KR20190135029A - Hpk1의 억제제인 이소퀴놀린 - Google Patents

Hpk1의 억제제인 이소퀴놀린 Download PDF

Info

Publication number
KR20190135029A
KR20190135029A KR1020197031954A KR20197031954A KR20190135029A KR 20190135029 A KR20190135029 A KR 20190135029A KR 1020197031954 A KR1020197031954 A KR 1020197031954A KR 20197031954 A KR20197031954 A KR 20197031954A KR 20190135029 A KR20190135029 A KR 20190135029A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
alkyl
optionally substituted
compound
independently
cycloalkyl
Prior art date
Application number
KR1020197031954A
Other languages
English (en)
Inventor
브라이언 찬
조이 드롭닉
루이스 가자드
티모시 헤프론
준 리앙
수샨트 말호트라
로한 멘돈카
나오미 라자팍사
크레이그 스티발라
존 텔리스
웨이루 왕
빈칭 웨이
아이허 조우
매튜 더블유 카트롸이트
마이클 라인치버리
에마누엘라 간치아
에일린 슈어드
앤드류 매딘
데이비드 페이버
킨 치우 퐁
용한 후
앤드류 굿
Original Assignee
에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 에프. 호프만-라 로슈 아게 filed Critical 에프. 호프만-라 로슈 아게
Publication of KR20190135029A publication Critical patent/KR20190135029A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/549—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame having two or more nitrogen atoms in the same ring, e.g. hydrochlorothiazide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/554—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one sulfur as ring hetero atoms, e.g. clothiapine, diltiazem
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 HPK1(조혈 전구 키나제 1)의 억제제인 이소퀴놀린 화합물 및 이의 용도에 관한 것이다. 상기 화합물은 HPK1-의존성 장애의 치료 및 면역 반응의 강화에 유용하다. 본 발명은 또한 HPK1의 억제 방법, HPK1-의존성 장애의 치료 방법, 면역 반응의 강화 방법, 및 이소퀴놀린 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

Description

HPK1의 억제제인 이소퀴놀린
관련 출원의 상호참조
본원은 2017년 3월 30일자 출원된 국제 특허 출원 제PCT/CN2017/078790호 및 2018년 2월 15일자 출원된 국제 특허 출원 제PCT/CN2018/076908호를 우선권 주장하고, 이들의 전문이 본원에 참조로 혼입된다.
서열목록
본원은 ASCII 포멧으로 전자적으로 제출된 서열목록을 포함하고 있고, 이의 전문은 본원에 참조로 혼입된다. 2018년 3월 13일자 생성된 상기 ASCII 카피는 파일명이 P34138_WO_2_SL.TX이고, 크기가 21 KB이다.
기술분야
본 발명은 HPK1의 기능을 조절하고 HPK1-매개된 질환 및 증상(예컨대, 암)의 치료에 유용한 화합물에 관한 것이다.
암 전문의가 암을 치료하기 위해 사용하는 주요 치료 방식은 외과적 절제, 방사선 요법 및 고전적 화학치료 약물이다. 불행하게도, 외과적 절제는 다수의 종양 및 암 형태에 대해서는 실행가능한 선택사항이 아니다. 또한, 방사선 요법 및 화학치료 약물은 병에 걸린 세포만 표적으로 하지 않으므로, 결국 건강한 세포를 손상시키게 된다. 종양 세포 내의 특정 단백질의 부적절한 과발현 또는 활성화 또는 항원의 종양-특이적 발현을 이용함으로써 종양 세포를 더 특이적으로 표적으로 하는 치료법이 개발되고 있지만, 종양 세포는 돌연변이되기 쉽고, 종양 세포를 특이적으로 표적으로 하는 약물에 내성이 될 수 있다.
다수의 암에 의해 활용되는 면역회피(immunoevasive) 전략을 환자 자신의 면역 시스템을 이용하여 극복하거나 항-종양 면역을 향상시키는 새로운 암 치료 패러다임이 등장하였다. 이러한 전략 중 하나는, 정상적으로 말초 내성을 유지하는 기능을 하는 면역 반응의 음성 조절자를 억제하여, 종량 항원 자체가 비-자기(non-self) 개체로 인식되도록 하는 것이다.
조혈 전구(hematopoietic progenitor) 키나제 1(HPK1)은, 항-종양 면역을 향상시키도록 표적화될 수 있는 T 및 B 세포 반응 및 수지상(dendritic) 세포 활성의 음성 조절자의 예이다. HPK1은 주로 조혈 세포(초기 전구 세포 포함)에 의해 발현된다. T 세포 내에서, HPK1은, Ser376에서의 SLP76(문헌[Di Bartolo et al. (2007) JEM 204:681-691]) 및 Thr254에서의 Gads를 포스포릴화하여, 포스포릴화된 SLP76 및 Gads에 결합하는 14-3-3 단백질의 동원을 야기하고, LAT-함유 마이크로클러스터로부터 SLP76-Gads-14-3-3 복합체를 방출시킴으로써, 신호전달 마이크로클러스터의 지속성을 감소시켜, T 세포 활성화를 음성으로 조절하는 것으로 생각된다(문헌[Lasserre et al. (2011) J Cell Biol 195(5):839-853]). HPK1은 또한, 흔히 종양에 의해 분비되어 면역 시스템으로부터 종양 세포의 탈출에 기여하는 프로스타글란딘 E2에 반응하여 활성화될 수 있다.
본원에서는, 효소 HPK1의 길항제가 제공된다. 상기 화합물은 화학식 I 또는 Ia로 개시되는 구조를 갖거나, 이의 약학적으로 허용되는 염, 대사산물, 전구약물, 또는 전구체이다. 또한, 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 제조 방법이 추가로 제공된다.
상기 화합물은 HPK1 키나제 활성의 억제, 면역 반응의 향상 및 HPK1-의존성 장애의 치료에 사용된다. 따라서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물이 또한 제공된다. HPK1을 효과량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체와 접촉시키는 것을 포함하는, HPK1 억제 방법이 제공된다. 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, HPK1-의존성 장애의 치료 방법이 제공된다. 또한, HPK1-의존성 장애를 치료하기 위한 키트가 제공되며, 상기 키트는, 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 포함하는 약학 조성물 및 사용 지침서를 포함한다.
본원에서는, HPK1(조혈 전구 키나제 1)의 억제제 또는 조절제인 화학식 I 또는 Ia의 화합물 및 이의 약학 조성물이 개시된다. 이와 같이, 상기 화합물 및 조성물은, HPK1에 의해 매개되는 질환 및 장애를 치료하는 데 유용하다. 치료 방법의 예는, 암에 걸린 대상의 경우이다. 상기 화합물은 암을 치료하는 데 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 유리하게는 이를 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 향상시키는 데 사용될 수 있다.
본원에 개시되는 요지가 이후에 더 자세히 기술될 것이다. 그러나, 전술된 설명에서 제시된 교시의 이점을 갖는 관련 요지가 속하는 분야의 숙련가는, 본원에 개시된 요지의 수많은 변형 및 다른 실시양태를 생각해낼 것이다. 따라서, 본원에 개시된 요지는 개시되는 특정 실시양태에 제한되지 않으며, 이의 변형 및 다른 실시양태도 첨부된 청구범위의 범주 내에 포함되는 것으로 의도됨을 이해해야 한다. 달리 말하면, 본원에 기술된 요지는 모든 대체물, 변형 및 등가물을 포괄한다. 하나 이상의 인용문헌, 특허 및 유사 자료(예컨대, 비제한적으로, 정의된 용어, 용어 용법, 설명된 기술 등)가 본원과 상이하거나 상충되는 경우, 본원이 우선한다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 당업자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 가진다. 본원에 언급된 모든 공개문헌, 특허 출원, 특허 및 다른 참고문헌은 그 전체가 본원에 참조로 혼입된다.
정의
용어 "치환기"는, 분자 상의 수소 원자를 대체하는 원자 또는 원자들의 기를 지칭한다. 용어 "치환된"은, 하나 이상의 치환기를 갖는 명시된 분자를 나타낸다. 용어 "화학식 ~의 화합물"은, 화학식 I 또는 Ia로 정의되는 화합물의 종으로부터 선택되는 임의의 화합물을 지칭한다.
본원에서 용어 "알킬"은, 1 내지 12개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 기를 지칭한다. 용어 "저급 알킬"은, C1-C6 알킬 쇄를 지칭한다. 알킬 기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, tert-부틸, 및 n-펜틸을 포함한다. 알킬 기는 임의적으로 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
용어 "알켄일"은, 불포화(즉, 탄소-탄소 sp2 이중 결합)의 적어도 하나의 부위를 갖는 2 내지 8개의 탄소 원자(C2-C8), 바람직하게는 (C2-6)의 선형 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 상기 알켄일 라디칼은 임의적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있고, "시스" 및 "트랜스" 배향 또는 다르게는 "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포함한다. 그 예는, 비제한적으로, 에틸렌일 또는 비닐(-CH=CH2), 알릴(-CH2CH=CH2) 등을 포함한다.
용어 "알켄일렌"은, 불포화(즉, 탄소-탄소 sp2 이중 결합)의 적어도 하나의 부위를 갖는 2 내지 8개의 탄소 원자(C2-C8), 바람직하게는 (C2-6)의 선형 또는 분지쇄 2가 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 상기 알켄일렌 라디칼은 임의적으로, 본원에 기술된 하나 이상의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있고, "시스" 및 "트랜스" 배향 또는 다르게는 "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포함한다. 그 예는, 비제한적으로, 에틸렌일렌 또는 비닐렌(-CH=CH-), 알릴렌(-CH2CH=CH-) 등을 포함한다.
용어 "알콕시"는, -O-알킬 기를 지칭한다. 알콕시 기는 임의적으로 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
용어 "할로알킬"은, 하나 이상의 할로 치환기로 치환된 알킬 라디칼을 지칭한다. 할로알킬 기의 예는 다이플루오로메틸(CHF2), 트라이플루오로메틸(CF3), 및 2,2,2-트라이플루오로에틸을 포함한다.
본원에서 용어 "할로겐", "hal" 또는 "할로"는, -F, -Cl, -Br 또는 -I를 의미한다.
본원에서 지정 "(CO)" 및 "C(O)"는, 카보닐 잔기를 나타내는데 사용된다. 적합한 카보닐 잔기의 예는, 비제한적으로, 케톤 및 알데하이드 잔기를 포함한다.
용어 "사이클로알킬"은 하나 이상의 포화 고리를 갖거나 하나 이상의 비-방향족 고리를 갖는 탄화수소 3 내지 8원 일환형 또는 7 내지 14원 이환형 고리 시스템을 지칭하고, 이때 비-방향족 고리는 어느 정도의 불포화도를 가질 수 있다. 사이클로알킬 기는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있다. 하나의 실시양태에서, 사이클로알킬 기의 각각의 고리의 0, 1, 2, 3 또는 4개의 원자는 치환기로 치환될 수 있다. 사이클로알킬 기의 대표적인 예는 사이클로프로필, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로부틸, 사이클로헵틸, 사이클로펜텐일, 사이클로펜타다이엔일, 사이클로헥센일, 사이클로헥사다이엔일 등을 포함한다.
용어 "아릴"은, 탄화수소 일환형, 이환형 또는 삼환형 방향족 고리 시스템을 지칭한다. 아릴 기는 임의적으로 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 하나의 실시양태에서, 아릴 기의 각각의 고리의 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 원자는 치환기로 치환될 수 있다. 아릴 기의 예는 페닐, 나프틸, 안트라센일, 플루오렌일, 인덴일, 아줄렌일 등을 포함한다.
용어 "헤테로아릴"은, 헤테로원자가 O, N, 및 S로부터 선택되고 나머지 고리 원자는 탄소인(달리 제시되지 않는 한, 적절한 수소 원자를 가짐) 방향족 5원 내지 10원 일환 또는 이환을 지칭한다. 헤테로아릴 기는 임의적으로 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 하나의 실시양태에서, 헤테로아릴 기의 각각의 고리의 0, 1, 2, 3, 또는 4개의 원자는 치환기로 치환될 수 있다. 헤테로아릴 기의 예는 피리딜, 퓨란일, 티엔일, 피롤릴, 옥사졸릴, 옥사다이아졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 이속사졸릴, 퀴놀린일, 피라졸릴, 이소티아졸릴, 피리다진일, 피리미딘일, 피라진일, 트라이아진일, 이소퀴놀린일, 인다졸릴 등을 포함한다.
용어 "헤테로사이클로알킬" 또는 "헤테로사이클릴"은, 1 내지 3개의 헤테로원자(일환형 고리인 경우), 1 내지 6개의 헤테로원자(이환형 고리인 경우), 또는 1 내지 9개의 헤테로원자(삼환형 고리인 경우)를 포함하는 비-방향족 3원 내지 8원 일환형, 7원 내지 12원 이환형, 또는 10원 내지 14원 삼환형 고리 시스템을 지칭하며, 상기 헤테로원자는 O, N, S, B, P 및 Si로부터 선택되고, 상기 비-방향족 고리 시스템은 완전히 포화된다. 헤테로사이클로알킬 기는 임의적으로 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 하나의 실시양태에서, 헤테로사이클로알킬 기의 각각의 고리의 0, 1, 2, 3, 또는 4개의 원자는 치환기로 치환될 수 있다. 대표적인 헤테로사이클로알킬 기는 피페리딘일, 피페라진일, 테트라하이드로피란일, 모폴린일, 티오모폴린일, 1,3-다이옥솔란일, 테트라하이드로퓨란일, 테트라하이드로티엔일, 티엔일 등을 포함한다.
용어 "하이드록시알킬"은, 추가로 하나 이상의 하이드록실 기로 치환된 알킬 치환기를 지칭한다. 상기 알킬 부분은 추가로, 임의적으로 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
치환기 및/또는 변수의 조합은, 이러한 조합이 정확한 원자가를 제공하는 경우에만 허용가능하다. 문맥상 달리 제시되지 않는 한, 하이픈(-)은, 펜던트 기 또는 라디칼의 부착 지점을 지정한다.
용어 "호변 이성질체" 또는 "호변 이성질체 형태"는, 저 에너지 장벽을 통해 상호전환가능한 상이한 에너지의 구조 이성질체를 지칭한다. 예를 들어, 양성자 호변 이성질체(양성자성 호변 이성질체로도 공지됨)는 양성자의 이동을 통한 상호전환(예컨대, 케토-엔올 및 이민-엔아민 이성질화)을 포함한다. 원자가 호변 이성질체는 결합 전자의 일부의 재구성에 의한 상호전환을 포함한다.
용어 "키랄"은, 거울상 파트너의 비-중첩성 특성을 갖는 분자를 지칭하고, 용어 "비키랄"은 이의 거울상 파트너와 중첩가능한 분자를 지칭한다.
용어 "부분입체 이성질체"는, 2개 이상의 비대칭 중심을 갖고 이들의 분자가 서로 거울상이 아닌 입체 이성질체들을 지칭한다.
용어 "거울상 이성질체"는, 서로 비-중첩가능 거울상인 화합물의 2개의 입체 이성질체를 지칭한다. 2개의 거울상 이성질체의 등몰 혼합물은 "라세미 혼합물" 또는 "라세미체"로 지칭된다.
용어 "이성질체" 또는 "입체 이성질체"는, 동일한 화학 구성을 갖지만 공간 내에서 원자 또는 기의 배열과 관련하여 상이한 화합물을 지치한다.
키랄 중심의 명명법과 관련하여, 용어 "d" 및 "1"(또는 (+) 및 (-)) 구조는 IUPAC 권고에 의해 정의된 바와 같다.
"용매화물"은, 하나 이상의 용매 분자와 본 발명의 화합물의 회합 또는 복합체를 지칭한다. 용매화물을 형성하는 용매의 예는, 비제한적으로, 물, 이소프로판올, 에탄올, 메탄올, DMSO, 에틸 아세테이트, 아세트산, 및 에탄올아민을 포함한다. 용어 "수화물"은, 용매 분자가 물인 경우의 상기 복합체를 지칭한다.
"대사산물"은, 명시된 화합물 또는 이의 염의 체내 대사작용을 통해 생성된 생성물이다. 화합물의 대사산물은 당업계에 공지된 관행적 기술을 이용하여 동정될 수 있고, 이의 활성은, 시험(예를 들어, 본원에 기술된 시험)을 이용하여 결정된다. 이러한 생성물은, 예를 들어, 투여된 화합물의 산화, 하이드록실화, 환원, 가수분해, 아마이드화, 탈아마이드화, 에스터화, 탈에스터화, 효소 분할 등으로부터 유래할 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 발명의 화합물의 대사산물(본 발명의 화합물을 이의 대사산물을 수득하기에 충분한 시간 동안 포유동물과 접촉시키는 것을 포함하는 방법에 의해 생성된 화합물 포함함)을 포함한다.
어구 "약학적으로 허용되는"은, 성분 또는 조성물이, 제형을 차지하는 다른 성분 및/또는 치료받을 대상과 화학적으로 및/또는 독성학적으로 상용성임을 나타낸다.
본원에서 어구 "약학적으로 허용되는 염"은, 본 발명의 화합물의 약학적으로 허용되는 유기 또는 무기 염을 지칭한다. 예시적인 염은, 비제한적으로, 설페이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 나이트레이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 올리에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아스코르베이트, 석시네이트, 말리에이트, 겐티시네이트, 퓨마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트 "메실레이트", 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 파모에이트(즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토에이트)) 염, 알칼리 금속(예컨대, 나트륨 및 칼륨) 염, 알칼리 토금속(예컨대, 마그네슘) 염, 및 암모늄 염을 포함한다. 약학적으로 허용되는 염은 또 다른 분자(예컨대, 아세테이트 이온, 석시네이트 이온 또는 다른 대응 이온)의 함유를 포함할 수 있다. 대응 이온은, 모 화합물 상의 전하를 안정화시키는 임의의 유기 또는 무기 잔기일 수 있다. 또한, 약학적으로 허용되는 염은, 이의 구조 내에 하나 보다 많은 하전된 원자를 가질 수 있다. 복수개의 하전된 원자가 상기 약학적으로 허용되는 염의 일부인 경우, 상기 염은 복수개의 대응 이온을 가질 수 있다. 따라서, 약학적으로 허용되는 염은 하나 이상의 하전된 원자 및/또는 하나 이상의 대응 이온을 가질 수 있다.
본원에서 "담체"는, 사용되는 투여량 및 농도에서 이에 노출되는 세포 또는 포유동물에 대해 무독성인 약학적으로 허용되는 담체, 부형제, 또는 안정화제를 포함한다. 흔히, 생리학적으로 허용되는 담체는 수성 pH 완충된 용액이다. 생리학적으로 허용되는 담체의 비제한적인 예는 완충액, 예컨대 포스페이트, 시트레이트 및 다른 유기산; 산화방지제, 예컨대 아스코르브산; 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 리신; 단당류, 이당류, 및 다른 탄수화물, 예컨대 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 당 알코올, 예컨대 만니톨 또는 소르비톨; 염-형성 대응 이온, 예컨대 나트륨; 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대 트윈(TWEEN)(상표), 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 및 플루로닉스(PLURONICS)(상표)를 포함한다. 특정 실시양태에서, 상기 약학적으로 허용되는 담체는 비-자연발생적 약학적으로 허용되는 담체이다.
본원에서 용어 "억제제"의 사용은, HPK1의 활성을 억제하는 분자를 의미하는 것으로 의도된다. 본원에서 "억제하다"는, 억제제의 부재 하의 효소의 활성에 비해, 표적 효소의 활성이 감소됨을 의미한다. 일부 실시양태에서, 용어 "억제하다"는, HPK1 활성의 약 5% 이상, 약 10% 이상, 약 20% 이상, 약 25% 이상, 약 50% 이상, 약 60% 이상, 약 70% 이상, 약 80% 이상, 약 90% 이상, 또는 약 95% 이상의 감소를 의미한다. 다른 실시양태에서, "억제하다"는, HPK1 활성의 약 5% 내지 약 25%, 약 25% 내지 약 50%, 약 50% 내지 약 75%, 또는 약 75% 내지 100% 감소를 의미한다. 일부 실시양태에서, "억제하다"는, HPK1 활성의 약 95% 내지 100%의 감소, 예를 들어 활성의 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 감소를 의미한다. 상기 감소는, 당업자가 인지할 수 있는 다양한 기술(예컨대, 키나제 분석)을 이용하여 측정될 수 있다.
본원에서 "HPK1 길항제" 또는 "HPK1 억제제"는, HPK1의 생물학적 활성(예컨대, 세린/트레오닌 키나제 활성, TCR 활성화시 TCR 복합체로의 모집, 단백질 결합 파트너(예컨대, SLP76)와의 상호작용) 중 하나 이상을 감소시키거나, 억제하거나 달리 약화시키는 분자이다. HPK1 길항제를 사용하는 길항작용이 반드시 HPK1 활성의 모든 제거를 나타내는 것은 아니다. 대신, 상기 활성은, 통계학적으로 의미있는 양으로 감소될 수 있다(예를 들어, 적절한 대조군에 비해 HPK1 활성이 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 95% 또는 100% 감소됨). 일부 실시양태에서, HPK1 길항제는 HPK1의 세린/트레오닌 키나제 활성을 감소시키거나, 억제하거나 달리 약화시킨다. 몇몇 상기 실시양태에서, HPK1 길항제는, SLP76 및/또는 Gads의 HPK1-매개된 포스포릴화를 감소시키거나, 억제하거나 달리 약화시킨다. 본원에 개시된 화합물은 HPK1에 직접 결합하여, 이의 키나제 활성을 억제한다.
"특이적 길항제"는, 비관련 표적에 비해, 정의된 표적의 활성을 감소시키거나, 억제하거나 달리 약화시키는 제제로 의도된다. 예를 들어, HPK1 특이적 길항제는, 임의의 다른 단백질(예컨대, 다른 세린/트레오닌 키나제)에 대한 상기 길항제의 억제 효과보다 통계학적으로 더 큰 양으로 HPK1의 적어도 하나의 생물학적 활성을 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 표적에 대한 상기 길항제의 IC50은, 비-표적에 대한 상기 길항제의 IC50의 약 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 1%, 0.1%, 0.01%, 0.001% 또는 그 이하이다. 본원에 개시된 화합물은 특이적 HPK1 길항제일 수 있거나 아닐 수 있다. 특이적 HPK1 길항제는, 임의의 다른 단백질(예컨대, 다른 세린/트레오닌 키나제)에 대한 상기 길항제의 억제 효과보다 통계학적으로 더 큰 양으로 HPK1의 생물학적 활성을 감소시킨다. 특정 실시양태에서, HPK1 길항제는 HPK1의 세린/트레오닌 키나제 활성을 특이적으로 억제한다. 몇몇 상기 실시양태에서, HPK1에 대한 HPK1 길항제의 IC50은, 또 다른 세린/트레오닌 키나제 또는 다른 유형의 키나제(예컨대, 티로신 키나제)에 대한 HPK1 길항제의 IC50의 약 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 0.1%, 0.01%, 0.001%, 또는 그 이하이다.
용어 "치료하다" 및 "치료"는, 치료 및 예방적 수단을 모두 지칭하며, 이의 목적은, 바람직하지 않은 생리학적 변화 또는 장애(예컨대, 암의 발달 또는 퍼짐)를 방지하거나 늦추는(약화시키는) 것이다. 본 발명의 목적을 위해, 유익하거나 바람직한 임상 결과는, 비제한적으로, 증상의 완화, 질환의 정도의 감소, 질환의 안정화된(즉, 악화되지 않는) 상태, 질환 전파의 지연 또는 늦어짐, 질환 상태의 개선 또는 일시적 완화, 및 검출가능하거나 검출가능하지 않은 차도(부분적 또는 완전한)를 포함한다. "치료"는 또한, 치료를 받지 않는 경우에 예상되는 생존율에 비해 연장된 생존율을 의미할 수 있다. 치료가 필요한 대상은, 이미 상기 증상 또는 장애를 가진 대상뿐만 아니라, 상기 증상 또는 장애를 예방해야 할 대상도 포함한다.
용어 "투여" 또는 "투여하다"는, 상기 화합물을 대상에게 도입하여 이의 의도된 기능을 수행하는 경로를 포함한다. 사용될 수 있는 투여 경로의 예는 주사(피하, 정맥내, 비경구, 복강내, 척수강내), 국소, 구강, 흡입, 직장 및 경피를 포함한다.
용어 "효과량"은, 필요한 기간 동안 투여량에서 목적하는 결과를 달성하는 데 효과적인 양을 포함한다. 화합물의 효과량은 인자(예컨대, 질환 상태, 연령, 대상의 체중, 및 대상에서 목적하는 반응을 유도하는 화합물의 능력)에 따라 다를 수 있다. 투여 체계는, 최적의 치료 반응을 제공하도록 조절될 수 있다. 효과량은 또한 억제제 화합물의 임의의 독성 또는 해로운 효과(예컨대, 부작용)가 치료적으로 이로운 효과보다 크지 않는 양일 수 있다.
본원에서 어구 "전신 투여", "전신 투여된", "말단 투여" 및 "말단 투연된"은, 환자의 시스템에 도입되어 대사작용 및 다른 유사 과정에 적용되도록 화합물, 약물 또는 다른 물질을 투여하는 것을 의미한다.
어구 "치료 효과량"은, (i) 특정 질환, 증상 또는 장애를 치료 또는 예방하거나, (ii) 특정 질환, 증상 또는 장애의 하나 이상의 징후를 완화, 개선 또는 제거하거나, (iii) 본원에 기술된 특정 질환, 증상 또는 장애의 하나 이상의 징후의 발병을 예방 또는 지연시키는 본 발명의 화합물의 양을 의미한다. 암의 경우, 치료 효과량의 약물은 암세포 수를 감소시키고; 종양 크기를 감소시키고; 말초 기관으로의 암세포 침윤을 억제(즉, 어느 정도 늦춤, 바람직하게는 중단)시키고; 종양 전이를 억제(즉, 어느 정도 늦춤, 바람직하게는 중단)시키고; 종양 성장을 어느 정도 억제시키고/시키거나, 암과 관련된 하나 이상의 증상의 어느 정도 경감시킬 수 있다. 약물이 암세포의 성장을 방지하거나 존재하는 암세포를 죽일 수 있는 정도까지, 약물은 세포분열억제성 또는 세포독성일 수 있다. 암 요법의 경우, 효능은, 예를 들어, 질병 진행 속도(time to disease progression: TTP)를 평가하고/하거나 반응 속도(RR)를 측정함으로써 측정될 수 있다.
용어 "대상"은, 동물, 예를 들어 포유동물, 예컨대, 비제한적으로, 영장류(예컨대, 인간), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스 등을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 대상은 인간이다.
용어 "비정상적 세포 증식", "비-제어된 세포 증식", 및 "과증식성 장애"는 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 본원에서 "비정상적 세포 증식"은, 달리 제시되지 않는 한, 정상적인 조절 메커니즘과 무관한 세포 증식(예컨대, 접촉 억제의 손실)을 지칭한다.
용어 "암"은, 비-제어된 세포 증식을 특징으로 하는 대상 내 증상을 지칭하며, 암성(cancerous) 세포는 비인접(noncontiguous) 부위에 대한 국부적 침입 및/또는 전이가 가능하다. 본원에서 "암세포", "암성 세포", 또는 "종양 세포"는, 상기 비-제어된 세포 증식 및 침입 특성을 특징으로 하는 세포를 지칭한다. 용어 "암"은 모든 유형의 암, 예컨대, 비제한적으로, 모든 형태의 암종, 흑색종, 아세포종, 육종, 림프종 및 백혈병, 예컨대, 비제한적으로, 방광암, 방광 암종, 뇌 종양, 유방암, 경추암, 대장암, 식도암, 자궁내막암, 간세포 암종, 후두암, 폐암, 골육종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 신장 암종 및 갑상샘 암, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 뇌실막종, 유잉(Ewing's) 육종, 교아종, 수아종, 신경아세포종, 골육종, 횡문근육종, 간상(rhabdoid) 암, 및 신아세포종(빌름스(Wilm's) 종양)을 포함한다.
"화학치료제"는, 암의 치료에 생물학적으로 유용한 화학적 화합물이다. 화학치료제의 예는 알킬화제, 예컨대 티오테파 및 사이클로포스파미드(사이톡산(CYTOXAN)(등록상표)); 알킬 설포네이트, 예컨대 부설판, 임프로설판 및 피로설판; 아지리딘, 예컨대 벤조도파, 카보쿠온, 메투레도파 및 우레도파; 에틸렌이민 및 메틸라멜라민, 예컨대 알트레타민, 트라이에틸렌멜라민, 트라이에틸렌포스포아마이드, 트라이에틸렌티오포스포아마이드 및 트라이메틸올로멜라민; 아세토게닌(특히, 불라타신 및 불라타시논); 델타-9-테트라하이드로카나비놀(드로나비놀, 마리놀(MARINOL)(등록상표)); 베타-라파콘; 라파콜; 콜키신; 베툴린산; 캄프토테신(예컨대, 합성 유사체 토포테칸(하이캄틴(HYCAMTIN)(등록상표)), CPT-11(이리노테칸, 캄프토사르(CAMPTOSAR)(등록상표)), 아세틸캄프토테신, 스코폴렉틴 및 9-아미노캄프토테신); 브리오스타틴; 페메트렉세드; 칼리스타틴; CC-1065(예컨대, 이의 아도젤레신, 카르젤레신 및 비젤레신 합성 유사체); 포도필로톡신; 포도필린산; 테니포사이드; 크립토파이신(특히, 크립토파이신 1 및 크립토파이신 8); 돌라스타틴; 듀오카르마이신(예컨대, 합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1); 엘레우테로빈; 판크라티스타틴; TLK-286; CDP323, 경구 알파-4 인테그린 억제제; 사르코딕타인; 스폰기스타틴; 질소 머스터드, 예컨대 클로람부실, 클로나파진, 클로로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로어에타민, 메클로어에타민 옥사이드 하이드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비킨, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스터드; 나이트로스우레아, 예컨대 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라님누스틴; 항생제, 예컨대 엔다이인 항생제(예를 들어, 칼리케아마이신, 특히 칼리케아마이신 감마1I 및 칼리케아마이신 오메가I1(예를 들어, 문헌[Nicolaou et al., Angew Chem Intl Ed Engl, 33: 183-186(1994)] 참조); 다이네마이신(예컨대, 다이네마이신 A); 에스페라마이신뿐만 아니라, 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색소단백질 엔다이인 항생제 발색단), 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카르미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-다이아조-5-옥소-L-노르류신, 독소루비신(예컨대, 아드리아마이신(ADRIAMYCIN)(등록상표)), 모폴리노-독소루비신, 시아노모폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신, 독소루비신 HCl 리포좀 주사액(독실(DOXIL)(등록상표) 및 데옥시독소루비신), 에피루비신, 에소루비신, 아이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신(예컨대, 미토마이신 C), 마이코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포르피로마이신, 푸로마이신, ?라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항-대사물질, 예컨대 메토트렉세이트, 겜시타빈(겜자르(GEMZAR)(등록상표)), 테가푸르(우프토랄(UFTORAL)(등록상표)), 카페시타빈(크젤로다(XELODA)(등록상표)), 에포틸론 및 5-플루오로우라실(5-FU); 엽산 유사체, 예컨대 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예컨대 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예컨대 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 사이타라빈, 다이데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 및 플록수리딘; 항부신제(anti-adrenal), 예컨대 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 엽산 보충물(replenisher), 예컨대 프롤린산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코사이드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 다이아지큐온; 엘포르니틴; 엘립티늄 아세테이트; 에토글루시드; 갈륨 나이트레이트; 하이드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 마이탄시노이드, 예컨대 다이탄신 및 안사미토신; 미토구아존; 미토잔트론; 모피단몰; 나이트라에린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로소잔트론; 2-에틸하이드라자이드; 프로카바진; PSK(등록상표) 다당류 복합체(제이에이치에스 내추럴 프로덕츠(JHS Natural Products), 미국 오레곤주 유진 소재); 라족잔; 리족신; 시조피란; 스파이로게르마늄; 테누아존산; 트라이아지큐온; 2,2',2"-트라이클로로트라이에틸아민; 트라이코테센(특히, T-2 톡신, 베라쿠린 A, 로리딘 A 및 안귀딘); 우레탄; 빈데신(엘디신(ELDISINE)(등록상표), 필데신(FILDESIN)(등록상표)); 데카바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가사이토신; 아라비노사이드("아라-C"); 티오테파; 탁소이드, 예컨대 파클리탁셀(탁솔(TAXOL)(등록상표)), 파클리탁셀의 알부민 조작된 나노입자 제형(아브락산(ABRAXANE)(상표)) 및 도세탁셀(탁소테레(TAXOTERE)(등록상표)); 클로란부실; 6-티오구아닌; 머캅토퓨린; 메토트렉세이트; 백금 유사체, 예컨대 시스플라틴 및 카보플라틴; 빈블라스틴(벨반(VELBAN)(등록상표)); 백금; 에토포사이드(VP-16); 이포스파미드; 미토잔트론; 빈크리스틴(온코빈(ONCOVIN)(등록상표)); 옥살리플라틴; 류코보빈; 비노렐빈(나벨빈(NAVELBINE)(등록상표)); 노반트론; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 이반드로네이트; 토포이소머라아제 억제제 RFS 2000; 다이플루오로메틸로르니틴(DMFO); 레티노이드, 예컨대 레티노산; 임의의 전술된 것들의 약학적으로 허용되는 염, 산 또는 유도체뿐만 아니라, 이들 중 2개 이상의 조합물, 예컨대 CHOP(사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴 및 프레드니졸론의 병용 치료에 대한 약어); 및 폴폭스(FOLFOX: 5-FU 및 류코보린과 조합된 옥살리플라틴(엘록산틴(ELOXATIN)(상표)을 사용한 치료 체계에 대한 약어)를 포함한다.
화학치료제의 추가의 예는, 암의 성장을 촉진할 수 있는 호르몬 효과를 조절하거나, 감소시키거나, 차단하거나, 억제하는 항-호르몬제를 포함하며, 흔히 전신(systemic or whole-body) 치료 형태이다. 이것 자체가 호르몬일 수 있다. 그 예는 항-에스트로겐 및 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 예를 들어, 타목시펜(예컨대, 놀바덱스(NOLVADEX)(등록상표) 타목시펜), 랄록시펜(에비스타(EVISTA)(등록상표)), 드롤록시펜, 4-하이드록시타목시펜, 트라이옥시펜, 케옥시펜, LY117018, 오나프리스톤, 및 토레미펜(파레스톤(FARESTON)(등록상표)); 항프로게스테론; 에스트로겐 수용체 하향-조절제(ERD); 에스트로겐 수용체 길항제, 예컨대 풀베스트란트(파스로덱스(FASLODEX)(등록상표)); 난소를 억제하거나 정지시키는 기능을 하는 제제, 예를 들어, 류틴화(leutinizing) 호르몬-방출 호르몬(LHRH) 작용제, 예컨대 류프롤라이드 아세테이트(루프론(LUPRON)(등록상표) 및 엘리가르드(ELIGARD)(등록상표)), 고세렐린 아세테이트, 부세렐린아세테이트 및 트립테렐린; 항-안드로겐, 예컨대 플루타마이드, 닐루타마이드 및 바이칼루타마이드; 및 아로마타제 효소(이는, 부신에서 에스트로겐 생성을 조절함), 예컨대, 4(5)-이미다졸, 아미노글루테티미드, 메게스트롤 아세테이트(메가제(MEGASE)(등록상표)), 엑세메스탄(아로마신(AROMASIN)(등록상표)), 포르메스타니, 파드로졸, 보로졸(리비졸(RIVISOR)(등록상표)), 레트로졸(페마라(FEMARA)(등록상표)), 및 아나스트라졸(아리미덱스(ARIMIDEX)(등록상표))을 포함한다. 추가로, 화학치료제의 상기 정의는 비스포스포네이트, 예컨대 클로드로네이트(예를 들어, 보네포스(BONEFOS)(등록상표) 또는 오스탁(OSTAC)(등록상표)), 에티드로네이트(다이드로칼(DIDROCAL)(등록상표)), NE-58095, 졸레드론산/졸레드로네이트(조메타(ZOMETA)(등록상표)), 알렌드로네이트(포사맥스(FOSAMAX)(등록상표)), 파미드로네이트(아레디아(AREDIA)(등록상표)), 틸루드로네이트(스켈리드(SKELID)(등록상표)) 또는 리세드로네이트(악토넬(ACTONEL)(등록상표))뿐만 아니라, 트록사시타빈(1,3-다이옥솔란 뉴클레오시드 사이토신 유사체); 안티센스 올리고뉴클레오티드, 구체적으로 비정상적 세포 증식에서 나타나는 신호 경로에서 유전자의 발현을 억제하는 것, 예를 들어, PKC-알파, Raf, H-라스 및 표피 성장 인자 수용체(EGF-R); 백신, 예컨대 테라토프(THERATOPE)(등록상표) 백신 및 유전자 치료 백신, 예를 들어, 알로벡틴(ALLOVECTIN)(등록상표) 백신, 류벡틴(LEUVECTIN)(등록상표) 백신 및 박시드(VAXID)(등록상표) 백신; 토포이소머라아제 1 억제제(예를 들어, 루르토테칸(LURTOTECAN)(등록상표)); 항-에스트로겐, 예컨대 풀베스트란트; EGFR 억제제 예컨대 에를로티닙 또는 세툭시맙; 항-VEGF 억제제, 예컨대 베박시주맙; 아리노테칸; rmRH(예를 들어, 아바렐릭스(ABARELIX)(등록상표)); 17AAG(열충격 단백질(Hsp) 90 포이즌인 겔다나마이신 유도체), 및 임의의 전술된 것들의 약학적으로 허용되는 염, 산 또는 유도체를 포함한다.
또한, "화학치료제"의 정의에 포함되는 것은 하기와 같다: (i) 종양에 대한 호르몬 작용을 조절하거나 억제하는 작용을 하는 항-호르몬제, 예를 들어 항-에스트로겐 및 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM), 예를 들어, 타목시펜(예컨대, 놀바덱스(NOLVADEX)(등록상표); 타목시펜 시트레이트), 랄록시펜, 드롤록시펜, 4-하이드록시타목시펜, 트라이옥시펜, 케옥시펜, LY117018, 오나프리스톤, 및 파레스톤(FARESTON)(등록상표)(토레미펜 시트레이트); (ii) 아로마타제 효소(이는 부신에서 에스트로겐 생성을 조절함)을 억제하는 아로마타제 억제제, 예컨대 4(5)-이미다졸, 아미노글루테티미드, 메가제(MEGASE)(등록상표)(메게스트롤 아세테이트), 아로마신(AROMASIN)(등록상표)(엑세메스탄; 화이자(Pfizer)), 포르메스타니, 파드로졸, 리비소르(RIVISOR)(등록상표)(보로졸), 페마라(FEMARA)(등록상표)(레트로졸; 노바티스(Novartis)), 및 아리미덱스(ARIMIDEX)(등록상표)(아나스트라졸; 아스트라제네카(AstraZeneca)); (iii) 항-안드로겐, 예컨대 플루타마이드, 닐루타마이드, 바이칼루타마이드, 류프롤라이드, 및 고세렐린뿐만 아니라, 트록사시타빈(1,3-다이옥솔란 뉴클레오시드 사이토신 유사체); (iv) 단백질 키나제 억제제; (v) 지질 키나제 억제제; (vi) 안티센스 올리고뉴클레오타이드, 특히, 비정상적 세포 증식에서 나타나는 신호 경로에서 유전자의 발현을 억제하는 것, 예를 들어, PKC-알파, Ralf 및 H-Ras; (vii) 리보자임, 예컨대 VEGF 발현 억제제(예컨대, 앤지오자임(ANGIOZYME)(등록상표)) 및 HER2 발현 억제제; (viii) 백신, 예컨대 유전자 치료 백신, 예를 들어, 알로벡틴(ALLOVECTIN)(등록상표), 류벡틴(LEUVECTIN)(등록상표), 및 박시드(VAXID)(등록상표); 프로류킨(PROLEUKIN)(등록상표) rIL-2; 토포이소머라제 1 억제제, 예컨대 루르토테칸(LURTOTECAN)(등록상표); 아바렐릭스(ABARELIX)(등록상표) rmRH; (ix) 항-혈관형성제, 예컨대 베바시주맙(아바스틴(AVASTIN)(등록상표), 제넨테크(Genentech)); 및 (x) 임의의 전술된 것들의 약학적으로 허용되는 염, 산 및 유도체.
일부 실시양태에서, 화학치료제는 면역치료제이다. 본원에서 "면역치료제"는, 암과 싸우는 것을 돕는 면역 시스템을 특이적으로 또는 비-특이적으로 향상시키는 화합물이다. 면역치료제는 단일클론 항체; 및 면역 시스템을 증강시키는 비-특이적 면역치료제, 예컨대 사이토카인, 인터루킨(예컨대, IL-2, IL-7, IL-12, IL-15, IL-21), 인터페론(예컨대, IFN-α, IFN-β, IFN-γ), GM-CSF, 탈리도마이드(탈로미드(THALOMID)(등록상표), 셀젠(Celgene)), 레날리도마이드(레블리미드(REVLIMID)(등록상표), 셀젠), 포말리도마이드(포말리스트(POMALYST)(등록상표), 셀젠), 이미퀴모드(자이클라라(ZYCLARA)(등록상표), 발레안트(Valeant))를 포함한다. 화학치료제로서 유용한 단일클론 항체의 비제한적인 예는 트라스투주맙(헤르셉틴(HERCEPTIN)(등록상표), 제넨테크), 베바시주맙아바스틴(AVASTIN)(등록상표), 제넨테크), 세툭시맙(에르비툭스(ERBITUX)(등록상표), 브리스톨-마이어스 스퀴브(Bristol-Myers Squibb)), 파니투무맙(벡티빅스(VECTIBIX)(등록상표), 암젠(Amgen)), 이필리무맙(에르보이(YERVOY)(등록상표), 브리스톨-마이어스 스퀴브), 리툭시맙(리툭산(RITUXAN)(등록상표), 제넨테크), 알렘투주맙(캄파쓰(CAMPATH)(등록상표), 겐자임(Genzyme)), 오파투무맙(아르제라(ARZERRA)(등록상표), 겐맙(Genmab)), 겜투주맙 오조가마이신(밀로타르그(MYLOTARG)(등록상표), 와이어스(Wyeth)), 브렌툭시맙 베도틴(아드세트리스(ADCETRIS)(등록상표), 시애틀 제네틱스(Seattle Genetics)), 90Y-표지된 이브리투모맙 티욱세탄(제발린(ZEVALIN)(등록상표), 바이오젠 아이덕(Biogen Idec)), 131I-표지된 토시투모맙(벡사르(BEXXAR)(등록상표), 글락소스미스클라인(GlaxoSmithKline)), 아도-트라스투주맙 엠탄신(카드실라(KADCYLA)(등록상표), 제넨테크) 블리나투모맙(블린시토(BLINCYTO)(등록상표), 암젠), 페르투주맙(페르제타(PERJETA)(등록상표), 제넨테크), 오비누투주맙(가지바(GAZYVA)(등록상표), 제넨테크), 니볼루맙(옵디보(OPDIVO)(등록상표), 브리스톨-마이어스 스퀴브), 펨브롤리주맙(키트루다(KEYTRUDA)(등록상표), 메르크(Merck)), 피딜리주맙(큐어테크(CureTech)), MPDL3280A(국제 특허 출원 공개 제WO2010/077634호에 기술됨, 상기 출원 전체를 본원에 인용함), MDX-1105(국제 특허 출원 공개 제WO2007/005874호에 기술됨, 상기 출원 전체를 본원에 인용함), 및 MEDI4736(국제 특허 출원 공개 제WO2011/066389호 및 미국 특허 출원 공개 제2013/034559호에 기술됨, 이들 출원 전체를 본원에 인용함)을 포함한다. 또 다른 유용한 면역치료제는 AMP-224(국제 특허 출원 공개 제WO2010/027827호 및 제WO2011/066342호에 기술됨, 이들 출원 전체를 본원에 인용함).
화합물
본원에 개시된 화합물은 화학식 I 또는 Ia의 화합물, 또는 이의 염(예컨대, 약학적으로 허용되는 염), 용매화물(예컨대, 수화물), 전구약물, 대사산물 또는 유도체이다. 상기 화합물은 유용한 HPK1 억제제이다.
한 양태에서, 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 염(예컨대, 약학적으로 허용되는 염), 용매화물(예컨대, 수화물), 전구약물, 대사산물 또는 유도체가 제공된다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 식에서,
R1은 수소, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 하이드록시알킬, 하이드록실, C1-6 알콕실, 임의적으로 치환된 아미노 또는 임의적으로 치환된 아실아미노이고;
R2는 (a) O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴; (b) 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴; (c) 수소, 할로겐, 시아노, -NRbC(O)Ra, -NRbSO2Ra, -SO2NRaRb 또는 -SO2Ra(이때, Ra는 각각 독립적으로 C1-6 알킬이고, Rb는 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 원자와 함께 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로사이클릴을 형성함); (d) -ORa1 또는 -(C1-6 알킬렌)-ORa1(이때, Ra1은 각각 독립적으로 C6-10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬; 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 상기 C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환됨); (e) 각각 1 내지 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬, C2-6 알켄일 또는 C2-6 알킨일; (f) 1 내지 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-8 사이클로알킬; (g) -C(O)NRa2Rb2 또는 -NRa2(CO)Rb2(이때, Ra2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, Rb2는 수소, C1-6 알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이거나, Ra2 및 Rb2는 이들이 부착된 원자와 함께 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로사이클릴을 형성하고; 상기 C1-6 알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환됨); 또는 (h) 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6-10 아릴 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴(이때, R2의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R3은 수소, 시아노, 할로겐, 임의적으로 치환된 C1-6 알킬, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로사이클릴 또는 임의적으로 치환된 C1-6 알콕시이고;
R4는 A-C(O)- 또는 D이고;
A는 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴, C2-9 헤테로사이클릴, -NHRg 또는 -ORh이고, 이때 A의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 및 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
Rg 및 Rh는 독립적으로 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴이고, 이때 Rg 및 Rh의 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 및 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
D는 수소, C6-10 아릴; O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-8 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴이고, 이때 D의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된다.
화학식 I의 한 양태에서,
R1은 수소, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 하이드록시알킬, 하이드록실, C1-6 알콕실, 임의적으로 치환된 아미노 또는 임의적으로 치환된 아실아미노이고;
R2는 (a) O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴; (b) 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴; (c) 수소, -NHSO2Ra, -SO2NRaRb 또는 -SO2NH2(이때, Ra는 각각 독립적으로 C1-6 알킬이고, Rb는 수소 또는 C1-6 알킬임); (d) -ORa1 또는 -(C1-6 알킬렌)-ORa1(이때, Ra1은 각각 독립적으로 C6-10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬; 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 상기 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환됨); (e) 1 내지 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬; (f) 1 내지 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-8 사이클로알킬; (g) -C(O)NRa2Rb2(이때, Ra2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, Rb2는 수소, C1-6 알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 상기 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환됨); 또는 (h) 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴(이때, R2의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R3은 수소, 시아노, 할로겐, 임의적으로 치환된 C1-6 알킬, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로사이클릴 또는 임의적으로 치환된 C1-6 알콕시이고;
R4는 A-C(O)- 또는 D이고;
A는 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴, C2-9 헤테로사이클릴, -NHRg 또는 -ORh이고, 이때 A의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 및 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
Rg 및 Rh는 독립적으로 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴이고, 이때 Rg 및 Rh의 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 및 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
D는 수소; O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-8 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴이고; D의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된다.
화학식 I의 한 양태에서,
R1은 수소, 할로겐, 메틸, CF3, CHF2, CH2OH 또는 시아노이고;
R2는 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3 또는 4개의 치환기 R6, R7, R8 및 R8[이들은 각각 독립적으로 i) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일 또는 C1-6 알켄일렌(이때, 상기 알킬, 알켄일 및 알켄일렌은 1 내지 4개의 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Ry, SONRy, -(CO)NRyRz 또는 -NRy(CO)Rz로 임의적으로 치환될 수 있고, Ry 및 Rz는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); ii) NRyRz-C(O)-(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); iii) 하이드록시(C1-6 알킬); iv) C1-6 알콕시(이때, 상기 알콕시는 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); v) C3-9 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 C6 아릴, 치환된 또는 비치환된 5원 헤테로아릴, 또는 C2-9 헤테로사이클릴; vi) 할로겐; vii) 아미노; viii) 시아노; ix) -NRy(CO)Rz(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); x) -SO2R'(이때, R'는 H 또는 C1-6 알킬임); xi) -SO2NR'R"(이때, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); 및 xii) 상기 헤테로사이클릴에 내포되고, 결합된 산소와 함께 카보닐을 형성할 수 있는 탄소로 이루어진 군으로부터 선택됨]로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이거나,
R2는 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C3-4 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌 및 사이클로알킬은 아미노, 하이드록실, 니트릴, 할로겐 및 아미드로 치환될 수 있음); 시아노, 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Rc, -SONRd, -(CO)NRcRd 및 -NRc(CO)Rd로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기를 갖는 C6-10 아릴이고, Rc 및 Rd는 각각 독립적으로 수소 및 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있거나,
R2는 수소 또는 -SO2NH2이고;
R3은 수소, 시아노 또는 할로겐이고;
R4는 A-C(O)-이고, 이때 A는 i) C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴[이때, 상기 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 1, 2, 3 또는 4개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, R5는 수소, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌(이때, 상기 알킬, 알켄일 및 알켄일렌은 아미노, C1-6 알콕시, 하이드록실, 니트릴, 할로겐, -SO2Re 또는 아미드로 치환될 수 있음); 할로겐, 하이드록시(C1-6 알킬), 할로(C1-6 알킬), 시아노, 시아노(C1-6 알킬), 하이드록실, C1-6 알콕시, 아미노, C2-9 헤테로아릴, -SO2Re 및 NReRf-C(O)-(이때, Re 및 Rf는 독립적으로 수소 및 분지형 또는 선형 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택됨)로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴은 2개의 R5와 함께 이환형 또는 스피로 고리를 형성하고, 상이한 탄소에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 이환형을 형성하거나, 동일한 탄소에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 스피로 고리를 형성함]; 또는 ii) -NHRg[이때, Rg는 a) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴 또는 C3-7 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌, 헤테로사이클릴 및 사이클로알킬은 하이드록실, 할로겐, -CF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -(CO)NR'R" 또는 -NR'(CO)R"로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); 및 b) C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴(이때, 상기 헤테로아릴은 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고; 상기 아릴 및 헤테로아릴은 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, 하이드록실, 할로겐, -CF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -(CO)NR'R" 및 -NR'(CO)R"로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임)로 이루어진 군으로부터 선택됨]이거나,
R4는 D이고, 이때 D는 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴이다.
한 양태에서, 하기 화학식 Ia의 화합물, 또는 이의 염(예컨대, 약학적으로 허용되는 염), 용매화물(예컨대, 수화물), 전구약물, 대사산물 또는 유도체가 제공된다:
[화학식 Ia]
Figure pct00002
상기 식에서,
R1은 수소, 할로겐, 메틸, CF3, CHF2, CH2OH 또는 시아노이고;
R2는 (a) O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3 또는 4개의 치환기 R6, R7, R8 또는 R8'[이들 각각은 i) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일 또는 C1-6 알켄일렌(이때, 상기 알킬, 알켄일 및 알켄일렌은 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Ry, -S(O)NRy, -(CO)NRyRz 및 -NRy(CO)Rz로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, Ry 및 Rz는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있음); ii) NRyRz-C(O)-(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있음); iii) 하이드록시(C1-6 알킬); iv) C1-6 알콕시(이때, 상기 알콕시는 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있음); v) C3-9 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 C6 아릴, 치환된 또는 비치환된 5원 헤테로아릴, 또는 C2-9 헤테로사이클릴; vi) 할로겐; vii) 아미노; viii) 시아노; ix) -NRyC(O)Rz(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있음); x) -SO2R'(이때, R'는 H 또는 C1-6 알킬임); xi) -SO2NR'R"(이때, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); xii) -NR'C(O)OR", -NR'SO2NR" 또는 -NR'S(O)R"(이때, R'는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"는 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴임); 및 xiii) 상기 헤테로사이클릴에 내포되고, 결합된 산소와 함께 카보닐을 형성할 수 있는 탄소로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택됨]로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴; (b) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌 및 C3-4 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기를 갖는 C6-10 아릴(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌 및 사이클로알킬은 아미노, 하이드록실, 시아노, 할로겐, 아미드, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Rc, -S(O)NRd, -C(O)NRcRd 또는 -NRcC(O)Rd로 치환될 수 있고, Rc 및 Rd는 각각 독립적으로 수소 및 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); (c) 수소, -NHSO2Ra, -SO2NRaRb 또는 -SO2NH2(이때, Ra는 각각 독립적으로 C1-6 알킬이고, Rb는 수소 또는 C1-6 알킬임); (d) -ORa1 또는 -(C1-6 알킬)-ORa1(이때, Ra1은 각각 독립적으로 C6-10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬; 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 상기 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨); (e) 하이드록실, 할로겐, 시아노, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, C3-8 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬(이때, 상기 C3-8 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨); (f) C1-6 알킬, 하이드록실, 할로겐, 시아노, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-8 사이클로알킬(이때, 상기 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨); (g) -C(O)NRa2Rb2(이때, Ra2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, Rb2는 수소, C1-6 알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 상기 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, 옥소, 하이드록실, 할로 및 시아노로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨); 또는 (h) 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴(이때, R2의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R3은 C1-6 알킬, 수소, 시아노 또는 할로겐이고;
R4는 A-C(O)- 또는 D이고, 이때 A는 i) C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴(이때, 상기 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 1, 2, 3 또는 4개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, R5는 수소, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌, 할로겐, 시아노, 하이드록실, C1-6 알콕시, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf 및 NReRf-C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되고, R5의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌은 C1-6 알콕시, 하이드록실, 할로겐, 시아노, -SO2Re, -NReRf 및 -C(O)NReRf로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, Re 및 Rf는 각각의 경우에 독립적으로 수소 및 분지형 또는 선형 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴은 2개의 R5와 함께 이환형 또는 스피로 고리를 형성하고, 상이한 원자에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 이환형을 형성하거나, 동일한 탄소에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 스피로 고리를 형성함); ii) -NHRg 또는 -ORh[이때, Rg 및 Rh는 독립적으로 a) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C3-5 사이클로알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴 및 C3-7 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌, 헤테로사이클릴 및 사이클로알킬은 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R" 및 -NR'C(O)R"로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); 및 b) C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴(이때, 상기 헤테로아릴은 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고, 상기 아릴 및 헤테로아릴은 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R" 및 -NR'C(O)R"로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임)로 이루어진 군으로부터 선택됨]; 또는 iii) 하이드록실, 할로겐, 시아노, C1-6 알콕시, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬(이때, 상기 C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
D는 수소; O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-8 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴(이때, D의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨)이다.
일부 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물은 N-(8-아미노-3-이소퀴놀린일)-N'-에틸-우레아, 5-[(8-아미노-3-이소퀴놀린일)아미노]-2-피라진카보니트릴, 5-[(8-아미노-3-이소퀴놀린일)아미노]-3-[(1R)-2-(다이메틸아미노)-1-메틸에톡시]-2-피라진카보니트릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물 및 이의 염이 아니다. 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 일부 실시양태에서, R2 및 R3 중 하나 이상은 수소가 아니다. 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 일부 실시양태에서, R2는 수소가 아니다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물의 다양한 실시양태에서, 알킬, 알켄일, 알킨일, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로사이클릴은 1 내지 5개의 치환기로 임의적으로 치환된다. 일부 실시양태에서, C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알킨일, C3-9 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 1 내지 5개의 R30으로 임의적으로 치환될 수 있다.
일부 실시양태에서, R30은 각각의 경우에 독립적으로 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알킨일, C3-9 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴, C2-9 헤테로사이클릴, 할로겐, 시아노, 옥소, -C(O)NR31R32, -C(O)OR33, -C(=NR36)R34, -C(=NR36)NR31R32, -C(=NOR36)R34, 시아노, 수소, 할로겐, -R31R32, -NR35C(O)R34, -NR35C(O)NR31R32, -NR35C(O)OR33, -NR35S(O)R36, -NR35SO2R36, -NR35SO2NR31R32, -OR33, -OC(O)R34, -OC(O)NR31R32, -S(O)R36, -SO2R36 또는 -SO2NR31R32이고, 이때 R30의 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알킨일, C3-9 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴, C2-9 헤테로사이클릴은 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환되거나, 2개의 R30 기는 이들이 부착된 모 잔기와 함께 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환된 고리를 형성하고;
R31 및 R32는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알킨일, C3-9 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴이고, 이들은 독립적으로 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환되거나, R31 및 R32는 이들이 부착된 질소 원자와 함께 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고;
R33, R34 및 R35는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알킨일, C3-9 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴이고, 이들은 각각 독립적으로 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환되고;
R36은 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬이다.
R40은 각각의 경우에 독립적으로 할로겐, 시아노, 옥소, -NR41R42, -SO2NR41R42, -C(O)NR41R42, -C(O)OR43, -OR43, -NR43C(O)R44, -NR43C(O)OR43, -NR43C(O)NR41R42, -NR43SO2R45, -SO2R45, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 및 C2-9 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 2개의 R40 기는 이들이 부착된 모 잔기와 함께 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환된 고리를 형성하고; R40의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
R41 및 R42는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이거나, R41 및 R42는 이들이 부착된 질소 원자와 함께 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고;
R43 및 R44는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
R45는 C1-6 알킬이다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물의 일부 실시양태에서, R5의 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴은 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 하이드록실, 할로겐, 시아노, C1-6 알콕시, 아미노-(C1-6 알콕시)- 및 C2-9 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된다.
R1의 유용한 값은 전술된다. 한 실시양태에서, R1은 수소이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같다. 한 실시양태에서, R1은 할로겐이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R1은 플루오로이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같다. 한 실시양태에서, R1은 시아노이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같다.
R3의 유용한 값은 전술된다. 한 실시양태에서, R3은 수소이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다. 한 실시양태에서, R3은 할로겐이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R3은 플루오로, 클로로 또는 브로모이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다. 특정 양태에서, R3은 플루오로이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다.
R4의 유용한 값은 전술된다. 특정 양태에서, R4는 A-C(O)-이고, 이때 A는 C3-6 사이클로알킬이고, 1 또는 2개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다. 특정 양태에서, A는 C3-5 사이클로알킬이고, 1 또는 2개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다. 특정 양태에서, A는 사이클로프로필이고, 1 또는 2개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, R2는 -A-C(O)-이다. 일부 실시양태에서, A는 임의적으로 치환된 C1-6 알킬, 임의적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로사이클릴, -NHRg 또는 -ORh이다.
일부 실시양태에서, A는 i) C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴(이때, 상기 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 1, 2, 3 또는 4개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, R5는 수소, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌, 할로겐, 시아노, 하이드록실, C1-6 알콕시, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf, -NReSO2Rf 및 NReRf-C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되고, R5의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌은 C1-6 알콕시, 하이드록실, 할로겐, 시아노, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf 및 -C(O)NReRf로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, Re 및 Rf는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴은 2개의 R5와 함께 이환형 또는 스피로 고리를 형성하고, 상이한 원자에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 이환형을 형성하거나, 동일한 탄소에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 스피로 고리를 형성함); ii) -NHRg 또는 -ORh[이때, Rg 및 Rh는 독립적으로 a) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴 및 C3-7 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌, 헤테로사이클릴 및 사이클로알킬은 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R", -NR'C(O)R", -NR'C(O)OR", -NR'C(O)NR"R"', -NR'SO2NR"R"' 및 -NR'S(O)R"로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"'는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"는 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴이거나, R" 및 R"'는 이들이 부착된 질소와 함께 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴을 형성할 수 있음); 및 b) C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴(이때, 상기 헤테로아릴은 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고; 상기 아릴 및 헤테로아릴은 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R" 및 -NR'C(O)R"로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임)로 이루어진 군으로부터 선택됨]; 또는 iii) 하이드록실, 할로겐, 시아노, C1-6 알콕시, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R", -NR'C(O)R", -NR'C(O)OR", -NR'C(O)NR"R"', -NR'SO2NR"R"' 및 -NR'S(O)R"로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬(이때, R' 및 R"'는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"는 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴이거나, R" 및 R"'는 이들이 부착된 질소와 함께 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성함)이다.
일부 실시양태에서, A는 C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴이고, 이때 상기 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 1, 2, 3 또는 4개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, R5는 수소, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌, 할로겐, 시아노, 하이드록실, C1-6 알콕시, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf, -NReSO2Rf 및 NReRf-C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되고, R5의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌은 C1-6 알콕시, 하이드록실, 할로겐, 시아노, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf 및 -C(O)NReRf로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, Re 및 Rf는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴은 2개의 R5와 함께 이환형 또는 스피로 고리를 형성하고, 상이한 원자에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 이환형을 형성하거나, 동일한 탄소에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 스피로 고리를 형성한다.
일부 실시양태에서, A는 임의적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬이다.
일부 실시양태에서, A는 하이드록실, 할로겐, 시아노, C1-6 알콕시, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R", -NR'C(O)R", -NR'C(O)OR", -NR'C(O)NR"R"', -NR'SO2NR"R"' 및 -NR'S(O)R"로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬이고, R' 및 R"'는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"는 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴이거나, R" 및 R"'는 이들이 부착된 질소와 함께 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴을 형성하고, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환된다(예컨대, 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 치환됨).
R5의 유용한 값은 전술된다. 한 실시양태에서, R5는 수소, 플루오로, 시아노, NH2-C(O)-, C2-9 헤테로아릴, 시아노(C1-6 알킬) 및 하이드록실(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 선택되고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R5는 플루오로 또는 시아노이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다.
한 실시양태에서, R5는 C2-9 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, C2-9 헤테로아릴은 하나 이상의 질소를 함유하는 임의적으로 치환된 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, 헤테로아릴은 1 또는 2개의 질소 원자를 함유하는 임의적으로 치환된 5원 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, 5원 헤테로아릴은 임의적으로 치환된 피라졸이다.
한 실시양태에서, 하나 이상의 R5는 시아노(C1-6 알킬)이다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, 하나 이상의 R5는 시아노-CH2-이다.
한 실시양태에서, R5는 수소이다.
한 실시양태에서, R5는 수소가 아닌 전술된 기이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다.
R5가 수소가 아닌 한 실시양태에서, R4는 A-C(O)-이고, A는
Figure pct00003
이고, v는 0, 1, 2, 3 또는 4이고; X, Y 및 Z는 각각 독립적으로 부재하거나 -CH2-이고, 존재하는 경우, 각각의 X, Y 및 Z 상의 0, 1 또는 2개의 H는 R5일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다.
한 실시양태에서, A는
Figure pct00004
이고, v는 0, 1 또는 2이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다.
한 실시양태에서, A는
Figure pct00005
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나 임의의 상기 실시양태에 기술된 바와 같다.
한 실시양태에서, R5는 수소가 아니고, R4는 A-C(O)-이고, A는
Figure pct00006
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나 임의의 상기 실시양태에 기술된 바와 같다.
한 실시양태에서, A는
Figure pct00007
이고, v는 0, 1 또는 2이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나 임의의 상기 실시양태에 기술된 바와 같다.
한 실시양태에서, R5는 수소가 아니고, R4는 A-C(O)-이고, A는
Figure pct00008
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나 임의의 상기 실시양태에 기술된 바와 같다.
일부 실시양태에서, R4는
Figure pct00009
이고, v는 0, 1, 2 또는 3이고; R5는 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌, 할로겐, 시아노, 하이드록실, C1-6 알콕시, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf, -NReSO2Rf 및 NReRf-C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되고; R5의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌은 C1-6 알콕시, 하이드록실, 할로겐, 시아노, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf 및 -C(O)NReRf로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, Re 및 Rf는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, R5는 수소, 불소, 시아노, NH2-C(O)-, 알킬-(C1-6)알콕시-, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴 및 시아노(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 이러한 실시양태에서, R5는 플루오로 또는 시아노이다. 이러한 실시양태에서, R5는 수소이다. 이러한 실시양태에서, R5는 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴 또는 시아노(C1-6 알킬)이다. 이러한 실시양태에서, R5는 시아노-CH2-이다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 R5는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, 하나 이상의 R5는 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, 하나 이상의 R5가 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴인 화합물은 1 또는 2개의 질소 원자를 함유하는 임의적으로 치환된 5원 헤테로아릴이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, 임의적으로 치환된 5원 헤테로아릴은 임의적으로 치환된 피라졸이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, 임의적으로 치환된 피라졸은
Figure pct00010
이고; 물결선은 사이클로프로필 고리에 대한 부착 지점을 나타내고; RB1은 분지형 또는 선형 C1-6 알킬이고, 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, -O-(C1-6 알킬), -O-(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노- 또는 -NRy(CO)Rz로 임의적으로 치환될 수 있고, Ry 및 Rz는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬; 또는 -SO2R'(이때, R'는 C1-6 알킬임)이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, RB1은 임의적으로 치환된 선형 C1-6 알킬이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, 임의적으로 치환된 선형 C1-6 알킬은 메틸이다.
일부 실시양태에서, R4는
Figure pct00011
이고, v는 2이고, 하나의 R5는 메틸이고, 두 번째 R5는 1-메틸피라졸-4-일이다.
일부 실시양태에서, R4는
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
이다. 일부 실시양태에서, R4는
Figure pct00015
이다. 일부 실시양태에서, R4는
Figure pct00016
이다. 일부 실시양태에서, R4는
Figure pct00017
이다. 일부 실시양태에서, R4는
Figure pct00018
Figure pct00019
이다.
일부 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물은 화합물 번호 195, 196, 197, 198, 279, 280, 281, 282 및 358, 및 이의 약학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다.
일부 실시양태에서, R4는 A-C(O)-이고, A는 -NHRg 또는 -ORh이고, Rg 및 Rh는 독립적으로 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴이고; 이들 각각은 본원에 상술된 바와 같이 임의적으로 치환될 수 있다. 일부 실시양태에서, Rg 및 Rh는 a) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴 및 C3-7 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌, 헤테로사이클릴 및 사이클로알킬은 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R", -NR'C(O)R", -NR'C(O)OR", -NR'C(O)NR"R"', -NR'SO2NR"R"' 및 -NR'S(O)R"로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"'는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"는 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴이거나, R" 및 R"'는 이들이 부착된 질소와 함께 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴을 형성함); 및 b) C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴(이때, 상기 헤테로아릴은 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고, 상기 아릴 및 헤테로아릴은 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R" 및 -NR'C(O)R"로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, R4는 A-C(O)-이고, A는 ii) -NHRg이고, Rg는 a) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴 및 C3-7 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌, 헤테로사이클릴 및 사이클로알킬은 하이드록실, 할로겐, -CF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -(CO)NR'R" 또는 -NR'(CO)R"로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); 및 b) C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴(이때, 상기 헤테로아릴은 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고, 상기 아릴 및 헤테로아릴은 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, 하이드록실, 할로겐, -CF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -(CO)NR'R" 및 -NR'(CO)R"로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에서 임의의 실시양태에 기술된 바와 같다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, R2는 D이다. 일부 실시양태에서, D는 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴이고, 상이한 원자에 부착된 2개의 치환기는 이들 각각이 부착된 원자와 함께 이환형 또는 삼환형을 형성하고, 상기 이환형 또는 삼환형은 임의적으로 치환되거나, 5 내지 10원 헤테로아릴은 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-8 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합되고, D의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 임의적으로 치환되고, 상기 융합된 고리는 임의적으로 치환된 이환형 또는 삼환형 시스템을 형성한다.
일부 실시양태에서, D는 수소; 또는 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고, 임의적으로 치환된(예컨대, 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환된) 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-8 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴이고, D의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 임의적으로 치환된다(예컨대, 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환됨).
한 실시양태에서, R4는 D이고, D는 하나 이상의 질소를 함유하는 임의적으로 치환된 헤테로아릴이다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴은 1 또는 2개의 질소 원자를 함유하는 임의적으로 치환된 5원 헤테로사이클릴이다. 일부 실시양태에서, 5원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환된 피라졸이다.
한 실시양태에서, 임의적으로 치환된 피라졸은
Figure pct00020
이고, 이때 물결선은 N에 대한 부착 지점을 나타내고; RA는 분지형 또는 선형 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노- 또는 -NRy(CO)Rz로 임의적으로 치환될 수 있고, Ry 및 Rz는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이다.
한 실시양태에서, RA는 하이드록실, 할로겐, 니트릴 또는 아미노로 치환된 선형 C1-6 알킬이다.
한 실시양태에서, 선형 C1-6 알킬은 니트릴로 치환된 에틸이다.
한 실시양태에서, RA는
Figure pct00021
이다.
한 실시양태에서, RA는
Figure pct00022
이다.
일부 실시양태에서, 임의적으로 치환된 피라졸은 다른 환형 잔기와 융합되어 임의적으로 치환된 이환형 또는 삼환형, 예컨대 1,5 결합에 융합된 다른 환형 잔기를 갖는 3-피로졸일을 형성한다. 일부 실시양태에서, D는
Figure pct00023
인 이환형(또는 추가 고리 융합이 존재하는 삼환형)이고, 이때 X' 및 Y'는 각각 독립적으로 C, N, S 또는 O이고; 상기 이환형은 수소, 하이드록실, 아미노 및 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고; 2개의 치환기는 이들이 부착된 원자와 함께 C3-C5 스피로 또는 C2-9 헤테로아릴 고리를 형성할 수 있고; 상기 C2-9 헤테로아릴 고리는 상기 이환형에 융합되어 삼환형을 형성할 수 있다. 이러한 일부 실시양태에서, X' 및 Y' 중 하나 이상은 N이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00024
이다.
일부 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물은 화합물 번호 228, 229, 230, 247, 276, 315 및 316, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다.
모든 다른 변수가 본원에 상술된 임의의 실시양태에서 정의된 바와 같은 실시양태에서, D인 화합물은 화학식
Figure pct00025
의 5원 헤테로아릴 또는 화학식
Figure pct00026
의 6원 헤테로아릴이고, 이때 Q는 NR20, CR20, O 또는 S이고;
T는 각각 독립적으로 N 또는 CR21이고;
Z는 각각 독립적으로 N 또는 C이되, 단지 하나의 Z는 N이고;
R20 및 R21은 각각 독립적으로 수소, 알킬, 할로알킬, 알콕시, 할로겐, 하이드록실 또는 시아노이고;
R22 및 R23은 이들이 부착된 원자와 함께 이환형을 형성하고, 이때 이환형은 N, S 및 O로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 함유할 수 있고; 이환형은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 R30으로 임의적으로 치환되고;
각각의 R30은 독립적으로 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C3-7 헤테로사이클릴, 할로겐, 시아노, 옥소, -NR31R32, -SO2NR31R32, -C(O)NR31R32, -C(O)OR33, -OR33, -NR33C(O)R34, -NR33SO2R35 또는 -SO2R35이고; 이때 R30의 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬 및 C3-7 헤테로사이클릴은 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환되거나, 2개의 R30 기는 이들이 부착된 모 잔기와 함께 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환된 고리를 형성하고;
R31 및 R32는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이거나, R31 및 R32는 이들이 부착된 질소 원자와 함께 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고;
R33 및 R34는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
R35는 C1-6 알킬이고;
R40은 각각 독립적으로 할로겐, 시아노, 옥소, -NR41R42, -SO2NR41R42, -C(O)NR41R42, -C(O)OR43, -OR43, -NR43C(O)R44, -NR43SO2R45, -SO2R45, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬(예컨대, -CHF2 또는 -CF3), C2-9 헤테로아릴, C6-10 아릴, 옥소로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 2개의 R40 기는 이들이 부착된 모 잔기와 함께 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환된 고리를 형성하고;
R41 및 R42는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이거나, R41 및 R42는 이들이 부착된 질소 원자와 함께 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고;
R43 및 R44는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
R45는 C1-6 알킬이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00027
이고, 이때 q는 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; R36은 독립적으로 수소 또는 R30이고; R20 및 R30은 본원에 상술된 바와 같다. 이러한 일부 실시양태에서, R20은 수소, C1-6 알킬(예컨대, 메틸), 할로겐(예컨대, 플루오로), 하이드록실 또는 C1-6 알콕시(예컨대, 메톡시)이다. 일부 실시양태에서, R20은 H, Me, F 또는 OH이다. 이러한 일부 실시양태에서, R36은 수소 또는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이다. 이러한 일부 실시양태에서, q는 0이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00028
이고; 이때 q는 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; R20 및 R30은 본원에 상술된 바와 같다. 이러한 일부 실시양태에서, q는 0이다. 이러한 일부 실시양태에서, R20은 수소, C1-6 알킬(예컨대, 메틸), 할로겐(예컨대, 플루오로), 하이드록실 또는 C1-6 알콕시(예컨대, 메톡시)이다. 일부 실시양태에서, R20은 H, Me, F 또는 OH이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00029
이고; 이때 R36은 독립적으로 수소 또는 R30이고; R20 및 R30은 본원에 상술된 바와 같다. 일부 실시양태에서, R36은 수소 또는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이고; R20은 수소이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00030
이고; p는 0, 1, 2, 3 또는 4이고; R36은 독립적으로 수소 또는 R30이고; R20 및 R30은 본원에 상술된 바와 같다. 일부 실시양태에서, p는 0이다. 일부 실시양태에서, R36은 수소 또는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이고; R20은 수소이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00031
이고; 이때 X는 CH2, N, O 또는 S이고; n은 1, 2, 3 또는 4이고; p는 0, 1, 2, 3 또는 4이고; R36은 수소 또는 R30이고; R20 및 R30은 본원에 상술된 바와 같다. 이러한 일부 실시양태에서, X는 CH2이고, n은 1이다. 일부 실시양태에서, R36은 수소 또는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이고; R20은 수소이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00032
이고; 이때 q는 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; G는 독립적으로 C 또는 N이고; G'는 독립적으로 N, NR46, CR47, S 또는 O이고; R46 및 R47은 독립적으로 수소 또는 R40이고, R20 및 R40은 본원에 상술된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 2개의 기 R46 및 R47은 함께 고리를 형성한다. 이러한 일부 실시양태에서, 하나의 G는 C이고, 다른 하나의 G는 N이다. 일부 실시양태에서, 각각의 G는 C이다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 G'는 N이다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 G'는 CR47이다. 일부 실시양태에서, R47은 H이다. 일부 실시양태에서, R20은 수소이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00033
이고; 이때 R20 및 R46은 본원에 상술된 바와 같다. 일부 실시양태에서, R46은 수소 또는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이고; R20은 수소이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00034
이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00035
이고; 이때 Q는 NR20, O 또는 S이고; X는 CR38aR38b, NR36, S 또는 O이고; X'는 CR39aR39b, NR36, S, SO2 또는 O이고; R36, R37a, R37b, R38a 및 R38b는 독립적으로 수소 또는 R30이고; R39a 및 R39b는 독립적으로 수소 또는 R30이거나, R39a 및 R39b는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-7 사이클로알킬 또는 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고; R20 및 R30은 본원에 상술된 바와 같다. 이러한 일부 실시양태에서, Q는 NR20이다. 이러한 일부 실시양태에서, Q는 S이다. 일부 실시양태에서, X는 CH2 또는 NR36이다. 일부 실시양태에서, X'는 CH2이다. 일부 실시양태에서, X'는 SO2이다. 일부 실시양태에서, X'는 CR39aR39b이고, R39a 및 R39b는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필을 형성한다. 일부 실시양태에서, R36은 수소 또는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이고; R20은 수소이다.
일부 실시양태에서, D는
Figure pct00036
이고; 이때 X, X', R20 및 R36은 본원에 상술된 바와 같다. 이러한 일부 실시양태에서, X는 CH2 또는 NR36이다. 일부 실시양태에서, X'는 CH2이다. 일부 실시양태에서, X'는 SO2이다. 일부 실시양태에서, X'는 CR39aR39b이고, R39a 및 R39b는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필을 형성한다. 일부 실시양태에서, R36은 수소 또는 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이다. 일부 실시양태에서, R20은 수소이다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물의 일부 양태에서, R2는 (a) O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고, 1, 2, 3 또는 4개의 치환기 R6, R7, R8 및 R8'[이들은 각각 독립적으로 i) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일 또는 C1-6 알켄일렌(이때, 상기 알킬, 알켄일 및 알켄일렌은 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Ry, -S(O)NRy, -(CO)NRyRz, -NRzSO2Ry, -NRy(CO)ORz, -NRy(CO)NRyRz 및 -NRy(CO)Rz로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, Ry 및 Rz는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 임의적으로 치환된 C1-6 알킬(예컨대, 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 알킬)임); ii) NRyRz-C(O)-(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 임의적으로 치환된 C1-6 알킬(예컨대, 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 알킬)임); iii) 하이드록시(C1-6 알킬); iv) 하이드록실 또는 임의적으로 치환된 C1-6 알콕시(예컨대, 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 알콕시); v) 치환된 또는 비치환된 C3-9 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 C6 아릴, 치환된 또는 비치환된 5원 헤테로아릴, 또는 치환된 또는 비치환된 C2-9 헤테로사이클릴; vi) 할로겐; vii) 치환된 또는 비치환된 아미노; viii) 시아노; ix) -NRyC(O)Rz(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 임의적으로 치환된 C1-6 알킬(예컨대, 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 알킬)임); x) -SO2R'(이때, R'는 H 또는 C1-6 알킬임); xi) -SO2NR'R"(이때, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이거나, R' 및 R"는 이들이 부착된 질소와 함께 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴을 형성함); xii) -NR'C(O)OR", -NR'C(O)NR"R"', -NR'SO2NR"R"' 또는 -NR'S(O)R"(이때, R' 및 R"'는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"는 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴이거나, R" 및 R"'는 이들이 부착된 질소와 함께 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴을 형성함); 및 xiii) 상기 헤테로사이클릴에 내포되고, 결합된 산소와 함께 카보닐을 형성할 수 있는 탄소로 이루어진 군으로부터 선택됨]로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴;
(b) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C3-4 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 5개의 치환기를 갖는 C6-10 아릴(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌 및 사이클로알킬은 아미노, 하이드록실, 시아노, 할로겐, 아미드, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Rc, -S(O)NRd, -C(O)NRcRd 또는 -NRcC(O)Rd로 치환될 수 있고, Rc 및 Rd는 각각 독립적으로 수소 및 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐로 임의적으로 치환될 수 있음);
(c) 수소, -NHSO2Ra, -SO2NRaRb 또는 -SO2NH2(이때, 각각의 Ra는 독립적으로 C1-6 알킬이고, Rb는 수소 또는 C1-6 알킬임);
(d) -ORa1 또는 -(C1-6 알킬)-ORa1(이때, 각각의 Ra1은 독립적으로 C6-10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬; 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 상기 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨);
(e) 하이드록실, 할로겐, 시아노, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 아미도, 설폰일, 설폰아미드, C3-8 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬[이때, C3-8 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환됨(예컨대, 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 치환됨)];
(f) C1-6 알킬, 하이드록실, 할로겐, 시아노, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 아미도, 설폰일, 설폰아미드, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-8 사이클로알킬[이때, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환됨(예컨대, 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 치환됨)];
(g) -C(O)NRa2Rb2 또는 -SO2NRa2Rb2[이때, Ra2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, Rb2는 수소, C1-6 알킬, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이거나(이때, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴은 임의적으로 치환됨(예컨대, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, 옥소, 하이드록실, 할로 및 시아노로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 치환됨)), Ra2 및 Rb2는 이들이 부착된 질소와 함께 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴(예컨대, 피페리딘, 피페라진, 피롤리딘)을 형성함]; 또는
(h) 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴[이때, R2의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 임의적으로 치환됨(예컨대, 하이드록실, 옥소, C1-6 알킬 및 C1-6 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 치환됨)이다.
모든 다른 변수가 상기 정의된 바와 같은 실시양태에서, R2의 유용한 값은 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴 또는 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로사이클릴(예컨대, C3-7 헤테로사이클릴)이다. 한 실시양태에서, R2는 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 5원 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 5원 헤테로사이클릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 6원 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 6원 헤테로사이클릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 7원 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 7원 헤테로사이클릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 8원 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 8원 헤테로사이클릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 9원 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 9원 헤테로사이클릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 10원 헤테로아릴이다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R2는 10원 헤테로사이클릴이다. 각각의 경우에, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 1, 2 또는 3개의 치환기 R6, R7 및 R8로 임의적으로 치환될 수 있다.
일부 실시양태에서, R6, R7 및 R8은 각각 독립적으로 i) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일 또는 C1-6 알켄일렌(이때, 상기 알킬, 알켄일 및 알켄일렌은 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Ry, -S(O)NRy, -(CO)NRyRz 및 -NRy(CO)Rz로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고, Ry 및 Rz는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 임의적으로 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 치환됨); ii) NRyRz-C(O)-(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨); iii) 하이드록시(C1-6 알킬); iv) C1-6 알콕시(이때, 상기 알콕시는 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨); v) C3-9 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 C6 아릴, 치환된 또는 비치환된 5원 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴; vi) 할로겐; vii) 아미노; viii) 시아노; ix) -NRyC(O)Rz(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환됨); x) -SO2R'(이때, R'는 H 또는 C1-6 알킬임); xi) -SO2NR'R"(이때, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); xii) -NR'C(O)OR", -NR'SO2NR" 또는 -NR'S(O)R"(이때, R'는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"는 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴임); 및 xiii) 상기 헤테로사이클릴에 내포되고, 결합된 산소와 함께 카보닐을 형성할 수 있는 탄소로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, R2는 각각 임의적으로 치환된
Figure pct00037
Figure pct00038
로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 상기 잔기는 1, 2 또는 3개의 치환기 R6, R7 및 R8로 임의적으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, R2는 각각 임의적으로 치환된
Figure pct00039
Figure pct00040
로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 상기 잔기는 1, 2 또는 3개의 치환기 R6, R7 및 R8로 임의적으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, R2의 유용한 값은
Figure pct00041
이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, R2는
Figure pct00042
이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, R2는
Figure pct00043
이다.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, R2는
Figure pct00044
이다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00045
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, R2는
Figure pct00046
이고, 이때 R6, R7 및 R8은 각각 독립적으로 수소, 하이드록실, 아미노, C1-6 알킬, C1-6 알콕시 및 모노(C1-6 알킬)아미노로 이루어진 군으로부터 선택되거나, R6, R7 및 R8 중 2개는 이환형을 형성한다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00047
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 일부 실시양태에서, R6 및 R7은 수소, 아미노 및 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, R6은 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이다. 일부 실시양태에서, R7은 수소 또는 아미노이다. 일부 실시양태에서, R7은 수소이다. 일부 실시양태에서, R7은 아미노이다. 일부 실시양태에서, R6은 C1-6 알킬(예컨대, 메틸)이고, R7은 수소 또는 아미노이다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00048
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태에서, R6은 수소, 임의적으로 치환된 C1-6 알킬 또는 하이드록시(C1-6 알킬)일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R6은 C1-6 알킬, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 펜틸 및 헥실일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R6은 메틸이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 일부 실시양태에서, R6은 하이드록실, -CF2, -CF3 또는 할로겐으로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2는
Figure pct00049
Figure pct00050
이다. 일부 실시양태에서, R2는
Figure pct00051
이다. 일부 실시양태에서, R2는
Figure pct00052
이다. 일부 실시양태에서, R2는
Figure pct00053
이다. 일부 실시양태에서, R2는
Figure pct00054
이다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00055
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00056
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00057
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 임의의 상기 실시양태에 기술된 바와 같다. 이러한 실시양태에서, R6은 임의적으로 치환된 분지형 또는 선형 C1-6 알킬이고, 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00058
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00059
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00060
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태에서, R6은 임의적으로 치환된 분지형 또는 선형 C1-6 알킬일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R6은 C1-6 알킬, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 펜틸 및 헥실일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R6은 메틸이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00061
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00062
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00063
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R6은 임의적으로 치환된 분지형 또는 선형 C1-6 알킬일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R6은 C1-6 알킬, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 펜틸 및 헥실일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R6은 메틸이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00064
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R6은 수소, 또는 임의적으로 치환된 분지형 또는 선형 C1-6 알킬일 수 있고, R7은 수소, 또는 임의적으로 치환된 분지형 또는 선형 C1-6 알킬일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R6은 C1-6 알킬, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 펜틸 및 헥실일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R6은 메틸이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 기술된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R6 및 R7은 각각 수소이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R8은 수소이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00065
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00066
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, R2는
Figure pct00067
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나 임의의 상기 실시양태에 기술된 바와 같다. 이러한 실시양태에서, R6은 임의적으로 치환된 분지형 또는 선형 C1-6 알킬일 수 있고, 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 한 양태에서, R6은 C1-6 알킬, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 펜틸 및 헥실일 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 특정 양태에서, R6은 메틸이다.
한 실시양태에서, 5 내지 10원 헤테로사이클릴에서, R6, R7 및 R8 중 하나는 O이고, 부착된 탄소와 함께 카보닐을 형성하고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R2는
Figure pct00068
Figure pct00069
이고, 이때 R7은 수소 또는 C1-5 알킬이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
한 실시양태에서, 5 내지 10원 헤테로사이클릴에서, R6, R7 및 R8 중 하나는 O이고, 부착된 탄소와 함께 카보닐을 형성하고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태의 특정 양태에서, R2는
Figure pct00070
이고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다. 이러한 실시양태에서, R7 및 R8은 독립적으로 수소, 및 분지형 또는 선형 C1-6 알킬로부터 선택되고, 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 치환될 수 있고, 모든 다른 변수는 화학식 I 또는 Ia에 정의된 바와 같거나, 본원에 기술된 임의의 실시양태에 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, 본원에 기술된 요지는 하기 화학식의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00071
Figure pct00072
Figure pct00073
Figure pct00074
Figure pct00075
Figure pct00076
Figure pct00077
Figure pct00078
Figure pct00079
Figure pct00080
Figure pct00081
Figure pct00082
Figure pct00083
Figure pct00084
Figure pct00085
.
모든 다른 변수가 임의의 상기 실시양태에 정의된 바와 같은 실시양태에서, 임의의 화합물 번호 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 54, 55, 56, 57, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 113, 115, 116, 117, 118, 119, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 153, 154, 155, 156, 157, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225 및 226을 비롯한 화합물이 제공된다.
일부 실시양태에서, 본원은 표 1, 표 2 및/또는 표 3의 하나 이상의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I 또는 Ia의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 실시양태에서, 상기 화합물은 표 1의 화합물 번호 9 내지 12, 29, 33 내지 36, 53, 58, 64, 83, 84, 96, 97, 111, 112, 114, 120, 121, 129, 137, 141, 142, 152 및 158, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 상기 화합물은 표 2의 화합물 번호 231 내지 390, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 상기 화합물은 표 3의 화합물 번호 391 내지 528, 또는 이들의 약학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다.
[표 1]
Figure pct00086
Figure pct00087
Figure pct00088
Figure pct00089
Figure pct00090
Figure pct00091
Figure pct00092
Figure pct00093
Figure pct00094
Figure pct00095
Figure pct00096
Figure pct00097
Figure pct00098
Figure pct00099
Figure pct00100
Figure pct00101
Figure pct00102
Figure pct00103
Figure pct00104
Figure pct00105
Figure pct00106
Figure pct00107
Figure pct00108
Figure pct00109
Figure pct00110
Figure pct00111
Figure pct00112
Figure pct00113
Figure pct00114
Figure pct00115
Figure pct00116
Figure pct00117
Figure pct00118
Figure pct00119
Figure pct00120
Figure pct00121
Figure pct00122
Figure pct00123
Figure pct00124
Figure pct00125
Figure pct00126
Figure pct00127
Figure pct00128
Figure pct00129
Figure pct00130
Figure pct00131
Figure pct00132
Figure pct00133
Figure pct00134
Figure pct00135
Figure pct00136
Figure pct00137
Figure pct00138
Figure pct00139
Figure pct00140
Figure pct00141
Figure pct00142
Figure pct00143
Figure pct00144
[표 2]
Figure pct00145
Figure pct00146
Figure pct00147
Figure pct00148
Figure pct00149
Figure pct00150
Figure pct00151
Figure pct00152
Figure pct00153
Figure pct00154
Figure pct00155
Figure pct00156
Figure pct00157
Figure pct00158
Figure pct00159
Figure pct00160
Figure pct00161
Figure pct00162
Figure pct00163
Figure pct00164
Figure pct00165
Figure pct00166
Figure pct00167
Figure pct00168
Figure pct00169
Figure pct00170
Figure pct00171
Figure pct00172
Figure pct00173
Figure pct00174
Figure pct00175
Figure pct00176
Figure pct00177
[표 3]
Figure pct00178
Figure pct00179
Figure pct00180
Figure pct00181
Figure pct00182
Figure pct00183
Figure pct00184
Figure pct00185
Figure pct00186
Figure pct00187
Figure pct00188
Figure pct00189
Figure pct00190
Figure pct00191
Figure pct00192
Figure pct00193
Figure pct00194
Figure pct00195
Figure pct00196
Figure pct00197
Figure pct00198
Figure pct00199
Figure pct00200
Figure pct00201
Figure pct00202
Figure pct00203
Figure pct00204
Figure pct00205
Figure pct00206
Figure pct00207
Figure pct00208
Figure pct00209
Figure pct00210
일부 실시양태에서, 상기 화합물은 표 1의 화합물 번호 1 내지 230, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 상기 화합물은 화합물 번호 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 54, 55, 56, 57, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 113, 115, 116, 117, 118, 119, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 138, 139, 140, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 153, 154, 155, 156, 157, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229 및 230, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 상기 화합물은 화합물 번호 9 내지 12, 29, 33 내지 36, 53, 58, 64, 83, 84, 96, 97, 111, 112, 114, 120, 121, 129, 137, 141, 142, 152 및 158, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 상기 화합물은 표 2의 화합물 번호 231 내지 390, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 상기 화합물은 표 3의 화합물 번호 391 내지 528, 및 이들의 약학적으로 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 염은 입체 이성질체 형태로 존재할 수 있다(예컨대, 이는 하나 이상의 비대칭 탄소 원자를 함유함). 개별적인 입체 이성질체(거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체) 및 이들의 혼합물은 본원에 개시된 요지의 범위 내에 포함된다. 마찬가지로, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 염이 화학식으로 도시된 것 이외의 호변 이성질체 형태로 존재할 수 있고, 이들 또한 본원에 개시된 요지의 범위 내에 포함됨이 이해된다. 본원에 개시된 요지가, 본원에 기술된 특정 기의 조합 및 부분집합을 포함함을 이해해야 한다. 본원에 개시된 요지의 범위는 입체 이성질체들의 혼합물뿐만 아니라, 정제된 거울상 이성질체 또는 거울상 이성질체/부분입체 이성질체-풍부 혼합물도 포함한다. 본원에 개시된 요지가, 본원에 정의된 특정 기의 조합 및 부분집합을 포함함을 이해해야 한다.
본원에 개시된 요지는 또한, 하나 이상의 원자가, 자연에서 일반적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된다는 사실을 제외하고는, 본원에 기술된 화합물의 동위원소-표지된 형태를 포함한다. 본원에 기술된 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 불소, 요오드, 및 염소의 동위원소, 예컨대 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 31P, 32P, 35S, 18F, 36Cl, 123I 및 125I를 포함한다.
