MX2008000969A - Biomateriales a base de carboximetilcelulosa salificada con zinc asociado con derivados de acido hialuronico. - Google Patents

Abstract

Biomateriales en forma de productos no tejidos, que comprenden carboximetilcelulosa salificada con zinc asociado con derivados hialuronicos en porcentajes variables, para su uso en cirugia para tratar varias clases de heridas, llagas por presion, quemaduras y en todas las afecciones que requieran la asociacion de una curacion de herida y la accion protectora de una accion antibacterica y/o antifungica.

Description

BIOMATERIALES A BASE DE CARBOXIMETILCELULOSA SALIFICADA CON ZINC ASOCIADO CON DERIVADOS DE ACIDO HIALURONICO La presente invención describe nuevos biomateriales en forma de productos no tejidos, que comprenden carboximetilcelulosa salificada con zinc asociado con derivados de ácido hialurónico en porcentajes variables, para su uso en cirugía para tratar varias clases de heridas, en particular heridas infectadas llagas por presión, quemaduras y en todas las afecciones que requieran la asociación de una curación de herida y acción protectora con una acción antibactérica y/o antifúngica. La presente invención se refiere también al procedimiento para preparar los biomateriales mismos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION El tratamiento de heridas de varios grados de severidad, caracterizadas por infección o un alto riesgo de infección, sean abrasiones de la piel, quemaduras o úlceras de varias clases (úlceras diabéticas, llagas por presión, úlceras venosas o arteriales), se realiza mediante la aplicación de una serie de dispositivos médicos destinados a proteger la lesión, favorecer la curación de heridas, prevenir la necrosis, absorber cualquier exudado que puedan formar y en particular liberar sustancias con propiedades antimicróbicas/antíbactéricas/antífúngicas.

