LV10458B - 4,13-dioxabicyclo£8.2.1.|tridecenone derivatives, method and intermediate products for preparation thereof and drugs containing that compounds - Google Patents

Description

LV 10458 4, 13-Dioxabicyclo[8.2.1]tridecenon-Derivate, Verfahren und Zwischenprodukte zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel.

Die vorliegende Erfindung betrifft neue N-substituierte [2R,3R(2R',3R'),6R,7S, 8S,9R,10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2' -yl) -7-[(2, 6-dideoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribo-hexpyranosyl) -oxy]-9-[(3,4,6-trideoxy-3-amino-P-D-xylo-hexopyranosyl) -oxy] -2,6,8,10,12-pentamethyl-4,13-dioxabicyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on-Verbindungen mit motilin-agonistischen Eigenschaften und deren Sāureadditionssalze sowie diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zubereitungen und Verfahren und Zwischenpro-dukte zur Herstellung dieser Verbindungen. Die erfindungsge-māfien Verbindungen sind ringverengte N-Desmethyl-N-isopropyl-Derivate des Erythromycin A.

Das Antibiotikum Erythromycin A besitzt bekanntermafien neben seinen antibiotischen Wirkungen auch fūr Antibiotika uner-wunschte gastrointestinale Nebenwirkungen, u.a. eine starke Vermehrung der Kontraktionsaktivitāt im Magen-Darm-Bereich mit Magen- und Darmkrāmpfen, Ūbelkeit, Erbrechen und Diarrhoe.

Es hat mehrere Versuche gegeben, das Erythromycin A so abzuwan-deln, dafi Derivate erhalten werden, in denen die antibiotische Wirkung praktisch nicht mehr vorhanden ist, jedoch eine die Motilitāt des gastrointestinalen Traktēs beeinflussende Wirkung erhalten ist. Aus der EP-Patentanmeldung 0 349 100 A2 sind pharmazeutische Zusammensetzungen bekannt, welche als gastro-prokinetischen Wirkstoff ein ringverengtes Erythromycin-A-Deri-vat oder dessen quartāre Salze enthalten, und welche die Magen-motilitāt durch cholinerge Mechanismen verstārken. 2

Der vorliegenden Erfindung liegt, die Aufgabe zugrunde, neue ringverengte Derivate des Erythromycin A ohne Antibiotikawir-kung und mit gunatiger Wirkung auf die Motilitāt des gastrointestinalen Traktea zu entwickeln.

Ea wurde nun gefunden, daJi die neuen ringverengten N-Desmethyl-N-isopropyl-Derivate dea Erythromycin A selektive motilin-agoni3tische Eigenachaften aufweiaen und die Motilitāt dea gastrointestinalen Traktea in gunstiger Weise stimulieren und den Toņus des unteren Oeaophagus Sphincter verstarkende Wirkun-gen zeigen. Aufgrund ihrea Wirkungsprofila eignen aich die erfindungsgemāfien Substanzen zur Behandlung von Motilitātssto-rungen im gastrointestinalen Trakt und zeichnen sich dabei durch eine gute Vertrāglichkeit aus.

Die vorliegende Erfindung betrifft daher neue [2R, 3R(2R', 3R' ) , 6R, 7S, 8S, 9R,10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2'-yl)-2,6, 8,10,12-pentamethyl-4,13-dioxabicyclo [8.2.1] tridec-12-en-5-on-Derivate der allgemeinen Formel I (s. Formel I) worin R1 Methyl oder Waaserstoff bedeutet, und deren stabile und physiologisch vertrāgliche Sāureadditionssalze.

Als gunstig erweist sich insbesondere die Verbindung der Formel I, worin R1 Methyl bedeutet.

Die Verbindungen der Formel I konnen erhalten werden, indēm man auf an sich bekannte Weise in [2R,3R(2R,,3R')/6Rf7S,8S,9R,10R]-3- (2' , 3' -Dihydroxypent-2' -yl) -2,6,8,10,12-pentaunethyl-4,13-dioxabicyclo [8.2.1] tridec-12-en-5-on-Derivate-Verbindungen der allgemeinen Formel II (s. Formel II) 3 LV 10458 worin Rl obige Bedeutung besitzt, einen Isopropylrest einfuhrt und gewūnschtenfalls in die erhaltene Verbindung der Formel I, worin R1 Wasserstoff bedeutet, einen Methylrest R1 einfuhrt oder in der erhaltenen Verbindung der Formel I, worin R1 Methyl bedeutet, den Methylrest R1 abspaltet, und gevrūnschtenf alls freie Verbindungen der Formel I in ihre stabilen Sāureaddi-tionssalze ūberfūhrt oder die Sāureadditionssalze in die freien Verbindungen der Formel I ūberfūhrt.