본원에 개시된 요지는, 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 전구약물, 대사산물, 유도체, 및 약학적으로 허용되는 염을 포함한다. 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 대사산물은, 화학식 I 또는 Ia의 화합물을, 이의 대사산물을 수득하기에 충분한 시간 동안 포유동물과 접촉시키는 것을 포함하는 방법에 의해 제조된 화합물을 포함한다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물이 염기인 경우, 목적하는 약학적으로 허용되는 염은 당업계에서 이용가능한 임의의 적합한 방법에 의해, 예를 들어, 자유 염기를 무기 산(예컨대, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 메탄설폰산, 인산 등) 또는 유기 산(예컨대, 아세트산, 말레산, 석신산, 만델산, 퓨마르산, 말론산, 피루브산, 옥살산, 글리콜산, 살리실산, 피라노시딜산, 예를 들어 글루쿠론산 또는 갈락투론산, 알파 하이드록시산, 예를 들어 시트르산 또는 타르타르산, 아미노산, 예를 들어 아스파트산 또는 글루탐산, 방향족 산, 예를 들어 벤조산 또는 신남산, 설폰산, 예를 들어 p-톨루엔설폰산 또는 에탄설폰산 등)으로 처리함으로써 제조될 수 있다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물이 산인 경우, 목적하는 약학적으로 허용되는 염은 임의의 적합한 방법에 의해, 예를 들어, 자유 산을 무기 또는 유기 염기(예컨대, 아민(1급, 2급 또는 3급), 알칼리 금속 하이드록사이드 또는 알칼리 토금속 하이드록사이드 등)로 처리함으로써 제조될 수 있다. 적합한 염의 예시적인 예는, 비제한적으로, 아미노산(예컨대, 글리신 및 아르기닌), 암모니아, 1급, 2급 및 3급 아민, 및 사이클릭 아민(예컨대, 피페리딘, 모폴린 및 피페라진)으로부터 유도된 유기 염; 및 나트륨, 칼슘, 칼륨, 마그네슘, 망간, 철, 구리, 아연, 알루미늄 및 리튬으로부터 유도된 무기 염을 포함한다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물은 "전구약물" 형태일 수 있고, 이는, 생체 내에서 대사작용될 수 있는 잔기를 갖는 화합물을 포함한다. 일반적으로, 전구약물은 에스터라제에 의해 또는 약물을 활성화시키는 다른 메커니즘에 의해 생체 내에서 대사작용된다. 전구약물 및 이의 사용의 예는 당업계에 공지되어 있다(예를 들어, 문헌[Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66:1-19] 참조). 전구약물은 상기 화합물의 최종 단리 및 정제 동안 동일 반응계 내에서 제조될 수 있거나, 이의 자유 산 형태 또는 하이드록실 형태인 정제된 화합물을 적합한 에스터화제와 별도로 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 하이드록실 기는 카복실산 처리를 통해 에스터로 전환될 수 있다. 전구약물 잔기의 예는 치환된 및 비치환된, 분지형 또는 비분지형 저급 알킬 에스터 잔기(예컨대, 프로피온산 에스터), 저급 알켄일 에스터, 다이-저급 알킬-아미노 저급-알킬 에스터(예컨대, 다이메틸아미노에틸 에스터), 아실아미노 저급 알킬 에스터(예컨대, 아세틸옥시메틸 에스터), 아실옥시 저급 알킬 에스터(예컨대, 피발로일옥시메틸 에스터), 아릴 에스터(페닐 에스터), 아릴-저급 알킬 에스터(예컨대, 벤질 에스터), (예를 들어, 메틸, 할로, 또는 메톡시 치환기로) 치환된 아릴 및 아릴-저급 알킬 에스터, 아마이드, 저급-알킬 아마이드, 다이-저급 알킬 아마이드, 및 하이드록시 아마이드를 포함한다. 생체 내에서 다른 메커니즘을 통해 활성 형태로 전환되는 전구약물이 또한 포함된다. 실시양태들에서, 본 발명의 화합물은 본원의 임의의 화학식의 전구약물이다.
일반 합성 반응식
화학식 I 또는 Ia의 화합물은 실시예의 절차에 의해, 및 일반적으로 하기 반응식 1 및 2에 의해 제조될 수 있고, 이때 R 기는 화학식 I 또는 Ia, 또는 이의 전구체에서 기술된 바와 같다.
[반응식 1]
Figure pct00211
반응식 1은 R2가 A-C(O)-인 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 제조하기 위한 일반적인 합성 방법을 제시한다. 화합물 A와 활성화된 아실 화합물 A-C(O)-X'의 반응은 3-아미노 기의 아실화를 야기하여 화합물 B를 제공한다. 화합물 B와 보론산 에스터 R2-B(OR)2의 Pd-촉매화된 커플링은 화합물 C를 제공한다. 화합물 C와 보호된 아민의 Pd-촉매화된 커플링은 화합물 D를 제공한다. 화합물 D의 탈보호는 A, R1 및 R2가 화학식 I 또는 Ia에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I-A의 생성물을 제공한다.
화합물 C를 보호된 아민(예컨대, HN = C(Ph)2 또는 Boc-NH2)과 반응시켜 화합물 D를 제조하는 단계; 및 화합물 D가 아민 탈보호 조건을 거치게 하여 A, R1 및 R2가 화학식 I 또는 Ia에 대해 정의된 바와 같은 화합물 I-A를 제조하는 단계를 포함하는, 화학식 I-A의 화합물의 제조 방법이 제공된다. 상기 방법은 화합물 A를 아실화시켜 화합물 B를 제조하는 단계[화합물 A와 A-C(O)-X(이때, X는 할로겐, 예컨대 Br 또는 I임)를 반응시키는 단계를 포함함]; 및 화합물 B를 보론산 에스터 R2-B(OR)2(이때, R은 알킬 또는 아릴이거나, 2개의 OR 기는 붕소 원자와 함께 고리를 형성함) 및 Pd 촉매와 반응시켜 화합물 C를 형성하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
[반응식 2]
Figure pct00212
반응식 2는 R2가 D인 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 제조하기 위한 일반적인 합성 방법을 제시한다. 화합물 A와 보론산 에스터 R2-B(OR)2 또는 보호된 아민(바람직한 R2 기가 아미노 기인 경우)의 Pd-촉매화된 커플링은 화합물 E를 제공한다. 화합물 E와 화합물 D-X의 Pd-촉매화된 커플링은 화합물 F를 제공한다. 화합물 C와 보호된 아민의 Pd-촉매화된 커플링은 화합물 G를 제공한다. 화합물 G의 탈보호는 화학식 I-D(이때, D, R1 및 R2는 화학식 I 또는 Ia에 대해 정의된 바와 같음)의 생성물을 제공한다.
화합물 F를 보호된 아민(예컨대, HN = C(Ph)2 또는 Boc-NH2)과 반응시켜 화합물 D를 제조하는 단계; 및 화합물 D가 아민 탈보호 조건을 거치게 하여 화합물 I-A(이때, A, R1 및 R2는 화학식 I 또는 Ia에 대해 정의된 바와 같음)를 제조하는 단계를 포함하는, 화학식 I-D의 화합물의 제조 방법이 제공된다. 상기 방법은 화합물 A를 보론산 에스터 R2-B(OR)2(이때, R은 알킬 또는 아릴이거나, 2개의 OR 기는 붕소 원자와 함께 고리를 형성함) 및 Pd 촉매와 반응시켜 화합물 E를 제조하는 단계; 및 화합물 E를 화합물 D-X(이때, X는 이탈기, 예컨대 Cl, Br 또는 I임) 및 Pd 촉매와 반응시켜 화합물 F를 제조하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 바람직한 R2가 임의적으로 치환된 아미노 기인 경우, 상기 방법은 화합물 A를 보호된 아민(예컨대, HNRR', 이때 R 및 R'는 아민 보호기임) 및 Pd 촉매와 반응시켜 화합물 E를 제조하는 단계; 및 화합물 E를 화합물 D-X(이때, X는 이탈기, 예컨대 Cl, Br 또는 I임) 및 Pd 촉매와 반응시켜 화합물 F를 제조하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
조성물
본원에 개시된 화합물은, 약학적으로 허용되는 담체와 함께 약학 조성물로 제형화될 수 있다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물은 표준 약학적 관행에 따라 약학 조성물로서 제형화될 수 있다. 상기 실시양태에 따르면, 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 함께 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
전형적인 제형은, 화학식 I 또는 Ia 화합물 및 담체, 희석제 또는 부형제를 혼합함으로써 제조된다. 적합한 담체, 희석제 및 부형제는 당업자에게 널리 공지되어 있고, 탄수화물, 왁스, 수용성 및/또는 수-팽윤성 중합체, 친수성 또는 소수성 물질, 젤라틴, 오일, 용매, 물 등과 같은 물질을 포함한다. 사용되는 특정 담체, 희석제 또는 부형제는, 화학식 I 또는 Ia의 화합물이 적용되는 수단 및 목적에 의존할 것이다. 용매는 일반적으로, 포유동물에게 투여하기에 안전한(GRAS) 것으로 당업자가 인식하는 용매에 기초하여 선택된다. 일반적으로, 안전한 용매는 비-독성 수성 용매, 예컨대 물 및 물에 가용성 또는 혼화성인 다른 비-독성 용매를 포함한다. 적합한 수성 용매는 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(예컨대, PEG 400, PEG 300) 및 이들의 혼합물을 포함한다. 상기 제형은 또한 하나 이상의 완충액, 안정화제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 유화제, 현탁제, 보존제, 산화방지제, 불투명화제, 활택제, 가공 보조제, 착색제, 감미제, 방향제, 향미제, 및 약물(즉, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학 조성물)의 우아한 외양을 제공하거나 약학 제품(약제)의 제조를 돕는 다른 공지된 첨가제를 포함할 수 있다.
상기 제형은 통상적인 용해 및 혼합 절차를 이용하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 벌크 약물 성분(즉, 화학식 I 또는 Ia의 화합물, 또는 화학식 I 또는 Ia 화합물의 안정화된 형태(예컨대, 사이클로덱스트린 유도체 또는 다른 공지된 착화제와의 복합체))을 전술된 하나 이상의 부형제의 존재 하에 적합한 용매에 용해시킨다. 화학식 I 또는 Ia의 화합물은 전형적으로 약학적 투여 형태로 제형화되어, 용이하게 제어가능한 투여량의 약물을 제공하고, 환자가 처방된 섭생을 준수할 수 있도록 한다.
적용을 위한 상기 약학 조성물(또는 제형)은, 약물 투여에 사용되는 방법에 따라 다양한 방식으로 패키지화될 수 있다. 일반적으로, 분배를 위한 물품은, 내부에 배치된 적절한 형태의 약학 제형을 갖는 용기를 포함한다. 적합한 용기는 당업자에게 널리 공지되어 있고, 병(플라스틱 및 유리), 샤쉐, 앰플, 플라스틱 백, 금속 실린더 등을 비롯한 물질을 포함한다. 상기 용기는 또한 패지키의 내용물에 대한 무분별한 접근을 막기 위해 쉽게 조작할 수 없는 조립체(tamper-proof assemblage)를 포함할 수 있다. 또한, 용기에는, 용기의 내용물을 설명하는 표지가 상부에 부착된다. 또한, 표지는 적절한 경고를 포함할 수 있다.
상기 약학 제형은 다양한 투여 경로 및 투여 유형으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 목적하는 정도의 순도를 갖는 화학식 I 또는 Ia의 화합물은 임의적으로, 동결건조된 제형, 밀링된 분말 또는 수용액 형태로, 약학적으로 허용되는 희석제, 담체, 부형제 또는 안정화제와 혼합될 수 있다(문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16th edition, Osol, A. Ed.]). 이러한 배합은 상온에서, 적절한 pH에서, 목적하는 정도의 순도로, 생리학적으로 허용되는 담체(즉, 사용된 투여량 및 농도에서 수용체에 무독성인 담체)와 혼합함으로써 수행될 수 있다. 상기 제형의 pH는 화합물의 특정 용도 및 농도에 주로 의존하지만, 약 3 내지 약 8 범위일 수 있다. 아세테이트 완충액(pH 5) 중의 제형이 적합한 실시양태이다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물은 멸균될 수 있다. 특히, 생체내 투여에 사용되는 제형은 멸균되어야 한다. 이러한 멸균은 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성된다.
상기 화합물은 일반적으로 고체 조성물, 동결건조된 제형 또는 수용액으로서 저장될 수 있다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물을 포함하는 약학 조성물은 우수한 의료 행위와 일치하는 방식(즉, 투여량, 투여 농도, 투여 스케줄, 투여 과정, 투여 비히클 및 투여 경로)으로 제형화되고, 복용되고 투여될 수 있다. 상기 맥락에서 간주되는 인자는 치료할 특정 장애, 치료할 특정 포유동물, 개별적인 환자의 임상 상태, 장애의 원인, 약제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 스케줄, 및 의사에게 공지된 다른 인자를 포함한다. 투여될 화합물의 "치료 효과량"은 상기 고려사항에 지배를 받을 수 있고, 응고 인자 매개된 장애를 방지하거나 개선하거나 치료하기에 필요한 최소량이다. 일부 실시양태에서, 상기 양은 수용체에 독성이거나 수용체에게 출혈에 대한 더 많은 민감성을 제공하는 양보다 작다.
허용되는 희석제, 담체, 부형제 및 안정화제는 사용된 투여량 및 농도에서 수용체에 비-독성이고, 완충액, 예컨대 포스페이트, 시트레이트 및 다른 유기산; 산화방지제, 예컨대 아스코르브산 및 메티오닌; 보존제(예를 들어, 옥타데실다이메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 리신; 단당류, 이당류 및 다른 탄수화물, 예컨대 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 당류, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염-형성 대응 이온, 예컨대 나트륨; 금속 착체(예컨대, Zn-단백질 착체); 및/또는 비-이온성 계면활성제, 예컨대 트윈(TWEEN)(상표), 플루로닉스(PLURONICS)(상표) 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함한다. 또한, 활성 약학 성분은, 코아세르베이션 기술에 의해 또는 계면 중합에 의해 각각 제조된 마이크로캡슐(예를 들어, 각각 콜로이드성 약물 전달 시스템(예를 들어, 리포솜, 알부민 미소구체, 마이크로유화액, 나노 입자 및 나노 캡슐) 또는 매크로유화액 중의 하이드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타실레이트) 마이크로캡슐) 내에 포획될 수 있다. 상기 기술은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)]에 개시되어 있다.
화학식 I 또는 Ia 화합물의 지속 방출 제제가 제조될 수 있다. 지속 방출 제제의 적합한 예는 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과 매트릭스를 포함하고, 상기 매트릭스는 성형 제품의 형태, 예를 들어 필름 또는 마이크로캡슐이다. 지속 방출 매트릭스의 예는, 폴리에스터, 하이드로겔(예를 들어, 폴리(2-하이드록시에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐 알코올)), 폴리락타이드(미국 특허 제3,773,919호), L-글루탐산과 γ-에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 비-분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 락트산-글리콜산 공중합체, 예컨대 루프론 데포트(LUPRON DEPOT)(상표)(락트산-글리콜산 공중합체 및 류프롤라이드 아세테이트로 구성된 주사가능 미소구체) 및 폴리-D-(-)-3-하이드록시부티르산을 포함한다.
상기 제형은 본원에 상술된 투여 경로에 적합한 것을 포함한다. 상기 제형은 편의상 단위 투여량 형태로 제공될 수 있고, 약학 분야에 널리 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 이러한 기술 및 제형은 일반적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co, Easton, PA)]에서 확인된다. 상기 방법은, 하나 이상의 부속 성분을 구성하는 담체와 활성 성분과의 회합을 제공하는 단계를 포함한다. 일반적으로, 상기 제형은, 활성 성분과 액체 담체, 미분된 고체 담체 또는 이들 둘 다와의 균일하고 친밀한 회합을 야기하고, 이어서, 필요한 경우 생성물을 성형함으로써 제조된다.
경구 투여에 적합한 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 제형은 개별 단위, 예컨대, 사전-결정된 양의 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 각각 함유하는 알약, 캡슐, 샤쉐, 또는 정제로서 제조될 수 있다.
압축된 정제는, 임의적으로 결합제, 윤활제, 비활성 희석제, 보존제, 표면 활성제 또는 분산제와 혼합된 자유 유동 형태(예컨대, 분말 또는 과립)의 활성 성분을 적합한 기계에서 압축하여 제조할 수 있다. 몰딩된 정제는 비활성 액체 희석제로 촉촉해진 분말형 활성 성분의 혼합물을 적합한 기계에서 몰딩하여 제조될 수 있다. 정제는 임의적으로 코팅되거나 자국-처리될(scored) 수 있고, 임의적으로 이의 활성 성분의 느린 배출 또는 제어된 배출을 제공하도록 배합된다.
정제, 트로키(troche), 로젠지(lozenge), 수성 또는 유성 현탁액, 분산가능한 분말 또는 과립, 유화액, 경질 또는 연질 캡슐, 예를 들어, 젤라틴 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르(elixir)는 경구용으로 제조될 수 있다. 경구용으로 의도된 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 제형은 약학 조성물의 제조에 대하여 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조될 수 있고, 상기 조성물은, 맛있는 제제를 제공하기 위해, 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제를 비롯한 하나 이상의 제제를 함유할 수 있다. 활성 성분을 정제의 제조에 적합한 무독성의 약학적으로 허용되는 부형제와의 혼합물로 함유하는 정제가 허용가능하다. 이러한 부형제는, 예를 들어, 비활성 희석제, 예컨대 탄산 칼슘 또는 탄산 나트륨, 락토스, 칼슘 또는 나트륨 포스페이트; 과립화제 및 붕해제, 예컨대 옥수수 전분, 또는 알긴산; 결합제, 예컨대 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 또는 활석일 수 있다. 정제는 비코팅되거나, 마이크로캡슐화를 비롯한 공지된 기술에 의해 코팅되어 위장관 내의 분해 및 흡수를 지연시킴으로써 오랜 기간에 걸쳐서 지속된 작용을 제공할 수 있다. 예를 들어, 시간 지연 물질, 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 다이스테아레이트가 단독으로 또는 왁스와 함께 사용될 수 있다.
눈 또는 다른 외부 조직, 예를 들어 입 및 피부의 치료를 위해, 상기 제형은 바람직하게는, 예를 들어, 0.075 내지 20 중량%의 양으로 활성 성분을 함유하는 국소 또는 크림으로서 적용된다. 연고로 배합되는 경우, 활성 성분은 파라핀계 또는 수-혼화성 연고 기제와 함께 사용될 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 수중유 크림 기제와 함께 크림으로 배합될 수 있다.
필요한 경우, 크림 기제의 수성 상은 다가 알코올(즉, 2개 이상의 하이드록실 기를 갖는 알코올), 예컨대 프로필렌 글리콜, 부탄 1,3-다이올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜(PEG 400 포함) 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 국소 제형은 바람직하게 피부 또는 다른 환부를 통해 활성 성분의 흡수 또는 침투를 강화하는 화합물을 포함할 수 있다. 상기 피부 침투 강화제의 예는 다이메틸 설폭사이드 및 관련된 유사체를 포함한다.
상기 유화액의 오일 상은, 공지된 방식으로, 공지된 성분으로 구성될 수 있다. 상기 상은 유화제만 포함할 수 있고, 이는 또한 적어도 하나의 유화제와 지방, 오일, 또는 지방 및 오일 둘 다와의 혼합물을 포함한다. 친유성 유화제와 함께 포함되는 친수성 유화제가 안정화제로서 작용할 수 있다. 또한, 오일 및 지방을 둘 다 포함하는 것이 바람직하다. 또한, 안정화제의 존재 또는 부재 하에 상기 유화제는 소위 유화 왁스를 형성하고, 상기 왁스는 오일 및 지방과 함께, 크림 제형의 유성 분산 상을 형성하는 소위 유화 연고 기제를 형성한다. 상기 제형에 사용하기에 적합한 유화제 및 유화액 안정화제는 트윈(등록상표) 60, 스판(등록상표) 80, 세토스트아릴 알코올, 벤질 알코올, 미리스틸 알코올, 글리세릴 모노스테아레이트 및 나트륨 라우릴 설페이트를 포함한다.
화학식 I 또는 Ia 화합물의 수성 현탁액은, 수성 현탁액의 제조에 적합한 부형제와의 혼합물로, 활성 물질을 함유한다. 상기 부형제는 현탁제, 예컨대 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 크로스카멜로스, 포비돈, 메틸셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 나트륨 알지네이트, 폴리비닐피롤리돈, 검 트라가칸트 및 검 아카시아; 및 분산제 또는 습윤제, 예컨대 천연 발생 포스파타이드(예를 들어, 레시틴), 알킬렌 옥사이드와 지방산의 축합 생성물(예를 들어, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트), 에틸렌 옥사이드와 장쇄 지방족 알코올의 축합 생성물(예를 들어, 헵타데카에틸렌옥시세탄올), 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유도된 부분적인 에스터와 에틸렌 옥사이드의 축합 생성물(예를 들어, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올리에이트)를 포함한다. 또한, 상기 수성 현탁액은 하나 이상의 보존제, 예컨대 에틸 또는 n-프로필 p-하이드록시벤조에이트, 하나 이상의 착색제, 하나 이상의 향미제 및 하나 이상의 감미제, 예컨대 수크로스 또는 사카린을 함유할 수 있다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물의 약학 조성물은 멸균 주사가능 제제의 형태, 예컨대 멸균 주사가능 수성 또는 유지성(oleaginous) 현탁액일 수 있다. 상기 현탁액은, 전술된 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여, 공지된 기술에 따라 배합될 수 있다. 또한, 멸균 주사가능 제제는, 무독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매(예컨대, 1,3-부탄다이올) 중 멸균 주사가능 용액 또는 현탁액일 수 있다. 상기 멸균 주사가능 제제는 동결건조 분말로서 제조된다. 특히 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매는 물, 링거액 및 등장성 염화 나트륨 용액이다. 또한, 멸균 고정유(fixed oil)는 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용될 수 있다. 상기 목적을 위해, 합성 모노글리세라이드 또는 다이글리세라이드를 비롯한, 맛이 밋밋한(bland) 임의의 고정유가 사용될 수 있다. 또한, 지방산, 예컨대 올레산이 마찬가지로, 주사가능 제제에 사용될 수 있다.
단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은, 치료할 수용체 및 특정 방식의 투여에 따라 다를 것이다. 예를 들어, 인간에게 경구 투여용으로 의도된 지속-방출(time-release) 제형은, 총 조성물의 약 5 내지 95 중량%로 다를 수 있는 적절하고 편리한 양의 담체 물질과 함께, 약 1 내지 1,000 mg의 활성 물질을 함유할 수 있다. 상기 약학 조성물은, 투여를 위해, 용이하게 측정가능한 양을 제공하도록 제조될 수 있다. 예를 들어, 정맥내 주입을 위해 의도된 수용액은, 약 30 mL/시간의 속도로 적합한 부피의 주입이 발생할 수 있도록 1 mL의 용액 당 약 3 내지 500 μg의 활성 성분을 함유할 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제형은, 산화방지제, 완충액, 세균 발육 저지제, 및 의도된 수용체의 혈액에 등장성인 제형을 제공하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다.
또한, 눈에 국소 투여하기에 적합한 제형은, 적합한 담체(특히, 활성 성분을 위한 수성 용매)에 활성 성분이 용해되거나 현탁된 점안액을 포함한다. 활성 성분은 바람직하게는 약 0.5 내지 20 중량%, 예를 들어 약 0.5 내지 10 중량%, 예를 들어 약 1.5 중량%의 농도로 상기 제형에 존재한다.
입에 국소 투여하기에 적합한 제형은 향미 기제(통상적으로 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트) 중 활성 성분을 포함하는 로젠지; 비활성 기제(예컨대, 젤라틴과 글리세린, 또는 수크로스와 아카시아) 중 활성 성분을 포함하는 알약; 및 적합한 액체 담체 중 활성 성분을 포함하는 구강 청결제를 포함한다.
직장 투여를 위한 제형은, 예를 들어 코코아 버터 또는 살리실레이트를 포함하는 적합한 기제를 갖는 좌제로서 제공될 수 있다.
폐내 또는 비강 투여에 적합한 제형은, 예를 들어 0.1 내지 500 μm 범위의 입자 크기(예를 들어, 0.5, 1, 30, 35 μm 등과 같은 증분 μm로, 예컨대 0.1 내지 500 μm 범위의 입자 크기)를 갖고, 이는 폐포 주머니에 도달하도록 비강을 통한 빠른 흡입에 의해 또는 입을 통한 흡입에 의해 투여된다. 적합한 제형은 활성 성분의 수성 또는 유성 용액을 포함한다. 에어로졸 또는 건조 분말 투여에 적합한 제형은 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있고, 다른 치료제, 예컨대 후술되는 장애의 치료 또는 예방에 사용되는 종래 화합물과 함께 전달될 수 있다.
질 투여에 적합한 제형은, 활성 성분에 더하여, 적절한 것으로 당업계에 공지된 담체를 함유하는, 좌약, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 포말 또는 스프레이 제형으로서 제공될 수 있다.
상기 제형은 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들어 밀봉된 앰풀 및 바이알에 포장될 수 있고, 사용 직전의 주사를 위해 멸균 액체 담체(예를 들어, 물)의 첨가만 필요로 하는 냉동-건조(동결건조) 상태로 저장될 수 있다. 즉석(extemporaneous) 주사 용액 및 현탁액은 전술된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조된다. 바람직한 단위 투여 제형은, 활성 성분의 상기 본원에 언급된 바와 같은 일일 용량 또는 일일 단위 하위-용량, 또는 이의 적절한 분획을 함유하는 것이다.
따라서, 본 발명의 요지는 또한, 상기 정의된 바와 같은 적어도 하나의 활성 성분을 이의 수의학적 담체와 함께 포함하는 수의학적 조성물을 제공한다. 수의학적 담체는 조성물의 투여 목적에 유용한 물질이고, 달리 비활성이거나 수의학 분야에서 허용가능하고 활성 성분과 혼화성일 수 있는 고체, 액체 또는 기체 물질일 수 있다. 상기 수의학 조성물은 비경구적으로, 경구적으로 또는 임의의 다른 바람직한 경로에 의해 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 개시된 화합물을 포함하는 약학 조성물은 화학치료제를 추가로 포함한다. 몇몇 상기 실시양태에서, 화학치료제는 면역치료제이다.
방법
본원에 개시된 화합물은 효소 HPK1의 활성을 억제하는 데 사용된다. HPK1(미토겐 활성화된 단백질 키나제 1 또는 MAP4K1로도 지칭됨)은 Ste20-관련된 세린/트레오닌 키나제의 배중심(germinal center) 키나제 아과의 일원이다. HPK1은, MAP3K 단백질(예컨대, MEKK1, MLK3 및 TAK1)을 포스포릴화 및 활성화함으로써 MAP4K로서 작용하여, MAPK Jnk의 활성화를 야기한다.
하나의 실시양태에서, 본원에 개시된 요지는, HPK1를 억제하는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은, HPK1을 효과량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물과 접촉시키는 것을 포함한다.
하나의 실시양태에서, 본원에 개시된 요지는, 면역 반응의 개선을 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은, 효과량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물을 상기 대상에게 투여하는 것을 포함한다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 대상의 T 세포는, 상기 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전에 비해 개선된 프라이밍, 개선된 활성화, 개선된 이동, 개선된 증식, 개선된 생존율, 및 개선된 세포용해 활성 중 적어도 하나를 가진다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, T 세포 활성화는, 상기 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전에 비해 γ-IFN+ CD8 T 세포의 증가된 빈도 또는 T 세포에 의한 개선된 IL-2 또는 그랜자임 B 생성의 개선된 수준을 특징으로 한다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전에 비해 T 세포의 개수가 증가된다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, T 세포는 항원-특이적 CD8 T 세포이다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 대상 내의 항원-제공 세포는, 상기 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전에 비해 개선된 성숙 및 활성화를 가진다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 항원-제공 세포는 수지상 세포이다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 항원-제공 세포의 성숙은, CD83+ 수지상 세포의 증가된 빈도를 특징으로 한다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 항원-제공 세포의 활성화는, 수지상 세포 상의 CD80 및 CD86의 증가된 발현을 특징으로 한다.
본원에 기술된 방법에서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학 조성물은, 본원에 기술된 암을 갖는 대상에게 투여된다.
하나의 실시양태에서, 본원에 개시된 요지는, HPK1-의존성 장애의 치료 방법에 관한 것이며, 상기 방법은, 효과량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함한다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 HPK1-의존성 장애는 암이다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 암은, 대장암, 흑색종, 비-소세포 폐암, 난소암, 유방암, 췌장암, 혈액암, 및 신장 세포 암종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 암을 포함한다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 암은 T-세포 침투의 증가된 수준을 가진다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 상기 대상 내의 암세포는 선택적으로, 상기 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전에 비해 MHC 부류 I 항원의 증가된 발현을 가진다.
본원에 기술된 방법에서, 상기 방법은 추가로, 화학치료제를 상기 대상에게 투여하는 것을 포함할 수 있다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 화학치료제는 상기 화합물 또는 조성물과 동시에 상기 대상에게 투여된다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 화학치료제는 상기 화합물 또는 조성물의 투여 이전에 상기 대상에게 투여된다. 상기 실시양태의 특정 양태에서, 화학치료제는 상기 화합물 또는 조성물의 투여 이후에 상기 대상에게 투여된다.
HPK1 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩티드는 당업계에 공지되어 있다(문헌[Hu et al. (1996) Genes Dev. 10: 2251-2264] 참조, 상기 문헌 전체를 본원에 참고로 인용함). HPK1 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩티드의 비제한적인 예는 서열번호 1(진뱅크(GenBank) 수탁번호 NM_007181.5의 뉴클레오타이드 141-2642)에 개시된 인간 HPK1 폴리뉴클레오타이드 및 서열번호 2에 개시된 코딩된 인간 HPK1 폴리펩티드(수탁번호 NP_009112.1)를 포함한다. HPK1의 더 짧은 821개의 아미노산 이소형이 인간에 존재하며, 이의 코딩 서열 및 아미노산 서열은 각각 서열번호 3 및 1에 개시되어 있다(각각 진뱅크 수탁번호 NM_001042600.2의 뉴클레오타이드 141-2606 및 진뱅크 수탁번호 NP_001036065.1).
HPK1 폴리펩티드는 다양한 보존된(conserved) 구조 모티브를 포함한다. 참조의 용이성을 위해, 상기 모티브는, 833개의 아미노산 잔기를 포함하는 더 긴 인간 HPK1 이소형(이는 서열번호 2에 개시됨)과 관련하여 논의될 것이다. HPK1 폴리펩티드는, 아미노산 잔기 23 내지 46으로부터의 ATP-결합 부위를 포함하는 아미노산 잔기 17 내지 293에 걸쳐 있는 아미노-말단 Ste20-유사 키나제 도메인을 포함한다. 상기 키나제 도메인에 이어, SH3-함유 단백질(예컨대, CrkL, Grb2, HIP-55, Gads, Nck, 및 Crk)에 대한 결합 부위로서 작용하는 프롤린-풍부(PR) 모티브가 존재한다. 4개의 PR 모티브가 각각 아미노산 잔기 308 내지 407, 394 내지 402, 432 내지 443, 및 468 내지 477에 걸쳐 있다. HPK1은 TCR 또는 BCR 자극에 반응하여, 포스포릴화되고 활성화된다. PR1과 PR2 사이에 존재하는 381 위치에서의 티로신의 TCR- 및 BCR-유도된 포스포릴화는 SLP-76 또는 BLNK SH2 도메인을 통해 T 세포 내의 SLP-76 또는 B 세포 내의 BLNK에 대한 결합을 매개하며, 이는 키나제 활성화에 필요하다. 대략 잔기 495 내지 800에 걸쳐있는, HPK1의 C-말단에서 발견되는 시트론 상동 도메인은 조절 도메인으로서 작용할 수 있고, 거대분자 상호작용에 관여할 수 있다.
본원에 개시된 화합물은 HPK1에 직접 결합하여, 이의 키나제 활성을 억제한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 화합물은 SLP76 및/또는 Gads의 HPK1-매개된 포스포릴화를 감소시키거나, 억제하거나 달리 약화시킨다.
본원에 개시된 화합물은 특이적 HPK1 길항제일 수도 있고 아닐 수도 있다. 특이적 HPK1 길항제는, 임의의 다른 단백질(예컨대, 다른 세린/트레오닌 키나제)에 대한 상기 길항제의 억제 효과보다 통계적으로 더 많은 양으로 HPK1의 생물학적 활성을 감소시킨다. 특정 실시양태에서, 본원에 개시된 화합물은 HPK1의 세린/트레오닌 키나제 활성을 특이적으로 억제한다. 몇몇 상기 실시양태에서, HPK1에 대한 상기 HPK1 길항제의 IC50은, 또 다른 세린/트레오닌 키나제 또는 다른 유형의 키나제(예컨대, 티로신 키나제)에 대한 상기 HPK1 길항제의 IC50의 약 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 0.1%, 0.01%, 0.001% 또는 그 이하이다.
본원에 개시된 화합물은 HPK1 억제 방법에 사용될 수 있다. 상기 방법은, HPK1을 효과량의 본원에 개시된 화합물과 접촉시키는 것을 포함한다. "접촉시키다"는, 상기 화합물이 HPK1에 결합하여 이의 활성을 억제할 수 있도록, 상기 화합물을 단리된 HPK1 효소 또는 HPK1-발현 세포(예컨대, T 세포, B 세포, 수지상 세포)와 충분히 근접시키는 것으로 의도된다. 상기 화합물을, 시험관 내에서 또는 상기 화합물을 대상에게 투여하는 것을 통해 생체 내에서, HPK1와 접촉시킬 수 있다.
HPK1의 키나제 활성을 측정하기 위한 당업계에 공지된 임의의 방법, 예를 들어, 시험관내 키나제 분석, HPK1의 포스포릴화된 표적(예컨대, SLP76 및 Gads)에 특이적인 항체를 사용한 면역블롯(immunoblot), 또는 HPK1 키나제 활성의 하류 생물학적 효과(예컨대, 포스포릴화된 SLP7 및 Gads에 대한 14-3-3 단백질의 모집, LAT-함유 마이크로클러스터로부터 SLP76-Gads-14-3-3 복합체의 방출, 또는 T 또는 B 세포 활성화)를 사용하여, HPK1이 억제되었는지를 결정할 수 있다.
본원에 개시된 화합물을 사용하여 HPK1-의존성 장애를 치료할 수 있다. 본원에서 "HPK1-의존성 장애"는, 병리학적 증상의 발생 또는 유지에 HPK1 활성이 필요한 병리학적 증상이다. 일부 실시양태에서, 상기 HPK1-의존성 장애는 암이다.
본원에 개시된 화합물은 또한, 면역 반응의 개선을 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하는 데 사용된다. 상기 방법은, 효과량의 본원에 개시된 화합물(즉, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체)을 투여하는 것을 포함한다.
본원에서 "면역 반응을 개선하다"란, 항원에 대한 임의의 면역원성 반응의 개선을 지칭한다. 항원에 대한 면역원성 반응의 개선의 비제한적인 예는 수지상 세포의 개선된 성숙 또는 이동, T 세포(예컨대, CD4 T 세포, CD8 T 세포)의 개선된 활성화, T 세포(예컨대, CD4 T 세포, CD8 T 세포)의 개선된 증식, B 세포의 개선된 증식, T 세포 및/또는 B 세포의 증가된 생존율, 항원 제공 세포(예컨대, 수지상 세포)에 의한 개선된 항원 제공, 개선된 항원 제거율(clearance), T 세포(예컨대, 인터루킨-2)에 의한 사이토카인 생성 증가, 프로스타글란딘 E2-유도된 면역 억제에 대한 증가된 내성, 및 CD8 T 세포의 개선된 프라이밍 및/또는 세포용해 활성을 포함한다.
일부 실시양태에서, 상기 대상 내의 CD8 T 세포는, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체의 투여 전에 비해 개선된 프라이밍, 활성화, 증식 및/또는 세포용해 활성을 가진다. 일부 실시양태에서, CD8 T 세포 프라이밍은, CD8 T 세포에서 증가된 CD44 발현 및/또는 개선된 세포용해 활성을 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, CD8 T 세포 활성화는, γ-IFN+ CD8 T 세포의 증가된 빈도를 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, CD8 T 세포는 항원-특이적 T-세포이다.
일부 실시양태에서, 상기 개체 내의 항원 제공 세포는, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체의 투여 전에 비해 개선된 성숙 및 활성화를 가진다. 일부 실시양태에서, 상기 항원 제공 세포는 수지상 세포이다. 일부 실시양태에서, 상기 항원 제공 세포의 성숙은, CD83+ 수지상 세포의 증가된 빈도를 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 상기 항원 제공 세포의 활성화는, 수지상 세포 상의 CD80 및 CD86의 증가된 발현을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, 상기 대상 내의 사이토카인 IL-10 및/또는 케모카인 IL-8(쥐 KC의 인간 동족체)의 혈청 수준은, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체의 투여 전에 비해 감소된다.
TCR의 관여는 HPK1 활성화를 야기하며, 이는, TCR-유도된 AP-1 반응 경로의 음성 조절제로서 작용한다. HPK1은, Ser376에서의 SLP76(문헌[Di Bartolo et al. (2007) JEM 204:681-691]) 및 Thr254에서의 Gads를 포스포릴화하여, 포스포릴화된 SLP76 및 Gads에 결합되는 14-3-3 단백질의 모집, 및 LAT-함유 마이크로클러스터로부터 SLP76-Gads-14-3-3 복합체 방출을 야기하고, T 세포 기능장애, 예컨대 아네르기(anergy) 및 탈진을 야기하여, 마이크로클러스터의 신호전달의 지속성을 감소시킴으로써, T 세포 활성화를 음성으로 조절하는 것으로 생각된다(문헌[Lasserre et al. (2011) J Cell Biol 195(5):839-853]).
면역 기능장애의 맥락에서 용어 "기능장애"는, 항원 자극에 대한 감소된 면역 반응성의 상태를 지칭한다. 상기 용어는, 항원 인식이 일어날 수 있지만 뒤이은 면역 반응이 감염 또는 종양 증식을 제어하기에 효과적이지 않은, 탈진 및/또는 아네르기 둘 다의 통상적인 요소를 포함한다.
본원에서 용어 "기능장애성"은 또한, 항원 인식에 대한 불응성 또는 무반응성, 특히, 항원 인식을 하류 T-세포 효과기(effector) 기능(예컨대, 증식, 사이토카인(예컨대, IL-2, γ-IFN) 생성 및/또는 표적 세포 멸살)으로 번역하는 손상된 능력을 포함한다.
용어 "아네르기"는, T-세포 수용체를 통해 전달되는 불완전한 또는 불충분한 항원 자극(예컨대, ras-활성화의 부재 하에 세포간 Ca+2의 증가)에 대한 무반응성 상태를 지칭한다. T 세포 아네르기는 또한 공동-자극의 부재 하에 항원의 자극에 대해 유발되어, 심지어, 공동-자극의 맥락에서, 항원에 의한 후속 활성화에 대해 세포가 불응하게 될 수 있다. 이러한 무반응성 상태는 흔히 인터루킨-2의 존재 하에 무시될 수 있다. 아네르기성 T-세포는 클론 확장을 겪지 않고/않거나, 효과기 기능을 획득하지 않는다.
용어 "탈진"은, 수많은 만성 감염 및 암 동안 발생하는 TCR 신호전달로부터 야기되는 T 세포 기능장애 상태로서의 T 세포 탈진을 지칭한다. 이는, 불완전한 또는 결핍된 신호전달을 통해서가 아니라 지속된 신호전달로부터 유발된다는 점에서 아네르기와 구별된다. 이는, 불량한 효과기 기능, 억제성 수용체의 지속된 발현, 및 기능적 효과기 또는 기억 T 세포와 별개의 전사 상태로 정의된다. 탈진은, 감염 및 종양의 최적 제어를 막는다. 탈진은 외인성 음성 조절 경로(예컨대, 면역조절 사이토카인)뿐만 아니라 세포 내인성 음성 조절(동시-자극) 경로(PD-1, B7-H3, B7-H4 등)에 의해서도 유래될 수 있다.
일부 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체를 대상에게 투여하는 것은 T 세포 기능을 개선시킨다.
"T 세포 기능 개선"은, T 세포가 지속된 또는 증폭된 생물학적 기능을 갖도록 유도, 유발 또는 자극하거나, 탈진된 또는 불활성 T 세포의 재개시키거나 재활성시키는 것을 의미한다. T 세포 기능 개선의 예는, 처치 이전의 수준 대비 사이토카인(예컨대, γ-인터페론, IL-2, IL-12, 및 TNFα)의 증가된 분비, 증가된 증식, 증가된 항원 반응성(예컨대, 바이러스, 병원체, 또는 종양 제거), 및 CD8 T 세포(예컨대, 그랜자임 B)에 의한 증가된 효과기 과립 생성을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 개선 수준은 50% 이상, 다르게는 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 120%, 150%, 200%이다. 상기 개선을 측정하는 방식은 당업자에게 공지되어 있다.
따라서, 본원에 개시된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체는 T 세포 기능장애성 장애의 치료에 유용하다. "T 세포 기능장애성 장애"는, 항원성 자극에 대한 감소된 반응성을 특징으로 하는 T 세포 장애 또는 증상이다. 특정 실시양태에서, T 세포 기능장애성 장애는, HPK1의 증가된 키나제 활성과 특히 관련된 장애이다. 또 다른 실시양태에서, T 세포 기능장애성 장애는, T 세포가 아네르기성이거나, 사이토카인을 분비하거나 증식하거나 세포용해 활성을 수행하는 능력이 감소된 장애이다. 특정 실시양태에서, 이러한 감소된 반응성은, 면역원을 발현시키는 병원체 또는 종양의 비-효과적인 제어를 제공한다. T-세포 기능장애를 특징으로 하는 T 세포 기능장애성 장애의 예는 미해결된 급성 감염, 만성 감염 및 종양 면역력을 포함한다.
따라서, 본원에 개시된 화합물은 개선된 면역원성(예컨대, 암 치료를 위한 종양 면역원성 증가)이 필요한 증상의 치료에 사용될 수 있다.
"면역원성"은, 면역 반응을 유발하는 특정 성분의 능력을 지칭한다. 종양은 면역원성이며, 면역 반응에 의해 종양 세포를 제거할 때 돕는 종양 면역원성을 개선한다.
"종양 면역력"은, 종양이 면역 인식 및 제거를 회피하는 과정을 지칭한다. 따라서, 치료적 개념으로서, 상기 회피가 약화되고 면역 시스템에 의해 종양이 인식되어 공격되는 경우, 종양 면역력이 "치료된다". 종양 인식의 예는 종양 결합, 종양 수축 및 종양 제거를 포함한다.
하나의 실시양태에서, 본원에서는, 암 치료가 필요한 대상에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 상기 방법은, 효과량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체를 대상에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 흑색종을 가진다. 흑색종은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 대장암을 가진다. 대장암은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 비-소세포 폐암을 가진다. 비-소세포 폐암은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 췌장암을 가진다. 췌장암은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 혈액암을 가진다. 혈액학적 악성 종양은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 난소암을 가진다. 난소암은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 유방암을 가진다. 유방암은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 대상은 신장 세포 암종을 가진다. 신장 세포 암종은 초기 단계 또는 말기 단계일 수 있다. 일부 실시양태에서, 암은 증가된 수준의 T-세포 침투를 가진다.
본원에 개시된 화합물은 당업계에 공지된 임의의 적합한 방식으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체는, 정맥내로, 근육내로, 피하로, 국소로, 경구로, 경피로, 복강내로, 안와내로, 이식에 의해, 흡입에 의해, 척추강내로, 심실내로, 종양내로, 비강내로 투입된다.
일부 실시양태에서, HPK1 길항제는 연속 투여된다. 다른 실시양태에서, HPK1 길항제는 간헐 투여된다. 또한, 효과량의 HPK1 길항제로 대상을 치료하는 것은 단일 치료를 포함할 수 있거나, 일련의 치료를 포함할 수 있다.
활성 화합물의 적절한 투여량은 의사 또는 수의사의 지식 이내의 수많은 인자에 의존함이 이해된다. 활성 화합물의 투여량은, 예를 들어, 연령, 체중, 일반 건강, 성, 및 대상의 식습관, 투여 시간, 투여 경로, 분비 속도 및 임의의 약물 병용에 따라 다를 것이다.
또한, 치료에 사용되는 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체의 효과적인 투여량은 특정 치료 과정에 따라 증가되거나 감소될 수 있음이 이해될 것이다. 투여량 변화가 생길 수 있고, 이는, 진단적 분석의 결과로부터 자명하게 된다.
일부 실시양태에서, HPK1 길항제는 약 0.001 μg/kg 내지 약 1,000 mg/kg, 예컨대, 비제한적으로, 약 0.001 μg/kg, 약 0.01 μg/kg, 약 0.05 μg/kg, 약 0.1 μg/kg, 약 0.5 μg/kg, 약 1 μg/kg, 약 10 μg/kg, 약 25 μg/kg, 약 50 μg/kg, 약 100 μg/kg, 약 250 μg/kg, 약 500 μg/kg, 약 1 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 100 mg/kg, 및 약 200 mg/kg의 투여량으로 대상에게 투여된다.
일부 실시양태에서, 암 치료가 필요한 대상에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 상기 방법은, 효과량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 전구약물, 대사산물 또는 유도체를 상기 대상에게 투여하는 것을 포함하며, 추가적 요법을 적용하는 것을 추가로 포함한다. 추가적 요법은 방사선 요법, 수술(예컨대, 종괴절제술 및 유방절제술), 화학요법, 유전자 치료법, DNA 요법, 바이러스 요법, RNA 요법, 면역요법, 골수 이식, 나노요법, 단일클론 항체 요법, 또는 전술된 것들의 조합일 수 있다. 추가적 요법은 보강(adjuvant) 또는 신보강(neoadjuvant) 요법 형태일 수 있다. 일부 실시양태에서, 추가적 요법은 항-전이제의 투여이다. 일부 실시양태에서, 추가적 요법은 부작용 제한제(예컨대, 치료 부작용의 발생 및/또는 심각성을 완화시켜주도록 의도된 제제, 예컨대 항-구토제 등)의 투여이다. 일부 실시양태에서, 추가적 요법은 방사선 요법이다. 일부 실시양태에서, 추가적 요법은 수술이다. 일부 실시양태에서, 추가적 요법은 방사선 요법과 수술의 병용이다. 일부 실시양태에서, 추가적 요법은 감마 방사선이다. 일부 실시양태에서, 추가적 요법은 PI3K/AKT/mTOR 경로, HSP90 억제제, 튜불린 억제제, 세포자멸사 억제제, 및/또는 화학예방제를 표적으로 하는 용법이다.
추가적 요법은 하나 이상의 화학치료제일 수 있다. 따라서, 암의 치료 방법은, 본원에 개시된 HPK1 길항제를 적어도 하나의 화학치료제와 함께 투여하는 것을 포함할 수 있다.
본원에서 "~와 함께"는, 하나의 치료 양식을 또 다른 치료 양식에 더하여 적용하는 것을 지칭한다. 따라서, "~와 함께"는, 하나의 치료 양식을, 다른 치료 양식의 적용 이전, 도중 또는 이후에 대상에게 적용하는 것을 지칭한다.
예를 들어, 상기 HPK1 길항제 및 화학치료제는 순차적으로(상이한 시점에) 또는 함께(동시에) 투여될 수 있다. HPK1 길항제 및 화학치료제는 동일한 투여 경로로 또는 상이한 투여 경로로 투여될 수 있다.
특정 실시양태에서, 상기 HPK1 길항제는 또 다른 면역요법과 함께 투여된다. 예를 들어, 상기 HPK1 길항제는, PDL1/PD1 경로를 표적으로 하는 화학치료제 또는 생물제제와 조합될 수 있다. 공지된 억제성 체크포인트(checkpoint) 경로는 PD-1 수용체를 통한 신호전달을 포함한다. 예정된-사멸(programmed-death) 1(PD-1) 수용체 및 이의 리간드 PD-L1 및 PD-L2는 CTLA-4로서의 동시-조절 분자의 동일 계열의 일부이다(추가로, 웹사이트[http://www.onclive.com/web-exclusives/the-role-of-anti-pd-l1-immunotherapy-in-cancer/2#sthash.cGfYa1T1.dpuf] 참조). PD-1 및 CD80에 결합하는 PD-L1을 차단하는 화학치료제 또는 생물제제는 T-세포 활성화의 PD-L1-매개된 억제(inhibition/suppression)를 막을 수 있다. 예정된 세포 사멸 리간드-1(PD-L1)은, 항원-제공 세포(APC) 및 다른 면역 세포 상에서 널리 발현된다. 이는 넓은 범위의 인간 암으로부터의 종양 세포에 대해 상향 조절되며, 항종양 T-세포 면역력의 억제와 연루된 것이다. PD-L1은, 활성화된 T 세포, B 세포, 및 다른 골수 세포 상의 수용체 PD-1 및 CD80에 결합하는 세포 표면 단백질이다. 활성화된 T-세포 상의 PD-1에 결합하는 PD-L1은 T-세포 증식을 방해하고 면역 반응을 억제하는 것으로 나타났다. 암세포 상의 PD-L1의 과발현은, 상기 세포가 면역 검출 및 제거를 피하도록 허용할 수 있다. 종양 세포 상의 높은 수준의 PD-L1 발현은 증가된 종양 공격성 및 불량한 예후와 관련된 것이다. PD-L1이 PD-1에 결합하는 것을 차단하는 화학치료제 또는 생물제제는 항-PD-L1 항체, 예컨대, 특히 두르발루맙, 니볼루맙, 피들리주맙, MPDL3280A, MK-3475 및 BMS-936559를 포함한다.
또 다른 예에서, 상기 HPK1 길항제는, TNF 상과(superfamily)의 일원인 OX40 및 이의 리간드(OX40L)를 표적으로 하는 화학치료제 또는 생물제제와 조합될 수 있다. OX40은, 활성화된 CD4(+) 및 CD8(+) T 세포 상에서 뿐만 아니라 다수의 다른 림프성 및 비-림프성 세포 상에서도 발현된다. OX40으로부터 통상적인 T 세포로의 상호-자극성(costimulatory) 신호는 분할 및 생존율을 촉진하여, 항원에 대해 생성될 때 효과기 및 기억 집단의 클론 확장을 증대시킨다. OX40은 T-조절 세포의 분화 및 활성을 추가로 억제하여, 상기 과정을 추가로 증폭시킨다. OX40 및 OX40L은 또한 T 세포, 항원-제공 세포, 자연 살해 세포 및 자연 살해 T 세포로부터의 사이토카인 생성을 조절하고, 사이토카인 수용체 신호전달을 조절한다. T 세포를 제어하는 것으로 공지된 가장 현저한 상호-자극성 분자 중 하나로서, OX40을 자극하는 것이 암에 대한 치료 면역화 전략에 대한 표적인 것으로 나타났다. 특정 OX40 작용제는 GBR 830을 포함하고, 이는, 문헌[Linch, et al., Frontiers in Oncology, v. 5, pp. 1-10 (2015)]에 개시되어 있고, 상기 문헌 전체를 본원에 참고로 인용한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 본원에 기술된 HPK1의 억제 방법, 치료를 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하는 방법, 및/또는 본원에 기술된 HPK1-의존성 장애의 치료 방법에 사용하기 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 본원에 기술된 HPK1의 억제 방법에 사용하기 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 면역 반응의 개선을 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하는 본원에 기술된 방법에 사용하기 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 본원에 기술된 HPK1-의존성 장애의 치료 방법에 사용하기 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, HPK1을 억제하기 위한 약제, 면역 반응의 개선을 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하기 위한 약제 및/또는 HPK1-의존성 장애의 치료용 약제의 제조를 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, HPK1을 억제하기 위한 약제의 제조를 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 면역 반응의 개선을 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하는 본원에 기술된 방법을 위한 약제의 제조를 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, HPK1-의존성 장애를 치료하기 위한 약제의 제조를 위한, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 본원에 기술된 HPK1의 억제 방법, 면역 반응의 개선을 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하는 본원에 기술된 방법 및/또는 본원에 기술된 HPK1-의존성 장애의 치료 방법에 있어서, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 본원에 기술된 HPK1 억제 방법에 있어서, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 면역 반응의 개선을 필요로 하는 대상에서 면역 반응을 개선하는 본원에 기술된 방법에 있어서, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한, 본원에 기술된 HPK1-의존성 장애의 치료 방법에 있어서, 본원에 기술된 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 본원에 기술된 약학 조성물의 용도를 제공한다.
일부 실시양태에서, 상기 치료는, 치료 중단 이후 대상에서 지속된 반응을 제공한다. "지속된 반응"은, 치료 중단 이후 종양 증식을 감소시키는 것에 대한 지속된 효과를 지칭한다. 예를 들어, 투여 단계를 시작할 때의 크기에 비해, 종양 크기가 동일하거나 더 작게 유지될 수 있다. 일부 실시양태에서, 지속된 반응은 치료 기간과 적어도 동일한 지속, 또는 치료 기간의 적어도 1.5배, 2.0배, 2.5배, 또는 3.0배 길이의 지속을 가진다.
본원에 개시된 치료 방법은 부분적 또는 완전한 반응을 제공할 수 있다. 본원에서 "완전한 반응" 또는 "CR"은, 모든 표적 병변의 소멸을 지칭하고; "부분적 반응" 또는 "PR"은, 기준선 SLD(표적 병변의 최장 직경들의 합)를 기준으로 SLD의 30% 이상의 감소로 지칭되고; "안정한 질환" 또는 "SD"는, 치료가 시작된 때부터, PR에 대한 자격을 얻기에 불충분한 표적 병변의 수축, 또는 최소 SLD를 기준으로 PD에 대한 자격을 얻기에 불충분한 증가를 지칭한다. 본원에서 "전체 반응 속도"(ORR)는, 완전한 반응(CR) 속도와 부분적 반응(PR) 속도의 합을 지칭한다.
본원에 개시된 치료 방법은, 상기 HPK1 길항제가 투여된 대상의 무-진행(progression free) 생존율 및 전체 생존율의 증가를 야기할 수 있다. 본원에서 "무-진행 생존율"(PFS)은, 치료될 질환(예컨대, 암)이 악화되지 않는, 치료 동안 및 이후의 시간 길이를 지칭한다. 무-진행 생존율은, 환자가 완전한 반응 또는 부분적 반응을 겪는 시간의 양뿐만 아니라, 환자가 안정한 질환을 겪는 시간의 양도 포함할 수 있다.
본원에서 "전체 생존율"은, 특정 기간 이후에 살아있을 가능성이 있는 그룹 내 대상의 %를 지칭한다.
일부 실시양태에서, HPK1 길항제가 투여되는 대상은 포유동물, 예를 들어 가축(예컨대, 소, 양, 고양이, 개 및 말), 영장류(예컨대, 인간 및 비-인간 영장류, 예를 들어 원숭이), 토끼, 및 설치류(예컨대, 마우스 및 래트)이다. 일부 실시양태에서, 치료되는 대상은 인간이다.
암에 대한 치료가 필요한 대상은, 암의 징후를 나타내는 개인, 암 진단을 받은 개인, 암으로부터 차도가 있는 대상, 또는 암 발달의 증가된 위험을 갖는 대상(예컨대, 유전적 소인, 특정 식습관 또는 환경적 노출)일 수 있다.
하기 실시예는 제한으로서가 아니라 예시로서 제공된다.
실시예
재료 및 방법
방법 A: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트(Agilent) MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1100 HPLC 상에서, 애질런트 썬파이어(Agilent SunFire)-C18 3.5 mm, 4.6 x 50 컬럼 및 2.0 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(0.05% TFA 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(0.05% TFA 함유)(용매 B)로부터 출발하여, 1.3분에 걸쳐 100%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.2분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 B: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 애질런트 썬파이어-C18 3.5 mm, 4.6 x 50 컬럼 및 2.0 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(0.01% TFA 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(0.01% TFA 함유)(용매 B)로부터 출발하여, 1.4분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.0분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 C: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 애질런트 엑스브릿지(Agilent Xbridge)-C18, 3.5 μm, 4.6 x 50 mm 컬럼 및 1.8 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(10 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 1.3분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.2분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 D: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 애질런트 엑스브릿지-C18, 3.5 μm, 4.6 x 50 mm 컬럼 및 1.8 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(10 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 1.6분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.0분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 E: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 애질런트 썬파이어-C18 3.5 μm, 4.6 x 50 컬럼 및 2.0 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(0.01% TFA 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(0.01% TFA 함유)(용매 B)로부터 출발하여, 1.5분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.0분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 F: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 애질런트 엑스브릿지-C18, 3.5 μm, 4.6 x 50 mm 컬럼 및 1.8 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 90%의 물(10 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 10%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 1.5분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.0분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 G: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 애질런트 엑스브릿지-C18, 3.5 mm, 4.6 x 50 mm 컬럼 및 1.8 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(10 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 1.4분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.0분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 H: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 게미니(Gemini)-Nx 3m, C18, 3 μm, 4.6 x 50 mm 컬럼 및 1.8 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 90%의 물(10 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 10%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 1.5분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.0분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 I: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 애질런트 MSD 질량 분석계와 함께 애질런트 1200 HPLC 상에서, 엑스브릿지-C18, 3.5 mm, 4.6 x 50 mm 컬럼 및 1.8 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(10 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 1.6분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 1.0분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 J: ESI를 이온화 공급원으로서 사용하는 애질런트 MSD (6140) 질량 분광계와 커플링된 애질런트 1290 UHPLC 상에서 실험을 수행하였다. LC 분리는 페노메넥스 XB-C18, 1.7 μm, 50 x 2.1 mm 컬럼을 0.4 mL/분 유량으로 사용하였다. 용매 A는 0.1% FA를 갖는 물이고, 용매 B는 0.1% FA를 갖는 아세토니트릴이다. 구배는 1.5분 동안의 평형에 이어서 7분에 걸쳐 2 내지 98% 용매 B로 구성되었고, 98% B를 1.5분 동안 유지하였다. LC 컬럼 온도는 40℃였다. UV 흡광도를 220 nm 및 254 nm에서 수집하였고, 질량 스펙트럼 전체 스캔이 모든 실험에 적용되었다.
방법 J*: ESI를 이온화 공급원, 심-팩 XR-ODS C18 2.2 μm, 3.0 x 50 컬럼 및 1.2 mL/분 유량을 사용하여 쉬마즈 LCMS2020 질량 분광계를 갖는 쉬마즈 20AD HPLC 상에서 실험을 수행하였다. 용매 시스템은 0.05% TFA를 갖는 95% 물(용매 A) 및 0.05% TFA를 갖는 5% 아세토니트릴(용매 B)로 출발하여, 2.0분에 걸쳐 95% 용매 B까지 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 K: ESI를 이온화 공급원으로서 사용하고 심-팩 XR-ODS 2.2 μm, 3.0 x 50 컬럼 및 1.2 mL/분 유량을 사용하여 LCMS-2020 질량 분광계를 갖는 쉬마즈 LC-20AD 상에서 실험을 수행하였다. 용매 시스템은 0.05% TFA를 갖는 95% 물(용매 A) 및 0.05% TFA를 갖는 5% 아세토니트릴(용매 B)로 출발하고, 2.0분에 걸쳐 5% 용매 A 및 95% 용매 B로 사응하는 구배였다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 K*: ESI를 이온화 공급원으로서 사용하고, 심-팩 XR-ODS 2.2 μm, 3.0 x 50 컬럼 및 1.2 mL/분 유량을 사용하여 쉬마즈 LCMS-2020 질량 분광계를 갖는 쉬마즈 20AD HPLC 상에서 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(0.05% TFA 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(0.05% TFA 함유)(용매 B)로부터 출발하여, 2.0분에 걸쳐 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 L: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 LCMS-2020 질량 분석계와 함께, 쉬마즈 LC-30AD 상에서 아센티스 익스프레스(Ascentis Express) C18 2.7 mm, 3.0 x 50 mm 컬럼 및 1.0 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(0.05% TFA 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(0.05% TFA 함유)(용매 B)로부터 출발하여, 2.0분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 L*: ESI를 이온화 공급원으로서 사용하고, 아센티스 익스프레스 C18 2.7 μm, 2.1 x 50 컬럼 및 1.0 mL/분 유량을 사용하여 쉬마즈 LCMS-2020 질량 분광계를 갖는 쉬마즈 30AD HPLC 상에서 실험을 수행하였다. 용매 시스템은 0.05% TFA를 갖는 95% 물(용매 A) 및 0.05% TFA를 갖는 5% 아세토니트릴(용매 B)로 출발하고, 2.0분에 걸쳐 95% 용매 B로 상승하는 구배였다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 유지하였다.
방법 M: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 LCMS-2020 질량 분석계와 함께, 쉬마즈 LC-20ADXR 상에서 포로쉘(poroshell) HPH-C18, 2.7 μm, 3.0 x 50 컬럼 및 1.2 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(5 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 2.0분에 걸쳐 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 M*: ESI를 이온화 공급원으로서 사용하고 포로쉘 HPH-C18, 2.7 μm, 3.0 x 50 컬럼 및 1.2 mL/분 유량을 사용하여 쉬마즈 LCMS2020 질량 분광계를 갖는 쉬마즈 20AD XR HPLC 상에서 실험을 수행하였다. 용매 시스템은 5 mM 암모늄 바이카본에이트를 갖는 95% 물(용매 A) 및 5% 아세토니트릴(용매 B)로 출발하고, 2.0분에 걸쳐 95% 용매 B로 상승하는 구배였다. 최종 용매 시스템 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 N: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 LCMS-2020 질량 분석계와 함께, 쉬마즈 LC-30AD 상에서 캡셀 코어(CAPCELL CORE) C18, 2.7 mm, 2.1 x 50 mm 컬럼 및 1.0 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(0.1% FA 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(0.1% FA 함유)(용매 B)로부터 출발하여, 2.0분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 N*: ESI를 이온화 공급원으로서 사용하여 애질런트 MSD(6140) 질량 분광계와 커플링된 애질런트 1290 UHPLC 상에서 실험을 수행하였다. LC 분리는 페노메넥스 XB-C18, 1.7 μm, 50 x 2.1 mm 컬럼 및 0.4 mL/분 유량을 사용하였다. 용매 A는 0.1% FA를 갖는 물였고, 용매 B는 0.1% FA를 갖는 아세토니트릴였다. 구배는 1.5분 동안 평형에 이어서 7분에 걸쳐 2 내지 98% 용매 B로 구성되었고, 1.5분 동안 98% B로 유지되었다. LC 컬럼 온도는 40℃였다. UV 흡광도는 220 nm 및 254 nm에서 수집되었고, 질량 스펙트럼 전체 스캔을 모든 실험에 적용하였다.
방법 O: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 LCMS-2020 질량 분석계와 함께, 쉬마즈 LC-30AD 상에서 키네텍스(kinetex) EVO C18, 2.7 mm, 2.1 x 50 컬럼 및 1.2 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(6.5 mM NH4HCO3 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(용매 B)로부터 출발하여, 2.0분에 걸쳐 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다.
방법 O*: ESI 이온화를 사용하여 워터스 LCT 프리미어 XE 질량 분광계를 갖는 워터스 억퀴티 UPLC 상에서 실험을 수행하였다. LC 분리는 억퀴티 UPLC BEH C18, 1.7 μm, 2.1 x 50 mm 컬럼 및 0.6 mL/분 유량을 사용하였다. MPA(이동상 A)는 0.05% TFA를 갖는 물였고, MPB(이동상 B)는 0.05% TFA를 갖는 아세토니트릴였다. 구배는 0.5분 동안 평형에 이어서 5분에 걸쳐 2 내지 98% MPB로 구성되었고, 0.5분 동안 98% B로 유지되었다. LC 컬럼 온도는 40℃였다. UV 데이터를 220 nm 및 254 nm에서 수집하고, 질량 스펙트럼 전체 스캔을 모든 실험에 적용하였다.
방법 P: 이온화 공급원으로서 ESI를 사용하는 LCMS-2010 질량 분석계와 함께, 쉬마즈 LC-20AD 상에서 쉼-팩 XR-ODS 2.2 μm, 3.0 x 50 컬럼 및 1.2 mL/분의 유량을 이용하여 실험을 수행하였다. 용매 시스템은, 95%의 물(0.05% TFA 함유)(용매 A) 및 5%의 아세토나이트릴(0.05% TFA 함유)(용매 B)로부터 출발하여, 2.0분에 걸쳐 5%의 용매 A 및 95%의 용매 B까지 경사지게 상승하는 구배를 가졌다. 최종 용매 시스템을 추가로 0.7분 동안 일정하게 유지하였다. LC 컬럼 온도는 40℃이다. UV 흡광도를 220 nm 및 254 nm에서 수집하였고, 질량 스펙트럼 전체 스캔을 모든 실험에 적용하였다.
화합물 합성
합성 중간체
실시예 I.1
중간체 1: 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00213
단계 1: 메틸 2,2-다이에톡시에탄이미데이트
Figure pct00214
무수 메탄올(50 mL) 중 다이에톡시아세토니트릴(7.0 g, 54.2 mmol)의 교반된 용액에 메탄올 중 나트륨 메톡사이드의 용액(4.2 mL, 20%, 8.4 mmol)을 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 잔사를 클로로포름에 용해시키고, 유기 층을 물로 세척하고, 건조하고, 농축하여 메틸 2,2-다이에톡시에탄이미데이트(8.37 g, 95% 수율)를 무색 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.95 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.51 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 1.14 (t, J = 7.2 Hz, 6H).
단계 2: (4-브로모-2-클로로-페닐)메탄아민
Figure pct00215
50 mL 환저 플라스크에 BH3-THF(THF 중 1.0 M, 32.5 mL, 32.5 mmol) 및 THF(10 mL) 중 4-브로모-2-클로로벤조니트릴(1.76 g, 8.13 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 가열 환류하였다. 반응 혼합물을 HCl 수용액(10 중량% 수율)의 첨가에 의해 급랭시켰다. pH를 NaOH의 수용액(5 중량% 수율)의 첨가에 의해 8로 조정하고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 건조하고, 여과하고, 농축하여 (4-브로모-2-클로로-페닐)메탄아민(1.62 g, 90% 수율)을 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 220.0.
단계 3: N-[(4-브로모-2-클로로-페닐)메틸]-2,2-다이에톡시-아세트아미딘
Figure pct00216
메틸 2,2-다이에톡시에탄이미데이트(2.7 g, 16.8 mmol)를 메탄올(100 mL) 중 (4-브로모-2-클로로-페닐)메탄아민(2.47 g, 11.2 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 잔사를 다이클로로메탄에 용해시켰다. 유기 층을 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하여 조질 N-[(4-브로모-2-클로로-페닐)메틸]-2,2-다이에톡시-아세트아미딘(3.76 g, 89% 수율)을 백색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 349.0.
단계 4: 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00217
조질 N-[(4-브로모-2-클로로-페닐)메틸]-2,2-다이에톡시-아세트아미딘(1.9 g, 5.05 mmol)에 농축 H2SO4(14.9 g, 152 mmol)를 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 1 M NaOH 용액을 첨가하여 pH를 7로 조정하였다. 잔사를 다이클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 건조한 후(Na2SO4), 농축 건조하였다. 조 물질을 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트:석유 에터 = 1:3)로 정제하여 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(410 mg, 33% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 256.9.
실시예 I.2
중간체 2: N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00218
다이클로로메탄(10 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(900 mg, 2.1 mmol) 및 피리딘(166 mg, 2.1 mmol)의 냉각된(0℃) 혼합물에 사이클로프로판카보닐 클로라이드(263 mg, 2.52 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH4Cl의 포화 수용액의 첨가에 의해 급랭시키고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기물을 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조 물질을 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 40% 다이클로로메탄)로 정제하여 (N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)사이클로프로판카복스아미드(550 mg, 74% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 324.9.
실시예 I.3
중간체 3: 8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00219
단계 1: 4-아미노-2-클로로-3-플루오로벤조니트릴
Figure pct00220
밀봉된 관에 구리(I) 시아나이드(1.2 g, 13.37 mmol), 4-브로모-3-클로로-2-플루오로아닐린(1 g, 4.46 mmol) 및 1-메틸-2-피롤리딘온(8 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 170℃에서 1시간 동안 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 반응 혼합물을 NH4Cl의 포화 용액(20 mL)의 첨가에 의해 급랭시키고, 여과하였다. 여액을 에틸 아세테이트(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(3 x 10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 실리카 겔의 패드를 통해 여과하고, 농축 건조하여 4-아미노-2-클로로-3-플루오로벤조니트릴(700 mg, 92% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 171.1.
단계 2: 2-클로로-3-플루오로-4-요오도벤조니트릴
Figure pct00221
아세토니트릴(50 mL) 중 CuI(3,341 mg, 17.59 mmol)의 현탁액에 tert-부틸 니트라이트(1,811 mg, 17.59 mmol)를 65℃에서 N2 하에 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 10분 동안 교반하였다. 이어서, 4-아미노-2-클로로-3-플루오로벤조니트릴(2 g, 11.73 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 Na2S2O4(30 mL) 및 수성 NH4Cl(30 mL)로 급랭시키고, 에틸 아세테이트(3 x 300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(2 x 10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 농축하여 조질 생성물을 수득하고, 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 5/1)로 정제하여 2-클로로-3-플루오로-4-요오도벤조니트릴(1 g, 30% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.80 (dd, J = 5.6, 8.2 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 1.4, 8.2 Hz, 1H).
단계 3: (2-클로로-3-플루오로-4-요오도페닐)메탄아민
Figure pct00222
2-클로로-3-플루오로-4-요오도벤조니트릴(1 g, 3.55 mmol)을 THF(30 mL) 중 보란-THF(35.53 mL, THF 중 1 M, 35.53 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 용액을 HCl 용액(6 M, 2 mL)의 적가에 의해 급랭시켰다. 혼합물을 NaHCO3 수용액으로 pH 8까지 중화시키고, 다이클로로메탄(2 x 200 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(2 x 10 mL) 및 염수(1 x 10 mL)로 급랭시키고, 건조하고(Na2SO4), 여과하고, 농축하여 (2-클로로-3-플루오로-4-요오도페닐)메탄아민(400 mg, 조질)을 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 285.9.
단계 4: N-(2-클로로-3-플루오로-4-요오도벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드
Figure pct00223
메탄올(5 mL) 중 메틸 2,2-다이에톡시아세트이미데이트(0.3 g, 1.88 mmol)의 용액에 (2-클로로-3-플루오로-4-요오도페닐)메탄아민(250 mg, 0.88 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하고, 이어서, 농축 건조하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)에 용해시키고, 물(2 x 10 mL) 및 이어서 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO4), 여과하고, 농축하여 N-(2-클로로-3-플루오로-4-요오도벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드(360 mg, 조질)를 황색 고체로서 수득하였다. 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 415.0.
단계 5: 8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00224
N-(2-클로로-3-플루오로-4-요오도벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드(0.36 g, 0.87 mmol) 및 농축 H2SO4(10 mL, 26.05 mmol)의 용액을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각하고, NaOH를 첨가하여 pH 9로 조정하였다. 잔사를 다이클로로메탄(5 x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 여과하고, 농축하여 8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민(0.25 g, 조질)을 황색 고체로서 수득하고, 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 322.9. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.00 (s, 1H), 8.08 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H).
실시예 I.4
중간체 4: 7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00225
단계 1: 4-아미노-3-브로모-2-클로로벤조니트릴
Figure pct00226
아세토니트릴(30 mL) 중 4-아미노-2-클로로벤조니트릴(1.5 g, 9.83 mmol)의 용액에 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-2,4-이미다졸리딘다이온(1.5 g, 5.25 mmol)을 첨가하였다. 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 NaHSO3 포화 용액(30 mL)의 첨가에 의해 급랭시키고, 에틸 아세테이트(50 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(석유 에터 중 10% 에틸 아세테이트)로 정제하여 4-아미노-3-브로모-2-클로로벤조니트릴 및 4-아미노-5-브로모-2-클로로벤조니트릴의 혼합물(850 mg, 5/2 비의 구조-이성질체, 26% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 혼합물을 후속 단계에 직접 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (s, 1H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 2.6H), 6.80 (s, 1H), 6.65 (d, J = 8.4 Hz, 2.6H), 4.81(bs, 5H), 4.71 (bs, 2H).
단계 2: 3-브로모-2-클로로-4-요오도벤조니트릴
Figure pct00227
아세토니트릴(300 mL) 중 CuI(51.63 g, 271.74 mmol)의 현탁액에 tert-부틸 니트라이트(33.59 g, 326.09 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 10분 동안 교반하였다. 4-아미노-3-브로모-2-클로로벤조니트릴 및 4-아미노-5-브로모-2-클로로벤조니트릴의 혼합물(3/4 비, 25 g, 108.7 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 Na2S2O4 용액(30 mL)으로 급랭시키고, 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하였다. 여액을 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 5% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3-브로모-2-클로로-4-요오도벤조니트릴(5 g, 31% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 7.91(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H).
단계 3: (3-브로모-2-클로로-4-요오도페닐)메탄아민
Figure pct00228
THF(30 mL) 중 3-브로모-2-클로로-4-요오도벤조니트릴(3 g, 8.76 mmol)의 용액에 보란-THF(30 mL, THF 중 1 M, 30 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 N2 하에 교반하였다. 혼합물을 메탄올(10 mL) 및 HCl(12 N, 10 mL)의 첨가에 의해 급랭시켰다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(100 mL)에 용해시키고, 물(50 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 폐기하고, 수성 층의 pH를 포화 NaHCO3 용액의 첨가에 의해 pH 9까지 조정하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(10 mL x 2) 및 이어서 염수(10 mL)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 여과하고, 농축하여 (3-브로모-2-클로로-4-요오도페닐)메탄아민(3 g, 99% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 345.9.
단계 4: N-(3-브로모-2-클로로-4-요오도벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드
Figure pct00229
메탄올(20 mL) 중 (3-브로모-2-클로로-4-요오도페닐)메탄아민(2.5 g, 7.22 mmol)의 용액에 메틸 2,2-다이에톡시아세트이미데이트(3.75 g, 23.26 mmol)를 첨가하였다. 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 다이클로로메탄(20 mL)에 용해시키고, 물 및 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 N-(3-브로모-2-클로로-4-요오도벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드(3 g, 87% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 474.9.
단계 5: 7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00230
황산(10 mL) 및 N-(3-브로모-2-클로로-4-요오도벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드(3 g, 6.31 mmol)의 혼합물을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 이어서 NaOH 용액을 첨가하여 pH를 9로 조정하였다. 잔사를 다이클로로메탄(100 mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민(2.4 g, 99% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 382.8. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.99 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.49 (s, 2H).
실시예 I.5
중간체 5: 7-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00231
단계 1: (3-브로모-2-클로로페닐)메탄아민
Figure pct00232
탄소 테트라클로라이드(10 mL) 중 1-브로모-2-클로로-3-메틸벤젠(1.0 g, 4.87 mmol), NBS(1.3 g, 7.3 mmol) 및 벤조일 퍼옥사이드(11 mg, 0.05 mmol)의 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축하고, 이어서 다이클로로메탄(10 mL) 및 물(10 mL)을 첨가하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 에탄올(10 mL)에 재-용해시키고, NH4OH(10 mL, 4.87 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(prep-TLC)(정상 상, 실리카 겔, 다이클로로메탄:메탄올 = 20:1)로 정제하여 (3-브로모-2-클로로페닐)메탄아민(500 mg, 46% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 220.0.
단계 2: N-(3-브로모-2-클로로벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드
Figure pct00233
메틸 2,2-다이에톡시에탄이미데이트(548 mg, 3.4 mmol)를 메탄올(100 mL) 중 (3-브로모-2-클로로페닐)메탄아민(500 mg, 2.27 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 다이클로로메탄에 용해시키고, 유기 용액을 염수로 세척하였다. 유기 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하여 조질 생성물 N-(3-브로모-2-클로로벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드(500 mg, 1.43 mmol, 63% 수율)를 황색 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 351.0.
단계 3: 7-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00234
조질 N-(3-브로모-2-클로로벤질)-2,2-다이에톡시아세트이미드아미드(500 mg, 1.43 mmol)를 0℃에서 불활성 대기(N2) 하에 환저 플라스크에 위치시키고, 농축 H2SO4(4,207 mg, 42.9 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음 물에 부었다. NH4OH를 첨가하여 pH를 8로 조정하였다. 고체를 여과에 의해 수집하여 7-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-아민(300 mg, 81% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 257.0.
실시예 I.6
중간체 6: 8-브로모-7-클로로이소퀴놀린-3-일 트라이플루오로메탄설포네이트
Figure pct00235
단계 1: (2-브로모-3-클로로페닐)메탄아민
Figure pct00236
2-브로모-1-클로로-3-메틸벤젠(500 mg, 2.43 mmol), NBS(649 mg, 3.65 mmol), 벤조일 퍼옥사이드(5 mg, 0.02 mmol) 및 탄소 테트라클로라이드(10 mL)의 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 가열하였다. 이어서, 혼합물을 농축하였다. 이어서, 다이클로로메탄(10 mL) 및 물(10 mL)을 첨가하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 에탄올(10 mL)에 용해시키고, NH4OH(5 mL, 2.43 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(정상 상, 실리카 겔, 다이클로로메탄:메탄올 = 20:1)로 정제하여 (2-브로모-3-클로로페닐)메탄아민(300 mg, 1.36 mmol, 55% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 220.0.
단계 2: N-(2-브로모-3-클로로벤질)-2,2-다이에톡시아세트아미드
Figure pct00237
(2,2-다이에톡시아세틸)옥시나트륨(270 mg, 1.59 mmol), (2-브로모-3-클로로페닐)메탄아민(350 mg, 1.59 mmol), HOBT(321 mg, 2.38 mmol), EDCI(454 mg, 2.38 mmol) 및 DMF(50 mL)의 혼합물에 DIPEA(819 mg, 6.35 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이어서, 물(50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50 mL x 3) 및 이어서 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 N-(2-브로모-3-클로로벤질)-2,2-다이에톡시아세트아미드(500 mg, 89% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 351.0.
단계 3: 8-브로모-7-클로로이소퀴놀린-3-올
Figure pct00238
N-(2-브로모-3-클로로벤질)-2,2-다이에톡시아세트아미드(500 mg, 1.43 mmol) 및 농축 H2SO4(10 mL, 14.26 mmol)의 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음 물에 부었다. 암모늄 하이드록사이드를 첨가하여 혼합물을 pH 8로 조정하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 8-브로모-7-클로로이소퀴놀린-3-올(270 mg, 73% 수율)을 황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 258.0.
단계 4: 8-브로모-7-클로로이소퀴놀린-3-일 트라이플루오로메탄설포네이트
Figure pct00239
8-브로모-7-클로로이소퀴놀린-3-올(270 mg, 1.04 mmol), 다이클로로메탄(10 mL) 및 DIPEA(404 mg, 3.13 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 트리플산 무수물(383.1 mg, 1.36 mmol)을 천천히 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. NH4Cl의 포화 수용액(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(10 mL x 2)으로 추출하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(정상 상, 실리카 겔, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 10/1)로 정제하여 8-브로모-7-클로로이소퀴놀린-3-일 트라이플루오로메탄설포네이트(290 mg, 71% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 391.0.
실시예 I.7
중간체 7: 8-브로모-7-플루오로이소퀴놀린-3-일 트라이플루오로메탄설포네이트
Figure pct00240
단계 1: (2-브로모-3-플루오로페닐)메탄아민
Figure pct00241
THF(10 mL) 중 2-브로모-3-플루오로벤조니트릴(1.5 g, 7.5 mmol)의 용액에 BH3-THF(THF 중 2 M, 11.2 mL, 22.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 1 N HCl 용액을 첨가하여 반응을 급랭시켰다. 1 N NaOH 용액을 첨가하여 혼합물의 pH를 8로 조정하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(20 mL x 2)으로 추출하였다. 유기 추출물을 물(20 mL x 3), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 (2-브로모-3-플루오로페닐)메탄아민(850 mg, 56% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 206.0.
단계 2: N-(2-브로모-3-플루오로벤질)-2,2-다이에톡시아세트아미드
Figure pct00242
DMF(5 mL) 중 (2,2-다이에톡시아세틸)옥시나트륨(667 mg, 3.92 mmol), (2-브로모-3-플루오로페닐)메탄아민(800 mg, 3.92 mmol), HOBT(793 mg, 5.88 mmol) 및 DIPEA(2.0 g, 15.68 mmol)의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이어서, 물(50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(50 mL x 3), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 5/1)로 정제하여 N-(2-브로모-3-플루오로벤질)-2,2-다이에톡시아세트아미드(820 mg, 62% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 336.0.
단계 3: 8-브로모-7-플루오로이소퀴놀린-3-올
Figure pct00243
N-(2-브로모-3-플루오로벤질)-2,2-다이에톡시아세트아미드(953 mg, 2.85 mmol) 및 농축 H2SO4(10 mL, 28 mmol)의 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음 물에 부었다. 암모늄 하이드록사이드를 첨가하여 pH를 8로 조정하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 조질 8-브로모-7-플루오로이소퀴놀린-3-올(500 mg, 72% 수율)을 황색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 243.9.
단계 4: 8-브로모-7-플루오로이소퀴놀린-3-일 트라이플루오로메탄설포네이트
Figure pct00244
8-브로모-7-플루오로이소퀴놀린-3-올(500 mg, 2.07 mmol), 다이클로로메탄(10 mL) 및 DIPEA(799 mg, 6.2 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 트리플산 무수물(757 mg, 2.69 mmol)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 수성 포화 NH4Cl(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(10 mL x 2)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(정상 상 실리카 겔, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 10/1)로 정제하여 8-브로모-7-플루오로이소퀴놀린-3-일 트라이플루오로메탄설포네이트(600 mg, 77% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 373.9.
실시예 I.8
중간체 8: (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00245
단계 1: 7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00246
1,4-다이옥산(160 mL) 및 물(40 mL) 중 7-브로모-8-클로로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(3.6 g, 9.39 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(2.5 g, 11.41 mmol), Pd(PPh3)4(750 mg, 0.65 mmol), K2CO3(3.8 g, 27.54 mmol)의 혼합물을 70℃에서 Ar 하에 23시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 혼합물을 염수(100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:2 → 에틸 아세테이트)로 정제하여 7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(2.9 g, 89% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 348.0.
단계 2: (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00247
옥살릴 클로라이드(3.0 g, 23.62 mmol)를 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(1.2 g, 10.8 mmol)의 현탁액에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온에서 증발시켜 다이클로로메탄 및 과량을 옥살릴 클로라이드를 제거하였다. 잔사를 다이클로로메탄(5 mL)에 재-현탁하고, 다이클로로메탄(50 mL) 중 7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(2.9 g, 8.32 mmol) 및 피리딘(10 mL, 123.64 mmol)의 혼합물에 0℃에서 적가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄(100 mL)으로 희석하고, H2O(50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1 → 1:2)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(2.85 g, 78% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 441.0.
실시예 I.9
중간체 9: (3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)보론산
Figure pct00248
1,4-다이옥산(20 mL) 중 비스(피나콜라토)다이보론(976 mg, 3.84 mmol), 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(900 mg, 3.5 mmol), Pd(dppf)Cl2(127 mg, 0.17 mmol) 및 칼륨 아세테이트(1370 mg, 13.98 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 질소 하에 교반하였다. 에틸 아세테이트(50 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 여과하고, 농축하여 조질 (3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)보론산(830 mg, 78% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, 추가 정제 없이 직접 사용하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 223.1.
실시예 I.10
중간체 10: (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00249
다이클로로메탄(5 mL) 중 에탄다이오일 다이클로라이드(1,330 mg, 10.49 mmol), (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(582 mg, 5.24 mmol) 및 1 점적의 DMF의 혼합물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 다이클로로메탄(5 mL) 및 피리딘(1 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(450 mg, 1.75 mmol)의 용액에 잔사를 여러 분획으로 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1 → 석유 에터:에틸 아세테이트 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(200 mg, 32.6% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 352.0.
실시예 I.11
중간체 11: (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00250
단계 1: (±)-시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐 클로라이드
Figure pct00251
다이클로로메탄(10 mL) 및 DMF(0.10 mL) 중 (±)-시스-2-플루오로-사이클로프로판카복실산(2.1 g, 20.18 mmol)의 용액에 에탄다이오일 다이클로라이드(3.33 g, 26.23 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 중에 농축하여 황색 잔사를 수득하고, 이어서 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00252
다이클로로메탄(10 mL) 및 피리딘(1.88 mL, 23.3 mmol) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(2.0 g, 7.77 mmol)의 용액에 다이클로로메탄(2 mL)에 용해된 (±)-시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐 클로라이드(2.38 g, 19.42 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 이어서 1 N HCl 용액을 첨가하여 혼합물의 pH를 6으로 조정하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1)로 정제하여 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(2.3 g, 86% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 343.0.
실시예 I.12
중간체 12: (±)-트랜스-8-클로로-3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일보론산
Figure pct00253
1,4-다이옥산(4 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(300 mg, 0.86 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(261 mg, 1.03 mmol), 칼륨 아세테이트(210 mg, 2.14 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(31 mg, 0.04 mmol)의 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 밀봉된 관에서 교반하였다. 혼합물을 농축하여 (±)-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(240 mg, 59% 수율)을 흑색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 316.0.
실시예 I.13
중간체 13: tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트
Figure pct00254
8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(3.6 g, 11.2 mmol), tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[4-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3-피리딜]카밤에이트(10 g, 23 mmol), Pd(dppf)Cl2(0.82 g, 1.1 mmol), 1,4-다이옥산(100 mL) 중 칼륨 카본에이트(3.4 g, 25 mmol) 및 물(10 mL)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 여과하였다. 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 합하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에터 중 40% 에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(3.4 g, 61%).
실시예 I.14
중간체 14: tert-부틸 8-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00255
단계 1: tert-부틸 7-브로모-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00256
테트라하이드로퓨란(2 mL) 중 7-브로모-8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진(1 g, 4.37 mmol)의 용액에 LiHMDS(8.73 mL, 8.73 mmol, 1 mol/L)를 0℃에서 적가하였다. 생성된 용액을 질소 하에 0.5시간 동안 0℃에서 교반하였다. 이어서, 다이-tert-부틸 다이카본에이트(2.85 g, 13.07 mmol)를 첨가하고, 반응 생성물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올(50 mL)로 급랭시켰다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 1/4)로 정제하여 tert-부틸 7-브로모-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(800 mg, 2.43 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 329.2.
단계 2: tert-부틸 8-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00257
1,4-다이옥산(2 mL) 중 tert-부틸 7-브로모-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(6.2 g, 18.83 mmol), 다이피나콜다이보론(23.93 g, 94.22 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(2.76 g, 3.77 mmol) 및 칼륨 아세테이트(5.55 g, 56.62 mmol)의 혼합물을 질소 하에 2.5시간 동안 90℃에서 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를, 에틸 아세테이트/석유 에터(30%)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 8-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(5 g, 13.29 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 376.3.
실시예 I.15
중간체 15: 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산
Figure pct00258
단계 1: 다이페닐(프로필)설포늄 테트라플루오로보레이트
Figure pct00259
다이클로로메탄(20 mL) 중 은 테트라플루오로보레이트(2 g, 10.31 mmol)의 용액에 1-요오도프로판(1.75 g, 10.31 mmol) 및 다이페닐 설파이드(5.76 g, 30.93 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 35℃에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄-에터로 세척하여 다이페닐(프로필)설포늄 테트라플루오로보레이트(2 g, 6.32 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 229.
단계 2: tert-부틸 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트
Figure pct00260
1,2-다이메톡시에탄(30 mL) 및 다이클로로메탄(3 mL) 중 다이페닐(프로필)설포늄 테트라플루오로보레이트(1.50 g, 4.75 mmol)의 용액에 리튬 다이이소프로필아미드(5.54 mL, 11.09 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 이어서, tert-부틸 (Z)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트(330 mg, 1.58 mmol)를 첨가하고, -78 내지 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트(350 mg, 1.40 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 251.
단계 3: 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산
Figure pct00261
다이클로로메탄(3 mL) 중 트랜스-tert-부틸 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트(350 mg, 1.4 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(8 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산(260 mg, 1.34 mmol)을 갈색 오일로서 수득하였다. 생성물 혼합물은 4개의 입체 이성질체로 이루어지고, 이때 피라졸은 카복실산에 대해 트랜스이고, (+/-)-2,2-다이메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산은 오염물이다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 195.
실시예 I.16
중간체 16: 2-브로모-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00262
단계 1: 2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)아세토니트릴
Figure pct00263
N,N-다이메틸포름아미드(20 mL) 중 3,5-다이브로모-1H-피라졸(1.0 g, 4.43 mmol) 및 칼륨 카본에이트(1.22 g, 8.85 mmol)의 혼합물을 25℃에서 10분 동안 교반하였다. 브로모아세토니트릴(796.59 mg, 6.64 mmol)을 첨가하고, 반응 생성물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 에틸 아세테이트(30 mL)로 희석하였다. 반응 생성물을 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/다이클로로메탄올(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)아세토니트릴(950 mg, 3.59 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 264.
단계 2: 2-[3-브로모-5-(2-메틸프로프-1-엔일)피라졸-1-일]아세토니트릴
Figure pct00264
1,4-다이옥산(20 mL) 및 물(2 mL) 중 2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)아세토니트릴(1.0 g, 3.77 mmol), 4,4,5,5-테트라메틸-2-(2-메틸프로프-1-엔-1-일)-1,3,2-다이옥사보롤란(687.29 mg, 3.77 mmol), Pd(dppf)Cl2(552.64 mg, 0.75 mmol) 및 칼륨 카본에이트(1.56 g, 11.32 mmol)의 혼합물을 질소 하에 1시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/3)로 용리하는 실리카 겔 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[3-브로모-5-(2-메틸프로프-1-엔일)피라졸-1-일]아세토니트릴(700 mg, 2.92 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 240.
단계 3: 2-브로모-5,5-다이메틸-6,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00265
메틸설폰산(15 mL) 중 2-[3-브로모-5-(2-메틸프로프-1-엔일)피라졸-1-일]아세토니트릴(700 mg, 2.92 mmol)의 혼합물을 65℃에서 3일 동안 교반하였다. 반응 생성물을 얼음 물로 급랭시켰다. 반응 혼합물을 수성 나트륨 하이드록사이드 용액으로 pH 9 내지 10으로 조정하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 2-브로모-5,5-다이메틸-6,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(300 mg, 1.16 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 258.
단계 4: 2-브로모-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00266
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 2-브로모-5,5-다이메틸-6,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(100 mg, 0.39 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(52.07 mg, 0.46 mmol)의 혼합물을 25℃에서 10분 동안 교반하였다. 요오도메탄(82.52 mg, 0.58 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하고, 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(80 mg, 0.29 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 272.
실시예 I.17
중간체 17: 2-브로모-4-메틸렌-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00267
단계 1: 3,5-다이브로모-1H-피라졸
Figure pct00268
3 L 3-목 환저 플라스크에 다이메틸 테트라하이드로퓨란(1,000 mL) 중 화합물 1(200 g, 656 mmol, 1.0 당량)을 N2 하에 첨가하고, 이어서 용액을 -78℃로 냉각하였다. n-BuLi(2.5 M, 525 mL, 2.0 당량)를 1시간 동안 -78℃에서 상기 용액에 적가하고, 혼합물을 -78℃에서 3시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 3/1, Rf = 0.51)는 반응이 완료되고, 하나의 주요한 신규 스팟이 형성됨을 나타냈다. 2개의 반응 생성물을 합하고, 반응 혼합물을 0℃의 물(1,000 mL)에 붓고, 용액의 pH 값을 2 N HCl에 의해 4 내지 5까지 산성화시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트(1,000 mL, 800 mL, 400 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수(800 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 진공 하에 농축하여 표제 화합물(284 g, 1.26 mol, 95.8% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 조질 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: tert-부틸 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct00269
MeCN(959 mL) 중 3,5-다이브로모-1H-피라졸(137 g, 607 mmol, 1.0 당량)의 용액에 tert-부틸 2-클로로아세테이트(137 g, 910 mmol, 131 mL, 1.5 당량), K2CO3(137 g, 989 mmol, 1.63 당량) 및 TBAI(11.0 g, 29.7 mmol, 0.049 당량)를 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 5/1, Rf = 0.74)는 반응이 완료되고, 하나의 주요한 신규 스팟이 형성됨을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc(500 mL x 3, 300 mL, 200 mL)로 세척하였다. 합한 여액을 농축하여 잔사를 수득하였다. 잔사를 EtOAc(2.0 L)에 용해시키고, 물(1.0 L), 염수(1.0 L)로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 진공 중에 농축하여 표제 화합물(744 g, 조질)을 갈색 오일로서 수득하였다. 1H NMR: (400 MHz, CDCl3): δ 6.35 (s, 1 H), 4.80 (s, 2 H), 1.46 (s, 9 H).
단계 3: 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트산
Figure pct00270
DCM(140 mL) 중 화합물 tert-부틸 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세테이트(248 g, 729 mmol, 1.0 당량)의 용액에 TFA(2.08 kg, 18.2 mol, 1.35 L, 25 당량)를 첨가하고, 생성된 용액을 80℃까지 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 5/1, Rf = 0.03)는 반응이 완료되고, 하나의 주요한 신규 스팟이 형성됨을 나타냈다. 반응을 2회 반복시켰다. 합한 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 석유 에터/에틸 아세테이트(4/1, 1.0 L)로 희석하고, 생성된 현탁액을 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 여과하였다. 필터 케이크를 수집하고, 진공에서 건조하여 표제 화합물(471 g, 1.66 mol, 75.8% 수율)을 크림성 백색 고체로서 수득하였다. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 13.3 (br s, 1 H), 6.70 (s, 1 H), 4.96 (s, 2 H).
