MX2014014563A - Formas solidas de un compuesto antiviral. - Google Patents

Abstract

Se prepararon formas sólidas amorfas y cristalinas del compuesto anti-VHC éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5- (2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-spiro[2.4]hept-6-il ]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza -biciclo [2.2.1] heptan-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico (Compuesto I) y caracterizaron en el estado sólido: (ver Fórmula) También se proporcionan procesos de fabricación y métodos de uso de las formas amorfas y cristalinas.

Description

FORMAS SÓLIDAS DE UN COMPUESTO ANTIVIRAL ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La presente descripción se refiere generalmente a formas sólidas cristalinas del compuesto antiviral éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metíl-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico, procesos para fabricar las formas, y sus métodos terapéuticos de uso.

La hepatitis C se reconoce como una enfermedad viral crónica del hígado que se caracteriza por enfermedad hepática. Aunque los fármacos dirigidos al hígado son de uso amplio y han mostrado eficacia, toxicidad y otros efectos secundarios han limitado su utilidad. Los inhibidores de virus de hepatitis C (VHC) son útiles para limitar el establecimiento y progresión de la infección por VHC así como en ensayos de diagnóstico para VHC.

El compuesto éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9— difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-meti1-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico, también conocido como ledipasvir, designado en la presente como Compuesto I, se conoce por ser un agente anti-VHC efectivo, como se describe por ejemplo en la WO 2010/132601. Una síntesis del compuesto I se describe en la Patente de E.U.A. No. 8,088,368. Sin embargo, el Compuesto I no se conocía hasta ahora en cualquier forma cristalina sólida.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente descripción cumple estas necesidades y otras al proporcionar formas cristalinas del Compuesto I, sales, y solvatos. La presente descripción también proporciona una forma amorfa del Compuesto I. La presente descripción también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden formas amorfas y cristalinas del Compuesto I. La descripción también proporciona procesos para fabricar las formas amorfas y cristalinas y métodos para usarlos en el tratamiento de VHC.

Por lo tanto, una modalidad es solvato de diacetona del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-bíciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma I). Compuesto I Forma I se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 6.8, 12.5, y 19.8 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Otra modalidad es solvato de monoacetona de éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma II). El Compuesto I Forma II se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 12.2, 12.7, y 20.5 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Una modalidad adicional es éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma III). El Compuesto I Forma III se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 12.4, 14.2, y 21.6 °2q± 0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Todavía otra modalidad es D-tartrato de éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I D-tartrato). El D-tartrato del Compuesto I se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 4.0, 10.3, y 19.7 O2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Otra modalidad es solvato de acetato de etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma IV), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 15.1, 17.2, y 21.5°2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Todavía otra modalidad es solvato de acetato de etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5- (2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}- 2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma V), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 14.4, 15.3, y 17.4 °2q ± 0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El Compuesto I Forma V es un solvato de acetato de etilo parcial.

Otra modalidad es solvato de acetato de isopropilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VI), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 5.6, 13.3, y 21.1 O2q+0.2 °2q como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

De acuerdo con una modalidad adicional, la presente descripción proporciona solvato de acetato de metilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VII), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 11.0, 13.8, y 22.2 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Todavía otra modalidad es éster de metilo del ácido (1-{3- [6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbónilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VIII), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 9.4, 15.5, y 17.5 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Una modalidad es (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarboni1amino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-i idazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino éster de metilo del ácido solvato de formiato de etilo (Compuesto I Forma IX), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 13.8, 19.2, y 22.0 O2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Otra modalidad es solvato de acetonitrilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma X), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 3.4, 6.9, y 10.3 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Aún una modalidad adicional es solvato de tetrahidrofurano del éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9— difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbónilamíno-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XI), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 3.2, 6.3, y 9.5 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Otra modalidad es solvato de cetona de metil etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)- carbámico cristalino (Compuesto I Forma XII), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 3.2, 6.4, y 20.6 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Todavía otra modalidad es solvato de tetrahidrofurano del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5- (2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIII-THF), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 3.2, 3.5, y 7.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El Compuesto I Forma XIII-THF es un solvato THF parcial.

Un alternativo es solvato de cetona de metil etilo del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIII-MEK), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 3.2, 3.5, y 7.0 O2q+0.2 °2q como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El Compuesto I Forma XIII-MEK es un solvato MEK parcial.

En otra modalidad, la presente descripción proporciona solvato de éter de metil tert-butilo del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamíno- 3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIV), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 6.9, 10.3, y 22.4 O2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Todavía otra modalidad es éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metí1-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XV), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 12.1, 12.8, y 20.8 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

Todavía otra modalidad es éster de metilo del ácido 1-{3- [6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico amorfo, caracterizado por una temperatura de transición vitrea (Tg) de alrededor de 160°C.

Todavía otra modalidad es una composición farmacéutica que comprende una forma cristalina o amorfa del Compuesto I y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Una modalidad es una composición que comprende al menos dos del Compuesto I Forma I, Compuesto I Forma II, Compuesto I Forma III, y Compuesto I D-tartrato.

Adicionalmente, la descripción proporciona en una modalidad un método para tratar un sujeto que padece de virus de hepatitis C (VHC). El método comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de una de cualesquiera de Compuesto I amorfo, Compuesto I Formas I - XV y Compuesto I D-tartrato, como se describe generalmente arriba.

Otra modalidad, opcionalmente en combinación con cualquier otra modalidad descrita en la presente, es el uso de una de cualesquiera del Compuesto I Formas I - XV y Compuesto I D-tartrato para tratar VHC en un sujeto que lo padece.

Todavía una modalidad adicional, opcionalmente en combinación con cualquier otra modalidad descrita en la presente, es el uso de una de cualesquiera del Compuesto I Formas I - XV y Compuesto I D-tartrato en la fabricación de un medicamento para tratar VHC en un sujeto que lo padece.

En otra modalidad, la descripción proporciona un proceso para hacer el Compuesto I Forma I. El proceso comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I amorfo con acetona, por lo cual un Compuesto I Forma I se forma.

Todavía otra modalidad es un proceso para hacer Compuesto I Forma II. El proceso comprende la etapa de desolvatar parcialmente Compuesto I Forma I, por lo cual el Compuesto I Forma II se forma.

Otra modalidad es un proceso para hacer el Compuesto I Forma III. El proceso comprende la etapa de calentar el Compuesto I Forma II hasta alrededor de 30 - 120°C, por lo cual el Compuesto I Forma III se forma.

La descripción proporciona en otra modalidad un proceso para hacer el Compuesto I D-tartrato como se describe arriba. El proceso comprende la etapa de poner en contacto ácido D-tartárico con una solución del Compuesto I en un solvente, por lo cual el Compuesto I D-tartrato se forma.

También se proporciona un proceso para hacer el Compuesto I Forma IV. El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma III con acetato de etilo.

En otra modalidad, la presente descripción proporciona un proceso para hacer el Compuesto I Forma V. El proceso comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma IV. El Compuesto I Forma V es un solvato de acetato de etilo parcial.

Otra modalidad es un proceso para hacer el Compuesto I Forma VI. El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma III con acetato de isopropilo.

Todavía otra modalidad es un proceso para hacer el Compuesto I Forma VII. El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma III con acetato de metilo.

Esta descripción proporciona en otra modalidad un proceso para hacer el Compuesto I Forma VIII. El proceso comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma VII.

Una modalidad es un proceso para hacer el Compuesto I Forma IX. El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma III con formiato de etilo.

Otra modalidad es un proceso para hacer el Compuesto I Forma X. El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma III con acetonitrilo.

Todavía otra modalidad es un proceso para hacer el Compuesto I Forma XI. El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma III con tetrahidrofurano.

Adicionalmente, la presente descripción proporciona un proceso para hacer el Compuesto I Forma XII. El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma III con metil etil cetona.

Otra modalidad es un proceso para hacer el Compuesto I Forma XIII-THF. El proceso comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma XI. El Compuesto I Forma XIII-THF es un solvato THF parcial.

También, la descripción proporciona un proceso para hacer el Compuesto I Forma XIII-MEK. El proceso comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma XII. El Compuesto I Forma XIII-MEK es un solvato MEK parcial.

En todavía otra modalidad, la presente descripción proporciona un proceso para hacer el Compuesto I Forma XIV.

El proceso comprende la etapa de poner en contacto el Compuesto I Forma VIII con metil tert-butil éter.

Además, la presente descripción proporciona un proceso para hacer el Compuesto I Forma XV. El proceso comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma X.

En todavía otra modalidad, la presente descripción proporciona un proceso para hacer Compuesto I amorfo como se indica en el Ejemplo 10.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La FIG.1 es una comparación entre los patrones XRPD del Compuesto I amorfo (curva inferior) y el Compuesto I Forma I (curva superior), respectivamente.

La FIG.2 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma I.

La FIG. 3 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma I.

La FIG.4 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma II.

La FIG. 5 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma II.

La FIG.6 compara los comportamientos de fotodegradación de Compuesto I amorfo (rayas verticales), Compuesto I Forma II (rayas horizontales), y una sal de clorohidrato parcialmente amorfo del Compuesto I (rayas diagonales) durante la fotoexposición en 0.9 M Lux-hrs. El grupo más a la izquierda de barras representa la disminución general en HPLC %AN de estas tres formas del Compuesto I. El grupo medio de barras representa la formación de una impureza de fotodegradación primaria que resulta de cada forma del Compuesto I. El grupo de barras más a la derecha representa similarmente la formación de una impureza de fotodegradación secundaria que se eluye con HPLC en un tiempo de retención relativo (RRT) 1.67.

La FIG.7 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma III.

La FIG. 8 es un gráfico de calorimetría de barrido diferencial combinado (DSC; curva inferior) y análisis termogravimétrico (TGA; curva superior) del Compuesto I Forma III.

La FIG.9 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I D-tartrato.

La FIG. 10 es un gráfico de calorimetría de barrido diferencial combinado (DSC; curva superior) y análisis termogravimétrico (TGA; curva inferior) del Compuesto I D-tartrato.

La FIG. 11 es un cuadro que compara velocidades de disolución entre Compuesto I amorfo (X), Compuesto I Forma II (·) , Compuesto I Forma III (¦), y Compuesto I D-tartrato (A) .

La FIG.12 es un cuadro que compara las velocidades de disolución entre muestras acuosas (pH 6) de Compuesto I amorfo (¦), una mezcla de Compuesto I amorfo y 0.1% (p/p) HPMC (?), Compuesto I D-tartrato (·), y Compuesto I D-tartrato con 0.1% (p/p) HPMC (O). Los gráficos para Compuesto I (¦) y Compuesto I D-tartrato (·) esencialmente se superponen en la escala vertical visualizada.

La FIG. 13 compara los comportamientos de fotodegradación de Compuesto I amorfo (rayas verticales), Compuesto I Forma III (rayas horizontales), Compuesto I Forma II (rayas diagonales), y Compuesto I D-tartrato (tablero de damas) durante la fotoexposición en 1.2 M Lux-hrs. El grupo más a la izquierda de barras representa la disminución general en HPLC %AN de estas cuatro formas de Compuesto I. El grupo medio de barras representa la formación de una impureza de fotodegradación primaria, que resulta de cada forma del Compuesto I. El grupo más a la derecha de barras similarmente representa la formación de una impureza de fotodegradación secundaria que eluye en HPLC en tiempo de retención relativo (TRR) 1.67.

La FIG.14 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma IV.

La FIG. 15 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma IV.

La FIG.16 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma V.

La FIG.17 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma VI.

La FIG. 18 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma VI.

La FIG.19 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma VII.

La FIG.20 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma VIII.

La FIG. 21 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma VIII.

La FIG.22 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma IX.

La FIG. 23 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma IX.

La FIG.24 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma X.

La FIG.25 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma XI.

La FIG.26 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma XII.

La FIG.27 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma XIII-THF.

La FIG. 28 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) de Compuesto I Forma XIII-THF.

La FIG.29 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma XIII-MEK.

La FIG. 30 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma XIII-MEK.

La FIG.31 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma XIV.

La FIG.32 es un patrón de difracción de polvo de rayos X del Compuesto I Forma XV.

La FIG. 33 es curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) del Compuesto I Forma XV.

La FIG.34 es una comparación entre los espectros de RMN en estado sólido 13C (ssRMN) de Compuesto I amorfo (curva superior) y Compuesto I D-tartrato (curva inferior), respectivamente.

La FIG. 35 es curva de calorimetría de barrido diferencial modulada (mDSC) de Compuesto I amorfo.

La FIG.36 es Espectros de Raman transformada de Fourier (FT-Raman) del Compuesto I amorfo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN El compuesto éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico (Compuesto I) es un inhibidor potente y selectivo de VHC NS5A.

Compuesto I Una modalidad es una forma amorfa del Compuesto I. Las propiedades fisicoquímicas de esta forma incluyen una temperatura de transición vitrea alta (Tg) de alrededor de 160°C y propiedades de polvo adecuadas para dosificación oral. En consecuencia, formulaciones en comprimido se desarrollaron usando esta forma como se discute en los Ejemplos 11 y 12 abajo. En algunas instancias, es deseable emplear una versión amorfa del fármaco para propiedades de solubilidad y biodisponibilidad mejoradas. En otros casos, es deseable tener el fármaco en forma cristalina para estabilidad mejorada.

Definiciones Como se usa en la presente especificación, las siguientes palabras y frases se destinan generalmente para tener los significados como se estableció abajo, excepto en la medida que el contexto en el cual se usan indique lo contrario.

El término "solvato" se refiere a un complejo formado por la combinación del Compuesto I y un solvente.

El término "desolvatado" se refiere a una forma de Compuesto I que es un solvato como se describe en la presente, y del cual las moléculas de solvente se han eliminado parcialmente o completamente. Las téenicas de desolvatación para producir formas desolvatadas incluyen, sin limitación, la exposición de una forma de Compuesto I (solvato) a un vacío, sometiendo el solvato a temperatura elevada, exponiendo al solvato a una corriente de gas, tal como aire o nitrógeno, o cualquier combinación de los mismos. Por lo tanto, una forma de Compuesto I desolvatado puede ser anhidro, esto es, completamente sin moléculas de solvente, o parcialmente solvatado en donde las moléculas de solvente se presentan en cantidades estoiquiométricas o no estoiquiométricas.

Cualquier fórmula o estructura dada en la presente, incluyendo el Compuesto I, también se pretende para representar formas no etiquetadas así como formas isotópicamente etiquetadas de los compuestos. Los compuestos isotópicamente etiquetados tienen estructuras representadas por las fórmulas dadas en la presente excepto que uno o más átomos se substituyen por un átomo que tiene una masa atómica seleccionada o número de masa. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en compuestos de la descripción incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tal como, pero no se limita a 2H (deuterio, D), 3H (tritio), C, 13C, 14C, 15N, 18F, 31P, 32P, 35S, 36C1 y 1 I. Di·versos compuestos isotópi,camente etiquetados de la presente descripción, por ejemplo aquellos en los cuales los isótopos radioactivos tal como 3H, 13C y 14C se incorporan.

Tales compuestos isotópicamente etiquetados pueden ser útiles en estudios metabólicos, estudios cinéticos de reacción, detección o téenicas de formación de imágenes, tal como tomografia por emisión de positrones (PET) o tomografía computarizada por emisión de fotón simple (SPECT) incluyendo ensayos de distribución de tejido de fármaco o substrato o en tratamiento radioactivo de pacientes.

La descripción también incluye Compuesto I en el cual desde 1 hasta "n" hidrógenos enlazados a un átomo de carbono se substituye(n) por deuterio, en el cual n es el número de hidrógenos en la molécula. Tales compuestos exhiben resistencia incrementada con el metabolismo y son por lo tanto útiles para incrementar la vida media de cualquier Compuesto I cuando se administra a un mamífero. Ver, por ejemplo, Foster, "Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism", Trends Pharmacol . Sci . 5(12):524-527 (1984). Tales compuestos se sintetizan por medios bien conocidos en la técnica, por ejemplo al emplear materiales de partida en los cuales uno o más átomos de hidrógeno se han reemplazado por deuterio.

