FR2628869A1 - - Google Patents

Abstract

L'invention concerne de nouveaux N-phényl-5-pyrimidinecarboxamides substitués. Selon l'invention, ils ont pour formule : (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate; R3 est un hydrogène et R4 est un fluor ou R3 est un fluor et R4 est un hydrogène; ainsi que leurs sels d'addition d'acide acceptables en pharmacie. L'invention s'applique notamment à la régression de la leucémie.

Description

RÉPUBLIQUE FRAN AISE N de publication: 2 628 869 (à nutiliser que pour

les INSTITUT NATIONAL commandes de reproduction)

DE LA PROPRIÉTÉ INDUSTRIELLE

D N d'enregistrement national 88 03462 PARIS

Int Cl': G 07 D 239/22; A 61 K 31/505.

@ DEMANDE DE BREVET D'INVENTION A1

Date de dépôt: 17 mars 1988. (Qi Demandeur(s): Société dite: UNIROYAL CHEMICAL LTD/UNIROYAL CHEMICAL LTEE. - CA et Société

) Priorité: dite: UNIROYAL CHEMICAL COMPANY Inc. - US.

Q Inventeur(s): Arthur D. Brewer: John A. Minatelli.

Date de la mise à disposition du public de la

demande: BOPI " Brevets " n 38 du 22 septembre 1989.

( Références à d'autres documents nationaux appa-

rentés: ( Titulaire(s)

( Mandataire(s): Cabinet Weinstein.

Nouveaux N-phényl-5-pyrimidinecarboxamides substitués, composition pharmaceutique pour le traitement de la

leucémie et des tumeurs les contenant.

(5 L'invention concerne de nouveaux N-phényl-5-pyrimidine-

carboxamides substitués.

Selon rl'invention, ils ont pour formule

O M

m dans laquelle RI est un hydrogène ou un résidu de carbohy-

drate: R3 est un hydrogène et R4 est un fluor ou R3 est un fluor et R4 est un hydrogène: ainsi que leurs sels d'addition

I d'acide acceptables en pharmacie.

L'invention s'applique notamment à la régression de la > leucémie, N N Coe M. D Vente des fascicules à l'IMPRIMERIE NATIONALE. 27. rue de la Convention -75732 PARIS CEDEX 1t La présente invention se rapporte à de nouveaux N-phényl-5-pyrimidinecarboxamides substitués, et leurs nucléosides. Plus particulièrement, l'invention concerne

de nouveaux dérivés N-(fluorophényl)-5-pyrimidinecarbo-

xamides oui ont une activité sur la régression de la leucémie ou des tumeurs, aux compositions pharmaceutiques contenant de tels dérivés en tant que leurs constituants

thérapeutiquement efficaces chez les mammifères.

Or, la préparation des composés 5-pyrimidinecarboxamides est connue, et plus particulièrement les composés de formule: o0 (A)

R1 C -NHT

R2 OH

dans laquelle: R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate choisi dans le groupe consistant en groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés désoxy et les groupes hydroxyalcoxyalcoyle et polyhydroxyalcoyle ayant de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et alcoyle; et R2 est un hydrogène ou un groupe alcoxy ayant de 1 à 4 atomes de carbone. Un composé préféré est également connu. Il s'agit du composé ayant pour formule:

(B) H

0 0 R1 c 3 H

H OH

R4 dans laquelle: R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate tel que décrit précédemment et l'un des R3 ou R4 est un fluor et l'autre est un hydrogène. Ces composés sont dénommés dans la présente

demande comme les composés "3,4-dihydro" ou "dihydro".

Cette désignation fait référence à la saturation de la liaison entre la position 3 et la position 4 et à la double liaison entre la position 1 et la position 2 sur

le noyau pyrimidine.