단계 4: N-알릴-2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트아미드
Figure pct00271
DMF(1.10 L) 중 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트산(157 g, 553 mmol, 1.0 당량)의 용액에 DIPEA(357 g, 2.77 mol, 482 mL, 5.0 당량) 및 EDCI(138 g, 719 mmol, 1.3 당량)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, HOBT(97.1 g, 719 mmol, 1.3 당량)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 프로프-2-엔-1-아민(47.4 g, 830 mmol, 62.2 mL, 1.5 당량)을 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 25℃까지 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1/1, Rf = 0.60)는 반응이 완료되고, 하나의 주요한 신규 스팟이 형성됨을 나타냈다. 반응을 2회 더 반복하였다. 반응 생성물의 3개의 회분을 합하고, 반응 혼합물을 얼음 물(12.0 L)에 붓고, 에틸 아세테이트(2.00 L, 2.00 L, 1.00 L)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수(2.0 L)로 세척하고, 이어서 진공 중에 농축하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 3/1)로 정제하여 표제 화합물(340 g, 1.05 mol, 63.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 6.41 (s, 1 H), 5.89 (br s, 1 H), 5.79 (m, 1 H), 5.08 - 5.17 (m, 2 H), 4.85 (s, 2 H), 3.86 -3.93 (m, 2 H).
단계 5: N-알릴-2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-(4-메톡시벤질)아세트아미드
Figure pct00272
THF(721 mL) 중 N-알릴-2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트아미드(103 g, 319 mmol, 1.0 당량)의 용액에 KOH(32.2 g, 574 mmol, 1.8 당량), 18-크라운-6 (3.37 g, 12.8 mmol, 0.04 당량) 및 1-(클로로메틸)-4-메톡시-벤젠(64.9 g, 415 mmol, 56.5 mL, 1.3 당량)을 첨가하고, 이어서 혼합물을 25℃에서 64시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 2/1, Rf = 0.50)는 하나의 주요한 신규 스팟이 형성됨을 나타냈다. 반응을 2회 더 반복하였다. 반응 생성물의 3개의 회분을 합하고, 반응 혼합물을 물(1.00 L)에 첨가하고, pH 값을 1 M HCl에 의해 7 내지 8로 조정하고, 이어서 EtOAc(1.00 L, 800 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수(800 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 진공 중에 농축하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 2/1)로 정제하여 표제 화합물(320 g, 722 mmol, 75.5% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 6: 2-브로모-6-(4-메톡시벤질)-4-메틸렌-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00273
DMF(1.0 L) 중 N-알릴-2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-(4-메톡시벤질)아세트아미드(50.0 g, 113 mmol, 1.0 당량)의 용액에 K2CO3(31.2 g, 226 mmol, 2.0 당량), Pd(PPh3)4(17.0 g, 14.7 mmol, 0.13 당량)를 Ar 하에 첨가하고, 이어서 혼합물을 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응을 6회 더 반복하였다. 반응 생성물의 7개의 회분을 합하고, 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 용매를 제거하여 잔사를 수득하였다. 이어서, 잔사를 물(2.0 L)에 첨가하고, 에틸 아세테이트(2.0 L, 1.0 L, 1.0 L)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수(1.0 L)로 세척하고, 농축하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 2/1)로 정제하여 표제 화합물(74.1 g, 204 mmol, 25.9% 수율, 98.7% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 7.21 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 6.86 - 6.92 (m, 2 H), 6.52 (s, 1 H), 5.50 (s, 1 H), 5.20 (s, 2 H), 5.02 (s, 1 H), 4.58 (s, 2 H), 4.13 (s, 2 H), 3.83 (s, 3 H).
단계 7: 2-브로모-4-메틸렌-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00274
DCM(28 mL) 중 2-브로모-6-(4-메톡시벤질)-4-메틸렌-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(3.90 g, 10.8 mmol, 1.0 당량), TFA(38.4 g, 336 mmol, 24.9 mL, 31.3 당량) 및 트라이플루오로메탄설폰산(16.2 g, 108 mmol, 9.5 mL, 10 당량)의 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔사를 수득하였다. 잔사에 물(100 mL)을 첨가하고, 이어서 pH 값을 포화 수성 NaHCO3 용액에 의해 6 내지 7로 조정하고, EtOAc(100 mL x 3, 60 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 진공 중에 농축하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1/1)로 정제하여 표제 화합물(1.90 g, 7.85 mmol, 72.9% 수율)을 회색 고체로서 수득하였다. 1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 6.88 (s, 1 H), 6.54 (s, 1 H), 5.55 (s, 1 H), 5.21 (s, 1 H), 5.08 (s, 2 H), 4.15 (d, J = 6.0 Hz, 2 H).
실시예 I.18
중간체 18: 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00275
단계 1: 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-메틸-N-(프로프-2-엔-1-일)아세트아미드
Figure pct00276
N,N-다이메틸포름아미드(500 mL) 중 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트산(15 g, 52.84 mmol), 메틸(프로프-2-엔-1-일)아민(5.7 g, 80.15 mmol), N,N-다이이소프로필에틸아민(27 g, 208.9 mmol) 및 HATU(30 g, 78.9 mmol)의 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(2/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-메틸-N-(프로프-2-엔-1-일)아세트아미드(16.3 g, 92%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 338.0.
단계 2: 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00277
N,N-다이메틸포름아미드(100 mL) 중 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-메틸-N-(프로프-2-엔-1-일)아세트아미드(5 g, 14.84 mmol), 팔라듐 아세테이트(166 mg, 0.74 mmol), 트라이페닐포스핀(388 mg, 1.48 mmol), TBAB(4.8 g, 14.890 mmol) 및 칼륨 아세테이트(4.2 g, 42.80 mmol)의 혼합물을 80℃에서 10시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(2/1)로 용리된 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(3.2 g, 84%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 258.1.
실시예 I.19
중간체 19: 2-브로모-6-이소프로필-4-메틸렌-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00278
N,N-다이메틸포름아미드(150 mL) 중 N-알릴-2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)-N-이소프로필-아세트아미드(6.3 g, 17.26 mmol), 팔라듐 다이아세테이트(386.5 mg, 1.73 mmol), 트라이페닐포스핀(904.29 mg, 3.45 mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드(5.56 g, 17.26 mmol)의 혼합물에 칼륨 아세테이트(4.87 g, 51.77 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(2/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-이소프로필-4-메틸렌-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(2.34 g, 8.23 mmol, 47.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 284.
실시예 I.20
중간체 20: 2'-브로모-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[사이클로프로판-1,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온
Figure pct00279
다이메틸 설폭사이드(30 mL) 중 트라이메틸설폭소늄 요오다이드(1.29 g, 5.86 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(656 mg, 5.85 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 다이메틸 설폭사이드(3 mL) 중 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(500 mg, 1.95 mmol의 용액을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 12시간 동안 50℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 2'-브로모-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[사이클로프로판-1,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온(120 mg, 23%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 270.
실시예 I.21
중간체 21: 2-브로모-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00280
단계 1: 메틸 2-(3-브로모-5-메틸-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct00281
N,N-다이메틸포름아미드(1 L) 중 3-브로모-5-메틸-1H-피라졸(100 g, 621.12 mmol), 메틸 2-클로로아세테이트(101.11 g, 931.68 mmol) 및 K2CO3(154.29 g, 1,118 mmol)의 용액에 TBAI(11.46 g, 31.06 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 12시간 동안 20℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EA(5,000 mL)로 희석하였다. 용액을 물(300 mL x 3)로 세척하고, 유기 층을 합하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 PE/DCM(60/40)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(3-브로모-5-메틸-피라졸-1-일)아세테이트(120 g, 82.9% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 2: 메틸 2-[3-브로모-5-(브로모메틸)피라졸-1-일]아세테이트
Figure pct00282
탄소 테트라클로라이드(1,500 mL) 중 메틸 2-(3-브로모-5-메틸-피라졸-1-일)아세테이트(50.0 g, 214.54 mmol) 및 AIBN(3.52 g, 21.45 mmol)의 용액을 실온에서 5분 동안 교반하였다. 1-브로모-2,5-피롤리딘다이온(40.09 g, 225.26 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 PE/EA(92/8)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-[3-브로모-5-(브로모메틸)피라졸-1-일]아세테이트(35.5 g, 53% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 3: 메틸 2-(3-브로모-5-(시아노메틸)-1H-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct00283
다이메틸 설폭사이드(550 mL) 중 메틸 2-[3-브로모-5-(브로모메틸)피라졸-1-일]아세테이트(35.4 g, 113.48 mmol) 및 나트륨 시아나이드(8.87 g, 181.02 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 EA(2.5 L)로 희석하였다. 용액을 물(200 mL x 5)로 세척하고, 유기 층을 합하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH(99/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(3-브로모-5-(시아노메틸)-1H-피라졸-1-일)아세테이트(17.6 g, 60% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 4: 메틸 2-(5-(2-아미노에틸)-3-브로모-1H-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct00284
메탄올(600 mL) 중 메틸 2-[3-브로모-5-(시아노메틸)피라졸-1-일]아세테이트(3.0 g, 11.62 mmol)의 용액에 PtO2(600 mg, 2.64 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 10 atm의 수소 기체 하에 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
단계 5: 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00285
메틸 2-[5-(2-아미노에틸)-3-브로모-피라졸-1-일]아세테이트의 용액(600 mL)에 TEA(70 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH(98/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1.12 g, 41.9% 2 단계 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 6: 2-브로모-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00286
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 2-브로모-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀(469.53 mg, 2.17 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(365.74 mg, 3.26 mmol)의 혼합물에 요오도메탄(616.86 mg, 4.35 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-메틸-4,5,7,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀(400 mg, 1.74 mmol, 80% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 244.
실시예 I.22
중간체 22: 2-브로모-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00287
N,N-다이메틸포름아미드(75 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(3.0 g, 13.04 mmol) 및 NaH(1.56 g, 39.12 mmol)의 용액을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 이어서, 2-요오도프로판(11.08 g, 65.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(2.1 g, 7.7166 mmol, 59.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 272.
실시예 I.23
중간체 23: 8-브로모-5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀
Figure pct00288
단계 1: 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-티온
Figure pct00289
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(314 mg, 1.36 mmol) 및 로손(Lawsson) 시약(551.4 mg, 1.36 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-티온(265 mg, 78.9%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 246.0.
단계 2: 2-브로모-N-(2,2-다이에톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-아민
Figure pct00290
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 2-브로모-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-티온(265.0 mg, 1.07 mmol), 2,2-다이에톡시에탄-1-아민(1.42 g, 10.7 mmol) 및 은 카본에이트(590 mg, 2.14 mmol)의 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 물(0.05% TFA)/CH3CN(85/15)으로 용리하는 역상 컬럼으로 정제하여 2-브로모-N-(2,2-다이에톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-아민(295 mg, 80%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 345.0.
단계 3: 8-브로모-5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀
Figure pct00291
아세트산(5 mL) 중 2-브로모-N-(2,2-다이에톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-아민(228 mg, 0.66 mmol) 및 농축 염산(0.17 mL, 0.66 mmol)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 물(0.05% TFA)/ACN(85/15)으로 용리하는 역상 컬럼으로 정제하여 8-브로모-5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀(150 mg, 89.7%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 253.0.
예시적인 화합물
실시예 1:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 1)
Figure pct00292
단계 1: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00293
1,4-다이옥산(15 mL) 및 물(1 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(350 mg, 1.0 mmol), 2-메틸-4-시아노페닐보론산(193 mg, 1.2 mmol), Pd(PPh3)4(115 mg, 0.1 mmol) 및 Na2CO3(212 mg, 2 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산 = 1:3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(380 mg, 86% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 387.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00294
DMF(6 mL) 및 톨루엔(6 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.26 mmol), 벤조페논 이민(94 mg, 0.52 mmol), Pd(OAc)2(12 mg, 0.05 mmol), 잔트포스(Xantphos)(60 mg, 0.1 mmol) 및 Cs2CO3(168 mg, 0.52 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 130℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 염수(3 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산 = 1:3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(130 mg, 74% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 532.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00295
다이클로로메탄(10 mL), 물(1 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(130 mg, 0.19 mmol)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH4OH(37% 수율)로 pH 7 내지 8까지 중화시켰다. 혼합물을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산 = 1:2)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(4-시아노-2-메틸-페닐)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(65 mg, 93% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.842, [M+H]+ = 368.1, 방법 = C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.12 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.54 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.39 (s, 2H), 2.78-2.73 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.16-2.11 (m, 1H), 1.62-1.57 (m, 1H), 1.45-1.44 (m, 1H).
실시예 2:
N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 2)
Figure pct00296
단계 1: N-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00297
1,4-다이옥산(5 mL) 중 N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)사이클로프로판카복스아미드(270 mg, 0.83 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(500 mg, 0.91 mmol), Pd(dppf)Cl2(121 mg, 0.17 mmol) 및 Na2CO3(175 mg, 1.66 mmol)의 혼합물을 글러브 박스에서 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 2:1)로 정제하여 N-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]사이클로프로판카복스아미드(240 mg, 72% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 338.0.
단계 2: N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00298
DMF(3 mL) 및 톨루엔(3 mL) 중 N-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]사이클로프로판카복스아미드(120 mg, 0.36 mmol), 벤조페논 이민(77 mg, 0.43 mmol), Cs2CO3(347 mg, 1.07 mmol), Pd(OAc)2(16 mg, 0.07 mmol) 및 잔트포스(41 mg, 0.07 mmol)의 혼합물을 마이크로파에서 150℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 1,4-다이옥산(4 M, 3 mL, 12 mmol) 중 THF(5 mL) 및 HCl을 첨가하고, 이어서 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(prep-HPLC)로 정제하여 N-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]사이클로프로판-카복스아미드(21 mg, 18.6% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.781, [M+H]+ = 319.2, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.78 (s, 1H), 9.31(s, 1H), 8.44 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.34 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.07-2.04 (m, 1H), 0.83-0.80 (m, 4H).
실시예 3:
(±)-시스-N-[8-아미노-6-[4-(하이드록시메틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 3)
Figure pct00299
단계 1: (±)-시스-N-[8-클로로-6-[4-(하이드록시메틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00300
1,4-다이옥산(16 mL) 및 물(4 mL) 중 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(170 mg, 0.49 mmol), 1-하이드록시-3H-옥사보롤로[3,4-c]피리딘(1 g, 7.41 mmol), PdCl2·dppf(150 mg, 0.21 mmol), K2CO3(200 mg, 1.45 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석하고, 염수(20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:2)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-[4-(하이드록시메틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(140 mg, 77% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 372.0.
단계 2: (±)-시스-N-[6-[4-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-3-피리딜]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00301
다이클로로메탄(15 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-[4-(하이드록시메틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(140 mg, 0.38 mmol), tert-부틸다이메틸클로로실란(500 mg, 3.32 mmol), 트라이에틸아민(600 mg, 5.94 mmol)의 혼합물을 밤새 환류하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 생성된 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/EA = 2:1 → 1:1)로 정제하여 (±)-시스-N-[6-[4-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-3-피리딜]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(110 mg, 59% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 486.2.
단계 3: (±)-tert-부틸 N-[6-[4-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-3-피리딜]-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00302
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-시스-N-[6-[4-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-3-피리딜]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(95 mg, 0.20 mmol), BocNH2(300 mg, 2.56 mmol), Pd2dba3(40 mg, 0.04 mmol), 브렛포스(40 mg, 0.07 mmol), t-BuONa(40 mg, 0.42 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석하고, 포화 NH4Cl(20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1 → 1:2)로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[6-[4-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-3-피리딜]-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(35 mg, 31% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 567.3.
단계 4: (±)-시스-N-[8-아미노-6-[4-(하이드록시메틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00303
메탄올(2 mL) 및 4 N HCl-다이옥산(2 mL, 8 mmol) 중 (±)-tert-부틸 N-[6-[4-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-3-피리딜]-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(35 mg, 0.062 mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔사를 메탄올(1 mL)에 용해시키고, 7 N NH3/메탄올의 첨가에 의해 pH 9 내지 10까지 조정된 pH를 수득하고, 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(C18, NH4HCO3/메탄올/물)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-[4-(하이드록시메틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(11 mg, 50% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.216, [M+H]+ = 353.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.25 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.74 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.99-4.95 (m, 0.5 H), 4.83-4.79 (m, 0.5 H), 4.67 (s, 2H), 2.18-2.13 (m, 1H), 1.88-1.77 (m, 1H), 1.27-1.18 (m, 1H).
실시예 4:
N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 4)
Figure pct00304
단계 1: N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00305
다이클로로메탄(25 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민(0.25 g, 0.78 mmol)의 용액에 피리딘(3 mL) 및 사이클로프로판카보닐 클로라이드(0.3 g, 2.84 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용액을 농축하였다. 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 30% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(35 mg)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 390.9.
단계 2: N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00306
물(2 mL) 및 THF(5 mL) 중 N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(35 mg, 0.09 mmol) 및 4-메틸피리딘-3-보론산(13 mg, 0.1 mmol)의 용액에 Na2CO3(27 mg, 0.25 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(7 mg, 0.01 mmol)를 첨가하였다. 용액을 65℃에서 3시간 동안 교반하였다. 냉각 후, 유기 층을 농축하였다. 이어서, 조 물질을 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 63% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 356.1.
단계 3: N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00307
N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 0.06 mmol), 벤조페논 이민(15 mg, 0.08 mmol), Pd(OAc)2(3 mg, 0.01 mmol), 잔트포스(5 mg, 0.01 mmol), Cs2CO3(51 mg, 0.16 mmol), DMF(3 mL) 및 톨루엔(1 mL)의 혼합물을 마이크로파 반응기에서 145℃에서 1시간 동안 가열하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 물(30 mL x 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 1,4-다이옥산 중 HCl의 용액(0.73 mL, 4 M, 2.93 mmol)에 재-용해시키고, 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용액을 농축하였다. 잔사를 10 mL 석유 에터 및 5 mL 에틸 아세테이트의 혼합물로 세척하였다. 조 물질을 역상 제조용 HPLC로 정제하여 N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(3 mg, 16% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.819, [M+H]+ = 337.0, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.05 (s, 1H), 8.54 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.48 (s, 2H), 8.26 (s, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.45 (bs, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.63-1.60 (m,1H), 1.16-1.14 (m, 2H), 0.94-0.92 (m, 2H).
실시예 5:
N-(8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 5)
Figure pct00308
단계 1: N-(7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00309
다이클로로메탄(25 mL) 중 7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민(3 g, 7.82 mmol)의 용액에 피리딘(3 mL) 및 사이클로프로판카보닐 클로라이드(3 g, 28.7 mmol)를 첨가하였다. 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용액을 농축하였다. 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 5% 메탄올)로 정제하여 N-(7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(1.2 g, 34% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 450.9.
단계 2: N-(7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00310
물(2 mL) 및 THF(5 mL) 중 N-(7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(300 mg, 0.66 mmol) 및 4-메틸피리딘-3-보론산(100 mg, 0.73 mmol)의 혼합물에 Na2CO3(200 mg, 1.89 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(50 mg, 0.06 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 교반하였다. 냉각 후, 유기 층을 농축하였다. 이어서, 조질 물질을 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-(7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(110 mg, 40% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 416.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.21 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.55-8.53 (m, 2H), 8.37 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 2.10-2.07 (m, 4H), 0.86-0.85 (m, 4H).
단계 3: N-(8-클로로-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00311
1-메틸-2-피롤리딘온(3 mL) 중 N-(7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(300 mg, 0.72 mmol) 및 CuCN(300 mg, 3.33 mmol)의 혼합물을 마이크로파 반응기에서 200℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL)로 희석하여 갈색 침전물을 수득하였다. 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 잔사를 암모늄 하이드록사이드(5 mL)로 희석하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(30 mL x 2)으로 추출하고, 물(20 mL x 2)로 세척하였다. 유기 층을 농축하고, 제조용 HPLC로 정제하여 N-(8-클로로-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(120 mg, 46% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 363.1. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.48 (s, 1H), 8.62-8. 61 (m, 2H), 8.47 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.31 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.68-1.62 (m, 1H), 1.19-1.15 (m, 2H), 1.01-0.98 (m, 2H).
단계 4: N-(8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00312
N-(8-클로로-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 0.06 mmol), 벤조페논이민(15 mg, 0.08 mmol), Pd(OAc)2(3 mg, 0.01 mmol), 잔트포스(5 mg, 0.01 mmol), Cs2CO3(50 mg, 0.15 mmol), DMF(3 mL) 및 톨루엔(1 mL)의 혼합물을 글러브 박스 내의 반응 관에 첨가하였다. 이어서, 반응 생성물을 밀봉하고, 마이크로파 반응기에서 145℃에서 1시간 동안 가열하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 물(30 mL x 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 1,4-다이옥산 중 HCl의 용액(0.72 mL, 4 M, 2.87 mmol)에 재-용해시켰다. 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용액을 농축하고, 10 mL 석유 에터 및 5 mL 에틸 아세테이트의 혼합물로 세척하였다. 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 N-(8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(4 mg, 21% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.688, [M+H]+ = 344.1, 방법 = F; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.04 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H),8.46 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.27 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.43 (bs, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.60-1.57 (m, 1H), 1.17-1.15 (m, 2H), 0.97- 0.96 (m, 2H).
실시예 6:
N-(8-아미노-7-시아노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 6)
Figure pct00313
단계 1: N-(7-브로모-8-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00314
물(3 mL) 및 THF(10 mL) 중 N-(7-브로모-8-클로로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(250 mg, 0.55 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(126 mg, 0.61 mmol)의 용액에 Na2CO3(166 mg, 1.57 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(41 mg, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 반응 용액을 N2 하에 85℃에서 12시간 동안 교반한 후, 농축 건조하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(10 mL)에 용해시키고, 물 및 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 농축하였다. 조 물질을 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-(7-브로모-8-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 67% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 405.0.
단계 2: N-(8-클로로-7-시아노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00315
1-메틸-2-피롤리딘온(3 mL) 중 N-(7-브로모-8-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.37 mmol) 및 CuCN(154 mg, 1.71 mmol)의 혼합물을 마이크로파 반응기에서 200℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 암모늄 하이드록사이드(5 mL)로 희석하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(30 mL x 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(20 mL x 2)로 세척하고, 건조하고, 농축하였다. 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 N-(8-클로로-7-시아노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 38% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 352.1.
단계 3: N-(8-아미노-7-시아노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00316
N-(8-클로로-7-시아노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 0.14 mmol), 벤조페논(39 mg, 0.21 mmol), Pd(OAc)2(8 mg, 0.03 mmol), 잔트포스(13 mg, 0.02 mmol), Cs2CO3(129 mg, 0.4 mmol), DMF(3 mL) 및 톨루엔(1 mL)의 혼합물을 글러브 박스 내의 밀봉된 관에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 145℃에서 마이크로파 반응기에서 1시간 동안 가열하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(30 mL x 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 1,4-다이옥산 중 HCl의 용액(1.85 mL, 4 M, 7.41 mmol)에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 13시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축하고, 10 mL 석유 에터 및 5 mL 에틸 아세테이트의 혼합물로 세척하였다. 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 N-(8-아미노-7-시아노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(5 mg, 11% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.724, [M+H]+ = 333.1, 방법 = H; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.27 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 1.33- 1.32 (m,1H), 1.04-1.03 (m, 2H), 0.95- 0.92 (m, 2H).
실시예 7:
(±)-[8-아미노-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(화합물 13)
Figure pct00317
단계 1: 5-브로모-2-클로로-4-메틸-피리미딘
Figure pct00318
tert-부틸 니트라이트(16 g, 155 mmol)를 다이클로로메탄(200 mL) 중 5-브로모-4-메틸-2-피리미딘일아민(5 g, 26.59 mmol) 및 벤질트라이에틸암모늄클로라이드(27 g, 118.54 mmol)의 혼합물에 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3으로 중화시키고, 다이클로로메탄(300 mL x 3)으로 추출하였다. 모든 다이클로로메탄 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 10:1)로 정제하여 5-브로모-2-클로로-4-메틸-피리미딘(2.5 g, 45% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 208.9.
단계 2: 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카보니트릴
Figure pct00319
다이메틸 설폭사이드(40 mL) 및 물(40 mL) 중 5-브로모-2-클로로-4-메틸피리미딘(2.5 g, 12.08 mmol), 나트륨 시아나이드(600 mg, 12.24 mmol) 및 DABCO(500 mg, 4.46 mmol)의 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(80 mL x 3)로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 합하고, 염수(50 mL x 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 10:1)로 정제하여 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카보니트릴(1.75 g, 73% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 199.9.
단계 3: 메틸 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실레이트
Figure pct00320
농축 HCl(20 mL) 및 메탄올(20 mL) 중 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카보니트릴(1.35 g, 6.82 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 환류하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔사를 물(20 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3의 첨가에 의해 pH 7로 조정하고, 에틸 아세테이트(30 mL x 3)로 추출하였다. 모든 에틸 아세테이트 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1)로 정제하여 메틸 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실레이트(940 mg, 60% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 233.0.
단계 4: 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실산
Figure pct00321
THF(5 mL) 및 물(5 mL) 중 메틸 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실레이트(300 mg, 1.3 mmol) 및 LiOH 일수화물(160 mg, 3.81 mmol)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 THF를 제거하였다. 잔사 수성 층을 물(20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(20 mL x 2)로 세척하였다. 수성 층을 농축 HCl의 첨가에 의해 pH 4 내지 5로 산성화시켰다. 나트륨 클로라이드를 포화될 때까지 첨가하고, 이어서 생성물을 에틸 아세테이트(40 mL x 5)로 추출하였다. 합한 추출물을 합하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실산(230 mg, 81% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 219.0.
단계 5: 5-브로모-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드
Figure pct00322
옥살릴 클로라이드(200 mg, 1.57 mmol)를 DMF(0.1 mL) 및 다이클로로메탄(5 mL) 중 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실산(230 mg, 1.06 mmol)의 혼합물에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄(2 mL)에 재-용해시키고, 다이클로로메탄(5 mL) 중 CH3NH2(THF 중 2 M, 2 mL, 4 mmol) 및 피리딘(0.51 mL, 6.33 mmol)의 용액에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄/에틸 아세테이트 = 1:4)로 정제하여 5-브로모-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(240 mg, 98% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 230.0.
단계 6: [4-메틸-2-(메틸카바모일)피리미딘-5-일]보론산
Figure pct00323
1,4-다이옥산(8 mL) 중 비스(피나콜라토)다이보론(200 mg, 0.79 mmol), 5-브로모-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(100 mg, 0.43 mmol), PdCl2·dppf(20 mg, 0.03 mmol), 칼륨 아세테이트(120 mg, 1.22 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 80℃에서 밤새 교반하였다. [4-메틸-2-(메틸카바모일)피리미딘-5-일]보론산의 반응 혼합물을 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 196.1.
단계 7: (±)-5-[8-클로로-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드
Figure pct00324
(±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.29 mmol), [4-메틸-2-(메틸카바모일)피리미딘-5-일]보론산(반응 혼합물, 약 8 mL, 약 0.43 mmol), PdCl2·dppf(20 mg, 0.03 mmol), K2CO3(120 mg, 0.87 mmol) 및 물(2 mL)의 혼합물을 Ar 하에 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석하고, 염수(30 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:2)로 정제하여 (±)-5-[8-클로로-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(20 mg, 17% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 414.0.
단계 8: (±)-5-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드
Figure pct00325
DMF(1 mL) 및 톨루엔(1 mL) 중 (±)-5-[8-클로로-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(20 mg, 0.048 mmol), 벤조페논 이민(80 mg, 0.44 mmol), Pd2dba3(10 mg, 0.01 mmol), 잔트포스(10 mg, 0.02 mmol), Cs2CO3(40 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 130℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(80 mL)로 희석하고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:2 → 다이클로로메탄/에틸 아세테이트 = 1:3)로 정제하여 (±)-5-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(12 mg, 44% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 559.2.
단계 9: (±)-5-[8-아미노-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드
Figure pct00326
물(0.1 mL), 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.5 mL) 및 다이클로로메탄(3 mL) 중 (±)-5-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(12 mg, 0.021 mmol)의 혼합물을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시켰다. 잔사를 메탄올(1 mL)에 용해시키고, 메탄올 중 7 N NH3으로 pH 9 내지 10까지 중화시키고, 플래시 크로마토그래피(C18, 메탄올/물 → 포름산/메탄올/물)로 정제하여 (±)-5-[8-아미노-3-[(시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-피리미딘-2-카복스아미드의 포름산 염(3.4 mg, 37% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.493, [M+H]+ = 395.1, 방법 = E; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.27 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.52 (brs, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.99-4.79 (m, 1H), 3.04 (s, 3H), 2.65 (s, 3H), 2.18-2.13 (m, 1H), 1.88-1.78 (m, 1H), 1.27-1.19 (m, 1H).
실시예 8:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(6-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 14)
Figure pct00327
단계 1: (±)-tert-부틸 5-(8-클로로-3-(시스-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-6-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-1-카복실레이트
Figure pct00328
1,4-다이옥산(6 mL) 및 물(1 mL) 중 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 0.23 mmol), tert-부틸 6-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤즈이미다졸-1-카복실레이트(83 mg, 0.23 mmol), Pd(dppf)Cl2(17 mg, 0.02 mmol) 및 K2CO3(96 mg, 0.70 mmol)의 혼합물을 90℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(정상 상 실리카 겔, uv 254 nm, 다이클로로메탄/메탄올 = 30/1)로 정제하여 (±)-tert-부틸 5-[8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-6-메틸-벤즈이미다졸-1-카복실레이트(70 mg, 60% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(6-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00329
밀봉된 관에 (±)-tert-부틸 5-[8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-6-메틸-벤즈이미다졸-1-카복실레이트(60 mg, 0.12 mmol), tert-부틸 카밤에이트(142 mg, 1.21 mmol), Pd2(dba)3(23 mg, 0.03 mmol), NaOtBu(34 mg, 0.36 mmol), tBu브렛포스(13 mg, 0.03 mmol) 및 1-메틸-2-피롤리딘온(4 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(6-메틸-1H-벤즈이미다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(5 mg, 11% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.335, [M+H]+ = 376.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.23 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.59-7.47 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.99-4.78 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.20-2.12 (m, 1H), 1.87-1.76 (m, 1H), 1.27-1.17 (m, 1H).
실시예 9:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 15)
Figure pct00330
단계 1: 8-클로로-6-(사이클로프로필에틴일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00331
DMF(2 mL) 중 에틴일사이클로프로판(500 mg, 7.56 mmol), CuI(50 mg, 0.26 mmol), 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(200 mg, 0.78 mmol), Et3N(785 mg, 7.77 mmol) 및 Pd(PPh3)2Cl2(62 mg, 0.08 mmol)의 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 수성 NH4Cl(20 mL x 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(정상 상 실리카 겔, 다이클로로메탄/메탄올 = 25/1)로 정제하여 8-클로로-6-(2-사이클로프로필에틴일)이소퀴놀린-3-아민(170 mg, 81% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
단계 2: 8-클로로-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00332
p-자일렌(3 mL) 중 1,2,4,5-테트라진(80 mg, 0.97 mmol) 및 8-클로로-6-(2-사이클로프로필에틴일)이소퀴놀린-3-아민(60 mg, 0.25 mmol)의 용액을 140℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(정상 상 실리카 겔, 다이클로로메탄/메탄올 = 30/1)로 정제하여 8-클로로-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)이소퀴놀린-3-아민(40 mg, 55% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00333
다이클로로메탄(10 mL) 및 피리딘(0.08 mL, 1.01 mmol) 중 (±)-8-클로로-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)이소퀴놀린-3-아민(100 mg, 0.34 mmol)의 용액에 다이클로로메탄(2 mL) 중 시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐 클로라이드(0.13 g, 1.08 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반한 후, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(정상 상, 실리카 겔, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 77% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 4: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00334
밀봉된 관에 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 0.21 mmol), tert-부틸 카밤에이트(244 mg, 2.09 mmol), Pd2(dba)3(19 mg, 0.02 mmol), NaOtBu(59 mg, 0.62 mmol), tBu브렛포스(10 mg, 0.02 mmol) 및 1-메틸-2-피롤리딘온(3 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-사이클로프로필피리다진-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(8 mg, 10% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.566, [M+H]+ = 364.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.28 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.99-4.78 (m, 1H), 2.21-2.08 (m, 2 H), 1.88-1.76 (m, 1H), 1.27-1.17 (m, 3H), 1.12-1.06 (m, 2H).
실시예 10:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(7-메틸-3H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 16)
Figure pct00335
단계 1: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(7-메틸-3H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00336
1,4-다이옥산(6 mL) 및 물(1 mL) 중 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(300 mg, 0.87 mmol), 7-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3H-이미다조[4,5-b]피리딘(280 mg, 1.08 mmol), Pd(dppf)Cl2(60 mg, 0.08 mmol), K2CO3(350 mg, 2.54 mmol)의 혼합물을 대기 하에 110℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조질 생성물을 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 = 1:1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(7-메틸-1H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(280 mg, 64% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 396.1.
단계 2: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(7-메틸-3-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-3H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00337
다이클로로메탄(15 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(7-메틸-3H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(280 mg, 0.71 mmol), 3,4-다이하이드로-2H-피란(1.0 mL, 10.96 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(0.1 mL, 1.34 mmol)의 용액을 환류 하에 밤새 가열하였다. 이어서, 반응 생성물을 5 mL의 포화 NaHCO3 용액으로 희석하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 이어서, 조 물질을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 = 1:10)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(7-메틸-3-테트라하이드로피란-2-일-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(160 mg, 46% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 480.2.
단계 3: (±)-tert-부틸 3-(시스-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)-6-(7-메틸-3-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-3H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00338
무수 DMF(2.0 mL) 및 무수 톨루엔(2.0 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(7-메틸-3-테트라하이드로피란-2-일-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 0.10 mmol), tert-부틸 카밤에이트(120 mg, 1.02 mmol), 잔트포스(25 mg, 0.04 mmol), Pd2(dba)3(20 mg, 0.02 mmol), 나트륨 tert-부톡사이드(50 mg, 0.52 mmol)의 혼합물을 115℃에서 밤새 교반하였다. 반응 생성물을 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(15 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 20 mL의 포화 염수 용액으로 세척하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 조 물질을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 1/5 → 1/1)로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(7-메틸-3-테트라하이드로피란-2-일-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 60% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 477.1.
단계 4: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(7-메틸-3H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00339
메탄올(1 mL) 및 HCl(다이옥산 중 4 M, 1.0 mL, 4 mmol) 중 (±)-tert-부틸 N-[3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(7-메틸-3-테트라하이드로피란-2-일-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.06 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(7-메틸-3H-이미다조[4,5-b]피리딘-6-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(9 mg, 38% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 377.2, Rt(분) = 1.42, 방법 = E; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.25 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.33 (s, 2H),7.06 (s, 1H), 6.76 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.99-4.79 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.18-2.13 (m,1H), 1.88-1.77 (m, 1H), 1.27-1.18 (m, 1H).
실시예 11:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 17)
Figure pct00340
단계 1: 5-이소프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00341
1,4-다이옥산(20 mL) 중 4-브로모-3-이소프로필-1H-피라졸(380 mg, 2.01 mmol), Pd(dppf)Cl2(140 mg, 0.19 mmol), 칼륨 아세테이트(800 mg, 8.16 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(4750 mg, 18.71 mmol)의 혼합물을 불활성 대기 하에 110℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 = 1:1)로 정제하여 5-이소프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(400 mg, 28% 수율)을 적색 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 237.2.
단계 2: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00342
밀봉된 관에 1,4-다이옥산(6 mL) 및 물(1 mL) 중 5-이소프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(400 mg, 0.56 mmol), Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.05 mmol), K2CO3(200 mg, 1.45 mmol) 및 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.44 mmol)의 반응 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 130℃에서 마이크로파에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 조질 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 50% 수율)를 황색 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 373.1.
단계 3: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(5-이소프로필-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00343
다이클로로메탄(15 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.22 mmol), 3,4-다이하이드로-2H-피란(1.0 mL, 10.96 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(0.1 mL, 1.34 mmol)의 용액을 밤새 환류하였다. 이어서, 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 10/1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 70% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 457.2.
단계 4: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-이소프로필-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00344
무수 DMF(1 mL) 및 무수 톨루엔(1 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 0.15 mmol), tert-부틸 카밤에이트(100 mg, 0.85 mmol), 잔트포스(35 mg, 0.06 mmol), Pd2(dba)3(25 mg, 0.03 mmol) 및 Cs2CO3(200 mg, 0.62 mmol)의 혼합물을 130℃에서 불활성 대기 하에 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 농축하고, 역상 크로마토그래피(메탄올 40-60%/물 중 0.05% 암모니아)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(25 mg, 37% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 438.2.
단계 5: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00345
1,4-다이옥산 중 HCl(4 M, 1.0 mL, 4.0 mmol) 중 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(25 mg, 0.06 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 역상 크로마토그래피(메탄올 60%/물 중 0.05% 암모니아)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(9 mg, 43% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.57, [M+H]+ = 354.1, 방법 = E; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.17(s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.69 (s, 1H),7.07 (s, 1H), 6.83 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 4.99-4.92 (m, 0.5 H), 4.83-4.79 (m, 0.5 H), 3.45-3.44 (m, 1H),2.17-2.13 (m, 1H), 1.87-1.79 (m, 1H), 1.37-1.35 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 1.27-1.18 (m, 1H).
실시예 12:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(1-에틸-5-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 18)
Figure pct00346
단계 1: 4-요오도-5-메틸피리딘-2-올
Figure pct00347
아세토니트릴(10 mL) 중 4-요오도-2-메톡시-5-메틸-피리딘(700 mg, 2.81 mmol), 요오다이드 트라이메틸실란(752 mg, 3.76 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 가열 환류하였다. 이어서, 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조질 생성물을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 4-요오도-5-메틸-피리딘-2-올(500 mg, 71% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 235.9.
단계 2: 1-에틸-4-요오도-5-메틸피리딘-2(1H)-온
Figure pct00348
DMF(5 mL) 중 4-요오도-5-메틸-피리딘-2-올(480 mg, 2.04 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(광유 중 60%, 200 mg, 5 mmol)의 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, 요오도에탄(0.5 mL, 6.25 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피(메탄올 60%/물 중 0.1% 암모니아)로 정제하여 1-에틸-4-요오도-5-메틸-피리딘-2-온(250 mg, 47% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 264.0.
단계 3: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(1-에틸-5-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00349
1,4-다이옥산(6 mL) 및 물(1 mL) 중 1-에틸-4-요오도-5-메틸-피리딘-2-온(120 mg, 0.46 mmol), Pd(dppf)Cl2(30 mg, 0.04 mmol), 칼륨 포스페이트(400 mg, 1.89 mmol) 및 (±)-[8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(140 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(1-에틸-5-메틸-2-옥소-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 37% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 400.1.
단계 4: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(1-에틸-5-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00350
무수 DMF(2 mL) 및 무수 톨루엔(2 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(1-에틸-5-메틸-2-옥소-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 0.13 mmol), tert-부틸 카밤에이트(155 mg, 1.32 mmol), 잔트포스(30 mg, 0.05 mmol), Pd2(dba)3(25 mg, 0.03 mmol) 및 Cs2CO3(200 mg, 0.62 mmol)의 혼합물을 불활성 대기 하에 112℃에서 밤새 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 농축하고, 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(1-에틸-5-메틸-2-옥소-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(8.1 mg, 17% 수율)를 포름에이트 염(황색 고체)으로서 수득하였다. LCMS(ESI): RT (분) = 1.44, [M+H]+ = 381.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.24 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.63 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.97-4.80 (m, 1H), 4.108 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.17-2.14(m, 1H), 2.05 (s, 3H), 1.86-1.79 (m, 1H), 1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.25-1.20 (m, 1H).
실시예 13:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 19)
Figure pct00351
단계 1: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(2-메톡시-5-메틸피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00352
1,4-다이옥산(6 mL) 및 물(1 mL) 중 4-요오도-2-메톡시-5-메틸-피리딘(255 mg, 1.02 mmol), Pd(dppf)Cl2(40 mg, 0.05 mmol), K3PO4(350 mg, 1.65 mmol), [8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(220 mg, 0.71 mmol)의 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 5/1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 386.1.
단계 2: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(2-메톡시-5-메틸피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00353
무수 DMF(2 mL) 및 무수 톨루엔(2 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.26 mmol), tert-부틸 카밤에이트(200 mg, 1.71 mmol), 잔트포스(60 mg, 0.10 mmol), Pd2(dba)3(50 mg, 0.05 mmol), Cs2CO3(420 mg, 1.29 mmol)의 혼합물을 115℃에서 Ar 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 에틸 아세테이트/석유 에터(1:1)로 용리하는 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 조질 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(25 mg)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 367.2.
단계 3: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00354
아세토니트릴(10 mL) 중 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(35 mg, 0.05 mmol) 및 요오도트라이메틸실란(30 mg, 0.15 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 가열 환류하였다. 이어서, 0.5 mL의 포화 Na2S2O3 용액을 첨가하고, 반응 생성물을 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(메탄올 40-50%/물 중 0.05% 암모니아)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-1H-피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(9 mg, 53% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI): RT (분) = 1.45, [M+H]+ = 353.1, 방법 = B; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.53-11.49 (m, 1H), 10.81 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.34 (s, 2H), 6.19 (s, 1H), 5.0 -4.83 (m, 1H), 2.28-2.22 (m, 1H), 1.91 (s, 3H), 1.71-1.63 (m, 1H), 1.21-1.14 (m, 1H).
실시예 14:
1-(8-아미노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-3-이소프로필우레아(화합물 20)
Figure pct00355
단계 1: 8-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00356
밀봉된 관에 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(300 mg, 1.17 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(364 mg, 1.75 mmol), Pd(dppf)Cl2(105 mg, 0.14 mmol), Na2CO3(375 mg, 3.54 mmol), 1,4-다이옥산(15 mL) 및 물(1.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 100℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고, 이어서 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔 컬럼, 석유 에터/에틸 아세테이트 1:1 → 0:100, uv 254 nm)로 정제하여 8-클로로-6-(1-메틸피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민(290 mg, 94% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 259.1.
단계 2: 1-(8-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-3-이소프로필우레아
Figure pct00357
압력 관에 8-클로로-6-(1-메틸피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민(280 mg, 1.08 mmol), 이소프로필 이소시아네이트(1 mL, 10.18 mmol) 및 DBU(494 mg, 3.25 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(20 g 실리카 겔 컬럼, 석유 에터/에틸 아세테이트 1:1 → 0:100으로 용리함)로 정제하여 1-[8-클로로-6-(1-메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아(200 mg, 52% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 344.1.
단계 3: 1-(8-아미노-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-3-이소프로필우레아
Figure pct00358
밀봉된 관에 1-[8-클로로-6-(1-메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아(180 mg, 0.52 mmol), tert-부틸 카밤에이트(500 mg, 4.27 mmol), Pd2(dba)3(100 mg, 0.11 mmol), NaOtBu(150 mg, 1.56 mmol), tBu브렛포스(60 mg, 0.12 mmol) 및 1-메틸-2-피롤리딘온(15 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(10 mmol/L NH4HCO3 수성/아세토니트릴 100:0 → 1:5)로 정제하여 1-[8-아미노-6-(1-메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아(31 mg, 18% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.167, [M+H]+ = 325.2, 방법 = B; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ : 8.94 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.76 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.92 -3.85 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 1.15 (d, J = 6.4 Hz, 6H).
실시예 15:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 21)
Figure pct00359
단계 1: 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘
Figure pct00360
1,4-다이옥산(18 mL) 중 4-브로모-1H-피롤로[2,3-b]피리딘(500 mg, 2.54 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(1,289 mg, 5.08 mmol), Pd(dppf)Cl2(186 mg, 0.25 mmol) 및 칼륨 아세테이트(497 mg, 5.08 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산 = 1:1)로 정제하여 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘(480 mg, 78% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 245.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00361
1,4-다이옥산(2 mL) 및 물(0.1 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(180 mg, 0.51 mmol), 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘(150 mg, 0.62 mmol), Pd(PPh3)4(59 mg, 0.05 mmol) 및 Na2CO3(109 mg, 1.03 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산 = 2:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(210 mg, 65% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 388.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00362
DMF(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.16 mmol)의 용액에 NaH(13 mg, 0.32 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 메틸 4-메틸벤젠설포네이트(30 mg, 0.16 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 조질 혼합물을 제조용 역상 HPLC(C-18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(110 mg, 53% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 402.1.
단계 4: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00363
DMF(3 mL) 및 톨루엔(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(110 mg, 0.09 mmol), Pd2(dba)3(16 mg, 0.02 mmol), 잔트포스(20 mg, 0.04 mmol), Cs2CO3(57 mg, 0.18 mmol) 및 벤조페논 이민(48 mg, 0.26 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 130℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(80 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 염수(3 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산, 1:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(31 mg, 59% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 547.3.
단계 5: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00364
다이클로로메탄(10 mL) 및 물(2 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(31 mg, 0.06 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH4OH에 의해 pH 7 내지 8로 중화시켰다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC(C18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1-메틸피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(16 mg, 69% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.479, [M+H]+ = 383.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.13 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.36 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.62 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.27 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.44 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.80-2.75 (m, 1H), 2.18-2.13 (m, 1H), 1.63-1.58 (m, 1H), 1.47-1.42 (m, 1H).
실시예 16:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 22)
Figure pct00365
단계 1: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[1-(p-톨릴설폰일)피롤로[2,3-b]피리딘-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00366
DMF(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(170 mg, 0.27 mmol)의 용액에 NaH(22 mg, 0.54 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 토실 클로라이드(104 mg, 0.54 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 제조용 HPLC(C-18; 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[1-(p-톨릴설폰일)피롤로[2,3-b]피리딘-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(169 mg, 79% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 542.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[1-(p-톨릴설폰일)피롤로[2,3-b]피리딘-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00367
DMF(6 mL) 및 톨루엔(6 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[1-(p-톨릴설폰일)피롤로[2,3-b]피리딘-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(170 mg, 0.22 mmol), Pd2(dba)3(40 mg, 0.04 mmol), 잔트포스(50 mg, 0.09 mmol), Cs2CO3(140 mg, 0.43 mmol) 및 벤조페논 이민(118 mg, 0.65 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 130℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(180 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 염수(3 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산 = 1:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[1-(p-톨릴설폰일)피롤로[2,3-b]피리딘-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 67% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 687.2.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00368
THF(15 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[1-(p-톨릴설폰일)피롤로[2,3-b]피리딘-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.15 mmol) 및 TBAF(152 mg, 0.58 mmol)의 혼합물을 50℃에서 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC(C18; 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(68 mg, 88% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 533.2.
단계 4: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00369
아세토니트릴(10 mL), 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL) 및 물(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(68 mg, 0.13 mmol)의 혼합물을 25℃에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH4OH로 pH 7 내지 8까지 중화시켰다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC(C18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1H-피롤로[2,3-b]피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(35 mg, 74% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.392, [M+H]+ = 369.1, 방법 = A. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.80 (s, 1H), 11.11(s, 1H), 9.36 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.30 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 2.8 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.23 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.67 (q, J = 1.7 Hz, 1H), 6.42 (s, 2H), 2.79-2.75 (m, 1H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.62-1.57 (m, 1H), 1.47-1.42 (m, 1H).
실시예 17:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-에틸-1-메틸-6-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 23)
Figure pct00370
단계 1: 6-브로모-1-메틸-피리딘-2-온
Figure pct00371
아세토니트릴(100 mL) 중 6-브로모-1H-피리딘-2-온(5.0 g, 28.74 mmol) 및 K2CO3(7.93 g, 57.47 mmol)의 혼합물에 요오도메탄(8.16 g, 57.47 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하였다. 여액을 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 6-브로모-1-메틸-피리딘-2-온(4.5 g, 83% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 189.9.
단계 2: 6-브로모-5-요오도-1-메틸-피리딘-2-온
Figure pct00372
DMF(15 mL) 중 6-브로모-1-메틸-피리딘-2-온(3.7 g, 19.68 mmol) 및 NIS (4.43 g, 25.58 mmol)의 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 혼합물을 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 2/1)로 정제하여 6-브로모-5-요오도-1-메틸-피리딘-2-온(1.1 g, 18% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 313.9; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.68(d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.27(d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.77(s, 3H).
단계 3: 6-브로모-1-메틸-5-비닐-피리딘-2-온
Figure pct00373
1,4-다이옥산(50 mL) 및 물(2 mL) 중 6-브로모-5-요오도-1-메틸-피리딘-2-온(1,000 mg, 3.19 mmol), 4,4,5,5-테트라메틸-2-비닐-1,3,2-다이옥사보롤란(1,471 mg, 9.56 mmol), Pd(PPh3)4(367 mg, 0.32 mmol) 및 K2CO3(879 mg, 6.37 mmol)의 혼합물을 N2 하에 60℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4/1)로 정제하여 6-브로모-1-메틸-5-비닐-피리딘-2-온(600 mg, 68% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 216.0.
단계 4: 6-브로모-5-에틸-1-메틸-피리딘-2-온
Figure pct00374
25 mL 플라스크에 6-브로모-1-메틸-5-비닐-피리딘-2-온(500 mg, 2.34 mmol), Pt/C(80 mg, 2.34 mmol) 및 에틸 아세테이트(15 mL)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 H2 대기 하에 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 농축하였다. 조질 생성물을 석유 에터/에틸 아세테이트(2:1)로 용리하는 제조용 TLC로 정제하여 6-브로모-5-에틸-1-메틸-피리딘-2-온(470 mg, 89% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 218.0.
단계 5: 6-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-5-에틸-1-메틸-피리딘-2-온
Figure pct00375
밀봉된 관에 (3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)보론산(494 mg, 2.22 mmol), 6-브로모-5-에틸-1-메틸-피리딘-2-온(400 mg, 1.85 mmol), Pd(dppf)Cl2(151 mg, 0.21 mmol), K3PO4(355 mg, 1.68 mmol), 나트륨 아세테이트(414 mg, 5.05 mmol), 아세토니트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트, 1/4)로 정제하여 6-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-5-에틸-1-메틸-피리딘-2-온(210 mg, 26% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 314.1.
단계 6: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(3-에틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00376
다이클로로메탄(15 mL) 중 6-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-5-에틸-1-메틸-피리딘-2-온(180 mg, 0.57 mmol) 및 피리딘(0.14 mL, 1.72 mmol)의 용액에 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(111 mg, 0.86 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(3-에틸-1-메틸-6-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(120 mg, 45% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 407.1.
단계 7: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-에틸-1-메틸-6-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00377
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(345 mg, 2.95 mmol), Pd2(dba)3(54 mg, 0.06 mmol), Cs2CO3(288 mg, 0.88 mmol), 잔트포스(57 mg, 0.12 mmol), (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(3-에틸-1-메틸-6-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(120 mg, 0.29 mmol), DMF(3 mL) 및 톨루엔(3 mL)을 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)에 용해시키고, 염수로 세척하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-에틸-1-메틸-6-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(25.5 mg, 22% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.528, [M+H]+ = 388.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.30 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.58 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.64 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.67-2.62 (m, 1H), 2.22-2.10 (m, 3H), 1.62-1.53 (m, 2H), 1.3 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 18:
(±)-시스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 24)
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 25)
Figure pct00378
단계 1: 3-브로모-1,4-다이메틸-피리딘-2-온
Figure pct00379
아세토니트릴(100 mL) 중 3-브로모-4-메틸-1H-피리딘-2-온(600 mg, 3.19 mmol) 및 K2CO3(880 mg, 6.38 mmol)의 혼합물에 요오도메탄(905 mg, 6.38 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3-브로모-1,4-다이메틸-피리딘-2-온(570 mg, 88% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 202.0.
단계 2: 3-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-1,4-다이메틸피리딘-2(1H)-온
Figure pct00380
밀봉된 관에 3-브로모-1,4-다이메틸-피리딘-2-온(350 mg, 1.73 mmol), (3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)보론산(462 mg, 2.08 mmol), Pd(dppf)Cl2(141 mg, 0.19 mmol), K3PO4(332 mg, 1.57 mmol), 나트륨 아세테이트(387 mg, 4.72 mmol), 아세토니트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 3-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-1,4-다이메틸-피리딘-2-온(240 mg, 43% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 300.1.
단계 3: (±)-시스-N-[8-클로로-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00381
다이클로로메탄(10 mL) 중 (±)-시스-2-플루오로-사이클로프로판카복실산(83 mg, 0.80 mmol), 3-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-1,4-다이메틸-피리딘-2-온(200 mg, 0.67 mmol) 및 피리딘(0.54 mL, 6.67 mmol)의 냉각된(0℃) 혼합물에 POCl3(102 mg, 0.67 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1/2)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(239 mg, 92% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 386.1.
단계 4: (±)-시스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드 및 트랜스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00382
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(668 mg, 5.7 mmol), Pd2(dba)3(104 mg, 0.11 mmol), Cs2CO3(557 mg, 1.71 mmol), 잔트포스(110 mg, 0.23 mmol), (±)-시스-N-[8-클로로-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(220 mg, 0.57 mmol), DMF(3 mL) 및 톨루엔(3 mL)을 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)에 용해시키고, 염수로 세척하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축 건조하였다. 이어서, 조질 생성물을 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(29.6 mg, 14% 수율)를 황색 고체로서 수득하고, 트랜스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(13 mg, 6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
(±)-시스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드: LCMS (ESI): RT (분) = 1.543, [M+H]+ = 367.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.21 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.58 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.40 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.98-4.78 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.17-2.13 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.87-1.76 (m, 1H), 1.26-1.17 (m, 1H). (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1,4-다이메틸-2-옥소-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드: LCMS (ESI): RT (분) = 1.524, [M+H]+ = 367.1, 방법 = B; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.21 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.58 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.40 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.97-4.78 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.49-2.39 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.55-1.47 (m, 1H), 1.41-1.36 (m, 1H).
실시예 19:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(6-메톡시-2-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 26)
Figure pct00383
단계 1: 6-메톡시-2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct00384
밀봉된 관에 3-브로모-6-메톡시-2-메틸-피리딘(1.2 g, 5.94 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(1.81 g, 7.13 mmol), Pd(dppf)Cl2(434 mg, 0.59 mmol), 칼륨 아세테이트(1,164 mg, 11.88 mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 95℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(실리카 겔, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 15/1)로 정제하여 2-메톡시-4-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(1.4 g, 94% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 250.0.
단계 2: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(6-메톡시-2-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00385
1,4-다이옥산(3 mL) 및 물(0.5 mL) 중 6-메톡시-2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(725 mg, 2.91 mmol), (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(500 mg, 1.46 mmol), PdCl2(dppf)(106 mg, 0.15 mmol) 및 K2CO3(602 mg, 4.37 mmol)의 혼합물을 N2로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3) 및 이어서 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(실리카 겔, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 3/1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(6-메톡시-2-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(370 mg, 66% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 386.0.
단계 3: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(6-메톡시-2-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00386
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(151 mg, 1.3 mmol), Pd2(dba)3(23 mg, 0.03 mmol), Cs2CO3(126 mg, 0.39 mmol), 잔트포스(25 mg, 0.05 mmol), (±)-시스-N-[8-클로로-6-(6-메톡시-2-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 0.13 mmol) 및 톨루엔(1 mL)을 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 130℃에서 2시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(실리카 겔, 다이클로로메탄/메탄올 = 20/1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(6-메톡시-2-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(13 mg, 27% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.738, [M+H]+ = 367.0. 방법 = G; 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 9.22 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.71(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.99-4.80 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.18-2.14 (m, 1H), 1.86-1.79 (m, 1H), 1.25-1.22 (m, 1H).
실시예 20:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(2-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 27)
Figure pct00387
아세토니트릴(4 mL) 중 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(6-메톡시-2-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.27 mmol)의 혼합물에 요오도트라이메틸실란(0.04 mL, 0.27 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3) 및 이어서 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 혼합물을 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(6-하이드록시-2-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 52% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.348, [M+H]+ = 353.0. 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.20 (s,1H), 8.29 (s,1H), 7.62 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.97 (s,1H), 6.65 (d, J = 1.2 Hz,1H), 6.48 (d, J = 9.2 Hz,1H), 4.98-4.80 (m,1H), 2.35 (s,3H), 2.18-2.13 (m,1H), 1.86-1.79 (m,1H),1.24-1.20 (m,1H).
실시예 21:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 28)
Figure pct00388
단계 1: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00389
밀봉된 관에 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(350 mg, 1.02 mmol), 5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피라졸(386 mg, 1.32 mmol), Pd(dppf)Cl2(92 mg, 0.13 mmol), K3PO4(214 mg, 1.02 mmol) 및 나트륨 아세테이트(253 mg, 3.09 mmol), 아세토니트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(실리카 겔, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 2/1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(350 mg, 80% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 429.7.
단계 2: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00390
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(956 mg, 8.16 mmol), Pd2(dba)3(149 mg, 0.16 mmol), Cs2CO3(1.33 g, 4.08 mmol), 잔트포스(158 mg, 0.33 mmol), (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(350 mg, 0.82 mmol) 및 톨루엔(5 mL)을 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3) 및 이어서 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 조질 생성물 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(0.3 g, 90% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 410.7.
단계 3: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00391
THF(3 mL) 중 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.49 mmol)의 혼합물에 1,4-다이옥산(1,4-다이옥산 중 4 M, 8 mL, 32 mmol) 중 HCl을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하였다. 메탄올 용액 중 7 M의 NH3을 첨가하여 혼합물의 pH를 8로 조정하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 12.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.417, [M+H]+ = 326.7. 방법 = G; 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 9.14 (s, 1H), 8.27 (s,1H), 7.81(s,1H), 7.14 (s,1H), 6.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.99-4.79 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.19-2.12 (m, 1H), 1.87-1.79 (m, 1H), 1.25-1.20 (m,1H).
실시예 22:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(5-옥소피롤리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 30)
Figure pct00392
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(202 mg, 1.73 mmol), Pd2(dba)3(31 mg, 0.03 mmol), Cs2CO3(168 mg, 0.52 mmol), 잔트포스(33 mg, 0.07 mmol), (1S,2S)-N-[8-클로로-6-(6-메톡시-2-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(10 mg, 0.03 mmol), DMF(0.5 mL) 및 톨루엔(0.5 mL)을 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 추출물을 물(20 mL x 3) 및 이어서 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 혼합물을 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (1S,2S)-N-[8-아미노-6-(5-옥소피롤리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(10 mg, 17% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.401, [M+H]+ = 329.7. 방법 = C; 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 9.14 (s,1H), 8.24 (s,1H), 6.99 (s,1H), 6.69 (s,1H), 4.99-4.78 (m, 1H), 3.86-3.76 (m,2H), 3.51-3.47 (m,1H), 2.81-2.74 (m,1H), 2.59-2.53 (m,1H), 2.14-2.11 (m,1H), 1.79-1.73 (m,1H), 1.22-1.20 (m,1H).
실시예 23:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(4-에틸-6-(하이드록시메틸)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 31)
Figure pct00393
단계 1: (±)-메틸 5-(8-클로로-3-(시스-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-4-에틸피콜린에이트
Figure pct00394
1,4-다이옥산(1 mL) 및 물(0.2 mL) 중 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(130 mg, 0.38 mmol), 메틸 4-에틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-카복실레이트(227 mg, 0.78 mmol), Pd(dppf)Cl2(26 mg, 0.04 mmol), K2CO3(156 mg, 1.14 mmol)의 혼합물을 N2로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 합한 추출물을 물 및 이어서 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(실리카 겔, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 2/1)로 정제하여 (±)-메틸 5-[8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-피리딘-2-카복실레이트(150 mg, 92% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 428.7.
단계 2: (±)-메틸 5-(8-아미노-3-(시스-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-4-에틸피콜린에이트
Figure pct00395
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(410 mg, 3.51 mmol), Pd2(dba)3(64 mg, 0.07 mmol), Cs2CO3(342 mg, 1.05 mmol), 잔트포스(67 mg, 0.1400 mmol), (±)-메틸 5-[8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-피리딘-2-카복실레이트(150 mg, 0.35 mmol), 톨루엔(1 mL) 및 DMF(1 mL)를 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 130℃에서 2시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(실리카 겔, 다이클로로메탄/메탄올, 20/1)로 정제하여 (±)-메틸 5-[8-아미노-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-피리딘-2-카복실레이트(60 mg, 42% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 409.7.
단계 3: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(4-에틸-6-(하이드록시메틸)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00396
메틸 알코올(5 mL) 중 (±)-메틸 5-[8-아미노-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-피리딘-2-카복실레이트(60 mg, 0.15 mmol)의 혼합물에 NaBH4(111 mg, 2.94 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 물(2 mL)을 첨가하여 반응을 급랭시켰다. 혼합물을 농축하고, 다이클로로메탄 및 메탄올(10:1, 10 mL)의 용액에서 재-현탁하였다. 혼합물을 여과하고, 다이클로로메탄 및 메탄올(10:1)로 세척하였다. 여액을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-[4-에틸-6-(하이드록시메틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(12 mg, 21% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.565, [M+H]+ = 381.7. 방법 = C; 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 9.25 (s,1H), 8.31(s, 1H), 8.30 (s, 1H) 7.56 (s,1H), 6.99 (s,1H), 6.67(d, J = 1.6 Hz,1H), 4.98-4.75 (m, 1H), 4.75 (s, 2H), 2.74 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.18-2.15 (m,1H), 1.88-1.85 (m,1H), 1.23-1.20 (m,1H), 1.18 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 24:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 32)
Figure pct00397
본원에 기술된 바와 유사한 방법을 사용하여 화합물을 합성하였다. LC/MS 및 NMR 데이터는 표 A-1에 제시된다.
실시예 25:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 37)
Figure pct00398
단계 1: 3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct00399
다이클로로메탄(10 mL) 및 피리딘(0.5 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(1 g, 3.88 mmol) 및 (1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판카복실산(0.49 g, 4.66 mmol)의 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, POCl3(0.4 mL, 4.29 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 생성물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3에 의해 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 건조하고(NaSO4) 및 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터:에틸 아세테이트, 1:1)로 정제하여 표제 화합물(1 g, 62.5% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 345.0.
단계 2: (1S,2S)-N-(8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00400
1,4-다이옥산(4 mL) 중 (1S,2S)-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.44 mmol), 4-메틸옥사졸리딘-2-온(53 mg, 0.52 mmol), 잔포스(Xanphos)(25 mg, 0.04 mmol), Pd2(dba)3(40 mg, 0.04 mmol) 및 K3PO4(277 mg, 1.31 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1 → 석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:2)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(140 mg, 61% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 364.1.
단계 3: tert-부틸 3-((1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00401
1,4-다이옥산(3 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(241 mg, 2.06 mmol), (1S,2S)-N-[8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.41 mmol), Pd2(dba)3(74 mg, 0.08 mmol), 브렛포스(44 mg, 0.08 mmol) 및 tBuONa(118 mg, 1.23 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터:에틸 아세테이트 = 2:1 → 석유 에터:에틸 아세테이트 = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(70 mg, 14.8% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 445.2.
단계 4: (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00402
1,4-다이옥산 중 HCl(1 mL, 4 M) 중 tert-부틸 N-[3-[[(1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(70 mg, 0.16 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 메탄올(2 mL)에 용해시키고, 포화 NaHCO3으로 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 혼합물을 역상 제조용 HPLC로 정제하여 표제 화합물을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT(분) = 1.54, [M+H]+ = 345.1, 방법 = C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.74 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.32 (s, 2H), 5.01-4.83 (m, 1H), 4.71 - 4.68 (m, 1H), 4.58-4.54 (m, 1H), 4.06 - 4.03 (m, 1H), 2.28 - 2.21 (m, 1H), 1.71 - 1.61 (m, 1H), 1.29 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.19 - 1.12 (m, 1H).
실시예 26:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(퀴놀린-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 38)
Figure pct00403
단계 1: 퀴놀린-4-일보론산
Figure pct00404
1,4-다이옥산(100 mL) 중 4-브로모퀴놀린(1.0 g, 4.81 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(12.0 g, 47.26 mmol), PdCl2·dppf(0.7 g, 0.96 mmol), 칼륨 아세테이트(1.4 g, 14.29 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1 → 다이클로로메탄:메탄올 = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(2 g, 조질). LCMS (ESI) [M+H]+ = 256.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(퀴놀린-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00405
1,4-다이옥산(4 mL) 및 물(1 mL) 중 트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(800 mg, 2.28 mmol), 퀴놀린-4-보론산(100 mg, 0.58 mmol), Pd(PPh3)4(67 mg, 0.06 mmol) 및 K2CO3(239 mg, 1.73 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1 → 석유 에터/아세테이트 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(100 mg, 25.3% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 399.1.
단계 3: (±)-트랜스-2-시아노-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(퀴놀린-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00406
DMF(3 mL) 및 톨루엔(1 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-6-(4-퀴놀릴)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(90 mg, 0.23 mmol), 벤조페논 이민(123 mg, 0.68 mmol), Pd2(dba)3(41 mg, 0.04 mmol), 잔트포스(13 mg, 0.02 mmol) 및 Cs2CO3(220 mg, 0.67 mmol)의 혼합물을 마이크로파 반응기에서 150℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하였다. 이어서, 유기 추출물을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(40 mg, 33% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 544.2.
단계 4: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(퀴놀린-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00407
다이클로로메탄(2 mL) 및 2 점적의 물 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-퀴놀릴)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(40 mg, 0.07 mmol) 및 TFA(0.5 mL, 6.71 mmol)의 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(10 mL)에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO3으로 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 혼합물을 농축 건조하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 = 2:1 → 에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(18.5 mg, 64% 수율). LCMS (ESI) RT (분) = 1.573, [M+H]+ = 380.1, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.15 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.96 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.82 - 7.78 (m, 1H), 7.62 - 7.58 (m, 1H), 7.51 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.73 (d, J = 1.6Hz, 1H), 6.49 (s, 2H), 2.77-2.72 (m, 1H), 2.15 -2.11 (m, 1H), 1.60 - 1.58 (m, 1H), 1.45 - 1.40 (m, 1H).
실시예 27:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 39)
Figure pct00408
단계 1: 3,5-다이브로모-4-에틸피리딘
Figure pct00409
THF(50 mL) 중 다이이소프로필아민(3.5 mL, 24.8 mmol)의 용액에 n-BuLi(헥산 중 2.5 M, 10.5 mL, 26.25 mmol)를 여러 분획으로 -78℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물에 3,5-다이브로모피리딘(5.0 g, 21.11 mmol)을 -78℃에서 N2 하에 첨가하였다. -78℃에서 1시간 교반 후에, 요오도에탄(3.29 g, 21.11 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 NH4Cl(100 mL)의 포화 용액으로 세척하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 20:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 265.9.
단계 2: tert-부틸 5-브로모-4-에틸피리딘-3-일카밤에이트
Figure pct00410
1,4-다이옥산(60 mL) 중 3,5-다이브로모-4-에틸-피리딘(2.4 g, 9.06 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.0 g, 8.54 mmol), K2CO3(2.5 g, 18.12 mmol), CuI(0.86 g, 4.53 mmol) 및 N1,N2-다이메틸에탄-1,2-다이아민(0.4 g, 4.55 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 여과하고, 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 10:1 → 석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1)로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(1.01 g, 37% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 301.0.
단계 3: tert-부틸 4-에틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일카밤에이트
Figure pct00411
1,4-다이옥산(20 mL) 중 비스(피나콜라토)다이보론(1.26 g, 4.98 mmol), tert-부틸 N-(5-브로모-4-에틸-3-피리딜)카밤에이트(1.0 g, 3.32 mmol), PdCl2·dppf(0.24 g, 0.33 mmol) 및 칼륨 아세테이트(0.98 g, 9.96 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물을 흑색 오일로서 수득하였다(490 mg, 25% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 349.3.
단계 4: (±)-tert-부틸 5-(8-클로로-3-((시스)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-4-에틸피리딘-3-일카밤에이트
Figure pct00412
아세토니트릴(4 mL) 및 물(1 mL) 중 (±)-tert-부틸 N-[4-에틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3-피리딜]카밤에이트(250 mg, 0.72 mmol), 시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.44 mmol), PdCl2·dppf(52 mg, 0.07 mmol), K3PO4(304 mg, 1.43 mmol) 및 나트륨 아세테이트(117 mg, 1.43 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1 → 석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(70 mg, 20.1% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 485.2.
단계 5: (±)-tert-부틸 N-[6-[5-(tert-부톡시카보닐아미노)-4-에틸-3-피리딜]-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00413
1,4-다이옥산(2 mL) 중 tert-부틸 N-[5-[8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-3-피리딜]카밤에이트(40 mg, 0.08 mmol), tert-부틸 카밤에이트(96 mg, 0.82 mmol), Pd2(dba)3(8 mg, 0.01 mmol), 브렛포스(5 mg, 0.01 mmol) 및 tBuONa(23 mg, 0.24 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1 → 에틸 아세테이트/석유 에터 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(20 mg, 34.7% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 566.3.
단계 6: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00414
1,4-다이옥산 중 HCl의 용액(1 mL, 4 M) 중 (±)-tert-부틸 N-[6-[5-(tert-부톡시카보닐아미노)-4-에틸-3-피리딜]-3-[[(시스)-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(20 mg, 0.04 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 메탄올(2 mL)에 용해시키고, 포화 NaHCO3으로 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 혼합물을 역상 제조용 HPLC(5-95% 메탄올 및 물 중 1% NH4HCO3)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(11.6 mg, 83.5% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.54, [M+H]+ = 366.2, 방법 = F. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.31 (s, 2H), 5.21 (s, 2H), 5.02-4.84 (m, 1H), 2.46 - 2.41 (m, 2H), 2.27-2.24 (m, 1H), 1.69 - 1.62 (m, 1H), 1.18 -1.14 (m, 1H), 0.98 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 28:
3-아미노-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)프로판아미드(화합물 40)
Figure pct00415
단계 1: tert-부틸 3-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일아미노)-3-옥소프로필카밤에이트
Figure pct00416
다이클로로메탄(2 mL) 및 피리딘(0.5 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(150 mg, 0.58 mmol), 3-(tert-부톡시카보닐아미노)프로판산(165 mg, 0.87 mmol)의 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. POCl3(89 mg, 0.58 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 10 mL 물로 세척하고, 포화 수성 NaHCO3으로 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 건조한 후(NaSO4), 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1 → 석유 에터/에틸 아세테이트 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(200 mg, 70% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 430.0.
단계 2: tert-부틸 3-(8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-3-옥소프로필카밤에이트
Figure pct00417
1,4-다이옥산(8 mL) 및 물(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)아미노]-3-옥소-프로필]카밤에이트(195 mg, 0.45 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(120 mg, 0.55 mmol), Pd(PPh3)4(53 mg, 0.05 mmol) 및 K2CO3(188 mg, 1.36 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1 → 100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(190 mg, 59% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 441.2.
단계 3: tert-부틸 3-(3-아미노프로판아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00418
1,4-다이옥산(5 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(470 mg, 4.01 mmol), tert-부틸 N-[3-[[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-3-옥소-프로필]카밤에이트(180 mg, 0.41 mmol), Cs2CO3(398 mg, 1.22 mmol), Pd2(dba)3(37 mg, 0.04 mmol) 및 브렛포스(21 mg, 0.04 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:1 → 에틸 아세테이트/석유 에터 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(150 mg, 38% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 522.3.
단계 4: 3-아미노-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)프로판아미드
Figure pct00419
1,4-다이옥산 중 HCl(4.0 M, 2 mL, 8 mmol) 중 tert-부틸 N-[3-[[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-3-옥소-프로필]카밤에이트(150 mg, 0.29 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 잔사를 메탄올(2 mL)에 용해시키고, 포화 NaHCO3으로 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 혼합물을 역상 제조용 HPLC(5-95% 메탄올 및 1% NH4HCO3)로 직접 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(39.5 mg). LCMS (ESI): RT(분) = 1.45, [M+H]+ = 322.2, 방법 = F. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.23 (s, 1H), 8.40 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.68 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 3.05 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H).
실시예 29:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 41)
Figure pct00420
단계 1: 5-이소프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00421
1,4-다이옥산(100 mL) 중 4-브로모-3-이소프로필-1H-피라졸(2.0 g, 10.58 mmol), Pd(dppf)Cl2(1.0 g, 1.37 mmol), 칼륨 아세테이트(4.8 g, 48.98 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(25.0 g, 98.45 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 100℃에서 밤새 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 이어서 조 물질을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 1/10 → 1/1)로 정제하여 3-이소프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.28 g, 39% 수율)을 황색 액체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 237.2.
단계 2: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00422
3-이소프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(600 mg, 1.91 mmol), Pd(dppf)Cl2(100 mg, 0.14 mmol), K2CO3(560 mg, 4.06 mmol), (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(520 mg, 1.51 mmol), 1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1.5 mL)의 반응 혼합물을 함유하는 압력 관을 마이크로파 반응기에서 130℃에서 80분 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 이어서, 조 물질을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(3-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(220 mg, 37% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 373.1.
단계 3: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(5-이소프로필-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00423
다이클로로메탄(15 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(220 mg, 0.59 mmol), 3,4-다이하이드로-2H-피란(2.0 mL, 21.92 mmol), TFA(0.5 mL, 6.71 mmol)의 용액을 환류 하에 밤새 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 이어서 조 물질을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 1/4 → 1/1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(230 mg, 84% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 457.2.
단계 4: (±)-시스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(3-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드 및 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(3-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00424
무수 DMF(3.0 mL) 및 무수 톨루엔(3.0 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-[1-테트라하이드로피란-2-일-3-(트라이플루오로메틸)피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.2 mmol), 벤조페논 이민(182 mg, 1.0 mmol), 잔트포스(58 mg, 0.1 mmol), Pd2(dba)3(46 mg, 0.05 mmol) 및 Cs2CO3(170 mg, 0.52 mmol)의 혼합물을 130℃에서 Ar 대기 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트(15 mL)에 용해시키고, 20 mL의 염수로 세척하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 1:3 → 1:1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(3-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(77 mg, 61% 수율)를 황색 액체로서 수득하고(LCMS(ESI):[M+H]+ = 602.3), (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(3-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(43 mg, 32% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다(LCMS (ESI): [M+H]+ = 602.3).
단계 5: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00425
1,4-다이옥산 중 HCl(2.0 mL, 4 M, 8 mmol) 중 (±)-시스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(3-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(120.0 mg, 0.20 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 생성된 잔사를 역상 제조용 HPLC(메탄올 0-40%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(3-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(30 mg, 43% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다(HCl 염). LCMS(ESI): [M+H]+ = 354.2, RT(분) = 1.53, 방법 = B; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.43 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.10-5.06 (m, 1H), 3.62-3.57 (m, 1H), 2.20-2.17(m, 1H), 1.99-1.89(m, 1H), 1.42 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 1.39-1.30(m, 1H).
실시예 30:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-이소프로필-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 42)
Figure pct00426
1,4-다이옥산 중 HCl 용액(2.0 mL, 4 M, 8 mmol) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(3-이소프로필-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(115 mg, 0.19 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 생성된 잔사를 역상 제조용 HPLC(메탄올 0-50%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(45 mg, 65% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다(HCl 염). LCMS(ESI): [M+H]+ = 354.2, RT(분) = 1.59, 방법 = B; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.41 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.08-5.05 (m, 1H), 3.62-3.58 (m, 1H), 2.46-2.38 (m, 1H), 1.75-1.65 (m, 1H), 1.58-1.50 (m, 1H), 1.42 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 31:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 43)
Figure pct00427
단계 1: 메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인다졸
Figure pct00428
1,4-다이옥산(20 mL) 중 6-브로모-1-메틸-피리딘-2-온(500 mg, 2.66 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(675 mg, 2.66 mmol), Pd(dppf)Cl2(97 mg, 0.13 mmol) 및 칼륨 아세테이트(781 mg, 7.98 mmol)의 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)로 희석하고, 여과하고, 농축하여 조질 생성물 1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일보론산(320 mg)을 회색 고체로서 수득하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 154.1.
단계 2: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00429
밀봉된 관에 (1-메틸-6-옥소-2-피리딜)보론산(106 mg, 0.70 mmol), (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(160 mg, 0.47 mmol), Pd(dppf)2Cl2(42 mg, 0.06 mmol), K3PO4(98 mg, 0.47 mmol), 나트륨 아세테이트(116 mg, 1.41 mmol), 아세토니트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 질소를 통해 2분 동안 발포시키고, 이어서 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트, 1/2)로 정제하여 (±)-시스-N-(8-클로로-6-(1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 28% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 372.0.
단계 3: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00430
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(157 mg, 1.34 mmol), Pd2(dba)3(24 mg, 0.03 mmol), Cs2CO3(131 mg, 0.40 mmol), 잔트포스(26 mg, 0.05 mmol), (±)-시스-N-(8-클로로-6-(1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 0.13 mmol), DMF(2 mL) 및 톨루엔(2 mL)을 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-(8-아미노-6-(1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(7 mg, 15% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.385, [M+H]+ = 353.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.27 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.59 (dd, J = 6.8, 9.2 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.62(dd, J = 1.2, 9.2 Hz, 1H), 6.42 (dd, J = 1.2, 6.8 Hz, 1H), 4.99-4.79 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 2.19-2.13 (m, 1H), 1.87-1.78 (m, 1H), 1.27-1.18 (m, 1H).
실시예 32:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 44)
Figure pct00431
단계 1: 메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인다졸
Figure pct00432
DMF(10 mL) 중 5-브로모-6-메틸-1H-인다졸(400 mg, 1.9 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(2.41 g, 9.48 mmol), Pd(dppf)Cl2(277 mg, 0.38 mmol) 및 칼륨 아세테이트(557 mg, 5.69 mmol)의 혼합물을 90℃ 3시간 동안 질소 하에 90℃까지 가열하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터)로 정제하여 6-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인다졸(370 mg, 37% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 259.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00433
밀봉된 관에 트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(160 mg, 0.46 mmol), 6-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인다졸(141 mg, 0.55 mmol), Pd(dppf)2Cl2(41 mg, 0.06 mmol), 나트륨 아세테이트(113 mg, 1.39 mmol), 아세토니트릴(2 mL) 및 물(0.2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 질소를 통해 2분 동안 발포시키고, 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트 = 2/1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(160 mg, 82% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 402.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(6-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00434
다이클로로메탄(5 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(190 mg, 0.47 mmol) 및 p-톨루엔설폰산(8 mg, 0.05 mmol)의 냉각된(0℃) 현탁액에 3,4-다이하이드로-2H-피란(47 mg, 0.57 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트, 4:1)로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-6-(6-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(190 mg, 75% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 486.2.
단계 4: (±)-트랜스-2-시아노-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(6-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-인다졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00435
밀봉된 관에 벤조페논 이민(61 mg, 0.34 mmol), 트랜스-N-[8-클로로-6-(6-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.31 mmol), Pd(OAc)2(7 mg, 0.03 mmol), Cs2CO3(201 mg, 0.62 mmol), 잔트포스(15 mg, 0.03 mmol) 및 톨루엔(5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 145℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트, 1/2)로 정제하여 (±)-트랜스-2-시아노-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(6-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-인다졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(90 mg, 46% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 631.1.
단계 5: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00436
THF(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(6-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 0.13 mmol)의 혼합물에 1,4-다이옥산 중 HCl 용액(2 mL, 4 M, 8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(6.3 mg, 12.9% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.513, [M+H]+ = 383.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.24 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.76 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 2.65-2.64 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.62-1.55 (m, 2H).
실시예 33:
(±)-트랜스-N1-[8-아미노-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]사이클로프로판-1,2-다이카복스아미드(화합물 45)
Figure pct00437
THF(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(6-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 0.13 mmol)의 혼합물에 1,4-다이옥산 중 HCl 용액(2 mL, 4 M, 8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N1-[8-아미노-6-(6-메틸-1H-인다졸-5-일)-3-이소퀴놀일]사이클로프로판-1,2-다이카복스아미드(8.3 mg, 16% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.372, [M+H]+ = 401.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.23 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 2.42-2.38 (m, 4H), 2.25-2.20 (m, 1H), 1.44-1.40 (m, 2H).
실시예 34:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 46)
Figure pct00438
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 47)
Figure pct00439
단계 1: (±)-8-클로로-3-(시스-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일보론산
Figure pct00440
DMF(4 mL) 중 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(1.0 g, 2.91 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(960 mg, 3.78 mmol), Pd(dppf)Cl2(424 mg, 0.58 mmol) 및 칼륨 아세테이트(855 mg, 8.73 mmol)의 혼합물을 N2로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 3:1)로 정제하여 8-클로로-3-(시스-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일보론산(600 mg, 66% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 309.0.
단계 2: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00441
밀봉된 관에 (±)-[8-클로로-3-[[시스-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(200 mg, 0.57 mmol), 3-브로모-4-메톡시-피리딘(128 mg, 0.68 mmol), Pd(dppf)2Cl2(51 mg, 0.07 mmol), K3PO4(120 mg, 0.57 mmol), 나트륨 아세테이트(142mg, 1.73 mmol), 1,4-다이옥산(2 mL) 및 물(0.2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(석유 에터/에틸 아세테이트, 2/1)로 정제하여 (±)-시스-N-(8-클로로-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 36% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 372.1.
단계 3: (±)-시스-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00442
밀봉된 관에 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(4-메톡시-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(60 mg, 0.16 mmol), 벤조페논 이민(32 mg, 0.18 mmol), Pd(OAc)2(4 mg, 0.02 mmol), Cs2CO3(105 mg, 0.32 mmol), 잔트포스(8 mg, 0.02 mmol), DMF(1 mL) 및 톨루엔(3 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 마이크로파 반응기에서 145℃에서 30분 동안 가열하였다. 반응 생성물을 에틸 아세테이트(50 mL)로 희석하고, 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 이어서, 조질 생성물을 플래시 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헥산 중 80% 에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-시스-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드 및 (±)-트랜스-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드의 혼합물(20 mg, 24% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 517.2.
단계 4: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00443
THF(3 mL) 중 (±)-시스-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드 및 트랜스-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메톡시피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드의 혼합물(20 mg, 0.04 mmol)의 용액에 1,4-다이옥산 중 HCl의 용액(2 mL, 4 M, 8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 2개의 바람직한 이성질체 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(4-메톡시-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(4.9 mg, 36%, 황색 고체)를 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.253, [M+H]+ = 353.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz,CD3OD): δ 9.22 (s, 1H), 8.44 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.21 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.98-4.80 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.19-2.14 (m, 1H), 1.88-1.78 (m, 1H), 1.27-1.18 (m, 1H).
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(4-메톡시-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(6 mg, 44%, 황색 고체). LCMS (ESI): RT (분) = 1.295, [M+H]+ = 353.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz,CD3OD): δ 9.22 (s, 1H), 8.44 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.21 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.88 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 4.99-4.78 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.50-2.40 (m, 1H), 1.55-1.49 (m, 1H), 1.42-1.37 (m, 1H).
실시예 35:
(±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-하이드록시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 48)
Figure pct00444
단계 1: 2-메톡시-4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct00445
압력 관에 3-브로모-2-메톡시-4-메틸피리딘(396 mg, 1.96 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(597 mg, 2.35 mmol), Pd(dppf)2Cl2(143 mg, 0.20 mmol), 칼륨 아세테이트(384 mg, 3.92 mmol) 및 1,4-다이옥산(15 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 95℃에서 4시간 동안 교반하였다. 잔사를 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 4:1)로 정제하여 2-메톡시-4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(250 mg, 51% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 249.3.
단계 2: (±)-시스-N-[8-클로로-6-(2-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00446
압력 관에 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(260 mg, 0.76 mmol), 2-메톡시-4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(226 mg, 0.91 mmol), Pd(dppf)2Cl2(68 mg, 0.09 mmol), 나트륨 아세테이트(244 mg, 2.3 mmol), K3PO4(160 mg, 0.76 mmol), 아세토니트릴(10 mL) 및 물(1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잔사를 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 4:1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(2-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(145 mg, 50% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 386.1.
단계 3: (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00447
톨루엔(1 mL) 및 DMF(1 mL) 중 Pd2dba3(32 mg, 0.03 mmol), Cs2CO3(253 mg, 0.78 mmol), (±)-시스-N-[8-클로로-6-(2-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.26 mmol) 및 tert-부틸 카밤에이트(304 mg, 2.59 mmol) 및 잔트포스(40 mg, 0.07 mmol)의 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(12 mg, 13% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 367.1.
단계 4: (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-하이드록시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00448
아세토니트릴(4 mL) 중 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(12 mg, 0.03 mmol)의 혼합물에 요오도트라이메틸실란(0.02 mL, 0.14 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-하이드록시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(9 mg, 78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.625, [M+H]+ = 353.1, 방법 = I; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.26 (s, 1H), 10.47(s, 1H), 9.25 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.13 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.91 (s, 2H), 5.00-4.76 (m, 1H), 2.27-2.23 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.74-1.61 (m, 1H), 1.18-1.12 (m, 1H).
실시예 36:
(±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-플루오로-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 49)
Figure pct00449
단계 1: (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-플루오로-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00450
밀봉된 관에 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.58 mmol), 3-플루오로-4-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(179 mg, 0.76 mmol), Pd(dppf)2Cl2(52 mg, 0.07 mmol), K3PO4(123 mg, 0.58 mmol) 및 나트륨 아세테이트(145 mg, 1.77 mmol), 아세토니트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 2:1)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-플루오로-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 46% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 374.1.
단계 2: (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-플루오로-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00451
톨루엔(1 mL) 및 DMF(1 mL) 중 Pd2dba3(33 mg, 0.04 mmol), Cs2CO3(262 mg, 0.80 mmol), (±)-시스-N-[8-클로로-6-(5-플루오로-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.27 mmol), tert-부틸 카밤에이트(313 mg, 2.68 mmol) 및 잔트포스(41 mg, 0.07 mmol)의 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(5-플루오로-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(18 mg, 19% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.422, [M+H]+ = 355.1, 방법 = D; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.25 (s, 1H), 8.39 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.68 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.99-4.78 (m, 1H), 2.31 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 2.18-2.13 (m, 1H), 1.87-1.77 (m, 1H), 1.26-1.21 (m, 1H).
실시예 37:
(±)-시스-N-[8-아미노-6-(3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 50)
Figure pct00452
단계 1: (±)-시스-N-[8-클로로-6-(3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00453
밀봉된 관에 시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(300 mg, 0.87 mmol), 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(214 mg, 1.05 mmol), Pd(dppf)2Cl2(78 mg, 0.11 mmol), 나트륨 아세테이트(281 mg, 2.65 mmol), K3PO4(184 mg, 0.87 mmol), 아세토니트릴(10 mL) 및 물(1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 1:1)로 정제하여 시스-N-[8-클로로-6-(3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 67% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 342.1.
단계 2: (±)-시스-N-[8-아미노-6-(3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00454
톨루엔(1 mL) 및 DMF(1 mL) 중 Pd2dba3(66 mg, 0.07 mmol), Cs2CO3(529 mg, 1.62 mmol), 시스-N-[8-클로로-6-(3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(185 mg, 0.54 mmol), tert-부틸 카밤에이트(634 mg, 5.41 mmol), 잔트포스(83 mg, 0.14 mmol)의 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 역상 제조용 HPLC로 정제하여 시스-N-[8-아미노-6-(3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 11% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.273, [M+H]+ = 323.0, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.23 (s, 1H), 8.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.56 (dd, J = 1.6, 4.8 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.21-8.18 (m, 1H), 7.56 (dd, J = 4.8, 8.0 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.01(d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.99-4.79 (m, 1H), 2.20-2.13 (m, 1H), 1.88-1.78 (m, 1H), 1.27-1.19(m, 1H).
실시예 38:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 51)
Figure pct00455
단계 1: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00456
밀봉된 관에 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.43 mmol), 3-메틸피리딘-4-보론산(70 mg, 0.51 mmol), Pd(dppf)2Cl2(39 mg, 0.05 mmol), Na2CO3(138 mg, 1.3 mmol), 1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 이어서 마이크로파 반응기에서 120℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(에틸 아세테이트/석유 에터, 1:1)로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 45% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 363.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00457
밀봉된 관에 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(60 mg, 0.17 mmol), tert-부틸 카밤에이트(157 mg, 1.35 mmol), Pd2(dba)3(31 mg, 0.03 mmol), NaOtBu(47 mg, 0.49 mmol), tBu브렛포스(19 mg, 0.04 mmol) 및 1-메틸-2-피롤리딘온(5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 TLC(에틸 아세테이트) 및 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(3 mg, 5% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.338, [M+H]+ = 344.2, 방법 = D; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.26 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.41(d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.69 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 2.64 - 2.63(m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.12-2.10(m, 1H), 1.60-1.53(m, 2H).
실시예 39:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 52)
Figure pct00458
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00459
다이클로로메탄(10 mL) 및 피리딘(0.6 mL, 7.44 mmol) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(800 mg, 2.48 mmol)의 용액에 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(830 mg, 6.41 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 물(10 mL)에 재-현탁하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하였다. 유기 층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 100 mL의 석유 에터 및 10 mL의 에틸 아세테이트에 현탁하고, 이어서 여과하여 (±)-트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(800 mg, 78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 416.0.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00460
밀봉된 관에 (±)-트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(400 mg, 0.96 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(253 mg, 1.15 mmol), Pd(dppf)2Cl2(84 mg, 0.12 mmol) 및 Na2CO3(255 mg, 2.41 mmol), 테트라하이드로퓨란(20 mL) 및 물(8 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 65℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 물(50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 1:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(220 mg, 60% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 381.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00461
톨루엔(6 mL) 및 DMF(6 mL) 중 Pd2dba3(96 mg, 0.11 mmol), Cs2CO3(513 mg, 1.58 mmol), 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.53 mmol), tert-부틸 카밤에이트(615 mg, 5.25 mmol) 및 잔트포스(121 mg, 0.21 mmol)의 혼합물을 130℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 10.5% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.330, [M+H]+ = 362.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.32 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.41(s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 2.65- 2.61 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.61-1.52 (m, 2H).
실시예 40:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로벤조[d]옥사졸-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 54)
Figure pct00462
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(3-(4-메톡시벤질)-5-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로벤조[d]옥사졸-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00463
(±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(90 mg, 0.26 mmol), Pd(dppf)Cl2(18 mg, 0.03 mmol), K2CO3(70 mg, 0.51 mmol), 3-[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,3-벤족사졸-2-온(101 mg, 0.26 mmol), 물(0.2 mL) 및 1,4-다이옥산(10 mL)의 혼합물을 100℃에서 N2 하에 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 30% 에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[3-[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸-2-옥소-1,3-벤족사졸-6-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(90 mg, 62% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 539.2.
단계 2: (±)-tert-부틸 3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-(3-(4-메톡시벤질)-5-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로벤조[d]옥사졸-6-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00464
밀봉된 관에 트랜스-N-[8-클로로-6-[3-[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸-2-옥소-1,3-벤족사졸-6-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(75 mg, 0.14 mmol), Pd2(dba)3(25 mg, 0.03 mmol), t-BuONa(27 mg, 0.28 mmol), tert-부틸 카밤에이트(326 mg, 2.78 mmol) 및 1,4-다이옥산(4 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[3-[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸-2-옥소-1,3-벤족사졸-6-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 70% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 620.3.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로벤조[d]옥사졸-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00465
(±)-tert-부틸 N-[3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[3-[(4-메톡시페닐)메틸]-5-메틸-2-옥소-1,3-벤족사졸-6-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(20 mg), TFA(0.5 mL) 및 트라이플루오로메탄설폰산(1 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 메탄올(7 M) 중 NH3으로 염기성화시켰다. 생성된 잔사를 역상 제조용 HPLC(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% 포름산)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-3H-1,3-벤족사졸-6-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(4 mg, 31% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.669, [M+H]+ = 400.1, 방법 = B; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.14(s, 1H), 9.36 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.61(s, 1H), 6.35 (s, 2H), 2.83-2.78 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.21-2.16 (m, 1H), 1.66-1.62 (m, 1H), 1.51-1.46 (m, 1H).