Los compuestos terapéuticos substituidos o etiquetados por deuterio de la descripción pueden tener propiedades de DMPK mejoradas (metabolismo de fármaco y farmacocinéticos), relativas a la distribución, metabolismo y excreción (ADME). La substitución con isótopos más pesados tal como deuterio puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de estabilidad metabólica mayor, por ejemplo vida media in vivo incrementada o requerimientos de dosificación reducidos. Un compuesto etiquetado 18F puede ser útil para estudios de PET o SPECT. Los compuestos isotópicamente etiquetados de esta descripción y profármacos de los mismos se pueden generalmente preparar al llevar a cabo los procedimientos descritos en los esquemas o en los ejemplos y preparaciones descritas abajo al substituir un reactivo isotópicamente etiquetado fácilmente disponible por un reactivo no isotópicamente etiquetado. Además, la substitución con isótopos más pesados, particularmente deuterio (esto es, 2H o D) puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de estabilidad metabólica mayor, por ejemplo vida media in vivo incrementada o requerimientos de dosificación reducidos o una mejora en el indice terapéutico. Se entiende que deuterio en este contexto se considera como un sustituyente en el Compuesto I.

La concentración de un isótopo más pesado, específicamente deuterio, se puede definir por un factor de enriquecimiento isotópico. En los compuestos de esta descripción cualquier átomo no señalado específicamente como un isótopo particular se entiende para representar cualquier isótopo estable de ese átomo. A menos que se establezca de otra manera, cuando una posición se designa específicamente como "H" o "hidrógeno", la posición se entiende para tener hidrógeno en su composición isotópica de abundancia natural. En consecuencia, en los compuestos de esta descripción cualquier átomo específicamente designado como un deuterio (D) se entiende para representar deuterio.

El término "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a una cantidad que es suficiente para efectuar el tratamiento, como se define abajo, cuando se administra a un mamífero en necesidad de tal tratamiento. La cantidad terapéuticamente efectiva variará dependiendo del sujeto que está siendo tratado, el peso y la edad del sujeto, la severidad de la afección de la enfermedad, la forma de administración y similares, que puede fácilmente determinarse por uno de experiencia ordinaria en la téenica.

El término "alrededor de" se refiere a un intervalo de ±10%, a menos que se especifique de otra manera.

Además, las abreviaturas como se usan en la presente tienen significados respectivos como siguen Formas Sólidas del Compuesto I Como se describe generalmente arriba, la presente descripción proporciona formas cristalinas sólidas del Compuesto I designado como Formas I - XV y D-tartrato. Los inventores sorprendentemente descubrieron que estas formas dan lugar a un número de ventajas téenicas sobre la forma amorfa del Compuesto I como se ejemplifica, por ejemplo, a lo largo de los ejemplos de trabajo y figuras en la presente.

El Compuesto I Forma I se caracteriza por su difractograma de polvo de rayos X que comprende picos a 6.8, 12.5, y 19.8 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma comprende picos adicionales a 10.2, 11.1, y 23.8 °2q±0.2 °2q. La Forma I también se caracteriza por su difractograma de polvos de rayos X completo como substancialmente se muestra en la Figura 2.

En algunas modalidades, la Forma I se caracteriza por su curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una endotermia menor en alrededor de 12 °C y una endotermia mayor en alrededor de 162°C. La Forma I también se caracteriza por su curva DSC completa como substancialmente se muestra en la Figura 3.

El Compuesto I Forma II similarmente se caracteriza por su difractograma de polvo de rayos X que alcanza el máximo en 12.2, 12.7, y 20.5°2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma comprende picos característicos adicionales en 7.5, 11.4, y 20.0 O2q±0.2 °2q. Alternativamente, la Forma II se caracteriza por su difractograma de polvo de rayos X substancialmente como se muestra en la Figura 4.

En algunas modalidades, la Forma II se caracteriza por su curva DSC que comprende una endotermia en alrededor de 130°C. En otras modalidades, la Forma II se caracteriza por su curva DSC completa substancialmente como se muestra en la Figura 5.

El Compuesto I Forma III se caracteriza por su difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 12.4, 14.2, y 21.6 °2Q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma para la Forma III comprende picos característicos adicionales en 8.3, 15.0, y 20.4 O2q±0.2 °2q. La Forma III también se caracteriza por su difractograma de polvos de rayos X completo que es substancialmente como se muestra en la Figura 7.

En algunas modalidades, las Forma III se caracteriza por su curva DSC que comprende una endotermia en alrededor de 176°C. Alternativamente, la Forma III se caracteriza por su curva DSC completa como substancialmente se muestra en la Figura 8.

El Compuesto I D-tartrato cristalino de acuerdo a esta descripción se caracteriza en una modalidad por su difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 4.0, 10.3, y 19.7 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. Los picos de caracterización adicionales ocurren en 9.1, 12.7, y 24.0 O2q±0.2 °2q. Alternativamente, el Compuesto I D-tartrato se caracteriza por su difractograma de polvos de rayos X completo como substancialmente se muestra en la Figura 9.

En algunas modalidades, el Compuesto I D-tartrato se caracteriza por su curva DSC que comprende una endotermia en alrededor de 221°C. Alternativamente, el Compuesto I D-tartrato se caracteriza por su curva DSC completa como substancialmente se muestra en la Figura 10.

El Compuesto I Forma IV se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 15.1, 17.2, y 21.5°2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. Los picos de caracterización adicionales ocurren en 5.6, 13.5, y 25.8 O2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma IV es además caracterizado por su difractograma XRPD como substancialmente se muestra en la Figura 14.

Alternativamente, el Compuesto I Forma IV se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una endotermia en alrededor de 167°C. El Compuesto I Forma IV también se caracteriza por su curva DSC completa como substancialmente se muestra en la Figura 15.

El Compuesto I Forma V se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos de caracterización en 14.4, 15.3, y 17.4 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 8.6, 11.8, y 18.9 O2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma V también se caracteriza por su difractograma XRPD completo como substancialmente se muestra en la Figura 16.

El Compuesto I Forma VI se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 5.6, 13.3, y 21.1 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 13.8, 14.8, y 16.9 O2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma VI también se caracteriza por su difractograma completo substancialmente como se muestra en la Figura 17.

Alternativamente, el Compuesto I Forma VI se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una endotermia en alrededor de 168°C. Además, la Forma VI se caracteriza por su curva DSC completa substancialmente como se muestra en la Figura 18.

El Compuesto I Forma VII se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 11.0, 13.8, y 22.2 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 17.0, 19.0, y 19.4 O2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma VII también se caracteriza por su difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 19.

El Compuesto I Forma VIII se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 9.4, 15.5, y 17.5 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 14.6, 12.2, y 18.8 °2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma VIII también se caracteriza por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 20.

Alternativamente, el Compuesto I Forma VIII se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una endotermia en alrededor de 171°C. La Forma VIII también se caracteriza por una curva DSC substancialmente como se muestra en la Figura 21.

El Compuesto I Forma IX se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 13.8, 19.2, y 22.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 8.2, 11.0, y 17.1 O2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma IX es además caracterizado por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 22.

Alternativamente, el Compuesto I Forma IX se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una endotermia en alrededor de 177°C. La Forma IX también se caracteriza por una curva DSC substancialmente como se muestra en la Figura 23.

El Compuesto I Forma X se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 3.4, 6.9, y 10.3 O2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 11.2, 20.0, y 22.4 °2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma X es adicionalmente caracterizado por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 24.

El Compuesto I Forma XI se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 3.2, 6.3, y 9.5 °2Q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 19.1, 20.6, y 22.5 O2q±0.2 °2Q. El Compuesto I Forma XI también se caracteriza por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 25.

El Compuesto I Forma XII se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 3.2, 6.4, y 20.6 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 9.6, 18.1, y 22.5 °2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma XII también se caracteriza por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 26.

El Compuesto I Forma XIII-THF se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 3.2, 3.5, y 7.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 8.6, 12.1, y 19.8 O2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma XIII-THF también se caracteriza por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 27.

Alternativamente, el Compuesto I Forma XIII-THF se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende endotermias en alrededor de 155°C y 173°C. La Forma XIII-THF también se caracteriza por su curva DSC substancialmente como se muestra en la Figura 28.

El Compuesto I Forma XIII-MEK se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 3.2, 3.5, y 7.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 8.6, 12.1, y 19.8 O2q±0.2 °2Q. El Compuesto I Forma XIII-MEK es adicionalmente caracterizado por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 29.

Alternativamente, el Compuesto I Forma XIII-MEK se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende endotermias en alrededor de 155°C y 173°C. La Forma XIII-MEK también se caracteriza por su curva DSC substancialmente como se muestra en la Figura 30.

El Compuesto I Forma XIV se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 6.9, 10.3, y 22.4 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 3.4, 11.2, y 20.1 O2q±0.2 °2q. El Compuesto I Forma XIV también se caracteriza por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 31.

El Compuesto I Forma XV se caracteriza por un difractograma de polvo de rayos X que comprende picos en 12.1, 12.8, y 20.8 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á. El difractograma además comprende picos en 9.1, 10.9, y 21.3 °2q±0.2 °2q. La Forma XV adicionalmente se caracteriza por un difractograma XRPD substancialmente como se muestra en la Figura 32.

Alternativamente, el Compuesto I Forma XV se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una endotermia en alrededor de 180°C. El Compuesto I Forma XV es además caracterizado por su curva DSC substancialmente como se muestra en la Figura 33.

El Compuesto I amorfo se caracteriza por una temperatura de transición vitrea (Tg) de alrededor de 160°C. El Compuesto I amorfo no tiene un punto de fusión definido y la descomposición ocurre en temperaturas por arriba de 200°C. Es higroscópico como se determina por sorción de vapor dinámico, que muestra una ganancia de peso máximo de 5.4% en 90% de humedad relativa. Esto no experimenta transformación de fase inducida por humedad en cualquier nivel de humedad.

Alternativamente, el Compuesto I amorfo se caracteriza por espectros de RMN de estado sólido 13C (ssRMN) como substancialmente se muestra por la curva superior en la Figura 34.

Alternativamente, el Compuesto I amorfo se caracteriza por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una temperatura de transición vitrea de alrededor de 160 °C. El Compuesto I amorfo es también caracterizado por su curva DSC completa substancialmente como se muestra en la Figura 35.

Alternativamente, el Compuesto I amorfo se caracteriza por espectros de Raman transformada de Fourier (FT-Raman) que comprenden picos en 939 y 1552 cm-1. El Compuesto I amorfo también se caracteriza por sus espectros de FT-Raman completos substancialmente como se muestra en la Figura 36.

Formulaciones farmacéuticas Las formas del compuesto I de esta descripción se formulan con portadores convencionales y excipientes, que se seleccionarán de acuerdo con la práctica ordinaria. Los comprimidos contendrán excipientes, deslizantes, rellenos, aglutinantes y similares. Las formulaciones acuosas se preparan en forma estéril, y cuando están previstas para suministrar por diferente de administración oral generalmente serán isotónicas. Todas las formulaciones opcionalmente contendrán excipientes tal como, por ejemplo, aquellos establecidos en el Handbook of Pharmaceutical Excipients (1986). Los excipientes incluyen ácido ascórbico y otros antioxidantes, agentes quelantes tal como, por ejemplo, EDTA, carbohidratos tal como, por ejemplo, dextrina, hidroxialquilcelulosa, hidroxialquilmetilcelulosa, ácido esteárico y similares. El pH de las formulaciones varia desde alrededor de 3 hasta alrededor de 11, pero es ordinariamente alrededor de 7 hasta 10. Típicamente, la forma del compuesto I se administrará en una dosis desde 0.01 miligramos hasta 2 grames. En una modalidad, la dosis será desde alrededor de 10 miligramos hasta 450 miligramos. Se contempla que la forma del compuesto I se puede administrar una vez, dos veces o tres veces al día.

Si bien es posible que los ingredientes activos se administren solos puede ser preferible presentarlos como formulaciones farmacéuticas. Las formulaciones, tanto para uso veterinario como humano, de la descripción comprenden al menos un ingrediente activo, como se define arriba, junto con uno o más portadores aceptables por lo tanto y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos. Los portadores deben ser "aceptables" en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la formulación y fisiológicamente inocuos para el receptor de los mismos.

Las formulaciones incluyen aquellas adecuadas para las vías de administración anteriores. Las formulaciones se pueden presentar convenientemente en forma de dosificación unitaria y se pueden preparar por cualquiera de los métodos bien conocidos en la téenica de la farmacia. Las técnicas y formulaciones generalmente se encuentran en Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA). Tales métodos incluyen la etapa de poner en asociación el ingrediente activo con el portador que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general las formulaciones se preparan al poner uniformemente e intimamente en asociación el ingrediente activo con portadores líquidos o portadores sólidos finamente divididos o ambos, y luego, si es necesario, conformando el producto.

Las formulaciones de la presente descripción adecuadas para administración oral se pueden presentar como unidades discretas tal como, por ejemplo, capsulas, sellos o comprimidos que contiene cada uno una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como un polvo o gránulos; como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión líquida aceite en agua o una emulsión líquida agua en aceite. El ingrediente activo también se puede administrar como un bolo, electuario o pasta.

Un comprimido se hace por compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos que se comprimieron se pueden preparar al comprimir en una máquina adecuada el ingrediente activo en una forma de flujo libre tal como, por ejemplo, un polvo o gránulos, opcionalmente mezclados con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, o conservador. Los comprimidos moldeados se pueden hacer al moldear en una máquina adecuada una mezcla del ingrediente activo en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Los comprimidos se pueden recubrir o registrar opcionalmente y opcionalmente se formulan a fin de proporcionar liberación lenta o controlada del ingrediente activo del mismo.

Para la administración al ojo u otros tejidos externos por ejemplo, boca y piel, las formulaciones se aplican preferiblemente como un ungüento tópico o crema que contiene los ingredientes activos en una cantidad de, por ejemplo, 0.075 hasta 20% p/p (incluyendo ingredientes activos en un intervalo entre 0.1% y 20% en incrementos de 0.1% p/p tal como, por ejemplo, 0.6% p/p, 0.7% p/p, etc.), preferiblemente 0.2 hasta 15% p/p y más preferiblemente 0.5 hasta 10% p/p. Cuando se formula un ungüento, los ingredientes activos se pueden emplear con ya sea una base parafinica o un ungüento soluble en agua. Alternativamente, los ingredientes activos se pueden formular en una crema con una base de crema de aceite en agua.

Si se desea, la fase acuosa de la base de crema puede incluir, por ejemplo, al menos 30% p/p de un alcohol polihídrico, esto es un alcohol que tiene dos o más grupos hidroxilo tal como, por ejemplo, propilen glicol, butano 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol y polietilen glicol (incluyendo PEG 400) y mezclas de los mismos. Las formulaciones tópicas pueden incluir deseablemente una forma del Compuesto I que mejora la absorción o penetración del ingrediente activo a través de la piel u otras áreas afectadas. Los ejemplos de tales potenciadores de penetración dérmica incluyen sulfóxido de dimetilo y análogos liberados.

La fase aceitosa de las emulsiones de esta descripción se puede constituir de ingredientes conocidos de una manera conocida. Mientras que la fase puede comprender meramente un emulsionante (conocido de otra manera como un emulgente), deseablemente comprende una mezcla de al menos un emulsionante con una grasa o un aceite o con tanto una grasa como un aceite. Preferiblemente, un emulsionante hidrofilico se incluye junto con un emulsionante lipofílico que actúa como un estabilizador. También se prefiere incluir tanto un aceite como una grasa. Juntos, los emulsionantes con o sin estabilizadores componen la llamada cera emulsionante, y la cera junto con el aceite y grasa componen la llamada base de ungüento emulsionante que forma la fase dispersa aceitosa de las formulaciones de crema.

Los emulgentes y estabilizadores de emulsión adecuados para usar en la formulación de la descripción incluyen Tween® 60, Span® 80, alcohol de cetoestearilo, alcohol de bencilo, alcohol de miristilo, mono-estearato de glicerilo y lauril sulfato de sodio.