Le procédé connu pour préparer les composés de formule (A) consiste généralement en une réaction d'une

4,6-dihydroxy-pyrimidine ou d'une 4,6-dihydroxy-2-alcoxy-

pyrimidine appropriée avec de l'isocyanate de phényle ou un isocyanate de phényle substitué de manière appropriée en présence d'un solvant ou d'un milieu dispersant comme le diméthylsulfoxyde, la pyridine, le diméthylformamide, la N-méthylpyrrolidone, le diméthylacétamide, le sulfolane, l'oxyde de tétrahydrothiophène, l'acétonitrile ou une amine tertiaire comme la triéthylamine. Les proportions molaires de la pyrimidine à l'isocyanate de phényle comme réactif peuvent être comprises entre environ 2:1 et 1:2 et sont de préférence d'environ 1,1: 1 à 1l,1, des proportions stoechiométriques étant généralement suffisantes. La réaction peut être effectuée à des températures variant entre environ 0 et 200 C, usuellement entre environ 24 et 160 C; dans la plupart des cas, la réaction se passe assez bien à des températures comprises entre environ 80 et 100 C. La formation des 5-carboxamides est sensiblement complète dans des périodes de réaction variant entre environ une demi- heure et 6 heures et usuellement entre environ 2 et

4 heures.

Alternativement, les 5-pyrimidinecarboxamides

peuvent être préparés à partir des 2-thioxo-5-pyrimidine-

carboxamides correspondants décrits dans la demande de brevet US en cours No. 699 776 déposée le 8 Février 1985

(5933 KON 1A), par réduction avec du nickel de Raney.

En particulier, les 5-pyrimidinecarboxamides substitués en fluorophényl de formule (B) peuvent ainsi

être préparés à partir des 2-thioxo-5-pyrimidine-

carboxamides N-(2-fluorophényl)- et N-(4-fluorophényl)-

substitués.

Un tel genre de préparation connue conduit en réalité à un mélange de corps qui présente une activité

sur la régression de la leucémie ou des tumeurs.

L'invention a pour objet ces nouveaux corps présents dans le mélange précité, qui n'ont jamais été isolés. La présente invention a alors pour objet un nouveau composé N-(fluorophényl)-5-pyrimidinecarboxamide de formule:

0 O H

R NI

1 H HNR

H4 dans laquelle.: R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate choisi dans le groupe consistant en groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés désoxy et les groupes hydroxyalcoxyalcoyle et polyhydroxyalcoyle ayant de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et alcoyle; et l'un des R3 ou R4 est un fluor et l'autre est un hydrogène; et leurs

sels d'addition d'acide acceptables en pharmacie.

Ces composés sont dénommés "1,2,3,4-tétrahydro" ou "tétrahvdro". La désignation "1,2,3,4-tétrahydro" fait référence > la saturation de chacune des liaisons entre les positions 1,2,3 et 4 sur le noyau pyrimidine. Les composés tétrahydro sont formés plus particulièrement par sur-réduction des composés dihydro au cours de leur

formation par réduction au nickel de Raney.

L'invention a également pour objet une composition pharmaceutioue utilisable pour induire la régression de la leucémie et/ou des tumeurs contenant des quantités efficaces d'un composé de formule (I) et d'un comrpcsé 3,-dihydro correspondant de formule: (B)

0 H

RI Cl R3

H N H

R dans laquelle: R1, R3 et R4 sont tels que définis ci-dessus, et leurs

sels acceptables en pharmacie.

Les composés tétrahydro de formule (I), et les mélanges contenant au moins environ 5% en mole et de préférence 25%' en mole des composés tétrahydro en mélange

avec les composés dihydro correspondants de formule (B).

sont actifs in vivo contre la leucémie L 1210 implantée par voie intrapêritonéale suivant un protocole d'essai 3LE31 du National Cancer Institut (NCI), décrit plus

ar.nlemcnt dans ce cui suit.

Les comzosés têtrahydro de la présente invention ne forr.ent pas de sels d'addition. Les composés dihydrc (qui peuvent être en mélange avec les composés têtrahvdro), former.nt, quant à eux, des sels d'addition avec une variété de réactifs organiques ou inorganiques pharmaceutiquement acceptables, formant des sels. Les sels d'addition sont en général des solides cristallins qui sont relativement insolubles à la fois dans des 2C sclvant. Dolaires ccmme l'eau, le méthanol et l'éthanol, et dans des solvants organiques non polaires conmme le ciéthyl éther, le benzène, le toluène et analogues. Ils sont un peu solubles dans des solvants aprotiques tels

que le diméthylformamide et le diméthylsulfoxyde.