Zur Einfūhrung des Isopropylrestes konnen die Verbindungen der Formel II auf an sich bekannte Weise alkyliert werden. Vor-zugsweise wird die Alkylierung als reduktive Alkylierung auf an sich bekannte Weise durch Umsetzen der Verbindungen der Formel II mit Aceton unter reduzierenden Bedingungen durchgefūhrt. Beispielsweise kdnnen die Verbindungen der Formel II mit Aceton in Gegenwart eines Reduktionsmittels, beispielsweise einer kom-plexen Borhydridverbindung wie Natriumcyanoborhydrid, Natrium-triacetoxyborhydrid oder Natriumborhydrid, umgesetzt werden. Gewūnschtenfalls kann die Alkylierung, insbesondere derjenigen Verbindung der Formel II, worin R1 Methyl bedeutet, auch durch Umsetzen mit einem Isopropylhalogenid, insbesondere Isopropyl~ jodid, oder Isopropylsulfat oder einem Isopropylsulfonsāure-ester erfolgen. ZweckmaJ5igerweise wird die Alkylierung in einem unter den Reaktionsbedingungen inerten orgānischen Ldsungsmit-tel durchgefūhrt. Fūr die reduktive Alkylierung kann beispiels-weise ein Ūberschufi an Aceton als Ldsungsmittel dienen. Ferner eignen sich als Losungsmittel auch cyclische Ether, wie Tetra-hydrofuran oder Dioxan, aromatische Kohlenwasserstoffe wie Toluol oder auch niedere Alkohole. Die Alkylierung kann bei Temperaturen zwischen Raumtemperatur und Siedetemperatur des Ldsungsmittels erfolgen. Bei der Alkylierung mit einem Isopro-pylderivat, beispielsveise einem Isopropylhalogenid wie Isopro-pyljodid, wird zweckmāBigerweise in Gegenwart einer Base wie beispielsveise einem Alkalimetallcarbonat oder einem tert. organischen Amin gearbeitet. 4

Die erhaltene Verbindung der Formel I, worin Rx Wasserstoff bedeutet, kann gevriinschtenf alls nachtrāglich in an sich be-kannter Weise zu der entsprechenden N-Methyl-Verbindung alky-liert werden. Die Alkylierung kann auf an sich bekannte Weise durch Umsetzen mit einem Methylhalogenid oder als reduktive Alkylierung durch Umsetzen mit Formaldehyd unter reduzierenden Bedingungen erfolgen und kann beispielsweise bei den zur Alky-lierung der Verbindungen der Verbindungen der Formel II ange-gebenen Bedingungen durchgefiihrt werden.

Aus der Verbindung der Formel I, worin Rl Methyl bedeutet, kann der Methylrest R1 gewunschtenfalls nachtrāglich abgespalt-en werden. Die Demethylierung kann auf an sich bekannte Weise durch Behandeln der Verbindung mit einem Halogen, insbesondere Jod und/oder Brom, in einem inerten Losungsmittel in Gegenwart einer geeigneten Base erfolgen. Als Basen eignen sich bei-spielsweise Alkalimetallhydroxide und Alkalimetallsalze von schwachen organischen Sāuren. Die Demethylierung wird vorzugs-weise in einem schwach alkalischem pH-Bereich von vorzugsweise unter 9 durchgefūhrt, um Hydrolysenebenreaktionen zu vermeiden.

Die Verbindungen der Formel I kbnnen auf an sich bekannte Weise aus dem Reaktionsgemisch isoliert und gereinigt werden. Sāure-additionssalze konnen in iiblicher Weise in die freien Basen ūberfuhrt werden und diese gevmnschte-nfalls in bekannter Weise in pharmakologisch vertrāgliche Sāureadditionssalze uberfūhrt werden. Zur Vermeidung von Hydrolysenebenreaktionen ist es zweckmāBig, zur Salzbildung nur āquivalente Mengen Sāuren zu verwenden.

Als pharmakologisch annehmbare Sāureadditionssalze der Verbindungen der Formel I eignen sich beispielsweise deren Salze mit anorganischen Sāuren, z.B. Kohlensāure, Halogenwasserstoff-sāuren, insbesondere Chlorwasserstoffsāure, oder mit organischen Sāuren, beispielsweise niederen aliphatischen Mono- oder 5 LV 10458

Dicarbonsāuren wie Maleinsāure, FumarsMure, Milchs&ure, Wein-sāure oder Essigsāure.

Die Ausgangsverbindungen der Formel II sind in der Literatur bisher noch nicht beschrieben worden. Erfindungsgemāfi stellen die Verbindungen der Formel II vrertvolle Zwischenprodukte zur Herstellung von pharmakologisch aktiven Verbindungen, bei-spielsweise Verbindungen der Formel I, dar.

