MX2012005296A - Inhibidor de bromodominio de benzodiazepina. - Google Patents

Abstract

Compuestos benzo-diazepina de la fórmula (I): y las sales de los mismos, composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos, y su uso en terapia, en particular en el tratamiento de enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio.

Description

INHIBIDOR DE BROMODOMINIO DE BENZODI AZEPI A Campo de la Invención La presente invención se refiere a compuestos de benzodiazepina, a composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos, y a su uso en terapia.

Antecedentes de la Invención Los genomas de los organismos eucarióticos están altamente organizados dentro del núcleo de la célula. Las largas cadenas de ADN dúplex están envueltas alrededor de un octámero de proteínas de histona (más usualmente comprendiendo dos copias de histonas H2A, H2B H3 y H4) para formar un nucleosoma. Esta unidad básica se comprime entonces adicionalmente mediante la acumulación y el pliegue de los nucleosomas para formar una estructura de cromatina altamente condensada. Es posible una gama de diferentes estados de condensación, y la estrechez de esta estructura varía durante el ciclo celular, siendo más compacta durante el proceso de división celular. La estructura de cromatina tiene una función crítica en la regulación de la transcripción genética, la cual no se puede presentar de una forma eficiente a partir de una cromatina altamente condensada. La estructura de cromatina es controlada por una serie de modificaciones posteriores a la traducción a las proteínas de histona, notoriamente las histonas H3 y H4, y más comúnmente dentro de las colas de histona que se extienden más allá de la estructura del nucleosoma del núcleo. Estas modificaciones incluyen acetilación, metilación, fosforilación, ubiquitinilación, SUMOilación. Estas marcas epigenéticas son escritas y borradas por enzimas específicas, las cuales colocan las marcas sobre los residuos específicos dentro de la cola de histona, formando de esta manera un código epigenético, el cual entonces es interpretado por la célula para permitir la regulación de la estructura de cromatina específica del gen, y por lo mismo, la transcripción.

La acetilación de histona está más usualmente asociada con la activación de la transcripción genética, debido a que la modificación afloja la interacción del ADN y el octámero de histona mediante el cambio de la electrostática. En adición a este cambio físico, las proteínas específicas se enlazan con los residuos de lisina acetilados dentro de las histonas para leer el código epigenético. Los bromodominios son dominios distintos pequeños (de aproximadamente 110 aminoácidos) dentro de las proteínas, que se enlazan con los residuos de lisina acetilados comúnmente, pero no exclusivamente, en el contexto de las histonas. Hay una familia de alrededor de 50 proteínas que se sabe que contienen bromodominios, y tienen una gama de funciones dentro de la célula.

La familia de proteínas BET que contienen bromodominio comprende 4 proteínas (BRD2, BRD3, BRD4 y BRD-t) que contienen bromodominios en fila capaces de enlazarse a dos residuos de lisina acetilados en estrecha proximidad, aumentando la especificidad de la interacción. Se reporta que BRD2 y BRD3 se asocian con las histonas a lo largo de los genes activamente transcritos, y pueden estar involucradas en la facilitación de la elongación de la transcripción (Leroy y colaboradores, Mol. Cell. 2008 30(1): 51-60), mientras que la BRD4 parece estar involucrada en el reclutamiento del complejo pTEF-ß hacia los genes inducibles, lo cual da como resultado la fosforilación de la polimerasa de ARN y el aumento de la producción de transcripción (Hargreaves y colaboradores, Cell, 2009 138(1): 129-145). También se ha reportado que la BRD4 o la BRD3 se puede fusionar con NUT (proteína nuclear en los testículos), formando oncogenes de fusión novedosos, BRD3-NUT o BRD4-NUT, en una forma altamente maligna de neoplasia epitelial (French y colaboradores, Cáncer Research, 2003, 63, 304-307, y French y colaboradores, Journal of Clinical Oncology, 2004, 22 (20), 4135-4139). Los datos sugieren que las proteínas de fusión BRD-NUT contribuyen a la carcinogénesis (Oncogene, 2008, 27, 2237-2242). BRD-t se expresa de una manera única en los testículos y en los ovarios. Se ha reportado que todos los miembros de la familia tienen alguna función en el control o en la ejecución de aspectos del ciclo celular, y se ha demostrado que permanecen formando complejos con los cromosomas durante la división celular - sugiriendo una función en el mantenimiento de la memoria epigenética. En adición, algunos virus hacen uso de estas proteínas para atar sus genomas a la cromatina de la célula huésped, como parte del proceso de la réplica viral (You y colaboradores Cell, 2004117(3): 349-60).

La Solicitud de Patente Japonesa Número JP2008-156311 da a conocer un derivado de bencimidazol, el cual se dice que es un agente de enlace de bromodominio BRD2 que tiene utilidad con respecto a la infección / proliferación del virus.

La Solicitud Internacional de Patente Número WO2009/084693A1 da a conocer una serie de derivados de tieno-triazolo-diazepina que se dice que inhiben el enlace entre una histona acetilada y una proteína que contiene bromodominio, que se dice que son útiles como agentes contra el cáncer.

Se ha encontrado una novedosa clase de compuestos que inhiben el enlace de los bromodominios con sus proteínas acetiladas cognadas, más particularmente, una clase de compuestos que inhiben el enlace de los bromodominios de la familia BET con los residuos de Usina acetilados. Estos compuestos será referidos posteriormente en la presente "inhibidores de bromodominio".

Breve Descripción de la Invención En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de la fórmula (I) o una sal del mismo, más particularmente, un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

En un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en terapia, en particular en el tratamiento de las enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio.

En un cuarto aspecto de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de las enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En un quinto aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio.

Descripción Detallada de la Invención La presente invención se refiere a los compuestos de la fórmula (I), o a una sal de los mismos: en donde: R1 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; R2 es -NR2aR2a' u -OR2 ; en donde uno de R a o R2'a es hidrógeno, y R2 o el otro de R2a o R2a se selecciona a partir de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, R2CR2'°N-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbociclilo, carbociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, heterociclilo, y heterociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en donde cualquiera de los grupos carbociclilo o heterociclilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbonilo, -CO-carbociclilo, azido, amino, hidroxilo, nitro y ciano, en donde el grupo -CO-carbociclilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, azido, nitro y ciano; o dos grupos adyacentes sobre cualquiera de los grupos carbociclilo o heterociclilo, junto con los átomos de interconexión, forman un anillo de 5 ó 6 miembros, cuyo anillo puede contener 1 ó 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; o R2a y R2 a, junto con el átomo de nitrógeno (N) con el que están unidos, forman un anillo de 4, 5, 6, ó 7 miembros, el cual opcionalmente contiene 1 ó 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; en donde el anillo de 4, 5, 6, ó 7 miembros está opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o amino; R2C y R2'c son independientemente hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; cada R3 se selecciona independientemente a partir de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, ciano, CF3, -OCF3, -COOR5, -alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-NR6R7 y -alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-OH; R4 es hidroxilo, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, ciano, CF3, -OCF3, -COOR5; u -OS(0)2-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; R5 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; y n es un entero 1 a 5.

En una modalidad, la presente invención se refiere puestos de la fórmula (le), o a una sal de los mismos: en donde: R1 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; R2 es -NR2aR23' u -OR2 ; en donde uno de R2a o R2'a es H, y R2 o el otro de Rza o R2'a se selecciona a partir de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, R2°R2'cN-alqu¡lo de 1 a 6 átomos de carbono, carbociclilo, carbocieli l-alq ui lo de 1 a 4 átomos de carbono, heterociclilo, y heterociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en donde cualquiera de los grupos carbociclilo o heterociclilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbonilo, -CO-carbociclilo, azido, nitro y ciano, en donde el grupo -CO-carbociclilo puede estar además opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, azido, nitro y ciano; o dos grupos adyacentes sobre cualquiera de los grupos carbociclilo o heterociclilo, junto con los átomos de interconexión, forman un anillo de 5 ó 6 miembros, cuyo anillo puede contener 1 ó 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; o R23 y R2a, junto con el átomo de nitrógeno (N) con el que están unidos, forman un anillo de 5, 6, ó 7 miembros, el cual puede contener opcionalmente 1 ó 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; en donde el anillo de 5, 6, ó 7 miembros puede estar además opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; R2° y R2 c son independientemente H y alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; cada R3 se selecciona independientemente a partir de H, hidroxilo, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, ciano, CF3, -OCF3 y -COOR5; R4 es hidroxilo, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, ciano, CF3, -OCF3; -COOR5 ó -OS(0)2-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; R5 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; y n es un entero 1 a 5.

En una modalidad de la invención se prefieren los enantiómeros-S.

Como se utiliza en la presente, el término "alquilo" se refiere a las cadenas de hidrocarburo rectas o ramificadas que contienen el número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono significa un alquilo de cadena recta o ramificada que contiene cuando menos 1, y cuando mucho 6, átomos de carbono. Los ejemplos de "alquilo", como se utiliza en la presente, incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, propilo normal, butilo normal, pentilo normal, hexilo normal, isobutilo, isopropilo, butilo terciario, y 1 , 1 -dimetil-propilo.

Como se utiliza en la presente, el término "alcoxilo" se refiere a un grupo alcoxilo de cadena recta o ramificada que contiene el número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono significa un grupo alcoxilo de cadena recta o ramificada que contiene cuando menos 1, y cuando mucho 6, átomos de carbono. Los ejemplos de "alcoxilo", como se utiliza en la presente, incluyen, pero no se limitan a, metoxilo, etoxilo, propoxilo, prop-2-oxilo, butoxilo, but-2-oxilo, 2-met¡l-prop-1-oxilo, 2-metil-prop-2-oxilo, pentoxilo o hexiloxilo.

Como se utiliza en la presente, el término "halógeno" o "halo" se refiere a los elementos de flúor, cloro, bromo y yodo. Los ejemplos de los halógenos adecuados son flúor, cloro y bromo.

A menos que se indique de otra manera, cualquier grupo carbociclilo contiene de 3 a 14 átomos del anillo, por ejemplo, de 3 a 10 átomos del anillo, o en un ejemplo adicional, de 3 a 8 átomos del anillo, y puede estar saturado, insaturado, o puede ser aromático. Los ejemplos de los grupos carbociclilo saturados incluyen ciclopropilo, ciclopentilo o ciclohexilo. Los ejemplos de los grupos carbociclilo insaturados incluyen aquéllos que contienen hasta 3 dobles enlaces. Un ejemplo de un grupo carbociclilo aromático adecuado es fenilo. El término carbocíclico se debe interpretar de una manera similar. En adición, el término carbociclilo incluye cualquier combinación fusionada de grupos carbociclilo, por ejemplo, naftilo, antrilo, fenantrilo, indanilo, indenilo, azulenilo, azulanilo, y fluorenilo.

A menos que se indique de otra manera, cualquier grupo heterociclilo contiene de 4 a 7 átomos del anillo, por ejemplo, de 5 a 7 átomos del anillo, y hasta 4 de los cuales pueden ser hetero-átomos, tales como nitrógeno, oxígeno y azufre, y puede estar saturado, insaturado, o puede ser aromático. Los ejemplos de los grupos heterociclilo son azetidinilo, fu rilo , tienilo, pirrolilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, imidazolilo, dioxolanilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, pirazolilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, piranilo, piridilo, piperidinilo, homopiperazinilo, dioxanilo, morfolino, ditianilo, tiomorfolino, t¡omorfolino-1 , 1 -dióxido, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piperazinilo, sulfolanilo, tetrazolilo, triazinilo, azepinilo, oxazepinilo, tiazepinilo, diazepinilo y tiazolinilo. En adición, el término eterociclilo incluye los grupos heterociclilo fusionados, por ejemplo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, imidazopiridinilo, benzoxazinilo, benzotiazinilo, oxazolopiridinilo, benzofuranilo, quinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, dihidro-quinazolinilo, benzotiazolilo, ftalimido, benzofuranilo, benzodiazepinilo, indolilo e ¡soindolilo. El término heterocíclico se debe interpretar de una manera similar.

Como se utiliza en la presente, el término "sustituido" se refiere a la sustitución con el sustituyente o los sustituyentes mencionados. Con múltiples grados de sustitución (por ejemplo, 1 ó 2) los grupos pueden ser iguales o diferentes.

En una modalidad de la invención, R1 representa metilo.

En una modalidad de la invención, R2 representa -OR2b.

Por consiguiente, se proporciona un compuesto de la fórmula (la): en donde: R\ R2b, R3, R4 y n son como se definen anteriormente para los compuestos de la fórmula (I).

En una modalidad de la invención, R2 es -NR2aR=a'.

En una modalidad de la invención, uno de R2a o Raa es hidrógeno, y el otro de R?a o R 'a se selecciona a partir de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbociclilo, carbociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, heterociclilo, y heterociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en donde cualquiera de los grupos carbociclilo o heterociclilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbonilo, -CO-carbociclilo, azido, amino, hidroxilo, nitro y ciano, en donde el grupo -CO-carbociclilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, azido, nitro y ciano. En otra modalidad, uno de R2a o R2'a es hidrógeno, y el otro de R2a o R2'a se selecciona a partir de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo, bencilo, benzo-f uranilo, piridinilo, tiazolilo, furanilo, y morfolinilo, en donde los grupos fenilo, bencilo, benzo-furanilo, piridinilo, tiazolilo, furanilo, o morfolinilo están opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbonilo, azido, nitro y ciano. En otra modalidad, R2a es hidrógeno, y Rza es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. En una modalidad adicional, R2'a es etilo.

En una modalidad de la invención, Rza es hidrógeno y R23 es R2CR2'cN-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. En otra modalidad, R2'a se selecciona a partir de R2CR2'°N-CH2-, R2CR2'CN-CH2CH2-, R2CR 'CN-CH2CH2CH2- y R2CR2'CN-CH2CH2CH2CH2-. En una modalidad adicional, R2C y R2'c se seleccionan a partir de hidrógeno y metilo.

En una modalidad de la invención, za es hidrógeno y R23 es carbociclilo. En otra modalidad, R2a es ciclopentilo o ciclohexilo, en donde cada grupo está opcionalmente sustituido una vez por amino o hidroxilo.

En una modalidad de la invención, R2a es hidrógeno, y R2a es heterociclilo. En otra modalidad, R a se selecciona a partir de pirrolidinilo, piperidinilo, tetrahidro-f uranilo y tetrahidro-pirano, en donde cada grupo está opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. En otra modalidad, R2'a se selecciona a partir de: En una modalidad adicional, R2'a se selecciona a partir de: En una modalidad de la invención, R a es hidrógeno y R2'a es heterociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido una vez por amino, hidroxilo o metilo. En otra modalidad, R2a se selecciona a partir de heterociclil-CH2-, heterociclil-CH2CH2-, heterociclil-CH2CH2CH2- y heterociclil-CH2CH2CH2CH2-, en donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido una vez por amino, hidroxilo o metilo. En otra modalidad, el heterociclilo se selecciona a partir de pirrolidinilo, piperidinilo, tetrahidro-piranilo, piperazinilo, morfolino y dióxido de tiomorfolino, en donde cada grupo está opcionalmente sustituido una vez por amino, hidroxilo o metilo. En otra modalidad, el heterociclilo se selecciona a partir de: En una modalidad adicional, el heterociclilo se selecciona partir de: En una modalidad de la invención, Raa y R2' , junto con el átomo de nitrógeno (N) con el que están unidos, forman un anillo de 5, 6, ó 7 miembros, el cual opcionalmente contiene 1 ó 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; en donde el anillo de 5, 6, ó 7 miembros está opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

En otra modalidad de la invención, R2a y R2'a, junto con el átomo de nitrógeno (N) con el que están unidos, forman un anillo de 4, 5, 6, ó 7 miembros, el cual opcionalmente contiene 1 ó 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; en donde el anillo de 4, 5, 6, ó 7 miembros está opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o amino. En otra modalidad, el anillo de 4, 5, 6, ó 7 miembros se selecciona a partir de: En una modalidad de la invención, R2b representa alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbociclilo o carbociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en donde el grupo carbociclilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbonilo, -CO-carbociclilo, azido, nitro y ciano, y en donde el grupo -CO-carbociclilo puede estar además opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, azido, nitro y ciano. En otra modalidad de la invención, R2b representa alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, fenilo, o bencilo, en donde el grupo fenilo o bencilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbonilo, -CO-carbociclilo, azido, nitro y ciano, y en donde el grupo -CO-carbociclilo puede estar además opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, azido, nitro y ciano. En otra modalidad, R2t) representa metilo, etilo, butilo normal, butilo terciario, bencilo, ¡sopropilo, isobutilo, o fenilo. En una modalidad adicional, Rz representa etilo, butilo terciario, bencilo, ¡sopropilo, isobutilo, o fenilo; En una modalidad de la invención, R3 representa halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, o CF3. En otra modalidad, R3 representa cloro, flúor, metoxilo o CF3. En otra modalidad, R3 representa 3-flúor, 4-cloro, 4-flúor, 4-metoxilo, o 4-CF3. En una modalidad adicional, R3 representa 4-cloro.

En una modalidad de la invención, R4 representa hidroxilo o alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono. En otra modalidad, R4 representa MeO.

En una modalidad de la invención, R4 se localiza en la posición 8, tal como 8-MeO.

Por consiguiente, en una modalidad, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (Ib): en donde: R , R2 y R3 y n son como se definen anteriormente para los compuestos de la fórmula (I). n puede representar, por ejemplo, un entero en el intervalo 1 a 3, tal como 1.

Aunque las modalidades para cada variable se han enlistado en términos generales anteriormente por separado para cada variable, esta invención incluye los compuestos en donde varias modalidades o cada modalidad en la fórmula (I) se selecciona a partir de cada una de las modalidades enlistadas anteriormente. Por consiguiente, esta invención pretende incluir todas las combinaciones de modalidades para cada variable descrita anteriormente en la presente, incluyendo las sales de las mismas.

En una modalidad, los ejemplos de los compuestos de presente invención incluyen: 2-[6-(4-cloro-fen¡l)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(2-fenil-et¡l)-acetamida; 6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4-[2-oxo-2-(1 - piperidinil)-etil]-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepina; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(2-furanil-metil)-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-ciclohexil-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(2,2,2-trifluoro-etil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(3-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(4-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(4-fluoro-fen¡l)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-4-pirid¡nil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-3-piridinil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-1 ,3-t¡azol-2-il-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-2-piridinil-acetamida; N-(4-azido-fenil)-2-t(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(tetra idro-2-furanil-metil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(9-oxo-9H-fluoren-2-il)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[3-(fenil-carbonil)-fenil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-{[4-(fenil-carbonil)-fenil]-metil}-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[4-yodo-2-(fenil-carbonil)-fenil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][ ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(4-{[4-(metiloxi)-fenil]-carbonil}-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(9-oxo-9H-fluoren-1 -il)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-{4-[(4-yodo-fenil)-carbonil]-fenil}-acetamida; 6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4-[2-(4-morfolinil)-2-oxo-etil]-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepina; N-(1 ,3-benzodioxol-5-il-metil)-2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazep¡n-4-il]-N-[(1 S)-1 -fenil-e til] -aceta mida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[(1 R)-1 -fenil-etil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(ciclopropil-metil)-acetamida; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-d¡azepin-4-il]-acetato de metilo; 2-[(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(4-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-8-hidroxi-1 -metil-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-A/-(4-fluoro-fenil)-acetamida; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de etilo; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de 1 -metil-etilo; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de butilo; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1, 4] -benzo-diazepin-4-il]-A/-[2-(metil-amino)-etil]- aceta mida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-4-piperidinil-acetamida; 1 -{[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetil}-N-metil-4-piperidin-amina; -(4-amino-piperidin-1 - il)-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1 -metil-4H-benzo-[f][1,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-diazepin-4-il)-etanona; (S)-N-(azetidin-3-il)-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1-metil-4H-benzo-[f][1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-diazepin-4-il)-acetamida; (S)-1 - (3-amino-azetidin-1 -il)-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1 -metil-4H-benzo-[f][1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-diazepin-4-il)-etanona; (S)-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1-metil-4H-benzo-[f][ ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-diazepin-4-il)-1 - (4-hidroxi-pipe ridin- -il)-etanona; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[2-(4-morfolinil)-etil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[2-(1 H-imidazol-4-il)-etil]-acetamida; acetato de (S)-terbutil-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1 -metil-4H-benzo-[f][1,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-diazepin-4-ilo); y acetato de (S)-piperidin-4-il-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1 - met¡l-4H-benzo-[f][1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-diazep¡n-4-¡lo); o una sal de los mismos.