Los dispositivos comunes en el mercado contienen sustancialmente metal plata como agente antibactérico y, sobre la base de sus características, se puede subdividir en: Hidrocoloide (espumas adhesivas y no adhesivas): por ejemplo espumas de poliuretano asociadas con sustancias hidrocoloidales (gelatina, pectina), tales como Contreet® de COLOPLAST. Tabletas hipoalergénicas: tales como Katomed® con regulador de pH con metal plata micronizada de DEVERGE' M. & M. Malla de polietileno: tal como Acticoat® (Smith & Nephew), de múltiples capas, compuesta de un núcleo absorbente entre dos mallas de polietileno no adherentes, revestidas con plata nanocristalina. Polvos de espolvorear y soluciones salinas: tales como Katoxyn® (polvo a base de plata metálica micronizada) y Vulnopur® (solución salina que contiene plata), ambos de DEVERGE' M. & M. Vendajes de hidrofibra: tales como Aquacel Ag, vendajes hechos de Hydrofiber® (fibra de carboximetilcelulosa) y plata iónica. Los dispositivos que se han de usar se escogen de acuerdo con los requisitos que se han de satisfacer y dependiendo tanto del tipo de herida como de la cantidad de plata que se ha de liberar en la misma, es decir, el nivel de infección o el riesgo de infección. En realidad, algunas afecciones requieren la aplicación inmediata de una cantidad considerable de plata (lesiones infectadas severamente), otras requieren la liberación lenta pero constante de metal (llagas por presión con grosor parcial o completo). El uso de los vendajes a base de plata que se describen anteriormente está algo limitado en el sentido de que la plata da origen a fenómenos de sensibilización (véase Chronic exposure to Silver or Silver salts, Patty's Industrial Higiene and Toxicology, Vol. 2o, G.D. Clayton, F.E. Clayton, Eds. Wiley-lnterscience, New York, 3a ed., 1981 , pp 1881 - 1894), especialmente en casos que requieran fuertes dosis de metal para mantener a raya las infecciones bactéricas, particularmente en el caso de manchas bactéricas y/o fúngicas, tales como S. Aureus, E. coli, C. albicans, A. niger y P. aeruginosa. Los productos no tejidos a base de fibras de derivados de ácido hialuróníco, posiblemente en asociación con derivados de celulosa, se han descrito ya como biomateriales, particularmente con el propósito de formar coágulos. Véase por ejemplo el documento EP 618817 que no describe sin embargo materiales que contengan iones de metal con actividad antibactérica.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCION Las limitaciones y los inconvenientes de la técnica anterior se han superado con los bíomateriales que son la materia de la presente invención, obtenibles mediante la asociación de derivados de ácido hialurónico con caboximetilcelulosa (CMC) salificada con zinc, preparados mediante un procedimiento que proveen dispositivos caracterizados por bioadhesividad, elasticidad, propiedades absorbente, capacidades de biodegradación/de resorción y actividad antibactérica de espectro amplio. Los dispositivos de la presente invención permanecen en su sitio durante tiempo suficiente para permitir que los tejidos sobre los cuales se aplican para curar y, mediante absorción del exudado de la herida sin liberarlo, eviten la contaminación bactérica gracias a la presencia de zinc en sus fibras. Además, los vendajes son fáciles de manejar, pueden estar adaptados para ajustarse a heridas de cualquier forma y tamaño y son flexibles y por lo tanto cómodos de llevar puestos. De acuerdo con la presente invención, la CMC salificada con zinc está asociada con éxito con derivados de ácido hialurónico mediante un procedimiento que provee dispositivos médicos caracterizados por actividad micróbica y adecuados para el tratamiento de heridas de origen variado. Se ha sabido durante mucho tiempo que el zinc tiene actividad antibactérica y ha habido numerosas publicaciones sobre la materia, tales como: - Yamamoto et. Al. "Effect of lattice constant of zinc oxide on antibacterial characteristics" J. Mater Sci Mater Med. 2004, 15, 847-851 ; - Cho YH et. Al. "Antibacterial effect of intraprostatic zinc injection in a rat model of chronic bacterial prostatitis" Int J Antimícrob Agents. 2002, 19, 576-582; - G.M. Hill et. Al. "Effect of pharmacological concentrations of zinc oxide with or without the inclusión of an antibacterial agent on nursery pig performance"^} Anim. Sci 2001 , 79, 934-941 ; mientras que otras publicaciones describen su capacidad de realzar la curación de heridas: - Kerry A. et.al. "Zinc-containing wound dressings encourage autolytíc debridement of dermal burns" WOUNDS 1998, 10, 54-58; - Joe A. Vinson et. Al. "Age related differences in topical zinc absorption from different formulations: Implications for health and disease" J Geríatr Dermatol 1997, 5, 276-280. Además, el documento EP 526541 expone que el zinc enlazado a resinas de ácido es útil para el tratamiento de enfermedades de la cavidad oral. Se informa que dichas resinas tienen propiedades alergénícas muy bajas. Se ha documentado extensamente la toxicología del zinc (DRAFT TOXICOLOGICAL PROFILE FOR ZINC, DEPARTAMENTO DE E.U.

DE SALUD Y SERVICIOS HUMANOS, Agencia Pública de Servicios de Salud para Sustancias Tóxicas e Inscripción de Enfermedades, septiembre de 2003).

Estructura de la carboximetilcelulosa La carboximetilcelulosa es un derivado de celulosa hidrófila semisintética (sal de sodio del éter policarboxiletílico de celulosa) con alto grado de viscosidad y un PM que varía entre 21 ,000 y 500,000, que luce como un polvo granular o fibroso, blanco, amarillento o grisáceo, ligeramente higroscópico, inodoro e insípido. Los polímeros contienen unidades sustituidas de glucosa anhidra con la siguiente fórmula general: C6H702(OR1 )(OR2)(OR3), en donde R1 , R2, R3 pueden ser: — H, — CH2COONa, — CH2COOH. Se usa extensamente como agente en suspensiones y emulsiones, como excipiente para tabletas y como agente para aumentar la viscosidad en preparaciones farmacéuticas. Además de estar presente en numerosas preparaciones esteroidales inyectables, se administra por la vía oral como catártico y por las vías oral y rectal como componente en un alimento con bario usado como medio de contraste en rayos X. Se ha demostrado la presencia de IgE específica circulante para la carboximetilcelulosa y pacientes que experimentaron reacciones inmediatamente después de tomar esteroides que contenían este excipiente resultaron positivos en la prueba de punzadura de piel. Se ha conocido durante mucho tiempo el ácido hialurónico (HA).