Die Verbindungen der Formel II konnen ausgehend von Erythromy-cin A der Formel III (siehe Formel III) nach an sich bekannten Methoden erhalten werden. So kann das Erythromycin A zunāchst auf an sich bekannte Weise, beispiels-weise nach dem aus der DE-OS 21 54 032 bekannten Verfahren, mono- oder didemethyliert werden durch Umsetzung mit Halogen, bevorzugt Jod, in einem inerten Losungsmittel in Gegenwart einer geeigneten Base. Als Basen eignen sich beispielsweise Alkalimetallhydroxide, Alkalimetallcarbonate und Alkalimetall-salze von schwachen Carbonsāuren wie beispielsweise Alkalime-tallacetate oder -propionate. Vorzugsweise werden 1 bis 5 Aqui-valente des Halogēns bezogen auf die Menge an zu demethylieren-der Erythromycin-Verbindung eingesetzt. Die Menge der Base wird vorzugsweise so gewāhlt, dafi ein pH-Wert im Bereich von 5 bis 9 gewāhrleistet ist, um Hydrolyse- oder Alkoholyse-Nebenreak-tionen zu vermeiden. Als Losungsmittel eignen sich Methanol, cyclische Ether wie Dioxan oder Tetrahydrofuran, Dimethylfor-mamid oder Mischungen der genannten Losungsmittel mit Wasser. Die Demethylierung wird zweckmāBigerweise bei Temperaturen zwi-schen Raumtemperatur und 50 °C durchgefūhrt. Die Reaktion kann durch Bestrahlung mit Licht, z.B. Licht mit einer WellenlšLnge von iiber 290 nm aus einer Quecksilberniederdrucklampe mit einem Filter aus Quarz oder hitzebestāndigem Glas (z.B. Pyrex R, ge-fdrdert werden. Die Reaktion erzeugt das monodemethylierte oder 6 didemethylierte Produkt vorwiegend in Abhāngigkeit von der Menge an verwendetem Halogen. Bei Verwendung von einem Aquiva-lent Halogen wird bevorzugt das monodemethylierte Produkt er-halten und bei Verwendung von 2 oder mehr Āguivalenten Halogen wird bevorzugt das didemethylierte Produkt erhalten. Gevriinsch-tenfalls kann zur Herstellung des didemethylierten Produktes auch von bereits monodemethyliertem Produkt ausgegangen werden.

Das mono- oder didemethylierte Erythromycin A kann auf an sich bekannte Weise durch milde Sāurebehandlung in ein entsprechen-des mono- oder didemethyliertes 8,9-Anhydroerythromycin-A-6,9-hemiketal der allgemeinen Formel IV (s. Formel IV) worin R1 Wasserstoff oder Methyl bedeutet, ūberfuhrt werden.

Die Hemiketalbildung kann beispielsweise durch Behandeln mit Eisessig oder verdūnnter Mineralsāure bei Temperaturen zvischen Raumtemperatur und ca. 50 °C erfolgen.

In den Verbindungen der Formel IV kann auf an sich bekannte Weise durch intramolekulare Translactonisierung eine Ringveren-gung des 14-gliedrigen Lactohringes des Erythromycin-Gerustes zu einem 12-gliedrigen Lactonring unter Bildung der entspre-chenden Verbindungen der Formel II durchgefūhrt werden. Hierzu werden die Verbindungen der Formel IV auf an sich bekannte Weise in einem niederen Alkohol in Gegenwart einer Base er-hitzt, beispielsweise auf Temperaturen zwischen 40 °C und 70 °C, vorzugsweise Siedetemperatur des Reaktionsgemisches. Als Basen eignen sich insbesondere Alkalimetallcarbonate, aber auch organische Basen wie tertiāre Amine, insbesondere tertiāre Nie-deralkylamine. Bei dieser Ringverengung āndert sich die Konfi-guration der Chiralitātszentren nicht. 7 LV 10458

Die neuen Verbindungen der Formel I und ihre physiologisch ver-trāglichen Sāureadditionssalze besitzen interessante pharmako-logische Eigenschaften, insbesondere die Motilitāt des gastrointestinalen Traktēs stimulierende motilin-agonistische Eigenschaften. Sie sind frei von antibiotischen Wirkungen und besitzen eine hohe selektive Affinitāt zu Motilin-Rezeptoren, wāhrend sie in motilin-agonistisch wirksamen Dosisbereichen keine praktisch relevante Affinitāt zu anderen Rezeptoren im gastrointestinalen Trakt wie Adrenalin-, Acetylcholin-, Histamin-, Dopamin- oder Serotonin-Rezeptoren zeigen.

Um eine geregelte Verdauung der eingenommenen Nahrung zu . gewāhrleisten, wirken im gesunden Zustand das autonome Nerven-system und Hormone des gastrointestinalen Traktēs zusammen, um eine geregelte Kontraktionstātigkeit des gastrointestinalen Traktēs nicht nur direkt nach Nahrungsaufnahme, sondern auch bei leerem gastrointestinalen Trakt zu erzeugen. Motilin ist ein bekanntes gastrointestinales Peptidhormon, welches die Motilitāt des gastrointestinalen Traktēs stimuliert und eine koordinierte Motilitāt im gesamten gastrointestinalen Trakt im niichternen Zustand sowie nach Nahrungsaufnahme induziert.

Die Verbindungen der Formel I zeigen motilin-artige physiologi-sche Wirkungen, indēm sie aļs Agonisten fur Motilinrezeptoren wirksam werden. So zeigen die Verbindungen der Formel I aus-geprāgte stimulierende Wirkungen im Magen-Darm-Bereich und am unteren Speiserohrensphincter. Sie bewirken insbesondere eine Beschleunigung der Magenentleerung und eine langanhaltende Erhohung des Ruhe-Tonus des Oesophagus Sphincter. Aufgrund ihres motilin-artigen Wirkungsprofils eignen sich die Substan-zen zur Behandlung von Krankheitszustānden, welche mit Motili-tātsstorungen im gastrointestinalen Trakt und/oder Ruckflufi von Speisebrei aus dem Magen in die Speiserohre verbunden sind. So sind die Verbindungen der Formel I z.B. indiziert bei Gastro-paresis verschiedensten Ursprungs, Storungen der Magenentleerung und gastroosophagalem Ruckflufi, Dyspepsie, Anomalien der 8

Colonmotilitāt, wie sie z.B. bei dem irritablen Colon (= irri-table bowel syndrom, abgekiirzt IBS) auftreten und postopera-tiven Motilitatsstdrungen, z.B. DarmverschluB (Ileus).