Par ailleurs, lorsque R1 est un résidu de carbohydrate, il peut être furanosyle (comme ribofurancsyle), pyranosyle (comme arabinopyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle), leurs dérivés désoxy ou leurs analogues aliphatiques (comme des groupes hydroxyaleoxyalcoyle ou polyhydroxyalcoyle ayant de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et

alcoyle, comme 2-hydrcxyéthoxyméthyle ou 2,3-dihydroxy-

propyle). Tel qu'utilisé ici, le terme "résidu de carbohydrate"' est destiné Z indiquer les groupes cycliques et acycliques qui forment des pyrimidine nucléosides ou les pseudo nucléosides, comme les matières comprenant à la fois les groupes cycliques ou acycliques

spécifiés précédemment.

Les N-fluorophényl-5-pyrimidinecarboxamides substitués de l'invention peuvent exister sous la forme illustrée dans la formule (I), ou sous chacune de ses formes tautomères. Pour la facilité de la compréhension, les composés de l'invention seront simplement illustrés ici sous la forme montrée dans la formule ci-dessus mais on comprendra qu'ils englobent les formes tautomères ou

leurs mélanges tautomères.

Les N-fluorophényl-5-pyrimide-carboxamides substitués peuvent être préparés à partir des

N-(2-fluorophényl) et N-(4-fluorophényl)-2-thioxo-5-

pyrimidecarboxamides substitués correspondants décrits dans la demande de brevet en cours No. 699 776 déposée le 8 Février 1985 (5933 KON 1 A), par réduction avec du

nickel de Raney.

Les nouveaux composés de l'invention sont des agents cytotoxiques utiles pour induire la régression des malignités du sang comme la leucémie, ainsi que pour inhiber la croissance des tumeurs solides et non solides. On peut les utiliser seuls ou en combinaison avec d'autres agents chimiothérapeutiques actifs dans ce but. Tels qu'utilisés ici, les termes "régression" et "inhibition" comprennent l'arrêt ou le retard de la croissance de la malignité ou autre manifestation de la maladie, en comparaison au cours de la maladie en

l'absence de traitement.

L'administration des nouveaux N-fluorophényl-

-5-pyrimidinecarboxamides à des souris en quantités comprises entre environ 12 et 200 mg/kg, de préférence entre environ 25 et 100 mg/kg de poids corporel s'est révélée efficace pour induire la régression de la leucémie. La relation des doses pour les mammifères d'autres dimensions et espèces est décrite par Freireich, E.J. et autres, Quantitative Comparison of Toxicity of Anti-Cancer Agents in Mouse, Rat, Hamster, Dog, Monkey, and Man, Cancer Chemotherapy, Reg. 50, No. 4, 219-244,

Mai 1966.

Le niveau de la dose peut bien entendu être

aJusté pour obtenir une réponse thérapeutique optimale.

Par exemple, plusieurs doses divisées peuvent être administrées quotidiennement ou bien la dose peut être réduite proportionnellement, comme cela est indiqué par

les exigences de la situation thérapeutique.

Les composés actifs peuvent être administrés de

manière appropriée par voie parentérale, intrapéri-

tonéale, intraveineuse ou orale. Des solutions ou dispersions des composés actifs peuvent être préparées dans l'eau, en mélange approprié avec un agent tensio-actif tel que de l'hydroxypropylcellulose. Des dispersions peuvent également être préparées dans le glycérol, des polyéthylène glycols liquides et leurs mélanges et dans des huiles. En conditions ordinaires de stockage et d'utilisation, ces préparations contiennent

un conservateur pour empêcher la croissance des micro-

organismes. Les formes pharmaceutiques appropriées à un usage injectable comprennent des solutions ou dispersions aqueuses stériles et des poudres stériles pour la pÉéparation extemporanée de solutions ou dispersions injectables stériles. Pour de telles utilisations, la forme doit être stérile et doit être fluide au point nécessaire pour obtenir une utilisation facile à la seringue. Elle doit être stable aux conditions de fabrication et de stockage et doit être préservée contre l'action de contamination des micro-organismes comme les

bactéries et les champignons.

Le support peut être un solvant ou milieu de dispersion contenant, par exemple, de l'eau, de l'éthanol, un polyol (par exemple glycérol, propylène glycol et polyéthylène glycol liquide, ou analogues), leurs mélanges appropriés et des huiles végétales. La fluidité appropriée peut être maintenue, par exemple, par utilisation d'un film comme de la lécithine, par le maintien de la granulométrie requise dans le cas d'une

dispersion et par l'utilisation d'agents tensio-actifs.

