MX2011010366A - Inhibidor de la map cinasa p38. - Google Patents

Inhibidor de la map cinasa p38.

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Peter John Murray
Catherine Elisabeth Charron
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Abstract

La presente invención se refiere a un compuesto de la Fórmula (I): (ver fórmula (I)) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, incluyendo todos los estereoisómeros y tautómeros, que es un inhibidor de las enzimas de proteína cinasa activadas por mitógeno p38 (en adelante se mencionan como inhibidores de la MAP cinasa p38), en particular sus subtipos de alfa y gamma cinasa, y su uso en terapia, incluyendo en combinaciones farmacéuticas, especialmente en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, incluyendo las enfermedades inflamatorias del pulmón, como la EPOC.

Description

INHIBIDOR DE LA MAP CINASA P38 CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a un compuesto que es un inhibidor de la enzima de proteína cinasa activada por mitógeno p38 (en adelante se mencionan como inhibidores de la MAP cinasa p38), en particular sus subtipos de alfa y gamma cinasa, y su uso en terapia, incluyendo en combinaciones farmacéuticas, especialmente en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, incluyendo las enfermedades inflamatorias del pulmón, como la EPOC.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Se han identificado cuatro isoformas de MAPK p38 (alfa, beta, gamma y delta, respectivamente), cada una mostrando un patrón de expresión de tejido específico. Las isoformas alfa y beta de MAPK p38 se expresan ubicuamente en todo el cuerpo y se encuentran en muchos tipos diferentes de células. Las isoformas alfa y beta de MAPK p38 se inhiben por ciertos inhibidores de MAPK p38 de molécula pequeña conocidos. Las primeras generaciones de compuestos eran altamente tóxicas debido al patrón de expresión ubicua de estas isoformas y los efectos distintos a los deseados de los compuestos. Los inhibidores más recientes se han mejorado para ser altamente selectivos para las isoformas alfa y beta de MAPK p38 y tienen un margen de seguridad más amplio.
Se sabe menos sobre las isoformas gamma y delta de MAPK p38. Estas isoformas se expresan en tejidos/células específicas (a diferencia de las isoformas alfa p38 y beta p38). La isoforma delta de MAPK p38 se expresa más en el páncreas, testículos, pulmón, intestino delgado y el riñon.
También es abundante en los macrófagos (Smith, S.J. (2006) Br. J.
Pharmacol. 149:393-404) y detectable en neutrófilos, CD4+ células T y células endoteliales (www.genecard.org, Karin, K. (1999) J. Immunol.). Muy poco se sabe sobre la expresión de gamma de MAPK p38 pero se expresa más en el cerebro, músculo esquelético y en el corazón, como también en los linfocitos y macrófagos (www.genecard.org).
Los inhibidores selectivos de molécula pequeña de gamma y delta de MAPK p38 no están actualmente disponibles, pero un compuesto existente, BIRB 796, es conocido por tener actividad inhibidora de la pan-isoforma. La inhibición de gamma p38 y delta p38 se observa a concentraciones más altas del compuesto que la que se requiere para inhibir alfa de MAPK p38 (Kuma, Y. (2005) J. Biol. Chem. 280: 19472-19479). BIRB 796 también daña la fosforilación de MAPK o JNK p38 por MKK6 o MKK4 cinasa corriente arriba. Kuma discute la posibilidad de que el cambio conformacional provocado por la unión del inhibidor a la MAPK puede afectar la estructura tanto del sitio de fosforilación como del sitio de acoplamiento para el activador corriente arriba, dañando así la fosforilación de MAPK o JNK p38.
Se cree que MAP cinasa p38 juega un papel de mediador en muchas de las trayectorias de señalización que intervienen en el inicio y mantenimiento de inflamación persistente, crónica en enfermedades humanas, por ejemplo, asma severo y EPOC. En la actualidad existe abundante literatura que demuestra que la MAP cinasa p38 es activada por una gama de citocinas pro-inflamatorias y que su activación da como resultado el reclutamiento y la liberación de más citocinas pro-inflamatorias. De hecho, los datos de algunos estudios clínicos demuestran cambios benéficos en la actividad de la enfermedad en los pacientes durante el tratamiento con inhibidores de MAP cinasa p38. Por ejemplo Smith, S. J. (2006) Br. J. Pharmacol. 149:393-404 describe el efecto inhibidor de los inhibidores de MAP cinasa p38 en la liberación de TNFa (pero no IL-8) a partir de PBMC humano. Se propone el uso de inhibidores de MAP cinasa p38 en el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). Los inhibidores de molécula pequeña dirigidos a ????a/ß p38 han demostrado ser efectivos para reducir varios parámetros de inflamación en células y tejidos obtenidos de pacientes con EPOC, quienes generalmente son insensibles a corticoesteroides, (Smith, S. J. (2006) Br. J. Pharmacol. 149:393-404) y modelos de animales in vivo (Underwood, D. C. et al. (2000) 279:895-902; Nath, P. et al. (2006) Eur. J. Pharmacol. 544: 160-167; Medícherla S. et al. (2008) J. Pharm. Exp. Ther. 324:921-929). Irusen y colegas también sugirieron la posibilidad de participación de ????a/ß p38 en insensibilidad a corticoesteroides por medio de la reducción de la afinidad de unión del receptor de glucocorticoides (GR) en los núcleos (Irusen, E. et al., (2002) J. Allergy Clin. Immunol., 109:649-657). La experiencia clínica con una gama de inhibidores de la MAP cinasa p38 , incluyendo AMG548, BIRB 796, VX702, SCI0469 y SCI0323 se describe en Lee et al. (2005) Current Med. Chem. 12,:2979-2994.
EPOC es una condición en la cual se ha reportado que la inflamación subyacente es sustancialmente resistente a los efectos antiinflamatorios de los corticoesteroides inhalados. En consecuencia, una estrategia eficaz para el tratamiento de EPOC puede muy bien ser el desarrollo de una intervención que tenga efectos anti-inflamatorios inherentes y que sea capaz de aumentar la sensibilidad de los tejidos pulmonares de los pacientes con EPOC a los corticoesteroides inhalados. La reciente publicación de Mercado et al (2007; American Thoracic Society Abstract A56) demuestra que gamma p38 de silenciamiento tiene el potencial de restablecer la sensibilidad a corticoesteroides. De este modo puede haber un beneficio de "acción doble" para el uso de un inhibidor de MAP cinasa p38 para el tratamiento de EPOC y asma severo.
En la actualidad existe un cuerpo sustancial de evidencia que implica fuertemente el papel de las infecciones virales respiratorias en el inicio de las exacerbaciones en pacientes que sufren de asma y/o EPOC. Las exacerbaciones requieren un incremento en la intensidad del tratamiento para restablecer el control de la sintomatología de la enfermedad. Si son graves, las exacerbaciones pueden dar como resultado la hospitalización o, en su caso más extremo, la muerte de los pacientes. Los virus que comúnmente se asocian con exacerbaciones incluyen el rinovirus, influenza y el virus sincitial respiratorio. Las respuestas celulares a estos virus se sabe ahora que incluyen la sobre regulación de ICA 1 (molécula de adhesión intercelular 1 ) y la liberación de citocinas, asi como la replicación de las partículas de virus. Ha habido una cierta investigación sobre el efecto de los inhibidores de MAP cinasa p38 en estas respuestas virales y algunos informes sugieren que los efectos de protección se pueden detectar con inhibidores de MAP cinasa p38 . En particular, algunos informes sugieren que la inhibición de la liberación inducida por el virus de IL-8 se puede conseguir in vitro con el compuesto conocido, SB203580. Es de destacar que la evaluación de la eficacia de un agente para reducir la inflamación inducida por rinovirus y la replicación del virus en modelos in vivo preclínicos sigue siendo un reto importante. Sin embargo, existen modelos in vivo bien establecidos de influenza en el ratón y parainfluenza en el conejillo de indias.
El principal obstáculo que impide la utilidad de los inhibidores de MAP cinasa p38 en el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas humanas ha sido la toxicidad observada en los pacientes. Esto ha sido lo suficientemente grave para dar lugar al retiro del desarrollo clínico de muchos de los compuestos desarrollados, incluyendo especialmente a todos los mencionados anteriormente.
Sigue habiendo la necesidad de identificar y desarrollar nuevos compuestos terapéuticamente útiles como inhibidores de MAP cinasa p38 que tengan potencial terapéutico mejorado, en particular que sean más eficaces, de acción más prolongada y/o menos tóxicos a las dosis terapéuticas pertinentes. Uno objetivo de la presente invención es proporcionar un compuesto que inhiba la MAP cinasa p38, por ejemplo, con cierta especificidad de sub-tipo, que muestre un buen potencial antiinflamatorio.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (1): o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, incluyendo todos los estereoisómeros y tautómeros de los mismos.
El nombre sistémico del compuesto de fórmula (1) es ?/-(4-(4-(3- (3-ferc-Butil-1 -p-tolil- H-pirazol-5-il) ureido) naftalen- -iloxi)piridin-2-il)-2-metoxiacetamida.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Ejemplos de sales del compuesto (1) incluyen todas las sales farmacéuticamente aceptables, como sin limitación, sales de adición de ácido de los ácidos de minerales fuertes, tales como las sales de HCI y HBr y sales de adición de ácidos orgánicos fuertes, tales como una sal de ácido metansulfónico.
Como se emplea en la presente abajo de la definición de un compuesto de fórmula (1 ) se pretende incluir las sales, solvatos, y todos los tautómeros de dicho compuesto, a menos que el contexto indique específicamente lo contrario. Ejemplos de solvatos incluyen hidratos.
La invención aquí proporcionada se extiende a profármacos del compuesto de fórmula (1), es decir, compuestos que se descomponen y/o son metabolizados in vivo para proporcionar un compuesto activo de fórmula (1 ). Ejemplos generales de profármacos incluyen ésteres simples, y otros esteres tales como ésteres de carbonato mixto, carbamatos, glucósidos, éteres, acétales y cetales.
En otro aspecto de la invención, se proporcionan uno o más metabolitos del compuesto de fórmula (1), en particular, un metabolito que conserva una o más de las actividades terapéuticas del compuesto de fórmula (1). Un metabolito, como se emplea en la presente, es un compuesto que se produce in vivo del metabolismo del compuesto de fórmula (1 ), tal como, sin limitación, metabolitos oxidativos y/o metabolitos generados, por ejemplo, de O-desalquilación.
Los compuestos de la descripción incluyen aquéllos donde el átomo especificado es un isótopo que sucede naturalmente o no. En una modalidad, el isótopo es un isótopo estable. De este modo, los compuestos de la descripción incluyen, por ejemplo, compuestos que contienen deuterio y similares.
La descripción también se extiende a todas las formas polimórficas de los compuestos definidos en la presente.
Un ejemplo de una vía para preparar un compuesto de la fórmula (1) se muestra a continuación en el esquema 1 : ESQUEMA 1 De este modo el compuesto de fórmula (1) se puede preparar por medio de un procedimiento que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (8): con un compuesto de fórmula (A): (A) en donde Ld es un grupo saliente por ejemplo halógeno, tal como cloro.
La reacción se lleva a cabo adecuadamente en presencia de una base (por ejemplo, N,N-diisopropiletilamina).
Los compuestos de fórmula (8) se pueden preparar al hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (7): (7) con un compuesto de fórmula (6): (6) y un compuesto de fórmula (B): en donde LG2 y LG3 cada uno representa independientemente grupos salientes (por ejemplo, LG2 es CI3CO- y LG3 es Cl. Alternativamente tanto LG2 como LG3 pueden ser iguales, por ejemplo LG2 y LG3 ambos representan imidazolilo o halógeno tal como cloro).