Die gastrointestinal wirksamen Eigenschaften der Verbindungen der Formel I lassen sich in pharmakologischen Standardtest-methoden in vitro und in vivo nachweisen.

Beschreibung der Testmethoden. 1. Bestimmung des Bindungsvermogens der Testssubstanzen an Motilin-Rezeptoren.

Die Affinitāt der Verbindungen der Formel I an Motilin-Rezeptoren wird in vitro an einer Fraktion eines Gewebehomogenats aus dem Kaninchenantrum gemessen. Bestimmt wird die Verdrāngung von radioaktiv markiertem jodiertem Motilin aus der Motilin-Rezeptor-Bindung durch die Testsubstanzen.

Die Rezeptor-Bindungsstudien werden nach einer Modifikation der Methode von Borman et al. (Regulatory Peptides 1_5 (1986), 143 -153) durchgefuhrt. Zur Herstellung des 125Jod-markierten Moti-lins wird Motilin auf an sich bekannte Weise, z.B. analog der von Bloom et al. (Scand. J. Gastroenterol. 1.1 (1976) 47 - 52) beschriebenen Methode enzymatisch unter Verwendung von Lacto-peroxidase jodiert.

Zur Gewinnung der in dem Tēst verwendeten Gewebehomogenatfraktion aus dem Kaninchenantrum wird das von Schleimhāuten be-freite Antrum zerkleinert und im 10-fachen Volumen einer kalten Homogenisierungspufferlosung (50 mM Tris-HCl-Puffer, 250 mM Sucrose, 25 mM KC1, 10 mM Mg2Cl2, pH 7,4) mit Zusatz von Inhi-bitoren (1 mM Jodacetamid, 1 μΜ Pepstatin, 0,1 mM Methylsul-fonylfluorid, 0,1 g/1 Trypsininhibitor, 0,25 g/1 Bactracin) mit einem Homogenisator 15 sec. bei 1500 Umdrehungen pro Minūte homogenisiert. Das Homogenisat wird dann 15 Minuten lang bei 1000 g zentrifugiert, der erhaltene Rūckstand wird viermal mit 9 LV 10458

Homogenisierungspufferlosung gewaschen und schliefllich in 0,9 %-iger Natriumchloridlosung (in einem der 5-fachen Gewichtsmenge des Antrums entsprechendem Volumen) resuspen-diert. Die so erhaltene Gewebefraktion, welche als "rohe Mem-branzubereitung" bezeichnet wird, wird fiir den Tēst eingesetzt. Fūr den Bindungsversuch werden 200 μΐ der rohen Membranfraktion (0,5 - 1 mg Protein) in 400 μΐ einer PufferlSsung A (50 mM Tris-HCl-Puffer, 1,5 % BSA, 10 mM MgCl2, pH 8,0) mit 100 μΐ jodiertem Motilin in Pufferlosung B (10 mM Tris-HCl-Puffer, 1 % BSA, pH 8) verdūnnt (Endkonzentration 50 pM) 60 min. bei 30 °C inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 3,2 ml kalter Pufferldsung B gestoppt und gebundenes und nichtgebundenes Motilin werden durch Zentrifugieren (1000 g, 15 Minuten) von-einander getrennt. Der nach dem Zentrifugieren als Peliet erhaltene Rūckstand wird mit Pufferlosung B gewaschen und in einem Gamma-Zāhler ausgezāhlt. Die Verdrāngungsstudien werden durch Zugabe steigender Mengen der zu testenden Substanz in das I'nkubationsmedium durchgefuhrt. Als Testsubstanzlosungen werden wāflrige Losungen eingesetzt, welche durch geeignete Verdiinnung von 60 x 10'1 2 3-molaren wāfirigen Stammldsungen hergestellt wer-den. In Wasser schwer ldsliche Testsubstanzen werden zunāchst in 60 %-igem Athanol gelost und diese Losung wird mit soviel Wasser verdūnnt, daB in der zu testenden Ldsung die Athanol-konzentration 1,6 Vol.-% nicht ūbersteigt. Aus den erhaltenen Meūdaten wird als IC50 der jeweiligen Testsubstanz diejenige Konzentration bestimmt, welche eine 50 %-ige Hemmung der spe-zifischen Bindung des jodierten Motilin an die Motilin-Rezep-toren bewirkt. Aus dieser wird der entsprechende pIC50-Wert berechnet. Nach der vorstehenden Methode wurde fūr die Substanz des Beispiels 1 ein pIC50-Wert von 8,32 bestimmt. 1

In-vivo-Bestimmung des Einflusses der Substanzen auf die Magenentleerungsgeschwindigkeit. 2

Die Bestimmung der Magenentleerungsgeschvrindigkeit wird an 3

Beagle-Hunden durchgefuhrt, welchen vor dem Versuch operativ 10 eine Oesophagus-Fistel angelegt und eine Duodenal-Kanūle implantiert wurden. 15 min. nach duodenaler Applikation der Testsubstanzen werden den nūchternen wachen Hunden 285 g einer halbfesten kalorischen Testmahlzeit ūber die Oesophagus-Fistel verabreicht. Der vom Magen entleerte Inhalt wird in 15-Minuten-Intervallen ūber die Duodenal-Kanūle aufgefangen. Aus den auf-gefangenen Mengen an Mageninhalt wird diejenige Zeitspanne berechnet, innerhalb welcher eine 50 %-ige Entleerung des Magens stattfindēt. Die Zeitspanne wird als Mafi fūr die Magen-entleerung angegeben.