실시예 41:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(2-에틸-5-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 55)
Figure pct00466
단계 1: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(2-에틸-5-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00467
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.5 mmol), 5-에틸피롤리딘-2-온(56 mg, 0.5 mmol), Pd2(dba)3(45 mg, 0.05 mmol), Cs2CO3(324 mg, 1.0 mmol), 잔트포스(58 mg, 0.1 mmol)의 혼합물을 100℃에서 N2 하에 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 0-100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-[2-에틸-5-옥소-피롤리딘-1-일]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(120 mg, 64% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 376.1.
단계 2: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(2-에틸-5-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00468
1-메틸-2-피롤리딘온(1 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(2-에틸-5-옥소-피롤리딘-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.27 mmol), tert-부틸 카밤에이트(311 mg, 2.66 mmol), tert-Bu브렛포스(51 mg, 0.108 mmol), Pd2(dba)3(47 mg, 0.054 mmol) 및 t-BuONa(51 mg, 0.53 mmol)의 혼합물을 110℃에서 N2 하에 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 0-100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2-에틸-5-옥소-피롤리딘-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(6 mg, 6.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.625, [M+H]+ = 356.7, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.15 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.07-7.04 (m, 1H), 6.85-6.84 (m,1H), 5.00-4.78 (m, 1H), 4.43-4.35 (m, 1H), 2.67-2.54 (m, 2H), 2.43-2.34 (m,1H), 2.20-2.10 (m,1H), 1.97-1.69 (m,3H), 1.55-1.47 (m,1H), 1.26-1.17 (m,1H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 42:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(6-에톡시-4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 56)
Figure pct00469
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)-2,7-나프티리딘-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00470
1-메틸-2-피롤리딘온(4 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(6-에톡시-4-에틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.24 mmol), tert-부틸 카밤에이트(555 mg, 4.74 mmol), t-Bu브렛포스(46 mg, 0.1 mmol), Pd2(dba)3(43 mg, 0.05 mmol) 및 t-BuONa(45 mg, 0.48 mmol)의 혼합물을 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 0-100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(6-에톡시-4-에틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(6 mg, 6.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.956, [M+H]+ = 402.2, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.24 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.94 (s, 1H),6.95 (s, 1H), 6.76 (s,1H), 6.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.35(q, J = 6.8 Hz, 2H), 2.69-2.63 (m, 3H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.61-1.53 (m, 2H), 1.42 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.12 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 43:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1,2-다이메틸-1H-이미다졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 57)
Figure pct00471
단계 1: 1,2-다이메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-이미다졸
Figure pct00472
글러브 박스에서, 압력 관을 [Ir(OMe)(COD)]2(105 mg, 0.16 mmol), THF(5 mL) 및 피나콜보란(1.1 mL, 7.8 mmol)으로 충전하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이러한 4,4-다이-tert-부틸 바이피리딘(42 mg, 0.16 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 추가로 10분 동안 교반하였다. THF(5 mL) 중 1,2-다이메틸이미다졸(500 mg, 5.2 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 헥산(10 mL x 4)으로 세척하고, 농축하여 1,2-다이메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다졸(1 g, 52% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 223.2.
단계 2: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-클로로-2,7-나프티리딘-3-일)-2-메틸사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00473
밀봉된 관에 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(220 mg, 0.63 mmol), 1,2-다이메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다졸(385 mg, 1.73 mmol), Pd(dppf)Cl2(101 mg, 0.14 mmol) 및 Na2CO3(202 mg, 1.91 mmol), 1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2를 통해 2분 동안 발포시키고, 100℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 1:1 → 0:100)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2,3-다이메틸이미다졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(250 mg, 97% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 366.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1,2-다이메틸-1H-이미다졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00474
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(768 mg, 6.56 mmol), (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2,3-다이메틸이미다졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(240 mg, 0.66 mmol), Pd2(dba)3(150 mg, 0.16 mmol), Cs2CO3(700 mg, 2.15 mmol), 잔트포스(100 mg, 17 mmol) 및 1-메틸-2-피롤리딘온(15 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 130℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(보스톰(BOSTOM) ODS 40 g 컬럼, 아세토니트릴 중 10 mM NH4HCO3 100:0 → 1:5로 용리함)로 정제하여 조질 생성물(100 mg)을 수득하였다. 조질 생성물을 제조용 TLC(실리카 겔, 다이클로로메탄/메탄올, 10:1)로 다시 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(2,3-다이메틸이미다졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(10 mg, 4% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.532, [M+H]+ = 346.8, 방법 = H; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ : 9.19 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 7.76 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 2.67-2.60 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.13-2.04 (m, 1H), 1.63-1.50 (m, 2H).
실시예 44:
(±)-시스-N-[8-아미노-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 59)
Figure pct00475
단계 1: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(3-메틸피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00476
밀봉된 관에 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.58 mmol), 3-메틸피리딘-4-보론산(95 mg, 0.70 mmol), Pd(dppf)Cl2(52 mg, 0.07 mmol), K3PO4(122 mg, 0.58 mmol), 나트륨 아세테이트(185 mg, 1.75 mmol), 아세토니트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 N2 하에 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 2:3)로 정제하여 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(140 mg, 67% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 356.1.
단계 2: (±)-시스-N-[8-아미노-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00477
톨루엔(3 mL) 및 DMF(3 mL) 중 (±)-시스-N-[8-클로로-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(130 mg, 0.37 mmol), tert-부틸 카밤에이트(428 mg, 3.65 mmol), Pd2dba3(66 mg, 0.07 mmol), 잔트포스(84 mg, 0.15 mmol) 및 Cs2CO3(357 mg, 1.1 mmol)의 혼합물을 밀봉된 관에서 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 석유 에터 및 에틸 아세테이트로 세척하여 조질 생성물을 수득하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(3-메틸-4-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(25 mg, 20% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.605, [M+H]+ = 337.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.25 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.43 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.36 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.69 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.99-4.79 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.20-2.12 (m, 1H), 1.87-1.77 (m, 1H), 1.27-1.18 (m, 1H).
실시예 45:
(±)-((트랜스)-N-(8-아미노-6-(4-(1,1-다이플루오로에틸)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 60)
Figure pct00478
단계 1: 4-(1,1-다이플루오로에틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct00479
1,4-다이옥산(10 mL) 중 3-브로모-4-(1,1-다이플루오로에틸)피리딘(500 mg, 2.25 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(857 mg, 3.37 mmol), PdCl2·dppf(164 mg, 0.22 mmol) 및 칼륨 아세테이트(662 mg, 6.76 mmol)의 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터:에틸 아세테이트 = 10:1 → 석유 에터/에틸 아세테이트 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(105 mg, 17% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 270.2.
단계 2: (±)-(트랜스)-N-(8-클로로-6-(4-(1,1-다이플루오로에틸)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00480
1,4-다이옥산(4 mL) 및 물(1 mL) 중 트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(108 mg, 0.31 mmol), 4-(1,1-다이플루오로에틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(100 mg, 0.37 mmol), Pd(PPh3)4(36 mg, 0.03 mmol), 칼륨 아세테이트(90 mg, 0.92 mmol)의 혼합물을 90℃에서 4시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1 → 석유 에터/에틸 아세테이트 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(80 mg, 61% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 413.1.
단계 3: (±)-트랜스-2-시아노-N-(6-(4-(1,1-다이플루오로에틸)피리딘-3-일)-8-(다이페닐메틸렌아미노)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00481
DMF(0.5 mL) 및 톨루엔(0.5 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[4-(1,1-다이플루오로에틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 0.17 mmol), 벤조페논 이민(92 mg, 0.51 mmol), Pd2(dba)3(31 mg, 0.03 mmol), 잔트포스(10 mg, 0.02 mmol), Cs2CO3(165 mg, 0.51 mmol)의 혼합물을 130℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, 건조하고(NaSO4), 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 4:1 → 석유 에터/에틸 아세테이트 = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(25 mg, 23.6% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 558.2.
단계 4: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-(1,1-다이플루오로에틸)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00482
다이클로로메탄(2 mL) 및 2 점적의 물 중 (±)-(트랜스)-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[4-(1,1-다이플루오로에틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(25 mg, 0.04 mmol) 및 TFA(0.5 mL, 6.71 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 N2 하에 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 메탄올(0.5 mL)에 용해시키고, 포화 NaHCO3으로 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 혼합물을 역상 제조용 HPLC(용리제: 5%-95% 메탄올 및 물)로 직접 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(14.2 mg, 81% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.75, [M+H]+ = 394.2, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.13 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.75 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.64 (d, J = 5.6Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.41 (s, 2H), 2.77 - 2.50 (m, 1H), 2.14 - 2.10 (m, 1H), 1.77 (t, J = 19.2 Hz, 1H), 1.61 - 1.58 (m, 1H), 1.44 - 1.43 (m, 1H).
실시예 46:
(±)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(모폴린-3-일)아세트아미드(화합물 61)
Figure pct00483
단계 1: 8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00484
1,4-다이옥산(20 mL) 및 물(2 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(2,000 mg, 7.77 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(2,042 mg, 9.32 mmol), Pd(dppf)Cl2(284 mg, 0.39 mmol) 및 Na2CO3(2,058 mg, 19.42 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 2:1 → 1:4)로 정제하여 8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(1.3 g, 52% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 270.1.
단계 2: (±)-tert-부틸 3-(2-(8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-2-옥소에틸)모폴린-4-카복실레이트
Figure pct00485
피리딘(2 mL) 중 8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(130 mg, 0.48 mmol) 및 2-(4-tert-부톡시카보닐모폴린-3-일)아세트산(142 mg, 0.58 mmol)의 용액에 인 옥시클로라이드(369 mg, 2.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 3:1 → 1:2)로 정제하여 (±)-tert-부틸 3-[2-[[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-2-옥소-에틸]모폴린-4-카복실레이트(130 mg, 48% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 497.2.
단계 3: (±)-tert-부틸 3-(2-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-2-옥소에틸)모폴린-4-카복실레이트
Figure pct00486
1,4-다이옥산(4 mL) 중 (±)-tert-부틸 카밤에이트(259 mg, 2.21 mmol), tert-부톡시나트륨(234 mg, 2.43 mmol), tert-부틸 3-[2-[[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-2-옥소-에틸]모폴린-4-카복실레이트(110 mg, 0.22 mmol), Pd2(dba)3(20 mg, 0.02 mmol) 및 브렛포스(24 mg, 0.04 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터:에틸 아세테이트, 3:1 → 1:3)로 정제하여 (±)-tert-부틸 3-[2-[[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-2-옥소-에틸]모폴린-4-카복실레이트(36 mg, 23% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 578.3.
단계 4: (±)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(모폴린-3-일)아세트아미드
Figure pct00487
0.5 mL의 1,4-다이옥산 중 4 M HCl 중 (±)-tert-부틸 3-[2-[[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-2-옥소-에틸]모폴린-4-카복실레이트(36 mg, 0.06 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 역상 HPLC(아세토니트릴 10-47%/물 중 0.05% 암모니아)로 정제하여 (±)-N-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-모폴린-3-일-아세트아미드(7.1 mg, 30.2% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.490, [M+H]+ = 378.2, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.62 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.45 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.35 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.33(s, 2H), 3.71-3.63 (m, 2H), 3.22-3.20 (m, 1H), 3.12-3.10 (m, 2H), 2.78-2.75 (m, 2H), 2.41-2.40 (m, 2H), 2.30 (s, 3H).
실시예 47:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 62)
Figure pct00488
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00489
1,4-다이옥산(4 mL) 및 물(0.4 mL) 중 (±)-트랜스-8-클로로-3-(2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일보론산(240 mg, 0.76 mmol), 5-브로모-4-메틸-이소티아졸(162 mg, 0.91 mmol), Pd(dppf)Cl2(28 mg, 0.04 mmol) 및 Na2CO3(161 mg, 1.52 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 5:1 → 1:5)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(190 mg, 48% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 369.0.
단계 2: (±)-트랜스- 2-시아노-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00490
DMF(2 mL) 및 톨루엔(2 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(90 mg, 0.24 mmol), 벤조페논 이민(88 mg, 0.49 mmol), Pd2(dba)3(45 mg, 0.05 mmol), 잔트포스(56 mg, 0.10 mmol) 및 Cs2CO3(161 mg, 0.49 mmol)의 혼합물을 130℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 물(10 mL)로 희석하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(20 mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 3:1 → 1:2)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(36 mg, 20% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 514.2.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00491
아세토니트릴(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(36 mg, 0.05 mmol)의 용액에 1 점적의 TFA 및 1 점적의 물을 첨가하였다. 생성된 용액을 20분 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축하고, 역상 제조용 HPLC(아세토니트릴 10-47%/물 중 0.05% 암모니아)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(8 mg, 47% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.759, [M+H]+ = 350.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.34 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.74 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.52 (s, 2H), 6.08 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 2.78-2.74 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.62-1.60 (m,1H), 1.46-1.42 (m, 1H).
실시예 48:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[6-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 63)
Figure pct00492
단계 1: 5-브로모-2-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-피리딘
Figure pct00493
DMF(20 mL) 중 5-브로모-4-에틸-피리딘-2-올(1.0 g, 4.9 mmol), 세슘 카본에이트(2.4 g, 7.4 mmol) 및 나트륨 클로로다이플루오로아세테이트(760 mg, 5.0 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 냉각된 혼합물을 물(30 mL)로 희석하고, 에터(25 mL)로 추출하였다. 유기 상을 물 및 이어서 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 주요 이성질체 O-알킬화된 생성물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헥산 중 0-10% 에틸 아세테이트)로 단리하여 표제 화합물(130 mg, 8.5% 수율)을 무색 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 253.1.
단계 2: 2-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct00494
비스(피나콜라토)다이보란(220 mg, 0.9 mmol), 칼륨 아세테이트(100.0 mg, 1.0 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(40 mg, 0.05 mmol)를 1,4-다이옥산(10 mL) 중 5-브로모-2-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-피리딘(110 mg, 0.4 mmol)의 용액에 Ar 대기 하에 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 0-100% 수율)로 정제하여 2-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(150 mg, 63% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 300.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[6-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00495
(±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.3 mmol), Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol) 및 K3PO4(120 mg, 0.6 mmol)의 혼합물을 1,4-다이옥산(6 mL) 및 물(0.6 mL) 중 2-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(105 mg, 0.4 mmol)의 용액에 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄, 1:3) 상에서 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[6-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 53% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 443.1.
단계 4: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[6-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00496
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(265.0 mg, 2.3 mmol), (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[6-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.23 mmol), Pd2(dba)3(40 mg, 0.04 mmol), NaOtBu(55.0 mg, 0.6 mmol) 및 tBu-브렛포스(49.0 mg, 0.09 mmol)의 혼합물을 120℃에서 1시간 동안 N2 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하고, 잔사를 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 0 → 50% 수율) 및 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[6-(다이플루오로메톡시)-4-에틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(3 mg, 3.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.950, [M+H]+ = 424.2, 방법 = F; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ : 9.26 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.58 (t, J = 73.2 Hz, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.67 (s, 1H), 2.71 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.68-2.65 (m, 1H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.63-1.52 (m, 2H), 1.15 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 49:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[4-(2-하이드록시에틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 65)
Figure pct00497
단계 1: 메틸 2-(3-브로모-4-피리딜)아세테이트
Figure pct00498
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 3-브로모-4-메틸피리딘(1.0 g, 5.8 mmol) 및 다이메틸 카본에이트(950.0 mg, 10.6 mmol)의 빙랭 용액에 LiHMDS(THF 중 1.0 M, 9 mL, 9 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 5시간 동안 교반한 후, 추가 LiHMDS(THF 중 1.0 M, 6 mL, 6 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl 용액의 첨가에 의해 급랭시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트 = 1:3)로 정제하여 메틸 2-(3-브로모-4-피리딜)아세테이트(1.2 g, 85% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 231.1.
단계 2: 2-(3-브로모-4-피리딜)에탄올
Figure pct00499
메틸 알코올(10 mL) 중 메틸 2-(3-브로모-4-피리딜)아세테이트(800 mg, 3.5 mmol)의 빙랭 용액에 NaBH4(264.0 mg, 6.9 mmol)를 여러 분획으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 1:1)로 정제하여 2-(3-브로모-4-피리딜)에탄올(550 mg, 78% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 203.1.
단계 3: 2-[3-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-4-피리딜]에탄올
Figure pct00500
2-(3-브로모-4-피리딜)에탄올(300 mg, 1.5 mmol), Pd(dppf)Cl2(120 mg, 0.16 mmol), 나트륨 아세테이트(300 mg, 3.7 mmol) 및 K3PO4(600 mg, 2.8 mmol)를 아세토니트릴(15 mL) 및 물(2 mL) 중 8-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린-3-아민(800 mg, 2.6 mmol)의 용액에 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 30% 메탄올)로 정제하여 2-[3-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-4-피리딜]에탄올(400 mg, 84% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 300.1.
단계 4: 6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00501
다이클로로메탄(50 mL) 중 2-[3-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-4-피리딜]에탄올(400.0 mg, 1.3 mmol), tert-부틸다이메틸클로로실란(2.0 g, 13.3 mmol) 및 트라이에틸아민(3.0 g, 29.7 mmol)의 혼합물을 밤새 환류하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 2:1 → 1:1)로 정제하여 6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(350 mg, 62% 수율)을 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 415.2.
단계 5: (±)-트랜스-N-[6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00502
옥살릴 클로라이드(350 mg, 2.8 mmol)를 다이클로로메탄(1 mL) 중 트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(200 mg, 1.8 mmol)의 현탁액에 0℃에서 적가하고, 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온에서 농축하여 다이클로로메탄 및 과량의 옥살릴 클로라이드를 제거하였다. 잔사를 다이클로로메탄(1 mL)에 현탁하고, 다이클로로메탄(2 mL) 중 6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(360 mg, 0.87 mmol), 피리딘(5.1 mL, 63.2 mmol)의 혼합물에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 추가로 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄(100 mL)으로 희석하고, H2O(50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에터/에틸 아세테이트, 1:1 → 1:2)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(350 mg, 63% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 508.1.
단계 6: (±)-tert-부틸 N-[6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00503
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(330 mg, 0.65 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.5 g, 12.8 mmol), Pd2(dba)3(120 mg, 0.1300 mmol), 브렛포스(130 mg, 0.24 mmol) 및 t-BuONa(170 mg, 1.7 mmol)의 혼합물을 90℃에서 N2 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 1:1)로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(220 mg, 52% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 588.1.
단계 7: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[4-(2-하이드록시에틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00504
다이클로로메탄(10 mL) 중 (±)- tert-부틸 N-[6-[4-[2-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시에틸]-3-피리딜]-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(200 mg, 0.34 mmol) 및 TFA(10 mL, 134.6 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[4-(2-하이드록시에틸)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(82 mg, 65% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.409, [M+H]+ = 374.2, 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.26 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.49 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.70 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 3.70 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.94 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.70-2.61 (m, 1H), 2.17-2.06 (m, 1H), 1.66-1.49 (m, 2H).
실시예 50:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 66)
Figure pct00505
단계 1: (1S,2S)-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00506
1,4-다이옥산(3 mL) 중 (1S,2S)-N-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(130 mg, 0.381 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(148 mg, 0.572 mmol), 칼륨 아세테이트(112 mg, 1.14 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(28.2 mg, 0.038 mmol)의 혼합물을 마이크로파에서 130℃에서 20분 동안 가열하여 (8-클로로-3-((1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)보론산을 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 309.0.
3-브로모-4-에틸피리딘(106 mg, 0.574 mmol) 및 물(0.5 mL, 30 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 생성물을 마이크로파에서 140℃에서 2시간 동안 가열하였다. 유기 층을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 → 7% 메탄올)로 정제하여 (1S,2S)-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(120 mg, 84.8% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 370.0.
단계 2: tert-부틸 (6-(4-에틸피리딘-3-일)-3-((1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00507
1,4-다이옥산(5 mL) 중 (1S,2S)-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(120 mg, 0.325 mmol), tert-부틸 카밤에이트(194 mg, 1.622 mmol), Pd2(dba)3(15 mg, 0.016 mmol), 브렛포스(9.168 mg, 0.016 mmol) 및 tBuONa(47 mg, 0.0.487 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 70℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 → 8% 메탄올)로 정제하여 표제 화합물(74 mg, 50.6% 수율)을 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 451.0.
단계 3: (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00508
다이클로로메탄(4 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.5 mL) 중 tert-부틸-(6-(4-에틸피리딘-3-일)-3-((1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(74 mg, 0.164 mmol)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(9.3 mg, 15.8% 수율)를 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 2.808, [M+H]+ = 351.1, 방법 = T. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.80 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.39 - 8.35 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.53 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 5.04 - 4.81 (m, 1H), 2.62 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.26 (dq, J = 14.1, 7.1 Hz, 1H), 1.73- 1.59 (m, 1H), 1.17 (ddt, J = 13.1, 9.8, 6.7 Hz, 1H), 1.13- 1.06 (m, 3H).
실시예 51:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 67)
Figure pct00509
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00510
1,4-다이옥산(4 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(150 mg, 0.428 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(166 mg, 0.642 mmol), 칼륨 아세테이트(126 mg, 1.28 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(31.6 mg, 0.043 mmol)의 혼합물을 마이크로파에서 130℃에서 45분 동안 가열하여 (8-클로로-3-((트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)보론산을 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 316.0.
이어서, 물(2.14 mL, 2.139 mmol) 중 3-브로모-4-에틸피리딘(143 mg, 0.77 mmol) 및 나트륨 카본에이트(1 mol/L)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로파에서 80℃에서 70분 동안 가열하였다. 유기 층을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 → 7% 메탄올)로 정제하여 (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(141 mg, 87.4% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 377.0.
단계 2: (±)-tert-부틸 (3-((트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00511
1,4-다이옥산(5 mL) 중 (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(141 mg, 0.374 mmol), tert-부틸 카밤에이트(224 mg, 1.871 mmol), Pd2(dba)3(34.2 mg, 0.037 mmol), 브렛포스(21.14 mg, 0.037 mmol) 및 tBuONa(71.9 mg, 0.748 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 → 8% 메탄올)로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(150 mg, 88% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 458.0.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00512
다이클로로메탄(3 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.3 mL) 중 (±)-tert-부틸 (3-((트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(150 mg, 0.327 mmol)의 혼합물을 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 트랜스-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(16.8 mg, 14.3% 수율)를 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 2.999, [M+H]+ = 358.1, 방법 = T. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.10 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.40 - 8.34 (m, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.38 (s, 2H), 2.80 - 2.72 (m, 1H), 2.61 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.13 (ddd, J = 9.3, 6.1, 4.3 Hz, 1H), 1.59 (ddd, J = 8.6, 6.0, 4.4 Hz, 1H), 1.43 (ddd, J = 9.3, 5.9, 4.4 Hz, 1H), 1.09 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 52:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 68)
Figure pct00513
단계 1: (±)-시스-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00514
1,4-다이옥산(2 mL) 중 (±)-시스-N-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(125 mg, 0.357 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(139 mg, 0.535 mmol), 칼륨 아세테이트(105 mg, 1.07 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(26.4 mg, 0.0357 mmol)의 혼합물을 마이크로파에서 130℃에서 45분 동안 가열하여 (8-클로로-3-((시스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)보론산을 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 316.0.
이어서, 물(1.71 mL, 1.71 mmol) 중 3-브로모-4-에틸피리딘(127 mg, 0.685 mmol) 및 나트륨 카본에이트(1 M)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로파에서 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 유기 층을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0 → 10% 메탄올)로 정제하여 (±)-(시스-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(81.5 mg, 63.2% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 377.0.
단계 2: (±)-tert-부틸 (3-((시스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00515
1,4-다이옥산(4.5 mL) 중 (±)-(시스-N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(81.5 mg, 0.216 mmol), tert-부틸 카밤에이트(129 mg, 1.08 mmol), Pd2(dba)3(9.90 mg, 0.0108 mmol), 브렛포스(6.11 mg, 0.0108 mmol) 및 tBuONa(31.2 mg, 0.324 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(30 mL x 2)으로 추출하였다. 유기 추출물을 물(20 mL), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 표제 화합물을 수득하였다(96 mg, 97.0% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 458.0.
단계 3: (±)-시스-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00516
다이클로로메탄(3 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.3 mL) 중 (±)-tert-부틸 (3-((시스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(96 mg, 0.210 mmol)의 혼합물을 25℃에서 50분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-(시스-N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(3.6 mg, 4.5% 수율)를 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 2.745, [M+H]+ = 358.2, 방법 = T. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.06 (d, J = 20.0 Hz, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 0.5 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.38 (dt, J = 9.0, 4.5 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.37 (s, 2H), 2.62 (dt, J = 15.0, 7.5 Hz, 3H), 2.30 - 2.22 (m, 1H), 1.51 - 1.40 (m, 2H), 1.09 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 53:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 69)
Figure pct00517
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00518
1,4-다이옥산(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(125 mg, 0.571 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(222 mg, 0.856 mmol), 칼륨 아세테이트(168 mg, 1.711 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(42.2 mg, 0.0571 mmol)의 혼합물을 마이크로파에서 130℃에서 45분 동안 가열하여 (±)-(8-클로로-3-((트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)보론산을 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 316.0.
이어서, 물(2.85 mL, 2.852 mmol) 중 5-브로모-4-메틸피콜리노니트릴(168 mg, 0.856 mmol) 및 나트륨 카본에이트(1 mol/L)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로파에서 90℃에서 55분 동안 가열하였다. 유기 층을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5 → 9% 메탄올)로 정제하여 (±)-(트랜스-N-(8-클로로-6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(187 mg, 86.5% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 388.0.
단계 2: (±)-tert-부틸 (6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)-3-((트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00519
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-(트랜스-N-(8-클로로-6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(160 mg, 0.413 mmol), tert-부틸 카밤에이트(247 mg, 2.063 mmol), Pd2(dba)3(37.8 mg, 0.041 mmol), 브렛포스(23.3 mg, 0.041 mmol) 및 tBuONa(59.5 mg, 0.619 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 80℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5 → 8% 메탄올)로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(45 mg, 23.3% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 469.0.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00520
다이클로로메탄(4 mL) 중 (±)-tert-부틸 (6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)-3-((트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(45 mg, 0.096 mmol) 및 TFA(0.3 mL)의 혼합물을 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(16.5 mg, 45.2% 수율)를 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 4.401, [M+H]+ = 369.1, 방법 = T. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.06 (d, J = 20.0 Hz, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 0.5 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.38 (dt, J = 9.0, 4.5 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.37 (s, 2H), 2.62 (dt, J = 15.0, 7.5 Hz, 3H), 2.30 - 2.22 (m, 1H), 1.51 - 1.40 (m, 2H), 1.09 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 54:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(6-시아노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 70)
Figure pct00521
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00522
1,4-다이옥산(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(98 mg, 0.279 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(109 mg, 0.419 mmol), 칼륨 아세테이트(82.3 mg, 0.839 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(20.7 mg, 0.028 mmol)의 혼합물을 마이크로파에서 130℃에서 45분 동안 가열하여 (±)-(8-클로로-3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)보론산을 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 316.0.
이어서, 7-브로모-8-메틸피리도[2,3-b]피라진(93.9 mg, 0.419 mmol) 및 물 중 나트륨 카본에이트(1 M)(1.398 mL, 1.398 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로파에서 90℃에서 55분 동안 가열하였다. 유기 층을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5 → 9% 메탄올)로 정제하여 (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(73 mg, 55.3% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 415.0.
단계 2: (±)-tert-부틸 (3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00523
1,4-다이옥산(4 mL) 중 (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(67 mg, 0.1615 mmol), tert-부틸 카밤에이트(96.5 mg, 0.807 mmol), Pd2(dba)3(14.8 mg, 0.016 mmol), 브렛포스(9.12 mg, 0.016 mmol) 및 tBuONa(23.3 mg, 0.242 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 80℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(다이클로로메탄 중 0.5 → 8% 메탄올)로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(19 mg, 23.7% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 496.0.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00524
다이클로로메탄(4 mL) 및 TFA(0.3 mL) 중 (±)-tert-부틸 (3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(19 mg, 0.038 mmol)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 역상 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(4.2 mg, 28% 수율)를 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 3.847, [M+H]+ = 396.1, 방법 = T. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.14 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 9.17 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 9.14 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.71 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.47 (s, 2H), 2.82 - 2.73 (m, 4H), 2.14 (ddd, J = 9.3, 6.1, 4.3 Hz, 1H), 1.59 (ddd, J = 8.6, 6.0, 4.5 Hz, 1H), 1.43 (ddd, J = 9.2, 5.9, 4.4 Hz, 1H).
실시예 55:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 109)
Figure pct00525
단계 1: N-(2,4-다이메톡시벤질)-4-요오도-5-메틸피리딘-2-아민
Figure pct00526
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-플루오로-4-요오도-5-메틸피리딘(1.0 g, 4.2 mmol), 2,4-다이메톡시벤질아민(2.0 g, 12.6 mmol) 및 DIEA(1.6 g, 12.6 mmol)의 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 Ar 기체 하에 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(바이오티지(Biotage), 20 g 컬럼, PE/EA = 5:1)로 정제하여 N-[(2,4-다이메톡시페닐)메틸]-4-요오도-5-메틸-피리딘-2-아민(1.0 g, 61% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 250.0.
단계 2: 4-요오도-5-메틸피리딘-2-아민
Figure pct00527
다이클로로메탄(10 mL) 중 N-[(2,4-다이메톡시페닐)메틸]-4-요오도-5-메틸-피리딘-2-아민(1.0 g, 2.6 mmol)의 혼합물에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(5 mL)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 농축하였다. MeOH 중 7 N NH3 용액을 첨가하여 혼합물을 pH 8로 조정하고, 혼합물을 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(PE/EA = 2:1)로 정제하여 4-요오도-5-메틸-피리딘-2-아민(590 mg, 97% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 235.7.
단계 3: 7-요오도-6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘
Figure pct00528
에탄올(4 mL) 및 물(1 mL) 중 4-요오도-5-메틸-피리딘-2-아민(1.0 g, 4.3 mmol), 클로로아세트알데하이드(0.42 mL, 6.41 mmol) 및 NaHCO3(430 mg, 5.13 mmol)의 혼합물을 100℃까지 가열하고, 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하였다. 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH = 20/1)로 정제하여 생성물 7-요오도-6-메틸-이미다조[1,2-a]피리딘(1.0 g, 90% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 259.7.
단계 4: 8-클로로-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00529
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 7-요오도-6-메틸-이미다조[1,2-a]피리딘(150 mg, 0.58 mmol), 8-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린-3-아민(442 mg, 1.45 mmol), Pd(dppf)Cl2(42 mg, 0.06 mmol), Na2CO3(183 mg, 1.74 mmol) 및 물(1 mL)의 용액을 3시간 동안 N2 하에 65℃까지 가열하였다. 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(20 mL x 3), 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH = 15:1)로 정제하여 8-클로로-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)이소퀴놀린-3-아민(180 mg, 77% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 309.7.
단계 5: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00530
다이클로로메탄(5 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드(0.02 mL) 중 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(120 mg, 1.08 mmol)의 용액에 에탄다이오일 다이클로라이드(274 mg, 2.16 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하여 조질 생성물 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(130 mg, 1 mmol, 93% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 다이클로로메탄(15 mL) 및 피리딘(0.14 mL, 1.75 mmol) 중 8-클로로-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)이소퀴놀린-3-아민(180 mg, 0.58 mmol)의 용액에 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(113 mg, 0.87 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 물(10 mL)을 첨가하였다. 이어서, 1 N HCl을 첨가하여 혼합물을 pH 6으로 조정하였다. 혼합물을 DCM(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 염수(20 mL x 1)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(PE/EA = 2:1)로 정제하여 생성물 트랜스-N-[8-클로로-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 85% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 402.7.
단계 6: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00531
톨루엔(0.5 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드(0.5 mL) 중 Pd2(dba)3(45 mg, 0.05 mmol), 잔트포스(57 mg, 0.1 mmol), Cs2CO3(243 mg, 0.75 mmol), (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.25 mmol) 및 tert-부틸 카밤에이트(291 mg, 2.49 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 밀봉된 관에서 130℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 PE 및 에틸 아세테이트로 세척하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(컬럼 엑스브리지(Xbridge) 21.2 x 250 mm c18, 10 μm, 이동상 A: 물(10 mmol/LNH4HCO3), B: ACN)로 정제하여 생성물 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(6-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-7-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(5 mg, 5.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.646, [M+H]+ = 383.7. 방법 = C; 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 9.26 (s,1H), 8.37 (s,1H), 8.30 (s,1H), 7.82 (s,1H), 7.59 (s,1H), 7.45 (s,1H), 7.04 (s,1H), 6.74 (s,1H), 2.66-2.64 (m,1H), 2.27 (s,3H), 2.15-2.10 (m,1H), 1.61-1.57 (m,2H).
실시예 56:
5-(8-아미노-3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-N,1-다이메틸-1H-피라졸-3-카복스아미드(화합물 110)
Figure pct00532
단계 1: 5-브로모-N,1-다이메틸-1H-피라졸-3-카복스아미드
Figure pct00533
MeOH(10 mL, 12.87 mmol) 중 에틸 5-브로모-1-메틸-피라졸-3-카복실레이트(300 mg, 1.29 mmol) 및 메탄아민의 혼합물을 80℃까지 가열하고, 밤새 교반하였다. 반응 용액을 농축하여 생성물 5-브로모-N,1-다이메틸-피라졸-3-카복스아미드(280 mg, 99% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 218.2.
단계 2: 5-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-N,1-다이메틸-1H-피라졸-3-카복스아미드
Figure pct00534
밀봉된 관에 5-브로모-N,1-다이메틸-피라졸-3-카복스아미드(200 mg, 0.92 mmol), 8-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린-3-아민(698 mg, 2.29 mmol), Pd(dppf)Cl2(67 mg, 0.09 mmol), K3PO4(193 mg, 0.92 mmol) 및 NaOAc(225 mg, 2.75 mmol), 아세토니트릴(5 mL), 물(1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2로 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH = 15:1)로 정제하여 5-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-N,1-다이메틸-피라졸-3-카복스아미드(290 mg, 81% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 316.7.
단계 3: (±)-5-(8-클로로-3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-N,1-다이메틸-1H-피라졸-3-카복스아미드
Figure pct00535
다이클로로메탄(5 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드(0.02 mL) 중 트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(250 mg, 2.25 mmol)의 용액에 에탄다이오일 다이클로라이드(571 mg, 4.5 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 로타뱁(rotavap)으로 농축하여 조질 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(290 mg, 99% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 다이클로로메탄(15 mL) 및 피리딘(0.18 mL, 2.19 mmol) 중 5-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-N,1-다이메틸-피라졸-3-카복스아미드(230 mg, 0.73 mmol)의 용액에 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(141 mg, 1.09 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 물(10 mL)을 첨가하였다. 1 N HCl을 첨가하여 혼합물을 pH 6으로 조정하였다. 혼합물을 DCM(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 층을 염수(20 mL x 1)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH = 15:1)로 정제하여 생성물 (±)-5-[8-클로로-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-N,1-다이메틸-피라졸-3-카복스아미드(280 mg, 94% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 409.7.
단계 4: 5-(8-아미노-3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-N,1-다이메틸-1H-피라졸-3-카복스아미드
Figure pct00536
톨루엔(0.5 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드(0.5 mL) 중 Pd2dba3(44 mg, 0.05 mmol), 잔트포스(56 mg, 0.1 mmol), Cs2CO3(239 mg, 0.73 mmol), 5-[8-클로로-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-N,1-다이메틸-피라졸-3-카복스아미드(100 mg, 0.24 mmol) 및 tert-부틸 카밤에이트(286 mg, 2.45 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 밀봉된 관에서 130℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, EA로 희석하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔사를 PE 및 에틸 아세테이트로 세척하여 조질 생성물을 수득하고, 제조용 HPLC(컬럼 엑스브리지 21.2 x 250 mm c18, 10 μm, 이동상 A: 물(10 mmol/L NH4HCO3), B: CAN)로 정제하여 생성물 (±)-5-[8-아미노-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-N,1-다이메틸-피라졸-3-카복스아미드(17 mg, 17.8% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.543, [M+H]+ = 390.7. 방법 = C; 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 9.25 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.15 (s,1H), 6.84 (s,1H), 6.80 (d, J = 1.2 Hz,1H), 3.99 (s, 3H), 2.93 (s, 3H), 2.65-2.62 (m, 1H), 2.15-2.10 (m, 1H), 1.62-1.48 (m, 2H).
실시예 57:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 113)
Figure pct00537
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00538
N,N-다이메틸포름아미드(14 mL) 중 (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(300 mg, 0.68 mmol), Pd(PPh3)4(75 mg, 0.06 mmol) 및 Zn(CN)2(44 mg, 0.38 mmol)의 혼합물을 130℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 제조용 역상 HPLC(C-18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(190 mg, 24% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 388.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00539
N,N-다이메틸포름아미드(7 mL) 및 톨루엔(7 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(190 mg, 0.16 mmol), Pd2(dba)3(28 mg, 0.03 mmol), 잔트포스(37 mg, 0.06 mmol), Cs2CO3(107 mg, 0.33 mmol) 및 벤조페논 이민(100 mg, 0.55 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 130℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. EtOAc(200 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 H2O(3 x 50 mL), 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 제조용 역상 HPLC(C-18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(36 mg, 17% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 533.3.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00540
아세토니트릴(10 mL) 및 물(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(36 mg, 0.04 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NH4OH(수성, 37%)로 pH 7 내지 8까자 중화시켰다. 혼합물을 농축하고, 제조용 역상 HPLC(C-18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(11 mg, 72% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.593, [M+H]+ = 369.1, 방법 = G. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.33 (s, 1H), 9.57 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.44 (s, 2H), 7.40 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 2.78-2.75 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.19-2.14 (m, 1H), 1.64-1.60 (m, 1H), 1.46-1.42 (m, 1H).
실시예 58:
트랜스-N-[8-아미노-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 115)
Figure pct00541
단계 1: 7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00542
1,4-다이옥산(160 mL), 물(40 mL) 중 7-브로모-8-클로로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(3.6 g, 9.39 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(2.5 g, 11.41 mmol), Pd(PPh3)4(750 mg, 0.65 mmol), K2CO3(3.8 g, 27.54 mmol)의 혼합물을 70℃에서 Ar 하에 23시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(500 mL)를 첨가하고, 혼합물을 염수(100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:2 → EA, PE/EA 1/2에서 Rf = 0.5)로 정제하여 7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(2.9 g, 89% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 348.0.
단계 2: (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00543
(COCl)2(3.0 g, 23.62 mmol)를 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(1.2 g, 10.8 mmol)의 현탁액에 0℃에서 적가하고, 혼합물을 0℃에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온에서 증발시켜 미반응된 (COCl)2를 제거하였다. 잔사를 DCM(5 mL)에 현탁하고, 다이클로로메탄(50 mL) 중 7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(2.9 g, 8.32 mmol) 및 피리딘(10 mL, 123.64 mmol)의 혼합물에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 추가로 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 DCM(100 mL)을 첨가하고, H2O(50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:1 → 1:2, PE/EA 1/1에서 Rf = 0.4)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(2.85 g, 78% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 441.0.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00544
1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(2.5 mL) 중 (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.45 mmol), 트라이메틸보록신(250 mg, 1.99 mmol), PdCl2·dppf(60 mg, 0.08 mmol) 및 K2CO3(200 mg, 1.45 mmol)의 혼합물을 80℃에서 Ar 하에 밀봉된 관에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(100 mL)를 첨가하고, 염수(30 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → 3:2 → 1:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(50 mg, 29% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 377.1.
단계 4: (±)-tert-부틸 N-[3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00545
1,4-다이옥산(2 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(25 mg, 0.07 mmol), tert-부틸 카밤에이트(75 mg, 0.64 mmol), Pd2dba3(20 mg, 0.02 mmol), 브렛포스(20 mg, 0.04 mmol) 및 t-BuONa(THF 중 2 M, 0.08 mL, 0.16 mmol)의 혼합물을 90℃에서 Ar 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 에틸 아세테이트(30 mL)를 잔사에 첨가하고, 포화 NH4Cl(10 mL)로 세척하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 제조용 TLC(EA:PE = 3:2)로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(7 mg, 23.1% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 458.2.
단계 5: (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00546
2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.5 mL) 및 다이클로로메탄(2 mL) 중 (±)-tert-부틸 N-[3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(7 mg, 0.02 mmol)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시켰다. 잔사를 MeOH(1 mL)에 용해시키고, 7 N NH3/MeOH를 pH 9 내지 10까지 첨가하고, 이어서 플래시 컬럼 크로마토그래피(C18, NH4HCO3/MeOH/H2O)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-메틸-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(3 mg, 54.9% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.70, [M+H]+ = 358.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.31 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 2.66-2.62 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.13-2.08 (m, 1H), 1.98 (s, 3H), 1.61-1.52 (m, 2H).
실시예 59:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 116)
Figure pct00547
단계 1: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00548
[8-클로로-3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산 및 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(5 mL, 약 0.43 mmol)의 반응 혼합물에 3-브로모-N,N-다이메틸-피리딘-4-아민(150 mg, 0.75 mmol), PdCl2·dppf(50 mg, 0.07 mmol), K2CO3(150 mg, 1.09 mmol) 및 물(1.5 mL)을 첨가하였다. 이어서, 반응 생성물을 80℃에서 Ar 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(40 mL)를 첨가하고, 염수(15 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:DCM:EA = 1:1:1 → 1:1:0)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 48% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 392.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00549
N,N-다이메틸포름아미드(2 mL) 및 톨루엔(2 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 0.20 mmol), 벤조페논 이민(210 mg, 1.16 mmol), Pd2dba3(40 mg, 0.04 mmol), 잔트포스(50 mg, 0.09 mmol) 및 Cs2CO3(120 mg, 0.37 mmol)의 혼합물을 130℃에서 Ar 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 에틸 아세테이트(50 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 염수(15 mL)로 세척하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 크로마토그래피(PE:EA = 1:1 → 1:3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(45 mg, 41% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 537.2.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00550
2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL), 다이클로로메탄(2 mL) 및 물(0.5 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(45 mg, 0.08 mmol)의 혼합물을 25℃에서 20분 동안 교반하였다. 잔사를 MeOH(1 mL)에 용해시켰다. 혼합물에 7 N NH3/MeOH를 pH 9 내지 10까지 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 농축하였다. 잔사를 제조용 TLC(EA:MeOH = 20:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[4-(다이메틸아미노)-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(18.8 mg, 60% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.64, [M+H]+ = 373.2, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.21 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.17 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 2.77 (s, 6H), 2.65-2.62 (m, 1H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.62-1.52 (m, 2H).
실시예 60:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1-메틸-4-옥소-1,4-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 117)
Figure pct00551
단계 1: 2-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-1-메틸피리딘-4(1H)-온
Figure pct00552
밀봉된 관에 (3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)보론산(371 mg, 1.67 mmol), 2-클로로-1-메틸-피리딘-4-온(200 mg, 1.39 mmol), Pd(dppf)Cl2(101 mg, 0.14 mmol), K3PO4(293 mg, 1.39 mmol), NaOAc(342 mg, 4.18 mmol), 아세토니트릴(20 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2에 의해 2분 동안 발포시키고, 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(DCM/MeOH = 20/1)로 정제하여 2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-1-메틸-피리딘-4-온(220 mg, 55% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M-56]+ = 286.0.
단계 2: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(1-메틸-4-옥소-1,4-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00553
다이클로로메탄(15 mL) 중 2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-1-메틸-피리딘-4-온(210 mg, 0.74 mmol) 및 피리딘(0.18 mL, 2.2 mmol)의 용액에 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(238 mg, 1.84 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 농축하고, 플래시 크로마토그래피(PE/EA = 2:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1-메틸-4-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(160 mg, 40% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M-56]+ = 379.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1-메틸-4-옥소-1,4-다이하이드로피리딘-2-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00554
DMF(3 mL) 및 톨루엔(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1-메틸-4-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 0.18 mmol), 잔트포스(42 mg, 0.07 mmol), Pd2dba3(33 mg, 0.04 mmol) 및 Cs2CO3(180 mg, 0.55 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 130℃까지 가열하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1-메틸-4-옥소-2-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(11.4 mg, 17% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.310, [M+H]+ = 360.1, 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.15 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.54-6.51 (m, 3H), 6.14 (dd, J = 2.8, 7.6 Hz, 1H), 6.02 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.77-2.73 (m, 1H), 2.17-2.12(m, 1H), 1.62-1.57 (m, 1H), 1.45-1.41 (m, 1H).
실시예 61:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(3-(하이드록시메틸)-5-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 118)
Figure pct00555
단계 1: 4-브로모-3-(에톡시메틸)-5-메틸-1H-피라졸
Figure pct00556
N,N-다이메틸포름아미드(15 mL) 중 에틸 5-메틸-1H-피라졸-3-카복실레이트(4.0 g, 25.95 mmol) 및 NBS(5.08 g, 28.54 mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(200 mL)에 용해시키고, 유기물을 포화 염수 용액으로 세척하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조한 후(Na2SO4), 농축 건조하였다. 이어서, 조 물질을 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE/EA = 3/2)로 정제하여 에틸 4-브로모-5-메틸-1H-피라졸-3-카복실레이트(4.8 g, 79% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 234.9.
단계 2: 4-브로모-3-(에톡시메틸)-5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00557
다이클로로메탄(50 mL) 중 TsOH-H2O(490 mg, 2.57 mmol) 및 에틸 4-브로모-5-메틸-1H-피라졸-3-카복실레이트(3.0 g, 12.87 mmol)의 교반된 용액에 3,4-다이하이드로-2H-피란(2.17 g, 25.74 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE/EA = 4/1)로 정제하여 생성물 에틸 4-브로모-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-3-카복실레이트(3.4 g, 83% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 5.52 (dd, J = 2.8, 9.6 Hz, 1H), 4.38 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.01-3.96 (m, 1H), 3.77-3.71 (m, 1H), 2.42-2.35 (m, 4H), 2.14-2.10 (m, 1H), 1.99-1.94 (m, 1H), 1.82-1.62 (m, 3H), 1.40 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 3: 8-클로로-6-(3-(에톡시메틸)-5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00558
밀봉된 관에 (3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)보론산(252 mg, 1.14 mmol), 에틸 4-브로모-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-3-카복실레이트(300 mg, 0.95 mmol), Pd(dppf)2Cl2(69 mg, 0.09 mmol), K3PO4(199 mg, 0.95 mmol), NaOAc(232 mg, 2.84 mmol), 아세토니트릴(5 mL) 및 물(0.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2에 의해 20분 동안 발포시키고, 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 제조용 TLC(PE/EA = 1:1)로 정제하여 에틸 4-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-3-카복실레이트(320 mg, 75% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 415.1.
단계 4: (4-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)메탄올
Figure pct00559
메틸 알코올(15 mL) 중 에틸 4-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-3-카복실레이트(310 mg, 0.75 mmol)의 혼합물에 NaBH4(282 mg, 7.47 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하고, 물(2 mL)을 첨가하여 반응을 급랭시켰다. 혼합물을 농축하고, DCM:MeOH(10:1, 10 mL)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 농축하고, 제조용 TLC(100%EA)로 정제하여 [4-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-3-일]메탄올(300 mg, 75% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 373.1.
단계 5: 6-(3-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)-8-클로로이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00560
다이클로로메탄(50 mL) 중 [4-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-3-일]메탄올(300 mg, 0.56 mmol), tert-부틸다이메틸클로로실란(849 mg, 5.64 mmol) 및 TEA(1267 mg, 12.55 mmol)의 혼합물을 밤새 환류하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(PE/EA = 2/1)로 정제하여 6-[3-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일]-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(210 mg, 72% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 488.2.
단계 6: 트랜스-N-(6-(3-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)-8-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00561
다이클로로메탄(15 mL) 및 피리딘(0.3 mL) 중 6-[3-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일]-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(200 mg, 0.41 mmol)의 용액에 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐 클로라이드(132 mg, 1.03 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 TLC(PE/EA = 3:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[6-[3-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 60% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 580.3.
단계 7: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(3-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00562
N,N-다이메틸포름아미드(1.5 mL)/톨루엔(1.5 mL) 중 (±)-트랜스-N-[6-[3-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일]-8-클로로-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(140 mg, 0.24 mmol), 잔트포스(55 mg, 0.10 mmol), Pd2dba3(44 mg, 0.05 mmol) 및 Cs2CO3(235 mg, 0.72 mmol)의 혼합물을 145℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축하고, 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 561.3.
단계 8: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(3-(하이드록시메틸)-5-메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00563
밀봉된 관에 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[3-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-5-메틸-1-테트라하이드로피란-2-일-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(60 mg, 0.11 mmol), 다이클로로메탄(5 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[3-(하이드록시메틸)-5-메틸-1H-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(9 mg, 23% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.268, [M+H]+ = 363.1, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.19 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 2.67-2.62 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.61-1.53 (m, 2H).
실시예 62:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복스아미드(화합물 119)
Figure pct00564
단계 1: (±)-트랜스-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복실산
Figure pct00565
메틸 (±)-트랜스-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복실레이트(500 mg, 3.84 mmol), 물(5 mL), 테트라하이드로퓨란(5 mL), 메틸 알코올(5 mL) 및 NaOH(700 mg, 17.5 mmol)를 바이알에 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 2 N HCl에 의해 pH 3 내지 4까지 산성화시켰다. 생성물을 에틸 아세테이트(50 mL x 2)로 추출하고, 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 (±)-트랜스-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복실산(390 mg, 87% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ : 3.40 (dd, J = 5.2, 11.6 Hz, 1H), 3.22 (dd, J = 5.6, 11.6 Hz, 1H), 1.41-1.35 (m, 2H), 0.91-0.85 (m, 1H), 0.75-0.70 (m, 1H).
단계 2: (±)-트랜스-2-(아세톡시메틸)사이클로프로판카복실산
Figure pct00566
(±)-트랜스-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복실산(390 mg, 3.36 mmol), 다이클로로메탄(10 mL) 및 아세틸 클로라이드(1 mL, 14.14 mmol)를 바이알에 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하여 (±)-트랜스-2-(아세톡시메틸)사이클로프로판카복실산(530 mg, 90% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ : 12.20 (s, 1H), 3.99 (dd, J = 6.0, 11.6 Hz, 1H), 3.83 (dd, J = 7.2, 11.6 Hz, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.59-1.50 (m, 2H), 1.04-0.99 (m, 1H), 0.92-0.87 (m, 1H).
단계 3: (±)-트랜스-2-(클로로카보닐)사이클로프로필)메틸 아세테이트
Figure pct00567
(±)-트랜스-2-(아세톡시메틸)사이클로프로판카복실산(530 mg, 3.02 mmol) 및 DCM(30 mL)을 바이알에 첨가하고, 0℃로 냉각하였다. 옥살릴 다이클로라이드(0.5 mL, 6.03 mmol) 및 이어서 N,N-다이메틸포름아미드(0.01 mL, 0.13 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여, 후속 단계에서 직접 사용되는 조질 생성물을 수득하였다.
단계 4: (±)-트랜스-2-(8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카바모일)사이클로프로필)메틸 아세테이트
Figure pct00568
8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(200 mg, 0.74 mmol), TEA(0.8 mL, 5.69 mmol) 및 DCM(5 mL)을 바이알에 첨가하고, 이어서 DCM(5 mL) 중 (±)-트랜스-2-클로로카보닐사이클로프로필)메틸 아세테이트(650 mg, 2.94 mmol)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE/EA 1:1 → 0:100)로 정제하여 (±)-트랜스-[2-[[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]카바모일]사이클로프로필]메틸 아세테이트(220 mg, 72% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 410.1.
단계 5: (±)-트랜스-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00569
밀봉된 관에 (±)-[트랜스-2-[[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]카바모일]사이클로프로필]메틸 아세테이트(210 mg, 0.51 mmol), 잔트포스(150 mg, 0.2600 mmol), Pd2(dba)3(150 mg, 0.16 mmol), Cs2CO3(500 mg, 1.54 mmol), 벤조페논 이민(600 mg, 3.31 mmol) 및 N,N-다이메틸포름아미드(10 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 N2에 의해 2분 동안 발포시키고, 이어서 130℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 100℃에서 농축하여 모든 유기 용매를 제거하였다. 메틸 알코올(20 mL)을 첨가하고, 반응 생성물을 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(PE/EA 1:1 → 0:100)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복스아미드(151 mg, 50% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 513.3.
단계 6: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00570
(±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복스아미드(150 mg, 0.25 mmol) 및 2 N HCl(5 mL, 10 mmol)을 바이알에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물의 pH를 수성 NaHCO3에 의해 pH 7까지 조정하였다. 이어서, 생성물을 DCM/MeOH = 10:1(100 mL x 2)로 추출하였다. 유기 추출물을 진공에서 농축하고, 콤비플래시 크로마토그래피(DCM/MEOH 30:1 → 15:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판카복스아미드(74 mg, 82% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. 단일 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 추가로 단리하였다. 라세미체의 LCMS (ESI): RT (분) = 1.302, [M+H]+ = 349.2, 방법 = B; 라세미체의 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.24 (s, 1H), 8.40 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 6.0, 11.2 Hz, 1H), 3.48 (dd, J = 6.8, 11.2 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.92-1.85 (m, 1H), 1.77-1.66 (m, 1H), 1.28-1.21 (m, 1H), 0.97-0.90 (m, 1H).
실시예 63:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[3-(트라이플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 122)
Figure pct00571
단계 1: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[3-(트라이플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00572
1,4-다이옥산(9 mL) 및 물(1.5 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(350 mg, 1 mmol), 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3-(트라이플루오로메틸)-1H-피라졸(300 mg, 1.14 mmol), Pd(dppf)Cl2(70 mg, 0.1 mmol), 칼륨 포스페이트(3 H2O)(660 mg, 2.48 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 이어서, 조질 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 1/13-1/1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[3-(트라이플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(230 mg, 51% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 406.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[1-테트라하이드로피란-2-일-3-(트라이플루오로메틸)피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00573
트라이플루오로아세트산(0.5 mL) 및 다이클로로메탄(15 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[3-(트라이플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.49 mmol) 및 3,4-다이하이드로-2H-피란(2.0 mL)의 용액을 밤새 가열 환류하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 이어서 조질 잔사를 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 1/5-1/3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[1-테트라하이드로피란-2-일-3-(트라이플루오로메틸)피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(230 mg, 95% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 490.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[1-테트라하이드로피란-2-일-3-(트라이플루오로메틸)피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00574
무수 N,N-다이메틸포름아미드(3.0 mL) 및 무수 톨루엔(3.0 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[1-테트라하이드로피란-2-일-3-(트라이플루오로메틸)피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.2 mmol), 벤조페논 이민(182 mg, 1.0 mmol), 잔트포스(58 mg, 0.1 mmol), Pd2(dba)3(46.0 mg, 0.05 mmol) 및 Cs2CO3(170.0 mg, 0.52 mmol)의 혼합물을 130℃에서 불활성 대기 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하여 톨루엔을 제거하고, 잔사를 에틸 아세테이트(15 mL)에 용해시켰다. 유기 혼합물을 20 mL의 염수로 세척하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축 건조하였다. 이어서, 조질 생성물을 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터, 1/3-1/1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[1-테트라하이드로피란-2-일-3-(트라이플루오로메틸)피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 57% 수율)를 황색 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 635.2.
단계 4: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[3-(트라이플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00575
메틸 알코올(2 mL) 및 4 M HCl(2 mL, 8 mmol) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-[1-테트라하이드로피란-2-일-3-(트라이플루오로메틸)피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.11 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 과량의 나트륨 바이카본에이트를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 여과하였다. 여액을 농축하고, 역상 크로마토그래피(메탄올 60%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-[3-(트라이플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(8 mg, 18.2% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다(HCl 염). LCMS (ESI): [M+H]+ = 387.1, RT(분) = 1.69, 방법 = B; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.27 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.04 (s, 1H),7.19 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 2.63-2.61 (m, 1H), 2.20-2.15(m, 1H), 1.65-1.59(m, 2H).
실시예 64:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 123)
Figure pct00576
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00577
1,4-다이옥산(8 mL) 및 물(2 mL) 중 (±)-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(400 mg, 1.27 mmol), 7-브로모-8-메틸-피리도[2,3-b]피라진(285 mg, 1.27 mmol), PdCl2·dppf(93 mg, 0.13 mmol) 및 K2CO3(525 mg, 3.8 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(300 mg, 38% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 415.2.
단계 2: (±)-tert-부틸 3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00578
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(290 mg, 0.7 mmol), tert-부틸 카밤에이트(245 mg, 2.09 mmol), Pd3(dba)2(64 mg, 0.07 mmol), 브렛포스(38 mg, 0.07 mmol) 및 Cs2CO3(684 mg, 2.1 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 Ar 기체 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:1 → PE:EA = 1:2)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(190 mg, 49% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 496.3.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00579
다이클로로메탄(2 mL) 중 (±)-tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(8-메틸피리도[2,3-b]피라진-7-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(190 mg, 0.38 mmol) 및 TFA(1 mL, 0.38 mmol)의 혼합물을 실온에서 N2 기체 하에 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 잔사를 EtOAc(10 mL)에 용해시키고, pH를 포화 NaHCO3에 의해 7 내지 8로 조정하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하고(NaSO4), 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:1 → EA:DCM = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(49.5 mg, 32% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.65, [M+H]+ = 396.2, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.15 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 9.17 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 9.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.48 (s, 2H), 2.79-2.75 (m, 3H), 2.15 -2.11 (m, 1H), 1.61 -1.59 (m, 1H), 1.44- 1.42 (m, 1H).
실시예 65:
(트랜스)-N-(8-아미노-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 124)
Figure pct00580
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00581
1,4-다이옥산(5 mL) 중 트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(400 mg, 1.14 mmol), (4R)-4-메틸옥사졸리딘-2-온(140 mg, 1.38 mmol), Pd3(dba)2(105 mg, 0.11 mmol), 잔트포스(66 mg, 0.11 mmol) 및 K3PO4(726 mg, 3.42 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 최종적으로 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(350 mg, 83% 수율. LCMS (ESI) [M+H]+ = 371.1.
단계 2: tert-부틸 3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00582
1,4-다이옥산(10 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-6-[(4R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(340 mg, 0.92 mmol), tert-부틸 카밤에이트(500 mg, 4.27 mmol), Pd3(dba)2(84 mg, 0.09 mmol), 브렛포스(50 mg, 0.09 mmol) 및 Cs2CO3(897 mg, 2.75 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 최종적으로 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(240 mg, 58% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 452.2.
단계 3: (트랜스)-N-(8-아미노-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00583
다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[(4R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(240 mg, 0.53 mmol) 및 TFA(1 mL, 0.53 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 실온에서 Ar 기체 하에 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 잔사를 EtOAc(10 mL)에 용해시키고, pH를 포화 NaHCO3에 의해 7 내지 8로 조정하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:1 → EA:DCM = 2:1)로 정제하여 표제 생성물을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT(분) = 1.56, [M+H]+ = 352.2, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.04 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.00 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.35 (s, 2H), 4.70 -4.67 (m, 1H), 4.57-4.53 (m, 1H), 4.06- 4.03 (m, 1H), 2.75-2.73 (m, 1H), 2.14 -2.10 (m, 1H), 1.60 -1.58 (m, 1H), 1.42-1.38 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 66:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(2-메틸-5-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 125)
Figure pct00584
단계 1: (1S,2S)-N-(8-클로로-6-(2-메틸-5-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00585
1,4-다이옥산(10 mL) 중 5-메틸-2-피롤리딘온(87 mg, 0.88 mmol), (1S,2S)-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(250 mg, 0.73 mmol), 잔트포스(43 mg, 0.07 mmol), Pd2(dba)3(67 mg, 0.07 mmol) 및 K3PO4(462 mg, 2.18 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:1 → EA:DCM = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(200 mg, 76% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 362.1.
단계 2: tert-부틸 3-((1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)-6-(2-메틸-5-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00586
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (1S,2S)-N-[8-클로로-6-(2-메틸-5-옥소-피롤리딘-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(170 mg, 0.47 mmol), tert-부틸 카밤에이트(550 mg, 4.69 mmol), 브렛포스(53 mg, 0.1 mmol), Pd2(dba)3(86 mg, 0.09 mmol) 및 Cs2CO3(460 mg, 1.41 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:1 → PE:EA = 1:2)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(140 mg, 59% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 443.2.
단계 3: (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(2-메틸-5-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00587
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(2-메틸-5-옥소-피롤리딘-1-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(140 mg, 0.32 mmol) 및 TFA(0.5 mL, 0.32 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 EtOAc(10 mL)에 용해시키고, pH를 포화 NaHCO3에 의해 7 내지 8까지 조정하였다. 용액을 농축하고, 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA = 1:1 → EA)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(78.2 mg, 72% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.52, [M+H]+ = 343.1, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.14 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.98 (d, J = 3.6Hz, 0.5H), 4.82-4.81 (m, 0.5H), 4.51 (d, J = 6.4Hz, 1H), 2.72- 2.61 (m, 1H), 2.59- 2.53 (m, 1H), 2.48- 2.41 (m, 1H), 2.16-2.14 (m, 1H), 1.88 -1.78 (m, 2H), 1.28-1.21 (m, 4H).
실시예 67:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-7-플루오로-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 126)
Figure pct00588
단계 1: 트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00589
1,4-다이옥산(15 mL) 중 트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(330 mg, 0.79 mmol), (4R)-4-메틸옥사졸리딘-2-온(160 mg, 1.58 mmol), CuI(151 mg, 0.79 mmol) 및 N1,N2-다이메틸에탄-1,2-다이아민(71 mg, 0.81 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 2:1)로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(290 mg, 77% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 345.0.
단계 2: tert-부틸 3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-7-플루오로-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00590
1,4-다이옥산(8 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(693 mg, 5.92 mmol), 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-[(4R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(230 mg, 0.59 mmol), Pd2(dba)3(270 mg, 0.3 mmol), 브렛포스(158 mg, 0.29 mmol) 및 Cs2CO3(576 mg, 1.77 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1: 2) 및 이어서 제조용 HPLC(용리제: 5%-95% 메탄올 및 0.8 g/L 물 중 NH4HCO3)로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(55 mg, 14% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 470.2.
단계 3: (트랜스)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00591
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-[(4R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(55 mg, 0.12 mmol) 및 TFA(0.5 mL, 0.12 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 제조용 HPLC(5-95% 메탄올 및 0.8 g/L 물 중 NH4HCO3)로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(30.6 mg, 13.7% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.65, [M+H]+ = 370.2, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.14 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.05 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.37 (s, 2H), 4.67 (t, J = 8.4Hz, 1H), 4.54-4.52 (m, 1H), 4.06 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 2.77-2.76 (m, 1H), 2.14-2.12 (m, 1H), 1.60-1.56 (m, 1H), 1.44-1.42 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 68:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 127)
Figure pct00592
단계 1: 트랜스-N-(8-클로로-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00593
1,4-다이옥산(10 mL) 중 트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(250 mg, 0.71 mmol), (4S)-4-메틸옥사졸리딘-2-온(86 mg, 0.85 mmol), K3PO4(453 mg, 2.14 mmol), 잔포스(42 mg, 0.07 mmol) 및 Pd2(dba)3(66 mg, 0.07 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 4:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(180 mg, 37% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 371.1.
단계 2: tert-부틸 3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00594
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (트랜스)-N-[8-클로로-6-[(4S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(330 mg, 0.89 mmol), tert-부틸 카밤에이트(520 mg, 4.44 mmol), 브렛포스(96 mg, 0.18 mmol), Pd2(dba)3(162 mg, 0.18 mmol) 및 Cs2CO3(870 mg, 2.67 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 기체 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1:1, PE/EA 1/1에서 Rf = 0.4)로 정제하였다. 생성물은 최종적으로 황색 고체(220 mg, 51% 수율)이다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 452.2.
단계 3: 트랜스-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00595
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[(4S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(220 mg, 0.49 mmol) 및 TFA(0.5 mL, 0.49 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 제조용 HPLC(5%-95% 메탄올 및 0.08 g/L 물 중 NH4HCO3)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(64.7 mg, 37.4% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.52, [M+H]+ = 352.1, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.03 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.00 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.35 (s, 2H), 4.70-4.67 (m, 1H), 4.57-5.54 (m, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 2.75-2.72 (m, 1H), 2.14-2.10 (m, 1H), 1.60-1.55 (m, 1H), 1.44-1.40 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 69:
((1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)
Figure pct00596
단계 1: (1S,2S)-N-(8-클로로-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00597
1,4-다이옥산(8 mL) 중 (1S,2S)-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.58 mmol), (4S)-4-메틸옥사졸리딘-2-온(71 mg, 0.7 mmol), 잔트포스(34 mg, 0.06 mmol), Pd2(dba)3(54 mg, 0.06 mmol) 및 K3PO4(369 mg, 1.74 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 4:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(140 mg, 58% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 364.1.
단계 2: tert-부틸 3-((1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미도)-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00598
1,4-다이옥산(4 mL) 중 (1S,2S)-N-[8-클로로-6-[(4S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-3-이소퀴놀일]-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(140 mg, 0.38 mmol), tert-부틸 카밤에이트(225 mg, 1.92 mmol), Pd2(dba)3(70 mg, 0.08 mmol), 브렛포스(40 mg, 0.07 mmol) 및 Cs2CO3(375 mg, 1.15 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 실리카 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(110 mg, 58% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 445.2.
단계 3: (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00599
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(1S,2S)-2-플루오로-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[(4S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(110 mg, 0.25 mmol) 및 TFA(0.5 mL, 0.25 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 포화 NaHCO3에 의해 pH를 7 내지 8로 조정하였다. 혼합물을 제조용 HPLC(5%-95% 메탄올 및 0.8 g/L 물 중 NH4HCO3)로 정제하여 표제 화합물을 갈색 고체로서 수득하였다(56.3 mg, 48.2% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.47, [M+H]+ = 345.1, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.32 (s, 2H), 5.02-5.00(m, 0.5H), 4.84-4.83 (m, 0.5H), 4.72-4.67 (m, 1H), 4.58-4.54 (m, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 2.26-2.23 (m, 1H), 1.69-1.63 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.4Hz, 3H), 1.17-1.13 (m, 1H).
실시예 70:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 130)
Figure pct00600
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00601
1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.5 mmol), 3-브로모-4-메틸-이소티아졸(107 mg, 0.6 mmol), Pd(dppf)Cl2(73 mg, 0.1 mmol) 및 K2CO3(138 mg, 1.0 mmol)의 혼합물을 100℃에서 N2 하에 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, PE 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 54% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 369.2.
단계 2: (±)-tert-부틸 3-((트랜스-)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00602
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 0.22 mmol), tert-부틸 카밤에이트(508 mg, 4.34 mmol), Pd2(dba)3(39 mg, 0.04 mmol) 및 브렛포스(46 mg, 0.09 mmol)의 혼합물을 90℃에서 N2 하에 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 잔사를 PE 중 0-50% EA로 용리하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[[(트랜스-)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 62% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 450.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00603
다이클로로메탄(2 mL) 중 (±)-tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(80 mg, 0.18 mmol)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 메탄올 중 NH3(7 M)에 의해 염기성화시켰다. 혼합물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-(트랜스-)-N-[8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(36 mg, 58% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.698, [M+H]+ = 350.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 11.12 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.81 (d, J = 0.4Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.97 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.37 (s, 2H), 2.78-2.73 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.16-2.12 (m, 1H), 1.62-1.57 (m,1H), 1.46-1.41 (m, 1H).
실시예 71:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-((R)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 131)
Figure pct00604
단계 1: 트랜스-N-(8-클로로-6-((R)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00605
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (3R)-3-하이드록시피롤리딘-2-온(129 mg, 1.28 mmol), (트랜스-)-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(300 mg, 0.86 mmol), Pd2(dba)3(83 mg, 0.09 mmol), 잔트포스(98 mg, 0.17 mmol) 및 Cs2CO3(556 mg, 1.71 mmol)의 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, DCM 중 0-20% MeOH로 용리하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-6-[(3R)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 47% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 371.1.
단계 2: 트랜스-N-(8-아미노-6-((R)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00606
1,4-다이옥산(10 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-6-[(3R)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(110 mg, 0.3 mmol), Pd2(dba)3(28 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(31 mg, 0.06 mmol), t-BuONa(192 mg, 0.59 mmol) 및 tert-부틸 카밤에이트(695 mg, 5.93 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, DCM 중 0-20% MeOH로 용리하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스-)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[(3R)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(62 mg, 28% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 452.0.
단계 3: 트랜스-N-(8-아미노-6-((R)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00607
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스-)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[(3R)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50 mg, 0.11 mmol)의 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 메탄올 중 NH3(7 M)에 의해 염기성화시키고, 농축하고, 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-70/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 트랜스-N-[8-아미노-6-[(3R)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(2 mg, 5.1% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.396, [M+H]+ = 352.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.02 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.28(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.315(s, 2H), 5.78-5.77 (m, 1H), 4.34-4.28 (m, 1H), 3.82-3.71 (m, 1H), 2.77-2.72(m, 1H), 2.44- 2.33 (m, 1H), 2.15-2.10 (m, 1H), 1.87-1.82 (m, 1H), 1.60-1.56 (m, 1H), 1.44-1.40 (m, 1H).
실시예 72:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-((S)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 132)
Figure pct00608
단계 1: 트랜스-N-(8-클로로-6-((S)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00609
1,4-다이옥산(15 mL) 중 (3S)-3-하이드록시피롤리딘-2-온(216 mg, 2.14 mmol), 트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(500 mg, 1.43 mmol), Pd2(dba)3(128 mg, 0.14 mmol), 잔트포스(163 mg, 0.28 mmol) 및 Cs2CO3(929 mg, 2.86 mmol)의 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 잔사를 DCM 중 0-20% MeOH로 용리하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-6-[(3S)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(90 mg, 17% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 371.1.
단계 2: 트랜스-N-(8-아미노-6-((S)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00610
1,4-다이옥산(8 mL) 중 Pd2(dba)3(23 mg, 0.02 mmol), 브렛포스(26 mg, 0.05 mmol), t-BuONa(46 mg, 0.49 mmol), tert-부틸 카밤에이트(284 mg, 2.43 mmol) 및 (트랜스-)-N-[8-클로로-6-[(3S)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(90 mg, 0.24 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 잔사를 PE 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스-)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[(3S)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(52 mg, 47% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 452.0.
단계 3: 트랜스-N-(8-아미노-6-((S)-3-하이드록시-2-옥소피롤리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00611
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스-)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-[(3S)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.13 mmol)의 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 메탄올 중 NH3(7 M)에 의해 염기성화시키고, 농축하고, 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-70/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 트랜스-N-[8-아미노-6-[(3S)-3-하이드록시-2-옥소-피롤리딘-1-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(3 mg, 6.4% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.394, [M+H]+ = 352.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.04 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.28(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.33 (s, 2H), 5.79-5.78 (m, 1H), 4.34-4.28 (m, 1H), 3.79-3.71 (m, 1H), 2.75-2.73 (m, 1H), 2.42-2.39 (m, 1H), 2.13-2.10(m, 1H), 1.87-1.82 (m, 1H), 1.61-1.56 (m, 1H), 1.44-1.41 (m, 1H).
실시예 73:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 133)
Figure pct00612
단계 1: 4-브로모-5-이소프로필-1-메틸-피라졸
Figure pct00613
DMF(10 mL) 중 4-브로모-5-이소프로필-1H-피라졸(950 mg, 5.03 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(300 mg, 7.5 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 10분 후, 요오도메탄(0.5 mL, 7.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 40 mL의 포화 염수를 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기물을 포화 염수(2 x 20 mL)로 세척하고, 이어서 분리하고, 건조하였다(Na2SO4). 유기물을 농축하여 조질 4-브로모-5-이소프로필-1-메틸-피라졸(900 mg)을 황색 액체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 203.1.
단계 2: 8-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00614
1,4-다이옥산(10 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(517 mg, 2.01 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(600 mg, 2.36 mmol), Pd(dppf)Cl2(130 mg, 0.18 mmol) 및 칼륨 아세테이트(500 mg, 5.09 mmol)의 혼합물을 Ar 대기 하에 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 1/4 → 1/1)로 정제하여 8-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이소퀴놀린-3-아민(600 mg, 89% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 305.2.
단계 3: 8-클로로-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00615
4-브로모-5-이소프로필-1-메틸-피라졸(500 mg, 2.46 mmol), (3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)보론산(600 mg, 2.7 mmol), Pd(dppf)Cl2(140 mg, 0.19 mmol) 및 칼륨 카본에이트(700 mg, 5.07 mmol)의 혼합물을 마이크로파 반응기에서 1시간 동안 130℃까지 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 1/3-1/2) 및 이어서 제조용 HPLC로 정제하여 8-클로로-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민(90 mg, 12% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 301.1.
단계 4: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00616
다이클로로메탄(10 mL) 중 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(113 mg, 1.02 mmol) 및 1 점적의 DMF의 혼합물에 옥살릴 다이클로라이드(0.3 mL, 3.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하여 과량의 옥살릴 다이클로라이드를 제거하고, 이어서 다이클로로메탄(5 mL)을 첨가하였다. 이어서, 용액을 다이클로로메탄(5 mL) 중 8-클로로-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민(85 mg, 0.28 mmol) 및 피리딘(0.5 mL, 6.18 mmol)의 혼합물에 적가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/다이클로로메탄 = 1/1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(110 mg, 97% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 394.2.
단계 5: (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00617
N,N-다이메틸포름아미드(3 mL) 및 톨루엔(4 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(110 mg, 0.28 mmol), 벤조페논 이민(225 mg, 1.24 mmol), 잔트포스(70 mg, 0.12 mmol), Pd2(dba)3(57 mg, 0.06 mmol) 및 Cs2CO3(200 mg, 0.62 mmol)을 함유하는 밀봉된 관을 Ar 대기 하에 130℃에서 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 40 mL의 염수의 첨가에 의해 급랭시키고, 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기물을 염수(2 x 20 mL)로 세척하고, 농축하였다. 이어서, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 1/3-1/1)로 정제하여 트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(64 mg, 27% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 539.3.
단계 6: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00618
메틸 알코올(5 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(64 mg, 0.08 mmol) 및 농축 수성 HCl(0.1 mL, 1.2 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 트라이에틸아민(0.2 mL, 1.43 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 농축하고, 역상 크로마토그래피(메탄올 0-60/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-이소프로필-1-메틸-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(18 mg, 63% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 375.2, RT(분) = 1.72, 방법 = F; 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.19 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.73 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.47-3.40 (m, 1H), 2.67-2.62(m, 1H), 2.15-2.10 (m, 1H), 1.62-1.52 (m, 2H), 1.36 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 74:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 134)
Figure pct00619
단계 1: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2-하이드록시아닐리노)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00620
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(400 mg, 1.14 mmol), 2-아미노페놀(150 mg, 1.37 mmol), Pd2(dba)3(48 mg, 0.05 mmol), Cs2CO3(650 mg, 2 mmol) 및 잔트포스(60 mg, 0.1 mmol)의 혼합물을 불활성 대기 하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 감압 하에 농축하였다. 이어서, 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터 1/5-1/1로 용리하는 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-6-(2-하이드록시아닐리노)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(420 mg, 78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 379.1.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00621
다이클로로메탄(20 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2-하이드록시아닐리노)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(400 mg, 1.06 mmol), 1,1'-카보닐다이이미다졸(400 mg, 2.47 mmol), 트라이에틸아민(2.0 mL, 14.35 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에터 1/3-1/1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(260 mg, 52% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 405.1.
단계 3: (±)- tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00622
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.49 mmol), tert-부틸 카밤에이트(600 mg, 5.12 mmol), 브렛포스(120 mg, 0.22 mmol), Pd2(dba)3(100 mg, 0.11 mmol) 및 Cs2CO3(325 mg, 1 mmol)의 혼합물을 Ar 대기 하에 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(62 mg, 21% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 486.1.
단계 4: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00623
메틸 알코올(2 mL) 및 HCl(다이옥산 중 4 M, 2 mL, 8 mmol) 중 (±)-tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(62 mg, 0.13 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 NaHCO3 분말의 첨가에 의해 급랭시키고, 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(2-옥소-1,3-벤족사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(6 mg, 11.8% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 386.1, RT(분) = 1.83 방법 = B; 1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 11.18 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.25-7.22 (m, 3H), 7.16 (s, 1H), 6.82 (d, J = 1.2 Hz,1H), 6.65-6.64 (m, 2H), 2.78-2.76 (m, 1H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.62-1.58 (m, 1H), 1.46-1.41(m, 1H).
실시예 75:
1-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(화합물 135)
Figure pct00624
단계 1: 1-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-3-메틸-우레아
Figure pct00625
테트라하이드로퓨란(5 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(400 mg, 1.24 mmol)의 혼합물을 트라이에틸아민(4 mL, 28.7 mmol) 및 트라이포스젠(400 mg, 1.35 mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후, 메탄아민 하이드로클로라이드(940 mg, 13.92 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축 건조하고, 에틸 아세테이트/석유 에터(1/3-1/1)로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-3-메틸-우레아(190 mg, 33% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 379.9.
단계 2: 1-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아
Figure pct00626
1,4-다이옥산(6 mL) 및 물(1 mL) 중 1-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-3-메틸-우레아(190 mg, 0.50 mmol), 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(120 mg, 0.55 mmol), Pd(dppf)Cl2(40 mg, 0.05 mmol) 및 K2CO3(180 mg, 1.3 mmol)의 혼합물을 Ar 대기 하에 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조하고, 이어서 조 물질을 메탄올/다이클로로메탄(1:12)으로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(145 mg, 74% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 345.0.
단계 3: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-(메틸카바모일아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00627
1,4-다이옥산(6 mL) 중 1-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(120 mg, 0.35 mmol), tert-부틸 카밤에이트(515 mg, 4.4 mmol), Pd2(dba)3(70 mg, 0.08 mmol), 브렛포스(90 mg, 0.17 mmol) 및 Cs2CO3(260 mg, 0.80 mmol)의 혼합물을 Ar 대기 하에 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 역상 크로마토그래피(메탄올 0-50%/물 중 0.1% 암모니아)로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-(메틸카바모일아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(30 mg, 18% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 426.2.
단계 4: 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아
Figure pct00628
다이옥산 중 HCl 용액(4 M, 2 mL, 8 mmol) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-(메틸카바모일아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(30 mg, 0.07 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 농축하고, 역상 크로마토그래피(메탄올 5-50/물 중 0.05% 암모니아)로 정제하여 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(15.4 mg, 67% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI):[M+H]+ = 326.1, RT(분) = 1.40, 방법 = E; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.25 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 2.91 (s, 3H), 2.31 (s, 3H).
실시예 76:
(±)-트랜스-3-(8-아미노-3-(2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-N,4-다이메틸벤즈아미드(화합물 136)
Figure pct00629
단계 1: 3-브로모-N,4-다이메틸벤즈아미드
Figure pct00630
4-브로모-3-메틸벤조산(1 g, 4. mmol), 다이클로로메탄(10 mL), DMF(0.1 mL, 4. mmol) 및 옥살릴 클로라이드(1.2 mL, 14.18 mmol)를 바이알에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 혼합물을 다이클로로메탄(10 mL)에 재-용해시키고, 메탄아민(EtOH 중 30%, 10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서. 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(PE/EA 1:1 → 0:100)로 정제하여 4-브로모-N,3-다이메틸-벤즈아미드(820 mg, 77% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 228.1.
단계 2: N,4-다이메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤즈아미드
Figure pct00631
밀봉된 관에 3-브로모-N,4-다이메틸-벤즈아미드(800 mg, 3.51 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(1.1 g, 4.33 mmol), 아세톡시칼륨(1.1 g, 11.21 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(256 mg, 0.35 mmol) 및 1,4-다이옥산(100 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 N2로 2분 동안 발포시키고, 이어서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:3 → 1:2)로 직접 정제하여 N,4-다이메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤즈아미드(800 mg, 41% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 276.1.
단계 3: (±)-트랜스-3-(8-클로로-3-(2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-N,4-다이메틸벤즈아미드
Figure pct00632
1,4-다이옥산(15 mL) 및 물(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.57 mmol), N,4-다이메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤즈아미드(500 mg, 0.91 mmol), Pd(dppf)Cl2(50 mg, 0.07 mmol) 및 Na2CO3(130 mg, 1.24 mmol)의 용액을 90℃에서 2시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:2 → 1:1)로 직접 정제하여 (±)-트랜스-3-[8-클로로-3-[(2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-벤즈아미드(200 mg, 84% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 419.1.
단계 4: (±)-트랜스-3-(8-아미노-3-(2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-N,4-다이메틸벤즈아미드
Figure pct00633
무수 N,N-다이메틸포름아미드(5 mL) 및 무수 톨루엔(5 mL) 중 (±)-트랜스-3-[8-클로로-3-[(2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-벤즈아미드(100 mg, 0.24 mmol), tert-부틸 카밤에이트(265 mg, 2.26 mmol), 잔트포스(55 mg, 0.10 mmol), Pd2(dba)3(44 mg, 0.05 mmol) 및 Cs2CO3(350 mg, 1.08 mmol)의 혼합물을 130℃에서 Ar 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하여 톨루엔을 제거하고, 이어서 20 mL 포화 염수 용액을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(20 mL x 2)로 추출하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하였다(Na2SO4). 생성된 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:1 → EA → DCM:MeOH = 20:1) 및 이어서 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-3-[8-아미노-3-[(2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-N,4-다이메틸-벤즈아미드(29 mg, 31% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.67, [M+H]+ = 400.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 9.24 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.75-7.73 (m, 2H), 7.40-7.38 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.67-2.62 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.62-1.52 (m, 2H).
실시예 77:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(3-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 138)
Figure pct00634
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(3-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00635
1,4-다이옥산(15 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.57 mmol), 1-메틸-2-벤즈이미다졸린온(120 mg, 0.81 mmol), Pd3(dba)2(100 mg, 0.11 mmol), 잔트포스(130 mg, 0.22 mmol) 및 K3PO4(360 mg, 1.7 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:3 → 1:2)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(3-메틸-2-옥소-벤즈이미다졸-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(120 mg, 50% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 418.1.
단계 2: (±)-tert-부틸 3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-(3-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00636
1,4-다이옥산(1 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(3-메틸-2-옥소-벤즈이미다졸-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.24 mmol), tert-부틸 카밤에이트(280 mg, 2.39 mmol), Pd3(dba)2(40 mg, 0.04 mmol), 브렛포스(20 mg, 0.04 mmol), Cs2CO3(230 mg, 0.71 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:2)로 직접 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-(3-메틸-2-옥소-벤즈이미다졸-1-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(70 mg, 59% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 499.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(3-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00637
다이클로로메탄(4 mL)에 용해된 (±)-tert-부틸 N-[3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-(3-메틸-2-옥소-벤즈이미다졸-1-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.12 mmol)에 TFA(0.2 mL, 0.24 mmol)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 직접 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(3-메틸-2-옥소-벤즈이미다졸-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(13 mg, 27% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.77, [M+H]+ = 399.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.15 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.27-7.08 (m, 5H), 6.78 (s, 1H), 6.54 (s, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.77-2.74 (m, 1H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.62-1.57 (m, 1H), 1.46-1.41 (m, 1H).
실시예 78:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 139)
Figure pct00638
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00639
1,4-다이옥산(15 mL) 및 물(3 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.57 mmol), 1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(320 mg, 1.15 mmol), Pd(dppf)Cl2(50 mg, 0.07 mmol) 및 Na2CO3(130 mg, 1.24 mmol)의 용액을 90℃에서 2시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:2)로 직접 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1-테트라하이드로피란-2-일피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(220 mg, 91% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 422.7.
단계 2: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00640
무수 N,N-다이메틸포름아미드(5 mL) 및 톨루엔(5 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(1-테트라하이드로피란-2-일피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.47 mmol), tert-부틸 카밤에이트(555 mg, 4.74 mmol), 잔트포스(110 mg, 0.19 mmol), Pd2(dba)3(90 mg, 0.10 mmol) 및 Cs2CO3(690 mg, 2.12 mmol)의 혼합물을 130℃에서 Ar 대기 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하여 톨루엔을 제거하고, 이어서 10 mL 포화 염수 용액을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하였다(Na2SO4). 생성된 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:1 → 2:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1-테트라하이드로피란-2-일피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 52% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 403.7.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00641
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1-테트라하이드로피란-2-일피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(80 mg, 0.20 mmol)를 다이클로로메탄(10 mL)에 용해시키고, TFA(1.5 mL, 0.20 mmol)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, MeOH 중 NH3의 용액의 첨가에 의해 중화시켰다. 생성된 혼합물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(1H-피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(26 mg, 42% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.47, [M+H]+ = 319.7, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.01 (s, 1H), 11.02 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.17 (s, 2H), 2.77-2.74 (m, 1H), 2.15-2.11 (m, 1H), 1.61-1.56 (m, 1H), 1.46-1.41 (m, 1H).
실시예 79:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 140)
Figure pct00642
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00643
1,4-다이옥산(15 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.57 mmol), 2-하이드록시벤즈이미다졸(110 mg, 0.82 mmol), Pd2(dba)3(100 mg, 0.11 mmol), 잔포스(130 mg, 0.22 mmol), K3PO4(360 mg, 1.70 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 기체 하에 가열하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:1)로 직접 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-3H-벤즈이미다졸-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(180 mg, 78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 404.1.
단계 2: (±)-tert-부틸 3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-(2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00644
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-3H-벤즈이미다졸-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(160 mg, 0.40 mmol), tert-부틸 카밤에이트(696 mg, 5.94 mmol), Pd2(dba)3(72 mg, 0.08 mmol), 브렛포스(40 mg, 0.07 mmol) 및 Cs2CO3(387 mg, 1.19 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-(2-옥소-3H-벤즈이미다졸-1-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 31% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 485.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(2-옥소-2,3-다이하이드로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00645
다이클로로메탄(2 mL)에 용해된 (±)-tert-부틸 N-[3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-(2-옥소-3H-벤즈이미다졸-1-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(55 mg, 0.11 mmol)의 용액에 TFA(1.0 mL, 0.11 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:1 → EA) 및 이어서 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 직접 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(2-옥소-3H-벤즈이미다졸-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(2.6 mg, 6% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.64, [M+H]+ = 385.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.13 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.15-7.00 (m, 6H), 6.79 (s, 1H), 6.51 (s, 2H), 2.78-2.74 (m, 1H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.61-1.57 (m, 1H), 1.46-1.41 (m, 1H).
실시예 80:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)-7-(트라이플루오로메틸)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 143)
Figure pct00646
단계 1: (±)-트랜스-N-(8-클로로-7-요오도-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00647
1,4-다이옥산(20 mL) 중 (±)-트랜스-N-[7-브로모-8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(500 mg, 1.13 mmol), 요오도나트륨(750 mg, 5 mmol), CuI(50 mg, 0.26 mmol) 및 다이메틸에탄-1,2-다이아민(1.5 mL, 13.69 mmol)의 용액을 2일 동안 110℃까지 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석하고, 물(30 mL x 3) 및 염수(30 mL)로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:1)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-클로로-7-요오도-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(430 mg, 78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 489.0.
단계 2: (±)-(트랜스)-N-(8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-7-(트라이플루오로메틸)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00648
N,N-다이메틸포름아미드(11 mL) 중 (±)-(트랜스)-N-[8-클로로-7-요오도-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(370 mg, 0.76 mmol) 및 다이페닐(트라이플루오로메틸)설포늄 트라이플루오로메탄설포네이트(620 mg, 1.53 mmol)의 용액에 Cu(150 mg, 2.34 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 67℃까지 가열하였다. 냉각 후, 반응 혼합물을 EtOAc(30 mL)에 용해시키고, 포화 수성 나트륨 클로라이드(10 mL x 3)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 2:3) 및 이어서 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% HCOOH)로 정제하여 (±)-(트랜스)-N-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-7-(트라이플루오로메틸)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(35 mg, 11% 수율)를 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 431.1.
단계 3: (±)-(트랜스)-2-시아노-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)-7-(트라이플루오로메틸)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00649
1,4-다이옥산(5 mL) 중 (±)-(트랜스)-N-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-7-(트라이플루오로메틸)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(30 mg, 0.07 mmol), Pd2(dba)3(12 mg, 0.01 mmol), 잔트포스(15 mg, 0.03 mmol), Cs2CO3(48 mg, 0.15 mmol) 및 벤조페논 이민(300 mg, 1.66 mmol)의 혼합물을 115℃에서 Ar 하에 6시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:5 → 1:1)으로 직접 정제하여 (±)-(트랜스)-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-7-(트라이플루오로메틸)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 50% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 576.2.
단계 4: (±)-(트랜스)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)-7-(트라이플루오로메틸)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00650
아세토니트릴(1 mL), 물(1 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.5 mL) 중 (±)-(트랜스)-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-7-(트라이플루오로메틸)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(20 mg, 0.02 mmol)의 용액을 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 0.2 mL 농축 HCl을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, CH3CN(1 mL)에 용해시키고, 포화 나트륨 바이카본에이트로 중화시켰다. 생성된 혼합물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 17-47/물 중 0.05% 암모니아)로 정제하여 (±)-(트랜스)-N-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-7-(트라이플루오로메틸)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(4 mg, 40% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.864, [M+H]+ = 421.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 9.41 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.25-8.23 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 2.64-2.26 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.09-2.05 (m, 1H), 1.57-1.47 (m, 2H).
실시예 81:
(±)-(트랜스)-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소이미다졸리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 144)
Figure pct00651
단계 1: tert-부틸 8-클로로-3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일카밤에이트
Figure pct00652
1,4-다이옥산(20 mL) 중 (트랜스)-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(600 mg, 1.71 mmol), Pd2(dba)3(240 mg, 0.26 mmol), 잔트포스(300 mg, 0.52 mmol), K2CO3(510 mg, 3.7 mmol) 및 tert-부틸 카밤에이트(400 mg, 3.41 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 7시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:5 → 1:3)로 직접 정제하여 tert-부틸 N-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]카밤에이트(500 mg, 76% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 387.1.
단계 2: (트랜스)-N-(8-클로로-6-(5-메틸-2-옥소이미다졸리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00653
N,N-다이메틸포름아미드(20 mL) 중 tert-부틸 N-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]카밤에이트(450 mg, 1.16 mmol)의 교반된 용액에 NaH(450 mg, 11.25 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 이어서, tert-부틸 N-(2-브로모프로필)카밤에이트(500 mg, 2.1 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 실온까지 냉각한 후, 혼합물을 포화 NH4Cl로 급랭시키고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:1)으로 정제하여 tert-부틸 N-[2-[[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]아미노]프로필]카밤에이트(25 mg, 5% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 370.1.
단계 3: tert-부틸 3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-(5-메틸-2-옥소이미다졸리딘-1-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00654
1,4-다이옥산(2 mL) 중 (트랜스)-N-[8-클로로-6-(5-메틸-2-옥소-이미다졸리딘-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(25 mg, 0.07 mmol), tert-부틸 카밤에이트(80 mg, 0.68 mmol), Pd2(dba)3(12 mg, 0.01 mmol), 브렛포스(12 mg, 0.02 mmol) 및 Cs2CO3(65 mg, 0.20 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:1 → 100% EA)으로 직접 정제하여 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(5-메틸-2-옥소-이미다졸리딘-1-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(15 mg, 49% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 451.1.
단계 4: (트랜스)-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소이미다졸리딘-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00655
다이클로로메탄(4 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(5-메틸-2-옥소-이미다졸리딘-1-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(15 mg, 0.03 mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 증발시키고, 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 17-47/물 중 0.05% HCOOH)로 정제하여 (트랜스)-N-[8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-이미다졸리딘-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(3 mg, 26% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.332, [M+H]+ = 351.2, 방법 = A; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.96 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.71(s, 1H), 6.18 (s, 2H), 4.12-3.97 (m, 2H), 3.81-3.75 (m, 1H), 2.76-2.67 (m, 1H), 2.14-2.08 (m, 1H), 1.58-1.50 (m, 1H), 1.42-1.40 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 82:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-5,7-다이플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 145)
Figure pct00656
아세토니트릴(5 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.29 mmol)의 용액에 1-플루오로-4-하이드록시-1,4-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄 비스(테트라플루오로보레이트)(220 mg, 0.69 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 마이크로파 반응기에서 교반하였다. 조 물질을 제조용 HPLC(컬럼 엑스브리지 21.2 x 250 mm c18, 10 μm 이동상 A: 물(10 mmol/LNH4HCO3), B: ACN)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-5,7-다이플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(5 mg, 4.5% 수율)를 수득하였다. (ESI): RT (분) = 1.625, [M+H]+ = 380.2, 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.32 (s, 1H), 9.53 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 2.62-2.75 (m, 1H), 2.11-2.25 (m, 4H), 1.60-1.68 (m, 1H),1.40-1.48 (m, 1H).
