KR20220073141A

KR20220073141A - 발효 유황이 첨가된 표고버섯 및 그 재배방법

Info

Publication number: KR20220073141A
Application number: KR1020200160946A
Authority: KR
Inventors: 김진선
Original assignee: 김진선
Priority date: 2020-11-26
Filing date: 2020-11-26
Publication date: 2022-06-03
Also published as: KR102505038B1

Abstract

본 발명은 발효 유황이 첨가된 표고버섯 및 그 재배방법에 관한 것으로, 구체적으로는 표고버섯 종균이 접종된 배지를 배양하는 배양단계에서 발효유황액을 침봉, 침수, 살수 및 분무 중 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하여 표고버섯을 재배함으로써, 일반적으로 물을 이용하여 재배한 버섯보다 향이 진하고 버섯의 조직이 단단해 식감이 쫄깃하다는 장점을 있으며, 항산화 작용이 우수하여 피부 미백, 노화 방지 및 주름 개선 효과 및 저장성이 우수하다는 장점이 있는 발효 유황이 첨가된 표고버섯 및 그 재배방법에 관한 것이다.

Description

발효 유황이 첨가된 표고버섯 및 그 재배방법{LENTINUS EDODE CULTIVATED BY USING FERMENTATION SULFURIC AND CULTVATION METHOD THEREOF}

다양한 종류의 버섯은 많은 연구를 통해 그 영양가와 약용 가치가 밝혀지면서 버섯 재배 기술에 대한 중요성이 증가되고 있다. 일반적인 버섯재배는 버섯의 배양과 생육에 적합한 온도, 습도, 이산화탄소, 빛 등 재배 조건을 인위적으로 갖추어야 한다. 버섯은 배지를 준비하는 과정, 종균을 배양하여 배지에 접종하는 과정, 배지에서 접종된 종균을 일정 기간 동안 배양하는 과정 및 배지에서 배양된 버섯을 수확하는 과정을 통해 재배될 수 있다.

표고버섯은 활엽수에 기생하는 담자균 주름버섯목 느타리과에 속하는 버섯으로 독특한 향미와 조직감을 갖고 있으며, 식이섬유, 비타민, 무기질 함량은 많은 반면 지방 함량은 낮아 현대인들의 관심이 급증하고 있다(Manzi P, Aguzzi A, Pizzoferrato L. Nutritional value of mushrooms widely consumed in Italy. Food Chem. 73: 321-325 (2001)). 특히 버섯의 자실체와 균사체에서 항암작용, 면역 증강작용 및 성인병 예방 등의 효과가 밝혀짐에 따라 식품뿐 아니라 의약품의 소재로도 주목받고 있다(Park MH, Oh KY, Lee BW. Anti-cancer activity of Lentinus edodes and Pleurotus astreatus. Korean J. Food Sci. Technol. 30: 702-708(1998)). 또한, 항산화 활성(Kim CH, Jeong JG. Antioxidant activities and the effect of reducing serum alcohol concentration of Lentinus edodes. Korea J. Herbol. 24: 159-164 (2009), Qi Y, Zhao X, Lim YI, Park KY. Antioxidant and anticancer effects of edible and medicinal mushrooms. J. Korean Soc. Food Sci.Nutr. 42: 655-662 (2013), Kim MG, Chu WM, Park EJ. Antioxidant and antigenotoxic effects of shiitake mushrooms affected by different drying methods. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 41: 1041-1048 (2012)), 항비만 효과(Lee MR, Oh DS, Wee AJ, Yun BS, Jang SA, Sung CK. Anti-obesity effects of Lentinus edodes on obese mice induced by high fat diet. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 43: 194-199(2014)) 등이 다양한 연구를 통해 보고된 바가 있으며, 그 외 항돌연변이 효과(Oh SI, Lee MS. Antioxidative stress and antimutagenic effects of Lentinus edodes ethanol extracts. Korean J. Food & Nutr. 20:341-348 (2007)), Hypoglyceminc 효과(Koki T, Chiyoko S, Yasuhiko S, Takashi M, Shigeyuki T. Effect of eritadenine on cholesterol metabolism in the rat. Biochem. Pharmacol. 23: 433-438 (1974)), 인지질의 수치 감소 효과(Sugiyama K, Akachi T, Yamakawa. Hypocholesterolemic action of eritadenine is mediated by a modification of hepatic phospholipid metabolism in rats. J. Nutr. 125: 2134-2144 (1995))도 보고 되고 있다. 특히 표고버섯의 에리타데닌(Eritadenine)은 콜레스테롤의 조직 흡수를 자극하고 방출을 억제함으로써 혈액 내에서의 수치를 낮추는 데에 효과적이라고 알려져 있다(Suzuki S, Ohshima S. Influence of shiitake (Lentinus edodes) on human serum cholesterol. Mushroom Sci. 9: 463-467 (1974), Takashima K,Sato C, Sasaki Y, Morita T, Takeyama S. Effect of eritadenine on cholesterol metabolism in the rat. Biochem. Pharmacol. 23: 433-438 (1974)).