La reacción se lleva a cabo adecuadamente en un solvente aprótico (por ejemplo, diclorometano), utilizando grupos protectores adecuados para los grupos químicamente sensibles.
Un compuesto de fórmula (6) se puede preparar por medio de la reacción de un compuesto de la fórmula (4a) (4a) en donde P1 es un grupo protector amina adecuado y LG representa un grupo saliente tal como cloro, con un compuesto de fórmula (C) por ejemplo, en presencia de un catalizador adecuado, tal como un catalizador de paladio homogéneo, seguido por la remoción de los grupos protectores de amina. Por ejemplo, cuando los grupos protectores son ferc-butoxicarbonilo, su remoción puede lograrse por medio del tratamiento con TFA en diclorometano.
Los compuestos de fórmula (4a) se pueden preparar al proteger un compuesto de la fórmula (3a): (3a) por ejemplo empleando di-terc-butil dicarbonato y D AP, en donde LG4 representa un grupo saliente, tal como cloro.
Los compuestos de fórmula (3a) se pueden preparar al hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (2): (2) con un compuesto de fórmula (D): (D) en donde LG4 representa un grupo saliente, por ejemplo un átomo de halógeno, tal como cloro, como por el compuesto de fórmula (3), bajo condiciones apropiadas de reacción, por ejemplo en presencia de una base fuerte tal como ferf-butóxido de potasio y N-metilpirrolidona (1-metilpirrolidin-2-ona).
El compuesto de fórmula (1) también se puede preparar por medio del procedimiento representado en el esquema 2: ESQUEMA 2 De este modo el compuesto de fórmula (1) se puede preparar al hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (7): (7) compuesto de fórmula (12): (12) por ejemplo, en presencia de un agente de acoplamiento adecuado, tal como el 1 ,1-carbonil-diimidazol.
El compuesto de fórmula (12) se puede preparar por la reducción de un compuesto de fórmula (11): (11) La reducción se puede realizar bajo condiciones de hidrogenación sobre un catalizador adecuado, tal como paladio sobre carbono, o alternativamente se puede llevar a cabo químicamente utilizando un agente reductor apropiado, tal como polvo de hierro en ácido acético.
El compuesto de fórmula (1 1 ) se puede preparar al hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (10): (10) con un compuesto de fórmula (A): (A) en donde Ld representa un grupo saliente, como se definió anteriormente.
La reacción se puede realizar en un solvente adecuado, por ejemplo diclorometano en presencia de una base no nucleófila adecuada tal como /V.W-ditsopropiletilamina.
Los compuestos de fórmula (10) se pueden preparar al hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (9): O) con un compuesto de fórmula (E): (E) en donde el grupo NR1R2 es una amina o un derivado protegido de manera adecuada de la misma, por ejemplo en presencia de una base tal como hidruro de sodio y un solvente adecuado tal como DMF. En donde NR1R2 no es -NH2, se apreciará que un paso de desprotección adecuado debe incluirse para proporcionar el compuesto de la fórmula (10).
Los compuestos de las fórmulas (2), (7), (9), (A), (B), (C), (D) y (E) están disponibles comercialmente, o son conocidos o son novedosos y se pueden preparar fácilmente por métodos convencionales. Véase, por ejemplo Regan, J. ef a/.; J. Med. Chem., 2003, 46, 4676-4686, WO00/043384, WO2007/087448 y W02007/089512.
Pueden ser necesarios grupos protectores para proteger a los grupos químicamente sensibles durante una o más de las reacciones descritas anteriormente, para garantizar que el procedimiento se lleve a cabo y/o sea eficiente. De este modo, si se desea o es necesario, los compuestos intermediarios pueden estar protegidos por el uso de grupos protectores convencionales. Los grupo protectores y medios para su eliminación se describen en "Protective Groups in Organic Synthesis", por Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts, publicado por John Wiley & Sons Inc; 4a Rev Ed., 2006, ISBN-10: 0471697540.
Los intermediarios novedosos como se describen en la presente forman un aspecto de la invención.
El compuesto de fórmula (1 ) es un inhibidor de MAP cinasa p38 y en un aspecto el compuesto es útil en el tratamiento de enfermedades, por ejemplo la EPOC y/o asma.
Sorprendentemente, el compuesto parece tener una larga duración de acción y/o la persistencia de acción en comparación con otros inhibidores de MAP cinasa p38, tales como BIRB796.
En una modalidad, el compuesto de fórmula (1) es un inhibidor de subtipo alfa y/o gamma de MAPK p38.
La persistencia de acción como se utiliza aquí se relaciona con el índice de disociación o constante de disociación del compuesto desde el objetivo (como un receptor). Un bajo índice de disociación puede conducir a la persistencia.
Un bajo índice de disociación en combinación con un alto índice de asociación tiende a proporcionar potentes entidades terapéuticas.
El compuesto de fórmula (1 ) puede ser potente in vivo.
Por lo general, los compuestos de la técnica anterior desarrollados hasta la fecha han sido destinados a la administración oral. Esta estrategia implica la optimización de compuestos que logran su duración de acción por medio de un perfil farmacocinético adecuado. Esto asegura que haya una concentración suficiente de fármaco establecida y mantenida después y entre las dosis para proporcionar un beneficio clínico. La consecuencia inevitable de este enfoque es que todos los tejidos del cuerpo, especialmente el hígado y el intestino, pueden estar expuestos a concentraciones terapéuticamente activas del fármaco, ya sea o no que se vean afectados de manera adversa por la enfermedad que se trata.
Una estrategia alternativa consiste en diseñar los enfoques de tratamiento en los que se dosifica el fármaco directamente en el órgano inflamado (terapia tópica). Si bien este enfoque no es adecuado para el tratamiento de todas las enfermedades inflamatorias crónicas, éste ha sido ampliamente explotado en enfermedades pulmonares (asma, EPOC), enfermedades de la piel (dermatitis atópica y psoriasis), enfermedades nasales (rinitis alérgica) y enfermedades gastrointestinales (colitis ulcerativa).
En la terapia tópica, la eficacia se puede lograr ya sea (i) asegurando que el fármaco tenga una duración sostenida de acción y se mantenga en el órgano relevante para reducir al mínimo los riesgos de toxicidad sistémica o (ii) produciendo una formulación que genere un "depósito" del fármaco activo que está disponible para mantener los efectos deseados del fármaco. El enfoque (i) se ejemplifica por el fármaco anticolinérgico tiotropio (Spíriva), que se administra por vía tópica al pulmón como un tratamiento para la EPOC, y que tiene una afinidad excepcionalmente alta para su receptor objetivo que resulta en un índice muy lento y una duración sostenida consecuente de acción.
En un aspecto de la descripción, el compuesto de fórmula (1) es particularmente adecuado para suministro tópico, tal como suministro tópico a los pulmones, en particular para el tratamiento de una enfermedad respiratoria, por ejemplo una enfermedad respiratoria crónica tal como EPOC y/o asma.
En una modalidad, el compuesto de fórmula (1) es adecuado para sensibilizar a los pacientes al tratamiento con corticoesteroides que se han vuelto resistentes a los regímenes de tratamiento.
El compuesto de fórmula (1) también puede ser útil para el tratamiento de artritis reumatoide.
El compuesto de fórmula (1 ) puede tener propiedades antivirales, por ejemplo, la capacidad para prevenir la infección de las células (corno las células epiteliales respiratorias) con un picornavirus, en particular, un rinovirus, influenza o virus sincitial respiratorio.
De este modo, se piensa que el compuesto es un agente antiviral, especialmente adecuado para la prevención, tratamiento o mejora de las infecciones por picornavirus, tal como infección por rinovirus, influenza o virus sincitial respiratorio.
En una modalidad, el compuesto de fórmula (1) es capaz de reducir la inflamación inducida por la infección viral, tal como infección por rinovirus y en particular infecciones virales que resultan en la liberación de citocinas como IL-8, especialmente in vivo. Esta actividad se puede probar, por ejemplo, in vitro empleando una prueba de IL-8 inducida por rinovirus como se describe en los ejemplos en la presente.
En una modalidad el compuesto de fórmula (1) es capaz de reducir la expresión de ICAM1 inducida por rinovirus, especialmente in vivo. ICAM1 es el mecanismo receptor utilizado por los llamados serotipos de rinovirus de ranura principales para infectar las células. Esta actividad se puede medir, por ejemplo mediante un método descrito en los ejemplos de la presente.
Se espera que las propiedades antes mencionadas hagan al compuesto de fórmula (1) especialmente adecuado para utilizarse en el tratamiento y/o profilaxis de las exacerbaciones, en particular exacerbaciones virales en pacientes con una o más de las siguientes condiciones crónicas tales como la insuficiencia cardiaca congestiva, EPOC, asma, diabetes, cáncer y/o en pacientes inmunodeprimidos, por ejemplo, después del trasplante de órganos.
En particular, el compuesto de fórmula (1) puede ser útil en el tratamiento de uno o más trastornos respiratorios incluyendo EPOC (incluyendo bronquitis crónica y enfisema), asma, asma infantil, fibrosis quística, sarcoidosis, fibrosis pulmonar idiopática, rinitis alérgica, rinitis, sinusitis, especialmente asma y EPOC (incluyendo bronquitis crónica y enfisema).
El compuesto de fórmula (1) es también útil en el tratamiento de una o más condiciones que pueden tratarse con la terapia tópica o local, incluyendo conjuntivitis alérgica, conjuntivitis, dermatitis alérgica, dermatitis de contacto, psoriasis, colitis ulcerativa, articulaciones inflamadas secundarias a la artritis reumatoide u osteoartritis.
También se espera que el compuesto de la fórmula (1) pueda ser útil en el tratamiento de otras condiciones incluyendo artritis reumatoide, pancreatitis, caquexia, inhibición del crecimiento y metástasis de tumores incluyendo carcinoma de pulmón de células no pequeñas, carcinoma de mama, carcinoma gástrico, carcinomas colorrectales y melanoma maligno.
El compuesto de la fórmula (1) también puede volver a sensibilizar la condición del paciente al tratamiento con un corticoesteroide, cuando la condición del paciente se ha vuelto resistente a los mismos.
Además, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la descripción opcionalmente en combinación con uno o más diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables.
Los diluyentes y portadores pueden incluir aquellos adecuados para la administración parenteral, oral, tópica, a través de la mucosa y rectal.
Como se mencionó anteriormente, dichas composiciones pueden prepararse, por ejemplo, para administración parenteral, subcutánea, intramuscular, intravenosa, intra-articular o peri-articulares, en particular en forma de soluciones líquidas o suspensiones; para administración oral, en particular en forma de tabletas o cápsulas; para administración tópica, por ejemplo, administración pulmonar o intranasal, en particular en forma de polvos, gotas nasales o aerosoles y administración transdérmica; para administración a través de la mucosa, por ejemplo, administración bucal, sublingual o vaginal, y para administración rectal, por ejemplo, en forma de supositorio.
Las composiciones pueden ser convenientemente administradas en forma de dosis unitarias y se pueden preparar por cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica farmacéutica, por ejemplo, corno se describe en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA., (1985). Las formulaciones para la administración parenteral pueden contener como excipientes agua estéril o solución salina, alquilen glicoles tales como propilenglicol, polialquilenglicoles tales como polietilenglicol, aceites de origen vegetal, naftalenos hidrogenados y similares. Las formulaciones para la administración nasal pueden ser sólidas y pueden contener excipientes, por ejemplo, lactosa o dextrano, o pueden ser soluciones acuosas u oleosas para su uso en forma de gotas nasales o aspersión medida. Para la administración bucal los excipientes típicos incluyen azúcares, estearato de calcio, estearato de magnesio, almidón pregelatinizado, y similares.