En otra modalidad, los ejemplos de los compuestos de la presente invención incluyen: 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(2-fenil-etil)-acetamida; 6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4-[2-oxo-2-(1-piperidinil)-etil]-4H-[l ,2,4]-triazolo-[4,3-a][l ,4]-benzo-diazepina; 2-[6-(4-c!oro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(2-furanil-metil)-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-ciclohexil-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(2,2,2-trifluoro-etil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(3-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(4-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(4-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-4-piridinil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-3-piridinil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][l ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-1 ,3-tiazol-2-il-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diaze in-4-il]-N-2-piridinil-acetamida; N-(4-azido-fenil)-2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4J-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(tetrahidro-2-furanil-metil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(9-oxo-9H-fluoren-2-il)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-tn'azolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[3-(fenil-carbonil)-fenil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-{[4-(fenil-carbonil)-fenil]-metil}-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[4-yodo-2-(fenil-carbonil)-fenil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(4-{[4-(metiloxi)-fenil]-carbonil}-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(9-oxo-9H-fluoren-1 - il) -aceta mida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-{4-[(4-yodo-fenil)-carbonil]-fenil}-acetamida; 6- (4-c loro-fe nil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4-[2-(4-morfolinil)-2-oxo-etil]-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepina; N-(1 ,3-benzodioxol-5-il-metil)-2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[(1 S)-1 -fenil-etil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[(1 R)-1 -fenil-etil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-(ciclopropil-metil)-acetamida; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de metilo; 2-[(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-M]-N-(4-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-8-hidroxi-1 -metil-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][l ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-(4-fluoro-fenil)-acetamida; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de etilo; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de 1 -melil-etilo; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-acetato de butilo; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-[2-(metil-amino)-etil]-acetamida; y 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il] - A«/-4-piperidiml-acetamida; o una sal de los mismos.

En una modalidad adicional, los ejemplos de los compuestos de la presente invención incluyen: 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-etil-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazep¡n-4-il]-/V-(2-fenil-etil)-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-(2-furanil-metil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-A/-(2-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-/V-(3-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-/V-(4-fluoro-fenil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-A/-2-piridinil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1-metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-d¡azepin-4-il]-/V-3-p¡ridinil-acetam¡da; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-4-piridinil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-IV-1 ,3-tiazol-2-il-acetam¡da; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-met¡l-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-d¡azepin-4-il]-/V-(ciclopropil-metil)-acetam¡da; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazep¡n-4-il]-A/-[(1 S)-1 -fen¡l-etil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-A/-{[4-(fenil-carbonil)-fenil]-metil}-acetamida; A/-et¡l-2-[(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1-metil-8-(met¡loxi)-4H-[1,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-d¡azepin-4-il]-acetamida; A/-(4-fluoro-fen¡l)-2-[(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1-metil-8-(met¡lox¡)-4A7-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-d¡azep¡n-4-¡l]-A-[2-(dimetil-amino)-etil]-acetamida; [(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-acetato de metilo; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-d¡azep¡n-4-il]-acetato de 1 -metil-etilo; t(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de butilo; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazep¡n-4-¡l]-N-[2-(met¡l-amino)-etil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-4-piperidinil-acetamida; 1 -{[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetil}-N-metil-4-piperidin-amina; 1 -{[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetil}-4-piperidin-amina; A/-3-azetidinil-2-[(4S)-6-(4-cloro-†enil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetamida; 1-{[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4W-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1,4]-benzo-d¡azep¡n-4-¡l]-acet¡l}-3-azet¡din-amina; (S)-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1-metil-4H-benzo-[f][1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-diazepin-4-il)-1 - (4-hidroxi-piperidin-1 - il)-etanona; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[2-(4-morfolinil)-etil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][ ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[2-(1 H-imidazol-4-il)-etil]-acetamida; acetato de (S)-terbutil-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metox¡-1 -metil-4H-benzo-[f][1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-diazepin-4-ilo); acetato de (S)-piperid¡n-4-il-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metox¡-1 -met¡l-4H-benzo-[f][1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1 ,4]-diazepin-4-ilo) ; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-N-[2-(d¡metil-amino)-etil]-acetam¡da; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-[3-(d¡met¡l-am¡no)-propil]-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -met¡l-8-(met¡lox¡)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-4-pirimidinil-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo- [4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-A/-(5-metil-3-isoxazolil)-acetamida; 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-acetamida; [4-(metiloxi)-fenil]-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)- 4H-[1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de metilo; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-d¡azepin-4-il]-acetato de 2-metil-propilo; [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de tetrahidro-2H-piran-4-ilo; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-4- iridinil-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 , 4] -benzo-diazepin-4-il]-/V-(ciclopropil-metil)- aceta mida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-1-metil-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/\/-4-piridinil-acetamida; 2-[6-(4-cloro-fenil)-l -metil-8-(metiloxi)-4/--[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-A/-1 ,3-tiazol-2-il-acetamida; y [6-(4-cloro-fenil)-1-metil-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazep¡n-4-il]-acetato de metilo; o una sal de los mismos.

En una modalidad de la invención, se proporciona un compuesto, el cual es la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-¡l]-A/-etil-acetamida, o una sal de la misma. En otra modalidad, se proporciona un compuesto, el cual es la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][ ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-etil-acetamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En una modalidad adicional, se proporciona un compuesto, el cual es la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diaze in-4-il]-A/-etil-acetamida.

Se apreciará que la presente invención cubre los compuestos de la fórmula (I) como la base libre y como las sales de los mismos, por ejemplo, como una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. En una modalidad, la invención se refiere a los compuestos de la fórmula (I) como la base libre. En otra modalidad, la invención se refiere a los compuestos de la fórmula (I), o a una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Debido a su uso potencial en medicina, las sales de los compuestos de la fórmula (I) son deseablemente farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas pueden incluir las sales de adición de ácido o de base. Para una revisión sobre las sales adecuadas, véase Berge y colaboradores, J. Pharm. ScL, 66: 1-19, (1977). Típicamente, se puede preparar fácilmente una sal farmacéuticamente aceptable utilizando un ácido o una base deseada, como sea apropiado. La sal resultante se puede precipitar a partir de una solución, y se puede recolectar mediante filtración, o se puede recuperar mediante la evaporación del solvente.

Una sal de adición de base farmacéuticamente aceptable se puede formar mediante la reacción de un compuesto de la fórmula (I) con una base inorgánica u orgánica adecuada (por ejemplo, trietil-amina, etanolamina, trietanolamina, colina, arginina, Usina o histidina), opcionalmente en un solvente adecuado, para dar la sal de adición de base, la cual usualmente se aisla, por ejemplo, mediante cristalización y filtración. Las sales de base farmacéuticamente aceptables incluyen las sales de amonio, las sales de metales alcalinos, tales como aquéllas de sodio y potasio, las sales de metales alcalinotérreos, tales como aquéllas de calcio y magnesio, y las sales con bases orgánicas, incluyendo las sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, tales como isopropil-amina, dietil-amina, etanolamina, trimetil-amina, diciclohexil-amina y N-metil-D-glucamina.

Una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable se puede formar mediante la reacción de un compuesto de la fórmula (I) con un ácido inorgánico u orgánico adecuado (tal como ácido bromhídrico, clorhídrico, azufreico, nítrico, fosfórico, succínico, maleico, acético, propiónico, fumárico, cítrico, tartárico, láctico, benzoico, salicílico, glutámico, aspártico, p-toluen-sulfónico, bencen- sulfónico, metan-sulfónico, etan-sulfónico, naftalen-sulfónico, tal como 2-naftalen-sulfónico, o hexanoico), opcionalmente en un solvente adecuado, tal como un solvente orgánico, para dar la sal, la cual usualmente se aisla, por ejemplo, mediante cristalización y filtración. Una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula (I) puede comprender o puede ser, por ejemplo, una sal de bromhidrato, clorhidrato, sulfato, nitrato, fosfato, succinato, maleato, acetato, propionato, fumarato, citrato, tartrato, lactato, benzoato, salicilato, glutamato, aspartato, p-toluen-sulfonato, bencen-sulfonato, metan-sulfonato, etan-sulfonato, naftalen-sulfonato (por ejemplo, 2-naftalen-sulfonato) o hexanoato.

Se pueden utilizar otras sales no farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, formatos, oxalatos o trifluoro-acetatos, por ejemplo, en el aislamiento de los compuestos de la fórmula (I), y se incluyen dentro del alcance de esta invención.

La invención incluye, dentro de su alcance, todas las posibles formas estequiométricas y no estequiométricas de las sales de los compuestos de la fórmula (I).

Se apreciará que muchos compuestos orgánicos pueden formar complejos con solventes en los que se hacen reaccionar, o a partir de los cuales se precipitan o se cristalizan. Estos complejos son conocidos como "solvatos". Por ejemplo, un complejo con agua se conoce como un "hidrato". Se puede utilizar solventes con altos puntos de ebullición y/o capaces de formar enlaces de hidrógeno, tales como agua, xileno, /V-metil-pirrolidinona, metanol y etanol, para formar solvatos. Los métodos para la identificación de los solvatos incluyen, pero no se limitan a, RMN y microanálisis. Los solvatos de los compuestos de la fórmula (I) están dentro del alcance de la invención.

La invención incluye, dentro de su alcance, todas las posibles formas estequiométricas y no estequiométricas de los solvatos de los compuestos de la fórmula (I).

La invención abarca todos los pro-fármacos de los compuestos de la fórmula (I), y de las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, los cuales, después de su administración al receptor, son capaces de proporcionar (directa o indirectamente) un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un metabolito activo o residuo del mismo. Estos derivados pueden ser reconocidos por los expertos en este campo, sin una indebida experimentación. No obstante, se hace referencia a la enseñanza de Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5a. Edición, Volumen 1: Principies and Practice, el cual se incorpora a la presente como referencia hasta el grado de la enseñanza de tales derivados.

Los compuestos de la fórmula (I) pueden estar en una forma cristalina o amorfa. Adicionalmente, Algunas de las formas cristalinas de los compuestos de la fórmula (I) pueden existir como polimorfos, los cuales se incluyen dentro del alcance de la presente invención. Las formas polimórficas de los compuestos de la fórmula (I) se pueden caracterizar y diferenciar utilizando un número de técnicas analíticas convencionales, incluyendo, pero no limitándose a, patrones de difracción en polvo de rayos-X (XRPD), espectros infrarrojos (IR), espectros Raman, calorimetría de exploración diferencial (DSC), análisis termogravimétrico (TGA), y resonancia magnética nuclear en estado sólido (SSRMN).

Algunos de los compuestos descritos en la presente pueden contener uno o más átomos quirales, de tal manera que se pueden formar isómeros ópticos, por ejemplo, - enantiómeros o diaestereoisómeros. De conformidad con lo anterior, la presente invención abarca todos los isómeros de los compuestos de la fórmula (I), ya sea como los isómeros individuales aislados tal como para quedar sustancialmente libres del otro isómero (es decir, puros), o bien como mezclas (es decir, racematos y mezclas racémicas).

De una manera similar, la invención también se extiende hasta los isómeros conformacionales de los compuestos de la fórmula (I), y cualesquiera isómeros geométricos (cis y/o trans) de estos compuestos.

Un isómero individual aislado tal como para quedar sustancialmente libre del otro isómero (es decir, puro), se puede aislar de tal manera que esté presente menos del 10 por ciento, en particular menos de aproximadamente el 1 por ciento, por ejemplo, menos de aproximadamente el 0.1 por ciento del otro isómero.

La separación de los isómeros se puede lograr mediante las técnicas convencionales conocidas por los expertos en este campo, por ejemplo, mediante cristalización fraccionaria, cromatografía, o HPLC.

Ciertos compuestos de la fórmula (I) pueden existir en una de varias formas tautoméricas. Se entenderá que la presente invención abarca todos los tautomeros de los compuestos de la fórmula (I), ya sea como los tautomeros individuales o como mezclas de los mismos.

Se apreciará, a partir de lo anterior, que dentro del alcance de la invención se incluyen los solvatos, isómeros y las formas polimórficas de los compuestos de la fórmula (I), y las sales de los mismos.

Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden hacer mediante una variedad de métodos, incluyendo la química convencional. Cualquier variable anteriormente definida continuará teniendo el significado anteriormente definido, a menos que se indique de otra manera. Los métodos sintéticos generales ilustrativos se estipulan más adelante, y luego se preparan los compuestos específicos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en los ejemplos de procesamiento. Estos procesos forman aspectos adicionales de la presente invención.

A través de toda la memoria descriptiva, las fórmulas generales se designan mediante numerales romanos (I), (II), (III), (IV), etc. Los subconjuntos de estas fórmulas generales se definen como (la), (Ib), (le), etc.

Los compuestos de la fórmula (le), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es OR2b, se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 1, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (Id), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es OH, con R2bOH, en la presencia de DIC y DMAP, a temperatura ambiente. De una manera alternativa, los compuestos de la fórmula (le) se pueden preparar mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (Id) con cloruro de oxalilo, seguida por la adición de RzbOH.

Esquema 1 Los compuestos de la fórmula (le), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es NR aR2'a, se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 2, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (Id), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es OH, con R2aR2 aNH, en la presencia de HATU o HBTU y DIEA, a temperatura ambiente. De una manera alternativa, los compuestos de la fórmula (le) se pueden preparar mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (Id) con cloruro de oxalilo, seguida por la adición de R2aR2'aNH, en la presencia de trietil-amina.

Esquema 2 De una manera alternativa, los compuestos de la fórmula (le), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es NR2aRaa, se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 3, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (III) con hidrazina, seguida por la reacción de la hidrazona resultante (II) con R1C(OR)3. De preferencia, la hidrazona (II) se utiliza sin mayor purificación, y se hace reaccionar con R1C(OR)3.

Esquema 3 en donde R representa alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, tal como metilo.

Los compuestos de la fórmula (Id), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es OH, se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 4. Las condiciones de reacción adecuadas comprenden hacer reaccionar los compuestos de la fórmula (le), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es OR2t, con hidróxido alcalino, de preferencia hidróxido de sodio o hidróxido de litio.

Esquema 4 Los compuestos de la fórmula (le), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es OR2", se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 5, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (IV) con AcOH.

Los compuestos de la fórmula (IV) se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 6, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (VI) con hidrazina por debajo de 15°C, seguida por la reacción de la hidrazona resultante (V) con FPCOCI a 0°C. En términos generales, la hidrazona (V) se utiliza sin mayor purificación, y se hace reaccionar con FPCOCI, por ejemplo, a 0°C.

Esquema 6 Los compuestos de la fórmula (III)' se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 7, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (VII) con R2aR2'aNH, en la presencia de HATU y DIEA, por ejemplo, a temperatura ambiente.

Esquema 7 Los compuestos de la fórmula (VII) se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 8. Las condiciones de reacción adecuadas comprenden hacer reaccionar los compuestos de la fórmula (VI) con hidróxido alcalino, tal como hidróxido de sodio.

Esquema 8 Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 9, a partir de los compuestos de la fórmula (VIII) mediante el tratamiento con reactivo de Lawesson o P4Si0- Las condiciones de reacción adecuadas comprenden hacer reaccionar los compuestos de la fórmula (VIII) con P4S 0 en 1,2- dicloro-etano, por ejemplo, a 70°C.

Esquema 9 Los compuestos de la fórmula (VIII) se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 10, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (X) con una base orgánica, tal como trietil- amina, seguida por la reacción de la amina resultante (IX) con ácido acético. En términos generales, la amina (IX) se utiliza sin mayor purificación, y se hace reaccionar con AcOH, por ejemplo, a 60°C.

Esquema 10 Los compuestos de la fórmula (X) se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción 11, mediante la reacción de los compuestos de la fórmula (XI) con el derivado de cloruro de acilo (XII) a partir del ácido aspártico protegido.

Esquema 11 Los compuestos de la fórmula (XI) se pueden preparar de acuerdo con los procedimientos descritos en Synthesis 1980, 677-688.

Los cloruros de acilo (XII) se pueden preparar de acuerdo con los procedimientos descritos en J. Org. C em., 1990, 55, 3068-3074, y J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 2001, 1673-1695 Será apreciado por los expertos en la materia que puede ser conveniente proteger uno o más grupos funcionales de los compuestos descritos en los procesos anteriores. Los ejemplos de los grupos protectores y los medios para su remoción se pueden encontrar en T. W. Greene 'Protective Groups in Organic Synthesis' (4a. Edición, J. Wiley and Sons, 2006). Los grupos protectores de amina adecuados incluyen acilo (por ejemplo, acetilo, carbamato (por ejemplo, 2',2',2'-tricloro-etoxi-carbonilo, benciloxi-carbonilo o terbutoxi-carbonilo), y aril-alquilo (por ejemplo, bencilo), los cuales se pueden remover mediante hidrólisis (por ejemplo, utilizando un ácido, tal como ácido clorhídrico en dioxano, o ácido trifluoro-acético en dicloro-metano), o reductivamente (por ejemplo, hidrogenólisis de un grupo bencilo o benciloxi-carbonilo, o mediante la remoción reductiva de un grupo 2',2',2'-tricloro-etoxi-carbonilo utilizando zinc en ácido acético), como sea apropiado. Otros grupos protectores de amina adecuados incluyen trif luoro-acetilo (-COCF3), el cual se puede remover mediante hidrólisis catalizada por base.

Se apreciará que, en cualquiera de las rutas descritas anteriormente, se puede variar el orden preciso de los pasos sintéticos mediante los cuales se introducen los distintos grupos y fracciones en la molécula. Estará dentro de la experiencia del practicante en este campo, asegurar que los grupos o fracciones introducidos en una etapa del proceso no sean afectados por las siguientes transformaciones y reacciones, y seleccionar el orden de los pasos sintéticos de conformidad con lo anterior.

Se cree que ciertos compuestos intermediarios descritos anteriormente son novedosos y, por consiguiente, forman un aspecto todavía adicional de la invención.

Los compuestos de la fórmula (I), y las sales de los mismos, son inhibidores de bromodominio y, por consiguiente, se cree que tienen una utilidad potencial en el tratamiento de las enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio.