Es un heteropolisacárido que consiste en residuos alternantes de ácido D-glucorónico y N-acetil-D-glucosamina. Tiene una cadena lineal y un peso molecular que varía entre 50,000 y 13 x 106 Da, de acuerdo con la fuente de la cual se haya extraído y/o el método usado para su preparación. Está presente en la naturaleza en los geles pericelulares, en la sustancia fundamental del tejido conjuntivo en organismos vertebrados (de los cuales es uno de los componentes principales), en el fluido sinovial de las articulaciones, el humor vitreo y el cordón umbilical. El HA es por lo tanto fundamentalmente importante para el organismo biológico, especialmente como soporte mecánico para las células de muchos tejidos, tales como la piel, los tendones, el músculo y el cartílago. A través de su receptor de membrana, CD44, el ácido hialurónico modula muchos procesos diferentes relacionados con la fisiología y la biología de las células, tales como la proliferación, la migración, la diferenciación y la angíogénesis de las células, además de sus otras funciones, tales como la hidratación de los tejidos y la lubricación de las articulaciones. Además, se ha demostrado que el HA desempeña un papel fundamental en el proceso de reparación de tejidos, tanto desde un punto de vista estructural (en la organización de la matriz extracelular y en la regulación de su hidratación) como en la estimulación de una extensa serie de procesos en los cuales interviene directa e indirectamente (formación de coágulos, actividad de fagocitos, proliferación de fibroblastos, neovascularizacíón, reepitelíalización, etcétera) (Weigel P. et al., J Theoretical Biol, 1986: 219-234; Abatangelo G. et al., J Surg Res, 1983, 35:410-416; Goa K. et al., Drugs, 1994, 47:536-566).