Las composiciones adecuadas para la administración oral pueden comprender uno o más portadores y/o excipientes fisiológicamente compatibles y pueden estar en forma sólida o líquida. Las tabletas y cápsulas se pueden preparar con agentes aglutinantes, por ejemplo, jarabe, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto o polivinilpirrolidona; llenadores tales como lactosa, sacarosa, almidón de maíz, fosfato de calcio, sorbitol o glicina; lubricantes, tales como estearato de magnesio, talco, polietilenglicol, o sílice, y agentes tensoactivos, tales como lauril sulfato de sodio. Las composiciones líquidas pueden contener aditivos convencionales tales como agentes de suspensión, por ejemplo, jarabe de sorbitol, metilcelulosa, jarabe de azúcar, gelatina, carboximetilcelulosa, o grasas comestibles; agentes emulsionantes tales como lecitina o acacia; aceites vegetales tales como aceite de almendras, aceite de coco, aceite de hígado de bacalao o aceite de cacahuate; conservadores tales como hidroxianisol butilado (BHA) e hidroxitolueno butilado (BHT). Las composiciones liquidas pueden encapsularse en, por ejemplo, gelatina para proporcionar una forma de dosificación unitaria.
Las formas de dosificación orales sólidas incluyen tabletas, cápsulas de cubierta dura de dos piezas y cápsulas de gelatina elástica blanda (SEG).
Una formulación de cubierta seca típicamente comprende una concentración de alrededor de 40% a 60% de gelatina, una concentración de alrededor de 20% a 30% de plastificante (tal como glicerina, sorbitol o propilenglicol) y una concentración de alrededor de 30% a 40% de agua. Otros materiales tales como conservadores, colorantes, opacificantes y saborizantes también pueden estar presentes. El material de relleno líquido comprende un fármaco sólido que se disolvió, solubilizó o dispersó (con agentes de suspensión tales como cera de abejas, aceite de ricino hidrogenado o polietilenglicol 4000) o un fármaco líquido en los vehículos o combinaciones de vehículos, tales como aceite mineral, aceites vegetales, triglicéridos, glicoles, polioles y agentes activos de superficie.
Convenientemente, el compuesto de fórmula (1) se administra por vía tópica en el pulmón. Por lo tanto, se proporciona de acuerdo con la invención, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la descnpción opcionalmente en combinación con uno o más diluyentes o vehículos farmacéuticamente aceptables. La administración tópica en el pulmón se puede lograr mediante el uso de una formulación en aerosol. Las formulaciones en aerosol comprenden típicamente el ingrediente activo suspendido o disuelto en un propulsor adecuado en aerosol, tal como clorofluorocarbono (CFC) o hidrofluorocarbono (HFC). Los propulsores de CFC adecuados incluyen tricloromonofluorometano (propulsor 1 1 ), diclorotetrafluoro metano (propulsor 1 14), y diclorodifluorometano (propulsor 12). Los propulsores de HFC adecuados incluyen tetrafluoroetano (HFC-134a) y heptafluoropropano (HFC-227). El propulsor normalmente comprende 40% a 99.5% por ejemplo, 40% a 90% en peso de la composición total para inhalación. La formulación puede comprender excipientes incluyendo co-solventes (por ejemplo, etanol) y agentes tensoactivos (por ejemplo, lecitina, trioleato de sorbitán y similares). Las formulaciones en aerosol son envasadas en botes y una dosis adecuada se suministra por medio de una válvula de medición (por ejemplo, que se suministra por Bespak, Valois o 3M).
La administración tópica en el pulmón también se puede lograr mediante el uso de una formulación no presurizada tal como una solución acuosa o suspensión. Esto puede ser administrado por medio de un nebulizador. La administración tópica en el pulmón también se puede lograr mediante el uso de una formulación en polvo seco. Una formulación en polvo seco tendrá el compuesto de la descripción en forma finamente dividida, por lo general con un diámetro aerodinámico de masa media (MMAD, por sus siglas en inglés) de 1-10 mieras. La formulación tendrá típicamente un diluyente tópicamente aceptable tal como lactosa, por lo general de un tamaño de partícula grande, por ejemplo, un MMAD de 100 µ?t? o más. Ejemplos de sistemas de suministro de polvo seco incluyen SPINHALER, DISKHALER, TURBOHALER, DISKUS y CLICKHALER.
El compuesto de fórmula (1) tiene actividad terapéutica. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto de la descripción para su uso como medicamento. De este modo, en un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto como se describió en la presente para su uso en el tratamiento de una o más de las condiciones antes mencionadas.
En un aspecto adicional, la presente invención proporciona el uso de un compuesto como se describió en la presente para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una o más de las condiciones antes mencionadas.
En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un método de tratamiento de una o más de las condiciones arriba mencionadas, que comprende administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la descripción o una composición farmacéutica que comprende el compuesto.
La palabra "tratamiento" pretende abarcar la profilaxis como también el tratamiento terapéutico.
Un compuesto de la descripción también se puede administrar en combinación con uno o más ingredientes activos, por ejemplo, ingredientes activos adecuados para el tratamiento de las condiciones antes mencionadas. Por ejemplo, las posibles combinaciones para el tratamiento de trastornos respiratorios incluyen combinaciones con esteroides (por ejemplo, budesonida, dipropionato de beclometasona, propionato de fluticasona, furoato de mometasona, furoato de fluticasona), beta agonistas (por ejemplo, terbutalina, salbutamol, salmeterol, formoterol) y/o xantinas (por ejemplo, teofilina). Otros activos adecuados incluyen anticolinérgicos, tales como tiotropio y agentes anti-virales, tales como, pero no limitado a, zanamivir u oseltamivir, por ejemplo, como el fosfato. Otros agentes antivirales incluyen peramivir y laninamivir.
Los datos generados a continuación en relación con las propiedades antivirales del compuesto de fórmula (1) lleva a los inventores a creer que las otras terapias antivirales serían útiles en el tratamiento o prevención de las exacerbaciones de los pacientes con enfermedades respiratorias tales como EPOC y/o asma y/o una o más de las indicaciones mencionadas anteriormente. De este modo, en un aspecto, se proporciona el uso de una terapia anti-viral, tal como, pero sin limitarse a, zanamavir u oseltamivir (por ejemplo fosfato de oseltamivir), en el tratamiento o la prevención de las infecciones virales respiratorias en pacientes con condiciones crónicas como la insuficiencia cardiaca congestiva, la diabetes, el cáncer o en pacientes inmunodeprimidos, por ejemplo después del trasplante de órganos.
Abreviaturas: AcOH ácido acético glacial Aq acuoso Ac acetilo ATP adenosin-5'-trifosfato BALF fluido de lavado bronquioalveolar Br amplio BSA albúmina sérica bovina CatCart® cartucho catalítico CDI 1 ,1-carbonil-diimidazol EPOC enfermedad pulmonar obstructiva crónica D doblete Pd2(dba)3 Tris(dibencolidenacetona)dipaladio DCM diclorometano DIAD diisopropilazadicarboxilato DIBAL-H hidruro de diisobutilaluminio DMAP N,N-dimetilpiridin-4-amina DIPEA ?,?-diisopropiletilamina DMF N,N-dimet¡lformamida DIVISO dimetil sulfóxido ELISA Ensayo inmunoabsorbente de enzimas EtOAc acetato de etilo FCS suero fetal de ternera FRET transferencia de energía por resonancia de fluorescencia HEPES ácido 2-(4-(2-hidroxietil)piperazin-1- il)etansulfónico Hr hora(s) HRP peroxidasa de rábano HRV rinovirus de humano ICAM1 molécula de adhesión intercelular 1 igG inmunoglobulina G IL-8 Interleucina 8 JNK cinasa N-terminal de c-Jun LPS lipopolisacárido MAPK proteína cinasa activada por proteína de mitógeno MAPKAP- proteína cinasa 2 activada por proteína cinasa K2 activada por mitógenos MeOH metanol Min minuto(s) MTT bromuro de 3-(4,5-Dimeti)tiazol-2-il)-2,5- difeniltetrazolio NMP /V-metilpirrolidon (1-metilpirrolidin-2-ona) NSE efecto no significativo OD densidad óptica PBMC célula mononuclear de sangre periférica PBS solución regulada de fosfato PMA forbol miristato acetato PPh3 trifenilfosfina RSV virus sincitial respiratorio TA temperatura ambiente RP HPLC cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa S singlete SCX intercambio catiónico soportado por sólidos SDS dodecil sulfato de sodio S¡02 gel de sílice T triplete TCID50 dosis de infección de los cultivos de tejidos al 50% TFA ácido trifluoroacético THF tetrahidrofurano TMB 3,3',5,5'-tetrametilbenzidina TNFa factor alfa de necrosis tumoral XantPhos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno Procedimientos generales Todos los materiales de partida y solventes se obtuvieron de fuentes comerciales o se prepararon de acuerdo con la cita bibliográfica. Las hidrogenaciones se realizaron en un reactor de flujo Thales H-cube en las condiciones establecidas. Las soluciones orgánicas se secaron normalmente sobre sulfato de magnesio. Se compró SCX con Supelco y se trató con HCI acuoso 1 M antes de su uso. La mezcla de reacción para la purificación se diluyó primero con MeOH y se hizo ácida con algunas gotas de AcOH . Esta solución se cargó directamente en SCX y se lavó con MeOH. El material deseado se fluyó luego por lavado con NH3 al 1 % en MeOH. Se realizó la cromatografía en columna en sílice PRE-envasada Silicycle (malla 230-400, 40-63 µ?) los cartuchos utilizando la cantidad indicada.
Cromatografía liquida de alto rendimiento de fase inversa preparativa: Columna Agilent Scalar C18, 5 pm (21.2 x 50 mm), velocidad de flujo 28 mL/min eluyendo con un gradiente de H2O-MeCN que contiene ácido fórmico al 0.1 % v/v durante 10 min utilizando detección UV a 215 y 254 nm.
Información de gradiente: 0.0 - 0.5 min: 95% de H20-5% de MeCN; 0.5 -7.0 min; Inclinado desde 95% de H2O-5% de MeCN a 5% de H2O-95% de MeCN; 7.0 - 7.9 min: Mantenido a 5% de H20-95% de MeCN; 7.9 - 8,0 min: Regresado a 95% de H2O-5% de MeCN; 8.0 - 10.0 min: Mantenido a 95% de H2O-5% de MeCN.
Métodos analíticos Cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa: Columna Agilent Scalar C18, 5 pm (4.6 x 50 mm) o Waters XBridge C18, 5 pm (4.6 x 50 mm) velocidad de flujo 2.5 mL/min eluyendo con gradiente de H2O-MeCN que contiene ácido fórmico al 0.1 % v/v durante 7 min empleando detección UV a 215 y 254 nm. Información de gradiente: 0.0 - 0.1 min: 95% de H20-5% de MeCN; 0.1 -5.0 min; Inclinado desde 95% de H20-5% de MeCN a 5% de H20-95% de MeCN; 5.0 - 5.5 min: Mantenido a 5% de H20-95% de MeCN; 5.5 - 5.6 min: Mantenido a 5% de H20-95% de MeCN, velocidad de flujo incrementada a 3.5 ml/min; 5.6 - 6.6 min: Mantenido a 5% de H20-95% de MeCN, velocidad de flujo 3.5 ml/min; 6.6 - 6.75 min: Regresado a 95% de H20-5% de MeCN, velocidad de flujo 3.5 ml/min; 6.75 - 6.9 min: Mantenido a 95% de H20-5% de MeCN, velocidad de flujo 3.5 ml/min; 6.9 - 7.0 min: Mantenido a 95% de H20-5% de MeCN, velocidad de flujo a 2.5 ml/min.