La elección de aceites o grasas adecuados para la formulación se basa en alcanzar las propiedades cosméticas deseadas. La crema preferiblemente debe ser un producto sin grasa, sin coloración y lavable con consistencia adecuada para evitar fugas de tubos u otros recipientes. Los ásteres de alquilo mono o dibásicos, de cadena recta o ramificada tal como, por ejemplo, di-isoadipato, estearato de isocetilo, propilen glicol diéster de ácidos grasos de coco, miristato de isopropilo, oleato de decilo, palmitato de isopropilo, estearato de butilo, 2-etilhexil palmitato o una mezcla de ásteres de cadena ramificada conocida como Crodamol CAP se puede usar, los últimos tres siendo ásteres preferidos. Estos se pueden usar solo o en combinación dependiendo de las propiedades requeridas. Alternativamente, los lipidos de alto punto de fusión tal como, por ejemplo, parafina suave blanca y/o parafina liquida u otros aceites minerales se usan.

Las formulaciones farmacéuticas de acuerdo a la presente descripción comprenden una o más formas del Compuesto I de la descripción junto con uno o más portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables y opcionalmente otros agentes terapéuticos. Las formulaciones farmacéuticas que contienen el ingrediente activo pueden ser en cualquier forma adecuada para el método previsto de administración. Cuando se usa para uso oral por ejemplo, comprimidos, pastillas, pildoras, suspensiones acuosas o aceitosas, emulsiones, capsulas duras o suaves, jarabes o elixires se pueden preparar. Las composiciones previstas para uso oral se pueden preparar de acuerdo a cualquier método conocido en la téenica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y tales composiciones pueden contener uno o más agentes incluyendo agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservadores, con objeto de proporcionar una preparación agradable al paladar. Los comprimidos que contienen el ingrediente activo en mezcla con excipiente farmacéuticamente aceptable no tóxico que son adecuados para la fabricación de comprimidos son aceptables. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tal como, por ejemplo, carbonato de calcio o sodio, lactosa, monohidrato de lactosa, croscarmelosa de sodio, povidona, fosfato de calcio o sodio; agentes de granulación y desintegrantes, tal como, por ejemplo, almidón de maíz, o ácido algínico; agentes de enlace, tal como, por ejemplo, celulosa, celulosa microcristalina, almidón, gelatina o acacia; y agentes lubricantes, tal como, por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden ser no recubiertos o pueden ser recubiertos por téenicas conocidas incluyendo microencapsulación para retardar la desintegración y adsorción en el tracto gastrointestinal y de este modo proporcionar una acción sostenida durante un periodo más largo. Por ejemplo, un material de retardo de tiempo tal como, por ejemplo, monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con una cera se pueden emplear.

Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar como capsulas de gelatina dura donde el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo fosfato de calcio o caolín, o como capsulas de gelatina suave en donde el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio de aceite, tal como, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

Las suspensiones acuosas de la descripción contienen los materiales activos en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes incluyen un agente de suspensión, tal como, por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropil metilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma acacia, y agentes de dispersión o humectantes tal como, por ejemplo, un fosfátido que se presenta naturalmente (por ejemplo, lecitina), un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso (por ejemplo, estearato de polioxietileno), un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga (por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol), un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un anhídrido de hexitol (por ejemplo, polioxietileno sorbitan monooleato). La suspensión acuosa también puede contener uno o más conservadores tal como, por ejemplo, etil o n-propil p-hidroxi-benzoato, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes y uno o más agentes edulcorantes, tal como, por ejemplo, sacarosa o sacarina.

Las suspensiones aceitosas se pueden formular al suspender el ingrediente activo en un aceite vegetal, tal como, por ejemplo, aceite de cacahuate, aceite de oliva, aceite de ajonjolí o aceite de coco, o en un aceite de mineral tal como, por ejemplo, parafina líquida. Las suspensiones orales pueden contener un agente espesante, tal como, por ejemplo, cera de abeja, parafina dura o alcohol de cetilo. Los agentes edulcorantes, tal como, por ejemplo, aquellos establecidos arriba, y agentes saborizantes se pueden agregar para proporcionar una preparación oral agradable al paladar. Estas composiciones se pueden conservar por la adición de un antioxidante tal como, por ejemplo, ácido ascórbico.

Los gránulos de la descripción adecuados para la preparación de una suspensión acuosa por la adición de agua proporciona el ingrediente activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión, y uno o más conservadores. Los agentes de dispersión o humectantes adecuados y agentes de suspensión se ejemplifican por aquellos descritos arriba. Los excipientes adicionales, por ejemplo edulcorantes, saborizantes y agentes colorantes, también se pueden presentar.

Las composiciones farmacéuticas de la descripción también pueden ser en la forma de emulsiones aceite en agua. La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal, tal como, por ejemplo, aceite de oliva o aceite de maní, un aceite mineral, tal como, por ejemplo, parafina liquida, o una mezcla de estas. Los agentes emulsificantes adecuados incluyen gomas que se presentan naturalmente, tal como, por ejemplo, goma acacia y goma de tragacanto, fosfátidos que se presentan naturalmente, tal como, por ejemplo, lecitina de soya, ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, tal como, por ejemplo, monooleato de sorbitan, y productos de condensación de estos ésteres parciales con óxido de etileno, tal como, por ejemplo, polioxietileno sorbitan monooleato. La emulsión también puede contener edulcorantes y agentes saborizantes. Los jarabes y elíxires se pueden formular con agentes edulcorantes, tal como, por ejemplo, glicerol, sorbitol o sacarosa. Tales formulaciones también pueden contener un emoliente, un conservador, un saborizante o un agente colorante.

Las composiciones farmacéuticas de la descripción pueden ser en la forma de una preparación inyectable estéril, tal como, por ejemplo, una suspensión acuosa inyectable estéril u oleaginosa. Esta suspensión se puede formular de acuerdo a la téenica conocida usando aquellos agentes de dispersión o humectantes adecuados y agentes de suspensión que se han mencionado arriba. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución inyectable estéril o suspensión en un solvente o diluyente parenteralmente aceptable no tóxico, tal como, por ejemplo, una solución en 1,3-butano-diol o preparado como un polvo liofilizado. Entre los vehículos y solventes aceptables que se pueden emplear son agua, solución de Ringer y solución de cloruro de sodio isotónico. Además, aceites fijos estériles se pueden emplear convencionalmente como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito cualquier aceite fijo blando se pueden emplear incluyendo mono- o digliceridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tal como, por ejemplo, ácido oléico se pueden usar si ilarmente en la preparación de inyectables.

La cantidad de ingrediente activo que se puede combinar con el material portador para producir una forma de dosificación simple variará dependiendo del hospedero tratado y el modo particular de administración. Por ejemplo, una formulación de liberación prolongada prevista para administración oral a humanos puede contener aproximadamente 1 hasta 1000 mg de material activo compuesto con una cantidad apropiada y conveniente de material portador que puede variar desde alrededor de 5 hasta alrededor de 95% de las composiciones totales (peso:peso). La composición farmacéutica se puede preparar para proporcionar cantidades fácilmente medióles para administración. Por ejemplo, una solución acuosa prevista para infusión intravenosa puede contener desde alrededor de 3 hasta 500 mg del ingrediente activo por mililitro de solución con el fin de que la infusión de un volumen adecuado en una velocidad de alrededor de 30 mL/hr puede ocurrir.

Las formulaciones adecuadas para la administración al ojo incluyen gotas para los ojos en donde el ingrediente activo se disuelve o suspende en un portador adecuado, especialmente un solvente acuoso para el ingrediente activo. El ingrediente activo se presenta preferiblemente en tales formulaciones en una concentración de 0.5 hasta 20%, ventajosamente 0.5 hasta 10%, particularmente alrededor de 1.5% p/p.

Las formulaciones adecuadas para administración tópica en la boca incluyen pildoras que comprenden el ingrediente activo en una base condimentada, usualmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte tal como, por ejemplo, gelatina y glicerina, o sacarosa y acacia; y enjuagues que comprenden el ingrediente activo en un portador liquido adecuado.

Las formulaciones para administración rectal se pueden presentar como un supositorio con una base adecuada que comprende por ejemplo manteca de cacao o un salicilato.

Las formulaciones adecuadas para la administración intrapulmonar o nasal tienen un tamaño de partícula por ejemplo en el intervalo de 0.1 hasta 500 micrones (incluyendo tamaño de partículas en un intervalo entre 0.1 y 500 micrones en incrementos de micrones tal como, por ejemplo, 0.5, 1, 30 micrones, 35 micrones, etc.), que se administra por inhalación rápida a través del paso nasal o por inhalación a través de la boca con el fin de alcanzar los sacos alveolares. Las formulaciones adecuadas incluyen soluciones acuosas o aceitosas del ingrediente activo. Las formulaciones adecuadas para administración en aerosol o polvo seco se pueden preparar de acuerdo a métodos convencionales y se pueden suministrar con otros agentes terapéuticos tal como, por ejemplo, compuestos hasta ahora usados en el tratamiento o profilaxis de afecciones asociadas con actividad de VHC.

Las formulaciones adecuadas para administración vaginal se pueden presentar como pesarlos, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en rocío que contienen además del ingrediente activo tales portadores como se conocen en la téenica por ser apropiados.

Las formulaciones adecuadas para administración parenteral incluyen soluciones de inyección estéril acuosas y no acuosas que pueden contener anti-oxidantes, soluciones amortiguadoras, bacteriostáticos y solutos que hacen la formulación isotónica con la sangre del recipiente previsto; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes.

Las formulaciones se presentan en recipientes de dosis unitaria o dosis múltiples, por ejemplo ampollas selladas y viales, y se pueden almacenar en una condición de secado por congelación (liofilizado) que requiere únicamente la adición del portador liquido estéril, por ejemplo agua para inyección, inmediatamente antes de usar. Las soluciones de inyección extemporánea y suspensiones se preparan de polvos estériles, gránulos y comprimidos de la clase previamente descrita. Las formulaciones de dosificación unitaria preferida son aquellas que contienen una dosis diaria o sub-dosis diaria unitaria, como se indica en la presente arriba, o una fracción apropiada de la misma, del ingrediente activo.

Se debe entender que además de los ingredientes particularmente mencionados arriba las formulaciones de esta descripción pueden incluir otros agentes convencionales en la téenica teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo aquellos adecuados para la administración oral pueden incluir agentes saborizantes.

La descripción además proporciona por lo tanto, composiciones veterinarias que comprenden al menos un ingrediente activo como se define arriba junto con un portador veterinario.

Los portadores veterinarios son materiales útiles para el propósito de administrar la composición y pueden ser materiales sólidos, líquidos o gaseosos que son de otro modo inertes o aceptables en la téenica veterinaria y son compatibles con el ingrediente activo. Estas composiciones veterinarias se pueden administrar oralmente, parenteralmente o por cualquier otra vía deseada.

Las formas del Compuesto I de la descripción también se pueden formular para proporcionar liberación controlada del ingrediente activo para permitir dosificación menos frecuente o para mejorar el perfil farmacocinético o toxicidad del ingrediente activo. En consecuencia, la descripción también proporciona composiciones que comprenden una o más formas del Compuesto I de la descripción formulada para liberación sostenida o controlada.

La dosis efectiva del ingrediente activo depende al menos de la naturaleza de la afección que se trata, toxicidad, si el compuesto está siendo usado profilácticamente (dosis inferiores), el método de suministro, y la formulación farmacéutica, y se determinará por el personal clínico usando estudios de aumento de dosis convencionales.

En una modalidad, la presente descripción proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste del Compuesto I Forma I, Compuesto I Forma II, Compuesto I Forma III, Compuesto I D-tartrato, Compuesto I Forma IV, Compuesto I Forma V, Compuesto I Forma VI, Compuesto I Forma VII, Compuesto I Forma VIII, Compuesto I Forma IX, Compuesto I Forma X, Compuesto I Forma XI, Compuesto I Forma XII, Compuesto I Forma XIII-THF, Compuesto I Forma XIII-MEK, Compuesto I Forma XIV, y Compuesto I Forma XV y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

En otra modalidad, la presente descripción proporciona una composición farmacéutica que comprende éster de metilo del ácido 1- {3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico amorfo, caracterizado por una temperatura de transición vitrea (Tg) de alrededor de 160°C y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Los ejemplos representativos de las formulaciones farmacéuticas de las formas del Compuesto I se discuten en los Ejemplos 11 y 12.

Métodos de Uso Las formas sólidas del Compuesto I descritas en la presente se administran a un sujeto que padece de virus de hepatitis C (VHC) en ya sea dosis simple o múltiple por cualquiera de los modos aceptados de administración conocidos por los que son expertos en la téenica. Las vías de administración incluyen, por ejemplo, aquellas descritas en cualquiera de las patentes y solicitudes de patente incorporadas como referencia, tal como vías rectal, bucal, intranasal y transdérmico, por inyección intra-arterial, intravenosamente, intraperitonealmente, parenteralmente, intramuscularmente, subcutáneamente, oralmente, tópicamente, como un inhalante, o por medio de un dispositivo impregnado o recubierto tal como una endoprótesis vascular, por ejemplo, o un polímero cilindrico insertado en la arteria.

La administración oral se puede llevar a cabo al suministrar cualquiera de las formas del Compuesto I por cápsula o comprimidos recubiertos entéricos, o similares.

Las formas del Compuesto I también se pueden administrar por dispositivos de suministro transdérmico ("parches"). Tales parches transdérmicos se pueden usar para proporcionar infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente descripción en cantidades controladas. La construcción y uso de parches transdérmicos para el suministro de agentes farmacéuticos es bien conocido en la téenica. Ver, por ejemplo, las Patentes de E.U.A. Nos. 5,023,252, 4,992,445 y 5,001,139. Tales parches se pueden construir para suministro continuo, pulsátil, o bajo demanda de agentes farmacéuticos.

Los compuestos se formulan preferiblemente en una forma de dosificación unitaria. El término "formas de dosificación unitarias" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad contiene una cantidad predeterminada de material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado. Los compuestos se administran generalmente en una cantidad farmacéuticamente efectiva.

Para la administración oral, cada unidad de dosificación típicamente contiene desde 1 mg hasta 2 g de un compuesto descrito en la presente. Se entenderá, sin embargo, que la cantidad del compuesto actualmente administrado usualmente se determinará por un médico, a la luz de las circunstancias relevantes, incluyendo la afección a tratarse, la vía elegida de administración, el compuesto actual administrado y su actividad relativa, la edad, peso, y respuesta del paciente individual, la severidad de los síntomas del paciente, y similares.

Terapia de Combinación Los sujetos que reciben tratamiento por administración de las formas del Compuesto I descritas en la presente descripción pueden beneficiarse del tratamiento con agentes terapéuticos adicionales que son efectivos en tratar VHC, o mejoran el efecto terapéutico anti-VHC de las formas del Compuesto, de acuerdo con algunas modalidades. Los agentes terapéuticos adicionales que son útiles para este propósito incluyen, pero no se limitan a, ribavirina, La presente descripción no se debe limitar en alcance por las modalidades especificas descritas en los ejemplos, que se pretende que sean ilustraciones de unas pocas modalidades de la descripción, ni es la descripción para limitarse por cualquiera de las modalidades que son funcionalmente equivalentes dentro del alcance de esta descripción. En efecto, diversas modificaciones de la descripción además de aquellas mostradas y descritas en la presente se harán evidentes para aquellos expertos en la téenica y se destinan para caer dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas. Para tal fin, se debe notar que uno o más átomos de hidrógeno o grupos de metilo se pueden omitir de las estructuras dibujadas consistentes con notación abreviada aceptada de tales compuestos orgánicos, y que un experto en la técnica de la química orgánica apreciará fácilmente su presencia.

EJEMPLOS Ejemplo 1: Preparación de solvato de diacetona del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.l]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico (Compuesto I Forma I).

Aproximadamente 15-60 mg de éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo [2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico amorfo (Pureza HPLC de 99.3%) se pesaron y transfirieron a un vial equipado con una mini barra de agitación magnética. La acetona se agregó en incrementos de 200 mL que resultan en la formación de una mezcla espesa. La mezcla espesa se permitió para agitar por dos semanas a temperatura ambiente (~22°C) y examinó periódicamente.