La prévention de l'action des micro-organismes peut être assurée par divers agents antibactériens et fongicides, par exemple parabène chlorCbutanol, phénol, acide sorbique, thirnérosal ou analogue. Dans de nombreux cas, il peut être préférable d'inclure des agents isotoniques, par exemple du sucre ou du chlorure de sodium, dans la forme du dosage. Une absorption prolongée des formules injectables peut être produite par incorporation d'agents retardant l'absorption, par exemple-du monostéarate

d'aluminium et de la gélatine.

Des solutions injectables stériles sont préparées en incorporant le composé actif dans le solvant approprié en mélange avec divers des autres ingrédients énumérés ci-dessus, selon ce qui est requis, avec ensuite stérilisation filtrée. En général, les dispersions sont préparées en incorporant l'ingrédient actif stérilisé dans un véhicule stérile qui contient le milieu de dispersion et tout autre ingrédient requis. Si par ailleurs des poudres stériles sont utilisées pour préparer des solutions stériles injectables, il est préférable de soumettre une solution stérile filtrée des ingrédients souhaités à un séchage sous vide ou une lyophilisation, pour donner une poudre de l'ingrédient

actif plus tout ingrédient supplémentaire souhaité.

a Tel qu'utilisé ici, "support ou excipient sensiblement non toxique acceptable en pharmacie" comprend des solvants, milieux de dispersion, revêtements ou films, agents bactéricides et fongicides, agents isotoniques et retardant l'absorption et analogues. L'utilisation de tels milieux et agents en tant que

supports ou excipients pour des substances pharmaceu-

tiquement actives est bien connue. A l'exception du fait qu'un milieu ou agent conventionnel peut être incompatible ayec l'ingrédient actif ou bien toxique, son utilisation dans les formules thérapeutiques de l'invention est envisagée ici. Des ingrédients actifs supplémentaires peuvent également être incorporés dans

les compositions thérapeutiques.

Il peut être avantageux de formuler les compositions de l'invention sous forme de dose unitaire pour la facilité de l'administration et l'uniformité du dosage. Une forme de dose unitaire, telle qu'utilisée ici, indique une unité physiquement distincte appropriée à une utilisation comme dose unitaire pour les sujets mammifères à traiter; chaque unité contient une quantité prédéterminée de la matière active calculée pour produire l'effet thérapeutique souhaité, en association avec le support pharmaceuticuement acceptable requis. Les spécifications des formes de dose unitaire sont dictées par et dépendent directement de (a) les caractéristiques uniques de la matière active et l'effet thérapeutique particulier à obtenir et (b) les limites inhérentes à la technique du mélange d'une telle matière active pour le traitement d'une maladie chez des sujets vivants ayant une condition de maladie, sans effets secondaires

cytotoxiques excessifs.

La régression de la leucémie ou l'inhibition de la croissance des tumeurs peut être atteinte par exemple, par l'utilisation de doses quotidiennes pendant 5 à 10 jours ou plus, de 5-pyrimidinecarboxamide selon la présente invention. Des doses multiples ou des doses sur toute base périodique souhaitée, peuvent également être utilisées. L'ingrédient thérapeutiquement actif est ainsi administré en quantités suffisantes pour aider à la régression et à l'inhibition d'une plus ample croissance de la leucémie en l'absence d'effets secondaires

excessifs néfastes d'une nature cytotoxique.

L'invention sera décrite en plus de détail en se référant aux exemples spécifiques suivants illustrant la préparation et les.essais de ces composés ainsi qu'aux figures dans lesquelles: - la figure 1 représente un spectre RMN (résonance magnétique nucléaire) du mélange des composés obtenus selon l'exemple I décrit ci-dessous; - la figure 2 représente un spectre de masse du mélange (exemple 1); - la figure 3 est un spectre RMN du composé pur 3,4-dihydro du témoin A ci-dessous; - la figure Z représente un spectre de masse du comDosé pur 3,4-dihydro du témoin A; la figure 5 est un spectre RMN du mélange de l'exemple 2 ci-dessous; et la figure 6 représente un spectre de masse du

mélange de l'exemple 2.

Dans les fluorophényl-5-pyrimidinecarboxamides substitués selon la présente invention, les composés

N-(4-fluorophényl)-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-py-

rimidinecarboxamides et N-(2-fluorophényl)-l,2,3,4-

tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamides et les mélanges contenant les composés précités avec leurs composés 3,4-dihydro correspondants seront détaillés plus amplement dans les exemples suivants de préparation et

d'essai de ces composés.

il

Exemole 1.