Se han explotado durante mucho tiempo estas propiedades extensamente reconocidas para la preparación de vendajes para heridas, ulceras y lesiones de la piel de origen variado. Se ha modificado químicamente el ácido hialurónico de varias maneras, dando polímeros que mantienen las características biológicas/farmacológicas del polímero de partida, pero son más fáciles de procesar y dan un mejor rendimiento mecánico. Particularmente adecuados para los propósitos de la presente invención son los derivados de ácido híalurónico obtenidos por: esterificación de alcoholes de la serie alifática, aralifática, cicloalifática, aromática, cíclica y heterocíclica, con un porcentaje de esterificacíón que puede variar entre 0.1 y 100%, preferiblemente entre 50 y 100%, de acuerdo con el tipo y la longitud del alcohol usado, mientras que el porcentaje restante del HA no esterificado se puede salificar con bases orgánicas y/o inorgánicas (HYAFF® - EP 216453 B1 ). Se han reconocido también las excelentes propiedades absorbentes de estos materiales (EP 999859 B1 ); perca rboxilación, obtenida mediante la oxidación del hidroxilo primario de la fracción de N-acetil-glucosamina con un grado de percarboxilación de entre 0 y 100% y preferiblemente entre 25 y 75% (HYOXX™- solicitud de patente No. EP 1339753). El ácido híalurónico usado en la presente invención se puede obtener de cualquier fuente, por ejemplo por extracción de crestas de gallo (EP 138572 B1 ), o por fermentación (EP 716688 B1 ), o por medios tecnológicos, y su peso molecular puede variar dentro de un intervalo de 400 a 3 x 106 Da. Los derivados descritos aquí están asociados con sal de zinc de CMC en porcentajes adecuados y, por medio de un procedimiento de extrusión en húmedo, se obtienen fibras de los mismos que se usan para hacer nuevos dispositivos médicos biocompatibles y biodegradables, altamente absorbentes, elásticos, flexibles y bíoadhesivos, que pueden estar adaptados para ajustarse a heridas de cualesquiera formas y tamaños y de varias clases, y tienen actividad antibactérica y/o antifúngica.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención se refiere a nuevos biomateriales y al procedimiento para su preparación, en forma de productos no tejidos, adecuados para la preparación de dispositivos médicos que se han de usar individualmente o en asociación con otros, en el tratamiento de heridas de varias clases (por ejemplo, abrasiones de piel, excoriaciones profundas, cortadas) o quemaduras que están infectadas o en riesgo de infectarse. Los biomateriales de la presente invención son completamente biocompatibles y biodegradables (no es necesario por lo tanto removerlos del sitio de aplicación), bioadhesívos, elásticos, flexibles, adaptables para ajustarse a la herida, altamente absorbentes y capaces de ejercer alta actividad antibactérica y/o antifúngica. Estas características. Se deben a los polímeros que constituyen los nuevos biomateriales, es decir CMC salificada con zinc y un derivado de ácido híalurónico, mezclados entre sí en porcentajes dados y procesados por extrusión en húmedo como se describe posteriormente. Como se dice antes, la CMC es capaz de formar hidrogeles cuando se carboxila celulosa a un grado de entre 15 y 40%; éstas son las condiciones ideales en las cuales obtener compuestos con excelentes propiedades para la absorción de soluciones acuosas fisiológicas. Se sabe bien que se ha modificado químicamente el ácido hialurónico de varias maneras para obtener polímeros que mantienen propiedades biológicas/farmacológicas del polímetro de partida, pero con mejores propiedades mecánicas (por ejemplo mejor resistencia y procedimiento y manipulación mas fáciles) y con biodegradabilídad ajustable. Los derivados particularmente preferidos de la presente invención, en el sentido que son fáciles de hidratar, son aquéllos obtenidos por: • esterificación con alcoholes de varias clases, particularmente con alcohol bencílico (HYAFF® 11), esterificado a un grado de entre 0.1 y 100%, preferiblemente entre 50 y 100%; • percaboxilación (HYOXX™) de la fracción de N-acet¡l-glucosamina con un grado de percaboxilación de entre 0 y 100% y preferiblemente entre 25 y 75%.

La hidratabilidad de la fracción de ácido hialurónico es fundamental para mantener un medio ambiente húmedo que favorezca la curación de heridas y que soporte la acción de la sal de zinc de CMC en el exudado absorbente, a fin de evitar las infecciones, la necrosis del nuevo tejido y la cicatrización anormal. El ácido hialurónico ejerce su acción biológica/farmacológica mediante la intervención sobre varios frentes. Es activo en efecto en la organización de la matriz extracelular y en la regulación de su hidratación y estimula una extensa serie de procesos en los cuales interviene directa o indirectamente (formación de coágulos, actividad de fagotitos, proliferación de fibroblastos, neovascularización, reepitelízación). Su presencia prolongada en el sitio debido a la baja bidegradabilidad de CMC realza estos efectos combinados. Si se desea, se pueden añadir polímeros adicionales, tales como ácido algínico, o sales del mismo, gelano y colágeno, a la CMC y los derivados de ácido hialuróníco. El procedimiento para la preparación del biomaterial de acuerdo con la invención permite un procesamiento eficiente de los polímeros, haciéndolos fácilmente adaptados a los requisitos industriales. Da por resultado también dispositivos médicos con características ventajosas en comparación con los productos conocidos actualmente disponibles. El procedimiento de la invención comprende la extrusión en húmedo de una mezcla de polímeros en condiciones adecuadas. En particular, el procedimiento comprende dos pasos separados: 1 - Preparación de la solución de los polímeros en un solvente aprótico polar (por ejemplo sulfóxido de dimetilo-DMSO). Se prepara la solución mezclando derivados de amonio de la CMC, tales como la sal de tetrabutilamonio o la sal de benzalconio con derivados de ácido hialuróníco en un porcentaje de 95 y 5% respectivamente, preferiblemente 90 y 10% y mas preferiblemente 80 y 20%. La CMC usada es una obtenible comercialmente, tal como Walocel® CTR 1000 (Bayer), mientras que el derivado de ácido hialurónico es un éster, preferiblemente un éster bencílico, esterificado a varios lados, por ejemplo 75% (HYAFF® 11 p75) o 100% (HYAFF® 11 ). Se puede añadir un polímetro adicional a dicha mezcla, por ejemplo ácido algínico o gelano en formas salificadas así como tetrabutilamonio o benzalconio, en porcentajes que varían de 5 a 50% en peso de la mezcla de CMC/HYAFF®. El gelano es obtenible comercialmente de CP Kelco US (goma gelano Kelcogel CG-LA,), Mientras que el ácido algínico, particularmente alginato de sodio, es fabricado por PRONOVA. Se disuelven luego los productos en concentraciones de entre 100 y 140 mg/ml en un solvente apolar aprótico (DMSO). 2 - Extrusión Se coloca la solución en un tanque y se abastece mediante una bomba dosificadora a una tobera hilandera de extrusión en húmedo con 3000 agujeros, cada una midiendo 65 µm de diámetro.