Después de dos semanas, una muestra de 300 mL de la mezcla espesa se removió del vial, se transfirió a un filtro centrifugo (Costar, 0.45 micrón) y centrifugó a 1000 rpm por 2 minutos. El sólido en la forma de torta húmeda se analizaron usando análisis XRPD (difractómetro en polvo de rayos X PANalytical X'Pert PRO). Este difractómetro usa radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, y opera bajo modo de reflexión. El intervalo de exploración es desde 2 hasta 40 grados 2 theta. El tamaño de la etapa es 0.008° en una velocidad de exploración de 0.13°/s, que da alrededor de 5 min por exploración. Después secar al aire la muestra pequeña, el análisis XRPD se realizó nuevamente para monitorear cualquier cambio en el patrón de difracción entre el material húmedo o seco. El análisis termogravimétrico (TGA) se llevó a cabo en la solución saturada para determinar la solubilidad de los sólidos de equilibrio en el solvente cuando el sólido apareció para ser cristalino.

Los resultados de estos análisis revelan que el Compuesto I transformado de un sólido amorfo a un material cristalino después de que se agitó en acetona por ~ 11 dias. Como se muestra en la Figura 1, el material sólido que está en equilibrio con la solución de acetona, cuando se filtra y seca suavemente durante menos de 1 hora, tiene un patrón XRPD distinto en comparación con el halo amplio por el material de partida amorfo. El patrón XRPD para el Compuesto I Forma I se muestra en la Figura 2 y los picos principales y sus intensidades relacionadas en el patrón XRPD se muestran en la Tabla 1 abajo.

Tabla 1 . Picos principales en el patrón XRPD para el Compuesto I Forma I La cristalinidad de la Forma I se confirmó además por una imagen Microscópica de Luz Polarizada (PLM) de los cristales.

El análisis HPLC muestra que la transformación del Compuesto I desde amorfo hasta Forma I mejora él % de pureza AN desde 99.3% hasta 99.8%. Además la investigación muestra que el solvato de acetona ofrece capacidad de purga de impureza significativa en que la mezcla de reacción con 96- 97.5% AN antes de la cristalización se actualizó a ~99.6% AN cuando la Forma I se aisló. En consecuencia, la cristalización de Forma I se utilizó en escala para purificar el Compuesto I crudo antes de que el Compuesto I final se produce.

La curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) de la Forma I muestra que tras calentar este material cristalino tiene una endotermia menor a 124.20°C, que indica una desolvatación de acetona del cristal de solvato (Figura 3). Después de la endotermia de desolvatación, había una endotermia mayor en 162.43°C, que indica la fusión del sólido desolvatado. La curva de análisis termogravimétrico (TGA) de la Forma I muestra una pérdida de peso de 12.20% durante un intervalo de temperatura amplio de 50-130°C, lo que indica que la Forma I posiblemente tiene poca acetona débilmente enlazada mezclada con acetona fuertemente enlazada. La cantidad de pérdida de peso también indica que la Forma I es un solvato de diacetona ya que el contenido de acetona teórico por un solvato de monoacetona es 6.1%.

Ejemplo 2: Preparación de solvato de monoacetona del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico (Compuesto I Forma II).

El Compuesto I Forma II se preparó al desolvatar parcialmente la Forma I, como se describe más completamente abajo. Los métodos de desolvatación son bien conocidos por los que son expertos en la téenica. Estos incluyen, por ejemplo, la aplicación de un vacio, exposición prolongada a condiciones ambientales, someter la Forma I a temperatura elevada, y someter la Forma I a un flujo de gas, tal como aire o nitrógeno, y cualquier combinación de los mismos. En algunas modalidades, la preparación del Compuesto I Forma I como se describe arriba en el Ejemplo 1 resulta en la formación de cantidades detectables del Compuesto I Forma II. Por lo tanto, en estas modalidades, es posible preparar mezclas de la Forma I y la Forma II.

Como un ejemplo, los cristales de Compuesto I Forma I se secaron bajo un vacio a ~21°C durante 5 dias, después de Compuesto I Forma II formado. El patrón XRPD para Forma II es distinto de es para Forma I, como se muestra en la Figura 4. Los picos principales y sus intensidades relacionadas en el patrón XRPD se muestran en la Tabla 2 abajo.

Tabla 2. Picos principales en el patrón XRPD para Compuesto I Forma II La curva DSC de Forma II muestra una endotermia amplia a 130.27°C, que indica una desolvatación de acetona del cristal solvatado junto con la fusión en el mismo intervalo de temperatura (Figura 5). La curva TGA de la Forma II muestra una pérdida de peso de 7.7% durante un intervalo de temperatura amplio de 70-150°C, lo que indica que la Forma II tiene poca acetona débilmente enlazada mezclada con acetona fuertemente enlazada. La cantidad de pérdida de peso también indica que la Forma II es un solvato de monoacetona ya que el contenido de acetona teórico para un monosolvato de acetona es 6.1%. Ambos datos TGA y DSC muestran que la Forma II tiene una estructura razonablemente estable hacia tensión térmica.

La Forma II sorprendentemente exhibe fotoestabilidad mejorada comparada con el Compuesto I amorfo y una sal HCl parcialmente amorfa del Compuesto I. Por lo tanto, las muestras separadas de la Forma II, Compuesto I amorfo, y sal HC1 del Compuesto I parcialmente amorfo se fotoexpusieron en la cantidad de 0.9 M Lux-hrs. El análisis de HPLC de las muestras compara las cantidades de productos de fotodegradación en cada muestra. Como se muestra en la Figura 6, el grupo más a la izquierda de barras describe la disminución general en HPLC % de AN por Compuesto I en las tres diferentes formas sólidas mencionadas arriba. Por ejemplo, la Forma II del Compuesto I dio lugar a la cantidad más baja (2.24 %AN) de fotodegradación en este experimento.

El grupo medio y grupo más a la derecha de barras describe las cantidades de dos de las principales purezas de fotodegradación formadas después de las tres formas sólidas del Compuesto I se fotoexpusieron. Estas comparaciones demuestran que, en general, la Forma II exhibe la mejor fotoestabilidad entre las tres formas comparadas.

Ejemplo 3: Preparación de éster de metilo del ácido (l-{3-[6- <9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.l]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico (Compuesto I Forma III).

A pesar de las ventajas sorprendentes que la Forma II ofrece sobre el Compuesto I amorfo, todavía tiene una cantidad significativa de acetona fuertemente enlazada en su estructura. El propósito de este ejemplo es para romper el solvato y generar una forma cristalina anhidra.

Por lo tanto, los cristales de la Forma II se calentaron para secar completamente o para desolvatar a ~115°C, que resultan en el descubrimiento de una tercera forma cristalina, Forma III.

La formación de Forma III se reveló por un experimento XRPD de temperatura variable. En este experimento, una muestra de Forma II se calentó a 10°C/min iniciando desde 25°C. Después de cada aumento de la temperatura de 10°C, la muestra se mantuvo en la temperatura elevada por 20 min para permitir un patrón XRPD a generarse en esa temperatura. Este periodo de calentamiento y de espera se continuó hasta que la temperatura alcanza 205°C. Algunos patrones de XRPD en temperaturas seleccionadas comparados con los patrones XRPD de referencia para la Forma I, Forma II, y Forma III. Esta comparación muestra que la Forma II comienza a exhibir transformación sólido-sólido, tras el calentamiento, en temperaturas por arriba de 85°C, y conversión significativa alcanzada a 115°C, mientras que la conversión a Forma III se completó a 145°C. El patrón XPRD de la Forma III se muestra en la Figura 7. Los picos principales y sus intensidades relacionadas en el patrón XRPD se muestran en la Tabla 3 abajo.

Tabla 3. Picos principales en el patrón XRPD para el Compuesto I Forma III La Forma III comenzó a derretirse a 175°C, que se confirmó por la curva DSC de la forma III (Figura 8). La curva TGA de la Forma III, también mostrada en la Figura 8, indica que esta forma de cristal es anhidra. Los datos de sorción de vapor dinámico (DVS) muestran que la Forma III es no higroscópica, tomando menos de 0.3% de humedad en 90% de humedad relativa, como se compara con absorción de 5.6% de humedad por Compuesto I amorfo.

Ejemplo 4: Preparación de D-tartrato del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-me oxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.l]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico (Compuesto I D-tartrato) Aproximadamente 100-500 mg de Compuesto I Forma I se transfirió a cada uno de un conjunto de viales que contienen una barra de agitación magnética. A cada vial se le agregó aproximadamente 1.0-20 mL de acetonitrilo (ACN) o alcohol isopropilico (IPA) hasta que una solución clara se alcanzó. En un conjunto separado de viales, las soluciones de ACN clara o IPA de los ácidos enlistados en la Tabla 4 abajo se prepararon.

Cada una de las soluciones ácidas se agregó a una solución correspondiente del Compuesto I en una forma gota a gota hasta que 1 equivalente de ácido había sido. Si las suspensiones resultantes se observaron, se permitieron enfriar desde temperatura ambiente hasta ~0°C. Si las soluciones claras se observaron, se permitieron evaporar lentamente para evaluar la posible cristalización.

Entre los ácidos separados por exclusión, ácido L-tartárico y HCl aparecieron separadamente para reaccionar con el Compuesto I Forma I y dio señales débiles de cristalinidad, como se determina por PLM. Sin embargo, los productos sólidos de estas dos reacciones demostraron ser inestables y de cristalinidad perdida fácilmente tras la exposición a atmósfera ambiente.

Tabla 4. Sal Separada por Exclusión para Compuesto I Incluso con una separación por exclusión de forma cristalina a fondo por L-tartrato, ningún producto cristalino estable se produjo con éxito, como se resume abajo en la Tabla 5. La caracterización XRPD de diversas muestras que resulta de la separación por exclusión de forma estable para L-tartrato muestra que las muestras permanecen como sólidos amorfos en la mayoría de los solventes. En acetona, el Compuesto I se vuelve nuevamente a la Forma I de solvato de acetona como se describe arriba.

Tabla 5. Resumen de Separación Por Exclusión de Forma Cristalina para Compuesto I L-tartrato Siguiendo estas observaciones, el ácido D-tartárico se agregó a la lista de ácido. Por lo tanto, cuando una solución IPA de ácido D-tartárico se agregó a una solución de Compuesto I en IPA, una suspensión blanca se generó inmediatamente. Una muestra se filtró y caracterizó con XRPD, de acuerdo a parámetros descritos arriba, que mostró claramente un producto cristalino, D-tartrato de éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico (Compuesto I D-tartrato).

La Figura 9 muestra el patrón XRPD del Compuesto I D-tartrato. Los picos principales e intensidades relativas correspondientes en el diagrama de patrón XRPD se enlistan abajo en la Tabla 6 Tabla 6. Los Picos XRPD Principales para Compuesto I D-tartrato La cristalinidad del Compuesto I D-tartrato se confirmó además por una imagen Microscópica de Luz Polarizada (PLM) de los cristales.

La curva DSC del Compuesto I D-tartrato muestra que tras el calentamiento este material cristalino tiene una endotermia agudo en 221.08°C, que indica un evento de fusión clara (Figura 10). La curva TGA muestra mínima pérdida de peso, que indica que el Compuesto I D-tartrato es anhidro. Los datos de sorción de vapor dinámico (DVS) demuestra que el Compuesto I D-tartrato toma menos de 3% de humedad a 90% RH.

Ejemplo 5. Separación por Exclusión de Forma Estable para Compuesto I D-tartrato Las muestras del Compuesto I D-tartrato se sometieron a una separación por exclusión de una manera análoga al procedimiento descrito arriba en el Ejemplo 1. Los resultados para la separación por exclusión de forma estable del Compuesto I D-tartrato se resumen en la Tabla 7 abajo. La caracterización de XRPD de diversas muestras después de 2 semanas muestra que la forma física no cambió, y únicamente poca cristalinidad se perdió en la muestra de agua después de 2 semanas.

Tabla 7. Resumen de Separación por Exclusión de Forma Estable para el Compuesto I D-tartrato Ejemplo 6. Solubilidad Cinética y Evaluación de Fotoestabilidad del Compuesto I D-tartrato en Comparación con Otras Formas La velocidad de disolución del Compuesto I D-tartrato en agua en pH 3 es 5 hasta 10 veces más rápido que cualquier otra forma del Compuesto I descrito en la presente. El Compuesto I D-tartrato también resulta en incremento de solubilidad sostenida (~2x) por un periodo de tiempo prolongado. En contraste, el Compuesto I Forma II resulta en la velocidad de disolución más lenta. Estos resultados y otros se muestran en la Figura 11. Estos resultados muestran que el Compuesto I D-tartrato exhibe propiedades de disolución mejoradas en medios acuosos moderadamente ácidos.

Ya que la solubilidad del Compuesto I durante un intervalo de pH mayor es menor que alrededor de 1 mg/mL, un experimento adicional se llevó a cabo para evaluar la solubilidad cinética del Compuesto I en un pH más alto, aquí pH 6. En este experimento, las velocidades de disolución se midieron para muestras de Compuesto I amorfo y Compuesto I D-tartrato, y muestras de cada forma mezclada con 0.1% (p/p) hidroxipropilmetil celulosa (HPMC) en medios acuosos en pH 6. Como se muestra en la Figura 12, la presencia de HPMC mejora la disolución y solubilidad durante un periodo de 60 minutos. Específicamente, alrededor de una mejora de 100 veces se observó para la mezcla del Compuesto I D-tartrato y HPMC (solubilidad en estado estacionario = 0.02 pg/mL). Los resultados demuestran la ventaja potencial del D-tartrato sobre todas las formas de base libre del Compuesto I usando ciertas téenicas de formulación.

La degradación fotoquímica del Compuesto I se evaluó en una cámara de SUNtest durante 8 horas (1.2M lux-hrs). Los resultados muestran la presencia de un fotodegradante primario en solución, y por lo menos como un sólido (Figura 13). Un fotodegradante secundario en tiempo de retención relativo (TRR) 1.67 se formó por exposición de luz o exposición a oxidantes químicos (degradante DP primario). Los resultados muestran que la cristalización del Compuesto I resulta generalmente en estabilidad más robusta en presencia de luz. En particular, los resultados demuestran que el Compuesto I D-tartrato es la forma más robusta en presencia de luz relativa a otras formas del Compuesto I descritas en la presente.

Ejemplo 7: Separación por Exclusión Polimorfa El propósito de este ejemplo es para ilustrar la síntesis y caracterización de formas cristalinas adicionales del Compuesto I. Como se describe en detalle abajo, once formas de solvato adicionales y dos formas anhidras de Compuesto I se descubrieron en una separación por exclusión de forma estable. Las dos nuevas formas anhidras se generaron por desolvatación de las formas de solvato. Tras la exposición a solventes orgánicos, las formas anhidras se disuelven, se vuelven amorfas, o convierten a formas de solvato.

A. Separación Por Exclusión de Forma Estable De una manera análoga a esa descrita arriba en el Ejemplo 1, la separación por exclusión de forma estable se llevó a cabo al agitar 100 hasta 200 mg del Compuesto I Forma III en 2 mL de diversos solventes en temperatura ambiente (~ 22°C). Después de algunos dias, heptano se agregó como antisolvente a aquellas muestras que permanecen como soluciones. En los casos donde se formaron suspensiones espesas, las suspensiones espesas se muestrearon y centrifugaron por análisis XRPD, como se describe más completamente abajo. La Tabla 8 resume el resultado de la separación por exclusión de forma estable, indicando donde es aplicable la formación de una nueva forma del Compuesto I.

Tabla 8. Resultados de Separación por Exclusión Adicional de Forma Estable B. Desolvatación de los Solvatos del Compuesto I Los solvatos del compuesto I que se sintetizaron de la separación por exclusión polimorfa descrita arriba se desolvataron bajo diversas condiciones. Como un resultado, diversas formas adicionales del Compuesto I se encontraron. Las condiciones experimentales y resultados con base en datos TGA se resumen abajo en la Tabla 9, que indica donde es en su caso la formación de formas cristalinas del Compuesto I.

