LU86403A1

LU86403A1 - 5-pyrimidine-carboxamides et traitement de la leucemie et des tumeurs avec ces derniers

Info

Publication number: LU86403A1
Application number: LU86403A
Authority: LU
Inventors: Arthur D Brewer
Original assignee: Uniroyal Chem Co Inc; Minatelli John A
Priority date: 1985-04-22
Filing date: 1986-04-22
Publication date: 1987-12-07
Also published as: CH668970A5; ZA862630B; DK182986A; AU5641886A; FR2580642B1; CN86102767A; ATA101986A; DK182986D0; DE3613447A1; ES8800671A1; AU2219688A; IL86711A0; FR2580642A1; IT8620153A0; JPS6259264A; CN1014990B; NZ215874A; GR861024B; BE904641A; NL8601023A

Description

» 5-pyrimidine-carboxamides et traitement de la leucémie * et des tumeurs avec ces derniers.

La présente invention concerne de nouveaux 5-pyrimidine-carboxamides, ainsi que leurs nucléosi-5 des et leurs sels d'addition pharmacologiquement acceptables. Plus particulièrement, l'invention concerne de nouveaux dérivés de 5-pyrimidine-carbo-xamides exerçant une activité anti-leucémie, des compositions pharmaceutiques contenant ces dérivés 10 comme constituants thérapeutiquement efficaces, de même qu'un procédé dans lequel on utilise ces dérivés pour provoquer la régression de la leucémie chez les mammifères.

Les nouveaux 5-pyrimidine-carboxamides 15 substitués de la présente invention répondent à la formule : r2—

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dans laquelle représente un atome d'hydrogène ou un groupe alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone ; 25 R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical carbohydrate ; R3 et R4 représentent chacun un atome d'hydrogène ou, lorsque R^ est un atome d'hydrogène, . un des radicaux Rg ou R^ peut être un atome de fluor ; 30 de même que leurs sels d'addition pharma cologiquement acceptables.

Les sels d'addition peuvent être formés avec différents réactifs formateurs de sels organiques et inorganiques pharmacologiquement acceptables. 35 C'est ainsi que des sels d'addition utiles peuvent ( 2 > être formés en mélangeant l'acide organique avec = un équivalent d'une base, par exemple, une amine organique telle que la triéthylamine ou la N-méthyl-glucamine, ainsi que des cations inorganiques tels 5 que le sodium, le potassium ou analogues. En règle générale, les sels d'addition des acides organiques de l'invention sont des solides cristallins qui sont relativement insolubles à la fois dans des solvants polaires tels que l'eau, le méthanol et l'éthanol, 10 ainsi que dans des solvants organiques non polaires · tels que l'éther diéthylique, le benzène, le toluène et analogues. Ils sont quelque peu solubles dans des solvants aprotiques tels que le diméthylformamide et le diméthylsulfoxyde.

15 D'autre part, lorsque Rg est un radical carbohydrate, il peut être un groupe furannosyle (par exemple, un groupe ribofurannosyle), un groupe pyrannosyle (par exemple, un groupe arabinopyrannosyle, un groupe glucopyrannosyle ou un groupe galactopyran-20 nosyle), leurs dérivés déoxy ou leurs analogues aliphatiques (par exemple, un groupe hydroxyalcoxyalkyle ou un groupe polyhydroxyalkyle contenant 2 à 12 atomes ‘ de carbone dans chacune des fractions alcoxy et alkyle, par exemple, le groupe 2-hydroxyéthoxyméthyle ou 25 le groupe 2,3-dihydroxypropyle). Telle qu'elle est utilisée dans la présente spécification, l'expression "radical carbohydrate" désigne les groupes cycliques et acycliques formant des pyrimidine-nucléosides ou les pseudo-nucléosides, par exemple, des matières 30 comprenant à la fois les groupes cycliques et acycliques spécifiés ci-dessus.

Les 5-carboxamides de l'invention peuvent exister sous la forme illustrée dans la formule ci-dessus ou sous l'une ou l'autre de leurs formes tauto-35 mères. Pour faciliter la compréhension, les composés 3 de l'invention seront uniquement illustrés ici sous la forme représentée dans la formule ci-dessus, mais il est entendu qu'ils englobent également leurs tau-tomères ou leurs mélanges tautomères.

