MX2011000306A - Sales de compuestos inhibidores de hiv. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a sales de compuestos antivirales, composiciones que contienen dichas sales, y métodos terapéuticos que incluyen la administración de dichas sales, así como a procesos e intermediarios útiles para preparar dichas sales.

Description

SALES DE COMPUESTOS INHIBIDORES DE HIV Campo de la Invención La presente invención se refiere de manera general a sales de compuestos con actividad antiviral y más específicamente con propiedades HIV.

Antecedentes de la Invención El virus de inmunodeficiencia humana (HIV) es un retrovirus que puede conducir al síndrome de inmunodeficiencia adquirida (AIDS), una condición en humanos, en la cual se debilita el sistema inmune, conduciendo a infecciones oportunistas que ponen en riesgo la vida. Los inhibidores de HIV son útiles para tratar una infección HIV en un mamífero (por ejemplo, reducir y limitar el establecimiento y progreso de infección mediante HIV) así como en ensayos de diagnóstico para HIV. La utilidad de los inhibidores de HIV actualmente comercializados, es hasta cierto punto limitada por la toxicidad y otros efectos secundarios. Por lo tanto, existe la necesidad de nuevos agentes terapéuticos HIV.

Una formulación farmacéutica de un agente terapéutico, debe suministrar en forma reproducible y consistente el agente terapéutico a un paciente que necesita del mismo. Esta consistencia de suministro se puede lograr, al menos en parte, mediante la incorporación de una forma estable, soluble, de estado sólido del agente terapéutico en la composición farmacéutica. Además, la síntesis de la forma de estado sólido deseada del agente terapéutico debe ser técnica y económicamente factible, y debe ser adecuada para una producción comercial a gran escala.

Breve Descripción de la Invención El N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, es un inhibidor de transcriptasa inversa que bloquea la réplica de los virus HIV, in vivo, y in vitro, y tiene efectos secundarios limitados indeseables cuando se administra a seres humanos. La estructura de N-[(S){{[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo se muestra en la fórmula P: El N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]ox¡}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo es un sólido amorfo, de bajo punto de fusión que es difícil de aislar, purificar, almacenar durante un período prolongado y formular como una composición farmacéutica. El N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo también es una base débil que tiene la capacidad de formar sales con ácidos. Por consiguiente, en un aspecto, la presente invención proporciona sales estables de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, que son más físicamente estables, y son aisladas y formuladas más fácilmente, que la forma de base libre del compuesto.

Las sales de la presente invención son útiles, por ejemplo, para tratar pacientes humanos infectados con virus de inmunodeficiencia humana (cepas de HIV-1 o HIV-2) que originan AIDS. Las sales de la presente invención también son útiles, por ejemplo, para preparar un medicamento para tratar HIV o un trastorno asociado con HIV. Las sales de la presente invención también son útiles, por ejemplo, para inhibir la réplica de los virus HIV in vitro, y se pueden utilizar, por consiguiente, en ensayos biológicos como un compuesto de control para identificar otros inhibidores de transcriptasa inversa, o para investigar el mecanismo de acción de la transcriptasa inversa HIV y su inhibición.

Por lo tanto, en un aspecto, la presente invención proporciona sales de citrato, succinato y malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, y métodos para elaborar las sales anteriores. En algunas modalidades, las sales de la presente invención son anhidro, aunque en otras modalidades las sales de la presente invención son al menos parcialmente hidratadas. En algunas modalidades, las sales de la presente invención existen como formas cristalinas.

Por lo tanto, la presente invención comprende sales de citrato, succinato y malonato del compuesto de la fórmula P, así como hidratos de las mismas. Los hidratos de la presente invención pueden estar en un estado hidratado parcial (por ejemplo, hemi-hidrato) o total (por ejemplo, mono-hidrato). La presente invención también comprende las sales en cuestión en estados anhidro y esencialmente anhidro. En forma similar, las sales de la presente invención y los hidratos de las mismas comprenden estados amorfos y cristalinos, así como estados que comprenden características tanto amorfas como cristalinas. Tal como se utiliza en la presente invención, el término "cristalino" significa un material que tiene una estructura molecular de rango largo, ordenada. En contraste, los materiales "amorfos" no poseen un orden de rango largo. Quedará entendido que los materiales cristalinos generalmente son más termodinámicamente estables que las formas amorfas de la misma sustancia. Por lo tanto, con únicamente algunas excepciones notables, se prefiere de manera general utilizar materiales cristalinos en aplicaciones farmacéuticas. Una medida del grado de cristalinidad de los compuestos de la presente invención se puede apreciar por ejemplo en lo afilado de las bandas de absorción DSC y XRPD (picos). Entre más afilado es el pico, mayor es el grado de cristalinidad. De manera inversa, entre más amplio es el pico, menor es el grado de cristalinidad.

Tal como se describe con mayor detalle en el Ejemplo 12 en la presente invención, en modalidades específicas, una sal de citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo está caracterizada por bandas de absorción, obtenidas de un patrón de difracción de polvo de rayos X, en espaciamientos-d espectrales de 4.48, 3.12 y 6.05 angstroms; una sal de succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo está caracterizada por bandas de absorción obtenidas de un patrón de difracción de polvo de rayos X en espaciamiento-d espectrales de 3.57, 4.80 y 4.99 angstroms; y una sal de malonato de N-[(S){[(2R,5R)-5-{6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alan¡nato de etilo está caracterizado por bandas de absorción, obtenidas de un patrón de difracción de polvo de rayos X, en espaciamientos-d espectrales de 4.99, 5.93 y 4.72 angstroms. En otra modalidad específica, la presente invención proporciona una sal de citrato de N-[(S)({[(2R.5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dih¡drofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo que tiene un punto de fusión de 142°C a 150°C.

El N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo es un profármaco de amidato que pasa por reacción con una descomposición en solventes próticos. El rango de reacción depende del pH y la temperatura. En forma consecuente, la formación de una sal estable entre el profármaco de amidato y el ácido cítrico, ácido succínico y/o ácido malónico, que cada uno contienen porciones nucleofílicas con la capacidad de reaccionar con el profármaco (por ejemplo, reacción con la porción de amidato de profármaco) es un resultado sorprendente e inesperado.

En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que incluyen cada una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de la presente invención y un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención también pueden incluir un agente terapéutico adicional, tal como un agente antiviral, antibacterial, antifúngico o anti-cáncer. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden estar en la forma de formas de dosificación unitaria, tales como tabletas o cápsulas. Las formas de dosificación unitarias normalmente proporcionan una dosis diaria efectiva de una sal de la presente invención a un ser humano que necesita de las mismas. Las dosis diarias efectivas de las sales de la presente invención normalmente fluctúan de 1 mg a 100 mg, tal como de 1 O mg a 30 mg.

En otro aspecto, la presenté invención proporciona métodos para elaborar las sales de citrato, succinato y malonato de la presente invención. Por lo tanto, por ejemplo, la presente invención proporciona un proceso para preparar una sal de citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-M)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, en donde el proceso incluye el paso de contactar aproximadamente un equivalente de la base libre de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo en un solvente adecuado (por ejemplo, acetonitrilo) con desde aproximadamente un equivalente hasta aproximadamente 1.2 equivalentes de ácido cítrico a una temperatura dentro del rango de aproximadamente 55°C hasta aproximadamente 75°C.

La presente invención también proporciona un proceso para preparar una sal de succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il)oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, en donde el proceso incluye el paso de contactar aproximadamente un equivalente de una base libre de N-[(S){{[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo en un solvente adecuado (por ejemplo, 2-butanona) con de aproximadamente un equivalente hasta aproximadamente 1.2 equivalentes de ácido succínico a una temperatura dentro del rango de aproximadamente 60°C hasta aproximadamente 70°C para formar la sal de succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)r4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo. Además, la presente invención proporciona un proceso para preparar una sal de malonato de N-[(S){[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, en donde el proceso incluye el paso de contactar aproximadamente un equivalente de base libre de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo en un solvente adecuado (por ejemplo, 2-butanona) con desde aproximadamente un equivalente hasta aproximadamente 1.2 equivalentes de ácido malónico a una temperatura dentro del rango de aproximadamente 50°C hasta aproximadamente, 70°C para formar la sal de malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona métodos para tratar o evitar en forma profiláctica AFDS, en donde los métodos incluyen el paso de administrar a un ser humano que padece de AIDS una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de la presente invención, o un hidrato del mismo.

Breve Descripción de las Figuras La figura 1 muestra un trazo de calorimetría de exploración diferencial (DSC) característico para la sal del malonato de N-[(S){[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]ox¡}metil)fenox¡fosfinoil]-L-alaninato de etilo.

La figura 2, muestra un trazo DSC característico para la sal de succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)-fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

La figura 3, muestra un trazo DSC característico para la sal de citrato de N-[(S)([[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

La figura 4, muestra un patrón de difracción de polvo de rayos X (XRPD) característico para la sal de malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

La figura 5, muestra un patrón XRPD característico para la sal de succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-am¡no-9H-purin-9-M)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

La figura 6, muestra un patrón XRPD característico para la sal de citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

Descripción Detallada de la Invención Cuando en la presente invención se utilizan nombres comerciales, los solicitantes pretenden incluir de manera independiente el producto con su nombre comercial, y el ingrediente(s) farmacéutico activo del producto del nombre comercial.

Sales de N-í(SUf r(2R.5R))-5-(6-am¡nlo-9H-purin-9-in-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-illoxi}metillfenoxifosfinoill-L-alaninato de etilo En un aspecto, la presente invención proporciona sales de citrato, succinato y malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il}-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

La sal de citrato se muestra en la fórmula I: La sal de succinato se muestra en la fórmula II: II La sal de malonato se muestra en la fórmula ni , Se describe en el Ejemplo 1 en la presente invención, un método para sintetizar N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo. Los métodos para elaborar las sales de malonato, succinato y citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-ámino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato se describen en los Ejemplos 3, 4 y 5, respectivamente. Algunas propiedades físicas de las sales anteriores se describen en el Ejemplo 6 de la presente invención, y demuestran, por ejemplo, que cada una de estas sales es físicamente estable cuando se almacena a una temperatura de 40°C y una humedad relativa de 75%.

Las sales de citrato, succinato y malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-¡l)-4-fluoro-2,5-dlhidrofuran-2-ll]oxi}metil)fenoxifosflnoil]-L-alaninato de etilo son útiles, por ejemplo, para inhibir la réplica de HIV in vitro y in vivo. A este respecto, tal como se explica con mayor detalle en el Ejemplo 8 de la presente invención, el N-[(S){[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo es un profármaco que es metabolizado en el cuerpo humano para producir un compuesto de origen, el cual a su vez, es fosforilado dentro del cuerpo para producir un metabolito activo que inhibe la réplica de HIV. El Ejemplo 8 de la presente invención muestra que el N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo origina una mayor acumulación del metabolito activo en los glóbulos blancos, los cuales son las células que albergan el virus de HIV, que el compuesto de origen. Además, el Ejemplo 9 de la presente invención presenta datos in vitro que muestran que N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil}fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo es un fármaco anti-HIV más potente que el compuesto de origen tal como se evalúa en un ensayo in vitro. Además, el Ejemplo 10 de la presente invención proporciona datos que muestran que una tableta que contiene la sal de citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2- il]oxi}metil)fenoxifosf¡noil]-L-alan¡nato de etilo proporciona este fármaco al torrente sanguíneo de perros Beagle con farmacocinética similares a la preparación líquida del fármaco administrado en forma oral. Por lo tanto, la sal de citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo es una composición de materia física y químicamente estable que puede administrarse en forma oral a un sujeto vivo, para proporcionar una cantidad terapéuticamente efectiva de N-[(S){[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, el cual es un agente anti-HIV más efectivo que el compuesto de origen.