Tabla 9. Resultados de Desolvataclón de los Solvatos del Compuesto I C. Compatibilidad de Formas Anhidras del Compuesto I con Diversos Solventes Para explorar la posibilidad de cristalización directa de las formas solvatadas del Compuesto I resumidas arriba, las formas desolvatadas del Compuesto I se dispersaron individualmente en algunos solventes comúnmente usados. En general, se observó que las formas desolvatadas del Compuesto I no fueron compatibles con estos solventes, excepto para la Forma VIII en agua y heptano.

Además, el Compuesto I Forma VIII convierte en MTBE al Compuesto I Forma XIV, que exhibe un patrón XRPD similar a ese del Compuesto I Forma X (un solvato ACN). Por lo tanto, se concluyó que el solvato MTBE y solvato ACN son isoestructurales; sin embargo, estos dos solvatos se observaron para desolvatar a diferentes formas tras el secado: La Forma X desolvata la Forma XV y la Forma XIV desolvata la Forma VIII, como se describe arriba. La Tabla 10 abajo resume los resultados de experimentos acerca de las formas desolvatadas del Compuesto I.

Tabla 10. Formas Finales de Experimentos en los cuales las formas anhidras del Compuesto I se agitaron en diversos solventes Ejemplo 8: Caracterización de Formas del Compuesto I IV - XV Este ejemplo presenta detalles en datos de caracterización para Formas del Compuesto IIV - XV que se sintetizaron como se describe arriba.

A. Formas IV y V Los Cristales simples del Compuesto I Forma IV se sometieron a análisis de difracción de rayos X de cristal simple, los resultados de los cuales se resumen en la Tabla 11 abajo.

Tabla 11. Resumen del Análisis de Difracción de Rayos X de Cristal Sencillo del Compuesto I Forma IV El Compuesto I Forma IV es a tri-etil acetato solvato de acuerdo al XRD de cristal simple y fácilmente pierde EtOAc durante el secado. Por lo tanto, el Compuesto I Forma V se obtuvo cuando la forma IV se desolvató parcialmente a 40 -50°C bajo vacío. El análisis TGA muestra que la Forma V perdió 2.7% de masa cuando se calentó a 110°C, indicando que la Forma V similarmente es un solvato de acetato de etilo parcial. La Forma V se volvió amorfo tras el secado a 110°C. El punto de fusión de la Forma V es alrededor de 160°C.

Los patrones XRPD de las Formas IV y V se muestran en las Figuras 14 y 16, respectivamente. Los anuncios de pico de XRPD e intensidades relativas se tabulan abajo en las Tablas 12 y 13, respectivamente.

Tabla 12. XRPD Picos e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma IV Tabla 13. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma V La curva DSC para la Forma IV se muestra en la Figura 15. Además, los datos DVS muestran que la Forma V es no higroscópica.

B. Forma VI La Forma VI se obtuvo de IPAc siguiendo el procedimiento general resumido arriba. Los datos TGA muestran que la Forma VI es una forma solvatada (22.8% pérdida de peso a 135°C). Cuando la Forma VI se calentó, los picos XRPD se ampliaron pero no aparecieron nuevos picos, lo que sugiere que no había nuevas formas generadas tras el calentamiento. El difractograma XRPD se muestra en la Figura 17; los picos e intensidades relativas se tabulan en la Tabla 14 abajo. La curva DSC se muestra en la Figura 18.

Tabla 14. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma VI C. Formas VII y VIII El Compuesto I Forma VII se obtuvo de una solución de acetato de metilo del Compuesto I. La Forma VIII es un solvato de acetato de metilo, y desolvata para convertirse en Forma VIII, una forma anhidra. Los patrones XRPD de estas dos formas se muestran en las Figuras 19 y 20, respectivamente. Las Tablas 15 y 16 abajo tabulan los picos XRPD e intensidades relativas. Además, la Figura 18 muestra la curva DSC para la Forma VIII.

Tabla 15. Picos XRPD e Intensidades Relativas para el Compuesto I Forma VII Tabla 16. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma VIII Los datos TGA para la Forma VIII muestra una pequeña pérdida de peso debajo de 50°C incluso si la Forma VIII se secó a 50°C bajo vacio. El análisis Karl Fischer mostró un contenido de agua de 1.8% después de secar en un horno de vacio a 50°C, confirmando que la pérdida de peso se causó por pérdida de agua. La fuente de agua se cree que es la humedad en el aire durante la transferencia de material. Una prueba de mezcla espesa en agua muestra que la Forma VIII es estable en agua. Los datos DVS muestran que la Forma VIII absorbe aproximadamente un equivalente de agua, sugiriendo que la Forma VIII existe como un monohidrato en agua. Por lo tanto, una ventaja de la Forma VIII es que se puede obtener al desolvatar la forma VII en temperatura más baja, incluso a temperatura ambiente bajo condiciones de vacio.

D . Forma IX El Compuesto I Forma IX es forma de solvato que se obtiene en formiato de etilo. El difractograma XRPD se muestra en la Figura 22; Tabla 17 abajo tabula los picos XRPD e intensidades relativas.

Tabla 17. Picos XRPD e Intensidades Relativas para el Compuesto I Forma IX Los datos TGA muestran la Forma IX que pierde 5.9% de masa antes de la fusión; la curva DSC se muestra en la Figura 23. XRPD (Figura 27) muestra que esta forma se desolvata para convertirse en Forma VIII.

E. Formas X y XIV El Compuesto I Forma X es un solvato de acetonitrilo y la Forma XIV es un solvato MTBE. Las Formas X y XIV exhiben patrones XRPD muy similares, como se muestra en las Figuras 24 y 31, respectivamente. Los datos TGA para estas formas, sin embargo, son bastante diferentes. Tras el secado, la Forma X se convierte en Forma XV, una forma anhidra del Compuesto I como se describe más completamente abajo, y la Forma XIV se convierte en Forma VIII como se describe arriba. Las Tablas 18 y 19 abajo tabulan los picos XRPD e intensidades relativas para las Formas X y XIV, respectivamente.

Tabla 18. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma X Tabla 19. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma XIV F. Formas XI, XII, y XIII La Forma XI es un solvato THF y la forma XII es un solvato MEK. Las dos formas tienen patrones XRPD muy similares, como se muestra en las Figuras 24 y 25, respectivamente. Las Tablas 20 y 21 abajo tabulan los picos XRPD e intensidades relativas para las Formas XI y XII, respectivamente.

Tabla 20. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma XI Tabla 21. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma XII Tras el secado en un horno al vacío a temperatura ambiente, las Formas XI y XII parcialmente pierden sus solventes y se convierten en Forma XIII-THF y Forma XIII-MEK, respectivamente. El RMN de muestras secadas en horno al vacío de Forma XIII-THF y Forma XIII-MEK muestra la existencia de solventes en estas formas, ~0.9 y -1.1 de equivalente molar, respectivamente. Además, las curvas DSC para la Forma XIII-THF y Forma XIII-MEK son diferentes, como se muestra en las Figuras 28 y 30, respectivamente. Por lo tanto, se concluyó que las Formas XIII-THF y XIII-MEK son solvatos parciales de THF y MEK, respectivamente. El análisis XRPD demuestra que los solvatos parciales THF y MEK son idénticos, como se muestra en las Figuras 27 y 29, respectivamente. Los picos XRPD e intensidades relativas para Formas XIII-THF y XIII-MEK se tabulan abajo en la tabla 22.

Tabla 22. Los Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Formas XIII-THF y XIII-MEK F. Forma XV Como se mencionó arriba, el Compuesto I Forma X se convirtió a Forma XV tras el secado a temperatura ambiente bajo vacio. La Forma XV es una forma cristalina anhidra y no higroscópica del Compuesto I, como se muestra por los experimentos TGA y DVS. La Figura 32 representa el difractograma XRPD y la Tabla 23 abajo resume los picos principales y sus intensidades relativas.

Tabla 23. Picos XRPD e Intensidades Relativas para Compuesto I Forma XV La Forma XV exhibe un punto de fusión ligeramente más alto que otras Formas de Compuesto I descritas en la presente, de acuerdo a los datos DSC (Figura 38).

Ejemplo 9: Comparación de Formas del Compuesto II - XV En la Tabla 24 abajo, los datos TGA y DSC se compilan para todas las formas cristalinas del Compuesto I como se describe en la presente. El punto de fusión de las formas anhidras, III, V, VIII, XIV están todos en el intervalo 160-172°C. Las temperaturas de desolvatación difieren mucho.

Tabla 24. Comparación de Datos Térmicos para Formas del Compuesto II - XV Los datos de microscopía de luz polarizada (PLM) se adquirieron para la mayoría de las formas del Compuesto I descritas en la presente. Por ejemplo, los datos PLM para las Formas I, IV, VI, VII, IX, X, XI, y XII confirmaron que cada una de las formas existe como un sólido cristalino.

Ejemplo 10: Sintesis de Compuesto I amorfo Las siguientes etapas discuten la síntesis de Compuesto I amorfo. La sintesis de solvato de acetona del Compuesto I también se describe en la Solicitud de E.U.A. No. de Serie 61/655,935 presentada el 5 de junio de 2012, y la Solicitud de E.U.A. No. de Serie 13/800,202 presentada el 13 de marzo de 2013, que se incorporan en la presente como referencia.

I . Sintesis de Materiales de Partida A. Yodación de diol 6 para preparar 7a 6 10°C La trifenilfosfina (257.2 g) e imidazol (66.7 g) se cargaron a un reactor. DCM (490 mL) se cargó, la agitación se inició y la solución se enfrió a 0°C. El yodo (249.2 g) se agregó como un sólido en porciones durante 1 h mientras que mantiene la temperatura interna por debajo de 10°C. Al término de la adición, una solución de 6 (50 g) en DCM (113 L) se cargó lentamente al reactor durante 0.5 h mientras que mantiene la temperatura interna por debajo de 10°C. Después de agitar por 2.5 h, una solución acuosa de NaCl (25 g) en agua (225 mL) se cargó al reactor. Después de la separación de fase, la capa orgánica de fondo se diluyó con n-heptano (550 mL). La fase orgánica se lavó con una solución acuosa de sulfito de sodio (21 g) en agua (190 mL). Después de la separación de capa, la fase orgánica se concentró a 600 mL por medio de destilación al vacio. El n-heptano adicional (550 mL) se cargó, y la mezcla se concentró nuevamente a 600 mL por medio de destilación al vacio. La mezcla espesa resultante se filtró sobre un tapón de gel de sílice (85 g) que habla sido mezcla espesa empacada con n-heptano. El tapón de gel de sílice se enjuagó con n-heptano adicional (1 L), y el filtrado se concentró luego por medio de destilación al vacío para proporcionar el producto deseado 7a como un líquido incoloro (114 g, 70%). XH RMN (400 MHz, CDCl3) d 3.33 (s, 2H), 0.95 (s, 2H). 13C RMN (75 MHz, CDC13): 19.1, 22.7, 26.0.

B. Alquilacion de 8 para preparar 9 I ' El hidruro de sodio (60.0 g, 3 equivalentes, 60% de dispersión en aceite mineral) y dimetilacetamida (600 mL) se cargaron a un matraz y la temperatura de reacción se redujo a 0-10°C. El Compuesto 7a (191.6 g, 1 equivalente) se cargó a la solución NaH una vez que la temperatura interna fue aproximadamente 5°C. Una solución de compuesto 8a (121.0 g, 1 equivalente) en DMAC (600 mL) se agregó durante 3.5 h, manteniendo la temperatura interna entre 0-ll°C. La solución se agitó a 0-10°C y se tomaron muestras para la finalización de la reacción después de 1 h. La reacción se consideró completa cuando la cantidad restante de 8a fue menos de 3%. Al terminar, AcOH (50 mL, 1.5 equivalentes) se agregó lentamente durante 2-3 h mientras que se mantiene la temperatura entre 4-9°C. La solución se agitó por 12 h a 0-10°C. MTBE (1000 mL) y agua (700 L) se agregaron a la solución apagada. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con MTBE (400 mL). Las capas orgánicas se combinaron y lavaron una vez con una solución NaCl 15% (1000 mL), una vez con una solución de bicarbonato de sodio al 5% (900 mL) y una vez con una solución de salmuera (600 mL). La solución MTBE se concentró a un volumen mínimo. El aceite se redisolvió en ACN (400 mL) y se lavó con hexanos (200 mL). Las fases se separaron, la capa ACN se concentró a un volumen mínimo y la capa de hexanos se descartó. El producto 9a se aisló como un aceite amarillo (98 g, 61%). XH RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.45 (dd, J = 8.5, 3.7 Hz, 0.5H rotámero 1), 4.35 (dd, J = 8.4, 4.4 Hz, 0.5H rotámero 2), 4.27 - 4.11 (m, 2H), 3.44 - 3.29 (m, 2H), 2.26 (ddd, J = 12.7, 8.4, 4.1 Hz, 1H), 1.80 (ddd, J = 23.5, 12.6, 4.0 Hz, 1H), 1.58, 1.48 - 1.40 (m, 9H), 1.32 - 1.21 (m, 3H), 0.68 - 0.44 (m, 4H).

C. Hidrólisis de éster de etilo 9a MeTHF,H2O Boc 50°C Boc 9a 17 Se agregaron agua (910 mL), hidróxido de litio (284 g, 2.0 eq) y 2-MeTHF (2.0 L) a un matraz equipado con agitación superior, un termómetro interno y una línea de nitrógeno. Una solución del compuesto 9a (911 g) en 2-MeTHF (1.0L) se transfirió en el matraz que contiene el hidróxido de litio. La reacción se calentó a 50°C hasta que la reacción se consideró completa como se determina por el análisis HPLC. La reacción se enfrió a 22°C y agua (3.6 L) se agregó a la reacción. Las capas se dividieron y la capa acuosa del fondo se mantuvo mientras que la capa orgánica superior se eliminó. 2-MeTHF (4 L) y HCI concentrado (420 mL) se agregaron a la capa acuosa. Las capas se separaron y la capa acuosa del fondo se eliminó. La capa orgánica superior se concentró y el producto 17 aisló como un sólido blanco (596 g, 71%). Los datos de caracterización para 17 son los mismos como para el compuesto 4 descrito arriba.

D. Resolución Clásica l l Boc 17 18a 4 El ácido carboxilico racémico 17 (596 g) se disolvió en 2-Me-THF (6 L) y luego la solución homogénea se calentó a 55°C. El (1S, 2R) -amino-indanol (221 g, 0.6 eq) se agregó a la reacción en 3 porciones iguales 10 minutos aparte. La solución se sembró con sal 18a (0.6 g) después de que la primera porción se había agregado. Después de que la última porción de amina se agregó la solución se añejó a 55°C por 1 h. La mezcla espesa se enfrió luego a 22°C en una velocidad de ~15 grados por hora. Una vez que la mezcla espesa había alcanzado la temperatura ambiente esto se filtró y la torta se lavó una vez con 2-Me-THF (1.2 L). Los sólidos se secaron a 45°C en un horno de vacío por 24 h. El compuesto 18a se aisló como un sólido blanco (320 g, 33 %).

Los sólidos 18a se disolvieron en MeTHF (1.5 L), HCl 1M (1.0 L) se agregó y la mezcla bifásica se agitó 30 min hasta que los sólidos se disolvieron. La capa acuosa inferior se removió y la capa orgánica se lavó con HC1 1M (1 L) y luego H2O (500 mL). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 (250 g cada uno) por 20 min, se filtró y la torta se lavó con MeTHF. Este mismo procedimiento de secado se repitió una segunda vez y luego la solución se concentró a un aceite para dar 4 (197 g, Formación de sal de potasio El ácido carboxílico 4 (219 g) se disolvió en 2-MeTHF (880 mL) y luego la solución se calentó hasta alrededor de 35°C. La solución tBuOK 1.0 M en THF (1.05 L) se agregó lentamente tal que la temperatura interna no excedió 40°C. La mezcla espesa se agitó por alrededor de 30 minutos y luego se enfrió lentamente hasta alrededor de 20°C durante alrededor de 2 horas. La mezcla espesa se añejó a 20°C por 1 h y luego se filtró. La torta se lavó con 2-MeTHF (715 mL). Los sólidos se secaron en un horno de vacio por 24 h a 40°C. El producto final 10 se aisló como un sólido blanco (212 g, 86%).1H RMN (400 MHz, CDCl3) d 4.07 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 3.44 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.35 (s, 1H), 3.10 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.03 (dd, J = 12.3, 6.9 Hz, 1H), 1.89 (dd, J = 12.3, 8.0 Hz, 1H), 1.38 (s, 9H), 0.71 - 0.27 (m, 4H). CH RMN (400 MHz, dg-DMSO, d): 3.89 (dd, J = 8.6, 4.1 Hz, 0.4H rotámero 1), 3.85 (dd, J = 8.6, 4.3 Hz, 0.6H rotámero 2), 3.21 - 3.07 (m, 2H), 2.00 -1.92 (m, 1H), 1.75 - 1.71 (m, 1H) 1.36 (s, 4H rotámero 1), 1.32 (s, 5H rotámero 2), 0.46 - 0.37 (m, 4H).13C RMN (100 MHz, d6-DMSO) d 174.5, 174.4, 154.1, 153.4, 77.2, 76.9, 62.3, 62.0, 54.1, 53.8, 38.7, 28.4, 28.3, 20.6, 19.9, 11.8, 11.6, 10.5, 10.2.