이러한 다양한 기능성을 가진 표고버섯을 비롯하여 많은 식용버섯의 영양성분 및 기능성 향상과 더불어 생산성 향상을 위한 다양한 재배 방법이 개발되어지고 있다.

한국등록특허 제10-1174245호는 화학약품인 살균제를 사용하지 않고 배지를 발효시켜 그 발효열과 유효미생물의 작용에 의해 살균이 이루어지고, 배지에 맥반석 분말이 혼합되기 때문에 항균성 및 배지의 산폐 내지 부패를 방지할 수 있는 발효배지를 이용하여 재배된 표고버섯 및 그 제배방법에 대해 개시하고 있다. 또한 한국등록특허 제10-2142811호는 표고버섯 재배용 배지에 무기 셀레늄을 첨가하여 재배할 때 생육 특허 저하를 최소화하고 유기 셀레늄으로의 전이량은 높일 수 있는 기능성 유기 셀레늄을 함유하는 표고버섯 재배방법에 대해 개시하고 있다. 아울러, 한국등록특허 제10-0907037호는 영지버섯 또는 표고버섯 균사체 배지용 조성물에 녹차 성분을 일정량 함유시킴으로써 버섯 특유의 이취를 감소시켜 향미가 증진되어 상품성을 높일 수 있는 녹차 성분을 함유하는 균사체의 재배방법 및 이를 이용하여 제조된 식품에 대해 개시하고 있다.

한편, 유황은 인간의 몸을 구성하고 있는 다량의 생체 원소 중에 하나이며, 특히 뼈나 피부, 머리카락에 많이 분포되어 있어 유황 결핍은 대머리, 손톱 및 발톱의 각질화, 피부의 노화 등을 일으키는 원인으로 알려져 있다. 또한, 유황은 중금속, 화공약품, 각종 농약 등의 공해물질의 오염에서 해방될 수 있는 해독작용을 가지고 있다고 알려져 있다. 이러한 유황은 알려진 기능성과 그 필요성에 비해 쉽게 섭취하기는 어려운 실정이어서 유황의 섭취 및 활용에 대한 다양한 방법의 개발이 요구되어지고 있다.

한국등록특허 제10-1174245호(2012.08.08.) 한국등록특허 제10-2142811호(2020.08.03.) 한국등록특허 제10-0907037호(2009.07.02.)

본 발명은 상술한 것과 같은 문제점을 해결하고 필요한 기술을 제공하기 위해 안출된 것으로서,

본 발명은 표고버섯 종균이 접종된 배지를 배양하는 배양단계에서 발효유황액을 침봉, 침수, 살수 및 분무 중 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하여 표고버섯을 재배함으로써, 일반적으로 물을 이용하여 재배한 버섯보다 향이 진하고 버섯의 조직이 단단해 식감이 쫄깃하다는 장점을 있으며, 항산화 작용이 우수하여 피부 미백, 노화 방지 및 주름 개선 효과 및 저장성이 우수하다는 장점이 있는 발효 유황이 첨가된 표고버섯 및 그 재배방법을 제공함에 그 목적이 있다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 실시 형태로서,

본 발명은 표고버섯 톱밥배지를 만들어 살균을 하는 배지살균단계; 상기 배지살균단계에서 살균된 배지에 표고버섯 종균을 접종하는 접종단계; 상기 접종단계에서 표고버섯 종균이 접종된 배지에 발효유황액을 공급하여 버섯을 배양하는 배양단계; 및 상기 배양단계에서 배양된 표고버섯이 색이 나도록 갈변시키는 갈변단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 발효 유황이 첨가된 표고버섯의 재배방법을 제공한다.