Composiciones Farmacéuticas En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas, también referidas como formulaciones farmacéuticas que incluyen una cantidad terapéuticamente efectiva de una o más sales de la presente invención, y un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Aunque es posible que las sales de la presente invención se administren solas, normalmente es preferible administrarla como composiciones farmacéuticas. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención se formulan con transportadores y excipientes convencionales, los cuales se seleccionan de acuerdo con la práctica ordinaria. El transportador(s) debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y fisiológicamente inocuo para el receptor del mismo. Las tabletas contienen componentes tales como excipientes, deslizantes, rellenadores, enlazadores y similares. Las formulaciones acuosas se preparan en forma estéril, y cuando se proyecta para suministro a través de una administración diferente a la administración oral, generalmente son isotónicos. Todas las formulaciones contienen opcionalmente excipientes tales como los establecidos en el Manual de Excipientes Farmacéuticos (R.C. Rowe y asociados, Pharmaceutical Press, 5o edición, 2006). Los excipientes incluyen ácido ascórbico y otros antioxidantes, agentes de quelación tales como EDTA, carbohidratos tales como dextrina, hidroxialquilcelulosa, hidroxialquilmetilcelulosa, ácido esteárico y similares. El pH de las formulaciones fluctúa de aproximadamente 3 a aproximadamente 11, pero normalmente es de aproximadamente 7 a 10.

Las formulaciones pueden presentarse en forma conveniente de una forma de dosificación unitaria (por ejemplo, tabletas) y pueden prepararse a través de cualesquiera de los métodos conocidos en la técnica farmacéutica. Las técnicas y formulaciones generalmente se encuentran en la Publicación de Ciencias Farmacéuticas de Reminaton (Mack Publishing Co., Easton, PA). Dichos métodos incluyen el paso de asociar el ingrediente activo con el transportador que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones de preparan asociando de manera uniforme y profunda el ingrediente activo con transportadores líquidos o transportadores sólidos finamente divididos o ambos, y posteriormente, si es necesario, dando forma al producto.

Las formulaciones farmacéuticas que contienen el ingrediente activo pueden estar en cualquier forma adecuada para el método de administración proyectado. Cuando se utilizan por ejemplo para uso oral, se pueden preparar tabletas, grageas, pastillas, suspensiones acuosas o aceitosas, polvos o gránulos dispersibles, emulsiones, cápsulas duras o blandas, jarabes o elíxires. Las composiciones proyectadas para uso oral pueden prepararse de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y dichas composiciones pueden contener uno o más agentes incluyendo agentes edulcorantes, agentes de saborización, agentes de coloración y agentes de conservación, con el objeto de proporcionar una preparación de buen sabor. Las tabletas que contienen ingrediente activo en mezclas con excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos que son adecuados para fabricación de tabletas, también son aceptables. Estos excipientes .pueden ser por ejemplo, diluyentes inertes tales como carbonato de calcio o sodio, lactosa, monohidrato de lactosa, sodio de croscarmelosa, povidona, fosfato de calcio o sodio; agentes de granulación y desintegración tales como, almidón de maíz, o ácido algínico; agentes de enlace tales como celulosa, celulosa microcristalina, almidón, gelatina o acacia; y agentes de lubricación tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Las tabletas pueden no recubrirse o pueden recubrirse a través de técnicas conocidas incluyendo microencapsulación para retardar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar de esta forma una acción sostenida durante un período más largo. Por ejemplo, también se puede emplear un material de retraso tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con una cera.

También se pueden presentar formulaciones para uso oral como cápsulas de gelatina dura en donde el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, fosfato de calcio o caolina, o como cápsulas de gelatina blanda en donde el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio aceitoso tal como aceite de coco, parafina líquida o aceite de olivo.

Las suspensiones acuosas de sales de la presente invención contienen materiales activos en mezcla en adiciones con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes pueden incluir un agente de suspensión tal como carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma de acacia, y agentes de dispersión o humectación tales como fosfatida que ocurre naturalmente, (por ejemplo, lecitina), un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso (por ejemplo, estearato de polioxietileno), un producto de condensación de óxido de etileno, un alcohol alifático de cadena larga (por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol), un producto de condensación de óxido de etileno con un éter parcial derivado de un ácido graso y un anhídrido de hexitol (por ejemplo, monooleato de sorbitano de polioxietileno). La suspensión acuosa también puede contener uno o más conservadores tales como benzoato de etilo o n-propilo de p-hidroxi, uno o más agentes de coloración, uno o más agentes de saborización y uno o más agentes edulcorantes, tal como sacarosa o sacarina.

Las suspensiones de aceite se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal tal como aceite de araquis, aceite de oliva, aceite de ajonjolí o aceite de coco, o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones orales pueden contener ün agente de engrosamiento tal como cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Los agentes edulcorantes tales como los establecidos anteriormente, y agentes de saborización pueden agregarse para proporcionar una preparación oral de sabor agradable.

Estas composiciones pueden ser conservadas mediante la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico.

Los polvos y granulos dispersibles de la presente invención adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua, proporcionan el ingrediente activo en mezclas con un agente de humectación o dispersión, agente de suspensión y uno o más conservadores. Los agentes de dispersión o humectación adecuados y agentes de suspensión se ejemplifican con los descritos anteriormente. Los excipientes adicionales por ejemplo, agentes de edulcoración, saborización y coloración también pueden estar presentes.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención también pueden estar en la forma de emulsiones de aceite en agua. La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de araquis, un aceite mineral, tal como parafina líquida, o una mezcla de estos. Los agentes de emulsificación adecuados incluyen gomas que ocurren naturalmente tales como goma de acacia, y goma de tragacanto, fosfatidas que ocurren naturalmente tales como lecitina de frijol soya, ésteres, ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, tales como monooleato de sorbitano, y productos de condensación de estos ésteres parciales con óxido de etileno, tal como monooleato de sorbitano de polioxietileno. La emulsión también puede contener agentes edulcorantes y de saborización. Se pueden formular jarabes y elíxires con agentes edulcorantes tales como glicerol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones pueden contener también un emoliente, un conservador, un saborizante o un agente de coloración.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden estar en la forma de una preparación inyectable estéril, tal como una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión se puede formular de acuerdo con la técnica conocida utilizando los agentes de dispersión o humectación adecuados y agentes de suspensión que han sido mencionados anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, tal como una solución en 1 ,3-butano-diol o prepararse como un polvo liofilizado. Entre los vehículos y solventes aceptables que se pueden emplear se encuentran agua, solución de Ringer y una solución de cloruro de sodio isotónica. Además, los aceites fijos estériles pueden ser mezclados convencionalmente como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito, se puede emplear cualquier aceite fijo blando incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Además, de igual manera se pueden utilizar en la preparación inyectables, ácidos grasos tales como ácido oleico.

La cantidad de ingrediente activo que puede ser combinada con el material transportador para producir una forma de dosificación simple variará dependiendo, por ejemplo, del modo de administración particular. Por ejemplo, una formulación de liberación de tiempo proyectada para administración oral a humanos, puede contener de aproximadamente 3 a 1000 mg del material activo en compuesto con una cantidad adecuada y conveniente de material transportador, que puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 95% de la composición total (peso:peso).

Las formulaciones adecuadas para administración a los ojos incluyen gotas para los ojos en donde el ingrediente activo se disuelve o suspende en un transportador adecuado, especialmente un solvente acuoso para el ingrediente activo.

Las formulaciones adecuadas para administración tópica en la boca incluyen pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base con sabor, tal como sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y acacia; y enjuagues bucales que comprenden el ingrediente activo en un transportador líquido adecuado.

Las formulaciones para administración rectal pueden presentarse como un supositorio con una base adecuada que comprende por ejemplo mantequilla de cocoa y un salicilato.

Las formulaciones adecuadas para administración intrapulmonar o nasal que tienen un tamaño de partícula, por ejemplo entre el rango de 0.1 a 500 mieras (incluyendo tamaños de partículas dentro de un rango de entre 0.1 y 500 mieras en incremento de mieras tales como 0.5, 1, 30 mieras, 35 mieras, etc.), que se administran mediante inhalación rápida a través del pasaje nasal o mediante inhalación a través de la boca para alcanzar los sacos alveolares. Las formulaciones adecuadas incluyen soluciones acuosas o aceitosas del ingrediente activo. Las formulaciones adecuadas para administración en aerosol o polvo seco pueden preparase de acuerdo con métodos convencionales y pueden ser suministrados con otros agentes terapéuticos tales como los compuestos aquí utilizados en el tratamiento o profilaxis de condiciones asociadas con actividad HIV.

Las formulaciones adecuadas para administración vaginal pueden presentarse como óvulo, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones de rocío, que contienen además del ingrediente activo, transportadores tales como los conocidos en la técnica como adecuados.

Las formulaciones adecuadas para administración parenteral incluyen soluciones de inyección estéril acuosa y no acuosa que pueden contener antioxidantes, amortiguadores, bacterioestatos y solutos que hacen a la formulación isotónica con la sangre del receptor proyectada; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes de engrosamiento.

Las formulaciones se presentan en contenedores de dosis unitaria o dosis múltiple, por ejemplo, ampolletas y frascos sellados y se pueden almacenar en una condición seca-por congelación (liofilizada) que requiere únicamente la adición del transportador líquido estéril, por ejemplo agua para inyección, inmediatamente antes de utilizarse. Las soluciones o suspensiones de inyección extemporáneas se preparan a partir de polvos estériles, gránulos, y tabletas del tipo previamente descrito. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son las que contienen una dosis diaria, una sub-dosis diaria unitaria o una fracción de las mismas, del ingrediente activo. Por lo tanto, por ejemplo, una dosis diaria de una sal de la presente invención se puede proporcionar como una sola tableta o en múltiples tabletas (por ejemplo, dos o , tres tabletas).

Deberá quedar entendido que además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente, las formulaciones de la presente invención pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica que tienen cuestiones con respecto al tipo de la formulación, por ejemplo adecuadas para administración oral, pueden incluir agentes de saborización .

Las formulaciones farmacéuticas que también están dentro del alcance de la presente invención proporcionan la liberación controlada del ingrediente activo, para permitir una dosificación menos frecuente para mejorar el perfil farmacocinético o de toxicidad del ingrediente activo. Por consiguiente, la presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden una o más sales de la presente invención formuladas para la liberación sostenida o controlada.