II . Ruta a Intermediario 22 A. Sintesis de Intermediario 20 , 20 Un matraz de 3 cuellos se cargó con 2-bromofluoreno (100 g) y acético ácido (2100 g). Los contenidos se calentaron a 40-45°C y agitaron por aproximadamente 30 minutos para obtener una solución clara. Después de ajustar la temperatura interna a 20-30°C, 20% (v/v) H2SO4 acuoso (200 g, preparado con 64.0 g de H2SO4 y 136 g de agua) se agregó, seguido por I2 (53.0 g, 0.512 mol equiv) seguido por KI03 (17.5 g, 0.200 mol equiv). La mezcla espesa se calentó a 58°C (56-60°C) por alrededor de 4 horas. La mezcla espesa se enfrió luego a 20-25°C y una solución Na2S039% (Na2S03, 47.0 g; agua, 500 g) se cargó a la mezcla de reacción mientras que se mantiene la temperatura interna a 20-30°C. La mezcla espesa se agitó a 25°C por 1 hora y filtró. La torta filtro se enjuagó con HOAc 85% en peso (200 g, preparado con 170 g de HOAc y 30 g de agua), seguido por agua (200 g, 2.0 equivalente de peso). La torta filtro se descargó y la mezcla espesa se lavó en agua (1500 g) por alrededor de 1 hora, luego se filtró y enjuagó con agua hasta que el pH del enjuague es 6-7, y además se enjuagó con heptanos (200 g). Los sólidos se secaron bajo vacío produciendo 143 g (95% de rendimiento, 96% pureza AN por HPLC) del producto 20 como un sólido blanco.

B . Síntesis de Intermediario 21 El material de partida (20, 100 g) y N-fluorobencenosulfonimida (NFSI, 251 g, 2.95 mol equiv) se agregaron como sólidos a un matraz. A la mezcla se le agregó THF (1000 g) y con agitación los sólidos se disolvieron. La solución se desgasificó tres veces al aplicar lentamente vacio, seguido por vacio de ruptura con nitrógeno. La solución se enfrió en un baño -78°C a una temperatura interna de -68°C. Tras el enfriamiento, una mezcla espesa de color blanco a blanco opaco se formó. Una solución de la base (1.0M LiHMDS en THF, 720 g, 3.00 mol equiv) se agregó a una velocidad que la temperatura interna se mantuvo por debajo de -55°C. La temperatura interna fue <-60°C para la mayoría de la adición, el tiempo de adición total fue alrededor de 1 h. La terminación de la reacción se monitoreó por análisis HPLC. La reacción se inactivó por la adición de NH3/MeOH (7N NH3 en MeOH, 8 g) y el baño frío se removió. Después de que la temperatura interna se había entibiado a -20°C, el análisis HPLC mostró el consumo completo del N-fluorobencenosulfonimida en exceso. La temperatura interna se ajustó a 0°C. Los heptanos (342 g) se agregó y la solución se agitó por 10 minutos. Si es necesario, la temperatura se ajustó a 20-25°C. La mezcla espesa se filtró y los sólidos se enjuagaron con una mezcla de THF/heptanos dos veces (para cada enjuague: THF, 89.0 g; heptanos: 205 g). El filtrado se almacenó a 5°C (2-8°C) por ca.20 horas. La solución luego se filtró en un matraz y se concentró a 2.5-3.0 volúmenes bajo vacío en temperatura interna máxima de 35°C. CH2Cl2 (1500 g) se cargó y la mezcla espesa se agitó a reflujo (ca.40°C) por 30 minutos. Después de ajustar la temperatura interna a 20-25°C, la mezcla espesa se filtró a través de un almohadilla de celite, y la torta filtro se enjuagó con DCM (400 g, 4.0 equivalente de peso). El filtrado se concentró hasta alrededor de 3.0 volúmenes bajo vacío. El metanol (600 g,) se agregó y la mezcla se concentró hasta alrededor de 4.0 volúmenes, el metanol adicional (300 g) se agregó y la mezcla se concentró nuevamente hasta alrededor de 4.0 volúmenes (300 volúmenes) . La mezcla espesa se filtró y enjuagó con metanol dos veces (para cada enjuague, 100 g). El producto 21 se secó bajo vacio produciendo 90 g (82% de rendimiento, 97-98% de pureza AN por HPLC) del producto como un sólido de color blanco opaco a amarillo pálido. 1R RMN (400 MHz, CDCl3, d): 7.94 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H).19F RMN (376 MHz, CDC13) d -111.0 (s, 2F).

C. Sintesis de Intermediario 22 Un matraz de 3 cuellos se cargó con 21 (100 g) y THF (800 mL). La solución se desgasificó tres veces al aplicar lentamente vacio, seguido por vacio de ruptura con nitrógeno. La solución se enfrió a temperatura interna -10°C. Una solución de solución i-PrMgCl 2N en THF (125 g, 1.04 mol equiv) se agregó lentamente mientras que mantiene temperatura interna en -10°C hasta 0°C. La mezcla resultante se agitó luego por 30 minutos a -10°C hasta que la reacción se completó. La 2-cloro-N-metoxi-N-metilacetamida (40.6 g, 1.20 mol equiv) se disolvió en MTBE (122 g, 1.22 equivalente de peso) y filtró a través de un filtro 1 mm. La solución MTBE de la acetamida se agregó luego lentamente al matraz manteniendo la temperatura interna a -10°C hasta 0°C. Al término de la adición, la temperatura interna se ajustó a 0°C y agitó por 2 horas. Después de que la reacción se completó, HCl 1N (750 g) se agregó lentamente de modo que la temperatura interna no exceda 20°C. Si es necesario, la temperatura interna se ajustó a 20°C. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con MTBE (410 g). Las capas orgánicas se combinaron y se secaron sobre MgSO4. El MgS04 se filtró completamente y enjuagó con THF (200 g). El filtrado y enjuague se concentraron bajo 10 volúmenes al vacío (1000 mL). El isopropanol (785 g) se agregó y cantidades pequeñas de cristales comenzaron a formarse. Esta mezcla espesa se concentró nuevamente bajo vacío a 10 volúmenes (1000 mL). El isopropanol (785 g) se agregó nuevamente una vez y la mezcla espesa se concentró bajo vacío a 10 volúmenes (1000 mL). La temperatura interna se ajustó a 20-25°C y se agitó por ca.30 minutos. La mezcla espesa se filtró y enjuagó con isopropanol (100 g) luego se secó bajo vacío para proporcionar 62.28 g (70.8%, 98% de pureza por HPLC) del producto 22 como un sólido de color blanco opaco a amarillo pálido.1H RMN (400 MHz, CDCl3, d 8.19 (s, 1H), 8.12 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4 . 71 ( s r 2H) . 19F RMN ( 376 MHz , CDC13) d -111. 4 ( s , 2F) III . Síntesis de Intermediario 24 22 10 23 El compuesto 22 (10.8 g, 1.05 eq) y compuesto 10 (8.0 g, 1.0 eq) se disolvieron en acetona (106 mL). La mezcla heterogénea se calentó a 55°C y añejó hasta que la reacción se consideró completa como se determina por el análisis HPLC. El agua (22 mL) se agregó lentamente y la solución se mantuvo a 55°C por 30 minutos. La solución se enfrió a 50°C y cristales de semilla de 23 se agregaron. Otra porción de agua (11 mL) se agregó lentamente. La solución se añejó a 50°C por 1 h y luego se enfrió a 20°C (15-25°C) durante un periodo de 2 horas. La mezcla espesa se filtró a 20°C (15-25°C) y la torta filtro se lavó con una mezcla de acetona (18 mL) y agua (6 mL). El producto se secó para dar 23 como un sólido amarillo (12.8 g, 95%). XH RMN (400 MHz, CDCl3, mezcla de rotámeros, d): 8.13 (s, 1H), 8.07 - 7.97 (m, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.67 - 7.56 (m, 2H), 7.53 - 7.44 (m, 1H), 5.61 (d, J = 16.3 Hz, 0.5H), 5.47 (d, J = 16.2 Hz, 0.5H), 5.29 (d, J = 16.2 Hz, 0.5H), 5.15 (d, J = 16.3 Hz, 0.5H), 4.62 (dd, J = 8.7, 3.5 Hz, 0.5H), 4.55 (dd, J = 8.7, 4.0 Hz, 0.5H), 3.48 -3.28 (m, 2H), 2.43 - 2.35 (, 1H), 2.17 - 2.07 (m, 1H), 1.48 (s, 9H) 0.77 - 0.55 (m, 4H); 13C RMN (100 MHz, CDC13) d 190.8, 190.3, 172.2, 172.0, 154.4, 153.7, 143.7 - 143.4 (m), 140.3 (t, J = 25.9 Hz), 138.2 (t, J = 25.4 Hz), 136.9 - 136.5 (m), 135.5, 135.4, 134.7, 134.6, 132.4, 127.7, 124.2, 124.1, 123.2, 123.2, 122.7, 121.6 (t, J = 244 Hz), 120.8, 120.8, 80.1, 80.0, 66.0, 65.9, 59.4, 59.0, 54.3, 53.7, 38.9, 38.0, 28.4, 28.3, 20.7, 20.0, 12.9, 12.3, 8.8, 8.3.19F RMN (376 MHz, CDC13) d -111.41 (s), -111.43 (s).

B. Formación de I idazol 24 Boc F, F Boc F, F 23 90 °C 24 Al compuesto 23 (7.0 g) y acetato de amonio (4.8 g, 5.0 eq) se le agregaron tolueno (62 mL) y 2-metoxietanol (3.5 mL). La mezcla heterogénea/bifásica se calentó a 90°C y añejó hasta que la reacción se consideró completa como se determina por el análisis HPLC. La solución se enfrió a 55°C y se agitó hasta que una mezcla espesa de 24 se había formado (semillas se pueden agregar si es necesario). El heptano (104 mL) se cargó a 55°C durante 1 h y luego la mezcla espesa se enfrió a 22°C durante 3 h. Una vez que la mezcla espesa había alcanzado la temperatura ambiente esto se añejó por 1 h. La mezcla espesa se filtró y lavó con heptano (15 mL). Los sólidos se disolvieron luego en DMAc (42 mL). La solución se calentó a 45°C y agua (7 mL) se cargó a la solución. La temperatura de la solución se incrementó a 50°C y los cristales de semilla de 24 se cargaron. La mezcla espesa se añejó por 30 min y luego una segunda porción de agua (9.1 mL) se cargó durante 1 h. Al completar la mezcla espesa se enfrió a 22°C durante 3 h y añejó a temperatura ambiente por lh. Los sólidos se filtraron y lavaron con una solución de DMAc (5 mL) y agua (2 mL). Un lavado de heptano final (23 mL) se aplicó para desplazar el DMAc y agua. Los sólidos se secaron a 45°C en un horno de vacío. El producto final 24 se aisló como un sólido café (5.2 g, 77%). l RMN (400 MHz, DMSO, mezcla de rotámeros, d): 12.31 - 11.78 (m, 1H), 8.15 - 8.03 (m, 1H), 8.02 - 7.84 (m, 2H), 7.84 - 7.43 (m, 4H), 5.04 - 4.84 (m, 1H), 3.62 - 3.21 (m, 2H), 2.42 - 2.09 (m, 1H), 2.08 - 1.78 (m, 1H), 1.40 (s, 4H), 1.17 (s, 5H), 0.75 - 0.31 (m, 4H) ; 19F RMN (376 MHz , CDC13) d -103.85 (s), -104.03 (s) . MS ESI+ : [M + H]+ calculado para C27H27BrF2N302, 542.1, 544.1 encontrado, 542.1, 544.1.