Préparation du N-(2-fluorophény -1,2,3,4-

tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide, en

mélange avec du N-(2-fluorophényl3,4-dihydro-6-hydroxy-

4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide. A un mélange d'ammoniaque aqueuse concentrée (200 ml) avec de l'eau (200 ml), on a ajouté 7,2 g de

NI- ( 2-fluorophény$-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-2-

thioxo-5-pyrimidinecarboxamide comme composé de départ (préparé de la même manière que les composés analogues dont la préparation est décrite à l'exemple 1 de la demande de brevet US en cours'ci-dessus mentionnée zo. 699 776). A cette solution, on a ajouté du nickel de Raney (26g). La suspension a été doucement chauffée (à 80-900C) pendant 6 heures et refroidie. On a ajouté de l'acide chlorhydrique fort Jusqu'à ce que le mélange de la réaction soit complètement acide et que le nickel de Raney commence à se dissoudre. Lorsqu'il n'y eut plus de dégagement d'hydrogène, les solides ont été récupérés et lavés sur un pain de filtrage avec de l'eau et de l'éthanol et ensuite remis en suspension dans l'éthanol (50ml) . La suspension fut alors amenée presque jusqu'à l'ébullition. Les solidesont été recueillis, lavés.avec

un peu d'éthanol et de l'éthyl éthe.r et séchés.

Cette préparation a donné 4,2 g d'une poudre de couleur grise n'ayant pas de point net de fusion et se décomposant à 240 C et plus. Le produit a présenté des spectres RMIZ et de masse, montrés dans les figures 1 et 2. On a trouvé que le mélange contenait environ 30% en

poids de N-(2-fluorophényl)-1,2,3,4-tétrahydro-

6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide et environ 70% en

poids de N-(2-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy-4-

cxo-5-pvrimidinecarboxamide. Les structures attribuées à ces composés sont basées sur l'interprétation des spectres RMN et de masse des figures 1 et 2. Se référant d'abord à la figure 1, le RMN présente tous les pics de résonance de l'hydrogène qui sont théoriquement présents basés sur la structure du

N-(2-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-

pyrimidinecarboxamide. Le pic net d'un singlet à 8,32, mettant en évidence l'hydrogène en position 2 du noyau pyrimidine est significatif ainsi que le large multiplet à 4,5 Squi met en évidence 2 hydrogènes en position 2 du noyau pyrimidine. Le fait que l'ensemble de ces pics soit présent en même temps, confirme l'existence d'un mélange de 2 composés, c'est-à-dire des formes 3,4-dihydro et ],2,3,4-tétrahydrc. La structure en pics multiples à 6,95-7,75 est due aux atomes d'hydrogène aromatique sur le noyau carboxamide substitué. La configuration spécifique de ce complexe de pics est indicative sur la position du substituant fluor. Dans la figure 1, le fluor est en position 2 sur le noyau (à comparer avec la figure

5 o le fluor est à la position 4).

Le spectre de masse illustrée à la figure 2, confirme l'attribution de structure basée sur les données RMN. Les principales caractéristiques sont les deux pics "de base" (M) des composés (249 et 251 m/e) et leurs équivalents (M + 1) (250 et 252 m/e) dus à la protonation. Dans le motif détaillé, le plus grand pic est celui de 111 m/e du à la protonation de la moitié 2-fluoroanilino, commune à la fois aux composés dihydro et tétrahydro. Les fragments pyrimidinecarbonyleà 139 et

141 m/e sont également présents.

Les composés 3,4-dihydro correspondants étant connus, il a été facile de déterminer les propriétés des composés substitués tétrahydro à partir des analyses RMN

et des spectres de masse relativement aux mélanges.

Témoin A.

Préparation du N-(2-fluorophényl)-3,4-dihydro-

6-hydroxy- 4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide.

On a préparé du N-(2-fluorophényl)-3,4-

dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide par l'oxydation contrôlée du composé 1,2,3,4-tétrahydro

contenu dans le mélange de l'exemple 1 comme suit.

On a mis en suspension le mélange (lOg) dans de l'acide acétique pur et 9 ml d'acide peracétique à 40%

dans de l'acide acétique furent ajoutés avec précaution.

Le mélange a été chauffé doucement pendant une Y2 heure.