본 발명에 있어서, 상기 발효유황액은, 100중량부에 대해 유황 10 내지 30중량부, 수산화나트륨 10 내지 30중량부, 천매암 1 내지 2중량부, 황토 1 내지 2중량부, 천일염 1 내지 2중량부, 제올라이트 1 내지 2중량부를 혼합한 후 1 내지 3시간 교반하여 유황혼합물을 제조하는 혼합단계; 상기 혼합단계에서 제조된 유황혼합물을 1 내지 3일간 정치한 후 침전물을 여과하여 유황액을 제조하는 여과단계; 및 상기 여과단계에서 제조된 유황액을 채에 1 내지 2회 내린 후, 채에 내린 유황액에 버섯균사를 넣고 20 내지 25℃에서 5 내지 10일간 발효시켜 발효유황액을 제조하는 발효유황액제조단계;로 이루어지는 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 배양단계에서는, 물 100중량부에 대해 발효유황액 0.1 내지 0.5중량부를 혼합 후 희석하여 이를 침봉, 침수, 살수 및 분무 중에서 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 다른 실시형태는 상기의 방법으로 재배되는 것을 특징으로 하는 발효 유황이 첨가된 표고버섯을 제공한다.

본 발명의 일 실시형태에 따른 발효 유황이 첨가된 표고버섯 및 그 재배방법은 표고버섯 종균이 접종된 배지를 배양하는 배양단계에서 발효유황액을 침봉, 침수, 살수 및 분무 중 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하여 표고버섯을 재배함으로써, 일반적으로 물을 이용하여 재배한 버섯보다 향이 진하고 버섯의 조직이 단단해 식감이 쫄깃하다는 장점을 있으며, 항산화 작용이 우수하여 피부 미백, 노화 방지 및 주름 개선 효과 및 저장성이 우수하다는 장점이 있다.

도 1은 표고버섯의 유황 및 총플라보노이드 함량을 측정한 결과를 나타내는 그림이다.
도 2는 자외선 차단 효과 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3은 표고버섯의 HaCaT cell 독성을 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 표고버섯의 RAW 264.7 cell 독성을 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 5는 표고버섯의 염증 효과를 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.

이하, 본원의 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시형태를 들어 상세히 설명한다. 본 발명의 실시형태는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 더욱 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다. 따라서, 본 발명의 실시형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시형태로 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 “포함”한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.

본 발명의 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 “약”, “실질적으로” 등은 언급된 의미에 고유한 제조 및 물질 허용 오차가 제시될 때 그 수치에서 또는 그 수치에 근접한 의미로 사용되고, 본 발명의 이해를 돕기 위해 정확하거나 절대적인 수치가 언급된 개시 내용을 비양심적인 침해자가 부당하게 이용하는 것을 방지하기 위해 사용된다.

본 발명은 발효 유황이 첨가된 표고버섯 및 그 재배방법에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 발효 유황이 첨가된 표고버섯 재배방법은 배지살균단계, 접종단계, 배양단계 및 갈변단계를 포함할 수 있다.

이하, 본 발명의 일 실시형태에 따른 발효 유황이 첨가된 표고버섯 재배방법을 구체적으로 설명한다. 본 발명의 일 실시형태에 따른 발효 유황이 첨가된 표고버섯(이하 ‘표고버섯’이라고도 함)은 후술하는 재배방법에 의하여 보다 명확하게 이해될 수 있다.

우선, 표고버섯 톱밥배지를 만들어 살균을 하는 배지살균단계를 수행할 수 있다.

다음으로, 상기 배지살균단계에서 살균된 배지에 표고버섯 종균을 접종하는 접종단계를 수행할 수 있다.

다음으로, 상기 접종단계에서 표고버섯 종균이 접종된 배지에 발효유황액을 공급하여 버섯을 배양하는 배양단계를 수행할 수 있다.

본 발명의 일 실시형태에 따르면, 상기 발효유황액은, 물 100중량부에 대해 유황 10 내지 30중량부, 수산화나트륨 10 내지 30중량부, 천매암 1 내지 2중량부, 황토 1 내지 2중량부, 천일염 1 내지 2중량부, 제올라이트 1 내지 2중량부를 혼합한 후 1 내지 3시간 교반하여 유황혼합물을 제조하는 혼합단계, 상기 혼합단계에서 제조된 유황혼합물을 1 내지 3일간 정치한 후 침전물을 여과하여 유황액을 제조하는 여과단계 및 상기 여과단계에서 제조된 유황액을 채에 1 내지 2회 내린 후, 채에 내린 유황액에 버섯균사를 넣고 20 내지 25℃에서 5 내지 10일간 발효시켜 발효유황액을 제조하는 발효유황액제조단계로 이루어지는 것을 특징으로 할 수 있다.