La presente invención, por consiguiente, proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en terapia. En una modalidad, se proporciona la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-etil-acetamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para utilizarse en terapia. Los compuestos de la fórmula (I), o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden ser para utilizarse en el tratamiento de enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio.

En una modalidad, se proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en el tratamiento de las enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio. En otra modalidad, se proporciona un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en el tratamiento de una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica. En una modalidad adicional, se proporciona un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en el tratamiento de cáncer, tal como carcinoma de línea media.

En una modalidad, se proporciona la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-etil-acetamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para utilizarse en el tratamiento de enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio. En otra modalidad, se proporciona la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4/-/-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-etil-acetamida , o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para utilizarse en el tratamiento de una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica. En una modalidad adicional, se proporciona la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-A-etil-acetamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, para utilizarse en el tratamiento de cáncer, tal como carcinoma de línea media.

En una modalidad, se proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio. En otra modalidad, se proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica. En una modalidad adicional, se proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de cáncer, tal como carcinoma de línea media.

En una modalidad, se proporciona el uso de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida, o de una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio. En otra modalidad, se proporciona el uso de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida, o de una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica. En una modalidad adicional, se proporciona el uso de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida, o de una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de cáncer, tal como carcinoma de línea media.

En una modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de una enfermedad o condición para la cual se indique un inhibidor de bromodominio, en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otra modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica, en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad adicional, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer, tal como carcinoma de línea media, en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de una enfermedad o condición para la cual se indique un inhibidor de bromodominio, en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida, o de una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En otra modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica, en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-met¡l-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida, o de una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. En una modalidad adicional, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer, tal como carcinoma de línea media, en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-N-etil-acetamida, o de una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

En una modalidad, el sujeto que lo necesita es un mamífero, en particular un ser humano.

Como se utiliza en la presente, el término "cantidad efectiva" significa la cantidad de un fármaco o agente farmacéutico que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o humano que esté siendo buscada, por ejemplo, por un investigador o clínico. Adicionalmente, el término "cantidad terapéuticamente efectiva" significa cualquier cantidad que, comparándose con un sujeto correspondiente que no haya recibido esa cantidad, da como resultado un mejor tratamiento, sanado, prevención, o mitigación de una enfermedad, trastorno, o efecto secundario, o una disminución en la velocidad de avance de una enfermedad o de un trastorno. El término también incluye, dentro de su alcance, las cantidades efectivas para mejorar la función fisiológica normal.

Se cree que los inhibidores de bromodominio son útiles en el tratamiento de una variedad de enfermedades o condiciones relacionadas con inflamación sistémica o de tejidos, respuestas inflamatorias a la infección o ipoxia, activación y proliferación celular, metabolismo de lípidos, fibrosis, y en la prevención y el tratamiento de infecciones virales.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en el tratamiento de una amplia variedad de condiciones autoinmunes e inflamatorias crónicas, tales como artritis reumatoide, osteoartritis, gota aguda, soriasis, lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria del intestino (enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa), asma, enfermedad obstructiva crónica de las vías respiratorias, neumonitis, miocarditis, pericarditis, miositis, eczema, dermatitis, alopecia, vitíligo, enfermedades ampollares de la piel, nefritis, vasculitis, ateroesclerosis, enfermedad de Alzheimer, depresión, retinitis, uveítis, escleritis, hepatitis, pancreatitis, cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante, enfermedad de Addison, hipofisitis, tiroiditis, diabetes tipo I, y rechazo agudo de órganos trasplantados.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en el tratamiento de una amplia variedad de condiciones inflamatorias agudas, tales como gota aguda, arteritis de células gigantes, nefritis, incluyendo nefritis por lupus, vasculitis con involucramiento de órganos, tal como glomerulonefritis, vasculitis, incluyendo arteritis de células gigantes, granulomatosis de Wegener, poliarteritis nodosa, enfermedad de Behcet, enfermedad de Kawasaki, arteritis de Takayasu, y rechazo agudo de órganos trasplantados.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en la prevención o el tratamiento de las enfermedades o condiciones que involucren respuestas inflamatorias a infecciones con bacterias, virus, hongos, parásitos o sus toxinas, tales como sepsis, síndrome de sepsis, choque séptico, endotoxemia, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS), síndrome de disfunción de múltiples órganos, síndrome de choque tóxico, lesión pulmonar aguda, ARDS (síndrome de insuficiencia respiratoria de adultos), insuficiencia renal aguda, hepatitis fulminante, quemaduras, pancreatitis aguda, síndromes post-quirúrgicos, sarcoidosis, reacciones de Herxheimer, encefalitis, mielitis, meningitis, malaria, infecciones virales asociadas con síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS), tales como influenza, herpes zóster, herpes símplex, y coronavirus.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en la prevención o el tratamiento de las condiciones asociadas con isquemia-lesión por reperfusión, tal como infarto de miocardio, isquemia cerebro-vascular (embolia), síndromes coronarios agudos, lesión renal por reperfusión, trasplante de órgano, injerto de derivación de arteria coronaria (bypass), procedimientos de derivación .(bypass) cardio-pulmonar, y embolia pulmonar, renal, hepática, gastro-intestinal, o de las extremidades periféricas.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en el tratamiento de trastornos del metabolismo de lípidos por medio de la regulación de APO-A1, tal como hipercolesterolemia, ateroesclerosis y enfermedad de Alzheimer.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en el tratamiento de condiciones fibroticas, tales como fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis renal, contracción post-operatoria, formación queloide, esclerodermia, y fibrosis cardíaca.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en la prevención y el tratamiento de infecciones virales, tales como virus de herpes, virus de papiloma humano, adenovirus, poxvirus, y otros virus de ADN.

Los inhibidores de bromodominio pueden ser útiles en el tratamiento de cáncer, incluyendo carcinomas hematológicos, epiteliales, incluyendo de pulmón, de mama, y de colon, carcinomas de línea media, tumores mesenquimales, hepáticos, renales, y neurológicos.

En una modalidad, la enfermedad o condición para la cual se indique un inhibidor de bromodominio se selecciona a partir de enfermedades asociadas con síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, tal como sepsis, quemaduras, pancreatitis, trauma mayor, hemorragia, e isquemia. En esta modalidad, el inhibidor de bromodominio se administraría en el punto de diagnóstico para reducir la incidencia de: síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS), el establecimiento de choque, síndrome de disfunción de múltiples órganos, el cual incluye el establecimiento de lesión pulmonar aguda, síndrome de insuficiencia respiratoria de adultos (ARDS), lesión renal aguda, hepática, cardíaca, y gastro- intestinal, y mortalidad. En otra modalidad, el inhibidor de bromodominio se administraría antes de cirugía o de otros procedimientos asociados con un alto riesgo de sepsis, hemorragia, daño extenso del tejido, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS), o MODS (síndrome de disfunción de múltiples órganos). En una modalidad particular, la enfermedad o condición para la cual se indica un inhibidor de bromodominio es sepsis, síndrome de sepsis, choque séptico y/o endotoxemia. En otra modalidad, el inhibidor de bromodominio se indica para el tratamiento de pancreatitis aguda, o aguda crónica. En otra modalidad, el inhibidor de bromodominio se indica para el tratamiento de quemaduras.

En una modalidad, la enfermedad o condición para la cual se indica un inhibidor de bromodominio se selecciona a partir de infecciones y reactivaciones de herpes símplex, llagas frías, infecciones y reactivaciones de herpes zóster, varicela, sarampión, virus de papiloma humano, neoplasia cervical, infecciones por adenovirus, incluyendo enfermedad respiratoria aguda, e infecciones por poxvirus, tales como cowpox y viruela, y virus de fiebre de cerdo africano. En una modalidad particular, se indica un inhibidor de bromodominio para el tratamiento de infecciones de la piel o del epitelio cervical por el virus de papiloma humano.

El término "enfermedades o condiciones para las cuales se indica un inhibidor de bromodominio", pretende incluir cualquiera o todos los estados de enfermedad anteriores.

En una modalidad, se proporciona un método para inhibir un bromodominio, el cual comprende poner en contacto el bromodominio con un compuesto de la fórmula (I), o con una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Aunque es posible que, para utilizarse en terapia, un compuesto de la fórmula (I), así como las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, se puede administrar como el producto químico sin procesar, es común presentar el ingrediente activo como una composición farmacéutica.

La presente invención, por consiguiente, proporciona, en un aspecto adicional, una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, son como se describen anteriormente. En una modalidad, se proporciona una composición farmacéutica, la cual comprende la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)- 1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-etil-acetamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los vehículos, diluyentes o excipientes deben ser aceptables en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la composición y no perjudiciales para el receptor de los mismos. De acuerdo con otro aspecto de la invención, también se proporciona un proceso para la preparación de una composición farmacéutica, el cual incluye mezclar un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. La composición farmacéutica puede ser para utilizarse en el tratamiento de cualquiera de las condiciones descritas en la presente.

Debido a que se pretende que los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se utilicen en composiciones farmacéuticas, será fácilmente entendido que cada uno se proporciona de preferencia en una forma sustancialmente pura, por ejemplo, cuando menos el 60 por ciento pura, de una manera más adecuada cuando menos el 75 por ciento pura, y de preferencia cuando menos el 85 por ciento pura, en especial cuando menos el 98 por ciento pura (por ciento sobre una base de peso por peso).

Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosis unitaria que contengan una cantidad previamente determinada del ingrediente activo por dosis unitaria. Las composiciones de dosificación unitaria preferidas son aquéllas que contienen una dosis o sub-dosis diaria, o una fracción apropiada de la misma, de un ingrediente activo. Estas dosis unitarias, por consiguiente, se pueden administrar más de una vez al día. Las composiciones de dosificación unitaria preferidas son aquéllas que contienen una dosis o sub-dosis diaria (para su administración más de una vez al día), como se menciona anteriormente en la presente, o una fracción apropiada de la misma, de un ingrediente activo.

Las composiciones farmacéuticas se pueden adaptar para su administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo, por la vía oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, inhalada, intranasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual o transdérmica) , vaginal o parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica). Estas composiciones se pueden preparar mediante cualquier método conocido en la técnica de la farmacia, por ejemplo, poniendo en asociación el ingrediente activo con los vehículos o excipientes.

En una modalidad, se proporciona una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, adaptada para su administración oral.

En una modalidad, la composición farmacéutica se adapta para su administración parenteral, en particular para su administración intravenosa.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para su administración parenteral incluyen soluciones estériles para inyección acuosas y no acuosas, las cuales pueden contener antioxidantes, reguladores del pH, bacteriostáticos, y solutos, que hagan a la composición isotónica con la sangre del receptor pretendido; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las composiciones se pueden presentar en recipientes de dosis unitaria o de múltiples dosis, por ejemplo, ampolletas selladas y frascos, y se pueden almacenar en una condición secada por congelación (liofilizada), que requiera solamente de la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo, agua para inyecciones, inmediatamente antes de usarse. Se pueden preparar soluciones y suspensiones para inyección extemporáneas a partir de polvos, gránulos y tabletas estériles.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para su administración oral se pueden presentar como unidades separadas, tales como cápsulas o tabletas; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas comestibles o batidos; o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite.

Por ejemplo, para su administración oral en la forma de una tableta o cápsula, el componente de fármaco activo se puede combinar con un vehículo oral inerte no tóxico farmacéuticamente aceptable, tal como etanol, glicerol, agua, y similares. Los polvos adecuados para incorporarse en tabletas o cápsulas se pueden preparar mediante la reducción del compuesto hasta un tamaño fino adecuado (por ejemplo, mediante micronización), y mezclando con un vehículo farmacéutico similarmente preparado, tal como un carbohidrato comestible, tal como, por ejemplo, almidón o manitol. También puede haber un agente saborizante, conservador, dispersante y colorante presente.

Las cápsulas se pueden hacer mediante la preparación de una mezcla de polvo, como se describe anteriormente, y llenando las cubiertas de gelatina formadas. Se pueden agregar derrapantes y lubricantes, tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, o polietilenglicol sólido a la mezcla de polvo antes de la operación de llenado. También se puede agregar un agente desintegrante o solubilizante, tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato de sodio, para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiera la cápsula.

Más aún, cuando se desee o sea necesario, también se pueden incorporar en la mezcla, aglutinantes, derrapantes, lubricantes, agentes edulcorantes, saborizantes, agentes desintegrantes y agentes colorantes adecuados. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales, tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas, tales como acacia, tragacanto o alginato de sodio, carboxi-metil-celulosa, polietilenglicol, ceras, y similares. Los lubricantes utilizados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio, y similares. Los desintegrantes incluyen, sin limitación, almidón, metil-celulosa, agar, bentonita, goma de xantano, y similares. Las tabletas se formulan, por ejemplo, mediante la preparación de una mezcla de polvo, la granulación o formación de pedazos, la adición de un lubricante, y la compresión en tabletas. Una mezcla de polvo se prepara mediante la mezcla del compuesto, adecuadamente triturado, con un diluyente o con una base como se describe anteriormente, y opcionalmente, con un aglutinante, tal como carboxi-metil-celulosa, un alginato, gelatina, o polivinil-pirrolidona, un retardante de solución, tal como parafina, un acelerador de resorción, tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción, tal como bentonita, caolín, o difosfato de calcio. La mezcla de polvo se puede granular mediante humectación con un aglutinante, tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de acacia, o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos, y forzando a través de un tamiz. Como una alternativa a la granulación, la mezcla de polvo se puede pasar a través de la máquina formadora de tabletas, y el resultado es el de pedazos imperfectamente formados que se rompen en gránulos. Los gránulos se pueden lubricar para prevenir la adhesión a los dados formadores de tabletas por medio de la adición de ácido esteárico, una sal de estearato, talco, o aceite mineral. La mezcla lubricada se comprime entonces en tabletas. Los compuestos de la presente invención también se pueden combinar con un vehículo inerte de flujo libre, y se comprimen en tabletas directamente sin pasa a través de los pasos de granulación o formación de pedazos. Se puede proporcionar un recubrimiento protector transparente u opaco que consiste en un recubrimiento sellador de shellac, un recubrimiento de azúcar o de material polimérico, y un recubrimiento pulido de cera. Se pueden agregar materiales de tinte a estos recubrimientos para distinguir diferentes dosificaciones unitarias.

Los fluidos orales, tales como soluciones, jarabes y elíxires, se pueden preparar en una forma unitaria de dosificación, de tal manera que una cantidad dada contenga una cantidad previamente determinada del compuesto. Los jarabes se pueden preparar mediante la disolución del compuesto en una solución acuosa adecuadamente saborizada, mientras que los elíxires se preparan a través del uso de un vehículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones se pueden formular mediante la dispersión del compuesto en un vehículo no tóxico. También se pueden agregar solubilizantes y emulsionantes, tales como alcoholes isoestearílicos etoxilados y éteres de sorbitol de polioxietileno, conservadores, aditivos de sabor, tales como aceite de hierbabuena, o edulcorantes naturales, o sacarina, u otros edulcorantes artificiales, y similares.

Cuando sea apropiado, las composiciones unitarias de dosificación para su administración oral se pueden microencapsular. La formulación también se puede preparar para prolongar o sostener la liberación como, por ejemplo, mediante el recubrimiento o el empotramiento del material en partículas en polímeros, cera, o similares.

Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, también se pueden administrar en la forma de sistemas de suministro de liposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes, y vesículas multilamelares. Los liposomas se pueden formar a partir de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina, o fosfatidil-colinas.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para su administración tópica se pueden formular como ungüentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, aspersiones, aerosoles, o aceites.

Para los tratamientos de los ojos o de otros tejidos externos, por ejemplo, la boca y la piel, las composiciones de preferencia se aplican como un ungüento o una crema tópica. Cuando se formula en un ungüento, el ingrediente activo se puede emplear con una base para ungüento ya sea parafínica o bien miscible en agua. De una manera alternativa, el ingrediente activo se puede formular en una crema con una base para crema de aceite en agua o en una base de agua en aceite.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas para su administración tópica a los ojos incluyen gotas para los ojos, en donde el ingrediente activo se disuelve o se suspende en un vehículo adecuado, en especial en un solvente acuoso.

Las formas de dosificación para su administración nasal o inhalada se pueden formular de una manera conveniente como aerosoles, soluciones, suspensiones, geles, o polvos secos.

Para las composiciones adecuadas y/o adaptadas para su administración inhalada, se prefiere que el compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, esté en una forma de tamaños de partículas reducidos, por ejemplo, que se obtenga mediante micronización. El compuesto o la sal del tamaño de partículas preferible de tamaño reducido (por ejemplo, micronizado) se define por un valor D50 de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 10 mieras (por ejemplo, como se mide utilizando difracción de láser).

Las formulaciones en aerosol, por ejemplo, para su administración inhalada, pueden comprender una solución o una suspensión fina de la sustancia activa en un solvente acuoso o no acuoso farmacéuticamente aceptable. Las formulaciones en aerosol se pueden presentar en cantidades individuales o en múltiples dosis, en una forma estéril en un recipiente sellado, el cual puede tomar la forma de un cartucho o repuesto para utilizarse con un dispositivo atomizados o inhalador. De una manera alternativa, el recipiente sellado puede ser un dispositivo dosificador unitario, tal como un inhalador nasal de una sola dosis, o un dosificador de aerosol adaptado con una válvula medidora (inhalador de dosis medida), el cual se pretende para su desecho una vez que se haya agotado el contenido del recipiente.

Cuando la forma de dosificación comprende un dosificador de aerosol, de preferencia contiene un propelente adecuado bajo presión, tal como aire comprimido, dióxido de carbono, o un propelente orgánico, tal como un hidro-fluoro-carbono (HFC). Los propelentes de hidro-fluoro-carbono (HFC) adecuados incluyen 1 , 1 ,1 ,2,3,3,3-hepta-fluoro-propano y 1 , 1 , 1 ,2-tetra-f luoro-etano. Las formas de dosificación en aerosol también pueden tomar la forma de un atomizador de bombeo. El aerosol presurizado puede contener una solución o una suspensión del compuesto activo. Esto puede requerir de la incorporación de excipientes adicionales, por ejemplo, co-solventes y/o tensoactivos, para mejorar las características de dispersión y la homogeneidad de las formulaciones en suspensión. Las formulaciones en solución también pueden requerir de la adición de co-solventes, tales como etanol.

Para las composiciones farmacéuticas adecuadas y/o adaptadas para su administración inhalada, la composición farmacéutica puede ser una composición inhalable en polvo seco. Esta composición puede comprender una base para polvo, tal como lactosa, glucosa, trehalosa, manitol, o almidón, el compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (de preferencia en una forma de tamaños de partículas reducidos, por ejemplo, en una forma micronizada), y opcionalmente un modificador del desempeño, tal como L-leucina u otro aminoácido, y/o sales de metales del ácido esteárico, tales como estearato de magnesio o de calcio. De preferencia, la composición inhalable en polvo seco comprende una mezcla de polvo seco de lactosa, por ejemplo, monohidrato de lactosa, y el compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Estas composiciones se pueden administrar al paciente utilizando un dispositivo adecuado, tal como el dispositivo DISKUS®, comercializado por GlaxoSmithKIine, el cual, por ejemplo, se describe en la Patente Británica Número GB 2242134 A.

Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden formular como una formulación fluida para suministrarse desde un dosificador de fluido, por ejemplo, un dosificador de fluido que tenga una boquilla de dosificación o un orificio de dosificación a través del cual se dosifique una dosis medida de la formulación fluida cuando se aplique una fuerza aplicada por el usuario a un mecanismo de bombeo del dosificador de fluido. Estos dosificadores de fluido son provistos en general con un depósito de múltiples dosis medidas de la formulación fluida, pudiéndose suministrar la dosis con accionamientos de bombeo en secuencia. La boquilla o el orificio de dosificación se puede configurar para insertarse en las fosas nasales del usuario para la dosificación por aspersión de la formulación fluida en la cavidad nasal. Un dosificador de fluido del tipo anteriormente mencionado se describe y se ilustra en la Publicación Internacional Número WO2005/044354 A1.

Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, dependerá de un número de factores, incluyendo, por ejemplo, la edad y el peso del animal, la condición precisa que requiera del tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulación, y la vía de administración, y por último, estará a discreción del médico o veterinario que atienda. En la composición farmacéutica, cada unidad de dosificación para administración oral o parenteral de preferencia contiene de 0.01 a 3,000 miligramos, más preferiblemente de 0.5 a 1,000 miligramos, de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculado como la base libre. Cada unidad de dosificación para administración nasal o inhalada de preferencia contiene de 0.001 a 50 miligramos, más preferiblemente de 0.01 a 5 miligramos, de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculado como la base libre.

Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden administrar en una dosis diaria (para un paciente adulto) de, por ejemplo, una dosis oral o parenteral de 0.01 miligramos a 3,000 miligramos al día, o de 0.5 a 1,000 miligramos al día, o una dosis nasal o inhalada de 0.001 a 50 miligramos al día, o de 0.01 a 5 miligramos al día, del compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculado como la base libre. Esta cantidad se puede dar en una sola dosis al día, o más usualmente en un número (tal como dos, tres, cuatro, cinco, o seis) de sub-dosis al día, de tal manera que la dosis diaria total sea la misma. Una cantidad efectiva de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede determinar como una proporción de la cantidad efectiva del compuesto de la fórmula (I) por sí mismo.

Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden emplear solos o en combinación con otros agentes terapéuticos. Las terapias de combinación de acuerdo con la presente invención, por consiguiente, comprenden la administración de cuando menos un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y el uso de cuando menos otro agente farmacéuticamente activo. De preferencia, las terapias de combinación de acuerdo con la presente invención comprenden la administración de cuando menos un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y cuando menos otro agente farmacéuticamente activo. Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y los otros agentes farmacéuticamente activos, se pueden administrar juntos en una sola composición farmacéutica, o por separado, y cuando se administran por separado, esto puede ocurrir de una manera simultánea o en secuencia en cualquier orden. Las cantidades de los compuestos de la fórmula (I), y de las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y de los otros agentes farmacéuticamente activos, y los tiempos relativos de administración, se seleccionarán con el objeto de lograr el efecto terapéutico combinado deseado. Por consiguiente, en un aspecto adicional, se proporciona una combinación que comprende un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y cuando menos otro agente farmacéuticamente activo. En una modalidad, se proporciona un producto farmacéutico de combinación, el cual comprende un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con uno o más agentes terapéuticamente activos diferentes.

Por consiguiente, en un aspecto, los compuestos y las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención, se pueden utilizar en combinación con, o pueden incluir, uno o más agentes terapéuticos diferentes, por ejemplo, seleccionados a partir de antibióticos, anti-virales, glucocorticosteroides, antagonistas muscarínicos, y agonistas de beta-2.

Se apreciará que, cuando los compuestos de la presente invención se administran en combinación con otros agentes terapéuticos normalmente administrados por la vía inhalada, intravenosa, oral o intranasal, la composición farmacéutica resultante se puede administrar por las mismas vías. De una manera alternativa, los componentes individuales de la composición se pueden administrar por diferentes vías.

Una modalidad de la invención abarca combinaciones que comprenden uno o dos agentes terapéuticos diferentes.

Quedará claro para una persona experta en este campo que, cuando sea apropiado, los otros ingredientes terapéuticos se pueden utilizar en la forma de sales, por ejemplo, como las sales de metales alcalinos o de amina, o como las sales de adición de ácido, o como pro-fármacos, o como ésteres, por ejemplo, ésteres de alquilo inferior, o como solvatos, por ejemplo, hidratos, para optimizar la actividad y/o estabilidad y/o características físicas, tales como la solubilidad, del ingrediente terapéutico. También quedará claro que, cuando sea apropiado, los ingredientes terapéuticos se pueden utilizar en una forma ópticamente pura.

Las combinaciones referidas anteriormente se pueden presentar de una manera conveniente para utilizarse en la forma de una composición farmacéutica y, por consiguiente, las composiciones farmacéuticas que comprenden una combinación como se define anteriormente, junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable, representan un aspecto adicional de la invención.

Los compuestos de la fórmula (I), y las sales de los mismos, se pueden preparar mediante los métodos descritos más adelante o mediante métodos similares. Por consiguiente, los siguientes intermediarios y Ejemplos sirven para ilustrar la preparación de los compuestos de la fórmula (I), y de las sales de los mismos, y no se debe considerar que limiten el alcance de la invención de ninguna manera.

Detalles Experimentales Generales Todas las temperaturas referidas están en °C.

Abreviaturas TLC - cromatografía de capa delgada AcOH - ácido acético AcCI - cloruro de acetilo PPTS - p-toluen-sulfonato de piridinio DCM - dicloro-metano 1 ,2-DCE - 1 ,2-dicloro-etano DIC - di-isopropil-carbodi-imida DIEA - /V,A-di-isopropil-etil-amina DMF - ,N-dimetil-formamida DMAP - 4-dimetil-amino-piridina Fmoc - 9H-fluoren-9-il-metil)-oxi]-carbonilo HATU - hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -i\)-N,N,N',N' tetrametil-uronio - hexafluorofosfato de 0-(benzotriazol- 1 -\'\)-?,?,?',?'- HBTU tetrametil-uronio Et20 - dietil-éter EtOAc - acetato de etilo /-PR20 - di-isopropil-éter Config. - configuración absoluta Reactivo de - 2,4-bis-(4-metoxi-fenil)-1 ,3-ditia-2,4-difosfetan-2,4- Lawesson disulfuro MeCN - acetonitrilo MeOH - metanol Rt - tiempo de retención THF - tetrahidrofurano RT - temperatura ambiente Pd/C - paladio sobre carbón COMU - hexafluorofosfato de 1 -ciano-2-etoxi-2-oxo-etiliden- amino-oxi)-dimetil-amino-morfolino-carbenio LC/MS se refiere a los análisis mediante HPLC analítica que se condujeron en tres tipos de aparatos: a) Sobre una columna Supelcosil LCABZ+PLUS (3 mieras, 3.3 centímetros x 4.6 milímetros de diámetro interno (ID)) eluyendo con HC02H al 0.1 por ciento y acetato de amonio 0.01 M en agua (solvente A), y acetonitrilo al 95 por ciento y HC02H al 0.05 por ciento en agua (solvente B), utilizando el siguiente gradiente de elución: de 0 a 0.7 minutos con el 0 por ciento de B, de 0.7 a 4.2 minutos con 0 ? 100 por ciento de B, de 4.2 a 5.3 minutos con el 100 por ciento de B, de 5.3 a 5.5 minutos con 100 ? 0 por ciento de B, a una velocidad de flujo de 3 mililitros/minuto. Los espectros de masas (MS) se registraron en un espectrómetro de masas Fisons VG Platform, utilizando los modos de ionización positiva por electroaspersión [(ES+ve para dar los iones moleculares [M + H]+ y [M+NH4]+], o ionización negativa por electroaspersión [(ES-ve para dar el ion molecular [M-H]"]. Los datos analíticos a partir de este aparato se dan con el siguiente formato: [M + H]+ o [M-H]'. b) Sobre una columna Cromolith Performance RP 18 (100 x 4.6 milímetros de diámetro interno (ID)), eluyendo con acetato de amonio 0.01 M en agua (solvente A), y acetonitrilo al 100 por ciento (solvente B), utilizando el siguiente gradiente de elución: de 0 a 4 minutos con 0 ? 100 por ciento de B, de 4 a 5 minutos con el 100 por ciento de B, a una velocidad de flujo de 5 mililitros/minuto. Los espectros de masas (MS) se registraron en un espectrómetro de masas Micromass Platform-LC utilizando los modos de ionización positiva química a presión atmosférica [AP+ve para dar los iones moleculares MH+], o ionización negativa química a presión atmosférica [AP-ve para dar los iones moleculares (M-H)"]. Los datos analíticos a partir de este aparato se dan con el siguiente formato: [M + H]+ o [M-H]' precedido por el acrónimo APCI para especificar entre ambas fuentes de análisis de espectrometría de masas. c) Sobre una columna Acquity UPLC BEH C18 (2.1 milímetros x 50 milímetros de diámetro interno (ID), 1.7 mieras de diámetro de empaque) a 40°C, eluyendo con una solución al 0.1 por ciento en volumen/volumen del ácido fórmico en agua (sistema de solvente A), y una solución al 0.1 por ciento en volumen/volumen del ácido fórmico en acetonitrilo (sistema de solvente B). El gradiente empleado fue: El sistema de detección UV fue una señal promediada a partir de una longitud de onda de 210 nanómetros a 350 nanómetros, y los espectros de masas se registraron en un espectrómetro de masas utilizando ionización por electroaspersión en modo de exploración alternado positivo y negativo.

LC/HRMS: La HPLC analítica se condujo sobre una columna Uptisphere-hsc (3 mieras, 33 x 3 milímetros de diámetro interno (ID)), eluyendo con acetato de amonio 0.01 M en agua (solvente A), y acetonitrilo al 100 por ciento (solvente B), utilizando el siguiente gradiente de elución: de 0 a 0.5 minutos con el 5 por ciento de B, de 0.5 a 3.75 minutos con 5 -? 100 por ciento de B, de 3.75 a 4.5 minutos con el 100 por ciento de B, de 4.5 a 5 minutos con 100 ? 5 por ciento de B, de 5 a 5.5 minutos con el 5 por ciento de B, a una velocidad de flujo de 1.3 mililitros/minuto. Los espectros de masas (MS) se registraron en un espectrómetro de masas Micromass LCT, utilizando los modos de ionización positiva por electroaspersión [ES+ve para dar los iones moleculares MH+], o ionización negativa por electroaspersión [ES-ve para dar los iones moleculares (M-H)"].

HPLC de auto-preparación dirigida a la masa se refiere al método en donde el material se purificó mediante cromatografía de líquidos de alto rendimiento sobre una columna HPLCABZ+ de 5 mieras (5 centímetros x 10 milímetros de diámetro interno (ID)) con HC02H al 0.1 por ciento en agua y MeCN al 95 por ciento, agua al 5 por ciento (HC02H al 0.5 por ciento), utilizando las siguientes condiciones de elución en gradiente: de 0 a 1.0 minutos con el 5 por ciento de B, de 1.0 a 8.0 minutos con 5? 30 por ciento de B, de 8.0 a 8.9 minutos con el 30 por ciento de B, de 8.9 a 9.0 minutos con 30 ? 95 por ciento de B, de 9.0 a 9.9 minutos con el 95 por ciento de B, de 9.9 a 10 minutos con 95 ? 0 por ciento de B, a una velocidad de flujo de 8 mililitros/minuto. El colector de fracciones Gilson 202 se disparó mediante un espectrómetro de masas VG Platform al detectar la masa de interés.

RMN de Protones Los espectros de (1H RMN) se registraron a temperatura ambiente en un espectrómetro Bruker Avance 300 DPX, utilizando un solvente como el estándar interno, y los cambios químicos de protones se expresan en ppm en el solvente indicado. Las siguientes abreviaturas se utilizan para la multiplicidad de señales de RMN: s = singulete, d = doblete, t = triplete, q = cuadruplete, dd = doble doblete, m = multiplete.

TLC (cromatografía de capa delgada) se refiere al uso de las placas de TLC vendidas por Merck recubiertas con gel de sílice 60 F254.

Intermediario 1 : f(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-G1 ,2,41-triazolo-r4,3-a1[1 ,41-benzo-diazepin-4-in-acetato de metilo El Intermediario 5 crudo (asumido 9.3 milimoles) se suspendió en una mezcla de tetrahidrofurano y AcOH (1/1), y se agitó durante la noche antes de concentrarse bajo presión reducida. La mezcla cruda se suspendió en dicloro-metano, y se lavó con una solución saturada de NaHCO3. La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró, y se concentró al vacío, y el sólido resultante se trituró en /'-PR20 y se filtró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM/MeOH: 95/5), para dar el compuesto del título, el cual se utilizará en el siguiente paso sin mayor purificación. LC/MS: m/z 395 [M + H] + , Rt 2.71 minutos.

Intermediario 2: Ácido [(4S)-6-(4-cloro-fen¡0-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-f1 ,2,41-triazolo-f4,3-alM .41-benzo-diazepin-4-in-acético A una solución del Ejemplo 34 (28 gramos, 68 milimoles) en tetrahidrofurano (450 mililitros) a temperatura ambiente, se le agregó NaOH 1N (136 mililitros, 136 milimoles). La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 5 horas antes de enfriarse y de apagarse con HCI 1N (136 mililitros). El tetrahidrofurano se removió bajo presión reducida, y la capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El sólido crudo se recristalizó en CH3CN, para dar el compuesto del título (23.9 gramos, 89 por ciento de rendimiento) como un polvo amarillo pálido. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 7.55-7.48 (m, 2H), 7.41 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.38-7.31 (m, 2H), 7.22 (dd, J = 2.9 y 8.9 Hz, 1H), 6.90 (d, J= 2.9 Hz, 1H), 4.59 (dd, J = 6.9 y 6.9 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.70 (dd, J = 6.9 y 25.7 Hz, 1H), 3.61 (dd, J = 6.9 y 25.7 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H). LC/MS: m/z 397 [M(35CI) + H] + , Rt 2.11 minutos.

El Intermediario 3 de la fórmula (Ib), es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es OH, se preparó mediante métodos análogos a aquél descrito para el Intermediario 2, empezando a partir del Intermediario 1, y utilizando dioxano en lugar de tetrahidrofurano como el solvente.

Intermediario 3: Ácido [(4S)-6-(3-fluoro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4?-G1 ,2,41-triazolo-f4,3-air ,41-benzo-diazepin-4-il1-acético LC/MS: m/z 381 [M + H]+, Rt 2.08 minutos.

Intermediario 4: f(3S)-2-[(1 Z)-2-acetil-hidrazino1-5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-3H-1 ,4-benzo-diazepin-3-¡ll-acetato de metilo A una suspensión del Intermediario 6 (30.2 gramos, 77.7 milimoles) en tetrahidrofurano (800 mililitros) a 0°C, se le agregó monohidrato de hidrazina (11.3 mililitros, 233 milimoles) por goteo.

La mezcla de reacción se agitó durante 4 horas entre 0°C y 15°C antes de enfriarse a 0°C. Entonces se agregó lentamente Et3N (32.4 mililitros, 230 milimoles), y se agregó por goteo AcCI (16.3 mililitros, 230 milimoles). La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente, y se agitó durante 1 hora; entonces se apagó con agua, y se concentró bajo presión reducida. La capa acuosa resultante se extrajo entonces con dicloro-metano (DCM), y la capa orgánica se secó sobre Na2S0 , se filtró, y se concentró al vacío, para dar el compuesto del título crudo (34 gramos, 100 por ciento de rendimiento), el cual se utilizó sin mayor purificación. LC/MS: m/z 429 [M(35CI) + H] + , Rt 2.83 minutos.

El método descrito anteriormente se pudo aplicar igualmente a la forma racémica del Intermediario 6, para dar el producto en una forma racémica.

El Intermediario 5 se preparó mediante métodos análogos a aquél descrito para el Intermediario 4, empezando a partir del Intermediario 7.

Intermediario 5: í(3S)-2-[(1 Z)-2-acetil- idrazino1-5-(3-fluoro-fenin-7-(metiloxi)-3H-1 ,4-benzo-diazepin-3-ill-acetato de metilo LC/MS: m/z 413 [M + H] + , Rt 2.66 minutos.

Intermediario 6: r(3S)-5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-2-tioxo-2,3-di idro-1 H-1 ,4-benzo-diazepin-3-in-acetato de metilo Una suspensión de P Si0 (85.8 gramos, 190 milimoles), y Na2C03 (20.5 gramos, 190 milimoles) en 1 ,2-DCE (1.5 litros) a temperatura ambiente, se agitó durante 1 hora antes de agregar el Intermediario 9 (40 gramos, 107 milimoles). La mezcla resultante se agitó a 65°C durante 4 horas antes de enfriarse y de filtrarse. El sólido se lavó con dicloro-metano (DCM), y el filtrado se lavó con NaHC03 saturado. La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El compuesto del título se precipitó a partir de una mezcla de DCM/i-PR20, y se filtró. Entonces el filtrado se concentró, y se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea (DCM/MeOH : 98/2), para proporcionar otro lote del producto. Se obtuvo el compuesto del título combinando las dos fracciones (30.2 gramos, 73 por ciento) como un polvo amarillo.

LC/MS: m/z 389 [M(35CI) + H] + , Rt 3.29 minutos.

De una manera alternativa, el intermediario 9 se pudo hacer reaccionar con el reactivo de Lawesson (0.6 equivalentes) en tolueno a reflujo, para dar el compuesto del título como una mezcla racémica.

El Intermediario 7 se preparó mediante métodos análogos a aquél descrito para el Intermediario 6, empezando a partir del Intermediario 10.

Intermediario 7: r(3S)-5-(3-fluoro-fenil)-7-(metiloxi)-2-t¡oxo-2,3-dihidro-1 H-1 ,4-benzo-diazepin-3-in-acetato de metilo LC/MS: m/z 373 [M + H] + , Rt 3.11 minutos.

Intermediario 8: 2-[5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-2-tioxo-2,3-di idro-1 H-1 ,4-benzo-diazepin-3-in-/V-ciclohexil-acetamida A una solución del Intermediario 11 (500 miligramos, 1.3 milimoles) en tetrahidrofurano (50 mililitros) a temperatura ambiente, se le agregó DIEA (0.35 mililitros, 2.0 milimoles), seguida por HATU (760 miligramos, 2.0 milimoles). La mezcla de reacción se agitó durante 5 minutos antes de agregar ciclohexil-amina (0.23 mililitros, 2.0 milimoles). La mezcla se agitó durante 30 horas, y se agregaron 0.5 equivalentes adicionales de HATU, DIEA y ciclohexil-amina con agitación. La capa orgánica se lavó con NaOH 1N. La capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM), y los orgánicos se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron al vacío. El sólido crudo entonces se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice, para dar el compuesto del título (420 miligramos, 62 por ciento) como una espuma amarilla. Rf = 0.68 (DCM/ Me OH : 90/10). LC/MS: m/z 456 [M(35CI) + H] + , Rt 3.11 minutos. Intermediario 9: [(3S)-5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro-1 H-1 ,4-benzo-diazep¡n-3-il1-acetato de metilo A una solución del Intermediario 12 crudo (asumido 0.2 moles) en dicloro-metano (500 mililitros), se le agregó Et3N (500 mililitros, 3.65 moles), y la mezcla resultante se puso a reflujo durante 24 horas antes de concentrarse. La amina cruda resultante se disolvió en 1,2-DCE (1.5 litros), y se agregó cuidadosamente AcOH (104 mililitros, 1.8 moles). La mezcla de reacción entonces se agitó a 60°C durante 2 horas antes de concentrarse al vacío, y se disolvió en dicloro-metano (DCM). La capa orgánica se lavó con HCI 1N, y la capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron dos veces con agua y salmuera, se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El sólido crudo se recristalizó en MeCN, conduciendo al compuesto del título (51 gramos) como un sólido amarillo pálido. El filtrado se pudo concentrar y recristalizar en MeCN, para dar otros 10 gramos del Intermediario 9 (total: 61 gramos, 69 por ciento de rendimiento, basándose en el Intermediario 12 recuperado). R, = 0.34 (DCM/MeOH : 95/5). LC/MS m/z 373 [M(35CI) + H] + , Rt 2.76 minutos.