실시예 83:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 146)
Figure pct00657
단계 1: 트랜스-2-시아노-N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00658
밀봉된 관에 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(450 mg, 1.24 mmol), 잔트포스(300 mg, 0.52 mmol), Pd2(dba)3(225 mg, 0.25 mmol), Cs2CO3(1.0 g, 3.08 mmol), 벤조페논 이민(1.2 g, 6.62 mmol) 및 N,N-다이메틸포름아미드(15 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 N2로 2분 동안 발포시키고, 130℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE/EA 10:1 → 1:1로 용리됨)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(250 mg, 31% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 508.3.
단계 2: (±)-트랜스-N-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00659
(±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(500 mg, 0.39 mmol), 테트라하이드로퓨란(5 mL) 및 2 N HCl(4.81 mL, 9.63 mmol)을 바이알에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 20:1 → 10:1) 및 이어서 제조용 HPLC(이동상: A: 물(10 mmol NH4HCO3), B: 아세토니트릴)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(11 mg, 8% 수율)를 연갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.667, [M+H]+ = 378.1, 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.03 (br, 2H), 2.79-2.71 (m, 1H), 2.17-2.10 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.63-1.55 (m, 1H), 1.46-1.40 (m, 1H).
실시예 84:
1-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아(화합물 147) 및 1-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아(화합물 148)
Figure pct00660
단계 1: 1-(8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아
Figure pct00661
밀봉된 관에 8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(700 mg, 2.6 mmol), 메틸아미노포름일클로라이드(1.2 g, 13 mmol), DBU(1 mL, 6.69mmol) 및 1,4-다이옥산(10 mL)을 첨가하였다. 반응 생성물을 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 100:1 → 30:1로 용리함)로 정제하여 1-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(820 mg, 84% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 327.1.
단계 2: tert-부틸 6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-(3-메틸우레이도)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00662
1-[8-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(800 mg, 2.45 mmol), 브렛포스(200 mg, 0.37 mmol), Pd2(dba)3(300 mg, 0.33 mmol), Cs2CO3(2.0 g, 6.15 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.6 g, 13.7 mmol) 및 1,4-다이옥산(50 mL)을 반응 바이알에 첨가하고, N2로 2분 동안 발포시켰다. 반응 생성물을 95℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 100:1 → 30:1로 용리함)로 정제하여 tert-부틸 N-[3-(메틸카바모일아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(430 mg, 41% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 408.1.
단계 3: 1-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아
Figure pct00663
tert-부틸 N-[3-(메틸카바모일아미노)-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(420 mg, 0.98 mmol) 및 HCl(다이옥산 중 4 N, 5 mL)을 반응 바이알에 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, MeOH 중 NH3의 용액(7 N, 20 mL)에 재-용해시키고, 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 30:1 → 10:1로 용리함)로 정제하여 1-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(230 mg, 75% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 308.2.
단계 4: 1-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아 및 1-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아
Figure pct00664
1-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(100 mg, 0.33 mmol), 아세토니트릴(10 mL) 및 N-클로로석신이미드(45 mg, 0.34 mmol)를 바이알에 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 HPLC(아세토니트릴 30-70%/물 중 0.1% NH4OH)로 정제하여 하기 물질을 수득하였다: 황색 고체인 1-[8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(화합물 147)(38 mg, 34% 수율). LCMS (ESI): RT (분) = 1.533, [M+H]+ = 342.2, 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.35 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.04 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.52 (s, 2H), 2.71 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 2.12 (s, 3H). 황색 고체인 1-[8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(화합물 148)(21 mg, 19% 수율). LCMS (ESI): RT (분) = 1.499, [M+H]+ = 342.1, 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.28 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.37 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.06 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 6.49 (s, 2H), 6.36 (s, 1H), 2.72 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 2.12 (s, 3H).
실시예 85:
1-(8-아미노-5-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아(화합물 149) 및 1-(8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아(화합물 150)
Figure pct00665
단계 1: 1-(8-아미노-5-요오도-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아 및 1-(8-아미노-7-요오도-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아
Figure pct00666
1-[8-아미노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(100 mg, 0.33 mmol), 아세트산(5 mL) 및 N-요오도석신이미드(75 mg, 0.33 mmol)를 반응 바이알에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 3일 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, pH를 포화 NaHCO3에 의해 7까지 조정하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(50 mL x 2)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 1-(8-아미노-5-요오도-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아 및 1-(8-아미노-7-요오도-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아의 조질 혼합물을 수득하였다. 조질 혼합물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 434.1.
단계 2: 1-(8-아미노-5-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아 및 1-(8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아
Figure pct00667
1-(8-아미노-5-요오도-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아 및 1-(8-아미노-7-요오도-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸우레아(100 mg, 0.23 mmol), Pd(t-Bu3P)2(15 mg, 0.03 mmol), Zn(5 mg, 0.08 mmol), Zn(CN)2(50 mg, 0.43 mmol) 및 N,N-다이메틸포름아미드(5 mL)의 혼합물을 바이알에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2분 동안 N2에 의해 발포시키고, 90℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 100:1 → 30:1로 용리함)로 정제하여 하기 물질을 수득하였다: 화합물 149: 백색 고체인 1-[8-아미노-7-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(14 mg, 18% 수율). LCMS (ESI): RT (분) = 1.512, [M+H]+ = 333.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.41 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.35 (s, 2H), 7.07 (q, J = 4.4 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 2.71 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 2.22 (s, 3H). 화합물 150: 단리된 백색 고체인 1-[8-아미노-5-시아노-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-3-메틸-우레아(23 mg, 30% 수율). LCMS (ESI): RT (분) = 1.428, [M+H]+ = 333.2, 방법 = G; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.37 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.50 (s, 2H), 7.43 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.00 (q, J = 4.4 Hz, 1H), 6.41 (s, 1H), 2.73 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 2.22 (s, 3H).
실시예 86:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(2-옥소-옥사졸리딘-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 151)
Figure pct00668
단계 1: tert-부틸 N-[2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-2-옥소-에틸]카밤에이트
Figure pct00669
무수 테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(500 mg, 1.94 mmol)의 용액에 iPrMgCl·LiCl 착물(THF 중 1.3 M)(20 mL, 26 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각하고, (±)-tert-부틸 2-(메톡시(메틸)아미노)-2-옥소에틸카밤에이트(1.27 g, 5.83 mmol)를 첨가하였다. 반응 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NaCl의 첨가에 의해 급랭시키고, 에틸 아세테이트(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기 추출물을 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 PE 중 40% 에틸 아세테이트로 용리하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-2-옥소-에틸]카밤에이트(330 mg, 48% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 336.1.
단계 2: tert-부틸 N-[2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-2-하이드록시-에틸]카밤에이트
Figure pct00670
MeOH(3 mL) 중 tert-부틸 N-[2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-2-옥소-에틸]카밤에이트(150 mg, 0.45 mmol)의 용액에 NaBH4(42 mg, 1.12 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하여 반응을 급랭시켰다. 혼합물을 EA(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 물(5 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 조질 생성물 tert-부틸 N-[2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-2-하이드록시-에틸]카밤에이트(140 mg, 93% 수율)를 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI): [M+H-100]+ = 338.1.
단계 3: 5-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)옥사졸리딘-2-온
Figure pct00671
tert-부틸 N-[2-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-2-하이드록시-에틸]카밤에이트(140 mg, 0.41 mmol)를 N,N-다이메틸포름아미드(3 mL)에 용해시켰다. NaH(15 mg, 0.62 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하여 반응을 급랭시키고, 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 2)로 추출하였다. 유기 층을 염수(10 mL x 3)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 TLC(DCM:MeOH = 20:1)로 정제하여 표제 생성물 5-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)옥사졸리딘-2-온(60 mg, 51% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 264.0.
단계 4: 트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-옥사졸리딘-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00672
다이클로로메탄(5 mL) 중 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(250 mg, 2.25 mmol)의 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 이어서, 에탄다이오일 다이클로라이드(572 mg, 4.51 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 농축하였다. 이어서, 조질 생성물을 다이클로로메탄(5 mL) 중 5-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)옥사졸리딘-2-온(60 mg, 0.23 mmol) 및 피리딘(0.06 mL, 0.68 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH = 10/1)로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-옥사졸리딘-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 86% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 357.0.
단계 5: 트랜스-N-[8-아미노-6-(2-옥소-옥사졸리딘-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00673
밀봉된 관에 tert-부틸 카밤에이트(229 mg, 1.96 mmol), Pd2(dba)3(36 mg, 0.04 mmol), Cs2CO3(192 mg, 0.59 mmol), 잔트포스(38 mg, 0.08 mmol), 트랜스-N-[8-클로로-6-(2-옥소-옥사졸리딘-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 0.20 mmol), N,N-다이메틸포름아미드(1 mL) 및 톨루엔(1 mL)을 글러브 박스에서 첨가하였다. 혼합물을 130℃에서 2일 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 물(20 mL)로 희석하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL x 3)로 추출하고, 합한 유기 층을 물(20 mL), 포화 NaCl 용액(30 mL x 3)으로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(이동상:A 물(0.01% NH3) + 10 mm(NH4HCO3), B 아세토니트릴)로 정제하여 트랜스-N-[8-아미노-6-(2-옥소-옥사졸리딘-5-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(4.8 mg, 7.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.398, [M+H]+ = 338.0, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.20 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.74 (s,1H), 5.72-5.68 (m, 1H), 4.07-4.02 (m, 1H), 3.53-3.49(m, 1H), 2.65-2.62 (m, 1H), 2.13-2.11 (m, 1H), 1.61-1.53 (m, 1H).
실시예 87:
(±)-트랜스-N-[8-아미노-7-(하이드록시메틸)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 153)
Figure pct00674
단계 1: (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-포름일-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00675
물(20 mL) 및 아세토니트릴(20 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-7-(다이플루오로메틸)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(140 mg, 0.25 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(8 mL)의 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 포화 NaHCO3(수성)에 의해 pH 7 내지 8까지 중화시켰다. 혼합물을 농축하고, 제조용 역상 HPLC(C-18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-포름일-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(120 mg, 68% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 372.7.
단계 2: (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-(하이드록시메틸)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00676
0℃의 아세토니트릴(20 mL) 및 메틸 알코올(20 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-포름일-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(100 mg, 0.16 mmol)의 용액에 NaBH4(24 mg, 0.63 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 제조용 역상 HPLC(C-18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-7-(하이드록시메틸)-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(25 mg, 41% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.852, [M+H]+ = 374.1, 방법 = C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.12 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.46 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.34 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.32 (s, 2H), 4.95 (s, 1H), 4.29 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.18 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.78-2.75 (m, 1H), 2.17-2.11 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.61-1.56 (m, 1H), 1.46-1.40 (m, 1H).
실시예 88:
(±)-1-[8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아(화합물 154)
Figure pct00677
단계 1: 1-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-3-이소프로필-우레아
Figure pct00678
1,4-다이옥산(15 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(400 mg, 1.55 mmol), 이소프로필 이소시아네이트(1.19 g, 13.98 mmol) 및 DBU(1.18 g, 7.76 mmol)의 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, EtOAc/헥산 = 1:2로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-3-이소프로필-우레아(570 mg, 1.03 mmol, 66% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 342.0.
단계 2: 1-[8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아
Figure pct00679
1,4-다이옥산(18 mL) 중 1-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-3-이소프로필-우레아(570 mg, 1.03 mmol), 4-메틸옥사졸리딘-2-온(125 mg, 1.24 mmol), Pd2(dba)3(95 mg, 0.1 mmol), 잔트포스(119 mg, 0.21 mmol) 및 K3PO3(437 mg, 2.06 mmol)의 혼합물을 Ar 하에 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, EtOAc/헥산 = 2:1로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-[8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아(306 mg, 81% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 363.1.
단계 3: (±)-tert-부틸 N-[3-(이소프로필카바모일아미노)-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00680
1,4-다이옥산(20 mL) 중 1-[8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아(286 mg, 0.79 mmol), BocNH2(922 mg, 7.88 mmol), Pd2(dba)3(108 mg, 0.12 mmol), 브렛포스(127 mg, 0.24 mmol) 및 Cs2CO3(512 mg, 1.58 mmol)의 혼합물을 90℃에서 Ar 하에 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, EtOAc/DCM = 3:1로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[3-(이소프로필카바모일아미노)-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(285 mg, 66% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 444.4.
단계 4: (±)-1-[8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아
Figure pct00681
다이클로로메탄(10 mL) 중 (±)-tert-부틸 N-[3-(이소프로필카바모일아미노)-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(280 mg, 0.52 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 포화 NaHCO3(수성)으로 pH 7 내지 8까지 중화시켰다. 혼합물을 농축하고, 제조용 역상 HPLC(C-18, 아세토니트릴/물 + 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-1-[8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)-3-이소퀴놀일]-3-이소프로필-우레아(140 mg, 78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) RT (분) = 1.399, [M+H]+ = 344.2, 방법 = A. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.09 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.21 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.25 (s, 2H), 4.71-4.68 (m, 1H), 4.55 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 4.04 (q, J = 4.4 Hz, 1H), 3.84-3.78 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 89:
N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-피라졸-5-일)아세트아미드(화합물 155)
Figure pct00682
단계 1: 2-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-일)아세토니트릴
Figure pct00683
에틸 아세테이트(5 mL) 중 2-(1H-피라졸-5-일)아세토니트릴(250 mg, 2.33 mmol), p-톨루엔설폰산(40 mg, 0.23 mmol) 및 3,4-다이하이드로-2H-피란(295 mg, 3.5 mmol)의 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 5 mL 포화 수성 NaHCO3을 반응 혼합물에 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. EA를 Na2SO4 상에서 건조하고, 진공에서 농축하여 2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세토니트릴(430 mg, 74.6% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+23]+ = 214.2.
단계 2: 2-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-일)아세트산
Figure pct00684
에탄올(5 mL), 물(5 mL) 중 2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세토니트릴(430 mg, 2.25 mmol) 및 KOH(378. mg, 6.75 mmol)의 혼합물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. EtOH를 제거하고, 생성된 혼합물을 물(10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(10 mL)로 추출하였다. 수성 상을 1 N HCl에 의해 pH 5까지 조정하고, 에틸 아세테이트(20 mL x 2)로 추출하였다. 합한 에틸 아세테이트 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 진공에서 농축하여 2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세트산(480 mg, 83.7% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 233.1.
단계 3: 8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00685
1,4-다이옥산(3 mL), H2O(0.3 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(300 mg, 1.17 mmol), 4-에틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(326 mg, 1.4 mmol), Na2CO3(309 mg, 2.91 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(43 mg, 0.06 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 2:1- 1:4)로 정제하여 8-클로로-6-(4-에틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(260 mg, 78.6% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.LCMS (ESI): [M+H]+ = 284.1.
단계 4: N-(8-클로로-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-일)아세트아미드
Figure pct00686
피리딘(2 mL) 중 8-클로로-6-(4-에틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(130 mg, 0.46 mmol) 및 2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세트산(130 mg, 0.62 mmol)의 혼합물에 인 옥시클로라이드(281 mg, 1.83 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3으로 급랭시키고, 에틸 아세테이트(20 mL x 2)로 추출하였다. 합한 에틸 아세테이트 층을 진공에서 농축하고, 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 3:1-1:3)로 정제하여 N-[8-클로로-6-(4-에틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세트아미드(90 mg, 38.5% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 476.2.
단계 5: N-(8-(다이페닐메틸렌아미노)-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-일)아세트아미드
Figure pct00687
N,N-다이메틸포름아미드(2 mL), 톨루엔(2 mL) 중 N-[8-클로로-6-(4-에틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세트아미드(80 mg, 0.17 mmol), 벤조페논 이민(61 mg, 0.34 mmol), Pd2(dba)3(31 mg, 0.03 mmol), 잔트포스(39 mg, 0.07 mmol) 및 Cs2CO3(110 mg, 0.34 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 130℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트(20 mL x 2)로 추출하였다. 합한 에틸 아세테이트 층을 진공에서 농축하여 N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-에틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세트아미드(170 mg, 50.5% 수율, 조질)를 갈색 고체로서 수득하였다. 이러한 조 물질을 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI):[M+H]+ = 611.2.
단계 6: N-(8-아미노-6-(4-에틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-피라졸-5-일)아세트아미드
Figure pct00688
1 mL 4 M HCl/다이옥산 중 N-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-6-(4-에틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(2-테트라하이드로피란-2-일피라졸-3-일)아세트아미드(160 mg, 0.26 mmol)의 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 10-45/물 중 0.05% NH4HCO3)로 정제하여 N-[8-아미노-6-(4-에틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-(1H-피라졸-5-일)아세트아미드(5.3 mg, 5.5% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.59, [M+H]+ = 373.1, 방법 = C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.62 (s, 1H), 10.52 (s, 1H), 9.31(s, 1H), 8.49 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.35 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 6.22 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 2.64 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.11 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
실시예 90:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 156)
Figure pct00689
단계 1: (±)-tert-부틸 5-(8-클로로-3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일카밤에이트
Figure pct00690
1,4-다이옥산(10 mL) 및 H2O(0.4 mL) 중 tert-부틸 N-(5-브로모-4-메틸-3-피리딜)카밤에이트(250 mg, 0.87 mmol), [8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(350 mg, 1.11 mmol), Na2CO3(185 mg, 1.75 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.05 mmol)의 혼합물을 90℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE/EA = 20%-60%)로 정제하여 tert-부틸 N-[5-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(160 mg, 36.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 478.1.
단계 2: (±)-tert-부틸 N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00691
1,4-다이옥산(4 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(178 mg, 1.52 mmol), tert-부틸 N-[5-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(160 mg, 0.33 mmol), Pd3(dba)2(30 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(20 mg, 0.04 mmol) 및 Cs2CO3(320 mg, 0.98 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 물(20 mL)로 희석하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(50 mL x 2)로 추출하였다. 합한 에틸 아세테이트 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE/EA = 40%-70%)로 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(80 mg, 42.78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 559.2.
단계 3: (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00692
다이클로로메탄(2 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL) 중 (±)-tert-부틸 N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(90 mg, 0.15 mmol)의 혼합물을 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축하고, 제조용 HPLC(아세토니트릴 5-40%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-(트랜스)-N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(31.4 mg, 60.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.49, [M+H]+ = 359.1, 방법 = C. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 9.25 (s, 1H), 8.28 (s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.68 (s,1H), 2.66-2.64 (m, 1H), 2.14 (s,3H), 2.14-2.11(m, 1H), 1.62-1.54 (m, 2H).
실시예 91:
(±)-4-(8-아미노-3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드(화합물 157)
Figure pct00693
단계 1: 8-클로로-3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일보론산
Figure pct00694
1,4-다이옥산(4 mL) 중 (±)-트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.57 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(174 mg, 0.68 mmol), 아세톡시칼륨(140 mg, 1.43 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(21 mg, 0.03 mmol)의 혼합물을 밀봉된 관에서 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하여 (±)-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(150 mg, 조질)을 흑색 고체로서 수득하였다. 이러한 물질을 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 316.1.
단계 2: (±)-4-(8-클로로-3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드
Figure pct00695
1,4-다이옥산(4 mL), H2O(0.4 mL) 중 조질 (±)-[8-클로로-3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(150 mg, 0.48 mmol), 4-브로모-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드(140 mg, 0.47 mmol), Pd(dppf)Cl2(35 mg, 0.05 mmol) 및 Na2CO3(101 mg, 0.95 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE/EA = 40%-70%)로 정제하여 4-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드(120 mg, 51.8% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 487.1.
단계 3: (±)-4-(3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-8-(다이페닐메틸렌아미노)이소퀴놀린-6-일)-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드
Figure pct00696
N,N-다이메틸포름아미드(3 mL) 및 톨루엔(1 mL) 중 4-[8-클로로-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드(100 mg, 0.21 mmol), 벤조페논 이민(75 mg, 0.41 mmol), Cs2CO3(134 mg, 0.41 mmol), Pd2(dba)3(38 mg, 0.04 mmol) 및 잔트포스(48 mg, 0.08 mmol)의 혼합물을 140℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 물(10 mL)로 희석하고, EA(20 mL x 2)로 추출하였다. 합한 EA 추출물을 진공에서 농축하여 조질 4-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-3-[[(1R,2R)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드(240 mg, 65.8% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. 이러한 조 물질을 정제 없이 후속 단계에 사용하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 632.2.
단계 4: (±)-4-(8-아미노-3-((트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드
Figure pct00697
N,N-다이메틸포름아미드(2 mL) 및 H2O(0.5 mL) 중 (±)-4-[8-(벤즈하이드릴리덴아미노)-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드(240 mg, 0.14 mmol)의 용액에 2 점적의 TFA를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이러한 반응 혼합물을 제조용 HPLC(아세토니트릴 20-50%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 (±)-4-[8-아미노-3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)벤즈아미드(16.4 mg, 26% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS (ESI): RT (분) = 1.80, [M+H]+ = 468.1, 방법 = C. 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 9.25 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.76 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 4.17-4.10 (m, 2H), 2.67-2.62 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.62-1.52 (m, 2H).
실시예 92:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3(2H)-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 159)
Figure pct00698
단계 1: 6-브로모-8-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00699
N,N-다이메틸포름아미드(50 mL) 중 NaH(1.25 g, 31 mmol)의 용액에 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(2.0 g, 7.77 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 4-메톡시벤질 클로라이드(2.2 mL, 16 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 포화 NH4Cl로 급랭시키고, 에틸 아세테이트(200 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:10)로 정제하여 6-브로모-8-클로로-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]이소퀴놀린-3-아민(2.8 g, 72% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 497.1.
단계 2: tert-부틸 3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-8-클로로이소퀴놀린-6-일카밤에이트
Figure pct00700
1,4-다이옥산(100 mL) 중 Pd2(dba)3(0.94 g, 1.0 3 mmol), 잔트포스(1.12 g, 1.94 mmol), K2CO3(1.87 g, 13.55 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.4 g, 11.95 mmol) 및 6-브로모-8-클로로-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]이소퀴놀린-3-아민(2.8 g, 5.62 mmol)의 혼합물을 90℃에서 Ar 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:10 → 1:8)로 직접 정제하여 tert-부틸 N-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-8-클로로-6-이소퀴놀일]카밤에이트(2.4 g, 80% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.LCMS (ESI) [M+H]+ = 534.2.
단계 3: 8-클로로-N3,N3-비스(4-메톡시벤질)이소퀴놀린-3,6-다이아민
Figure pct00701
1,4-다이옥산(40 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드(40 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-8-클로로-6-이소퀴놀일]카밤에이트(2.4 g, 4.49 mmol) 및 Cs2CO3(4.8 g, 14.72 mmol)의 용액을 130℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석하고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EA:PE = 1:2)로 정제하여 8-클로로-N3,N3-비스[(4-메톡시페닐)메틸]이소퀴놀린-3,6-다이아민(900 mg, 46% 수율)을 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 434.2.
단계 4: 2-옥소프로필 3-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-8-클로로이소퀴놀린-6-일카밤에이트
Figure pct00702
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 트라이포스젠(1.2 g, 4.04 mmol)의 교반된 용액에 테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 트라이에틸아민(3 mL, 21.52 mmol) 및 8-클로로-N3,N3-비스[(4-메톡시페닐)메틸]이소퀴놀린-3,6-다이아민(900 mg, 2.07 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 후, 하이드록시아세톤(2.0 g, 27 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석하고, 염수로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:2)으로 정제하여 아세톤일 N-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-8-클로로-6-이소퀴놀일]카밤에이트(650 mg, 59% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 534.2.
단계 5: 3-(8-클로로-3-(4-메톡시벤질아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸옥사졸-2(3H)-온
Figure pct00703
아세트산(40 mL) 중 아세톤일 N-[3-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-8-클로로-6-이소퀴놀일]카밤에이트(640 mg, 1.2 mmol)의 용액을 2시간 동안 120℃까지 가열하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔사를 다이클로로메탄(10 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)에 용해시키고, 실온에서 1시간 동안 계속 교반하였다. 반응 생성물을 농축하여 조질 3-[8-클로로-3-[(4-메톡시페닐)메틸아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-옥사졸-2-온(430 mg, 91% 수율)을 적색 오일로서 수득하고, 후속 반응에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 396.1.
단계 6: 3-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸옥사졸-2(3H)-온
Figure pct00704
2,2,2-트라이플루오로아세트산(8 mL) 중 3-[8-클로로-3-[(4-메톡시페닐)메틸아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-옥사졸-2-온(430 mg, 1.09 mmol)의 용액을 45℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 농축하고, 잔사를 DCM(50 mL)에 재-용해시키고, 포화 나트륨 바이카본에이트 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA:PE = 1:2 → EA:DCM = 1:1)로 정제하여 3-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-옥사졸-2-온(160 mg, 53% 수율)을 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 276.0.
단계 7: (±)-트랜스-N-(8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3(2H)-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00705
(COCl)2(0.09 mL, 1.06 mmol)를 다이클로로메탄(5 mL) 중 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(50 mg, 0.45 mmol) 및 DMF(3 mg, 0.04 mmol)의 현탁액에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 실온에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온에서 증발시켜 대부분의 DCM 및 (COCl)2를 제거하였다. 잔사를 DCM(5 mL)에 현탁하고, 다이클로로메탄(5 mL) 중 3-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-옥사졸-2-온(80 mg, 0.29 mmol) 및 피리딘(0.5 mL, 6.18 mmol)의 혼합물에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 추가로 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석하고, H2O(20 mL)를 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EA:PE = 1:2)로 정제하여 (±)-(트랜스)-N-[8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(40 mg, 37% 수율)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 369.1.
단계 8: tert-부틸 3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3(2H)-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00706
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(230 mg, 1.96 mmol), Pd2(dba)3(35 mg, 0.04 mmol), 브렛포스(35 mg, 0.07 mmol), Cs2CO3(210 mg, 0.64 mmol) 및 트랜스-N-[8-클로로-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(70 mg, 0.19 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2일 동안 Ar 하에 가열하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:1 → 100% EA)으로 직접 정제하여 (±)-tert-부틸 N-[3-[[(트랜스)-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(35 mg, 41% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 450.1.
단계 9: 트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3(2H)-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00707
다이클로로메탄(4 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(30 mg, 0.07 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축한 후, 잔사를 MeOH 중 암모늄으로 중화시켰다. 생성된 혼합물을 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 17-47/물 중 0.05% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 (±)-(트랜스)-N-[8-아미노-6-(4-메틸-2-옥소-옥사졸-3-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(2.7 mg, 12% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.572, [M+H]+ = 350.1, 방법 = C; 1H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 9.26 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 2.67-2.62 (m, 1H), 2.15-2.09 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.62-1.52 (m, 2H).
실시예 93:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(2-메틸-6-옥소피페라진-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 160)
Figure pct00708
단계 1: tert-부틸 3-메틸-5-옥소피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00709
1,4-다이옥산(8 mL) 및 물(2 mL) 중 6-메틸피페라진-2-온(200 mg, 1.75 mmol), (Boc)2O(420 mg, 1.93 mmol) 및 Na2CO3(370 mg, 3.49 mmol)의 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물(10 mL) 및 EtOAc(20 mL)로 희석하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조하였다(Na2SO4). 잔사를 농축하여 tert-부틸 3-메틸-5-옥소-피페라진-1-카복실레이트(350 mg, 93.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 215.1.
단계 2: tert-부틸 4-(8-클로로-3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-3-메틸-5-옥소피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00710
1,4-다이옥산(15 mL) 중 트랜스-N-(6-브로모-8-클로로-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(200 mg, 0.57 mmol), Pd2(dba)3(100 mg, 0.11 mmol), 잔트포스(130 mg, 0.22 mmol), K3PO4(360 mg, 1.7 mmol) 및 tert-부틸-3-메틸-5-옥소-피페라진-1-카복실레이트(170 mg, 0.79 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 교반하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 1:2 → 1:1)으로 직접 정제하여 tert-부틸 4-[8-클로로-3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-5-옥소-피페라진-1-카복실레이트(100 mg, 36.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 484.1.
단계 3: tert-부틸 4-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)이소퀴놀린-6-일)-3-메틸-5-옥소피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00711
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(200 mg, 1.71 mmol), Pd2(dba)3(32 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(20 mg, 0.04 mmol), Cs2CO3(160 mg, 0.49 mmol) 및 tert-부틸 4-[8-클로로-3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-5-옥소-피페라진-1-카복실레이트(80 mg, 0.17 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 교반하였다. 혼합물을 실리카 겔 컬럼(EA:PE = 2:1 → 4:1)으로 직접 정제하여 tert-부틸 4-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-5-옥소-피페라진-1-카복실레이트(50 mg,0.09 mmol, 53.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 565.1.
단계 4: 트랜스-N-(8-아미노-6-(2-메틸-6-옥소피페라진-1-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00712
다이클로로메탄(4 mL)에 용해된 tert-부틸 4-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐)아미노]-6-이소퀴놀일]-3-메틸-5-옥소-피페라진-1-카복실레이트(40 mg, 0.07 mmol)의 용액에 TFA(2 mL, 0.14 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 트랜스-N-[8-아미노-6-(2-메틸-6-옥소-피페라진-1-일)-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(9.7 mg, 37.6% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): RT (분) = 1.35, [M+H]+ = 365.1, 방법 = C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.09 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.16(s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.05-3.92 (m, 2H), 3.17-3.12 (m, 2H), 2.78-2.74 (m, 3H), 2.17-2.11 (m, 1H), 1.61-1.56 (m, 1H), 1.45-1.42 (m, 1H), 1.01 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 94:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-7-플루오로-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 161)
Figure pct00713
단계 1: 트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00714
DCM(3 mL) 및 1 점적의 DMF 중 (±)-트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복실산(290 mg, 2.61 mmol), 옥살릴 다이클로라이드(0.2 mL, 2.36 mmol)의 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하였다. DCM(7 mL) 및 피리딘(0.5 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(700 mg, 2.17 mmol)의 용액에 농축 산 클로라이드 혼합물을 여러 분획으로 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 잔사를 EtOAc(50 mL)에 용해시키고, pH를 포화 NaHCO3에 의해 7 내지 8로 조정하였다. 유기 층을 100 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 이어서, 유기물을 분리하고, 건조한 후(NaSO4), 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 크로마토그래피(PE:EA = 2:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(730 mg, 40.2% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 416.0.
단계 2: 트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00715
1,4-다이옥산(10 mL) 중 트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도-3-이소퀴놀일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(730 mg, 1.76 mmol), (4S)-4-메틸옥사졸리딘-2-온(270 mg, 2.67 mmol), CuI(667 mg, 3.51 mmol), N1,N2-다이메틸에탄-1,2-다이아민(616 mg, 7 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA = 4:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 최종적으로 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(460 mg, 40.9% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 389.1.
단계 3: tert-부틸 3-(트랜스-2-시아노-사이클로프로판카복스아미도)-7-플루오로-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00716
1,4-다이옥산(10 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-[(4S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-3-이소퀴놀일]-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(450 mg, 1.16 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.3 g, 11.1 mmol), 브렛포스(120 mg, 0.22 mmol), Pd2(dba)3(210 mg, 0.23 mmol) 및 Cs2CO3(1.1 g, 3.37 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 Ar 하에 가열하였다. 반응 생성물을 농축 건조하였다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA = 4:1 → PE:EA = 1:1)로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(55 mg, 6.2% 수율). LCMS (ESI) [M+H]+ = 470.2.
단계 4: 트랜스-N-(8-아미노-7-플루오로-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00717
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[트랜스-2-시아노-사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-[(4S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(55 mg, 0.12 mmol), TFA(0.5 mL, 0.12 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 농축 건조하고, 잔사를 MeOH(2 mL)에 용해시키고, pH를 포화 NaHCO3에 의해 7 내지 8로 조정하였다. 혼합물을 제조용 HPLC(5%-95% 메탄올 및 물 중 0.8 g/L NH4HCO3)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(16.7 mg, 37.8% 수율). LCMS (ESI): RT(분) = 1.65, [M+H]+ = 370.1, 방법 = B. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.14 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.06 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.39 (s, 2H), 4.67 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 2.75-2.71 (m, 1H), 2.15-2.12 (m, 1H), 1.61-1.57 (m, 1H), 1.42-1.40 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 95:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로벤조[d]옥사졸-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 162) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로벤조[d]옥사졸-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 163)
Figure pct00718
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-메틸-2-옥소-2,3-다이하이드로벤조[d]옥사졸-6-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드에 대해 기술된 과정을 사용하여 제조하였다. 단일 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 162: LCMS (ESI): RT(분) = 3.83, [M+H]+ = 400.1, 방법 = J. 화합물 163: LCMS (ESI): RT(분) = 3.83, [M+H]+ = 400.1, 방법 = J.
실시예 96:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 164)
Figure pct00719
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)에 대해 기술된 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.7 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.0 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 4.84-5.02 (m, 1H), 4.58-4.72 (m,1H), 4.56 (t, 1H), 4.04-4.07 (m, 1H), 2.23-2.51 (m, 1H), 1.63-1.70 (m, 1H), 1.14-1.3 (m, 4H)
실시예 97:
(1S,2R)-N-(8-아미노-6-((R)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 165)
Figure pct00720
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)에 대해 기술된 과정을 사용하여 제조하였다. LCMS (ESI): RT(분) = 1.52, [M+H]+ = 345.2, 방법 = B.
실시예 98:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 166) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 167)
Figure pct00721
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 156)에 대해 기술된 과정을 사용하여 제조하였다. 단일 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 166: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.08 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.31 (s, 2H), 5.18 (s, 1H), 2.73-2.77 (m, 1H), 2.12-2.14 (m, 1H), 1.59-1.61 (m, 1H), 1.40-1.57 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 2.48, [M+H]+ = 359.1, 방법 = J. 화합물 167: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.08 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.31 (s, 2H), 5.18 (s, 1H), 2.73-2.77 (m, 1H), 2.12-2.14 (m, 1H), 1.59-1.61 (m, 1H), 1.40-1.57 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 2.48, [M+H]+ = 359.1, 방법 = J.
실시예 99:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 168) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 169)
Figure pct00722
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸이소티아졸-5-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 62)에 대해 기술된 과정을 사용하여 제조하였다. 단일 이성질체를 키랄 SFC로 분리하였다. 화합물 168: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.18 (s, 1H), 3.34 (s, 1H), 8.48 (s, H), 8.29 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.55 (s, 2H), 2.74-2.76 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.08-2.17 (m, 1H), 1.62-1.63 (m, 1H), 1.40-1.45 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 4.66, [M+H]+ = 350.1, 방법 = J. 화합물 169: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.18 (s, 1H), 3.34 (s, 1H), 8.48 (s, H), 8.29 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.55 (s, 2H), 2.74-2.76 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.08-2.17 (m, 1H), 1.62-1.58 (m, 1H), 1.40-1.45 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 4.66, [M+H]+ = 350.1, 방법 = J.
실시예 100:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1-메틸-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 170)
Figure pct00723
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 123)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.09 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.29 (d, J = 9.8 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.00 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.68 (dd, J = 3.0, 0.8 Hz, 1H), 6.37 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 2.80 - 2.73 (m, 1H), 2.17 - 2.11 (m, 1H), 1.63- 1.55 (m, 1H), 1.48 - 1.40 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 2.76, [M+H]+ = 383.1, 방법 = J.
실시예 101:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(1-메틸-1H-피라졸로[3,4-c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 171)
Figure pct00724
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 123)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.11 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.40 - 8.29 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.06 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.44 (s, 2H), 4.24 (s, 3H), 2.77 (dd, J = 10.8, 8.0 Hz, 1H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 1.65 - 1.56 (m, 1H), 1.49 - 1.39 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 3.09, [M+H]+ = 384.1, 방법 = J.
실시예 102:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(2-메틸-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 172)
Figure pct00725
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 123)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.11 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.32 (d, J = 14.3 Hz, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.02 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.39 (s, 2H), 4.30 (s, 3H), 2.75 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 1.64 - 1.55 (m, 1H), 1.49 - 1.39 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 2.70, [M+H]+ = 384.1, 방법 = J.
실시예 103:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5,5-다이메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 173)
Figure pct00726
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.01 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 3.89 (s, 2H), 2.74 (dd, J = 11.4, 7.2 Hz, 1H), 2.18 - 2.09 (m, 1H), 1.60 - 1.55 (m, 1H), 1.48 (s, 6H), 1.42 (dt, J = 10.2, 5.1 Hz, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 3.58, [M+H]+ = 366.1, 방법 = J.
실시예 104:
트랜스-N-(8-아미노-6-((S)-4-이소프로필-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 174)
Figure pct00727
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.03 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.00 (s, 2H), 6.35 (s, 2H), 4.63 (dd, J = 8.4, 4.1 Hz, 1H), 4.42 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.29 (dd, J = 9.0, 4.0 Hz, 1H), 2.73 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.16 - 2.07 (m, 2H), 1.61 - 1.55 (m, 1H), 1.42 (dt, J = 9.3, 4.7 Hz, 1H), 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.75 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 3.89, [M+H]+ = 380.1, 방법 = J.
실시예 105:
트랜스-N-(8-아미노-6-((R)-4-이소프로필-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 175)
Figure pct00728
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.03 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.00 (s, 2H), 6.35 (s, 2H), 4.69 - 4.59 (m, 1H), 4.42 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.30 (dd, J = 8.9, 4.0 Hz, 1H), 2.79 - 2.69 (m, 1H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 1.64 - 1.54 (m, 1H), 1.46 - 1.37 (m, 1H), 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.75 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 3.98, [M+H]+ = 380.2, 방법 = J.
실시예 106:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 176)
Figure pct00729
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.01 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.35 (s, 2H), 4.47 - 4.40 (m, 2H), 4.13- 4.06 (m, 2H), 2.78 - 2.71 (m, 1H), 2.17 - 2.08 (m, 1H), 1.61 - 1.54 (m, 1H), 1.46 - 1.38 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 3.02, [M+H]+ = 338.1, 방법 = J.
실시예 107:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(2-옥소테트라하이드로-2H-사이클로펜타[d]옥사졸-3(3aH)-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 177)
Figure pct00730
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-((S)-4-메틸-2-옥소-옥사졸리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판카복스아미드(화합물 128)에 대해 기술된 바와 유사한 과정을 사용하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.02 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.35 (s, 2H), 5.14 - 5.04 (m, 1H), 4.89 (s, 1H), 2.73 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 2.01 - 1.93 (m, 1H), 1.86 - 1.76 (m, 3H), 1.68 (s, 1H), 1.63- 1.52 (m, 2H), 1.42 (d, J = 4.3 Hz, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 3.73, [M+H]+ = 378.1, 방법 = J.
실시예 108:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(N,N-다이메틸설팜오일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판-1,2-다이카복스아미드(화합물 178)
Figure pct00731
LCMS (ESI): RT(분) = 3.32, [M+H]+ = 378.1, 방법 = N*.
실시예 109:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(N,N-다이메틸설팜오일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 179)
Figure pct00732
LCMS (ESI): RT(분) = 3.39, [M+H]+ = 369.1, 방법 = N*.
실시예 110:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 180) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 181)
Figure pct00733
단계 1: 4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-아민
Figure pct00734
10:1 다이옥산/물(110 mL) 중 2-클로로-4-메틸피리딘-3-아민(5.0 g, 35 mmol), (1-메틸-1H-피라졸-5-일)보론산(13.25 g, 105.2 mmol), K3PO4(22.33 g, 105.20 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(2.57 g, 3.51 mmol)의 혼합물을 100℃에서 가열하였다. 3시간 후, 고체를 여과하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(3:2 석유 에터/에틸 아세테이트)로 정제하여 4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-아민(2.0 g, 30% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 189.
단계 2: 3-요오도-4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘
Figure pct00735
CH3CN(10 mL) 중 4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-아민(0.50 g, 2.7 mmol), t-BuNO2(1.09 g, 10.6 mmol)의 빙랭 용액에 CuI(2.02 g, 10.6 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온까지 가온하였다. 16시간 후, 반응 생성물을 암모늄 하이드록사이드(10 mL) 및 물(10 mL)로 순차적으로 희석하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄(20 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(3:1 에틸 아세테이트/석유 에터)로 정제하여 3-요오도-4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘(0.30 g, 38%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 300.
단계 3: 8-클로로-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00736
10:1 1,4-다이옥산/물(22 mL) 중 (3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)보론산(892 mg, 4.01 mmol), 3-요오도-4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘(0.60 g, 2.0 mmol), Pd(dppf)Cl2(147 mg, 0.20 mmol), AcONa(164 mg, 2.01 mmol) 및 K3PO4(1.28 g, 6.02 mmol)의 혼합물을 100℃에서 가열하였다. 2시간 후, 고체를 여과하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 8-클로로-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민(0.70 g, 74% 수율)을 암적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 350.
단계 4: 트랜스-N-[8-클로로-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00737
다이클로로메탄(40.00 mL) 중 8-클로로-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민(632 mg, 1.81 mmol), 트랜스-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산(0.20 g, 1.2 mmol) 및 피리딘(6.00 mL)의 빙랭 용액에 POCl3(277 mg, 1.81 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온까지 가온하였다. 30분 후, 과량의 POCl3을 물(30 mL)로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄(100 mL)으로 추출하였다. 수집된 유기물을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 조질 트랜스-N-[8-클로로-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(0.60 g)를 암적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 498.
단계 5: 트랜스-tert-부틸 N-(3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00738
다이옥산(20 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(0.80 g, 1.61 mmol), tert-부틸 카밤에이트(3.76 g, 32.1 mmol), Pd2(dba)3(294 mg, 3.21 mmol), 브렛포스(302 mg, 0.56 mmol) 및 t-BuONa(386 mg, 4.03 mmol)의 현탁액을 90℃에서 가열하였다. 16시간 후, 고체를 여과하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 트랜스-tert-부틸 N-(3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(350 mg, 38% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 579.
단계 6: (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00739
N,N-다이메틸포름아미드(2.0 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-(3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-[4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.30 g, 0.52 mmoL)의 용액에 HCl(5 mL, 다이옥산 중 4 M)을 실온에서 첨가하였다. 1시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하였다. 조 물질을 제조용 HPLC로 정제하여 라세미체 생성물(60 mg, 24%)을 연황색 고체로서 수득하였다. 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 분리하였다. 화합물 180: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.17 (s, 1H), 8.56 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.49 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.47(d, J = 1.3 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 2.38 - 2.33 (m, 1H), 2.29 (s,3H), 2.12 - 2.04 (m,1H), 1.57 - 1.53 (m,1H), 1.30 - 1.18 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.23, [M+H]+ = 479, 방법 = K. 화합물 181: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.17 (s, 1H), 8.56 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.49 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 7.37(s, 1H), 7.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.47 (d, J = 1.3 Hz,1H), 5.99(d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.86 (s,3H), 3.81 (s,3H), 2.38 - 2.33 (m, 1H), 2.29 (s,3H), 2.12 - 2.04 (m,1H), 1.57 - 1.53 (m, 1H), 1.30 - 1.18 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.22, [M+H]+ = 479, 방법 = K.
실시예 111:
(1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-페닐피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 182) 및 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-페닐피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 183)
Figure pct00740
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 180)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 182: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.14 (s,1H), 8.47 (s,1H), 8.13 (s,1H), 7.50 (s,1H), 7.44 - 7.26 (m, 4H), 7.22 - 7.11 (m, 3H), 6.78 (s, 1H), 6.50 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 0.6 Hz, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.13- 2.04 (m, 1H), 1.56 - 1.53 (m, 1H), 1.32 - 1.17 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.13, [M+H]+ = 474, 방법 = K. 화합물 183; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.14 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.44 - 7.26 (m, 4H), 7.22 - 7.11 (m, 3H), 6.78 (s, 1H), 6.50 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.13- 2.04 (m, 1H), 1.56 - 1.53 (m, 1H), 1.32 - 1.17 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.13, [M+H]+ = 474, 방법 = K.
실시예 112:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(피페리딘-1-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 184)
Figure pct00741
표제 화합물을, 3-브로모-4-메틸-2-(피페리딘-1-일)피리딘을 치환하는 것을 제외하고는, (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 180)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.06 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.29 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.94 - 6.80 (m, 2H), 6.53 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.96 (s, 4H), 2.19 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.36 (qd, J = 7.0, 6.2, 4.3Hz, 3H), 1.25 (d, J = 8.3Hz, 4H), 1.20 - 1.10 (m,1H). LCMS (ESI): RT (분) = 2.02, [M+H]+ = 482.3, 방법 = K.
실시예 113:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(2-아미노-3-메틸피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 185)
Figure pct00742
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 156)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.83 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 6.53-6.41 (m, 2H), 6.31 (s, 2H), 5.78 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.20-2.16 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.44-1.32 (m, 1H), 1.17-1.14 (m, 1H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.05, [M+H]+ = 414.1, 방법 = K.
실시예 114:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-[4-메틸-5-[(프로판-2-일)아미노]피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 186)
Figure pct00743
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 156)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.26 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.68 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 3.83-3.80 (m, 1H), 2.71 - 2.60 (m, 1H), 2.18 - 2.03 (m, 4H), 1.58 - 1.54 (m, 2H), 1.33 (d, J = 12 Hz, 6H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.03, [M+H]+ = 401.1, 방법 = K.
실시예 115:
(±)-트랜스-(1S,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)사이클로프로판카복스아미드(화합물 187)
Figure pct00744
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 180)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.28 (s, 1H), 8.41 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.26 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.83- 2.59 (m, 2H), 2.18 (t, J = 0.7 Hz, 3H), 2.01 (dt, J = 8.7, 4.5 Hz, 1H), 1.85 - 1.58 (m, 1H), 1.33 (dt, J = 9.0, 4.7 Hz, 1H), 1.07 - 1.00 (m, 1H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.207, [M+H]+ = 438.2, 방법 = K.
실시예 116:
N-(8-아미노-6-(2,3-다이하이드로-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 188)
Figure pct00745
단계 1: tert-부틸 4-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트
Figure pct00746
5:1 다이옥산/물(12 mL) 중 tert-부틸 4-[(트라이플루오로메탄)설폰일옥시]-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트(0.50 g, 1.36 mmol, 문헌[J.Med. Chem. 2014, 57, 2462]), (3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)보론산(602 mg, 2.71 mmol), Pd(dppf)Cl2(198 mg, 0.27 mmol)의 혼합물에 K3PO4(288 mg, 1.36 mmol) 및 NaOAc(167 mg, 2.04 mmol)를 첨가하였다. 현탁액을 100℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(10:1 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트(0.30 g, 56% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 397.1.
단계 2: tert-부틸 4-(8-클로로-3-사이클로프로판아미도이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트
Figure pct00747
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트(0.40 g, 1.0 mmol)의 용액에 사이클로프로판카보닐 클로라이드(0.120 g, 1.15 mmol) 및 피리딘(0.20 g, 2.5 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 3시간 후, 반응 생성물을 진공 하에 농축하여 조질 tert-부틸 4-(8-클로로-3-사이클로프로판아미도이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트(0.50 g)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 465.1.
단계 3: tert-부틸 4-(8-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-사이클로프로판아미도이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트
Figure pct00748
다이옥산(50 mL) 중 tert-부틸 4-(8-클로로-3-사이클로프로판아미도이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트(0.50 g, 1.08 mmol), tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]카밤에이트(2.50 g, 11.5 mmol), Pd2(dba)3(0.20 g, 0.22 mmol), 브렛포스(0.20 g, 0.37 mmol) 및 t-BuONa(0.260 g, 2.71 mmol)의 현탁액을 90℃에서 가열하였다. 1시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(10:1 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 tert-부틸 4-(8-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-사이클로프로판아미도이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트(0.40 g, 68% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 546.1.
단계 4: N-(8-아미노-6-[1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일]이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00749
다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 4-(8-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-3-사이클로프로판아미도이소퀴놀린-6-일)-1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-카복실레이트(250 mg, 0.46 mmol)의 용액에 농축 염산(10 mL)을 25℃에서 첨가하였다. 30분 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 N-(8-아미노-6-[1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일]이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(4.7 mg, 3%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.11-7.02 (m, 1H), 6.73 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.36 (s, 2H), 6.18 (s, 1H), 3.55 -3.50 (m, 2H), 3.20 -3.15 (m, 2H), 2.06 - 2.01 (m, 1H), 0.84 - 0.80 (m, 4H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.193, [M+H]+ = 346.1, 방법 = K.
실시예 117:
(S)-N-(8-아미노-6-(2-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 189) 및 (R)-N-(8-아미노-6-(2-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 190)
Figure pct00750
표제 화합물을 N-(8-아미노-6-[1H,2H,3H-피롤로[2,3-c]피리딘-4-일]이소퀴놀린-3-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 188)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 단일 이성질체를 키랄 SFC로 정제하였다. 화합물 189: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.21 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.18 -3.91 (m, 1H), 3.34 -3.31 (m, 1H), 2.81 (dd, J = 16.8 Hz, 7.7 Hz, 1H), 1.98 - 1.90 (m, 1H), 1.29 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.05 - 0.99 (m, 2H), 0.98 - 0.85 (m, 2H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.09, [M+H]+ = 360.3, 방법 = K. 화합물 190: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.21 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.18 -3.91 (m, 1H), 3.34 -3.31 (m, 1H), 2.81 (dd, J = 16.8, 7.7 Hz, 1H), 1.98 - 1.90 (m, 1H), 1.29 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.05 - 0.99 (m, 2H), 0.98 - 0.85 (m, 2H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.09, [M+H]+ = 360.3, 방법 = K.
실시예 118:
(±)-(1S*,2S*,3R*)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드(화합물 191) 및 (±)-(1S*,2S*,3S*)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드(화합물 192)
Figure pct00751
단계 1: 2-[(벤질옥시)메틸]-N-[8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00752
다이클로로메탄(30 mL) 중 8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(282 mg, 1.05 mmol)의 빙랭 용액에 피리딘(6.0 mL, 74 mmol), 트랜스-2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실산(0.30 g, 1.4 mmol) 및 POCl3(321 mg, 2.09 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 25℃까지 가온한 후, 물(20 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄(3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기물을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 2-[(벤질옥시)메틸]-N-[8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(210 mg, 43%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 472.0.
단계 2: tert-부틸 N-(3-[[2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00753
다이옥산(10 mL) 중 트랜스-2-[(벤질옥시)메틸]-N-[8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(420 mg, 0.89 mmol), NH2Boc(2.61 g, 22 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(184 mg, 0.18 mmol), 브렛포스(191 mg, 0.36 mmol) 및 Cs2CO3(1.16 g, 3.57 mmol)의 현탁액을 120℃에서 가열하였다. 1.5시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(4:1 에틸 아세테이트/석유 에터)로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(450 mg, 92%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 472.2.
단계 3: tert-부틸 3-(2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00754
메탄올(30 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[(1S,2S)-2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(350 mg, 0.63 mmol) 및 탄소 상 Pd(OH)2(2.5 g)의 현탁액을 30분 동안 25℃에서 H2(1 atm) 하에 교반하였다. 고체를 여과하고, 여액을 진공에서 농축하여 조질 tert-부틸 N-(3-[[(2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.20 g, 68%)를 연녹색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.3.
단계 4: 2-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카바모일)-3-메틸사이클로프로필)메틸 메탄설포네이트
Figure pct00755
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[(1S,2S)-2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(140 mg, 0.30 mmol) 및 트라이에틸아민(183 mg, 1.81 mmol)의 빙랭 용액에 MsCl(138 mg, 1.21 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 25℃까지 가온한 후, 물(10 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄(50 mL)으로 추출하였다. 유기 추출물을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 조질 2-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카바모일)-3-메틸사이클로프로필)메틸 메탄설포네이트(150 mg)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 541.3.
단계 5: tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00756
DMSO(3 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(메탄설폰일메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.10 g) 및 KCN(99 mg, 1.5 mmol)의 용액을 50℃에서 가열하였다. 2시간 후, 반응 생성물을 물(20 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄(50 mL)으로 추출하였다. 수집된 유기물을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(10:1 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.070 g, 78%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 472.3.
단계 6: (±)-(1S*,2S*,3R*)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드 및 (±)-(1S*,2S*,3S*)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00757
다이클로로메탄(1 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.070 g, 0.15 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(1.0 mL, 13 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 25분 후, 반응 혼합물을 2 M 수성 나트륨 바이카본에이트에 의해 pH 8까지 조정하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄(50 mL)으로 추출하였다. 수집된 유기물을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 제조용 HPLC로 정제하여 2개의 부분입체 이성질체를 수득하였다. 화합물 191: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.80 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.67 - 8.39 (m, 2H), 8.26 (s, 1H), 7.45 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.97 - 6.81 (m, 1H), 6.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.37 (s, 2H), 2.81 (dd, J = 17.6, 7.3 Hz, 1H), 2.69 (dd, J = 17.7, 7.7 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.79 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 1.71 - 1.57 (m, 1H), 1.52 - 1.37 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.3 Hz, 3H). LCMS (ESI) RT (분) = 1.153, [M+H]+ = 372.2, 방법 = C. 화합물 192: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.79 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.48 - 8.36 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.99 - 6.86 (m, 1H), 6.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 2.83- 2.61 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.15 - 2.03 (m, 1H), 1.58 - 1.45 (m, 1H), 1.36 (dt, J = 9.1, 6.1 Hz, 1H), 1.17 (d, J = 6.1 Hz, 3H). LCMS (ESI) RT (분) = 1.924, [M+H]+ = 372.2, 방법 = C.
실시예 119:
(2S)-2-(4-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 193) 및 (2R)-2-(4-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 194)
Figure pct00758
단계 1: 2-(4-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴
Figure pct00759
1,4-다이옥산(15 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(250 mg, 0.86 mmol), 2-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(1.04 g, 5.21 mmol), 3세대 t-Bu브렛포스 전촉매(370 mg, 0.43 mmol), t-Bu브렛포스(210 mg, 0.43 mmol) 및 칼륨 카본에이트(720 mg, 5.2 mmol)의 현탁액을 120℃에서 가열하였다. 16시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 2-(4-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(240 mg, 68%)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 407.1.
단계 2: tert-부틸 N-(3-[[1-(1-시아노에틸)-1H-피라졸-4-일]아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00760
1,4-다이옥산(50 mL) 중 2-(4-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(0.420 g, 1.03 mmol), tert-부틸 카밤에이트(3.63 g, 31.0 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(160 mg, 0.15 mmol), 브렛포스(110 mg, 0.20 mmol) 및 Cs2CO3(1.35 g, 4.12 mmol)의 현탁액을 90℃에서 가열하였다. 3시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(95:5 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[1-(1-시아노에틸)-1H-피라졸-4-일]아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.40 g, 79%)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 488.3.
단계 3: (2S)-2-(4-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴 및 (2R)-2-(4-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴
Figure pct00761
다이클로로메탄(10.0 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[1-(1-시아노에틸)-1H-피라졸-4-일]아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(350 mg, 0.71 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(10.0 mL, 134 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 1시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC 및 이어서 키랄 SFC로 정제하여 2개의 거울상 이성질체를 수득하였다. 화합물 193: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.29 (s, 1H), 8.76 (s,1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.09 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.34 (m, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.76 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.82 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.80 (d, J = 7.1 Hz, 3H). LCMS (ESI) RT (분) = 1.08, [M+H]+ = 388.2. 방법 = K. 화합물 194: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.29 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.09 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.34 (m, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.76 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.82 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.80 (d, J = 7.1 Hz, 3H). LCMS (ESI) RT (분) = 1.08, [M+H]+ = 388.2. 방법 = K.
실시예 120:
(1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 195), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 196), (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 197) 및 (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 198)
Figure pct00762
단계 1: 에틸다이페닐설포늄 테트라플루오로보레이트
Figure pct00763
다이클로로메탄(450 mL) 중 AgBF4(37.48 g, 192.5 mmol)의 용액에 요오도에탄(30.0 g, 192 mmol)을 N2 하에 실온에서 첨가하였다. 30분 후, 다이페닐설파이드(107 g, 574 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 35℃까지 가온하였다. 16시간 후, 고체를 여과 제거하고, 여액을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 다이클로로메탄/에터(3 x 500 mL)로 세정하여 에틸다이페닐설파늄 테트라플루오로보라누이드(25 g, 39%)를 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 2: tert-부틸 (2E)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트
Figure pct00764
N,N-다이메틸포름아미드(20 mL) 중 4-요오도-1-메틸-1H-피라졸(5.0 g, 24 mmol), tert-부틸 프로프-2-에노에이트(9.23 g, 72.0 mmol), 트라이에틸아민(2.91 g, 28.8 mmol), Pd(OAc)2(538 mg, 2.40 mmol) 및 P(o-Tol)3(1.46 g, 4.80 mmol)의 용액을 110℃에서 가열하였다. 16시간 후, 반응 생성물을 진공 하에 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(3:1 석유 에터/에틸 아세테이트)로 정제하여 tert-부틸 (2E)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트를 연황색 오일로서 수득하였다(3.9 g, 74%). LCMS (ESI): M+H+ = 209.0.
단계 3: tert-부틸-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct00765
1,2-다이메톡시에탄(100 mL) 및 다이클로로메탄(15 mL) 중 에틸다이페닐설포늄 테트라플루오로보레이트(6.53 g, 21.6 mmol)의 용액에 LDA의 용액(12.6 mL, 235.24 mmol, THF 중 2 M)을 -78℃에서 적가하였다. 30분 후, 1,2-다이메톡시에탄(10 mL) 중 tert-부틸 (2E)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트(1.50 g, 7.20 mmol)를 일라이드 용액에 -78℃에서 적가하였다. 첨가 후, 반응 생성물을 실온까지 가온하였다. 16시간 후, 반응 생성물을 물(100 mL)로 희석하고, 생성된 혼합물을 클로로포름(3 x 150 mL)으로 추출하였다. 수집한 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 조질 tert-부틸-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실레이트(1.5 g)를 연황색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct00766
다이클로로메탄(10 mL) 중 tert-부틸-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실레이트(0.60 g, 2.5 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(10 mL)을 실온에서 첨가하였다. 5시간 후, 반응 생성물을 진공 하에 농축하고, 생성된 잔사를 물(45 mL)로 희석하였다. 수용액을 10 M 나트륨 하이드록사이드에 의해 pH 9 내지 10까지 염기성화시켰다. 이어서, 수용액을 에터(30 mL)로 세척하고, 생성된 수성 물질을 1 M 수성 염산에 의해 pH 3 내지 4까지 산성화시켰다. 산성 수용액을 에틸 아세테이트(3 x 70 mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 진공 하에 농축하여 조질 2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산을 회백색 고체로서 수득하였다(450 mg, 70% 순도, 30% TFA를 함유함). LCMS (ESI): M+H+ = 181.0.
단계 5: N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00767
다이클로로메탄(50 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(1.0 g, 3.5 mmol), 2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산(690 mg, 3.8 mmol), 피리딘(7 mL) 및 프로파길 알코올(953 mg, 6.22 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 진공 하에 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(30:1 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(750 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 450.2.
단계 6: tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00768
1,4-다이옥산(260 mL) 중 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(2.0 g, 4.45 mmol)의 용액에 tert-부틸 카밤에이트(11.5 g, 98.2 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름(691 mg, 0.67 mmol), 다이사이클로헥실[3,6-다이메톡시-2',4',6'-트리스(1-메틸에틸)[1,1'-바이페닐]-2-일]포스핀(477 mg, 0.89 mmol) 및 세슘 카본에이트(7.3 g, 22.41 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 90℃에서 교반하였다. 2.5시간 후, 고체를 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(15:1 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(1.2 g, 51%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 531.1.
단계 7: (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드, (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드, (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드 및 (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00769
다이클로로메탄(25 mL) 및 트라이플루오로아세트산(25 mL) 중 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(1.0 g, 1.88 mmol)의 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 제조용 HPLC 및 키랄 SFC로 정제하여 4개의 이성질체를 수득하였다. 화합물 195: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.30 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.45 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.34 - 2.32 (m, 4H), 2.17 - 2.14 (m, 1H), 1.62 - 1.48 (m, 1H), 1.35 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.14, [M+H]+ = 461.3, 방법 = K. 화합물 196: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.31 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.98 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.52 - 2.49 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.99 - 1.97 (m, 1H), 1.79 - 1.72 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.15, [M+H]+ = 461.3, 방법 = K. 화합물 197: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.31 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.43 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.98 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.53- 2.49 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.99 - 1.97 (m, 1H), 1.77 - 1.72 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.15, [M+H]+ = 461.3, 방법 = K. 화합물 198: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.30 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.45 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.34 - 2.32 (m, 4H), 2.17 - 2.14 (m, 1H), 1.67 - 1.61 (m, 1H), 1.35 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.14, [M+H]+ = 461.3, 방법 = K.
실시예 121:
(R)-2-(3-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 199) 및 (S)-2-(3-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 200)
Figure pct00770
표제 화합물을 (2S)-2-(4-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 193)에 대해 기술된 과정을 사용하여 제조하였다. 단일 이성질체를 키랄 HPLC로 단리하였다. 화합물 199: 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.14 (s, 1H), 8.39 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 7.80 (s, 1H), 7.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.25 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.59-5.54 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.91 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 0.99, [M+H]+ = 461.3, 방법 = K. 화합물 200: 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 9.14 (s, 1H), 8.39 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 7.80 (s, 1H), 7.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.25 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.59 - 5.54 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.91 (d, J = 6.8 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 0.99, [M+H]+ = 461.3, 방법 = K.
실시예 122:
(S)-2-(4-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 201) 및 (R)-2-(4-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 202)
Figure pct00771
표제 화합물을 (2S)-2-(4-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 193)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 거울상 이성질체를 키랄 HPLC로 단리하였다. 화합물 201: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 8.39 - 8.37 (m, 2H), 8.06 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.37(d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 6.45 (s, 1H), 5.62 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.90 (d, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.585, [M+H]+ = 370.2, 방법 = K. 화합물 202: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 8.39 - 8.37 (m, 2H), 8.06 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.37(d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 6.45 (s, 1H), 5.62 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.90 (d, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 0.946, [M+H]+ = 370.2, 방법 = K.
실시예 123:
2-(4-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 203), 2-(4-(8-아미노-5,7-다이클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 204), (2S)-2-(4-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 205) 및 (2R)-2-(4-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(화합물 206)
Figure pct00772
CH3CN(10 mL) 중 2-(4-[[8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-1H-피라졸-1-일)프로판니트릴(0.20 g, 0.54 mmol) 및 NCS(72 mg, 0.54 mmol)의 용액을 50℃에서 가였하였다. 2시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 제조용 HPLC 및 키랄 SFC로 순차적으로 정제하여 4개의 이성질체를 수득하였다. 화합물 203: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.17 (s, 1H), 8.42 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.63 (q, J = 7.2, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.89 (d, J = 7.2, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.12, [M+H]+ = 404.2, 방법 = K. 화합물 204: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.26 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.14 (1H, s), 7.70 (s, 1H), 7.46 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 5.65 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.90 (d, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 2.20, [M+H]+ = 438.1, 방법 = K. 화합물 205: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.17 (s, 1H), 8.42 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 5.61 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.89 (d, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.78, [M+H]+ = 404.2, 방법 = K. 화합물 206: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.17 (s, 1H), 8.42 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.80 (s, 2H), 5.61 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.89 (d, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT (분) = 1.78, [M+H]+ = 404.2, 방법 = K.
실시예 124:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 207) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 208)
Figure pct00773
단계 1: 3-요오도-4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘
Figure pct00774
DMA(10.00 mL) 중 2-클로로-3-요오도-4-메틸피리딘(600 mg, 2.367 mmol), 피롤리딘(336.71 mg, 4.73 mmol) 및 DIEA(611.88 mg, 4.73 mmol)의 용액을 120℃에서 가열하였다. 2시간 후, 반응 생성물을 물(50 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 수집된 유기물을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 조질 3-요오도-4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘(630 mg, 92%)을 암적색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 289.0.
단계 2: 8-클로로-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민
Figure pct00775
1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(2.5 mL) 중 (3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)보론산(926.4 mg, 4.17 mmol), 3-요오도-4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘(600 mg, 2.08 mmol), X-Phos 팔라듐(II) 바이페닐-2-아민 클로라이드(328 mg, 0.42 mmol), X-Phos(397 mg, 0.83 mmol) 및 칼륨 카본에이트(576 mg, 4.16 mmol)의 현탁액을 100℃에서 가열하였다. 2시간 후, 고체를 여과하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(1:1 에틸 아세테이트/석유 에터)로 정제하여 8-클로로-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민(0.40 g, 57%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 339.1.
단계 3: (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00776
다이클로로메탄(40 mL) 중 8-클로로-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민(440 mg, 1.3 mmol), 트랜스-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산(180 mg, 1.08 mmol) 및 피리딘(6.00 mL, 74.54 mmol)의 빙랭 용액에 POCl3(249 mg, 1.63 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 실온까지 가온하고, 물(50 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄(100 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하여 조질 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(0.40 g, 76%)를 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 487.0.
단계 4: (±)-트랜스-tert-부틸 N-(3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00777
1,4-다이옥산(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-클로로-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(0.30 g, 0.62 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.50 g, 12.8 mmol), Pd2(dba)3CHCl3(148 mg, 0.14 mmol), 브렛포스(120 mg, 0.22 mmol) 및 t-BuONa(152 mg, 1.58 mmol)의 혼합물을 100℃에서 가열하였다. 4시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에터 중 10% 에틸 아세테이트 → 100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 조질 (±)-트랜스-tert-부틸 N-(3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.20 g, 57%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 568.0.
단계 5: (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct00778
4 N HCl/1,4-다이옥산(5 mL) 중 (±)-트랜스-tert-부틸 N-(3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-[4-메틸-2-(피롤리딘-1-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(0.050 g, 0.088 mmol)의 용액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 키랄 SFC로 정제하여 2개의 거울상 이성질체를 수득하였다. 화합물 207: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.22 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.93 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.67 - 6.60 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.15 -3.07 (m, 4H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.15 - 2.04 (m, 4H), 1.75 - 1.67 (m, 4H), 1.57 (dt, J = 9.1, 4.5 Hz, 1H), 1.33-1.20 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.14, [M+H]+ = 467.0, 방법 = K. 화합물 208: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.22 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.93 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.67 - 6.60 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.15-3.07 (m, 4H), 2.37 (dt, J = 9.7, 4.4 Hz, 1H), 2.14 - 2.04 (m, 4H), 1.75 - 1.67 (m, 4H), 1.57 (dt, J = 9.3, 4.6 Hz, 1H), 1.33- 1.20 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.38, [M+H]+ = 467.0, 방법 = K.
실시예 125:
(±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-클로로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)사이클로프로판카복스아미드(화합물 209)
Figure pct00779
단계 1: tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일]-N-[(tert-부톡시)카보닐]카밤에이트
Figure pct00780
다이옥산(100 mL) 및 물(10 mL) 중 6-브로모-8-클로로이소퀴놀린-3-아민(5.8 g, 22 mmol), (5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)보론산(16.0 g, 45.4 mmol), Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(3.3 g, 4.0 mmol) 및 나트륨 카본에이트(4.81 g, 45.38 mmol)의 현탁액을 85℃에서 가열하였다. 16시간 후, 반응 생성물을 여과하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(1% → 50% 에틸 아세테이트/석유 에터)로 정제하여 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일]-N-[(tert-부톡시)카보닐]카밤에이트(4.5 g, 41%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 485, 487.
단계 2: tert-부틸 N-[3-아미노-6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct00781
1,4-다이옥산(120 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일]-N-[(tert-부톡시)카보닐]카밤에이트(5.0 g, 10.3 mmol), tert-부틸 카밤에이트(24 g, 205 mmol), 브렛포스(1.1 g, 2.05 mmol), Pd2(dba)3-CHCl3(2.13 g, 2.06 mmol) 및 Cs2CO3(6.7 g, 20.6 mmol)의 현탁액을 85℃에서 가열하였다. 3시간 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(1% → 10% 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 tert-부틸 N-[3-아미노-6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(1.5 g, 26%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 566.0.
단계 3: (±)-트랜스-tert-부틸 N-[6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)-3-[[2-(시아노메틸)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct00782
다이클로로메탄(20 mL) 중 트랜스-2-(시아노메틸)사이클로프로판-1-카복실산(0.50 g, 3.40 mmol), tert-부틸 N-[3-아미노-6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(132 mg, 0.23 mmol) 및 피리딘(4 mL, 50 mmol)의 빙랭 용액에 POCl3(401 mg, 2.62 mmol)을 적가하였다. 반응 생성물을 1시간 동안 실온까지 가온하고, 이어서 물(20 mL)로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(1% → 10% 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 (±)-트랜스-tert-부틸 N-[6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)-3-[[2-(시아노메틸)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(330 mg, 12%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 673.1.
단계 4: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00783
다이클로로메탄(5 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)-3-[[2-(시아노메틸)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(0.060 g, 0.089 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(5 mL)을 실온에서 첨가하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조질 트랜스-N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(20.4 mg, 31%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 473.1.
단계 5: (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-클로로이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00784
CH3CN(10 mL) 중 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(110 mg, 0.30 mmol) 및 NCS(39.5 mg, 0.30 mmol)의 용액을 60℃에서 가열하였다. 6시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 농축하고, 생성된 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 (±)-트랜스-N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-클로로이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(20.4 mg, 17%)를 연황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.54 (s, 2H), 5.22 (s, 2H), 2.77 - 2.70 (m, 2H), 2.11 - 2.07 (m, 1H), 1.82 (s, 3H), 1.58 - 1.55 (m, 1H), 1.15 - 1.08 (m, 1H), 0.99 - 0.92 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.21, [M+H]+ = 407.0, 방법 = M.
실시예 126:
(1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 210) 및 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 211)
Figure pct00785
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 180)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 210: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.28 (s, 1H), 8.41 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.27 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.53 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 2.36 (ddd, J = 9.6, 6.3, 4.0 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.14 - 2.05 (m, 1H), 1.56 (dt, J = 9.1, 4.6 Hz, 1H), 1.27 - 1.20 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.09, [M+H]+ = 479.3, 방법 = K. 화합물 211: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.28 (s, 1H), 8.41 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.27 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.53 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 2.36 (ddd, J = 9.8, 6.4, 4.0 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.14 - 2.07 (m, 1H), 1.56 (dt, J = 9.2, 4.6 Hz, 1H), 1.28 - 1.19 (m, 1H) LCMS (ESI): RT(분) = 1.09, [M+H]+ = 479.3, 방법 = K.
실시예 127:
(1S,2S,3S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 212), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 213), (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 214) 및 (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 215)
Figure pct00786
표제 화합물을 (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 195)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 212: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.26 (s, 1H), 8.45 - 8.43 (m, 2H), 8.34 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.45 (d, J = 6.0 Hz 1H), 7.35 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.70 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.34 (dd, J = 6.5, 4.8 Hz, 1H), 2.17 (dd, J = 9.1, 4.9 Hz, 1H), 1.66 (dt, J = 8.9, 6.2 Hz, 1H), 1.37 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 0.95, [M+H]+ = 413.4, 방법 = N. 화합물 213: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.26 (s, 1H), 8.46 - 8.37 (m, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.41 (d, J = 4.8Hz, 2H), 7.04 (s, 1H), 6.69 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.52 (dd, J = 9.3, 4.7 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.99 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.82 - 1.72 (m, 1H), 1.07 (d, J = 6.3 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 0.75, [M+H]+ = 413.2, 방법 = K. 화합물 214: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.24 (s, 1H), 8.42 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.41 (t, J = 2.6 Hz, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.70 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.53 (dd, J = 9.2, 4.7 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.00 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.77 (ddd, J = 9.4, 6.1, 4.7 Hz, 1H), 1.07 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 0.74, [M+H]+ = 413.3, 방법 = K. 화합물 215: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.31 (s, 1H), 8.49 - 8.39 (m, 2H), 8.34 (s, 1H), 7.55 - 7.41 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.70 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.34 (dd, J = 6.5, 4.9Hz, 1H), 2.17 (dd, J = 9.1, 4.9 Hz, 1H), 1.66 (dt, J = 9.0, 6.3 Hz, 1H), 1.37 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LCMS (ESI): RT(분) = 0.95, [M+H]+ = 413.3, 방법 = N.
실시예 128:
(1R,2R)-N-(8-아미노-6-(2,6-다이클로로페닐)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 216) 및 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(2,6-다이클로로페닐)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 217)
Figure pct00787
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 123)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 216: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.78 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.63- 7.55 (m, 3H), 7.48 - 7.41 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 6.35 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.21 - 2.16 (m, 2H), 1.39 - 1.35 (m, 1H), 1.19 - 1.14 (m,1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.30, [M+H]+ = 452.1, 방법 = K. 화합물 217: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.78 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.65 - 7.51 (m, 3H), 7.46 (dd, J = 8.7, 7.5 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 6.35 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.23- 2.13 (m, 2H), 1.42 - 1.33 (m, 1H), 1.21 - 1.12 (m,1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.31, [M+H]+ = 452.2, 방법 = K.
실시예 129:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(2,6-다이플루오로페닐)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 218) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(2,6-다이플루오로페닐)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 219)
Figure pct00788
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 123)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 단일 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 218: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.24 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 (ddd, J = 8.5, 6.3, 2.1 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.10 (t, J = 8.0 Hz, 3H), 6.78 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.37 (td, J = 6.1, 3.2 Hz, 1H), 2.11 (dt, J = 8.7, 4.7 Hz, 1H), 1.57 (ddd, J = 9.2, 5.1, 4.1 Hz, 1H), 1.26 (ddd, J = 8.2, 6.4, 4.1 Hz, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.49, [M+H]+ = 420.2, 방법 = K. 화합물 219: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.24 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 (ddd, J = 8.5, 6.3, 2.1 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.10 (t, J = 8.0 Hz, 3H), 6.78 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.37 (td, J = 6.1, 3.2 Hz, 1H), 2.11 (dt, J = 8.7, 4.7 Hz, 1H), 1.57 (ddd, J = 9.2, 5.1, 4.1 Hz, 1H), 1.26 (ddd, J = 8.2, 6.4, 4.1 Hz, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.49, [M+H]+ = 420.2, 방법 = K.
실시예 130:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(2-시아노-6-메틸페닐)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 220) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(2-시아노-6-메틸페닐)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 221)
Figure pct00789
표제 화합물을 (±)-트랜스-N-(8-아미노-6-(8-메틸피리도[3,2-b]피라진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-시아노-사이클로프로판카복스아미드(화합물 123)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 220: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.14 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.76 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.50 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.46 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.78 - 2.72 (m, 1H), 2.16 - 2.10 (m, 4H), 1.62 - 1.57 (m, 1H), 1.45 - 1.43 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.55, [M+H]+ = 368.2, 방법 = M. 화합물 221: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.14 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.76 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.50 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.46 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.78 - 2.72 (m, 1H), 2.16 - 2.10 (m, 4H), 1.62 - 1.57 (m, 1H), 1.45 - 1.43 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.55, [M+H]+ = 368.2, 방법 = M.
실시예 131:
(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-3-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 222) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-3-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 223)
Figure pct00790
표제 화합물을 (1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸-2-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(화합물 180)에 대해 기술된 과정에 따라 약간의 변형을 가하여 제조하였다. 거울상 이성질체를 키랄 SFC로 단리하였다. 화합물 222: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.74 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.48 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 3H), 6.71 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.77 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 2.18 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.35 - 1.34 (m, 1H), 1.17 - 1.15 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.10, [M+H]+ = 479.3, 방법 = K. 화합물 223: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.74 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.48 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 3H), 6.71 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.77 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 2.18 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.35 - 1.34 (m, 1H), 1.17 - 1.15 (m, 1H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.10, [M+H]+ = 479.3, 방법 = K.
실시예 132:
엑소-N-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-하이드록시바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(화합물 224), 엑소-N-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-하이드록시바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(화합물 225) 및 엑소-N-(8-아미노-5,7-다이클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-하이드록시바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(화합물 226)
Figure pct00791
단계 1: (엑소)-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)옥시]-N-[8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-1-메틸바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드
Figure pct00792
다이클로로메탄(5 mL) 중 (엑소)-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)옥시]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복실산(289 mg, 0.75 mmol)(국제 공개공보 제2015/091889호), 8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(488 mg, 1.80 mmol) 및 피리딘(1 mL)의 빙랭 용액에 POCl3(491 mg, 3.20 mmol)을 적가하였다. 반응 생성물을 30분 동안 실온까지 가온하고, 이어서 물(10 mL)로 희석하였다. 용액을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(1:1에틸 아세테이트/석유 에터)로 정제하여 (엑소)-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)옥시]-N-[8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-1-메틸바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(0.30 g, 61%)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 632.2.
단계 2: tert-부틸 N-[6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[(엑소)-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)옥시]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct00793
다이옥산(10 mL) 중 (엑소)-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)옥시]-N-[8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(0.40 g, 0.63 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.85 mg, 0.02 mmol), Pd2(dba)3(130 mg, 0.14 mmol), Cs2CO3(819 mg, 2.51 mmol) 및 브렛포스(135 mg, 0.25 mmol)의 현탁액을 120℃에서 가열하였다. 2시간 후, 반응 생성물을 여과하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피(1:1 에틸 아세테이트/석유 에터)로 정제하여 tert-부틸 N-[6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[(엑소)-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)옥시]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(315 mg, 70%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 713.3.
단계 3: (엑소)-N-[8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)메틸]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드
Figure pct00794
트라이플루오로아세트산(6 mL) 및 다이클로로메탄(30 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[(엑소)-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)메틸]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(630 mg, 0.88 mmol)의 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 잔사를 DCM(20 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 메탄올 중 NH3의 용액(7 M)에 의해 pH 8까지 염기성화시키고, 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (엑소)-N-[8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)메틸]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(480 mg, 89%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 613.3.
단계 4: (엑소)-N-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드, (엑소)-N-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클[3.1.0]헥산-6-카복스아미드 및 (엑소)-N-(8-아미노-5,7-다이클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드
Figure pct00795
CH3CN(10 mL) 중 (엑소)-N-[8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-[(tert-부틸다이페닐실릴)메틸]바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(320 mg, 0.52 mmol) 및 NCS(35 mg, 0.52 mmol)의 용액을 50℃에서 교반하였다. 1시간 후, 추가 NCS(35 mg, 0.52 mmol)를 첨가하고, 용액을 50℃에서 추가로 2시간 동안 유지하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하고, 생성된 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(10:1 다이클로로메탄/메탄올)로 정제하여 (엑소)-N-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드, (엑소)-N-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클[3.1.0]헥산-6-카복스아미드 및 (엑소)-N-(8-아미노-5,7-다이클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(0.30 g, 89%)의 혼합물을 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): M+H+ = 647.3, 681.2.
단계 5: (엑소)-N-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-하이드록시바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드 및 (엑소)-N-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-하이드록시바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드 및 (엑소)-N-(8-아미노-5,7-다이클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-하이드록시바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드
Figure pct00796
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 (엑소)-N-(8-아미노-7-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드, (엑소)-N-(8-아미노-5-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클[3.1.0]헥산-6-카복스아미드 및 (엑소)-N-(8-아미노-5,7-다이클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복스아미드(0.30 g)의 혼합물에 TBAF(1.03 g, 3.93 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 30분 후, 반응 생성물을 진공에서 농축하고, 조질 생성물을 제조용 HPLC로 정제하여 3개의 생성물을 수득하였다. 화합물 224: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 10.59 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.49 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.37 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.57 (s, 2H), 4.70 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.85 -3.78 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.09 - 2.04 (m, 2H), 1.89 - 1.87 (m, 1H), 1.73- 1.71 (m, 2H), 1.69 - 1.61 (m, 2H). LCMS (ESI): RT(분) = 2.236, [M+H]+ = 409.1, 방법 = K. 화합물 225: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 10.70 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.49 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.38 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.54 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.83-3.78 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.09 - 2.05 (m, 2H), 1.92 - 1.90 (m, 1H), 1.76 - 1.74 (m, 2H), 1.69 - 1.62 (m, 2H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.029, [M+H]+ = 409.2, 방법 = K. 화합물 226: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 10.79 (s, 1H), 9.53 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.53 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.43 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.77 (s, 2H), 4.71 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.85 -3.79 (m, 1H), 2.12 - 2.08 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.92 - 1.90 (m, 1H), 1.75 - 1.74 (m, 2H), 1.69 - 1.62 (m, 2H). LCMS (ESI): RT(분) = 1.205, [M+H]+ = 443.1, 방법 = L.
실시예 133:
1-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-3-(사이클로프로필메틸)우레아(화합물 29)
Figure pct00797
단계 1: tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00798
1,4-다이옥산(20 mL)/물(4 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(1.14 g, 3.54 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(518.19 mg, 0.71 mmol), 칼륨 카본에이트(1.47 g, 10.62 mmol) 및 tert-부틸 8-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(2.0 g, 5.32 mmol)의 용액을 1시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(1.5 g, 3.37 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 445.1.
단계 2: tert-부틸 7-(8-클로로-7-플루오로-3-(((4-니트로페녹시)카보닐)아미노)이소퀴놀린-6-일)-8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00799
다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(200 mg, 0.45 mmol), 피리딘(106.68 mg, 1.35 mmol) 및 4-니트로페닐클로로포름에이트(135.92 mg, 0.67 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 후처리 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 610.
단계 3: tert-부틸 7-[8-클로로-3-(사이클로프로필메틸카바모일아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00800
tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[(4-니트로페녹시)카보닐아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트의 용액에 사이클로프로판메틸아민(34.98 mg, 0.49 mmol) 및 피리딘(77.8 mg, 0.98 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(C18 컬럼, 10분 내에 CH3CN/H2O = 0-80%)로 정제하여 tert-부틸 7-[8-클로로-3-(사이클로프로필메틸카바모일아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(150 mg, 0.28 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 542.
단계 4: tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-(사이클로프로필메틸카바모일아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00801
1,4-다이옥산(10 mL) 중 1-[8-클로로-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-(사이클로프로필메틸)우레아(150 mg, 0.28 mmol) 및 세슘 카본에이트(353.92 mg, 1.09 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(74.96 mg, 0.07 mmol), 2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2',4',6'-트라이이소프로필-1,1'-바이페닐(77.74 mg, 0.14 mmol)의 용액을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-(사이클로프로필메틸카바모일아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(130 mg, 0.21 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 623.
단계 5: 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-(사이클로프로필메틸)우레아
Figure pct00802
다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-(사이클로프로필메틸카바모일아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(130 mg, 0.21 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): 7분 내에 CH3CN = 30% B → 50% B; 25 mL/분)로 정제하여 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-(사이클로프로필메틸)우레아(49.8 mg, 0.12 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS （ESI） [M+H]+ = 423. 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.21 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 4.42-4.35 (m, 2H), 3.48 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.18 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.00 (d, J = 1.7 Hz, 3H), 1.11-1.08 (m, 1H), 0.58-0.50 (m, 2H), 0.29-0.27 (m, 2H).
실시예 134:
(1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 9); (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 10); (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 11) 및 (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 12)
Figure pct00803
단계 1: tert-부틸 7-(8-클로로-3-((1S,3S)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미도)-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00804
다이클로로메탄(30 mL) 및 피리딘(6 mL) 중 tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(1.6 g, 3.6 mmol) 및 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산(908.09 mg, 4.68 mmol)의 용액을 0℃에서 3분 동안 교반하였다. 인 옥시클로라이드(1.1 g, 7.19 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 농축하여 tert-부틸 7-[8-클로로-3-[[(1S,2S)-2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(1.4 g, 2.25 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 621.
단계 2: tert-부틸 7-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-(2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미도)-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00805
1,4-다이옥산(80 mL) 중 tert-부틸 7-[8-클로로-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(1.4 g, 2.25 mmol), tert-부틸 카밤에이트(6.6 g, 56.35 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0) 클로로포름 부가물(466.59 mg, 0.45 mmol), 2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2',4',6'-트라이이소프로필-1,1'-바이페닐(483.27 mg, 0.90 mmol) 및 세슘 카본에이트(3.67 g, 11.27 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(1 g, 1.42 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 702.
단계 3: (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드; (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드; (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00806
다이클로로메탄(50 mL) 중 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(1.0 g, 1.42 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(10 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 NH3·H2O에 의해 pH 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(하기 조건에 따름: 컬럼: 엑스브리지 Prep OBD C18 컬럼 30 x 150 mm 5 μm; 이동상 A: 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트), 이동상 B: ACN; 유량: 60 mL/분; 구배: 7분 내에 25% B → 47% B; 254/220 nm; Rt: 6.13분)로 정제하여 N-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(400 mg, 0.80 mmol)의 이성질체의 혼합물을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 502. 혼합물을 키랄 SFC에 의해 4개의 이성질체로 분리하였다(이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 9:　황색 고체(28.7 mg, 0.057 mmol). 체류 시간: 2.401분(키랄팩(CHIRALPAK) IE-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):MeOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 502; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.68 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.25 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.37 (s, 2H), 2.26-2.17 (m, 2H), 1.93 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.86-1.43 (m, 3H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 1H). 화합물 10: 황색 고체(22.5 mg, 0.045 mmol). 체류 시간: 2.090분(리페어드 키랄(Repaired Chiral) IA, 0.46 x 10 cm; 5 μm; MtBE(0.1% DEA):MeOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 502; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.68 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.25 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.20 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.38 (s, 2H), 2.35-2.12 (m, 2H), 1.93 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.84-1.38 (m, 3H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 1H). 화합물 12: 황색 고체(89.3 mg, 0.18 mmol). 체류 시간: 4.15분(리페어드 키랄 IA, 0.46 x 10 cm; 5 μm; MtBE(0.1% DEA):MeOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 502; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.72 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.84 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.37 (s, 2H), 2.37-2.29 (m, 1H), 2.17 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.93 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.58-1.44 (m, 1H), 1.30-1.16 (m, 2H), 0.89 (t, J = 7.3 Hz, 3H). 화합물 11: 황색 고체(113.1 mg, 0.23 mmol). 체류 시간: 2.66분(키랄팩 IE-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):MeOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 502; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.72 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.29 (s, 1H) 6.84 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.37 (s, 2H), 2.38-2.29 (m, 1H), 2.17 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.93 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.58-1.44 (m, 1H), 1.30-1.16 (m, 2H), 0.89 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
실시예 135:
(1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(추정됨)(화합물 36), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(추정됨)(화합물 35), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(추정됨)(화합물 34) 및 (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(추정됨)(화합물 33)
Figure pct00807
단계 1: 에틸다이페닐설파늄 테트라플루오로보라누이드
Figure pct00808
다이클로로메탄(450 mL) 중 AgBF4(37.48 g, 192.53 mmol)의 용액에 요오도에탄(30 g, 192.35 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 용액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. (페닐설판일)벤젠(106.92 g, 573.99 mmol)을 첨가하고, 이어서 16시간 동안 35℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/에터(1/1)로 세척하여 에틸다이페닐설파늄 테트라플루오로보라누이드(25 g, 116.28 mmol)를 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 215.
단계 2: 트랜스-tert-부틸 2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트
Figure pct00809
다이클로로메탄(2 mL) 및 1,2-다이메톡시에탄(20 mL) 중 에틸(다이페닐)설포늄(1.55 g, 7.2 mmol)의 용액에 리튬 다이이소프로필아미드(4.2 mL, 8.4 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. tert-부틸 (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트(500 mg, 2.4 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트(550 mg, 조질)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 237.
단계 3: (+/-)-트랜스-tert-부틸 2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트
Figure pct00810
다이클로로메탄(3 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(4 mL) 중 트랜스-tert-부틸 2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트(500 mg, 조질)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 7까지 조정하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 피라졸이 카복실산에 대해 트랜스인 2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산의 4개의 입체 이성질체의 혼합물(180 mg, 0.99 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 181.
단계 4: tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[[(1S)-2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00811
다이클로로메탄(15 mL) 및 피리딘(3 mL) 중 트랜스-2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산(182.27 mg, 1.01 mmol)의 용액에 tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(450 mg, 1.01 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 20분 동안 25℃에서 교반하였다. 인 옥시클로라이드(309.51 mg, 2.02 mmol)를 첨가하고, 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(9:1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[[(1S)-2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(320 mg, 0.53 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 607.
단계 5: tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[(1S)-2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00812
1,4-다이옥산(15 mL) 중 tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[[(1S)-2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(420 mg, 0.69 mmol), tert-부틸 카밤에이트(2.43 g, 20.76 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(143.21 mg, 0.14 mmol) 및 브렛포스(148.61 mg, 0.28 mmol)의 용액에 세슘 카본에이트(902.15 mg, 2.77 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[(1S)-2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(450 mg, 0.65 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 688.
단계 6: (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct00813
다이클로로메탄(10 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(10 mL) 중 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[(1S)-2-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(800 mg, 1.16 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 7분 내에 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:ACN = 20%-50%)로 정제하여 혼합물(260 mg, 0.44 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 33: 황색 고체(27.3 mg, 0.056 mmol). 체류 시간: 3.92분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 488.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.68 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.30-4.29 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.38-3.37(m, 2H), 2.28-2.12 (m, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.64-1.50 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 34: 황색 고체(26.6 mg, 0.055 mmol). 체류 시간: 5.736분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 488.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.68 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.21 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.30-4.29 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.38-3.37(m, 2H), 2.28-2.12 (m, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.64-1.50 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 35: 황색 고체(72.6 mg, 0.15 mmol). 체류 시간: 7.063 분 (키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 488.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.72 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.32 (s 1H), 7.29 (s, 1H), 6.84 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.30-4.29 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.38-3.37 (m, 2H), 2.31 (dd, J = 9.1, 4.5 Hz, 1H), 2.12 (t, J = 4.6 Hz, 1H), 1.93 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.67-1.54 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 36: 황색 고체(80.2 mg, 0.16 mmol). 체류 시간: 9.167분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 488.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.72 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.32 (s 1H), 7.29 (s, 1H), 6.84 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.30-4.29 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.38-3.37 (m, 2H), 2.31 (dd, J = 9.1, 4.5 Hz, 1H), 2.12 (t, J = 4.6 Hz, 1H), 1.93 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.67-1.54 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
실시예 136:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 233)
Figure pct00814
단계 1: tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00815
1,4-다이옥산(20 mL) 및 물(4 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(1.14 g, 3.54 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(518.19 mg, 0.71 mmol), 칼륨 카본에이트(1.47 g, 10.62 mmol) 및 tert-부틸 8-메틸-7-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(2.0 g, 5.32 mmol)의 용액을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(1.5 g, 3.37 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 2: tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00816
1,4-다이옥산(40 mL) 중 tert-부틸 7-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(200 mg, 0.44 mmol) 및 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(147 mg, 0.52 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(77 mg, 0.08 mmol), t-Bu브렛포스(104 mg, 0.16 mmol), 세슘 카본에이트(439 mg, 1.36 mmol)의 용액을 120℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(150 mg, 0.024 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 517.24.
단계 3: tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00817
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(150 mg, 0.24 mmol), tert-부틸 카밤에이트(552.4 mg, 4.8 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(48.82 mg, 0.048 mmol), 2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2',4',6'-트라이이소프로필-1,1'-바이페닐(50.63 mg, 0.096 mmol) 및 세슘 카본에이트(230.49 mg, 0.71 mmol)의 용액을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(100 mg, 0.14 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 717.8.
단계 4: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00818
다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(100 mg, 0.07 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(2 mL, 0.07 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하고, 이어서 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 9까지 조정하였다. 잔사를 제조용 HPLC(선파이어(SunFire) Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm 10 nm; 물(0.1% FA): CAN = 7 분 내에 9% B → 30% B; 25 mL/분)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(10 mg, 0.019 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 517.24. 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.11 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.81 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.03 (s, 2H), 4.77-4.68 (m, 1H), 4.39 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.89-3.79 (m, 2H), 3.48 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.02 (s, 3H), 1.21 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 137:
1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-[(1R)-1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸]우레아(화합물 111) 및 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-[(1S)-1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸]우레아(화합물 112)
Figure pct00819
단계 1: tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸카바모일아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
tert-부틸 7-(8-클로로-7-플루오로-3-(((4-니트로페녹시)카보닐)아미노)이소퀴놀린-6-일)-8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트를 사용하여, 표제 화합물을 실시예 133(화합물 29)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 596.1.
단계 2: tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸카바모일아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트
Figure pct00821
tert-부틸 7-[8-클로로-7-플루오로-3-[1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸카바모일아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트를 사용하여, 표제 화합물을 실시예 133(화합물 29)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 677.3.