이에 제한되는 것은 아니나, 상기 발효유황액은 물 100중량부에 대해 유황 20중량부, 수산화나트륨 20중량부, 천매암 1중량부, 천일염 1중량부, 제올라이트 1중량부를 혼합한 후 2시간 동안 교반하여 유황혼합물을 제조하는 혼합단계, 상기 혼합단계에서 제조된 유황혼합물을 2일간 정치한 후 침전물을 여과하여 유황액을 제조하는 여과단계 및 상기 여과단계에서 제조된 유황액을 채에 2회 내린 후, 채에 내린 유황액에 버섯균사를 넣고 23℃에서 7일간 발효시켜 발효유황액을 제조하는 발효유황액제조단계로 이루어지는 것이 가장 바람직하다.

또한, 본 발명의 일 실시형태에 따르면, 상기 배양단계에서는, 물 100중량부에 대해 발효유황액 0.1 내지 0.5중량부를 혼합 후 희석하여 이를 침봉, 침수, 살수 및 분무 중에서 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하는 것을 특징으로 할 수 있다.

이에 제한되는 것은 아니나, 상기 배양단계에서는 물 100중량부에 대해 발효유황액 0.2중량부를 혼합한 후 희석하여 이를 침봉, 침수, 살수 및 분무 중에서 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하는 것이 가장 바람직하다.

표고버섯 재배 시 발효유황액 사용에 있어 상기와 같이 한정한 범위를 벗어날 경우, 재배된 표고버섯의 유황 함량이 낮아 폴리페놀 함량이나 항산화능 등의 기능성의 효과를 기대할 수 없으며, 반대로 유황 함량이 너무 높을 경우 버섯의 성장이 제대로 이루어지지 않거나 생산단가가 과도하게 높아질 수 있다는 문제점이 발생할 수 있다는 우려가 있다.

다음으로, 상기 배양단계에서 배양된 표고버섯이 색이 나도록 갈변시키는 갈변단계를 수행할 수 있다.

이하, 본 발명을 구체적인 실시예에 따라 상세히 설명한다. 본 발명의 일 실시형태에 따라 재배된 표고버섯의 유황 및 총플라보노이드 함량 측정 실험, 총폴리페놀 화합물 함량 측정 실험, 수용성 단백질 함량 측정실험, 환원당 함량 측정 실험, 항산화 활성 측정 실험, 수렴효과 측정 실험, 미백 활성(Tyrosinase 저해 활성) 실험, Collagenase 저해 활성 실험, 자외선 차단 효과 실험, 세포 독성 실험, 항염 활성 실험을 실시하였다. 본 발명의 일 실시형태에 따라 재배된 표고버섯은 후술하는 실험에 의하여 보다 명확하게 이해될 수 있다.

표고버섯의 재배방법

1. 배지살균단계 : 참나무톱밥과 미강, 탄산칼슘 등을 혼합하여 배지를 제조하고 이를 살균한다.

2. 접종단계 : 표고버섯 종균을 접종한다.

3. 배양단계 : 표고버섯 종균이 접종된 배지에 물 100중량부에 발효유황액 0.2중량부를 혼합 후 희석한 발효유황액을 침봉, 침수, 살수 및 분무 중 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하여 버섯을 배양한다.

4.갈변단계 : 배양된 표고버섯을 색이 나도록 갈변시킨다.

발효유황액 제조

1. 혼합단계 : 물 100중량부에 유황 20중량부, 수산화나트륨 20중량부, 천매암 1중량부, 황토 1중량부, 천일염 1중량부, 제올라이트 1중량부를 혼합한 후 2시간 동안 교반하여 유황혼합물을 제조한다.

2. 여과단계 : 유황혼합물을 2일간 정치한 후 침전물을 여과하여 유황액을 제조한다.

3. 발효유황액제조단계 : 유황액을 채에 2회 내린 후, 채에 내린 유황액에 버섯균사를 넣고 23℃에서 7일간 발효시켜 발효유황액을 제조한다.