5 D'une manière générale, on peut préparer les 5-pyrimidine-carboxamides de l'invention en faisant réagir la 4,6-dihydroxypyrimidine ou une 4,6-dihydroxy-2-alcoxypyrimidine appropriée avec l'isocyanate de phényle ou un isocyanate de phényle subs-10 titué de manière appropriée en présence d'un solvant ou d'un milieu dispersant tel que le diméthylsulfoxyde, la pyridine, le diméthylformamide, la N-méthylpyrroli-done, le diméthylacétamide, le sulfolane, l'oxyde de tétrahydrothiophène, 1'acétonitrile ou une amine 15 tertiaire telle que la triéthylamine. Les proportions molaires eritre la pyrimidine et le réactif isocyanate de phényle peuvent se situer entre environ 2:1 et •1:2, de préférence, entre environ 1,1:1 et 1:1,1, des proportions stoechiométriques étant généralement 20 suffisantes. La réaction peut être effectuée à des températures variant entre environ 0°C et 200°C, habituellement entre environ 24°C et 160°C ; dans la plupart des cas, la réaction se déroule très bien à des températures comprises entre environ 80°C et 25 100°C. La formation des 5-carboxamides est pratique ment achevée dans des périodes réactionnelles variant entre environ 1/2 et 6 heures, habituellement entre environ 2 et 4 heures.

En variante, on peut préparer les 5-pyrimi-30 dine-carboxamides à partir des 2-thioxo-5-pyrimidine-carboxamides correspondants décrits dans la demande de brevet des Etats-Unis d'Amérique n° 699.776 déposée le 8 février 1985 (5933 KON IA) par réduction avec du nickel de Raney. En particulier, on peut ainsi 35 préparer les 5-pyrimidine-carboxamides substitués i I ' 4 par un groupe fluorophényle à partir des 2-thioxo- 5-pyrimidine-carboxamides correspondants substitués par un groupe N-(2-fluorophényle) et par un groupe N-(4-fluorophényle).

5 On peut également préparer les 2-alcoxy- 5-pyrimidine-carboxamides en faisant réagir une o-alkyl-pseudo-urée avec un diester d'acide 2-aroyl-amino-propane-dioïque substitué d'une manière appropriée (que l'on prépare en faisant réagir un diester 10 d'acide malonique avec un isocyanate d'aryle non substitué ou substitué de manière appropriée), par exemple, l'ester diéthylique d'acide ^(phénylamino)-carbonyl ,7-propane-dioïque, puis en séparant et en récupérant les produits obtenus.

15 . Les nouveaux composés de l'invention sont des agents cytotoxiques utiles pour provoquer la régression des tumeurs malignes du sang telles que la leucémie. Ils peuvent être utilisés seuls ou en combinaison avec d'autres agents chimiothérapeu-20 thiques actifs à cet effet. Telles qu'elles sont utilisées dans la présente spécification, les expressions, "régression" et "inhibition" signifient l'arrêt 1 ou le freinage de la croissance de la tumeur maligne ou d'autres manifestations de la maladie, comparati-25 vement au déroulement de la maladie en l'absence de traitement.

On a trouvé que l'administration des nouveaux 5-carboxamides substitués à des souris en quantités se situant entre environ 12 et 200 mg/kg, de préfé-30 rence, entre environ 25 et 100 mg/kg du poids du corps, était efficace pour provoquer la régression de la leucémie. L'interrelation de dosages pour des mammifères ayant d'autres tailles et faisant partie d'autres espèces est décrite par Freireich, E.J. et al., 35 Quantitative Comparison of Toxicity of Anti-Cancer 5

Agents in Mouse, Rat, Hamster, Dog, Monkey and Man, , ' Cancer Chemotherapy, Reg. 50, n° 4.219-244, mai Î966.

.Bien entendu, le dosage peut être réglé pour assurer la réponse thérapeutique optimale.

5 Par exemple, on peut administrer quotidiennement plusieurs doses divisées ou on peut réduire proportionnellement la dose comme l'indiquent les exigences du cas thérapeutique.

Les composés actifs peuvent être avantageu-10 sement administrés par voie parentérale, intrapéritonéale, intraveineuse ou orale. On peut préparer des solutions ou des dispersions des composés actifs dans l'eau, avantageusement en mélange avec un agent tensio-actif tel que 1'hydroxypropyl-cellulose.On 15 peut également préparer des dispersions dans du glycérol,1 des polyéthylène ,-glycols liquides et leurs mélanges, 1 ainsi que dans des huiles. Dans des conditions habituelles de conservation et d'utilisation, ces préparations contiennent un agent de conservation afin 20 d'empêcher la croissance de micro-organismes.

Parmi les formes pharmaceutiques appropriées pour injections, il y a les dispersions Ou · les solutions aqueuses stériles, de même que les poudres stériles pour la'préparation extemporanée 25 de dispersions ou de solutions injectables stériles.

Pour de telles utilisations, la forme adoptée doit être stérile et fluide au degré nécessaire pour assurer une injection aisée au moyen d'une seringue.

Elle doit être stable dans les conditions de fabri-30 cation et de conservation et elle doit être préservée contre la contamination par les micro-organismes tels que les bactéries et les champignons.

