1 -f eni 1 e t i 1 ) pi rrolo [ 2 , 3 d] i r imidin- 4 ( 3H) - ona (1.0 g, 2.91 minóles) en ácido pol i f os f ór i co (30.0 mi) . La mezcla se calienta a 100°C durante 4 horas. La suspensión caliente se vierte en hielo con agua, se agita vigorosamente para dispersar la suspensión, y se basifica a pH 6 con KOH sólido. El sólido resultante se filtra y se recolecta para obtener 0.49 g (69%) de 5 , 6 - dime t i 1 - 2 - f eni 1 - 7H -pirrólo [2, 3d] pirimidin-4 (3H) -ona. ?E RMN (200 MHz, DMSO-d6) d_2.17 (s, 3H) , 2.22 (s, 3H) , 7.45 (br, 3H) , 8.07 (br, 2H, ) , 11.49 (s, 1H) , 11.82 (s, 1H) . ?? (ES) : 344.2 (M+ + l ) .

Los siguientes compuestos se obti en una manera similar a la de la preparación 10 5-metil-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d]pirimidin-4 (3H) -ona . MS (ES) : 226.0 (M+ + l) . 5,6-dimetil-2- (3-piridil) -7H-pirrolo[2,3d] -pirimidin-4 (3H) -ona. MS (ES) : 241.1 (M+ + l ) . 5,6-dimetil-2- (2-furil) -7H-pirrolo[2,3d] -pirimidin-4 (3H) -ona. ]? RMN (200 KHz, DMSO-ds) d 2.13 (s, 3H) , 2.18 (s, 3H) , 6.39 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H) , 6.65 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H) , 7.85 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H) , 11.45 (a, 1H) , 11.60 (s, 1H) . MS (ES) : 230.1 (M+ + l) . 5,6-dime il-2- (3-furil) -7H-pirrolo[2,3d] -pirimidin-4 (3H) -ona. 1 K RMN (200 MHz, DMSO-ds) d 2.14 (s, 3H) , 2.19 (s, 3H) , 6.66 (s, 1H) , 7.76 (s, 1H) , 8.35 (s, 1H) , 11.3 (s, 1H) , 11.4 (s, 1H) . MS (ES ) : 230.1 (M+ + l ) . 5, 6-dimetil-2-ciclopentil-7H-pirrolo [2 , 3 d] -pirimidin-4 (3H) -ona. :H MN (200 MHz, D SO-d6) d 1.57-1.91 (m, 8H) , 2.12 (s, 3H) , 2.16 (s, 3H) , 2.99 (m, 1H) , 11.24 (s, 1H) , 11.38 (s, 1H) . MS (ES) : 232.2 (M++l) . 5, 6-dimetil-2- (2-tienil) -7H-pirrolo [2, 3d] -pirimidin-4 (3H) -ona. ? RMN (200 MHz, DMSO-ds) 6 2.14 (s, 3H) , 2.19 (s, 3H) , 7.14 (dd, J = 3.0, 5.2 Hz, 1H) , 7.70 (d, J = 5.2 Hz 1H) , 8.10 (d, J = 3.0 Hz, 1H) , 11.50 (s, 1H) . MS (ES) : 246.1 (M +l) . 5, 6-dimetil-2- (3-tienil) -7H-pirrolo [2,3d] -pirimidin-4 (3H) -ona. 1H RMN (200 MHz, DMSO-ds) d 2.17 (s, 3H) , 2.21 (s, 3H) , 7.69 (m, 1H) , 7.75 (m, 1H) , 8.43 (m, 1H) , 11.47 (s, 1H) , 11.69 (s, 1H) . MS (ES) : 246.1 (M+ + l) . 5, 6 - dimet i 1 - 2 - (4-fluorofenil) -7H-pirrolo- [2, 3d] pirimidin-4 (3H) -ona. ? RMN (200 MHz , DMSO-d6) d 2.17 (s, 3H) , 2.21 (s, 3H) , 7.31 (m, 2H) , 8.12 (m, 2H) , 11.47 (s, 1H) . S (ES ) : 258.2 (M+ + l ) . 5,6-dimetil-2- (3-fluorofenil) - 7H -pirrólo - [2, 3d]pirimidin-4 (3H) -ona. 1¥L RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.18 (s, 3H) , 2.21 (s, 3H) , 7.33 (m, 1H) , 7.52 (m, 1H) , 7.85-7.95 (m, 2H) , 11.56 (s, 1H) , 11.80 (s, 1H) . MS (ES ) : 258.1 (M† + l ) . 5,6-dimetil-2- (2-fluorofenil) -7H-pirrolo-[2, 3d]pirimidin-4 (3H) -ona. ]'H RMN (200 MHz, D SO-d6) d 2.18 (s, 3H) , 2.22 (s, 3H) , 7.27 - 7.37 (m, 2H) , 7.53 (m 1H) , 7.98 (m, 1H) , 11.54 (s, 1H) , 11.78 (s, 1H) . MS (ES) : 258.1 ( + + l) . 5,6-dimetil-2-isopro il-7H-pirrolo- [2 , 3d] irímidin-4 ( 3H) -ona . XH RMN (200 MHz, DMSO-d6) ó 1.17 (d, J = 6.6 Hz, 6H) , 2.11 (s, 3H) , 2.15 (s, 3H) , 2.81 (m, 1H) , 11.20 (s, 1H) , 11.39 (s, 1H) . MS (ES) : 206.1 (M+ + l) . 5 , 6-dimetil-7H-pirrolo (2 , 3 d) pirimidin-4 ( 3H) -ona . 1H RMN (200 MHz, D SO-d6) 6 2.13 (s, 3H) , 2.17 (s, 3H) , 7.65 (s, 1H) . MS (ES) : 164.0 (M+ + l) .

Preparación 11 Se somete a reflujo una solución de 5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4 (3H) -ona (1.0 g, 4.2 mmoles) en oxicloruro de fósforo (25.0 mi) durante 6 horas y después se concentra al vacío hasta sequedad. Se agrega agua al residuo para inducir la cristalización y el sólido resultante se filtra y se recolecta para obtener 0.90 g (83%) de 4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] -pirimidina . XH RMN (200 MHz, DMSO-d6) d_2.33 (s, 3H) , 2.33 (s, 3H) , 7.46-7.49 (m, 3H) , 8.30-8.35 (m, 2H) , 12.20 ( s , 1H) . MS (ES) : 258.1 (M+ + l) . Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la de la preparación 11: 4-cloro-5 -me t i 1 - 2 -fenil-7H-pirrolo- [2 , 3d] pirimidina .

S (ES) : 244. O (M++l) 4 - c 1 oro - 6-metil-2-fenil-7H-pirrolo[2, 3d] -pirimidina . MS (ES) ; 244.0 (M++l) . 4-cloro-2-f enil-7H-pirrolo [2 , 3d]pirímídina ?? RMN (200 MHz , DMSO-ds) d 8.35 (2, 2H) 7.63 (br s, 1H) , 7.45 (m, 3H) , 6.47 (br s, 1H) . MS (ES) : 230.0 (M++l) . 4-cloro-5, 6-dimetil-2- (3-piridil) - 7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidína. MS (ES) : 259.0 (M++l) . 4-cloro-5, 6-dimetil-2- (2-furil) -7H-pirrolo- [2,3d]pirímidina. XH RMN (200 MHz, DMSO-d6 ) 6 2.35 (s, 3H) , 2.35 (s, 3H) , 6.68 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H) , 7.34 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H) , 7.89 ( dd , J = 1.8, 3.6 H , 1H) . MS (ES) : 24B .0 (M+ + l) . 4 - c loro -5,6 -dimetil-2- (3-furil) -7H-pirrolo- [2 , 3d] pirimidin . 1H RMN (200 MH z , DMSO-d6) d 2.31 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 6.62 (s, 1H) , 7.78 (s, 1H) , 8.18 (s, 1H) , 12.02 ( s , 1H) . ? (ES ) : 248.1 (M++l ) . 4-cloro-5,6-diraetil-2-ciclopentil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . XH RMN (200 MHz, DMSO-d6) 6 1.61-1.96 (m, 8H) , 2.27 (s, 3H) , 2.27 (s, 3H) , 3.22 (m, 1H) , 11.97 ( s , 1H) . MS (ES) : 250.1 (M++ l) . 4-cloro-5, 6-dimetil-2- (2-tienil) -7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . XH RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.29 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 7.14 ( dd , J = 3.1 Hz, 4.0 Hz , 1H) , 7.33 (d, J = 4.9 Hz, 1H) , 7.82 (d, J = 3.1 Hz, 1H) , 12.19 ( s , 1H) . MS (ES) : 264.1 (M++l) . 4-cloro-5, 6-dimetil-2- (3-tienil) -7H-pirrolo [2 , 3 d] pirimidina . XH RMN (200 MHz, DMSO-ds) 8 2.32 (s, 3H) , 2.32 (s, 3H) , 7.62 (dd, J = 3.0, 5.2 Hz, 1H) , 7.75 (d, J = 5.2 Hz, 1H) , 8.20 (d, J = 3.0 Hz, 1H) .

MS (ES) : 264.0 (M++l) 4-cloro-5, 6-dimetil-2- (4 -f luorof enil) - 7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . 1 K RMN (200 MHz, D SO-dfi) d 2.33 (s, 3H) 2.33 (s, 3H) , 7.30 (m, 2H) , 8.34 (m, 2H) , 12.11 (s 1H) . S ( E ? ) : 276.1 ( + + l ) . 4-cloro-5,6-dimetil-2- (3-fluorofenil) -7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . 1H RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.31 (s, 3H) 2.33 (s, 3H) , 7.29 (m, 1H) , 7.52 (m, 1H) , 7.96 (m 1H) , 8.14 (m, 1H) , 11.57 (s, 1H) . MS (ES) : 276.1 (M++l) . 4-cloro-5,6-dimetil-2- (2-fluorofenil) -7H-pirrolo [2, 3d]pirimidina. XH RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 2.34 (s, 3H) 2.34 (s, 3H) , 7.33 (m, 2H) , 7.44 ( m , 1H) , 7.99 (m 1H) , 12.23 ( s , 1H) . MS (ES) : 276.1 (M+ + l) . 4-cloro-5, 6-dimetil-2- i so ro i 1 - 7H-pi rrolo [ 2 , 3 d] pi rimidin .

XH RMN (200 MHz, DMSO-d6) d 1.24 (d, J = 6.6 Hz, 6H) , 2.28 (s, 3H) , 2.28 (s, 3H) , 3.08 (q, J = 6.6 Hz, 1H) , 11.95 (s, 1H) . MS (ES) : 224.0 ( ++ l) . 4-cloro-5, 6 - dimet i l-7H-pirrolo [2 , 3d] -pirimidina . 1R R N (200 MHz, DMSO-d6) d 2.31 (s, 3H) , 2.32 (s , 3H) , 8.40 (s , 1H) . MS (ES) : 182.0 (M++ l) . dl-4-cloro-5,6-dimetil-2-fenil-7H-7-(l-feniletil) pirrólo - [2 , 3d] pirimidina.

Preparación 12 A una solución de di -1 , 2 -diaminopropano (1.48 g, 20.0 mmoles) y carbonato de sodio (2.73 g, 22.0 mmoles) en dioxano (100.0 mi) y agua (100.0 mi) se agrega di - ter-dicarbonato (4.80 g, 22.0 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agita durante 14 horas. El dioxano se elimina al vacío. El material precipitado se filtra el material filtrado se concentra al vacío hasta sequedad. El residuo se tritura con EtOAc y después se filtra. El material filtrado se concentra al vacío hasta sequedad para obtener una mezcla de di -l-amino-2- (1 , 1-dimetíletoxi) carbonilamino-pro ano y dl-2-amino-l- (1,1-dimetiletoxi) carboni 1 amino-propano los cuales no se pueden separar utilizando el método de cromatografí normal. La mezcla se utiliza para la reacción en el e emplo T.

Preparación 13 A una solución de Fmoc - ß - Al a - OH (1.0 g, 3.212 inmoles) y cloruro de oxalilo (0.428 g, 0.29 mi, 3.373 mmoles) en diclorometano (20.0 mi) se agregan unas cuantas gotas de , N- dimet i 1 formamida a 0°C. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 1 hora seguida por adición de ciclopropilmetilamina (0.229 g, 0.28 mi, 3.212 mmoles) y trietilamina (0.65 g, 0.90 mi, 6.424 mmoles) . Después de 10 minutos, la mezcla se trata con clorhidrato 1M (10.0 mi) y la mezcla acuosa se extrae con diclorometano (3 x 30.0 mi) . La solución orgánica se concentra al vacío hasta sequedad. El residuo se trata con una solución de piperidina al 20% en , - dimet i 1 f ormamida (20.0 mi) durante 0.5 horas. Después de eliminar el solvente al vacío, el residuo se trata con clorhidrato 1M (20.0 mi) y acetato de etilo (20.0 mi) . La mezcla se separa y la capa acuosa se basifica con hidróxido de sodio sólido hasta pH = 8. El material precipitado se elimina mediante filtración y la solución acuosa se somete a columna de intercambio iónico y se eluye con piridina al 20% para obtener 0.262g (57%) de la amida de N- ciclopro i lmetil - ß-alanina . ]H N (200 MHz, CD30D) d_0.22 (m, 2H) , 0.49 (m, 2H) , 0.96 (m, 2H) , 2.40 (t, 2H) , 2.92 (t, 2H) , 3.05 (d, 2H) . MS (ES) : 143 .1 (M++l) .

Preparación 14 N - t er - but oxicarboni 1 - t rans - 1 , 4 -ciclohexildiamina Se disuelve rans - 1 , 4 - c i c 1 ohexi 1 d i ami na (6.08 g, 53.2 mmoles) en diclorometano (100 mi) . Mediante una cánula, se agrega una solución de dicarbonato de di-t-butilo (2.32 g, 10.65 mmoles en 40 mi de diclorometano) . Después de 20 horas, la reacción se divide entre CHCl3 y agua. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con CHCl3 (3x) . Las capas orgánicas combinadas se secan con MgS04, se filtran y se concentran para obtener 1.20 g de un sólido de color blanco (53%) . 1R RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.0-1.3 (m, 4H) , 1.44 (s, 9H) , 1.8-2.1 (m, 4H) , 2.62 (brm, 1H) , 3.40 (brs , 1H) , 4.37 (brs , 1H) . MS ( ?? ) : 215.2 (M++ l ) . 4- (N-acetil) -N- 1 er- but oxicarboni 1 - 1 rana - 1, 4-ciclohexildiamina Se disuelve N - er - but oxi c a rboni 1 - t r ns - 1 , 4 -ciclohexildiamina (530 mg , 2.47 mmoles) en di c 1 oromet ano (20 ml) . Se agrega gota a gota anhídrido acético (250 mg , 2.60 mmoles) . Después de 16 horas, la reacción se diluye con agua y CHC13. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con CHC13 (3x) . Las capas orgánicas combinadas se secan con MgS04, se filtran y se concentran. La re c r i s t al i zac i ón (EtOH/H20) permite obtener 190 mg de cristales de color blanco (30%) . XH RMN (200 Hz, CDC13) & 0.9-1.30 (m, 4H) , 1.43 (s, 9H) , 1.96-2.10 (m, 7H) , 3.40 (brs, 1H) , 3.70 (brs, 1H) , 4.40 (brs, 1H) , 4,40 (brs, 1H) . MS (ES) : 257.2 (M++l) , 242.1 (M+ - 15) , 201.1 (M+ + 56) . 4- (4-trans-acetamidociclohexil) amino-5, 6 -di etil-2-fenil-7H- (l-feniletil) irrólo [2 , 3d] -pi r imidina Se disuelve 4 - (N-acetil) -N-ter-butoxicarboni 1 - t rans - 1 , 4 - c iclohexi 1 di amina (190 mg , 0.74 mmoles) , en diclorometano (5 mi) y se diluye con TFA (6 mi) . Después de 16 horas, la reacción se concentra. Se combinan el sólido crudo, DMSO (2ml) , NaHC03 (200 mg , 2.2 mmoles) y 4 - c 1 o ro - 5 , 6 - di me i 1 ~ 2 -f eni 1 - 7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina (35 mg , 0.14 mmoles) en un matraz y se calientan a 130°C. Después de 4.5 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y se diluye con EtOAc y agua. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con EtOAc (3x) . Las capas orgánicas combinadas se secan con MgS04, se filtran y se concentran. La cromatografía (placa preparatoria de sílice; 20:1 CHCl3.-EtOH) permite obtener 0.3 mg de un sólido de color canela (1% de rendimiento) . MS (ES) : 378.2 (M+ + l) . 4- (N-metansulf onil ) - N - t e r - utoxi carbón i 1 -trans -1,4- c iclohexildiamina Se disuelve t r ans - 1 , 4 - c i c 1 ohe i 1 di ami na (530 mg , 2.47 mmoles) en dicloromet no (20 mi) y se diluye con piridina (233 mg , 3.0 mmoles) . Se agrega gota a gota cloruro de metansul f onilo (300 mg , 2.60 mmoles) . Después de 16 horas, la reacción se diluye con agua y CHC13. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con CHC13 (3x) . Las capas orgánicas combinadas se secan con MgS0 , se filtran y se concentran. La re c i s t al i zac i ón (EtOH/H20) permite obtener 206 mg de cristales de color blanco (29%) . XH RMN (200 MHz, CDC13) d 1.10-1.40 (m, 4H) , 1.45 (s, 9H) , 2.00 -2.20 (m, 4H) , 2.98 (s, 3H) , 3.20-3.50 (brs, 2H) , 4.37 (brs, 1H) . MS (ES) 293.1 (M+ +l) , 278.1 (M+ - 15 ) , 237.1 (M+ -56) . 4- (4-trans- me t ansul amidoc i c lohexil) mino-5, 6-dime il-2-fenil-7H- (l-feniletil)pirro lo [2 , 3d] -pirimidina Se disuelve 4- (N-sulf onil ) -N-ter-but oxi c arboni 1 - t r ns - 1 , 4 - c i c lohexi 1 di ami na (206 mg , 0.71 mmoles) , en di c 1 oróme t ano (5ml) y se diluye con TFA (6 mi) . Después de 16 horas, la reacción se concentra. Se combinan la mezcla de reacción cruda, DMSO (2 mi) , NaHC03 (100 mg , 1.1 mmoles) y 1-cloro-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [ , 3d]pirimidina en un matraz y se calientan a 130°C. Después de 15 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente, y se diluye con EtOAc (3x) . Las capas orgánicas combinadas se secan con MgS04, se filtran y se concentran. La cromatografía (placa preparatoria de sílice, 20:1 CHCl3/EtOH) permite obtener 2.6 mg de un sólido de color canela (5% de rendimiento) . MS (ES) : 414.2 (M+ + l ) .

EJEMPLO 1 Se calienta una solución de 4-cloro-5,6-dime t i 1 - 2 - f eni 1 - 7H -pi rrol o [ 2 , 3 d] pir imi dina (0.50 g, 1.94 mmoles) y 4 - t ans - hi droxi c i c 1 ohexi 1 amina (2.23 g, 19.4 mmoles) en sulfóxido de metilo (10.0 mi) a 130°C durante 5 horas. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se agrega agua (10.0 mi) y la solución acuosa resultante se extrae con EtOAc (3 x 10.0 mi) . La solución de EtOAc combinada se seca (MgS04) y se filtra, el material filtrado se concentra al vacío hasta sequedad, el residuo se somete a croma ografía en gel de sílice para obtener 0.49 g (75%) de 4 - (4-trana-hidroxíciclohexil) amino-5, S - dime t i l-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . P . f . : 197-199°C. 1 K RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.25 - 1.59 (m, 8H) , 2.08 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 3.68 - 3.79 (m, 1H) , 4.32 -4.38 (m, 1H) , 4.88 (d, J = 8 Hz, 1H) , 7.26-7.49 (m, 3H) , 8.40-8.44 (dd, J = 2.2, 8 Hz, 2H) , 10.60 (s , 1H) . MS ( ?? ) : 337.2 (M++l ) . Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la del ejemplo 1: 4 - (4-trans-hidroxiciclohexil) arnino-6- me t i 1 -2-f enil-7H-pirrolo [2, 3 d] pirimidina. l H RMN (200 MHz, CDCl3) d 11.37 (s, 1H, pirrol-NH) , 8.45 (m, 2H, Ar-H) , 7.55 (m, 3H, Ar-H] , 6.17 (s, 1H, pirrol-H) , 4.90 (br d, 1H, NH) , 4.18 (m, 1H, CH-O) , 3.69 (m, 1H, CH-N) , 2.40-2.20 (m, 2H) , 2.19-1.98 (m, 2H) , 2.25 (s, 3H, CH3) 1.68-1-20 (m, 4H) . MS (ES) : 323.2 (M+ + l) . 4 - (4-trans - hi droxí (ciclohexil) amino-5-metil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. XH RMN (200 MHz, CDC13) 6 11.37 (s, 1H, pirrol-NH) , 8.40 (m, 2H, Ar-H) , 7.45 (m, 3H, Ar-H) , 5.96 (s, 1H, pirrol-H) , 4.90 (br d, 1H, NH) , 4.18 (m, 1H, CH-O) , 3.69 (m, 1H, CH-N) , 2.38-2.20 (m, 2H) , 2.18-1.98 (m, 2.H) , 2.00 (s, 3H, CH3) 1.68-1.20 (m, 4H) . MS (ES) : 323.2 (M+ + l) . 4 - (4-trans-hidroxiciclohexil) amino-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . P . f . : 245.5-246.5°C . 1H RMN (200 MHz, CD3OD) d B.33 (m, 2H, Ar-H) , 7.42 (m, 3H, Ar-H) , 7.02 (d, 1H, J = 3.6 Hz, pirrol-H) , 6.53 (d, 1H, J = 3.6 Hz, pirrol-H) , 4.29 (m, 1H, CH-0) , 3.62 (m, 1H, CH-N) , 2.30-2.12 (m, 2H) , 2.12-1.96 (m, 2H) , 1.64 -1.34 ( m , 4H) . MS , M+l=309.3. Análisis (CiBH24N40) C, H, N. 4- (4 -trans-hidroxiciclohexil ) amino- 5 , 6 -dímet i 1 - 2 - (3-piridil) - 7H-pirrolo [2, 3 d] pirimidina. 'LU RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.21-1.54 (m, 8H) ; 2.28 (s, 3 H ) ; 2.33 ( s , 3 H ) ; 3.70 (m, 1H) , 4.31 (m, 1H) , 4.89 (d, 1H) , 7.40 (m, 1H) , 8.61 (m, 2H) , 9.64 (m, 1H) . MS (ES) : 338.2 (M+ +l) . 4 - ( 4 - t ans - ni droxi cic lohexi 1 ) amino - 5 , 6 -dimetil-2- (2-furíl) -7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . 1H RMN (200 MHz, CDC13) d 1.26 - 1.64 (m, 8H) , 2.22 (s, 3H) , 2.30 (a, 3H) , 3.72 (tn, 1H) , 4.23 (m, 1H) , 4.85 (d, 1H) , 6.52 ( m , 1H) , 7.12 (m, 1H) , 7.53 (m, 1H) , 9.28 (s , 1H) .