La extrusión tiene lugar en un baño de coagulación que contiene cloruro de zinc o bromuro de zinc en una solución de alcohol al 5-10% (etanol absoluto). La masa de las hebras que emerge de la tobera hilandera es transportada por rodillos a dos baños de enjuague sucesivos que contienen el etanol absoluto solamente. Al final de la etapa de enjuague, se seca la masa de las hebras en una corriente de aire caliente. Se cargan las fibras así obtenidas para obtener un producto no tejido. Las fibras obtenidas mediante dicho procedimiento tienen un diámetro que varía entre 10 y 60 µm, mientras que el producto no tejido puede pesar entre 20 y 500 g/m2 y tener un ancho de entre 0.2 y 5 mm. Se puede esterilizar el material en la etapa de empacamiento mediante los métodos normales (por ejemplo rayos ?). Se informa a continuación acerca de ejemplos detallados para la preparación de fibras de la invención.

EJEMPLO 1 Preparación de un producto no tejido compuesto de una mezcla de sal de zinc de CMC (90%) v HYAFF® 11 p75 (10%) Se mezcló 9 g de sal de tetrabutilamonio de CMC, obtenida por intercambio de iones sobre una resina sulfónica fuerte Dowex M 15, cargada con hidróxido de tetrabutilamonio, partiendo de CMC Walocel® CRT 1000 con 1 g de HYAFF® 11 p75 en forma de polvo y se solubilizó con 100 ml de DMSO. Una vez que hubo estado completa la solubilización, se colocó la solución en un tanque y se abasteció mediante una bomba dosificadora a una tobera hilandera de extrusión en húmedo con 3000 mil agujeros, cada uno midiendo 65 µm. La extrusión tuvo lugar en un baño de coagulación que contenía cloruro de zinc en una solución de alcohol de etanol absoluto al 5%. La masa de hebras que emergía de la tobera hilandera fue transportada por rodillos a dos baños de enjuague sucesivos que contenían etanol absoluto y se secaron luego en una corriente de aire caliente. Se cardaron las fibras así obtenidas para obtener un producto no tejido. El producto no tejido final era de 2 mm de grosor y se cortó en piezas de 10 x 10 cm y se esterilizó con rayos ?.

EJEMPLO 2 Preparación de un producto no tejido compuesto de una mezcla de sal de zinc de CMC (95%) v HYAFF® 11 p75 (5%) Se mezcló 19 g de sal de benzalconio de CMC, obtenida por intercambio de ¡ones con cloruro de benzalconio, partiendo de CMC Walocel® CRT 1000, con 1 g de HYAFF® 11 p75 en forma de polvo y se solubilizó con 160 mi de DMSO. Una vez que hubo estado completa la solubilización, se colocó la solución en un tanque y se abasteció mediante una bomba dosificadora a una tobera hilandera de extrusión en húmedo con 3000 mil agujeros, cada uno midiendo 65 µm. La extrusión tuvo lugar en un baño de coagulación que contenía cloruro de zinc en una solución de alcohol de etanol absoluto al 7%. La masa de hebras que emergía de la tobera hilandera fue transportada por rodillos a dos baños de enjuague sucesivos que contenían etanol absoluto y se secaron luego en una corriente de aire caliente. Se cardaron las fibras así obtenidas para obtener un producto no tejido. El producto no tejido final era de 1 mm de grosor y se cortó en piezas de 5 x 5 cm y se esterilizó con rayos ?.