Una dosis efectiva de una sal de la presente invención depende, por ejemplo, de si la sal está siendo utilizada en forma profiláctica (normalmente se requiere una menor dosis en comparación con el uso terapéutico de la misma sal), el método de suministro y la formulación farmacéutica, y será determinada por el especialista utilizando estudios de escala de dosis convencionales. Una dosis efectiva puede esperarse que sea de aproximadamente 0.0001 mg/kg de peso corporal día hasta aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal día. Normalmente, de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal día. Más normalmente, de aproximadamente .01 a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal día. Más normalmente de aproximadamente .05 a aproximadamente 0.5 mg/kg de peso corporal día. Por ejemplo, la dosis diaria para un adulto humano de aproximadamente 70 kg de peso corporal normalmente fluctuará dentro del rango de 1 mg a 1000 mg, preferentemente entre 5 mg y 500 mg, y puede tomar la forma de una dosis o dosis múltiples. A manera de ejemplo, la dosis de una sal de la presente invención en una formulación de dosis unitaria que será administrada una vez al día puede ser de 1 mg a 100 mg, tal como de 30 mg a 60 mg, tal como una dosis diaria de 30 mg o una dosis diaria de 60 mg.

Terapia de Combinación Cada una de las sales de citrato, succinato y malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo se puede emplear en combinación con otros agentes terapéuticos para el tratamiento o profilaxis de AIDS y/o una o más de otras enfermedades presentes en un sujeto humano que padece de AIDS (por ejemplo, infecciones bacterianas y/o fúngicas, otras infecciones virales tales como hepatitis B o hepatitis C, o cánceres tales como sarcoma de Kaposi). El agente(s) terapéutico adicional puede ser formulado junto con una o más sales de la presente invención (por ejemplo, formuladas junto con una tableta).

Los ejemplos de dichos agentes terapéuticos adicionales incluyen agentes que son efectivos para el tratamiento o profilaxis de infecciones virales, de parásitos o bacterianas o condiciones asociadas o para el tratamiento de tumores o condiciones relacionadas, incluyen 3'-azido-3'-desoxitimidina (zidovudina, AZT), 2'-desoxi-3'-tiacitidina (3TC), 2',3'-didesox¡-2',3'-didehidroadenosina (D4A), 2',3'-didesoxi-2\3'-didehidrotimidina (D4T), carbovir (carbocíclico 2',3'-didesoxi-2',3'-didehidroguanosina), 3'-azido-2',3'-didesoxiuridina, 5-fluorotimidina, (E)-5-(2-bromovinil)-2'-desoxiuridina (BVDU), 2-clorodesoxiadenosina, 2-desoxicoformicina, 5-fluorouracilo, 5-fluorouridina, 5-fluoro-2'-desoxiyuridina, 5-trifluorometil-2'- desoxiyuridina, 6-azauridina, ácido 5-fluoroorótico, metotrexato, triacetiluridina, 1-(2'-desoxi-2'-fluoro-1- -arabinosil)-5-yodocitidina (FIAC), tetrahidro-imidazo(4,5, 1 - Jk)-( 1,4)-benzodiazepin-2(1 H)-tiona (TIBO), 2'-nor-ciclicGMP, 6-arabinosida de metoxipurina (ara-M), arabinosida de 6-metoxipurina 2'-0-valerato; arabinosida de citocina (ara-C). 2',3'-didesoxinucleósidos tal como 2,3'-didesoxicitidina (ddC), 2',3'-didesoxiadenosina (ddA) y 2',3'-didesoxiinosina (ddl); nucleósidos acíclico tales como aciclovir, penciclovir, famciclovir, ganciclovir, HPMPC, PMEA, PMEG, PMPA, PMPDAP, FPMPA, HPMPA, HPMPDAP, (2R, 5R)-9-tetrahidro-5-(fosfonometoxi)-2-furaniladenina, (2R,5R)-1-tetrahidro-5-(fosfonometoxi)-2-furaniltimidina; otros antivirales incluyendo ribavirin (arabinosida de adenina), 2-tio-6-azauridina, tubercidin, ácido aurintricarboxílico, 3-deazancoplanocin, neoplanocin, rimantidina, adamantina, y foscarnel (fosfonoformato de trisodio); agentes antibacterianos incluyendo fluoroquinolonas bactericinas (ciprofloxacin, pefloxacin y similares); antibióticos bactericidas de aminoglucósido (estreptomicina, gentamicina, amicacina y similares); inhibidores de ß-lactamasa (cefalosporinas, penicilinas y similares); otros antibacterianos incluyendo tetraciclina, isoniazid, rifampin, cefoperazona , claitromicina y azitromicina, agentes antiparásitos o antifúngicos incluyendo pentamidina (1 ,5-bis(4'-aminofenoxi)pentano), 9-deaza-inosina, sulfametoxazol, sulfadiazina, quinapiramina, quinina, fluconazol, quetoconazol, itraconazol, Amfotericin B, 5-fluorocitosina. clotrimazol, hexadecilfosfocolina y nistatina; inhibidores de excresión renal tales como probenicid; inhibidores de transporte de nucleósido tales como dipiridamol, dilazep y nitrobenciltioinosina, inmunomoduladores tales como FK506, ciclosporin A, timosina a-1; citocinas incluyendo TNF y TGF-ß; ¡nterferonas incluyendo IFN-a, IFN-ß, y IFN-?; interleucinas incluyendo diversas interleucinas, factores de estimulación de colonia de granulocito/macrófago incluyendo GM-CSF, G-CSF, M-CSF, antagonistas de citocina incluyendo anticuerpos anti-TNF, anticuerpos anti-interleucina, receptores de interleucina solubles, inhibidores de cinasa C de proteína y similares.

Los ejemplos de agentes terapéuticos activos adecuados o ingredientes que se pueden combinar con las sales de la presente invención y que tienen actividad contra HIV, incluyen 1) inhibidores de proteasa HIV, por ejemplo, amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, lopinavir + ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, daranavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), AG1859, DG35, L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684, y GW640385X, DG 17, PPL-100, 2) un inhibidor sin nucleósido HIV de transcriptasa inversa por ejemplo, capravirina, emivirina, delaviridina, efavirenz, nevirapina, ( + ) calanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV-150, y TMC-L20, TMC-278 (rilpivirina), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453,061, RDEA806, 3) un inhibidor de nucleosido HIV de transcriptasa inversa, por ejemplo, zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabina, alovudina, MTV-210, racivir (-FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfatida, tixodil de fozivudina, tixodil de fosalvudina tidoxil, apricitibina (AVX754), amdoxovir. KP-1461, abacavir + lamivudina, abacavir +- lamivudina + zidovudina, zidovudina + lamivudina, 4) un inhibidor de nucleótido HIV de transcriptasa inversa, por ejemplo tenofovir, fumarato de disoproxil de tenofovir + emtricitabina, fumarato de disoproxil de + emtricitabina -+ efavirenz, y adefovir, 5) un inhibidor de integrasa HIV, por ejemplo, cúrcuma derivados de curcumina, ácido quicórico, derivados de ácido quicórico, ácido 3,5-dicafeoilquínico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquínico, ácido aurintricarboxílico, derivados de ácido aurintricarboxílico, éster fenetílico de ácido cafeico, derivados de éster fenetílico de ácido cafeico, tirfostina, derivados de tirfostina, quercetina, derivados de quercetina, S-1360, zintevir (AR-177). L-870812, y L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-707035, MK-2048, BA-011, BMS-538158, GSK364735C, 6) un inhibidor gp41, por ejemplo, enfuvirtida, sifuvulida, FB006M, TRI-1144, SPC3, DES6, Locus gp41, CovX, y REP 9, 7) un inhibidor CXCR4, por ejemplo, AMD-070, 8) un inhibidor de entrada, por ejemplo, SP01A, TNX-355, 9) un inhibidor gp120, por ejemplo, BMS-488043 y BlockAide/CR, 10) un inhibidor de oxidasa G6PD y NADH, por ejemplo, inmunitina, 11) un inhibidor CCR5, por ejemplo, aplaviroc, vicriviroc, INCB9471, PRO-140, INCB15050, PF-232798, CCRSmA b004, y maraviroc, 12) un interferón, por ejemplo, rlFN-alfa 2b pegilado, rlFN-alfa 2a pegilado, rlFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rlFN-alfa 2a, IFN alfa de consenso, infergen, rebif, locteron, AVI-005, PEG-infergen, IFN-beta pegilado, interferón alfa oral, ferón, reaferón, alfa intermax, r-IFN-beta, infergen + actinmune, IFN-omega con DUROS, y albuferon, 13) análogos de ribavirin, por ejemplo, copegus, levovirin, VX-497, y viramidina (taribavirin) 14) inhibidores NS5a, por ejemplo, A-831 y A-689, 15) inhibidores de polimerasa NS5b, por ejemplo, NM-283, valopicitabina, R1626, PSI-6130 (Rl 656), HrV-796, BILB 1941. MK-0608, NM-107, R7128. VCH-759, PF-S68554, GSK625433, y XTL-2125, 16) inhibidores de proteasa NS3, por ejemplo, SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprcvir), IT N-I 91 y BILN-2065, 17) inhibidores de alfa-glucosidasa 1, por ejemplo, MX-3253 (celgosivir) y UT-231B, 18) hepatoprotectores, por ejemplo, IDN-6556, ME3738, MitoQ, y LB-84451, 19) inhibidores sin nucleósido de HIV, por ejemplo, derivados de bencimidazol , derivados de benzo-1,2,4-tiadiazina y derivados de fenilalanina, 20) otros fármacos para tratar HIV, por ejemplo, zadaxin, nitazoxanida (alinea), BIVN- 401 (virostat), DEBIO-025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, bavituximab, oglufanide, PYN-17, KPE02O03002, actilon (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, ANA-975 (isatoribina), XTL-6865, ANA 971, NOV-205, tarvacin, EHC-18, y NIM811, 21) aumentadores farmacocinéticos, por ejemplo, BAS-100 y SPI452, 22) inhibidores de ARNase H, por ejemplo, ODN-93 y ODN-112, 23) otros agentes anti-HIV, por ejemplo, VGV-1, PA-457 (bevirimat), ampligen, HRG214, citolin, polimun, VGX-410, KD247, AM2 0026, CYT 99007. A-221 HIV, BAY 50-4798, MDX010 (iplimumab), PBS119, ALG889 y PA-1050040.

Nuevamente a manera de ejemplo, la siguiente lista describe antivirales HIV de ejemplo con sus números de Patentes Norteamericanas correspondientes que se pueden combinar con las sales de la presente invención.