MS (ES) : 327.2 (M++l) 4 - (4 - trans-hidroxíciclohexil) ami no -5,6-dimetíl-2- (3-furil) -7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1K RMN (200 MHz , CDC13) d 1.25-1 .fi.^ (m, 8H) , 2.11 (s, 3H) , 2.27 (s, 3H) , 3.71 (m, 1H) , 4.20 (m, 1H) , 4.84 (d, 1H) , 7.03 (m, 1H) , 7.45 (m, 1H) , 8.13 (m, 1H) , 10.38 (m, 1H) . MS (ES) : 327.2 (M+ +l) . 4- (4-trans-hidroxiciclohexíl) amino-5, 6 -dime t i l-2-ciclo entil-7H-pirrolo [2 , 3d] irimídina. 1H RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.26-2.04 (m, 16H) , 2.26 (s, 3H) , 2.27 (s, 3H) , 3.15 (m, 1H) , 3.70 (m, 1H) , 4.12 (m, 1H) , 4.75 ( d , 1H) . MS (ES) : 329.2 (M+ + l ) . 4- (4-trans-hidroxiciclohexil) amino-5, 6 -dimetil-2- (2-tienil) -7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-amin . 1H RMN (200 MHz, CDCl3) 8 1.28 - 1.59 ( m , 8H) , 2.19 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 3.74 (m, 1H) , 4.19 (m, 1H) , 4.84 (d, 1H) , 7.09 (m, 1H) , 7.34 (m, 1H) , 7.85 (m, 1H) , 9.02 (s , 1H) . MS (ES) : 343.2 (M++l) . 4 - (4-trans-hidroxiciclohexil) amino-5, 6 -dimetil-2- (3-tienil) -7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . XH RMN (200 MHz, CDC13) d 1.21-1.60 (m, 8H) , 1.98 (S, 3H) , 2.23 (s, 3H) , 3.66 (m, 1H) , 4.22 (m, 1H) , 7.27 (m, 1H) , 7.86 (m, 1H) , 8.09 (ra, 1H) , 11.23 ( s , 1H) . MS (ES) : 343.2 (M+ + l) . 4- (4-trans - hidroxi c iclohexil) amino-5, 6 -dimetil-2- (4-fluorofenil) -7H-pirrolo[2,3d] -pirimidin . 1H RMN (200 MHz, CDC13) d 1.26- 1.66 (m, 8H) , 1.94 (s, 3H) , 2.28 (s, 3H) , 3.73 (m, 1H) , 4.33 (m, 1H) , 4.92 (d, 1H) , 7.13 (m, 2H) , 8.41 (m, 2H) , 11.14 ( s , 1H) . MS (ES) : 355.2 (M+ + l) . 4- (4-trans-hidro iciclohexil) amino-5, 6 -di e il-2- (3-fluorofernl) -7H-pirrolo [2, 3d] -pirimidina. U RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.26-1.71 (m, 8H) , 2.06 (s, 3H) , 2.30 (s, 3H) , 3.72 (m, 1H) , 4.30 (m, 1H) , 4.90 (d, 1H) , 7.09 (m, 1H) , 7.39 (m, 1H) , 8.05 (m, 1H) , 8.20 (m, 1H) , 10.04 (s, 1H) . MS (ES) : 355.2 (M+ + l ) . 4 - (4-trans-hidroxiciclohexíl) mino-5 dimetil-2- (2 - f 1 uoro feni 1 ) -7H-pirrolo[2,3d] -pirimidin . LK RMN (200 MHz, CDC13) 6 1.30-1. 8H) , 2.17 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 3.73 (m, 1H (m, 1H) , 4.82 (d, 1H) , 7.28 (m, 2H) , 8.18 ( 9.02 (m , 1H) , 12.20 (s, 1H) . MS (ES) : 355.3 (M++l) . 4- (4-trang - hidroxi c iclohexil) amino-5, 6 -dime il-2-isopropil-7H-pirrolo [2 , 3d]pirimidina. XH RMN (200 MHz , CDC13) Ó 1.31 (d, J = 7.0 Hz, 6H) , 1.30-1.65 (m, 8H) , 2.27 (s, 3H) , 2.28 (s, 3H) , 3.01 (m, J = 7.0 Hz, 1H) , 3.71 (m, 1H) , 4.14 (m, 1H) , 4.78 (d, 1H) . MS (ES) : 303.2. di -4 - (2-trans-hidroxiciclohexil) amino -5,6-dimetíl-2-isopropil-7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . 2H RMN (200 MHz, CDC13) 6 1.31-1.42 (br, 4 H ) , 1.75-1.82 (br, 4H) , 2.02 (s, 3 H ) , 2.29 ( s , 3H) , 3.53 (m, 1H) , 4.02 (m, 1H) , 5.08 (d, 1H) , 7.41-7.48 (m, 3H) , 8.30 (m, 2H) , 10.08 (s, 1H) . MS (ES) : 337.2 (M+ + 1) 4- (3,4-trans-dihidroxiciclohexil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina. MS (ES ) : 353.2 (M+ + l ) . 4 - ( 3 , 4 -cig -dihidroxilcic 1 ohexi 1) amino-5, 6 -dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina. MS (ES) : 353.2 (M+ + l) . 4 - (2-acetilaminoetil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil - H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . P . f . 196- 199°C . U RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.72 (s, 3H) , 1.97 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 3.59 (m, 2H) , 3.96 (m, 2H) , 5.63 (br, 1H) , 7.44-7.47 (m, 3H) , 8.36-8.43 (dd, J = 1 Hz, 7 Hz, 2H) , 10.76 (s, 1H) . MS (ES) : 324.5 (M++l) . di - 4 - (2-trans- hidroxi ciclopentil ) mino-5 , 6 dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] irimidina. XH RMN (200 MHz, CDC13) 5 1.62 (m, 2H) 1.79 (br, 4H) , 1.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H) , 4.11 (m 1H) , 4.23 (m, 1H) , 5.28 (d, 1H) , 7.41-7.49 (m, 3H) 8.22 (m, 2H) , 10.51 (s, 1H) . MS (ES ) : 323.2 (M++l ) . Para la preparación de 2-trans hi droxi c i c 1 opent i 1 amina , véase PCT 9417090 di -A - (3-trans-hidroxiciclopentil) amino-5, 6 -dime il-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina. XH RMN (200 MH z , CDC13) d 1.58 - 1 .90 (hr 6H) , 2.05 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 4.48 -4.57 (m, 1H) 4.91-5.01 (m, 2H) , 7.35 -7.46 ( m , 3H) , 8.42 - 8.47 (m 2H) , 10.11 (s, 1H) . MS (ES) : 323.2 ( + + l) . Para la preparación de 3-trans hi d oxi c i c 1 opent i 1 ami na , véase EP-A-322242. di -A - (3-cis-hidroxiciclopentil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . 1K RMN (200 MHz, CDC13) d 1.82 -2.28 (br 6H) , 2.02 (s, 3H) , 2.30 (s, 3H) , 4.53 -4.60 (m, 1H) 4.95 - 5.08 (m, 1H) , 5.85- 5.93 (d, 1H) , 7.35 - 7.47 (m 3H) , 8.42-8.46 (m, 2H) , 10.05 (s, 1H) . ?? (ES) : 323.2 (M+ + l ) . Para la preparación de 3-cis hidroxi c i c lopent i 1 amina , véase EP-A-322242. 4- (3 , 4 -trans -dihidroxiciclopentil) amino-5 , 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . XH RMN (200 MHz, CDC13) d 1.92 -1.99 (br 2H) , 2.14 (s, 3?) , 2.20 (br, 2?) , 2.30 (s, 3H) , 2.41-2.52 (br, 2H) , 4.35 (m, 2H) , 4.98 (m, 2H) , 7.38-7.47 (m, 3H) , 8.38-8.42 (m, 2H), 9.53 (s, 1H) . MS (ES) : 339.2 (M+ + l) . Para la preparación de 3,4-trans-díhidroxi c i c lopent i 1 amina , véase PC 9417090. 4 - ( 3 - mino - 3 - o opropi 1 ) amino-5, 6-dimetil-2-fenil - 7H-pirrolo (2 , 3d) irimidina . XH R N (200 Hz, CDC13) d 2.02 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 2.71 (t, 2H), 4.18 (m, 2H) , 5.75-5.95 (m, 3H) , 7.38-7.48 (m, 3H) , 8.37-8.41 (m, 2H) , 10.42 ( s , 1H) . MS (ES) : 310.1 (M++l ) . 4- ( 3 -N-ciclopropilmetílamino-3 -oxopropil) -amino-5 , 6 - dimet il-2-fenil-7H-pirrolo- [2,3d]pirimidina. ]H RMN (200 MHz, CD30D) 5 0.51 (q, 2H) , 0.40 (q, 2H) , 1.79- 1.95 (br, 1H) , 2.36 (s, 3H) , 2.40 (s, 3H) , 2.72 (t, 2H) , 2.99 (d, 2H) , 4.04 (t, 2H) , 7.58-7.62 (m, 3H), 8.22-8.29 (m, 2H) . MS (ES) : 364.2 (M++l) . 4- (2-amino-2-oxoetil) amino-5, 6-dime il-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. t? RMN (200 Hz, CD3OD) 6 2.31 (s, 3H) , 2.38 (s, 3H) , 4.26 (s, 2H) , 7.36 (m, 3H) , 8.33 (m, 2H) . MS (ES) : 396.1 (M++l) . 4- (2-N-metil amino - 2 - oxoe t i 1) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1R RMN (200 MHz , CDCl3) d 1.99 (s, 3H) , 2.17 (s, 3H) , 2.82 (d, 3H) , 4.39 (d, 2H) , 5.76 (t, 1H) , 6.71 (br, 1H) , 7.41-7.48 (m, 3H) , 8.40 (m, 2H) , 10.66 (s, 1H) . MS (ES) : 310.1 (M++l) . 4 - (3 -ter-butil o i 1 -3-oxopropil) amino-5, 6 -dimetil -2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] pirimidin . 1K RMN (200 MHz , CDCl3) d 1.45 (s, 9H) , 1.96 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 2.71 (t, 2H) , 4.01 (q, 2H) , 5.78 (t, 1H) , 7.41-7.48 (m, 3H) , 8.22-8.29 (m, 2H) . MS (ES) : 367.2 (M++l) . 4 - (2-hidroxietil) amino-5, 6 -dime t i 1 -2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d ] irimidin . 1U RMN (200 MHz, CDC13) d 1.92 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 3.81-3.98 (br, 4H) , 5.59 (t, 1H) , 7.39-7.48 (m, 3H) , 8.37 (m, 2H) , 10.72 (s, 1H) . MS (ES) : 283.1 (M+ + l) . 4 - (3 -hi droxipropil) amino-5 , 6 -dimetil-2 -fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . 1U RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.84 (m, 2H) , 1.99 (s, 3H) , 2.32 (s, 3H) , 3.62 (t, 2H) , 3.96 (m, 2H) , 3.35 (t, 1H) , 7.39-7.48 (m, 3H) , 8.36 (m, 2H) , 10.27 ( s , 1H ) . MS (ES ) : 297.2 (M+ + l ) . 4 - ( 4 - hidroxibut i 1 ) amino -5, 6-dimetil-2-£enil-7H-pirrolo [2 , 3d]pirimidina . 1H R N (200 MHz, CDCl3) d 1.71-1.82 ( m , 4H) , 1.99 (S, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 3.68 - 3.80 (m, 4H) , 5.20 (t, 1H) , 7.41-7.49 (m, 3H) , 8.41 (m, 2H) , 10.37 (3, 1H) . MS (ES) : 311.2 (M++l) . 4 - (4-trans-acetilaminociclohexil) amino -5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d] irimidina. 4- ( 4 - t rans - me i 1 sul f oni 1 aminoc i c lohexi 1 ) -amino -5,6- dime t i l-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] -pirimidin . 4 - (2-acetilaminoetil) amino -5, 6-dimetil-2-fenil-7H-7- (l-feniletil)pirrolo(2,3d)pirimidina. 4 - ( 4 - trans -hidroxiciclohexil ) ami no -5, 6 -dimetil-2-fenil-7H-l-feniletil)pirrolo [2, 3 d] -pirí midina . 4- (3-piridil me t i 1) amino-5 , 6- di me t i 1 - 2 -fenil-7H-7- (1-feniletil) pirrólo [2 , 3d] pirimidina . 4- (2-me ilpro il)amino-5,6 -d met il-2-fenil 7H-7- (l-feniletil)pirrolo[2,3d]pirimidina.

EJEMPLO 2 A una suspensión agitada de t i f eni 1 fos f ina (0.047 g, 0.179 mmoles) y ácido benzoico (0.022 g, 0.179 mmoles) en THF (1.0 mi) enfriada a 0°C se agrega 4- (4-trans- idroxiciclohexil) amino-5, 6 -dime t i 1 - 2 - f eni 1 - 7H - pi r o 1 o [ 2 , 3 d] pi r imi di na (0.05 g, 0.149 mmoles) a 0°C. Después se agrega gota a gota azodicarboxilato de dietilo (0.028 mi, 0.179 mmoles) en un lapso de 10 minutos. Después se deja calentar la reacción hasta temperatura ambiente. Después de confirmar, mediante CCF, que la reacción se ha completado, la mezcla de reacción se extingue con solución acuosa de bicarbonato de sodio (3.0 mi) . La fase acuosa se separa y se extrae con éter (2 X 5.0 mi) . Los extractos orgánicos se combinan, se secan y se concentran al vacío hasta sequedad. Al residuo se agrega éter (2.0 mi) y hexano (5.0 mi) después de lo cual se filtra la mayor parte del óxido de trifenilfogfina. La concentración del material filtrado permite obtener un aceite viscoso el cual se purifica mediante c omatografía en columna (hexano : acetato de etilo = 4:1) para obtener 5.0 mg (7.6%) de 4-(4-cis-benzoil oxi c i el ohexi 1 ) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo (2 , 3d] irimidina . MS (ES) : 441.3 (M++l) . La reacción también produce 50.0 mg (84%) de 4- (3-ciclohexenil) amino -5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidin . MS (ES) : 319.2 (M++l) .

EJEMPLO 3 A una solución de 4 - (4-cis-benzoiloxicíclohexil) mino -5,6 - dimet i l-2-fenil-7H-pirrólo [2 , 3d] pirimidina (5.0 mg , 0.0114 mmoles) en etanol (1.0 mi) se agregan 10 gotas de hidróxido de sodio 2M. Después de 1 hora, la mezcla de reacción se extrae con acetato de etilo (3 x 5.0 mi) y la capa orgánica se seca, se filtra y se concentra al vacío hasta sequedad. El residuo se somete a cromatografía en columna ( hexano : acetato de etilo = 4:1) para obtener 3.6 mg (94:) de 4- (4-cis-hidroxiciclohexil) ami no- 5, 6 -dimetil -2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) : 337.2 (M++l) . Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la del ejemplo 3: 4 - (3-N,N-dimetil-3- oxoprop il) mino-5, 6-dimetil-2-ienil-7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina. 1R RMN (200 MHz, CDC13) d 2.01 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 2.73 (t, 2H) , 2.97 (s, 6H) , 4.08 (m, 2H) , 6.09 (t, 1H) , 7.41-7.48 (m, 3H) , 8.43 (m, 2H) , 10.46 (s , 1H) . MS (ES) : 338.2 (M+ + l) . 4 - ( 2 - f ormi laminoetil) amino-5, 6- di me t i 1 - 2 -fenil-7H-pirrolo [ , 3 d ] pirimidina . 1ü RMN (200 MHz, CDCl3) 6 2.26 (s, 3H) 2.37 (s, 3H) , 3.59-3.78 (m, 2H) , 3.88-4.01 (m, 2H) 5.48-5.60 (m, 1H) , 7.38-7.57 (m, 3H) , 8.09 (s, 1H) 8.30-8.45 (m, 2H) , 8.82 (s, 1H) . MS (ES) : 310.1 (M++l) . 4- (3-acetilaminopropil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) : 338.2 (IVT + I) .

EJEMPLO 4 Se disuelve 4 - ( 3 - t er -but loxi - 3 -oxopropil) amino-5 , 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo-[2 , 3d] pirimidina (70.0 mg , 0.191 mmoles) en ácido t r i f 1 uoroacé t i co : d i c 1 oróme t ano (1:1, 5.0 mi) . La solución resultante se agita a temperatura ambiente durante 1 hora y después se somete a reflujo durante 2 horas. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, la mezcla se concentra al vacío hasta sequedad. El residuo se somete a cromatografía en capa fina preparativa ( EtOAc : hexano : AcOH = 7:2.5:0.5) para obtener 40.0 mg (68%) de 4- (3 - hidroxi-3 -oxopropil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] pirimidina . 1K RMN (200 MH z , CD3OD) 6 2.32 (s, 3H) , 2.38 (s, 3H) , 2.81 (t, 2H) , 4.01 (t, 2H) , 7.55 (m, 3H) , 8.24 (m, 2H) . MS (ES) : 311.1 (M+ + l) . El siguiente compuesto se obtiene en una manera similar a la del ejemplo 4 : 4 - (3 -arainopropil) amino-5, 6 - dimet il-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) : 296.1 ( ++l) , 279.1 (M+-NH3) .

EJEMPLO 5 Se disuelve 4 - ( 3 - hidroxi - 3 - oxoprop i 1 ) amino -5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d]pirimidina (50.0 mg , 0.161 mmoles) en una mezcla de ?,?-dimet i 1 f ormamida (0.50 mi) , dioxano (0.50 mi) y agua (0.25 rnl) . A esta solución se agrega metilamina (0.02 mi, 40% en peso en agua, 0.242 mmoles) , triet i lamina (0.085 mi) y tetrafluoroborato de ?,?,?'?' -tetrametiluronio (61.2 mg, 0.203 mmoles) . Después de agitar a temperatura ambiente durante 10 minutos, se concentra la solución y el residuo se somete a cromatografía en capa fina preparativa (EtOAc) para obtener 35.0 mg (67%) de 4 - ( 3 -N-met il - 3 -oxopropil) amino - 5 , 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo-[2 , 3d] pirimidina . 1H RMN (200 MHz, CDC13) & 1.92 (s, 3H) , 2.30 (s, 3H) , 2.65 (t, 2H) , 4.08 (t, 2H) , 5.90 (t, 1H) , 6.12 (m, 1H) , 7.45 (m, 3H) , 8.41 (m, 2H) , 10.68 (s, 1H) . MS (ES) : 311.1 (M+ +l) .

Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la del ejemplo 5: 4 - ( 2 - c i c 1 o ro anca rboni laminoetil) amino-5,5-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. ?? (ES) : 350.2 (M++l) . 4 - (2-isobutirilaminoetil) amino-5, 6 - dime111 -2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) : 352.2 (M++l) . 4 - (3-propionilaminopropil) amino-5, 6 -dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina. XH RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.00 - 1.08 (t, 3H) , 1.71-2.03 (m, 4H) , 2.08 (s, 3H) , 2.37 (s, 3H) , 3.26-3.40 (m, 2H) , 3.79-3.96 (m, 2H) , 5.53-5.62 (m, 1H) , 6.17-6.33 (m, 1H) , 7.33-7.57 (m, 3H) , 8.31-8.39 (m, 2H) , 9.69 (s , 1H) . MS (ES ) : 352.2 (M++l ) . 4 - ( 2 - me ilsulfonílaminoetil) amino-5 , 6 -dimetil -2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] pirimidina . :? RMN (200 MHz, CDCl3) d 2.18 (s, 3H) , 2.27 (s, 3H) , 2.92 (s, 3H) , 3.39-3.53 (m, 2H) , 3.71-3.88 (m, 2H) , 5.31-5.39 (m, 1H) , 6.17-6.33 (m, 1H) , 7.36-7.43 (m, 3H) , 8.20 - 8.25 (m, 2H) , 9.52 (s, 1H) . MS (ES) : 360.2 (M+ + l) .

EJEMPLO 6 Se somete a reflujo una mezcla de 4-cloro-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [ , 3d]pirimidina (0.70 g, 2.72 mmoles) y 1 , 2 - diaminoetano (10.0 mi, 150 mmoles) bajo atmósfera inerte durante 6 horas. El exceso de amina se elimina al vacío, el residuo se lava en forma secuencial con éter y hexano para obtener 0.75 g (98%) de 4 - ( 2 - ami noe t i 1 ) amino - 5 , 6 -dime til-2-fenil-7H pirrolo [2 , 3 d] irimidina . MS (ES) ; 282.2 (M++l) , 265.1 (M+-NH3) .

EJEMPLO 7 A una solución de 4 - ( 2 - aminoet i 1 ) mino - 5 , 6 -dime i 1 - 2 - feni 1 - 7H -pirrólo [ 2 , 3 d] irimidina (70.0 mg , 0.249 mmoles) y t ietilamina (50.4 mg , 0.498 mmoles) en dic lorometano (2.0 mi) se agrega cloruro de propionilo (25.6 mg , 0.024 mi, 0.274 mmoles) a 0°C. Después de 1 hora, la mezcla se concentra al vacío y. el residuo se somete a cromatografía en capa fina preparativa (EtOAc) para obtener 22.0 mg (26%) de 4 - ( 2 - ro i on: 1 minoet i 1 ) ami o - 5 , 6 - dimet i 1 -2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d]pirímidina. MS (ES) : 338.2 (M'+ 1) . Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la del ejemplo 7: 4 - ( 2 - N ' - me tilureaetil) amino 5 , 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . XH R N (200 MHz, CDCl3) d 2.13 (s, 3H) , 2.32 (s, 3H) , 3.53 (d, 3H) , 3.55 (m, 2H) , 3.88 (m, 2H) , 4.29 (m, 1H) , 5.68 (t, 1H) , 5.84 (m, 1H) , 7.42 (m, 3H) , 8.36 (dd, 2H), 9.52 (s, 1H) . MS (ES) : 339.3 (M++l) . 4-(2-N'-etilureaetil)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidin . MS (ES ) : 353.2 (M++ l ) .

EJEMPLO 8 A una solución de clorhidrato de l-(3-dime t i 1 mi noprop i 1 ) - 3 - e t i 1 carbodi - imida (41.1 mg , 0.215 minóles) , dime t i 1 amino - p i r i di na (2.4 mg , 0.020 mmoles) y ácido pirúvico (18.9 mg , 0.015 mi, 0.215 mmoles) en di c 1 oromet ano (2.0 mi) se agrega 4- (2-aminoetil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo-[2 , 3d] irimidina (55.0 mg , 0.196 mmoles) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 4 horas. El tratamiento acostumbrado y la cromatografí en columna (EtOAc) después permiten obtener 10.0 mg (15%) de 4 - ( 2 ' -piruvilamidoet il ) amino- 5 , 6 -dimetil -2 -fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) : 352.2 (M+ +l) .

EJEMPLO 9 A una solución de 4 - ( 2 - aminoet i 1 ) amino - 5 , 6 -dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d] pirimidina (60.0 mg , 0.213 mmoles) en diclorometano (2.0 mi) se agrega isocianato de N - 1 r ime t ilsililo (43.3 mg , 0.051 mi, 0.320 mmoles) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 3 horas seguido por la adición de solución acuosa de bicarbonato de sodio. Después de filtrar a través de una cantidad pequeña de gel de sílice, el material filtrado se concentra al vacío hasta sequedad para obtener 9.8 mg (14%) de 4- ( 2 - ureae t i 1 ) amino - 5 , 6 - dime t i 1 - 2 - f eni 1 - H -pirrólo [2 , 3d] irimidina . MS (ES) : 325.2 (M++l) . Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la del ejemplo 9: di -A- (2-acetil aminopropi 1) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2,3d]pirimidina. :H RMN (200 MHz , CDC13) d 1-28-1.32 (d, J = 8 H z , 3 H ) , 1.66 (s, 3H) , 1 .96 ( s , H) , 2.30 (3, 3H) 3.76 - 3.83 (m, 2H) , 4.10-4.30 (m, 1H) , 5.60 -5.66 (t, J = 6 Hz, 1H) , 7.40-7.51 (m, 3H) , 8.36-8.43 (m, 2H) , 10.83 ( s , 1H) . MS (ES) : 338.2 (M++l) .

(R) -4- (2-acet i 1 amino ropi 1 ) amino-5, 6 -dímetil -2-f enil -7H-pirrolo [2, 3 d] pirimidina. lU RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.31 (d, 3H) , 1.66 (S, 3H) 1.99 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 3.78-3.83 (m, 2H) , 4.17-4.22 (m, 1H) , 5.67 (t, 1H) , 7.38-7.5 ( m , 3H) , 8.39 ( m , 2 H ) , 10.81 (3 , 1H) . MS (ES) : 338.2 (M+ + l) .

( R ) - 4 - (1 -met il-2-acetilaminoetil) amino-5, 6 -dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina. 1 RMN (200 MHz, CDC13) d 1.41 (d, 3H) , 1.68 (s, 3H) , 2.21 (s, 3H) , 2.34 (s, 3H) , 3.46-3.52 (br, m, 2H) , 4.73 (m, 1H) , 5.22 (d, 1H) , 7.41-7.46 (m, 3H) , 8.36-8.40 (m, 2H) , 8.93 (s, 1H) . MS (ES) : 338.2 (M++l) . ( ? ) - 4 - (2 - ace t i lamí no ro i 1 ) amino-5, 6 -dimetil-2-f enil-7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . 1= RMN (200 Hz , CDC13) d 1.31 (d, 3H) , 1.66 (s, 3H) 2.26 (a, 3H) , 2.35 (s, 3H) , 3.78-3.83 (m, 2H) , 4.17-4.22 (m, 1H) , 5.67 (t, 1H) , 7.38 - 7.5 (m, 3H) , 8.39 (m, 2H) , 8.67 (s, 1H) . MS (ES) : 338.2 (M++l) .

(S) - 4 - (l-metil-2-acetilaminoetil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] pirimidina. XH RMN (200 MHz, CDC13) 1.41 (d, 3H) , 1.68 (s, 3H) , 2.05 (s, 3H) , 2.32 (s, 3H) , 3.46-3.52 (m, 2H) , 4.73 (m, 1H) , 5.22 (d, 1H) , 7.41-7.46 (m, 3H) , 8.36- 8.40 (m, 2H) , 10.13 (s, 1H) . MS (ES) : 338.2 (M+ + l ) .

EJEMPLO 10 Se efectúa la reacción de 4-cloro-5,6-dime i 1 - 2 - f eni 1 - 7H - i rolo [ 2 , 3 d] i r imi dina con la mezcla de di - 1 - amino - 2 - ( 1 , 1 - dime t i 1 e t oxi ) -carboni 1 amino - ropano y di -2 - amino - 1 - ( 1 , 1 -dime t i 1 e t oxi ) carboni 1 ami no - propano en una manera similar a la del ejemplo 1. La reacción produce una mezcla de di -4 - ( 1 - me t i 1 - 2 - ( 1 , 1 - d ime t i 1 e t oxi ) -carbón ílaraino) etilamino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-p i rrol o [ 2 , 3 d] p i rimidi na y di -4 - ( 2 - me t i 1 - 2 - ( 1 , 1 -dimetiletoxi) c arboni 1 amino) etilamino-5, 6-dimetil-2-f enil - 7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina la cual se separa mediante cromatografía en columna (EtOAc : hexanos = 1:3) . La primer fracción es di - - (1 - me t i 1 - 2 - (1, 1 -dimetiletoxi) carbonilaminoetil) -amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d] -pirimidina: XH RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.29 - 1.38 (m, 12H) , 1.95 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) 3.34 - 3.43 (m, 2H) , 4.62 -4.70 (m, 1H) , 5.36 - 5.40 (d, J = 8 Hz, 1H) , 5.53 (br, 1H) , 7.37-7.49(mf 3H) , 8.37-8.44 (m, 2H) , 10.75 ( s , 1H) . MS 396.3 ( + + l) . La segunda fracción es di -4 - ( 2 - ( 1 , 1 -dimetiletoxi) carbonilaminopropil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d]pirimidina: XH RMN (200 MHz, CDC13) d 1.26 -1.40 (m, 12H) , 2.00 (S, 3H) , 2.31 (s, 3H) 3.60 - 3.90 ( m , 2H) , 3.95 - 4.10 (m, 1H) , 5.41-5.44 (d, J - 6.0 Hz, 1H) , 5.65 (br, 1H) , 7.40-7.46 (m, 3H) , 8.37-8.44 (m, 2H) , 10.89 (s, 1H) . MS (ES) : 396.2 (M++l) . Los siguientes compuestos se obtienen en una manera similar a la del ejemplo 10: (S, S) - 4 - (2-acetilaminociclohexil) am no - 5 , 6 -dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. 1H RMN (200 MHz, CDC13) d 1.43 (m, 4H) , 1.60 (s, 3H) , 1.83 (m, 2H) , 2.18 (s, 3H) , 2.30 (m, 2H) , 2.32 (s, 3H) , 3.73 (br, 1H) , 4.25 (br, 1H) , 5.29 (d, 1H) , 7.43-7.48 (m, 3H) , 8.35-8.40 (m, 2H) , 9.05 (a , 1H) . 4 - (2 - metil -2 -acetil amino rop il)amino-5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina. 1E RMN (200 MHz, CDCl3) d 1.51 (a, 6H) , 1.56 (s, 3H) , 2.07 (s, 3H) , 2.36 (s, 3H) , 3.76 (d, 2H) , 5.78 (t, 1H) , 7.41-7.48 ( m , 3H) , 7.93 (s, 1H) , 8.39 (m, 2H) , 10.07 (s, 1H) . MS (ES ) : 352.3 (M+ + l ) .

EJEMPLO 11 Se trata di -4 - ( 1 -me il -2 - ( 1 , 1 -dime tiletoxi) carbonil aininoet il) amino-5 , 6 - dime t i 1 - 2 -fenil - 7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina (60.6 mg , 0.153 mmoles) con ácido trifluoroacético (0.5 mi) en diclorometano (2.0 mi) durante 14 horas. El solvente orgánico se elimina al vacío hasta sequedad. El residuo se disuelve en N,N-dimet i 1 f ormami da (2.0 mi) y trietilamina (2.0 mi) . A la solución a 0°C se agrega anhídrido acético (17.2 mg , 0.016, 0.169 mmoles) . La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 48 horas y después se concentra al vacío hasta sequedad. El residuo se somete a cromatografía en capa fina preparativa (EtOAc) para obtener 27.0 mg (52%) de di -4 - ( 1 -met i 1 - 2 - ace i 1 minoet i 1 ) mino - 5 , 6 -dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] pirimidina. XH MN (200 MHz, CDCl3) d 1.38-1.42 (d, J = 8 Hz, 3H) , 1.69 (s, 3H) , 2.01 (s, 3H) , 2.32 (s, 3H) 3.38-3.60 (m, 2H) , 4.65-4.80 (m, 1H) , 5.23-5.26 (d, J = 6 Hz, 1H) , 7.40-7.51 (m, 3H) , 8.37-8.43 (m, 2H) , 10.44 (S, 1H) . S (ES) : 338.2 ( ++l ) .

EJEMPLO 12 Se trata ( R , R ) - 4 - ( 2 - aminoc i el ohexi 1 ) amino -5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d]pirimidína, preparado en una manera similar a la del ejemplo 1 con 4 - c 1 oro - 5 , 6 - dime t i 1 - 2 - f eni 1 - 7H- i rrolo [2,3d] pirimidina (0. 15 g, 0.583 minóles) y (IR, 2R)-(-) -1 , 2 - diaminociclohexano (0.63 g, 5.517 mino les) , con trietilamina (0.726 g, 7.175 mmoles) y anhídrido acético (0.325 g, 3.18 mmoles) en N,N-dimet i 1 f ormami da (10.0 mi) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de eliminar el solvente al vacío, se agregan acetato de etilo (10.0 mi) y agua (10.0 mi) al residuo. La mezcla se separa y la capa acuosa se extrae con acetato de etilo (2 x 10.0 mi) . La solución combinada de acetato de etilo se seca (MgS04) y se filtra. El material filtrado se concentra al vacío hasta sequedad y el residuo se somete a cromatografía en columna ( EtOAc : Hexano 1:1) para obtener 57.0 mg (26%) de (R,R) -4-(2-acetilaminociclohexil) amino - 5 , 6 - di me t i 1 - 2 - f en i 1 - 7H -pirrólo [2 , 3d] irimidin . 1 K RMN ( 200 Hz, CDC13) 6 1.43 (m, 4H) , 1.60 (s, 3H) , 1.84 (m, 2H) , 2.22 (s, 3H) , 2.30 (m, 2H) , 2.33 (s, 3H) , 3.72 (br, 1H) , 4.24 (br, 1H) , 5.29 (d, 1H) , 7.43-7.48 (m, 3H) , 8.35-8.39 (m, 2H) , 8.83 ( s , 1 H) . MS (ES ) : 378.3 ( ++l ) .

EJEMPLO 13 A una solución de 4- ( 2 - hidroxiet i 1 ) amino -5,6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina (40.0 mg, 0.141 mmoles) en piridma (1.0 mi) se agrega anhídrido acético (0.108 g, 1.06 mmoles) a 0°C. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 4 horas y el solvente se elimina al vacío. El residuo se somete a cromatog afía en capa fina preparativa (EtOAc : hexano = 1:1) para obtener 32.3 mg (71: ) de 4 - ( 2 - ace t i 1 oxie t i 1 ) amir.o - 5 , 6 - dime t i 1 - 2 -fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . 1U MN (200 MHz, CDC13) d_1.90 (a, 3H) , 2.08 (s, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 4.05 (m, 2H) , 4.45 (t, 2H) , 5.42 (m, 1H) , 7.41-7.49 (m, 3H) , 8.42 (m, 2H) , 11.23 (s , 1H) .

EJEMPLO 14 Se agita una solución de Fmoc - ß - Ala- OH (97.4 mg , 0.313 mmoles) y cloruro de oxalilo (39.7 mg, 27.3 AL, 0.313 mmoles) en diclorometano (4.0 mi) con 1 gota de N, -dimetilf ormamida a 0°C durante 1 hora seguido por adición de 4- (2-aminoetil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo- [2 , 3d] pirimidina (80.0 mg, 0.285 mmoles) y trietilamina (57.6 mg , 79.4 µ? , 0.570 mmoles) a 0°C. Después de 3 horas, la mezcla se concentra al vacío y el residuo se trata con la solución de piperidina al 20% en N , N- dimet i 1 f ormamida (2.0 mi) durante 0.5 horas. Después de eliminar el solvente al vacío, el residuo ge lava con éter diet í 1 i co : hexano (1:5) para obtener 3.0 mg (3%) de 4 - (6-amino-3-aza-4-oxohexil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . MS (ES) : 353.2 (M++l) .