In diesem Testmodell zeigte die Verbindung des Beispiels 1 eine deutliche Stimulierung der Magenentleerung bei einer Dosis von 0,46 μΜοΙ/kg. Die Zeit fūr eine 50 %-ige Entleerung des Magens verringerte sich von 4 6 min. bei einer Kontrolltiergruppe auf 27 min. bei Tieren, welche die Testsubstanz erhalten hatten. 3. In-vivo-Bestimmung des Einflusses der Substanzen auf den Ruhe-Tonus des Oesophagus Sphincter.

Diese Bestimmung wird an trainierten, wachen, nūchternen Beagle-Hunden vorgenommen, denen vor Versuch je eine Oesophagus-Fistel und eine Duodenal-Kanūle gelegt worden sind. Der Druck des unteren Oesophagus Sphincter wird mittels eines perfundierten Kathetersystems mit seitlicher Čffnung, das mit einem Druckaufnehmer und einem Recorder verbunden ist, gemes-sen. Der Katheter wird ūber die Oesophagus-Fistel in den Magen gefūhrt und dann langsam manuell zurūckgezogen (= Durchzugs-manometrie). Beim Passieren des Katheterteils mit der seitli-chen Čffnung durch die Hochdruckzone des unteren Oesophagus Spincter wird ein Peak registriert. Aus diesem Peak wird der Druck in mm Hg bestimmt.

Auf diese Weise wird zunāchst als Kontrollwert der basale Druck des Oesophagus Spincter bestimmt. Anschliefiend wird die Testsubstanz intraduodenal appliziert und nach 15 min. wird der Druck am unteren Oesophagus Spincter in 2-Minuten-Intervallen 11 LV 10458 uber einen Zeitraum von 46 min. gemessen. Die Steigerung des Druckes nach Testsubstanzgabe im Vergleich zu dem vorbestimmten basalen Druck wird berechnet.

In diesem Tēst wurde der basale Toņus des Oesophagus Sphincter durch eine Dosis von 0,251 μΜοΙ/kg der Substanz des Beispiels 1 mehr als verdoppelt. Dieser Effekt hielt wāhrend der gesamten Testdauer von 45 min. an.

Aufgrund ihrer Wirkungen im gastrointestinalen Trakt sind die Verbindungen der Formel I in der Gastroenterologie als Arznei-mittel fiir grdfiere Sāugetiere, insbesondere Menschen, zur. Prophylaxe und Behandlung von Motilitātsstdrungen des gastrointestinalen Traktēs geeignet.

Die zu verwendenden Dosen konnen individuell verschieden sein und variieren naturgemāJi je nach Art des zu behandelnden Zustandes und der Applikationsform. Zum Beispiel werden par-ēnterale Formulierungen im allgemeinen weniger Wirkstoff enthalten als orale Prāparate. Im allgemeinen eignen sich jedoch f<ir Applikationen an grdfleren S&ugetieren, insbesondere Menschen, Arzneiformen mit einem Wirkstoffgehalt von 5 bis 200 mg pro Einzeldosis. i

Als Heilmittel kSnnen die Verbindungen der Formel I mit ubli-chen pharmazeutischen Hilfsstoffen in galenischen Zubereitungen wie z.B. Tabletten, Kapseln, Suppositorien oder Ldsungen enthalten sein. Diese galenischen Zubereitungen konnen nach an sich bekannten Methoden hergestellt werden unter Verwendung ūblicher fester Trāgerstoffe, wie z.B. Milchzucker, Starke oder Talkum oder flussiger Verdūnnungsmittel, wie z.B. Wasser, fet-ten Olen oder flussigen Paraffinen und unter Verwendung von pharmazeutisch ūblichen Hilfsstoffen, beispielsweise Tabletten-sprengmitteln, Ldsungsvermittlern oder Konservierungsmitteln. 12

Die nachfolgenden Beispiele sollen die Erfindung nāher erlau-tern, jedoch deren Umfang in keiner Weise beschrānken.