Antivirales HIV de Ejemplo v Números de Patente Ziagen (Sulfato de Abacavir, Publicación de Patente No. 5,034,394) Epzicom (sulfato de Abacavir/lamivudina, Publicación de Patente No. 5.034,394) Hepsera (dipivoxilo de Adefovir, Publicación de Patente No. 4,724,233) Agenerase (Amprenavir- Publicación de Patente No. 5,646,180) Reyataz (Sulfato de Atazanavir, Publicación de Patente No. 5,849,911) Rescriptor (Mesilato de Delavirdina, Publicación de Patente No. 5,563,142) Hivid (Didesoxicitidina; Zalcitabina, Publicación de Patente No. 5,028,595) Videx (Didesoxiihosina; Didanosina, Publicación de Patente No. 4,861 ,759) Sustiva (Efavirenz, Publicación de Patente No. 5,519,021) Emtriva (Emtricitabine. Publicación de Patente No. 6,642,245) Lexiva (Calcio de fosamprenavir, Publicación de Patente US 6,436,989) Virudin, Triapten; Foscavir (Sodio de foscarnet, Publicación de Patente US 6,476,009) Crixivan (Sulfato de indinavir, Publicación de Patente. US 5,413,999) Epivir (Lamivudina. Publicación de Patente US 5 047,407) Combivir (Lamivudina/Zidovudina, Publicación de Patente US 4,724,232) Aluviran (Lopinavir) Kaletra (Lopinavir/ritonavir, Publicación de Patente US 5,541 ,206) Viracept (Mesilato de nelfinavir, Publicación de Patente US 5,484,926) Viramune (Nevirapina, Publicación de Patente US 5,366,972) Norvir (Ritonavir, Publicación de Patente US 5,541.206) Invirase; Fortovase (Mesilato de saquinavir, Publicación de Patente US 5,196,438) Zerit (Estavudina, Publicación de Patente US 4,978,655) Truvada (Fumarato de disoproxilo de tenofovir/emtricitabina, Publicación de Patente US 5,210,085) Aptivus (Tipranavir) Retrovir (Zidovudina; Azidotimidina, Publicación de Patente US 4,724,232) Métodos de inhibición de HIV En un aspecto adicional, la presente invención proporciona métodos para tratar el Síndrome de Deficiencia Inmune Adquirida (AIDS), en donde cada método incluye el paso de administrar a un humano que padece de AIDS, una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de la presente invención, o un hidrato de una sal de la presente invención. El tratamiento de AIDS incluye la disminución de al menos un síntoma de AIDS, y/o disminuir o prevenir el progreso de la enfermedad. Normalmente la cantidad terapéuticamente efectiva de la sal se administra a un ser humano en la forma de una composición farmacéutica tal como se describe en la sección "composiciones farmacéuticas". Normalmente, la composición farmacéutica se administra en forma oral, por ejemplo en la forma de una tableta. Los ejemplos de dosis diarias terapéuticamente efectivas de una o más sales de la presente invención, o hidratos de las mismas, son de 1 mg a 100 mg tal como de 10 mg a 30 mg. Las sales de la presente invención se pueden administrar diariamente, por ejemplo en la forma de una o más tabletas que incluyen una cantidad de sal que proporciona una cantidad efectiva tal como 10 mg o 30 mg o 60 mg, de la base libre cuando la sal se disocia en un medio acuoso dentro del cuerpo humano.

Rutas de Administración Se administran una o más sales de la presente invención a través de cualquier ruta adecuada para la condición que será tratada. Las rutas adecuadas incluyen oral, rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), vaginal y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal y epidural) y similares. Se puede apreciar que la ruta preferida puede variar, por ejemplo, con la condición del receptor. Una ventaja de las sales de la presente invención es que son oralmente biodisponibles y pueden dosificarse en forma oral.

Ejemplos y Modalidades de Ejemplo: Ver también la Publicación Internacional WO 2006/110157, cuya descripción está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia, particularmente páginas 167 a 174. Ejemplo 1. Síntesis de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino -9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo. 2-deoxi-2-f luoro-3,5-di-0-benzoil-a-D- arabinofuranosilbromuro (2) El compuesto (2) se sintetizó de acuerdo con los esquemas sintéticos descritos en la Publicación de Tann y asociados, JOC, 1985, Vol. 50 página 3644 y Howell y asociados, JOC, 1988, Vol. 53, página 85.

A una solución de 1.3.5-tri-0-benzoil-2-deoxi-2-fluoro-a-D-arabinofuranosa (1) (120 g, 258 mmoles), comercialmente disponible en Davos o CMS Chemicals, en CH2CI2 (1 L), se le agregó HBr/ácido acético al 33% (80 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, se enfrió con hielo-agua y se neutralizó lentamente durante 1 a 2 horas con NaHC03 (150 g/1.5 L de solución).

Se separó la fase CH2CI2 y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con NaHC03 hasta que no hubo ácido. La fase orgánica se secó sobre MgS04, se filtró y concentró bajo presión reducida para proporcionar el producto 2 en la forma de un aceite amarillo (-115 g). 2-deoxi-2-f luora-3,5-di-0-benzoil-p-D-arabinof u ra nos i 1-9 H -6- cloropurina (3) El compuesto (3) se sintetizó de acuerdo con los esquemas sintéticos descritos en las Publicaciones de Ma y asociados, J. Med. Chem., 1997, Vol. 40, página 2750; Márquez y asociados, J. Med. Chem., 1990, Vol. 33, página 978; Hildebrand y asociados, J. Org. Chem., 1992, Vol. 57, página 1808 y Kazimierczuk y asociados, JACS, 1984, Vol. 106, página 6379.

A una suspensión de NaH (14 g, 60% en Acetonitrilo (900 ml_), se le agregó 6-cloropurina (52.6 g) en 3 porciones. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1.5 horas. Se agregó en forma de gotas una solución de 2 (258 mmoles) en Acetonitrilo (300 ml_). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se extinguió con ácido acético (3.5 mL), se filtró y concentró, bajo presión reducida. El residuo se dividió entre CH2CI2 y agua. La fase orgánica se secó sobre MgS04, se filtró y concentró. El residuo se trató con CH2CI2 y posteriormente EtOH (-1:2 general) para precipitar el producto deseado 3 en la forma de un sólido amarillento (83 g, 65% de 1). 2-deoxi-2-fluoro-p-D-arabinofuranosil-6-metoxiadenina (4) A una suspensión de 3 (83 g, 167 mmoles) en Metanol (1 L) a una temperatura de 0°C, se le agregó NaOMe (25% en peso, 76 ml_). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, y posteriormente se extinguió con ácido acético (~ 11 mL, pH)7). La mezcla se concentró bajo presión reducida y el residuo resultante se dividió entre hexano y agua (aproximadamente 500 mL de hexano y 300 mL de agua). La capa acuosa se separó y la capa orgánica se mezcló una vez más con agua (aproximadamente 300 mL). Las fracciones de agua se combinaron y concentraron bajo presión reducida a -100 mL. El producto, 4, se precipitó y recolectó mediante filtración (42 g, 88%). 2-deoxi-2-fluoro-5-carboxi-p-D-arabinofuranosil-6 metoxiadenina (5) Se sintetizó el compuesto (5) de acuerdo con los esquemas sintéticos descritos en la Publicación de Moss y asociados, J. Chem. Soc, 1963, página 1149.

Una mezcla de Pt/C (10%, 15 g (20-30% mol equiv.) en la forma de una pasta de agua) y NaHC03 (1.5 g, 17.94 mmoles) en H20 (500 ml_), se agitó a una temperatura de 65°C bajo H2 durante 0.5 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar posteriormente, se colocó bajo un vacío y se enjuagó varias veces con N2 para eliminar completamente todo el H2. El compuesto 4 (5.1 g, 17.94 mmoles) se agregó posteriormente a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a una temperatura de 65°C bajo 02 (balón) hasta que la reacción se completó mediante LC-MS (normalmente 24 a 72 horas). La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El Pt/C se lavó en forma extensa con H20. Los filtrados combinados se concentraron a ~ 30 mL, y se acidificaron (pH 4) a través de la adición de HCI (4N) a una temperatura de 0°C. Se precipitó un sólido color negro el cual se recolectó mediante filtración. El producto crudo se disolvió en una cantidad mínima de Metanol y se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (eluyendo con Metanol). El filtrado se concentró y cristalizó a partir de agua para proporcionar el compuesto 5 (2.5 g) en la forma de un sólido color crema. <6> (2'R,3'R,4'R,5,R)-6-Metoxi-9-[tetrahidro 4-yodo-3-f luoro-5- (dietoxifosfinil)metoxi-2-furanil]purina (6) El compuesto (6) se sintetizó de acuerdo con esquemas sintéticos descritos en Zemlicka y asociados, J. Amer. Chem., Soc, 1972, Vol. 94, página 3213.

A una solución de 5 (22 g, 73.77 mmoles) en DMF (400 mL), se le agregaron acetal de dineopentilo de DMF (150 mL, 538 mmoles) y ácido metanosulfónico (9.5 mL, 146.6 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a una temperatura de 80 a 93°C (temperatura interna) durante 30 minutos, posteriormente se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La fase orgánica se separó y lavó con NaHC03, seguido de salmuera, se secó sobre MgS04, se filtró y concentró bajo presión reducida. Se disolvieron el residuo e (hidroximetil)fosfonato de dietilo (33 mL, 225 mmoles) en CH2CI2 (250 mL) y se enfriaron a una temperatura de -40°C. Una solución de monobromuro de yodo (30.5 g, 1.1 mol) en CH2CI2 (100 mL) se agregó en forma de gotas. La mezcla se agitó a una temperatura de -20 a -5°C durante 6 horas.

Posteriormente la reacción se extinguió con NaHC03 y Na2S203. La fase orgánica se separó y la fase de agua se extractó con CH2CI2. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice para proporcionar el producto 6 (6 g, 15.3%).

Procedimiento Alternativo para la Preparación de 6 Una solución de 5 (2.0 g, 6.7 mmoles) en THF (45 mL) se trató con fosfina de trifenilo (2.3 g, 8,7 mmoles) bajo N2. Se agregó lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (1.8 g, 8.7 mmoles). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y posteriormente se concentró bajo presión reducida hasta secarse. El residuo se disolvió en CH2CI2 (20 mi) y posteriormente se trató con dietil(hidroximetil)fosfonato (4.5 g, 27 mmoles). La mezcla se enfrió a una temperatura de -60°C y posteriormente se agregó una solución fría de monobromuro de yodo 2 g, 9.6 mmoles) en CH2CI2 (10 mi). La mezcla de reacción se templó a una temperatura de -10°C y posteriormente se mantuvo a una temperatura de -10°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con CH2CI2, se lavó con NaHC03 acuoso saturado, y posteriormente con tiosulfato de sodio acuoso. La fase orgánica se separó, se secó sobre MgS04 y concentró bajo presión reducida hasta secarse. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (eluyendo con acetato de etilo al 25% en CH2CI2, posteriormente cambiando a metanol al 3% en CH2CI2) para producir el producto 6 (0.9 g, 33 %). (2,R,5,R)-6-Metoxi-9-[3-fluoro-2,5-dihidro-5- (dietoxifosfinil)metoxi-2-furanil]purina (7) A una solución del compuesto 6 (6 g, 11.3 mmoles) en ácido acético (2.5 ml_) y metanol (50 ml_), se le agregó en forma de gotas NaCIO (10-13%) (50 mL). La mezcla de reacción se agitó posteriormente durante 0.5 horas y se concentró bajo presión reducida. El residuo se trató con acetato de etilo y posteriormente se filtró para eliminar los sólidos. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice para proporcionar el producto 7 (4 g, 88%).