EJEMPLO 15 Se agita una solución de 4- (2-aminoetil) mino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo-[ , 3d] pirimidina (70.0 mg , 0.245 mmoles) y anhídrido succínico (27.0 mg , 0.274 mmoles) en di c 1 o rornet ano (4.0 mi) con 1 gota de N,N-dime t i 1 formami da a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla de reacción se extrae con hidróxido de sodio al 20% (3 x 5.0 mi) . La solución acuosa se acidula con clorhidrato 3M hasta pH 7.0. La mezcla completa se extrae con acetato de etilo (3 x 10 mi) . La solución orgánica combinada se seca (MgS04) y se filtra. El material filtrado se concentra al vacío hasta sequedad para obtener 15.0 mg (16%) de - ( 7 - hidroxi - 3 - a z a - 4 , -dioxoheptil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-p i o 1 o ( 2 , 3 d ) p i r imi di na .

S (ES) : 382.2 (M++l) EJEMPLO 16 A 10 mi de dimet i 1 forrnamida (DMF) a temperatura ambiente se agregan 700 mg de 4-cis-3-hidroxiciclopentil) amino-2-f enil-5, 6-dimetil-7H-pi ro 1 o [ 2 , 3 d] p i rimi dina seguido por 455 mg de N-Boc glicina, 20 mg de N , - di me i 1 ami no i r i di na (DMAP) , 293 mg de hidroxibenzotriazol (HOBT) y 622 mg de clorhidrato de 1 - ( 3 - dimet i 1 aminopropi 1 ) - 3 -et i 1 c arbodi - imi da (EDC1) . La mezcla de reacción se deja agitando durante toda la noche. Después se elimina la DMF a presión reducida y la mezcla de reacción se divide entre 20 mi de acetato de etilo y 50 mi de agua. La porción acuosa se extrae también con 2x20 mi de acetato de etilo y las porciones orgánicas combinadas se lavan con salmuera, se secan con sulfato de sodio anhidro, se filtran y se concentran. La purificación en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo/hexano permite obtener 410 mg del producto deseado: 4-(cis-3- ( N - t - but oxi c arboni 1 - 2 - ami noacet oxi ) -ciclo-pentil) amino-2-fenil-5, 6, -dimetil-7H-pirrolo [2, 3 d ] -pirimidina, MS (ES) (M++l) = 480.2. El éster se trata después con 5 mi de ácido trif luoroacét ico al 20% en diclorometano a temperatura ambiente, se deja reposar durante la noche y después se concentra. La trituración con acetato de etilo permite obtener 300 mg de un sólido blanquecino; sal de ácido t ri f luoroacé t i co de 4-(cis-3-(2-aminoacetoxi) ciclopentil) amino -5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) (M++l) = 380.1. Un experto en la técnica podrá apreciar que se pueden sintetizar los siguientes compuestos utilizando los métodos antes descritos: 4 - (cis-3-hidroxiciclopentil) amino-B, 6 -dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [ 2 , 3 d] pirimidina. MS (ES) (M++l) = 323.1.

Sal de ácido t ri f luoroacé i c o de 4- (cis-3- (2-aminoacetoxi) ciclopentil) amino-B, 6 - dimet i 1 - 2 -fenil-7H-pirrolo [2 ,3d] pirimidina. MS (ES) (M++l) = 380.1. 4- ( 3 -acetamido) piperidinil-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo [ , 3 d] pirimidina . MS (ES) (M++ l) = 364.2. 4 - ( 2 -N ' -metilureapropil) amino-5, 6 - dimet i 2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d]pirimidina. MS (ES) (NT+1) =353.4. 4- (2-acetamidobutil) amino-5, 6-dimetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES) (M++l)= 352.4. 4- (2-N' -metilureabutil) mino -5,6-dimetil fenil-7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) (M++l)= 367.5. 4 - ( 2 - ammoc i clopropilacetamidoetil) amino fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. MS (ES) (M++l) = 309.1. 4- (trans-4-hidroxiciclohexil ) mino-2- ( 3 -clorofenil) -7H-pirrolo [2 , 3d] irimidina . MS (ES) (M++l) =342.8. 4- (trans -4 -hidroxiciclohexil ) amino-2- (3 f luorof enil ) - 7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) (M++l ) =327.2. 4- (trans-4- hi droxi c iclohexil) amino-2- (4-piridil) -7H-pirrolo [2 , 3d] pirimidina . MS (ES) (M++l) = 310.2.

EJEMPLO 17 ESQUEMA DE REACCIÓN El nitrógeno de pirrol de (7) (esquema de reacción IX) se protege con dicarbonato de di-t-butilo bajo condiciones básicas para obtener el carbamato correspondiente (22) . La bromación del radical de (22) procede de manera regioselectiva para obtener el bromuro (23) . En general, el compuesto (23) sirve como un intermediario e lee of i 1 i co clave para diversos compañeros de copulación nucleof ílicos . El desplazamiento del bromuro de alquilo con fenolato de sodio trihidratado permite obtener el compuesto (24) . El desplazamiento posterior del cloruro de arilo y la remoción del grupo protector carbamato de t-butilo se presenta en un paso para obtener el compuesto (25) de seado .

Síntesis detallada de los compue s tos (22 (25) de conformidad con el esquema de reacción IX Se agregan dicarbonato de di-t-butilo (5.37 g, 24.6 mmoles) y dimet i 1 mi nop i i dina (1.13 g, 9.2 mmoles) a una solución que contiene (7) (1.50 g, 6.15 mmoles) y piridina (30 mi) . Después de 20 horas, la reacción se concentra y el residuo se divide entre CH2Cl2 y agua. La capa de CH2C12 se separa, se seca con gS04, se filtra y se concentra para obtener a sólido de color negro. La cromatografía de vaporización instantánea (Si02; 1/9 EtOAc /hexanos , Rf 0.40) permite obtener 1.70 (80%) de un sólido de color blanco (22) . XH RMN (200 MHz, CDC13) d 8.50 (m, 2H, Ar H) , 7.45 (m, 3H, Ar-H) , 6.39 (s, 1H, pirrol-H) 2.66 (e, 3H, pirrol-CH3) , 1.76 (s, 9H, carbamato CH3) . MS, M+ + 1 = 344.1. P . f . = 175-177°C .

Se agregan N-bromosuccinimida (508 mg , 2.86 mmoles) y AIBN (112 mg , 0.68 mmoles) a una solución que contiene (22) (935 mg , mmoles) y CCl4 (50 mi) . La solución se calienta a reflujo. Después de dos horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y se concentra al vacío para obtener un sólido de color blanco. La cromatografía de vaporización instantánea (Si02; l/l CH2Cl2/hexanoa , Rf 0.30) permite obtener 960 mg (84%) de un sólido de color blanco (23) . 1H RMN (200 MHz, CDC 13 ) d 8.52 (m, 2H, Ar H ) , 7.48 (m, 3H, Ar-H), 6.76 (s, 1H, pirrol-H) 4.93 (s, 2H, pirrol - CH2Br ) , 1.79 (s, 9H, carbamato CH3) . MS, M+ + 1 = 423.9. P . f . = 155-157°C .

Se agrega fenóxido de sodio trihidratado (173 mg , 1.02 mmoles) en una porción a una solución del bromuro (23) (410 mg , 0.97 mmoles) disuelto en CH2C12 (5 mi) y DMF (10 mi) . Después de 2 horas, la solución de reacción se divide entre CH2C12 y agua. La capa acuosa se extrae con CH2C12. Las capas de CH2C12 combinadas se lavan con agua, se secan con MgS04, se filtran y se concentran para obtener un sólido de color amarillo. La cromatografía de vaporización instantánea (Si02; 1/6 EtOAc /hexanos , Rf 0.30) permite obtener 210 mg (50%) de un sólido de color blanco (24) . 1H RMN (200 MHz , CDCl3) d 8.53 (m, 2H, Ar- H ) , 7.48 (m, 3H, Ar-H) , 7.34 (m, 2H, Ar-H) , 7.03 (m, 3H, Ar-H) , 6. 83 (s, 1H, pirrol-H) , 5.45 (s, 2H, ArCH20) , 1.76 (s, 9H, carbama o - CH3 ) . MS , M+ - 436.2.

Se calienta una solución que contiene (24) (85 mg , 0.20 mmoles), - ace t i 1 e t i 1 endi amina (201 mg, 1.95 mmoles) y DMSO (3 mi) hasta 100°C. Después de 1 hora, la temperatura se eleva hasta 130°C. Después de 3 horas, la reacción se enfría hasta teatro ambiente y se divide entre EtOAc y agua. La capa acuosa se extrae con EtOAc (2x) . Las capas de EtOAc combinadas se lavan con agua, se secan con MgS04, se filtran y se concentran. La cromatografía de vaporización instantánea (Si02; 1/10 EtOH/CHCl3, Rf 0.25) permite obtener 73 mg (93%)de un sólido espumoso de color blanco (25) . XH RMN (200 MHz , DMSO - de ) 5 11.81 (br s, 1H, N-H) , 8.39 (m, 2H, Ar-H) , 8.03 (br t, 1H, N-H) , 7.57 (br t, 1H, N-H) , 7.20-7.50 (m, 5H, Ar-H) , 6.89- 7.09 (m, 3H, Ar-H) , 6.59 (a, 1H, pirrol-H) , 5.12 (s, 2H, ArCH20) , 3.61 (m, 2H, NCH2) , 3.36 (m, 2H, NCH2) , 1.79 (s, 3H, COCH^) . MS , M+ 1 = 402.6. Los siguientes compuestos se obtienen en una forma similar a la del ejemplo 17: 4- (2-acetilaminoetil) amino-6-f enoximetil-2-fenil-7H-pirrolo[2,3d]pirimidina. P.f. 196 - 197 °C . MS (ES) : 401.6 (M+ +l) . 4- (2-acetilaminoetil) amino-6- (4-fluorofen-oxi)metil-2-fenil-7H-pirrolo [2,3d]pirimidina. MS (ES) : 420.1 (M++ 1 ) . 4- (2-acetilaminoetil) amino-6 - (4-clorofe oxi ) met il-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 d] irimidina. MS (ES) : 436.1 (M++ l) . 4 - (2-acetilaminoetil) amino-6- (4-metoxi f eno i ) -metil-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3 d ] irimidina. MS (ES) : 432.1 (M++l) . 4 - (2-acetilaminoetil) amino-6- (N-piridin-2-ona) metil-2-fenil-7H-pirrolo [2, 3d] irimidina. MS (ES) : 403.1 (M++l) . 4- (2-acetilaminoetil) amino-6- (N-f enilamino) met i l-2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3] pirimidina . MS (ES) : 400.9 ( ++l) . 4 - (2-acetilammoetil) amino-6- (N-me il-N-f enilamino) met il - 2 - fenil - 7H-pirrolo - [2,3d] -pirimidina . MS (ES) : 414. B (M++ 1) . 4 - ( 2 - ' - me t i lureaetil) amino-6- f enox i me t i 1 -2-fenil-7H-pírrolo [2, 3d] pirimidina. MS (ES ) : 416.9 (M+ + l ) .

EJEMPLO 18 Síntesis de antagonistas de Ai de adenosina El compuesto 1319 y el compuesto 1320 (cuadro 13 siguiente) se pueden sintetizar utilizando los procedimientos generales de la presente invención.

Compuesto 1319 (81%) 1E RMN (d6-DMSO) d 1.37 (m, 4H) , 1.93 (m, 2H) , 2.01 (m, 2H) , 4.11 (brs, 1H) , 4.61 (d, 1H, J = 4.4 Hz) , 6.59 (m, 1H) , 7.09 (m, 1H) , 7.21 (m, 2H) , 7.49 (dd, 1H, J = 8 Hz, 14 Hz) , 8.03 (m, 1H) , 8.18 (d, 1H, J = 8 Hz) , 11. 55 (brs, 1H) . MS (ES) : 327.0 (M++l) .

Compuesto 1320 (31%) MS (ES) : 343.1 (M++l) .

EJEMPLO 19 Síntesis de antagonlata de Ai de adenoaina El compuesto 1321 (cuadro 13 siguiente ) se puede sintetizar utilizando los procedimientos generales indicados más adelante.

Se disuelve el compuesto 28 (10.93 g, 50.76 mmoles) en DMF (67 mi) . Se agregan clorhidrato de 4 -amidinopiridina (8.0 g, 50.76 mmoles) y DBU (15.4 g, 101.5 mmoles) en forma secuencial y la reacción se calienta hasta 85°C. Después de 22 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y la DMF se elimina al vacío. El aceite oscuro se diluye con HCl 2M (80 mi) . La reacción se deja reposar. Después de 2 horas, la solución se enfría hasta 10aC y se filtra. El sólido se lava con agua fría y se seca para obtener 7.40g de un sólido de color amarillo, compuesto 29 (69%) . 1H RMN ( 200 MHz, d6-DMSO) d 6.58 (s, 1H) , 7.27 (s, 1H) , 8.53 (d, 2H, J = 5.6) , 9.00 (d, 2H, J = 5.2 Hz) , 12.35 (brs, 1H) . MS (ES) : 212.8 (M++l) .

Se diluye el compuesto 29 (7 4 mmo les, 9.8 mmoles) con P0C13 y se calienta hasta 105°C. Después de 18 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y el POCI3 se elimina al vacío. El aceite oscuro espeso se diluye con eOH (75ml) seguido por éter (120ml) . El solido amorfo de color rojo se filtra y se lava con éter para obtener 3.82 g de un sólido de color rojo. El sólido crudo tiene aproximadamente 80% de pureza y se utiliza sin purificación adicional en la siguiente reacción. MS (ES) : 230.7 (NT + 1) .

Compuesto 1321 (15%) H RMN (200 Hz, d5-DMS0) 8 1.38 (m, 4H) , 1.92 (brs, 2H) , 2.02 (brs, 2H) , 3.44 (brs, 1H) , 4.14 (brs, 1H) , 4.56 (d, 1H, J = 4 Hz) , 6.63 (m, 1H) , 7.15 (m, 1H) , 7.32 (d, 1H, J = 6.2 Hz) , 8.20 (d, 2H, J = 4.4 Hz) , 8.65 (d, 2H, J = 4.4Hz) , 11.67 (brs , 1H) . MS (ES ) : 310.2 (M+ + l ) .

Compuesto 1501 (70%) (cuadro 15 siguiente) 1H RMN (200MHz, CD3OD ) d 1.84 (s, 3H) , 3.52 (t, 2H, J = 6.0 Hz) , 3.83 (t, 2H, J = 6.0 Hz) , 6.51 (d, 1H, J = 3.4 Hz) , 7.06 (d, 1H, J = 3.8 Hz) , 7.42 (m, 3H) , 8.36 (m, 2H) . MS (ES) : 296.0 (M++l) .

Compuesto 1502 (cuadro 15 siguiente) MS (ES) : 345.0 (M++l) Compuesto 1500 (cuadro 15 siguiente) XH R N (200 MHz , CDC13) d 1.40-1.80 (m, 6H) , 1.85-2.10 (m, 2H) , 2.18 (s, 3H) , 2.33 (s, 3H) , 2.50 (d, 3H) , 3.90-4.10 (m, 2H) , 4.76 (m, 1H) , 5.50 (d, 1H) , 6.03 (m, 1H) , 7.40 (m, 3H) , 8.37 (m, 2H) , 9.15 (brs , 1H) . MS (ES) : 393.3 ( ++l) .

EJEMPLO 20 Sintesia de antagonista de Ai de adenosina El compuesto 1504 (cuadro 15 siguiente) se puede sintetizar utilizando los procedimientos que se indican a continuación.

Corrpucsto 1504 Se disuelve el compuesto 31 (200 mg , 0.47 inmoles) en DCM (4 mi) . Se agregan, en forma secuencial, trietilamina (51 mg , 0.5 mmoles) y tiomorfolina (52 mg , 0.5 mmoles) . La solución se mezcla durante varios minutos y se deja reposar durante 72 horas. La reacción se diluye con DCM y H20 y las capas se separan. La capa acuosa se extrae con DCM. Las capas de DCM combinadas se secan con MgS04, se filtran y se concentran. Se agrega éter etílico a la muestra cruda y el sólido resultante se filtra para obtener 100 mg de un sólido de color blanco, 32 ( 62%) . XH RMN (200 MHz, CDC13) d 1.76 (s, 9H), 2.66 (brs, 2H) , 2.79 (brs, 2H) , 3.86 (s, 2H) , 7.46 (m, 3H) , 8.50 (m, 2H) .

Se combina el compuesto 32 con DMSO (3 mi) y t rans - 4 - aminoc i c lohexanol (144 mg , 1.25 mmoles) y se calienta hasta 130°C durante 4 horas. La reacción se enfría hasta temperatura ambiente, y se diluye con. EtOAc y H20. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con EtOAc (2x) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con H20 y salmuera, se secan con MgS04, se filtran y se concentran. La cromatografía (sílice, 8:1 CHCl3/EtOH) produce 32 mg de un aceite de color canela. Se agrega éter etílico y el sólido resultante se filtra para obtener 5 mg de un sólido de color blanco (9%) .

OSIC-148265. 1E RMN (200 MHz, CD3OD) : d 1.44 (brm, 4H) , 2.03 (brm, 2H) , 2.21 (brm, 2H) , 2.70 (brm, 8H) , 3.53 (m, 4H) , 3.92 (m, 1H) , 4.26 (bra, 1H) , 6.42 (s, 1H) , 7.42 (m, 3H) , 8.33 (m, 2H) .

EJEMPLO 21 Síntesis de antagonista de Ai de adenoslna El compuesto 1503 (cuadro 15 siguiente) se puede sintetizar utilizando los procedimientos generales indicados a continuación.

Corrpucsto I 5Ü3 Se disuelve el bromuro, compuesto 31 (220 mg , 0.47 mmoles) se disuelve en 1:1 DMF : diclorometano (5 mi) . A esta solución se agrega K2C03 (71 mg, 0.52 mmoles) y morfolina (0.047 mi, 0.47 mmoles) . La mezcla se deja agitando a temperatura ambiente durante toda la noche. Los solventes se eliminan al vacío y el residuo se divide entre H20 y diclorometano. La capa orgánica se seca con MgS04, se filtra y concentra para obtener un sólido blanquecino el cual, después de triturar con éter/hexanos permite obtener 175mg de un sólido de color blanco, 33 (84%) . ]'H RMN (200 Hz, CDCl3) d 1.9 ( 9H , s) , 2.54 (4H, s) , 3.65 (4H, s) , 3.85 (1H, s) , 6.59 (1H, s) , 7.45 (3H, m) , 8.5 (2H, m) .

Se disuelven el compuesto 33 (50 mg , 0.11 mmoles) y t rans - 4 - aminoc i c 1 ohexano 1 (105 mg , 0.91 mmoles) en D SO (2ml) . La solución resultante se burbujea con N2 y después se calienta hasta 100°C en un baño de aceite y se agita durante toda la noche. La mezcla de reacción cruda se vierte en agua y se extrae dos veces con acetato de etilo (50 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con H20. Después de secar con MgS04, y de filtrar, la capa orgánica se concentra al vacío para obtener un sólido de color naranja. La cromatografí (sílice, 10% de CH30H en CH2C12) permite obtener 15 mg (33%) . 1H RMN (200 MHz, CDC13) d 1.24 -1.62 (4H, m) , 1.85 (2H, m) , 2.10 (2H, m) , 2.26 (4H, m) , 3.53 (4H, m) , 4.22 (1H, m) , 4.73 (1H, m) , 5.85 (1H, d) , 6.15 (1H, s) , 7.25 (3H, m) , 8.42 (2H, m) , 10.0 (1H, s) .

?? (ES) : 408 ( + + 1) . Los compuestos 1500, 1501, y 1502 se pueden sintetizar utilizando pasos de preparación similares a los del ejemplo 20 tratando el compuesto 32 con una amina sustituida de manera apropiada .

Pruebas para el gen reportero de ß-galactosidasa para los receptores Ai y A2 a de a_de o sina de humano Se transforman cepas de levadura (S. cerevisiae) con Ai de humano (AiR; CADUS cepa CY12660) o A2a de humano (A2aR; CADUS cepa CY8362) y con la adición de un gen reportero lacz( -galactosidasa) para utilizarlo como una lectura funcional. Más adelante se lista una descripción completa de las transformaciones (véase Cepas de Levadura) . Se utiliza ÑECA (5'-N-e t i 1 c arboxarai doadenos ina ) , un agonista potente del receptor de adenosina con una afinidad similar para los receptores Ax y A2a, como un ligando para todas las pruebas. Los compuestos de prueba se examinan a 8 concentraciones (0.1-10,000 nM) respecto a la capacidad para inhibir la actividad de ß-galactosidasa inducida por ECA utilizando CY12660 o CY8362.

Preparación de los cultivos de levadura de res e rva Se siembran por estrías cada una de las cepas de levadura respectivas, CY12660 y CY8362, en una placa LT con agar y se incuban a 30°C hasta que se observe el crecimiento de colonias. Las levaduras provenientes de estas colonias se agregan a medio LT (pH 6.8) y se cultivan durante toda la noche a 30°C. Después se diluye cada cepa de levadura hasta una DO600 = 1.0-2.0 (aproximadamente 1-2 x 107 cé lulas /mi ) , según se determina mediante espectrofotometrí a (V AX de Molecular Devices) . Por cada 6 mi de cultivo líquido de levadura, se agregan 4 mi de glicerol al 40% (1:1.5 vol:vol) ("solución de reserva de levadura/glicerol") . A partir de esta solución de reserva de levadura/glicerol, se preparan después alícuotas de 1 mi y se almacenan a -80°C hasta que sean requeridas para la prueba.

Prueba para AiR y A2aR de levadura Se descongela un frasco de cada una de las soluciones de reserva de levadura/glicerol de CY12660 y CY8362 y se utilizan para inocular medio líquido LT complementado, pH 6.8 (92 mi de líquido LT, al cual se agregan: 5 mi de glucosa al 40%, 0.45 mi de KOH 1M y 2.5 mi de Pipes, pH 6.8) . Los cultivos líquidos se cultivan durante 16-18 horas (durante la noche) a 30°C. Después se diluyen alícuotas provenientes de los cultivos nocturnos en medio LT, que contienen 4U/ml de desaminasa de adenosina (tipo VI o VII proveniente de la mucosa intestinal de bovino, Sigma), hasta obtener una DO600 = 0.15 (1.5 x 10s células/ml) para CY8362 (A2aR) y una DO600 = 0.50 ( 5 x 106 células/ml) para CY12660 (AXR) . Las pruebas se conducen con un volumen final de 100 ul en placas para mi c rot i tul ac i ón de 96 cavidades, de tal manera que se obtenga una concentración final de 2% de DMSO en todas las cavidades. Para la evaluación primaria, se utilizan 1-2 concentraciones de los compuestos de prueba (10 uM, 1 µ?) . Para efectuar el perfil del compuesto, se evalúan 8 concentraciones (10,000, 1000, 500, 100, 50, 10, 1 y 0.1 nM) . A cada placa de microt i tul ac i ón se agregan 10 ul de DMSO al 20% para obtener las cavidades "control" y "Total" mientras que se agregan 10 ul del Compuesto de Prueba (en DMSO al 20%) a las cavidades "Incógnita". Posteriormente, se agregan 10 ul de ÑECA (5 uM para AXR, 1 uM para A2aR) las cavidades "Total" e "Incógnita". En la adición final, se agregan a todas las cavidades 80 ul de cepa de levadura, CY8362 o CY12660. Después todas las placas se agitan brevemente (agitador orbital LabLine 2-3 minutos) y se dejan incubar durante 4 horas a 30°C en un horno seco. La actividad de ß - g 1 ac t os i dasa se puede cuantificar utilizando substratos colorimét ricos (por ejemplo, ONPG , CPRG) , lumi iscentes (por ejemplo Ga 1 ac t on - St a ) o f 1 uoromé t r i eos (por ejemplo, FDG, Resofurin) . En la actualidad, se prefiere la detección de fluo escencia tomando como base la relación superior señal : ruido, la libertad relativa de interferencia y el costo bajo. Se agrega digalactopiranósido de fluoresceína (FDG, de Molecular Probes o de Marker Gene Technologies) , un substrato de ß-galactosidasa fluorescente, a todas las cavidades a 20 ul/cavidad (concentración final = 80 uM) . Las placas se agitan durante 5-6 segundos (agitador orbital LabLine) y después se incuban a 37°C durante 90 minutos, se detiene la actividad de ß-galactosidasa utilizando 20 ul/cavidad de Na2C03 y todas las placas se agitan durante 5-6 segundos. Las placas se agitan después durante 6 segundos y se determina la intensidad relativa de fluorescencia utilizando un fluorómetro ( Spectraf luor de Tecan; excitación = 485 nm , emisión - 535 nm) .

Cálculos Los valores de fluorescencia relativa para las cavidades "control" se interpretan como fondo y se restan de los valores "Total" e "Incógnita". Los perfiles del compuesto se analizan mediante transformación logarítmica (eje de las x: concentración del compuesto) seguido por un ajuste de la curva de competencia por sitio para calcular los valores CI50 (GraphPad Prism) .

Cepas de levadura Se desarrollaron las cepas de Saccharomyces cerevisiae CY12660 [farl*1442 tbtl-1 fusl-HIS3 canl Stel4 : : trpl : : LYS2 Ste3*1156 gp 1 ( 41 ) - G i 3 lys2 ura3 leu2 trpl: his3; LEU2 PGK -MfalLeader- hAIR - PHO 51 e rm 2mu-orig REP3 Ampr) y CY8362 [gpal - GasEl 0K farl*1442 tbtl-1 fusl-HIS3 canl stel4: :trpl: LYS2 ste3*1156 lys2 ura3 leu2 trpl his3; LEU2 PGK - hA2 aR 2mu-ori REP3 Ampr] Medio LT El medio LT (complementado con Leu-Trp) está constituido por lOOg de base nitroqenada de levadura DIFCO, complementado con lo siguiente: 1.0 g de valina, 1.0 g de ácido aspártico, 0.75 g de f eni lalanina , 0.9 g de lisina, 0.45 g de tirosina, 0.45 g de isoleucina 0.3 g de metionina, 0.6 g de adenina, 0.4 g de uracilo, 0.3 g de serina, 0.3 g de prolina, 0.3 g de cisteína, 0.3 g de arginina, 0.9 g de histidina y 1.0 g de treonina.

Construcción de cepas de levadura que expresan al receptor ?? de adenosina de humano En este ejemplo, se describe la construcción de cepas de levadura que expresan un receptor Ai de adenosina de humano integrado de manera funcional en la ruta del sistema de feromona de levadur .

I . Construcción del vector de expresión Para construir un vector de expresión en levadura para el receptor Ai de adenosina de humano, se obtiene el ADNc para el receptor Ax de adenosina mediante PCR de transcriptasa inversa de ARNm de hipocampo de humano utilizando iniciadores diseñados tomando como base la secuencia publicada del receptor Ai de adenosina de humano y técnicas estándar. El producto de PCR se subclona en los sitios Ncol y Xbal del plásmido de expresión en levadura pMP15. El plásmido pMP15 se crea a partir de pLPXt de la siguiente manera: se elimina el sitio Xbal de YE P 51 (Broach, J.R. et al. (1983) "Vectora for high-level, inducible expression of cloned genes in yeast" p. 83-117 en M. Inouye (ed. ) , Experimental Manipulation of Gene Expression. Academic Press, New York) mediante digestión, llenado de extremos y volviendo a ligar para crear YepSlNcoDXba. Se crea otro sitio Xbal en el sitio BamHI mediante digestión con BamHI, llenado de extremos, ligamiento de enlazador (New England Biolabs, # 1081) , digestión con Xbal y volviendo a ligar para generar YEPSINcoXt. Este plásmido se digiere con Esp31 y Ncol y se liga a los fragmentos Leu2 y PGKp generados mediante PCR. El producto de PCR Leu2 de 2 kb se genera mediante amplificación a partir de YEP5 INco utilizando iniciadores que contienen los sitios Esp31 y BglII. El producto de PCR PGKp de 660 pares de bases se genera mediante amplificación a partir de pPGKas (Kang, Y.-S. et al. (1990) Mol. Cell. Biol . 10:2582-2590) con iniciadores para PCR que contienen los sitios BglII y Ncol. El plásmido resultante se denomina pLPXt . pLPXt se modifica insertando la región codificadora de la secuencia líder pre-pro del factor a en el sitio Ncol. La secuencia líder prepro se inserta de tal manera que se mantiene el sitio de clonación Ncol en el extremo 3' de la secuencia líder, pero no se regenera en el extremo 5' , De esta manera, se puede clonar los receptores mediante digestión del plásmido con Ncol y Xbal . El plásmido resultante se denomina pMP15. El plásmido pMP15 en el cual se inserta el ADNc para el receptor Ax de adenosina de humano se denomina p5095. En este vector, el ADNc del receptor está fusionado al extremo 3' de la secuencia líder prepro del factor-a de levadura. Durante la maduración de la proteína, se disocian las secuencias peptídicas prepro para generar el receptor maduro de longitud completa. Esto sucede durante el procesamiento del receptor a través de la ruta secretora de levadura. Este plásmido se mantiene mediante selección con Leu (es decir, crecimiento en medio que carece de leucina) . Se determina la secuencia de la región codificadora clonada y se encuentra que es equivalente a aquella de la literatura publicada (números de acceso de GenBank S45235 y S56143 ) .