On a ajouté de l'acide acétique pur en plus à la solution chaude, en chauffant, jusqu'à ce que les solides soient

dissous en grande partie. La solution a été filtrée -

lorscu'elle était très chaude, puis refroidie pendant une

heure et les solides qui sont apparus ont été récupérés.

Un solide microcristallin sous forme d'un disque pale (6,2g) a été produit n'ayant pas de point net de f sion

et se décomposant en fondant à environ 230 C.

L'élimination du composé 1,2,3,z-tétrahydro a été montrée par la disparition du pic à 4,55 C et d'autres pics mineurs dans le spectre de résonance magnétique nucléaire, tel que représenté sur la figure 3, et par l'abscence du pic à 251 m/e sur le spectre de

masse tel que représenté sur la figure 4.

Exemple 2

Préparation du N-(4-fluorophényl)-l,2,3,4-

tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide, en

mélange avec du N-(4-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-

hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide.

A un mélange d'ammoniaque aqueuse concentrée (200ml) et d'eau (200 ml), on a ajouté 7,2 g d'un composé

de départ: N-(4-fluorophényl)-1,2,3,4-tétrahydro-

6-hydroxy-4-oxo-2-thioxo-5-pyrimidinecarboxamide (préparé de la même manière que le composé analogue dont la préparation est décrite à l'exemple 1 de la demande de brevet US No. 699 776). On y a ajouté du nickel de Raney (26g). La suspension a été doucement chauffée (à 80-90 C) pendant 6 heures puis refroidie. De l'acide chlorhydrique fort a été ajouté jusqu'à ce que le mélange réactionnel soit totalement acide et que le nickel de Raney commence à se dissoudre. Lorsqu'il n'y eut plus de dégagement d'hydrogène, les solides ont été recueillis, lavés sur un pain de filtrage avec de l'eau et de l'éthanol, puis remis en suspension dans l'éthanol (50 ml). La suspension a alors été amenée presqu'à l'ébullition. Les solides ont été recueillis, lavés avec un peu d'éthanol et de l'éthyl éther et séchés. Le rendement était de 4,2g d'une poudre de couleur grise n'ayant pas de point net de fusion, se

décomposant à 2O0 C et plus. Les spectres de RMN et de-

masse du produit sont annexés aux figures 5 et 6. Les spectres sont cohérents avec un mélange de

N-(4-fluorophényl)-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-py-

rimidinecarboxamide et de N-(4-fluorophényl)-3,4-

dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide. De façon spécifique, le spectre RMN de la figure 5 montre des pics à 8,32 Set 4,5 qui indiquent un hydrogène unique à la position 2 sur le noyau pyrimidine, comme dans le composé 3,4-dihydro, et deux hydrogènes à la position 2 sur le noyau pyrimidine, comme dans le composé 1,2,3,4-tétrahydro. Comme ces deux formes ne peuvent coexister dans la même molécule, un mélange de

ces composés est révélé.

Cette conclusion est supportée par les données de spectre de masse de la figure 6. Dans ce spectre, deux pics de base "M'", un pour le composé 3,4dihydro (249 m/e), et l'autre pour le composé 1,2,3,4-tétrahydro

(251 m/e) sont clairement montrés.

Comparaison des activités anti-leucémie des cofposés de l'exemple 1 et du témoin A, et de l'exemple 2 avec des analogues de 5pyrimidinecarboxamides substitués dans la régression de la leucémie lymphoide L1210 implantée par voie intrapéritonéale. Des échantillons des c6mposés de l'exemple 1, du témoin A et de l'exemple 2 et d'autres pyrimidinecarboxamides substitués de structure similaire ont été testés in vivo selon le protocole d'essai 3LE31 du National Cancer Institut (NCI Protocol 1100,Cancer Chemotherapy Reports, Partie 3, Volume 3, No.2, Septembré 1972) pour déterminer les effets des composés sur la leucémie L 1210 implantée par voie intrapéritonéale (J. Nat'l. Cancer Inst. 13 (5): 1328, 1953). Chaque essai a compris l'implantation des cellules de leucémie dans 6 souris DBA/2 souris, un sexe par expérience, les souris mâles pesant un minimum de 18 grammes et les souris femelles pesant un minimum de 17 grammes, et tous les animaux d'essai étant dans une gamme de poids ayant des variations de 3 grammes. Les composés

d'essai ont été administrés par injection intra-

péritonéale, en doses de 0,1 ml de fluide ascitique dilué (105 cellules par dose), en commençant un jour après l'implantation de la tumeur et en continuant

quotidiennement pendant 9 jours.