Beispiel 1: [2R,3R(2R', 3R') ,6R,7S,8S,9R,10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2' -yl)-7-[(2,6-dideoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribo-hexpyranosyl)-oxy]-9-[(3,4,6-trideoxy-3-(N-methyl-N-isopropylamino)-B-D-xylo-hexopyranosyl)-oxy]-2,6,8,10,12-pentamethyl-4,13-dioxabi-cyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on (= Verbindung der Formel I, R1 Methyl) . A) Herstellung von N-Desmethylerythromycin A. 20 g Erythromycin A (= 27,2 mmol) und 11,2 g (= 136,2 mmol) Natriumacetat wurden in 200 ml eines Gemisches aus Methanol/ Wasser 8 : 2 gelost. Die Losung wurde auf 47 °C erwārmt. Dann wurden 6,9 g (= 136,2 mmol) Jod zugegeben. Der pH-Wert wurde durch Zugeben von verdunnter wāfiriger Natriumhydroxidlosung auf 8' bis 9 gehalten. Nach 3 Stunden wurde das Reaktionsgemisch zur Aufarbeitung in ein Gemisch aus 1 1 Wasser und 20 ml Ammonium-hydroxidlosung gegossen. Das Reaktionsgemisch wurde mit Essig-sāureethylester extrahiert, und der organische Extrakt mit Ammoniumhydroxid-haltigem Wasser gewaschen und eingeengt. Das nach Entfernen des Losungsmittels verbleibende Rohprodukt wurde aus Aceton/Ammoniumhydroxidlosung 50 : 3 umkristallisiert. Schmelzpunkt 143 - 148 °C. B) Herstellung von N-Desmethyl-8, 9-anhydroerythromycin-A-6,9-hemiketal (= Verbindung der Formel IV, R1 = Methyl). 21 g des unter A) erhaltenen Produktes wurden in 110 ml Eis-essig gelost und die Losung wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur geriihrt. Dann wurde das Reaktionsgemisch zur Aufarbeitung unter Eiskūhlung in 400 ml konzentrierte Ammoniumhydroxidl6sung ge-tropft. Das Reaktionsgemisch wurde mit Essigsāureethylester extrahiert, der organische Extrakt mit Wasser gewaschen und das 13 LV 10458

Losungsmittel abgezogen. Das als Riickstand verbleibende Rohpro-dukt wurde erst aus Ether und dann aus Methanol umkristalli-siert. Es wurden 14 g reines Produkt mit einem Schmelzpunkt von 145 °C erhalten. C) Herstellung von [2R, 3R(2R',3R'),6R,7S,8S,9R,10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2' -yl) -7- [ (2, 6-idideoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribo-hexpyranosyl)-oxy]-9-[ (3,4,6-trideoxy-3-methylamino-p-D-xylo-hexopyranosyl)-oxy]-2, 6,8,10,12-pentamethyl-4,13-dioxabi-cyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on (= Verbindung der Formel II, R1 = Methyl) . 9,4 g (= 13,4 mmol) des unter B) erhaltenen Produktes wurden mit 1,9 g ( = 13,4 mmol) Kaliumcarbonat in Methanol 2,5 Stunden unter RuckfluB gekocht. Zur Aufarbeitung wurde das Reaktions-gemisch eingeengt, mit Wasser verdiinnt und mit Essigsāureethyl-ester extrahiert. Das nach Entfernen des Losungsmittels verbleibende Rohprodukt wurde aus Isopropanol umkristallisiert. Es wurden 7,1 g reines Produkt mit einem Schmelzpunkt von 199 bis 200 eC erhalten, optischer Drehwert [a]20D : - 31,6 ° (c = 1, Methanol). D) Herstellung der Titelverbindung. 2 g (=2,8 mmol) des vorstehend unter C) erhaltenen Produktes vrurden in Methanol gelost und der pH-Wert der Losung wurde durch Zugabe von verdunnter Salzsāurelosung auf 4 eingestellt. Zu der Losung wurden 2 g eines Molekularsiebs (Calciumalumini-umsilikat, Porendurchmesser 4 A) ein Ūberschufl an Aceton und 0,4 g (= 6,4 mmol)’ Natriumcyanoborhydrid gegeben. Das Reak-tionsgemisch wurde 12 Stunden geruhrt. Zur Aufarbeitung wurde von dem Molekularsieb abfiltriert, das Filtrat eingeengt, mit Wasser versetzt und mit Essigsāureethylester extrahiert. Das nach Einengen des Essigsāureethylesterextraktes als Riickstand verbleibende Rohprodukt wurde sāulenchromatographisch ūber Kie-selgel (Elutionsmittel Essigsāureethylester/Methanol 95 : 5) 14 gereinigt. Es wurden 1,4 g der Titelverbindung mit einem Schmelzpunkt von 130 bis 134 °C erhalten, optischer Drehwert [CC]20D : - 32,8