Espectroscopia 1H RMN: Bruker Avance III de 400 MHz utilizando solvente residual no deuterizado como referencia Procedimientos experimentales para el Esquema 1 4-(2-Cloropiridin-4-ilox¡)naftalen-1 -amina (3) (2) (3) A una solución agitada de 2-cloro-4-fluoropiridina (1.261 g, 9.58 mmoles) y clorhidrato de 4-amino-1-naftol (2) (750 mg, 3.83 mmoles) en NMP (40 mi) a -20°C, se agregó terc-butóxido de potasio (1.290 g, 1 .50 mmoles). La mezcla de reacción se dejó calentar a TA. Después 2.5 hr, la mezcla de reacción se diluyó con agua (100 mL) y se extrajo con EtOAc ( 00 mL luego 2 x 80 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (150 mL), se secaron y después se evaporaron al vacío. El producto crudo se sometió a la captura y liberación de SCX eluyendo con 1% de NH3 al vacio para dar 4-(2-cloropiridin-4-iloxi)naftalen-1 -amina (3) (1 .019 g, 92%) como un sólido marrón: m/z 271 (M+H)+ (ES+). 4-(2-Cloropiridin-4-iloxi)naftalen-1-A/,/\/-di-rerc-butilcarbamato (4) (3) (4) A una solución agitada de 4-(2-cloropiridin-4-iloxi)naftalen-1 -amina (3) (1.019 g, 3.76 mmoles) en THF (30 mL) a 0°C se agregó DMAP (0.034 g, 0.282 mmoles) y después dicarbonato de di-ferc-butilo (0.904 g, 4.14 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos y luego se dejó calentar a TA. Después de 1 .5 hr, la mezcla de reacción se enfrió a 0°C, y además se agregó dicarbonato de di-terc-butilo (0.904 g, 4.14 mmoles). La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 15 mins, y después a TA. Después 16 hr, la mezcla de reacción se diluyó con agua (40 mL) y se extrajo con EtOAc (2 x 40 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (75 mL), se secaron y después se evaporaron al vacio. El material crudo fue purificado por cromatografía de columna instantánea (S¡02i 80 g) eluyendo con 0 a 40% de EtOAc en iso-hexano para dar 4-(2-cloropiridin-4-iloxi)naftalen-1 -A/,/\/-di-rerc-butilcarbamato (4) (0.892 g, 48%) como un sólido púrpura: m/z 471 (M+H)+ (ES+). terc-Butil 4-(4-(f/V,/V-di-ferc-butilcarbamil)naftalen-1 -iloxi)piridin-2-ilcarbamato (5) Una mezcla de 4-(2-cloropiridin-4-iloxi)naftalen-1 -/V,A/-di-íerc-butilcarbamato (4) (0.892 g, 1 .894 mmoles), ferc-butil carbamato (0,666 g, 5.68 mmoles), carbonato de cesio (0.926 g, 2.84 mmoles), Pd2(dba)3 (0.043 g, 0.047 mmoles) y XantPhos (0.055 g, 0.095 mmoles) se suspendieron en THF (10 mL). La mezcla de reacción se purgó rigurosamente con nitrógeno y después se calentó a reflujo. Después 15 hr, la mezcla de reacción se enfrió a TA, se diluyó con agua (35 mL) y se extrajo con EtOAc (35 x 25 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron y después se evaporaron al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía de columna instantánea (Si02; 80 g) eluyendo con 0 a 30% de EtOAc en iso-hexano para dar terc-butil 4-(4-(N,N-d -terc- but¡lcarbam¡l)naftalen-1 -¡loxi)pir¡d¡n-2-ilcarbamato (5) (289 mg, 28%) como un sólido blanco: m/z 552 (M+H)+ (ES+). 4-(4-Aminonaftalen-1 -iloxi)piridin-2-amina (6) (5) (6) A una solución agitada de terc-butil 4-(4-(N,N-d -terc-butilcarbamil)naftalen-1 -iloxi)piridin-2-ilcarbamato (5) (289 mg, 0.524 mmoles) en DCM (8 mL), a 0°C, se agregó TFA (4 mL). La mezcla resultante se agitó mientras se calentó lentamente a TA. Después de 5 hr, los volátiles se eliminaron al vacio y el residuo se absorbió en MeOH (5 mL) y se sometió a la captura y liberación de SCX eluyendo con 1 % de NH3 en solución de MeOH. El solvente se removió al vacio para producir 4-(4-aminonaftalen-1-iloxi)pirid¡n-2-amina (6) ( 16 mg, 85%) como un aceite marrón-anaranjado: m/z 252 (M+H)+ (ES+). 1 -(4-(2-aminopir¡din-4-iloxi)naftalen-1-il)-3-(3-terc-butil-1-p-tolil-1 H-pirazol-5-il)urea (8) Una solución saturada de NaHC03 (14 mL) se agregó a una solución de 5-aminopirazol (7) (0.206 g, 0.900 mmoles) en DCM (20 mL). La mezcla se agitó vigorosamente, se enfrió a 0°C y se le agregó triclorometilcloroformato (0.326 mL, 2.70 mmoles) en una porción. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 0°C durante otros 80 minutos. Se separaron las capas y la capa orgánica se secó, se evaporó al vacio y el aceite anaranjado resultante se secó durante 30 minutos más al alto vacío. El isocianato aislado resultante se absorbió entonces en THF (6 mL) y se mantuvo bajo nitrógeno a 0°C.
A una solución agitada de 4-(4-aminonaftalen-1-iloxi)piridin-2-amina (6) (1 16 mg, 0.462 mmoles) y DIPEA (241 µ?, 1.385 mmoles) en THF (3 mL), a 0°C se añadió una alícuota de la solución de isocianato preparada anteriormente (2 mL, 0.300 mmoles). La mezcla resultante se agitó mientras se calentó lentamente a TA. Se agregaron alícuotas adicionales de la solución de isocianato en THF a la mezcla de reacción después de 1.5 hr, (1 mL, 0.150 mmoles) y después de 3.5 hr adicionales (0.5 mL, 0.075 mmoles). Después 20 hr, se agregó agua (30 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc (2 x 30 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron y después se evaporaron al vacío. El material crudo se purificó por cromatografía de columna instantánea (Si02; 12 g) eluyendo con 25 a 100% [5% MeOH en EtOAc] en iso-hexano para dar 1-(4-(2-aminopir¡din-4-iloxi)naftalen-1 -il)-3-(3-ferc-butil-1-p-tolil-1 /-/-pirazol-5-il)urea (8) (127 mg, 49%) como un aceite marrón: m/z 507 (M+H)+ (ES+).
A/-(4-(4-(3-(3-terc-Butil-1-p-tolil-1 H-pirazol-5-il)ureido)naftalen-1-iloxi)piridin-2-il)-2-metoxiacetamida (1 ) Se agregó lentamente (64.2 µ?, 0.703 mmoles) a una mezcla de 1 -(4-(2-aminopiridin-4-iloxi)naftalen-1-il)-3-(3-rerc-butil-1 -p-tolil-1 H-pirazol-5-il) urea (8) (89 mg, 0.176 mmoles) y DIPEA (153 µ?, 0.878 mmoles) en THF (5 mL). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante otros 20 minutos y luego se calentó a TA. Después de 2.5 horas, la reacción se templó por la adición de una solución de 1 % de NH3 en MeOH (3 mL), y la mezcla resultante se agitó durante 45 min. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se disolvió en una mezcla de MeOH (5 mL) y AcOH (2 mi) y se sometieron a la captura y liberación de SCX eluyendo con 1 % de NH3 en solución de MeOH. El material crudo se purificó por cromatografía de columna instantánea (SiO2; 12 g) eluyendo con 0 a 60% [5% de MeOH en EtOAc] en iso-hexano para dar ?/-(4-(4-(3-(3-terc-butil-1-p-tolil-1 H-pirazol-5-il)ureido)naftalen-1-iloxi)piridin-2-il)-2-metoxiacetamida (1) (62 mg, 61%) como un sólido blanco: m/z 579 (M+H)+ (ES+).
H RMN (400MHz, DMSO-d6) d: 1.29 (9 H, s), 2.40 (3 H, s), 3.31 (3 H, s), 3.99 (2 H, s), 6.41 (1 H, s), 6.70 (1 H, dd), 7.32-7.40 (3 H, m), 7.44-7.48 (2 H, m), 7.55-7.61 (1 H, m), 7.63-7.67 (2 H, m), 7.84 (1 H, dd), 7.97 (1 H, d), 8.09 (1 H, d), 8.19 (1 H, d), 8.79 (1 H, s), 9.13 (1 H, s), 10.02 (1 H, s).
Procedimientos experimentales para el Esquema 2 4-(4-Nitronaftalen-1 -iloxi)piridin-2-amina ( 10) (9) (10) A una solución agitada de 2-aminopiridin-4-ol (23.0 g, 209 mmoles) en D F (200 mL) a 0 °C, bajo nitrógeno se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 9.21 g, 230 mmoles) en porciones durante 30 mins. La mezcla se calentó a TA y después de 1 hr se enfrió a 0 °C y se agregó una solución de 1-fluoro-4-nitronaftileno (9) (40.0 g, 209 mmoles) en DMF (100 mL). La mezcla de reacción se dejó calentar a TA y después de 1.5 hr se diluyó con agua (1 L) y se extrajo con EtOAc (3 x 500 mL). Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con agua (3 x 700 mL) y salmuera (500 mL). Un precipitado amarillo se separó el cual se recolectó por filtración y se lavó con agua (500 mL) y se secó al vacío durante la noche. La capa orgánica se secó (MgS04), se filtró y se evaporó al vacio. El residuo se trituró con una mezcla de acetonitrilo (20 mL) y éter (200 mL) para dar un sólido rojo que se lavó con isohexano (200 mL). La solución sobrenadante de la titulación se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía de columna instantánea (SiO2, 120 g, 30-100% de EtOAc en isohexano, gradiente de elución). El producto se combinó con los dos sólidos aislados previamente, se absorbió en MeOH (500 mL) y se evaporó al vacío para producir 4-(4-nitronaftalen-1-iloxi)piridin-2-amina (10) (40.1 g, 65%) como un sólido amarillo: m/z 282 (M+H)+ (ES+). 2-Metoxi-/V-(4-(4-nitronaftalen-1-iloxi)piridin-2-il)acetamida (1 1 ) (10) (11) A una solución agitada de 4-(4-nitronaftalen-1-iloxi)piridin-2-amina (10) (40.0 g, 135 mmoles) y DIPEA (48.1 mL, 270 mmoles) en DCM (600 mL) a 0°C, bajo nitrógeno, se agregó gota a gota cloruro de metoxiacetilo (18.53 mi, 203 mmoles). La mezcla se calentó a TA y después de 1 hora una solución de amoníaco (100 mL, 7 M en MeOH) se agregó y continuó la agitación durante 30 minutos, tiempo durante el cual se formó un precipitado. La mezcla se evaporó al vacío y se agregó agua (1 L) al residuo para proporcionar una suspensión roja. Se agregó gota a gota ácido acético glacial hasta que persistió un color amarillo (~ 5 mL). El sólido se recolectó por filtración y se lavó con agua (300 mL) para producir 2-metoxi-/V-(4-(4-nitronaftalen-1-iloxi)piridin-2-il)acetamida (1 1) (44.1 g, 90 %) como un sólido amarillo: m/z 354 (M+H)+ (ES+).