Le support peut être un solvant ou un milieu dispersant contenant, par exemple, de l'eau, 35 de l'éthanol, un polyol (par exemple, le glycérol, « 6 le propylène-glycol et le polyéthylène-glycol liquide ou analogues), leurs mélanges appropriés, ainsi que les huiles végétales. La fluidité adéquate peut être maintenue, par exemple, en utilisant un enrobage 5 tel que la lécithine, en maintenant la granularité requise des particules dans le cas d'une dispersion et en utilisant des agents tensio-actifs.

On peut prévenir l'action des micro-organismes par différents agents antibactériens et antifongiques, 10 par exemple, le paraben-chlorobutanol, le phénol, l'acide sorbique, le thimérosal ou analogues. Dans de nombreux cas, il peut être préférable d'incorporer, dans la forme de dosage, des agents isotoniques, par exemple, le sucre ou le chlorure de sodium.

15 On peut provoquer une absorption prolongée des formulations injectables en incorporant des agents retardant l'absorption, par exemple, le monostéarate d'aluminium et la gélatine.

On prépare des solutions injectables stériles 20 en incorporant le composé actif dans le solvant approprié en mélange avec différents autres ingrédients énumérés ci-dessus selon les conditions requises, * tout en procédant ensuite à une stérilisation par filtration. En règle générale, on. prépare des dis-25 persions en incorporant l'ingrédient actif stérilisé dans un véhicule stérile contenant le milieu dispersant ou l'un ou l'autre des ingrédients requis.

Lorsque, d'autre part, on utilise des poudres stériles pour préparer des solutions injectables stériles, 30- il est préférable de soumettre une solution stérile filtrée des ingrédients désirés à un séchage sous vide ou à une lyophilisation pour obtenir une poudre constituée de l'ingrédient actif avec l'un ou l'autre des ingrédients supplémentaires désirés.

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Telle qu'elle est utilisée dans la présente spécification, l'expression "excipient ou support pratiquement non toxique et pharmaceutiquement acceptable" englobe des solvants, des milieux dispersants,.

5 des enrobages, des agents antibactériens et antifongiques, des agents isotoniques, des agents retardant l'absorption et analogues. L'utilisation de tels milieux et de tels agents comme supports ou excipients pour substances pharmaceutiquement actives est bien 10 connue dans la technique. Sauf dans la mesure où * * l'un ou l'autre milieu ou agent classique est incompatible avec l'ingrédient actif ou est toxique, on envisage son utilisation dans les formulations thérapeutiques de l'invention. Des ingrédients actifs 15 supplémentaires peuvent également être incorporés dans les compositions thérapeutiques. 1

Il peut être avantageux de formuler les •compositions de l'invention sous forme de dosages unitaires afin de faciliter l'administration et 20 d'assurer l'uniformité du dosage. Telle qu'elle i est utilisée selon l'invention, une forme de dosage unitaire désigne une unité physiquement discrète pouvant être utilisée comme dosage unitaire pour les mammifères à traiter ; chaque unité contient une quantité prédéterminée de la matière active, 25 calculée pour produire l'effet thérapeutique désiré, en association avec le support pharmaceutiquement acceptable requis. Les spécifications concernant les formes de dosages unitaires sont déterminées par et dépendent directement de (a) les caractéris-30 tiques exceptionnelles de la matière active et v l'effet thérapeutique particulier à obtenir, et (b) les limitations inhérentes dans la technique de combinaison d'une telle matière active pour le traitement d'une maladie chez des sujets vivants sans 35 effets secondaires cytotoxiques excessifs.

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On peut obtenir une régression de la leucémie, par exemple, en utilisant un dosage quotidien pendant 5 ou 10 jours ou plus encore. On peut également adopter un dosage multiple ou un dosage calculé 5 sur l'une ou l'autre base périodique désirée. C'est ainsi que l'ingrédient thérapeutiquement actif est administré en quantités suffisantes pour faciliter la régression et l'inhibition d'une croissance complémentaire de la leucémie en absence d'effets secon-10 daires néfastes excessifs de nature cytotoxique.

Parmi les 5-carboxamides préférés de l'invention, il y a le 3,4-dihydro—4-hydroxy-6~oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carboxamide, le 3,4-dihydro-6-hydroxy-2-méthoxy-4-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carbo-15 xamide, le N-(4-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy- 5-pyrimidine-carboxamide et le N-(2-fluorophényl)- 1 3.4- dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide.

L'invention sera décrite plus en détail par les exemples spécifiques ci-après illustrant 20 la préparation de ces composés et les essais auxquels ? ils ont été soumis.