IV. Síntesis de Intermediario 28 Boc Boc 25 B. Síntesis de 26 y 27 ' A un matraz se le cargó 25 (20.00 g, 0.083 mol), 4-bromo-1, 2-bencenodiamina (16.74 g, 0.089 mol, 1.08 equiv.), hidroxibenzotriazol (HOBt) (13.96 g, 0.091 mol, 1.1 equiv.), y HCl l-etil-3-(3-dimetilaminopropil )carbodiimida (EDC-HC1) (17.48 g, 0.091 mol, 1.1 equiv.). El matraz se enfrió en un baño de hielo, y se cargó con N,N-dimetilacetamida (DMAC, 80 mL). La reacción se permitió enfriar a ca. 10°C con agitación. La N-metilmorf olina (NMM) (27.34 mL, 0.249 mol, 3 equiv.) se agregó durante 5 minutos manteniendo la temperatura interna por debajo de 20°C. La reacción se agitó a ta por 20 h. Al completar la reacción, la mezcla de reacción se agregó a MTBE (200 mL) y agua (600 mL) en un embudo separador y se agitó suavemente. Las capas se permitieron separar, y la capa acuosa se removió. La capa acuosa se extrajo dos veces con MTBE (50 mL), y los extractos orgánicos se combinaron. Los extractos orgánicos combinados se extrajeron luego con agua (500 mL), formando una mezcla que no se separa bien. La mezcla se filtró sobre un soporte sólido apropiado y las capas se separaron. La fase orgánica se concentró bajo vacio, y el residuo resultante se disolvió en éter de diisopropilo (100 mL). La solución se enfrió a ca. 5°C con agitación. El ácido acético (5.22 mL, 0.091 mol, 1.1 eguiv.) se agregó lentamente manteniendo la temperatura interna por debajo de 10°C, y la suspensión resultante se agitó 2 h a 5°C. La suspensión espesa se filtró luego, y el sólido se enjuagó con éter de diisopropilo (100 mL), seguido por heptano (100 mL). La torta se secó bajo vacio para dar el producto como un sólido color beige ligero como una mezcla de regioisómeros 26 y 27 (28.19 g, 72%, >99% AN). XH R N (400 MHz, DMSO) mezcla de 26 & 27 (datos son para los dos rotámeros del regioisómero principal): d 9.25 (s, 0.5H), 9.13 (s, 0.5H), 7.08 (d, J = 8.3 Hz, 0.5H); 7.06 (d, J = 8.2 Hz, 0.5H), 6.92 (d, J = 2.2 Hz, 0.5H), 6.89 (d, J = 2.1 Hz, 0.5H), 6.71 (dd, J = 8.4, 2.2, 0.5H), 6.66 (dd, J = 8.4, 2.2, 0.5H), 5.10 (br s, 1H), 5.05 (br s, 1H), 4.15 (br s, 0.5H), 4.10 (br s, 0.5H), 3.76 (s, 1H), 2.64 (br s, 1H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.77-1.67 (m, 1H), 1.67-1.19 (m, 4H), 1.41 (s, 4.5H), 1.33 (s, 4.5H). MS-ESI+: [M + H]+ calculado para Ci8H25B 03N3, 410.1, 412.1; encontrado, 410.0, 412.0 C. Síntesis de Intermediario 28 A un reactor se le cargó la mezcla 26/27 (50.0 g, 0.106 mol) . El MTBE (200 mL, 4V) se cargó y a la suspensión se le agregó acético ácido glacial (30.4 mL, 0.532 mol, 5 equiv.). La mezcla se calentó a 55°C resultando en una solución homogénea, café, y se agitó a esta temperatura por 18 h. Al completar la reacción como se determina por HPLC, la solución se enfrió a ca. 10°C y se apagó luego con KOH acuoso (35 g en H2O 200 mL) manteniendo la temperatura interna por debajo de 20°C. La mezcla bifásica se agitó vigorosamente por 15 min. La agitación se detuvo y las capas se permitieron separar. La capa acuosa se drenó y se volvió a extraer nuevamente con MTBE (50 mL). Los extractos orgánicos se combinaron, H20 (300 mL) se cargaron, y la mezcla bifásica se agitó vigorosamente por 15 min. La agitación se detuvo y las capas se permitieron separar. La capa acuosa se drenó, y la capa orgánica color marrón se filtró al pulimiento. El solvente se destiló a un volumen de ca.50 mL. El éter de diisopropilo (IPE, 150 mL) se agregó mientras que se mantuvo la temperatura interna arriba de 48°C y la solución se destiló a un volumen total de ca. 80 mL. El IPE (150 mL) se agregó nuevamente y la solución se destiló a ca. 120 mL. Este proceso se continuó hasta que el solvente fue principalmente éter de diisopropilo como se indica por una temperatura interna durante la destilación de alrededor de 69°C o como se determina por 1H RMN. El volumen total se ajustó luego a ca. 120 mL, y la solución se permitió enfriar lentamente (10°C/h) durante la noche a 0°C resultando en formación de mezcla espesa. La mezcla espesa luego se filtró y enjuagó con IPE frió (100 mL). Los sólidos se colectaron y secaron en un horno de vacio para dar 28 (39.23 g, 94% de rendimiento, >99.5% AN).1H RMN (400 MHz, CDCl3, d): 10.70 (s, 1H), 7.86 (s, 0.5H), 7.58 (d, J = 8.6 Hz, 0.5H), 7.54 (s, 0.5H), 7.30 (d, 8.3Hz, 1H), 7.25 (d, J = 8.0 Hz, 0.5H), 4.52 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.43 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.93 - 1.81 (m, 1H), 1.80 - 1.55 (m, 4H), 1.52 (s, 9H). MS-ESI+: [M + H]+ calculado para Ci8H23BrC>2N3, 392.1, 394.1; encontrado, 392.1, 393.9 V. Síntesis de Compuesto I amorfo del Intermediario 28 A. Formación del Compuesto 29 la. Acoplamiento de los compuestos 28 y 24 i 29 29 oxalato El Compuesto 28 (24 . 98 g) , bis (pinacolato) diboro ( 19. 40 g) , propionato de potasio (21.40 g) y PdCl2 [ P ( t-Bu) 2Ph] 2 (2 . 04 g) se cargaron a un reactor, y el reactor se volvió inerte . El acetato de isopropilo (250 mL) se cargó, la agitación se inició y el reactor de nuevo se volvió inerte . La mezcla de reacción se calentó a 75°C y se agitó por 3.5h. Después del enfriamiento a 25°C, el compuesto 24 (29.31 g) se cargó a la mezcla de reacción, y el reactor se volvió inerte. El K3R041 M acuoso desgasificado (223 L) se cargó al reactor, y la mezcla de reacción se calentó a 75°C. La mezcla de reacción se mantuvo a esta temperatura por lh y se enfrió luego a 35-40°C. La Z\7-Acetil-L-cisteina (6.27 g) se cargó, y la mezcla se agitó a 35-40°C por 15 h. La mezcla de reacción se enfrió a 20°C, la agitación se detuvo y las capas se permitieron dividir. Las fases se separaron y N-acetil-L-cisteína (6.27 g) se cargó a la capa orgánica. La mezcla de reacción se calentó a 45-50°C. Después de agitar la mezcla a 45-50°C por 2 h, la reacción se enfrió a 20 °C y NaOH acuosa 5% (250 mL) se agregó. Las fases se separaron, y la capa orgánica se lavó con NaCl acuosa 5% (125 mL). La fase orgánica se trató luego con NaCl acuoso al 5% (125 L) y transfirió a un embudo separador por medio de filtración a través de papel filtro. Las capas se separaron. La fase orgánica se transfirió a un reactor y se concentró a aproximadamente 160 mL por destilación al vacio. El iPrOAc (20 mL) se cargó para llevar el volumen final a aproximadamente 180 mL. El etanol (100 mL) se cargó, y los contenidos se calentaron a aproximadamente 50°C. Una solución de ácido oxálico (9.3 g) en etanol (40 mL) se cargó luego a la mezcla. La solución se sembró con oxalato 29 (200 mg) y añejó a 50°C por 72 h. El acetato de isopropilo (240 mL) se cargó durante 5 h, y la mezcla espesa se enfrió a 15°C durante 4 h y se agitó a esta temperatura por 20 h. El producto se colectó por filtración, se lavó con una solución de etanol en acetato de isopropilo (48 mL EtOH, 191 mL iPrAc) y se secó bajo vacío a 45°C para proporcionar oxalato 29 como un sólido blanco opaco (41.46 g, 81% de rendimiento).1H RMN (400 MH, DMSO-d6, d) 11.80 (br s, 4H), 8.11 (d, J=1.2 Hz, 1H), 8.00 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.90 (s, 2H), 7.87, (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.60 (dd, J=8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.56 (dd, J=7.6, 1.6 Hz, 1H), 5.03 (m, 0.5H), 4.99 (m, 0.5H), 4.52 (s, 0.5H), 4.50 (s, 0.5H), 4.28 (br s, 0.5H), 4.19 (br s, 0.5H), 3.48 (m, 1H), 3.34 (m, 1H), 2.66 (br d, J=12.7 Hz, 1H), 2.38 (m, 0.5H), 2.26 (m, 0.5H), 2.04 (m, 1H), 1.96 (m, 0.5H), 1.86 (d, J=11.6 Hz, 0.5H), 1.77 (m, 1H), 1.70 (m, 1H), 1.64 (2H, m), 1.43 (s, 6H) 1.41 (s, 3H), 1.35 (m, 1H), 1.19 (s, 5H), 1.14 (s, 4H), 0.65 (m, 2H) 0.54 (m, 1H), 0.42 (m, 1H). HRMS-ESI+: [M + H]+ calculado para C45H49O4N6F2, 775.3778; encontrado, 775.3773. B. Desprotección Bis-Boc del Compuesto 29 _ 29 30 A una solución de 29 (92.5 g, 119 mol) en MeCN (324 mL) a 65°C se le cargó una solución HCl acuosa 1.5 N (398 mL, 5.0 mol equiv). La mezcla de reacción se agitó por alrededor de 2 h a 65°C y monitoreó para la terminación por análisis HPLC. Tras la determinación del consumo de material de partida, la temperatura de la mezcla de reacción se ajustó a 45°C. El acetonitrilo (648 mL) se cargó sobre un curso de ³ 30 min con objeto de mantener una temperatura interna de 40-50°C. Al completar esta adición de anti-solvente, los cristales de semilla de 30 sal de clorhidrato se cargaron (0.103 g). La mezcla espesa se añejó a 45°C por ³1 h. El MeCN adicional (1480 mL) se cargó sobre un curso de ³ 30 min con objeto de mantener una temperatura interna de 40-50°C. La mezcla espesa se enfrió a 20°C durante ³ 2 h y luego se filtró. La torta filtro se secó para proporcionar 84.6 g de 30 (como su sal tetra-HCl, también incluyendo ~6% contenido de H2O, 80.4% de rendimiento). El contenido de agua típico varia desde alrededor de 4 hasta alrededor de 13%. CH RMN (400 MHz, DMSO-d6, d): 10.83 (br s, 2H), 10.44 (br s, 2H), 10.33 (br s, 1H), 9.33 (br s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.26 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J=0.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J=0.8 Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.98 (dd, J=8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.79 (dd, J=8.4, 0.4 Hz, 1H), 7.75 (dd, J=8.4, 1.2 Hz, 1H), 5.29 (dd, J=8.0, 7.6 Hz, 1H), 4.82 (d, J=3.6 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.65 (d, J=10.8 Hz, 1H), 3.14 (s, 1H), 3.12 (d, J=10.8 Hz, 1H), 2.85 (dd, J=13.2, 9.6 Hz, 1H), 2.23 (dd, J=12.8, 7.6 Hz, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.99 (d, J=11.2 Hz 1H), 1.83 (m, 1H), 1.76 (m, 1H), 1.71 (d, J=10.8 Hz, 1H), 1.67 (m, 1H), 0.84 (m, 2H), 0.70 (m, 2H). HRMS-ESI+: [M + H]+ calculado para C35H33N6F2, 575.2729; encontrado, 575.2729.

El Compuesto 30 se aisló como un sólido cristalino de una mezcla de CH3CN y HCI acuoso.

C. Acoplamiento de Amida I - EDC-HCl (4.39 g), HOBt (2.06 g), Moc-Valina (4-(1-metiletil)-2,5-dioxo-, metoxicarbonil) (4.02 g), y DMF (50 mL) se cargaron a un matraz. La mezcla de reacción se agitó por 20 min a 23°C. La solución se enfrió luego a 0°C. La sal 30-HC1 (5.0 g) y N-metilmorfolina (5.03 mL) se cargaron a la mezcla de reacción. Los contenidos se entibiaron a temperatura ambiente y se agitaron por 4 horas a 23°C. El agua (2.5 L) se agregó a la mezcla de reacción y los contenidos se agitaron por 15 horas a 23°C. EtOAc (70 mL) y agua (100 mL) se agregaron y las capas se separaron. D la capa orgánica se le agregó EtOAc (50 mL) y agua (50 L), las capas se mezclaron y luego separaron. La capa orgánica se lavó con NaHCO3 5% (50 mL) y agua (2 x 25 mL). La capa orgánica luego se destiló a 2.5 vols (12.5 mL) y se enfrió a 23°C. La acetona (70 mL) se agregó a la capa orgánica. Los contenidos de reacción se sembraron con compuesto 31 (solvato de acetona) y se agitaron por 15 horas. Los contenidos se filtraron, la torta filtro se lavó con acetona (5 mL) y la torta se secó para proporcionar 4.78g de 31 como el solvato de acetona (73%). XH RMN (400 MHz, DMSO-df, d): 12.29 (s, 0.1H), 12.19 (d, J=4.0 Hz, 1H), 12.14 (s, 0.2H), 11.85 (s, 1H), 8.10 (s, 0.1H), 8.08 (s, 1H), 8.01 (s, 0.1H), 7.963 (m, 1H), 7.955 (s, 1H), 7.89 (d, J=6.4 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.83 (dd, J=8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.79 (dd, J=7.2, 2.8 Hz, 1H), 7.78-7.90 (mise., 0.9H), 7.70 (s, 1H), 7.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.51 (dd, J=8.8, 1.6 Hz, 1H), 7.44 (m, 0.1H), 7.31 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.91 (d, J=8.0 Hz, 0.2H), 6.77 (m, 0.2H), 5.34 (d, J=7.6 Hz, 0.1H), 5.20 (dd, J=8.0, 5.2 Hz, 1H), 5.18 (m, 0.1H), 4.88 (s, 0.1H), 4.67 (d, J=6.4 Hz, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.17 (dd, J=8.0, 8.0 Hz, 1H), 4.10 (m, 0.2H), 4.01 (dd, J=8.4, 8.0 Hz, 1H), 3.97 (m, 0.1H), 3.82 (d, J=9.6 Hz, 1H), 3.77 (s, 0.2H), 3.71 (d, J=9.6 Hz, 1H), 3.554 (s, 3H), 3.548 (s, 3H), 3.43 (s, 0.4H), 3.20 (d, J=7.6 Hz, 0.3H), 2.77 (s, 0.1H), 2.66 (s, 1H), 2.41 (d, J=8.8 Hz, 1H), 2.22 (dd, J=12.4, 8.0 Hz, 1H), 2.13 (m, 0.4H), 2.08 (s, 6H), 2.05 (dd, J=13.2, 5.2 Hz, 1H), 1.99 (m, 2H), 1.92 (m, 1H), 1.77 (m, 2H), 1.61 (m, 0.3H), 1.56 (m, 1H) , 1.46 (d, J= 9.2 Hz, 1H) , 1.33 (d, J=10.0 Hz, 0.1H) , 0.97 (dd, J=6.4, 2.0 Hz, 3H) , 0.93 (d, J=6.8 Hz, 3H) , 0.88 (d, J=6. Hz , 3H) , 0.87 (d, J=6.4 Hz, 3H) , 0.80-1.05 (mise., 2H) , 0.70 (m, 1H) , 0.59 (m, 2H) , 0.54 (m, 1H) , 0.33 (m, 0.1H) . HRMS-ESI+: [M + H]+ calculado para C49H55O6N8F2 , 889.4207; encontrado, 889.4205.

C. Aislamiento de Compuesto I amorfo El solvato de acetona del Compuesto I, Compuesto 31 (191.4 g), se combinó con acetonitrilo (1356 g) en un recipiente de reacción y mezcló hasta que una solución se formó. Esta solución se agregó lentamente a otro recipiente de reacción que contiene agua vigorosamente agitada (7870 g). La mezcla de reacción combinada se agitó en alrededor de 23°C por alrededor de 30 minutos. El sólido luego se filtró y se secó en alrededor de 40-45°C para dar Compuesto I amorfo (146.4 g, 82% de rendimiento).

Ejemplo 11: Formulaciones de Compuesto I amorfo Los comprimidos que contienen 1 mg y 10 mg de Compuesto I amorfo (base libre) se prepararon usando proceso de granulación húmeda y seca como se discute abajo.

Proceso de Granulación en Húmedo de Alto Corte Las formulaciones granuladas en húmedo contenidas comúnmente usan excipientes, e incluyen rellenos (lactosa y celulosa microcristalina), un desintegrante, un aglutinante, y un lubricante. Las composiciones de las formulaciones preparadas por un proceso de granulación en húmedo de alto corte se presentan en la Tabla 25.

Tabla 25. Composición Cuantitativa de Comprimidos de 10 mg de Compuesto I amorfo Proceso de Granulación en Seco Las Formulaciones de granulación en seco también se evaluaron, y sus composiciones se presentan en la Tabla 26. La biodisponibilidad oral del Compuesto I amorfo de granulaciones secas fue equivalente a un tensoactivo que contiene formulación de granulación húmeda. Los excipientes típicos se usaron en el proceso de granulación en seco, e incluyeron lactosa y celulosa microcristalina como rellenos, un desintegrante, y un lubricante. La lactosa anhidra se usó en lugar del monohidrato de lactosa más típico para minimizar la presencia de agua en proximidad con la base libre amorfa. La estabilidad química y física de la formulación principal fue aceptable, así como toda la uniformidad de mezcla de polvo y métricas de comprimido.

Tabla 26. Composición Cuantitativa de Compuesto I amorfo Comprimidos 10 mg - Además, los comprimidos 1 mg y 10 mg de Compuesto I amorfo se recubrieron por película con Blanco Opardy basado en hipromelosa YS-1-18202A y sus composiciones se presentan en la Tabla 27.

Tabla 27. Composición Cuantitativa de Comprimidos 1 mg y 10 mg de Compuesto I amorfo Ejemplo 12: Formulaciones de Compuesto I D-tartrato Los comprimidos que contienen 10 mg de Compuesto I D-tartrato se prepararon usando el proceso de granulación en seco como se discute abajo.

Proceso de Granulación en Seco Un aspecto importante del proceso que fue critico para mantener fue una etapa de molienda cónica de alta velocidad, que fue necesaria para dispersar aglomerados pequeños pero relativamente duros del Compuesto I D-tartrato. El procedimiento de molienda también se empleó para mantener mezcla aceptable y uniformidad de contenido de comprimido dada la carga de fármaco relativamente baja de los comprimidos. Además, los comprimidos 10 mg del Compuesto I D-tartrato se recubrieron por película con Blanco Opardy YS-1-18202A basado en hipromelosa y sus composiciones se presentan en la Tabla 28.

Tabla 28. Composición Cuantitativa de los Comprimidos 10 mg del Compuesto I D-tartrato Los comprimidos que contienen 10 mg de Compuesto I D-tartrato con una composición diferente que la descrita en la Tabla 28 y comprimidos que contienen 30 mg de Compuesto I D- tartrato se prepararon usando el proceso de granulación en seco descrito arriba. Sus composiciones se presentan en la Tabla 29.