Les animaux d'essai ont été pesés et les survivants enregistrés sur une base régulière pendant une période d'essai de 30 jours. Le rapport du temps de survie pour les animaux traités et témoins (T/C) a été

déterminé comme un pourcentage.

Les essais ont été effectués à diverses doses

selon les résultats obtenus avec chaque composé d'essai.

On a pu déterminer statisquement dans le système d'essai 3LE31 qu'une valeur initiale de T/C au moins égale à 125% est nécessaire pour démontrer l'activité tandis qu'une valeur reproductible de T/C égale à ou supérieure à 125% garantit une plus ample étude. Une valeur reproductible de T/C de 150% ou plus est considérée comme étant une

activité significative.

Les résultats d'essai pour les composés de l'exemple 1 et du témoin A de l'exemple 2, et des analogues 2-chlorophényl, 3-fluorophényl ou 2,4difluorophényl substitués de façon similaire (témoins B-D), sont résumés au tableau I. Sous le système d'essai 3LE31, les composés de l'exemple 1 ont montré une activité anti-leucémie (T/C%9 > 125%) à une dose aussi basse eue 50 mg/kg (exemple 1). Par ailleurs, aucun des

composés témoins a montré une activité.

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-- 00Z I! '1D! 1 il sd u. otu' 1 Sil 1JVNI S S([)dLOJ asodwuoj a9 (] 1 r) 1 rL l e En plus du test 3LE31, le mélange de l'exemple 1 a été testé selon les protocoles 3PS31 (leucémie P388 implantée par voie intrapéritonéale) et 3MBG5 (xénogreffe MX-1 du carcinome mammaire humain en capsule subrénale) du National Cancer Institute, comme suit. Activité anti-leucémie du composé de l'exemple 1 dans la régression de la leucémie P388 implantée par

voie intrapéritonéale.

*. Des échantillons du mélange testé de l'exemple 1 ont été testés in vivo selon le protocole d'essai 3PS31 du NCI (Cancer Chemotherapy Reports, Partie 3, Vol. 3, No. 2, Septembre 1972) pour déterminer l'effet du mélange sur la leucémie P388 implantée par voie intrapéritonéale (American Journal of Pathology, 33: No. 3; p. 603, 1957). Chacue essai a compris l'implantation des cellules de leucémie dans six souris DBA/2, un sexe par expérience, les souris mâles pesant un minimum de 18 grammes et les souris femelles pesant un minimum de 17 grammes, et tous les animaux d'essai étant dans une gamme de poids ayant des variations de 3 grammes. Les composés d'essai ont été administrés par injection intraoéritonéale, en doses de O,lml du fluide ascitique (10 cellules par dose), en commençant un jour après l'implantation de la tumeur et en continuant quotidiennement pendant 5 jours pour ces produits de synthèse. Les animaux d'essai ont été pesés et les survivants enregistrés sur une base quotidienne pendant la période d'essai de 30 jours. Le rapport du temps de survie pour les animaux traités et témoins (T/C) a été

déterminé comme un pourcentage.

Les essais ont été effectués à diverses doses.

On a pu déterminer dans le système d'essai 3PS31 qu'une valeur initiale de T/C au moins égale ou supérieure à 120% pour les produits synthétiques, était nécessaire pour démontrer une activité modérée. Une valeur reproductible de T/C de 175% ou plus est considérée comme étant une activité significative. Le mélange de l'exemple 1 a présenté l'activité suivante: Tableau II Activité des composés de l'exemple 1 sur la régression de la leucémie P388 implantée par voie intraDéritonéale. Dose (mg/kg) T/C % T/C %' (repété)

400

188 171

158 144

124 134

128 - 127

Ls mélange del'exemple 1 a montré une activité anti-leucémie (T/C > 120%5) à une dose aussi faible

que 25 mg/kg.

Test comparatif du mélange de l'exemple 1 sur la régression de la xénogreffe MX-1 du carcinome mammaire

humain en capsule-subrénale.