I I . Construcción de la cepa de levadura Para crear una cepa de levadura que exprese al receptor Ax de adenosina de humano, se utiliza la cepa CY7967 como la cepa precursora de partida. El genotipo de CY7967 es el siguiente: MATa gpaD1163 gpal(41)Gai3 farlD1442 tbt-1 FUS 1-HIS3 canl st e 14 : : t r 1 : : LYS 2 ste3D1156 lys2 ura3 leu2 trpl his3. Los marcadores genéticos se revisan a con inuación : MATa Apareamiento tipo a gpalD1163 El GPA1 de la proteína G de levadura endógeno ha sido suprimido gpal (41) Gixi3 Se integra gpal(41)Gcci3 en el genoma de la levadura. Esta proteína Ga quimérica está constituida por los primeros 41 aminoácidos del GPA1 de la subunidad Ga de levadura endógeno fusionado al Gai3 de la proteína G de mamífero en el cual Be han eliminado los aminoácidos del extremo N- terminal . farlD1442 Se elimina el gen FAR1 (responsable de la detención del ciclo celular) (con lo cual se evita la detención del ciclo celular después de activar la ruta de la respuesta a feromona) . tbt-1 Cepa con eficiencia elevada de transformación mediante electroporación FUS1-HIS3 Una fusión entre el promotor FUS1 y la región codificadora HIS3 (con lo cual se crea un gen HIS3 inducible con feromona) . canl Arginina/canavinina permeasa. 3tel : : trpl : : LYS. Disrupción del gen de STE14 , una C- farnesilmetiltransferasa (con lo cual se reduce la señalización basal a través de la ruta de feromona) . ete3D1156 ST de levadura endógeno, se altera el receptor de feromona del factor a (STE3) . lys2 Defecto en la 2 -aminoadipato reductasa, la levadura necesita lisina para crecer. ura3 Defecto en la orotidina-5 ' -fosfato descarboxilasa , la levadura necesita uracilo para crecer. leu2 Defecto en la b-isopropilmalato deshidrogenasa, la levadura necesita leucina para crecer. t pl Defecto en la fosforibosilantranilato, la levadura necesita triptófano para crecer. his3 Defecto en la imidazolglicerolfosfato deshidrogenasa, la levadura necesita histidina para crecer.

Se transforman dos plásmidos en la cepa CY7967 mediante electroporación : el plásmido p5095 (que codifica para el receptor Ai de adenosina de humano; descrito anteriormente) y el plásmido pl584, el cual es un plásmido del gen reportero FUS 1 - ß - ga 1 ac o s i das a . El plásmido pl584 se obtiene a partir del plásmido pRS425 ( Ch i s i ns o , T.W. et al. (1992) Gene 110:119-1122) . El plásmido pRS426 contiene un sitio de polienlazador en los nucleótidos 2004-2016. Se inserta una fusión entre el promotor FUS1 y el gen para ß -galactosidasa en los sitios de restricción EagI y Xhol para crear el plásmido pl584. El plásmido pl584 se mantiene mediante selección con Trp (es decir, crecimiento en medio que carece de leucina) .

La cepa resultante que contiene a p5095 y pl584, conocida como CY12660, expresa al receptor A de adenosina de humano. Para cultivar esta cepa en placas de agar o líquidas, se utiliza medio mínimo que carece de leucina y triptófano. Para efectuar una prueba de crecimiento en placas (para evaluar FUS 1 - H I S 3 ) , las placas están a un pH de 6.8 y contienen 0.5-2.5 mM de 3-amino-l , 2 , 4-triazol y carecen de leucina, triptófano e histidina. Como un control para la especificidad, se incluye una comparación con una o más selecciones de receptor de s i e t e - t ransmembrana basadas en levadura en todos los experimentos.

Construcción de cepas de levadura que expresan al receptor A2a de adenosina de humano En este ejemplo, se describe la construcción de cepas de levadura que expresan un receptor A2a de adenosina de humano integrado de manera funcional en la ruta del sistema de feromona de 1 evadur .

I . Construcción del vector de expresión Para construir un vector de expresión en levadura para el receptor A2a de adenosina de humano, se obtiene el ADNc para el receptor A2a de adenosina con el Dr. Phil Murphy (NIH) . Después de recibir este clon, se determina la secuencia del inserto del receptor A2a y se encuentra que es idéntica a la secuencia publicada (# de acceso de GenBank S46950) . El ADNc del receptor se extirpa del plásmido mediante PCR con polimerasa VENT y se clona en el plásmido pLPBX, el cual controla la expresión del receptor mediante un promotor constitutivo de f os f ogl icerato cinasa (PGK) en levadura. De nuevo se determina la secuencia del inserto completo y se encuentra que es idéntica a la de la secuencia publicada. Sin embargo, debido a la estrategia de clonación utilizada existen tres aminoácidos anexados al extremo carboxi - terminal , GlySerVal .

I I . Construcción de la cepa de levadura Para crear una cepa de levadura que exprese al receptor A2a de adenosina de humano, se utiliza la cepa CY8342 de levadura como la cepa precursora de partida. El genotipo de CY8342 es el siguiente: MATa farlD1442 tbtl-1 lys2 ura3 leu2 trpl his3 fusl-HIS3 canl ste3D1156 gpaD1163 stel4 : : trpl : : LYS2 gpalp-rGUBE10K (o gpalp-rGaeD229S o gpalp-rGaeE10K+D229S) .

Los marcadores genéticos son como los descritos en el ejemplo 1, excepto por la variación de la proteína G. Para la expresión del receptor A2a de humano, se utilizan cepas de levadura en las cuales se ha eliminado el GPA1 para la proteína G de levadura endógeno y se reemplaza con un Graa . Se utilizan tres mut ntes de G„a de rata. Estas variantes contienen una o dos mutaciones de punto que las convierten en proteínas que se copulan en forma eficiente a ß? de levadura. Estas se identifican como GreaE10K (en la cual el ácido glutámico en la posición 10 está reemplazado con lisina) , GasD229S (en la cual el ácido aspártico en la posición 229 está reemplazado con serina) y GasE 10K+D229 S (la cual contiene ambas mutaciones de punto) . La cepa CY8342 (la cual tiene una de las tres proteínas G„s mutantes de rata se transforma ya sea con el vector precursor pLPBX (Receptor ") o con pLPBX-A2a (Receptor ") . Se agrega un plásmido que tiene al promotor FUS1 fusionado a las secuencias codificadoras de ß -galactos idasa (descritas anteriormente) para evaluar la magnitud de activación de la ruta de respuesta a feromona.

Prueba funcional utilizando cepas de levadu a que expresan al receptor Ai de adenosina En este ejemplo, se describe el desarrollo de una prueba de evaluación funcional en levadura para moduladores del receptor Ai de adenosina de humano .

I . Ligandos utilizados en la prueba Se utilizan adenosina, un agonista natural para este receptor, así como otros dos agonistas sintéticos para el desarrollo de esta prueba. En un subconjunto de experimentos se utilizan adenosina, de la cual se reporta que tiene un valor CE50 de aproximadamente 75 nM , y ( - ) - N6 - ( 2 - f eni 1 i s oprop i 1 ) -adenosina (PIA) que tiene una afinidad reportada de aproximadamente 50 nM . En todas las pruebas de crecimiento se utiliza 51 - N - e t i 1 c arboxamido -adenosina ( ECA) . Para evitar la señalización debido a la presencia de adenosina en el medio de crecimiento, se agrega adenosina desaminasa (4U/ml) a todas las pruebas.

I I . Respuesta biológica en levadura Se determina la capacidad del receptor Ai de adenosina para acoplarse de manera funcional en un sistema de levadura heterólogo in roduciendo el vector de expresión del receptor Ax (p5095, descrito anteriormente) en una serie de cepas de levadura que expresan diferentes subunidades de la proteína G. la mayoría de estos transformantes expresan las subunidades Ga del subtipo Gal o Gao . También se evaluaron proteínas Ga respecto a la posible iden ificación de acoplamiento promiscuo de r e cept or - ro t e í na Ga . En diversas cepas se integra una construcción STE18 o una construcción quimérica STE18-Gy2 en el genoma de la levadura. Las cepas de le\radura alojan un gen HIS3 defectuoso y una copia integrada de FUS1-HIS3, con lo cual se permite la selección en medio selectivo que contiene 3 -amino- 1 , 2 , 4 - triazol (e\raluado a 0.2, 0.5 y 1.0 mM) y que carece de histidina. Se aislan los transformantes y se preparan monocapas en medio que contiene 3-amino-l , 2 , 4-triazol , 4 U/ml de adenosina desaminasa y que carece de histidina. Se aplican cinco microlitros de diversas concentraciones de ligando (por ejemplo, ECA a 0, 0.1, 1.0 y 10 mM) . El crecimiento se monitorea durante 2 días. De este modo se evalúan las respuestas de crecimiento dependientes de ligando en las diversas cepas de levadura. Los resultados se presentan en forma resumida en el siguiente cuadro 1. El símbolo (-) indica que no se detectó activación del receptor dependiente del ligando, mientras que el símbolo (+) indica respuesta dependiente de ligando. El término "LIRMA" significa Activación Mediada por Receptor Independiente del Ligando (Ligand Independent Receptor Mediated Activation) , CUADRO 3 Como se indica en el cuadro 3, se descubrió que la señalización más robusta se presenta en una cepa de levadura que expresa la quimera GPAi(41)- Gui 3 .

III. Prueba para fusl-LacZ Para caracterizar la activación de la ruta de la respuesta a feromonas de manera más completa, se mide la síntesis de ß -galac t o s idas a mediante fuslLacZ en respuesta a la estimulación del agonista. Para efectuar la prueba de ß-galactosidas , se agregan concentraciones cada vez mayores del ligando a cultivos en fase log intermedia del receptor A1 de adenosina de humano en una cepa de levadura que co-expreaa una quimera Stel8-Gy2 y GPA i-Gai3. Los ransformantes se aislan y cultivan durante la noche en presencia de histidina y de 4 U/ml de adenosina desaminasa. Después de incubar durante 5 horas con 4 U/ml de adenosina desaminasa y ligando, se mídela inducción de ß -galactos idasa utilizando CPRG como el substrato para ß - gal act ós i do . Se utilizan 5 x 105 células por cada prueba. Los resultados obtenidos con la estimulación con ÑECA indican que a una concentración de ECA de 10"8 M, se obtiene una estimulación de actividad de ß -galactosidasa de aproximadamente 2 veces. Además, se observa un índice de estimulación de aproximadamente 10 veces a una con entración de ECA de 10~5 M . La utilidad de esta prueba se extiende mediante validación de la actividad de los antagonistas sobre esta cepa. Se evalúan dos antagonistas conocidos de adenosina, XAC y DPCPX, respecto a su capacidad para competir contra ÑECA (a 5 mM) para actividad en la prueba de ß-galactosidas . En estas pruebas, la inducción de ß-galactosidasa se mide utilizando FDG como el substrato y 1.6 x 105 células por prueba. Los resultados indican que en ambos compuestos, XAC y DPCPX, sirven como antagonistas potentes del receptor Ai de adenosina expresado en levadura, con valores de CI50 de 44 nM y 49 nM, respectivamente. Para determinar si este efecto inhibidor es específico del subtipo Ai, se efectúa una serie de experimentos complementarios con la prueba para el receptor A2a basada en levadura (descrita en el ejemplo 4) . Los resultados obtenidos con la prueba para A2a basada en levadura indican que el compuesto XAC es un antagonista del receptor A2a relativamente efectivo, consistente con los reportes publicados. En contraste, el compuesto DPCPX es relativamente inerte en este receptor, como es de esperar a partir de los reportes publicados.

IV . Unión de radioligando La prueba para el receptor Ai de adenosina se caracteriza también midiendo les parámetros de unión a radioligando del receptor. Se analiza el desplazamiento de la unión de [ H]CPX mediante varios compuestos de referencia para el receptor adenosina, XAC , DPCPX, y CGS, utilizando membranas preparadas provenientes de levaduras que expresan al receptor A1 de adenosina de humano. Se comparan los resultados con membranas de levadura que expresan al receptor Ai de adenosina de humano con aquellos provenientes de membranas de levaduras que expresan al receptor A2a de adenosina de humano o al receptor A3 de humano para examinar el carácter específico de la unión. Para efectuar la prueba, se incuban cincuenta mg de membranas con 0.4 nM [3H] CPX y con concentraciones cada vez mayores de ligandos para el receptor de adenosina. La incubación se efectúa en Tris-HCl 50 mM , pH 7.4, 1 mM de EDTA, 10 mM de gCl2, 0.25% de BSA y 2 U/ml de adenosina desaminasa en presencia de inhibidores de proteasa durante 60 minutos a temperatura ambiente. La unión se termina agregando Tris-HCl 50 mM helada, pH 7.4 más 10 mM de MgCl2, seguido por filtración rápida a través de filtros GF/B previamente remojados con solución de pol iet i 1 enimina al 0.5%, utilizando una cosechadora Packard de 96 cavidades. Los datos se analizan utilizando un procedimiento de ajuste de curva por mínimos cuadrados no lineal utilizando el programa Prism 2.01. Los valores CI50 obtenidos en este experimento se muestran en forma resumida en el siguiente cuadro 4: CUADRO 4 Estos datos indican que los compuestos de referencia tienen afinidades consistentes con aquellas reportadas en la literatura. Los datos también indican que las pruebas basadas en levadura tienen una sensibilidad suficiente para diferenciar la especificidad del subtipo de receptor.

Prueba funcional utilizando cepas de levadura que expresan al receptor de adenosina En este ejemplo, se describe el desarrollo de una prueba de selección funcional en levadura para moduladores del receptor Ai de adenosina de humano .

I . Ligandos utilizados en la p_rueba Se utiliza el ligando natural adenosina, así como otros ligandos completamente caracterizados y disponibles comercialmente para estudiar al receptor A2a de humano expresado de manera funcional en levadura. Se utilizan tres ligandos para establecer esta prueba. Estos i nc 1 uyen : Ligando Ki reportada Función Adenosina 500 nM Agonista 5' -N-etilcarboxamidoadenos 10-15 nM Agonista ( ECA) (-) -N6- (2-fenilisopropil) - 100-125 nM Agonista adenosina (PIA) Para evitar la señalización debido a la presencia de adenosina en el medio de crecimiento, se agrega adenosina desaminasa (4 U/ml) a todas las pruebas .

II. Respuesta biológica en levadura Se evalúan los agonistas para el receptor A2a respecto a la capacidad para estimular la ruta de la respuesta a feromonas en levadura transformada con el plásmido de expresión del receptor A2a y expresando ya sea GasE 10 K , GasD229S o GIÍSE10K+D229S . La habilidad del ligando para estimular la ruta de la respuesta a feromonas en una manera dependiente del receptor se indica mediante una alteración en el fenotipo de la levadura. La activación del receptor modifica el fenotipo desde una auxotrofía para histidina hasta una prototrofia para histidina (activación de fusl-HIS3) . Se aislan tres transformantes independientes y se cultivan durante la noche en presencia de histidina. Las células se lavan para eliminar la histidina y se diluyen hasta 2 x 106 células/ml. Se aplican de manera localizada 5 µ? de cada transformante en medio no selectivo (que incluye histidina) o medio selectivo (1 mM de AT) en ausencia o en presencia de 4 U/ml de adenosina desaminasa. Las placas se cultivan a 30°C durante 24 horas. En presencia de histidina tanto en la cepa con Receptor"1" (R+) y con Receptor (R ) son capaces de crecer. Sin embargo, en ausencia de histidina únicamente crecen las células R+ . Debido a que no se agrega ligando a estas placas son posibles dos explicaciones para este resultado. Una posible interpretación es que la levadura reporta al receptor tienen una ventaja de crecimiento debido a la Activación Mediada por Receptor Independiente de Ligando (LIR A por sus siglas en inglés) . Como alternativa, la levadura podría haber sintetizado el ligando adenosina. Para distinguir entre estas dos posibilidades, se agrega una enzima que degrade al ligando, adenosina desaminasa (ADA) , a la levadura en crecimiento y a las placas. En presencia de adenosina desaminasa ya no crecen las células R+ en ausencia de histidina, lo que indica que la levadura en efecto sintetiza al ligando. Está interpretación se confirma mediante una prueba de crecimiento A2a en líquido. En este experimento se inocula levadura R+ (una cepa GragE10K que exprese al receptor A2 ) a tres densidades (1 x 10s células/ml; 3 x 105 células/ral; o 1 x 105 células/ml) en presencia o ausencia de adenosina desaminasa (4 U/ml) . La astringencia de la prueba se incrementa incrementando las concentraciones (0, 0.1, 0.2 o 0.4 mM) de 3 -ammo- 1 , 2 , 4 - triazol (AT) , un antagonista competitivo de la imida zo lg 1 i c e rol - P deshidratas , el producto proteínico del gen HIS3. en presencia de adenosina desaminasa y de 3-amino-1 , 2 , 4 - triazol la levadura crece en forma menos vigorosa. Sin embargo, en ausencia de 3 -amíno-1 , 2 , - 1 i zo 1 , la adenosina desaminasa tiene poco efecto. Por lo tanto la adenosina desaminasa por sí sola no tiene un efecto directo sobre la ruta de respuesta a feromona. Un método alternativo para medir el crecimiento y que se puede miniaturizar para selección de alto rendimiento es una prueba por mancha de ligando del receptor A2a ¦ Se cultiva durante la noche una cepa GftgE10K que exprese al receptor A2a (A2aR+) o que carece del receptor (R-) en presencia de histidina y de 4 U/ml de adenosina desaminasa. Las células se lavan para eliminar la histidina y se diluyen hasta 5 x 106 células/ml . Se diseminan 1 x 106 células en placas selectivas que contienen 4 U/ml de adenosina desaminasa y 0.5 o 1.0 mM de 3 - amino- 1 , 2 , 4 - triazol (AT) y se dejan secar durante 1 hora. Se aplican 5 µ? de los siguientes reactivos a la monocapa: 10 mM de adenosina, 38.7 mm de histidina, sulfóxido de dimetilo (DMSO) , 10 mM de PIA o 10 mM de ÑECA. Las células se cultivan durante 24 horas a 30 °C . Los reaultados demuestran que las células sin receptor sólo pueden crecer cuando se agrega histidina al medio. En contraste, las células R" sólo crecen en las áreas en las cuales se han aplicado manchas de los ligandos PIA y ÑECA para el receptor A2a . Debido a que las placas contienen adenosina desaminasa, la ausencia de crecimiento en donde se han aplicado manchas de adenosina confirma que la adenosina desaminasa está activa.

III. Prueba para fus! LacZ Para cuantificar la activación de la ruta de apareamiento de levadura, se mide la síntesis de ß-galactosidasa mediante fuslLacZ. Se transforman cepas de levadura que expresan Gas E 10 K , CasD229S o CagE10K+D229S con un plásmido que codifica para el receptor A2a de humano ( +) o con un plásmido que carece del receptor (R-) . Los transformantes se aislan y cultivan durante la noche en presencia de histidina y 4 U/ml de adenosina desaminasa. Se diluyen 1 x 107 células hasta 1 x 105 células/ml y se exponen a concentr ciones cada vez mayores de ECA durante 4 horas, seguido por determinación de la actividad de ß -gal actos ida sa en las células. Los resultados demuestran que esencialmente no se detecta en las cepas R - , mientras que se detectan cantidades cada vez mayores de actividad de ß-galactosidasa en las cepas R+ que expresan ya sea GasE 10 K , GrasD229S o GasE 10 +D229 S a medida que la concentración de ECA se incrementa, lo que indica un incremento dependiente de la dosis en unidades de beta - gal actos idasa detectado en respuesta a la exposición a una concentración incrementada de ligando. Esta dependencia de la dosis se observa únicamente en células que expresan al receptor A2a-Además, la construcción GaB más potente para el receptor es G„gE10K. La construcción G„aD229S es la construcción Gas que ocupa el segundo lugar en potencia para el receptor A2a, mientras que la construcción GuaE 10 K+D229 S es la menos potente de las tres construcciones GrxB evaluadas, aunque la construcción incluso estimula cantidades fácilmente detectables de actividad de ß-galactosidasa . Para una descripción adicional de las pruebas identificadas, véase solicitud de patente E.U.A. No. de serie 09/088985, titulada " Func ional Expression of Adenosine Receptora in Yeast", presentada el 2 de junio de 1998 (número de caso de apoderado CPI-093) , cuyo contenido completo se incorpora en la presente invención para referencia.

Caracterización farmacológica de los subtipos de receptor de adenosina de humano Materiales y métodos Materiales : Los compuestos [3H]-DPCPX [ c i c 1 opent i 1 - 1 , 3 -dipropi lxant in , 8 - ( dipro i 1 - 2 , 3 - 3H ( ) ] (120.0 Ci/mmoles) ; [3H]-CGS 21680, [carboxietil -3H (N) ] (30 Ci/mmoles) y [ 125 I ] -AB - MECA ( [ 1251 ] - 4 - aminobenc i 1 - 51 -N- me i 1 carboxarai daadenos i na ) (2,200 Ci/mmoles) se adquieren de New England Nuclear (Boston, MA) . Los compuestos XAC (congénero de amina tipo xantina) ; ECA ( 51 -N- et i 1 carboxamidoadenos ina ) ; e IB-MECA provienen de Research Biochemicals International (RBI, Natick, MA) . La adenosina desaminasa y las tabletas de mezcla de inhibidor de proteasa completa se adquieren de Boehringer Mannheim Corp. ( I ndi anapo 1 i s , IN) . Las membranas provenientes de células HEK-293 que expresan de manera estable a loa subtipos de receptor 2a de adenosina [ B-HA2a] ; 2b de adenos ina [RB-HA2b] o 3 e adenosina [RB-HA3 ] , respecti amente provienen de Receptor Biology (Beltsville, MD) . Los reactivos para cultivo celular provienen de Life Technologies (Grand Island, NY) excepto por el suero que se adquieren de Hyclone (Logan, UT) .

Cepas de 1 evadura Se desarrollan las cepas CY12660 [farl*1442 tbtl-1 fusl-HIS3 canl stel4 : : trpl : : LYS2 ste3*1156 gpal (41 ) -Gai3 lys2 ura3 leu2 trpl: his3; LEU2 PGKp- Mf lLeader-hAIR- PH05term 2mu-orig RE P3 Ampr] y CYB362 [gpalp-rG sElO farl*1442 tbtl-1 fusl-HIS3 canl stel4 : : trpl : LYS2 ste3*1156 lys2 ura3 leu2 trpl his3; LEU2 PGKp - hA2 aR 2mu-ori REP3 Ampr] de Saccharo yces cerevisiae como se describió anteriormente .

Cultivo de levadura Las levaduras transformadas se cultivan en medio Leu-Trp [LT] (pH 5.4) complementado con 2% de glucosa. Para la preparación de las membranas se inoculan 250 mi de medio LT con un título de inicio de 1-2 x 106 células/ml proveniente de un cultivo nocturno de 30 mi y se incuba a 30°C bajo oxigenación permanente mediante rotación. Después de cultivar durante 16 horas, las células se cosechan mediante centrifugación y se preparan las membranas como se describió más adelante.

Cultivo de tejido de mamífero Se cultivan células HEK-293 que expresan al subtipo del receptor 2a de adenosina de humano (clon Cadus # 5) en medio esencial mínimo de Dulbecco (DMEM) complemen ado con 10% de suero fetal de bovino y IX de penicilina/estreptomicina bajo presión selectiva utilizando 500 mg/ml del antibiótico G418, a 37°C en una atmósfera con 5% de C02 húmeda .

Preparaciones de membrana celular de levadura Se cosechan cultivos de 250 mi después de incubar durante toda la noche, mediante centrifugación a 2,000 x g en una centrífuga Sorvall RT6000. Las células se lavan en agua helada, se centrifugan a 4°C y el comprimido se vuelve suspender en 10 mi de solución reguladora helada para lisis [Tris-HCl 5 mM , pH 7.5; 5 mM de EDTA; y 5 ra de EGTA] complementado con tabletas de mezcla de inhibidor de proteasa (1 tableta por cada 25 mi de solución reguladora) . A la suspensión se agregan esferas de vidrio (17 g; malla 400-600; Sigma) y las células se rompen mediante acción de remolino vigorosa a 4°C durante 5 minutos. El material homogéneo se diluye con 30 mi adicionales de solución reguladora para lisis más los inhibidores de proteasa y se centrifuga a 3,000 x g durante 5 minutos. Posteriormente, las membranas se convierten en comprimidos a 36,000 x g (Sorvall RC5B, rotor tipo SS34) durante 45 minutos. El comprimido de membranas resultante se vuelve a suspender en 5 mi de solución reguladora para membrana [Tris-HCl 50 raM, pH 7.5; 0.6 mM de EDTA; y 5 mM de MgCl2) complementado con tabletas de mezcla de inhibidor de proteasa (1 tableta por cada 50 mi de solución reguladora) y se almacena a -80°C para experimentos posteriores.

Preparaciones de membrana celular de maraí e ro Las membranas de células HEK-293 se preparan como se describió previamente (Duzic E et al. : J. Biol. Chem., 267, 9844-9851, 1992) . En breve, lae células se lavan con PBS y se cosechan con un gendarme de hule. Las células se convierten en comprimidos a 4°C 200 x g en una centrífuga Sorvall RT6000. El comprimido se vuelve a suspender en 5 ml/ca^a de solución reguladora para lisie a 4°C (Tris-HCl 5mM, pH 7.5; 5 mM de EDTA; 5 mM de EGTA; 0.1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo, 10 mg/ml de pepstatina A; y 10 mg/ml de aprotinina) y se homogeneiza en un homogeni zador Dounce. El lisado celular se centrifuga después a 36,000 x g (Sorvall RC5B, rotor tipo SS34) durante 45 minutos y el comprimido se vuelve a suspender en 5 mi de solución reguladora para membrana [Tris-HCl 50 mM , pH 7.5; 0.6 mM de EDTA; 5 mM MgCl2; 0.1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo, 10 mg/ml de pepstatina A; y 10 mg/ml de aprotinina) y se almacena a - 80 °C para experimentos posteriores. Se utilizan los estuches para prueba de proteína de Bio-Rad, basados en el procedimiento de unión de colorante de Bradford, (Bradford, M. : Anal. Biochem. 72:248 (1976) ) para determinar la concentración de proteína total en las membranas de levadura y de mamífero.

Uní ón por saturación y por competencia del radioligando al subtipo de receptor 1 de adeno s i na Se efectúa la unión por saturación y por competencia en membranas provenientes de células de levadura transformadas con el subtipo de receptor Ai de humano utilizando el antagonista {3H)DPCPX como un ligando radioactivo. Las membranas se diluyen en solución reguladora para unión (Tris-HCl 50 mM , pH 7.4; que contiene 10 mM de MgCl2; 1.0 mM de EDTA; 0.25% de BSA; 2 U/ml de adenosina desaminasa y 1 tableta de mezcla de inhibidor de proteasa/50 mi) a concentraciones de 1.0 mg/ml. En la unión por saturación, las membranas (50 g ca id d) se incuban con incrementos en la concentración de [3H]DPCPX ( 0.05 - 25 nM) en un volumen final de 100 µ? de solución reguladora para unión a 250 C durante 1 hora en ausencia y en presencia de 10 µ? de XAC sin marcar en una placa para microtitulación de 96 cavidades. En la unión por competencia, las membranas (50 µg/ca idad) se incuban con [3H]DPCPX (1.0 nM) en un volumen final de 100 mi de solución reguladora para unión a 25°C durante 1 hora en ausencia y presencia de 10 µ? de XAC sin marcar o de concentraciones cada vez mayores de los compuestos competidores en una placa de micro itulación de 96 cavidades .

Unión por competencia del radio ligando al subtipo 2a del receptor de adenoaina Se efectúa la unión por competencia en membranas provenientes de células HEK293 que expresan de manera estable al subtipo del receptor A2a de humano utilizando el agonista [3H ] CGS - 21680 como un ligando radioactivo. Las membranas se diluyen en solución reguladora para unión (Tris-HCl 50 mM, pH 7.4; que contiene 10 mM de MgCl?. ; 1.0 mM de EDTA; 0.25% de BSA; 2 U/ml de adenosina desaminasa y 1 tableta de mezcla de inhibidor de proteasa/50 mi) a concentraciones de 0.2 mg/ml . Las membranas (10 µ9/?3???3?) se incuban con [3H]CGS-21680 (100 nM) en un volumen final de 100 mi de solución reguladora para unión a 25°C durante 1 hora en ausencia y presencia de 50 µ? de ECA sin marcar o de concentraciones cada vez mayores de los compuestos competidores en una placa para microtitulación de 96 cavidades.