Exemple 1 * 3.4- dihydro-4-hydroxy-6-oxo-N-phényl-5-pyrlmidine-carboxamide 25 A 400 ml d'hydroxyde d'ammonium aqueux concentré et à 400 ml d'eau, on ajoute 13,2 g de 1.2.3.4- tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-N-phényl-2-thioxo- 5-pyridimine-carboxamide (préparé comme décrit à l'exemple 1 de la demande de brevet précitée des 30 Etats-Unis d'Amérique n° 699.776). La pyrimidine se dissout. A cette solution, on ajoute une bouillie de nickel de Raney dans l'eau (50 g). On chauffe modérément la suspension à reflux tout en agitant pendant 4 heures. On la refroidit et on traite les 35 solides constitués du produit et de substances inor- «ς 9 ganiques avec de l'acide chlorhydrique dilué, on filtre le mélange et on extrait les solides avec une solution d'hydroxyde de sodium 2N, puis on filtre. Ensuite, on acidifie le filtrat avec de 5 l'acide chlorhydrique dilué, on redissout le précipité obtenu dans de 1'hydroxyde d'ammonium aqueux, on le purifie avec du charbon activé et de la celite et on le reprécipite avec de l'acide dilué. On recueille le solide, on le lave avec de l'eau et 10 on le sèche. Rendement : 5,8 g. Point de fusion : * 200-208°.' Spectre de masse : 231, calculé 231 ; spectre de résonance magnétique, nucléaire (diméthyl-sulfoxyde) : 6,8-7,7 6 (pics aromatiques) ; 8,28 é (atome de 2-hydrogène) ; 11,8 6 (protons échangeables).

15 Exemple 2 3,4-dihydro’-6-hydroxy-2-méthoxy-4-oxo-N-phényl-5- 1 pyrimidine-carboxamide 1 A une solution de 6 g de 4,6-dihydroxy-2'-méthoxy-pyrimidine dans du diméthylsulfoxyde sec, 20 on ajoute 5,9 ml de triéthylamine. On porte la solution à 60°C et on ajoute 5 g d'isocyanate de phényle.

On maintient la solution à 80-90°C pendant 2 heures, on la refroidit et on ajoute lentement de l'eau pour provoquer la précipitation.

25 /On obtient le produit sous forme d'un solide de couleur blanche légèrement sale et d'un point de fusion de 164-168°. Analyse : calculé pour °12Η11Ν3°4’ C 55’17^ '> H 4,21% ; N 16,09% ; trouvé C 54,84% ; H 4,17% ; N 15,85%. Spectre de masse, 30 calculé : 261, trouvé : 261. Spectre de résonance magnétique nucléaire (diméthylsulfoxyde) : 3,93 é (singulet, intégral 3) ; 7,1-7,7 é (singulet complexe large, intégral 6) ; 14,2 é (singulet large, intégral 1).

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Exemple 3 N-(2-fluorophény1)-3,4-dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide A un mélange de 200 ml d'ammoniaque aqueuse 5 concentrée et de 200 ml d'eau, on ajoute 7,2 g de la matière de départ, à savoir le N-(2-fluorophényl)- 1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-2-thioxo-5-pyrimi-dine-carboxamide (préparé de la même manière que le composé analogue dont la préparation est décrite 10 dans la demande de brevet précitée des Etats-Unis d'Amérique n° 699.776, exemple 1). On ajoute 26 g de nickel de Raney. On chauffe modérément la suspension (à 80-90°C) pendant 6 heures, puis on la refroidit. On ajoute de l'acide chlorhydrique fort 15 jusqu'à ce que le mélange réactionnel soit parfaitement acide 'et le nickel de Raney commence à se dis- 1 soudre. Lorsqu'il n'y a plus de dégagement complé- ! .mentaire d'hydrogène, on recueille les solides, on les lave sur le gâteau de filtre avec de l'eau et 20 de l'éthanol, puis on les remet en suspension dans de l'éthanol (50 ml). On porte la suspension à peu près au point d'ébullition. On recueille les solides, on les lave avec un peu d'éthanol et d'éther éthylique, puis on les sèche. Cette préparation donne 25 4.2 g d'une poudre grise ne présentant aucun point de fusion net avec décomposition à 240°C et plus.

Le spectre de résonance magnétique nucléaire et le spectre de masse sont compatibles avec la structure escomptée.

30 Exemple 4 N-(4-fluorophény1)-3,4-dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide A un mélange de 200 ml d'ammoniaque aqueuse concentrée et de 200 ml d'eau, on ajoute 7,2 g de 35 la matière de départ, à savoir le N-(4-fluorophényl)- 11 1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-2-thioxo-5-pyri-midine-carboxamide (préparé de la même manière que le composé analogue dont la préparation est décrite à l'exemple 1 de la demande de brevet des Etats-Unis 5 d'Amérique n° 699.776). On ajoute 26 g de nickel de Raney. On chauffe modérément la suspension (à 80-90°C) pendant 6 heures, puis on la refroidit.