El Intermediario 10 se preparó mediante métodos análogos a aquél descrito para el Intermediario 9, empezando a partir del Intermediario 13.

Intermediario 10: [(3S)-5-(3-fluoro-fenil)-7-(metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro-1 H-1 ,4-benzo-diazepin-3-il1-acetato de metilo LC/MS: m/z 357 [M + H] + , Rt 2.83 minutos.

Intermediario : Ácido [5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-2-tioxo-2,3-dihidro-1 H-1 ,4-benzo-diazepin-3-ill-acético A una solución del Intermediario racémico 6 (2.6 gramos, 6.7 milimoles) en 1,4-dioxano (70 mililitros) a temperatura ambiente, se le agregó lentamente NaOH 1N (13.5 mililitros), y la mezcla de reacción se agitó durante la noche antes de agregar más NaOH 1N (13.5 mililitros). La mezcla entonces se agitó adicionalmente durante 2 horas antes de remover el 1,4-dioxano al vacío. La capa acuosa se acidificó con HCI 1N hasta un pH de aproximadamente 6, y se extrajo con dicloro-metano (DCM). Los orgánicos se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida, para dar el compuesto del título (1.9 gramos, 76 por ciento de rendimiento) como un sólido amarillo. LC/MS: m/z 375 [M(35CI) + H] + , Rt = 1.6 minutos.

Intermediario 12: N1-[2-f(4-cloro-fenil)-carboniH-4-(metiloxi)-fenin-N2-([(9H-fluoren-9-il-metil)-oxi1-carbonil)-L-g-asparaqinato de metilo Una mezcla del N-{[(9H-fluoren-9-il-met¡l)-oxi]-carbonil}-L-a-aspartil-cloruro de metilo (preparado a partir de J. Org. Chem. 1990, 55, 3068-3074, y J. Chem. Soc. Perkin trans. 1 2001, 1673-1695) (221 gramos, 0.57 moles), y el Intermediario 14 (133 gramos, 0.5 moles) en CHCI3 (410 mililitros), se agitó a 60°C durante 1.5 horas antes de enfriarse y de concentrarse bajo presión reducida, y se utilizó sin mayor purificación. LC/MS: m/z 613 [M(35CI) + H] + , Rt = 3.89 minutos.

El Intermediario 13 se preparó mediante métodos análogos a aquél descrito para el Intermediario 12, empezando a partir del N-{[(9H-fluo re n-9-¡l-metil)-oxi]-carbonil}-L-a-aspart ¡l-cloruro de metilo (preparado a partir de J. Org. Chem. 1990, 55, 3068-3074, y J. Chem. Soc. Perkin trans. 1 2001, 1673-1695), y (2-amino-5-metox¡-fenil)(3-fluoro-fenil)-metanona (Synthesis 1980, 677-688).

Intermediario 13: N H2-í(3-fluoro-f en il) -carbón i ?-4- ( m e ti I oxi )-fenil1-N2-{í(9H-fluoren-9-il-metil)-oxil-carbonil}-L-a-asparaqinato de metilo LC/MS: m/z 597 [M + H] + , Rt 3.75 minutos.

Intermediario 14: [2-amino-5-(metiloxi)-fenil1(4-cloro-fenil)- metanona A una solución del Intermediario 15 (40.0 gramos, 0.21 moles) en una mezcla de tolueno (560 mil¡litros)/éter (200 mililitros) a 0°C, se le agregó por goteo una solución de bromuro de 4-cloro-fenil-magnesio (170 mililitros, 1M en Et20, 0.17 moles). La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente, y se agitó durante 1 hora antes de apagarse con HCI 1N. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 veces), y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El compuesto crudo se disolvió entonces en EtOH (400 mililitros), y se agregó HCI 6 N (160 mililitros). La mezcla de reacción se puso a reflujo durante 2 horas antes de concentrarse bajo presión reducida. El sólido resultante se filtró y se lavó dos veces con éter antes de suspenderse en EtOAc, y se neutralizó con NaOH 1N. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 veces), y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S0 , se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. Se obtuvo el compuesto del título como un sólido amarillo (39 gramos, 88 por ciento de rendimiento), el cual se utilizó sin mayor purificación.

Intermediario 15: 2-metil-6-(metiloxi)-4/-/-3,1-benzoxazin-4-ona Una solución de ácido 5-metoxi-antranílico (7.8 gramos, 46.5 milimoies) se puso a reflujo en anhídrido acético (60 mililitros) durante 2 horas 15 minutos, antes de enfriarse y de concentrarse bajo presión reducida. El residuo crudo se concentró entonces dos veces en la presencia de tolueno antes de filtrarse, y se lavó con éter, para proporcionar al compuesto del título (6.8 gramos, 77 por ciento de rendimiento) como un sólido color beige; LC/MS: m/z 192 [M+H] + , Rt 1.69 minutos.

Intermediario 16: r2-((f(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-Í1 ,2,41-triazolo-[4,3-aU1 ,41-benzo-diazepin-4-ill-acet¡l j-amino)-etill-metil-carbamato de 1 , 1 -dimetil-etilo El Intermediario 2 (104 miligramos, 0.262 milimoies), (2-amino- et¡l)-metil-carbamato de 1 , 1 -dimetil -etilo (0.049 mililitros, 0.275 mili-moles), HATU (120 miligramos, 0.314 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.110 mililitros, 0.629 milimoles), se disolvieron en N ,N-dimetil-formamida (DMF) (2.5 mililitros), y se agitó a 50°C bajo N2 durante la noche. La reacción se dejó enfriar hasta la siguiente mañana, entonces la ?,?-dimetil-formamida (DMF) se evaporó al vacío, y el aceite crudo se dividió entre EtOAc y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se lavó con salmuera acuosa saturada, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó al vacío, para dar un aceite incoloro. La purificación del residuo mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-metanol, gradiente del 0.5 al 10 por ciento) dio el compuesto del título como un aceite amarillo (189 miligramos, 0.342 milimoles, 130 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H)+ 553, (M(37CI) + H)+ 555; RT 1.07 minutos.

Intermediario 17: 4-(fí(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 - metil-8-(metilox¡)- 4H-í1,2,41-tr¡azolo-f4,3-alf1,4l-benzo-diazepin-4-il1-acetil)-amino)-1-piperidin-carboxilato de 1 , 1 -dimetil-etilo El Intermediario 2 (100 miligramos, 0.252 milimoles), 4-amino-1 -piperidin-carboxilato de 1 ,1 -dimetil-etilo (0.054 mililitros, 0.265 milimoles), HATU (115 miligramos, 0.302 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.106 mililitros, 0.605 milimoles), se disolvieron en ?,?-dimetil-formamida (DMF) (2.5 mililitros), y se agitaron a 50°C bajo N2 durante la noche. La reacción se dejó enfriar hasta la siguiente mañana, entonces la N ,N-dimetil-formamida (DMF) se evaporó al vacío, y el aceite crudo se dividió entre EtOAc y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se lavó con salmuera acuosa saturada, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó al vacío, para dar un aceite incoloro. La purificación del residuo mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-metanol, gradiente del 0.5 al 10 por ciento) dio el compuesto del título como un aceite amarillo (165 miligramos, 0.285 milimoles, 113 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H)+ 579, (M(37CI) + H)÷ 581; RT 1.11 minutos.

Los Intermediarios 18 a 21 se prepararon a partir del Intermediario 2 y la amina apropiada, empleando el procedimiento descrito en el Intermediario 17.

La LC/MS se llevó a cabo utilizando el aparato c).

Intermediario 22: Ácido [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-8-hidroxi-1 -metil- 4H-Í1 ,2,41-tr¡azolo-[4,3-alí1 ,41-benzo-diazepin-4-iH-acético Una solución del Intermediario 2 (400 miligramos, 1 milimol) en dicloro-metano (8 mililitros) se enfrió a -78°C. Se agregó lentamente una solución de tribromuro de boro (1.26 gramos, 476 microlitros, 5 milimoles) en dicloro-metano (2 mililitros). La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 minutos bajo nitrógeno; entonces se dejó calentar a temperatura ambiente, y se agitó durante 4 horas. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo/agua (aproximadamente 100 mililitros), y la fase orgánica se separó. La fase acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) (10 mililitros, 2 veces). La fase acuosa se evaporó a sequedad. El residuo se extrajo con metanol (10 mililitros, 3 veces), y la fase orgánica combinada se evaporó, y el residuo se volvió a evaporar a partir de tolueno (2 veces), para dar el compuesto del título como un sólido amarillo (383 miligramos, 1.0 milimol, 99 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H)+ 383, (M(37CI) + H)+ 385; RT 0.73 minutos, (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejem los Ejemplo 1: 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H- [1,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-/V-et¡l-acetamida A una solución del Intermediario 2 (16.0 gramos, 40 milimoles) en tetrahidrofurano a temperatura ambiente, se le agregó DIEA (14 mililitros, 80 milimoles), seguida por HATU (30.4 gramos, 80 milimoles). La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a esta temperatura, y se agregó etil-amina (40 mililitros, 2M en tetrahidrofurano, 80 milimoles). La mezcla se agitó durante 48 horas antes de concentrarse bajo presión reducida. El material crudo se suspendió en agua, y se extrajo con dicloro-metano. La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró, y se concentró al vacío. El sólido crudo se purificó mediante cromatografía sobre Si02 (DCM/MeOH, 95/5), y el sólido resultante se recristalizó en MeCN. El sólido se disolvió entonces en dicloro-metano, y se precipitó con /'-PR20, para dar el compuesto del título (8 gramos, 47 por ciento de rendimiento) como un sólido blanco.

R, = 0.48 (DCM/MeOH : 90/10). p.f. >140°C (llega a hacerse gomoso). ? RMN (300 MHz, CDCI3) d 7.53-7.47 (m, 2H), 7.39 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 7.20 (dd, J = 2.9 y 8.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.40 (m, 1H), 4.62 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.51 (dd, J = 7.3 y 14.1 Hz, 1 H), 3.46-3.21 (m, 3H), 2.62 (s, 3H), 1.19 (t, J = 7.3 Hz, 3H). LC/MS : m/z 424 [M(35CI)+H]\ Rt 2.33 minutos.

Los Ejemplos 2 a 24, es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es N R2aR2 a (véase la Tabla 1), se prepararon mediante métodos análogos a aquél descrito para el Ejemplo 1, a partir del Intermediario 2, utilizando la amina apropiada. El intermediario 3 se utilizó en lugar del Intermediario 1 para los Ejemplos 23 y 24.

Ejemplo 25: 2-r(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-f1,2,41-triazolo-[4,3-airi,41-ben20-d¡a2epin-4-in-A-r4-(4-metoxi-benzoiP-fenill-acetamida A una solución del Intermediario 2 (1 gramo, 2.5 milimoles) en tetrahidrofurano a 0°C, se le agregó por goteo cloruro de oxalilo (1.26 mililitros, 2.0 M en dicloro-metano (DCM), 2.5 milimoles). Entonces se agregó por goteo ?,?-dimetil-formamida (DMF) (1 mililitro), y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora antes de agregar 1 equivalente adicional de cloruro de oxalilo. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora adicional. Entonces se agregó una décima parte de esta última solución a una solución de (4-amino-fenil)[4-(metiloxi)-fenil]-metanona (50 miligramos, 0.22 milimoles), y Et3N en tetrahidrofurano. La mezcla se agitó durante la noche antes de apagarse con NaOH 1N. La capa acuosa se extrajo con EtOAc, y los orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM entonces DCM/MeOH : 95/5), y el sólido se trituró en -PR20, para dar el compuesto del título (38 miligramos, 26 por ciento de rendimiento) como un polvo ocre. LC/MS: m/z 606 [M(35CI) + H] + , Rt 3.41 minutos.

Los Ejemplos 26 a 29, es decir, los compuestos de la fórmula general (I), en donde R2 es NRaaR2a (véase la Tabla 2) se prepararon mediante métodos análogos a aquél descrito para el Ejemplo 25 utilizando la amina apropiada.

Tabla 2 Ejemplo 30: 2-re-(4-cloro-fenin-1-mettl-8-(metiloxi)-4H-ri .2,41-triazolo-r4,3-a1M ,41-benzo-diaze in-4-ill-/\/-ciclohexil-acetamida A una solución del Intermediario 8 (420 miligramos, 0.9 milimoles) en metanol (40 mililitros) a 0°C, se le agregó monohidrato de hidrazina (0.22 mililitros, 4.6 milimoles). Después de 15 minutos a 0°C, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente (RT) durante 1 hora, y se agregaron 25 equivalentes adicionales de hidrato de hidrazina antes de calentarse hasta 40°C durante 15 minutos. La mezcla se concentró entonces hasta la mitad del volumen, y se agregó agua. La capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (DC ) (2 veces), y los orgánicos se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron al vacío. El producto crudo se disolvió entonces en metanol (30 mililitros), y se agregaron orto-acetato de trimetilo (0.17 mililitros, 1.3 milimoles), y PPTS (45 miligramos, 0.18 milimoles). La mezcla de reacción se puso a reflujo durante 45 minutos antes de concentrarse bajo presión reducida. La mezcla cruda se disolvió en dicloro-metano (DCM), y se lavó con agua, se secó sobre Na2S04, se filtró, y se concentró al vacío. El sólido crudo entonces se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice, para dar el compuesto del título (70 miligramos, 16 por ciento de rendimiento en dos pasos) como un sólido blanco. R, = 0.5 (DCM/MeOH : 90/10). p.f. >260°C. LC/HRMS (M + H)+ calculado para C26H2835CI 502 478.2010; encontrado 478.1968. Rt 2.76 minutos.

Ejemplo 31: Metan-sulfonato de (4S)-6-(4-cloro-fenil)-4-(2-r(4-fluoro-fenil)-aminol-2-oxo-etil)-1 - metil-4H-ri ,2,41-triazolo-r4.3-aU1.41-benzo-diazepin-8-ilo A una solución del Ejemplo 32 (20 miligramos, 42 micromoles), y Et3N (9 microlitros, 63 micromoles) en tetrahidrofurano (1 mililitro) a temperatura ambiente, se le agregó cloruro de metan-sulfonilo (5 microlitros, 63 micromoles). La mezcla de reacción se agitó durante 5 horas antes de agregar más Et3N (63 micromoles), y cloruro de metan-sulfonilo (63 micromoles), dos veces. Después de la concentración, la mezcla cruda se disolvió en dicloro-metano (DCM), y se lavó sucesivamente con HCI 1N, NaOH 1N y salmuera, se secó sobre Na2SO,, se filtró, y se concentró al vacío. El sólido crudo se trituró en una mezcla de DCM/i-PR20, para dar el compuesto del título (9 miligramos, rendimiento del 39 por ciento) como un sólido blanco. LC/ S: m/z 554 [M(35CI) + H] + , Rt 3.04 minutos.

Ejemplo 32: 2-r(4S)-6-(4-cloro-fenil)-8-hidroxi-1-metil-4H-G ,2,41-triazolo-r4,3-a1f 1 ,41-benzo-diazepin-4-ill-/V-(4-fluoro-fenil)-acetamida Una mezcla de una solución del Ejemplo 11 (50 miligramos, 0.1 milimol) en dicloro-metano (DCM) (1 mililitro), y BBR3 (0.51 mililitros, 1M en dicloro-metano (DCM), 0.51 milimoles) a 0°C, se dejó agitándose, y se calentó hasta la temperatura ambiente (RT) durante 5 horas antes de apagarse con agua. La capa orgánica se lavó entonces con una solución saturada de hidrosulfito y salmuera, antes de secarse sobre Na2S04; se filtró, y se concentró al vacío. El sólido crudo se trituró en una mezcla de DCM/i-PRzO, para dar el compuesto del título (47 miligramos, 99 por ciento de rendimiento) como un sólido amarillo pálido, p.f. = 222°C (descomposición). LC/MS: m/z 476 [M(35CI) + H] + , Rt 2.82 minutos.

El Ejemplo 33 se preparó mediante un método análogo a aquél descrito para el Ejemplo 32, empezando a partir del Ejemplo 1.

Ejemplo 33: 2-r(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-8-hídroxi-1 -metil-4H-f 1.2.41-triazolo-í4,3-airi ,41-benzo-diazepin-4-il1-/V-et¡l-acetamida LC/HRMS (? + ?)4· calculado para C21H203S CIIM502 410.1384; encontrado 410.1324. Rt 2.05 minutos.

Ejemplo 34: r(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-G1. , 41 -triazolo-f4,3-a1[1141-benzo-diaze pin -4-ill- acetato de metilo El Intermediario 4 crudo (34 gramos, 79 milimoles) se suspendió en tetrahidrofurano (200 mililitros), y se agregó AcOH (200 mililitros), a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante la noche antes de concentrarse a sequedad. El residuo se suspendió en NaHC03 saturado, y se extrajo con dicloro-metano (DCM). La capa orgánica se secó sobre Na2SO„, se filtró, y se concentró al vacío. El sólido crudo se purificó mediante cromatografía sobre Si02 (DCM/MeOH : 90/10), para dar el compuesto del título (28 gramos, 86 por ciento de rendimiento) como un polvo amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 7.54-7.47 (m, 2H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 7.22 (dd, J = 2.8 y 8.8 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.61 (dd, J = 6.4 y 7.8 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.66 (dd, J = 7.8 y 16.9 Hz, 1H), 3.60 (dd, J = 6.4 y 16.9 Hz, 1H), 2.62 (s, 3H). LC/MS m/z 411 [M(35CI) + H]*, Rt 2.88 minutos.

El método descrito anteriormente se pudo aplicar igualmente a la forma racémica del Intermediario 4, para dar el producto en una forma racémica.