단계 3: 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-[(1R)-1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸]우레아(화합물 111) 및 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-[(1S)-1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸]우레아(화합물 112)
Figure pct00822
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 7-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[1-(1-메틸피라졸-4-일)에틸카바모일아미노]-6-이소퀴놀일]-8-메틸-2,3-다이하이드로피리도[2,3-b][1,4]옥사진-1-카복실레이트(80 mg, 0.12 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(2 mL, 25.96 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 진공 하에 농축하고, 이어서 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 8까지 조정하였다. 잔사를 제조용 HPLC(엑스-브리지(X-Bridge) Prep C18 OBD 5 μm, 19 x 150 mm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): ACN = 9분 내에 5% B → 45% B) 및 키랄-HPLC로 정제하여 2개의 거울상 이성질체를 수득하였다: 화합물 111: 황색 고체인 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-[(1R)-(1-메틸피라졸-4-일)에틸]우레아(추정됨)(20.6 mg, 0.043 mmol). Rt = 2.634분(룩스 셀룰로스(Lux Cellulose)-4, 0.46 x 15 cm; 3 μm, MtBE(0.1% DEA): EtOH = 50:50, 1.0 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 477.2; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.21 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.89 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 5.08-5.02(m, 1H), 4.42 (t, J = 4.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.51 (t, J = 4.2 Hz, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H). 화합물 112: 황색 고체인 1-[8-아미노-7-플루오로-6-(8-메틸-2,3-다이하이드로-1H-피리도[2,3-b][1,4]옥사진-7-일)-3-이소퀴놀일]-3-[1(S)-(1-메틸피라졸-4-일)에틸]우레아(20.7 mg, 0.043 mmol). Rt = 3.544 (룩스 셀룰로스-4, 0.46 x 15 cm, 3 μm; MtBE(0.1% DEA): EtOH = 50:50, 1.0 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 477.2; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.21 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.89 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 5.08-5.02(m, 1H), 4.42 (t, J = 4.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.51 (t, J = 4.2 Hz, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 138:
2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(화합물 234)
Figure pct00823
단계 1: tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-((5,5-다이메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct00824
1,4-다이옥산(15 mL) 중 2-브로모-5,5-다이메틸-6,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(66.34 mg, 0.26 mmol), tert-부틸 N-[5-[3-아미노-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(100.0 mg, 0.17 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(58.53 mg, 0.07 mmol), t-Bu브렛포스(41.55 mg, 0.09 mmol) 및 세슘 카본에이트(167.57 mg, 0.51 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 질소 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(98/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(5,5-다이메틸-7-옥소-6,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(60 mg, 0.08 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 761.
단계 2: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00825
다이클로로메탄(6 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5,5,6-트라이메틸-7-옥소-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(80.0 mg, 0.10 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 9까지 조정하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% FA)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(30.5 mg, 0.06 mmol)을 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 461.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.76-7.65 (m, 3H), 6.73 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.07 (s, 2H), 6.04 (s, 1H, 5.41 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.05 (s, 2H), 1.96 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.18 (s, 6H).
실시예 139:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-5,5,6-트라이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 235)
Figure pct00826
단계 1: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5,5,6-트라이메틸-7-옥소-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00827
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-브로모-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(65.28 mg, 0.24 mmol), tert-부틸 N-[5-[3-아미노-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(100 mg, 0.17 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(58.53 mg, 0.07 mmol), t-Bu브렛포스(41.55 mg, 0.09 mmol) 및 세슘 카본에이트(167.57 mg, 0.51 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(100/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5,5,6-트라이메틸-7-옥소-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(80 mg, 0.10 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 775.
단계 2: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산
다이클로로메탄(6 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5,5,6-트라이메틸-7-옥소-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(80 mg, 0.10 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 9까지 조정하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% FA)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-5,5,6-트라이메틸-4,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산(30.5 mg, 0.059 mmol)을 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 475; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.25 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.69-7.67 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.70-6.69 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.05 (s, 3H), 5.26 (s, 2H), 4.94 (s, 2H), 3.20 (s, 2H), 2.76 (s, 3H), 1.93 (s, 3H), 1.28 (s, 6H).
실시예 140:
(1S,2S,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 239), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 237), (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 238) 및 (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 236)
Figure pct00829
단계 1: 트랜스-tert-부틸 2-(벤질옥시메틸)-3-메틸사이클로프로판카복실레이트
Figure pct00830
(E)-tert-부틸 4-(벤질옥시)부트-2-에노에이트를 사용하여, 표제 화합물을 실시예 135(화합물 36)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 277.
단계 2: 트랜스-2-(벤질옥시메틸)-3-메틸사이클로프로판카복실산
Figure pct00831
트랜스-tert-부틸 2-(벤질옥시메틸)-3-메틸사이클로프로판카복실레이트를 사용하여, 표제 화합물을 실시예 135(화합물 36)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 221.
단계 3: 트랜스-tert-부틸 N-[5-[3-[[2-(벤질옥시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트
Figure pct00832
트랜스-2-(벤질옥시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카복실산을 사용하여, 표제 화합물을 실시예 135(화합물 36)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 705.
단계 4: tert-부틸 N-[5-[3-[[트랜스-2-(벤질옥시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트
Figure pct00833
트랜스-tert-부틸 N-[5-[3-[[2-(벤질옥시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트를 사용하여, 표제 화합물을 실시예 135(화합물 36)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 786.
단계 5: 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00834
메탄올(30 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[5-[3-[[2-(벤질옥시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(1.1 g, 1.4 mmol) 및 Pd(OH)2/C(979.77 mg, 1.4 mmol)의 용액을 25℃에서 수소 대기 하에 36시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(450 mg, 0.65 mmol)를 유색 교체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 696.
단계 6: 트랜스-[2-[[6-[5-[비스(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-메틸-3-피리딜]-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]카바모일]-3-메틸-사이클로프로필]메틸 메탄설포네이트
Figure pct00835
다이클로로메탄(15 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(450 mg, 0.65 mmol) 및 트라이에틸아민(195.97 mg, 1.94 mmol)의 용액에 메탄설폰일 클로라이드(187.56 mg, 1.29 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 트랜스-[2-[[6-[5-[비스(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-메틸-3-피리딜]-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]카바모일]-3-메틸-사이클로프로필]메틸 메탄설포네이트(450 mg, 0.58 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 774.
단계 7: 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00836
다이메틸 설폭사이드(10 mL) 중 트랜스-[2-[[6-[5-[비스(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-메틸-3-피리딜]-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]카바모일]-3-메틸-사이클로프로필]메틸 메탄설포네이트(450 mg, 0.58 mmol) 및 칼륨 시아나이드(113.39 mg, 1.74 mmol)의 용액을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 제1철 설페이트의 용액으로 급랭시키고, 이어서 아세트산 에터로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(400 mg, 0.57 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 705.
단계 8: (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드
트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸-사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(400 mg, 0.57 mmol)를 사용하여, 표제 화합물을 실시예 135(화합물 36)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. 혼합물을 키랄 SFC 분리에 의해 정제하여 4개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 시아노메틸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 236: 황색 고체(14.5 mg, 0.036 mmol). 체류 시간: 8.931분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):MeOH = 95:5; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 405.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.22 (s, 2H), 2.82-2.59 (m, 2H), 2.06 (dd, J = 9.1, 4.7 Hz, 1H), 1.89 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 1.54-1.48 (m, 1H), 1.34 (dt, J = 8.9, 6.1 Hz, 1H), 1.14 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 237: 황색 고체(14.7 mg, 0.036 mmol). 체류 시간: 10.678분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):MeOH = 95:5; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 405.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.22 (s, 2H), 5.22 (s, 2H), 2.82-2.59 (m, 2H), 2.06 (dd, J = 9.1, 4.7 Hz, 1H), 1.89 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 1.54-1.48 (m, 1H), 1.34 (dt, J = 8.9, 6.1 Hz, 1H), 1.14 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 238: 황색 고체(15.3 mg, 0.038 mmol). 체류 시간: 4.185분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 405.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.83 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.24 (s, 2H), 2.86-2.58 (m, 2H), 1.89 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.76 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 1.70-1.53 (m, 1H), 1.52-1.38 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.4 Hz, 3H). 화합물 239: 황색 고체(15.5 mg,0.038 mmol). 체류 시간: 6.037분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 405.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.83 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.24 (s, 2H), 2.86-2.58 (m, 2H), 1.89 (d, J = 1.5 H.
실시예 141:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-((2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 240)
Figure pct00837
단계 1: (2-메톡시-3-피리딜)메탄올
Figure pct00838
2-메톡시니코틴산(200.0 mg, 1.31 mmol) 및 보란 테트라하이드로퓨란 착물 용액(1 mol/L)(4 mL, 3.92 mmol)의 용액을 질소 하에 테트라하이드로퓨란(5 mL)에서 0℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올(2 mL)로 급랭시켰다. 용매를 진공 하에 농축하여 2-메톡시-3-피리딜)메탄올(150 mg, 1.08 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 139.2.
단계 2: 3-(클로로메틸)-2-메톡시피리딘
Figure pct00839
다이클로로메탄(5 mL) 중 (2-메톡시-3-피리딜)메탄올(1.0 g, 7.19 mmol) 및 SOCl2(2.56 g, 21.55 mmol)의 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(5/95)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(클로로메틸)-2-메톡시피리딘(500 mg, 3.17 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 157.6.
단계 3: tert-부틸 (7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-6-((2-메톡시피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00840
테트라하이드로퓨란(1 mL) 및 물(0.10 mL) 중 (8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)보론산(86.96 mg, 0.17 mmol), 3-(클로로메틸)-2-메톡시-피리딘(40.0 mg, 0.25 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(24.35 mg, 0.03 mmol) 및 세슘 카본에이트(165.22 mg, 0.51 mmol)의 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/5)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-6-((2-메톡시피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(76 mg, 0.13 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 589.7.
단계 4: 2-((8-아미노-7-플루오로-6-((2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00841
N,N-다이메틸포름아미드(5 mL) 중 tert-부틸 (7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-6-((2-메톡시피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(60 mg, 0.10 mmol), 리튬 클로라이드(54 mg, 1.29 mmol) 및 p-톨루엔설폰산(240 mg, 1.26 mmol)의 혼합물을 120℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-((8-아미노-7-플루오로-6-((2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(5.1 mg, 0.01 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 11.59 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.27-7.25 (m, 1H), 7.12 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 6.14-6.09 (m, 1H), 5.95-5.88 (m, 3H), 4.96 (s, 2H),4.61-4.57(m, 1H) 3.78 (s, 4H), 2.99 (s, 2H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 142:
N-(8-아미노-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)에탄설폰아미드(화합물 241)
Figure pct00842
단계 1: tert-부틸 (3-아미노-8-클로로이소퀴놀린-6-일)카밤에이트
Figure pct00843
1,4-다이옥산(30 mL) 중 6-브로모-8-클로로-이소퀴놀린-3-아민(1.0 g, 3.88 mmol), tert-부틸 카밤에이트(13.65 g, 116.5 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(803.85 mg, 0.78 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(897.83 mg, 1.55 mmol) 및 세슘 카본에이트(6.33 g, 19.42 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)카밤에이트(500 mg, 1.70 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 294.
단계 2: tert-부틸 (8-클로로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)카밤에이트
Figure pct00844
1,4-다이옥산(50 mL) 중 tert-부틸 N-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)카밤에이트(300 mg, 1.02 mmol), tert-부틸 N-(3-아미노-8-클로로-6-이소퀴놀일)카밤에이트(300 mg, 1.02 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(348.87 mg, 0.41 mmol), t-Bu브렛포스(247.15 mg, 0.51 mmol) 및 세슘 카본에이트(1.66 g, 5.11 mmol)의 용액을 120℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(97/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[8-클로로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]카밤에이트(279 mg, 0.58 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 485.
단계 3: 2-((6-아미노-8-클로로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00845
2,2,2-트라이플루오로아세트산(10 mL) 중 tert-부틸 N-[8-클로로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]카밤에이트(270 mg, 0.56 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH4CO3)로 정제하여 2-[(6-아미노-8-클로로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 0.52 mmol)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 385.
단계 4: N-(8-클로로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)에탄설폰아미드
Figure pct00846
다이클로로메탄(2 mL) 중 2-[(6-아미노-8-클로로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 0.52 mmol) 및 트라이에틸아민(262.43 mg, 2.60 mmol)의 용액에 에탄설폰일 클로라이드(200.46 mg, 1.56 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 0℃에서 교반하였다. 유기 층을 진공 하에 농축하였다. 이어서, 물(10 mL) 중 나트륨 하이드록사이드(500 mg, 20.83 mmol)를 첨가하고, 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH4CO3)로 정제하여 N-[8-클로로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]에탄설폰아미드(85 mg, 0.18 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 477.
단계 5: tert-부틸 (6-(에틸설폰아미도)-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00847
1,4-다이옥산(8 mL) 중 N-[8-클로로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]에탄설폰아미드(80 mg, 0.17 mmol), tert-부틸 카밤에이트(491.22 mg, 4.19 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(69.44 mg, 0.07 mmol), 브렛포스(71.92 mg, 0.13 mmol) 및 세슘 카본에이트(164.03 mg, 0.50 mmol)의 혼합물을 120℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-(에틸설폰일아미노)-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(35 mg, 0.063 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 558.
단계 6: N-(8-아미노-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)에탄설폰아미드
Figure pct00848
tert-부틸 N-[6-(에틸설폰일아미노)-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(30 mg, 0.05 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(3 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스실렉트(XSelect) CSH Prep C18 OBD 컬럼, 19 x 250 mm, 5 μm; 물(0.1% FA): 7분 내에 ACN(5%-70%); 25 mL/분)로 정제하여 N-[8-아미노-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]에탄설폰아미드; 포름산(14 mg, 0.028 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 458; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.84 (s, 1H), 9.00 (s, 2H), 7.40 (s, 1H), 6.57 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.19 (s, 2H), 6.00 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.61 (m, 1H), 3.90-3.71 (m, 2H), 3.19 (m, 2H), 3.00 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 1.22 (m, 3H), 1.14 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 143:
5-(8-아미노-7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-에틸옥사졸-2(3H)-온(화합물 242)
Figure pct00849
단계 1: 4-에틸-3H-옥사졸-2-온
Figure pct00850
다이에틸 에터(100 mL) 중 칼륨 시아네이트(6.0 g, 74.07 mmol), 1-하이드록시부탄-2-온(3.0 g, 34.05 mmol)의 용액을 아세트산(3.0 mL, 34.05 mmol)을 첨가하고, 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하여 4-에틸-3H-옥사졸-2-온(1.0 g, 8.84 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 114.
단계 2: 4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온
Figure pct00851
나트륨 하이드라이드(579.52 mg, 60% 순도, 25.2 mmol)를 N,N-다이메틸포름아미드(30 mL) 중 4-에틸-3H-옥사졸-2-온(1.9 g, 16.8 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 용액을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 4-메톡시벤질클로라이드(3.14 g, 20.16 mmol)를 첨가하고, 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 추출물을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피[물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트)/ACN(60/40)]로 정제하여 4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온(2.1 g, 9.00 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 234.
단계 3: 5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온
Figure pct00852
N,N-다이메틸아세트아미드(4 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(287 mg, 0.89 mmol), 4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온(207.58 mg, 0.89 mmol), 트라이사이클로헥실 포스핀(49.83 mg, 0.18 mmol), 팔라듐 아세테이트(29.01 mg, 0.09 mmol), 피발산(22.69 mg, 0.22 mmol) 및 칼륨 카본에이트(245.61 mg, 1.78 mmol)의 용액을 100℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 잔사를 물(나트륨 바이카본에이트 10 mmol/L)/ACN(30/70)으로 용리하는 역 컬럼으로 정제하여 5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온(225 mg, 0.53 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 428.
단계 4: 5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온
Figure pct00853
1,4-다이옥산(20 mL) 중 5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온(225 mg, 0.53 mmol), 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(171.73 mg, 0.63 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(108.86 mg, 0.11 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(121.58 mg, 0.21 mmol) 및 세슘 카본에이트(514.3 mg, 1.58 mmol)의 용액을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온(158 mg, 0.26 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 619.
단계 5: tert-부틸 N-[6-[4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-옥소-옥사졸-5-일]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00854
1,4-다이옥산(12 mL) 중 5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]옥사졸-2-온(155 mg, 0.25 mmol), tert-부틸 카밤에이트(732.32 mg, 6.26 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(51.83 mg, 0.05 mmol), 브렛포스(40.26 mg, 0.08 mmol) 및 세슘 카본에이트(244.86 mg, 0.75 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-[4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-옥소-옥사졸-5-일]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(80 mg,0.11 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 700.
단계 6: 5-[8-아미노-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-3H-옥사졸-2-온
Figure pct00855
2,2,2-트라이플루오로아세트산(5.0 mL) 및 트라이플루오로메탄설폰산(1.0 mL) 중 tert-부틸 N-[6-[4-에틸-3-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-옥소-옥사졸-5-일]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(140 mg, 0.20 mmol)의 용액을 25℃에서 48시간 동안 교반하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC[엑스브리지 Prep C18 5 μm x 30 mm x 150 mm; 물(나트륨 바이카본에이트 10 mmol/L):6.03분 내에 ACN(15%-50%)]로 정제하여 5-[8-아미노-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-3H-옥사졸-2-온(33 mg, 0.069 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 480; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.04 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.0 Hz, 1 H), 6.13 (s, 2H), 5.98 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.65-4.56 (m, 1H), 3.78 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.51-2.47 (m, 2H), 1.21-1.12 (m, 9H).
실시예 144:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-클로로피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 243)
Figure pct00856
단계 1: 4-클로로-5-요오도-피리딘-3-아민
Figure pct00857
다이에틸 에터(10 mL) 중 4-클로로-3-요오도-5-니트로-피리딘(1.0 g, 3.52 mmol)의 용액에 염산(7.4 mL, 3.52 mmol) 및 제1 주석 클로라이드(8.0 g, 35.4 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 4-클로로-5-요오도-피리딘-3-아민(800 mg, 3.14 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 254.5.
단계 2: tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-클로로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00858
질소 하에, 아세토니트릴(1 mL) 및 물(0.10 mL) 중 4-클로로-5-요오도-피리딘-3-아민(74.0 mg, 0.29 mmol), [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(50.0 mg, 0.10 mmol), 칼륨 포스페이트(20.0 mg, 0.09 mmol), 나트륨 아세테이트(23.85 mg, 0.29 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(15.0 mg, 0.02 mmol)의 용액을 제조하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 90℃에서 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(5/95)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-클로로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50 mg, 0.084 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 595.1.
단계 3: 2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-클로로피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00859
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-클로로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50.0 mg, 0.08 mmol) 및 TFA(1 mL, 0.08 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 7까지 조정하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-클로로피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(12.9 mg, 0.026 mmol)을 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.2. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.24 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 6.77 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.09 (s, 2H), 5.94 (s, 1H), 5.77 (s, 2H), 4.94 (s, 2H), 4.63-4.51 (m, 1H), 3.81-3.70 (m, 2H), 2.99-2.91 (m, 2H), 1.10 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 145:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-((4-메틸-2-옥소피페라진-1-일)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 244)
Figure pct00860
단계 1: (3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)메탄올
Figure pct00861
1,4-다이옥산(20 mL) 중 트라이부틸스탄일메탄올(3.98 g, 12.4 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(2.0 g, 6.2 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(1.43 g, 1.24 mmol)의 용액을 90℃에서 60시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)메탄올(550 mg, 2.43 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 227.
단계 2: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(하이드록시메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00862
1,4-다이옥산(40 mL) 중 3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)메탄올(200 mg, 0.88 mmol), 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(264.18 mg, 0.97 mmol), t-Bu브렛포스(213.56 mg, 0.44 mmol) 및 t-Bu브렛포스 Pd G3(301.46 mg, 0.35 mmol)의 용액에 세슘 카본에이트(1.44 g, 4.41 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 120℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(하이드록시메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(120 mg,0.29 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 418.
단계 3: 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00863
다이클로로메탄(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(하이드록시메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg, 0.12 mmol) 및 티온일 클로라이드(70.6 mg,0.60 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하여 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg, 0.11 mmol)을 유색 교체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 436.
단계 4: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00864
N,N-다이메틸포름아미드(3 mL) 중 4-메틸-2-피페라진온(26.16 mg, 0.23 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(18.34 mg, 60% 순도, 0.46 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 20분 동안 0℃에서 교반하였다. 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg, 0.11 mmol)을 첨가하고, 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(9 mg, 0.018 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 514.
단계 5: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00865
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(46 mg, 0.09 mmol), tert-부틸 카밤에이트(314.53 mg, 2.68 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(18.53 mg, 0.02 mmol) 및 브렛포스(19.22 mg, 0.04 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(116.7 mg, 0.36 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(45 mg, 0.076 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 595.
단계 6: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00866
2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL) 및 다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(43 mg, 0.07 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(아틀란티스(Atlantis) HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA): CH3CN = 7분 내에 7%-15% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-[(4-메틸-2-옥소-피페라진-1-일)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(15.5 mg, 0.029 mmol)을 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.16 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.63 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.66-4.50 (m, 3H), 3.76 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.3-3.2 (m, 2H), 3.19 (s, 2H), 2.96 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.88-2.64 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.10 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 146:
5-(8-아미노-7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-N,N,4-트라이메틸피리미딘-2-카복스아미드(화합물 245)
Figure pct00867
단계 1: 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카보니트릴
Figure pct00868
다이메틸 설폭사이드(2 mL) 및 물(2 mL) 중 나트륨 시아나이드(1,062.86 mg, 21.69 mmol) 및 1,4-다이아자바이사이클로옥탄 트라이에틸렌다이아민(323.92 mg, 2.89 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 다이메틸 설폭사이드 중 5-브로모-2-클로로-4-메틸피리미딘(3.0 g, 14.46 mmol)의 용액을 첨가하고, 12시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물 중 제1철 설페이트로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(5/95)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카보니트릴(700 mg, 3.54 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 198.0.
단계 2: 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실산
Figure pct00869
물(40 mL) 중 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카보니트릴(1.0 g, 5.05 mmol) 및 NaOH(606 mg, 15.15 mmol)의 용액을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염산(2 mol/L)에 의해 pH 2까지 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실산(800 mg, 3.69 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC0MS (ESI) [M+H]+ = 217.0.
단계 3: 5-브로모-N,N,4-트라이메틸-피리미딘-2-카복스아미드
Figure pct00870
N,N-다이메틸포름아미드(30 mL) 중 5-브로모-4-메틸-피리미딘-2-카복실산(1.0 g, 4.61 mmol), N,N-다이메틸아민(311.58 mg, 6.91 mmol) 및 N,N-다이이소프로필에틸아민(2,377.66 mg, 18.43 mmol)의 용액에 2-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(2,628.08 mg, 6.91 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하고, 이어서 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(5/95)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-N,N,4-트라이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(600 mg, 2.46 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 244.1.
단계 4: tert-부틸 N-[6-[2-(다이메틸카바모일)-4-메틸-피리미딘-5-일]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00871
1,4-다이옥산(5 mL) 및 물(1 mL) 중 [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(50.0 mg, 0.10 mmol), 5-브로모-N,N,4-트라이메틸-피리미딘-2-카복스아미드(47.64 mg, 0.20 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(22.56 mg, 0.02 mmol) 및 칼륨 카본에이트(40 mg, 0.29 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 나트륨 바이카본에이트(10 mmol/L)/ACN(70/30)으로 용리하는 역 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-[6-[2-(다이메틸카바모일)-4-메틸-피리미딘-5-일]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40 mg, 0.063 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 631.7.
단계 5: tert-부틸 N-[6-[2-(다이메틸카바모일)-4-메틸-피리미딘-5-일]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00872
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[6-[2-(다이메틸카바모일)-4-메틸-피리미딘-5-일]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(5.0 mg, 0.010 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.2 mL)의 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 7까지 조정하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 5-(8-아미노-7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-N,N,4-트라이메틸피리미딘-2-카복스아미드(9.1 mg, 0.017 mmol)를 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 532.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.30 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 6.92 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.56-4.58 (m, 1H), 3.80-3.77 (m, 2H), 3.05 (s, 3H), 2.98-2.90 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.45 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 147:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메톡시피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 246)
Figure pct00873
단계 1: 3-브로모-4-메톡시-5-니트로-피리딘
Figure pct00874
N,N-다이메틸포름아미드(3 mL) 중 3-브로모-4-클로로-5-니트로피리딘(3.0 g, 12.63 mmol), 메탄올(4.68 mL) 및 칼륨 카본에이트(3.49 g, 25.27 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(2/98)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-4-메톡시-5-니트로-피리딘(600 mg, 2.57 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 233.0.
단계 2: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(4-메톡시-5-니트로-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00875
1,4-다이옥산(1 mL) 및 물(0.10 mL) 중 8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일 보론산(102.94 mg, 0.20 mmol), 3-브로모-4-메톡시-5-니트로-피리딘(70.0 mg, 0.30 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(47.35 mg, 0.04 mmol) 및 칼륨 카본에이트(82.35 mg, 0.60 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 ACN/물(70%)로 용리하는 C18 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(4-메톡시-5-니트로-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.097 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 620.6.
단계 3: tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-메톡시-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00876
메탄올(5 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(4-메톡시-5-니트로-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(70 mg, 0.11 mmol) 및 라니 니켈(10 mg, 0.11 mmol)의 혼합물을 25℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 ACN/물(60%)로 용리하는 C18 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-메톡시-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40 mg, 0.07 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 590.6.
단계 4: 2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메톡시피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00877
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-메톡시-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40.0 mg, 0.07 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 7까지 조정하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메톡시피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(6.1 mg, 0.012 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 491.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.24 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 6.83 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.62-4.55 (m, 1H), 3.81-3.73 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.02-2.94 (m, 2H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 148:
6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-N3-(5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-8-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3,8-다이아민(화합물 247)
Figure pct00878
단계 1: 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-티온
Figure pct00879
1,4-다이옥산(30 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1.0 g, 4.35 mmol) 및 로손(Lawesson) 시약(1.8 g, 4.45 mmol)의 용액을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-티온(530 mg, 2.15 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 246.1.
단계 2: 2-브로모-N-(2,2-다이에톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-아민
Figure pct00880
테트라하이드로퓨란(100 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-티온(1.2 g, 4.88 mmol), 아미노아세트알데하이드 다이에틸 아세탈(3.25 g, 24.38 mmol) 및 Ag2CO3(2.69 g, 9.75 mmol)의 용액을 85℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.05% TFA)로 정제하여 2-브로모-N-(2,2-다이에톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-아민(900 mg, 2.6 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 245.2.
단계 3: 8-브로모-5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀
Figure pct00881
아세트산(10 mL) 중 2-브로모-N-(2,2-다이에톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-아민(425 mg, 1.23 mmol) 및 염산(0.31 mL, 1.23 mmol)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 물(0.05% 2,2,2-트라이플루오로아세트산)/아세토니트릴(85/15)로 용리하는 역상 컬럼으로 정제하여 8-브로모-5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀(200 mg, 0.79 mmol)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 253.1.
단계 4: tert-부틸 N-[5-[3-아미노-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트
Figure pct00882
1,4-다이옥산(50 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(500 mg, 0.99 mmol), tert-부틸 카밤에이트(3,489.27 mg, 29.82 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(205.78 mg, 0.20 mmol), 브렛포스(159.85 mg, 0.30 mmol) 및 세슘 카본에이트(972.22 mg, 2.98 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 물/아세토니트릴(40/60) 중 나트륨 바이카본에이트(10 mmol/L)로 용리하는 역 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-[5-[3-아미노-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(100 mg, 0.17 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 583.7.
단계 5: tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-((5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-8-일)아미노)-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct00883
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-[5-[3-아미노-8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(130 mg, 0.20 mmol), 8-브로모-5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀(249.6 mg, 1.0 mmol), t-Bu브렛포스 G3(145.6 mg, 0. 20 mmol), t-Bu브렛포스(108 mg, 0. 20 mmol) 및 세슘 카본에이트(421.2 mg, 1.30 mmol)의 용액을 120℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-((5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-8-일)아미노)-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(70 mg, 0.10 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 755.8.
단계 6: 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-N3-(5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-8-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3,8-다이아민
Figure pct00884
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-3-((5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-8-일)아미노)-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(70 mg, 0.09 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 7로 조정하였다. 잔사를 물(0.05% TFA)/ACN(85/15)으로 용리하는 역상 컬럼으로 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-N3-(5,6-다이하이드로-11H-이미다조[1,2-a]피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-8-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3,8-다이아민(19.2 mg, 0.038 mmol)을 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 456.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.25 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.21 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.05 (s, 3H), 5.40 (s, 2H), 5.22 (s, 2H), 4.39-4.31 (m, 2H), 3.27-3.19 (m, 2H), 1.93 (s, 3H).
실시예 149:
2-((6-((1H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-일)메틸)-8-아미노-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 249)
Figure pct00885
단계 1: 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00886
다이클로로메탄(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(하이드록시메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg, 0.12 mmol) 및 티온일 클로라이드(70.6 mg, 0.60 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하여 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg, 0.11 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 436.
단계 2: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(피롤로[2,3-c]피리딘-1-일메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00887
N,N-다이메틸포름아미드(6 mL) 중 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg, 0.11 mmol), 1H-피롤로[2,3-c]피리딘(40.62 mg, 0.34 mmol) 및 세슘 카본에이트(186.79 mg, 0.57 mmol)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(피롤로[2,3-c]피리딘-1-일메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(15 mg, 0.029 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 518.
단계 3: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(피롤로[2,3-c]피리딘-1-일메틸)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00888
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(피롤로[2,3-c]피리딘-1-일메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(70 mg, 0.14 mmol), tert-부틸 카밤에이트(474.33 mg, 4.05 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(27.97 mg, 0.03 mmol) 및 브렛포스(29.03 mg, 0.05 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(176.22 mg, 0.54 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(피롤로[2,3-c]피리딘-1-일메틸)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(45 mg, 0.075 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 599.
단계 4: 2-((6-((1H-피롤로[2,3-c]피리딘-1-일)메틸)-8-아미노-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00889
다이클로로메탄(4 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(4 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(피롤로[2,3-c]피리딘-1-일메틸)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(80 mg, 0.13 mmol)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA): CH3CN = 7분 내에 5%-6% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(피롤로[2,3-c]피리딘-1-일메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(9.4 mg, 0.017 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 499.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.17 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.12 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.54 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 6.06 (s, 2H), 5.95 (s, 1H), 5.64 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.60 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 3.78 (s, 2H), 2.98 (s, 2H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 150:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-7-메틸-6,7-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8(9H)-온(화합물 250)
Figure pct00890
단계 1: 2-[tert-부톡시카보닐(메틸)아미노]에틸 메탄설포네이트
Figure pct00891
다이클로로메탄(20 mL) 중 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카밤에이트(1.0 g, 5.71 mmol) 및 트라이에틸아민(1.15 g, 11.41 mmol)의 용액에 메탄설폰일 클로라이드(975.86 mg, 8.56 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 물로 세척하고, 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 2-[tert-부톡시카보닐(메틸)아미노]에틸 메탄설포네이트(1.29 g, 5.08 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 254.
단계 2: tert-부틸 N-[2-(4-브로모-2-메틸-이미다졸-1-일)에틸]-N-메틸-카밤에이트
Figure pct00892
N,N-다이메틸포름아미드(100 mL) 중 5-브로모-2-메틸-1H-이미다졸(5.0 g, 31.06 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(1.86 g, 60% 순도, 46.58 mmol)의 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 2-[tert-부톡시카보닐(메틸)아미노]에틸 메탄설포네이트(8.0 g, 31.58 mmol)를 첨가하고, 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH3H2O)로 정제하여 tert-부틸 N-[2-(4-브로모-2-메틸-이미다졸-1-일)에틸]-N-메틸-카밤에이트(6 g, 18.85 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 318.
단계 3: 메틸 2-[4-브로모-1-[2-[tert-부톡시카보닐(메틸)아미노]에틸]이미다졸-2-일]아세테이트
Figure pct00893
테트라하이드로퓨란(100 mL) 중 tert-부틸 N-[2-(4-브로모-2-메틸-이미다졸-1-일)에틸]-N-메틸-카밤에이트(2.0 g, 6.29 mmol) 및 다이메틸 카본에이트(2.83 g, 31.43 mmol)의 용액에 리튬 다이이소프로필아미드(7.54 mL, 15.08 mmol, 2 mol/L)를 -70℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 -70 내지 -30℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH3)로 정제하여 메틸 2-[4-브로모-1-[2-[tert-부톡시카보닐(메틸)아미노]에틸]이미다졸-2-일]아세테이트(400 mg, 1.06 mmol)를 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 376.
단계 4: 메틸 2-[4-브로모-1-[2-(메틸아미노)에틸]이미다졸-2-일]아세테이트
Figure pct00894
다이클로로메탄(3 mL) 중 메틸 2-[4-브로모-1-[2-[tert-부톡시카보닐(메틸)아미노]에틸]이미다졸-2-일]아세테이트(400 mg, 1.06 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하여 메틸 2-[4-브로모-1-[2-(메틸아미노)에틸]이미다졸-2-일]아세테이트(250 mg, 0.91 mmol)를 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 276.
단계 5: 2-브로모-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온
Figure pct00895
메탄올(10 mL) 중 메틸 2-[4-브로모-1-[2-(메틸아미노)에틸]이미다졸-2-일]아세테이트(250 mg, 0.91 mmol) 및 트라이에틸아민(914.42 mg, 9.05 mmol)의 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH3)로 정제하여 2-브로모-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온(160 mg, 0.65 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 244.
단계 6: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온
Figure pct00896
1,4-다이옥산(6 mL) 중 2-브로모-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온(50 mg, 0.20 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(47.15 mg, 0.16 mmol), t-Bu브렛포스 G3(69.97 mg, 0.08 mmol), t-Bu브렛포스(49.67 mg, 0.10 mmol) 및 세슘 카본에이트(200.34 mg, 0.61 mmol)의 혼합물을 120℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH4CO3)로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온(5.7 mg, 0.013 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 451.
단계 7: tert-부틸 (7-플루오로-3-((7-메틸-8-옥소-6,7,8,9-테트라하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00897
1,4-다이옥산(15 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온(230 mg, 0.51 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.79 g, 15.3 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(105.59 mg, 0.10 mmol) 및 브렛포스(109.57 mg, 0.20 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(665.16 mg, 2.04 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 1시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(7-메틸-8-옥소-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(70 mg, 0.13 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 532.
단계 8: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온
Figure pct00898
다이클로로메탄(5 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(7-메틸-8-옥소-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(65 mg, 0.12 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA): CH3CN = 7분 내에 7%-10% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-7-메틸-6,9-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-d][1,4]다이아제핀-8-온(2 mg, 0.0042 mmol)을 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 432.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 19.2 Hz, 2H), 6.70 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.10 (s, 2H), 4.11 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 3.99 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.89 (s, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.21 (s, 3H).
실시예 151:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-4,5-다이하이드로-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드(화합물 252)
Figure pct00899
단계 1: 에틸 2-(클로로메틸설판일)아세테이트
Figure pct00900
테트라하이드로퓨란(200 mL) 중 나트륨 하이드라이드(5.83 g, 60% 순도, 145.63 mmol)의 용액에 에틸 2-머캡토아세테이트(17.5g, 145.63 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 브로모클로로메탄(94.21 g, 728.14 mmol)을 첨가하고, 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 진공에서 증류시켜 에틸 2-(클로로메틸설판일)아세테이트(14 g, 83.02 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. GCMS = 168.
단계 2: 메틸 5-브로모-2-[(2-에톡시-2-옥소-에틸)설판일메틸]피라졸-3-카복실레이트
Figure pct00901
N,N-다이메틸포름아미드(30 mL) 중 메틸 5-브로모-1H-피라졸-3-카복실레이트(1.5 g, 7.32 mmol), 에틸 2-(클로로메틸설판일)아세테이트(1.36 g, 8.05 mmol) 및 칼륨 카본에이트(2.02 g, 14.63 mmol)의 혼합물에 테트라부틸암모늄 요오다이드(134.99 mg, 0.37 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 4시간 동안 25℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(5/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-2-[(2-에톡시-2-옥소-에틸)설판일메틸]피라졸-3-카복실레이트(1.8 g, 5.34 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 337.
단계 3: 메틸 2-브로모-4-옥소-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-5-카복실레이트
Figure pct00902
메탄올(10 mL) 중 메틸 5-브로모-2-[(2-에톡시-2-옥소-에틸)설판일메틸]피라졸-3-카복실레이트(500 mg, 1.48 mmol) 및 나트륨 메틸레이트(0.55 mL, 2.97 mmol)의 용액을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 아세트산으로 pH 8까지 조정하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(5/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-브로모-4-옥소-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-5-카복실레이트(270 mg, 0.93 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 291.
단계 4: 2-브로모-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-4-온
Figure pct00903
1,4-다이옥산(15 mL) 중 메틸 2-브로모-4-옥소-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-5-카복실레이트(1.1 g, 3.78 mmol) 및 농축 황산(49.37 g, 75.57 mmol)의 용액을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 나트륨 하이드록사이드(10%)로 pH 6까지 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 2-브로모-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-4-온(900 mg, 2.90 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 233.
단계 5: N-[(Z)-(2-브로모-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-4-일리덴)아미노]-4-메틸-벤젠설폰아미드
Figure pct00904
메탄올(3 mL) 중 2-브로모-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-4-온(50 mg, 0.21 mmol) 및 4-메틸벤젠설포노하이드라자이드(39.95 mg, 0.21 mmol)의 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 고체를 석유 에터(10 mL)로 세척하여 N-[(Z)-(2-브로모-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-4-일리덴)아미노]-4-메틸-벤젠설폰아미드(80 mg, 0.20 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 401.
단계 6: 2-브로모-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진
Figure pct00905
다이클로로메탄(10 mL) 중 N-[(Z)-(2-브로모-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-4-일리덴)아미노]-4-메틸-벤젠설폰아미드(80 mg, 0.20 mmol)의 용액에 다이이소부틸알루미늄 하이드라이드(1 mL, 1.0 mmol,1 mol/L)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-브로모-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진(20 mg, 0.091 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 219.
단계 7: 2-브로모-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드
Figure pct00906
다이클로로메탄(10 mL) 중 2-브로모-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진(130 mg, 0.59 mmol) 및 3-클로로퍼옥시벤조산(612.32 mg, 3.56 mmol)의 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 나트륨 설파이트 및 나트륨 바이카본에이트 용액으로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 2-브로모-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드(70 mg, 0.28 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 251.
단계 8: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00907
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(250 mg, 0.50 mmol), 2-브로모-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드(149.77 mg, 0.60 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(102.89 mg, 0.10 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(115.12 mg, 0.20 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(486.11 mg, 1.49 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(70 mg, 0.10 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 673.
단계 9: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00908
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(65 mg, 0.10 mmol), tert-부틸 카밤에이트(339.36 mg, 2.90 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(19.99 mg, 0.020 mmol) 및 브렛포스(20.74 mg, 0.040 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(125.92 mg, 0.39 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 4시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(60 mg, 0.080 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 754.
단계 10: 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-N3-(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)-7-플루오로-이소퀴놀린-3,8-다이아민
Figure pct00909
다이클로로메탄(2 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시메틸아미노)-3-[(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(53.98 mg, 0.070 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA): CH3CN = 7분 내에 3%-15% B)로 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-N3-(6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)-7-플루오로-이소퀴놀린-3,8-다이아민(5.5 mg, 0.011 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.33 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.70 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.18 (s, 2H), 6.08 (s, 1H), 5.82 (s, 2H), 5.43 (s, 2H), 3.58 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.27 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.00 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
실시예 152:
2-((8-아미노-6-사이클로프로필-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 253)
Figure pct00910
단계 1: tert-부틸 6-사이클로프로필-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00911
1,4-다이옥산(5 mL) 중 8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-6-일 트라이플루오로메탄설포네이트(150 mg, 0.24 mmol), 사이클로프로필보론산(41.88 mg, 0.49 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(56.20 mg, 0.049 mmol)의 혼합물에 칼륨 카본에이트(84.01 mg, 0.61 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 3시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 6-사이클로프로필-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-8-일카밤에이트(100 mg, 0.20 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.
단계 2: 2-[(8-아미노-6-사이클로프로필-7-플루오로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00912
2,2,2-트라이플루오로아세트산(4 mL) 중 tert-부틸 N-[6-사이클로프로필-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(70 mg, 0.14 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): CH3CN = 10분 내에 33%-50% B)로 정제하여 2-[(8-아미노-6-사이클로프로필-7-플루오로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(8.4 mg, 0.021 mmol)을 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 409.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.12 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.48 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.64-4.53 (m, 1H), 3.76 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.00 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.13-2.09 (m, 1H), 1.14 (d, J = 6.9 Hz, 6H), 1.06-0.96 (m, 2H), 0.84-0.82 (m, 2H).
실시예 153 및 실시예 154:
2-((8-아미노-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 254) 및 2-((8-아미노-7-플루오로-6-(2-이소프로폭시-4-메틸피리미딘-5-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 255)
Figure pct00913
단계 1: 5-브로모-2-이소프로폭시-4-메틸피리미딘
Figure pct00914
나트륨 하이드라이드(550 mg, 60% 순도, 13.75 mmol)를 테트라하이드로퓨란(50 mL) 중 2-프로판올(1.75 g, 29.12 mmol)의 용액에 0℃에서 회분식으로 첨가하였다. 생성된 용액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 5-브로모-2-클로로-4-메틸피리미딘(1.0 g, 4.82 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 염수로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/다이클로로메탄(2/1)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-2-이소프로폭시-4-메틸-피리미딘(350 mg, 1.51 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 231.
단계 2: 2-이소프로폭시-4-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리미딘
Figure pct00915
1,4-다이옥산(50 mL) 중 비스(피나콜라토)다이보론(2.043 g, 8.05 mmol), 5-브로모-2-이소프로폭시-4-메틸-피리미딘(310 mg, 1.34 mmol), 칼륨 아세테이트(394.39 mg, 4.02 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(98.2 mg, 0.13 mmol)의 혼합물을 80℃에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/다이클로로메탄(3/7)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-이소프로폭시-4-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리미딘(350 mg, 1.26 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 279.
단계 3: tert-부틸 (7-플루오로-6-(2-이소프로폭시-4-메틸피리미딘-5-일)-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트 및 tert-부틸 (7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00916
1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트(150 mg, 0.24 mmol), 2-이소프로폭시-4-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리미딘(101.5 mg, 0.36 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(56.2 mg, 0.05 mmol) 및 칼륨 카본에이트(100.72 mg, 0.73 mmol)의 용액을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(2-이소프로폭시-4-메틸-피리미딘-5-일)-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(35 mg, 0.057 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 619. tert-부틸 (7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(20 mg, 0.042 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 469.
단계 4: 2-((8-아미노-7-플루오로-6-(2-이소프로폭시-4-메틸피리미딘-5-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 255)
Figure pct00917
다이클로로메탄(1 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(2-이소프로폭시-4-메틸-피리미딘-5-일)-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(30 mg, 0.05 mmol) 및 TFA(5 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 생성물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 쉴드(Shield) RP18 OBD 컬럼 30 x 150 mm, 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): 8분 내에 ACN(32%-60%); 60 mL/분)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(2-이소프로폭시-4-메틸-피리미딘-5-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(7.7 mg, 0.015 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 519.3; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.15 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.89 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 5.49-5.34 (m, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.89-4.71 (m, 1H), 3.97-3.80 (m, 2H), 3.24-3.06 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 1.44 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 1.24 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
단계 5: 2-((8-아미노-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 254)
Figure pct00918
tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(20 mg, 0.04 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(4 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(선파이어 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA): 7분 내에 ACN(25%-52%); 25 mL/분)로 정제하여 2-[(8-아미노-7-플루오로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(2.5 mg, 0.0068 mmol)을 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 369.2; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.23 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.51-7.42 (m, 1H), 7.06-7.02 (m, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.83-4.72 (m, 1H), 3.96-3.85 (m, 2H), 3.18-3.05 (m, 2H), 1.25 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 155:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-5-이소프로필-4,5-다이하이드로-7H-피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드(화합물 256)
Figure pct00919
단계 1: 1-클로로-N-이소프로필-메탄설폰아미드
Figure pct00920
다이클로로메탄(100 mL) 중 이소프로필아민(1.19 g, 20.13 mmol) 및 트라이에틸아민(2.03 g, 20.13 mmol)의 혼합물에 클로로메탄 설폰일클로라이드(1.5 g, 10.07 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 2시간 동안 0℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 물로 세척하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 1-클로로-N-이소프로필-메탄설폰아미드(1.1 g, 6.40 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. GCMS = 171.
단계 2: 메틸 5-브로모-2-(이소프로필설팜오일메틸)피라졸-3-카복실레이트
Figure pct00921
1-메틸-2-피롤리딘온(20 mL) 중 1-클로로-N-이소프로필-메탄설폰아미드(1,381.51 mg, 8.05 mmol), 메틸 3-브로모-1H-피라졸-5-카복실레이트(1.1 g, 5.37 mmol) 및 칼륨 카본에이트(2.22 g, 16.1 mmol)의 혼합물을 60℃에서 5시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% NH3H2O)로 정제하여 메틸 5-브로모-2-(이소프로필설팜오일메틸)피라졸-3-카복실레이트(600 mg, 1.76 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 340.
단계 3: 1-[3-브로모-5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]-N-이소프로필-메탄설폰아미드
Figure pct00922
다이클로로메탄(20 mL) 중 메틸 5-브로모-2-(이소프로필설팜오일메틸)피라졸-3-카복실레이트(600 mg, 1.76 mmol)의 용액에 다이이소부틸알루미늄 하이드라이드(3.53 mL, 3.53 mmol, 1 mol/L)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올로 급랭시켰다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 1-[3-브로모-5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]-N-이소프로필-메탄설폰아미드(400 mg,1.28 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 312.
단계 4: 2-브로모-5-이소프로필-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드
Figure pct00923
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 1-[3-브로모-5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]-N-이소프로필-메탄설폰아미드(400 mg, 1.28 mmol) 및 트라이페닐포스핀(671 mg, 2.56 mmol)의 용액에 다이이소프로필 아조다이카복실레이트(517 mg, 2.56 mmol)를 0℃에서 질소 하에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 유기 층을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(7/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-5-이소프로필-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드(300 mg,1.02 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 294.
단계 5: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00924
1,4-다이옥산(20 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(342 mg, 0.68 mmol), 2-브로모-5-이소프로필-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드(200 mg, 0.68 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(140 mg, 0.14 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(157.19 mg, 0.27 mmol), 세슘 카본에이트(665 mg, 2.04 mmol)의 혼합물을 질소 하에 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(105 mg, 0.15 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 716.
단계 6: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00925
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(90 mg, 0.13 mmol), tert-부틸 카밤에이트(294.42 mg, 2.51 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(26 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(27 mg, 0.05 mmol) 및 세슘 카본에이트(122 mg, 0.38 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(60 mg, 0.075 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 797.
단계 7: 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-N3-(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민; 포름산
Figure pct00926
다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(60 mg, 0.08 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% FA)로 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-N3-(5-이소프로필-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민; 포름산(18.6 mg, 0.034 mmol)을 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 497; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.17 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.28 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.34-4.27 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.20 (d, J = 6.4 Hz, 6H).
실시예 156:
2-((8-아미노-6-(벤질옥시)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 257)
Figure pct00927
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-[6-벤질옥시-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50 mg, 0.086 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 7까자 조정하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-((8-아미노-6-(벤질옥시)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(12.2 mg, 0.026 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 475.2. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.02 (d, J = 14.0 Hz, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.56-7.46 (m, 2H), 7.50-7.31 (m, 3H), 6.62-6.59 (m, 1H), 5.94 (d, J = 6.4 Hz, 3H),5.25 (s, 2H), 4.98 (s, 2H), 4.63-4.58 (m, 1H), 3.79-3.77 (m, 2H), 3.00-2.98 (m, 2H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 157:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-메틸이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 258)
Figure pct00928
단계 1: tert-부틸 (7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-6-메틸이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00929
[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트(100 mg, 0.16 mmol), 트라이메틸보록신(101.79 mg, 0.81 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(37.46 mg, 0.03 mmol) 및 칼륨 카본에이트(67.14 mg, 0.49 mmol)의 용액을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-메틸-8-이소퀴놀일]카밤에이트(35 mg, 0.073 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 483.
단계 2: 2-((8-아미노-7-플루오로-6-메틸이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00930
tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-메틸-8-이소퀴놀일]카밤에이트(25 mg, 0.05 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(5 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(선파이어 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm 10 nm; 물(0.1% FA): 12분 중 ACN(10%-27%): 25 mL/분)로 정제하여 2-[(8-아미노-7-플루오로-6-메틸-3-이소퀴놀일)아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(5.4 mg, 0.014 mmol)을 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 383.2; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.03 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.83-4.65 (m, 1H), 3.96-3.81 (m, 2H), 3.24-3.08 (m, 2H), 2.39 (d, J = 2.3 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 158:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-메톡시이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 259)
Figure pct00931
단계 1: tert-부틸 (7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-6-메톡시이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct00932
N,N-다이메틸포름아미드(10 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-하이드록시-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(100 mg, 0.21 mmol) 및 칼륨 카본에이트(42.72 mg, 0.31 mmol)의 용액을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 이어서, 요오도메탄(43.96 mg, 0.31 mmol)을 첨가하고, 이어서 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-메톡시-8-이소퀴놀일]카밤에이트(58 mg, 0.12 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 499.
단계 2: 2-((8-아미노-7-플루오로-6-메톡시이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00933
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-메톡시-8-이소퀴놀일]카밤에이트(55 mg, 0.11 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.5 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼 30 x 150 mm, 5 μm ; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): 9분 내에 ACN(20%-46%): 60 mL/분)로 정제하여 2-[(8-아미노-7-플루오로-6-메톡시-3-이소퀴놀일)아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(17.2 mg, 0.043 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 399.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.02 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 6.48 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.95 (s, 2H), 5.89 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.62-4.57 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.80-3.76 (m, 2H), 2.99-2.96 (m, 2H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 159:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-((피리딘-2-일옥시)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 260)
Figure pct00934
단계 1: 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00935
다이클로로메탄(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(하이드록시메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(145 mg, 0.35 mmol) 및 티온일 클로라이드(204.73 mg, 1.74 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하여 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.34 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 436.
단계 2: 2-((8-클로로-7-플루오로-6-((피리딘-2-일옥시)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온 및 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00936
N,N-다이메틸포름아미드(5 mL) 중 2-[[8-클로로-6-(클로로메틸)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.34 mmol), 1H-피리딘-2-온(98.08 mg, 1.03 mmol) 및 세슘 카본에이트(560.38 mg, 1.72 mmol)의 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 염산)로 정제하여 2-((8-클로로-7-플루오로-6-((피리딘-2-일옥시)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(15 mg, 0.03 mmol) 및 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(85 mg, 0.17 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 495.
단계 3: tert-부틸 7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)-6-((피리딘-2-일옥시)메틸)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00937
1,4-다이옥산(3 mL) 중 2-(8-클로로-7-플루오로-6-((피리딘-2-일옥시)메틸)이소퀴놀린-3-일아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(14 mg, 0.028 mmol), tert-부틸 카밤에이트(99.47 mg, 0.85 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(5.86 mg, 0.0057 mmol) 및 브렛포스(6.08 mg, 0.011 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(36.9 mg, 0.11 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)-6-((피리딘-2-일옥시)메틸)이소퀴놀린-8-일카밤에이트(15 mg, 0.076 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 576.
단계 4: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(2-피리딜옥시메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00938
다이클로로메탄(3 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(2-피리딜옥시메틸)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(18 mg, 0.03 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/나트륨 바이카본에이트): 7분 내에 CH3CN = 35%-55% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(2-피리딜옥시메틸)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(3.4 mg, 0.0072 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.20 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.20 (ddd, J = 5.1, 2.0, 0.8 Hz, 1H), 7.76 (ddd, J = 8.4, 7.1, 2.0 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.02 (ddd, J = 7.1, 5.0, 1.0 Hz, 1H), 6.99-6.91 (m, 2H), 6.01 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 5.45 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.59 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 3.78 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 160:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-((2-옥소피리딘-1(2H)-일)메틸)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 261)
Figure pct00939
단계 1: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00940
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(95 mg, 0.19 mmol), tert-부틸 카밤에이트(673.7 mg, 5.76 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(39.73 mg, 0.040 mmol) 및 브렛포스(41.23 mg, 0.080 mmol)의 용액에 세슘 카본에이트(250.29 mg, 0.77 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(75 mg, 0.13 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 576.
단계 2: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00941
2,2,2-트라이플루오로아세트산(3 mL) 및 다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(70 mg, 0.12 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/나트륨 바이카본에이트): CH3CN = 7분 내에 13%-43% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-[(2-옥소-1-피리딜)메틸]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(23.8 mg, 0.050 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.18 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 7.72 (dd, J = 6.9, 2.0 Hz, 1H), 7.53-7.43 (m, 2H), 6.49-6.39 (m, 2H), 6.29 (td, J = 6.7, 1.4 Hz, 1H), 6.05 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.94 (s, 2H), 4.59 (m, J = 6.8 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 1.11 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 161:
6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-N3-(7,7-다이플루오로-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3,8-다이아민(화합물 262)
Figure pct00942
단계 1: 1-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)헥스-5-엔-2-올
Figure pct00943
N,N-다이메틸포름아미드(20 mL) 중 3,5-다이브로모-1H-피라졸(5.0 g, 22.14 mmol), 1,2-에폭시-5-헥센(4.35 g, 44.27 mmol) 및 세슘 카본에이트(21.78 g, 66.41 mmol)의 용액을 85℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)헥스-5-엔-2-올(4.2 g, 13.0 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 324.0.
단계 2: 2-브로모-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]아제핀-7-올
Figure pct00944
N,N-다이메틸아세트아미드(70 mL) 중 1-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)헥스-5-엔-2-올(7.2 g, 22.22 mmol), 팔라듐 아세테이트(500 mg, 2.23 mmol), 트라이페닐포스핀(1,170.0 mg, 4.47 mmol), 칼륨 아세테이트(6,570.0 mg, 67.04 mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드(7,155.33 mg, 22.22 mmol)의 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 질소 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]아제핀-7-올(3.8 g, 15.63 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 243.1.
단계 3: 2-브로모-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-7-온
Figure pct00945
다이클로로메탄(20 mL) 중 2-브로모-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]아제핀-7-올(1.5 g, 6.17 mmol) 및 DMP의 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 나트륨 바이카본에이트로 pH 7까지 조정하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-7-온(600 mg, 2.49 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 241.1.
단계 4: 2-브로모-7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀
Figure pct00946
다이클로로메탄(10 mL) 중 2-브로모-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-7-온(400 mg, 1.66 mmol) 및 다이에틸아미노황 트라이플루오라이드(801.39 mg, 4.98 mmol)의 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(5/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀(120 mg, 0.46 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI): [M+H]+ = 263.1.
단계 5: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00947
1,4-다이옥산(6 mL) 중 2-브로모-7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀(21.24 mg, 0.08 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(65.0 mg, 0.13 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(44.15 mg, 0.05 mmol), t-Bu브렛포스(31.27 mg, 0.06 mmol) 및 세슘 카본에이트(126.39 mg, 0.39 mmol)의 혼합물을 130℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 PE/EA(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(30 mg, 0.044 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 685.1.
단계 6: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00948
1,4-다이옥산(4 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(40 mg, 0.06 mmol), tert-부틸 카밤에이트(170.99 mg, 1.46 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(12.09 mg, 0.01 mmol), 브렛포스(9.39 mg, 0.02 mmol) 및 세슘 카본에이트(57.1 mg, 0.18 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(40 mg, 0.06 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 765.8.
단계 7: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00949
메탄올(5 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸렌-6,8-다이하이드로-5H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(105.0 mg, 0.14 mmol) 및 팔라듐 탄소(10%)(20 mg, 0.14 mmol)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(70 mg, 0.09 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 767.8.
단계 8: 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-N3-(7,7-다이플루오로-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3,8-다이아민
Figure pct00950
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(7,7-다이플루오로-4-메틸-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(70 mg, 0.09 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 7까지 조정하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% FA)로 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-N3-(7,7-다이플루오로-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3,8-다이아민(19.9 mg, 0.043 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 486.2. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.29 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.75 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.94 (s, 1H), 5.55 (s, 2H), 4.77-4.65 (m, 1H), 4.48-4.35 (m, 1H), 3.04-2.95 (m, 1H),2.40-2.20(m, 2H) 1.99 (s, 3H), 1.82 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 1.50-1.40 (m, 1H), 1.32 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 162:
5-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-1-메틸-1,3-다이하이드로이소티아졸로[4,3-b]피리딘 2,2-다이옥사이드(화합물 263)
Figure pct00951
단계 1: N-(2,6-다이클로로-3-피리딜)메탄설폰아미드
Figure pct00952
다이클로로메탄(120 mL) 중 2,6-다이클로로-3-피리딘일아민(3.0 g, 18.4 mmol), 트라이에틸아민(9.29 g, 92.02 mmol) 및 메탄설폰일 클로라이드(6.29 g, 55.21 mmol)의 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 10% 나트륨 하이드록사이드 용액으로 pH 10까지 조정하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 수성 층을 합하였다. 반응 혼합물을 12% 염산 용액으로 pH 5까지 조정하였다. 여과 후, 고체를 수집하고, 건조하여 N-(2,6-다이클로로-3-피리딜)메탄설폰아미드(3 g, 12.44 mmol)를 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 241.1.
단계 2: N-(2,6-다이클로로-3-피리딜)-N-메틸-메탄설폰아미드
Figure pct00953
N,N-다이메틸포름아미드(170 mL) 중 N-(2,6-다이클로로-3-피리딜)메탄설폰아미드(3.5 g, 14.52 mmol), 칼륨 카본에이트(5.01 g, 36.29 mmol), 테트라부틸암모늄 브로마이드(0.93 g, 2.9 mmol) 및 요오도메탄(6.18 g, 43.55 mmol)의 용액을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:30분 내에 ACN(5%-70%))로 정제하여 N-(2,6-다이클로로-3-피리딜)-N-메틸-메탄설폰아미드(3.5 g, 13.72 mmol)를 적색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI): [M+H]+ = 255.1.
단계 3: 5-클로로-1-메틸-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘 2,2-다이옥사이드
Figure pct00954
다이메틸 설폭사이드(70 mL) 중 N-(2,6-다이클로로-3-피리딜)-N-메틸-메탄설폰아미드(2.2 g, 8.62 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(2.41 g, 21.56 mmol)의 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 반응 시스템을 역상 크로마토그래피(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:30분 내에 메탄올(5%-45%))로 정제하여 5-클로로-1-메틸-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘 2,2-다이옥사이드(900 mg, 4.12 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 218.7.
단계 4: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(1-메틸-2,2-다이옥소-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘-5-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00955
1,4-다이옥산(30 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(300 mg, 0.60 mmol), 5-클로로-1-메틸-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘 2,2-다이옥사이드(300 mg, 1.37 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(123.47 mg, 0.12 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(103.43 mg, 0.18 mmol) 및 세슘 카본에이트(486.11 mg, 1.49 mmol)의 혼합물을 95℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:30분 내에 메탄올(5%-70%))로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(1-메틸-2,2-다이옥소-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘-5-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(150 mg, 0.22 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 685.2.
단계 5: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(1-메틸-2,2-다이옥소-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘-5-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00956
1,4-다이옥산(1 mL) 중 [tert-부틸 카밤에이트(250 mg, 2.13 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(15 mg, 0.01 mmol), 브렛포스(8.0 mg, 0.01 mmol), tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(1-메틸-2,2-다이옥소-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘-5-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.07 mmol) 및 세슘 카본에이트(95.0 mg, 0.29 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(5/95)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(1-메틸-2,2-다이옥소-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘-5-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.065 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 765.9.
단계 6: [6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-N3-(1-메틸-2,2-다이옥소-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘-5-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민
Figure pct00957
다이클로로메탄(1 mL) 중 [tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(1-메틸-2,2-다이옥소-3H-이소티아졸로[4,3-b]피리딘-5-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(300 mg, 0.39 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.2 mL, 0.39 mmol)의 용액을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 급랭시켰다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 5-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-1-메틸-1,3-다이하이드로이소티아졸로[4,3-b]피리딘 2,2-다이옥사이드(17.1 mg, 0.037 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 466.2. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.69 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.45-7.28 (m, 2H), 6.77 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 5.26 (s, 2H), 4.79 (s, 2H), 3.05 (s, 3H), 1.94 (d, J = 1.4 Hz, 3H).
실시예 163:
6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4S,7S)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민(화합물 265), 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4R,7R)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민(화합물 266), 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4S,7R)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민(화합물 267) 및 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4R,7S)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민(화합물 268)
Figure pct00958
단계 1: 1-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)헥스-5-엔-2-올
Figure pct00959
아세토니트릴(20 mL) 및 2-(부트-3-엔일)옥시란(2 g, 20 mmol) 중 3,5-다이브로모-1H-피라졸(1.5 g, 6.7 mmol)의 용액에 칼륨 카본에이트(2.8 g, 20 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 1-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)헥스-5-엔-2-올(1.4 g, 4.3 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 323.
단계 2: 2-브로모-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-7-올
Figure pct00960
N,N-다이메틸포름아미드(50 mL) 중 1-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)헥스-5-엔-2-올(5.2 g, 16.15 mmol), 팔라듐 아세테이트(361 mg, 1.62 mmol), 트라이페닐포스핀(846 mg, 3.23 mmol), 칼륨 아세테이트(4.7 g, 48.45 mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드(5.2 g, 16.15 mmol)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-7-올(3.6 g, 14.8 mmol)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 243.
단계 3: 2-브로모-7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀
Figure pct00961
메틸 요오다이드(15 mL) 중 2-브로모-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-7-올(1 g, 4.12 mmol) 및 산화 은의 혼합물을 밤새 환류하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀(1.02 g, 3.98 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 257.
단계 4: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐(5-(8-클로로-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct00962
1,4-다이옥산(20 mL) 중 2-브로모-7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀(1.02 g, 3.97 mmol), tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐(5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(2 g, 3.97 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(683 mg, 0.8 mmol) 및 t-Bu브렛포스(774 mg, 1.6 mmol)의 용액에 세슘 카본에이트(3.9 g, 12 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 120℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐(5-(8-클로로-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(1.5 g, 2.21 mmol)를 딥-브라운(deep-brown) 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 679.
단계 5: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct00963
1,4-다이옥산(15 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐(5-(8-클로로-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(1.5 g, 2.2 mmol), tert-부틸 카밤에이트(7.7 g, 66 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(455 mg, 0.44 mmol) 및 브렛포스(236 mg, 0.44 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(2.9 g, 0.8 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(1.10 g, 1.45 mmol)를 딥-브라운 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 760.
단계 6: tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct00964
메탄올(15 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸렌-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(1.1 g, 1.45 mmol), 산화 백금(120 mg)의 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(800 mg, 1.05 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 762.
단계 7: 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4S,7S)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민, 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4R,7R)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민, 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4S,7R)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민 및 6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-N3-((4R,7S)-7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민
Figure pct00965
다이클로로메탄(10 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(10 mL) 중 tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((7-메톡시-4-메틸-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(800 mg, 1.05 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 역-HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:ACN = 7분 내에 20%-50%)로 정제하여 혼합물(168 mg, 0.36 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다. 화합물 265: 황색 고체(56.3 mg). 체류 시간: 6.06분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.25 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.66 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 6.64 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.04 (s, 2H), 5.85 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.51 (dd, J = 15.2, 5.3 Hz, 1H), 4.16 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 3.53 (s, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.89-2.72 (m, 1H), 2.16-2.03 (m, 1H), 1.93 (s, 3H), 1.87-1.72 (m, 1H), 1.58-1.42 (m, 2H), 1.27 (d, J = 6.9 Hz, 3H). 화합물 266: 황색 고체(48.7 mg). 체류 시간: 4.46분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.3. 화합물 268: 황색 고체(17.8 mg). 체류 시간: 6.53분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.25 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.68 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 6.69 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.05 (s, 2H), 5.87 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.34 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.03 (dd, J = 14.0, 9.5 Hz, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.16 (s, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.13 (s, 1H), 1.93 (s, 3H), 1.86-1.56 (m, 2H), 1.41-1.20 (m, 1H), 1.27 (t, J = 6.8 Hz, 3H). 화합물 267: 황색 고체(17.8 mg). 체류 시간: 11.8분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.3.
실시예 164:
5-[8-아미노-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-1-에틸-피라졸-3-카보니트릴(화합물 269)
Figure pct00966
단계 1: 메틸 5-브로모-1-에틸-피라졸-3-카복실레이트
Figure pct00967
테트라하이드로퓨란(50 mL) 중 메틸 5-브로모-1H-피라졸-3-카복실레이트(2. 0 g, 9.76 mmol), 요오도에탄(4.5g, 28.85 mmol) 및 칼륨 카본에이트(3.0 g, 21.74 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 80℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-1-에틸-피라졸-3-카복실레이트(1.2 g, 5.15 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 233.1.
단계 2: 5-브로모-1-에틸-피라졸-3-카복스아미드
Figure pct00968
암모늄 하이드록사이드(10 mL, 30%) 중 메틸 5-브로모-1-에틸-피라졸-3-카복실레이트(1.2 g, 5.15 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 용액을 진공 하에 농축하여 5-브로모-1-에틸-피라졸-3-카복스아미드(1.1 g, 5.05 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 218.1.
단계 3: 5-브로모-1-에틸-1H-피라졸-3-카보니트릴
Figure pct00969
트라이플루오로아세트산 무수물(1.27 g, 6.05 mmol)을 다이클로로메탄(30 mL) 중 5-브로모-1-에틸-피라졸-3-카복스아미드(1.1 g, 5.05 mmol) 및 트라이에틸아민(1.53 g, 15.14 mmol)의 용액에 0℃에서 적가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-60%/물 중 0.05% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 5-브로모-1-에틸-1H-피라졸-3-카보니트릴(1 g, 5.00 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 200.
단계 4: tert-부틸 N-[6-(5-시아노-2-에틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00970
2-메틸-2-프로판올(0.80 mL) 및 물(0.20 mL) 중 [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(80 mg, 0.16 mmol) 및 칼륨 바이플루오라이드(40 mg, 0.41 mmol)의 용액을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 5-브로모-1-에틸-피라졸-3-카보니트릴(80 mg, 0.40 mmol), 칼륨 포스페이트(96 mg, 0.45 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(40 mg, 0.03 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 4.5시간 동안 마이크로파의 조사 하에 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-(5-시아노-2-에틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(45 mg, 0.077 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 588.3.
단계 5: 5-[8-아미노-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-1-에틸-피라졸-3-카보니트릴
Figure pct00971
다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-시아노-2-에틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40 mg, 0.07 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 트라이에틸아민으로 pH 7까지 조정하였다. 조질 생성물을 하기 조건에 따라 제조용 HPLC로 정제하였다: 컬럼, 아틀란티스 HILIC OBD 컬럼 19 x 150 x 5 μm; 이동상: 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 ACN(7분 내에 40-50%); 검출기, UV 254 nm. 5-[8-아미노-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-1-에틸-피라졸-3-카보니트릴(13.8 mg, 0.028 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 488.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.30 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.94 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.61-4.57 (m, 1H), 4.16 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.79-3.76 (m, 2H), 2.98 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 165:
2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5,6,7,8-테트라하이드로이미다조[1,2-a]피라진-3-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(화합물 270)
Figure pct00972
단계 1: tert-부틸 3-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-6, 8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트
Figure pct00973
N,N-다이메틸아세트아미드(20 mL) 중 tert-부틸 6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트(1.0 g, 4.48 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(1.5 g, 4.65 mmol), 칼륨 카본에이트(1.0 g, 7.25 mmol), 팔라듐 아세테이트(122 mg, 0.37 mmol), 트라이사이클로헥실 포스핀(210 mg, 0.75 mmol) 및 트라이메틸아세트산(115 mg, 1.13 mmol)의 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-55%/물 중 0.05% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 tert-부틸 3-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트(500 mg, 1.20 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 418.1.
단계 2: tert-부틸 3-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트
Figure pct00974
1,4-다이옥산(35 mL) 중 tert-부틸 3-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트(350 mg, 0.84 mmol), 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(455 mg, 1.67 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(350 mg, 0.41 mmol), t-Bu브렛포스(420 mg, 0.73 mmol) 및 세슘 카본에이트(805 mg, 2.47 mmol)의 혼합물을 120℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 3-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트(300 mg, 0.49 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 609.2.
단계 3: tert-부틸 3-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트
Figure pct00975
1,4-다이옥산(26 mL) 중 tert-부틸 3-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트(260 mg, 0.43 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(78 mg, 0.08 mmol), 브렛포스(91 mg, 0.17 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.56 g, 13.32 mmol) 및 세슘 카본에이트(416 mg, 1.28 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-60%/물 중 0.05% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 tert-부틸 3-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트(150 mg, 0.22 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 690.3.
단계 4: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5,6,7,8-테트라하이드로이미다조[1,2-a]피라진-3-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct00976
다이클로로메탄(6 mL) 중 tert-부틸 3-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,8-다이하이드로-5H-이미다조[1,2-a]피라진-7-카복실레이트(145 mg, 0.21 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.5 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 25℃에서 교반하고, 이어서 진공 하에 농축하였다. 잔사를 트라이에틸아민으로 pH 7까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC: 아틀란티스 HILIC OBD 컬럼 19 x 150 x 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 ACN(7분 내에 20-30%)으로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5,6,7,8-테트라하이드로이미다조[1,2-a]피라진-3-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(17.2 mg, 0.035 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 490.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.22 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.07 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.07 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.60 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.97 -3.85 (m, 4H), 3.79-3.77 (m, 2H), 3.04-2.98 (m, 4H), 2.75 (s, 1H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 166:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-5,6-다이하이드로-4H,8H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀 7,7-다이옥사이드(화합물 271)
Figure pct00977
단계 1: 2-브로모-6,8-다이하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀 7,7-다이옥사이드
Figure pct00978
N,N-다이메틸포름아미드(120 mL) 중 1-(알릴설폰일메틸)-3,5-다이브로모-피라졸(2.0 g, 5.81 mmol), 트라이에틸아민(4.11 g, 40.7 mmol), 팔라듐 아세테이트(0.2 g, 0.87 mmol) 및 트라이(2-메틸페닐)포스핀(530.2 mg, 1.74 mmol)의 혼합물을 140℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 이어서 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(6/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6,8-다이하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀 7,7-다이옥사이드(100 mg, 0.38 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 263.2.
단계 2: 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀 7,7-다이옥사이드
Figure pct00979
메탄올(30 mL) 중 2-브로모-6,8-다이하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀 7,7-다이옥사이드(200.0 mg, 0.76 mmol), 산화 백금(17.26 mg, 0.08 mmol) 및 아세트산(9.12 mg, 0.15 mmol)의 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 수소(2 atm) 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트물:MeOH = 20분 내에 95%-60%)로 정제하여 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀 7,7-다이옥사이드(130 mg, 0.49 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS45 (ESI) [M+H]+ = 265.3.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00980
1,4-다이옥산(28 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(140 mg, 0.28 mmol), 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀 7,7-다이옥사이드(140 mg, 0.53 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(190.17 mg, 0.22 mmol), t-Bu브렛포스(134.72 mg, 0.28 mmol) 및 세슘 카본에이트(453.7 mg, 1.39 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 130℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:MeOH = 20분 내에 95%-35%)로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(75 mg, 0.11 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 687.3.
단계 4: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct00981
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(100 mg, 0.15 mmol), tert-부틸 카밤에이트(425.65 mg, 3.64 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(22.59 mg, 0.02 mmol), 브렛포스(15.6 mg, 0.03 mmol) 및 세슘 카본에이트(237.2 mg, 0.73 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(100 mg, 0.13 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 768.4.
단계 5: 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-N3-(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)-7-플루오로-이소퀴놀린-3,8-다이아민
Figure pct00982
다이클로로메탄(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(100 mg, 0.13 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(10.0 mL, 1.3 mmol)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 용액의 pH 값을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트: CH3CN = 45분 내에 95%-35%)로 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-N3-(7,7-다이옥소-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-c][1,3]티아제핀-2-일)-7-플루오로-이소퀴놀린-3,8-다이아민(10.3 mg, 0.02 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.28 (s, 1H), 9.26 (s, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.80 (s, 2H), 6.74-6.72 (m, 1H), 6.13 (s, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.73-5.45 (m, 4H), 3.50-3.40 (m, 2H), 2.97-2.94 (m, 2H), 2.03-1.98 (m, 5H).
실시예 167:
2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5-메틸-2-옥소-1H-피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산(화합물 272)
Figure pct00983
단계 1: 4-요오도-2-메톡시-5-메틸-피리딘
Figure pct00984
메탄올(50 mL) 중 2-플루오로-4-요오도-5-메틸피리딘(5.0 g, 21.1 mmol) 및 메탄올 중 나트륨 메탄올레이트(50 mL, 30%)의 용액을 80℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(5/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-요오도-2-메톡시-5-메틸-피리딘(3.7 g, 14.86 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 250.
단계 2: (2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)보론산
Figure pct00985
테트라하이드로퓨란(5 mL) 중 4-요오도-2-메톡시-5-메틸-피리딘(200 mg, 0.80 mmol), n-부틸리튬(0.8 mL, 2 mmol)의 용액을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 트라이이소프로폭시보란(1 mL, 4.33 mmol)의 용액을 첨가하고, 이어서 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 (2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)보론산(300 mg, 0.72 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 168.
단계 3: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct00986
1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 (2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)보론산(54.16 mg, 0.32 mmol), [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트(100.0 mg, 0.16 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(11.87 mg, 0.02 mmol) 및 칼륨 카본에이트(49.24 mg, 0.36 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 질소 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1:9)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(59 mg,0. 10 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 590.
단계 4: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5-메틸-2-옥소-1H-피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산
Figure pct00987
아세토니트릴(60 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(2-메톡시-5-메틸-4-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.10 mmol) 및 요오도트라이메틸실란(122.16 mg, 0.61 mmol)의 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA): CH3CN = 10분 내에 13%-24% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5-메틸-2-옥소-1H-피리딘-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산(11.4 mg, 0.022 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 476.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 11.89-11.19 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.73 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.66-4.55 (m, 1H), 3.84-3.74 (m, 2H), 3.04-2.94 (s, 2H), 1.84 (s, 3H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 168:
2-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-6-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 273)
단계 1: 메틸 2-(3-브로모-5-(2-(2-하이드록시-2-메틸프로필아미노)에틸)-1H-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct00989
메탄올(10 mL) 중 메틸 2-[5-(2-아미노에틸)-3-브로모-피라졸-1-일]아세테이트(400 mg, 1.53 mmol) 및 이소부틸렌옥사이드(20 mL, 1.53 mmol)의 용액을 25℃에서 40시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 334.
단계 2: 2-브로모-6-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00990
메탄올(50 mL) 중 메틸 2-[3-브로모-5-[2-[(2-하이드록시-2-메틸-프로필)아미노]에틸]피라졸-1-일]아세테이트(200 mg, 0.60 mmol) 및 트라이에틸아민(604.41 mg, 5.98 mmol)의 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(5/95)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(40 mg, 0.13 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 302.
단계 3: 2-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-6-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00991
1,4-다이옥산(20 mL) 중 2-브로모-6-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(252.05 mg, 0.83 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(200 mg, 0.70 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(143.89 mg, 0.14 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(160.99 mg, 0.28 mmol) 및 세슘 카본에이트(679.83 mg, 2.09 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/9)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.29 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 509.
단계 4: tert-부틸 7-플루오로-3-(6-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct00992
1,4-다이옥산(15 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(1,173.85 mg, 10.02 mmol), 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(170 mg, 0.33 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(69.14 mg, 0.07 mmol), 브렛포스(71.74 mg, 0.13 mmol) 및 세슘 카본에이트(435.54 mg, 1.34 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/9)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[6-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.10 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 590.
단계 5: 2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-6-(2-하이드록시-2-메틸프로필)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct00993
2,2,2-트라이플루오로아세트산(6 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[6-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.10 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): CH3CN = 7분 내에 20%-45% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2-하이드록시-2-메틸-프로필)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(14.1 mg, 0.029 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 490.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.27 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.12 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.59 (s, 1H), 4.00-3.93 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.15-3.07 (s, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.06 (s, 6H).
실시예 169:
(R)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(7-하이드록시-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 274) 및 (S)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(7-하이드록시-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 275)
Figure pct00994
단계 1: 메틸 4-브로모-7-하이드록시-5H-사이클로펜타[c]피리딘-6-카복실레이트
Figure pct00995
테트라하이드로퓨란(22 mL) 중 에틸 5-브로모니코티메이트(5 g, 21.7 mmol)의 용액에 리튬 다이이소프로필아미드(23.9 mmol, 테트라하이드로퓨란 중 2.5 M)를 5분에 걸쳐 -78℃에서 적가하였다. 생성된 암적색 용액을 30분 동안 -78℃에서 교반하였다. 테트라하이드로퓨란(22 mL) 중 메틸 아크릴레이트(4.9 mL, 54.3 mmol)를 5분에 걸쳐 -78℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 -78℃에서 추가로 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 수성 10% 아세트산(43.5 mL, 76.1 mmol)을 첨가하고( pH 4 내지 5를 제공함), 반응 생성물을 실온까지 가온하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하여 메틸 4-브로모-7-하이드록시-5H-사이클로펜타[c]피리딘-6-카복실레이트(5.38 g, 조질)를 진한 녹색 무정형 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H+] = 270, 272.
단계 2: 4-브로모-5,6-다이하이드로-7H-사이클로펜타[c]피리딘-7-온
Figure pct00996
4-브로모-6-(메톡시카보닐)-5H-사이클로펜타[c]피리딘-7-올레이트(5.38 g, 조질)를 수성 6 M 염산(54 mL)에 용해시키고, 1.5시간 동안 환류 하에 가열하였다. 반응 생성물을 얼음/물에서 냉각하고, 이어서 칼륨 하이드록사이드(6 mol/L)로 pH 9까지 조정하였다. 생성된 용액을 에터 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(100/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-브로모-5,6-다이하이드로-7H-사이클로펜타[c]피리딘-7-온(0.69 g, 3.25 mmol)을 분홍색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 212, 214.
단계 3: 4-브로모-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-7-올
Figure pct00997
에탄올(10 mL) 중 4-브로모-5,6-다이하이드로사이클로펜타[c]피리딘-7-온(0.69 g, 3.3 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(188 mg, 5 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 4-브로모-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-7-올(580 mg, 2.72 mmol)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 214, 216.
단계 4: 4-브로모-7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘
Figure pct00998
N,N-다이메틸포름아미드(10 mL) 중 4-브로모-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-7-올(424 mg, 2 mmol)의 용액에 이미다졸(408 mg, 6.0 mmol) 및 tert-부틸클로로다이페닐실란(1.1 g, 4.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 염수로 세척하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 4-브로모-7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘(820 mg, 1.81 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 452, 454.
단계 5: 7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일보론산
Figure pct00999
압력 관에 1,4-다이옥산 중 4-브로모-7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘(450 mg, 1 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(2.54 g, 10 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(73 mg, 0.1 mmol) 및 칼륨 아세테이트(290 mg, 0.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역-HPLC로 정제하여 7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일보론산(320 mg, 0.77 mmol)을 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 418.
단계 6: tert-부틸 6-(7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01000
압력 관에 1,4-다이옥산 중 7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일보론산(100 mg, 0.24 mmol), 8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-6-일 트라이플루오로메탄설포네이트(98 mg, 0.16 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(26 mg, 0.032 mmol) 및 칼륨 카본에이트(66 mg, 0.48 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 이어서 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역-HPLC로 정제하여 tert-부틸 6-(7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-8-일카밤에이트(108 mg, 0.13 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 840.
단계 7: 2-(8-아미노-6-(7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01001
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 6-(7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-8-일카밤에이트(108 mg, 0.13 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하여 2-(8-아미노-6-(7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(45 mg, 0.061 mmol)을 갈색 오일로서 수득하였다. 잔사를 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 740.
단계 8: (R)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(7-하이드록시-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온 및 (S)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(7-하이드록시-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01002
다이클로로메탄(10 mL) 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드(0.1 mL) 중 2-(8-아미노-6-(7-(tert-부틸다이페닐실릴옥시)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[c]피리딘-4-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(45 mg, 0.061 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:ACN = 30분 내에 20%-50%)로 정제하여 라세미체 생성물(25 mg, 0.049 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. 라세미체 생성물을 키랄-HPLC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다: 화합물 275: 백색 고체(7.1 mg, 0.014 mmol). 체류 시간: 2.68분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 502.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.12 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 5.52 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 5.26 (dd, J = 12.6, 6.4 Hz, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.64-4.54 (m, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.03-2.71 (m, 4H), 2.40-2.31 (m, 1H), 1.88-1.78 (m, 1H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H). 화합물 274: 백색 고체(7.8 mg, 0.015 mmol). 체류 시간: 3.73분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.3% IPAmine):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분).
실시예 170:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-5-메틸-4,5-다이하이드로-7H-피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드(화합물 276)
Figure pct01003
단계 1: 메틸 5-브로모-2-(메틸설팜오일메틸)피라졸-3-카복실레이트
Figure pct01004
1-메틸-2-피롤리딘온(10 mL) 중 메틸 3-브로모-1H-피라졸-5-카복실레이트(100 mg, 0.49 mmol), 1-브로모-N-메틸-메탄설폰아미드(91.72 mg, 0.49 mmol) 및 칼륨 카본에이트(134.63 mg, 0.98 mmol)의 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-2-(메틸설팜오일메틸)피라졸-3-카복실레이트(100 mg, 0.32 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 312.
단계 2: 1-[3-브로모-5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]-N-메틸-메탄설폰아미드
Figure pct01005
다이클로로메탄(10 mL) 중 메틸 5-브로모-2-(메틸설팜오일메틸)피라졸-3-카복실레이트(60 mg, 0.19 mmol)의 용액에 다이이소부틸알루미늄 하이드라이드(0.19 mL, 0.38 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올로 급랭시켰다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% 암모늄 하이드록사이드)로 정제하여 1-[3-브로모-5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]-N-메틸-메탄설폰아미드(35 mg, 0.12 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 284.
단계 3: 2-브로모-5-메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드
Figure pct01006
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 1-[3-브로모-5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]-N-메틸-메탄설폰아미드(200 mg, 0.70 mmol) 및 트라이페닐포스핀(370.25 mg, 1.41 mmol)의 혼합물을 25℃에서 5분 동안 교반하였다. 이어서, 다이이소프로필 아조다이카복실레이트(284.38 mg, 1.41 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(5/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-5-메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드(170 mg, 0.64 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 266.
단계 4: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01007
1,4-다이옥산(20 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(321.3 mg, 0.64 mmol), 2-브로모-5-메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진 6,6-다이옥사이드(170 mg, 0.64 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(132.23 mg, 0.13 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(147.69 mg, 0.26 mmol) 및 세슘 카본에이트(624.76 mg, 1.92 mmol)의 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(110 mg, 0.16 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 688.
단계 5: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01008
1,4-다이옥산(15 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(100 mg, 0.15 mmol), tert-부틸 카밤에이트(340.47 mg, 2.91 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(30.08 mg, 0.03 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(33.6 mg, 0.06 mmol) 및 세슘 카본에이트(142.12 mg, 0.44 mmol)의 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(105 mg, 0.14 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 769.
단계 6: 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-N3-(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민
Figure pct01009
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(100 mg, 0.13 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 9까지 조정하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-N3-(5-메틸-6,6-다이옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[5,1-d][1,2,5]티아다이아진-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민(55.3 mg, 0.12 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 469; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.33 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.65-6.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.16 (s, 1H), 6.09 (s, 2H), 5.57 (s, 2H), 5.22 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 2.86 (s, 3H), 1.92 (s, 3H).
실시예 171:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(옥세탄-3-일메틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 277)
Figure pct01010
단계 1: 2-브로모-6-(옥세탄-3-일메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01011
N,N-다이메틸포름아미드(5 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 0.87 mmol)의 용액에 NaH(79.98 mg, 3.48 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 이어서 5분 동안 교반하였다. 3-(요오도메틸)옥세탄(344.26 mg, 1.74 mmol)을 첨가하고, 이어서 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-(옥세탄-3-일메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(192 mg, 0.64 mmol)을 주황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 300.3.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[6-(옥세탄-3-일메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01012
1,4-다이옥산(19 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(214.5 mg, 0.43 mmol), 2-브로모-6-(옥세탄-3-일메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(192.01 mg, 0.64 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(88.28 mg, 0.09 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(98.6 mg, 0.17 mmol) 및 세슘 카본에이트(347.57 mg, 1.07 mmol)의 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[6-(옥세탄-3-일메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(231.3 mg, 0.32 mmol)를 주황색 고체로서 수득하였다: LCMS15 (ESI) [M+H]+ = 722.3.
단계 3: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01013
1,4-다이옥산(20 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[6-(옥세탄-3-일메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(231.3 mg, 0.32 mmol), tert-부틸 카밤에이트(936.78 mg, 8.01 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(66.3 mg, 0.06 mmol) 및 브렛포스(68.67 mg, 0.13 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(261.02 mg, 0.80 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 반응 용액을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[6-(옥세탄-3-일메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(105.4 mg, 0.1313 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 803.3.
단계 4: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(옥세탄-3-일메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01014
옥시다이벤젠(2.0 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[6-(옥세탄-3-일메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(66 mg, 0.08 mmol)의 용액을 3시간 동안 180℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 N,N-다이메틸포름아미드에 용해시키고, 이어서 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD 컬럼 19 x 150 mm x 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트)/ACN = 7분 내에 15%-30%)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(옥세탄-3-일메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(4.6 mg, 0.0092 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 503.3. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.24 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.69-7.66 (m, 2H), 6.72-6.70 (m, 1H), 6.06 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.63-4.59 (m, 2H), 4.34-4.30 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.71-3.69 (m, 2H), 3.25-3.21 (m, 1H), 2.99-2.98 (m, 2H), 1.92 (s, 3H).
실시예 172:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-6-메톡시-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 278)
Figure pct01015
단계 1: 2-메톡시-4-메틸-3-니트로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct01016
1,4-다이옥산(40 mL) 중 5-브로모-2-메톡시-4-메틸-3-니트로-피리딘(2.0 g, 8.1 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(10.28 g, 40.48 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(1.19 g, 1.62 mmol) 및 칼륨 아세테이트(2.38 g, 24.29 mmol)의 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-메톡시-4-메틸-3-니트로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(2.1 g, 7.14 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 295.
단계 2: 8-클로로-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01017
1,4-다이옥산(30 mL) 및 물(3 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(1.0 g, 3.1 mmol), 2-메톡시-4-메틸-3-니트로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(1.37 g, 4.65 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(226.97 mg, 0.31 mmol) 및 칼륨 카본에이트(941.37 mg, 6.82 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8-클로로-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(780 mg, 2.15 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 363.
단계 3: 2-브로모-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01018
N,N-다이메틸포름아미드(20 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(500 mg, 2.17 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(156.48 mg, 60% 순도, 6.52 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 이어서, 2-요오도-1,1-다이플루오로에탄(2.09 g, 10.87 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-브로모-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(480 mg, 1.63 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 294.
단계 4: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01019
1,4-다이옥산(45 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(300 mg, 0.83 mmol), 2-브로모-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(291.88 mg, 0.99 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(171.2 mg, 0.17 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(191.21 mg, 0.33 mmol) 및 세슘 카본에이트(674.04 mg, 2.07 mmol)의 혼합물을 100℃에서 7시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(175 mg,0.30 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 576.
단계 5: tert-부틸 N-[3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01020
1,4-다이옥산(8 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(84 mg, 0.15 mmol), tert-부틸 카밤에이트(427.16 mg, 3.65 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(30.19 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(31.27 mg, 0.06 mmol) 및 세슘 카본에이트(237.74 mg, 0.73 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40 mg, 0.061 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 657.
단계 6: tert-부틸 (6-(5-아미노-6-메톡시-4-메틸피리딘-3-일)-3-((6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-7-플루오로이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01021
메탄올(7 mL) 중 tert-부틸 N-[3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-(6-메톡시-4-메틸-5-니트로-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40 mg, 0.06 mmol) 및 라니 니켈 (60 mg, 0.06 mmol)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 수소(1 atm) 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 (6-(5-아미노-6-메톡시-4-메틸피리딘-3-일)-3-((6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)-7-플루오로이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(30 mg, 0.048 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 627.
단계 7: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-6-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01022
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-6-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-8-이소퀴놀일]카밤에이트(20 mg, 0.03 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(3 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼 30 x 150 mm, 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): 7분 내에 ACN(30% → 45%))로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-6-메톡시-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1.8 mg, 0.0034 mmol)을 진한 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 527.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.24 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.70 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.29-5.89 (m, 4H), 5.05 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 3.93 (m, 6H), 3.80 (s, 1H), 3.06 (m, 2H), 1.95 (d, J = 1.6 Hz, 3H).
실시예 173:
(1R,2R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 279), (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 280), (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 281), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 282), (1S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2,2-다이메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 120) 및 (1R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2,2-다이메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 121)
Figure pct01023
단계 1: 다이페닐(프로필)설포늄 테트라플루오로보레이트
Figure pct01024
다이클로로메탄(20 mL) 중 은 테트라플루오로보레이트(2 g, 10.31 mmol)의 용액에 1-요오도프로판(1.75 g, 10.31 mmol) 및 다이페닐 설파이드(5.76 g, 30.93 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 35℃에서 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄-에터로 세척하여 다이페닐(프로필)설포늄 테트라플루오로보레이트(2 g, 6.32 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 229.
단계 2: 트랜스-tert-부틸 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트
Figure pct01025
1,2-다이메톡시에탄(30 mL) 및 다이클로로메탄(3 mL) 중 다이페닐(프로필)설포늄 테트라플루오로보레이트(1.50 g, 4.75 mmol)의 용액에 리튬 다이이소프로필아미드(5.54 mL, 11.09 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 이어서, tert-부틸 (Z)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트(330 mg, 1.58 mmol)를 첨가하고, -78℃ 내지 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 피라졸이 에스터에 대해 트랜스인 4개의 입체 이성질체의 혼합물인 트랜스-tert-부틸 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트(350 mg, 1.40 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 251.
단계 3: 트랜스-2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산
Figure pct01026
다이클로로메탄(3 mL) 중 트랜스-tert-부틸 2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실레이트(350 mg, 1.4 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(8 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% HCl)로 정제하여 트랜스-2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산(260 mg, 1.34 mmol)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 195.
단계 4: 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01027
다이클로로메탄(15 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(675 mg, 1.34 mmol), 트랜스-2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복실산(338.86 mg, 1.74 mmol) 및 피리딘(3 mL)의 용액에 인 옥시클로라이드(410.66 mg, 2.68 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 25℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(900 mg, 1.32 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 679.
단계 5: 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01028
1,4-다이옥산(80 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(1.3 g, 1.91 mmol), tert-부틸 카밤에이트(5.61 g, 47.85 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(396.21 mg, 0.38 mmol), 브렛포스(410.38 mg, 0.77 mmol) 및 세슘 카본에이트(3.12 g, 9.57 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(1 g, 1.32 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 760.