On ajoute de l'acide chlorhydrique fort jusqu'à ce que le mélange réactionnel soit parfaitement acide, 10 tandis que le nickel de Raney commence à se dissoudre. Lorsqu'il n'y a plus de dégagement complémentaire d'hydrogène, on recueille les solides, on les lave sur un gâteau de filtre avec de l'eau et de l'éthanol, puis on les remet en suspension dans de l'éthanol 15 (50 ml). On porte ensuite la suspension à peu près au point d'ébullition. On recueille les solides, ! on les lave avec un peu d'éthanol et d'éther éthyli- 1 que et on les sèche. Le rendement est de 4,2 g d'une poudre de couleur grise n'ayant aucun point de fu-20 sion net avec décomposition à 240°C et plus. Le spectre de résonance magnétique nucléaire et le spectre de masse sont compatibles avec la structure escomptée.

Comparaison des activités anti-leucémie des composés 25 des exemples 1-4 avec d'autres 5-pyrimidine-carboxa-mides pour la régression de la leucémie lymphoïde L1210 implantée par voie intrapéritonéale.

On a soumis des échantillons des composés d'essai des exemples 1-4 et d'autres 5-pyrimidine-30 carboxamides substitués ayant des structures semblables à des essais in vivo conformément au protocole d'essai 3LE31 du "National Cancer Institute" (NCI Protocol 1.100, Cancer Chemotherapy Reports partie 3, volume 3, n° 2, septembre 1972) afin de déterminer 35 les effets des composés sur la leucémie L1210 implantée 12 par voie intrapéritonéale (J. Nat'l. Cancer Inst. 13(5):1328, 1953). Chaque essai a consisté à implanter les cellules de la leucémie chez six souris DBA/2 (un sexe par expérience), les souris mâles pesant 5 au minimum 18 g et les souris femelles pesant au minimum 17 g, tous les animaux d'essai se situant dans la tolérance de poids de'3 g. On a administré les composés d'essai par des injections intrapéritonéales en doses de 0,1 ml du fluide ascitique g 10 dilué (10 cellules par dose) en commençant un jour 1 après l'implantation de la tumeur et en poursuivant quotidiennement pendant 9 jours.

On a pesé les animaux d'essai et l'on a enregistré les sujets survivants sur une base régu-15 lière au cours d'une période d'essai de 30 jours.

Le rapport du temps de survie pour les animaux traités 1 et les animaux témoins (T/C) a été déterminé par i un pourcentage.

On a effectué les essais à différents i 20 dosages selon les résultats obtenus avec chaque composé d'essai. Il a été déterminé statistiquement dans le système d'essai 3LE31 qu'une valeur T/C initiale au moins égale à 125% était nécessaire pour démontrer une activité, tandis qu'une valeur T/C 25 reproductible égale ou supérieure à 125% garantit une étude complémentaire. Une valeur T/C reproductible de 150% ou plus est considérée comme une activité significative.

Les résultats des essais sont résumés dans 30 le tableau ci-après 13

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Un autre composé témoin, à savoir le 3,4-dihydro-4-hydroxy-6-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-thio-carboxamide (témoin T) a fait l'objet d'essais selon le protocole 3LE31 comme décrit ci-dessus. On a 5 trouvé que ce composé (analogue thio du composé de l'exemple 1) était inactif in vivo. Il présentait l'activité suivante :

Dose (mg/kg) T/C % 10 200 98 100 96 50 92 25 96

Dans le système d'essai 3LE31, tous les 15 composés des exemples 1-4 exerçaient une activité anti-leucémie reproductible garantissant une étude 1 complémentaire (T/C %> 125%). D'autre part, dans .aucun des composés témoins, on n'a pas observé une activité.

20 En plus de l'essai 3LE31, le composé de l'exemple 3 a fait l'objet d'essais selon les protocoles du National Cancer Institute 3PS31 (leucémie P388 implantée par voie intrapéritonéale) et,3MBG5 (xénogreffe MX-1 du carcinome mammaire humain des 25 glandes surrénales), comme suit :

Activité anti-leucémie du composé de l'exemple 3 pour la régression de la leucémie P388 implantée par voie intrapéritonéale

On a soumis des échantillons du composé 30 d'essai de l'exemple 3 à des essais in vivo suivant le protocole d'essai 3PS31 du National Cancer Institute (Cancer Chemotherapy Reports, partie 3, volume 3, n° 2, septembre 1972) afin de déterminer l'effet du composé sur la leucémie P388 implantée par voie 35 intrapéritonéale (American Journal of Pathology, i I ' 19 ' > 33:N° 3,page 603, 1957). Chaque essai consistait en l'implantation des cellules de la leucémie chez six souris DBA/2 (un sexe par expérience), les souris mâles pesant au minimum 18 g et les souris femelles 5 pesant au minimum 17 g, tous les animaux d'essai se situant dans la tolérance pondérale de 3 g. On a, administré les composés d'essai par des injections par voie intrapéritonéale en doses de 0,1 ml de fluide ascitique dilué (10 cellules par dose), en commençant 10 un jour après l'implantation de la tumeur et en poursuivant quotidiennement pendant 5 jours.