Una suspensión agitada de 2-metoxi-/V-(4-(4-nitronaftalen-1-iloxi)piridin-2-il)acetamida (11) (44.0 g, 125 mmoles) y polvo de hierro (41.7 g, 747 mmoles) en ácido acético (300 mL) se calentó a 45°C. Después de 3 hr la mezcla se enfrió a TA y se vertió lenta y cuidadosamente en Na2CC>3 sólido (200 g). La mezcla entró en efervescencia con fuerza. La mezcla se dividió entre agua (500 mL) y EtOAc (500 mL). La capa acuosa se basificó con Na2C03 sólido a pH 1 1 y se filtró a través de una almohadilla de celite. La capa acuosa y la almohadilla de celite se extrajeron con EtOAc (3 x 500 mL) y los extractos combinados se lavaron con solución de NaHC03 acuosa saturada (500 mL), se secaron (MgS04) y se evaporaron al vacío para producir /V-(4-(4-aminonaftalen-1-iloxi)piridin-2-il)-2-metoxiacetamida (12) (35.0 g, 78%) como una espuma púrpura: m/z 324 (M+H)+ (ES+).
A/-(4-(4-(3-(3-rerc-Butil-1 -p-tolil-1 H-pirazol-5-il)ureido)naftalen-1 -iloxi)piridin-2-il)-2-metoxiacetamida (1 ) A una suspensión agitada de CDI (28.8 g, 178 mmoles) en DCM (250 mL) a TA, bajo nitrógeno, se agregó 3-/erc-butil-1-p-tolil-1H-pirazol-5-amina (7) (40.7 g, 178 mmoles) en porciones durante 1 hr. Después de 1 hr la solución color rojo oscuro resultante se agregó gota a gota, durante 1 hr, a una solución agitada de A/-(4-(4-aminonaftalen-1-iloxi)piridin-2-il)-2-metoxiacetamida (12) (35.5 g, 99 mmoles) en DCM (1 L). Después de 1 hr se agregó MeOH (100 mL) y la mezcla se mantuvo a TA durante 16 hr. La mezcla de reacción se evaporó al vacío y el residuo se absorbió en DCM (500 mL) y se lavó con agua y solución de NaHC03 acuosa saturada (500 mL). La capa orgánica se secó (MgS04), se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna instantánea (Si02, 800 g, 2% de MeOH en DCM, elución ¡socrática). Este producto se recristalizó a partir de etil acetato/heptano (800 mL de una mezcla de 5:3 v/v) para producir ?/-(4-(4-(3-(3-íerc-butil-1-p-tolil-1 /-/-pirazol-5-il)ureido)naftalen-1-iloxi) piridin-2-il)-2-metoxiacetamida (1) (25.5 g, 45%) como un polvo blanco.
Encontrado: C, 68.41 ; H, 5.93; N, 14.36; C33H34N604 requiere: C, 68.49; H, 5.92; N, 14.52%.
Pruebas biológicas A continuación se presentan los resúmenes de las propiedades del compuesto de la fórmula (1) establecidas utilizando ensayos in vitro: El compuesto de la fórmula (1) mostró diferencias sustanciales en sus perfiles para BIRB796. Aunque ambos compuestos eran inhibidores potentes y efectivos de la liberación de TNFa inducida por LPS en células THP-1 y células U937 diferenciadas (Cuadro 1), BIRB796 no mostró efectos significativos (NSE, por sus siglas en inglés) en los otros seis sistemas que se investigaron, principalmente: liberación de IL-8 inducida por LPS en células U937 diferenciadas (BIRB796 31 % de inhibición máxima; el compuesto de fórmula (1) Cl50. 7.9 nM); liberación de IL-8 inducida por LPS de macrófagos del esputo (Cuadro 2); expresión de ICAM1 inducida por poli I: C en la línea de células epiteliales bronquiales de humano, las células BEAS2B (BIRB796 sin efecto en 10 ug/ml, el compuesto de fórmula (1 ) CI50: 1.7 nM), expresión de ICAM1 inducida por rinovirus en células BEAS2B (Cuadro 2), liberación de IL-8 inducida por rinovirus en células BEAS2B (Cuadro 2) y replicación de rinovirus en células MRC5. En marcado contraste, el compuesto de fórmula (1) demostró actividad en todos los seis sistemas y mostró los niveles de potencia que fueron equivalentes a o superiores a aquellos demostrados en la liberación de TNFa inducida por LPS en células U937.
CUADRO 1 Actividad MAP cinasa p38 comparativa y actividad de TNF-a inducida por LPS de macrófagos para BIRB796 y Compuesto (1 ) Valores Cl50 (nM) Liberación de TNFo inducida enzimas MAPK p38 Compuesto por LPS de prueba Subtipo a Subtipo ? Células THP1 U937 BIRB796 12 (n=6) 296 (n=5) 20 (n=2) 12 (n=3) (1) 12 (n=2) 344 (n=2) 2.1 (n=3) 13 (n=3) a) Células d-U937 = Células U937 diferenciadas CUADRO 2 Actividad anti-inflamatoria comparativa de BIRB796 y Compuesto (1) Valores Clso (nM) Macrófagos de esputo Células BEAS2B Compuesto de prueba Expresión de Liberación de Liberación de IL-8 ICAM inducida IL-8 inducida inducida por LPS NSE @ 1.9µ? NSE @ 1.9µ? BIRB796 NSE @ 19µ? (n=2) (n=2) (n=2) (1) 5 (n=1 ) 0.37 (n=4) 0.065 (n=4) El potencial de estos dos compuestos para inhibir la replicación de rinovirus en fibroblasto de pulmón fetal de humano, las células MRC5 se han investigado adicionalmente. Se estableció que BIRB796 no tuvo efecto sobre la replicación viral en una escala de concentración de hasta 1.9 µ . Sin embargo, se investigaron las curvas del efecto de concentración del compuesto de fórmula (1) y se encontró que una concentración de 5.2 nM disminuyó el título viral por orden de 1 log.
La siguiente es una descripción de estos ensayos: Ensayo de inhibición de enzimas La actividad inhibidora de la enzima del compuesto se determinó por FRET utilizando péptidos sintéticos marcados con el donador y los fluoróforos aceptores (Z-LYTE, Invitrogen Ltd., Paisley, Reino Unido). APK? p38 fosforilado recombinante (MAPK12 .Millipore) fue eluído en regulador de HEPES, mezclado con el compuesto a concentraciones finales deseadas y se incubó durante dos horas a temperatura ambiente. El péptido FRET (2 µ?) y ATP (100 µ?) después fueron agregados a la mezcla de enzima/compuesto y se incubaron durante 1 hora. Se añadió un reactivo de desarrollo (proteasa) durante 1 hora antes de la detección en un lector de microplaca de fluorescencia (Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific). La proteasa específica del sitio sólo escinde al péptido no fosforilado y elimina la señal de FRET. Los niveles de fosforilación de cada reacción fueron calculados usando la relación de emisión de cumarina (donador) sobre emisión de fluoresceina (aceptor) con altas relaciones indicando una alta fosforilación y bajas relaciones, bajos niveles de fosforilación. El porcentaje de inhibición de cada reacción se calculó con relación al control no inhibido, y después se calculó el 50% de concentración inhibidora (valor CI50) a partir de la curva de concentración-respuesta.
Para MAPK p38 alfa (MAPK14: Invitrogen), se evaluó la actividad enzimática en forma indirecta determinando la activación/fosforilación de la molécula corriente abajo, MAPKAP-K2. La proteína MAPK p38 fue mezclada con el compuesto de prueba durante 2 horas a TA. MAPKAP-K2 objetivo inactivo p38a (Invitrogen) y el péptido FRET (2 µ?), que es un objetivo de fosforilación para MAPKAP-K2, y ATP (10 µ?) después fueron agregados a la mezcla de enzimas/compuesto y se incubó durante una hora. Después se agregó un reactivo de desarrollo y la mezcla se incubó durante una hora antes de la detección por fluorescencia completando el protocolo de ensayo.
Liberación de TNFa inducida por LPS en células U937 y células ???-1 : potencia Células U937, línea celular monocítica humana, fueron diferenciadas a células tipo macrófago por incubación con acetato de forbol miristato (PMA; 100 ng/ml) durante 48 a 72 horas. Cuando fue apropiado, las células fueron PRE incubadas con concentraciones finales del compuesto durante 2 horas Las células fueron entonces estimuladas con 0.1 pg/ml de LPS (de E. Coli: 011 1 :B4, Sigma) durante 4 hrs., y el sobrenadante se recolectó para la determinación de la concentración de TNFa por medio de ELISA sandwich (sistemas Duo-set, R&D). La inhibición de la producción de TNFa fue calculada como un porcentaje de la que se logró con 10 pg/ml de BIRB796 a cada concentración del compuesto de prueba por medio de la comparación con control de vehículo. Se determinó el 50% de concentración efectiva (R-CE50) a partir de la curva de concentración-respuesta resultante. También se utilizó la línea celular THP-1 humana monocítica para este ensayo. Las células THP-1 fueron entonces estimuladas con 3 pg/ml de LPS (de E. Coli: 0111 :B4, Sigma) durante 4 hrs., y el sobrenadante se recolectó para la determinación de la concentración de TNFa.
Se determinó el 50% de concentración inhibidora (CI50) a partir de la curva de concentración-respuesta resultante.
Liberación de IL-8 inducida por LPS en células U937: potencia Células U937, línea celular monocítica humana, fueron diferenciadas a células tipo macrófago por incubación con miristato-acetato de forbol (PMA; 100 ng/ml) durante 48 a 72 horas. Las células fueron preincubadas con concentraciones finales del compuesto durante 2 horas. Después las células fueron estimuladas con 0.1 pg/ml de LPS (de E. Coli: O11 1 :B4, Sigma) durante 4 hrs., y el sobrenadante se recolectó para la determinación de la concentración de IL-8 por medio de ELISA sándwich (sistemas Duo-set, R&D). La inhibición de la producción de IL-8 fue calculada a cada concentración del compuesto de prueba por medio de la comparación con control de vehículo. Se determinó el 50% de concentración inhibidora (CI50) a partir de la curva de concentración-respuesta resultante.