총폴리페놀 화합물 함량 측정 및 결과

폴리페놀 화합물은 Folin-Denis법(AOAC, 2005)으로 표고버섯의 폴리페놀 화합물 함량을 측정하였으며, tannic acid(Sigma-Aldrich Co., Belgium)를 표준물질로 측정한 검량선과 비교하여 각 추출물에 함유된 총 폴리페놀 화합물 함량을 산출하였다. 그 결과는 하기 표 1과 같다.

	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
총폴리페놀화합물 함량 (mg/g)	16.35±0.37	8.73±0.08

유황 및 총플라보노이드 함량 측정 및 결과

재배한 표고버섯의 유황 및 총플라보노이드 함량에 대해 농업기술실용화제단에 분석 의뢰를 하였다. 그 결과는 도 1에 나타내었다.

수용성 단백질 함량 측정 및 결과

수용성 단백질 함량은 Lowry 등(1951)의 방법에 따라 측정하였으며, Bovine serum albumin(Sigma aldrich Co.)으로 표준곡선을 작성하여 표고버섯 추출물에 함유된 수용성 단백질 함량을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 2와 같다.

	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
수용성 단백질 함량 (mg/g)	169.83±2.86	112.88±86

환원당 함량 측정 및 결과

환원당 함량은 Somogyi-Nelson(1944)방법에 측정하였으며, glucose (Sigma aldrich Co.)의 표준곡선을 기준으로 표고버섯 추출물의 환원당 함량을 산출하였다. 그 결과는 하기 표 3과 같다.

	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
환원당 함량 (mg/g)	313.90±2.37	79.22±0.41

항산화 활성 측정 및 결과

1. ABTS radical 소거활성(ABTS radical scavenging) 측정 및 결과

2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid(ABTS) radical에 대한 소거능력은 Re etal. (1999)의 방법을 변형하여 측정하였으며, 대조군으로는 ascorbic acid를 사용하였다. ABTS radical 소거활성(ABTS radical scavenging) 측정 결과는 하기 표 4와 같다.

농도 (ug/mL)	control (ascorbic acid)	발효유황 표고버섯 열수수추출물 (ug/mL)	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물 (ug/mL)
62.5	100.68±0.78	36.23±2.44	27.27±1.07
125	99.50±0.22	58.64±0.93	31.34±3.36
250	99.94±0.11	86.29±2.57	43.60±3.10
500	101.00±0.43	95.29±2.38	57.16±1.34
1000	99.32±0.66	99.94±0.42	80.99±0.41
2000	97.70±0.47	100.42±0.21	92.08±3.31

2. DPPH radical 소거활성(DPPH radical scavenging abiltiy) 측정 및 결과

Blois(26)의 방법에 따라 표고버섯 추출물의 DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl)에 대한 전자공여 효과로써 각 시료의 환원력을 측정하였으며, 시료 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율(%)로 나타내었다. 대조군으로는 ascorbic acid를 사용하였다. DPPH radical 소거활성 측정 결과는 하기 표 5와 같다.

농도 (ug/mL)	control (ascorbic acid)	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
62.5	88.21±0.36	41.75±0.67	17.54±2.91
125	92.50±0.71	67.00±2.36	36.63±1.05
250	93.93±0.36	74.86±2.55	63.95±0.77
500	93.21±0.36	79.57±2.36	86.43±0.67
1000	92.50±0.36	83.28±3.60	87.21±2.91
2000	94.64±0.00	89.67±0.70	89.24±1.16

3. SOD 유사활성(SOD-like activity) 측정 및 결과

Marklund와 Marklund(27)의 방법에 따라 유해 환원 산소종을 과산화수소(H2O2)로 전환시키는 반응을 촉매하는 pyrogallol의 산화된 양을 측정하여 SOD 유사활성을 평가하였다. 표고버섯 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율(%)로 나타내었다. 대조군으로는 ascorbic acid를 사용하였다. SOD 유사활성 측정 결과는 하기 표 6과 같다.