Unión por competencia del radioligando al receptor 3 de adenosina Se efectúa la unión por competencia en membranas provenientes de células HEK293 que expresan de manera estable al subtipo del receptor A3 de humano utilizando al agonista [ 12 b I ] AB - MECA como un ligando radiactivo. Las membranas se diluyen en solución reguladora para unión [Tris-HCl 50 mM, pH 7.4; que contiene 10 m de MgCl2; 1.0 mM de EDTA; 0.25% de BSA; 2 U/ml de adenosina desaminasa y 1 tableta de mezcla de inhibidor de proteasa/50 mi] a concentraciones de 0.2 mg/ml. Las membranas (10 µg/cavidad) se incuban con [125I]AB-MECA (0.75 n ) en un volumen final de 100 µ? de solución reguladora para unión a 25°C durante 1 hora en ausencia y presencia de 10 µ,? de IB-MECA sin marcar o de concentraciones cada vez mayores de los compuestos competidores en una placa para microtitulación de 96 cavidades. Al final de la incubación, se terminan las pruebas de unión de radioligando a los subtipos de receptor Ai, A2a y A3 agregando solución reguladora Tris-HCl 50 mM (pH 7.4) helada complementada con 10 mM de MgCl2; seguido por filtración rápida en filtros de fibra de vidrio (GE/E Unifilters de 96 cavidades, Packard) previamente pre - emoj dos en polietilenimina al 0.5% en una cosechadora celular Filtermate 196 (Packard) . Las placas de filtro se secan revestidas con 50 µ?/cavidad de fluido para destello ( Mi c ros c i nt - 20 , Packard) y se cuentan en un aparato TopCount (Packard) . Las pruebas se realizan por triplicado. La unión no especifica es de 5.6 + 0.5%, 10.8 + 1.4% y 15.1 ± 2.6% de la unión total en una prueba de unión a AIR, A2a y A3R, respectivamente.

Unión por competencia del radioligando al subtipo del receptor 2b de adenosina Se efectúa la unión por competencia en membranas provenientes de células HEK293 que expresan de manera estable al subtipo del receptor A2b de humano utilizando el antagonista para el receptor Al [3H]DPCPX como un ligando radioactivo. Las membranas se diluyen en solución reguladora para unión [Hepes-KOH 10 mM, pH 7.4; que contiene 1.0 mM de EDTA; 0.1 mM de benzamidina y 2 U/ml de adenosina desaminasa] a concentraciones de 0.3 mg/ml. Las membranas (15 se incuban con [3H]DPCPX (15 nM) en un volumen final de 100 µ? de solución reguladora para unión a 25°C durante 1 hora en ausencia y en presencia de 10 µ? de XAC sin marcar o de concentraciones cada vez mayores de los compuestos competidores en una placa para mic o t i tul ac ion de 96 cavidades. Al final de la incubación, la prueba se finaliza agregando solución reguladora Hepes-KOH 10 mM helada (pH 7.4) , seguido por filtración rápida en filtros de fibra de vidrio (UniFilters GF/C de 96 cavidades, Packard) previamente pre - remo j ado s en pol ie t i 1 enimina al 0.5% en una cosechadora celular Filtermate 196 (Packard) . Las placas de filtros se secan revestidas con 50 µ?/cavidad de fluido para destello (MicroScint - 20 , Packard) y se cuentan en un aparato TopCount (Packard) . Las pruebas se efectúan por triplicado. La unión específica es de 14.3 + 2.3% de la unión total. La unión específica de [3H]DPCPX; [3H]CGS-21680 y [ 12 I ] AB - MECA se define como la diferencia entre la unión total y la unión no específica. El porcentaje de inhibición de los compuestos se calcula contra la unión total. Los datos de competencia se analizan mediante ajuste de curva iterativo a un modelo de un sitio, y los valores Ki se calcula a partir de los valores CI5o (Cheng y Prusof, Biochem. Pharmacol . 22, 3099 -3109, 1973) utilizando el programa GraphPad Prizm 2.01 Re su 11 ados Una de las funciones primarias de algunos receptores de la superficie celular es reconocer los ligandos apropiados. Por consiguiente, se determinan las afinidades de unión a ligando para establecer la integridad funcional del subtipo del receptor 1 de adenosina expresado en levadura. Las membranas crudas preparadas a partir de Saccharomyces cerevi síae transformada con la construcción para el subtipo del receptor 1 de adenosina presentan unión saturable específica de [:íH]DPCPX con una KD de 4.0 + 0.19 nM . Los valores KD y Bm&x se calculan a partir de la isoterma de saturación y las transformadas de Scatchard de los datos indican una clase individual de sitios de unión. Las densidades de los sitios de unión de adenosina en los preparados de membrana de levadura se estiman en 716.8 + 43.4 fmol/mg de proteína de membrana . Se investigan las caracterís icas farmacológicas de subtipo de las células de levadura recombinante transformadas con el subtipo del receptor Ai de humano con ligandos de adenosina selectivos de subtipo (XAC, DPCPX; CGS-15943; compuesto 600; compuesto 1002; ÑECA, (R) -PIA; IB-MECA y aloxazina) que compitan con [3H] DPCPX en el orden de rango esperado. Las curvas de desplazamiento registradas con estos compuestos muestran la pendiente típica con todos los ligandos, y se pueden modelar los datos para cada uno de los ligandos mediante un ajuste de un sitio. Las constantes de disociación aparentes estimadas para el compuesto individual provenientes de las curvas (cuadro 5) son consistentes con el valor publicado para el receptor obtenido a partir de o r s fuente s .

CUADRO 5 Valores de Ki para membranas provenientes de células de levadura transformadas con el subtipo de receptor Ai de humano Ligandos Ki (nM) XAC 5.5 DPCPX 7.1 CGS-1594 10.8 ÑECA 179.6 (R) - PIA 56.3 IB-MECA 606.5 CUADRO 5 ( cont . ) Ligandos Ki nM Aloxazina 894.1 Compuesto 600 13.9 Compuesto 1002 9.8 Los cuadros 6 a 12 demuestran la eficacia y los perfiles e s t ructu a - ac t i i dad de las desazapurinas de la invención. Los cuadros 13 y 14 demuestran que se puede lograr la selectividad para los sitios del receptor de adenosina de humano modulando los grupos funcionales en la estructura de la de s a z apuri na . El cuadro 14 también demuestra el descubrimiento sorpresivo que los compuestos indicados en la presente invención tienen actividad subnanomolar y una selectividad mayor para el receptor A2b en comparación con los compuestos en el cuad o 13.

CUADRO 6 Efecto del sustituyante en la posición N6 CUADRO 7 Efecto del suatituyente en C2 CUADRO 8 Efecto del sustituyante en el anillo de pirrol CUADRO 9 CUADRO 10 Efecto del suatituyente en N6 Al Compuesto R Ki de unión CI50 en (nM) levadura (nM) O 1013 270.1 3009.5 ^ ^"^ NH 1014 384.9 2005 1015 179.3 3712 1016 176.1 5054 CUADRO 11 CUADRO 12 Análogos tipo "retro-amida CUADRO 13 Perfil de antagonistas selectivos de adenosina 1 2 - t ieni 1 - 2 - i lo ; 2 C5-H; 3 soluble en agua; 4 R5 y R6 son hidrógeno; 5 R3 es 3 - f luorof eni lo ; 5 R3 es 3 - clorof enilo ; 7 R3 es 4-piridilo; 8 % de actividad a una concentración de 10 µ? .

CUADRO 14 Perfil de antagonistas de A2b selectivos Compuesto R2 R2 Datos de unión Ki (nM) x A2a A2b A3 1400 -O-Ph Me 41.7 21 10.3 14.6 1401 -O-Ph(p) F Me 33 58 18 1402 -O-Ph(p) Cl Me 825 591 22 60 -N-piridin- 2 ¦ 1403 Me 60 41 18 48 ona 1404 -NH-Ph Me 49 31 4.6 57 CUADRO 15 Compuestos selectivos para el receptor A], de adenos lna * por lo menos 10 veces más selectivo que para los otros tres Ki- ??-?2ß Ki -A2b Ki-A3 Compuesto Estructura Ai relativa relativa relativa 1504 Las páginas 176-201 (texto en inglés) se refieren a compuestos específicos para el receptor A2a Breviario de la invención La presente invención también se basa en compuestos que se unen en forma selectiva al receptor A2a de adenosina, con lo cual se trata una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenosina en un individuo admi ist ando al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de dichos compuestos. Las enfermedades que serán tratadas están asociadas con, por ejemplo, un trastorno del sistema nervioso central, un trastorno cardiovascular, un trastorno renal, un trastorno i flamatorio, un trastorno gastrointestinal, un trastorno ocular, un trastorno alérgico o un trastorno res iratorio. Esta invención también presenta un compuesto que tiene la estructura: (VI) en la cual NRiR2, es un anillo de 4-8 eslabones sustituido o no sustituido; en la cual Ar es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido; en la cual R4 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en el cual dicho alquilo sustituido es -C(R8) (R9)XRSj en la cual X es 0, S, o NR7 , en la cual R8 y R9 son cada uno de manera independiente H o alquilo, en la cual Rg y R7 son cada uno de manera independiente alquilo o c i c 1 oal qui lo , o R6 , R7 y el nitrógeno forman juntos un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones, en la cual R5 es H, alquilo, alquilo sus ituido, o c i c 1 oal qui 1 o ; con la condición que RiR2 no sea 3-acetamidopiperadino , 3-hidroxipirrolidino, 3-metiloxicarbonilmetilpirrolidino, 3-aminocarbonil-metilo, o pirrolidino; con la condición que RiR2 sea 3 -hidroximetilpiperadino únicamente cuando Ar sea 4-piridilo. Esta invención también presenta un método para inhibir la actividad de un receptor A2a de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto dicha célula con los compuestos antes menc ionados . Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: (VI) en la cual NRiR2 es un anillo de 4-8 eslabones sustituido o no sustituido; en la cual Ar es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido; en la cual R4 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en el cual dicho alquilo sustituido es -C(Ra) (R9)XR6) en la cual X es 0, S, o NR7 , en la cual R8 y R9 son cada uno de manera independiente H o alquilo, en la cual R6 y R7 son cada uno de manera independiente alquilo o c i c loal qui 1 o , o R6 , R7 y el nitrógeno forman juntos un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones, en la cual R5 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cic loa 1 quilo ; con la condición que NRiR2 no sea 3-acetamidopiperadino , 3 - hidroxipirro 1 i di o , 3-met i 1 ox i carbón i lme t ilpirrolidino, 3-aminocarbonil-metilo, o pirrol idino ; con la condición que RxR2 sea 3 -hidroximetilpiperadino únicamente cuando Ar sea 4-piridilo. En una modalidad del compuesto, Ar es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido, fenilo, pirrol, tiofeno, furano, tlazol, imidazol, pirazol, 1 , 2 , 4 - t iazol , piridina, 2 ( 1H) -piridona , 4 ( 1H) -piridon , pirazina, pirimidina, piridazina, isotiazol, isoxazol , oxazol, tetrazol, naftaleno, tetralina, naftiridina, benzofurano, benzot iof eno , indol , 2,3-dihidroindol , lH-indol, indolina, benzopirazol , 1 , 3 -benzodioxol , benzoxazol , purina, cumarina, cromona, quinolina, tetrahidroquinol ina , isoquinol ina , bencimidazol , quinazolina, p i ri do [2 , 3 -b] pirazina, pirido[3,4-b]pirazina, p i ri do [3 , 2 -c] iridazina, purido [3 , 4-b] -piridina, lH-pirazol [ 3 , 4 -d] pirimidina , pteridma, 2 (1H) -quinolona, 1 ( 2H) - isoquinolona , 1 , 4 - benz i soxa z ina benzotiazol, quinoxalina, quinol ina -N- óxido isoquinolina-N-óxido, quinoxalina-N-óxido qui na zo 1 ina - N- óxi do , benzoxazina, ftalazina cinolina, o tiene una estructura: en la cual Y es carbono o nitrógeno; en la cual R3 es H, alquile sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, halógeno, metoxi, metilamino, metiltio. En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: en la cual m es 1 o 2; en la cual RA y RB son cada uno de manera independiente H, -OH, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(=0)NH2, un heteroátomo , o - C ( =0 ) NR3R3 - ; en la cual R3 es arilo, arilo sustituido, o heteroarilo; en la cual 3 es alquilo, o XR3 " , en la cual X es O, o N y R " es alquilo o arilo sustituido. En otra modalidad del compuesto, RiR2N es {D) - 2 - aminocarboni lpi r ro 1 idino , (D) - 2 - hi droxime t i 1 -pirrolidino, ( D ) - 2 - hidroximet i 1 - 1 rans - 4 - hi droxi -pirrolidino, piperazino, o 3 - hi droxime t i 1 -pipe radino . En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: en la cual m es 0, 1, 2, o 3; en la cual Y es O, S, o NR , en la cual R es RA o RB ; en la cual RA y RB son cada uno de manera independiente H, -OH, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(=0)NH2, un heteroátomo, o -C (=0) NR3R3 ' ; en la cual R3 es arilo, arilo sustituido, o heteroarilo; en la cual R3 ' es alquilo, o XR3", en la cual X es 0, o N y R" es alquilo o arilo sustituido. En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1606) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1607) Incluso en otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En una modalidad adicional del compuesto, el compuesto tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura (V) en la cual R es H, o metilo. En una modalidad del compuesto V , el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1608 En otra modalidad del compuesto V, el compuesto tiene la estructura: Esta invención también provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenosina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de los compuestos IV, o V . En una modalidad del método, el compuesto trata dichas enfermedades estimulando la adenilato c i c 1 a s a . En otra modalidad del método, el individuo es un mamífero. En otra modalidad del método, el mamífero e s un humano . En otra modalidad del método, dicho receptor A2a de adenosina está asociado con enfermedad de Parkinson, enfermedades asociadas actividad del aparato locomotor, vasodi 1 at ac ión , inhibición plaquetaria, generación de superóxido en neutrófilos, trastorno cognitivo, o demencia senil. Las enfermedades asociadas con los receptores Al, A2a, A2b y A3 de adenosina se describen en los documentos WO 99/06053 y WO-09822465, O- 09705138, WO - 09511681 , WO- 09733879, JP-09291089, PCT/US 98 / 16053 y patente E.U.A. No. 5,516,894 cuyos contenidos completos se incorporan totalmente en la presente invención para referencia . Eata invención también provee un profármaco soluble en agua de los compuestos IV o V, en el cual dicho profármaco soluble en agua es metabolizado in vivo para producir un fármaco activo que inhibe de manera selectiva al receptor A2a de adenosina. En una modalidad del profármaco, dicho profármaco es metabolizado in vivo mediante hidrólisis catalizada por esterasa. Esta invención también provee una composición farmacéutica que comprende el profármaco y un vehículo farmacéuticamente aceptable . Esta invención también provee un método para inhibir la actividad de un receptor A2a de adenosina en una célula, el cual comprende poner en contacto dicha célula con los compuestos IV o V. En una modalidad del método, el compuesto es un antagonista de dicho receptor A2a de adenosina . En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación oftálmica. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o intraocular. En otra modalidad de la composición f rmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica. Esta invención también provee un método para tratar un trastorno gastrointestinal en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad efectiva de los compuestos IV, o V. En una modalidad del método, dicho trastorno es diarrea. En otra modalidad del método, el individuo e s un humano . En otra modalidad del método, el compuesto es un antagonista de los receptores A2a de adenosina . Esta invención también provee un método para tratar trastorno respiratorio en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad efectiva de los compuestos IV, o V. En una modalidad del método, dicho trastorno es asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, o un trastorno del tracto superior respiratorio. En otra modalidad del método, el individuo es un humano . En otra modalidad del método, dicho compuesto es un antagonista de los receptores A2a de adenosina . Esta invención también provee un método para tratar daño al ojo de un individuo que comprende administrar a dicho individuo una cantidad efectiva de los compuestos IV, o V. En una modalidad del método, dicho daño comprende daño a la retina o a la cabeza del nervio ópt ico. En otra modalidad del método, dicho daño es agudo o crónico. En otra modalidad del método, dicho daño es el resultado de glaucoma, edema, isquemia, hipoxia o t raum . En otra modalidad del método, el individuo e s un humano . En otra modalidad del método, el compuesto es un antagonista de los receptores A2a de adenos ina . Esta invención también provee una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de los compuestos IV, o V y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En una modalidad de la composición farmacéutica, dicha cantidad terapéuticamente efectiva es efectiva para tratar enfermedad de Parkinson, enfermedades asociadas con actividad del aparato locomotor, vas odi 1 at c ion , inhibición plaquetaria, generación de superóxido en neutrófilos, trastorno cognitivo, o demencia senil. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación oftálmica. En otra modalidad de la composición f rmacéutic , dicha composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o infraocular.

En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica . En otra modalidad de la composición f rmacéutica, dicha composición farmacéutica es una solución para irrigación quirúrgica. Esta invención también provee una terapia de combinación para la enfermedad de Parkinson que comprende los compuestos IV y V, y cualquiera de los fomentadores de dopamina. Esta invención también provee una terapia de combinación para el cáncer que comprende los compuestos IV y V, y cualquiera de los agentes c it ot óxi eos. Esta invención también provee una terapia de combinación para el glaucoma, que comprende los compuestos IV o V, y un agonista de prostaglandina , un agonista muscarínico, o un antagonista b-2. Esta invención también provee una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenoaina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de los compuestos IV, o V; y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para tratar dicha enfermedad en un i ndi iduo . Esta invención también provee un método para preparar el compuesto IV, que comprende los pa ao ñ d : a) hacer reaccionar para proveer en la cual P es un grupo protector que puede ser eliminado; b) tratar el producto del paso a) bajo condiciones de ciclación para proveer c) tratar el producto del paso b) bajo condiciones apropiadas para proveer d) tratar el producto clorado del paso c) con pa a proveer en la cual NRiR2 es un anillo de 4-8 eslabones sustituido o no sustituido; en la cual Ar es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido; en la cual R4 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en el cual dicho alquilo sustituido es -C(R8) (R9)XR6, en la cual X es O, S, o NR7, en la cual Ra y R9 son cada uno de manera independiente H o alquilo, en la cual Rg y R7 son cada uno de manera independiente alquilo o c i c 1 oal qui lo , o R6 , R7 y el nitrógeno forman juntos un anillo sustituido o no sustituido que tiene entre 4 y 7 eslabones. en la cual R5 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloal quilo,¦ con la condición que NRiR2 no sea 3-acetamidopiperadino , 3 -hidroxipirrol idino , 3-metiloxicarbonilmetilpirrolidino, 3-aminocarbonil-metilo, o pirrolidino; con la condición que NRiR2 sea 3 -hidroxime i lpiperadino únicamente cuando Ar sea 4-piridilo. Esta invención también provee un método para preparar el compuesto V, que comprende los pasos de : a) hacer reaccionar para proveer en la cual P es un grupo protector que puede ser eliminado; b) tratar el producto del paso a) bajo condiciones de ciclación para proveer c) tratar el producto del paso b) bajo condiciones apropiadas para proveer d) tratar el producto clorado del paso c) primero con dimetilamina y f ormaldehí do , después con N-metil bencilamina y por último con NH2Ri para proveer en la cual Ri es acetomidoetilo ; en la cual Ar es 4-piridilo en la cual R es H, o metilo; en la cual R5 es N-met i 1 -N- benc i 1 aminome i lo . Tal como se utiliza en la presente invención, "Un compuesto es selectivo de A2a" significa que un compuesto tiene una constante de unión para el receptor A2a de adenosina por lo menos cinco veces mas alta que para los receptores Ai, A2b; o A3 de adenosina. La invención se ilustra también mediante los siguientes ejemplos los cuales, en ninguna manera, deben ser considerados como limitaciones adicionales. Los contenidos de todas las referencias, solicitudes de patente pendientes y solicitudes de patente publicadas, citadas a través de esta solicitud, incluyendo aquellas a las que se hace referencia en la sección de antecedentes de la invención, quedan incluidas para referencia en la presente invención. Se debe entender que los modelos utilizados a través de los ejemplos son modelos aceptados y que la demostración de la eficacia en estos modelos puede pronosticar la eficacia en humanos. Esta invención se entenderá mejor a partir de la siguiente sección de detalles experimentales. Sin embargo, un experto en la técnica apreciará fácilmente que los métodos y resultados específicos discutidos son únicamente ilustrativos de la invención tal como se describe con mayor detalle en las reivindicaciones que sigue después de ésta.

EJEMPLO 22 Síntesis de antagonls taa de A2 , compuestos 1601, 1602, y 1603 Compuesto 26 Compuesto 27 Compuesto 28 Conpuesto 1601 Se disuelve el compuesto 26 (10.93 g, 50.76 mmoles) en DMF (67 mi) . Se agregan en forma secuencial clorhidrato de 4 - amidinopiridina (8.0 g, 50.76 mmoles) y DBU (15.4 g, 101.5 mmoles) y la reacción se calienta a 85°C. Después de 22 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y la DMF se elimina al vacío. El aceite oscuro se diluye con HC1 2M (80 mi) . Se deja reposar la reacción. Después de 2 horas, la solución se enfría hasta 10°C y se filtra. El sólido se lava con agua fría y se seca para obtener 7.40 g de un sólido de color amarillo, compuesto 27 (69%) . ? RMN (200 MHz, d6-DMSO) d 6.58 (s, 1H) , 7.27 (s, 1H) , 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2Hz) , 12.35 (brs, 1H) . MS (ES) : 212.8 (M+ + l ) .

El compuesto 27 (7.4 mmoles, 29.8 mmoles) se diluye con P0C13 y se calienta hasta 105°C. Después de 18 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y el P0C13 se elimina al vacío. El aceite oscuro espeso se diluye con MeOH (75 mi) seguido por éter (120ml) . El sólido amorfo de color rojo se filtra y se lava con éter para obtener 3.82 g de un sólido de color rojo. El sólido crudo, compuesto 28, tiene 80% aproximadamente de pureza y se utiliza sin purificación adicional en la siguiente reacción. XH RMN (200 MHz, d6-DMSO) 8 6.58 (s, 1H) , 7.27 (s, 1H) , 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2 Hz), 12.35 (brs , 1H) . MS (ES) : 212.8 (M++ l) .

Compuesto 1601 Se agrega DMSO (5 mi) y D-prolinol (500 mg , 4.94 minóles) al compuesto 28 (500 mg , 2.17 mmoles) . La reacción se calienta a 120°C. Después de 18 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y se diluye con EtOAc y H20. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con EtoAc (2x) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con H20 (2x) , salmuera, se secan con MgS04, se filtran y se concentran para obtener 200 mg de un sólido de color canela. El sólido se recristaliza con EtOAc para obtener 82 mg de un sólido de color canela (13%) . XH RMN (200 MHz, d6-DMSO) d 2.05 (m, 4H) , 3.43 (m, 1H) , 3.70 -4.00 (m, 3H) , 4.50 (brs, 1H) , 4.92 (brs, 1H) , 6.62 (m, 1H) , 7.22 (m, 1H) , 8.22 (d, 2H, J = 6.0 Hz) , 6.64 (d, 2H, J = 6.2 Hz) . MS (ES) : 296.0 (M++l) . P.f. = 210-220°C (descomposición) .

Compuesto 1602 La cromatografía (sílice, , 9:1 CHC 13 / MeOH ) permite obtener 10 mg de un sólido de color canela (2%) . 1H RMN (200 MHz, ds-nMfiO) d 2.00-2.50 (m, 4H) , 4.05 (m, 1H) , 4.21 (m, 1H) , 6.71 (d, 1H, J = 3.2 Hz) , 7.18 (d, 1H, J = 3.2 Hz) , 8.37 (d, 2H, J = 4.8 Hz) , 8.56 (d, 2H, J = 5.0 Hz) . MS (ES) : 309.1 (M+ + l) .

Compuesto 1603 La cromatografía (sílice, 20:1 Hexanoa /EtOAc ) permite obtener 135 mg de un sólido de color canela (53%) . 1R RMN (200 MHz, d6-DMSO) ft 2.00 (m, 4H) , 3.43 (brs, 1H) , 3.74 (brs, 2H) , 3.87 (brs, 1H) , 4.49 (brs, 1H) , 4.93 (m, 1H) , 6.56 (m, 1H) , 7.12 (m, 1H) , 7.40 (m, 3H) , 8.34 (m, 2H) , 11.62 (brs, 1H) . MS (ES) : 295.1 (M+ + l) .

Compuesto 1605 En un matraz de fondo redondo de 50 mi se disuelven 60 mg de la sal HCl de 2 - ( 4 ' - pi r idi 1 ) - -cloropirimidinopirrol en 2 mi de DMSO anhidro. Se agregan a la misma la sal THF de 3 - ( ) - hidroxi - ( D ) -prolinol (380mg) y 500 mg de bicarbonato de sodio. La mezcla se purga después con gas nitrógeno durante 5 minutos y se calienta hasta 130°C. Después de 2 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y el DMSO se elimina al vacío. El residuo se divide entre EtOAc (15 mi) y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (15 mi) . La capa orgánica se separa y se lava con salmuera (15 mi) y se seca con Na2S04. Después de eliminar el solvente, el producto crudo se purifica mediante CCF preparativa (CH2Cl2/ eOH = 95/5) para obtener 35 mg (50%) . RMN (200 MHZ, CDCl3) 2.3-2.5 (1H) 3.4- 3.8 (3H) , 4.4-4.6 (2H) , 6.4 (1H) ; 7.1 (1H) 2H) , 8.7 (d, 2H) , 11.0 (1H) . MS (ES) : 312 (M++l ) .

EJEMPLO 23 Síntesis de antagonista de A2n de adenosina, compuesto 1606 Conpuesto 28 Compre sto 29 Conpuesto 1606 Se trata el compuesto 26 (200mg) con DMF (30ml) , éster metílico de ( - dime t i 1 g 1 í c i na (73 mg de sal HC1 en 2 mi de agua) y 500 mg de bicarbonato de sodio. Después de 18 horas, la DMF se elimina al vacío. El residuo se divide entre EtOAc (30 mi) y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (15 mi) . La capa orgánica se lava con salmuera (15 mi) , se seca con sulfato de sodio, se filtra y se concentra. La cromatografí (sílice, 10:4 hexanos /EtOAc ) permite obtener 150 mg de producto puro, compuesto 29 (69%) . 1H RMN (200 MHz, CDC13) , 6 1.4 (s, 6H) , 3.8 (S, 3 H ) ; 3.9 (s, 2 H ) ; 6.4 ( s , 1H) ; 7.4-7.5 ( m , 3 H ) ; 8.4 (m, 2H) ; 9.8 (s, 1H) .

Compuesto 1606 El procedimiento es el mismo que para el compuesto 1605 (72%) . XH RMN (200 MHz, CDCl3) , d 1.3 (s, 6H) , 1.7-1.9 (m, 2H) ; 2.05-2.30 (m, 2H) ; 3.6-4.1 (m, 11H) ; 4.80-4.95 ( m , 1H) ; 6.4 (s, 1H) ; 7.4-7.6 (m, 3H) ; 8.3-8.4 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 10 (s, 1H) . MS (ES) : 424.0 (M+ + l ) . Los siguientes compuestos se pueden sintetizar en la misma manera.

Compuesto 1600: (51%) MS (ES) : 326.0 ( + + l) .

Compuesto 1607 1K RMN (200 MHz , CnCl3) , fi 1.40 - 1.80 (m, 5H) , 2.80 - 3.50 (m, 3H) , 4.60-4.80 (m, 3H) , 6.66 (d, IH, J - 6.2 Hz), 7.26 (m, 1H) , 8.21 (d, 2H, J = 6.3 Hz) , 8.65 (d, 2H, J = 5.8 Hz) , 11.90 (s, 1H) . MS (ES) : 310.1 (M+ + l) .

Compuesto 1608 (64%) . XH RMN (200 MHz, ds-DMSO) , d 1.75 (3, 3H) 2.11 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 3.56 (m, 6H) , 7.23-7.41 (m, 5H) , 8.00 (bra, 1H) , 8.23 (d, 2H, J = 6.0 Hz) , 8.63 (d, 2H, J = 5.4 Hz) , 8.82 (brs, 1H) , II.56 (brs , 1H) . MS (ES) : 444.0 (M++l) .

Compuesto 1604 1H RMN (200 MHz, CD30D) 5 3.40 (m, 4H) , 4.29 (m, 4H) , 6.99 (s, 1H) , 7.5-7.2 (m, 3H) , 7.90 (d, 2H) , 8.39 (d, 2H) , 8.61 (d, 2H) . MS (ES) : 357.0 (M+ + l) .

CUADRO 16 Compuestos selectivos para el receptor A2n adeno s Ina Las páginas 202-256 se refieren a compuestos específicos para el receptor A3.

