KR970062038A - 신규의 니트릴히드라타제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 신규의 니트릴 히드라타제를 제공하는 것을 과제로 하며, 그 해결 수단으로서, 슈도노칼디어.서모필러Pseudonocardia thermophilaJCM 3085에 유래되며, 헤테로의 2종의 서브유닛으로부터 구성되는 니트릴히드라타제의 아미노산배열 및 이 유전자의 염기배열을 제공한다. 또, 이 유전자가 삽입된 조환플라스미드를 제작하고, 이 조환플라스미드를 도입한 헹질전환균체를 사용해서 니트릴화합물을 대웅하는 아미드화합물로 변환한다. 이로써, 니트릴화랍물을 대응하는 아미드 화합물로 효율좋게 변환하는 것이 가능해지는 효과를 얻게 된다.

Description

신규의 니트릴히드라타제
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 폴리스미드 pPT-B1의 제한효소절단감지도를 표시함.
제2도는 폴라스미드 pPT-DB1의 제한효소 절단점지도를 표시함.

Claims (21)

  1. 배열표의 배열번호 : 1기재의 아미노산 배열에 의해 표시되는 α서브유닛 및 배열표의 배열번호:2기재의 아미노산배열에 의해 표시되는 β서브유닛으로부터 구성되는 것을 특징으로 하는 니트릴히드라타제.
  2. 배열표의 배열번호 : 1기재의 아미노산배열의 일부를 치환, 결실, 삭제 또는 삽입해서 얻게되는 α서브유닛과 배열표의 배열번호 : 2기재의 아미노산배열의 일부를 치환, 결실, 삭제 또는 삽입해서 얻게되는 β서브유닛의 어느 한쪽 또는 양쪽을 구성요소로서 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 니트릴히드라타제.
  3. 제1항 또는 청구항2에 있어서, 슈도노칼디어ㆍ서모필러(Pseudonocardia thermophilaJCM3095)유래인것을 특징으로 하는 니트릴히드라타제.
  4. 배열표의 배열번호 : 1기재의 아미노산배열의 6번째, 19번째, 38번째, 77번째, 90번째, 102번째, 106번째, 126번째, 130번째, 142번째, 146번째, 187번째, 194번째 및 203번째의 아미노산의 어느 한개이상의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환해서 얻게되는 α서브유닛을 구성요소로서 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 니트릴히드라타제.
  5. 배열표의 배열번호 : 2기재의 아미노산배열의 20번째,21번째, 108번째, 200번째, 212번째의 아미노산의 어느 한개 이상의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환해서 얻게되는 β서브유닛을 구성요소로서 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 니트릴히드라타제.
  6. 제1항에 기재된 니트릴히드라타제의 α서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  7. 재2항에 기재된 니트릴히드라타제의 α서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  8. 배열표의 배열번호 : 3에 기재된 염기배열로 표시되는 니트릴히드라타재의 α서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  9. 배열표의 배열번호 : 3에 기재된 염기배열의 일부를 치환, 결실, 삭제 또는 삽입해서 얻게되는 염기배열로 표시되는 니트릴히드라타제의 α서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  10. 배열표의 배열번호 : 3에 기재된 염기배열의 16번째로부터 18번째, 55번째로부터 57번째, 112번째로부터 114번째, 227번째로부터 231번째, 268번째로부터 270번째, 304번째로부터 306번째, 316번째로부터 318번째, 376번째로부터 378번째, 388번째로부터 390번째, 424번째로부터 426번째, 436번째로부터 438번째, 559번째로부터 561번째, 580번째로부터 582번째, 607번째로부터 609번째의 어느 한개 이상의 염기 배열을 다른 배열로 치환해서 얻게되는 염기배열로 표시되는 니트릴히드라타제의 α서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  11. 제1항에 기재된 니트릴히드라타제의 β서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  12. 제2항에 기재된 니트릴히드라타제의 β서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  13. 배열표의 배열번호 : 4에 기재된 염기배열로 표시되는 니트릴히드라타제의 β서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  14. 배열표의 배열번호 : 4에 기재된 염기배열의 일부를 치환, 결실 ,삭제 또는 삽입해서 얻게되는 염기배열로 표시되는 니트릴히드라타제의 β서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  15. 배열표의 배열번호 : 4에 기재된 염기배열의 58번째로부터 60번째, 61번째로부터 63번째, 322번째로부터 324번째, 598번째로부터 600번째, 634번째로부터 636번째의어느 한개 이상의 염기배열을 다른 염기배열로 치환해서 얻게되는 염기배열로 표시되는 니트릴히드라타제의 β서브유닛을 코드하는 것을 특징으로 하는 유전자.
  16. 제6항에서부터 제10항에 기재된 니트릴히드라타제 α서브유닛을 코드하는 유전자 또는 제1항에서부터 제15항에 기재된 니트릴히드라타제의 β서브유닛을 코드하는 유전자의 어느 것을 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 조환플라스미드.
  17. 제6항에서부터 제10항에 기재된 니트릴히드라타제의 α서브유닛을 코드하는 유전자 및 제11항에서부터 제15항에 기재된 니트릴히드라타제의 β서브유닛을 코드하는 유전자를 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 조환플라스미드.
  18. 제16항에 기재된 조환플라스미드를 유지하는 것을 특징으로 하는 형질전환주.
  19. 제17항에 개지된 조환플라스미드를 유지하는 것을 특징으로 하는 형질전환주.
  20. 제18항 또는 제19항에 기재된 형질전환주를 배양해서, 배양에 의해 얻게된 형질전환주, 배양액 및 그들의 처리물로부터 니트릴히드라타제를 회수하는 것을 특징으로 하는 니트릴히드라타제의 생산방법.
  21. 제18항 또는 제19항에 기재된 형질전환주을 배양해서, 배양에 의해 얻게된 형질전환주, 배양액 및 그들의 처리물, 혹은 그것으로부터 얻게되는 니트릴히드라타제와 니트릴화합물을 수성매체속에서 접촉시켜서 이 니트릴화합물에 대응하는 아미드화합물을 제조하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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