EJEMPLO 3 Preparación de un producto no tejido compuesto de una mezcla de sal de zinc de CMC (95%) y HYOXX(R) (5%) Se mezcló 9.5 g de sal de benzalconio de CMC, obtenida por intercambio de iones con cloruro de benzalconio, partiendo de CMC Walocel® CRT 1000 con 0.5 g de HYOXX® en forma de polvo y se solubilizó con 100 ml de DMSO.

Una vez que hubo estado completa la solubilización, se colocó la solución en un tanque y se abasteció mediante una bomba dosificadora a una tobera hilandera de extrusión en húmedo con 3000 mil agujeros, cada uno midiendo 65 µm. La extrusión tuvo lugar en un baño de coagulación que contenía cloruro de zinc en una solución de alcohol de etanol absoluto al 5%. La masa de hebras que emergía de la tobera hilandera fue transportada por rodillos a dos baños de enjuague sucesivos que contenían etanol absoluto y se secaron luego en una corriente de aire caliente. Se cardaron las fibras así obtenidas para obtener un producto no tejido. El producto no tejido final era de 1 mm de grosor y se cortó en piezas de 5 x 5 cm y se esterilizó con rayos ?.

EJEMPLO 4 Preparación de producto no tejido compuesto de una mezcla de sal de zinc de CMC (90%) v HYAFF® 11 p75 (10%) v ácido algínico (40%) sobre la mezcla de CMC/HYAFF® Se mezcló 9 g de sal de tetrabutilamonio de CMC, obtenida por intercambio de iones sobre resina sulfónica fuerte Dowex M 15, cargada con hidróxido de tetrabutilamonio, partiendo de CMC Walocel® CRT 1000 con 1 g de HYAFF® 11 p75 en forma de polvo y se solubilizó con 100 ml de DMSO.

Se solubilizó por separado 4 g de sal de benzalconio de ácido algíníco, obtenida por intercambio de ¡ones con cloruro de benzalconio, en 40 ml de DMSO y añadida a la mezcla de CMC/HYAFF®, obteniendo así una mezcla añadida con ácido algíníco en una cantidad de 40% sobre el peso de la mezcla de CMC/HYAFF® Se colocó la masa resultante en un tanque y se abasteció mediante una bomba dosificadora a una tobera hilandera de extrusión en húmedo con 3000 agujeros, cada uno midiendo 65 µm. La extrusión tuvo lugar en un baño de coagulación que contenía cloruro de zinc en una solución de alcohol de etanol absoluto al 5%.

EJEMPLO 5 Preparación de producto no tejido compuesto de una mezcla de sal de zinc de CMC (80%) y HYAFF® 11 p75 (20%) y gelano (25%) sobre la mezcla de CMC/HYAFF® Se mezcló 8 g de sal de tetrabutilamonio de CMC, obtenida por intercambio de iones sobre resina sulfónica fuerte Dowex M 15, cargada con hidróxido de tetrabutilamonio, partiendo de CMC Walocel® CRT 1000 con 2 g de HYAFF® 11 en forma de polvo y se solubilizó con 100 ml de DMSO. Se solubilizó por separado 2.5 g de gelano, obtenido por intercambio de iones sobre resina sulfónica fuerte Dowex M 15, cargada con hidróxido de tetrabutilamonio, partiendo de Kelcogel CG-LA, en 25 ml de DMSO y añadida a la mezcla de CMC/HYAFF®, obteniendo así una mezcla añadida con gelano en una cantidad de 25% sobre el peso de la mezcla de CMC/HYAFF® Se colocó la masa resultante en un tanque y se abasteció mediante una bomba dosificadora a una tobera hilandera de extrusión en húmedo con 3000 agujeros, cada uno midiendo 65 µm. La extrusión tuvo lugar en un baño de coagulación que contenía cloruro de zinc en una solución de alcohol de etanol absoluto al 5%. Se sometió cada uno de los productos no tejidos así preparados a pruebas específicas para evaluar la cantidad de zinc tanto contenida como liberada por las fibras de CMC y para demostrar qué tan eficaz es el zinc en la inhibición del crecimiento de algunas especies bactéricas y fúngicas. Se describen las pruebas a continuación.