Sal disódica de (2'R,5" R)-9-{3-f luoro-2,5-di h id ro-5- f osfonometoxi-2-f uranil)adenina (8) Una solución del compuesto 7 (2.3 g, 5.7 mmoles) en metanol (6 mL) se mezcló con hidróxído de aluminio (28-30%) (60 mL). La mezcla resultante se agitó a una temperatura de 120°C durante 4 horas, se enfrió y posteriormente se concentró bajo presión reducida. El residuo se secó bajo vacío durante 12 horas. El residuo se disolvió en DMF (40 mL) y se agregó bromotrimetilsilano (3.5 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, y posteriormente se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió eri NaHC03 acuoso (2.3 g en 100 mL de agua). La solución se evaporó y el residuo se purificó en una columna C-18 (40 pm), eluyendo con agua. Las fracciones acuosas se secaron por congelación para proporcionar la sal disódica 8 (1.22 g, 57%).

Ejemplo de Preparación de Monoamidato (9) La sal disódica 8 (25 mg, 0.066 mmoles), el clorhidrato de áster (S)-Ala-O-ciclobutílico (24 mg, 2 eq. 0.133 mmoles) y fenol (31 mg, 0.333 mmoles) se mezclaron en piridina anhidro (1 mL). Se agregó trietilamina (111 pL, 0.799 mmoles) y la mezcla resultante se agitó a una temperatura de 60°C bajo nitrógeno. En un frasco separado, se disolvieron 2 ' - Al d ri ti o I (122 mg, 0.466 mmoles) y trifenilfosfina (103 mg, 0.466 mmoles) en piridina anhidro (0.5 ml_) y la solución amarilla resultante se agitó durante 15 a 20 minutos. Posteriormente la solución se agregó a la solución de 8 en una porción. La mezcla combinada se agitó a una temperatura de 60°C bajo nitrógeno durante 16 horas para proporcionar una solución con color de amarillo claro a café claro. Posteriormente la mezcla se concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se disolvió en CH2CI2 y se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (eluyendo con un gradiente lineal de 0 a 5% MeOH en CH2CI2) para proporcionar un agente. El aceite resultante se disolvió en acetonitrilo y agua y se purificó mediante HPLC de preparación (gradiente lineal, 5 a 95% de acetonitrilo en agua). Las fracciones puras fueron combinadas y se secaron por congelación para proporcionar el mono amidato 9 en la forma de un polvo color blanco.

Ejemplo de Preparación de bis amidato (10) Se mezclaron sal disódica 8 (12 mg, 0.032 mmoles) y clorhidrato de éster (S)-Ala-O-n-Pr (32 mg, 6 eq., 0.192 mmoles) en piridina anhidro (1 ml_). Se agregó trietilamina (53 µ?-, 0.384 mmoles) y la mezcla resultante se agitó a una temperatura de 60°C bajo nitrógeno. En un frasco separado, se disolvieron 2 '-Al d riti o I (59 mg, 0.224 mmoles) y trifenilfosfina (49 mg, 0.224 mmoles) en piridina anhidro (0.5 ml_) y la solución amarilla resultante se agitó durante 15 a 20 minutos. Posteriormente la solución se agregó a la solución de 8 en una porción. La mezcla combinad se agitó a una temperatura de 60°C bajo nitrógeno durante 16 horas para proporcionar una solución de color amarillo claro a café claro. Posteriormente la mezcla se concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se disolvió en CH2CI2 y se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (eluyendo con un gradiente lineal de 0 a 5% MeOH en CH2CI2) para proporcionar un aceite. El aceite resultante se disolvió en acetonitrilo y agua y se purificó mediante HPLC de preparación (gradiente lineal, 5 a 95% de acetonitrilo en agua). Las fracciones puras se combinaron y se secaron por congelación para proporcionar bis amidato en la forma de una polvo blanco.

Ejemplo de Preparación de Monoamidato (11) El compuesto 8 (1.5 g, 4 mmoles) se mezcló con sal HCI de éster de etilalanina (1.23 g, 8 mmoles) y fenol (1.88 g, 20 mmoles). Se agregó piridina anhidro (35 ml_) seguido de TEA (6.7 ml_, 48 mmoles). La mezcla se agitó a una temperatura de 60°C bajo nitrógeno durante 15 a 20 minutos. Se mezcló 2'-Aldritiol (7.3 g) en un frasco por separado con trifenilfosfina (6.2 g) en piridina anhidro (5 ml_) y la mezcla resultante se agitó durante 10 a 15 minutos. para proporcionar una solución color amarillo claro, aclarada. Posteriormente la solución se agregó a la mezcla anterior y se agitó durante la noche a una temperatura de 60°C. La mezcla se concentró bajo presión reducida para eliminar la piridina. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo y se lavó con una solución de bicarbonato de sodio saturada (2x) y posteriormente con una solución de cloruro de sodio saturada. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y posteriormente se concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se disolvió en diclorometano y se cargó sobre una columna CombiFlash seca, 40 g, eluyendo con un gradiente lineal de 0 a 5% de metanol en diclorometano durante 10 minutos y posteriormente en metanol al 5% en diclorometano durante 7 a 10 minutos. Las fracciones que contienen el producto deseado se combinaron y concentraron bajo presión reducida para proporcionar una espuma. La espuma se disolvió en acetonitrilo y se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar 11 (0.95 g).

Se disolvió 11 (950 mg) en una pequeña cantidad de acetonitrilo y se dejó asentar a temperatura ambiente durante la noche. El sólido se recolectó mediante filtración y se lavó con una pequeña cantidad de acetonitrilo. El filtrado se redujo bajo vacío y posteriormente se cargó en una columna Chiralpak AS-H equilibrada en amortiguador A, etanol al 2% en acetonitrilo. El isómero A, 12, se eluyó con el amortiguador A en 10 mL/minuto durante 17 minutos. Después de esto, el amortiguador B, metanol al 50% en acetonitrilo, se utilizó para eluir el isómero B, 13, por separado de la columna en 8 minutos.

Se eliminó todo el solvente y posteriormente se volvió a disolver por separado en acetonitrilo y agua. Se secaron por congelación en forma separada las muestras (masa - 348 mg). El isómero 12 se muestra a continuación.

Ejemplo 2. Clasificación de las formas de sal de N-((S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo Se clasificaron los siguientes ácidos para determinar si formaron sales cristalinas adecuadas de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}- met¡l)fenox¡fosfinoil]-L-alaninato de etilo: Acidos minerales (HX, en donde X = halógeno; H3P04); ácidos sulfónicos orgánicos (RSO3H, en donde R = Me, Et, Ph, ( + )-canfor-10-ácido sulfónico; naftaleno-2-ácido sulfónico; naftaleno-1 ,5-ácido disulfónico); ácidos monocarboxílicos (RCO2H, en donde R = H, Me, Et, Ph, rrans-PhCH = CH, CI2CH, PhCONHCH2), y ácidos dicarboxílicos (malónico, succinico, fumárico, adípico, oxálico, maleico).

Se obtuvieron los sólidos con tres de los ácidos anteriores cuando se mezclaron con N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dih¡droruran-2-il]oxi]metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato: ácido trifluoroacético, ácido malónico y ácido succinico. El ácido trifluoroacético no se considera como farmacéuticamente aceptable.

El N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo es un profármaco de amidato que pasa por descomposición en solventes próticos bajo condiciones ácidas o básicas. Por esta razón, no se incluyeron ácidos con porciones potencialmente nucleofílicas en la vuelta inicial de la clasificación. En forma subsecuente, se evaluó el ácido cítrico, ácido glicólico, ácido (S)-( + )-láctico, ácido salicílico, ácido (S)-(-)-málico, (S)-( + )-mandélico y ácido (S)-( + )-glutámico. El N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo formó de manera inesperada una sal cristalina estable con ácido cítrico. Esto fue un resultado inesperado debido a que el ácido cítrico incluye un grupo hidroxilo el cual puede actuar como un nucleófilo hacia la porción de amidato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il )-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo y pasar potencialmente por una reacción en ese lugar, en donde se forma un enlace covalente entre N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-¡l)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato y el grupo hidroxilo de ácido cítrico con la expulsión ya sea de fenol o éster etílico de alanina.

Ejemplo 3. Síntesis de sal de malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo La forma de base libre de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo se disolvió en 2-butanona templado (15 parte), y se agregó ácido malónico (0.26 partes) para formar una solución con agitación. Se agregó heptano (5 partes a la solución la cual se enfrió lentamente a una temperatura de aproximadamente 5°C, se recolectó y enjuagó con 2-butanona/heptano frío. La sal de malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-M)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo resultante, se produjo de esta forma con un rendimiento de aproximadamente el 80%.

El espectro RMN de la sal de malonato tuvo las siguientes características: 1H RMN (400MHz, CHLOROFORMO-d) ppm = 8.27 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 7.32 - 7.20 (m, 3 H), 7.15 (d. J = 7.8 Hz, 2 H), 6.78 (m, 1 H), 5.88 (br. s., 1 H), 5.78 (s, 1 H), 4.17 (m. 2 H), 4.15 - 4.07 (m, 3 H), 3.85 (dd, J = 8.0, 8.0, 1 H), 3.38 (s, 2 H), 1.31 (d, J = 7.0 Hz, 3 H), 1.23 (t, J = 7.0 Hz, 3 H) 31P RMN (162 Hz, CHLOROFORMO-d) ppm = 20.64 (s) 19F RMN (376 M Hz, ACETONITRILO-d3) ppm = -335.19 (s) Ejemplo 4. Síntesis de sal de succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosf inoil]-L-alaninato de etilo.

La forma de base libre de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxífosfinoil]-L-alaninato de etilo se disolvió en 2-butanona templada (15 partes), y se agregó ácido succínico (0.28 partes) para formar una solución con agitación. La solución se enfrió lentamente a una temperatura de aproximadamente 5°C, se recolectó y enjuagó con 2-butanona fría, para producir de esta forma la sal de succinato de N-[(S)({[(2 ,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]ox¡}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato con un rendimiento del 80%.

El espectro RMN de la sal de succinato tuvo las siguientes características: 1H RMN (400MHz, ACETONITRILO-d3) ppm = 8.26 (s, 1H), 8.15 (s, 1 H), 7.29 (dd, J = 7.6, 7.6 Hz, 2 H). 7.16 (d, 7 = 7.6 Hz, 1 H), 7.12 (d, J= 8.0 Hz, 2 H), 6.78 (m, 1 H ), 6.17 (br s, 1H), 5.89 (m, 2 H), 4.12 - 3.95 (multipletos traslapados, 6 H), 2.53 (s, 4 H), 1.24 (d, J= 6.8, 3 H), 1.18 (t, J= 7.2, 3 H). 31P RMN (162 MHz, Acetonitrilo-d3) ppm = 21.60 (s) 19F RMN (376 MHz, Acetonitrilo-d3) ppm = -135.19 (s) Ejemplo 5. Síntesis de Sal de Citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenox¡fosfinoil]-L-alaninato de etilo.

La forma de base libre de N-[(S)({[(2R, 5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo (aproximadamente 30 g) se disolvió en acetonitrilo caliente (16 partes) y se agregó ácido cítrico (0.38 partes) con agitación. La solución resultante se enfrió lentamente a una temperatura de aproximadamente 5°C, se recolectó y enjuagó con acetonitrilo frío, y se secó, para producir de esta forma la sal de citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo con un rendimiento de aproximadamente 84%.