Inducción de ICAM- inducida por Poli l:C en células BEAS2B: potencia Se transfectó Poli I: C (1 pg/ml) (Invivogen Ltd., San Diego, CA) en células BEAS2B (células epiteliales bronquiales humanas, ATCC) con Oligofectamine (Invitrogen, Carlsbad, CA). Las células fueron preincubadas con concentraciones finales del compuesto durante 2 horas. Se determinó el nivel de expresión de ICAM1 sobre la superficie celular por ELISA con base en las células. En pocas palabras, a las 18 horas después de la transfección con poli l:C, se fijaron las células con formaldehído al 4% en PBS. Después de templar la peroxidasa endógena mediante la adición de azida de sodio al 0.1 % y peróxido de hidrógeno al 1 %, las células fueron lavadas con regulador de pH de lavado (Tween al 0.1 % en PBS: PBS-Tween). Después de bloquear los pozos con 5% de leche en PBS-Tween durante 1 hora, las células fueron incubadas con anticuerpos ICAM-1 anti-humanos (Cell Signaling Technology, Danvers, MA) en BSA PBS al 1 % durante la noche a 4°C. Se lavaron las células con PBS-Tween y se incubaron con el anticuerpo secundario (IgG anticonejo conjugado con HRP, Ltd. Dako, Glostrup, Dinamarca). Se detectó la señal de ICAM-1 mediante la adición de substrato y la lectura de la absorbancia a 450 nm de longitud de onda de referencia de 655 nm usando un espectrofotómetro. Se lavaron luego las células con PBS-Tween y se determinó el número total de células en cada pozo mediante la lectura de la absorbancia a 595 nm después de la tinción con Crystal Violet y la elución con solución de SDS al 1 %. Se corrigieron las lecturas medidas de OD 450-655 para el número de células dividiendo por la lectura de OD595 en cada pozo. La inhibición de la expresión de ICAM-1 fue calculada a cada concentración del compuesto de prueba por medio de la comparación con control de vehículo. Se determinó el 50% de concentración inhibidora (CI50) a partir de la curva de concentración-respuesta resultante.
Ensayo de macrófagos de esputo El esputo se indujo por inhalación de una solución nebulizada al 3% (p/v) de solución salina hipertónica en voluntarios sanos. Ditiotreitol (0.02% al final) se añadió entonces y se mezcló vigorosamente utilizando un mezclador de vórtice hasta que el esputo se volvió menos viscoso. La pella celular producida mediante centrifugado (a 1500 rpm durante 10 min) se volvió a suspender en 10% de FCS RPMI-1640, y los macrófagos de esputo se separaron por adhesión de placas en una placa de alta unión (CelIBIND®, Corning Limited. Reino Unido) durante 2 hr. Las células adheridas se lavaron con RPMI-1640, y se estimularon con LPS (1 ug/ml). Después de 4 horas de incubación, el sobrenadante se recolectó para la medición de la producción de IL-8 utilizando el equipo de desarrollo Duoset ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MN). Los compuestos se agregaron 2 horas antes de la estimulación con LPS. 1L-8 inducida por rinovirus e ICAM- Se obtuvo RV16 de rinovirus humano (HRV, por sus siglas en inglés) a partir de American Type Culture Collection (Manassas, VA) Los materiales virales fueron generados mediante la infección de células HeLa con HRV hasta que el 80% de las células fueron citopáticas.
Las células BEAS2B fueron infectadas con 5 MOI (multiplicidad de infección de 5) de HRV y se incubaron durante 2 horas a 33°C con agitación suave para absorción. Las células se lavaron entonces con PBS, se agregó medio fresco y las células fueron incubadas durante 72 horas más. El sobrenadante se recolectó para ensayo de las concentraciones de IL-8 utilizando el equipo de desarrollo Duoset ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MN).
El nivel de la superficie celular que expresa ICAM-1 se determinó por ELISA basado en células. Después de la apropiada incubación, se fijaron las células con formaldehído al 4% en PBS. Después de templar la peroxidasa endógena mediante la adición de azida de sodio al 0.1 % y peróxido de hidrógeno al 1 %, los pozos fueron lavados con regulador de pH de lavado (Tween al 0.05% en PBS: PBS-Tween). Tras el bloqueo del pozo con 5% de leche en PBS-Tween durante 1 hora, las células fueron incubadas con anticuerpos ICAM-1 anti-humano en 5% de BSA PBS-Tween (1 :500) durante la noche. Se lavaron los pozos con PBS-Tween y se incubaron con el anticuerpo secundario (IgG anti-conejo conjugado con HRP, Dako, Ltd.). Se detectó la señal de ICAM-1 mediante la adición de substrato y la lectura a 450 nm de longitud de onda de referencia de 655 nm usando un espectrofotómetro. Se lavaron luego los pozos con PBS-Tween y se determinó el número total de células en cada pozo mediante la lectura de la absorbancia a 595 nm después de la tinción con Crystal Violet y la elución con solución de SDS al 1 %. Se corrigieron las lecturas medidas de OD 450-655 pa a el número de células dividiendo por la lectura de OD595 en cada pozo. Los compuestos se agregaron 2 horas antes de la infección por HRV y 2 horas después de la infección cuando se lavó el HRV no infectado.
Ensayo de rinovirus-titulación Las células MRC5 (fibroblasto de pulmón humano, ATCC) fueron infectadas con 1 MOI (multiplicidad de infección de 1.0) de HRV y se incubaron durante 1 hora a 33°C con agitación suave para absorción. Las células se lavaron entonces con PBS, se agregó medio fresco y las células fueron incubadas durante 96 horas más. Se recolectó el sobrenadante y se prepararon diluciones en serie de 10 del sobrenadante que contiene el virus. Todas las titulaciones se realizaron mediante la infección de las monocapas de la célula Hela confluente con sobrenadante diluido en serie (10 1 a 10"5) y la evaluación del efecto citopatético por el ensayo MTT 4 días después de la infección. La cantidad de virus necesaria para infectar el 50% de las células Hela se calculó en cada tratamiento como TCID50 U/mL. Los compuestos se agregaron 24 y 2 horas antes de la infección por HRV y 1 hora después de la infección cuando se lavó el HRV no infectado.
Acumulación de neutrófilos inducida por LPS en ratones Ratones no sometidos a ayuno fueron dosificados por vía intratraqueal con vehículo o la sustancia de prueba en los tiempos indicados (dentro de la escala de 2-12 hr) antes de iniciar el tratamiento con LPS. En T = 0, se colocaron ratones en una cámara de exposición y fueron expuestos a LPS. Ocho horas después de la estimulación con LPS, los animales fueron anestesiados ligeramente, se colocó una cánula en la tráquea y se les extrajo BALF por infusión y extracción de 1 mi de PBS en los pulmones vía un catéter traqueal. Se midieron conteos de células blancas totales y diferenciales en las muestras de BALF utilizando un hemocitómetro de Neubaur. Se prepararon frotis de citospina de las muestras de BALF por centrifugado a 20O rpm durante 5 mins. a temperatura ambiente y se tiñeron usando un sistema de tinción de DiffQuik (Dade Behring). Las células fueron contadas usando microscopía de inmersión en aceite. Se encontró que el tratamiento de ratones con el compuesto (1 ) inhibe la acumulación de neutrófilos en BALF cuando se trataron 2, 8 o 12 hr antes del desafío con LPS (Cuadros 3 y 4) CUADRO 3 Efectos del tratamiento con el Compuesto ( 1) Números de neutrófilos en el BAL (x 105/ml) Tratamiento mg/ml Compuesto (1 ) 2 horas antes de la 12 horas antes de dosis la dosis Vehículo 20.2 ± 3.7 - 0.02 15.1 ± 2.1 20.1 ± 2.9 0.1 10.4 ± 1.6 16.7 ± 2.4 0.2 4.6 ± 1.2 14.3 ± 2.0 Los resultados se presentan como la media ± SEM, n = 8 CUADRO 4 Efectos del tratamiento con el Compuesto ( 1) Números de neutrófilos en el BAL (x Tratamiento 105/ml) 8 horas antes de la dosis Vehículo 16.38 ± 2.53 Compuesto (1) 0.2 mg/ml 9.65 ± 1.50 Los resultados se presentan como la media ± SEM, n = 8 Acumulación de eosinófilos inducida por alérgenos en conejillos de Indias Se inmunizaron conejillos de Indias Dunkin Hartley con ovoalbúmina. Seis dosis de vehículo o el ejemplo 8 (1.5 mg/ml)fueron administrados por aerosol cada 12 horas habiéndose administrado la última dosis dos horas antes del inicio del desafío alergénico (grado V, OVA, 10 pg/ml de solución en aerosol usando un nebulizador ultrasónico De Vibliss 2000, durante un periodo de 30 minutos). Dos grupos de animales recibieron 6 dosis del ejemplo 8, mientras que otros dos grupos recibieron 6 dosis de vehículo. 8 o 24 horas después del desafio con OVA (ver detalles del grupo anterior), se colocó una cánula en la tráquea y se extrajo BALF. El procedimiento para esto implicaba aspirar 5 mi de PBS a los pulmones a través de un catéter traqueal. Se midieron los conteos totales y diferenciales de células blancas en las muestras de fluido BAL utilizando un hemocitómetro de Neubaur. Se prepararon frotis de citospina de las muestras de fluido BAL por centrifugado de 200 rpm durante 5 min a temperatura ambiente y se tiñeron usando un sistema de tinción de DiffQuik (Dade Behring). Las células fueron contadas en ciego usando microscopía de inmersión en aceite.
Se encontró que el tratamiento de los conejillos de indias con el Compuesto (1) inhibe la acumulación de eosinófilos en BALF cuando se investigan 8 y 24 horas después del desafío con ovoalbúmina (Cuadro 5) CUADRO 5 Inhibición de eosinófilos en BALF después del desafío alergénico Números de neutrófilos en el BAL (x 105/ml) Tratamiento 2 horas antes de la .. . . . . . . 12 horas antes de la dosis dosis Compuesto 12.4 ± 1.7 21.6 ± 3.9 (1) Los resultados se presentan como la media ± SEM, n = 6 Modelo de humo de cigarrillo Ratones A J (machos, 5 semanas de edad) fueron expuestos a humo de cigarrillo (4% de humo de cigarrillo, diluido con aire comprimido) durante 30 min/día durante 11 días utilizando el Sistema de Experimento con la Inhalación de Humo de Tabaco para animales pequeños (Modelo SIS-CS; Sibata Scientific Technoloy, Tokio, Japón). Se les proporcionaron sustancias por vía intra nasal (35 µ? de una solución en 50% DMSO/PBS) y terapéuticamente dos veces al día durante 3 días después de la exposición final al humo de cigarrillo. Doce horas después de la última dosificación los animales fueron anestesiados, se les colocó una cánula en la traquea y se recolectó el fluido de lavado bronquioalveolar (BALF). Se determinaron los números de macrófagos y neutrófilos alveolares por el análisis de FACS (EPICS® ALTRA II, Beckman Coulter, Inc., Fullerton, CA, USA) utilizando el anticuerpo MOMA2 antirratón (macrófago) o el anticuerpo 7/4 antirratón (neutrófilo).
Los resultados del tratamiento con el compuesto (1) se muestran en la figura 1 (neutrófilos) y figura 2 (macrófagos alveolares activados). Los datos para los números de célula se muestran como la media ± SEM. El modelo de humo de cigarrillo que se utilizó para este estudio se reporta como un sistema refractario corticoesteroide, (Medicherla S. et al., (2008); J. Pharmacol. Exp. Ther. 324(3):921-9) y se confirmó que el propionato de fluticasona no inhibía la acumulación ni de neutrófilo ni de macrófagos en las vías respiratorias a 50 pg/mL (35 µ?, bid, en), la misma dosis que produjo >80% de inhibición de la acumulación de neutrófilo inducida por LPS. Sin embargo, se encontró que el tratamiento con el compuesto (1 ) dio como resultado una reducción, dependiente de la dosis, marcada en el número de neutrófilos y macrófagos activados.
