KR900003369A - 모티린형 폴리펩티드의 제조방법 및 그것의 발현 - Google Patents

모티린형 폴리펩티드의 제조방법 및 그것의 발현 Download PDF

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다까히꼬 미타니
하루오 다까하시
게니찌 다나까
가쓰야 후지무라
기이찌 사와이
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가또 슈
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Abstract

내용 없음

Description

모티린형 폴리펩티드의 제조방법 및 그것의 발현
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 본 발명의 방법은 요부를 구성하는, 모티린형 유전자 하나를 포함하고 있는 재조합 DNA를 갖는 플라스미드의 제조과정을 나타내는 설명도.
제2도는, 제1도에서와 같으나, 단,2개의 모티린형 유전자를 텐덤으로 포함하는 플라스미드의 제조과정을 나타내는 설명도.
제3도는 본 발명의 방법으로 제조된 13 - 루이신 - 모티린(이하〔루이신13〕 -모티린으로 포기함)과 종래 방법으로 얻은 순수모티린의 장관(intestinal canal)수축 활성을 마그너스법으로 측정한 결과를 나타내는 그래프.

Claims (5)

  1. 식(1)Phe-Val-Pro-lle-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Alg-X-Gin-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln(상기 식에서, X는 Met 및 Asp 이외의 아미노산 잔기를 의미함)로 표시하는 모티린형 폴리펩티드의 제조 방법에 있어서, 비전하 극성 아미노산 잔기를 적어도 6개 갖고, 또, 말단 위치에 메티오닌을 갖는 단사 DNA와, 상기 식(1)로 표시된 아미노산 결합 서열을 코우드한 단사 DNA와, 이들 단사 DNA의 상보적인 단사 DNA를 각각 합성하고, 이들 4개의 합성된 단사 DNA 단편과, 비전하극성 아미노산 잔기를 갖는 DNA 단편과 그것의 상보적인 DNA 단편을 사용하여 리어더 배열로서 2중사 DNA를 만들고, 이 2중사 DNA 단편의 말단에 각각 특정의 제한효소 인식부위를 부가하는 한편, 다른 단백질 유전정보가 조립된 플라스미드를 상기 세한효소로 절단하고, 상기 2중사 DNA단편을 절단된 플라스미드의 각 절단부위에 부가하여 재조합 DNA를 갖는 플라스미드로서 재구성하고, 이 재구성된 플라스미드를 사용하여 미생물을 형질변환 시킴과 동시에 배양하여 상기 식(1)로 표시된 아미노산 결합서열을 코우드한 폴리펩티드를 융합단백질의 일부로 생산하고, 미생물을 파괴한 후에 시아노겐 브로마이드와 펩티드 중간 분해효소로 처리하여 상기 식 (1)로 표시된 폴리펩티드를 분리해내고, 그 다음 분획 처리하여 폴리펩티드를 정제하는 젓을 특징으로 하는 모티린형 폴리펩티드의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 비전하극성 아미노산이 아스파라진, 글루타민, 트에오닌 및 세린으로부터 선택된 것인 모티린형 폴리펩티드의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서, 합성된, 13위치가 변환된 모티린형 유전자가 조립된 재구성 플라스미드를 2종의 제한 효소로 처리하여, 13위치가 변환된 모티린형 유전자 부분의 상류부위와 플라스미드의 다른부위에서 절단하여 얻을 플라스미드 단편을 회수하는 한편, 재구성된 플라스미드를, 한 종류는 첫번째 플라스미드를 내브에서 절단하는데 사용된 것과 동일한 제한요소로, 다른 한 종류는 13위치가 변한된 모티린형 유전자 부분의 하류부위가 상기한 상류부위의 절단부위와 공통되도록 상기한 것과는 다른 제한효소를 사용하여 절단하여 두번째 플라스미드 단편을 얻고, DNA리가 아제를 사용하여 두번째 플라스미드 단편을 첫번째 플라스미드 단편에 텐덤으로 접합시켜 13의 위치가 변환된 2개의 유전자를 갖는 플라스미드를 재구성하고, 필요에 따라 이러한 절단 및 접합조작을 반복하여 원하는 수만큼의 모티린형 유전자를 조립시키는 것을 특징으로 하는 모티린 형 폴리펩티드의 제조방법.
  4. 비전하극성 아미노산 잔기를 적어도 6개 갖는 리어더 배열 폴리펩티드와, 리이더 배열 폴리펩티드의 하류에 메티오닌을 통하여 연결되고, 또 13위치가 메티오닌 및 아스파르트산 이외의 아마노산 잔기로된 13위치가 변환된 모티린에 상당하는 폴리펩티드가 연결되러 있는 것을 특징으로 하는 모티린형 폴리펩티드 제조용 재조합 DNA
  5. 비전하 극성 아미노산 잔기를 적어도 6개 갖는 리이더 배열 폴리펩티드와, 이 리이더 배열 폴리펩티드의 하류에 메티오닌을 통하여 연결되고. 또 13위치가 메티오닌 및 아스파르트산 이외의 아미노산 잔기로된 13위치가 변환된 모티린에 상당하는 폴리펩티드가 연결되어 있는 재조합 DNA가 조릭되어 있는 것을 특징으로 하는 모티린형 폴리펩티드 제조용의 발현용 멕터.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019890012147A 1988-08-24 1989-08-24 모티린형 폴리펩티드의 제조방법 및 그것의 발현 KR960011525B1 (ko)

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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0378078A1 (en) * 1989-01-06 1990-07-18 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Motilin-like polypeptide and use thereof
JPH04299990A (ja) * 1991-03-27 1992-10-23 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd モチリンアナログの精製方法
US5470830A (en) * 1993-08-06 1995-11-28 Ohmeda Pharmaceutical Products Division Inc. Motilin-like polypeptides that inhibit gastrointestinal motor activity
US5422341A (en) * 1993-08-06 1995-06-06 Ohmeda Pharmaceutical Products Division Inc. Motilin-like polypeptides with gastrointestinal motor stimulating activity
JPH083196A (ja) 1994-06-21 1996-01-09 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd カルシトニン誘導体及びその用途
EP1097211B1 (en) * 1998-07-10 2007-04-18 Calgene LLC Expression of eukaryotic peptides in plant plastids
RU2209244C2 (ru) * 2001-04-28 2003-07-27 Закрытое акционерное общество "АСГЛ-Фармацевтические Инновации" Нуклеиновая кислота, кодирующая лидерную последовательность (варианты), вектор на основе плазмиды р6803-platform (варианты), лидерный пептид (варианты) и способ получения белков
AU2010279076B2 (en) * 2009-07-29 2014-09-25 Daiichi Sankyo Company,Limited Motilin-like peptide compound having transmucosal absorbability imparted thereto

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3328793A1 (de) * 1983-08-10 1985-02-28 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Herstellung von sekretin
JPS6078595A (ja) * 1983-10-04 1985-05-04 Wakunaga Seiyaku Kk ２７−デスアミドセクレチンの精製法
JPS62135500A (ja) * 1985-06-20 1987-06-18 モンサント　コンパニ− ポリペプチドからのペプチドの放出
JP2862870B2 (ja) * 1986-09-12 1999-03-03 協和醗酵工業株式会社 新規ペプチド
JP2575022B2 (ja) * 1987-05-07 1997-01-22 株式会社 三和化学研究所 ヒトモチリン前駆体、該前駆体含有クローン化ｄｎａ、その調製法並びに該クローン化ｄｎａが組込まれたプラスミド

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