El espectro RMN de la sal de citrato tuvo las siguientes características: 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) ppm = 8.20 (s, 2H), 7.45 (2H, br s), 7.29 (dd, J = 7.6, 7.6 Hz, 2 H), 7.13 (dd, J = 7.2 Hz, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.12 (dd, J = 8.0 Hz, J= 8.0 Hz 2 H), 6.86 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 6.14 (s, 1H). 5.97 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.78 (dd, J = 12.2, 10.4 Hz, 1H), 4.05 (m, 1H), 4.02 (m, 2H), 3.98 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 2.76 (d, J = 15.6 Hz, 2H), 2.66 (d, J= 15.6 Hz, 2H), 1.16 (d, J= 7.2 Hz, 1H). 3 P RMN (162 MHz, DMSO-d6) ppm = 22.29 (s) 19F RMN (376 MHz, ACETONITRILO-d3) ppm = -133.88 (s) HRMS: m/z. 507.1561; Calculado para C2i H24FN606P: 507.1557.

Anal. Calculado para C21 H24FN606P: C: 46.42; H: 4.62; N: 12.03; P: 4.43; F: 2.72; Encontrado: C: 45.83; H: 4.74; N: 11.81: P: 4.45; F: 2.80.

Ejemplo 6. Propiedades Fisicoquímicas de las Sales de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo Se prepararon lotes representativos de sales de malonato, succinato y citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dih id rotura n-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo. Los puntos de fusión de estas sales fueron determinados y sirvieron como una medida rigurosa de estabilidad con un mayor punto de fusión indicado un mayor nivel de estabilidad. Tal como se muestra en la tabla 1, la sal de citrato tuvo el punto de fusión más alto. Además, el calor de fusión (AH(fUS¡6n)) de cada una de las tres sales se muestra en la tabla 1. La sal de citrato tuvo el calor de fusión más alto, indicando un mayor grado de cristalinidad de estado sólido que las otras dos sales.

Tabla 1. Temperatura de Fusión y Calor de Fusión de Sales de Succinato, Malonato y Citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-ainino- 9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2- il]oxi}metil)fenoxifosf¡noil]-L-alaninato de etilo La forma de base libre de N-[(S)({[{2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo es amorfa, higroscópica y químicamente inestable cuando se almacena bajo condiciones abiertas a una temperatura de 40°C y humedad relativa de 75% (RH). Tal como se muestra en la tabla 2, las sales de succinato, malonato y citrato correspondientes no fueron higroscópicas a temperatura ambiente cuando se expusieron a una humedad relativa de 92% durante varios días.

Tabla 2. Higroscopicidad de Estados Sólidos de las Formas de Sal de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-¡l)-4-fluoro-2,5- dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo a Temperatura Ambiente La estabilidad química de estado sólido de las sales de succinato, malonato y citrato de base libre, de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo se revisaron bajo condiciones abiertas a una temperatura de 40°C y una humedad relativa de 75%. Tal como se muestra en la tabla 3, la sal de citrato mostró una estabilidad química superior en comparación con las sales de citrato y malonato.

Tabla 3. Estabilidad de Estado Sólido de la Forma de Base Libre de N^-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5- dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato, y las sales de Succinato, Citrato y Malonato Correspondientes en ( Condiciones de temperatura de 40°C/Humedad Relativa de 75% Bajo Condiciones Abiertas Otras Tiempo Base Libre Forma Impurezas (días) (%) (%) 0 99.01 0.99 7 82.95 17.05 Base Libre 14 66.89 33.11 22 55.90 44.10 0 98.95 1.05 9 95.15 4.85 Sal de 16 92.47 7.53 Succinato 22 90.43 9.57 30 82.92 14.08 0 97.82 2.18 9 94.66 5.34 Sal de Malonato 16 92.97 7.03 22 93.48 6.52 30 85.84 14.16 0 98.00 2.00 4 97.27 2.73 Sal de Citrato 12 97.20 2.80 17 95.86 4.14 27 94.59 5.41 Ejemplo 7. Composición de Tabletas que Proporcionan el Equivalente a 10 mg y 30 mg de la base libre de N-[(S)({[{2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2- ¡l]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo La sal de citrato de N-[(S)({[{2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin- 9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo se formuló en tabletas de 10 mg y 30 mg utilizando un proceso de compactación con rodillo. El ingrediente activo, lactosa anhidro, celulosa microcristalina y sodio de croscarmelosa se combinaron primero, y la mezcla posteriormente se lubricó con un tercio de la cantidad total de estearato de magnesio, posteriormente se compactó con rodillo, seguido de molido. Los gránulos resultantes se lubricaron con la cantidad restante de estearato de magnesio y se prensaron en tabletas.

La tabla 4 muestra la composición de las tabletas que incluyen la sal de citrato de N-[(S){{[(2R, 5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo, y que proporciona ya sea 10 mg o 30 mg de la forma de base libre del compuesto, cuando la sal de citrato se disocia en un medio acuoso.

Tabla 4. a Equivalente de 10% 2/2 de la forma de base libre del compuesto. El peso real de la sustancia de fármaco se ajustará para tomar en cuenta la pureza de sustancia .el fármaco b Equivalente a 10 mg de la forma de base libre del compuesto. c Equivalente a 10 mg de la forma de base libre del compuesto. d La cantidad de sustancia de fármaco ajustada se sustraerá de la cantidad de lactosa anhidro. 8 La abreviatura NF, significa formulario nacional, y la abreviatura HSE, significa Referencia de Compendio Local , el cual es un estándar interno utilizado en Gilead Sciences Ejemplo 8 Comparación de Carga de Linfocito de Metabolito Activo Después de Administración a Linfocitos de N-[(S)({[(2R,5R)-5- (6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2- il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo (Profármaco) o Compuesto de Origen.

El N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5- d¡h¡drofuran-2-¡l]oxi}met¡l)fenox¡fosfinoil]-L-alan¡nato de etilo es un profármaco que es hidrolizado en el cuerpo humano para producir un producto de hidrólisis el cual en lo sucesivo será referido como "el compuesto de origen". El compuesto de origen es fosforilado dentro del cuerpo humano para producir un producto fosforilado biológicamente activo (en lo sucesivo "el metabolito activo") que inhibe la actividad de enzima de transcriptasa inversa.

Para caracterizar el metabolismo intracelular del fármaco y compuesto de origen, se trataron las células de linfocito ya sea con 1 µ? de profármaco o 100 µ? de compuesto de origen durante 2, 6, y 24 horas. Se aislaron células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) de recubrimientos esponjosos humanos (Stanford Blood Bank, Palo Alto, CA) utilizando centrifugación en Ficoll Paque Plus (GE Healtcare, Piscataway, NJ) de acuerdo con el procedimiento del fabricante. Las PBMCs aisladas de 3 a 4 donadores independientes se mantuvieron en un medio RPMI-1640 con suero de bovino fetal al/ 20% y antibióticos (estado inactivo) o se activaron en la presencia de interleucina 2 (20 un¡dades/ml_, Roche Biochemicals, I ndianapolis, IN) y fitohemaglutinina PHA-P (1 pg/mL, Sigma) durante 3 a 4 días antes de iniciar los experimentos.

Se obtuvieron células T CCRF-CEM humanas transformadas en La Recolección de Cultivo Tipo Americano (Manassas, VA) y se cultivaron en un medio RPMI-1640 suplementado con 10% de FBS y antibióticos. Se recolectó una alícuota de células (2-3x106 células) en cada punto de tiempo, se contaron, se peletizaron mediante centrifugación, se resuspendieron en 0.5 mL del medio de tratamiento original y se elaboraron en capas en 0.5 mL de aceite Nyosil 25. Las muestras se giraron en una microcentrif ugadora durante 20 segundos a la velocidad máxima (aproximadamente 800 x g). La capa superior del medio se eliminó y la capa de aceite se lavó dos veces con 0.8 mL de solución salina amortiguada por fosfato. El amortiguador de lavado y la capa de aceite se eliminaron en forma cuidadosa, el pelet celular se resuspendió en 0.5 mL de metanol al 70% y se incubó durante la noche a una temperatura de -70°C para facilitar la lisis celular. Los Usados celulares se centrifugaron, los sobrenadantes se recolectaron, se secaron mediante vacío y se resuspendieron en 10 pL de acetato de amonio de tetrabutilo que contiene el difosfato de ácido [5-(6-Amino-purin-9-il}-2,5-dihidro-furan-2-iloximetil]-fosfónico (el análogo no fluorinado del metabolito activo) en la forma de un estándar interno.

Se utilizó cromatografía líquida de alto desempeño de emparejamiento de iones temporal acoplada a espectrometría de masa tándem de electrorocío de iones positivos (LC/MS/MS) para cuantificar los nucleótidos intracelulares. Los métodos se adaptaron a partir de los descritos para el análogo de nucleótido de fosfonato acíclico, adefovir sus metabolitos fosforilados y nucleótidos naturales (Vela, .1.E. y asociados, Cuantificación simultánea del análogo de nucleótido adefovir, sus anabolitos fosforilados y trifosfato de 2'-desoxiadenosina mediante emparejamiento de iones LC/MS/MS. Journal of Chromatography B Anal. Technol. Biomed. Life Sci., vol. 848, 2007, pp 335-343). Las curvas estándar y las muestras de control de calidad fueron generadas para todos los materiales para análisis utilizando extractos de las células no tratadas. Las curvas estándar de siete puntos generalmente fluctuaron de 0.03 a 20 pmol/millón de células y tuvieron una linealidad en exceso de r a 0.99 para todos los materiales para análisis: Los límites de cuantificación inferiores para todos los materiales para análisis, fluctuaron de 0.05 a 0.1 pmol/millón de células. Se corrieron muestras de control de calidad de concentración alta y baja (normalmente 0.2 y 10 pmol/millón de células, respectivamente) con cada material para análisis al comienzo y final de cada corrida analítica para asegurar la exactitud y precisión dentro del 20%.

El compuesto de origen fue incubador en una concentración mayor de 100 veces (100 µ?) que el profármaco (1 µ ) para facilitar el análisis preciso de la acumulación de metabolitos intracelulares muy inferior observada después de la incubación de linfocitos con el compuesto de origen. Tal como se muestra en la tabla 5, el profármaco indujo niveles de incremento de 76-, 290- y 140 veces del metabolito activo en forma relativa al compuesto de origen después de incubación con CEM-CCRF, PBMCs inactivas y PBMCs activadas, respectivamente. Los niveles de metabolito activo fueron normalizados con base en la concentración extracelular después de incubaciones con 1 µ? de profármaco o con 100 µ? del compuesto de origen.

Tabla 5 Ejemplo 9.

Comparación de Actividad Anti-HIV del Profármaco y el Compuesto de Origen Los términos "profármaco" y "compuesto de origen" tienen los significados establecidos en el Ejemplo 8.

Se mantuvieron células MT-2 en un medio RPMI-1640 suplementado con antibióticos y suero bovino fetal al 10% (FBS). Se infectaron células MT-2 con HIV-1 IIIB en una multiplicidad de infección (moi) de 0.01 y se agregaron en placas de 96 depósitos con diluciones en serie y los compuestos se probaron a una densidad de 20,000 células/depósito. Después de incubación de 5 días, se determinó el efecto citopático inducido por virus utilizando un ensayo de viabilidad celular CelITiter-GloTM (Promega, Madison, Wl) y expresadas como un porcentaje de la señal de las muestras con la réplica de virus completamente suprimida después de las substracción de señal del control no tratado. La concentración de cada fármaco que inhibió el efecto citopático inducido por virus en un 50% (EC5o), fue determinada mediante regresión no lineal. Se determinó la actividad contra mutantes resistentes a NRT1 en paralelo con el virus de control tipo natural y se calculó el cambio en dobles en EC50.