Evaluación del contenido de iones de zinc en el producto no tejido de sal de zinc de CMC con HYAFF® 11 p75 en una mezcla al 95/5, después del tratamiento en plasma artificial a 37°C El producto no tejido obtenido como se describe en el ejemplo 2 se sometió a aprueba en cuanto a la cinética de liberación del ion de zinc presente en la fibra, medíante el tratamiento con plasma artificial a una temperatura de 37°C del intervalo fijados de 2, 4, 6, 24, 48 y 72 horas. Se colocó 100 mg de producto no tejido en 6 frascos de vidrio estériles de 10 ml y se trataron luego con 5 ml de plasma artificial. Se mantuvieron todos los frascos a una temperatura de 37°C durante los intervalos de tiempo fijados. Después del período de incubación, se filtró cada muestra a través de un filtro de 0.2 µm y se secó la solución por congelación. Para el tiempo 0, se filtró el plasma artificial solamente a través de un filtro de 0.2 µm y se secó por congelación. La cantidad de zinc liberada durante el experimento está mostrada en la figura 1. Se liberó zinc del producto no tejido convenientemente durante las primeras 2 horas en contacto con el plasma artificial (7.6% con respecto a un total del 14% que es el porcentaje de iones de zinc presentes en las fibras), y luego progresivamente durante las siguientes 48-72 horas hasta que se haya liberado todo el zinc.

Análisis por difusión de agar de la actividad inhibitoria de un producto no tejido de sal de zinc de CMC con HYAFF® 11 p75 en una mezcla a 90/10 El producto no tejido obtenido de acuerdo con el ejemplo 1 fue sometido a prueba en cuanto a su actividad antibactérica contra manchas de P. aeruginosa; E. coli; S. aureus; C. alvans, A. niger. Como control negativo, se usó Walocel® CRT 1000 como CMC de partida. Se repitió el procedimiento, en condiciones asépticas, para cada mancha micróbica.

Se prepararon dos cajas de Petri, cada una con una capa de 15 ml de medio de agar solidificado, específico e incompleto, añadido con 5 ml de medio nutriente específico fusionado a 45°C, inoculado previamente con el microorganismo de prueba para obtener una concentración en el medio de aproximadamente 104 UFC/ml. Se dejó solidificar el medio. Se practicaron tres pozos, de 10 mm de diámetro, en cada caja de Petri. Se usó una caja para la muestra y la otra para el control negativo. Se prepararon la muestra de prueba y el control negativo como sigue: se disolvió 0.6 g en 9 ml de agua destilada estéril para dar una mezcla de consistencia gelatinosa. Los pozos practicados en las cajas de Petri se llenaron hasta el borde con alícuotas de esta mezcla (aproximadamente 10 µl). En paralelo con el procedimiento de prueba descrito anteriormente, se sometió a prueba cada mancha micróbica en cuanto a fertilidad del medio mediante la preparación de una caja de Petri con una capa menor a 15 ml de medio de agar específico e incompleto y una capa sobre 5 ml de medio nutriente específico inoculado previamente con el microorganismo de prueba, a fin de obtener una concentración de aproximadamente 104 UFC/ml en el medio. Las cajas dispuestas de esta manera se incubaron a 30°C±1 °C durante 48-72 horas.