단계 6: (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-에틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2,2-다이메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2,2-다이메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01029
다이클로로메탄(10 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[2-에틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카보닐]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(1.0 g, 1.32 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(10 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 소정 조건(엑스브리지 Prep OBD C18 컬럼 30 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): 7분 내에 ACN(22% → 40%))을 갖는 제조용 HPLC로 정제하여 6개의 이성질체 생성물의 혼합물(230 mg, 0.50 mmol)을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 정제하여 6개의 이성질체를 수득하였다. 에틸사이클로프로판-함유 이성질체(화합물 279 내지 282)에 대한 사이클로프로판 입체화학(아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 에틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 279: 황색 고체(47.7 mg, 0.104 mmol). 체류 시간: 6.036분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 2 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 460.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.73 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.37-2.27 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.62-1.45 (m, 1H), 1.22 (m, 2H), 0.89 (m, 3H). 화합물 280: 황색 고체(56 mg, 0.12 mmol). 체류 시간: 7.559분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 2 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 460.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.73 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.38-2.15 (m, 2H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.62-1.43 (m, 1H), 1.23 (m, 2H), 0.89 (m, 3H). 화합물 281: 황색 고체(13.5 mg, 0.029 mmol). 체류 시간: 4.98분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 2 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 460.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.69 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.25 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.29-2.17 (m, 2H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.83-1.42 (m, 3H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H). 화합물 282: 황색 고체(10.2 mg, 0.022 mmol). 체류 시간: 3.847분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 2 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 460.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.69 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.25 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.29-2.17 (m, 2H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.83-1.42 (m, 3H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H). 화합물 120: 황색 고체인 N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]-2,2-다이메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(16.6 mg, 0.036 mmol). 체류 시간: 6.312분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 2 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 460.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.63 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.87 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.23 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.33-2.19 (m, 2H), 1.92 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 1.29 (s, 3H), 0.99 (s, 3H). 화합물 121: 황색 고체인 N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]-2,2-다이메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(16 mg, 0.035 mmol). 체류 시간: 5.166분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 2 mL/분). LCMS (ESI) [M+H]+ = 460.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.63 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.87 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.38-2.15 (m, 2H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.28 (s, 3H), 0.99 (s, 3H).
실시예 174:
2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-사이클로프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(화합물 283)
Figure pct01030
단계 1: [2-브로모-6-사이클로프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01031
테트라하이드로퓨란(5 mL) 중 사이클로프로필보론산(448.06 mg, 5.22 mmol), 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(400.0 mg, 1.74 mmol), 구리(II) 아세테이트(567.97 mg, 1.74 mmol), 트라이에틸아민(526.82 mg, 5.22 mmol) 및 피리딘(206.03 mg, 2.61 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 60℃에서 산소 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(2/98)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 [2-브로모-6-사이클로프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(260 mg, 0.96 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 270.1.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6-사이클로프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01032
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-브로모-6-사이클로프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.56 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(195 mg, 0.39 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(80.25 mg, 0.08 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(175.5 mg, 0.30 mmol) 및 세슘 카본에이트(379.88 mg, 1.17 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 100℃에서 질소 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6-사이클로프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(160 mg, 0.23 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 692.2.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6-사이클로프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01033
1,4-다이옥산(2 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(812.8 mg, 6.94 mmol), tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6-사이클로프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(160.0 mg, 0.23 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(48.0 mg, 0.05 mmol), 브렛포스(25.6 mg, 0.05 mmol) 및 세슘 카본에이트(304 mg, 0.93 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 질소 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6-사이클로프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(160.0 mg, 0.21 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 772.9.
단계 4: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-사이클로프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01034
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6-사이클로프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(160 mg, 0.21 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL, 0.21 mmol)의 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 7까지 조정하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피에 의한 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-사이클로프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(11.4 mg, 0.02 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 472.5; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.71 (d, J = 3.4 Hz, 2H), 6.73 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.08 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 5.30 (s, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.87-3.77 (m, 2H), 3.06-2.96 (m, 2H), 2.81-2.70 (m, 1H), 1.95 (s, 3H), 0.75-0.60 (m, 2H), 0.71-0.59 (m, 2H).
실시예 175:
2-[[8-아미노-6-(3,4-다이하이드로-2H-피리도[4,3-b][1,4]옥사진-8-일)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(화합물 284)
Figure pct01035
단계 1: 8-브로모-4H-피리도[4,3-b][1,4]옥사진-3-온
Figure pct01036
N,N-다이메틸포름아미드(30 mL) 중 3-아미노-5-브로모-4-피리딘올(5 g, 26.45 mmol), 클로로아세틸 클로라이드(3.25 g, 28.78 mmol), 칼륨 카본에이트(11.0 g, 79.71 mmol)의 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8-브로모-4H-피리도[4,3-b][1,4]옥사진-3-온(3.5 g, 15.28 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 229.
단계 2: 8-브로모-3,4-다이하이드로-2H-피리도(4,3-b)(1,4)옥사진
Figure pct01037
테트라하이드로퓨란(15 mL) 중 8-브로모-4H-피리도(4,3-b)(1,4)옥사진-3-온(1.0 g, 4.37 mmol)의 혼합물에 보란-테트라하이드로퓨란 착물(13.1 mL, 13.1 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 12시간 동안 60℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 메탄올(5 mL) 및 염산(5 mL, 12 mol/L)의 용액에 60℃에서 5시간 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 8-브로모-3,4-다이하이드로-2H-피리도(4,3-b)(1,4)옥사진(1 g, 4.7 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 215.0.
단계 3: tert-부틸 8-브로모-2,3-다이하이드로피리도(4,3-b)(1,4)옥사진-4-카복실레이트
Figure pct01038
다이클로로메탄(30 mL) 중 다이-tert-부틸다이카본에이트(1.67 g, 7.67 mmol), 8-브로모-3,4-다이하이드로-2H-피리도(4,3-b)(1,4)옥사진(1.1 g, 5.12 mmol), 트라이에틸아민(1.5 g, 15.3 mmol)의 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 8-브로모-2,3-다이하이드로피리도(4,3-b)(1,4)옥사진-4-카복실레이트(770 mg, 2.44 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 315.2.
단계 4: tert-부틸 8-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도[4,3-b][1,4]옥사진-4-카복실레이트
Figure pct01039
1,4-다이옥산(5 mL) 중 tert-부틸 8-브로모-2,3-다이하이드로피리도(4,3-b)(1,4)옥사진-4-카복실레이트(350 mg, 1.11 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(2.8 g, 11.15 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(161.0 mg, 0.22 mmol) 및 칼륨 아세테이트(327.8 mg, 3.34 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(30/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 8-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도[4,3-b][1,4]옥사진-4-카복실레이트(240 mg, 0.66 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 362.2.
단계 5: tert-부틸 8-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2,3-다이하이드로피리도(4,3-b)(1,4)옥사진-4-카복실레이트
Figure pct01040
1,4-다이옥산(2 mL) 중 (4-tert-부톡시카보닐-2,3-다이하이드로피리도[4,3-b][1,4]옥사진-8-일)보론산(100.0 mg, 0.36 mmol), [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트(111.1 mg, 0.18 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(13.33 mg, 0.02 mmol) 및 칼륨 카본에이트(75.56 mg, 0.55 mmol)의 혼합물을 질소 하에 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 [tert-부틸 8-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-2,3-다이하이드로피리도[4,3-b][1,4]옥사진-4-카복실레이트(120 mg, 0.17 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다.
단계 6: 2-[[8-아미노-6-(3,4-다이하이드로-2H-피리도[4,3-b][1,4]옥사진-8-일)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01041
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 8-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-2,3-다이하이드로피리도[4,3-b][1,4]옥사진-4-카복실레이트(140 mg, 0.20 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 7까지 조정하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(3,4-다이하이드로-2H-피리도[4,3-b][1,4]옥사진-8-일)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(10.3 mg, 0.02 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 502.5. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.25 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.82 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.97 (s, 1H),4.98 (s, 2H), 4.70-4.55 (m, 1H), 4.28-4.21 (m, 2H), 3.83-3.74 (m, 2H), 3.40 (s, 2H), 3.04-2.95 (m, 2H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 176:
2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-에틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(화합물 286)
Figure pct01042
단계 1: 3-브로모-4-요오도-5-니트로-피리딘
Figure pct01043
아세토니트릴(300 mL) 중 3-브로모-4-클로로-5-니트로피리딘(5.0 g, 21.06 mmol) 및 칼륨 요오다이드(70 g, 422.02 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-4-요오도-5-니트로-피리딘(6.5 g, 19.76 mmol)을 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 328.7.
단계 2: 3-브로모-5-니트로-4-비닐-피리딘
Figure pct01044
1,4-다이옥산(300 mL) 및 물(30 mL) 중 3-브로모-4-요오도-5-니트로-피리딘(5.0 g, 15.2 mmol), 칼륨 트라이플루오로(비닐)보레이트(2.6 g, 19.41 mmol), 나트륨 카본에이트(4.8 g, 45.28 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(1.1 g, 1.5 mmol)의 혼합물을 3일 동안 50℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-5-니트로-4-비닐-피리딘(2.8 g, 12.22 mmol)을 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 229.
단계 3: 5-브로모-4-에틸-피리딘-3-아민
Figure pct01045
메탄올(20 mL) 중 3-브로모-5-니트로-4-비닐-피리딘(500 mg, 2.18 mmol), 백금 다이옥사이드(100 mg, 0.44 mmol) 및 아세트산(5 점적)의 혼합물을 20℃에서 수소 하에 4시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-4-에틸-피리딘-3-아민(220 mg, 1.09 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 201.
단계 4: tert-부틸 N-(5-브로모-4-에틸-3-피리딜)-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트
Figure pct01046
테트라하이드로퓨란(2 mL) 중 5-브로모-4-에틸-피리딘-3-아민(200 mg, 0.99 mmol) 및 다이-tert-부틸다이카본에이트(650 g, 2.98 mmol)의 용액을 90℃에서 2시간 동안 밀봉 관에서 교반하였다. 유기 층을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(5-브로모-4-에틸-3-피리딜)-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(180 mg, 0.45 mmol)를 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 401.
단계 5: [5-[비스(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-에틸-3-피리딜]보론산
Figure pct01047
N,N-다이메틸아세트아미드(5 mL) 중 tert-부틸 N-(5-브로모-4-에틸-3-피리딜)-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(200 mg, 0.50 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(600 mg, 2.36 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(70 mg, 0.10 mmol), 칼륨 아세테이트(150 mg, 1.53 mmol)의 용액을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-70%/물 중 0.05% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 [5-[비스(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-에틸-3-피리딜]보론산(100 mg, 0.27 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 367.3.
단계 6: tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-에틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct01048
1,4-다이옥산(5 mL) 및 물(0.05 mL) 중 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(13 mg, 0.02 mmol), 칼륨 카본에이트(65 mg, 0.47 mmol), [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트(100 mg, 0.16 mmol), [5-[비스(tert-부톡시카보닐)아미노]-4-에틸-3-피리딜]보론산(90 mg, 0.25 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/메탄올(40/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-에틸피리딘-3-일)카밤에이트(46 mg, 0.058 mmol)를 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 789.4.
단계 7: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-에틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01049
다이클로로메탄(5 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-에틸-3-피리딜]카밤에이트(41 mg, 0.05 mmol)의 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 N,N-다이메틸포름아미드에 용해시키고, 용액을 트라이에틸아민으로 pH 7까지 조정하였다. 생성된 용액을 제조용 HPLC(엑스브리지 prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트)/CH3CN = 7분 내에 25%-45%)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-에틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(8.1 mg, 0.017 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 489.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.24 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.70 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.06 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.63-4.55 (m, 1H), 3.77 (s, 2H), 2.98 (s, 2H), 2.35-2.33(m, 2H), 1.12 (d, J = 6.7 Hz, 6H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
실시예 177:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-4-에틸-4H,6H-피라졸로[1,5-c]티아졸 5,5-다이옥사이드(화합물 287)
Figure pct01050
단계 1: 3-(브로모메틸설판일)프로프-1-엔
Figure pct01051
톨루엔(110 mL) 중 폴리포름알데하이드(16 g, 0.13 mol)의 용액에 270 mL의 수소 브로마이드(수성, 48%)를 5분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 20분 동안 20℃에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 40℃까지 가온하고, 알릴 머캡탄(45 g, 606.96 mmol)을 첨가 깔대기에 의해 20분에 걸쳐 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 50℃까지 가열하고, 이어서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 3-(브로모메틸설판일)프로프-1-엔(20 g, 조질)을 연황색 오일로서 수득하였다. GCMS (ESI) M = 168.0.
단계 2: 1-(알릴설판일메틸)-3,5-다이브로모-피라졸
Figure pct01052
N,N-다이메틸포름아미드(100 mL) 중 3,5-다이브로모-1H-피라졸(10 g, 44.27 mmol)의 용액에 칼륨 카본에이트(12.22 g, 88.55 mmol), 테트라부틸암모늄 요오다이드(0.82 g, 2.21 mmol) 및 3-(브로모메틸설판일)프로프-1-엔(22.19 g, 132.82 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(8/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(알릴설판일메틸)-3,5-다이브로모-피라졸(10 g, 32.05 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 310.9.
단계 3: 1-(알릴설폰일메틸)-3,5-다이브로모-피라졸
Figure pct01053
다이클로로메탄(400 mL) 중 1-(알릴설판일메틸)-3,5-다이브로모-피라졸(10 g, 32.05 mmol)의 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산(12.13 g, 70.51 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 나트륨 티오설페이트 및 나트륨 카본에이트 수용액으로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-(알릴설폰일메틸)-3,5-다이브로모-피라졸(1.5 g, 4.36 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 345.1.
단계 4: 2-브로모-4-메틸-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드
Figure pct01054
N,N-다이메틸포름아미드(50 mL) 중 트라이에틸아민(1.47 g, 14.53 mmol), 트리스(2-메틸페닐)포스핀(264.48 mg, 0.87 mmol), 팔라듐 아세테이트(97.66 mg, 0.44 mmol) 및 1-(알릴설폰일메틸)-3,5-다이브로모-피라졸(1 g, 2.91 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4-메틸-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드(500 mg, 1.90 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 263.2.
단계 5: 2-브로모-4-메틸-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드
Figure pct01055
메탄올(30 mL) 중 2-브로모-4-메틸-7H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드(500 mg, 1.9 mmol) 및 나트륨 보로하이드라이드(252.75 mg, 6.65 mmol)의 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트: CH3CN = 30분 내에 70%-5%)로 정제하여 2-브로모-4-메틸-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드(280 mg, 1.06 mmol)를 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 267.3.
단계 6: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01056
1,4-다이옥산(15 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(150 mg, 0.30 mmol), 2-브로모-4-메틸-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진 6,6-다이옥사이드(237.21 mg, 0.89 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(123.47 mg, 0.12 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(103.43 mg, 0.18 mmol) 및 세슘 카본에이트(291.67 mg, 0.89 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 120℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트: CH3CN = 30분 내에 70%-5%)로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.07 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS45 (ESI) [M+H]+ = 687.3.
단계 7: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01057
1,4-다이옥산(8 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.07 mmol), tert-부틸 카밤에이트(213.1 mg, 1.82 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(26.36 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(19.5 mg, 0.04 mmol) 및 세슘 카본에이트(118.6 mg, 0.36 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.07 mmol)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 768.4.
단계 8: 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-N3-(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민 포름에이트 염
Figure pct01058
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.07 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(12 mL)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 15 mm 5 μm C-0013; 물 중 0.1% HCOOH: CH3CN = 7분 내에 93%-60%)로 직접 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-N3-(4-메틸-6,6-다이옥소-5,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-c][1,3]티아진-2-일)이소퀴놀린-3,8-다이아민(1.3 mg, 0.003 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 468.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.45 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.68-7.66 (m, 2H), 6.69-6.67 (m, 1H), 6.25 (s, 1H), 6.11 (s, 2H), 5.46-5.38 (m, 2H), 5.22 (s, 2H), 4.67-4.63 (m, 1H), 2.03-1.99 (m, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.14-1.10 (m, 3H).
실시예 178:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(사이클로프로필메틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온 포름에이트 염(화합물 288)
Figure pct01059
단계 1: 2-브로모-6-(사이클로프로필메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01060
N,N-다이메틸포름아미드(5 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 0.87 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(79.98 mg, 3.48 mmol)의 용액을 20℃에서 5분 동안 교반하였다. 이어서, (요오도메틸)사이클로프로판(316.44 mg, 1.74 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(98/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-(사이클로프로필메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(191 mg, 0.67 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 284.1.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[6-(사이클로프로필메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01061
1,4-다이옥산(18 mL) 중 2-브로모-6-(사이클로프로필메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(180.5 mg, 0.64 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(213 mg, 0.42 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(87.66 mg, 0.08 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(97.91 mg, 0.17 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(345.14 mg, 1.06 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[6-(사이클로프로필메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(225 mg, 0.32 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 706.4.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[6-(사이클로프로필메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01062
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[6-(사이클로프로필메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(225 mg, 0.32 mmol), tert-부틸 카밤에이트(933.11 mg, 7.97 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(65.95 mg, 0.06 mmol) 및 브렛포스(68.31 mg, 0.13 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(259.66 mg, 0.80 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 생성된 용액을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[6-(사이클로프로필메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(67 mg, 0.085 mmol)를 주황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 787.2.
단계 4: 2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(사이클로프로필메틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온; 포름산
Figure pct01063
다이클로로메탄(3.0 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[6-(사이클로프로필메틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(65 mg, 0.08 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.0 mL, 0.08 mmol)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 8까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA) 및 10분 내에 ACN(5%-18%))로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(사이클로프로필메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산(13.5 mg, 0.025 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 487.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.25 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.72-6.70 (m, 1H), 6.06 (s, 2H), 5.98(s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.99 (s, 2H), 3.93-3.89 (m, 2H), 3.28-3.26 (m, 2H), 3.09-3.05 (m, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.01 (s, 1H), 0.48-0.44 (m, 2H), 0.29 (m, 2H).
실시예 179:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(5-하이드록시-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온; 포름산(화합물 289)
Figure pct01064
단계 1: 3-브로모-5-(메톡시메톡시)-4-메틸-피리딘
Figure pct01065
테트라하이드로퓨란(5 mL) 중 5-브로모-4-메틸-피리딘-3-올(213 mg, 1.13 mmol) 및 나트륨 하이드라이드(52.11 mg, 2.27 mmol, 60% 순도)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 브로모메틸 메틸 에터(169.87 mg, 1.36 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올로 급랭시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-5-(메톡시메톡시)-4-메틸-피리딘(190 mg, 0.82 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 232.
단계 2: [5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]보론산
Figure pct01066
1,4-다이옥산(15 mL) 중 3-브로모-5-(메톡시메톡시)-4-메틸-피리딘(714 mg, 3.08 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(781 mg, 3.08 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(450 mg, 0.62 mmol) 및 칼륨 아세테이트(904 mg, 9.23 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 [5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]보론산(300 mg, 1.52 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 198.
단계 3: 8-클로로-7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01067
1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(300 mg, 0.93 mmol), [5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]보론산(275 mg, 1.4 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(68 mg, 0.09 mmol) 및 칼륨 카본에이트(385 mg, 2.79 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8-클로로-7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]이소퀴놀린-3-아민(145 mg, 0.42 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 348.
단계 4: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01068
1,4-다이옥산(5 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]이소퀴놀린-3-아민(135 mg, 0.39 mmol), 2-브로모-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(142 mg, 0.58 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(80 mg, 0.08 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(89 mg, 0.16 mmol) 및 세슘 카본에이트(381 mg, 1.16 mmol)의 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg,0.098 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 511.
단계 5: tert-부틸 N-[7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01069
1,4-다이옥산(3 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(50 mg, 0.10 mmol), tert-부틸 카밤에이트(286 mg, 2.45 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(20 mg, 0.020 mmol), 브렛포스(15.74 mg, 0.03 mmol) 및 세슘 카본에이트(95 mg, 0.29 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40 mg, 0.067 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 592.
단계 6: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5-하이드록시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산
Figure pct01070
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-[5-(메톡시메톡시)-4-메틸-3-피리딜]-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(30 mg, 0.05 mmol) 및 염산(0.17 mL, 0.5 mmol)의 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 8까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 nm 5 μm; 물(0.1% FA): CH3CN = 7분 내에 5%-19%)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(5-하이드록시-4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산(1.4 mg, 0.0028 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 448. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.16(s, 1H), 8.07(s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.86 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.92(t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.16(t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.10 (s, 3 H), 2.15 (s, 3H).
실시예 180:
2-(8-아미노-7-플루오로-6-(5-(하이드록시메틸)-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 290)
Figure pct01071
단계 1: 3-브로모-5-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-4-메틸피리딘
Figure pct01072
N,N-다이메틸포름아미드(15 mL) 중 (5-브로모-4-메틸-3-피리딜)메탄올(500 mg, 2.47 mmol) 및 이미다졸(505.42 mg, 7.42 mmol)의 용액을 25℃에서 10분 동안 교반하였다. TBSCl(742.39 mg, 4.95 mmol)을 첨가하고, 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(16/84)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (5-브로모-4-메틸-3-피리딜)메톡시-tert-부틸-다이메틸-실란(820 mg, 2.07 mmol)을 백색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 316.
단계 2: 5-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-4-메틸피리딘-3-일보론산
Figure pct01073
1,4-다이옥산(18 mL) 중 (5-브로모-4-메틸-3-피리딜)메톡시-tert-부틸-다이메틸-실란(1.65 g, 5.22 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(1.99 g, 7.82 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(381.84 mg, 0.52 mmol) 및 칼륨 아세테이트(1.28 g, 13.04 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 [5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]보론산(480 mg, 1.70 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 282.
단계 3: 6-(5-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-4-메틸피리딘-3-일)-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01074
1,4-다이옥산(15 mL) 및 물(1.5 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(382 mg, 1.18 mmol), [5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]보론산(499.66 mg, 1.78 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(86.7 mg, 0.12 mmol), 칼륨 카본에이트(359.6 mg, 2.61 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(7:3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-[5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(320 mg, 0.74 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 432.
단계 4: 2-(6-(5-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-4-메틸피리딘-3-일)-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01075
1,4-다이옥산(20 mL) 중 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(181.42 mg, 0.67 mmol), 6-[5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(240.0 mg, 0.56 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(115.0 mg, 0.11 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(128.66 mg, 0.22 mmol) 및 세슘 카본에이트(543.32 mg, 1.67 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[6-[5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(56 mg, 0.090 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 623.
단계 5: tert-부틸 6-(5-((tert-부틸다이메틸실릴옥시)메틸)-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-3-(6-이소프로필-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01076
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-[[6-[5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(60.0 mg, 0.10 mmol), tert-부틸 카밤에이트(337.91 mg, 2.89 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(19.93 mg, 0.020 mmol), 브렛포스(20.68 mg, 0.040 mmol) 및 세슘 카본에이트(125.54 mg, 0.39 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(12:88)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-[5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(60 mg, 0.085 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 704.
단계 6: 2-(8-아미노-7-플루오로-6-(5-(하이드록시메틸)-4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01077
2,2,2-트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 N-[6-[5-[[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시메틸]-4-메틸-3-피리딜]-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50.0 mg, 0.070 mmol)의 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): CH3CN = 7분 내에 20%-40% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-[5-(하이드록시메틸)-4-메틸-3-피리딜]-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(5.1 mg, 0.010 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 490.2; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.17 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.87 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 4.75 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.88 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.14 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.32 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 181:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(2-메톡시에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 291)
Figure pct01078
단계 1: 2-브로모-6-(사이클로프로필메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01079
N,N-다이메틸포름아미드(6 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 0.86 mmol)의 혼합물에 나트륨 하이드라이드(79.18 mg, 3.48 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20분 동안 20℃에서 교반하였다. 1-요오도-2-메톡시-에탄(485.06 mg, 2.6 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-(2-메톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(172 mg, 0.31 mmol)을 주황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 288.1.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[6-(2-메톡시에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01080
1,4-다이옥산(16 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(199 mg, 0.82 mmol), 2-브로모-6-(2-메톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(172 mg, 1.24 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(82.12 mg, 0.08 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(92.32 mg, 0.16 mmol) 및 세슘 카본에이트(389.23 mg, 1.22 mmol)의 혼합물을 95℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[6-(2-메톡시에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(222 mg, 0.17 mmol)를 선황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 710.3.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[6-(2-메톡시에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01081
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[6-(2-메톡시에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(222 mg, 0.31 mmol), tert-부틸 카밤에이트(915.51 mg, 7.81 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(64.71 mg, 0.06 mmol) 및 브렛포스(67.02 mg, 0.13 mmol)의 혼합물에 세슘 카본에이트(254.76 mg, 0.78 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(94/6)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[6-(2-메톡시에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(131 mg, 0.17 mmol)를 주황색 고체로서 수득하였다: LCMS (ESI) [M+H]+ = 791.4.
단계 4: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2-메톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01082
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[6-(2-메톡시에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(131 mg, 0.17 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.0 mL)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 아민의 용액으로 pH 8까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm C-0013; 물(0.1% FA) 및 7분 내에 ACN(5%-15%))로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2-메톡시에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(34.2 mg, 0.064 mol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 491.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 9.25 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.72-6.70 (m, 1H), 6.06 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.98 (s, 2H), 3.87-3.85 (m, 2H), 3.57-3.54 (m, 2H), 3.46-3.43 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 3.03-3.01 (m, 2H), 1.93 (s, 3H).
실시예 182:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 292)
Figure pct01083
단계 1: tert-부틸 3-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-5-카복실레이트
Figure pct01084
아세토니트릴(10 mL) 및 물(1 mL) 중 [7-플루오로-8-(이소프로폭시카보닐아미노)-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(100 mg, 0.21 mmol), tert-부틸 3-브로모-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-5-카복실레이트(120 mg, 0.40 mmol), 칼륨 포스페이트(40 mg, 0.19 mmol), 나트륨 아세테이트(50 mg, 0.61 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(40 mg, 0.05 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/메탄올(50/1)로 용리하는 제조용 TLC로 정제하여 tert-부틸 3-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-5-카복실레이트(43 mg, 0.065 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 662.
단계 2: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-3-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01085
tert-부틸 3-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-6,7-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-a]피라진-5-카복실레이트(40 mg, 0.06 mmol), 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL) 및 다이클로로메탄(5 mL)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄에 용해시키고, 이어서 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 7까지 조정하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(엑스브리지 prep C18 OBD, 19 x 150 mm, 5 μm; 물(0.05% NH3H2O): ACN(7분 내에 7-24%))로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-3-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(4 mg, 0.0087 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 462. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.17 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.73 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 6.74 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.98 (s, 3H), 4.99 (s, 2H), 4.06-4.05 (m, 4H), 3.83-3.82 (m, 2H), 3.18-3.17 (m, 2H), 3.05-3.03 (m, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.69 (s, 1H).
실시예 183:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H,8H-피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀 7,7-다이옥사이드(화합물 293)
Figure pct01086
단계 1: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-메틸-4-메틸렌-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01087
1,4-다이옥산(15 mL) 중 2-브로모-6-메틸-4-메틸렌-5,8-다이하이드로피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀 7,7-다이옥사이드(200 mg, 0.68 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(309.89 mg, 0.62 mmol), t-Bu브렛포스(165.67 mg, 0.34 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(233.85 mg, 0.27 mmol) 및 세슘 카본에이트(557.93 mg, 1.71 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-메틸-4-메틸렌-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(100 mg, 0.14 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 714.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-4-메틸렌-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01088
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(262.44 mg, 2.24 mmol), tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-메틸-4-메틸렌-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(80 mg, 0.11 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(23.19 mg, 0.02 mmol), 브렛포스(18.05 mg, 0.03 mmol) 및 세슘 카본에이트(91.29 mg, 0.28 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(2/98)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-4-메틸렌-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(60 mg,0.076 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 795.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(4,6-다이메틸-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01089
메탄올(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-4-메틸렌-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.06 mmol) 및 라니 니켈(10 mg)의 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(4,6-다이메틸-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(45 mg, 0.05 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 797.
단계 4: 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-N3-(4,6-다이메틸-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)-7-플루오로-이소퀴놀린-3,8-다이아민; 포름산
Figure pct01090
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(4,6-다이메틸-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.06 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1 mL)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% FA)로 정제하여 6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-N3-(4,6-다이메틸-7,7-다이옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[5,1-e][1,2,6]티아다이아제핀-2-일)-7-플루오로-이소퀴놀린-3,8-다이아민; 포름산(2.9 mg, 0.0053 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 497. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.16 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.78-7.77 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 6.90-6.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.92-5.88 (d, J = 16 Hz,1H), 5.36-5.32 (d, J = 16 Hz, 1H), 3.79-3.55 (m, 3H), 3.13 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.39-1.38 (d, J = 4.0 Hz, 3H).
실시예 184:
[2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-에틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(화합물 298)
Figure pct01091
단계 1: 2-브로모-6-에틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01092
N,N-다이메틸포름아미드(2 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1 g, 4.0 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(313 mg, 13.0 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 요오도에탄(1.3 g, 9.0 mmol)을 이러한 반응 용액에 0℃에서 첨가하고, 이어서 4시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-브로모-6-에틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1 g, 3.89 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 258.1.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6-에틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01093
1,4-다이옥산(2 mL) 중 2-브로모-6-에틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(140.0 mg, 0.54 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(272.8 mg, 0.54 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(112.27 mg, 0.11 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(125.4 mg, 0.22 mmol) 및 세슘 카본에이트(530.45 mg, 1.63 mmol)의 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6-에틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(70 mg, 0.10 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 680.2.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6-에틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01094
1,4-다이옥산(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[(6-에틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(40.0 mg, 0.06 mmol), tert-부틸 카밤에이트(206.76 mg, 1.76 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(12.0 mg, 0.01 mmol), 브렛포스(6.32 mg, 0.01 mmol) 및 세슘 카본에이트(76.8 mg, 0.24 mmol)의 혼합물을 4시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/4)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6-에틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(40 mg, 0.053 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 706.9.
단계 4: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-에틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01095
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[(6-에틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(40.0 mg, 0.05 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 C18 상 플래시 크로마토그래피(아세토니트릴 - 물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-에틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(2.4 mg, 0.01 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 460.5. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.69 (d, J = 9.4 Hz, 2H), 6.72 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.07 (s, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.97 (s, 2H), 3.90-3.84 (m, 2H), 3.50-3.43 (m, 2H), 3.05-2.90 (m, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.09-1.01 (m, 3H).
실시예 185:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4,6-다이메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 299)
Figure pct01096
단계 1: 다이메틸 2-(5-브로모-4-메틸-3-니트로-2-피리딜)프로판다이오에이트
Figure pct01097
1-메틸-2-피롤리딘온(100 mL) 중 다이메틸 말로네이트(3.15 g, 23.86 mmol)의 용액에 0℃의 나트륨 하이드라이드(0.95 g, 23.86 mmol, 60% 순도)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 5-브로모-2-클로로-4-메틸-3-니트로피리딘(4.0 g, 15.91 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 반응 혼합물을 물로 희석하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 다이메틸 2-(5-브로모-4-메틸-3-니트로-2-피리딜)프로판다이오에이트(3.5 g, 10.08 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 347.
단계 2: 5-브로모-2,4-다이메틸-3-니트로-피리딘
Figure pct01098
염산(20 mL, 12 mol/L) 중 다이메틸 2-(5-브로모-4-메틸-3-니트로-2-피리딜)프로판다이오에이트(3.5 g, 10.08 mmol)의 용액을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 나트륨 하이드록사이드 용액(10%)으로 pH 10까지 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/9)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-2,4-다이메틸-3-니트로-피리딘(1.5 g, 6.49 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 231.
단계 3: (4,6-다이메틸-5-니트로피리딘-3-일)보론산
Figure pct01099
1,4-다이옥산(30 mL) 중 5-브로모-2,4-다이메틸-3-니트로-피리딘(1.5 g, 6.49 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(3.29 g, 12.98 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(950.44 mg, 1.30 mmol) 및 칼륨 아세테이트(1.91 g, 19.48 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 나트륨 하이드록사이드 용액(10%)으로 pH 10까지 조정하였다. 물 층을 다이에틸 에터로 세척하였다. 용액을 염산(1 mol/L)으로 pH 5까지 조정하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 (4,6-다이메틸-5-니트로피리딘-3-일)보론산(1.1 g, 3.95 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 197.
단계 4: 8-클로로-6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01100
1,4-다이옥산(15 mL) 중 (4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)보론산(364.58 mg, 1.86 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(400 mg, 1.24 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(90.79 mg, 0.12 mmol) 및 칼륨 카본에이트(342.31 mg, 2.48 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8-클로로-6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(220 mg,0.63 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 347.
단계 5: 2-[[8-클로로-6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01101
1,4-다이옥산(15 mL) 중 8-클로로-6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(220 mg, 0.63 mmol), 2-브로모-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(154.87 mg, 0.63 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(65.67 mg, 0.06 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(108.37 mg, 0.13 mmol) 및 세슘 카본에이트(620.52 mg, 1.9 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(210 mg, 0.41 mmol)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 510.
단계 6: tert-부틸 N-[6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01102
1,4-다이옥산(20 mL) 중 2-[[8-클로로-6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(260 mg, 0.51 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1,194.66 mg, 10.2 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(105.55 mg, 0.10 mmol), 브렛포스(82.14 mg, 0.15 mmol) 및 세슘 카본에이트(415.56 mg, 1.27 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(150 mg, 0.25 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 591.
단계 7: tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4,6-다이메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01103
메탄올(10 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(4,6-다이메틸-5-니트로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(150 mg, 0.25 mmol) 및 라니 니켈(50 mg)의 혼합물을 5시간 동안 25℃에서 H2 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하여 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4,6-다이메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(100 mg,0.17 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 561.
단계 8: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4,6-다이메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01104
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4,6-다이메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(100 mg, 0.18 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 암모니아)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4,6-다이메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(22.2 mg, 0.04 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 561. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.23 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.69 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.03 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.90 (s, 2H), 3.89-3.80 (m, 2H), 3.03-3.00 (m, 2H), 2.94 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.95 (s, 3H).
실시예 186:
2-(8-아미노-6-(2-아미노-3-메틸피리딘-4-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 300)
Figure pct01105
단계 1: 4-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-3-메틸피리딘-2-아민
Figure pct01106
N,N-다이메틸포름아미드(50 mL) 중 4-브로모-3-메틸-피리딘-2-아민(500.0 mg, 2.67 mmol), 나트륨 하이드라이드(427.72 mg, 10.69 mmol)의 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 4-메톡시벤질 클로라이드(2.09 g, 13.37 mmol)를 첨가하고, 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 혼합물을 물로 세척하고, 유기 층을 합하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(2/8)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸-피리딘-2-아민(1.1 g, 2.57 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 427.
단계 2: 2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-메틸피리딘-4-일보론산
Figure pct01107
1,4-다이옥산(15 mL) 중 4-브로모-N,N-비스[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸-피리딘-2-아민(1.1 g, 2.57 mmol), 비스(피나콜라토)다이보론(980.51 mg, 3.86 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(188.43 mg, 0.26 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 5-85%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]보론산(750 mg, 1.91 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 393.
단계 3: 6-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-메틸피리딘-4-일)-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01108
1,4-다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(400 mg, 1.24 mmol), 2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]보론산(729.76 mg, 1.86 mmol), 칼륨 카본에이트(376.55 mg, 2.73 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(90.79 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(480 mg, 0.88 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 543.
단계 4: 2-(6-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-메틸피리딘-4-일)-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01109
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-브로모-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(100.19 mg, 0.34 mmol), 6-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(185 mg, 0.34 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(70.52 mg, 0.07 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(59.18 mg, 0.10 mmol) 및 세슘 카본에이트(222.12 mg, 0.68 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(7/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[6-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(90 mg, 0.12 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 756.
단계 5: tert-부틸 6-(2-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-3-메틸피리딘-4-일)-3-(6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)-7-플루오로이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01110
1,4-다이옥산(15 mL) 중 2-[[6-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.20 mmol), tert-부틸 카밤에이트(696.23 mg, 5.95 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(41.06 mg, 0.040 mmol), 브렛포스(21.3 mg, 0.040 mmol) 및 세슘 카본에이트(258.65 mg, 0.79 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-8-이소퀴놀일]카밤에이트(110 mg, 0.13 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 457.2.
단계 6: 2-(8-아미노-6-(2-아미노-3-메틸피리딘-4-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01111
2,2,2-트라이플루오로아세트산(10 mL) 중 tert-부틸 N-[6-[2-[비스[(4-메톡시페닐)메틸]아미노]-3-메틸-4-피리딜]-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-8-이소퀴놀일]카밤에이트(110.0 mg, 0.13 mmol)의 용액을 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): CH3CN = 7분 내에 27%-42% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(2-아미노-3-메틸-4-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(18.3 mg, 0.037 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 497.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.25 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 7.85 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.69 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.34-6.02 (m, 3H), 5.99 (s, 1H), 5.82 (s, 2H), 5.05 (s, 2H), 3.95 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.85 (td, J = 15.5, 4.0 Hz, 2H), 3.10-3.02 (m, 2H), 1.90 (d, J = 1.3 Hz, 3H).
실시예 187:
2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-5-메틸-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온(화합물 302)
Figure pct01112
단계 1: 메틸 2-(3-브로모-5-메틸-1H-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct01113
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 3-브로모-5-메틸-1H-피라졸(500.0 mg, 3.11 mmol), 메틸 클로로아세테이트(505.53 mg, 4.66 mmol), 테트라부틸암모늄 요오다이드(57.3 mg, 0.16 mmol) 및 칼륨 카본에이트(771.43 mg, 5.59 mmol)의 용액을 12시간 동안 20℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(98/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(3-브로모-5-메틸-피라졸-1-일)아세테이트(671 mg, 2.88 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 233.
단계 2: 메틸 2-(3-브로모-5-(브로모메틸)-1H-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct01114
탄소 테트라클로라이드(400 mL) 중 메틸 2-(3-브로모-5-메틸-피라졸-1-일)아세테이트(20 g, 85.81 mmol), 2,2'-아조비스(2-메틸프로피오니트릴)(1.41 g, 8.58 mmol), 1-브로모-2,5-피롤리딘다이온(16.80 g, 94.4 mmol)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-[3-브로모-5-(브로모메틸)피라졸-1-일]아세테이트(20 g, 64.11 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 311.
단계 3: 2-브로모-5-메틸-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온
Figure pct01115
테트라하이드로퓨란(10 mL) 중 메틸 2-[3-브로모-5-(브로모메틸)피라졸-1-일]아세테이트(900 mg, 2.88 mmol) 및 메탄아민(896.08 mg, 28.85 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-5-메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6-온(460 mg, 2.00 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 230.
단계 4: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01116
1,4-다이옥산(60 mL) 중 2-브로모-5-메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6-온(219.55 mg, 0.95 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(400.0 mg, 0.80 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(164.62 mg, 0.16 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(138.14 mg, 0.24 mmol) 및 세슘 카본에이트(518.52 mg, 1.59 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(10:1)로 용리하여 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(340 mg, 0.52 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 652.
단계 5: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01117
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(1.83 g, 15.64 mmol), tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(340.0 mg, 0.52 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(107.92 mg, 0.10 mmol), 브렛포스(56.0 mg, 0.10 mmol) 및 세슘 카본에이트(679.87 mg, 2.09 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(12/88)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(250 mg, 0.34 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 733.
단계 6: 2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-5-메틸-4,5-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6(7H)-온
Figure pct01118
2,2,2-트라이플루오로아세트산(20 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(5-메틸-6-옥소-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(240.0 mg, 0.33 mmol)의 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L): CH3CN = 7분 내에 15%-35% B)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-5-메틸-4,7-다이하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-6-온(49 mg, 0.11 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 433.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.27 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.68 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 6.67 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.08 (s, 2H), 6.05 (s, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.67 (s, 2H), 4.60 (s, 2H), 3.01 (s, 3H), 1.93 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
실시예 188:
(E)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-4-((1-메틸-1H-피라졸-4-일)메틸렌)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 303)
Figure pct01119
단계 1: (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-올
Figure pct01120
다이클로로메탄(100 mL) 중 tert-부틸 (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트(3.0 g, 14.41 mmol) 및 DIBAL-H(43.0 mL, 43.22 mmol)의 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올의 첨가에 의해 급랭시켰다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-올(800 mg, 5.79 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 139.
단계 2: (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔알
Figure pct01121
다이클로로메탄(30 mL) 중 (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-올(897 mg, 6.49 mmol) 및 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼요디난(2.75 g, 6.49 mmol)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔알(800 mg, 5.87 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 137.
단계 3: (E)-N-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-아민
Figure pct01122
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 (E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔알 (794.0 mg, 5.83 mmol) 및 메탄아민(543.41 mg, 17.5 mmol)의 용액을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. 메탄올(10 mL) 및 나트륨 보로하이드라이드(664.83 mg, 17.5 mmol)를 첨가하고, 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 역상 크로마토그래피(C18; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 MeOH(5%-25%))로 정제하여 (E)-N-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-아민(412 mg, 2.72 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 152.
단계 4: 2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)-N-메틸-N-[(E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)알릴]아세트아미드
Figure pct01123
N,N-다이메틸포름아미드(15 mL) 중 2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)아세트산(770 mg, 2.71 mmol), (E)-N-메틸-3-(1-메틸피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-아민(410.1 mg, 2.71 mmol) 및 N,N-다이이소프로필에틸아민(1.05 g, 8.14 mmol)의 용액을 25℃에서 5분 동안 교반하였다. 2-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(1.55 g, 4.07 mmol)를 첨가하고, 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 컬럼(C18;물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 20분 내에 MeOH(5%-70%))으로 정제하여 2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)-N-메틸-N-[(E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)알릴]아세트아미드(852 mg, 2.04 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 416.
단계 5: (4E)-2-브로모-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01124
N,N-다이메틸포름아미드(10 mL) 중 2-(3,5-다이브로모피라졸-1-일)-N-메틸-N-[(E)-3-(1-메틸피라졸-4-일)알릴]아세트아미드(817 mg, 1.96 mmol), 팔라듐 아세테이트(43.88 mg, 0.20 mmol), 트라이페닐포스핀(102.64 mg, 0.39 mmol), 테트라부틸암모늄 브로마이드(630.72 mg, 1.96 mmol) 및 칼륨 아세테이트(575.88 mg, 5.88 mmol)의 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (4E)-2-브로모-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(540 mg, 1.61 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 336.
단계 6: (4Z)-2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01125
1,4-다이옥산(20 mL) 중 (4E)-2-브로모-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(520 mg, 1.55 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(445.03 mg, 1.55 mmol), tBu브렛포스 Pd G3(528.37 mg, 0.62 mmol), tBu브렛포스(374.31 mg, 0.77 mmol) 및 세슘 카본에이트(1,512.72 mg, 4.64 mmol)의 혼합물을 130℃에서 1시간 동안 교반하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (4Z)-2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(305 mg, 0.56 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 543.
단계 7: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[(4Z)-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01126
1,4-다이옥산(15 mL) 중 (4Z)-2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(300 mg, 0.55 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.62 g, 13.81 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(114.37 mg, 0.11 mmol), 브렛포스(88.84 mg, 0.17 mmol) 및 세슘 카본에이트(540.34 mg, 1.66 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[(4Z)-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(100 mg, 0.16 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 624.
단계 8: (4E)-2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01127
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[(4E)-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(95 mg, 0.15 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(3 mL)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 소정 조건을 갖는 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 nm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 7분 내에 ACN(20%-45%))로 정제하여 (4E)-2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-4-[(1-메틸피라졸-4-일)메틸렌]-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(13.5 mg, 0.026 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 524; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.31 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.50 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.39 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.80 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.50 (s, 1H), 6.14 (s, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.68(s, 2H), 3.89(s, 3H), 2.90 (s, 3H), 2.23 (s, 3H).
실시예 189:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 305)
Figure pct01128
단계 1: 2-브로모-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01129
N,N-다이메틸포름아미드(25 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(600 mg, 2.61 mmol)의 혼합물에 나트륨 하이드라이드(187.78 mg, 60% 순도, 4.69 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 테트라하이드로퓨란 중 2,2,2-트라이플루오로에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(3.03 g, 13.04 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 0.5% 나트륨 바이카본에이트 용액/메탄올(60%)에 의한 역상 컬럼으로 직접 정제하여 2-브로모-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(500 mg,1.60 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 312.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01130
1,4-다이옥산(60 mL) 중 2-브로모-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(250 mg, 0.80 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(402.9 mg, 0.80 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(165.82 mg, 0.16 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(185.2 mg, 0.32 mmol) 및 세슘 카본에이트(783.43 mg, 2.40 mmol)의 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(200 mg, 0.27 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 734.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01131
1,4-다이옥산(20 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(280 mg, 0.38 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.12 g, 9.53 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(78.95 mg, 0.080 mmol), 브렛포스(81.77 mg, 0.15 mmol) 및 세슘 카본에이트(621.68 mg, 1.91 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(97/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(120 mg, 0.15 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 815.
단계 4: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01132
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(110 mg, 0.13 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)에 의해 pH 10까지 조정하였다. 잔사를 제조용 HPLC(선파이어 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm 5 μm 10 nm; 물(0.1% FA): CAN = 10분 내에 22% B → 36% B; 25 mL/분)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(47.4 mg, 0.092 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 515.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 6.73 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.07 (s, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.23 (s, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.34-4.24 (m, 2H), 4.00-3.98 (m, 2H), 3.07-3.05 (m, 2H), 1.94 (s, 3H).
실시예 190:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-클로로피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온; 포름산(화합물 306)
Figure pct01133
단계 1: 6-벤질옥시-8-클로로-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01134
N,N-다이메틸포름아미드(2 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(100 mg, 0.31 mmol), CuI(23.69 mg, 0.12 mmol), 3,4,7,8-테트라메틸-1,10-페난트롤린(58.62 mg, 0.25 mmol), 페닐메탄올(334.87 mg, 3.1 mmol), 세슘 카본에이트(303.25 mg, 0.93 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 95℃에서 교반하였다. 혼합물을 상온까지 냉각하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-벤질옥시-8-클로로-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(70 mg, 0.23 mmol)을 유색 교체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 301.1.
단계 2: 2-[(6-벤질옥시-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01135
1,4-다이옥산(9.6 mL) 중 2-브로모-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(60 mg, 0.25 mmol), 6-벤질옥시-8-클로로-7-플루오로-이소퀴놀린-3-아민(74.41 mg, 0.25 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(50.88 mg, 0.05 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(56.83 mg, 0.10 mmol) 및 세슘 카본에이트(240.4 mg, 0.74 mmol)의 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 상온까지 냉각하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(40/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[(6-벤질옥시-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(65 mg, 0.14 mmol)을 유색 교체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 466.1.
단계 3: tert-부틸 N-[6-벤질옥시-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01136
1,4-다이옥산(7.5 mL) 중 2-[(6-벤질옥시-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일)아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(60 mg, 0.13 mmol), tert-부틸 카밤에이트(376.68 mg, 3.22 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(26.66 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(20.71 mg, 0.04 mmol) 및 세슘 카본에이트(125.95 mg, 0.39 mmol)의 혼합물을 85℃에서 2시간 동안 질소 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[6-벤질옥시-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50 mg, 0.092 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 547.1.
단계 4: tert-부틸 N-[7-플루오로-6-하이드록시-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01137
메탄올(20 mL) 중 tert-부틸 N-[6-벤질옥시-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(220 mg, 0.40 mmol) 및 팔라듐 탄소(40 mg, 0.40 mmol)의 용액을 수소(1 atm) 하에 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(5/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-하이드록시-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(97.3 mg, 0.21 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 457.1.
단계 5: [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트
Figure pct01138
다이클로로메탄(20 mL) 중 [tert-부틸 N-[7-플루오로-6-하이드록시-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(550 mg, 1.2 mmol), tert-부틸 N-[7-플루오로-6-하이드록시-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(550 mg, 1.2 mmol)의 혼합물에 트라이에틸아민(243.39 mg, 2.41 mmol) 및 트라이플루오로메탄설폰산(509.93 mg, 1.81 mmol)을 -60℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 -60℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트(670 mg, 조질)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 589.1.
단계 6: [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산
Figure pct01139
1,4-다이옥산(20 mL) 중 [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]트라이플루오로메탄설포네이트(670 mg, 1.14 mmol)의 혼합물에 비스(피나콜라토)다이보론(867.28 mg, 3.42 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(83.3 mg, 0.11 mmol)을 90℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(380 mg, 0.78 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 485.1.
단계 7: tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-클로로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01140
아세토니트릴(2 mL)/물(0.2 mL) 중 4-클로로-5-요오도-피리딘-3-아민(189.15 mg, 0.74 mmol) 및 [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(120 mg, 0.25 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(36.28 mg, 0.05 mmol), 칼륨 포스페이트(157.79 mg, 0.74 mmol), 나트륨 아세테이트(20.32 mg, 0.25 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 조 물질을 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 567.1.
단계 8: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-클로로-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산
Figure pct01141
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-4-클로로-3-피리딜)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(120 mg, 0.21 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(3 mL)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-클로로-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온; 포름산(15.6 mg, 0.030 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 9.26 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.80 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.10 (s, 2H), 5.98 (s, 1H), 5.79 (s, 2H), 4.97 (s, 2H), 3.83-3.81 (m, 2H), 3.18-3.16 (m, 2H), 2.95 (s, 3H).
실시예 191:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(메틸-d3)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 231)
Figure pct01142
단계 1: 2-브로모-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01143
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(250 mg, 1.09 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(243.41 mg, 2.17 mmol)의 용액에 요오도메탄-D3(236.29 mg, 1.63 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 반응 생성물을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(5/95)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(220 mg, 0.89 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 247.
단계 2: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01144
1,4-다이옥산(20 mL) 중 2-브로모-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(220 mg, 0.89 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(256.15 mg, 0.89 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(138.22 mg, 0.13 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(152.06 mg, 0.18 mmol) 및 세슘 카본에이트(870.71 mg, 2.67 mmol)의 혼합물을 5시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(280 mg, 0.62 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 454.
단계 3: tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-[[7-옥소-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01145
1,4-다이옥산(20 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(280 mg, 0.62 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.80 g, 15.42 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(127.69 mg, 0.12 mmol), 브렛포스(99.38 mg, 0.19 mmol) 및 세슘 카본에이트(804.39 mg, 2.47 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-[[7-옥소-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(150 mg,0.28 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 535.
단계 4: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01146
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-[[7-옥소-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(120 mg, 0.22 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2 mL)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.1% 암모니아)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(트라이듀테리오메틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(40.7 mg, 0.09 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 435; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.27 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.50-8.49 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.39-7.38 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.79-6.77 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.10 (s, 2H), 5.98 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.83-3.81 (m, 2H), 3.18-3.16 (m, 2H), 2.22 (s, 3H).
실시예 192 및 실시예 193:
(±)-2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 308), (4R)-2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 309) 및 (4S)-2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 310)
Figure pct01147
단계 1: 2-브로모-4-하이드록시-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01148
메탄올(5 mL) 중 2-브로모-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,7-다이온(300 mg, 1.16 mmol) 및 NaBH4(44.17 mg, 1.16 mmol)의 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 ACN/물(17%)로 용리하는 C18 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4-하이드록시-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 0.77 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 260.
단계 2: 2-브로모-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01149
다이클로로메탄(20 mL) 중 2-브로모-4-하이드록시-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 0.77 mmol) 및 다이에틸아미노황 트라이플루오라이드(247.9 mg, 1.54 mmol)의 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 NaHCO3 용액으로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-40%/물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 2-브로모-4-플루오로-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.57 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 262.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(4-플루오로-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01150
1,4-다이옥산(50 mL) 중 2-브로모-4-플루오로-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(300.0 mg, 1.14 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(575.74 mg, 1.14 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(236.95 mg, 0.23 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(264.65 mg, 0.46 mmol) 및 칼륨 카본에이트(473.9 mg, 3.43 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(4-플루오로-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(400 mg, 0.58 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 684.
단계 4: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(4-플루오로-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01151
1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(4-플루오로-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(420 mg, 0.61 mmol), Boc-NH2(2.15 g, 18.42 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(127.08 mg, 0.12 mmol), 브렛포스(65.93 mg, 0.12 mmol) 및 세슘 카본에이트(800.55 mg, 2.46 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(4-플루오로-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(400 mg, 0.52 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 765.
단계 5: (±)-2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 308)
Figure pct01152
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(4-플루오로-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(400 mg, 0.52 mmol) 및 TFA(10 mL, 0.52 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L): CH3CN = 10분 내에 17%-27% B)로 정제하여 [2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-4-플루오로-6-메틸-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.32 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 465.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.28 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 6.74 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.08 (s, 2H), 5.99-5.86 (m, 1H), 5.27-5.18 (m, 3H), 4.81 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 4.45-4.36 (m, 1H), 4.05-3.93 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 1.93 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
단계 6: (4R)-2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온 및 (4S)-2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01153
2-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일아미노)-4-플루오로-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온을 키랄-HPLC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다: 화합물 309: 황색 고체(18.8 mg, 0.041 mmol). 체류 시간: 4.500분(키랄 셀룰로스-SB. 0.46 x 15 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 465.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.27 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.66 (s, 2H), 6.73 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.07 (s, 2H), 6.00-5.83 (m, 1H), 5.27-5.16 (m, 3H), 4.80 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 35.2, 16.1 Hz, 1H), 4.00 (dd, J = 14.6, 8.0 Hz, 1H), 2.99 (s, 3H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H). 화합물 310: 황색 고체(20.9 mg, 0.045 mmol)(추정됨). 체류 시간: 5.344분(키랄 셀룰로스-SB. 0.46 x 15 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (53) [M+H]+ = 465.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.27 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.66 (s, 2H), 6.73 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.07 (s, 2H), 5.99-5.83 (m, 1H), 5.27-5.16 (m, 3H), 4.80 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 4.45-4.34 (m, 1H), 4.07-3.96 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
실시예 194:
2-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-4-하이드록시-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 311)
Figure pct01154
단계 1: 2-브로모-6-메틸-5,6-다이하이드로-8H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-4,7-다이온
Figure pct01155
탄소 테트라클로라이드(1 mL), 아세토니트릴(1 mL) 및 물(1 mL) 중 2-브로모-6-메틸-4-메틸렌-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1.0 g, 3.9 mmol)의 용액을 25℃에서 10분 동안 교반하였다. RuCl3(265.0 mg, 1.18 mmol) 및 나트륨 퍼요데이트(2520 mg, 11.78 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 Na2S2O3/NaHCO3 용액에 의해 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 EA/PE(20%)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,7-다이온(300 mg, 1.16 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 258.
단계 2: 2-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-6-메틸-5,6-다이하이드로-8H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-4,7-다이온
Figure pct01156
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-브로모-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,7-다이온(160.0 mg, 0.62 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(178.38 mg, 0.62 mmol), t-Bu브렛포스(150.04 mg, 0.31 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(211.79 mg, 0.25 mmol) 및 세슘 카본에이트(606.35 mg, 1.86 mmol)의 혼합물을 4시간 동안 120℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,7-다이온(70 mg, 0.15 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 465.
단계 3: 2-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-4-하이드록시-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01157
THF(10 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,7-다이온(100 mg, 0.22 mmol)의 혼합물에 테트라하이드로퓨란 중 메틸마그네슘 요오다이드(0.43 mL, 1.29 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 -65℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-4-하이드록시-4,6-다이메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(40 mg,0.083 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI): [M+H]+ = 481.
단계 4: tert-부틸 7-플루오로-3-(4-하이드록시-4,6-다이메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-2-일아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01158
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-4-하이드록시-4,6-다이메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(70 mg, 0.15 mmol), Boc-NH2(510.9 mg, 4.37 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(30.13 mg, 0.0300 mmol), 브렛포스(15.63 mg, 0.030 mmol), 세슘 카본에이트(189.8 mg, 0.58 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올/다이클로로메탄(1/10)으로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(4-하이드록시-4,6-다이메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(40 mg, 0.071 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 562.
단계 5: 2-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-4-하이드록시-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01159
다이클로로메탄(2 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(4-하이드록시-4,6-다이메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(30 mg, 0.050 mmol)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L): CH3CN = 7분 내에 15%-40% B)로 정제하여 2-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일아미노)-4-하이드록시-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-g][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(4.3 mg, 0.0093 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 462.3; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.16 (s, 1H), 8.50-8.37 (m, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.35 (s, 1H), 5.16 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 4.96-4.89 (m, 2H), 4.11 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.64 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.61 (s, 3H).
실시예 195:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 312)
Figure pct01160
단계 1: 2-브로모-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01161
N,N-다이메틸포름아미드(50 mL) 중 2-브로모-4,5,6,8-테트라하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(900 mg, 3.91 mmol)의 혼합물에 나트륨 하이드라이드(281.67 mg, 11.74 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 이어서, 반응 생성물을 0.5시간 동안 교반하였다. N,N-다이메틸포름아미드(5 mL) 중 2-요오도-1,1-다이플루오로에탄(3.75 g, 19.56 mmol)을 첨가하고, 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 잔사를 MeOH/물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트(30분 내에 5% → 65%)에 의한 역상 HPLC로 직접 정제하여 2-브로모-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(380 mg, 33% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 294.1.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01162
1,4-다이옥산(35 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(350 mg, 0.70 mmol), 2-브로모-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(307 mg, 1.04 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(144 mg, 0.14 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(160 mg, 0.28 mmol) 및 세슘 카본에이트(680 mg, 2.09 mmol)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 MeOH/물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트(30분 내에 5% → 75%)에 의한 역상 HPLC로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(180 mg, 36.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 716.4.
단계 3: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01163
1,4-다이옥산(20 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(180 mg, 0.25 mmol), tert-부틸 카밤에이트(736 mg, 6.28 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(39 mg, 0.04 mmol), 브렛포스(27 mg, 0.05 mmol) 및 세슘 카본에이트(410 mg, 1.26 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 ACN/물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트(30분 내에 5% → 65%)에 의한 역상 HPLC로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(100 mg, 49.9% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 797.5.
단계 4: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01164
DCM(5 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-3-[[6-(2,2-다이플루오로에틸)-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-7-플루오로-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(500 mg, 0.63 mmol) 및 TFA(10 mL)의 용액을 20℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 MeOH 중 NH3(7 M)으로 pH 10까지 조정하였다. 진공 하에 농축한 후, 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 15 mm 5 μm; 물 중 10 mmol 나트륨 바이카본에이트: ACN(7분 내에 20%-41%))로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-(2,2-다이플루오로에틸)-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(156 mg, 50.3% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 497.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 9.24 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.37-5.98 (m, 4H), 5.22 (s, 2H), 5.04 (s, 2H), 3.96-3.79 (m, 4H), 3.07-3.03 (m, 2H), 1.92 (s, 3H).
실시예 196:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 313)
Figure pct01165
단계 1: 2'-브로모-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[옥시란-2,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온
Figure pct01166
다이클로로메탄(20 mL) 중 2-브로모-6-메틸-4-메틸렌-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(1.0 g, 3.91 mmol) 및 m-CPBA(2.03 g, 11.73 mmol)의 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 수성 Na2S2O3 및 NaHCO3으로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2'-브로모-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[옥시란-2,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온(300 mg, 1.10 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 272.
단계 2: 2-브로모-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01167
메탄올(5 mL) 중 2'-브로모-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[옥시란-2,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온(300 mg, 1.10 mmol) 및 나트륨 메톡사이드(178 mg, 3.30 mmol)의 용액을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(170 mg, 0.56 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 304.
단계 3: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01168
1,4-다이옥산(4 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)이소퀴놀린-3-아민(75.68 mg, 0.26 mmol), 2-브로모-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(80 mg, 0.26 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(89.85 mg, 0.11 mmol), t-Bu브렛포스(63.65 mg, 0.13 mmol) 및 세슘 카본에이트(257.25 mg, 0.79 mmol)의 혼합물을 130℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(47 mg, 0.092 mmol)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 511.
단계 4: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01169
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(100 mg, 0.20 mmol), tert-부틸 카밤에이트(573.2 mg, 4.89 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(40.51 mg, 0.04 mmol), 브렛포스(31.47 mg, 0.06 mmol) 및 세슘 카본에이트(191.41 mg, 0.59 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50 mg, 0.085 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 592.
단계 5: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01170
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[[4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-7-옥소-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]-6-(4-메틸-3-피리딜)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(80 mg, 0.14 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.5 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 8까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트): CAN = 7분 내에 30%-45%)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-3-피리딜)-3-이소퀴놀일]아미노]-4-하이드록시-4-(메톡시메틸)-6-메틸-5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(11.5 mg, 0.023 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 492. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.29 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.50 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1 H), 7.72 (s, 1H), 7.39 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.85 (s, 1H), 5.07-4.84 (m, 2H), 4.07-3.65(m, 2H), 3.55-3.43(m, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.97 (s, 3 H), 2.23 (s, 3H).
실시예 197:
2'-((8-아미노-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸-1H-피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[사이클로프로판-1,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온(화합물 314)
Figure pct01171
단계 1: 8-클로로-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01172
1,4-다이옥산(15 mL) 및 물(1.5 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도-이소퀴놀린-3-아민(500 mg, 1.55 mmol), 1,3,5-트라이메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(500 mg, 2.12 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(113 mg, 0.15 mmol) 및 칼륨 카본에이트(536 mg, 3.88 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8-클로로-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민(517 mg,1.69 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 305.
단계 2: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온
Figure pct01173
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-브로모-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온(50 mg, 0.19 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)이소퀴놀린-3-아민(56.41 mg, 0.19 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(63.23 mg, 0.07 mmol), t-Bu브렛포스(44.79 mg, 0.09 mmol) 및 세슘 카본에이트(181.02 mg, 0.56 mmol)의 혼합물을 130℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(94/6)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온(27 mg,0.055 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 494.
단계 3: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-2-일)아미노]-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01174
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온(136.0 mg, 0.28 mmol), tert-부틸 카밤에이트(806.36 mg, 6.88 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(56.99 mg, 0.06 mmol), 브렛포스(44.27 mg, 0.08 mmol) 및 세슘 카본에이트(269.27 mg, 0.83 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-2-일)아미노]-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(65 mg, 0.11 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 575.
단계 4: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온
Figure pct01175
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-2-일)아미노]-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-8-이소퀴놀일]카밤에이트(87.42 mg, 0.15 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.0 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 반응 혼합물을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 pH 8까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 150 mm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 7분 내에 ACN(30%-50%))로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(1,3,5-트라이메틸피라졸-4-일)-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온(33 mg, 0.07 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 475; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.20 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 6.65 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.96 (s, 2H), 5.61 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.73-3.70 (m, 5H), 2.99 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.18-1.16 (m, 2H), 0.95-0.92 (m, 2H).
실시예 198:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 315)
Figure pct01176
단계 1: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01177
1,4-다이옥산(28 mL) 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(518 mg, 1.03 mmol), 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(280.27 mg, 1.03 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(213.19 mg, 0.21 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(238.11 mg, 0.41 mmol) 및 세슘 카본에이트(1.01 g, 3.09 mmol)의 혼합물을 100℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 이어서 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(280 mg,0.40 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 694.
단계 2: tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트
Figure pct01178
1,4-다이옥산(40 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(270 mg, 0.39 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.14 g, 9.72 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(80.51 mg, 0.08 mmol), 브렛포스(83.39 mg, 0.16 mmol) 및 세슘 카본에이트(633.97 mg, 1.94 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실온까지 냉각하고, 이어서 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(150 mg,0.19 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 775.
단계 3: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01179
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(140 mg, 0.18 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(5 mL, 0.18 mmol)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼, 5 μm, 19 x 150 mm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) = 7분 내에 25% B → 45% B; 25 mL/분)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(36.5 mg, 0.077 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 475.3. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 6.72 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.05 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 5.23 (s, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.61-4.57 (m, 1H), 3.79-3.75 (m, 2H), 2.99-2.96 (m, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 199:
2'-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[사이클로프로판-1,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온(화합물 316)
Figure pct01180
단계 1: tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-([3'-메틸-4'-옥소-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-8'-일]아미노)이소퀴놀린-6-일]-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트
Figure pct01181
1,4-다이옥산 중 tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-4-메틸-3-피리딜]-N-tert-부톡시카보닐-카밤에이트(200 mg, 0.40 mmol), 2-브로모-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온(129 mg, 0.48 mmol), t-Bu브렛포스 Pd G3(137 mg, 0.16 mmol), t-Bu브렛포스(97 mg, 0.2 mmol), 세슘 카본에이트(391 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 130℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-([3'-메틸-4'-옥소-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-8'-일]아미노)이소퀴놀린-6-일]-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트(69 mg, 25% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS(ESI) [M+H]+ = 692.
단계 2: tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((6'-메틸-7'-옥소-5',6',7',8'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-2'-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct01182
1,4-다이옥산(5 mL) 중 tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-([3'-메틸-4'-옥소-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-8'-일]아미노)이소퀴놀린-6-일]-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트(69 mg, 0.1 mmol), tert-부틸 카밤에이트(293 mg, 2.5 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(21 mg, 0.02 mmol), 세슘 카본에이트(98 mg, 0.3 mmol), 브렛포스(22 mg, 0.04 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((6'-메틸-7'-옥소-5',6',7',8'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-2'-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(39 mg, 50%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 773.
단계 3: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온
Figure pct01183
다이클로로메탄 중 tert-부틸 N-tert-부톡시카보닐-N-[5-[8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-메틸-7-옥소-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]-4-메틸-3-피리딜]카밤에이트(50 mg, 0.06 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.0 mL)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 혼합물을 메탄올 중 NH3의 용액으로 pH 8까지 조정하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD 컬럼 19 mm x 150 μm; CH3CN:H2O(나트륨 바이카본에이트 10 mmol/L) = 8분 내에 28-43%)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸-3-피리딜)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-메틸-스피로[5,8-다이하이드로피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-4,1'-사이클로프로판]-7-온(8.2 mg,0.017 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI [M+H]+ = 473; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.24 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.72 (d, J = 6 Hz, 1H), 6.05 (s, 2H), 5.61 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 5.06 (s, 2H), 3.73 (s, 2H), 2.99(s, 3H), 1.93(s, 3H), 1.24-1.16 (m, 2H), 0.96-0.92 (m, 2H).
실시예 200:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-4-메틸렌-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 317)
Figure pct01184
다이옥산 중 HCl(2 mL, 4 mol/L) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-4-메틸리덴-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(20 mg, 0.03 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD 컬럼 19 x 150 mm x 5 μm; 물(0.1% 나트륨 바이카본에이트):CH3CN = 7분 내에 25%-41%)로 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(2.8 mg, 0.006 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 444; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.29 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.50 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.38 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 6.11 (s, 2H), 5.63 (s, 1H), 5.33 (s, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.41 (s, 2H), 2.91 (s, 3H), 2.21 (s, 3H).
실시예 201:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 318)
Figure pct01185
단계 1: 3,5-다이브로모-1H-피라졸
Figure pct01186
THF(750 mL) 중 3,4,5-트라이브로모-1H-피라졸(50 g, 164.1 mmol)의 용액에 헥산(150 mL) 중 n-BuLi(2.5 M)의 용액을 -65℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 -65℃에서 드라이아이스 욕에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(50/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3,5-다이브로모-1H-피라졸(20 g, 54%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 226.9.
단계 2: tert-부틸 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세테이트
Figure pct01187
N,N-다이메틸포름아미드(400 mL) 중 3,5-다이브로모-1H-피라졸(20 g, 88.55 mmol)의 용액에 칼륨 카본에이트(20 g, 144.7 mmol), TBAI(1.6 g, 4.33 mmol) 및 tert-부틸 2-클로로아세테이트(20 g, 132.8 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(100/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 tert-부틸 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세테이트(18 g, 60%)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 341.0.
단계 3: 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트산
Figure pct01188
다이클로로메탄(10 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(100 mL) 중 tert-부틸 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세테이트(18 g, 52.94 mmol)의 용액을 2시간 동안 80℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하여 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트산(15 g, 조질)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 284.9.
단계 4: 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-메틸-N-(프로프-2-엔-1-일)아세트아미드
Figure pct01189
N,N-다이메틸포름아미드(500 mL) 중 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)아세트산(15 g, 52.84 mmol), 메틸(프로프-2-엔-1-일)아민(5.7 g, 80.15 mmol), N,N-다이이소프로필에틸아민(27 g, 208.9 mmol) 및 HATU(30 g, 78.9 mmol)의 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 나트륨 클로라이드 용액으로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(2/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-메틸-N-(프로프-2-엔-1-일)아세트아미드(16.3 g, 92%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 338.0.
단계 5: 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01190
N,N-다이메틸포름아미드(100 mL) 중 2-(3,5-다이브로모-1H-피라졸-1-일)-N-메틸-N-(프로프-2-엔-1-일)아세트아미드(5 g, 14.84 mmol), 팔라듐 아세테이트(166 mg, 0.74 mmol), 트라이페닐포스핀(388 mg, 1.48 mmol), TBAB(4.8 g, 14.890 mmol) 및 칼륨 아세테이트(4.2 g, 42.80 mmol)의 혼합물을 80℃에서 10시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(2/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(3.2 g, 84%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 258.1.
단계 6: 5-브로모-4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘
Figure pct01191
1,4-다이옥산(30 mL) 중 2,5-다이브로모-4-메틸피리딘(1.2 g, 4.78 mmol), 2-(트라이부틸스탄일)-1,3-옥사졸(2.06 g, 5.75 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(552 mg, 0.48 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/2)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 5-브로모-4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘(380 mg, 33%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H+] = 241.1.
단계 7: 4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct01192
1,4-다이옥산(30 mL) 중 5-브로모-4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘(800 mg, 3.35 mmol), 4,4,5,5-테트라메틸-2-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,3,2-다이옥사보롤란(8.4 g, 33.08 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(244 mg, 0.33 mmol) 및 칼륨 아세테이트(820 mg, 8.36 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(1.2 g, 조질)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 287.1.
단계 8: 8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01193
1,4-다이옥산(25 mL) 및 물(5 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민(550 mg, 1.71 mmol), 4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(1.2 g, 4.19 mmol), 칼륨 카본에이트(825 mg, 5.97 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(125 mg, 0.17 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민(580 mg 95%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 355.1.
단계 9: 2-([8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01194
1,4-다이옥산(80 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-아민(700 mg, 1.97 mmol), 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1.2 g, 4.69 mmol), 3세대 t-Bu브렛포스 전촉매(675 mg, 0.79 mmol), t-Bu브렛포스(403 mg, 0.83 mmol) 및 세슘 카본에이트(3.2 g, 9.82 mmol)의 혼합물을 110℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하였다. 여액을 농축하였다. 진공 하에 농축한 후, 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(15:1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 2-([8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(300 mg, 29%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 530.3.
단계 10: 2-([8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-4,6-다이메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01195
메탄올(90 mL) 및 다이클로로메탄(10 mL) 중 2-([8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(300 mg, 0.57 mmol)의 혼합물에 탄소 상 팔라듐(30.12 mg, 0.28 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 수소(2 atm) 하에 2시간 동안 실온에서 교반하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하여 2-([8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-4,6-다이메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(130 mg, 43%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 532.3.
단계 11: tert-부틸 N-[3-([4,6-다이메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01196
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-([8-클로로-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-4,6-다이메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(100 mg, 0.19 mmol), tert-부틸 카밤에이트(550 mg, 4.70 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(30 mg, 0.03 mmol), 브렛포스(20 mg, 0.04 mmol) 및 세슘 카본에이트(300 mg, 0.92 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하고, 이어서 여과하였다. 진공 하에 농축한 후, 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10:1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 tert-부틸 N-[3-([4,6-다이메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(100 mg, 87%)를 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 6 13.4.
단계 12: 2-([8-아미노-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-4,6-다이메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01197
DCM(5 mL) 및 TFA(5 mL) 중 tert-부틸 N-[3-([4,6-다이메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(100 mg, 0.16 mmol)의 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 용액의 pH 값을 메탄올 중 NH3(7 M)으로 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 15 mm 5 μm; 물 중 10 mmol 나트륨 바이카본에이트: 8분 내에 ACN(50%-77%))로 직접 정제하여 2-([8-아미노-7-플루오로-6-[4-메틸-6-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘-3-일]이소퀴놀린-3-일]아미노)-4,6-다이메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(22.5 mg, 27%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 513.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.29 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.86-6.84 (m, 1H), 6.17 (s, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.13-4.81 (m, 2H), 3.84-3.77 (m, 1H), 3.68-3.63 (m, 1H), 3.30-3.26 (m, 1H), 2.97 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.26 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 202:
(1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 322), (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 321), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 320) 및 (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 319)
Figure pct01198
단계 1: 메틸 (2E)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-5-일]프로프-2-에노에이트
Figure pct01199
테트라하이드로퓨란(150 mL) 중 1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-5-카브알데하이드(10 g, 29.55 mmol) 및 메틸 2-(트라이페닐-λ5-포스판일리덴)아세테이트(9.88 g, 29.55 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 70℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/10)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 (2E)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-5-일]프로프-2-에노에이트(10 g, 25.38 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 395.
단계 2: 트랜스-메틸 2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01200
에틸렌 글리콜 다이메틸 에터(100 mL) 및 다이클로로메탄(10 mL) 중 에틸다이페닐설파늄; 트라이플루오로(λ2-플루오라니딜)보라누이드(15 g, 49.64 mmol)의 혼합물에 리튬 다이이소프로필아미드(25 mL, 466.75 mmol)를 -78℃에서 질소 하에 첨가하였다. 반응 생성물을 30분 동안 -78℃에서 교반하였다. 메틸 (2E)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]프로프-2-에노에이트(6.8 g, 17.23 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 -78℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 얼음 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-메틸 2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(3 g, 7.10 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 423.
단계 3: 트랜스-2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct01201
메탄올(20 mL) 및 물(20 mL) 중 트랜스-메틸 2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(3 g, 7.10 mmol) 및 LiOH(853 mg, 35.61 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 수소 클로라이드로 pH 5까지 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 층을 합하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(1.26 g, 3.08 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 409.
단계 4: 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01202
다이클로로메탄(50 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(886 mg, 3.07 mmol), 트랜스-2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(1.26 g, 3.08 mmol) 및 피리딘(5 mL, 62.118 mmol)의 혼합물에 인 옥시클로라이드(1.4 g, 9.13 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 이어서 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(500 mg, 0.73 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 678.
단계 5: 트랜스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01203
다이옥산(30 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(5.2 g, 44.38 mmol), 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(1.5 g, 2.21 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(460 mg, 0.44 mmol), 브렛포스(478 mg, 0.89 mmol) 및 세슘 카본에이트(2.89 g, 8.87 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 질소 하에 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[(1S,3S)-2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(1 g, 1.32 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 759.
단계 6: (1S,2S,3S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,2S,3R)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1R,2R,3S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-5-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01204
트라이플루오로아세트산(10 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(1 g, 1.31 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 혼합물(500 mg, 1.20 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. 혼합물을 Prep-SFC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대한 이미다졸 트랜스; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 321: 황색 고체(84.9 mg, 0.20 mmol), 체류 시간: 1.25분(키랄팩 IC, 3.0 x 100 mm, 3 μm; MeOH(0.1% DEA); 2 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 417; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.76(s,1H), 10.68 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 2H), 6.27 (s, 2H), 2.39-2.32 (m, 1H), 2.29-2.27 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.75-1.70 (m, 1H), 1.29-1.27 (m,3H). 화합물 322: 황색 고체(123.9 mg, 0.29 mmol), 체류 시간: 1.47분(키랄팩 IC, 3.0 x 100 mm, 3 μm; MeOH(0.1% DEA); 2 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 417; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.76(s,1H), 10.68 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 2H), 6.27 (s, 2H), 2.39-2.32 (m, 1H), 2.29-2.27 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.75-1.70 (m, 1H), 1.29-1.27 (m,3H). 화합물 320: 황색 고체(110.2 mg, 0.26 mmol). 체류 시간: 1.63분(키랄팩 IC, 3.0 x 100 mm, 3 μm; MeOH(0.1% DEA); 2 mL/분);LCMS (ESI) [M+H]+ = 417; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.76(s,1H), 10.68 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51-8.50 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 2H), 6.27 (s, 2H), 2.39-2.32 (m, 1H), 2.29-2.27 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.75-1.70 (m, 1H), 1.29-1.27 (m,3H). 화합물 319: 황색 고체(168.9 mg, 0.40 mmol). 체류 시간: 2.20분(키랄팩 IC, 3.0 x 100 mm, 3 μm; MeOH(0.1% DEA); 2 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 417; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.76(s,1H), 10.68 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51-8.50 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 2H), 6.27 (s, 2H), 2.39-2.32 (m, 1H), 2.29-2.27 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.75-1.70 (m, 1H), 1.29-1.27 (m,3H).
실시예 203:
(±)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 328)
Figure pct01205
단계 1: 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-2-온
Figure pct01206
톨루엔(3 mL) 중 (2E)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-일 2-다이아조아세테이트(100 mg, 0.48 mmol) 및 tert-부틸[(tert-부틸다이메틸실릴)큐프리오]다이메틸실란(7.1 mg, 0.024 mmol)의 용액을 2시간 동안 환류 하에 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(2/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-2-온(25 mg, 0.14 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 179.1.
단계 2: N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01207
THF(5 mL) 중 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-2-온(200 mg, 1.12 mmol)의 용액에 LiHMDS(1.35 mL, 8.07 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(287 mg, 0.99 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(150 mg, 29%)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 3: N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[(옥산-2-일옥시)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01208
테트라하이드로퓨란(5 mL) 중 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(150 mg, 0.32 mmol), 3,4-다이하이드로-2H-피란(140 mg, 1.66 mmol), TsOH(10 mg, 0.058 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[(옥산-2-일옥시)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드(95 mg, 54%)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 4: tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[(옥산-2-일옥시)메틸]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01209
N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[(옥산-2-일옥시)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드(95 mg, 0.17 mmol), Pd2(dba)3(30 mg, 0.033 mmol), tert-부틸 카밤에이트(510 mg, 4.35 mmol), 브렛포스(30 mg, 0.056 mmol), 세슘 카본에이트(280 mg, 0.86 mmol), 1,4-다이옥산(3 mL)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[(옥산-2-일옥시)메틸]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(60 mg, 55%)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 5: N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01210
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[(옥산-2-일옥시)메틸]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(60 mg, 0.095 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(2 mL)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(7.1 mg, 17%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 447.3, 2.187분, K; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.303 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 (s, J = 5.1 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.00 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.99-3.88 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 2.32-2.24 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.28-2.24 (m, 1H), 1.93-1.84 (m, 1H).
실시예 204 및 실시예 205:
(1R,2S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 327) 및 (1S,2R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 326)
Figure pct01211
단계 1: 3-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온
Figure pct01212
다이옥산(10 mL) 중 3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온(390 mg, 3.48 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(500 mg, 1.73 mmol), 4-다이메틸아미노피리딘(425 mg, 3.47 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 120℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 3-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온(450 mg, 1.18 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 382.
단계 2: tert-부틸 N-(3-[2,4-다이옥소-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-일]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01213
다이옥산(20 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(1.22 g, 10.41 mmol), 3-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온(200 mg, 0.52 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(108 mg, 0.10 mmol), 브렛포스(112 mg, 0.20 mmol), 세슘 카본에이트(682 mg, 2.09 mmol)의 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[2,4-다이옥소-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-일]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(150 mg, 0.32 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.
단계 3: 시스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01214
메탄올(30 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[2,4-다이옥소-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-일]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(460 mg, 0.99 mmol)의 혼합물에 나트륨 보로하이드라이드(190 mg, 5.02 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 시스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 0.42 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.
단계 4: (1R,2S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1S,2R)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01215
트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 시스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 0.42 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 라세미체 생성물(50 mg, 0.13 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. 라세미체 생성물을 키랄-HPLC로 분리하여 2개의 트랜스-이성질체를 수득하였다: 화합물 327: 체류 시간: 3.04분(리페어드 키랄 IC, 0.46 x 10 cm; 5 μm; Hex(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 367; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.28 (s, 1H), 8.45-8.44 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.42-7.41 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.98-6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.86-3.82 (m, 1H), 3.75-3.70 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.08-2.02 (m,1H), 1.64-1.59 (m, 1H), 1.15-1.10 (m, 2H). 화합물 326: 체류 시간: 3.86분(리페어드 키랄 IC, 0.46 x 10 cm; 5 μm; Hex(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 367; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.28 (s, 1H), 8.45-8.44 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.42-7.41 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.98-6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.86-3.82 (m, 1H), 3.75-3.70 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.08-2.02 (m,1H), 1.64-1.59 (m, 1H), 1.15-1.10 (m, 2H).
실시예 206:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 387)
Figure pct01216
단계 1: 2-브로모-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01217
THF/DMF(40 mL/40 mL) 중 2-브로모-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(1 g, 4.35 mmol)의 용액에 t-BuOK(1.5 g, 13.4 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(5 g, 21.5 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 조질 생성물을 역상 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트: MeOH(50분 내에 5%-70%))로 정제하여 2-브로모-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(300 mg, 22%)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 312.0.
단계 2: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01218
8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(100 mg, 0.35 mmol), 2-브로모-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(110 mg, 0.35 mmol), 3세대 t-Bu브렛포스 전촉매(120 mg, 0.14 mmol), t-Bu브렛포스(75 mg, 0.16 mmol), 세슘 카본에이트(570 mg, 1.75 mmol) 및 1,4-다이옥산(12 mL)의 혼합물을 1시간 동안 110℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(15/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(35 mg, 19%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 519.2.
단계 3: tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01219
1,4-다이옥산(12 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(150 mg, 0.29 mmol), tert-부틸 카밤에이트(850 mg, 7.26 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(45 mg, 0.043 mmol), 브렛포스(30 mg, 0.056 mmol), 세슘 카본에이트(472 mg, 1.45 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(40 mg, 23%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 600.4.
단계 4: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01220
다이클로로메탄(2 mL) 및 트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[7-옥소-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(40 mg, 0.067 mmol)의 용액을 2.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 용액의 pH 값을 메탄올 중 NH3(7 M)으로 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 15 mm 5 μm; 물 중 10 mmol 나트륨 바이카본에이트: 8분 내에 ACN(50%-77%))로 직접 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(6.0 mg, 18%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 500.1; 1H NMR (300 MHz, MeOD) δ 9.14 (s, 1H), 8.44 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.41 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.25-4.22 (m, 2H), 4.07-4.03 (m, 2H), 3.19-3.17 (m, 2H), 2.30 (s, 3H).
실시예 207:
(1S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-4-일)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 369) 및 (1R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-4-일)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 370)
Figure pct01221
단계 1: 4-메틸-N'-[(1E)-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]메틸리덴]벤젠-1-설포노하이드라자이드
Figure pct01222
메탄올(200 mL) 및 AcOH(0.5 mL) 중 1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-카브알데하이드(10 g, 29.55 mmol), 4-메틸벤젠-1-설포노하이드라자이드(11 g, 59.06 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 여과 후, 고체를 수집하고, 메탄올(50 mL)로 세척하여 4-메틸-N'-[(1E)-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]메틸리덴]벤젠-1-설포노하이드라자이드(10 g, 19.76 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 507.
단계 2: 2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01223
자일렌(200 mL) 중 메틸 (2E)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-에노에이트(5 g, 30.08 mmol), 4-메틸-N'-[(1E)-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]메틸리덴]벤젠-1-설포노하이드라자이드(18.2 g, 35.92 mmol)의 혼합물을 150℃에서 4시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(1.8 g, 3.68 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 489.
단계 3: 2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct01224
물(15 mL) 및 메탄올(15 mL) 중 메틸 2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(700 mg, 1.43 mmol) 및 LiOH(172 mg, 7.18 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 수소 클로라이드(1 N)로 pH 5까지 조정하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하여 2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(500 mg, 1.05 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 475.
단계 4: N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01225
다이클로로메탄(20 mL) 중 2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(500 mg, 1.05 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(302 mg, 1.05 mmol) 및 피리딘(4 mL)의 혼합물에 인 옥시클로라이드(480 mg, 3.13 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(350 mg,0.47 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 744.
단계 5: tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01226
다이옥산(20 mL) 중 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(250 mg, 0.33 mmol), tert-부틸 카밤에이트(787 mg, 6.71 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(70 mg, 0.06 mmol), 브렛포스(72 mg, 0.13 mmol) 및 세슘 카본에이트(438 mg, 1.34 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(120 mg, 0.14 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 825.
단계 6: (1R,3S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-4-일)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1S,3R)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-4-일)-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01227
트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(100 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% FA)로 정제하여 라세미체 생성물(20 mg, 0.04 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. 라세미체 생성물을 키랄-HPLC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다(이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 비공지된 이미다졸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 370: 체류 시간: 4.99분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 483; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.33(s, 1H), 8.48 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.42-8.40 (m, 2H), 7.56 (s,1H), 7.45 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.90-2.86 (m, 1H), 2.79-2.76 (m, 1H), 2.71-2.69 (m, 1H), 2.32 (s, 3H); 화합물 369: 체류 시간: 5.98분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 483; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.33(s, 1H), 8.48 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.42-8.40 (m, 2H), 7.56 (s,1H), 7.45 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.90-2.86 (m, 1H), 2.79-2.76 (m, 1H), 2.71-2.69 (m, 1H), 2.32 (s, 3H).
실시예 208 및 실시예 209:
(±)-(1R,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-((다이메틸아미노)메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 343); (1R,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-((다이메틸아미노)메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 344) 및 (1S,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-((다이메틸아미노)메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 345).
Figure pct01228
단계 1: 에틸 2-옥소-3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복실레이트
Figure pct01229
N,N-다이메틸포름아미드(300 mL) 중 (2-에톡시-2-옥소에틸)다이메틸설파늄 브로마이드(60 g, 261.85 mmol) 및 세슘 카본에이트(101 g, 309.98 mmol)의 용액을 20분 동안 20℃에서 교반하였다. 2,5-다이하이드로퓨란-2-온(20 g, 237.88 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 추가로 15시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(3/7)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 2-옥소-3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복실레이트(3 g, 7%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 171.
단계 2: 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01230
테트라하이드로퓨란(150 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(6.1 g, 21.20 mmol)의 용액에 LiHMDS(18 mL, 107.57 mmol)를 첨가하고, 이어서 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 에틸 2-옥소-3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-6-카복실레이트(4.5 g, 26.45 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 추가로 15시간 동안 20℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(49/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복실레이트(3.1 g, 26%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 458.
단계 3: 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-[(메탄설폰일옥시)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01231
다이클로로메탄(20 mL) 중 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복실레이트(1.4 g, 3.06 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(927 mg, 9.161 mmol) 및 메탄설폰일 클로라이드(703 mg, 6.14 mmol)를 첨가하고, 이어서 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하여 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-[(메탄설폰일옥시)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트(2 g, 조질)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 536.
단계 4: 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01232
메탄올(160 mL) 중 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-[(메탄설폰일옥시)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트(3.6 g, 6.72 mmol) 및 다이메틸아민의 용액을 20℃에서 36시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(24/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트(1.85 g, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 485.
단계 5: 에틸 2-[(8-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)카바모일]-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01233
1,4-다이옥산(20 mL) 중 에틸 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트(592 mg, 1.22 mmol), tert-부틸 카밤에이트(3.57 g, 30.475 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(253 mg, 0.244 mmol), 브렛포스(262 mg, 0.49 mmol), 세슘 카본에이트(1.99 g, 6.11 mmol)의 혼합물을 90℃에서 15시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 2-[(8-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)카바모일]-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트(280 mg, 41%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 566.
단계 6: tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]-3-(하이드록시메틸)사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01234
다이클로로메탄(5 mL) 중 에틸 2-[(8-[[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)카바모일]-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복실레이트(280 mg, 0.49 mmol)의 용액에 DIBAl-H(1.98 mL, 11.81 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 메탄올로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(7/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]-3-(하이드록시메틸)사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(80 mg, 31%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 524.
단계 7: tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]-3-[(메탄설폰일옥시)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01235
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]-3-(하이드록시메틸)사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(70 mg, 0.13 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(42 mg, 0.42 mmol), 메탄설폰일 클로라이드(31 mg, 0.27 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]-3-[(메탄설폰일옥시)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(90 mg, 조질)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 602.
단계 8: tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01236
DMSO(5 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]-3-[(메탄설폰일옥시)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(90 mg, 0.150 mmol) 및 NaCN(15 mg, 0.31 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 50℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(50 mg, 63%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 533.
단계 9: (1R,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-((다이메틸아미노)메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1S,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-((다이메틸아미노)메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01237
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[(1R,2S,3S)-2-(시아노메틸)-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(48 mg, 0.090 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(5 mL)의 용액을 1시간 동안 20℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 소정 조건을 갖는 제조용 HPLC(키네텍스(Kinetex) EVO C18 컬럼, 30 x 150, 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 10분 내에 ACN(15% → 35%))로 정제하여 (±)-(1R,2S,3S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)-3-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드(2.4 mg, 6%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 433.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.84 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.1Hz, 1H), 6.94 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.29 (s, 2H), 2.84-2.72 (m, 2H), 2.46 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.13 (s, 7H), 1.60 (dd, J = 6.5, 5.0 Hz, 1H), 1.51-1.40 (m, 1H). 라세미체 생성물을 SFC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다. 화합물 344(5.1 mg, 34%)를 황색 고체로서 수득하였다. 체류 시간: 3.652분(키랄팩 IF, 2 x 25 cm, 5 μm; MTBE 및 23분 내에 20.0% 에탄올(8 mmol/L NH3·H2O)); LCMS (ESI) [M+H]+ = 433.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.84 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.29 (s, 2H), 2.84-2.72 (m, 2H), 2.46 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.13 (s, 7H), 1.60 (dd, J = 6.5, 5.0 Hz, 1H), 1.51-1.40 (m, 1H). 화합물 345: 황색 고체(5.4 mg, 36%). 체류 시간: 4.805분(키랄팩 IF, 2 x 25 cm, 5 μm; MTBE 및 23분 내에 20.0% 에탄올(8 mmol/L NH3·H2O)); LCMS (ESI) [M+H]+ = 433.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.84 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.29 (s, 2H), 2.84-2.72 (m, 2H), 2.46 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.13 (s, 7H), 1.60 (dd, J = 6.5, 5.0 Hz, 1H), 1.51-1.40 (m, 1H).
실시예 210:
(1S,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-(1H-이미다졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 324) 및 (1R,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-(1H-이미다졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 323)
Figure pct01238
단계 1: 다이메틸 3-(1-트라이틸-1H-이미다졸-4-일)사이클로프로판-1,2-다이카복실레이트
Figure pct01239
자일렌(150 mL) 중 1,4-다이메틸 (2E)-부트-2-엔다이오에이트(10 g, 69.38 mmol), 4-메틸-N'-[(1E)-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]메틸리덴]벤젠-1-설포노하이드라자이드(2.85 g, 5.63 mmol) 및 칼륨 카본에이트(4.09 g, 29.59 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 150℃에서 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (±)-다이메틸 (1S,2S)-3-(1-트라이틸-1H-이미다졸-4-일)사이클로프로판-1,2-다이카복실레이트(4 g, 24%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 467.
단계 2: 2-(메톡시카보닐)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct01240
테트라하이드로퓨란(30 mL) 및 메탄올(10 mL) 중 1,2-다이메틸 3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1,2-다이카복실레이트(3.2 g, 6.85 mmol) 및 LiOH·H2O(288 mg, 6.86 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, 용액의 pH 값을 수소 클로라이드(1.0 mol/L)로 4까지 조정하였다. 생성된 혼합물을 3 x 100 mL의 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하여 2-(메톡시카보닐)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(1.2 g, 39%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 453.
단계 3: 메틸 2-(하이드록시메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01241
다이클로로메탄(40 mL) 중 2-(메톡시카보닐)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(3.0 g, 6.63 mmol)의 용액에 BH3-Me2S(2 mL, 21.09 mmol)를 첨가하였다. 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 메탄올로 급랭시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(하이드록시메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(1.5 g, 52%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.
단계 4: 메틸 2-[(메탄설폰일옥시)메틸]-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01242
다이클로로메탄(10 mL) 중 메틸 2-(하이드록시메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(537 mg, 1.23 mmol) 및 트라이에틸아민(371 mg, 3.67 mmol)의 용액에 메탄설폰일 클로라이드(281 mg, 2.45 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 용액을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 메틸 2-[(메탄설폰일옥시)메틸]-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(500 mg, 79%)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 517.
단계 5: 메틸 (2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01243
다이메틸 설폭사이드(10 mL) 중 메틸 2-[(메탄설폰일옥시)메틸]-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(620 mg, 1.20 mmol) 및 NaCN(118 mg, 2.41 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 50℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 혼합물을 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(440 mg, 82%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 448.
단계 6: (1R,2S,3S)-2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct01244
에탄올(10 mL), 테트라하이드로퓨란(10 mL) 및 물(10 mL) 중 메틸 2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(400 mg, 0.89 mmol) 및 나트륨 하이드록사이드(107 mg, 2.68 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 용액을 물로 희석하였다. 용액의 pH 값을 수소 클로라이드(1.0 mol/L)로 4까지 조정하였다. 용액을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(320 mg, 83%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 434.
단계 7: tert-부틸 N-(3-[[(2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01245
다이클로로메탄(10 mL) 중 2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(377 mg, 0.87 mmol), tert-부틸 N-[3-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(320 mg, 0.87 mmol) 및 피리딘(1 mL)의 용액에 POCl3(405 mg, 2.64 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(500 mg, 73%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 784.