Des échantillons du composé d'essai de l'exemple 1 ont été testés in viVo selon le protocole d'essai 3MBG5 NCI (Cancer Chemotherapy Reports,Partie 3, vol. 3, No. 2, Septembre 1972) pour déterminer les effets du mélange sur les carcinomes mammaires humains en capsules subrénales (explantatio-. chirurgicale en 1974 de la tumeur mammaire primaire d'une femme de 29 ans sans chimiothérapieopréalable). Chaque essai a compris l'implantation d'un fragment de tumeur sans le recouvrement membraneux du rein. de souris athymique de race Suisse ou de souris athymique de race auelconque. Il y avait 6 souris par groupe d'essai et douze par témoin, un sexe par expérience, les souris mnles pesant 18 grammes au min.imrum et les souris femelle pesant 17 grammes au minimum et tous les animaux d'essai étant dans une gamme de poids ayant des variations de 4 grammes. Les comDosés d'essai ont été administrés par injection intrapéritonéale en comrnencant un jour après l'implantation de la tumeur, et répétés tous les 4 jours

sur un total de 3 injections.

Les animaux d'essai ont été pesés et les morts enregistrés quotidiennement pendant une période d'essai de onze jours. Le rapport du changement moyen de poids de la tumeur pour des animaux traités et témoins (T/C) a été

déterminé comme un pourcentage.

Les essais ont été effectués à diverses doses.

On a pu déterminer qu'une valeur initiale de T/C inférieure à ou égale à 20%' était. nécessaire pour démontrer une activité modérée dans cet essai. Une valeur reproductible de T/C inférieure à ou égale à 10% est considérée comme étant une activité significative. Le

mélange de l'exemple 1 a présenté l'activité suivante.

Activité des composés de l'exemple 1 sur la régression de la xénogreffe MX-1 du carcinome mammaire

humain en capsule subrénale.

Dose (mg/kg) T/C % T/C, (répété)

&00 --

400 --- 58

33 51

55 67

On a trouvé que le mélange de l'exemple 1 était

inactif sous le système d'essai 3MBG5.

Au vu de ce qui précède, on pourra voir que, selcn la présente invention, une classe de nou\eaux -pyrirmidinecarboxamides est fournie dont les éléments présentent une activité cytotoxicue importante et induisent la régression et/ou inhibent la croissance de la leucémie et des tumeurs chez les mammifères. Il sera apparent que divers changements peuvent 8tre apportés dans la préparation et l'utilisation, ainsi que dans la substitution particulière, des composés thérapeutiquement

actifs de l'invention.

Claims (2)

R E V E N D I C A T I 0 N S

1. N-phényl-5-pyrimridinecarboxamide substitué, caractérisé en ce qu'il a pour formule: (I)

0 H

R1 t R3

H N)

OH R

H h 4 dans laouelle R1 est un hydrogène ou un résidu de carbohydrate choisi dans le groupe consistant en groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés désoxy et les groupes hydroxyalcoyle et polyhydroxyalcoyle ayvnt de 2 à 12 atomes de carbone dans chacun des fragments alcoxy et alcoyle; R3 est un hydrogène et R4 est un fluor ou R3 est un fluor et R4 est un hydrogène; et leurs sels d'addition d'acide acceptables en pharmacie. 2. N-phényl-5pyrimidinecarboxamide selon la revendication 1,caractérisé en ce que c'est un

- -(2-fluorophényl)-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-

-pyrimidinecarboxamide. 3. N-phénvl-5-pyrimidinecarboxamide selon la revendication 1, caractérisé en ce que c'est un

-I-(4-fluorophényl)-1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-py-

rimidinecarboxamide. 4. Composition pharmaceutique utilisable pour induire la régression de la leucémie et/ou des tumeurs, caractérisée en ce qu'elle comprend des quantités efficaces notamment d'un 5- pyrimidinecarboxamide selon la revendication 1. 5. Composition pharmaceutique selon la revendication 4, caractérisée en ce qu'elle comprend des

quantités efficaces du N-(2-fluorophényl)-1,2,3,4-

tétrahydro-6-hyTdroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide et

d'un r-(2-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy-

4-oxo-5-:yrimidinecarboxamide. 6. Composition pharmaceutique selon la revendication Z., caractérisêe en ce qu'elle comprend des

quantités efficaces du [-(4-fluorophényl)-1,2,3,4-

tétrahydro-6-hyCdroxy --4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide et

d'un!T-(4-fluoroDhênvl)-3,4-dihydro-6-hydroxy -4-oxo-

-pvrimid necarboyxmide. s- 'àFG

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