Breviario de la invención La presente invención también se basa en compuestos que se unen de manera selectiva al receptor A3 de adenosina, con lo cual se trata una enfermedad asociada con el receptor A3 de adenosina en un individuo adminis rando al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de dichos compuestos . Las enfermedades que serán tratadas están asociadas con, por ejemplo, asma, hipersens ibi 1 idad , rinitis, fiebre del heno, enfermedad del suero, vasculitis alérgica, dermatitis atópica, dermatitis, psoriasis, eczema, fibrosis pulmonar idiopática, c 1 oree i st i t i s eosinof í 1 ica , inflamación crónica de las vías respiratorias, síndromes hipereo s ino f í 1 i co s , gas roenteritis eos i no f í 1 i ca , edema, urticaria, enfermedad eosinofílica del miocardio, angioedema episódico con eosinofilia, enfermedad inflamatoria del intestino, colitis ulcerante, granulomatosis alérgica, c are inomat o s i s , granuloma eo s i no f í 1 i co , hist ioc itos i s familiar, hipertensión, desgranulación de mastocitos, tumor, hipoxia cardiaca, isquemia cerebral, diuresis, i suficiencia renal, trastorno neurológico, trastorno mental, trastorno cognitivo, isquemia del miocardio, bronquioconstricción, artritis, enfermedad autoinmune, enfermedad de Crohn, enfermedad de Grave, diabetes, esclerosis múltiple, anemia, psoriasis, trastornos de la fertilidad, lupus eritematoso, daño por reperfusión, diámetro de la arteriola del cerebro, la liberación de mediadores alérgicos, escleroderma , embolia, isquemia general, trastorno del sistema nervioso central, trastorno cardiovascular, trastorno renal, trastorno inflamatorio, trastorno gastrointestinal, trastorno ocular, trastorno alérgico, trastorno respiratorio, o trastorno inmunológico . Esta invención también presenta un compuesto que tiene la estructura: en la cual Ri es H y R2 es ciclopropil-metilamino carboni 1 e t i 1 o , cis - 3 -hidroxiciclo-pentilo, acetamidobutilo , met i laminocarboni lamino butilo, e t i 1 aminocarbon i 1 aminoprop i 1 o , metilamino-carbonilaminopropilo, 2-acetilamino-3- met ilbutilo, , N - d i e t i 1 ami noc arboni 1 ami noet i 1 o , t i oace t amido -etilo, 3 - amí no ce t i 1 oxi c i c 1 opent i 1 o , 3-hidroxiciclopentilo, 2 -pirrolilcarbonilaminoetilo, 2-imidazolidinonaetilo, l-aminocarbonil-2- me t i 1 propilo, 1 - aminocarboni 1 - 2 - f eni 1 e t i 1 o , 3 -hidroxi-azetidino, 2 - imidazoliletilo , acetamidoetilo , 1-(R) - f eni 1 - 2 - hi droxiet i 1 o , - me t i 1 aminoc arboni 1 -piridil-2- metilo, o Ri , R2 y el nitrógeno juntos son 3 - cetamidopiperadino , 3 -hidroxipi rol idino , 3-metiloxícarbonilmetilpirrolidino, 3 -aminocarbonil -me i lp i rro 1 i di no , o 3 - hi droxime t i lp ipe adi no . en la cual R3 es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido, pirrol, tiofeno, furano, tiazol, imidazol, pirazol, 1,2,9-tiazol, piridina, 2 ( 1H) -piridona , 4 ( 1H ) - p i r i dona , pirazina, pirimidina, piridazina, isotiazol, isoxazol, oxazol, tetrazol, naftaleno, tetralina, naftiridina , benzofurano, benzot i o f eno , indol, 2,3-dihidromdol , lH-indol, indolina, benzopirazol , 1 , 3 -benzodioxol , benzoxazol, purina, cumarina, cromona, quinolina, tetrahidroquinol ina , i soquinol in , benzimidazol , quinazolina, pirido[2,3-b]pirazina, pirido[3,4-b]pirazina, pirido[3,2-c]piridazina, purido[3,4-b] -piridina, ??-pi azol [ 3 , - d ] pi r imidina , pteridina, 2 (1H) -quinolona, 1 ( 2H ) - i soquino 1 ina , 1 , 4 -benzisoxazina , benzotiazol, quinoxalina, quinol in -N- óxi do , isoquinolina-N-óxido, qui noxal ina-N-óxido, quina zol ina -N- óxido , benzoxazina, ftalazina, o cinol in . en la cual 5 es H, alquilo, alquilo sustituido, o c i c 1 oal qui lo ; en la cual R6 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, o arilo sustituido. Esta invención también presenta un método para inhibir la actividad de un receptor A3 de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto dicha célula con los compuestos antes menc ionados . práctica típica y es conocida por los expertos en la técnica. Los esquemas de síntesis típicos para la preparación de los intermediarios de desazapurina de la invención se indican más adelante en el esquema de reacción I. Esta invención también provee un método para preparar el compuesto IV, que comprende los pasos de : a) hacer reaccionar para proveer en la cual P es un grupo protector que puede ser eliminado; b) tratar el producto del paso a) bajo condiciones de ciclación para proveer c) tratar el producto del paso b) bajo condiciones apropiadas para proveer d) tratar el producto clorado del paso c) con HR!R2 para proveer en la cual Rx es H y R2 es ciclopropil-metilaminocarboniletilo, cis-3 -hidroxiciclo-pentilo, acetamí dobut i lo , me t i 1 aminocarbon i 1 amino -butilo, e t i 1 aminocarboni 1 aminopropi lo , metilamino-c arboni 1 mi noprop i 1 o , 2 - ce i 1 amino - 3 - me t i 1 but i 1 o , ?,?-dietilaminocarbonilaminoetilo, tioacetamido-etilo, 3 - minoacet i loxi c i c lopent i lo , 3-hidroxi-c i c 1 opent i 1 o , - p i r ro 1 i 1 c rboni 1 ami noe t i 1 o , 2-imidazolidinonaetilo, 1- minocarbon 1- -met i 1 -propilo, 1 - aminocarboni 1 - - feni 1 et i lo , 3-hidroxi-azetidino, 2 - imi da zo 1 i 1 e t i 1 o , ac e t ami doe t i 1 o , 1- (R) - f eni 1 - 2 - hi droxi et i 1 o , N-met i 1 minoc arboni 1 -pi r idi 1 - 2 - met i 1 o , o Ri , R2 y el nitrógeno juntos son 3 - ac e t midop ipe radino , 3 - hidroxi i rro 1 i diño , 3-me t i loxi carboni lme t i lpir ro 1 idino , 3 - aminocarboni 1 -me i Ipi rrol i di no , o 3 - hi droximet i lpipe radino . en la cual R3 es un anillo de cuatro a seis eslabones sustituido o no sustituido; en la cual R5 ea H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloalquilo ; en la cual R6 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, o arilo sustituido. Esta invención también provee un método para preparar el compuesto V, que comprende los pasos de : a) hacer reaccionar para proveer en la cual P es un grupo protector que puede ser eliminado; b) tratar el producto del paso a) bajo condiciones de delación para proveer c) tratar el producto del paso b) bajo condiciones apropiadas para proveer d) tratar el producto clorado del paso c) con NH2CH2 (CH2) mCH2NHC ( =0) Ri para proveer en la cual m es 0, 1, o 2 ,- en la cual Ri es c i c 1 oprop i lmet i 1 o , metilo, metilamino, o aminornetilo ; en la cual R2 es arilo, arilo sustituido, heteroari 1 o ; en la cual R5 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloalquilo; en la cual R6 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, araino, arilo sustituido, en el cual dicho alquilo sustituido es -C (Rg) (Rio)NR7R8, en la cual R9 y Rio son cada uno H o alquilo, en la cual R7 y Re son cada uno alquilo o cicloalquilo, o R7 , Re y el nitrógeno forman juntos un sistema de anillo que tiene entre 4 y 7 eslabones . Esta invención provee también un método para preparar el compuesto VI, que comprende: a) hacer reaccionar para proveer en la cual P es un grupo protector que puede ser eliminado; b) tratar el producto del paso a) bajo condiciones de ciclación para proveer c) tratar el producto del paso b) bajo condiciones apropiadas para proveer tratar el producto clorado del paso con para proveer c i c 1 opent i 1 o , ace t ami dobut i 1 o , me t i 1 aminoc arboní 1 -aminobutilo, etil minoc rbon i 1 ami noprop i 1 o , me t i 1 aminocarboni 1 ami no rop i lo, 2-acetilamino-3-me tilbutilo, ?,?-dietil minoc a rboni laminoetilo, t oa c e t ami doe t i 1 o , 3 - ami noace t i 1 oxi i c 1 opent i 1 o , 3-hidroxiciclopentilo, 2-pirrolilcarbonil mi no e t i lo , 2-imidazolidinonaetilo, 1 - aminocarboni 1 - 2 -met i lpropi lo , 1 - aminoc arboni 1 - 2 - f en i 1 e t i 1 o , 3-hidroxiazetidino, 2-imidazoliletilo, acet amidoet i lo , 1 - (R) - f enil -2 -hidroxietilo , N-me i 1 aminocarboni lp iridi 1 - 2 -me t i lo , o Ri , R2 y el nitrógeno juntos son 3 - cetamidopiperadino , 3-hidroxipirrolidino, 3 -me i loxicarbonilmetil-pirrolidino, 3 - ami nocarboni 1 me t i lp i rro 1 i d i no , o 3-hidroximetil piperadino. en la cual R3 es un benceno sustituido o no sustituido, pirrol, tiofeno, furano, tiazol, imidazol, pirazol, 1 , 2 , 4 - riazol , piridina, 2 (1H) -piridona, 4 ( 1H) -piridona , pirazina, pirimidina, piridazina, isotiazol, isoxazol, oxazol, tetrazol, naftaleno, tetralina, naftiridina, benzofurano, benzot iof eno , indol , 2 , 3 -dihidroindol , lH-indol, indolina, benzopirazol , 1 , 3 -benzodioxol , benzoxazol , purina, cumarina, cromona, quinolina, tetrahidroquinolina , i aoquinol i a , benc imi da zol , quinazolina, p i ri do [ 2 , 3 - b ] ? ra z i na , pi ri do [ 3 , 4 -b] pirazina , i rido [ 3 , 2 - c ] i rida z i na , puri do [ 3 , 4 - b ] -piridina, 1 H - p i ra zol [ 3 , - d] p i rim di na , pteridina, 2 ( 1H ) - quinol ona , 1 ( 2H) - isoquinol ina , 1,4-benzisoxazina, benzotiazol, quinoxalina, quinolina-N-5xido, i soquinol ina -N- óxido , qui noxa 1 ina - N- óxi do , qui na zo 1 ina - N - óxi do , benzoxazina, ftalazina, o c i no 1 ina. en la cual 5 es H , alquilo, alquilo sustituido, o c i c 1 oal qui 1 o en la cual R6 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, o arilo sustituido. En una modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, R3 es feni lo En otra modalidad del compue drógeno o metilo.

En otra modalidad del compuesto, Rs es hidrógeno, metilo, fenilo, 3 - c 1 orof eni 1 oxime t i 1 o , o trana-2-fenilaminometilpirrol i diñóme tilo. Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: V en la cual m es 0, 1, o 2; en la cual Rx es c i c 1 oprop i lme t i 1 o , metilo, metilamino, o aminotnetílo; en la cual R2 es arilo, arilo sustituido, o heteroarilo ; en la cual R5 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloalquilo; en la cual R6 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en el cual dicho alquilo sustituido es -C(R9) (Ri0)NR7R8, en la cual R9 y R10 son cada uno H o alquilo, en la cual R7 y R8 son cada uno alquilo o cicloalquilo, o R-? , R8 y el nitrógeno juntos forman un sistema de anillo que tiene entre 4 y 7 e s 1 abones . En una modalidad del compuesto V, m es 0 y R2 es f eni lo . En otra modalidad del compuesto V, m es 1 y R2 es f eni lo . En otra modalidad del compuesto V, m es 2 y R2 es f eni lo . En otra modalidad del compuesto V, R5 y R5 son met i lo . En otra modalidad del compuesto V, R5 y R5 son met i lo . En otra modalidad del compuesto V, R5 y Rs son met i lo . En otra modalidad del compuesto V, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1316) En otra modalidad del compue s t o mpuesto tiene la estructura : (Compuesto 1311) En otra modalidad del compuesto compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1202) En otra modalidad del compu mpuesto tiene la estructura: (Compuesto 1310) En otra modalidad del compuesto compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1312) Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: (Compuesto 609) Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: en la cual R2 es arilo no sustituido; en la cual R5 es H, alquilo, alquilo sustituido, o cicloalquilo ; en la cual R6 es H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilalquilo, amino, arilo sustituido, en el cual dicho alquilo sustituido es -C(R9) (Rio)NR7R8, en la cual R9 y Ri0 son cada uno H o alquilo, en la cual R7 y R8 son cada uno alquilo o cicloalquilo, o R7 , Ra y el nitrógeno forman juntos un sistema de anillo que tiene entre 4 y 7 eslabones . En una modalidad del compuesto VI, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1309) En una modalidad del compuesto 1309, el compuesto tiene la estructura: H En otra modalidad del compuesto 1309, el compuesto tiene la estructura: II Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: en la cual Ri es 3 - hidroxi c i c 1 opent i 1 etilaminocarbonilaminopropilo, N,N-dietilamino c rboni 1 aminoe t i 1 o , t i oac e t ami doe i 1 o , 3-amino ac e t i 1 oxi c i c 1 opent i lo , 3 - hidroxi c i c 1 opent i 1 o , 2 pirrolilcarbonilami noetilo, 2-imidazolidinonaetilo 1 - ami no carbóni 1-2-metil-propilo, 1- aminoc arboni 1 - 2 -feniletilo, 3 - hi droxi a ze t i diño , 2 - i mi da zol i 1 e t i 1 o , acet amidoet lo , 1 - ( R ) - f eni 1 - 2 - hi droxi e i 1 o , o N-meti 1 ami nocarbóni l ir i di 1 -2 -metilo; en la cual y R4 son de manera independiente H, alquilo sustituido o no sustituido, o arilo. En una modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1700) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1701) En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1702) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1704) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, ompuesto tiene la estructura: (Compuesto 1707) modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura (Compuesto 1708 En otra modalidad del compuesto, mpuesto tiene la estructura: (Compuesto 1709) En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1710) En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1712) En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1713) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1714 En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura (Compuesto 1715) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: VI II en la cual Rif R2 y el nitrógeno juntos son 3-hidroxipirrolidino, 3-metiloxicar onilmetil-pirrolidino, 3 - ami no carboni 1 me i lpi r o 1 i di no , o 3- i, drox ime t i lpi pe radino ; en la cual R3 y R4 son de manera independiente H, alquilo sustituido o no sustituido, o arilo. En una modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1711) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1703) En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la e s t ruc t ura : En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1716) En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura En otra modalidad del compues compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1717) En otra modalidad del compuesto compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del corap compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: (Compuesto 1718) En otra modalidad del compuesto, el compuesto tiene la estructura: En otra modalidad del compuesto, compuesto tiene la estructura: Esta invención también provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor A3 de adenosina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de cualquiera de loa compuestos IV, V, VI, VI, o VIII. En una modalidad del método, el individuo es un mamífero. En otra modalidad del método, el mamífero es un humano . En otra modalidad del método, dicho receptor A3 de adenosina está asociado con un trastorno del sistema nervioso central, un trastorno cardiovascular, asma, hipersensibilidad, rinitis, fiebre del heno, enfermedad del suero, vasculitis alérgica, dermatitis atópica, dermatitis, psoriasis, eczema, fibrosis pulmonar idiopática, clorecistitis eos inof í 1 i ca , inflamación crónica de las vías respirato i s, síndromes hipereosinofílicos, gastroenteritis eo s i no f í 1 i a , edema, urticaria, enfermedad eosinofílica del miocardio, angioedema episódico con eosinofilia, enfermedad inflamatoria del intestino, colitis ulcerante, granul ornat os i s alérgica, c arc inomat os i s , granuloma eosinof í lico , hi s t ioc i t os i s familiar, hipertensión, desgranulación de mastocitos, tumor, hipoxia cardiaca, isquemia cerebral, diuresis, insuficiencia renal, trastorno neurológico, trastorno mental, trastorno cognitivo, isquemia del miocardio, bronquioconstricción , artritis, enfermedad autoinmune, enfermedad de Crohn, enfermedad de Grave, diabetes, esclerosis múltiple, anemia, psoriasis, trastornos de la fertilidad, lupus eritematoso, daño por reperfusión, diámetro de la arteriola del cerebro, liberación de mediadores alérgicos, escleroderma, embolia, isquemia general, trastorno del sistema nervioso central, trastorno cardiovascular, trastorno renal, trastorno inflamatorio, trastorno gastrointestinal, trastorno ocular, trastorno alérgico, trastorno respiratorio, o trastorno ínmunológico . Las enfermedades asociadas con los receptores Al, A2a, A2b y A3 de adenosina se describen en los documentos WO 99/06053 y WO-09822465, WO-09705138, WO-09511681, WO-09733879, JP-09291089, PCT/US 98 / 16053 y patente E.U.A. No. 5,516,894, cuyos contenidos en su totalidad se incorporan totalmente en la presente invención para ref e rene ia . Esta invención también provee un profármaco soluble en agua de cualquiera de los compuestos IV, V, VI, VII, o VIII; en el cual dicho profármaco soluble en agua es metabolizado in vivo hasta un fármaco activo el cual inhibe de manera selectiva al receptor A3 de adenosina. En una modalidad del profármaco, dicho profármaco es metabolizado in vivo mediante hidrólisis catalizada por esterasa. Esta invención también provee una composición farmacéutica que comprende el profármaco y un vehículo farmacéuticamente aceptable . Esta invención también provee un método para inhibir la actividad de un receptor A3 de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto dicha célula con cualquiera de los compuestos IV, V, VI, VII, o VIII. En una modalidad del método, el compuesto es un antagonista de dicho receptor A.-¾ de adenosina. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación oftálmica. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o intraocular . En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica. Esta invención también provee un método para tratar un trastorno gastrointestinal en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad efectiva de cualquiera de los compuestos IV, V, VI, VII, o VIII. En una modalidad del método, dicho trastorno es diarrea. En otra modalidad del método, el individuo es un humano . En otra modalidad del método, el compuesto es un antagonista de los receptores A3 de adenosina. Esta invención también provee un método para tratar trastorno respiratorio en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad efectiva de cualquiera de los compuestos IV, V, VI, VII , o VIII . En una modalidad del método, dicho trastorno es asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, o un trastorno del tracto superior respiratorio. En otra modalidad del método, el individuo es un humano . En otra modalidad del método, dicho compuesto es un antagonista de los receptores A3 de adenos ina . Esta invención también provee un método para tratar daño al ojo de un individuo que comprende administrar a dicho individuo una cantidad efectiva de cualquiera de los compuestos IV, V, VI , il , o VIII . En una modalidad del método, dicho daño comprende daño a la retina o a la cabeza del nervio ópt ico. En otra modalidad del método, dicho daño es agudo o crónico . En otra modalidad del método, dicho daño es el resultado de glaucoma, edema, isquemia, hipoxia o t rauma . En otra modalidad del método, el individuo es un humano . En otra modalidad del método, el compuesto es un antagonista de los receptores A3 de adenosina. Esta invención también provee una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de cualquiera de los compuestos IV, V, VI, VII, o VIII y un vehículo f rmacéutic mente aceptable. En una modalidad de la composición farmacéutica, dicha cantidad terapéuticamente efectiva es efectiva para tratar un trastorno respiratorio o un trastorno gastrointestinal. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicho trastorno gastrointestinal es diarrea . En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicho trastorno respiratorio es asma, rinitis alérgica, o enfermedad pulmonar obstructiva crónica . En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación oftálmica. En otra modalidad de la composición f rmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o infraocular. En otra modalidad de la composición farmacéutica, dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica. En otra modalidad de la composición farmacéu ica, dicha composición farmacéutica es una solución para irrigación quirúrgica.

Esta invención también provee una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor A3 de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de cualquiera de los compuestos IV, V, VI, VII, o VIII; y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para tratar dicha enfermedad en un indi iduo . Los compuestos representados por las fórmulas IV, V, VI, VII, y VIII se pueden sintetizar utilizando los esquemas de reacción I-IX . Tal como se utiliza en la presente invención, "Un compuesto es selectivo de A3 " significa que un compuesto tiene una constante de unión para el receptor A3 de adenosina de por lo menos diez veces más alta que para los receptores Ai, A2a o A2b de adenosina. La invención se ilustra también mediante los siguientes ejemplos los cuales, en ninguna manera, deben ser considerados como limitaciones adicionales. Los contenidos de todas las referencias, solicitudes de patente pendientes y solicitudes de patente publicadas, citadas a través de esta solicitud, incluyendo aquellas a las que se hace referencia en la sección de antecedentes de la invención, quedan incluidas para referencia en la presente invención. Se debe entender que los modelos utilizados a través de los ejemplos son modelos aceptados y que la demost ación de la eficacia en estos modelos puede pronosticar la eficacia en humanos. Un experto en la técnica sabe que el metabolismo de los compuestos descritos en la presente invención en un individuo produce ciertos metabolitos biológicamente activos los cuales pueden servir como fármacos. Esta invención se entenderá mejor a partir de la siguiente sección de detalles experimentales. Sin embargo, un experto en la técnica apreciará fácilmente que los métodos y resultados específicos discutidos son únicamente ilustrativos de la invención tal como se describe con mayor detalle en las reivindicaciones que siguen después de ésta.

EJEMPLO 24 Sección Experimental para antagonista de A3 de adenos ina Compuesto 1700 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) : 366.1 (M++l) Compuesto 1710 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) : 381.1 (M+ + l) .

Compuesto 1316 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) : 353.2 (M+ + l) .

, Compuesto 1703 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) : 357.1 (M+ + l) .

Compuesto 1719 (cuadro 17 siguiente) 1E RMN (200 MHz, d6-DMSO) 6 1.75 (m, 2H) , 3.11 (m, 2H) , 3.35 (s, 3H) , 3.59 (m, 2H) , 5.72 (m, 1H) , 5.96 (m, 1H) , 6.55 (s, 1H) , 7.15 (s, 1H) , 7.49 (m, 2H) , 8.32 (m, 2H) .

Compuesto 1704 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) : 367.0 (M++l ) .

Compuesto 1706 (cuadro 17 siguiente) XH RMN (200 MHz , CDC13) d 1.22 (m, 2H) , 1.60-2.40 (m, 4H) , 4.53 (m, 1H) , 4.94 (m, 1H) , 5.70 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 6.35 (d, 1H, J = 2.8 Hz) , 6.97 (d, 1H, J = 2.0 Hz) , 7.50 ( m , 3H) , 8.40 (m, 2H) , 10.83 (brs , 1H) .

Compuesto 1707 (cuadro 17 siguiente) ?? ( ES ) : 347.0 (M++l ) .

Compuesto 1708 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) 399.0 (M++l) .

Compuesto 1709 (cuadro 17 siguiente ) MS (ES) 385.9 (M++l) .

Compuesto 1710 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) 434.0 (M+ + l) .

Compuesto 1711 (cuadro 17 siguiente) XH RMN (200 MHz, CD3OD) d 3.95 (d, 2H, J = 5.8 Hz) , 4.23-4.31 (m, 2H), 4.53 (t, 2H, J = 8.8 Hz) , 6.30 (d, 1H, J = 3.0 Hz) , 6.98 (d, 1H, J = 3.0 Hz) , 7.45 -7.48 (m, 3H) , 7.83 - 8.42 (m, 2H) , 9.70 (brs , 1H) . MS (ES) : 281.1 (M++l) . OSIC- 148313 XH RMN (200 MHz, CD3OD) d 3.02 (m, 2H) , 3.92 (m, 2H), 5.09 (2, 2H) , 6.53 (s, 1H) , 6.90 -7.04 (br s, 1H) , 6.92 (m, 2H), 7.02 (m, 1H) , 7.21 (dd, 1H, J = 8.2 Hz), 7.40 (m, 3H) , 7.50-7.80 (br s , 1H) , 8.33 (m, 2H) . S (ES) : 445.1 (M++l) .

Compuesto 1713 (cuadro 17 siguiente) XH RMN (200 MHz, CDC13) d 1.65 - 1.80 ( m , 7H) , 1:88-2.00 (m, 1H) , 2.10-2.40 (m, 1H) , 2.70-3.05 (m, 3H) , 3.09-3.14 (m, 2H), 3.16-3.38 (m, 1H) , 3.45 (d, 1H, J = 14 Hz) , 3.53 -3.60 (m, 2H) , 3.84-3.92 (m, 2H) , 3.97 (d, 1H, J = 14 Hz) , 5.55 (t, 1H, J = 5.8 Hz) , 6.17 (s, 1H) , 6.55-6.59 (m, 2H) , 6.64-6.71 (m, 1H) , 7.11-7.19 (m, 2H) , 7.43 -7.46 (m, 3H) , 8.38-8. 2 (m , 2H) . MS (ES) : 484.0 ( + + l) .

Compuesto 1714 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) : 471.0 ( ++l) .

Compuesto 1715 (cuadro 17 siguiente) MS (ES) : 505.0 (M++l) .

Compuesto 1716 (cuadro 17 sigui ente} XH RMN (200 MHz , CD3OD) d 1.65 (m, 1H) , 2.18 (m, 1H) , 2.49 (br d, 2H, J = 6.2 Hz) , 2.64 (m, 1H) , 3.38 (m, 1H) , 3.69 (a, 3H) , 3.72 (m, 1H) , 3.93 (m, 1H) , 4.10 (m, 1H) , 5.06 (2, 2H) , 6.58 (s, 1H) , 6.92 (m, 2H) , 7.02 (m, 1H) , 7.23 (dd, 1H, J = 8.1 Hz) , 7.39 (m, 3H) , 8.32 (m, 2H) . MS (ES) : 477.1 (M++l) .

Compuesto 1717 (cuadro 17 siguiente) ? RMN (200 ???, CD3OD) d 1.69 (m, 1?) , 2.26 (m, 1H) , 2.42 (d, 2H, J = 7.4 Hz) , 2.72 (m, 1H) , 3.53 (m, 1H) , 3.83 ( m , 1H) , 4.02 (m, 1H) , 4.14 (dd, 1H, J = 10.6, 7.0 Hz) , 5.14 (2, 2H) , 6.69 (s, 1H) , 6.96 (m, 2H) , 7.06 (m, 1H) , 7.25 (dd, 1H, J - 8.0 Hz) , 7.39 (m, 3H) , 8.35 (m, 2H) . MS (ES) : 462.2 (M++l ) .

Compuesto 1718 (cuadro 17 siguiente) XH RMN (200 MHz, CD3OD) d 1.40-2.00 (m, 5H) , 3.52 (d, 2H, 7.6 Hz) , 3.80 -4.00 (m, 1H) , 4.00-4.20 (m, 3H) , 4.50 (m, 2H) , 6.36-6.50 (m, 2H) , 6.54 (s, 1H) , 6.84 - 6.92 (m, 1H) , 7.05 (t, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.30- 7.45 (m, 3H) , 8.24 (d, 2H, J = 9.8 Hz) . MS ( ES ) : 449.0 ( + + l ) .

CUADRO 17 Compuea tos selectivos del receptor A3 de adenosina ?? ?? Esta invención provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compue que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compue que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compu que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: En una modalidad adicional la invención provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor Ai de adenosina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapéu icamente efectiva de los compuestos 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, o 1520. En una modalidad adicional la invención provee el método anterior, en el cual el individuo es un mamífero. En una modalidad adicional la invención provee el método anterior, en el cual el mamífero e s un humano . En una modalidad adicional la invención provee el método anterior, en el cual dicho receptor A de adenosina está asociado con enfermedad cognitiva, insuficiencia renal, arritmias cardiacas, epitelio respiratorio, liberación de transmisor, sedación, vasoconstricci n, bradicardia, inotropia y dromotropia cardiaca negativa, bronquioconstricción, quimiotaxis de neutróf ilo, condición de reflujo, o condición ulcerante. En una modalidad adicional la invención provee un profármaco soluble en agua de los compuestos 1505, 1506, 1507, 15C8, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, o 1520, en la cual el profármaco soluble en agua es metabolizado in vivo para producir un fármaco activo el cual inhibe de manera selectiva al receptor Ai de adenosina. En una modalidad adicional la invención provee, en la cual dicho profármaco es metabolizado in vivo mediante hidrólisis catalizada por esterasa . En una modalidad adicional la invención provee una composición farmacéutica que comprende el profármaco anterior y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En una modalidad adicional la invención provee un método para inhibir la actividad de un receptor ?? de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto la célula con los compuestos 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, o 1520. En una modalidad adicional la invención provee el método anterior para inhibir la actividad de un receptor Ai de adenosina en una célula, en la cual el compuesto es un antagonista del receptor Ai de adenosina . En una modalidad adicional la invención provee el método anterior para inhibir la actividad de un receptor Ax de adenosina en una célula, en la cual la célula es célula de humano. En una modalidad adicional la invención provee el método anterior para inhibir la actividad de un receptor Ai de adenosina en una célula de humano, en la cual el compuesto es un antagonista de los receptores Ai de adenosina. En una modalidad adicional la invención provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor ?? de adenosina en un individuo, en la cual dicha enfermedad es asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, o un trastorno del tracto superior respiratorio.