On a pesé les animaux d'essai et l'on a enregistré les sujets survivants sur une base quotidienne au cours de la période d'essai de 30 jours.

15 Le rapport du temps de survie pour les animaux traités ' et les animaux témoins (T/C) a été déterminé par un ! pourcentage.

, . On a effectué les essais à différents dosa ges. Dans le système d'essai 3PS31, il a été déter- i 20 miné qu'une valeur initiale T/C au moins égale ou supérieure à 120% était nécessaire pour démontrer une activité modérée. Une valeur T/C reproductible de 175% ou plus est considérée comme une activité significative. Le composé de l'exemple 3 présentait 25 l'activité suivante :

Dose (mg/kg) T/C % T/C % (répétition) 400 200 188 171 100 158 144 30 50 124 134 25 128 127

Le composé de l'exemple 3 exerçait une activité anti-leucémie (T/C % > 120%) à un dosage aussi faible que 25 mg/kg.

20

Essai comparatif du composé de l'exemple 3 pour la régression de la xénogreffe du carcinome mammaire humain MX-1 des glandes surrénales

On a soumis des échantillons du composé 5 d'essai de l'exemple 3 à des essais in vivo suivant le protocole d'essai 3MBG5 du National Cancer Institute (Cancer Chemotherapy Reports, partie 3, volume 3, n° 2, septembre 1972) pour déterminer les effets du composé sur les carcinomes mammaires humains des 10 glandes surrénales (expiant chirurgical en 1974 de -la tumeur mammaire primaire d'une femme âgée de 29 ans n'ayant subi aucune chimiothérapie préalable).

Chaque essai consistait en l'implantation d'un fragment de tumeur sous le recouvrement membraneux du 15 rein de souris athymiques Swiss ou de souris athymi- ques élevées au hasard. Il y avait six souris par | ' groupe d'essai et 12 par témoin (un sexe par expérien- ( Oe), les souris mâles pesant au minimum 18 g et les souris femelles pesant au minimum 17 g, tous les 20 animaux d'essai se situant dans la tolérance pondérale de 4 g. On a administré les composés d'essai par injection intrapéritonéale en commençant un jour après l'implantation de la tumeur et on a répété, tous les quatre jours pour un total de trois injections.

25 On a pesé les animaux d'essai et l'on a enregistré quotidiennement la mortalité au cours d'une période d'essai de 11 jours. Le rapport de changement de poids moyen de la tumeur pour les animaux traités et les animaux témoins (T/C) a été déterminé par un 30 pourcentage.

On a effectué les essais à différents dosages. Il a été déterminé qu'une valeur initiale T/C inférieure ou égale à 20% était nécessaire pour démontrer une activité modérée au cours de cet essai.

35 Une valeur T/C reproductible inférieure ou égale à 21 10% est considérée comme une activité significative.

Le composé de l'exemple 3 a exercé l'activité suivante : Dose (mg/kg) T/C % T/C % (répétition) 800 5 400 --- 58 ..

200 33 51 100 55 67

On a trouvé que le composé de l'exemple 3 était inactif dans le système d'essai 3MBG5.

10 D'après ce qui précède, on constate que, · selon la présente invention, on obtient une classe de nouveaux 5-pyrimidine-carboxamides substitués dont les membres donnent lieu à une régression et/ou à une inhibition de la croissance de la leucémie. On 15 comprendra que différents changements peuvent être apportés dans le procédé de préparation et l'utili- ' sation des composés thérapeutiquement actifs de l'in- ! •vention. En conséquence, la description ci-dessus doit être considérée uniquement à titre d'illustra- 1 20 tion et le cadre de l'invention doit être interprété conformément aux revendications ci-après.