Al final del pepodo de incubación, se inspeccionaron las cajas visualmente en cuanto a la presencia de halos inhibidores alrededor de los pozos. Además, se evaluó el desarrollo micróbico en las cajas preparadas para controlar la fertilidad del medio. Se observó un halo inhibidor evidente en las cajas que contenían muestras de S. aureus, E. coli, C. albicans y A. niger, mientras que se observó un halo más limitado en la caja inoculada con P. aeruginosa. No se detectó algún halo de inhibición en alguna de las cajas de control negativo. Se observó el desarrollo micróbico en todas las cajas que sometían a prueba la fertilidad del medio. En conclusión, en las condiciones de prueba descritas anteriormente, el producto de prueba resultó tener excelente actividad bactericida hacia las manchas de S. aureus y E. coli, actividad bacteriostática más moderada hacia P. aeruginosa y actividad fungicida hacia A. niger y C. albicans.

Claims (17)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Biomateriales en forma de producto no tejido constituido por una asociación de derivados de ácido hialurónico con carboximetilcelulosa (CMC) solidificada con zinc.

2.- Los biomateriales de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizados además porque los derivados de ácido hialurónico son esteres con alcoholes.

3.- Los biomateriales de conformidad con la reivindicación 2, caracterizados además porque los derivados de ácido hialurónico son esteres bencílicos.

4.- Los biomateriales de conformidad con la reivindicación 2 ó 3, caracterizados además porque tienen un porcentaje de esterificación de entre 0.1 y 100%.

5.- Los biomateriales de conformidad con la reivindicación 4, caracterizados además porque tienen un porcentaje de esterificación de entre 50 y 100%.

6.- Los biomateriales de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizados además porque los derivados de ácido hialuróníco son derivados percarboxilados de la fracción de N-acetil-glucosamina.

7 '.- Los bíomateriales de conformidad con la reivindicación 6, caracterizados además porque tienen un grado de percarboxilación de entre 25 y 75%.

8.- Los biomateriales de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizados además porque la carboxímetilcelulosa tiene un grado de carboxilación de entre 15 y 40%.

9.- Los biomateriales de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizados además porque el porcentaje en peso de la carboximetilcelulosa es de entre 95 y 5% el del derivado de ácido hialurónico.

10.- Los biomateriales de conformidad con la reivindicación 9, caracterizados además porque el porcentaje en peso de la carboximetilcelulosa es de entre 90 y 10% el del derivado de ácido hialurónico.

11.- Los biomateriales de conformidad con la reivindicación 10, caracterizados además porque el porcentaje en peso de la carboximetilcelulosa es de entre 80 y 20% el del derivado de ácido hialurónico.

12.- Los biomateriales de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-11 , caracterizados además porque comprenden adicionalmente un polímero seleccionado entre ácido algínico o sales del mismo, gelano y colágeno.

13.- Un procedimiento para la preparación de biomateriales como los que se reclaman en las reivindicaciones 1-12, el cual incluye: a) preparar una solución de sales de amonio de carboximetílcelulosa y del derivado de ácido hialurónico y opcionalmente de un polímero adicional como el que se reclama en la reivindicación 12 en un solvente apolar aprótico; b) extruir en húmedo en una tobera hilandera en un baño de coagulación que contiene cloruro de zinc o bromuro de zinc en una solución de alcohol de etanol al 5-10%; c) enjuagar las hebras obtenidas por extrusión en etanol; d) secar en una corriente de aire caliente; e) cardar las hebras secadas.

14.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque las sales de carboximetilcelulosa son sales de tetrabutilamonio o benzalconio.

15.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 13 ó 14, caracterizado además porque el solvente es sulfóxido de dimetilo.

16.- Fibras obtenibles mediante el procedimiento que se reclama en las reivindicaciones 13 a 15, que tienen un diámetro que varía entre 10 y 60 µm.

17.- El uso de biomateriales como los que se reclaman en las reivindicaciones 1-12, para la preparación de utensilios o dispositivos para el tratamiento de heridas de origen diverso y quemadas.