Desafío con ovalbúmina/modelo de infección con parainfluenza Conejillos de indias Dunkin-Hartley machos (300-350 g, n = 6/grupo) fueron sensibilizados con 100 pg de ovalbúmina (OVA) + 100 mg Al2(OH)3 en 1 mi de solución salina normal (i.p.) en los días 2 y 6. Se instilaron por vía nasal el virus de parainfluenza (PIV-3; 106 unidades infecciosas) o medio sin virus en los días 1 1 y 12. Los animales fueron tratados con (i) propionato de fluticasona nebulizado en dosis de 1.5 mg por día (los estudios iniciales establecieron que esta dosis de propionato de fluticasona inhibe los cambios de función pulmonar mediada por ovoalbúmina en animales sensibilizados tratados con medio de PIV3) o (ii) Compuesto 1 (0.15 mg por día) o (Ni) una combinación de propionato de fluticasona y el compuesto 1 en las dosis indicadas anteriormente o (iv) el vehículo (DMSO:etanol:solución salina, 30:30:40%) a partir de los días 10-15. Todos los animales fueron desafiados durante 1 hr. con OVA nebulizada (10 pg/ml) el día 15 y se hicieron mediciones repetidas de la conductancia específica de las vías respiratorias (sGaw) durante un período de 24 hrs. utilizando pletismografía de todo el cuerpo. Se grafican las mediciones de sGaw después del desafío con OVA como % de cambio a partir de la línea de base. La figura 3 muestra el efecto del compuesto 1 como monoterapia, mientras que la figura 4 muestra sus efectos cuando se administra en combinación con propionato de fluticasona. Se encontró que el tratamiento con el compuesto (1) sólo, no produce efecto alguno sobre la respuesta inicial bronquioconstrictora (1° hora) para desafiar la ovoalbúmina, pero inhibió marcadamente la posterior respuesta (2-12 horas después del tratamiento). Cuando se co-administra con propionato de fluticasona, se inhibieron las respuestas bronquioconstrictoras tanto iniciales como posteriores provocadas por el desafío de la ovoalbúmina.
Sumario Los estudios biológicos in vitro demuestran que el compuesto de la fórmula (I) es un potente inhibidor de los subtipos de MAP cinasa p38 alfa y gamma con buena eficiencia en un modelo in vitro de la actividad antiinflamatoria (liberación de TNFa inducida por LPS a partir de células U937 diferenciadas y células THP-1 ). Además, el compuesto de fórmula (1 ) muestra propiedades sorprendentes de ser capaz de inhibir la inflamación inducida por rinovirus y la replicación de rinovirus.
En la especificación y las siguientes reivindicaciones, a menos que el contexto indique otra cosa, la palabra "comprende" y variaciones como "que comprende" o "comprendiendo" deberán considerarse como implicando la inclusión de un entero establecido, paso, grupo de enteros o grupo de pasos, pero no la exclusión de cualquier otro entero, paso, grupo de enteros o grupo de pasos.
Todas las patentes y solicitudes de patente aquí mencionadas están incorporadas como referencia en su totalidad.
La solicitud de la cual forman parte esta descripción y reivindicaciones se puede usar como una base para prioridad con respecto a cualquier solicitud posterior. Las reivindicaciones de dicha solicitud posterior se pueden referir a cualquier característica o combinación de características descritas en la presente. Pueden tener la forma de un producto, composición, procedimiento, o las reivindicaciones de uso y pueden incluir, como ejemplo y sin limitación, las reivindicaciones.

Claims (10)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES
1 .- Un compuesto de fórmula (1 ) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, incluyendo todos los estereoisómeros y tautómeros de los mismos.
2 - Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 , en combinación con uno o más diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables.
3.- El compuesto de fórmula (1) de conformidad con la reivindicación 1 , para usarse como un medicamento.
4.- El compuesto de fórmula (1 ) de conformidad con la reivindicación 1 o una composición de conformidad con la reivindicación 2, para usarse en el tratamiento o la prevención de las exacerbaciones en pacientes con enfermedad respiratoria crónica, tal como la EPOC (incluyendo bronquitis crónica y enfisema), asma, asma pediátrico, fibrosis quística, sarcoidosis, fibrosis pulmonar idiopática.
5. - El compuesto de fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una composición de conformidad con la reivindicación 2, para usarse en el tratamiento o prevención de una afección seleccionada de: EPOC (incluyendo bronquitis crónica y enfisema), asma, asma infantil, fibrosis quística, sarcoidosis, fibrosis pulmonar idiopática, rinitis alérgica, rinitis, sinusitis, conjuntivitis alérgica, conjuntivitis, dermatitis alérgica, dermatitis por contacto, psoriasis, colitis ulcerosa, inflamación de las articulaciones secundarias a la artritis reumatoide o la osteoartritis, artritis reumatoidea, pancreatitis, caquexia, inhibición del crecimiento y metástasis de tumores, incluyendo carcinoma de pulmón de células no pequeñas, carcinoma de mama, carcinoma gástrico, carcinoma colorrectal y melanoma maligno.
6. - Uso de un compuesto de fórmula (1) de la reivindicación 1 o una composición de la reivindicación 2, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de una afección seleccionada de: EPOC (incluyendo bronquitis crónica y enfisema), asma, asma infantil, fibrosis quistica, sarcoidosis, fibrosis pulmonar idiopática, rinitis alérgica, rinitis, sinusitis, hipertensión pulmonar, conjuntivitis alérgica, conjuntivitis, dermatitis alérgica, dermatitis por contacto, psoriasis, colitis ulcerosa, inflamación de las articulaciones secundarias a la artritis reumatoide o la osteoartritis, artritis reumatoidea, pancreatitis, caquexia, inhibición del crecimiento y metástasis de tumores, incluyendo carcinoma de pulmón de células no pequeñas, carcinoma de mama, carcinoma gástrico, carcinoma colorrectal y melanoma maligno.
7. - El compuesto de fórmula (1) de conformidad con la reivindicación 1 o una composición de conformidad con la reivindicación 2, para usarse en el tratamiento o la prevención de las infecciones virales respiratorias en pacientes con condiciones crónicas como la insuficiencia cardiaca congestiva, la diabetes, el cáncer o en pacientes inmunodeprimidos, por ejemplo después del trasplante de órganos.
8. - El compuesto de fórmula (1 ) de conformidad con la reivindicación 1 o una composición de conformidad con la reivindicación 2, en combinación con un agente anti-viral tal como zanamavir u oseltamivir (por ejemplo fosfato de oseltamivir), para usarse en el tratamiento o prevención de infecciones virales respiratorias en pacientes con condiciones crónicas como insuficiencia cardiaca congestiva, diabetes, cáncer o en pacientes inmunodeprimidos, por ejemplo después del trasplante de órganos.
9. - El uso de un compuesto de fórmula (1 ) de la reivindicación 1 o una composición de la reivindicación 2, para preparar un medicamento para tratar o prevenir exacerbaciones de la enfermedad respiratoria crónica, tal como la EPOC (incluyendo bronquitis crónica y enfisema), asma, asma pediátrico, fibrosis quística, sarcoidosis, fibrosis pulmonar idiomática en un paciente.
10.- El uso de un compuesto de fórmula (1) de la reivindicación 1 o una composición de la reivindicación 2, para preparar un medicamento para tratar o prevenir infecciones virales respiratorias en pacientes con condiciones crónicas tal como insuficiencia cardiaca congestiva, diabetes, cáncer o en pacientes inmunodeprimidos, por ejemplo, después del trasplante de órganos. 1 1.- El uso de un compuesto de fórmula (1) de la reivindicación 1 o una composición de la reivindicación 2, en combinación con un agente antiviral tal como zanamavir u oseltamivir (por ejemplo fosfato de oseltamivir), para preparar un medicamento para tratar o prevenir infecciones virales respiratorias en pacientes con condiciones crónicas como insuficiencia cardiaca congestiva, diabetes, cáncer o en pacientes inmunodeprimidos, por ejemplo después del trasplante de órganos.
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Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2709257C (en) 2007-12-19 2016-12-13 Cancer Research Technology Limited Pyrido[2,3-b]pyrazine-8-substituted compounds and their use
CN102256964A (zh) 2008-10-02 2011-11-23 瑞斯比维特有限公司 p38MAP激酶抑制剂
CA2746354A1 (en) * 2008-12-11 2010-06-17 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
GB0905955D0 (en) 2009-04-06 2009-05-20 Respivert Ltd Novel compounds
GB0921730D0 (en) * 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Method of treatment
US8855064B2 (en) 2010-01-12 2014-10-07 Qualcomm Incorporated Bundled frequency division multiplexing structure in wireless communications
NZ601085A (en) 2010-02-01 2015-04-24 Cancer Rec Tech Ltd 1-(5-tert-butyl-2-phenyl-2h-pyrazol-3-yl)-3-[2-fluoro-4-(1-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1h-imidazo[4,5-b]pyridin-7-yloxy)-phenyl]-urea and related compounds and their use in therapy
GB201005589D0 (en) * 2010-04-01 2010-05-19 Respivert Ltd Novel compounds
JP5787977B2 (ja) 2010-04-08 2015-09-30 レスピバート・リミテツド Ｐ３８ｍａｐキナーゼ阻害剤
US9260410B2 (en) 2010-04-08 2016-02-16 Respivert Ltd. P38 MAP kinase inhibitors
WO2011158044A2 (en) 2010-06-17 2011-12-22 Respivert Limited Respiratory formulations and compounds for use therein
GB201010193D0 (en) * 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Medicinal use
GB201010196D0 (en) * 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Methods
EP2578582A1 (en) 2011-10-03 2013-04-10 Respivert Limited 1-Pyrazolyl-3-(4-((2-anilinopyrimidin-4-yl)oxy)napththalen-1-yl)ureas as p38 MAP kinase inhibitors
EP2763984B1 (en) * 2011-10-03 2016-04-20 Respivert Limited 1-pyrazolyl-3-(4-((2-anilinopyrimidin-4-yl)oxy)napththalen-1-yl)ureas as p38 map kinase inhibitors
GB201214750D0 (en) 2012-08-17 2012-10-03 Respivert Ltd Compounds
GB201215357D0 (en) 2012-08-29 2012-10-10 Respivert Ltd Compounds
US20150210722A1 (en) 2012-08-29 2015-07-30 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP2890701B1 (en) 2012-08-29 2017-03-29 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014033447A2 (en) 2012-08-29 2014-03-06 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP2925742B1 (en) 2012-11-16 2016-10-26 Respivert Limited Kinase inhibitors
US20160016934A1 (en) 2013-03-14 2016-01-21 Respivert Limited Kinase inhibitors
EA027782B1 (ru) 2013-04-02 2017-08-31 Респайверт Лимитед Ингибитор киназ
WO2014162121A1 (en) 2013-04-02 2014-10-09 Topivert Pharma Limited Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles
GB201320732D0 (en) 2013-11-25 2014-01-08 Cancer Rec Tech Ltd Methods of chemical synthesis