Beispiel 2: [2R, 3R(2R' , 3R' ) , 6R, 7S, 8S, 9R, 10R] -3- (2' , 3' -Dihydroxypent-2' -yl) -7- [ (2, 6-dideoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribo-hexpyranosyl) -oxy] -9- [ (3,4,6-trideoxy-3- (N-methyl-N-isopropylamino) -p-D-xylo-hexopyranosyl) -oxy] -2,6,8,10, 12-pentamethyl-4,13-dioxabi-cyclo[8.2.1]tridec-l2-en-5-on(= Verbindung der Formel I, R1 = Methyl) . A) Herstellung N-Desmethylerythromycin A. 5 g Erythromycin A und 4,7 g Natriumacetat (x 3 H20) wurden in 200 ml eines Gemisches aus Methanol/Viasser 8:2 gelost. Zu der Losung wurden 1,75 g Jod zugegeben und das Reaktionsgemisch wurde sodann bei Raumtemperatur 20 Minuten lang mit einer Q‘uarzlampe bestrahlt. AnschlieBend wurde die Halfte des Lo-sungsmittels abgedampft, und das verbleibende Reaktionsgemisch wurde in ein Gemisch aus 140 ml Wasser und 10 ml Ammoniak gegossen. Das Reaktionsgemisch wurde mit dreimal 20 ml Methyl-t-butylether extrahiert. Der Etherextrakt wurde abgetrennt und der Ether teilweise abgedampft. Dann wurde das Reaktionsprodukt auskristallisieren gelassen und aus Aceton umkristallisiert. Es wurden 2 g N-Desmethylerythromycin A erhalten. B) Zur Herstellung von N-Desmethyl-8, 9-anhydroerythromycin-A-6,9-hemiketal (= Verbindung der Formel IV, R1 = Methyl) wurden 2 g des unter A) erhaltenen Produktes wie in Beispiel 1 B) beschrieben behandelt. Es wurden 2,3 g des Hemiketals als amorpher Feststoff erhalten. 15 LV 10458 C) Zur Herstellung von [2R,3R(2R' , 3R' ),6R, 7S, 8S,9R,10R]-3-(2' ,3'-Dihydroxypent-2'-yl)-7-[(2,6-dideoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribo-hexpyranosyl)-oxy]-9-[(3,4, 6-trideoxy-3-methylamino-*P-D-xylo-hexopyranosyl) -oxy] -2, 6,8,10,12-penta-methyl-4,13-dioxabicyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on (= Verbindung der Formel II, R1 Methyl) wurden 2,3 g des vorstehend er-haltenen Produktes wie in Beispiel 1 C) beschrieben behandelt. Das erhaltene Rohprodukt wurde aus Ethylacetat umkristalli-siert. Es wurden 1,3 g reines Produkt mit einem Schmelzpunkt von 199 - 202 °C erhalten. D) 1,3 g des vorstehend erhaltenen Produktes wurden in ein Ge-misch aus 26 ml Aceton und 0,11 ml Essigsāure gegeben. Zu dem Reaktionsgemisch wurden 0,6 g Natriumtriacetoxyborhydrid por-tionsweise unter Stickstoffatmosphāre zugegeben und das Reak-tionsgemisch wurde 4 Stunden bei Raumtscperatur geruhrt. Dann wurden zwei Drittel des Losungsmittels abgedampft, und der Ruckstand wurde mit 40 ml Ethylacetat verdūnnt. Unter krāftigem Rlihren wurden 65 ml einer gesāttigten Natriumhydrogencarbonat-losung zugegeben. Von der sich bildenden klaren Losung wurde die organische Phase abgetrennt und die wāfirige Phase wurde nochmals mit 20 ml Ethylacetat gewaschen. Die vereinicrten or-ganischen Phasen vrurden mit 13 ml Wasser gewaschen und ūber Natriumsulfat getrocknet. Das Losungsmittel wurde aūsgedampft, der Ruckstand wurde in 20 ml Toluol aufgenommen und dieses dann wiederum abgedampft. Das erhaltene Rohprodukt wurde durch Fil-tration uber eine Aluminiumoxidsāule (25 g A1203, Aktivitāts-stufe II/III) unter Verwendung von Ethylacetat als Elutions-mittel gereinigt. Dann wurde das Losungsmittel abgedampft und der Ruckstand in siedendem Ethylacetat gelost. AnschlieBend wurde n-Hexan zugegeben bis die Mischung sich trubte. Man liefi das Produkt in der Kalte auskristallisieren. Die gebildeten Kristalle wurden unter vermindertem Druck aLbfiltriert und mit n-Hexan gewaschen. Es wurden 0,8 g der Titelverbindung mit einem Schmelzpunkt von 128 - 135 °C erhalten. 16 E) Zur Ūberfuhrung in ihr Acetat wurden 1 g (=1,3 mmol) der Titelverbindung in Methanol gelost und die Losung wurde mit 0,08 ml (= 1,3 mmol) Eisessig versetzt. AnschlieBend wurde das Losungsmittel unter vermindertem Druck abgezogen und das ge-bildete Acetat der Titelverbindung getrocknet. Schmelzpunkt des Acetates der Titelverbindung: 145 - 150 °C Optischer Drehwert [a] 200 : -30, 8 0 (c = 1, Methanol).

Beispiel I:

Man stellte Tabletten in folgender Zusammensetzung pro Tablette her: [2R, 3R(2R' , 3R' ) , 6R, 7S, 8S, 9R, 10R] -3-(2',3'-Dihydroxypent-2'-yl)-7-[(2, 6-dideoxy-3-C-methyl-3-0-methyl-a-L-ribo-hexpyranosyl)-oxy]-9-[ (3,4,6-trideoxy-3-(N-methyl-N-isopropyl-amino)-β-D-xylo-hexopyranosyl)-oxy]-2,6,8,10,12-pentamethyl-4,13-dioxabicyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on (= Verbindung der Formel I, Rl = Methyl) 20 mg Maisstarke 60 mg Milchzucker 135 mg Gelatine (als 10%-ige Losung) 6 mg

Der Wirkstoff, die Maisstārke und der Milchzucker wurden mit der 10%-igen Gelatine-Losung eingedickt. Die Paste wurde zerkleinert und das entstandene Granulat wurde auf ein geeignetes Blech gebracht und bei 45 *C getrocknet. Das getrocknete Granulat wurde durch eine Zerkleinerungs-maschine geleitet und in einem Mixer mit weiteren folgen-den Hilfsstoffen vermischt:

Talkum 5 mg

Magnesiumstearat 5 mg

Maisstārke 9 mg und sodann zu Tabletten von 240 mg verprefit. 17 LV 10458

Rll

IV

III LV 10458

Patentanspruch® 1. [2R, 3R(2R',3R'),6R,7S,8S,9R,10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2'-

yl)-2,6,8,10,12-pentamethyl-4,13-dioxabicyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on-Derivate der allgemeinen Formel I

Rl l

worin R1 Methyl oder Wasserstoff bedeutet, und deren stabile und physiologisch vertrāgliche Sāureadditionssalze. 2. Verbindungen gemāB Anspruch 1, worin R1 Methyl bedeutet. 3. Arzneimittel, enthaltend eine pharmakologisch wirksame Menge einer Verbindung gemāJJ Anspruch 1 und ūbliche pharmazeuti-sche Hilfs- und/oder Trāgerstoffe. 2 4, Verfahren zur Herstellung von [2R, 3R (2R' ,3R'),6R,7S, 8S, 9R, 10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2'-yl)-2,6,8,10,12-pentamethyl-4 , 13-dioxabicyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on-Derivate der all-gemeinen Formel I,

I worin R1 Methyl oder Wasserstoff bedeutet, und deren stabi-len und physiologisch vertrāglichen Sāureadditionssalzen, dadurch gekennzeichnet, daB man in [2R,3R(2R',3R'),6R,7S,

8S,9R,10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2'-yl)-2, 6,8,10, 12-pentamethyl-4,13-dioxabicyclo[8.2.1]tridec-12-en-5-on-Derivate der allgemeinen Formel II 3 LV 10458

worin R1 obige Bedeutung besitzt, einen lsopropylrest einfūhrt, und gewūnschtenfalls in die erhaltene Verbindung der For-mel I, worin R1 Wasserstoff bedeutet, einen Methylrest R1 einfūhrt oder in der erhaltenen Verbindung der Formel I, worin R1 Methyl bedeutet, den Methylrest R1 abspaltet und gewūnschtenfalls freie Verbindungen der Formel 1 in ihre stabilen Sāureadditionssalze ūberfūhrt oder die Sāureaddi-tionssalze in die freien Verbindungen der Formel I ūberfūhrt .

[2R,3R(2R',3R'),6R,7S,8S, 9R,10R]-3-(2',3'-Dihydroxypent-2'-yl)-2,6,8,10,12-pentamethyl-4,13-dioxabicyclo[8.2.1]tri-dec-12-en-5-on-Derivate der allgemeinen Formel II 4

worin R1 Methyl oder Wasserstoff bedeutet. LV 10458

Zusammenfassung

Es werden ringverengte N-Desmethyl-N-isopropyl-Erythromycin-A-Derivate mit die gastrointestinal virksamen motilin-agonosti-schen Eigenschaften und deren Herstellung beschrieben.

Claims (5)

1. LV 10458 PATENTA FORMULA 1. [2R,3R(2R’,3R'),6R)7S,8S,9R,10R]-3-(2')3,-dihidroksipent-2,-il)-2,6,8.10,12--pentametil-4,13-dioksabiciklo[8.2.1 ļtridec-12-en-5-on-atvasinājumi ar kopējo formulu I Rl

   kur Rl apzīmē metilgrupu vai ūdeņradi, un to stabilie un fizioloģiski saderīgie skābju-aditīvie sāļi.
2. 2. Savienojumi, saskaņā ar 1. punktu, kuros Rl apzīmē metilgrupu.
3. 3. Ārstniecības līdzekļi, kuri satur farmakoloģiski iedarbīgu 1.punktam atbilstoša savienojuma daudzumu un parastās farmaceitiskās palīg- un/vai pildvielas.
4. 4. Metode [2R,3R(2R,,3R,),6R,7S}8S,9R,10R]-3-(2,,3'-dihidroksipent-2'-il)-2,6, 8,10,12-pentametil-4,13-dioksabiciklo[8.2.1]tridec-12-en-5-on-atvasinājumu ar kopējo formulu I 2 R1

   kur Rl apzīmē metilgrupu vai ūdeņradi, un to stabilo un fizioloģiski saderīgo skābju-aditīvo sāļu iegūšanai, atšķirīga ar to, ka [2R,3R(2R’,3R’),6R,7S,8S,9R,10R]-3-(2',3'-dihidroksi-pent-2'-il)-2,6,8,10,12- pentametil-4,13-dioksabiciklo[8.2.1]tridec-12-en-5-on--atvasinājumos ar kopējo formulu II

   kur Rl ir iepriekš minētā nozīme, LV 10458 3 ievada izopropilgrupu, un, ja vēlas , iegūtajā formulas I savienojumā, kur R1 apzīmē ūdeņradi, ievada metilgrupu vai ari iegūtajā formulas I savienojumā, kurā Rl apzīmē metilgrupu, metilgrupu Rl atšķeļ un, ja vēlas, formulas I brīvos savienojumus pārvērš to stabilajos skābju--aditīvajos sāļos vai arī skābju-aditīvos sāļus pārvērš formulas I brīvajos savienojumos.
5. 5. [2R,3R(2R,,3R'),6R,7S,8S,9R,10R]-3-(2’,3'-dihidroksipent-2'-il)-2,6,8,10,12--pentametil-4,13-dioksabiciklo[8.2.1]tridec-12-en-5-on-atvasinājumi ar kopējo formulu II R1

   II, kur Rl apzīmē metilgrupu vai ūdeņradi.