농도 (ug/mL)	control (ascorbic acid)	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
62.5	46.11±0.51	12.47±0.54	8.83±0.14
125	75.46±0.14	13.16±0.33	10.19±0.49
250	86.72±0.56	14.11±2.35	10.65±1.06
500	93.67±1.01	17.04±1.08	12.55±0.39
1000	97.15±0.41	22.60±1.44	15.36±1.19
2000	99.41±0.36	28.36±1.67	17.17±1.73

4. 아질산염 소거능(Nitrite scavenging ability)

아질산염(NaNO2) 소거작용은 Kato 등(28)의 방법에 따라 측정하였으며, pH 1.2와 3.0 그리고 6.0의 조건으로 설정하여 시료의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율(%)로 나타내었다. 대조군으로는 ascorbic acid를 사용하였다. 아질산염 소거능 측정 결과는 하기 표 7과 같다.

pH	농도 (ug/mL)	control (ascorbic acid)	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
1.2	62.5	13.58±0.40	0.34±1.51	-
	125	45.18±0.43	1.19±0.89	-
	250	81.76±0.27	3.61±0.83	0.51±0.13
	500	87.75±1.14	9.26±0.87	4.16±0.57
	1000	95.34±1.09	17.20±0.13	11.04±0.65
	2000	95.65±0.20	35.88±1.36	25.73±1.10
3.0	62.5	4.78±0.89	-	-
	125	28.09±1.69	1.00±0.37	-
	250	50.15±1.00	1.25±0.12	1.49±1.01
	500	67.92±1.09	5.37±0.12	2.23±0.94
	1000	83.77±0.54	8.11±1.02	3.35±0.50
	2000	91.39±0.25	13.03±0.47	9.87±0.84
6.0	62.5	-	4.15±0.28	-
	125	1.97±1.89	4.55±0.43	-
	250	14.96±1.62	5.11±0.72	-
	500	35.18±0.25	6.59±0.32	-
	1000	55.84±0.79	6.23±0.21	-
	2000	74.65±0.39	10.10±1.82	-

수렴효과 측정 및 결과

Okamura et al(1993)의 방법에 준하여 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율을 백분율(%)로 하여 측정하였다. 대조군으로는 Tannic acid를 사용하였다. 수렴효과 측정 결과는 하기 표 8과 같다.

농도 (ug/mL)	control (ascorbic acid)	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
0.1	81.41±0.52	8.17±0.67	-
0.2	97.07±0.79	8.70±3.04	0.35±2.46
0.5	98.45±0.52	18.47±1.39	6.08±1.67
1.0	101.89±0.30	20.75±2.82	10.07±2.17

미백 활성(Tyrosinase 저해 활성) 측정 및 결과

Yagi et al.(1987)의 방법에 따라 표고버섯의 각 추출물에 대한 tyrosinase 저해율을 측정하여 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율을 백분율(%)로 하여 미백 활성으로 하였으며, 대조군으로는 ascorbic acid를 사용하였다. 미백 활성(Tyrosinase 저해 활성) 측정 결과는 하기 표 9와 같다.

농도 (ug/mL)	control (ascorbic acid)	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
62.5	96.54±0.19	5.61±1.33	16.51±1.05
125	96.55±1.34	10.78±3.02	19.38±1.73
250	97.54±1.85	12.41±2.27	24.77±1.05
500	98.21±1.69	14.62±2.71	26.83±0.53
1000	102.68±2.69	18.76±2.95	25.23±1.53
2000	108.83±2.52	28.06±0.92	29.24±1.11

Collagenase 저해 활성 측정 및 결과

표고버섯의 collagenase 저해율은 Wunsch & Heindrich(1963)의 방법에 따라 측정하였으며, 표고버섯 추출물 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율을 백분율(%)로 하여 collagenase 저해율로 나타내었다. 대조군으로는 녹차에서 추출된(epigallocatechin gallate; EGCG)를 사용하였다. Collagenase 저해 활성 측정 결과는 하기 표 10과 같다.

농도 (ug/mL)	control (ascorbic acid)	발효유황 표고버섯 열수수추출물	발효유황 표고버섯 에탄올수추출물
62.5	38.73±1.22	3.63±1.13	-
125	54.58±1.27	6.67±2.47	-
250	70.19±1.42	8.55±1.04	-
500	98.47±0.54	11.74±0.75	-
1000	132.39±2.66	16.32±0.45	6.95±1.16
2000	176.76±2.20	27.63±2.59	14.11±2.93

자외선 차단 효과 측정 및 결과

표고버섯 추출물을 312.5 ug/mL의 농도로 UV-Visible Spectrophotometer(Shimadzu, UV-1601)를 사용하여 자외선영역 UV-A(400∼320 nm), UV-B(320∼290 nm), UV-C(290∼200 nm)대의 차단 효과를 측정하였다. 자외선 차단 효과 측정 결과는 도 2에 나타내었다.