Ejemplo 35: r(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-ri,2.4T-triazolo-r4,3-alf1,4l-benzo-diazepin-4-in-acetato de etilo A una solución del Intermediario 2 (200 miligramos, 0.5 milimoles) en tetrahidrofurano (10 mililitros) a 0°C, se le agregó cloruro de oxalilo (0.37 mililitros, 2 en dicloro-metano (DCM), 0.75 milimoles). Después de agitar durante 3 horas, se agregó un exceso de etanol, y la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente, y se agitó durante 24 horas adicionales. La mezcla se concentró a sequedad, y el residuo se absorbió en agua, y se extrajo con dicloro-metano (DCM), para proporcionar una mezcla cruda, la cual se purificó mediante cromatografía de auto-preparación dirigida a la masa, para dar el compuesto del título como un polvo blanco (30 miligramos, 15 por ciento). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 7.54-7.47 (m, 2H), 7.39 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.37-7.32 (m, 2H), 7.22 (dd, J = 2.8 y 9.1 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.61 (dd, J = 6.2 y 7.9 Hz, 1H), 4.23 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.64 (dd, J = 7.9 y 17.0 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 6.3 y 17.0 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H), 1.33 (t, J= 7.2 Hz, 3H). LC/HRMS (M + H) + calculado para C22H2135CIN403425.1333; encontrado 425.1328. Rt 2.80 minutos.

Ejemplo 36: í(4S)-6-(4-cloro-f enil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H- ri,2,41-triazolo-r4,3-airi,41-benzo-d¡azepin-4-¡H-acetato de 1 - metil-etilo A una solución del Intermediario 2 (200 miligramos, 0.5 milimoles) en isopropanol, se le agregaron, a temperatura ambiente, DIC (80 microlitros, 0.55 milimoles), y DMAP (67 miligramos, 0.55 milimoles). Después de agitar durante 48 horas a temperatura ambiente, la mezcla cruda se concentró bajo presión reducida. Se agregó agua, y el compuesto se extrajo con dicloro-metano (DCM), y la capa orgánica se secó sobre Na2S0 . La purificación del compuesto mediante cromatografía de auto-preparación dirigida a la masa, proporcionó el compuesto del título como una espuma blanca (40 miligramos, 19 por ciento). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 7.49 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.21 (dd, J = 2.6 y 8.9 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.59 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.70-3.48 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.31 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.28 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LC/HRMS (M + H)+ calculado para C23H2335CI 403439.1537; encontrado 439.1527; Rt 2.89 minutos.

Ejemplo 37: r(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-ri,2,41-triazolo-[4.3-airi.41-benzo-diazepin-4-il1-acetato de butilo A una solución del Intermediario 2 (200 miligramos, 0.5 milimoles) en butanol, se le agregaron, a temperatura ambiente, DIC (80 microlitros, 0.55 milimoles), y DMAP (67 miligramos, 0.55 milimoles). Después de agitar durante 48 horas a temperatura ambiente, la mezcla cruda se concentró bajo presión reducida. Se agregó agua, y el compuesto se extrajo con dicloro-metano (DCM), y la capa orgánica se secó sobre Na2S04. La purificación del compuesto mediante cromatografía de auto-preparación dirigida a la masa, proporcionó el compuesto del título como una espuma blanca (70 miligramos, 31 por ciento). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó" 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.22 (dd, J = 2.6 y 8.8 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.60 (dd, = 5.7 y 8.5 Hz, 1 H), 4.18 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.66 (dd, J = 8.5 y 16.8 Hz, 1H), 3.56 (dd, J = 5.7 y 16.8 Hz, 1H), 2.62 (s, 3H), 1.66 (m, 2H), 1.42 (m, 2H), 0.95 (t, J = 7.3 Hz, 3H). LC/HRMS (M + H)+ calculado para C 35CIN403453.1693; encontrado 453.1704; Rt 3.06 minutos.

Ejemplo 38: Sal de ácido trifluoro-acético de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-M ,2,41-triazolo-í4,3-alM ,41-benzo-diazepin-4-il1-N-[2-(metil-amino)-etil]-acetamida El Intermediario 16 (189 miligramos, 0.342 milimoles), y ácido trifluoro-acético (0.022 mililitros, 0.285 milimoles), se disolvieron en dicloro-metano (DCM) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C bajo N2 durante 2 horas. El solvente se evaporó al vacío, y el residuo obtenido se disolvió en dicloro-metano (DCM) y se volvió a evaporar al vacío, para dar un aceite amarillo, el cual se secó bajo un alto vacío, para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo (153 miligramos, 0.270 milimoles, 95 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H)+ 453, (M(37CI) + H)+ 455; RT 0.74 minutos.

Ejemplo 39: Sal de acido trifluoro-acético de la 2-f(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-met¡l-8-(metiloxi)-4H-n ,2,41-triazolo-r4,3-airi ,41-benzo-diazepin-4-ill-N-4-piperidinil-acetamida El Intermediario 17 (165 miligramos, 0.285 milimoles), y ácido trifluoro-acético (0.022 mililitros, 0.285 milimoles), se disolvieron en dicloro-metano (DCM) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C bajo N2 durante 2 horas. El solvente se evaporó al vacío, y el residuo obtenido se disolvió en dicloro-metano (DCM), y se volvió a evaporar al vacío, para dar un aceite amarillo, el cual se secó bajo un alto vacío, para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo (161 miligramos, 0.272 milimoles, 95 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H) + 479, (M(37CI) + H) + 481; RT 0.73 minutos.

Ejemplo 40: Sal de ácido fórmico de la 1 -lT(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-n ,2,4l-triazolo-r4,3-aU1 ^l-benzo-diazepin^-ill-acetiD-N-metil^-piperidin-amina Se agregó ácido trifluoro-acético (0.5 mililitros, 6.49 milimoles) a una solución del Intermediario 18 (142 miligramos, 0.239 mili- moles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) a 25°C bajo N2, y la mezcla se agitó durante 2 horas. El solvente se evaporó al vacío, para dar un residuo amarillo, el cual se disolvió en metanol (1 mililitro), y se purificó mediante cromatografía de auto-preparación dirigida a la masa, para dar el compuesto del título como un sólido color crema (81 miligramos, 0.150 milimoles, 62.8 por ciento de rendimiento) LC/MS ( (35CI) + H)+ 493, (M(37CI) + H)+ 495; RT 0.76 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplos 41 a 43 Los Ejemplos 41 a 43 se prepararon mediante un método análogo a aquél descrito para el Ejemplo 40, empezando a partir del intermediario apropiadamente protegido.

La LC/MS se llevó a cabo utilizando el aparato c).

Ejemplo 44: (S)-2-(6-(4-cloro-fen¡D-8-metoxi-1-metil-4H-benzo-G?? ,2,41-triazolo-r4,3-ain ,41-d¡azepin-4-il)-1 -(4-hidroxi-piperidin-1-il)-etanona El Ejemplo 44 se preparó mediante un método análogo a aquél descrito para el Intermediario 17, empezando a partir del Intermediario 2 y la amina apropiada.

LC/HRMS (M(35CI) +H) + , (M(37CI) + H)+; encontrado 480, 482. Rt 0.86 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 45; 2-r(4S)-6-(4-cloro-f enil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-f112,41-tria2o)o-f4,3-ain,41-benzo-diazepin-4-ill-N-r2-(4-morfoliniD-etill-acetamida El Intermediario 2 (104 miligramos, 0.262 milimoles), [2-(4-morfolinil)-etil]-amina (0.036 mililitros, 0.275 milimoles), COMU (135 miligramos, 0.314 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.055 mililitros, 0.314 milimoles) se disolvieron en N ,N-dimetil-formamida (DMF) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C durante la noche. El solvente se evaporó, para dar un aceite color naranja, el cual se dividió entre dicloro-metano (DCM) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La mezcla se separó sobre una frita hidrofóbica, y la fase clorada se evaporó al vacío, para dar un aceite color naranja, el cual se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-MeOH , gradiente del 5 al 20 por ciento), para dar el compuesto del título como un sólido color naranja (64 miligramos, 0.126 milimoles, 48.0 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H)+ 509, (M(37CI) + H)+ 511; RT 0.77 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 46: 2-f(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-f 1 ,2,41-triazolo-r413-airi ,41-benzo-diazepin-4-M1-N-r2-(1 H-imidazol-4-il)-etil1-acetamida El Intermediario 2 (104 miligramos, 0.262 milimoles), histamina (30.6 miligramos, 0.275 milimoles), COMU (135 miligramos, 0.314 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.055 mililitros, 0.314 milimoles) se disolvieron en ?,?-dimetil-formamida (DMF) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C durante la noche. Se agregaron más histamina (30.6 miligramos, 0.275 milimoles), y COMU (135 miligramos, 0.314 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.055 mililitros, 0.314 milimoles), y la reacción se agitó durante 6 horas adicionales, entonces se dejó asentarse a temperatura ambiente durante 56 horas. El solvente se evaporó, para dar un aceite color naranja, el cual se dividió entre dicloro-metano (DCM) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La mezcla se separó sobre una frita hidrofóbica, y la fase clorada se evaporó al vacío, para dar un aceite amarillo, el cual se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-MeOH, gradiente del 5 al 20 por ciento), para dar el compuesto del título como un sólido blanco (66 miligramos, 0.135 milimoles, 51.4 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H) + 490; RT 0.74 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 47: Acetato de (S)-terbutil-2-(6-(4-cloro-fenil)-8-metoxi-1 -metil-4H-benzo-fflf1 ,2l4l-tr¡azolo-r413-aU1 ,41-diazepin-4-ÜSl Se agregó cloruro de oxalilo (0.114 mililitros, 1.298 milimoles) a una solución fría (0°C) del Intermediario 2 (103 miligramos, 0.260 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) bajo N2. Entonces se agregó ?,?-dimetil-formamida (DMF) (0.020 mililitros, 0.260 milimoles), y la reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente (RT) durante 1 hora. La mezcla cruda de cloruro de ácido se vertió en una solución de terbutanol (0.124 mililitros, 1.298 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros), y se agregó base de Hunig (0.045 mililitros, 0.260 milimoles), y se agitó durante 10 minutos. Entonces se agregó más terbutanol (1 mililitro), y la solución se agitó durante 1 hora. La mezcla de reacción se evaporó y se volvió a disolver en terbutanol (1 mililitro) dos veces más; entonces el solvente se evaporó una última vez, para dar un sólido amarillo. La purificación del sólido mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (ciciohexano-acetato de etilo, gradiente del 10 al 50 por ciento) dio el compuesto del título como un aceite incoloro (25 miligramos, 0.055 milimoles, 21.27 por ciento de rendimiento). H RMN (400 MHz, CDCI3) d 7.50 (d, J=9 Hz, 2 H), 7.39 (d, J=9 Hz, 1 H), 7.20 (dd, J=9, 3 Hz, 1 H) 7.33 (s, 2 H), 6.89 (d, J=3 Hz, 1 H), 4.56 (dd, J=8, 6 Hz, 1 H), 3.81 (s, 3 H), 3.24 - 3.71 (m, 2 H), 2.62 (s, 3 H), 1.50 (s, 9 H). LC/MS (M(35CI) + H)+ 453, (M(37CI) + H)+ 455; RT 1.19 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 48: Acetato de (S)-piperidin-4-il-2-(6-(4-cloro-fenil)- 8-metoxi-1 -metil-4H-benzo-rflí1 ,2,41-tria20lo-f4,3-airi ,41-diazepin- 4-ilo) El Intermediario 2 (103 miligramos, 0.260 milimoles), 4-hidroxi- 1 -piperidin-carboxilato de 1 ,1 -dimetil-etilo (0.101 mililitros, 0.389 milimoles), EDC (74.6 miligramos, 0.389 milimoles), y DMAP (6.34 miligramos, 0.052 milimoles), se disolvieron en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) a temperatura ambiente bajo N2, y la mezcla de reacción se dejó agitándose durante la noche. La mezcla de reacción se apagó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y la mezcla se filtró a través de una frita hidrofóbica, y la fase clorada se evaporó al vacío, para dar un residuo amarillo. La purificación del sólido mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-MeOH, gradiente del 5 al 20 por ciento) dio el compuesto del título como un aceite incoloro, el cual se utilizó inmediatamente en la siguiente reacción.

El aceite Incoloro (157 miligramos, 0.271 milimoles), y ácido trifluoro-acético (0.5 mililitros, 6.49 milimoles), se disolvieron en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) a 0°C bajo N2, y la mezcla se dejó calentar hasta la temperatura ambiente (RT) durante 1 hora. El solvente se evaporó al vacío, y el residuo obtenido se disolvió en dicloro-metano (DCM), y se volvió a evaporar al vacío, para dar un aceite amarillo, el cual se secó bajo un alto vacío, para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo (50 miligramos, 0.095 milimoles, 35 por ciento de rendimiento).

? RMN (400 MHz, MeOH-c/4) d 8.49 (s, 1 H), 7.66 (d, J=9 Hz, 1 H), 7.47 (d, J=9 Hz, 2 H), 7.23 - 7.41 (m, 3 H), 6.85 (s, 1 H), 5.04 (br. s., 1 H), 4.57 (t, J=7 Hz, 1 H), 3.77 (s, 3 H), 3.51 (d, J=7 Hz, 2 H), 3.28 (br. s., 2 H), 3.17 (br. s., 2 H), 2.59 (s, 3 H), 2.07 (br. s., 2 H), 1.93 (br. s., 2 H). LC/MS ( (35CI) + H)+ 480; RT 0.78 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 49: 2-r(4S)-6-(4-cloro-fenil)-8-hidroxi-1 -metil-4H-f1,2,41-triazolo-r4,3-a1f1 ,41-benzo-diazepin-4-il1-N-etil-acetamida El Intermediario 22 (383 miligramos, 1.00 milimoles), clorhidrato de etil-amina (163 miligramos, 2.0 milimoles), HATU (457 miligramos, 1.20 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.349 mililitros, 2.0 milimoles), se disolvieron en ?,?-dimetil-formamida (D F) (2 mililitros), y se agitaron a temperatura ambiente durante la noche. Se agregaron más clorhidrato de etil-amina (163 miligramos, 2.0 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.349 mililitros, 2.0 milimoles), y la reacción se agitó durante 2 horas adicionales. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 mililitros), y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 mililitros), agua y salmuera. La fase orgánica se secó y se evaporó al vacío. La purificación del residuo mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-metanol, gradiente del 10 al 20 por ciento) dio el compuesto del título como un sólido grisáceo (200 miligramos, 0.488 milimoles, 49 por ciento de rendimiento). LC/MS (M(35CI) + H)+ 410, (M(37CI) + H)+ 412; RT 0.76 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 50: Sal de ácido fórmico de la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-f1 ,2,41-triazolo-r4.3-alM ,41-benzo-diazepin-4-il1-N-r2-(dimetil-amino)-etin-acetamida El Intermediario 2 (105 miligramos, 0.265 milimoles), N,N-dimetil-1 ,2-etandiamina (0.071 mililitros, 0.278 milimoles), COMU (136 miligramos, 0.318 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.116 mililitros, 0.661 milimoles) se disolvieron en ?,?-dimetil-formamida (DMF) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C. Después de la adición de la amina, se hizo color naranja, y se dejó agitándose a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se evaporó, para dar un aceite amarillo, el cual se dividió entre dicloro-metano (DCM) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La mezcla se separó sobre una frita hidrofobica, y la fase clorada se evaporó al vacío, para dar un aceite amarillo, el cual se disolvió en metanol (1 mililitro), y se purificó mediante cromatografía de auto-preparación dirigida a la masa, para dar el compuesto del título como un sólido blanco (48 miligramos, 0.094 milimoles, 35.4 por ciento de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, Metanol- /4) d 8.40 (br. s., 1 H), 7.70 (d, J=9 Hz, 1 H), 7.52 (d, J=9 Hz, 2 H), 7.26 - 7.45 (m, 3 H), 6.87 (s, 1 H), 4.62 (t, J=7 Hz, 1 H), 3.65 (s, 3H), 3.65 - 3.92 (m, 3 H), 3.32 - 3.55 (m, 3 H), 3.24 (br. s., 1 H), 2.90 (s, 6 H), 2.62 (s, 3 H). LC/MS (M(35CI) + H)+ 467, (M(37CI) + H)+ 469; RT 0.76 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 51 : Sal de ácido fórmico de la 2-r(4S)-6-(4-cloro- fenin-1-metil-8-(metiloxi)-4H-ri ,2.41-triazolo-r4,3-alf1 ,41-benzo- diazepin-4-il1-N-r3-(dimetil-amino)-propil1-acetamida El Intermediario 2 (100 miligramos, 0.252 milimoles), N,N- d i metí I - 1 ,3-propandiamina (0.033 mililitros, 0.265 milimoles), HATU (115 miligramos, 0.302 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.106 mililitros, 0.605 milimoles), se disolvieron en N,N-dimetil- formamida (DMF) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C durante la noche. El solvente se evaporó, para dar un aceite amarillo, el cual se dividió entre dicloro-metano (DCM) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La mezcla se separó sobre una frita hidrofóbica, y la fase clorada se evaporó al vacío, para dar un aceite amarillo, el cual se disolvió en metanol (1 mililitro), y se purificó mediante cromatografía de auto-preparación dirigida a la masa, para dar el compuesto del título como un sólido blanco (95 miligramos, 0.180 milimoles, 71.5 por ciento de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, Metanol-c/4) d 8.41 (br. s., 1 H), 7.74 (d, J=9 Hz, 1 H), 7.56 (d, J=9 Hz, 2 H), 7.37 - 7.46 (m, 3 H), 6.91 (d, J=3 Hz, 1 H), 4.66 (t, J=7 Hz, 1 H), 3.83 (s, 3 H), 3.35 - 3.57 (m, 3 H), 3.28 - 3.18 (m, 4 H), 2.87 (s, 6 H), 2.66 (s, 3 H), 1.89 - 2.09 (m, 2 H). LC/MS (M(35CI) + H)+ 481, (M(37CI) + H)+ 483; RT 0.79 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 52: 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-ri.2,41-triazolo-f4,3-airi ,41-benzo-diazepin-4-ill-N-í3-(4-morfoliniD-propill-acetamida El Intermediario 2 (150 miligramos, 0.378 milimoles), [3-(4-morfolinil)-propil]-amina (57.2 miligramos, 0.397 milimoles), HATU (172 miligramos, 0.454 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.158 mililitros, 0.907 milimoles), se disolvieron en N,N-dimetil-formamida (DMF) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C durante la noche. El solvente se evaporó, para dar un aceite amarillo, el cual se dividió entre dicloro-metano (DCM) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La mezcla se separó sobre una frita hidrofóbica, y la fase clorada se evaporó al vacío, para dar un aceite amarillo. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-metanol, gradiente del 5 al 20 por ciento) dio el compuesto del título como un sólido color crema pálido (77 miligramos, 0.147 milimoles, 38.9 por ciento de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 7.54 (t, J=5 Hz, 1 H), 7.42 (d, J=9 Hz, 2 H), 7.19 - 7.37 (m, 3 H), 7.13 (dd, J=9, 3 Hz, 1 H), 6.78 (d, J=3 Hz, 1 H), 4.58 (t, J=7 Hz, 1 H), 3.73 (s, 3 H), 3.66 (t, J=5 Hz, 3 H), 3.36 - 3.48 (m, 2 H), 3.22 - 3.36 (m, 3 H), 2.46 - 2.76 (m, 4 H), 2.17 - 2.46 (m, 5 H), 1.56 - 1.85 (m, 2 H). LC/MS (M(35CI) + H)+ 523, (M(37CI) + H)+ 525; RT 0.74 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplo 53: 2-r(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-G1 ,2,41-triazolo-í4,3-ain ,4l-benzo-diazepin-4-¡n-N-f2-(1 ,1 -dióxido-4-tiomorfolinil)-etil1-acetamida El Intermediario 2 (150 miligramos, 0.378 milimoles), [2-(1,1-dióxido-4-tiomorfolinil)-etil]-amina (70.7 miligramos, 0.397 milimoles), HATU (172 miligramos, 0.454 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.158 mililitros, 0.907 milimoles), se disolvieron en N,N-dimetil-formamida (DMF) (3 mililitros), y se agitaron a 25°C durante la noche. El solvente se evaporó, para dar un aceite amarillo, el cual se dividió entre dicloro-metano (DCM) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La mezcla se separó sobre una frita hidrofóbica, y la fase clorada se evaporó al vacío, para dar un aceite color naranja. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM-metanol, gradiente del 5 al 20 por ciento) dio el compuesto del título como un sólido color crema pálido (84 miligramos, 0.151 milimoles, 39.9 por ciento de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 7.41 - 7.70 (m, 4 H), 7.30 - 7.41 (m, 2 H), 7.25 (dd, J=9, 3 Hz, 1 H), 6.87 (d, J=3 Hz, 1 H), 4.64 (dd, J=8, 6 Hz, 1 H), 3.82 (s, 3 H), 3.65 - 3.78 (m, 1 H), 3.56 (dd, J=15, 8 Hz, 1 H), 3.26 - 3.50 (m, 2 H), 3.19 (q, J=7 Hz, 1 H), 2.86 - 3.11 (m, 5 H), 2.63 (s, 3 H), 1.23 - 1.53 (m, 4 H). LC/MS (M(35CI) + H)+ 557, (M(37CI) + H)+ 559; RT 0.84 minutos (usando el aparato de LC/MS c)).