Se aislaron células mononucleares de sangre periférica humana (PBMC) de recubrimientos esponjosos donadores utilizando centrifugación en Ficoll Paque Plus y activados durante 4 a 5 días en un medio RPMI-1640 con 20% FBS, antibióticos, interleucina-2 (20 unidades/mL) y fitohemaglutinina PMA-P (2 pg/mL). Se infectaron las PBMC activadas con HIV-1 BaL durante 3 horas, se lavaron, se sembraron en placas de 96 depósitos (250,000 células/depósitos) y se incubaron con diluciones en serie de compuestos probados durante 5 días, punto en el cual se recolectaron los sobrenadantes celulares y se determinó la producción del virus utilizando ELISA comercial HIV-1 p24 (Beckman Coulter, Miami, FL). La concentración de cada fármaco que inhibe la producción del antígeno p24 de un 50% (EC50) se determinó mediante análisis de regresión.

El efecto de la adición de las pro-porciones de la actividad anti-HIV fue evaluada en MT-2 y PBMC estimuladas infectadas con HIV-1. Tal como se muestra en la tabla 6, el profármaco fue 71 - y 2,300-veces más potentes que el compuesto de origen en MT-2 y PBMC activadas, respectivamente.

Tabla 6. Actividad anti-HIV del profármaco y compuesto de origen en una línea de célula derivada de linfoide y células linfoides primarias.

Ejemplo 10.

Biodisponibilidad Oral de la Sal de Citrato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-am¡no-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo. Después de la. administración en Forma de Tabletas a Perros Beagle El grupo de dosificación consistió en 3 perros Beagle macho no na'fve. Los animales se dejaron en ayuno durante la noche antes de la administración de la dosis y hasta 4 horas después de la dosificación. A los perros se les administró una sola tableta que contiene 41.38 mg de la sal de citrato del profármaco (que proporciona 30 mg del profármaco por tableta).

La tableta consistió en 13.79% de la sal de citrato de profármaco, 66% de lactosa anhidro, 15.21% de celulosa microcristalina, 3.5% de croscarmelosa de sodio y 1.5% de estearato de magnesio en una base de peso por peso. Se obtuvieron muestras de plasma antes de la dosificación (0 horas) y a las 0.083, 0.25, 0.50, 1.0, 2.0, 4,0, 8.0, 12, 24 horas. Se recolectaron muestras de sangre en tubos Vacutainer™ que contienen EDTA-K3. Las muestras de sangre se centrifugaron a una temperatura de 4°C para separar el plasma. Se diluyó primero una alícuota de 100 µ? de cada muestra de plasma con 300 µ? de 80% de acetonitrilo/agua que contiene 200 nM de estándar interno. Después de la centrifugación del precipitado de proteína, se eliminaron 100 µ? del sobrenadante y se utilizaron para análisis. Las curvas estándar y las muestras de control de calidad se prepararon en plasma de perro, de animales que no fueron dosificados con el profármaco. Las muestras fueron analizadas a través de un método de acoplamiento de cromatografía líquida parcialmente validada a espectrometría de masa de cuadrupolo triple.

La administración de la sal de citrato del profármaco en la forma de una tableta, dio como resultado una rápida absorción de profármaco y el compuesto de origen derivado del mismo. Tal como se resume en la tabla 7, después de la administración se observó la exposición del plasma al profármaco y el compuesto de origen. La biodisponibilidad oral del profármaco intacto fue de 11.4%. Estos resultados no fueron marcadamente diferentes a los observados después de administración oral del profármaco en una formulación de solución, que ilustra la efectividad de las tabletas que contienen la sal de citrato del profármaco para suministrar el profármaco y sus metabolitos en la circulación sistémica.

Tabla 7. Parámetros Farmacocinéticos en Plasma Promedio para el Profármaco y el Compuesto de Origen después de Administración Oral de una Formulación de Tableta de la Sal de Citrato del Profármaco como una Dosis Promedio de 3.05 mg/kg equivalentes (promedio, n = 3).

Ejemplo 11.

Calorimetría de Exploración Diferencial (DSC) De Sales de Citrato, Malonato y Succinato de N-[(S)({[{2R:5R)-5-(6-amino- 9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-¡l]oxi}metil)fenox¡fosfinoil]-L-alaninato.

La 1 calorimetría de exploración diferencial mide en forma precisa las temperaturas y flujo de calor asociados con las transiciones térmicas en un material. Los trazos DSC de las sales de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfino¡l]-L-alaninato de etilo de la presente invención fueron generados utilizando un TA Instrument (New Castie, DE) DSC 2010 en un rango de exploración de 5°C min"1. La figura 1 muestra el trazo DSC característico de la sal de malonato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo. El termograma DSC reveló un endotermo simple que corresponde al punto de fusión de (120.43°C, AHf= 73.72 J/g) seguido de un exotermo siempre que corresponda la descomposición de la sal de malonato.

La figura 2, muestra el trazo DSC característico de la sal de succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo. El termograma DSC de la sal de succinato de GS-913 , reveló un solo endotermo que corresponde al punto de fusión (137.44°C, AHf = 66.18 J/g) seguido de un solo exotermo que corresponda la descomposición de la sal.

La figura 3, muestra el trazo DSC característico para la sal de citrato de N-[(S)({[2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfino¡l]-L-alaninato de etilo. El termograma DSC de la sal de citrato reveló un solo endotermo que corresponde al punto de fusión (149.41°C, AHf = 85.72 J/g) seguido de un solo exotermo que corresponde a la descomposición de la sal de citrato.

La sal de citrato tiene un calor de fusión significativamente mayor al de las sales de malonato y succinato, indicando un mayor grado de cristalinidad de estado sólido.

Ejemplo 12.

Análisis de Difracción de Rayos X (XRD) de Sales de Citrato, Malonato y Succinato de N-[(S)({[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo.

Los patrones de difracción de polvo de rayos X (XRPD) de las sales de N-[(S){[(2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-yil)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il]oxi}metil)fenoxifosfinoil]-L-alaninato de etilo de la presente invención, fueron generados utilizando dos métodos. En el primer método, se utilizó un instrumento Shimadzu XRD 6000 con los siguientes atributos: tubo de rayos X Cu, 2.2KW, NF (foco normal); monocromador de grafito curvo; goniómetro vertical, radio 185 mm; ranuras de divergencia: 0.5°, 1.0°, 0.05 mm; ranuras de Soller: 0.05°, 1o, 2o; ranuras de recepción: 0.15 mm, 0.3 mm; detector de centelleo (Nal) HV 500-1200.

En el segundo método, se utilizó un instrumento Shimadzu XRD 6000 con los siguientes atributos: tubos de rayos X objetivo Cu, 35 kv, corriente 40 ma; exploración continúa, monocromador, ranura de divergencia, 1o: ranura de Soller 1o, ranura de recepción 0.3 mm.

Los datos XRPD para las sales de malonato y succinato se obtuvieron utilizando el método 1. Los datos XRPD para la sal de citrato fueron obtenidos utilizando el método 2.

Quedará entendido que las desviaciones experimentales pueden cambiar ligeramente la información de la banda de absorción XRPD (pico). Por lo tanto, los números reportados en esta patente que resultan de los patrones XRPD de las sales de la presente invención, serán los mismos o esencialmente los mismos que los números que ocurrirán al momento de repetir las pruebas. El término "esencialmente el mismo" dentro del contexto, significan que se toman en cuenta la posición pico y la variabilidad de intensidad típicas (ya que normalmente podrían ser para cualquier técnica analítica). Por ejemplo, un experto en la técnica podrá apreciar que las posiciones pico mostrarán cierta variabilidad inter-aparato. Por ejemplo, las posiciones de pico 2-teta normalmente se desviarán tanto como 0.1 grados. Además un experto en la técnica apreciará que las intensidades pico relativas también mostrarán variabilidad debido al grado de cristalinidad, orientación preferida, superficie de muestra preparada y otros factores conocidos en la técnica. Por lo tanto, las intensidades pico relativas deben ser tomadas únicamente como una medida cualitativa.

La figura 4 muestra el patrón XRPD característico de la sal de malonato. Los picos principales característicos que definen esta forma cristalina de la sal de malonato se muestran en las tablas 8A y 8B.

Tabla 8A Picos PXRD de sal de Malonato Tabla 8B Proceso de Datos Básico Nombre del Grupo Nombre de Datos 34964B Nombre de Archivo 34964:5. F R Nombre de la Muestra Lote# 2587-169-17 Comentario Sales 11 SP 941> # de Picos más fuertes 3 no. 2 Teta o 1/11 FWHM Intensidad Int Integrado de pico (grados) (A) (grados) (Conteo) (Conteo) 13 17.7561 4.99119 100 0.31900 947 16049 ? 4.916B 5. S3423 92 0.30230 667 14513 IB.8000 •i .11634 80 0.657 0 758 23557 # de Lista de Datos Pico no. 2 Teta d 1/11 FWH Intensidad Int Integra de pico (grados) (A) (grados) (Conteo) (Conteo) 1 4.7340 IB .6S124 i 0.16140 9 69 2 5.9215 j.4 .91 31 11 0.26430 100 1723 3 7.000Q 12 .61783 3 0.20Ó60 29 563 4 7.5504 11 .69922 29 .0.44910 279 6489 5 S.1S0O 9 .65724 8 0. 2000 76 1779 6 10.5600 3 .37073 4 C.18660 34 6e 7 11.0208 8 .02175 34 0.29110 323 44S8 8 11.160O 7 .92200. 30 O.56800 287 770B 9 12.6400 E .9S756 16 0.25600 147 2545 10 1 .8400 6 .88901 20 0.27840 191 2234 11 1.4.5200 6 .09549 9 C .16300 8? 12B2 12 14. 168 c .93423 92 0.30230 867 14513 13 17.7561 4 .99119 100 0.31900 947 16049 14 13.3000 4 . S 40S 73 0.40260 692 12656 15 13.8000 4 .71634 P.O 0.65720 758 21597 16 19.2077 4 .6 7 41 0.36220 387 6608 1 19.5800 4 .53018 63 0.34720 593 11731. 18 20.0200 4 . 3159 14 0..15560 130 ?83 19 20. 824 i .270 1 2-1 0.541 0 223 6510 .70 22.0112 .0349S 6 0.477 SO 250 6040 21 22. 800 3 .95190 G ^ 0.45260 211 4333 23.3273 3 .81023 IB 0.29470 171 2718 3 24.1490 3 .682'! G: 24 0.51800 232 £302 24 25.3900 3 .50653 44 0.43120 413 14100 25.85.30 3 .43321 44 0.279T? 419 5539 25 26.2380 .35378 24 0.79670 227 esio 27 26.8200 3 .321 40 0. G1720 363 13675 28 27.30T.7 3 .26310 14 0.49680 130 3057 29 27.7600 .21107 18 0·.42.180 175 4291 30 28.9185 3 .0B501 27 0.5 570 258 S924 31 29.3200 3 .04367 11 C .20660 104 2021 32 30.3600 .94173 13 0.65340 11 194 33 31.1400 .86980 17 0.56000 159 4256 34 32.0000 2 .7S46I 3 0.14340 25 j 65 3 S 32.8233 .72637 10 0.29230 95 1975- 36 33.8725 .64428 7 0.5S500 64 íess La figura 5 muestra el patrón XRPD característico de la sal de succinato. Los picos principales y característicos que definen esta forma cristalina de la sal de succinato se muestran en las tablas 9A y 9B.