Claims

22
1. Procédé en vue de provoquer la régression de la leucémie, caractérisé en ce qu'il consiste à traiter la leucémie avec une quantité efficace d'un 5 composé de formule : 10 ^N^ OH D ^ R4 dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone ; R„ représente un atome d'hydrogène ou un 15 ^ radical carbohydrate choisi parmi le groupe comprenant les groupes furannosyle, pyrannosyle, glucopyran-nosyle ou galactopyrannosyle, leurs dérivés déoxy, ainsi que les groupes hydroxyalcoxyalkyle et polyhy-droxyalkyle contenant 2 à 12 atomes de carbone dans 20 chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle ; Rg et R^ représentent chacun un atome d'hydrogène ou, lorsque R^ est un atome d'hydrogène, un des radicaux Rg ou R4 peut être un atome de fluor ; ainsi que de ses sels d'addition pharmacolo-25 giquement acceptables.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que chacun des radicaux .Rg et R^ du composé est un atome d'hydrogène.
3. Procédé selon la revendication 1, carac-30 térisé en ce qu'un des radicaux Rg ou R^ de ce composé est un atome d'hydrogène et l'autre est un atome de fluor.
4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le 3,4-dihydro-4- 35 hydroxy-6-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carboxamide. 23
5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le 3,4-dihydro-6-hydroxy-2-méthoxy-4-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carbo-xamide.
6. Procédé selon la revendication 1, carac térisé en ce que le composé est le N-(2-fluorophényl)- 3,4-dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide.
7. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le N-(4-fluorophényl)- 10 3,4-dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide.
8. Composition pharmaceutique en vue de provoquer la régression de la leucémie, caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité efficace d'un 5-pyrimidine-carboxamide de formule : 15 0 · 1 r2_A-c -
1 N ^OH 20 dans laquelle R^ représente un atome d'hydrogène ou un groupe alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone ; R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical carbohydrate choisi parmi le groupe comprenant 25 les groupes furannosyle, pyrannosyle, glucopyrannosyle ou galactopyrannosyle, leurs dérivés déoxy, ainsi que les groupes hydroxyalcoxyalkyle et polyhydroxy-alkyle contenant 2 à 12 atomes de carbone dans chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle ;
30 Rg et R^ représentent chacun un atome d'hy drogène ou, lorsque R1 représente un atome d'hydrogène, . un des radicaux Rg ou R^ peut être un atome de fluor, ainsi que de ses sels d'addition pharmacologiquement acceptables. 24
9. Composition pharmaceutique selon la revendication 8, caractérisée en ce que chacun des radicaux Rg et du 5-pyrimidine-carboxamide est un atome d'hydrogène.
10. Composition pharmaceutique selon la revendication 8, caractérisée en ce qu'un des radicaux Rg et R^ du 5-pyrimidine-carboxamide est un atome d'hydrogène et l'autre est un atome de fluor*
11. Composition pharmaceutique selon la 10 revendication 8, caractérisée en ce que le 5-pyrimi- dine-carboxamide est le 3,4-dihydro-4-hydroxy-6-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carboxamide.
12. Composition pharmaceutique selon la revendication 8, caractérisée en ce que le 5-pyrimidine- 15 carboxamide est le 3,4-dihydro-6-hydroxy-2-méthoxy- 4-oxo-N-phériyl-5-pyrimidine-carboxamide.
13. Composition pharmaceutique selon la revendication 8, caractérisée en ce que le 5-pyrimidine-carboxamide est le N-(2-fluorophényl)-3,4-dihydro- 20 6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide.
14. Composition pharmaceutique selon la revendication 8, caractérisée en ce que le 5-pyrimidine-carboxamide est le N-(4-fluorophényl)-3,4-dihydro- 6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide.
15. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 8 à 14, caractérisée en ce qu'elle comprend le 5-pyrimidine-carboxamide en mélange avec un excipient ou un support pratiquement non toxique et pharmaceutiquement acceptable. 30 ,16. 5-pyrimidine-carboxamide de formule : î JjC 's^·