Tabla 29. Composición Cuantitativa de Comprimidos 10 mg y 30 mg de Compuesto I D-tartrato

Claims (106)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. Un solvato de diacetona del éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino- 3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma I) caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 6.8, 12.5, y 19.8 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

2. El Compuesto I Forma I de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 10.2, 11.1, y 23.8 O2q+0.2 °2q.

3. El Compuesto I Forma I de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 2.

4. El Compuesto I Forma I de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia menor en alrededor de 124°C y una endotermia mayor en alrededor de 162°C.

5. El Compuesto I Forma I de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 3.

6. Un solvato de monoacetona del éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino- 3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma II), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 12.2, 12.7, y 20.5°2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

7. El Compuesto I Forma II de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 7.5, 11.4, y 20.0 O2q±0.2 °2Q.

8. El Compuesto I Forma II de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 4.

9. El Compuesto I Forma II de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 130°C.

10. El Compuesto I Forma II de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 5.

11. Un éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9— difluoro-7-(2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma III), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 12.4, 14.2, y 21.6 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

12. El Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 8.3, 15.0, y 20.4°2Q±0.2 °2q.

13. El Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 7.

14. El Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 176°C.

15. El Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 8.

16. Un D-tartrato del éster de metilo del ácido (1—{3— [6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I D-tartrato), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 4.0, 10.3, y 19.7 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 A.

17. El Compuesto I D-tartrato de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 9.1, 12.7, y 24.0 O2q±0.2 °2q.

18. El Compuesto I D-tartrato de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 9.

19. El Compuesto I D-tartrato de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 221°C.

20. El Compuesto I D-tartrato de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 10.

21. Un solvato de acetato de etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma IV), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 15.1, 17.2, y 21.5°2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

22. El Compuesto I Forma IV de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 5.6, 13.5, y 25.8 O2q±0.2 °2q.

23. El Compuesto I Forma IV de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 14.

24. El Compuesto I Forma IV de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 167°C.

25. El Compuesto I Forma IV de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 15.

26. Un solvato de acetato de etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma V), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 14.4, 15.3, y 17.4 O2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

27. El Compuesto I Forma V de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 8.6, 11.8, y 18.9 O2q±0.2 °2q.

28. El Compuesto I Forma V de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 16.

29. Un solvato de acetato de isopropilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VI), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 5.6, 13.3, y 21.1 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

30. El Compuesto I Forma VI de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 13.8, 14.8, y 16.9 O2q±0.2 °2q.

31. El Compuesto I Forma VI de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 17.

32. El Compuesto I Forma VI de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 168°C.

33. El Compuesto I Forma VI de conformidad con la reivindicación 32, en donde la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 18.

34. Un solvato de acetato de metilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VII), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 11.0, 13.8, y 22.2 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

35. El Compuesto I Forma VII de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 17.0, 19.0, y 19.4 °2q±0.2 °2q.

36. El Compuesto I Forma VII de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 19.

37. Un éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VIII), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 9.4, 15.5, y 17.5 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 A.

38. El Compuesto I Forma VIII de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 14.6, 12.2, y 18.8 °2q±?.2 °2q.

39. El Compuesto I Forma VIII de conformidad con la reivindicación 38, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 20.

40. El Compuesto I Forma VIII de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 171°C.

41. El Compuesto I Forma VIII de conformidad con la reivindicación 40, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 21.

42. Un solvato de formiato de etilo del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma IX), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 13.8, 19.2, y 22.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

43. El Compuesto I Forma IX de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 8.2, 11.0, y 17.1 O2q±0.2 °2q.

44. El Compuesto I Forma IX de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 22.

45. El Compuesto I Forma IX de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 177°C.

46. El Compuesto I Forma IX de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 23.

47. Un solvato de acetonitrilo del éster de metilo del ácido {1—{3—[6—(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino- 3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma X), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.4, 6.9, y 10.3 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

48. El Compuesto I Forma X de conformidad con la reivindicación 47, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 11.2, 20.0, y 22.4 O2q±0.2 °2q.

49. El Compuesto I Forma X de conformidad con la reivindicación 48, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 24.

50. Un solvato de tetrahidrofurano del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6- il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-bicielo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XI), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.2, 6.3, y 9.5 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

51. El Compuesto I Forma XI de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 19.1, 20.6, y 22.5 O2q±0.2 °2Q.

52. El Compuesto I Forma XI de conformidad con la reivindicación 51, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 25.

53. Un solvato de cetona de etil etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XII), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.2, 6.4, y 20.6 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 A.

54. El Compuesto I Forma XII de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 9.6, 18.1, y 22.5 O2q±0.2 °2q.

55. El Compuesto I Forma XII de conformidad con la reivindicación 54, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 26.

56. Un solvato de tetrahidrofurano del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2. ]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIII-THF), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 3.2, 3.5, y 7.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

57. El Compuesto I Forma XIII-THF de conformidad con la reivindicación 56, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 8.6, 12.1, y 19.8 °2q±0.2 °2q.

58. El Compuesto I Forma XIII-THF de conformidad con la reivindicación 57, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 27.

59. El Compuesto I Forma XIII-THF de conformidad con la reivindicación 56, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende endotermias en alrededor de 155°C y 173°C.

60. El Compuesto I Forma XIII-THF de conformidad con la reivindicación 59, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 28.

61. Un solvato de cetona de metil etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIII-MEK), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.2, 3.5, y 7.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

62. El Compuesto I Forma XIII-MEK de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 8.6, 12.1, y 19.8 O2q+0.2 °2q.

63. El Compuesto I Forma XIII-MEK de conformidad con la reivindicación 62, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 29.

64. El Compuesto I Forma XIII-MEK de conformidad con la reivindicación 61, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende endotermias en alrededor de 155°C y 173°C.

65. El Compuesto I Forma XIII-MEK de conformidad con la reivindicación 64, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 30.

66. Un solvato de éter de metil tert-butilo del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIV), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 6.9, 10.3, y 22.4 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

67. El Compuesto I Forma XIV de conformidad con la reivindicación 66, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 3.4, 11.2, y 20.1 O2q±0.2 °2q.

68. El Compuesto I Forma XIV de conformidad con la reivindicación 67, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 31.

69. Un éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9— difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XV), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 12.1, 12.8, y 20.8 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á.

70. El Compuesto I Forma XV de conformidad con la reivindicación 69, caracterizado porque el difractograma además comprende picos en 9.1, 10.9, y 21.3 O2q±0.2 °2q.

71. El Compuesto I Forma XV de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque el difractograma es substancialmente como se muestra en la Figura 32.

72. El Compuesto I Forma XV de conformidad con la reivindicación 69, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) comprende una endotermia en alrededor de 180°C.

73. El Compuesto I Forma XV de conformidad con la reivindicación 72, caracterizado porque la curva DSC es substancialmente como se muestra en la Figura 33.

74. Un éster de metilo del ácido 1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico amorfo, caracterizado porque una curva de calorimetría de barrido diferencial modulada (mDSC) comprende una temperatura de transición vitrea de alrededor de 160°C.

75. El Compuesto I amorfo de conformidad con la reivindicación 74, caracterizado porque la curva mDSC es substancialmente como se muestra en la Figura 35.

76. El Compuesto I amorfo de conformidad con la reivindicación 74, caracterizado por espectros RMN de estado sólido 13C (ssRMN) substancialmente como se muestra por la curva superior en la Figura 34.

77. El Compuesto I amorfo de conformidad con la reivindicación 74, caracterizado por espectros Raman transformados de Fourier que comprenden picos en 939 y 1552 crrf1.

78. El Compuesto I amorfo de conformidad con la reivindicación 77, caracterizado porque los espectros Raman transformados de Fourier es substancialmente como se muestra en la Figura 36.

79. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste de Compuesto I Forma I de conformidad con la reivindicación 1, Compuesto I Forma II de conformidad con la reivindicación 6, Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11, Compuesto I D-tartrato de conformidad con la reivindicación 16, Compuesto I Forma IV de conformidad con la reivindicación 21, Compuesto I Forma V de conformidad con la reivindicación 26, Compuesto I Forma VI de conformidad con la reivindicación 29, Compuesto I Forma VII de conformidad con la reivindicación 34, Compuesto I Forma VIII de conformidad con la reivindicación 37, Compuesto I Forma IX de conformidad con la reivindicación 42, Compuesto I Forma X de conformidad con la reivindicación 47, Compuesto I Forma XI de conformidad con la reivindicación 50, Compuesto I Forma XII de conformidad con la reivindicación 53, Compuesto I Forma XIII-THF de conformidad con la reivindicación 56, Compuesto I Forma XIII-MEK de conformidad con la reivindicación 61, Compuesto I Forma XIV de conformidad con la reivindicación 66, y Compuesto I Forma XV de conformidad con la reivindicación 69, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

80. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende éster de metilo del ácido 1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico amorfo, caracterizado por una curva de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que comprende una temperatura de transición vitrea de alrededor de 160°C y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

81. Un método para tratar un sujeto que padece de virus de hepatitis C (VHC), caracterizado porque comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de Compuesto I Forma I de conformidad con la reivindicación I, Compuesto I Forma II de conformidad con la reivindicación 6, Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación II, Compuesto I D-tartrato de conformidad con la reivindicación 16, Compuesto I Forma IV de conformidad con la reivindicación 21, Compuesto I Forma V de conformidad con la reivindicación 26, Compuesto I Forma VI de conformidad con la reivindicación 29, Compuesto I Forma VII de conformidad con la reivindicación 34, Compuesto I Forma VIII de conformidad con la reivindicación 37, Compuesto I Forma IX de conformidad con la reivindicación 42, Compuesto I Forma X de conformidad con la reivindicación 47, Compuesto I Forma XI de conformidad con la reivindicación 50, Compuesto I Forma XII de conformidad con la reivindicación 53, Compuesto I Forma XIII-THF de conformidad con la reivindicación 56, Compuesto I Forma XIII-MEK de conformidad con la reivindicación 61, Compuesto I Forma XIV de conformidad con la reivindicación 66, o Compuesto I Forma XV de conformidad con la reivindicación 69, o Compuesto I amorfo de conformidad con la reivindicación 74.

82. El método de conformidad con la reivindicación 81, caracterizado porque comprende además administrar al sujeto al menos un agente anti-VHC.

83. El método de conformidad con la reivindicación 82, caracterizado porque el agente anti-VHC es un compuesto seleccionado del grupo que consiste de ribavirina,

84. Un proceso para hacer solvato de diacetona éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma I), caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 6.8, 12.5, y 19.8 °2Q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de (1) poner en contacto éster de metilo del ácido (1—{3— [6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico amorfo con acetona, por lo cual se forma el Compuesto I Forma I.

85. El proceso de conformidad con la reivindicación 84, caracterizado además porque comprende la etapa de (2) aislar el Compuesto I Forma I.

86. Un proceso para hacer solvato de monoacetona del éster de metilo del ácido (l-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma II), caracterizado porque un difractoqrama de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 12.2, 12.7, y 20.5°2q+0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de: (1) desolvatar parcialmente solvato de diacetona del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma I) caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 6.8, 12.5, y 19.8 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, por lo cual se forma el Compuesto I Forma II.

87. Un proceso para hacer éster de metilo del ácido (1-{3- [6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo [2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma III) caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 12.4, 14.2, y 21.6 O2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de (1) calentar hasta alrededor de 30 - 120°C solvato de monoacetona del éster de metilo del ácido (1—(3—[6—(9,9— difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-az -biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma II) caracterizado por un difractograma de polvo de rayos X que comprende los siguientes picos: 12.2, 12.7, y 20.5°2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, por lo cual se forma el Compuesto I Forma III.

88. Un proceso para hacer (1—{3—[6-(9,9-difluoro-7-{2- [5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino D-tartrato del éster de metilo del ácido (Compuesto I D-tartrato), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 4.0, 10.3, y 19.7 °2q+0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de (1) poner en contacto ácido D-tartárico con ácido (1- {3-[6- (9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico en un solvente, por lo cual se forma el Compuesto I D-tartrato.

89. El proceso de conformidad con la reivindicación 88, caracterizado porque además comprende la etapa de (2) aislar el Compuesto I D-tartrato.

90. El proceso de conformidad con la reivindicación 88, caracterizado porque el solvente es seleccionado del grupo que consiste de un alcohol, un éter, un acetato de alquilo, y combinaciones de los mismos.

91. El proceso de conformidad con la reivindicación 90, caracterizado porque el solvente se selecciona de alcohol isopropílico, acetato de etilo, etanol, tetrahidrofurano, metanol, y combinaciones de los mismos.

92. El proceso de conformidad con la reivindicación 91, caracterizado porque el solvente es alcohol isopropílico.

93. El proceso de conformidad con la reivindicación 91, caracterizado porque el solvente es etanol.

94. Un proceso para hacer solvato de acetato de etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-meti1-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma IV), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 15.1, 17.2, y 21.5°2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11 con acetato de etilo.

95. Un proceso para hacer solvato de acetato de etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5- (2-metoxicarbonilamino-3-meti1-butiril)-5-aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}- 2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma V), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 14.4, 15.3, y 17.4 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de desolvatar Compuesto I Forma IV de conformidad con la reivindicación 21.

96. Un proceso para hacer solvato de acetato de isopropilo del éster de metilo del ácido (1—{3—(6—(9,9— difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VI), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 5.6, 13.3, y 21.1 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11 con acetato de isopropilo.

97. Un proceso para hacer solvato de acetato de metilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H- benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VII), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 11.0, 13.8, y 22.2 °2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11 con acetato de metilo.

98. Un proceso para hacer solvato de formiato de metilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma VIII), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 9.4, 15.5, y 17.5 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de desol atar Compuesto I Forma VII de conformidad con la reivindicación 34.

99. Un proceso para hacer solvato de formiato de etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H- benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma IX), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 13.8, 19.2, y 22.0 °2q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11 con formiato de etilo.

100. Un proceso para hacer solvato de acetonitrilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma X), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.4, 6.9, y 10.3 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11 con acetonitrilo.

101. Un proceso para hacer solvato de tetrahidrofurano del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5- (2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H- benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XI), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.2, 6.3, y 9.5 °2Q±0.2 °2Q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11 con tetrahidrofurano.

102. Un proceso para hacer solvato de cetona de metil etilo del éster de metilo del ácido (1—{3—[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-i1]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XII), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.2, 6.4, y 20.6 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma III de conformidad con la reivindicación 11 con cetona de metil etilo.

103. Un proceso para hacer solvato de tetrahidrofurano del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro [2. 4 ] hept-6-il] -3H-imidazol-4-il } -9H-f luoren-2-il) -1H- benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIII-THF), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.2, 3.5, y 7.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma XI de conformidad con la reivindicación 50.

104. Un proceso para hacer solvato de cetona de metil etilo del éster de metilo del ácido (1-{3-[6-(9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIII-MEK), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 3.2, 3.5, y 7.0 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma XII de conformidad con la reivindicación 53.

105. Un proceso para hacer solvato de éter de metil tert-butilo del éster de metilo del ácido (1—{3—[6—(9,9— difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5- aza-espiro [2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-1H-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XIV), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 6.9, 10.3, y 22.4 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 Á, que comprende la etapa de poner en contacto Compuesto I Forma VIII de conformidad con la reivindicación 37 con éter de metil tert-butilo.

106. Un proceso para hacer éster de metilo del ácido (1-{3-[6- (9,9-difluoro-7-{2-[5-(2-metoxicarbonilamino-3-metil-butiril)-5-aza-espiro[2.4]hept-6-il]-3H-imidazol-4-il}-9H-fluoren-2-il)-lH-benzoimidazol-2-il]-2-aza-biciclo[2.2.1]heptano-2-carbonil}-2-metil-propil)-carbámico cristalino (Compuesto I Forma XV), caracterizado porque un difractograma de polvo de rayos X comprende los siguientes picos: 12.1, 12.8, y 20.8 O2q±0.2 °2q, como se determina en un difractómetro usando radiación Cu-Ka en una longitud de onda de 1.54178 A, que comprende la etapa de desolvatar el Compuesto I Forma X de conformidad con la reivindicación 47.