Ejemplos 54 a 57 Los Ejemplos 54 a 57 se prepararon a partir del Intermediario 2 y la amina apropiada, empleando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1.

La LC/MS se llevó a cabo utilizando el aparato c).

Los compuestos de ejemplo adicionales de la invención incluyen: ??? ??? Se entenderá que, en el contexto de los Ejemplos empleados para ilustrar la invención, la información acerca de la manera en que se prepararon los compuestos no se puede deducir a partir del formato utilizado para presentar la información, por ejemplo, los intermediarios y los productos finales pueden haber sido preparados por diferentes individuos, y/o en diferentes puntos del tiempo, empleando distintos lotes y las técnicas apropiadas.

Los detalles experimentales de los métodos de LC/MS D y F, como son referidos en la presente, son como sigue: La LC/MS (Método D) se condujo sobre una columna Supelcosil LCABZ+PLUS (3 mieras, 3.3 centímetros x 4.6 milímetros de diámetro interno (ID)), eluyendo con HC02H al 0.1 por ciento y acetato de amonio 0.01 M en agua (solvente A), y acetonitrilo al 95 por ciento y HC02H al 0.05 por ciento en agua (solvente B), utilizando el siguiente gradiente de elución: de 0 a 0.7 minutos con el 0 por ciento de B, de 0.7 a 4.2 minutos con 0? 100 por ciento de B, de 4.2 a 5.3 minutos con el 100 por ciento de B, de 5.3 a 5.5 minutos con 100 ? 0 por ciento de B, a una velocidad de flujo de 3 mililitros/minuto. Los espectros de masas (MS) se registraron en un espectrómetro de masas Fisons VG Platform, utilizando los modos de ionización positiva por electroaspersión [(ES + ve para dar los iones moleculares [M + H]+ y [M + NH4]+], o ionización negativa por electroaspersión [(ES-ve para dar el ion molecular [M-H]"]. Los datos analíticos a partir de este aparato se dan con el siguiente formato: [M + H]+ o [M-H]".

La LC/MS (Método F) se condujo sobre una columna Sunfire C18 (30milímetros x 4.6 milímetros de diámetro interno (ID), 3.5 mieras de diámetro de empaque) a 30 grados centígrados, eluyendo con una solución al 0.1 por ciento en volumen/volumen de ácido trifluoro-acético en agua (Solvente A), y una solución al 0.1 por ciento en volumen/volumen de ácido trifluoro-acético en acetonitrilo (Solvente B), utilizando el siguiente gradiente de elución: de 0 a 0.1 minutos con el 3 por ciento de B, de 0.1 a 4.2 minutos con el 3 al 100 por ciento de B, de 4.2 a 4.8 minutos con el 100 por ciento de B, de 4.8 a 4.9 minutos con el 100 al 3 por ciento de B, de 4.9 a 5.0 minutos con el 3 por ciento de B, a una velocidad de flujo de 3 mililitros/minuto. La detección UV fue una señal promediada a partir de una longitud de onda de 210 nanómetros a 350 nanómetros, y los espectros de masas se registraron en un espectrómetro de masas utilizando ionización positiva por electroaspersión. Los datos de ionización se redondearon hasta el entero más cercano.

LC/HRMS: La HPLC analítica se condujo sobre una columna Uptisphere-hsc (3 mieras, 33 x 3 milímetros de diámetro interno (ID)), eluyendo con acetato de amonio 0.01 M en agua (solvente A), y acetonitrilo al 100 por ciento (solvente B), utilizando el siguiente gradiente de elución: de 0 a 0.5 minutos con el 5 por ciento de B, de 0.5 a 3.75 minutos con 5 ? 100 por ciento de B, de 3.75 a 4.5 minutos con el 100 por ciento de B, de 4.5 a 5 minutos con 100 ? 5 por ciento de B, de 5 a 5.5 minutos con el 5 por ciento de B, a una velocidad de flujo de 1.3 mililitros/minuto. Los espectros de masas (MS) se registraron en un espectrómetro de masas Micromass LCT, utilizando los modos de ionización positiva por electroaspersión [ES+ve para dar los iones moleculares MH+], o ionización negativa por electroaspersión [ES-ve para dar los iones moleculares (M-H)'].

La TLC (cromatografía de capa delgada) se refiere al uso de las placas de TLC vendidas por Merck recubiertas con gel de sílice 60 F254.

Las técnicas de cromatografía en sílice incluyen ya sea las técnicas automatizadas (Flashmaster o Biotage SP4) o bien la cromatografía manual sobre cartuchos previamente empacados (SPE) o columnas por evaporación instantánea manualmente empacadas.

Cuando se da el nombre de un proveedor comercial después del nombre de un compuesto o de un reactivo, por ejemplo, "el compuesto X (Aldrich)" o "el compuesto X / Aldrich", esto significa que el compuesto X se puede obtener con un proveedor comercial, tal como el proveedor comercial nombrado.

Compuesto de referencia A: 2-met¡l-6-(metiloxi)-4H-3,1 -benzoxazin-4-ona Una solución del ácido 5-metoxi-antranílico (Lancaster) (41.8 gramos, 0.25 moles) se puso a reflujo en anhídrido acético (230 mililitros) durante 3.5 horas antes de concentrarse bajo presión reducida. El compuesto crudo se concentró entonces dos veces en la presencia de tolueno antes de filtrarse, y se lavó dos veces con éter, para proporcionar al compuesto del título (33.7 gramos, 71 por ciento de rendimiento) como un sólido color café; LC/MS (Método D): m/z 192 [M + H] + , Rt 1.69 minutos.

Compuesto de referencia B: [2-amino-5-(metiloxi)-fenil](4-cloro-fenil)-metanona A una solución de la 2-metil-6-(metiloxi)-4H-3,1 -benzoxazin-4-ona (para una preparación, véase el compuesto de referencia A) (40.0 gramos, 0.21 moles) en una mezcla de tolueno/éter (2/1) (760 mililitros) a 0°C, se le agregó por goteo una solución de bromuro de 4-cloro-fenil-magnesio (170 mililitros, 1 M en Et20, 0.17 moles). La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente, y se agitó durante 1 hora antes de apagarse con HCI 1N (200 mililitros). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (150 mililitros, 3 veces), y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mililitros), se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El compuesto crudo se disolvió entonces en EtOH (400 mililitros), y se agregó HCI 6 N (160 mililitros). La mezcla de reacción se puso a reflujo durante 2 horas antes de concentrarse hasta una tercera parte del volumen. El sólido resultante se filtró y se lavó dos veces con éter antes de suspenderse en EtOAc, y se neutralizó con NaOH 1N. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (150 mililitros, 3 veces), y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (150 mililitros), se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. Se obtuvo el compuesto del título como un sólido amarillo (39 gramos, 88 por ciento de rendimiento); LC/MS (Método D): m/z 262 [M + H] + , Rt 2.57 minutos. Compuesto de referencia C: N1-[2-[(4-cloro-fenil)-carbonil]-4-(metiloxi)-fenil]-N2-{[(9H-fluoren-9-il-metil)-oxi]-carbonil}-L-a-asparaginato de metilo El N-{[(9H-fluoren-9-il-metil)-oxi]-carbonil}-L-a-asparti I -cloruro de metilo {Int. J. Peptide Protein Res. 1992, 40, 13-18) (93 gramos, 0.24 moles) se disolvió en CHCI3 (270 mililitros), y se agregó la [2-amino-5-(metiloxi)-fenil](4-cloro-fenil)-metanona (para una preparación, véase el compuesto de referencia B) (53 gramos, 0.2 moles). La mezcla resultante se agitó a 60°C durante 1 hora antes de enfriarse y de concentrarse al 60 por ciento del volumen, se agregó éter a 0°C, y el precipitado resultante se filtró y se desechó. El filtrado se concentró bajo presión reducida, y se utilizó sin mayor purificación.

Compuesto de referencia D: [(3S)-5-(4-cloro-fenil)-7- (metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzo-d¡azep¡n-3-il]-acetato de metilo A una solución del N1-[2-[(4-cloro-fenil)-carbonil]-4-(metiloxi)- fenil]-N2-{[(9H-fluoren-9-il-metil)-oxi]-carbonil}-L-a-asparaginato de metilo (para una preparación, véase el compuesto de referencia C) (asumido 0.2 moles) en dicloro-metano (500 mililitros), se le agregó Et3N (500 mililitros, 3.65 moles), y la mezcla resultante se puso a reflujo durante 24 horas antes de concentrarse. La amina cruda resultante se disolvió en 1,2-DCE (1.5 litros), y se agregó cuidadosamente AcOH (104 mililitros, 1.8 moles). La mezcla de reacción entonces se agitó a 60°C durante 2 horas antes de concentrarse al vacío, y se disolvió en dicloro-metano (DCM). La capa orgánica se lavó con HCI 1N, y la capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron dos veces con agua y salmuera, se secaron sobre Na2S0 , se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El sólido crudo se recristalizó en MeCN, conduciendo al compuesto del título (51 gramos) como un sólido amarillo pálido. El filtrado se pudo concentrar y recristalizar en MeCN, para dar otros 10 gramos del producto deseado; Rf = 0.34 (DCM/MeOH : 95/5).

HRMS (M + H)+ calculado para C19H 1835CIN204 373.0955; encontrado 373.0957.

Compuesto de referencia E: [(3S)-5-(4-cloro-fenil)-7- (met¡lox¡)-2-t¡oxo-2,3-d¡h¡dro-1H-1,4-benzo-diazepin-3-il]-acetato de metilo Una suspensión de ?4310 (36.1 gramos, 81.1 milimoles), y Na2C03 (8.6 gramos, 81.1 milimoles) en 1,2-DCE (700 mililitros) a temperatura ambiente, se agitó durante 2 horas antes de agregarse el [(3S)-5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro-1 H-1 ,4-benzo- diazepin-3-il]-acetato de metilo (para una preparación, véase el compuesto de referencia D) (16.8 gramos, 45.1 milimoles). La mezcla resultante se agitó a 70°C durante 2 horas antes de enfriarse, y se filtró. El sólido se lavó dos veces con dicloro-metano (DCM), y el filtrado se lavó con NaHC03 saturado y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre gel de sílice (DCM/MeOH : 99/1), para proporcionar el compuesto del título (17.2 gramos, 98 por ciento de rendimiento) como un sólido amarillento. LC/MS (Método D): m/z 389 [M(35CI) + H] + , Rt 2.64 minutos.

HRMS (M + H)+ calculado para C19H1835CIN203S 389.0727; encontrado 389.0714.

Compuesto de referencia F: [(3S)-2-[(1 Z)-2-acetil-hidrazino]-5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-3H-1 ,4-benzo-diazepin-3-il]-acetato de metilo A una suspensión del [(3S)-5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-2-tioxo-2,3-dihidro-1 H-1 ,4-benzo-diazepin-3-il]-acetato de metilo (para una preparación, véase el compuesto de referencia E) (9.0 gramos, 23.2 milimoles) en tetrahidrofurano (300 mililitros) a 0°C, se le agregó monohidrato de hidrazína (3.4 mililitros, 69.6 milimoles) por goteo. La mezcla de reacción se agitó durante 5 horas entre 5°C y 15°C antes de enfriarse a 0°C. Se agregó entonces lentamente Et3N (9.7 mililitros, 69.6 milimoles), y se agregó por goteo cloruro de acetilo (7.95 mililitros, 69.6 milimoles). La mezcla entonces se dejó calentar a temperatura ambiente durante 16 horas antes de concentrarse bajo presión reducida. El producto crudo se disolvió en dicloro-metano y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre Na2S0 , se filtró, y se concentró al vacío, para dar el compuesto del título crudo (9.7 gramos, 98 por ciento de rendimiento), el cual se utilizó sin mayor purificación. R, = 0.49 (DCM/MeOH : 90/10).

Compuesto de referencia G: [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de metilo El [(3S)-2-[(1Z)-2-acetil-hidrazino]-5-(4-cloro-fenil)-7-(metiloxi)-3H-1 ,4-benzo-diazepin-3-il]-acetato de metilo crudo (para una preparación, véase el compuesto de referencia F) (asumido 9.7 gramos) se suspendió en tetrahidrofurano (100 mililitros), y se agregó AcOH (60 mililitros), a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 2 días antes de concentrarse bajo presión reducida. El sólido crudo se trituró en i-PR20 y se filtró, para dar el compuesto del título (8.7 gramos, 91 por ciento en 3 pasos) como un sólido grisáceo.

HRMS (M + H)+ calculado para C2iH2oCI 403 411.1229; encontrado 411.1245.

Compuesto de referencia H: Ácido [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acético A una solución del [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metilox¡)-4H-[ ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetato de metilo (para una preparación, véase el compuesto de referencia G) (7.4 gramos, 18.1 milimoles) en tetrahidrofurano (130 mililitros) a temperatura ambiente, se le agregó NaOH 1N (36.2 mililitros, 36.2 milimoles). La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 5 horas antes de apagarse con HCI 1N (36.2 mililitros), y se concentró al vacío. Entonces se agregó agua, y la capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) (3 veces), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida, para dar el compuesto del título (7 gramos, 98 por ciento de rendimiento) como un sólido amarillo pálido.

Compuesto de referencia I: [5-({[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-d¡azepin-4-¡l]-acetil}-amino)-pent¡l]-carbamato de 1 ,1-dimetil-etilo Una mezcla del ácido [(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-acético (para una preparación, véase el compuesto de referencia H) (1.0 gramos, 2.5 milimoles), HATU (1.9 gramos, 5 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (0.88 mililitros, 5 milimoles) se agitó durante 80 minutos a temperatura ambiente; a esto se agregó (4-amino-butil)-carbamato de 1 ,1-dimetil-etilo (1.05 mililitros, 5.0 milimoles, disponible en Aldrich). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas antes de concentrarse. El residuo se absorbió en dicloro-metano, y se lavó con HCI 1N. La capa acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) dos veces. La capa orgánica se lavó con hidróxido de sodio 1N, seguido por una solución saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio, y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía por evaporación instantánea sobre sílice utilizando dicloro-metano (DCM) / metanol 95/5, para dar el compuesto del título como un sólido amarillo (1.2 gramos). LC/MS (Método D): rt = 3.04 minutos.

Compuesto de referencia J: Trif luoro-acetato de N-(5-amino-pentil)-2-[(4S)-6-(4-c loro-fe ni l)-1-met i l-8-(met¡loxi)-4H-[ ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetamida A una solución del [5-({[(4S)-6-(4-cloro-fenil)- 1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazepin-4-il]-acetil}-amino)-pentil]-carbamato de 1 ,1 -dimetil-etilo (para una preparación, véase el compuesto de referencia H) (0.2 gramos, 0.34 milimoles) en dicloro-metano (3 mililitros), se le agregó ácido trifluoro-acético (0.053 mililitros, 0.68 milimoles) por goteo a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas desde 0°C hasta la temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró a sequedad, para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo higroscópico (200 miligramos) LC/MS (Método D): rt = 2.33 minutos.

HRMS (M + H)+ calculado para C25H29CIN602 481.2119; encontrado 481.2162.

Compuesto de referencia K: Mezcla de isómeros 5 y 6 de Alexa Fluor 488-N-(5-amino-pentil)-2-[(4S)-6-(4-cloro-fen¡l)-1 - metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-tr¡azolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo-diazep¡n- 4-il]-acetamida El trifluoro-acetato de N-(5-amino-pentil)-2-[(4S)-6-(4-cloro- fenil)-1-metil-8-(metilox¡)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][1 ,4]-benzo- diazepin-4-il]-acetam¡da (para una preparación, véase el compuesto de referencia J) (7.65 miligramos, 0.013 milimoles) se disolvió en ,N-dimetil-formamida (DMF) (300 microlitros) , y se agregó a Alexa Fluor 488 succinimidil-éster de ácido carboxílico (5 miligramos, 7.77 micromoles, mezcla de isómeros 5 y 6, disponible en Invitrogen, producto número A-20100) en un tubo centrífugo Eppendorf. Se agregó base de Hunig (7.0 microlitros, 0.040 milimoles), y la mezcla se puso en vórtex durante la noche. Después de 18 horas, la mezcla de reacción se evaporó a sequedad, y el residuo se volvió a disolver en sulfóxido de dimetilo (DMSO)/agua (50 por ciento, <1 mililitro en total), se aplicó a una columna de preparación Phenomenex Júpiter C18, y se eluyó con un gradiente del 95 por ciento de A : 5 por ciento de B hasta el 100 por ciento de B (A = ácido trifluoro-acético al 0.1 por ciento en agua, B = ácido trifluoro-acético al 0.1 por ciento / 90 por ciento de acetonitrilo / 10 por ciento de agua) a una velocidad de flujo de 10 mililitros/minuto durante 150 minutos. Las fracciones impuras Las fracciones impuras se combinaron y se volvieron a purificar utilizando el mismo sistema. Las fracciones se combinaron y se evaporaron, para proporcionar el producto del título (2.8 miligramos) como una mezcla de los 2 regioisómeros mostrados. LC/MS (Método F):, MH+ = 999, rt = 1.88 minutos.

Métodos de Prueba Biológicos Ensayo de enlace de anisotropía de fluorescencia Se evaluó el enlace de los compuestos de la fórmula (I) con el Bromodominio 2, 3 y 4 utilizando un ensayo de enlace de anisotropía de fluorescencia.