35 X ^OH R^ 25 dans laquelle R^ représente un atome d'hydrogène du un groupe alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone ; Rg représente un atome d'hydrogène ou un 5 radical carbohydrate choisi parmi le groupe compre nant les groupes furannosyle, pyrannosyle, glucopyran-nosyle ou galactopyrannosyle, leurs dérivés déoxy, ainsi que les groupes hydroxyalcoxyalkyle et’poly-hydroxyalkyle contenant 2 a 12 atomes de carbone dans 10 chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle ; Rg et R^ représentent chacun un atome d'hydrogène ou, lorsque R1 est un atome d'hydrogène, un des radicaux Rg ou peut être un atome de fluor ; ainsi que ses sels d'addition pharmacologi-15 quement acceptables. 17. 5-pyrimidine-carboxamide selon la revendication 16, caractérisé en ce que chacun des radicaux Rg et R^ est un atome d'hydrogène. 18. 5-pyrimidine-carboxamide selon la re-20 vendication 16, caractérisé en ce qu'un des radicaux Rg ou R^ est un atome d'hydrogène et l'autre est un atome de fluor. 19. 5-pyrimidine-carboxamide selon la revendication 16, à savoir le 3,4-dihydro-4-hydroxy- 25 6-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carboxamide. 20. 5-pyrimidine-carboxamide selon la re-vendication 16, à savoir le 3,4-dihydro-6-hydroxy-2-méthoxy-4-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carboxamide. 21. 5-pyrimidine-carboxamide selon la re- 30 vendication 16, à savoir le N-(2-fluorophény1)-3,4- dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide. 22. 5-pyrimidine-carboxamide selon la revendication 16, à savoir le N-(4-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide. 26
23. Procédé de préparation d'un 5-pyrimi-dine-carboxaraide de formule : 5 2
1. N R4 dans laquelle R.^ représente un atome d'hydrogène. ou un 10 groupe alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone ; représente un atome d'hydrogène ou un radical carbohydrate choisi parmi le groupe comprenant les groupes furannosyle, pyrannosyle, glucopyran-nosyle ou galactopyrannosyle, leurs dérivés déoxy, 15 ainsi que les groupes hydroxyalcoxyalkyle et poly- hydroxyalkyïe contenant 2 à 12 atomes de carbone dans chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle ; Rg et R^ représentent chacun un atome d'hydrogène ou, lorsque R^ est un atome d'hydrogène, un 20 des radicaux Rg ou R4 peut être un atome de fluor ; ainsi que de ses sels d'addition pharmacologiquement acceptables, caractérisé en ce qu'il consiste à faire 1 réagir la 4,6-dihydroxy-pyrimidine ou une 4,6-dihydroxy-r 2-alcoxy-pyrimidine appropriée avec 1'isocyanate de 25 phényle ou un isocyanate de phényle substitué approprié en présence d'un solvant ou d'un milieu disper- K sant.
24. Procédé selon la revendication 23, caractérisé en ce qu'on fait réagir la 4,6-dihydroxy- 30 pyrimidine ou une 4,6-dihydroxy-2-alcoxy-pyrimidine appropriée avec l'isocyanate de phényle ou un isocyanate de phényle substitué approprié dans des proportions molaires de 2:1 à 1:2, la réaction étant effectuée à des températures comprises entre 0 et 200°C. 1 % , 1 27 ' i
25. Procédé selon la revendication '23, caractérisé en ce que chacun des radicaux et du 5-pyrimidine-carboxamide est un atome d'hydrogène.
26. Procédé de préparation d'un 5-pyrimi-5 dine-carboxamide répondant à la formule indiquée dans la revendication 23, caractérisé en ce qu'il consiste à réduire un 2-thioxo-5-pyrimidine-carboxamide correspondant avec du nickel de Raney. ,27. Procédé selon la revendication 26, 10 pour la préparation du 5-pyrimidine-carboxamide, ca- 1 i 1 ractérisé en ce qu'un des radicaux Rg ou R4 est un atome d'hydrogène et l'autre est un atome de fluor, i ce procédé consistant à réduire un 2-thioxo-5-p7rimidine-carboxamide correspondant substitué par un groupe N-(2-fluoro-15 phényle) ou par un groupe N-(4-fluorophényle) avec du nickel dé Raney.
28. Procédé de préparation d'un 5-pyrimidine-carboxamide répondant à la formule indiquée dans la revendication 23, caractérisé en ce qu'il consiste 20. réduire un 2-thioxo-5-pyrimidine-carboxamide correspondant substitué par un groupe N-(2-fluorophényle) ou par un groupe N-(4-fluorophényle) avec du nickel de Raney.
29. Procédé de préparation d'un 2-alcoxy-25 5-pyrimidine-carboxamide répondant à la formule indiquée dans la revendication 23, caractérisé en ce qu'il Λ consiste à faire réagir une O-alkyl-pseudo-urée avec urt diester d'acide 2-aroylamino-propane-dioïque subs-· titué de manière appropriée. i .
30. Procédé selon les revendications 23- 26 ci-dessus pour la préparation du 3,4-dihydro-4~ hydroxy-6-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carboxamide.
31. Procédé selon les revendications 23-26 ci-dessus pour la préparation du 3,4-dihydro-6-35 . hydroxy-2-méthoxy-4-oxo-N-phényl-5-pyrimidine-carbo- * > 28 - xamide.
32. Procédé selon les revendications 26-28 ci-dessus pour la préparation du N-(2-fluorophényl)- 3.4- dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide.
33. Procédé selon les revendications 26- 28 ci-dessus pour la préparation du N-(4-fluorophényl)- 3.4- dihydro-6-hydroxy-5-pyrimidine-carboxamide. r . ! ' Γ , i i ' i : i