En una modalidad adicional la invención provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor Ai de adenosina en un individuo, en la cual dicha enfermedad es asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, o un trastorno del tracto superior respiratorio y en la cual el individuo es un humano . En una modalidad adicional la invención provee un método para tratar las enfermedades anteriores, en la cual dicho compuesto es un antagonista de los receptores Ai de adenosina. En una modalidad adicional la invención provee una terapia de combinación para el asma, que comprende el compuesto 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, o 1520, y un esteroide, agonista ß2, glucocor icoide, antagonista de lucotrieno, o agonista ant icol inérgico . En una modalidad adicional la invención provee una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, O 1520, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En una modalidad adicional la invención provee un método para tratar un trastorno respiratorio con el compuesto 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, o 1520, en la cual dicho trastorno respiratorio es asma, rinitis alérgica, o enfermedad pulmonar obstructiva crónica. En una modalidad adicional la invención provee la composición o composiciones farmacéuticas anteriores, en la cual dicha composición farmacéutica es formulación para inyección periocular, retrobulbar o intraocular. En una modalidad adicional la invención provee la composición o composiciones farmacéu icas anteriores, en la cual dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica. En una modalidad adicional la invención provee la composición o composiciones f rmacéuticas anteriores, en la cual dicha composición farmacéutica es una solución para irrigación qui rúrg i ca . En una modalidad adicional la invención provee una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor Ai de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, o 1520; y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para tratar dicha enfermedad en un individuo . En una modalidad adicional la invención provee una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, o 1520. En una modalidad adicional la invención provee la sal farmacéuticamente aceptable anterior, en la cual la sal armacéuticamente aceptable del compuesto 1509, 1511, 1515, 1518, o 1519 contiene un catión que se selecciona del grupo que consiste de sodio, calcio y amonio. Incluso en una modalidad adicional la invención provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor A1 de adenosina en un individuo, en la cual el receptor Ai de adenosina está asociado con insuficiencia cardiaca congest iva .

EJEMPLOS EJEMPLO 21 Síntesis de la amida del ácido 1 - [ 6 - ( 4 - hidroxi - - fenil-piperidln-l-il-metil) - 2 - fenll - 7H -pirrólo [2,3- d] pirimidin- 4 - il] -pirrolidin - 2 -carboxílico (1505) El compuesto 1505 se sintetiza en una forma similar a la del ejemplo 17 utilizando el esquema de síntesis IX con L-prol ínamida y 4-fenil- ipe r i din - 4 - ol para obtener: lti RMN (d6-D SO) d 1.53 (s, 1H) , 1.60 (s, 1H) , 1.84-2.30 (m, 6H) , 2.66 (m, 2H) , 3.60 (s, 2H) , 3.88 (m, 1H) , 4.02 (m, 1H) , 4.66 (d, 1H, J = 6.8 Hz) , 4.73 (s, 1H) , 6.44 (a, 1H) , 6.94 (s, 1H) , 7.12-7.50 (m, 10H) , 8.35 (m, 2H) , 11.6 (brs, 1H) MS (ES) : 305.1 ( ++l) . P.f. = 234 -235 °C .

EJEMPLO 22 [N - (2 - fenil-7H- pirro lo [2 , 3 -d] pirimldin- 4-il) (L) -prolinamida (1506 ) El compuesto 1506 se sintetiza utilizando el esquema de síntesis VII con L -prol inamida para obtener : RMN (DMSO-ds) d 2.05 (m, 4H) , 3.85 (m, 1 , H ) , 4.05 (m, 1H) , 4.70 (d, 1H, J = 8.0 Hz) , 6.58 (brs , 1H) , 6.85 (brs, 1H) , 7.15 (d, 1H, J = 3.4 (m, 3H) , 7.50 (brs, 1H) , 8.40 (m, 2H) , 1H) . (ES) : 308.3 (M++l) . E . = 236-238°C.

EJEMPLO 23 Síntesis de [N- ( 2 - f eni 1 - 6 - metoxime t i 1 - 7H - pirrólo [2, 3-d]pirimidin-4-il) - (L) - rolinamida (1507) El compuesto 1507 se sintetiza utilizando el compuesto precursor 23 del esquema de síntesis IX para obtener: Se disuelve el bromuro 23 (4.23 g, 10 inmoles) en metanol anhidro (60 mi) y DCM (l20ml) y se trata con Ag03CCF3 bajo N2 a temperatura ambiente durante 1 hora. El sólido se retira mediante filtración y se lava con DCM (2x20ml) . El material filtrado se concentra al vacío. El residuo se vuelve a disolver en DCM (80 mi) . La solución resultante se lava después con solución saturada de NaHC03 y salmuera, se seca con MgS04, se filtra y se concentra para obtener 3.71 g (4, 99%) de un sólido blanquecino . XH RMN ( CDC13 ) d 1.75 (s, 9H) , 3.51 (s; 3H) , 4.83 (s, 2?) , 6.70 (s, 1?) , 7.47 (m, 3H) , 8.52 (m, 2H) .

Se combinan el cloruro de arilo 4 (2.448 g, 6.55 mmoles) , DMSO (15 mi) , L-prolinaraida (4.0 g, 35.0 mmoles) y NaHC03 (2.9 g) y se calienta hasta 120°C bajo nitrógeno. Después de 4 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y se diluye con agua (60 mi) . La suspensión resultante se extrae con DC (lOx) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con solución saturada de NaHC03 y salmuera, se secan con MgS04 , se filtran y se concentran para obtener 2.48 g de un sólido de color café. El producto puro (1.86 g, 81%) se obtiene después de cromatografía de vaporización instantánea en columna como un sólido de color blanco. Se obtienen cristales de color blanco a partir de una mezcla THF/hexano. P. f . = 213-215°C. XH MN (CDC13) d 2.15 (m, 3H) , 2.52 (m, H) , 3.26 (s, 3H) , 3.92 (m, 1H) , 4.10 (m, 1H) , 4.42 (s, 2H) , 5.08 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 5.49 (brs, 1H) , .48 (s, 1H) , 7.08 (brs, 1H) , 7.42 (m, 3H) , 8.38 (m, 2H) , 9.78 (brs , 1H) . ?? (ES) : 352.2 ( ++l) .

EJEMPLO 24 Síntesis de la amida del ácido 4 -hidroxi - 1 - ( 2 - £enil-7H-pirrolo(2,3-d] pirimidln- -il] -pirro lidin- 2 - carboxí 1 ico (1508) El compuesto 1508 se obtiene con el esquema íntesis VII utilizando cis-hidroxíprolinamida obtene : XH RMN (d6-DMSO) 6 1.90 (m, 1H) , 3.85 (d, H, J = 9.2 Hz) , 4.08 (m, 1H) , 4.37 (s, 1H) , 4.67 (dd, 1H, J = 8.8, 4.0 Hz) , 5.30 (s, 1H) , 6.55 (s, H) , 7.15 (s, 2H) , 7.37 (m, 3H) , 7.64 (s, 1H) , 8.37 (m, 2H) , 11.65 (brs , 1H) .

MS (ES) : 324.2 (M++l) . P.f. = 268-271°C.

EJEMPLO 25 Síntesis del ácido 3 - [4 - ( ( S ) - 2 - carbamoil - pirro lodin-l-il) -2-fenil-7H-pirrolo [2,3- d] irimidin- 6 - il] -propiónico (1509) El compuesto 1509 se obtiene utilizando compuesto precursor 23 del esquema de síntesis para obtener: Se combinan el bromuro de arilo 23 protegido con t er - but oxi carboni 1 o (4.0 g, 9.5 mmoles) , DMSO seco (25 mi) , NaH2P04 (454 mg , 3.79 mmoles) y Na2HP04 (1.62 g, 11.4 mmoles) y se calientan hasta 50°C bajo argón durante 3.5 horas aproximadamente. La mezcla se vierte después en agua (200 mi) y se extrae con tres porciones de 100 mi de EtOAc . Las capas orgánicas combinadas se lavan en forma exhaustiva con agua, salmuera, se secan con MgS04/ se filtran y se concentran para obtener un sólido de color amarillo el cual se purifica mediante trituración con etanol para obtener 1.55 g de un sólido de color amarillo pálido (7) . La solución madre se purifica mediante cromatografía de vaporización instantánea (10% de EtOAc en hexano) para obtener 454 mg adicionales (60%) . XH RMN (CDC13) d 1.77 (s, 9H) , 7.25 (s, 1H) , 7.48 (m, 3H) , 8.52 (m, 2H) 10.39 (s, 1H) P.f . = 156°C (descomposición) .

Se disuelve el aldehido 7 (600 mg , mmoles) en THF seco (20 mi) y se enfría hasta 0°C bajo argón. A esta solución se agrega una solución a 0°C de ( t er- butoxi carboni lme t i 1 en ) t r i f eni 1 -fosforano (694 mg , 1.8 mmoles) en 10 mi de THF seco, gota a gota, a través de una cánula. Después de 3 horas, la mezcla se concentra y purifica mediante trituración con etanol para obtener 565 mg (73%) de un sólido de color blanco (8) . 1H RMN (CDCI3) d 1.58 (s, 9H) , 1.79 (s, 9H) , 5.46 (d, 1H) , 6.95 (s, 1H) , 7.48 (m, 3H) , 8.09 (d, 1H) , 8.56 (m, 2H) .

Se diluye una solución del compuesto 8 (565 mg , 1.2 mmoles) en 5 mi de THF hasta 100 mi con EtOAc. Después de agregar 600 mg de catalizador (5% en peso de Pd, 50% de H20) y de purgar con argón, la mezcla se hidrogena bajo presión atmosférica. Después de 8 horas, la mezcla se filtra, se concentra y purifica mediante cromatografía de vaporización instantánea (10% de EtOAc en hexano) para aislar 200 mg (35%) del compuesto 9 como un aceite claro que cristaliza en reposo. 1U RMN (CDCI3) 6 1.42 (3, 9H) , 1.75 (s, 9H) , 2.65 (t, 2H) , 3.32 (t, 2H) , 6.41 (s, 1H) , 7.45 (m, 3H) , 8.51 (m, 2H) .

Se combinan el cloruro de arilo 9 (200 mg , 0.44 mmoles) , DMSO (10 mi) y L - ro 1 i nami da (440 mg , 4.4 mmoles) y se calientan hasta 85 °C bajo argón. Después de 14 horas, la mezcla se enfría hasta temperatura ambiente y se divide entre agua y acetato de etilo. Las capas se separan y la capa acuosa se lava con EtOAc (3x) . Las capas orgánicas combinadas se lavan minuciosamente con agua (3x) , salmuera, se secan con MgS04, se filtran y se concentran para obtener el compuesto 10 como una película de color amarillo la cual se purifica mediante cromatografía de vaporización instantánea (2.5% de MeOH en CH2C12) · 1B5 mg (97%) . ?? (ES) : 435.8 (M+ + l) .

Se hidroliza el éster 10 (30 mg , mmoles) en 5 mi de dioxano agregando 0.5 mi de HC1 concentrado. Después de 3 horas, la mezcla se concentra al vacío y se recristaliza en EtOH/EtOAc para obtener el compuesto 1509 como un sólido de color blanco (20 mg , 61%) . MS (ES) : 380 ( ++l) .

EJEMPLO 26 Síntesis de [N- ( 2 - f eni 1 - 6 - aminoc arbonl 1 - me toximetil-7H -pirrólo [2 , 3 -d] i r lmldin - 4 - i 1 ) - (L) - prollnamlda (1510) El compuesto 1510 se obtiene utilizando el compuesto precursor 23 del esquema de síntesis IX para obtene : Se agitan el bromuro 23 (1.27 g, 3 mmoles tamices moleculares (5g) en glicolato de metil nhidro (5.8 g, 60 mmoles) y DCM (40ml) . L solución se trata con AgOTf bajo N3 y se deja agitar durante 3 horas. El sólido se retira mediante filtración y se lava con DCM (2x20 mi) . El material filtrado se concentra al vacío. El residuo se vuelve a disolver en DCM (80 mi) . La solución resultante se lava después con agua, solución saturada de NaHC03 y salmuera, se seca con MgS04, se filtra y se concentra para obtener 1.35g (99%) de un sólido blanquecino (12) . 1R MN (CDC13) d 1.75 (s, 9H) , 3.80 (s, 3H) , 5.0 (s, 2H) , 6.78 (s, 1H) , 7.47 (m, 3H) , 8.52 (m, 2H) . combinan el cloruro de arilo 12 (177 mg 0.41 mmoles) , DMSO (10 mi) , L - ro 1 i nami da (466 mg , 4 mmoles) y NaHC03 (500mg) y se calientan hasta 120°C bajo nitrógeno. Después de 4 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y se diluye con agua (60 mi) . La suspensión resultante se extrae con DCM (5x30ml) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con solución saturada de NaHC03 y salmuera, se secan con gS04 , se filtran y concentran para obtener un sólido de color café. El producto puro (154 mg , 92%) se obtiene después de someter a cromatografía de vaporización instantánea en columna como un sólido de color blanco (13) . 1 H RMN ( CDC 13 ) d 2.15 (m, 3H) , 2.52 (m, 1H) , 3.55 (s, 3H) , 4.58 (s, 2H) , 5.08 (s, 1H) , 5.85 (brs, 1H) , 6.48 (s, 1H) , 7.08 (brs, 1H) , 7.42 (m, 3H) , 8.40 (m, 2H) , 10.58 (brs, 1H) . MS (ES) : 410.1 (M++l) .

Se disuelve el éster metílico 13 (124 mg , 0.3 mmoles) en HOCH3 (15 mi) . Se burbujea amoniaco a través de la solución durante 0.5 horas. La mezcla de reacción se agita después durante otras 3 horas a temperatura ambiente. Después de eliminar el solvente se obtienen 111 mg de un sólido de color blanco (1510 , 93%) . 1 H RMN ( CDC 13 ) d 1.82 (m, 3H) , 2.20 (m, 1H) , 2.80 (m, 1H) , 3. 10 (m, 1H) , 3.63 (dd, 2H, Jx = 13.8 Hz, J2 = 19.4 Hz) , 3.87 (m, 1H) , 4.07 (m, 1H) , 4.97 (m, 1H) , 5.96 (m, 2H), 6.35 (s, 1H) , 6.86 (brs, 1H) , 7.11 (brs, 1H) , 7.37 (rr, 3H) , 8.28 (m, 2H) , 11 .46 (bra , 1H) . MS (ES ) : 394.8 (M++l ) .

EJEMPLO 27 Síntesis del ácido [4 - ( 2 - carbamoi lpirrol idin- 1 - il ) - 2-fenil-7H-plrrolo [2,3-d] pirlmldlna - 6 - carboxí 1 ico (1511) El compuesto II se sintetiza utilizando compuesto precursor del esquema de síntesis para obtener : A una suspensión de hidruro de sodio (780 mg de una suspensión al 60% en aceite, 19.5 inmoles) en DMF seca (20 mi) , que se enfría utilizando un baño de hielo/agua, bajo nitrógeno, se agrega una solución de la pirrolopirimidina 15 (2.00 g, 7.52 mmoles) en DMC (10 mi) en un lapso de 5 minutos. Después de 15 minutos, se agrega cloruro de bencensulfonilo (1.2 mi, 9.40 mmoles) , después se retira el baño de enfriamiento. Después de 4 horas, la mezcla de reacción se vierte en una mezcla de hielo y solución saturada de NaHC03 , el sólido precipitado se filtra y se tritura con acetona (3 ) y metanol (2 ) , para obtener 2.37 g de un sólido de color beige. Este sólido (16) contiene aproximadamen e 10% molar de DMF (tomando como base el rendimiento de 83%) y se puede utilizar en el siguiente paso; se puede obtener una muestra pura mediante cromatografía en gel de sílice utilizando acetona como eluyente. XH RMN ( CDC 13 ) d 6.70 (d, J = 4.2 Hz, 1H) , 7.47 -7.68 (m, 6H) , 7.76 (d, J = 4.2 Hz, 1H) , 8.24-8.32 (m, 2H) , 8.48-8.56 (m, 2H) . IR (sólido) : n = 3146 cm"1, 1585, 1539, 1506, 1450, 1417, 1386, 1370, 1186, 1176, 1154, 1111, 1015, 919, 726, 683, 616, 607. P.f. = 226-227°C.

A una solución del compuesto N-sulfonilo 16 (337 mg, 0.911 mmoles) en THF seco (34 mi) , que se enfría con hielo seco/acetona, se agrega LDA'THF (1.0 mi, solución 1.5 M en ciclohexano, 1.5 mmoles) . Después de 45 minutos, se burbujea dióxido de carbono en la solución durante 5 minutos, después se retira el baño de enfriamiento. Cuando la solución alcanza la temperatura ambiente, los solventes se evaporan, , y se obtienen 398 mg de la sal 17, que contiene 0.5 equivalentes de ( i Pr ) 2 CO2L1 , como un sólido de color amarillo. La sal se utiliza sin purificación en el siguiente paso . 1E RMN (dg-DMSO) : d = 6.44 (s, 1H) , 7.50-7.75 (m, 6H) , 8.33 -8.40 (m, 2H) , 8.53 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz , 2H) .

Se calienta una solución de la sal de litio 17 (50 mg) y L - pro 1 i nami da (122 mg , 1.07 mmoles) en DIVISO (1.5 mi) bajo nitrógeno hasta 80°C durante 15.5 horas. Se agrega ácido acético acuoso al 4% (10 mi) a la solución fría, y la mezcla se extrae con EtOAc (5 x 10 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con ácido acético acuoso al 4% (10 mi) , agua (10 mi) y salmuera (10 mi) y se seca con MgS04. La filtración y concentración permiten obtener 40 mg del compuesto 18 como un sólido de color amarillento, el cual se utiliza sin purificación en el siguiente paso. JH RMN (CD30D) : d = 1.95 -2.36 (m, 4H) , 3.85-3.95 (m, 1H) , 3.95-4.17 (m, 1H) , 4.72 (brs, 1H) , 7.14 (s, 1H) , 7.35-7.45 (m, 3H) , 7.45-7.70 (m, 3H) , 8.33 - 8.50 (m, 4H) .

Se agrega una solución de hidróxido de sodio en metanol (1.5 mi, 5 , 7.5 mmoles) a una solución de la pirrolopirimidina 18 (40 mg , 0.081 mmoles) en metanol (2 mi) . Después de 2 horas, se ajusta el pH a 5, la mayoría del metanol se evapora, la mezcla se extrae con EtOAc (5 10 mi) , las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera y se secan con MgS04. La filtración y concentración permiten obtener 24 mg de un sólido de color amarillo pálido, el cual se tritura con tolueno/EtOAc/MeOH para obtener 15.6 mg (55%) del ácido 1511 como un sólido de color ligeramente amar i lio. XH RMN (CD30D) : d = 2.05 -2.20 (m, 4H) , 3.95-4.10 (m, 1H) , 4.15-4.25 (m, 1H) , 4.85 (brs, 1H) , 7.14 (s, 1H) , 7.35-7.42 (m, 3H) , 8.38-8.45 (m, 2H) . IR (sólido) : n = 3192 cm"1, 2964, 2923, 2877, 1682, 1614, 1567, 1531, 1454, 1374, 1352, 1295, 1262, 1190, 974, 754, 700. MS ( ES ) : 352 (M+ + l ) . P.f. = 220 °C (descomposición) .

EJEMPLO 28 Síntesis de la amida del ácido 1- ( 6 -metil - 2 - f enil - 7H-pirrolo [ 2 , 3d]pirimidin-4-il) - (3) -pirrolidin-2- carboxílico (1512) El compuesto 1512 se sintetiza utilizando los siguientes pasos: Se combinan el cloruro de arilo 20 (3 g, 10.7 turnóles) , DMSO (50 mi) y ( S ) - pro 1 i nami da y se calientan hasta 85°C bajo argón. Después de agitar durante toda la noche (14 horas) , la mezcla se enfría hasta temperatura ambiente y se vierte en 800 mi de agua. Esto se extrae con tres porciones de 200 mi de EtOAc . Las capas orgánicas combinadas se lavan minuciosamente con agua (3 x 300 mi) , salmuera, se secan con gS0 , se filtran y se concentran para obtener un sólido de color café oscuro. El sólido se recristaliza dos veces con EtOAc para obtener 1.95 g (57%) de un sólido de color canela (1512) . 1H MN (DMSO-dc) d 1.8-2.2 (m, 4H) , 2.3 (s, 3H) , 3.8 (m, 1H) , 4.0 (m, 1H) , 4.6 (d, 1H) 6.2 (s, 1H) , 6.9 (s, 1H) , 7.2 (m, 3H) , 7.3 (g, 1H) , 8.4 (m, 2H) , 11.5 (s , 1H) . MS (ES) : 322 ( ++l) .

EJEMPLO 29 Síntesis de la amida del ácido 1 - [ 6 - ( 2 - hidroxi - e toximetil ) -2-fenil-7H-plrrolo[2,3-d] irimidln- 4 - il) -pirrolidin- -carboxíllco (1513) El compuesto 1513 se sintetiza en una forma similar a la del ejemplo 17 utilizando el esquema de síntesis IX con L - pro 1 inami da y etano- 1 , 2 -diol para obtener : MS (ES ) : 382 (M++l ) .

EJEMPLO 30 Síntesis de 4 - ( 6 - imidazol - 1 - lime t i 1 - 2 - fenl 1 - 7H - pirrólo [2 , 3 -d] irimidin - 4 - i 1 amiino ) - c i c lohexanol (1514) El compuesto 1514 se sintetiza en una forma similar a la del ejemplo 17 utilizando el esquema de síntesis IX con N-6 aminoc i c 1 ohexano 1 e imidazol para obtener : MS (ES) : 369 (M+ +l ) .

EJEMPLO 31 Síntesis del ácido 4 - ( 4 - hidro¾l - c ic lohexi 1 amino ) - 2 - fenil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxíllco (1515) El compuesto 1515 se sintetiza en una forma similar a la del ejemplo 27 utilizando el esquema de síntesis IX con N-6 amino ciclohexanol para obtener : EJEMPLO 32 Síntesis de 4 - [ 6 - ( 2 - hidroxi - e toxlme t i 1 ) - 2 - f enl 1 - 7H - pirrólo [2, 3-d] pirimidin-4- i lamino1 - ciclohexanol (1516) El compuesto 1516 se sintetiza en una forma similar a la del compuesto 1513 utilizando el esquema de síntesis IX con N-6 amino ciclohexanol pa a obtener : MS (ES) : 383 ( ++l) .

EJEMPLO 33 Síntesis del óster metílico del ácido 4 - ( 4 - hidroxi- ciclohexllamino ) -2-fenil-7H-pirrolo [2,3- d] pir imid n.- 6 - carboxi 1 i co (1517) Una solución de la sal de litio 17 (0.13 ramoles) en DMF seca (4 mi) se agita con yoduro de me-ilo (0.1 mi, 1.6 mmoles) a 20°C bajo argón durante 3 horas. La DMF se evapora, y se agrega solución acuosa de cloruro de amonio (15 mi) . La mezcla se extrae con EtOAc (3 x 15 mi) , las capas orgánicas combinadas se lavan con agua (2 x 10 mi) y salmuera (10 mi) y se secan con MgS04. La filtración y concentración permiten obtener 21 mg (38%) del éster metílico 22.

Se calienta una solución del éster metílico 22 (24.5 mg, 0.057 mmolea) y 4-trans-aminociclohexanol (66 mg , 0.57 mmoles) en DMSO (1.5 mi) bajo nitrógeno a 80°C durante 5 horaa, después se detiene el calentamiento, y se continúa agitando a 20°C durante 13.5 horas. Se agrega ácido acético acuoso al 4% (10 mi) a la solución fría, y la mezcla se extrae con EtOAc (3 x 10 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con ácido acético acuoso al 4% (10 mi) , agua (10 mi) , NaOH 2N (10 mi) , agua (10 mi) , y salmuera (10 mi) y se secan con MgS04. A una solución del material crudo que se obtiene después de filtrar y concentrar (el espectro 1 H RMN indica una remoción de 50% aproximadamente del grupo bencensulfonilo) en THF (2ml) , se agrega una solución de NaOH en MeOH (0.5 mi de solución 5 M, 2.5 mmoles) a temperatura ambiente. Después de 20 minutos, se agregan agua y solución saturada de NaHC03 (5 mi de cada una) , y la mezcla se extrae con EtOAc (4 x 15 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaOH 2N (10 mi) , agua (10 mi) , y salmuera (10 mi) y se secan con MgS04. La cromatografía del material crudo que se obtiene, después de filtrar y concentrar, en gel de sílice, eluyendo con hexanos / EtOAc 1:1 ó 1:2 permite obtener 8.6 mg (41%) del compuesto 1517 como un sólido de color blanco. P . f . : 225-227°C. 1 H RMN (CD3OD) : d = 1.38-1.62 (m, 4H) , 1.95-2.10 (m, 2H) , 2.10-2.25 (m, 2H) , 3.55-3.70 (m, 1H) , 3.91 (s, 3H) , 4.20 -4.35 (m, 1H) , 7.32 (s, 1H) , 7.35-7.47 (m, 3H) , 8.35-8.42 (m, 2H) . IR (sólido) : n = 3352 cm"1, 3064, 2935, 2860, 1701, 1605, 1588, 1574, 1534, 1447, 1386, 1333, 1263, 1206, 1164, 1074, 938, 756, 705. MS ( ES ) : 367 (MH+) .

EJEMPLO 34 Síntesis del áster metílico del ácido [9- (2- carbamoil -pirrolidin- 1- 11 ) -2-fenil-7H-pirrolo[2,3- d] pirimidin- 6 - llmatoxi] -acético (1518) El compuesto 1518 se sintetiza en una forma similar a la del ejemplo 26 utilizando el compuesto precursor 12 para obtener: MS (ES ) : 910 (M++l ) .

EJEMPLO 35 Síntesis del ácido [4 - ( 2 - carbamol 1 -plrrol idin- 1 - il) -2-fenil- 7H- irrólo [2 , 3 -d] irimidln- 6 - ilmetoxi] - acético (1519) El compuesto 1519 se sintetiza en una forma similar a la del compuesto 1518 en la cual el grupo ésuer metílico se vuelve a hidrolizar con una base para obtener : MS (ES) : 396 (M++l) EJEMPLO 40 Síntesis de la amida del ácido 4 - ( 4 - hidroxl - c i clohexi lamino) -2-fenil-7H-pirrolo [2 , 3 - d] plrimidlna-6-carboxílico (1520) Se condensa amoniaco gaseoso en una solución de la pirrolopirimidina 23 (7.8 mg, 0.021 mmoles) en metanol (6 mi) , se enfría con hielo s e c o / ac e t ona , hasta que se obtiene un volumen total de 12 mi. Después de agitar durante 10 días a 20°C, se evaporan los solventes, y el residuo se purifica mediante CCF preparativa en gel de sílice, eluyendo con 5% de MeOH en CH2C12. El material obtenido de esta manera se tritura con éter para obtener 6.5 mg (88%) de la amida 1520 como un sólido de color bl anco . P.f. : 210-220°C (descomposición) . ? RMN (CD3OD) : d = 1.40- 1.60 (m, 4H) , 2.00-2.15 ( m , 2H) , 2.15-2.25 (m, 2H) , 3.55-3.70 ( m , 1H) , 4.20 -4.35 (m, 1H) , 7.16 (s, 1H) , 7.35 - 7.47 (m, 3H) , 8.34-8.40 (m, 2?) . IR (sólido) : n = 3358 cm"1, 3064, 3025, 2964, 2924, 2853, 1652, 1593, 1539, 1493, 1452, 1374, 1326, 1251, 1197, 1113, 1074, 1028, 751, 699. Mñ (ES) : 352 ( MH+ ) .

Actividad de los compuestos Se efectúan pruebas de saturación y competencia de unión de radioligando del receptor 1 de adenosina (Ai) para los compuestos 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, y 1520 como se describe la presente invención y en las páginas 152-153, entre otras, de esta especificación. Todos los compuestos a los que se hace referencia anteriormente igualan o sobrepasan la afinidad de unión al receptor Ax de les compuestos de referencia 1318 o 1319 tal como se describe en la presente invención y, entre otros, en el cuadro 13, en la página 171 de la especificación. Es de esperar que las solubilidades en agua de los compuestos anteriores listados en el cuadro 18 sean mejores que la de los compuestos de referencia 1318 o 1319 debido a sus valores cLogP, los cuales se calculan utilizando el programa para computadora CS ChemDraw, ChemDraw Ultra ver. 6.0 ®1999 como el suministrado por CambridgeSof t Corporation, 100 Cambridge Park Dríve, Cambridge, A 02190. Los compuestos específicos para el receptor Ai listados en el cuadro 18 tienen valores cLogP menores, entre 1.5 aproximadamente hasta 3.11 aproximadamente, según se compara con los compuestos de referencia 1318 o 1319 que tienen un valor cLogP de 3.8 aproximadamente. No se pronostica que los compuestos para el receptor Ai más polares listados en el cuadro 18, que tienen valores cLogP menores que los de los compuestos de referencia 1318 o 1319, sigan conservando la potencia y selectividad de unión al receptor Ai según se compara con aquellos compuestos de re ferencia .