세포 독성 측정 및 결과

1. HaCaT cell 독성

표고버섯 추출물을 31.5 ~ 1000 ug/mL의 농도로 설정하여 세포독성을 확인하였다. HaCaT cell에서 표고버섯 열수 추출, 에탄올 추출의 경우 최고농도 1000 ug/mL 농도까지 세포독성을 나타내지 않았다. HaCaT cell 독성 측정 결과는 도 3에 나타내었다.

2. RAW 264.7 cell 독성

표고버섯 추출물을 31.5 ~ 1000 ug/mL의 농도로 설정하여 세포독성을 확인하였다. RAW264.7 cell에서 열수 추출 62.5 ug/mL 농도까지 세포독성을 나타내지 않았으며, 에탄올 추출의 경우 125 ug/mL 농도까지 세포독성을 나타내지 않았다. RAW 264.7 cell 독성 측정 결과는 도 4에 나타내었다.

항염증 효과 측정 및 결과

표고버섯 추출물을 31.5 ~ 1000 ug/mL의 농도로 설정하여 Nitric oxide 저해능을 확인하였다. RAW264.7 cell 에서 송화 열수 추출, 에탄올 추출 모두 농도가 증가할수록 nitric oxide 저해능이 있음을 알 수 있다. 항염증 효과 측정 결과는 도 5에 나타내었다.

결론적으로 상기 실시예 1 내지 13을 실시한 결과를 통해, 본 발명의 일 실시형태에 따른 표고버섯은 항산화 활성이 높게 나타나고, 미백활성, 주름 개선 활성 또한 우수하며, 세포독성 또한 나타나지 않는다는 것을 확인하였다. 이에 본 발명의 표고버섯을 식용버섯으로 뿐만 아니라 표고버섯을 이용한 피부 개선 화장료 조성물 등으로 다양한 활용이 가능할 것으로 보여진다.

이상, 실시예를 들어 본 발명을 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되지 않으며, 여러 가지 다양한 형태로 변형될 수 있고, 본 발명의 기술적 사상 내에서 당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러 가지 많은 변형이 가능함이 명백하다. 또한, 청구범위의 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에 의해 다양한 형태의 치환, 변형 및 변경이 가능할 것이며, 이 또한 본 발명의 범위에 속한다고 할 것이다.

Claims

표고버섯 톱밥배지를 만들어 살균을 하는 배지살균단계;
상기 배지살균단계에서 살균된 배지에 표고버섯 종균을 접종하는 접종단계;
상기 접종단계에서 표고버섯 종균이 접종된 배지에 발효유황액을 공급하여 버섯을 배양하는 배양단계; 및
상기 배양단계에서 배양된 표고버섯이 색이 나도록 갈변시키는 갈변단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 발효 유황이 첨가된 표고버섯의 재배방법.
청구항 1에 있어서,
상기 발효유황액은,
물 100중량부에 대해 유황 10 내지 30중량부, 수산화나트륨 10 내지 30중량부, 천매암 1 내지 2중량부, 황토 1 내지 2중량부, 천일염 1 내지 2중량부, 제올라이트 1 내지 2중량부를 혼합한 후 1 내지 3시간 교반하여 유황혼합물을 제조하는 혼합단계;
상기 혼합단계에서 제조된 유황혼합물을 1 내지 3일간 정치한 후 침전물을 여과하여 유황액을 제조하는 여과단계; 및
상기 여과단계에서 제조된 유황액을 채에 1 내지 2회 내린 후, 채에 내린 유황액에 버섯균사를 넣고 20 내지 25℃에서 5 내지 10일간 발효시켜 발효유황액을 제조하는 발효유황액제조단계;로 이루어지는 것을 특징으로 하는 발효 유황이 첨가된 표고버섯의 재배방법.
청구항 1에 있어서,
상기 배양단계에서는,
물 100중량부에 대해 발효유황액 0.1 내지 0.5중량부를 혼합 후 희석하여 이를 침봉, 침수, 살수 및 분무 중에서 어느 하나의 방법으로 배지에 공급하는 것을 특징으로 하는 발효 유황이 첨가된 표고버섯의 재배방법.
청구항 1 내지 3 중 어느 한 항의 재배방법에 따라 재배되는 것을 특징으로 하는 발효 유황이 첨가된 표고버섯.