La proteína de bromodominio, el ligando fluorescente (el compuesto de referencia , véase anteriormente), y una concentración variable del compuesto de prueba, se incuban juntos hasta alcanzar el equilibrio termodinámico, bajo condiciones tales que, en ausencia del compuesto de prueba, el ligando fluorescente se enlaza de una manera significativa (>50 por ciento), y en la presencia de una concentración suficiente de un inhibidor potente, la anisotropía del ligando fluorescente no enlazado es mensurablemente diferente del valor enlazado.

Todos los datos se normalizaron al promedio de 16 pozos de control altos y 16 pozos de control bajos en cada placa. Entonces se aplicó un ajuste de curva de cuatro parámetros de la siguiente forma: y = a + ((b - a) / (1 + (10 A x / 10 A c) A d) En donde 'a' es el mínimo, 'b' es la pendiente de Hill, 'c' es la plC50, y 'd' es el máximo.

Los Bromodominios Humanos Recombi nantes (Bromodominio 2 (1-473), el Bromodominio 3 (1-435), y el Bromodominio 4 (1-477)) se expresaron en células de E.coli (en el vector pET15b) con una marca de seis-His en el término N. El Bromodominio marcado con His se extrajo a partir de las células de E.coli utilizando 0.1 miligramos/ mililitro de lisozima y sonicación. El Bromodominio entonces se purificó mediante cromatografía por afinidad sobre una columna HisTRAP HP, eluyendo con un gradiente lineal de ¡midazol de 10 a 500 mM, sobre 20 Cv. La purificación adicional se llevó a cabo mediante una columna de exclusión de tamaños de grado de preparación Superdex 200. La proteína purificada se almacenó a -80°C en HEPES 20 mM, pH de 7.5 y NaCI 100 mM.

Protocolo para el Bromodominio 2: Todos los componentes se disolvieron en una composición reguladora de HEPES 50 mM, pH de 7.4, NaCI 150 mM, y CHAPS 0.5 mM, con concentraciones finales del Bromodominio 2 75 nM, ligando fluorescente 5 nM. Se agregaron 10 microlitros de esta mezcla de reacción utilizando un micro-multigoteo a pozos que contenían 100 nanolitros de diferentes concentraciones del compuesto de prueba o del vehículo de sulfóxido de dimetilo (DMSO) (1 por ciento final) en una placa de microtitulación de bajo volumen Greiner negra de 384 pozos, y se equilibraron en la oscuridad durante 60 minutos a temperatura ambiente. La anisotropía de fluorescencia se leyó en un Envision (Aex = 485 nanómetros, ??? = 530 nanómetros; Dicroico -505 nM).

Protocolo para el Bromodominio 3: Todos los componentes se disolvieron en una composición reguladora de HEPES 50 mM, pH de 7.4, NaCI 150 mM, y CHAPS 0.5 mM, con concentraciones finales del Bromodominio 3 75 nM, ligando fluorescente 5 nM. Se agregaron 10 microlitros de esta mezcla de reacción utilizando un micro-multigoteo a pozos que contenían 100 nanolitros de diferentes concentraciones del compuesto de prueba o del vehículo de sulfóxido de dimetilo (DMSO) (1 por ciento final) en una placa de microtitulación de bajo volumen Greiner negra de 384 pozos, y se equilibraron en la oscuridad durante 60 minutos a temperatura ambiente. La anisotropía de fluorescencia se leyó en un Envision (Aex = 485 nanómetros, AEM = 530 nanómetros; Dicroico -505 nM).

Protocolo para el Bromodominio 4: Todos los componentes se disolvieron en una composición reguladora de HEPES 50 mM, pH de 7.4, NaCI 150 mM, y CHAPS 0.5 mM, con concentraciones finales del Bromodominio 4 75nM, ligando fluorescente 5nM. Se agregaron 10 microlitros de esta mezcla de reacción utilizando un micro-multigoteo a pozos que contenían 100 nanolitros de diferentes concentraciones del compuesto de prueba o del vehículo de sulfóxido de dimetilo (DMSO) (1 por ciento final) en una placa de microtitulación de bajo volumen Greiner negra de 384 pozos, y se equilibraron en la oscuridad durante 60 minutos a temperatura ambiente. La anisotropía de fluorescencia se leyó en un Envision (Aex = 485 nanómetros, AEM = 530 nanómetros; Dicroico -505 nM).

Todos los ejemplos (con la excepción de los Ejemplos 5 a 8, 18, 19, 30, 32, 33, 35, 49, 52, 53, 70 a 80 y 82) se probaron en los ensayos descritos anteriormente. Todos los compuestos probados con la excepción del Ejemplo 81 tuvieron una plC50 = 5.0 en uno o más de los BRD2, BRD3 y BRD4. Los Ejemplos 1, 2, 4, 9 a 17, 22 a 24, 26, 34, 36 a 48, 50, 51, 54 a 56 y 58 a 65, tuvieron una plC50 > 6.0 en uno o más de los ensayos de BRD2, BRD3 y BRD4 descritos anteriormente.

Ensayo de sangre entera estimulada por LPS que mide los niveles de TNFa La activación de las células monocíticas mediante los agonistas de los receptores tipo-Toll, tales como el lipopolisacárido bacteriano (LPS), da como resultado la producción de los mediadores inflamatorios clave, incluyendo TNFa. Se considera ampliamente que estas sendas son centrales para la patofisiología de una gama de trastornos autoinmunes e inflamatorios.

Los compuestos que se vayan a probar se diluyen para dar un intervalo de concentraciones apropiadas y se agrega 1 microlitro de los suministros de dilución a los pozos de una placa de 96 pozos. En seguida de la adición de sangre entera (130 microlitros), las placas se incuban a 37 grados (C02 al 5 por ciento) durante 30 minutos antes de la adición de 10 microiitros de 2.8 microgramos/mililitro de LPS, diluido en RPMI 1640 Complete (concentración final = 200 nanogramos/mililitro) , para dar un volumen total de 140 microiitros por pozo. Después de una incubación adicional durante 24 horas a 37 grados, se agregan 140 microiitros de suero regulado con fosfato (PBS) a cada pozo. Las placas se sellan, se agitan durante 10 minutos, y entonces se centrifugan (2,500 revoluciones por minuto x 10 minutos). Se remueven 100 microiitros del sobrenadante, y se ensayan los niveles de TNFa mediante un inmunoensayo (típicamente mediante la tecnología MesoScale Discovery) ya sea inmediatamente o bien en seguida del almacenamiento a -20 grados. Las curvas de respuesta a la dosis para cada compuesto se generaron a partir de los datos, y se calculó un valor de IC50.

Los Ejemplos 1, 12, 14, 34, 36, 37 y 81 se probaron en el ensayo anterior y se encontró que tenían una plC50 = 5.0. Los Ejemplos 1, 12, 14, 34, 36 y 37 se probaron en el ensayo anterior, y se encontró que tenían una plC50= 6.0.

Medición de la secreción de IL-6 inducida por LPS a partir de sangre entera La activación de las células monocíticas mediante los agonistas de los receptores tipo-Toll, tales como el lipopolisacárido bacteriano (LPS), da como resultado la producción de los mediadores inflamatorios clave, incluyendo IL-6. Se considera ampliamente que estas sendas son centrales para la patofisiología de una gama de trastornos autoinmunes e inflamatorios.

Los compuestos que se vayan a probar se diluyen para dar un intervalo de concentraciones apropiadas, de las cuales, se agrega 1 microlitro de los suministros diluidos a una placa de 96 pozos. En seguida de la adición de sangre entera (130 microlitros), las placas se incuban a 37 grados (C02 al 5 por ciento) durante 30 minutos antes de la adición de 10 microlitros de 2.8 microgramos/mililitro de LPS, diluido en RPMI 1640 Complete (concentración final = 200 nanogramos/mililitro), para dar un volumen total de 140 microlitros por pozo. Después de una incubación adicional durante 24 horas a 37 grados, se agregan 140 microlitros de suero regulado con fosfato a cada pozo. Las placas se sellan, se agitan durante 10 minutos, y entonces se centrifugan (2,500 revoluciones por minuto durante 10 minutos). Se remueven 100 microlitros del sobrenadante, y se ensayan los niveles de IL-6 mediante un inmunoensayo (típicamente mediante la tecnología MesoScale Discovery), ya sea inmediatamente o bien en seguida del almacenamiento a -20 grados. Las curvas de respuesta a la concentración para cada compuesto se generaron a partir de los datos, y se calculó un valor de IC50.

Los Ejemplos 1 a 4, 9 a 11, 13, 15, 17, 26, 31, 34, 38 a 48, 50, 51, 54, 55, 56, 58 a 64, 67, 69 y 81, se probaron en el ensayo anterior, y se encontró que todos, con la excepción del Ejemplo 81, tienen una plC50= 5.0.

Estos datos demuestran que los inhibidores de bromodominio probados en los dos ensayos de sangre entera anteriores inhibieron la producción de los mediadores inflamatorios clave de TNFa y/o IL6.

Esto sugiere que estos compuestos tienen un perfil anti-inflamatorio.

Modelo de Endotoxemia de Ratón In vivo Las altas dosis de la Endotoxina (lipopolisacárido bacteriano) administrada a los animales producen un síndrome de choque profundo que incluye una fuerte respuesta inflamatoria, mala regulación de la función cardiovascular, falla de órganos, y por último mortalidad. Este patrón de respuesta es muy similar a la sepsis humana y al choque séptico, en donde la respuesta del cuerpo a una infección bacteriana significativa puede ser similarmente amenazante de la vida.

Para probar los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, a los grupos de ocho ratones Balb/c machos se les dio una dosis letal de 15 miligramos/ kilogramo de LPS mediante inyección intraperitoneal. Noventa minutos más tarde, los animales se dosificaron intravenosamente con el vehículo (ciclodextrina al 20 por ciento, etanol al 1 por ciento en agua sin pirógeno) o el compuesto (10 miligramos/kilogramo). La sobrevivencia de los animales se monitoreó a los 4 días.

Números de animales sobrevivientes a los 4 días (sumados a través de múltiples experimentos repetidos): Vehículo 4/66 (6 por ciento) Compuesto del Ejemplo 1 24/56 (52 por ciento) Estos datos demuestran que el inhibidor de bromodominio probado en el modelo anterior dio lugar a un efecto de sobrevivencia animal significativo en seguida de la administración intravenosa.

Ensayo de Crecimiento Celular Las líneas celulares humanas (n = 33 comprendiendo 15 líneas celulares heme, 14 líneas celulares de mama, y otras 4 líneas celulares) se cultivaron en RPMI-1640 conteniendo suero bovino fetal al 10 por ciento; se aplicaron 1,000 células viables por pozo en placas de poliestireno negras de fondo plano de 384 pozos (Greiner #781086) en 48 microlitros de medio de cultivo. Todas las placas se pusieron en C02 al 5 por ciento, a 37°C durante la noche. Al día siguiente, se cosechó una placa con CellTiter-Glo (CTG, Promega #G7573) durante un tiempo igual a una medición de 0 (T0), y el se agregó compuesto (titulación de 20 puntos a desde 14.7 µ? hasta 7 pM) a las placas restantes. La concentración final de sulfóxido de dimetilo en todos los pozos fue del 0.15 por ciento. Las células se incubaron durante 72 horas o durante el tiempo indicado, y cada placa se reveló con reactivo CellTiter-Glo utilizando un volumen equivalente al volumen del cultivo celular en los pozos. Las placas se agitaron durante aproximadamente 2 minutos, y la señal quimiluminiscente se leyó en el Lector de Placas Analyst GT (Molecular Devices) o EnVision (Perkin Elmer).

Los resultados se expresaron como un porcentaje del T0, y se graficaron contra la concentración del compuesto. El valor de T0 se normalizó al 100 por ciento, y representa el número de células en el momento de la adición del compuesto, y los datos de respuesta a la concentración se ajustaron con un ajuste de curva de 4 parámetros utilizando el software XLfit (modelo 205). La concentración que inhibió el crecimiento celular por el 50 por ciento (glC50) es el punto medio de la "ventana de crecimiento" (entre el T0 y el control de sulfóxido de dimetilo). El valor Ymin - T0 se determina sustrayendo el valor de T0 (100 por ciento) a partir del valor de Ymin (%) determinado a partir del ajuste de la curva de respuesta a la concentración. Los valores a partir de los pozos sin células se sustrajeron a partir de todas las muestras para la corrección del fondo.

El Ejemplo 1 se probó de acuerdo con el ensayo anterior, y se encontró que tenía una glC50 en el intervalo de 163 a 29,300 nM a través de todas las líneas celulares, más específicamente en el intervalo de 163 a 2,480 nM para las líneas celulares heme, y de 410 a 29,300 nM para las líneas celulares de mama.

Estos datos demuestran que el inhibidor de bromodominio probado en el ensayo anterior inhibió el crecimiento celular en un panel de líneas celulares de oncología.

Todas las publicaciones, incluyendo, pero no limitándose a, las patentes y solicitudes de patente, citadas en esta memoria descriptiva, se incorporan a la presente como referencia como si cada publicación individual fuera específicamente e individualmente indicada como incorporada por referencia en la presente como si fuera completamente estipulada.

Claims (44)

1. REIVINDICACIONES compuesto de la fórmula (I), o una sal del mismo en donde: R1 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; R2 es -NR2aR2£" u -OR2 ; en donde uno de R2a o R2a es hidrógeno, y R2b o el otro de R2a o R2a se selecciona a partir de alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, R2CR2'cN-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbociclilo, carbociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, heterociclilo, y heterociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en donde cualquiera de los grupos carbociclilo o heterociclilo está opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, carbonilo, -CO-carbociclilo, azido, amino, hidroxilo, nitro y ciano, en donde el grupo -CO-carbociclilo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, azido, nitro y ciano; o dos grupos adyacentes sobre cualquiera de los grupos carbociclilo o heterociclilo, junto con los átomos de interconexión, forman un anillo de 5 ó 6 miembros, cuyo anillo puede contener 1 ó 2 heteroatomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; o R2a y R2a, junto con el átomo de nitrógeno (N) con el que están unidos, forman un anillo de 4, 5, 6, ó 7 miembros, el cual opcionalmente contiene 1 ó 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de O, S y N; en donde el anillo de 4, 5, 6, ó 7 miembros está opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo o amino; R2° y R2° son independientemente hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; cada R3 se selecciona independientemente a partir de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, ciano, CF3, -OCF3l -COOR5, -alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-N R6R7 y -alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-OH; R4 es hidroxilo, halógeno, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, nitro, ciano, CF3, -OCF3, -COOR5; u -OS(0)2-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; R5 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; y n es un entero 1 a 5.
2. 2. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R1 es el metilo.
3. 3. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 o con la reivindicación 2, en donde R2 es -OR2 .
4. 4. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 3, en donde R2b es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.
5. 5. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 4, en donde R2 se selecciona a partir de metilo, etilo, isopropilo y butilo.
6. 6. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 o con la reivindicación 2, en donde R2 es -NR2aR2£".
7. 7. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 6, en donde R2a es hidrógeno y R=a es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.
8. 8. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 7, en donde Ra a es etilo.
9. 9. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 6, en donde R2a es hidrógeno y R2a es R2CR2'cN-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.
10. 10. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R2a se selecciona a partir de R2CR2CN-CH2-, R2CR2°N-CH2CH2-, R2CR2'CN-CH2CH2CI-I2- y R2°R2'CN-CH2CH2 C H 2C H 2- .
11. 11. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 10, en donde R2C y R=c se seleccionan a partir de hidrógeno y metilo.
12. 12. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 6, en donde R2a es hidrógeno y R23 es carbociclilo.
13. 13. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 12, en donde R2a es ciclopentilo o ciclohexilo, en donde cada grupo está opcionalmente sustituido una vez por amino o hidroxilo.
14. 14. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 6, en donde R2a es hidrógeno, y R2'a es heterociclilo.
15. 15. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 14, en donde R2a se selecciona a partir de pirrolidinilo, piperidinilo, tetrahidro-furanilo y tetrahidro-pirano, en donde cada grupo está opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.
16. 16. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 15, en donde R2 a se selecciona a partir de:
17. 17. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 6, en donde R23 es hidrógeno, y R2'a es heterociclil-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido una vez por amino, hidroxilo o metilo.
18. 18. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 17, en donde R2a se selecciona a partir de heterociclil-CH2-, heterociclil-CH2CH2-, heterociclil-CH2CH2CH2- y heterociclil-CH2CH2CH2CH2- , en donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido una vez por amino, hidroxilo o metilo.
19. 19. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 18, en donde el heterociclilo se selecciona a partir de tetrahidro-furanilo, pirrolidinilo, piperidinilo, tetrahidro-piranilo, piperazinilo, morfolino y dióxido de tiomorfolino, en donde cada grupo está opcionalmente sustituido una vez por amino, hidroxilo o metilo.
20. 20. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el heterociclilo se selecciona a partir de:
21. 21. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, en donde n es .
22. 22. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, en donde R3 es 3-flúor, 4-cloro, 4-flúor, 4-metoxilo o 4-CF3.
23. 23. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 22, en donde R3 es 4-cloro.
24. 24. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 23, en donde R4 es MeO.
25. 25. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 24, en donde R4 es 8-MeO.
26. 26. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 25, el cual es el enantiómero-S.
27. 27. Un compuesto, el cual es cualquiera de los Ejemplos 1 a 37, o una sal de los mismos.
28. 28. Un compuesto, el cual es el Ejemplo 38 o el Ejemplo 39, o una sal de los mismos.
29. 29. Un compuesto, el cual es cualquiera de los Ejemplos 40 a 48, o una sal de los mismos.
30. 30. Un compuesto, el cual es cualquiera de los Ejemplos 49 a 82, o una sal de los mismos.
31. 31. Un compuesto, el cual es la 2-[(4S)-6-(4-cloro-fenil)-1 -metil-8-(metiloxi)-4H-[1 ,2,4]-triazolo-[4,3-a][ ,4]-benzo-diazepin-4-il]-W-etil-acetamida: o una sal de la misma.
32. 32. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
33. 33. Una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la reivindicación 32, y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.
34. 34. Un producto farmacéutico de combinación, el cual comprende un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la reivindicación 32, junto con uno o más agentes terapéuticamente activos diferentes.
35. 35. Un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la reivindicación 32, para utilizarse en terapia.
36. 36. Un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la reivindicación 32, para utilizarse en el tratamiento de enfermedades o condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio.
37. 37. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse de acuerdo con la reivindicación 36, en donde la enfermedad o condición es una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica.
38. 38. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse de acuerdo con la reivindicación 36, en donde la enfermedad o condición es cáncer.
39. 39. El uso de un compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la reivindicación 32, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades o. condiciones para las cuales se indique un inhibidor de bromodominio.
40. 40. Un método para el tratamiento de una enfermedad o condición para la cual se indique un inhibidor de bromodominio, en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula (I), o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la reivindicación 32.
41. 41. Un método para el tratamiento de acuerdo con la reivindicación 40, en donde la enfermedad o condición es una condición autoinmune y/o inflamatoria crónica.
42. 42. Un método para el tratamiento de acuerdo con la reivindicación 40, en donde la enfermedad o condición es cáncer.
43. 43. Un método para el tratamiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 40 a 42, en donde el sujeto es un ser humano.
44. 44. Un método para inhibir un bromodominio, el cual comprende poner en contacto el bromodominio con un compuesto de la fórmula (I), o con una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la reivindicación 32.