CUADRO 18 Compuesto cLogP 1505 4.1 1506 3.0 1507 2.88 1508 2.1 Compue s to cLogP 1509 2.9 1510 1.5 1511 2.7 1512 3.37 1513 2.4 1514 2.8 1515 3.1 1516 2.8 1517 3.4 1518 2.4 1519 2.2 1520 2.4 Las páginas 288-293 se refieren a compuestos adicionales específicos para el receptor A2a Esta invención provee un compuesto que tiene la estructura: 1609 Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: En una modalidad adicional la invención provee un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenoaina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de los compuestos 1609 o 1610. La invención también provee el método anterior, en el cual el individuo es un mamífero. La invención también provee el método anterior, en el cual el mamífero es un humano. La invención también provee el método para tratar una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenosína en un individuo, en el cual el receptor A2a de adenosina está asociado con actividad del aparato locomotor, va sodi 1 at c ión , inhibición plaquetaria, generación de superóxido en neutrófilos, trastorno cognitivo, demencia senil, o enfermedad de Parkinson, La invención provee el método anterior, en el cual el compuesto trata las enfermedades estimulando la adenilato ciclaaa. T.a invención también provee un profármaco soluble en agua del compuesto 1609 o 1610, en el cual el profármaco soluble en agua es metabolizado in vivo hasta un fármaco activo para inhibir de manera selectiva un receptor A2a de adenosina. La invención también provee un profármaco soluble en agua del compuesto 1609 o 1610, en la cual el profármaco es metabolizado in vivo mediante hidrólisis catalizada por esterasa. La invención también provee una composición farmacéutica que comprende el profármaco soluble en agua del compuesto 1609 o 1610, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La invención también provee un método para inhibir la actividad de un receptor A2a de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto la célula con el compuesto 1609 o 1610. La invención también provee un método para inhibir la actividad de un receptor A2a de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto la célula con el compuesto 1609 o 1610, en el cual el compuesto es un antagonista de dicho receptor de A2a de adenosxna . La invención también provee el método anterior, en el cual la célula es una célula de humano . La invención también provee el método anterior, en el cual la célula es una célula de humano y el compuesto es un antagonista de los receptores A2a de adenosina. La invención también provee una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto 1609 o 1610 y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La invención también provee la composición farmacéutica anterior, en la cual la cantidad terapéuticamente efectiva es efectiva para tratar enfermedad de Parkinson, enfermedades asociadas con actividad del aparato locomotor, vasodi 1 at ac ión , inhibición plaquetaria, generación de superóxido en neutrófilos, trastorno cognitivo, o demencia senil. La invención también provee la composición farmacéutica anterior, en la cual la composición farmacéutica es una formulación oftálmica. La invención también provee la composición farmacéutica anterior, en la cual la composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o infraocular. La invención también provee la composición farmacéutica anterior, en la cual la composición farmacéutica es una formulación sistémica. La invención también provee la composición farmacéutica anterior, en la cual la composición farmacéutica es una solución para irrigación qui rúrg i ca . La invención también provee una terapia de combinación para la enfermedad de Parkinson, que comprende los compuestos 1609 o 1610, y cualquiera de los fomentadores de dopamina. La invención también provee una terapia de combinación para el cáncer, que comprende el compuesto 1609 o 1610, y cualquiera de los agentes c i t otóxi co s . La invención también provee una terapia de combinación para el glaucoma, que comprende el compuesto 1609 o 1610, y un agonista de prostaglandina , un agonista muscarínico, o un antagonista ß-2. La invención también provee una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto 1609 o 1610; y (b) instrucciones para utilizar el compuesto para tratar dicha enfermedad en un individuo .

EJEMPLOS EJEMPLO 41 Síntesis de la amida del ácido 1 - ( 6 - f eni 1 - 2 - piridin-4-il-7H-pirrolo(2,3-d] pirimidin-4 - 11] - pirrol idin- 2 - carboxí 1 ico (1609) El compuesto 1609 se sintetiza haciendo reaccionar L - rol i nami da con el intermediario cloruro apropiado descrito en el esquema de síntesis II en la página 82 para obtener: 1609 1U R N (d6-DMSO) 6 1.95-2.15 ( m , 4H) , 4.00 (brs, 1H) , 4.15 (brs, 1H) , 4.72 (brs, 1H) , 6.90 (brs, 1H) , 7.19 (brs, 1H) , 7.30 (t, 1H, J = 7.0 Hz) , 7.44 (t, 2H, J = 7.0 Hz) , 7.59 (s, 1H) , 7.92 ( b r s , 2H) , 8.26 ( d , 2H, J = 6.2 Hz) , 8.65 (d, 2 H , J = 6.2 Hz ) . MS (ES) : 384.9 (M++l) . P.f. = 280-316°C (descomposición) .

EJEMPLO 42 Síntesis de la amida del ácido 1- [6- (3-metoxi- fanil) -2-piridir_-4-il-7H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-4- il) -pirrolidin- 2 -carboxí lico (1610) El compuesto 1610 se sintetiza haciendo reaccionar L-prol inamida con el intermediario cloruro apropiado descrito en el esquema de síntesis II en la página 82 para obtener: 1610 1H RMN (d6-DMSO) d 2.07 (m, 4H) , 3.85 (s, 3H) , 4.02 (m, 1H) , 4.17 (m, 1H) , 4.75 (m, 1H) , 6.89 (m, 1H) , 7.00 (s, 1H) , 7.23 (s, 1H), 7.35 (t, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.53 (S, 2H) , 7.60 (s, 1H) , 8.28 (d, 2H, J = 5.8 Hz) , 8.67 (d, 2H, J = 5.8 Hz) , 12.37 (s, 1H) . ?? ( ?? ) : 415.0 (M+ +l) .

Actividad de los compuestos Se efectúan pruebas de competencia de unión de radio ligando al subtipo del receptor 2a de adenosina (A2a) para los compuestos 1609 y 1610 como se describe en la presente invención y en la página 153, entre otras, de esta especificación. Se encontró que los compuestos 1609 y 1610 tienen afinidad y selectividad de unión al receptor A2a. Las páginas 294-300 se refieren a compuestos adicionales específicos para el receptor A3 - Esta invención también provee un compuesto que tiene la estructura: 1720 En una modalidad adicional la invención provee un método para inhibir la actividad de un receptor A3 de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto la célula con el compuesto 1720. En una modalidad adicional la invención provee un método para inhibir la actividad de un receptor A3 de adenosina en una célula, en la cual el compuesto es un antagonista del receptor A3 de adenos i na . En una modalidad adicional la invención provee el método anterior para inhibir la actividad de un receptor A3 de adenosina en una célula, en la cual la célula es célula de humano. En una modalidad adicional la invención provee el método anterior para inhibir la actividad de un receptor A3 de adenosina en una célula, en la cual la célula es una célula de humano y en la cual el compuesto es un antagonista de los receptores A3 de adenos ina . En una modalidad adicional la invención provee un método para tratar daño al ojo de un individuo que comprende administrar al individuo una composición que comprende una cantidad ter péuticamente efectiva del compuesto 1720. En una modalidad adicional la invención provee el método anterior, en la cual el daño comprende daño a la retina o a la cabeza del nervio ópt ico . En una modalidad adicional la invención provee una terapia para el glaucoma, que comprende administrar a un individuo una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto 1720. En una modalidad adicional la invención provee una terapia para el glaucoma que comprende uno o más antagonistas de receptor de adenosina, de preferencia que comprende un antagonista del receptor A3 de adenosina (de preferencia una 7-desazapurina N-S sustituida, más preferido [2-(3H-imidazol-4-il) - etil] - (2-fenil-7H-pirrolo [2,3-d] - i imi di n - 4 - i 1 ) -amina) . En una modalidad alternativa la invención provee una terapia de combinación para el glaucoma que comprende un antagonista del receptor A3 de adenosina (de preferencia una 7 -desazapurina N-6 sustituida, más preferido [ 2 - ( 3 H - imi da zol - 4 - i 1 ) -etil] - (2-fenil-7H-pi olo[2,3-d]pirimidin-4-il) -amina) ) y uno o más de otros compuestos que se seleccionan del grupo que consiste de antagonistas de adrenoceptor beta (es decir, antagonistas beta adrenérgicos o bloqueadores ß) (por ejemplo, maleato de timolol, betaxolol, carteolol, levobunolol, met iprano 1 o 1 , L-653328 (el éster acetato de L-652698), antagonistas de adrenoceptor beta 1) , agonistas de adrenoceptor -2 (por ejemplo, a l clonidina, brimonidina, AGN-195795, AGN- 190837 (un análogo de Bay - a - 6781 ) ) , inhibidores de anhidrasa carbónica (brinzolamida, dorzolamida, MK-927 (un inhibidor de la isoenzima anhidrasa carbónica II de humano) , inhibidores de la isoenzima anhidrasa carbónica IV) , agonistas colinérgicos (por ejemplo, agonistas colinérgicos muse í ni c o s , carbacol, clorhidrato de pilocarpina, nitrato de pilocarpina, pilocarpina, profármacoa de pilocarpina (por ejemplo, DD-22A)) , prostaglandinas y agonistas del receptor de prostaglandina (por ejemplo, latanoprost, unoprostone isopropilo, agonistas de PGF2 alfa, agonistas de receptor FP selectivos de prostanoide, agonistas de PG tales como las prostamidas hipotensoras) , inhibidores de la enzima para conversión de angiotensina (ACE) (por ejemplo, Spirapríl, spi apri 1 a ) , antagonistas del receptor AMPA, agonistas de 5-HT (por ejemplo, un agonista del receptor 5-HT 1A selectivo tal como MKC-242 (5-3-[((2S)-l, 4 - benz odi oxan - 2 - i 1me t i 1 ) -amino] propoxi - 1 , 3 -benxodioxol "HCl ) , inhibidores de angiogénesis (por ejemplo, el esteroide anecortave) , antagonistas de NMDA (por ejemplo, HU-211, memantina, el agonista del receptor NMDA canabinoide dexanabinol, profármacos y análogos de dexanabinol, antagonistas selectivos de NR2B (por ejemplo, eliprodil ( SL - 82.0715 ) ) , inhibidores de renina (por ejemplo, CGP-38560, SR-43845) , agonistas de receptor canabinoide (por ejemplo, tetrahidrocanabinol (THC) y análogos de THC, agonistas del receptor CB2 canabinoide selectivos (por ejemplo, L-768242, L-759787) , compuestos tales como anandamida que se unen tanto a los receptores CB1 específicos de cerebro como a los receptores CB2 pe iféricos) , antagonistas de receptor angiotensina (por ejemplo, antagonistas de receptor de angiotensina II (por ejemplo, CS- 088) , antagonistas de receptor AT-I de angiotensina II selectivos, tales como losarían potásico) , clorhidrotiazida (HCTZ) , agonistas de somatostatina (por ejemplo, el agonista no peptídíco de somatosta ina, NNC-26 - 9100) , antagonistas de glucocorticoide , inhibidores de desgranulación de mastocitos (por ejemplo nedocromil) , bloqueadores del receptor al fa - drenérgi c o (por ejemplo daniprazol, antagonistas del adrenoceptor alfa-2, antagonistas del adrenoceptor alfa-1 (por ejemplo, bunazosin) ) , antagonistas del adrenoceptor alfa-2, imitadores de tromboxano A2 , inhibidores de proteína cinasa (por ejemplo, H7) , derivados de prostaglandina F (por ejemplo, S-1033) , antagonistas de pros t ag 1 andi na - 2 alfa (por ejemplo, PhXA-34) , agonistas de DI y 5-HT2 de dopamina (fenoldopam) , agentes para liberación de óxido nítrico (por ejemplo NCX-904 o NCX-905, derivados de timolol para liberación de óxido nítrico) , antagonistas de 5-HT 2 (por ejemplo, sarpogre 1 ate ) , antagonistas de NMDA (por ejemplo, profármacos y análogos de dexanab i no 1 ) , antagonistas del adrenoceptor alfa 1 (por ejemplo, bunazosin) , inhibidores de ciclooxigenasa (por ejemplo, diclofenac, o el compuesto no esteroide nepafenac) , inosina, agonistas del receptor D2 y del adrenoceptor alfa 2 de dopamina (por ejemplo, talipexol) , antagonistas de receptor Di y agonistas de receptor D2 de dopamina (por ejemplo, SDZ-GLC-756) , antagonistas de receptor de vasopresina (por ejemplo, antagonistas de receptor V2 de vasopresina (por ejemplo, SR- 121463 ) ) , antagonistas de endotelina (por ejemplo, TBC- 2576) , 1 - ( 3 -hídroxi - 2 -fos foni lme t oxiprop i 1 c i o s ina (HP PC) y análogos y profármacos relacionados, ligandos para receptor de la hormona tiroidea (por ejemplo, KB-130015) , agonistas MI muscarínicos , antagonistas del receptor de NMDA (por ejemplo, el antagonista del receptor NMDA canabinoide dexanabinol) , agonistas de PG tal como los lípidos hipotensores , prostamidas, bloqueadores del canal de sodio, antagonistas de NMDA, bloqueadores de canal iónico de acción mixta, antagonistas del adrenoceptor beta y combinaciones de agonistas de PGF2 alfa (por ejemplo, latanoproat y timolol) , activadores de la guanilato ciclasa (por ejemplo péptido natriurético atrial (ANP) o imitadores no peptídicos, inhibidores de endopept idasa neutra de ANP, vasodilatadores nitrogenados (por ejemplo, ni roglicerina, hidralazina, nitroprúsido sódico), moduladores del receptor de endotelina (por ejemplo, ET-1 o imitadores no peptídicos, sa a f ot oxina - S 6 c ) , ácido etacrínico, otros análogos de ácido f enoxi acét i co (por ejemplo indacrinona, ticrinafen) , disruptores de actina (por ejemplo, 1 at runcul i na ) , bloqueadores del canal de calcio (por ejemplo, veraparail , nifedipina, brovincamina , nivaldipina) y agentes neuroprotetore s . Una terapia de combinación para el glaucoma, que comprende el compuesto de 1702, y uno o más compuestos que se seleccionan del grupo que consiste de antagonistas de adrenoceptor beta, agonistas de adrenoceptor alfa-2, inhibidores de anhidrasa carbónica, agonistas colinérgicos y agonistas de receptor de prostaglandina . En una modalidad adicional la invención provee una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto 1720 y un vehículo farmacéuticamente aceptable . En una modalidad adicional la invención provee una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor A3 de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad erapéuticamente efectiva del compuesto 1720; y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para tratar dicha enfermedad en un indi iduo . En una modalidad adicional la invención provee un método para preparar una composición que comprende el compuesto 1720, el método comprende mezclar el compuesto 1702 con un vehículo apropiado . En una modalidad adicional la invención provee una sal farmacéu icamente aceptable del compuesto 1720, en la cual la sal farmacéuticamente aceptable contiene un anión que se selecciona del grupo que consiste de maléico, fumárico, tartárico, acetato, fosfato y mes i lato.

EJEMPLOS EJEMPLO 43 Síntesis de [ 2 - ( 3H- imidazol - 4 - i 1 ) - e t il ] - ( 2 - f enl X - 7H-pirrolo[2, 3 - d] lr imidin - 4 - 11 ) -amina (1720) El compuesto 1720 se sintetiza utilizando el compuesto precursor 1 del esquema de síntesis vil para obtener: 1 1720 combinan el cloruro de arilo 1 (400 mg 1.50 i moles) , DMSO (10 mi) e histamina (1.67 g, 15.0 minóles) y se calientan hasta 120°C bajo nitrógeno. Después de 6.5 horas, la reacción se enfría hasta temperatura ambiente y se divide entre EtOAc y agua. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con EtOAc (3x) . Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (2x) , se secan con MgS0 ( se filtran y concentran para obtener 494 mg de un sólido de color café. El sólido se lava con MeOH frío y se recristaliza con MeOH para obtener 197 mg (43%) de un sólido blanquecino (1720) . XH RMN (CD3OD) : d 3.05 (t, 2H, J = 7.0 Hz) , 3.94 (t, 2H, J = 7.0 Hz) , 6.50 (d, 1H, J = 3.5 Hz) , 6.88 (brs, 1H) , 7.04 (d, 1H, J = 3.5 Hz) , 7.42 (m, 3H) , 7.57 ( s , 1H) , 8.34 (m, 2H) . MS (ES) : 305.1 (M++l ) . P . f . = 234 -235 °C .

Act ividad de los compuestos Se efectúan pruebas de unión de radioligando por competencia al receptor 3 de adenosina (A3) tal como se describe en la presente invención y en las páginas 153-154, entre otras, de esta especificación. Se encontró que el compuesto 1720 tiene una afinidad de unión a receptor A3 mayor de 10 veces la del compuesto de referencia 1308 tal como se describe en la presente invención y en el cuadro 13, entre otros, en la página 169 de la especificación.

Incorporación para referencia Todas las patentes, solicitudes de patentes publicadas y otras referencias descritas en la presente invención se incorporan expresamente en la misma para referencia .

Equivalentes Los expertos en la técnica reconocerán, o podrán establecer, utilizando solamente experimentación rutinaria, muchos equivalentes para las modalidades específicas de la invención descritas de manera específica en la misma. Se pretende que tales equivalentes queden abarcados en el campo de las siguientes reivindicaciones.

Esta invención también provee compuestos que tengan la fórmula: en la cual R1NR2 forman juntos un anillo que tiene e s t ruc t ura : R5 es H , o alquilo o alquilarilo sustituido o no sus t i tu ido .

Claims (80)

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito presente invento considera como novedad y lo tanto se recl como propiedad lo contenido las siguientes: REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto que tiene la fórmula caracterizado porque RiNR2 forman juntos un anillo que tiene estructura : o R1 es H y R2 es:

R5 es H , o alquilo o alquilarilo sustituido o no sustituido. 2. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura:

3.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura:

4. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura:

5. - El compuesto de conformidad con ivindicación 1, que tiene la estructura:

6. - El compuesto de conformidad con reivindicación 1, que tiene la estructura:

7. - El compuesto de conformidad con reivindicación 1, que tiene la estructura:

8. - El compuesto de conformidad con reivindicación 1, que tiene la estructura:

9.- El compuesto de conformidad con reivindicación 1, que tiene la estructura:

10.- El compuesto de conformidad con reivindicación 1, que tiene la estructura:

11.- El compuesto de conformidad con indicación 1, que tiene la estructura:

12. - El compuesto de conformidad con la rei indicación 1, que tiene la estructura:

13. - El compuesto de conformidad con ndicación 1, que tiene la estructura:

14. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura:

15.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura:

16.- El compuesto de conformidad con eivindic ción 1, que tiene la es t uctura :

17.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura:

18. - Un método para tratar una enfermedad asociada el receptor Ax de adenosina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

19. - El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado además porque el individuo es un mamífero.

20. - El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque el mamífero es un humano.

21. - El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado además porque dicho receptor A± de adenosina está asociado con enfermedad cognitiva, insuficiencia renal, arritmias cardiacas, epitelio respirato io, liberación de transmisor, sedación, vasoconstricción, bradicardia, inotropia y dromotropia cardiaca negativa, bronqui oconstr ice ión , quimiotaxis de neutro f i 1 o , condición de reflujo, o condición ulcerante.

22.- Un profármaco soluble en agua del compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque el profármaco soluble en agua se metaboliza in vivo para producir un fármaco activo que inhibe de manera selectiva al receptor Ax de adenosina.

23. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado además porque dicho profármaco se metaboliza in vivo mediante hidrólisis catalizada por esterasa.

24. - Una composición farmacéutica que comprende el profármaco de conformidad con la rei indicación 22 y un vehículo farmacéuticamente aceptable .

25. - Un método para inhibir la actividad de un receptor Ai de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto la célula con un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

26. - El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado además porque el compuesto es un antagonista del receptor Ax de adenosina .

27. - El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado además porque la célula es una célula de humano.

28. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracter zado además porque el compuesto es un antagonista de los receptores Ai de adenos ina .

29. - El método de conformidad con la reivindicación 18, carac erizado además porque dicha enfermedad es asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, rinitis alérgica, o un trastorno del tracto respiratorio superior.

30. - El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado además porque el individuo es un humano.

31. - El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado además porque dicho compuesto es un antagonista de los receptores Ai de adenosina.

32.- Una terapia de combinación para el asma, que comprende el compuesto de conformidad con la reivindic ción 1, y un esferoide, agonista ß2 , glucocorticoide , antagonista de lucotrieno, o agonista ant icol inérgico .

33.- Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéu icamente efectiva del compuesto de conformidad con la rei indicación 1, y un vehículo farmacéu icamente aceptable.

34. - El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado además porque dicho trastorno respiratorio es asma, rinitis alérgica, o enfermedad pulmonar obstructiva cróni ca .

35. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 33, caracterizada además porque dicha composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o infraocular.

36. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 33, caracterizada además porque dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica.

37. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado además porque dicha composición farmacéutica es una solución para irrigación quirúrgica.

38. - Una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor Ax de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de conformidad con la reivindicación 1; y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para tratar dicha enfermedad en un

39. - Una sal f rmacéuticamen e aceptable del compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

40. - La sal f rmacéuticamente aceptable de conformidad con la reivindic ción 39, caracterizada además porque la sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de conformidad con las reivindicaciones 6, 8, 12, 15, o 16 contiene un catión que se selecciona del grupo que consiste de sodio, calcio y amonio.

41. - El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado además porque el receptor A1 de adenosina está asociado con insuficiencia cardiaca congestiva.

42. - Un compuesto que tiene la estructura:

43.- Un compuesto que tiene la estructura:

44. - Un método para tratar una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenosina en un individuo, que comprende administrar al individuo una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 42 , o 43.

45. - El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque el individuo es un mamífero.

46. - El método de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado además porque el mamífero es un humano.

47.- El método de conformidad con la reivindicación 46, caracterizado además porque dicho receptor ??3 de adenosina está asociado con actividad locomotora, va s odi 1 at c i ón , inhibición plaquetaria, generación de superóxido de neutrofilos, trastorno cognitivo, demencia senil, o enfermedad de Parkínson.

48. - El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque el compuesto trata dichas enfermedades estimulando la adenílato ciclasa.

49. - Un profármaco soluble en agua de los compuestos de conformidad con las reivindicaciones 42, o 43, caracterizado además porque dicho profármaco soluble en agua se metaboliza in vivo hasta un fármaco activo que inhibe de manera selectiva al receptor A2a de adenosina.

50. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 49, caracterizado además porque dicho profármaco se metaboliza in vivo mediante hidrólisis catalizada por esterasa.

51. - Una composición farmacéutica que comprende el profármaco de conformidad con la reivindicación 49 y un vehículo farmacéuticamente aceptabl e .

52.- Un método para inhibir la actividad de un receptor A2a de adenosina en una célula, que comprende poner en contacto dicha célula con un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 42 , o 43.

53.- El método de conformidad con la reivindicación 52, caracterizado además porque el compuesto es un antagonista de dicho receptor A2a de adenos ina .

54. - El método de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque la célula es una célula de humano.

55. - El método de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque el compuesto es un antagonista de los receptores A2a de adenosina .

56. - Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de conformidad con las reivindicaciones 42 o 43 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

57. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 56, caracterizada además porque dicha cantidad terapéuticamente efectiva es efectiva para tratar enfermedad de Parkinson y enfermedades asociadas con actividad locomotora, vasodi 1 at c ión , inhibición plaquetaria, generación de superóxido de neutrofilos, trastorno cognitivo, o demencia senil.

58. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 56, caracterizada además porque dicha composic ón farmacéutica es una formulación oftálmica.

59. - La composición farmacéutica de conformidad con la rei indicación 56, caracterizada además porque dicha composición farmacéutica es una formulación para inyección periocular, retrobulbar o infraocular.

60. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindic ción 56, caracterizada además porque dicha composición farmacéutica es una formulación sistémica.

61. - La composición farmacéutica de conformidad con la rei indicación 56, caracterizada además porque dicha composición farmacéutica es una solución para irrigación quirúrgica.

62. - Una terapia de combinación para la enfermedad de Parkinson, que comprende los compuestos de conformidad con las reivindicaciones 42 o 43, y cualquiera de los fomentadores de dopamina .

63. - Una terapia de combinación para el cáncer, que comprende el compuesto de conformidad con las reivindicaciones 42 o 43, y cualquiera de los agentes citotóxicos.

64.- Una terapia de combinación para el glaucoma, que comprende el compuesto de conformidad con las reivindicaciones 42 o 43, un agonista de prostaglandina , un agonista muscarínico, o un antagonista ß-2.

65.- Una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor A2a de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de los compuestos de conformidad con las reivindicaciones 42 o 43 ,· y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para tratar dicha enfermedad en un individuo .

66. - Una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de conformidad con la rei indicaciones 42 o 43.

67. - La sal farmacéuticamente aceptable de conformidad con la reivindicación 66, caracterizada además porque la sal farmacéuticamente aceptable de los compuestos de conformidad con las reivindicaciones 42 o 43 contiene un anión que se selecciona del grupo que consiste de maléico, fumárico, tartárico, acetato, fosfato y mesilato.

68. - Un compuesto que tiene la estructura:

69. - Un método para inhibir la actividad de un receptor A3 de adenoaina en una célula, que comprende poner en contacto la célula un compuesto de conformidad con la reivindicación 68.

70. - El método de conformidad con la reivindicación 69, caracterizado además porque el compuesto es un antagonista del receptor A3 de adenos ina .

71. - El método de conformidad con la reivindicación 69, caracterizado además porque la célula es una célula de humano.

72. - El método de conformidad con la reivindicación 71, caracterizado además porque el compuesto es un antagonista de los receptores A3 de adeno s ina.

73. - Un método para tratar daño al ojo de un individuo que comprende administrar al individuo una composición que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de conformidad con la reivindicación 68.

74. - El método de conformidad con la reivindicación 73, caracte izado además porque el daño comprende daño a la retina o a la cabeza del nervi o ópt i co .

75. - Una terapia para el glaucoma, que comprende administrar a un individuo una cantidad terapéu icamente efectiva del compuesto de conformidad con la reivindicación 68.

76. - Una terapia de combinación para el glaucoma, que comprende el compuesto de conformidad con la reivindicación 68, y uno o más compuestos que se seleccionan del grupo que consiste de antagonistas de adrenoceptor beta, agonistas de adrenoceptor oc-2, inhibidores de anhidrasa carbónica, agonistas col inérgi eos , prostagl andinas y agonistas del receptor de prostaglandina , inhibidores de la enzima de conversión de angiotensina (ACE) , antagonistas del receptor de AMPA, agonistas de 5-HT, inhibidores de angi ogén s i s , antagonistas de NMDA, inhibidores de renina, agonistas del receptor de canabinoides , antagonistas del receptor de angiotensina, clorhidrotiazida (HCTZ) , agonistas de somatostat ina , antagonistas de glucocort icoide , inhibidores de la desgranulación de mastocitos, bloqueadores del receptor - adrené rg ico , antagonistas del adrenoceptor a-2, imitadores de tromboxano A2 , inhibidores de proteína cinasa, derivados de prostaglandina F, antagonistas de pros t g 1 andi na - 2 , agonistas de DI y 5-HT2 de dopamina, agentes para liberación de óxido nítrico, antagonistas de 5HT 2, inhibidores de ciclóoxígenasa, ínoaína, agonistas del receptor D2 de dopamina y del adrenoceptor a-2, antagonistas del receptor DI de dopamina y agonistas del receptor D2 , antagonistas del receptor de vasopresína, antagonistas de endotelina, 1 - ( 3 - hidroxi - 2 -f os f oni lme t oxipropi 1 ) ci t os ina (HPMPC) y análogos y profármacos relacionados, ligandos para el receptor de la hormona tiroidea, agonistas MI muscarí ni eos , bloqueadores del canal de sodio, bloqueadores de canal iónico de acción mixta, antagonistas de adrenoceptor beta y combinaciones de agonistas de PGF2 ex, activadores de guanilato ciclasa, vasodilatadores nitrogenados, moduladores del receptor de endotelina, ácido etacrínico, otros análogos del ácido f enoxiacét i co , perturbadores de actina, bloqueadores del canal de calcio y agentes ne roprotectores .

77.- Una terapia de combinación para el glaucoma, que comprende el compuesto de conformidad con la reivindicación 68, y uno o más compuestos que se seleccionan del grupo que consiste de antagonistas del adrenoceptor beta, agonistas del adrenoceptor ot-2, inhibidores de anhidrasa carbónica, agonistas colinérgicos y agonistas del receptor de prostagl andina .

78.- Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de conformidad con la reivindicación 68 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

79. - Una composición farmacéutica empacada para tratar una enfermedad asociada con el receptor A3 de adenosina en un individuo, que comprende: (a) un contenedor que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de conformidad con la reivindicación 68; y (b) instrucciones para utilizar dicho compuesto para tratar dicha enfermedad en un individuo .

80. - Un método para elaborar una composición que comprende el compuesto de conformidad con la reivindicación 68, el método