GB201320729D0 (en) 2013-11-25 2014-01-08 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds and their use
CN106029651A (zh) 2013-12-20 2016-10-12 瑞斯比维特有限公司 用作激酶抑制剂的脲衍生物
CN106573914B (zh) 2014-02-14 2021-05-28 瑞斯比维特有限公司 作为激酶抑制剂的吡唑基-脲
MA40774A (fr) 2014-10-01 2017-08-08 Respivert Ltd Dérivés de diaryle-urée en tant qu'inhibiteurs de kinase p38
AU2017245888B2 (en) 2016-04-06 2021-05-13 Oxular Acquisitions Limited Kinase inhibitors
CA3142097A1 (en) 2018-05-30 2019-12-05 Washington University Mitogen-activated protein kinase inhibitors, methods of making, and methods of use thereof
CN114144410A (zh) * 2019-07-19 2022-03-04 阿纳格纳斯生物技术股份有限公司 多芳基脲衍生物及其在治疗肌肉疾病中的用途
EP4029501A1 (en) 2021-01-19 2022-07-20 Anagenesis Biotechnologies Combination of polyaromatic urea derivatives and glucocorticoid or hdac inhibitor for the treatment of diseases or conditions associated with muscle cells and/or satellite cells

Family Cites Families (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU1367599A (en) 1997-11-03 1999-05-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as anti-inflammatory agents
JP4403482B2 (ja) 1997-12-22 2010-01-27 バイエル コーポレイション 置換複素環尿素合成のための中間体およびその製造方法
US7329670B1 (en) 1997-12-22 2008-02-12 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of RAF kinase using aryl and heteroaryl substituted heterocyclic ureas
KR100622138B1 (ko) 1997-12-22 2006-09-13 바이엘 코포레이션 아릴 및 헤테로아릴 치환 헤테로고리형 우레아를 사용한라프 키나제의 저해
US20080300281A1 (en) 1997-12-22 2008-12-04 Jacques Dumas Inhibition of p38 Kinase Activity Using Aryl and Heteroaryl Substituted Heterocyclic Ureas
KR100571588B1 (ko) 1997-12-22 2006-04-17 바이엘 코포레이션 치환 헤테로시클릭 우레아를 이용한 ｒａｆ 키나제의 억제
EP1043995B9 (en) 1997-12-22 2008-10-08 Bayer Pharmaceuticals Corp. INHIBITION OF p38 KINASE ACTIVITY USING ARYL AND HETEROARYL SUBSTITUTED HETEROCYCLIC UREAS
EP1064289A1 (en) 1998-03-18 2001-01-03 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic signal transduction inhibitors, compositions containing them
UA73492C2 (en) 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
DE60014603T2 (de) 1999-03-12 2006-02-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Heterocyklischer harnstoff und verwandte verbindungen als entzündungshemmende mittel
ATE312823T1 (de) 1999-07-09 2005-12-15 Boehringer Ingelheim Pharma Verfahren zur herstellung heteroarylsubstituierter ureaverbindungen
JP2003516314A (ja) 1999-09-17 2003-05-13 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ライノウイルス感染症におけるｃｓａｉｄの使用
US6492529B1 (en) 2000-01-18 2002-12-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Bis pyrazole-1H-pyrazole intermediates and their synthesis
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
WO2002066442A1 (en) 2001-02-15 2002-08-29 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Process for synthesis of heteroaryl-substituted urea compounds useful as antiinflammatory agents
EP1392661A1 (en) 2001-05-16 2004-03-03 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Diarylurea derivatives useful as anti-inflammatory agents
EP1408950B1 (en) 2001-07-11 2007-04-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Methods of treating cytokine mediated diseases
WO2003068223A1 (en) 2002-02-11 2003-08-21 Bayer Corporation Aryl ureas with raf kinase and angiogenesis inhibiting activity
DK1478358T3 (da) 2002-02-11 2013-10-07 Bayer Healthcare Llc Sorafenibtosylat til behandling af sygdomme kendetegnet ved unormal angiogenese
ATE386030T1 (de) 2002-02-25 2008-03-15 Boehringer Ingelheim Pharma 1,4-disubstituierte benzokondensierte cycloalkyl- harnstoffverbindungen zur behandlung von zytokinvermittelten erkrankungen
NZ536278A (en) 2002-04-05 2007-05-31 Boehringer Ingelheim Pharma p38 kinase inhibitors for treating mucus hypersecretion associated with cystic fibrosis
US20060063782A1 (en) 2002-07-03 2006-03-23 Murray Christopher W 3-Hetero arylmethoxy ! pyridines and their analogues as p38 map kinase inhibitors
US20040110755A1 (en) 2002-08-13 2004-06-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy with p38 MAP kinase inhibitors and their pharmaceutical compositions
JP2006503025A (ja) 2002-09-05 2006-01-26 サイオス インク． ｐ３８ＭＡＰキナーゼの抑制による疼痛治療
US7144911B2 (en) 2002-12-31 2006-12-05 Deciphera Pharmaceuticals Llc Anti-inflammatory medicaments
US7202257B2 (en) 2003-12-24 2007-04-10 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Anti-inflammatory medicaments
WO2004078746A2 (en) 2003-02-28 2004-09-16 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2-oxo-1,3,5-perhydrotriazapine derivatives useful in the treatment of hyper-proliferative, angiogenesis, and inflammatrory disorders
WO2004078116A2 (en) 2003-03-03 2004-09-16 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
GB0308511D0 (en) 2003-04-14 2003-05-21 Astex Technology Ltd Pharmaceutical compounds
GB0320244D0 (en) 2003-05-06 2003-10-01 Aventis Pharma Inc Pyrazoles as inhibitors of tumour necrosis factor
WO2004101529A1 (ja) 2003-05-19 2004-11-25 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. 含窒素複素環化合物およびその医薬用途
WO2005002673A1 (en) 2003-07-03 2005-01-13 Astex Therapeutics Limited Raf kinase inhibitors
US20050148555A1 (en) * 2003-08-22 2005-07-07 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating COPD and pulmonary hypertension
WO2005048953A2 (en) 2003-11-13 2005-06-02 Ambit Biosciences Corporation Amide derivatives as kinase modulators
WO2006028524A2 (en) 2004-04-29 2006-03-16 Pharmix Corporation Compositions and treatments for inhibiting kinase and/or hmg-coa reductase
EP1751139B1 (en) 2004-04-30 2011-07-27 Bayer HealthCare LLC Substituted pyrazolyl urea derivatives useful in the treatment of cancer
KR20070032648A (ko) 2004-05-12 2007-03-22 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 혈전 상태의 치료에 유용한 ｐ２ｙ１ 수용체의 우레아길항제
PL1761520T3 (pl) 2004-06-23 2008-12-31 Lilly Co Eli Inhibitory kinazy
EP1609789A1 (en) 2004-06-23 2005-12-28 Eli Lilly And Company Ureido-pyrazole derivatives and their use as kinase inhibitors
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
EA012119B1 (ru) 2004-08-12 2009-08-28 Пфайзер Инк. ПРОИЗВОДНЫЕ ТРИАЗОЛОПИРИДИНСУЛЬФАНИЛА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ p38 MAP КИНАЗЫ
GB0423554D0 (en) 2004-10-22 2004-11-24 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds
US7612200B2 (en) 2004-12-07 2009-11-03 Locus Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of protein kinases
WO2006068591A1 (en) 2004-12-20 2006-06-29 Astrazeneca Ab Novel pyrazole derivatives and their use as modulators of nicotinic acetylcholine receptors
EP1835934A4 (en) 2004-12-23 2010-07-28 Deciphera Pharmaceuticals Llc ENZYME MODULATORS AND TREATMENTS
AU2005325676A1 (en) 2004-12-23 2006-08-03 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Anti-inflammatory medicaments
GB0500435D0 (en) * 2005-01-10 2005-02-16 Novartis Ag Organic compounds
US20070110760A1 (en) 2005-01-14 2007-05-17 Monroe John G Methods and compositions targeting viral and cellular ITAM motifs, and use of same in identifying compounds with therapeutic activity
DE102005015253A1 (de) 2005-04-04 2006-10-05 Merck Patent Gmbh Pyrazolderivate
US20090074676A1 (en) 2005-05-23 2009-03-19 Smithkline Beecham Corporation Inhibition of p38 MAPK For Treatment Of Obesity
US8178694B2 (en) 2005-06-20 2012-05-15 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Heterocyclylaminoalkyl substituted benzimidazoles
US7700620B2 (en) 2005-06-27 2010-04-20 Bristol-Myers Squibb Company C-linked cyclic antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
DE102005037499A1 (de) 2005-08-09 2007-02-15 Merck Patent Gmbh Pyrazolderivate
WO2007038425A2 (en) 2005-09-27 2007-04-05 Regents Of The University Of Minnesota Anti-viral compouinds
AR056582A1 (es) 2005-10-28 2007-10-10 Lilly Co Eli COMPUESTOS DE PIRAZOLIL UREA CON ACTIVIDAD INHIBITORIA DE CINASA P38 Y FORMULACIoN FARMACÉUTICA QUE LO COMPRENDE
EP1960394A2 (en) 2005-11-15 2008-08-27 Bayer HealthCare AG Pyrazolyl urea derivatives useful in the treatment of cancer
MX2008006979A (es) 2005-12-01 2009-01-14 Bayer Healthcare Llc Compuestos de urea utiles en el tratamiento contra el cancer.
CA2637172A1 (en) 2006-01-27 2007-08-09 Array Biopharma Inc. Pyridin-2-amine derivatives and their use as glucokinase activators
KR20080081359A (ko) 2006-01-30 2008-09-09 아이알엠 엘엘씨 Ｐｐａｒ 조절제로서의 스피로 이미다졸 유도체
JP2009526039A (ja) 2006-02-10 2009-07-16 ファイザー・プロダクツ・インク ピリジノンピラゾール尿素およびピリミジノンピラゾール尿素誘導体
KR20090047509A (ko) 2006-08-04 2009-05-12 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 융합 헤테로시클릭 유도체 및 이의 용도
BRPI0807928A2 (pt) 2007-02-20 2014-07-08 Melior Pharmaceuticals I Inc Métodos para identificar um ativador de lyn quinase, e para tratar diabetes em um humano, kit, e, composição
EP2131858A4 (en) 2007-03-20 2011-11-23 Cadila Pharmaceuticals Ltd P38 INHIBITORS
AR065858A1 (es) 2007-03-29 2009-07-08 Sanofi Aventis Metodo para preparar el inhibidor de triptasa [ 4-(5-aminoetil-2-fluoro-fenil)-piperidin-1-il]-(4-bromo-3-metil-5-propoxi-tiofen-2-il)-metanona.
WO2008125014A1 (fr) 2007-04-13 2008-10-23 Institute Of Pharmacology And Toxicology Academy Of Military Medical Sciences P.L.A. Composés d'urée, leurs procédés de préparation et leurs utilisations pharmaceutiques
CA2709257C (en) 2007-12-19 2016-12-13 Cancer Research Technology Limited Pyrido[2,3-b]pyrazine-8-substituted compounds and their use
ES2423991T3 (es) 2008-02-04 2013-09-26 Pfizer Limited Forma polimórfica de un derivado de [1,2,4]triazolo[4,3-a]piridina para el tratamiento de enfermedades inflamatorias
MX2010010172A (es) 2008-03-17 2010-11-25 Ambit Biosciences Corp Derivados de quinazolina como moduladores de quinasa raf y metodos de uso de los mismos.
US8604049B2 (en) 2008-08-05 2013-12-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh 4-dimethylamino-phenyl-substituted naphthyridines, and use thereof as medicaments
CN102256964A (zh) 2008-10-02 2011-11-23 瑞斯比维特有限公司 p38MAP激酶抑制剂
GB0818033D0 (en) 2008-10-02 2008-11-05 Respivert Ltd Novel compound
CA2746354A1 (en) 2008-12-11 2010-06-17 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
GB0905955D0 (en) 2009-04-06 2009-05-20 Respivert Ltd Novel compounds
GB0921731D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Theraputic uses
GB0921730D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Method of treatment
GB201005589D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Respivert Ltd Novel compounds
JP5787977B2 (ja) 2010-04-08 2015-09-30 レスピバート・リミテツド Ｐ３８ｍａｐキナーゼ阻害剤
US9260410B2 (en) 2010-04-08 2016-02-16 Respivert Ltd. P38 MAP kinase inhibitors
GB201010196D0 (en) * 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Methods
GB201010193D0 (en) 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Medicinal use
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