Tabla 9A picos PXRD de Sal de Succinato Tabla 9B Proceso de Datos Básico Nombre del Grupo Nombre de Datos 34984A Nombre de Archivo 34984A. PKR Nombre de la Muestra Lote# 2587-166-27 Comentario Sales USP <941> # de Picos más fuertes 3 no. no. 2 Teta d I/ FWHM Intensidad Int Integrado de pico (grados) (A) (grados) (Conteo) (Conteo) 10 24.9100 3.57161 100 1.13000 590 40991 18.4600 4.80243 81 0.73400 480 16639 1 .7600 4.99010 79 O .41620 464 9106 # de Picos más fuertes 3 no. 2 Teta l/ll FWHM Intensidad Int Integrado de pico (grados) (grados) (Conteo) (Conteo) 1 6.0033 .71029 7 0.64670 43 1492 2 9.4308 9.37032 12 1.24830 69 4432 1 11.7717 7.51169 33 1.08060 195 11923 d 14.7400 6..00500 10 0.600O0 60 4288 5 16.0720 5.51020 9 0.55880 56 1470 6 17.7600 4.99010 79 0.41620 464 9106 7 ia.4600 .80243 61 0, 73400 480 16639 8 20.4772 .33367 57 0.87020 337 13869 9 21. 293 4.14323 43 0.40730 252 4832 10 2 .9100 3.57161 IDO 1.13000 590 40991 11 26.1400 . 0628 36 2'.92000 212 21458 12 2 .9400 3.19019 15 1.47000 66 8157 13 29.7800 2.99769 9 0.31340 53 779 14 30.9200 2.88972 7 1.28000 40 3619 1S 33.2233 2. £9446 8 1.08670 49 2527 La figura 6 muestra el patrón XRPD característico para la sal de citrato. Los picos principales y característicos que definen esta forma cristalina de la sal de citrato se muestran en las tablas 1 OA y 1 OB.

Tabla 1 OA Picos PXRD de Sal de citrato Tabla 10 B Proceso de Dalos Básico Nombre del Grupo Nombre de Datos 3S614A Nombre de Archivo 35614A. PKP.

Nombre de la Muestra Lotej) 27B2-76- Comentario USP <941> # de Picos más fuertes 3 no. 2 Teta I/Il FWHM Intensidad Inl Integrado de pico (grados) (A) (Conteo) (Conteo) 21 19.78S8 4.4B352 1.00 0.26810 1443 20S3B 30 23.8400 3.72944 55 0.33400 793 14S67 35 26.S9SS 3.34884 51 0.31810 734 11131 # de Lista de Datos Pico no. FWHM Intensidad Int Integrado 2 Teta d I/T.1 (grados) (Conteo) (Conteo) de pico (grados) (A) 1 6.7400 13.10398 3 0.163GO 47 455 6.9496 12.70922 6 0.2 930 B7 B64 3 8.2200 10.74764 6 0.23.20 81 1414 4 8.4436 10.46352 18 0.22630 253 2802 5 9.0566 9.75662 6 0.22460 B9 1275 6 11.0600 7.9S341 4 0.18000 62 762 7 11.2871 7.83308 16 0.23720 238 2770 9 11.8800 7.44345 4 0.19560 52 603 9 12.0S0B 7.33833 8 0.25030 114 1167 10 13.1691 6.717S8 16 0.2217D 229 3085 1 13.9959 6.32255 25 0.23910 358 5182 12 1 .6151 6.0S6 4 33 0.26400 470 7221 13 15.4624 5.72604 25 0.30010 356 SG58 14 15 , 8200 5.59740 3 0.1BB00 48 832 ib 16.9600 5.22354 26 0.27100 377 549S 16 17.3474 5.10785 46 0.26120 668 9289 17 18.0000 .92411 1 0.19920 271 3037 IB 18.2200 86514 32 0.20420 465 5224 19 18.7154 73746 4 0.21520 51 606 20 19, 2200 .61421 10 0.19200 146 2871 21 19.785B .4B252 100 0-26810 1443 20538 22 20.0BOB .41849 38 0.193B0 546 6060 23 20.5315 32233 32 0.32250 455 7724 24 21.1200 .20320 e 0.25500 114 1667 25 21. 000 .14BE3 16 0.26760 235 3054 26 21.8913 4. C56B2 10 0.26260 141 2250 27 22.8001 . e9713 13 0.30?? 181 2641 29 23.2200 3.82760 3 0.19760 50 746 c. 29 23.3691 3.80351 0.16040 83 625 30 23.8400 3. 2944 55 0.33400 753 14567 31 24.1800 3.67776 26 0.12300 380 4146 32 25.0296 3.55482 f, 0.32290 119 2002 33 25.6031 3.47648 7 0.2209C 102 1365 34 26.2800 3.38845 26 0.30180 379 5681 35 26.5965 3.348B4 5) 0.31B10 734 11131 36 27.4B4B 3.24255 6 0.20170 1222 37 28.1600 3.1GC36 4 0.05340 441 8 28.5989 3.11875 46 0.33280 666 12909 39 29.0484 3.07151 o 0.23960 127 1440 40 25.5600 2.0195C 20 0.48340 290 6624 41 29.8RO0 2.98789 16 0.14600 2012 42 30. 400 2.93413 0,09340 274 43 30.7800 2.90254 11 C.10020 737 44 31.0600 2.87701 6 0.19060 3504 45 31.3400 2. E5195 0.18000 B02 46 31.5800 2.83082 0.12960 357 47 31. B602 12 i l¿ 2604 46 32.2200 2. ? 503 4 0.08.580 55 4B2 no. 2 Teta d I/Il FWHM Intensidad Int Integrado de pico (grados) (A) (grados) (Conteo) (Conteo) 49 33.08O0 2.70580 3 0.09060 5 386 50 33.2668 2.69103 5 0.12920 65 453 51 33. S21 2.66571 7 0.36940 108 2006 52 34.3755 2.60673 6 0.15550 B3 1053 Todas las menciones de la literatura y patentes anteriores están incorporadas expresamente de esta manera como referencia en los lugares donde se mencionan. Las secciones o páginas mencionadas de manera específica de los trabajos mencionados anteriormente, están incorporados con especificidad como referencia. Aunque la presente invención ha sido descrita con detalle suficiente para permitir que un experto en la técnica realice y utilice el asunto o materia de las reivindicaciones que se encuentran a continuación, también se podrá contemplar que se pueden realizar ciertas modificaciones de las reivindicaciones adjuntas y permanecerá aún dentro del alcance y espíritu de la presente invención.

Claims (32)

REIVINDICACIONES

1. Una sal de citrato de la fórmula I o un hidrato de la misma: (l)

2. La sal o hidrato tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque es cristalina.

3. La sal tal como se describe en la reivindicación 2, caracterizada porque las bandas" de absorción de espaciamiento-d espectrales son obtenidas de un patrón de difracción de polvo de rayos X de los mismos o esencialmente los mismos 4.48, 3.12 y 6.05 angstroms.

4. La sal tal como se describe en la reivindicación 2, caracterizada porque las bandas de absorción del ángulo de difracción 2-teta son obtenidas del patrón de difracción de polvo de rayos X de los mismos o esencialmente los mismos 19.81, 28.63 y 14.64 grados.

5. El hidrato tal como se describe en la reivindicación 2, caracterizado porque es parcial o completamente hidratado.

6. La sal tal como se describe en la reivindicación 2, caracterizada porque es anhidro o esencialmente anhidro.

7. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 6 y un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

8. La composición farmacéutica tal como se describe en la reivindicación 7, caracterizada porque comprende además un agente terapéutico adicional.

9. La composición farmacéutica tal como se describe en la reivindicación 8, caracterizada porque el agente terapéutico es un fármaco anti-HIV.

10. La composición farmacéutica tal como se describe en la reivindicación 7, caracterizada porque la composición farmacéutica es una forma de dosificación unitaria.

11. La composición farmacéutica tal como se describe en la reivindicación 10, caracterizada porque la forma de dosificación unitaria es una tableta.

12. Una composición farmacéutica preparada combinando la cantidad terapéuticamente efectiva de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 6, con un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

13. El uso de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 6 para tratar o prevenir profilácticamente una infección HIV.

14. El uso de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 6 para la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir profilácticamente una infección de HIV.

15. El uso tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 13 a 14, caracterizado porque la sal o hidrato están presentes en la forma de una composición farmacéutica tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 7 a la 12.

16. Una sal de succinato tal como se describe en la fórmula II o un hidrato de la misma: (ID

17. La sal o hidrato tal como se describe en la reivindicación 16, caracterizada porque es cristalina.

18. La sal tal como se describe en la reivindicación 2, caracterizada porque las bandas de absorción de espaciamiento-d espectrales se obtienen de un patrón de difracción de polvo de rayos X de los mismos o esencialmente los mismos 3.57, 4.80 y 4.99 angstroms.

19. La sal tal como se describe en la reivindicación 2, caracterizada porque las bandas de absorción del ángulo de difracción 2-teta son obtenidas del patrón de difracción de polvo de rayos X de los mismos o esencialmente los mismos 24.91, 18.46 y 17.76 grados.

20. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 16 a la 19 y un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

21. La composición farmacéutica tal como se describe en la reivindicación 20, caracterizada porque comprende un ingrediente activo adicional.

22. Una composición farmacéutica preparada combinando la cantidad terapéuticamente efectiva de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 16 a la 19 con un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

23. El uso de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 16 a la 19, para tratar o prevenir profilácticamente una infección HIV.

24. Una sal de malonato de la fórmula III o un hidrato del mismo: (III)

25. La sal o hidrato tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque es cristalina.

26. La sal tal como se describe en la reivindicación 25, caracterizada porque las bandas de absorción de espaciamiento-d espectrales se obtienen' de un patrón de difracción de polvo de rayos X de los mismos o esencialmente los mismos 4.99, 5.93 y 4.72 angstroms.

27. La sal tal como se describe en la reivindicación 25, caracterizada porque las bandas de absorción del ángulo de difracción 2-teta son obtenidas del patrón de difracción de polvo de rayos X de los mismos o esencialmente los mismos 17.76, 14.92 y 18.80 grados.

28. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 24 a la 27 y un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable .

29. La composición farmacéutica tal como se describe en la reivindicación 28, caracterizada porque comprende un ingrediente activo adicional.

30. Una composición farmacéutica preparada combinando la cantidad terapéuticamente efectiva de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 24 a la 27 con un transportador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

31. El uso de la sal o hidrato tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 24 a la 27, para tratar o prevenir profilácticamente una infección HIV.

32. Una composición o método tal como se describe en la presente invención.