단계 8: (1R,2S,3S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)-3-(1H-이미다졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1S,2R,3R)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(시아노메틸)-3-(1H-이미다졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01246
다이클로로메탄(5 mL) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(600 mg, 0.77 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하고, 이어서 다이클로로메탄으로 희석하였다. 용액의 pH 값을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 8까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(키네텍스 EVO C18 컬럼, 30 x 150, 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 ACN(20% ACN → 7분 내에 35%))로 정제하여 라세미체 생성물을 수득하였다. 라세미체 생성물을 키랄-HPLC로 정제하여 2개의 거울상 이성질체를 수득하였다. 화합물 323: 연황색 고체(16.7 mg, 5%). LCMS (ESI) [M+H]+ = 784. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.86 (s, 1H), 10.77 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.39 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.29 (s, 2H), 2.97-2.82 (m, 2H), 2.47-2.41 (m, 2H), 2.38-2.20 (m, 4H). 화합물 324: 연황색 고체(13.8 mg, 4%). LCMS (ESI) [M+H]+ = 784. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.86 (s, 1H), 10.77 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.39 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.29 (s, 2H), 2.97-2.82 (m, 2H), 2.47-2.41 (m, 2H), 2.38-2.20 (m, 4H).
실시예 211:
2-((8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 229)
Figure pct01247
단계 1: tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)이소퀴놀린-6-일]-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트
Figure pct01248
1,4-다이옥산(4 mL) 중 2-브로모-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(25 mg, 0.10 mmol), tert-부틸 N-[5-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일]-N-[(tert-부톡시)카보닐]카밤에이트(50 mg, 0.099 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(21 mg, 0.020 mmol), 잔트포스(23 mg, 0.040 mmol), 세슘 카본에이트(81 mg, 0.25 mmol)의 혼합물을 100℃에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)이소퀴놀린-6-일]-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트(20 mg, 0.030 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 666.
단계 2: tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((6-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트
Figure pct01249
1,4-다이옥산(15 mL) 중 tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-[8-클로로-7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)이소퀴놀린-6-일]-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트(60 mg, 0.090 mmol), tert-부틸 카밤에이트(264 mg, 2.25 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(19 mg, 0.018 mmol), 브렛포스(20 mg, 0.037 mmol), 세슘 카본에이트(147 mg, 0.45 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (tert-부톡시카보닐)(5-(8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-7-플루오로-3-((6-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노)이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일)카밤에이트(50 mg, 0.067 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 747.
단계 3: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01250
다이클로로메탄(3 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(290 mg, 0.39 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(10 mL)의 용액을 1시간 동안 20℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 용액의 pH 값을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 11까지 조정하였다. 조질 생성물을 소정 조건을 갖는 제조용 HPLC(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼, 30 x 150 mm, 5 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트) 및 ACN(10% ACN → 10분 내에 30%)로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(34.1 mg, 20%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 447.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.72 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.07 (s, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.23 (s, 2H), 4.98 (s, 2H), 3.84 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.05 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H), 1.94 (d, J = 1.5 Hz, 3H).
실시예 212:
(1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 332), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 331), (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 330) 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(추정됨)(화합물 329)
Figure pct01251
단계 1: 3-요오도-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct01252
에틸 아세테이트(200 mL) 중 5-요오도-1H-피라졸(10 g, 51.55 mmol), 3,4-다이하이드로-2H-피란(13 g, 154.55 mmol), TsOH(443 mg, 2.57 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 80℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/석유 에터(3/7)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-요오도-1-(옥산-2-일)-1H-피라졸(7.0 g, 25.18 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 279.
단계 2: (E)-메틸 3-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)아크릴레이트
Figure pct01253
N,N-다이메틸포름아미드(100 mL) 중 3-요오도-1-(옥산-2-일)-1H-피라졸(5 g, 17.98 mmol), 메틸 프로프-2-에노에이트(4.64 g, 53.90 mmol), 팔라듐 아세테이트(604 mg, 2.69 mmol), 트라이-o-톨릴 포스핀(1.09 g, 3.58 mmol), 트라이에틸아민(2.725 g, 26.93 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 110℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(15/85)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 (2E)-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]프로프-2-에노에이트(2.7 g, 11.44 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 237.
단계 3: 메틸 2-메틸-3-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)사이클로프로판카복실레이트
Figure pct01254
다이클로로메탄(30 mL) 및 에틸렌 글리콜 다이메틸 에터(150 mL) 중 메틸 (2E)-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]프로프-2-에노에이트(2.7 g, 11.43 mmol), 에틸다이페닐설파늄 트라이플루오로보란 플루오라이드(10.37 g, 34.31 mmol), 리튬 다이이소프로필아미드(20 mL, 373.40 mmol)의 혼합물을 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(4/6)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(1.5 g, 5.66 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 265.
단계 4: 2-메틸-3-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)사이클로프로판카복실산
Figure pct01255
테트라하이드로퓨란(15 mL) 및 물(15 mL) 중 메틸 2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(1.45 g, 5.49 mmol), LiOH(659 mg, 27.52 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수 상을 수소 클로라이드(1 mol/L)로 pH 3까지 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판-1-카복실산(1.3 g, 5.18 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 251.
단계 5: N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01256
다이클로로메탄(30 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(1.5 g, 5.21 mmol), 2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판-1-카복실산(1.3 g, 5.19 mmol), POCl3(1.6 g, 10.44 mmol), 피리딘(5 mL, 62.12 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(2/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (1S,3S)-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(1.26 g, 2.42 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 520.
단계 6: tert-부틸 7-플루오로-3-(2-메틸-3-(1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01257
1,4-다이옥산(160 mL) 중 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(1.3 g, 2.50 mmol), tert-부틸 카밤에이트(8.79 g, 75.05 mmol), 브렛포스(269 mg, 0.50 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(518 mg, 0.50 mmol), 세슘 카본에이트(3.27 g, 10.02 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(9/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(480 mg, 0.80 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 601.
단계 7: (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판카복스아미드(추정됨), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판카복스아미드(추정됨), (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판카복스아미드(추정됨) 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판카복스아미드(추정됨)
Figure pct01258
HCl/다이옥산(8 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-3-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(480 mg, 0.80 mmol), 메탄올(2 mL, 49.40 mmol)의 혼합물을 실온에서 10시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:ACN = 7분 내에 30%-40%)로 정제하여 혼합물(150 mg, 0.36 mmol)을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 332: 황색 고체(16.7 mg, 0.040 mmol). 체류 시간: 2.289분(리페어드 키랄 IC. 0.46 x 10 cm; 5 μm; MtBE(0.1% DEA):IPA = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 417.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.73-12.49 (m, 1H), 10.82-10.77 (m, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.61-7.35 (m, 2H), 6.96 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.32 (s, 2H), 6.06-5.97 (m, 1H), 2.42-2.29 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.73 (s, 1H), 1.29 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 331: 황색 고체(36.7 mg, 0.088 mmol). 체류 시간: 2.917분(리페어드 키랄 IC. 0.46 x 10 cm; 5 μm; MtBE(0.1% DEA):IPA = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 417.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.77-12.59 (m, 1H), 10.82 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.66-7.40 (m, 2H), 6.94 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.32 (s, 2H), 6.14-6.01 (m, 1H), 2.49-2.24 (m, 3H), 2.22 (s, 2H), 1.70-1.64 (m, 1H), 1.1-0.9 (m, 3H). 화합물 330: 황색 고체(17.8 mg, 0.043 mmol). 체류 시간: 3.720분 (리페어드 키랄 IC. 0.46 x 10 cm; 5 μm; MtBE(0.1% DEA):IPA = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 417.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.73-12.49 (m, 1H), 10.82-10.77 (m, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.61-7.35 (m, 2H), 7.09-6.82 (m, 1H), 6.32 (s, 2H), 6.15-5.72 (m, 1H), 2.43-2.32 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.77-1.69 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.0 Hz, 3H). 화합물 329: 황색 고체(37.4 mg, 0.090 mmol). 체류 시간: 6.054분(리페어드 키랄 IC. 0.46 x 10 cm; 5 μm; MtBE(0.1% DEA):IPA = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 417.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.77-12.58 (m, 1H), 10.82 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.65-7.37 (m, 2H), 6.94 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.32-6.02 (m, 3H), 2.48-2.30 (s, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.66 (s, 1H), 1.02 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 213:
(1S,2S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 335) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-이미다졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 334)
Figure pct01259
단계 1: 에틸 (2E)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]프로프-2-에노에이트
Figure pct01260
1,4-다이옥산(100 mL) 및 물(20 mL) 중 4-요오도-1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸(7.41 g, 16.98 mmol), 에틸 (2E)-3-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)프로프-2-에노에이트(9.60 g, 42.46 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(1.96 g, 1.69 mmol), 칼륨 포스페이트(10.82 g, 50.97 mmol)의 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(20/80)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 에틸 (2E)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]프로프-2-에노에이트(2 g, 4.90 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 409.
단계 2: 에틸 트랜스-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01261
다이메틸 설폭사이드(20 mL) 중 S,S-다이메틸메탄설핀일 요오다이드(3.02 g, 13.72 mmol) 및 t-BuOK(1.54 g, 13.72 mmol)의 혼합물을 30분 동안 25℃에서 교반하였다. 에틸 (2E)-3-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]프로프-2-에노에이트(1.4 g, 3.42 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 15시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물로 희석하고, 이어서 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 다이클로로메탄/메탄올(20/1)로 용리하는 잔사를 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 에틸 트랜스-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(360 mg, 0.85 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 423.
단계 3: 트랜스-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct01262
테트라하이드로퓨란(10 mL) 및 물(10 mL) 중 에틸 트랜스-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(600 mg, 1.42 mmol) 및 LiOH(170 mg, 7.09 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 수소 클로라이드로 pH 4 내지 5까지 조정하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 트랜스-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(460 mg, 1.17 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 395.
단계 4: 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01263
다이클로로메탄(20 mL) 및 피리딘(3 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(364 mg, 1.26 mmol), 트랜스-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복실산(500 mg, 1.26 mmol)의 용액에 인 옥시클로라이드(290 mg, 1.89 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 생성물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(300 mg, 0.45 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 664.
단계 5: 트랜스-tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01264
1,4-다이옥산(20 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(600 mg, 0.90 mmol), tert-부틸 카밤에이트(2.1 g, 17.92 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(187 mg, 0.18 mmol), 브렛포스(193 mg, 0.36 mmol) 및 세슘 카본에이트(1.17 g, 3.59 mmol)의 혼합물을 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(300 mg, 0.40 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 745.
단계 6: (1S,2S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1R,2R)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1H-이미다졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01265
트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[2-[1-(트라이페닐메틸)-1H-이미다졸-4-일]사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(200 mg, 0.26 mmol)의 용액을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% 나트륨 바이카본에이트)로 정제하여 라세미체 생성물(40 mg,0.09 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. 라세미체를 키랄-HPLC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대한 이미다졸 트랜스; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 335: 체류 시간: 3.38분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 403; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.27(s, 1H), 8.45 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.42 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 2.51-2.46 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.19-2.18(m, 1H), 1.57-1.52 (m, 1H), 1.41-1.38 (m, 1H). 화합물 334: 체류 시간: 5.68분(키랄팩 ID-3, 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 403; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.27(s, 1H), 8.45 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.42 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 2.51-2.46 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.19-2.18(m, 1H), 1.57-1.52 (m, 1H), 1.41-1.38 (m, 1H).
실시예 214:
(1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 340), (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 339), (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 338) 및 (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 337)
Figure pct01266
단계 1: 1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-요오도-1H-피라졸
Figure pct01267
N,N-다이메틸포름아미드(30 mL) 중 4-요오도-1H-피라졸(3 g, 15.47 mmol), 2-브로모-1,1-다이플루오로에탄(2.7 g, 18.63 mmol), 칼륨 카본에이트(4.3 g, 31.11 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(20/80)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에 적용하여 1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-요오도-1H-피라졸(3.3 g, 12.74 mmol)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 259.
단계 2: (E)-tert-부틸 3-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)아크릴레이트
Figure pct01268
N,N-다이메틸포름아미드(30 mL) 중 1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-요오도-1H-피라졸(3.3 g, 12.79 mmol), tert-부틸 프로프-2-에노에이트(4.9 g, 38.23 mmol), 팔라듐 아세테이트(430 mg, 1.92 mmol), 트라이-o-톨릴 포스핀(778 mg, 2.56 mmol), 트라이에틸아민(1.94 g, 19.172 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 120℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 층을 합하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(60/40)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (2E)-3-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]프로프-2-에노에이트(2.37 g, 9.15 mmol)를 연황색 고체로서 수득하였다. LC/MS (ESI) [M+H]+ = 259.
단계 3: tert-부틸 2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복실레이트
Figure pct01269
다이클로로메탄(20 mL) 중 tert-부틸 (2E)-3-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]프로프-2-에노에이트(2.9 g, 11.23 mmol), 에틸렌 글리콜 다이메틸 에터(150 mL, 1.55 mol), 리튬 다이이소프로필아미드(19.6 mL, 365.93 mmol) 및 에틸다이페닐설파늄 트라이플루오로보란 플루오라이드(10.2 g, 33.76 mmol)의 혼합물을 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(7/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실레이트(1.9 g, 6.62 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 287.
단계 4: 2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복실산
Figure pct01270
트라이플루오로아세트산(10 mL) 및 다이클로로메탄(20 mL) 중 tert-부틸 2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실레이트(1.9 g, 6.64 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 소정 조건에 의한 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; CH3CN/H2O = 5%/95%에서 30분 내에 CH3CN/H2O = 40%/60%까지 증가함)로 정제하여 2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실산(1.13 g, 4.89 mmol)을 자주색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 231.
단계 5: N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01271
다이클로로메탄(50 mL) 중 2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실산(1.1 g, 4.78 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(1.4 g, 4.87 mmol), 인 옥시클로라이드(1.5 g, 9.78 mmol), 피리딘(5 mL, 62.118 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(8/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(1.48 g, 2.96 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 500.
단계 6: tert-부틸 3-(2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미도)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01272
1,4-다이옥산(120 mL) 중 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(1.4 g, 2.80 mmol), tert-부틸 카밤에이트(9.85 g, 84.08 mmol), 브렛포스(302 mg, 0.56 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(581 mg, 0.56 mmol), 세슘 카본에이트(3.66 g, 11.23 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(8/2)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(1.44 g, 2.48 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 581.
단계 7: (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드, (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드, (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드 및 (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01273
메탄올(10 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-[1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(1.4 g, 2.41 mmol), HCl/다이옥산(30 mL, 354.12 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% 나트륨 바이카본에이트:ACN = 7분 내에 37%-45%)로 정제하여 혼합물(550 mg, 1.15 mmol)을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 340: 황색 고체(46.5 mg, 0.097 mmol). 체류 시간: 1.65분(룩스 5u 셀룰로스-3. 4.6 x 250 mm, 5 μm; MeOH(0.1% DEA); 4.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.72 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.45-7.34 (m, 2H), 6.95 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.50-6.13 (m, 3H), 4.55 (td, J = 15.1, 3.8 Hz, 2H), 2.31-2.22 (m, 5H), 1.66-1.51 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H). 화합물 339: 황색 고체(163.3 mg, 0.34 mmol). 체류 시간: 1.86분(룩스 5u 셀룰로스-3. 4.6 x 250 mm, 5 μm; MeOH(0.1% DEA); 4.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.77 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.46-7.36 (m, 2H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.52-6.16 (m, 3H), 4.60 (td, J = 15.2, 3.8 Hz, 2H), 2.37-2.30 (m, 1H), 2.22(s,3H), 2.15 (t, J = 4.7 Hz, 1H) 1.70-1.55 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 338: 황색 고체(173.9 mg, 0.36 mmol). 체류 시간: 2.23분(룩스 5u 셀룰로스-3. 4.6 x 250 mm, 5 μm; MeOH(0.1% DEA); 4.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.77 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.46-7.36 (m, 2H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.52-6.16 (m, 3H), 4.60 (td, J = 15.2, 3.8 Hz, 2H), 2.37-2.30 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.15 (t, J = 4.7 Hz, 1H) 1.69-1.56 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 337: 황색 고체(66.3 mg, 0.14 mmol). 체류 시간: 2.91분(룩스 5u 셀룰로스-3. 4.6 x 250 mm, 5 μm; MeOH(0.1% DEA); 4.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.71 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.45-7.34 (m, 2H), 6.95 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.51-6.13 (m, 3H), 4.55 (td, J = 15.2, 3.8 Hz, 2H), 2.31-2.15 (m, 5H), 1.66-1.52 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
실시예 215:
(1R,2S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-((다이메틸아미노)메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 342) 및 (1S,2R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-((다이메틸아미노)메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 341)
Figure pct01274
단계 1: 3-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온
Figure pct01275
다이옥산(10 mL) 중 3-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온(390 mg, 3.48 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(500 mg, 1.73 mmol), 4-다이메틸아미노피리딘(425 mg, 3.47 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 120℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 3-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온(450 mg, 1.18 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 382.
단계 2: 시스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01276
IPA(20 mL) 및 물(2 mL) 중 3-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-2,4-다이온(450 mg, 1.17 mmol)의 용액에 NaBH4(224 mg, 5.92 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 층을 합하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 시스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(300 mg, 0.78 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 386.
단계 3: 시스-[2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]사이클로프로필]메틸 메탄설포네이트
Figure pct01277
다이클로로메탄(20 mL) 중 시스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(하이드록시메틸)사이클로프로판-1-카복스아미드(300 mg, 0.77 mmol), 트라이에틸아민(236 mg, 2.33 mmol)의 용액에 메탄설폰일 클로라이드(177 mg, 1.54 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 물로 세척하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하여 시스-[2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]사이클로프로필]메틸 메탄설포네이트(300 mg,0.64 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 464.
단계 4: 시스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01278
테트라하이드로퓨란(5 mL) 중 시스-[2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카바모일]사이클로프로필]메틸 메탄설포네이트(300 mg, 0.64 mmol), 다이메틸아민(292 mg, 6.47 mmol)의 용액을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(3/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 시스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드(250 mg, 0.60 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 413.
단계 5: 시스-tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01279
시스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드를 사용하여 표제 화합물을 실시예 135(화합물 36)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 제조하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 494.
단계 6: (1R,2S)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1S,2R)-N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01280
시스-tert-부틸 N-(3-[[2-[(다이메틸아미노)메틸]사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트를 사용하여 실시예 135(화합물 36)에 대해 기술된 바와 유사한 방식으로 표제 화합물(라세미체)을 제조하였다. 라세미체를 키랄-HPLC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 다이메틸아미노메틸; 임의로 할당된 절대 입체화학): 화합물 342: 체류 시간: 1.44분(룩스 셀룰로스-4, 0.46 x 5 cm; 3 μm; Hex(8 mM NH3):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 394; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.31(s, 1H), 8.48 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.41(s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.45 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.05-3.03 (m, 2H), 2.57 (s, 6H), 2.31 (s, 3H), 2.21-2.15 (m, 1H), 1.62-1.56 (m, 1H), 1.30-1.25 (m, 1H), 1.18-1.10 (m,1H). 화합물 341: 체류 시간: 2.87분(룩스 셀룰로스-4, 0.46 x 5 cm; 3 μm; Hex(8 mM NH3):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 394; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.31(s, 1H), 8.48 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.41(s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.45 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.05-3.03 (m, 2H), 2.57 (s, 6H), 2.31 (s, 3H), 2.21-2.15 (m, 1H), 1.62-1.56 (m, 1H), 1.30-1.25 (m, 1H), 1.18-1.10 (m,1H).
실시예 216:
(1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드(화합물 381), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드(화합물 380), (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드(화합물 379) 및 (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드(화합물 382)
Figure pct01281
단계 1: 2-(4-(2-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카바모일)-3-메틸사이클로프로필)-1H-피라졸-1-일)에틸 메탄설포네이트
Figure pct01282
다이클로로메탄(10 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(670 mg, 1.20 mmol), 트라이에틸아민(604 mg, 5.97 mmol), 메탄설폰일 클로라이드(273 mg, 2.38 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 희석하였다. 생성된 혼합물을 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 2-(4-((2-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카바모일)-3-메틸사이클로프로필)-1H-피라졸-1-일)에틸 메탄설포네이트(800 mg, 1.25 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 639.
단계 2: tert-부틸 7-플루오로-3-(2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01283
N,N-다이메틸포름아미드(10 mL) 중 2-(4-(2-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카바모일)-3-메틸사이클로프로필)-1H-피라졸-1-일)에틸 메탄설포네이트(700 mg, 1.10 mmol), 아제티딘-3-올(320 mg, 4.38 mmol), 트라이에틸아민(332 mg, 3.28 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 60℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-플루오로-3-(2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트(180 mg, 0.29 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 616.
단계 3: (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드, (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드 및 (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01284
메탄올(3 mL) 및 HCl/다이옥산(10 mL, 6 mol/L) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[1-[2-(3-하이드록시아제티딘-1-일)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(180 mg, 0.29 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% NH4HCO3: ACN = 8분 내에 2%-50%)로 정제하여 혼합물을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 381: 황색 고체(11.1 mg, 0.022 mmol). 체류 시간: 2.342분(키랄팩 IC-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 516.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.71 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.95 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 5.24 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.21-4.05 (m, 1H), 4.01-3.83 (m, 2H), 3.51-3.38 (m, 2H), 2.78-2.69 (m, 2H), 2.68-2.60 (m, 2H), 2.28-2.19 (m, 4H), 2.18-2.09 (m, 1H), 1.67-1.51 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H). 화합물 380: 황색 고체(11.7 mg, 0.023 mmol). 체류 시간: 3.412분(키랄팩 IC-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 516.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.71 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.95 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 5.31-5.11 (m, 1H), 4.19-4.01 (m, 1H), 3.95 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.50-3.39 (m, 2H), 2.76-2.61 (m, 4H), 2.22 (s, 4H), 2.19-2.12 (m, 1H), 1.67-1.51 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H). 화합물 379: 황색 고체(22.0 mg, 0.043 mmol). 체류 시간: 9.180분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 75:25; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 516.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.31 (s, 2H), 5.23 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.19-4.08 (m, 1H), 4.01 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.49-3.37 (m, 2H), 2.74 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.69-2.61 (m, 2H), 2.37-2.24 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.67-1.53 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 382: 황색 고체(18.5 mg, 0.036 mmol). 체류 시간: 11.776분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 75:25; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 516.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.75 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.31 (s, 2H), 5.23 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.19-4.08 (m, 1H), 4.01 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.46-3.37 (m, 2H), 2.75 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.69-2.61 (m, 2H), 2.34-2.27 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.67-1.53 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
실시예 217:
2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 230)
Figure pct01285
단계 1: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01286
1,4-다이옥산(10 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(100 mg, 0.35 mmol)의 용액에 2-브로모-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(110 mg, 0.45 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(72 mg, 0.07 mmol), 잔트포스(80 mg, 0.14 mmol) 및 세슘 카본에이트(290 mg, 0.89 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 110℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(15/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(45 mg, 29%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 451.2.
단계 2: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01287
1,4-다이옥산(45 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(500 mg, 1.11 mmol)의 혼합물에 tert-부틸 카밤에이트(3.25 g, 27.74 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(175 mg, 0.17 mmol), 브렛포스(125 mg, 0.23 mmol) 및 세슘 카본에이트(1.8 g, 5.525 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(350 mg, 59%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS45 (ESI) [M+H]+ = 532.3.
단계 3: 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01288
트라이플루오로아세트산(10 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(350 mg, 0.66 mmol) 및 다이클로로메탄(5 mL)의 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 용액의 pH 값을 메탄올 중 NH3(7 M)으로 10까지 조정하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 컬럼 19 x 15 mm 5 μm; 물 중 10 mmol NH4HCO3: ACN(8분 내에 20%-40%))로 직접 정제하여 2-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(90 mg, 32%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 432.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.27 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.39 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.78(d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.98 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.84-3.81 (m, 2H), 3.05-3.03 (m, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.22 (s, 3H).
실시예 218:
N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-아자바이사이클로[2.1.1]헥산-2-카복스아미드(화합물 336)
Figure pct01289
단계 1: 4-니트로페닐 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카밤에이트
Figure pct01290
다이클로로메탄(10 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(500 mg, 1.74 mmol), 피리딘(1 mL, 12.424 mmol), 4-니트로페닐 클로로포름에이트(1.05 g, 5.21 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하여 4-니트로페닐 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카밤에이트(800 mg, 1.77 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 453.
단계 2: N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-아자-바이사이클로[2.1.1]헥산-2-카복스아미드
Figure pct01291
1-메틸-2-피롤리딘온(10 mL) 중 2-아자바이사이클로[2.1.1]헥산(658 mg, 7.92 mmol), 피리딘(2 mL), 4-니트로페닐 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]카밤에이트(500 mg, 1.10 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 30℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-아자바이사이클로[2.1.1]헥산-2-카복스아미드(400 mg, 1.01 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 397.
단계 3: tert-부틸 3-(2-아자-바이사이클로[2.1.1]헥산-2-카복스아미도)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01292
1,4-다이옥산(100 mL) 중 N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-아자바이사이클로[2.1.1]헥산-2-카복스아미드(900 mg, 2.27 mmol), tert-부틸 카밤에이트(7.98 g, 68.12 mmol), 브렛포스(244 mg, 0.46 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(470 mg, 0.45 mmol) 및 세슘 카본에이트(2.96 g, 9.09 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-[3-[([2-아자바이사이클로[2.1.1]헥산-2-일]카보닐)아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(110 mg, 0.23 mmol)를 자주색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 478.
단계 4: N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-아자-바이사이클로[2.1.1]헥산-2-카복스아미드
Figure pct01293
메탄올(2 mL) 및 HCl/다이옥산(10 mL, 6 mol/L) 중 tert-부틸 N-[3-[([2-아자바이사이클로[2.1.1]헥산-2-일]카보닐)아미노]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(100 mg, 0.21 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(10 mmol/L NH4HCO3): CH3CN = 14분 내에 0%-45% B)로 정제하여 N-[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-아자바이사이클로[2.1.1]헥산-2-카복스아미드(45.9 mg, 0.12 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 378.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.39 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.43 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.26 (s, 2H), 4.65 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.46-3.39 (m, 2H), 2.88 (s, 1H), 2.24 (s, 3H), 1.94 (s, 2H), 1.37-1.28 (m, 2H).
실시예 219:
(1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 349), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 348), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 347) 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 346)
Figure pct01294
단계 1: 2-(4-(2-(8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일카바모일)-3-메틸사이클로프로필)-1H-피라졸-1-일)에틸 메탄설포네이트
Figure pct01295
다이클로로메탄(5 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 0.36 mmol), 트라이에틸아민(72 mg, 0.71 mmol), 메탄설폰일 클로라이드(61 mg, 0.53 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 이어서 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[1-[2-(메탄설폰일옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(240 mg, 0.38 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 639.
단계 2: tert-부틸 7-플루오로-3-(2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01296
N,N-다이메틸포름아미드(6 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[1-[2-(메탄설폰일옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(600 mg, 0.94 mmol), 모폴린(409 mg, 4.70 mmol) 및 칼륨 카본에이트(260 mg, 1.88 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 70℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 이어서 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(9/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-[1-[2-(모폴린-4-일)에틸]-1H-피라졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(288 mg, 0.46 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 630.
단계 3: (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드, (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-(2-모폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01297
tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-메틸-3-[1-[2-(모폴린-4-일)에틸]-1H-피라졸-4-일]사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(280 mg, 0.45 mmol), 메탄올(4 mL) 및 HCl/1,4-다이옥산(10 mL, 6 mol/L)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% NH4HCO3: ACN = 8분 내에 30%-58%)로 정제하여 혼합물을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 349: 황색 고체(19.1 mg, 0.036 mmol). 체류 시간: 3.550분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 530.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.71 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.95 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.14 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.56 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.66 (t, J = 4.0 Hz, 2H), 2.39 (s, 4H), 2.27-2.14 (m, 5H), 1.64-1.48 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 348: 황색 고체(29.2 mg, 0.055 mmol). 체류 시간: 2.801분(키랄팩 IC-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 530.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.18 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.55 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.68 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.41-2.36 (m, 4H), 2.35-2.29 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.69-2.51 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 347: 황색 고체(16.7 mg, 0.032 mmol). 체류 시간: 3.608분(키랄팩 IC-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 530.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.71 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.44-7.37 (m, 1H), 7.26 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.14 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.56 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.66 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.43-2.36 (m, 4H), 2.27-2.13 (m, 5H), 1.66-1.48 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 346: 황색 고체(33.1 mg, 0.063 mmol). 체류 시간: 6.022분(키랄팩 IE-3. 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 530.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.31 (s, 2H), 4.19 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.55 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.68 (s, 2H), 2.38 (s, 4H), 2.34-2.28 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.67-1.53 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
실시예 220:
(1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 351), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 353), (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 352) 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 350)
Figure pct01298
단계 1: 5-브로모-4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘
Figure pct01299
1,4-다이옥산(15 mL) 중 2,5-다이브로모-4-메틸피리딘(584 mg, 2.32 mmol)의 용액에 2-(트라이부틸스탄일)-1,3-옥사졸(1.00 g, 2.79 mmol) 및 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(268.95 mg, 0.23 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 16시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘(470 mg, 84%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 439.1.
단계 2: 4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘
Figure pct01300
1,4-다이옥산(15 mL) 중 5-브로모-4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)피리딘(470 mg, 1.96 mmol)의 용액에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1,3,2-다이옥사보롤란(4.99 g, 19.65 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(143.85 mg, 0.19 mmol) 및 칼륨 아세테이트(482.36 mg, 4.91 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 16시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(330 mg, 59%)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 287.1.
단계 3: N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01301
1,4-다이옥산(16 mL) 중 N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(380 mg, 0.78 mmol)의 용액에 4-메틸-2-(1,3-옥사졸-2-일)-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(448.66 mg, 1.56 mmol), 칼륨 카본에이트(325.06 mg, 2.35 mmol), X-Phos(37.37 mg, 0.07 mmol), X-Phos-PdCl-2nd G(59.57 mg, 0.07 mmol) 및 물(3.2 mL)을 첨가하였다. 반응 생성물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(25/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(210 mg, 52%)를 주황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI): [M+H]+ = 517.2.
단계 4: tert-부틸 (7-플루오로-3-(2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01302
1,4-다이옥산(10 mL) 중 N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(210 mg, 0.40 mmol)의 용액에 tert-부틸 카밤에이트(1.19 g, 10.15 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(63.07 mg, 0.06 mmol), 브렛포스(43.61 mg, 0.08 mmol) 및 세슘 카본에이트(661.78 mg, 2.03 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(25/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-tert-부틸 (7-플루오로-3-(2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(140 mg, 58%)를 주황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 598.3.
단계 5: (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01303
다이클로로메탄(15 mL) 중 트랜스-tert-부틸 (7-플루오로-3-(2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미도)-6-(4-메틸-6-(옥사졸-2-일)피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(310 mg, 0.51 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(15 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액의 pH 값을 메탄올 중 암모니아(7 mol/L)로 8까지 조정하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 혼합물(120 mg, 46%)을 황색 고체로서 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 단리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 351: 황색 고체(5.7 mg, 5%). 체류 시간: 2.261분(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼, 5 μm, 19 x 150 mm; 물(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분 내에 25.0% ACN → 50.0%); LCMS (ESI) [M+H]+ = 498.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.73 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.40-8.30 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 7.55-7.45 (m, 2H), 7.25 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.35 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.22 (dd, J = 8.9, 4.8 Hz, 1H), 2.17 - 2.11 (m, 1H), 1.57 (dt, J = 8.9, 6.3 Hz, 1H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 353: 황색 고체(5.1 mg, 4%). 체류 시간: 2.691분(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼, 5 μm, 19 x 150 mm; 물(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분 내에 25.0% ACN → 50.0%); LCMS (ESI) [M+H]+ = 498.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.73 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.40-8.30 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 7.58-7.47 (m, 2H), 7.25 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.36 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.22 (dd, J = 8.9, 4.8 Hz, 1H), 2.18- 2.09 (m, 1H), 1.57 (dp, J = 8.7, 6.2 Hz, 1H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 3H). 화합물 352: 황색 고체(26.5 mg, 22%); 체류 시간: 7.975분(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼, 5 μm, 19 x 150 mm; 물(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분 내에 25.0% ACN → 50.0%); LCMS (ESI) [M+H]+ = 498.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.77 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.39-8.30 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 7.58-7.47 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.00 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.36 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.32-2.28 (m, 1H), 2.12 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.60 (ddd, J = 9.1, 6.4, 4.8 Hz, 1H), 0.96 (d, J = 6.2 Hz, 3H). 화합물 350: 황색 고체(22.9 mg, 19%). 체류 시간: 9.196분(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼, 5 μm, 19 x 150 mm; 물(0.05% NH3H2O) 및 ACN(7분 내에 25.0% ACN → 50.0%); LCMS (ESI) [M+H]+ = 498.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.78 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.39-8.31 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 7.59- 7.47 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.00 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.36 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.30 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.12 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.66-1.54 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
실시예 221:
2'-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-6'-메틸-5',6'-다이하이드로스피로[사이클로프로판-1,4'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-7'(8'H)-온(화합물 228)
Figure pct01304
단계 1: 8'-[[6-(4-아미노피리딘-3-일)-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]아미노]-3'-메틸-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-4'-온
Figure pct01305
1,4-다이옥산(12 mL) 중 8'-브로모-3'-메틸-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-4'-온(200 mg, 0.74 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(225 mg, 0.78 mmol), 3세대 t-Bu브렛포스 전촉매(266 mg, 0.31 mmol), t-Bu브렛포스(151 mg, 0.32 mmol), 세슘 카본에이트(1.27 g, 3.89 mmol)의 혼합물을 준비하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 120℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8'-[[6-(4-아미노피리딘-3-일)-8-클로로-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]아미노]-3'-메틸-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-4'-온(110 mg, 31%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 477.
단계 2: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([3'-메틸-4'-옥소-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-8'-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01306
1,4-다이옥산(5 mL) 중 8'-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-3'-메틸-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-4'-온(110 mg, 0.23 mmol), tert-부틸 카밤에이트(668 mg, 5.70 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(48 mg, 0.046 mmol), 세슘 카본에이트(375 mg, 1.15 mmol), 브렛포스(37 mg, 0.069 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([3'-메틸-4'-옥소-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-8'-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(80 mg, 62%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 558.
단계 3: 8'-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-3'-메틸-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-4'-온
Figure pct01307
다이클로로메탄(2 mL) 및 메탄올(2 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([3'-메틸-4'-옥소-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-8'-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(60 mg, 0.11 mmol), 수소 클로라이드(2 mL)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(키네텍스 EVO C18 컬럼, 30 x 150, 5 μm; 물(10 mmol/L NH4HCO3) 및 ACN(4.5분 내에 10% → 70%))로 정제하여 8'-[[8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-3'-메틸-2',3',4',5'-테트라하이드로스피로[사이클로프로판-1,1'-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀]-4'-온(2.9 mg, 6%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 458; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.27 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.51 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.39 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.11 (s, 2H), 5.61 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.73 (s, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.24-1.18 (m, 2H), 0.96-094 (m, 2H).
실시예 222:
(1R,2R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 357), (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 358), (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 359) 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 360)
Figure pct01308
단계 1: N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01309
8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민(280.6 mg, 0.87 mmol), 2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산(420 mg, 2.33 mmol), 인 옥시클로라이드(298.4 mg, 1.95 mmol), 피리딘(5 mL), 다이클로로메탄(15 mL)의 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 건조하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(4/6)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 (1S,3S)-N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드(1.1 g, 2.27 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 485.
단계 2: tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-(8-클로로-7-플루오로-3-[[(1S,2R,3S)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트
Figure pct01310
1,4-다이옥산(5 mL) 중 N-(8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(400 mg, 0.83 mmol), tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[4-메틸-5-(테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일]카밤에이트(720 mg, 1.66 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(190 mg, 0.16 mmol), 칼륨 포스페이트(520 mg, 2.45 mmol) 및 물(1 mL)의 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 실온으로 냉각하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(1/9)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-(8-클로로-7-플루오로-3-[[2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트(545 mg, 0.82 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 665.
단계 3: tert-부틸 N-[6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-3-[[(1S,2R,3S)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01311
1,4-다이옥산(30 mL) 중 tert-부틸 N-[(tert-부톡시)카보닐]-N-[5-(8-클로로-7-플루오로-3-[[2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-6-일)-4-메틸피리딘-3-일]카밤에이트(1.15 g, 1.73 mmol), tert-부틸 카밤에이트(5.06 g, 43.19 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(356.5 mg, 0.34 mmol), 브렛포스(373.8 mg, 0.70 mmol) 및 세슘 카본에이트(2.25 g, 6.91 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 110℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(30/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-[6-(5-[비스[(tert-부톡시)카보닐]아미노]-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로-3-[[2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(1.0 g, 1.34 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 746.
단계 4: (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드, (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드, (1S,2R,3S)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드 및 (1R,2S,3R)-N-(8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01312
4 M 1,4-다이옥산 중 HCl(50 mL) 중 N-[8-아미노-6-(5-아미노-4-메틸피리딘-3-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]-2-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(400 mg, 0.90 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% NH4HCO3:ACN = 9분 내에 5%-50%)로 정제하여 이성질체의 혼합물을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 357: 황색 고체(11.4 mg, 0.026 mmol). 체류 시간: 2.794분(룩스 3 μ 셀룰로스-3. 100 x 4.6 mm; MeOH(20 mmNH3); 4.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 446.3; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.30 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.99 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.34 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 2.23-2.1 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.77-1.52 (m, 1H), 1.37 (d, J = 6.2 Hz, 3H). 화합물 358: 황색 고체(101.8 mg, 0.23 mmol). 체류 시간: 3.089분(룩스 3 μ 셀룰로스-3. 100 x 4.6 mm; MeOH(20 mmNH3); 4.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 446.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.74 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.26 (s, 2H), 5.26 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.33-2.25 (m, 1H), 2.11 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.92 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.66-1.53 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 359: 황색 고체(91.3 mg, 0.21 mmol). 체류 시간: 2.505분(키랄팩 IC-3. 100 x 3 mm, 3 μm; MeOH:ACN = 1:1(10 mmNH3); 2.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 446.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.74 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.85 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.25 (s, 2H), 5.26 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.33-2.25 (m, 1H), 2.11 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.92 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 1.66-1.53 (m, 1H), 0.96 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 360: 황색 고체(17.2 mg, 0.039 mmol). 체류 시간: 2.084분(키랄팩 IC-3. 100 x 3 mm, 3 μm; MeOH:ACN = 1:1(10 mmNH3); 2.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 446.3; 1H NMR (300 MHz, 메탄올-d 4) δ 9.30 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.99 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.34 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 2.21-2.12 (m, 1H), 2.08 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 1.71-1.52 (m, 1H), 1.37 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
실시예 223:
(S)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 361) 및 (R)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 362)
Figure pct01313
단계 1: 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01314
1,4-다이옥산(15 mL) 중 2-브로모-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(250 mg, 0.98 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(282 mg, 0.98 mmol), 3세대 t-Bu브렛포스 전촉매(335 mg, 0.39 mmol), t-Bu브렛포스(189 mg, 0.39 mmol), 세슘 카본에이트(1.6 g, 4.91 mmol)의 용액을 2시간 동안 130℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(200 mg, 44%)을 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.
단계 2: tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-4-메틸리덴-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01315
1,4-다이옥산(5 mL) 중 2-[[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]아미노]-6-메틸-4-메틸리덴-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(180 mg, 0.39 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.14 g, 9.73 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(81 mg, 0.078 mmol), 세슘 카본에이트(636 mg, 1.95 mmol), 브렛포스(63 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-4-메틸리덴-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(160 mg, 76%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 544.
단계 3: tert-부틸 N-[3-([4,6-다이메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01316
메탄올(10 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-3-([6-메틸-4-메틸리덴-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(140 mg, 0.26 mmol), 탄소 상 팔라듐(200 mg)의 혼합물을 수소 하에 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[3-([4,6-다이메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(134 mg, 95%)를 연황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 546.
단계 4: (S)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온 및 (R)-2-((8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)아미노)-4,6-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온
Figure pct01317
다이클로로메탄(2 mL) 중 tert-부틸 N-[3-([4,6-다이메틸-7-옥소-4H,5H,6H,7H,8H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일]아미노)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(150 mg, 0.28 mmol), 수소 클로라이드(2 mL)의 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC[키네텍스 EVO C18 컬럼, 30 x 150, 5 μm;물(10 mmol/L NH4HCO3) 및 ACN(7분 내에 25% → 42%)]로 정제하여 라세미체 생성물(50 mg, 41%)을 황색 고체로서 수득하였다. 라세미체 생성물을 Prep-SFC로 정제하여 단일 거울상 이성질체를 수득하였다: 화합물 362: 황색 고체(5.7 mg, 11%). 체류 시간: 0.867 분, 키랄셀 OJ-3, 4.6 x 50 mm, 3 μm; CO2/메탄올 = (50%)/(0.1% DEA, 50%); LCMS (ESI) [M+H]+ = 446; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.28 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.50 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.39 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.11 (s, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.13-4.81 (m, 2H), 3.99-3.51 (m, 2H), 3.32-3.35(m, 1H) 2.97 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.26 (d, J = 7.0 Hz, 3H). 화합물 361: 황색 고체(5.8 mg, 12%). 체류 시간: 1.268분, 키랄셀(CHIRALCEL) OJ-3, 4.6 x 50 mm, 3 μm; CO2/메탄올 = (50%)/(0.1% DEA, 50%); LCMS (ESI) [M+H]+ = 446. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.28 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.50 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.39 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.11 (s, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.13-4.81 (m, 2H), 3.99-3.51 (m, 2H), 3.32-3.35(m, 1H) 2.97 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.26 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 224:
(1S,2S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 363) 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 364)
Figure pct01318
단계 1: 에틸 (2Z)-3-(1H-피라졸-5-일)프로프-2-에노에이트
Figure pct01319
테트라하이드로퓨란(100 mL) 중 에틸 2-[비스(2,2,2-트라이플루오로에톡시)포스포릴]아세테이트(3.04 g, 9.15 mmol), 나트륨 하이드라이드(400 mg, 16.66 mmol), 1H-피라졸-5-카브알데하이드(800 mg, 8.32 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 층을 합하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/3)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 (2Z)-3-(1H-피라졸-5-일)프로프-2-에노에이트(500 mg, 2.99 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 167.
단계 2: 에틸 (2Z)-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]프로프-2-에노에이트
Figure pct01320
에틸 아세테이트(20 mL) 중 에틸 (2Z)-3-(1H-피라졸-5-일)프로프-2-에노에이트(530 mg, 3.18 mmol), 3,4-다이하이드로-2H-피란(536 mg, 6.37 mmol), TsOH(27 mg, 0.15 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 80℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/10)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 에틸 (2Z)-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]프로프-2-에노에이트(600 mg, 2.39 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 251.
단계 3: 에틸 트랜스-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01321
DMSO(20 mL) 중 트라이메틸(옥소)-l^[6]-설판일륨 요오다이드(3.52 g, 15.99 mmol), t-BuOK(1.792 g, 15.97 mmol), 에틸 (2Z)-3-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]프로프-2-에노에이트(2 g, 7.99 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 층을 합하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/10)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-에틸-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(400 mg, 1.52 mmol)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 265.
단계 4: 트랜스-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct01322
테트라하이드로퓨란(10 mL) 및 물(10 mL) 중 트랜스 에틸-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복실레이트(400 mg, 1.51 mmol), 리튬 하이드록사이드(180 mg, 7.51 mmol)의 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수소 클로라이드로 pH 4까지 조정하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 층을 합하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복실산(300 mg, 1.27 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 237.
단계 5: 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01323
피리딘(1 mL) 및 다이클로로메탄(10 mL) 중 트랜스-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복실산(350 mg, 1.48 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(426 mg, 1.48 mmol)의 혼합물에 인 옥시클로라이드(450 mg, 2.93 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(95/5)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(300 mg, 0.59 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 506.
단계 5: 트랜스-tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트
Figure pct01324
다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 카밤에이트(1.67 g, 14.25 mmol), 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판-1-카복스아미드(360 mg, 0.71 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(150 mg, 0.14 mmol), 브렛포스(153 mg, 0.28 mmol), 세슘 카본에이트(930 mg, 2.85 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 질소 하에 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼 상에 적용하여 트랜스-tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(200 mg, 0.34 mmol)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 587.
단계 6: (1S,2S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1R,2R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1H-피라졸-5-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01325
트라이플루오로아세트산(5 mL) 중 트랜스-tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[[-2-[1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-5-일]사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(200 mg, 0.34 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 역상 크로마토그래피(아세토니트릴 0-50%/물 중 0.1% NH4HCO3)로 정제하여 라세미체 생성물(70 mg, 0.17 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. 라세미체 생성물을 키랄-HPLC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다(사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸): 화합물 364: 체류 시간:1.69분(룩스 셀룰로스-4, 0.46 x 5 cm; 3 μm; Hex(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 402; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.29 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.58-7.56 (m, 1H), 7.44 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.00(d, J = 6 Hz, 1H), 6.18-6.16 (m, 1H), 2.60-2.59 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.29-2.25 (m, 1H), 1.64-1.61 (m, 1H), 1.44-1.42 (m, 1H); 화합물 363: 체류 시간: 3.07분(룩스 셀룰로스-4, 0.46 x 5 cm; 3 μm; Hex(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 402; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.29 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.58-7.56(m, 1H), 7.44 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.00(d, J = 6 Hz, 1H), 6.18-6.16 (m, 1H), 2.60-2.59 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.29-2.25 (m, 1H), 1.64-1.61 (m, 1H), 1.44-1.42 (m, 1H).
실시예 225:
(1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 368), (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 367), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 366) 및 (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 365)
Figure pct01326
단계 1: 1-(2-(벤질옥시)에틸)-4-요오도-1H-피라졸
Figure pct01327
N,N-다이메틸포름아미드(25 mL) 중 4-요오도-1H-피라졸(10 g, 51.55 mmol), [(2-브로모에톡시)메틸]벤젠(13.24 g, 61.54 mmol), 칼륨 카본에이트(14.23 g, 102.94 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 혼합물을 물로 세척하였다. 유기 상을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 1-[2-(벤질옥시)에틸]-4-요오도-1H-피라졸(20 g, 60.79 mmol)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 329.
단계 2: (E)-tert-부틸 3-(1-(2-(벤질옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)아크릴레이트
Figure pct01328
N,N-다이메틸포름아미드(150 mL) 중 1-[2-(벤질옥시)에틸]-4-요오도-1H-피라졸(22 g, 67.04 mmol), tert-부틸 프로프-2-에노에이트(25.76 g, 200.95 mmol), 팔라듐 아세테이트(2.25 g, 10.04 mmol), 트라이-o-톨릴 포스핀(12.23 g, 40.18 mmol) 및 트라이에틸아민(10.16 g, 100.43 mmol)의 혼합물을 12시간 동안 110℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 이어서 물로 세척하고, 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(4/6)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 (2E)-3-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]프로프-2-에노에이트(13.8 g, 41.95 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 329.
단계 3: (1S,2S)-tert-부틸 2-(1-(2-(벤질옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복실레이트
Figure pct01329
LDA(19 mL, 45.67 mmol)를 tert-부틸 (2E)-3-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]프로프-2-에노에이트(5 g, 15.23 mmol) 및 에틸렌 글리콜 다이메틸 에터(100 mL)의 혼합물에 -78℃에서 첨가하였다. 용액을 이러한 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 에틸다이페닐설파늄 트라이플루오로보란 플루오라이드(13.8 g, 45.67 mmol)를 -78℃에서 첨가하고, 이어서 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 추가의 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(7/3)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실레이트(4 g, 11.20 mmol)를 적색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 357.
단계 4: 2-(1-(2-(벤질옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복실산
Figure pct01330
다이클로로메탄(50 mL) 중 tert-부틸 2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실레이트(3.9 g, 10.94 mmol), 트라이플루오로아세트산(10 mL)의 혼합물을 준비하였다. 생성된 용액을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하여 2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실산(5 g, 조질)을 자주색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 301.
단계 5: 2-(1-(2-(벤질옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)-N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01331
다이클로로메탄(100 mL, 1.57 mol) 중 2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실산(5.6 g, 18.65 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(5.36 g, 18.62 mmol), 피리딘(20 mL) 및 인 옥시클로라이드(5.71 g, 37.25 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(7/3)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(6.1 g, 10.70 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 570.
단계 6: tert-부틸 3-((1S,2S)-2-(1-(2-(벤질옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미도)-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01332
1,4-다이옥산(100 mL) 중 2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(6.1 g, 10.70 mmol), tert-부틸 카밤에이트(37.63 g, 321.21 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(2.22 g, 2.14 mmol), 브렛포스(1.15 g, 2.14 mmol) 및 세슘 카본에이트(13.98 g, 42.91 mmol)의 혼합물을 5시간 동안 90℃에서 교반하였다. 고체를 여과하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(4/1)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(6.8 g, 10.45 mmol)를 자주색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 651.
단계 7: tert-부틸 7-플루오로-3-(2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트
Figure pct01333
tert-부틸 N-(3-[[(1S,2S)-2-[1-[2-(벤질옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(1.5 g, 2.31 mmol), Pd(OH)2/C(646 mg, 4.60 mmol) 및 메탄올(50 mL)의 혼합물을 수소 기체를 통해 20분 동안 발포시켰다. 생성된 용액을 12시간 동안 수소(볼룬) 하에 50℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(250 mg, 0.45 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 561.
단계 8: (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드, (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드 및 (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-3-메틸사이클로프로판카복스아미드
Figure pct01334
HCl/1,4-다이옥산(10 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 0.36 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC(C18 실리카 겔; 물 중 0.5% NH4HCO3: ACN = 7분 내에 20%-50%)로 정제하여 4개의 이성질체의 혼합물을 수득하였다. 혼합물을 키랄-HPLC로 분리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(각각의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 피라졸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 368: 황색 고체(12.1 mg, 0.026 mmol. 체류 시간: 4.112분(키랄 IA.0.46 x 15 cm; 5 μm; MeOH(0.1% DEA): 다이클로로메탄 = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 461.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.72 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.41 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.31 (s, 2H), 4.87 (s, 1H), 4.06 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.69 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.28-2.13 (m, 2H), 1.62-1.49 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H). 화합물 367: 황색 고체(20.5 mg, 0.045 mmol). 체류 시간: 2.172분(룩스 셀룰로스-4. 0.46 x 5 cm; 3 μm; Hex(8 mM NH3):EtOH = 60:40; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 461.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.89 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.10 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.80-3.63 (m, 2H), 2.33-2.27 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.13 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.67-1.54 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 366: 황색 고체(10.2 mg, 0.022 mmol). 체류 시간: 3.118분(룩스 셀룰로스-4. 0.46 x 5 cm; 3 μm; Hex(8 mM NH3):EtOH = 60:40; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 461.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.71 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 4.86 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.80-3.59 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.28-2.13 (m, 2H), 1.62-1.50 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H). 화합물 365: 황색 고체(25.4 mg, 0.055 mmol). 체류 시간: 7.392분(키랄 IA. 0.46 x 15 cm; 5 μm; MeOH(0.1% DEA):다이클로로메탄 = 80:20; 1.0 mL/분); LCMS (ESI) [M+H]+ = 461.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.76 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.43 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.31 (s, 2H), 4.89 (s, 1H), 4.10 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.71 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.39-2.30 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 2.13 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 1.67-1.54 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
실시예 226:
(1R,2R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 356) 및 (1S,2S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 355)
Figure pct01335
단계 1: tert-부틸 (2E)-3-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로프-2-에노에이트
Figure pct01336
N,N-다이메틸포름아미드(50 mL, 646.09 mmol) 중 4-브로모-1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸(5 g, 30.87 mmol), tert-부틸 프로프-2-에노에이트(11.9 g, 92.85 mmol), 팔라듐 아세테이트(1.1 g, 4.90 mmol), 트라이-o-톨릴포스판(1.9 g, 6.24 mmol) 및 트라이에틸아민(4.7 g, 46.45 mmol)의 용액을 12시간 동안 110℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(3/2)로 용리하는 실리카 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (2E)-3-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로프-2-에노에이트(3.6 g,17.23 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 210.
단계 2: 트랜스-tert-부틸-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실레이트
Figure pct01337
다이메틸 설폭사이드(80 mL) 중 트라이메틸(옥소)-[6]-설판일륨 요오다이드(7.6 g, 34.53 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(3.9 g, 34.76 mmol)의 용액에 tert-부틸 (2E)-3-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로프-2-에노에이트(3.6 g, 17.21 mmol)를 실온에서 12시간 동안 첨가하였다. 생성된 용액을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 트랜스-tert-부틸-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실레이트(1.3 g, 조질)를 황색 오일로소 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 224.
단계 3: 트랜스-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산
Figure pct01338
다이클로로메탄(10 mL) 중 트랜스-tert-부틸-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실레이트(1.3 g, 5.82 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(2 mL, 26.93 mmol)을 실온에서 2시간 동안 첨가하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하고, 잔사를 역상 컬럼 크로마토그래피(물 중 0.5% NH4HCO3/CH3CN = 25분 내에 5%-50%)로 정제하여 트랜스-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산(223 mg, 1.34 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 168.
단계 4: 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01339
다이클로로메탄(5 mL, 78.65 mmol) 중 트랜스-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복실산(223 mg, 1.33 mmol), 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(320 mg, 1.11 mmol) 및 피리딘(0.5 mL, 6.21 mmol)의 용액에 인 옥시클로라이드(258 mg, 1.68 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하여 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(262 mg, 0.60 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 437.
단계 5: 트랜스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01340
1,4-다이옥산(12 mL) 중 트랜스-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드(242 mg, 0.55 mmol), tert-부틸 카밤에이트(1.95 g, 16.65 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(115 mg, 0.11 mmol), 브렛포스(60 mg, 0.11 mmol) 및 세슘 카본에이트(724 mg, 2.22 mmol)의 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(92/8)로 용리하는 실리카 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(120 mg, 0.23 mmol)를 적색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 518.
단계 6: (1R,2R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (1S,2S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01341
1,4-다이옥산(2.5 mL, 29.510 mmol) 및 수소 클로라이드(2.5 mL, 82.280 mmol) 중 트랜스-tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(100 mg, 0.19 mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 진공 하에 농축한 후, 잔사를 제조용 HPLC(엑스브리지 Prep C18 OBD 19 x 150 mm x 5 μm; 물 중 10 mmol NH4HCO3:CH3CN = 7분 내에 10%-50%)로 정제하여 라세미체 생성물을 수득하였다. 라세미체 생성물을 Prep-키랄-HPLC로 분리하여 2개의 이성질체를 수득하였다(2개의 이성질체에 대한 사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 트라이아졸, 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 355: 황색 고체(8.7 mg, 0.021 mmol). 체류 시간; 1.977분(키랄팩 IC2 x 25 cm, 5 μm; MeOH(0.1% DEA):다이클로로메탄 = 70:30); LCMS (ESI) [M+H]+ = 418; 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.44-7.37 (m, 1H), 6.94 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.32 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 2.49-2.40 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.50-1.35 (m, 2H). 화합물 356: 황색 고체(10.3 mg, 0.025 mmol). 체류 시간: 2.424분(키랄팩 IC2 x 25 cm, 5 μm; MeOH(0.1% DEA):다이클로로메탄 = 70:30); LCMS (ESI) [M+H]+ = 418; 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.44-7.37 (m, 1H), 6.94 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 6.32 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 2.49-2.40 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.50-1.35 (m, 2H).
실시예 227:
(±)-(1S,2R,6R,7S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-하이드록시바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미드(화합물 373 및 화합물 374) 및 (±)-(1S,2S,6R,7S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-하이드록시바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미드(라세미체)(화합물 371 및 화합물 372)
Figure pct01342
단계 1: 엑소-에틸 2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복실레이트
Figure pct01343
다이클로로메탄(40 mL) 중 사이클로헥스-2-엔-1-온(4 g, 41.61 mmol), Ru2(OAc)4(0.91 g, 2.05 mmol)의 혼합물에 에틸 2-(λ4-다이아진일)아세테이트(7.86 g, 68.28 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 반응 생성물을 2시간 동안 25℃에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1:4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 엑소-에틸 2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복실레이트(2 g, 0.011 mol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 183.2.
단계 2: 엑소-2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복실산
Figure pct01344
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 엑소-에틸 2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복실레이트(2 g, 10.97 mmol)의 혼합물에 물(5 mL) 중 LiOH(1.05 g, 43.84 mmol)를 첨가하고, 3시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용액의 pH 값을 시트르산으로 5까지 조정하고, 이어서 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 엑소-2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복실산(1.26 g, 74%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 155.2.
단계 3: 엑소-N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미드
Figure pct01345
다이클로로메탄(68 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(2.2 g, 7.64 mmol), 엑소-2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복실산(1.18 g, 7.654 mmol), 피리딘(12 mL, 206.32 mmol)의 용액에 인 옥시클로라이드(2.36 g, 15.39 mmol)를 5℃에서 적가하였다. 반응 생성물을 30분 동안 5℃에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 엑소-N-(8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미드(2.5 g, 77%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 424.2.
단계 4: 엑소-tert-부틸 (7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-(2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01346
1,4-다이옥산(40 mL) 중 엑소-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미드(1.1 g, 2.59 mmol), tert-부틸 카밤에이트(7.6 g, 64.87 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(540 mg, 0.52 mmol), 브렛포스(560 mg, 1.04 mmol), 세슘 카본에이트(3.4 g, 10.43 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-(2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일카밤에이트(800 mg, 1.59 mmol)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 505.3.
단계 5: 엑소-tert-부틸 (7-플루오로-3-(2-하이드록시바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01347
메탄올(20 mL) 중 tert-부틸 N-[7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)-3-[(7S)-2-옥소바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(800 mg, 1.58 mmol) 및 NaBH4(362 mg, 9.56 mmol)의 혼합물을 0℃에서 90분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 엑소-tert-부틸 7-플루오로-3-(2-하이드록시바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일카밤에이트(370 mg, 46%)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 6: (1S,2R,6R,7S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-하이드록시바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미드(라세미체) 및 (1S,2S,6R,7S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-하이드록시바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-카복스아미드(라세미체)
Figure pct01348
N,N-다이메틸포름아미드(1 mL) 중 엑소-tert-부틸 N-[7-플루오로-3-(2-하이드록시바이사이클로[4.1.0]헵탄-7-아미도)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(200 mg, 0.39 mmol)의 용액에 HCl(g)/다이옥산(10 mL, 4 M)을 첨가하였다. 반응 생성물을 2시간 동안 20℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2개의 이성질체를 수득하였다. 혼합물을 키랄 HPLC 상에서 더욱 분리하여 4개의 단일체 입체 이성질체를 수득하였다. 상대 입체화학은 표 1에 제시한 바와 같지만, 절대 입체화학은 임의로 할당되었다. 화합물 371: 체류 시간; 2.74분(키랄팩 OJ-3 4.6 x 50 mm; MeOH(0.1% DEA)); LCMS (ESI) [M+H]+ = 407. 화합물 372: 체류 시간; 1.56분(키랄팩 OJ-3 4.6 x 50 mm; MeOH(0.1% DEA)); LCMS (ESI) [M+H]+ = 407. 화합물 373: 체류 시간; 1.25분((셀룰로스-4, 4.6 x 50 mm; MeOH(0.1% DEA); LCMS (ESI) [M+H]+ = 407. 화합물 374: 체류 시간; 3.03분(키랄셀 OJ-3, 4.6 x 50 mm; MeOH(0.1% DEA)); LCMS (ESI) [M+H]+ = 407.
실시예 228:
(±)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 192) 및 (±)-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 191)
Figure pct01349
단계 1: tert-부틸 N-(3-[[2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01350
다이옥산(10 mL, 118.041 mmol) 중 2-[(벤질옥시)메틸]-N-[8-클로로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(420 mg, 0.89 mmol), tert-부틸 카밤에이트(2.61 g, 22.2 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(184 mg, 0.178 mmol), 브렛포스(191 mg, 0.36 mmol), 세슘 카본에이트(1.16 g, 3.566 mmol)의 혼합물을 120℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(4/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(450 mg, 92%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 472.2.
단계 2: tert-부틸 N-(3-[[2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01351
메탄올(30 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[(1S,2S)-2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(350 mg, 0.63 mmol)의 용액에 Pd(OH)2/C(2.5 g, 17.80 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 수소 하에 30분 동안 25℃에서 교반하였다. 여과 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(3-[2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 68%)를 연녹색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 463.3.
단계 3: (2-((8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)카바모일)-3-메틸사이클로프로필)메틸 메탄설포네이트
Figure pct01352
다이클로로메탄(3 mL, 47.19 mmol) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(140 mg, 0.30 mmol), 트라이에틸아민(183 mg, 1.81 mmol)의 용액에 MsCl(138 mg, 1.21 mmol)을 적가하였다. 생성된 용액을 30분 동안 25℃에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 ((1S,2S)-2-((8-((tert-부톡시카보닐)아미노)-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)카바모일)-3-메틸사이클로프로필)메틸 메탄설포네이트(100 mg, 0.19 mmol)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 541.3.
단계 4: tert-부틸 N-(3-[[(1S,2S)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01353
DMSO(3 mL, 42.24 mmol) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(메탄설폰일메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(100 mg, 0.19 mmol)의 용액에 KCN(99.29 mg, 1.53 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 50℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하였다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[(1S,2S)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(70 mg, 78%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 472.3.
단계 5: (±)-(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드 및 (±)-(1S,2S)-N-(8-아미노-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01354
다이클로로메탄(1 mL, 15.73 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(1 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(70 mg, 0.15 mmol)의 용액에 30분 동안 25℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC[엑스브리지 Prep 아미드 OBD 컬럼, 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.05% NH3H2O): ACN(6분 내에 20%-55%)]로 정제하여 두 쌍의 거울상 이성질체를 수득하였다(사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 시아노메틸; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 191: 황색 고체(2.8 mg, 5%). LCMS (ESI) [M+H]+ = 372.2.; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.80 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.67-8.39 (m, 2H), 8.26 (s, 1H), 7.45 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.37 (s, 2H), 2.81 (dd, J = 17.6, 7.3 Hz, 1H), 2.69 (dd, J = 17.7, 7.7 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.79 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 1.71-1.57 (m, 1H), 1.52-1.37 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.3 Hz, 3H). 화합물 192: 회백색 고체. LCMS (ESI) [M+H]+ = 372.2; 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 10.79 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.48-8.36 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 7.35 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 2.83-2.61 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.15-2.03 (m, 1H), 1.58-1.45 (m, 1H), 1.36 (dt, J = 9.1, 6.1 Hz, 1H), 1.17 (d, J = 6.1 Hz, 3H).
실시예 229:
(±)-시스-N-(8-아미노-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 152)
Figure pct01355
단계 1: 8-클로로-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-아민
Figure pct01356
다이옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-요오도이소퀴놀린-3-아민(800 mg, 2.48 mmol), (2,6-다이클로로페닐)보론산(1.42 g, 7.42 mmol), 비스(트라이-tert-부틸포스핀)팔라듐(0)(127 mg, 0.25 mmol) 및 세슘 플루오라이드(1.13 g, 7.44 mmol)의 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1/3)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 8-클로로-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-아민(820 mg, 2.412 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 341.
단계 2: (±)-시스-N-[8-클로로-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01357
다이클로로메탄(10 mL) 중 8-클로로-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-아민(794 mg, 2.32 mmol), 시스-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복실산(320 mg, 3.075 mmol) 및 피리딘(1 mL, 12.42 mmol)의 용액에 인 옥시클로라이드(560 mg, 3.65 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 물로 급랭시키고, 이어서 다이클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 무수 나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(1:1)로 용리하는 실리카 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 시스-N-[8-클로로-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(763 mg，1.79 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 427.
단계 3: (±)-트랜스-tert-부틸 (6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로-3-(2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01358
1,4-다이옥산(15 mL) 중 시스-N-[8-클로로-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(300 mg, 0.70 mmo), tert-부틸 카밤에이트(2.5 g, 21.34 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(150 mg, 0.15 mmol), 브렛포스(75 mg, 0.14 mmol) 및 세슘 카본에이트(930 mg, 2.85 mmol)의 용액을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 실온까지 냉각하고, 이어서 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(3/2)로 용리하는 실리카 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 시스-tert-부틸 (6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로-3-(2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미도)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(190 mg,0.375 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 508.
단계 4: (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01359
다이클로로메탄(8 mL) 중 시스-tert-부틸 N-[6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로-3-[[2-플루오로-사이클로프로판]아미도]이소퀴놀린-8-일]카밤에이트(170 mg, 0.33 mmol) 및 트라이플루오로아세트산(1.6 mL, 21.541 mmol)의 용액을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(아틀란티스 HILIC OBD, 19 x 150 mm 5 μm; 물(0.1% FA): 7분 내에 CH3CN(5%-23%))로 정제하여 (±)-시스-N-[8-아미노-6-(2,6-다이클로로페닐)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일]-2-플루오로-사이클로프로판-1-카복스아미드(21.6 mg, 0.053 mmol)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 408; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.86 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.54-7.49 (m, 1H), 6.93 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.32 (s, 2H), 5.04-4.83 (m, 1H), 2.31-2.19 (m, 1H), 1.68-1.66 (m, 1H), 1.19-1.17 (m, 1H).
실시예 230:
2-((6-(1-아세틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-8-아미노-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 232)
Figure pct01360
단계 1: 1-[4-(3-아미노-7-클로로-6-이소퀴놀일)-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-1-일]에탄온
Figure pct01361
1,4-다이옥산(2 mL) 중 6-브로모-7-클로로-이소퀴놀린-3-아민(200 mg, 0.78 mmol)의 용액에 1-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-1-일]에탄온(234.1 mg, 0.93 mmol), 칼륨 카본에이트(321.5 mg, 2.33 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(56.85 mg, 0.08 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1-[4-(3-아미노-7-클로로-6-이소퀴놀일)-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-1-일]에탄온(210 mg, 0.69 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 319.0.
단계 2: 2-[[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01362
1,4-다이옥산(20 mL) 중 1-[4-(3-아미노-8-클로로-7-플루오로-6-이소퀴놀일)-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-1-일]에탄온(200 mg, 0.66 mmol), 2-브로모-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(265 mg, 0.99 mmol), t-Bu브렛포스 G3(171 mg, 0.20 mmol), t-Bu브렛포스(195 mg, 0.40 mmol), 세슘 카본에이트(645 mg, 1.98 mmol)의 혼합물을 100℃에서 8시간 동안 교반하였다. 현탁액을 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(110 mg, 0.019 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 510.
단계 3: 2-[[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01363
1,4-다이옥산(10 mL) 중 2-[[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(100 mg, 0.20 mmol) 및 tert-부틸 카밤에이트(340 mg, 2.93 mmol), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐-클로로포름 부가물(30 mg, 0.04 mmol), 브렛포스(40.0 mg, 0.07 mmol), 세슘 카본에이트(180 mg, 0.55 mmol)의 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 2-[[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-8-클로로-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(100 mg, 0.20 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 591.
단계 4: 2-[[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-8-아미노-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01364
다이클로로메탄(5 mL) 중 TFA(1 mL, 0.18 mmol) 중 tert-부틸 N-[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(105 mg, 0.18 mmol)의 용액을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC로 정제하여 2-[[6-(1-아세틸-3,6-다이하이드로-2H-피리딘-4-일)-8-아미노-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(27.8 mg, 0.057 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 492.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.16 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 6.79-6.76 (m, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.94 (s, 3H), 4.97 (s, 2H), 4.64-4.55 (m, 1H), 4.17-4.10 (m, 2H), 3.80-3.78 (m, 2H), 3.66-3.61 (m, 2H), 3.00-2.96 (m, 2H), 2.56 (s, 1H), 2.51-2.50 (m, 1H), 2.07 (d, J = 9.2 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 9.2 Hz, 6H).
실시예 231:
2-((8-아미노-6-(3-아미노-1,4-다이메틸-1H-피라졸-5-일)-7-플루오로이소퀴놀린-3-일)아미노)-6-이소프로필-5,6-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7(8H)-온(화합물 251)
Figure pct01365
단계 1: 1,4-다이메틸-3-니트로-피라졸
Figure pct01366
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 4-메틸-3-니트로-1H-피라졸(500 mg, 3.93 mmol), 요오도메탄(837.9 mg, 5.9 mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(484.6 mg, 4.33 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 1,4-다이메틸-3-니트로-피라졸(450 mg, 3.18 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 142.
단계 2: 1,4-다이메틸피라졸-3-아민
Figure pct01367
메탄올(20 mL) 중 1,4-다이메틸-3-니트로-피라졸(530 mg, 3.76 mmol) 및 팔라듐 탄소(10%)(50 mg, 3.76 mmol)의 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 감압 하에 농축하여 1,4-다이메틸피라졸-3-아민(400 mg, 3.59 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 112.
단계 3: 3-(2,5-다이메틸피롤-1-일)-1,4-다이메틸-피라졸
Figure pct01368
톨루엔(60 mL) 중 1,4-다이메틸피라졸-3-아민(1.53 g, 13.77 mmol), 2,5-헥산다이온(3.14 g, 27.53 mmol) 및 p-톨루엔설폰산(0.24 g, 1.38 mmol)의 용액을 110℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(80/20)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(2,5-다이메틸피롤-1-일)-1,4-다이메틸-피라졸(1.5 g, 7.92 mmol)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 190.
단계 4: 3-(2,5-다이메틸피롤-1-일)-5-요오도-1,4-다이메틸-피라졸
Figure pct01369
테트라하이드로퓨란(20 mL) 중 3-(2,5-다이메틸피롤-1-일)-1,4-다이메틸-피라졸(500 mg, 2.64 mmol)의 용액에 n-부틸리튬(1.27 mL, 3.17 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 이어서, 요오드(671.03 mg, 2.64 mmol)를 첨가하고, -78℃에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 수성 포화 나트륨 티오설페이트로 급랭시켰다. 생성된 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 석유 에터/에틸 아세테이트(3/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3-(2,5-다이메틸피롤-1-일)-5-요오도-1,4-다이메틸-피라졸(385 mg, 1.22 mmol)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 316.
단계 5: 5-요오도-1,4-다이메틸-피라졸-3-아민
Figure pct01370
에탄올(20 mL) 및 물(20 mL) 중 3-(2,5-다이메틸피롤-1-일)-5-요오도-1,4-다이메틸-피라졸(500 mg, 1.59 mmol), 칼륨 하이드록사이드(444.23 mg, 7.93 mmol), 하이드록실아민 하이드로클로라이드(1.09 g, 15.87 mmol)의 용액을 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하였다. 잔사를 다이클로로메탄/메탄올(96/4)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 5-요오도-1,4-다이메틸-피라졸-3-아민(281 mg,1.18 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 238.
단계 6: tert-부틸 N-[6-(5-아미노-2,4-다이메틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트
Figure pct01371
1,4-다이옥산(3 mL) 및 물(0.3 mL) 중 5-요오도-1,4-다이메틸-피라졸-3-아민(31.0 mg, 0.13 mmol), [8-(tert-부톡시카보닐아미노)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-6-이소퀴놀일]보론산(67 mg, 0.13 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(27.59 mg, 0.03 mmol) 및 칼륨 카본에이트(54.14 mg, 0.39 mmol)의 용액을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-2,4-다이메틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50 mg, 조질)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 578.
단계 7: 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-2,4-다이메틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온
Figure pct01372
다이클로로메탄(4 mL) 중 tert-부틸 N-[6-(5-아미노-2,4-다이메틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-[(6-이소프로필-7-옥소-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-2-일)아미노]-8-이소퀴놀일]카밤에이트(50.0 mg, 0.09 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.0 mL)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 진공 하에 농축하였다. 조질 생성물을 제조용 HPLC[아틀란티스 HILIC OBD 컬럼 19 x 150 nm x 50 μm; 물(10 mmol/L 나트륨 바이카본에이트 및 7분 내에 ACN(20%-50%)]로 정제하여 2-[[8-아미노-6-(5-아미노-2,4-다이메틸-피라졸-3-일)-7-플루오로-3-이소퀴놀일]아미노]-6-이소프로필-5,8-다이하이드로-4H-피라졸로[1,5-d][1,4]다이아제핀-7-온(9.1 mg, 0.019 mmol)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 478; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.26 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 6.75 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.13 (s, 2H), 5.98 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.65-4.55 (m, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.78 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.98 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.77 (s, 3H), 1.12 (d, J = 6.0 Hz, 6H).
실시예 232:
(1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 383), (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 384), (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 385), (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(화합물 386)
Figure pct01373
단계 1: 2-[(벤질옥시)메틸]-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01374
다이클로로메탄(20 mL) 중 8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-아민(1 g, 3.48 mmol), (1S,2S)-2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판-1-카복실산(1.15 g, 5.22 mmol), 피리딘(2 mL, 24.847 mmol)의 용액에 인 옥시클로라이드(1.06 g, 6.90 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하고, 이어서 물로 급랭시켰다. 생성된 용액을 다이클로로메탄으로 추출하고, 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (1S,2S)-2-[(벤질옥시)메틸]-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(0.9 g, 53%)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 2: tert-부틸 N-(3-[[(2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01375
1,4-다이옥산(30 mL) 중 2-[(벤질옥시)메틸]-N-[8-클로로-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일]-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드(900 mg, 1.84 mmol), tert-부틸 N-메틸카밤에이트(4.3 g, 32.78 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(380 mg, 0.37 mmol), 브렛포스(395 mg, 0.74 mmol), 세슘 카본에이트(2.4 g, 7.37 mmol)의 용액을 100℃에서 5시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 에틸 아세테이트/석유 에터(10/1)로 용리하는 실리카 겔 상 플래시 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 N-(3-[[2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(500 mg, 48%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 571.
단계 3: tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01376
메탄올(20 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-[(벤질옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(500 mg, 0.88 mmol)의 용액에 Pd(OH)2/C(100 mg)를 첨가하였다. 생성된 용액을 12시간 동안 실온에서 H2(1 atm) 하에 교반하였다. 반응 생성물을 여과하고, 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(220 mg, 52%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 481.
단계 4: tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[(메탄설폰일옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01377
다이클로로메탄(10 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[(1S,2S)-2-(하이드록시메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 0.42 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(70 mg, 0.69 mmol) 및 메탄설폰일 클로라이드(60 mg, 0.52 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 15분 동안 교반하고, 이어서 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[(메탄설폰일옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 조질)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 559.
단계 5: tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트
Figure pct01378
다이메틸 설폭사이드(10 mL) 중 tert-부틸 N-(7-플루오로-3-[[2-[(메탄설폰일옥시)메틸]-3-메틸사이클로프로판]아미도]-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(200 mg, 0.36 mmol)의 용액에 칼륨 시아나이드(46 mg, 0.71 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 3시간 동안 60℃에서 교반하였다. 생성된 용액을 물로 희석하고, 이어서 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 무수 나트륨 설페이트로 건조하였다. 여과 후, 여액을 진공 하에 농축하여 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(210 mg, 조질)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (ESI) [M+H]+ = 490.
단계 6: (1S,2S,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2R,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1S,2S,3S)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드, (1R,2R,3R)-N-(8-아미노-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-3-일)-2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판-1-카복스아미드
Figure pct01379
1,4-다이옥산(5 mL) 중 tert-부틸 N-(3-[[2-(시아노메틸)-3-메틸사이클로프로판]아미도]-7-플루오로-6-(4-메틸피리딘-3-일)이소퀴놀린-8-일)카밤에이트(100 mg, 0.20 mmol) 및 TFA(3 mL)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔사를 제조용 HPLC(엑스브리지 쉴드 RP18 OBD 컬럼, 5 μm, 19 x 150 mm; 물(0.05% NH3H2O) 및 ACN(15분 내에 15% ACN → 40%))로 정제하여 혼합물을 수득하였다. 혼합물을 SFC로 단리하여 4개의 이성질체를 수득하였다(사이클로프로판 입체화학: 아미드에 대해 트랜스인 시아노메틸; 임의로 할당된 메틸 상대 입체화학; 임의로 할당된 모든 절대 입체화학): 화합물 383: 황색 고체(2.4 mg, 3%). 체류 시간: 3.83분(키랄팩 ID-3 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS(ESI) [M+H]+ = 390; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.31(s, 1H), 8.48-8.41 (m, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.45-7.43 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.00-6.98 (d, J = 6 Hz, 1H), 2.79-2.60 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.88-1.85 (m, 1H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.34-1.20 (m, 3H). 화합물 384: 황색 고체(2.4 mg, 3%). 체류 시간: 5.64분(키랄팩 ID-3 0.46 x 10 cm; 3 μm; MtBE(0.1% DEA):EtOH = 70:30; 1.0 mL/분); LCMS(ESI) [M+H]+ = 390; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.31 (s, 1H), 8.48-8.41 (m, 2H), 8.31 (s, 1H), 7.45-7.43 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.00-6.98 (d, J = 6 Hz, 1H), 2.79-2.60 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.88-1.85 (m, 1H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.34-1.20 (m, 3H). 화합물 385: 황색 고체(3.4 mg, 4%). 체류 시간: 4.636분(키랄팩 IA-30.46 x 5 cm; 3 μm; Hex(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1.0 mL/분); LCMS(ESI) [M+H]+ = 390; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.31 (s, 1H), 8.48-8.41 (m, 2H), 8.31 (s,1H), 7.45-7.43 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.00-6.98 (d, J = 6 Hz, 1H), 2.79-2.60 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.88-1.85 (m, 1H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.34-1.20 (m,3H). 화합물 386: 황색 고체(2.7 mg, 3%). 체류 시간: 6.686분(키랄팩 IA-30. 46 x 5 cm; 3 μm; Hex(0.1% DEA):EtOH = 50:50; 1.0 mL/분); LCMS(ESI) [M+H]+ = 390; 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.31 (s, 1H), 8.48-8.41 (m, 2H), 8.31 (s,1H), 7.45-7.43 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.00-6.98 (d, J = 6 Hz, 1H), 2.79-2.60 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.88-1.85 (m, 1H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.34-1.2 (m, 3H).
화합물 특징규명: 화학적
실시예 233:
예시적인 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 제조하고 특징규명하였다. 데이터는 표 A-1에 제시된다.
[표 A-1]
Figure pct01380
Figure pct01381
Figure pct01382
Figure pct01383
Figure pct01384
Figure pct01385
Figure pct01386
Figure pct01387
Figure pct01388
Figure pct01389
Figure pct01390
Figure pct01391
Figure pct01392
Figure pct01393
Figure pct01394
Figure pct01395
Figure pct01396
Figure pct01397
실시예 234:
추가의 예시적인 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 제조하고(표 A-2, A-3 및 A-4); 결합 데이터를 표 B1-1 및 B1-2에 제시한다.
[표 A-2]
Figure pct01398
Figure pct01399
Figure pct01400
Figure pct01401
Figure pct01402
Figure pct01403
Figure pct01404
Figure pct01405
Figure pct01406
Figure pct01407
Figure pct01408
Figure pct01409
Figure pct01410
Figure pct01411
[표 A-3]
Figure pct01412
Figure pct01413
Figure pct01414
Figure pct01415
Figure pct01416
Figure pct01417
Figure pct01418
Figure pct01419
Figure pct01420
Figure pct01421
Figure pct01422
Figure pct01423
Figure pct01424
Figure pct01425
Figure pct01426
Figure pct01427
Figure pct01428
Figure pct01429
Figure pct01430
Figure pct01431
Figure pct01432
Figure pct01433
Figure pct01434
Figure pct01435
Figure pct01436
Figure pct01437
Figure pct01438
Figure pct01439
Figure pct01440
Figure pct01441
Figure pct01442
Figure pct01443
Figure pct01444
Figure pct01445
Figure pct01446
[표 A-4]
Figure pct01447
Figure pct01448
Figure pct01449
Figure pct01450
Figure pct01451
Figure pct01452
Figure pct01453
Figure pct01454
Figure pct01455
Figure pct01456
Figure pct01457
Figure pct01458
Figure pct01459
Figure pct01460
Figure pct01461
Figure pct01462
Figure pct01463
Figure pct01464
Figure pct01465
Figure pct01466
Figure pct01467
Figure pct01468
Figure pct01469
Figure pct01470
Figure pct01471
Figure pct01472
Figure pct01473
Figure pct01474
Figure pct01475
Figure pct01476
Figure pct01477
Figure pct01478
Figure pct01479
Figure pct01480
Figure pct01481
Figure pct01482
Figure pct01483
Figure pct01484
Figure pct01485
Figure pct01486
Figure pct01487
Figure pct01488
Figure pct01489
Figure pct01490
Figure pct01491
Figure pct01492
Figure pct01493
Figure pct01494
Figure pct01495
Figure pct01496
Figure pct01497
Figure pct01498
Figure pct01499
Figure pct01500
Figure pct01501
Figure pct01502
Figure pct01503
Figure pct01504
Figure pct01505
Figure pct01506
Figure pct01507
생물학적 평가
예시적인 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 시험하여, HPK-1의 화합물 억제를 평가하였다. 각각의 예시적인 화합물에 대한 Ki를 결정하였다.
실시예 B1: HPK1 Ki 결정
실시예 B1A: HPK1-FL HTRF 효소 검정("HTRF")
검정 원리:
HPK-FL 효소는 1 mM의 ATP 및 다양한 농도의 시험 화합물의 존재 하에 비오틴-SLP-76 기질을 인산화한다. 생성물은, Eu-항-pSLP76 Ab 및 SA-XL665를 사용하여 FRET로 검출하였다. 또한, 추가적인 HTRF 기술 정보에 대해서는 웹사이트(www.cisbio.com/HTRF)를 참조한다.
기기 장치:
에코(Echo)555 화합물 분배기,
애질런트 브라보(Agilent Bravo),
퍼킨 엘머 엔비젼(Perkin Elmer Envision).
최종 검정 조건:
HPK 전장, T165E S171E: 0.125 nM,
비오틴-SLP76: 100 nM,
ATP: 1 mM(ATP Km = 20 μM),
Eu-항-pSLP76: 2 nM,
SA-XL665: 8.3 nM,
사전-항온처리 시간: 30분,
키나제 반응 시간: 60분,
온도: 상온,
총 부피: 12 μL,
ATPapp Km: 17.7 μM.
재료:
검정 플레이트: 백색 프록시플레이트(ProxiPlate) 384 F(퍼킨 엘머 카탈로그 번호 6008289),
키나제: HPK 전장 이중 돌연변이,
기질: 비오틴-SLP76,
ATP: 100 mM ATP,
BSG: 2% BSG,
DMSO: DMSO(시그마(Sigma) 카탈로그 번호 34869-100ML),
반응 완충액: H2O/50 mM HEPES, pH 7.5/10 mM MgCl2/2 mM TCEP/0.01% Brij-35/0.01% BSG,
검출 믹스: Eu-항-pSLP76/SA-XL665(시스바이오(Cisbio), #610SAXAC)
검정 절차 Ki 결정:
상부에 80 nL의 화합물 또는 DMSO를 방울로 떨어뜨린(spotted) 384 웰 프록시플레이트(Proxiplate)에, 4 μL/웰 키나제 믹스를 가했다. 이 혼합물을 30분 동안 사전-항온처리하고, 이어서 4 μL/웰의 기질 믹스를 가했다. 이 용액을 60분 동안 항온처리하고, 이어서 4 μL/웰의 검출 믹스를 가했다. 이 용액을 추가로 60분 동안 항온처리하였다. 이어서, 상기 플레이트를 퍼킨 엘머 엔비젼 상에 적재하고, 615 및 665 nm에서 TR-FRET 신호를 측정하였다. 665/620 비를 사용하여, 각각의 화합물 농도에서 활성(%)을 계산하였다.
실시예 B1B: HPK1 란타 결합 검정("란스")
재료:
Figure pct01508
절차:
I. 화합물 희석:
브라보(Bravo) 액체 취급 플랫폼을 사용하여, 컬럼 2 및 13 내의 12.5 μL/웰의 5 mM 화합물(100X), 및 컬럼 3 내지 12, 14 내지 23 및 웰 A1 내지 H1 및 I24 내지 P24의 화합물 플레이트 내의 10 μL/웰의 DMSO를 준비함으로써, 시험할 화합물을 희석하였다. 기준 화합물의 경우, 최고 농도는 1 mM이었다. 상기 플레이트에, 웰 J1 내지 P1 및 A24 내지 H24에 10 μL의 2 mM 스타우로스포린을 가했다. 상기 브라보 액체 취급 플랫폼을 사용하여, 11 포인트 5배 화합물 연속 희석을 수행하였다. 상기 플레이트로부터, 컬럼 2 및 컬럼 13으로부터의 2.5 μL의 용액을 컬럼 3 및 14 내의 10 μL의 DMSO로 옮겼다. 상기 화합물 플레이트를 1분 동안 2,500 rpm으로 원심 분리하였다. 에코(Echo) 액체 취급기 시스템을 사용하여, 상기 화합물 플레이트로부터, 80 nL의 상기 화합물을 검정 플레이트로 옮겼다. 하나의 화합물 플레이트가 2개의 검정 플레이트를 생성하였다. 각각의 검정 플레이트를 밀봉하고, N2 캐비넷에 저장하였다.
II. 검정 조건:
하기 검정 농도 및 시간을 사용하였다: 2 nM HPK1, 2nM Eu-항-GST Ab, 및 15 nM 트레이서-222, 및 60분의 항온처리 시간.
III. HPK 란스 결합 검정:
결합 검정을 위해, 멀티드롭(Multidrop) 시약 분배기를 사용하여, 4 μL 2X HPK1 및 Eu-항-GST 항체를 상기 검정 플레이트의 각각의 웰에 가했다. 이 용액을 23℃ 항온처리기 내에서 1시간 동안 항온처리하였다. 멀티드롭 시약 분배기를 사용하여, 상기 검정 플레이트의 각각의 웰에, 4 μL의 2X 트레이서-222를 가했다. 이 용액을 다시 23℃ 항온처리기 내에서 1시간 동안 항온처리하였다. 엔비젼 플레이트 판독기를 사용하고, 하기 매개변수를 사용하여, 검정 결과를 판독하였다: TR_FRET, 340ex/615 및 665em; 100 usec 지연; 및 200 usec 적분.
IV. 분석:
화합물 Ki를, XL-fit 내의 모리슨(Morrison) ki 피팅 모델을 이용하여 분석하였다.
a. fit = (1-((((E+x)+(Ki×(1+(S/Kd))))-(((((E+x)+(Ki×(1+(S/Kd))))2) - ((4×E)×x))0.5))/(2×E)))
res = (y-fit)
b. 매개변수:
E = 효소 농도,
S= 트레이서-222 농도,
Kd = 트레이서-222 Kd.
모든 측정은 동일한 단위(μM)를 사용하여 보고된다.
예시적인 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 상기 결합 검정으로 시험하였다. 결정된 Ki 값을 하기 표 B1-1 및 B1-2에 열거한다.
[표 B1-1]
Figure pct01509
Figure pct01510
Figure pct01511
Figure pct01512
Figure pct01513
[표 B1-2]
Figure pct01514
Figure pct01515
Figure pct01516
Figure pct01517
Figure pct01518
Figure pct01519
Figure pct01520
실시예 B2: 인간 T-세포 IL2 유도 검정
검정 원리:
항-CD3 및 항-CD28은 일차(primary) 인간 Pan-T 세포 내의 TCR 신호전달을 활성화시켜, IL-2 프로모터 유도를 야기한다. 세포 배양 상청액 중의 분비된 IL-2를, IL-2에 대한 포획 항체 및 설포-태그(SULFO-tag)로 표지된 항-IL-2 항체를 사용하여 전기화학발광(electrochemiluminescence)으로 검출하였다.
문헌:
추가적인 전기화학발광 기술 정보에 대해서는 웹사이트(www.mesoscale.com)를 참조한다.
검정 절차:
일차 인간 Pan-T 세포를, 가습식 배양기 내에서 37℃ 및 5% CO2에서 30분 동안 다양한 농도의 시험 화합물과 함께 배양하였다. 상기 세포를, 고정된 농도의 항-인간 CD3(각각의 공여자 로트에 대해 개별적으로 결정됨)으로 사전-코팅된 플레이트에 옮기고, 가용성 항-인간 CD28(최종 농도 = 1 μg/mL)을 가했다. 세포 가습식 배양기 내에서 37℃ 및 5% CO2로 4시간 동안 자극하였다. 25 μL의 상청액을, 항-인간 IL-2 항체로 사전-코팅된 MSD 단일 스팟 플레이트로 옮겼다. MSD 플레이트를 가벼운 진탕 하에 밤새도록 4℃에서 배양하였다. MSD 플레이트를 세척 완충액으로 4회 세척하였다. 설포(SULFO)-표지된 검출 항체를 1:50 희석으로 가하고, 실온에서 진탕 하에 2시간 동안 배양하였다. MSD 플레이트를 완충액으로 4회 세척하고, 150 μL의 MSD 판독 완충액을 2회 가했다. MSD 장치 상에서 판독하였다. 자극된/미처리된 대조군에 대한 데이터를 표준화하여, 각각의 농도의 화합물에서의 활성(%)을 계산하였다.
재료:
냉동된 일차 인간 Pan-T 세포(스템셀 테크노로지스(StemCell Technologies) #70024)
항-인간 CD3(OKT3 클론)(이바이오사이언스(eBioscience) #16-0037-81)
항-인간 CD28(CD28.2 클론)(BD #555725)
96-웰 인간 IL-2 조직 배양 키트(MSD #K151AHB-4)
기기 장치:
액체 취급용 바이오멕(Biomek) FX(벡만 콜터(Beckman Coulter)),
MSD SECTOR S 600(메조 스케일 디스커버리(Meso Scale Discovery)).
예시적인 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 인간 T-세포 IL-2 유도 검정으로 시험하였다. 미처리된 세포 대비, 시험 화합물로 처리된 세포 내의 IL-2에 대해 측정된 증가%를 특정 화합물에 대해 하기 표 B2에 제공한다.
[표 B2]
Figure pct01521
용어 "하나의" 개체가 하나 이상의 상기 개체를 지칭함에 주목해야 한다. 예를 들어, "폴리펩티드"는, 하나 이상의 폴리펩티드를 나타내는 것으로 이해된다. 이와 같이, 용어 "하나", "하나 이상", 및 "적어도 하나"는 본원에서 상호교환적으로 사용될 수 있다.
본원에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 동일한 의미를 가진다. 사용되는 수치(예컨대, 양, 온도 등)와 관련하여 정확성을 보장하기 위해 노력하였지만, 일부 실험 오차 및 표준편차는 설명되어야 한다.
본원 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐, 용어 "포함하다" 및 "포함하는"은, 문맥이 달리 요구하는 경우를 제외하고는, 비-배타적 의미로 사용된다. 본원에 기술된 실시양태가 실시양태들로 "이루어짐" 및/또는 "본질적으로 이루어짐"을 포함함이 이해된다.
본원에서 용어 "약"은, 값을 지칭하는 경우, 명시된 양으로부터, 일부 실시양태에서 ±50%, 일부 실시양태에서 ±20%, 일부 실시양태에서 ±10%, 일부 실시양태에서 ±5%, 일부 실시양태에서 ±1%, 일부 실시양태에서 ±0.5%, 일부 실시양태에서 ±0.1%의 편차를 포함하는 것으로 의도되며, 이때 상기 편차는 개시된 방법을 수행하거나 개시된 조성물을 사용하기에 적합하다.
값의 범위가 제공되는 경우, 각각의 사이(intervening) 값은, 문맥상 달리 명백히 제시되지 않는 한, 상기 범위 및 임의의 다른 언급된 값 및 상기 언급된 범위 내의 사이 값의 상한과 하한 사이에서 하한의 단위의 10분의 1까지 본 발명 이내에 포함되는 것으로 이해된다. 더 작은 범위 내에 독립적으로 포함될 수 있는 작은 범위의 상한 및 하한 역시, 언급된 범위 내의 임의의 구체적으로 배제된 한계를 조건으로, 본 발명 내에 포함된다. 언급된 범위가 상기 상한 및 하한 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 경우, 상기 상한 및 하한 중 하나 또는 둘 다를 배제하는 범위 역시 본 발명에 포함된다.
전술된 설명 및 첨부된 도면에서 제시되는 교시의 이점을 갖는, 본원에 개시된 본 발명의 다수의 변형 및 다른 실시양태가 본 발명이 속한 당업자에게 떠오를 것이다. 따라서, 본 발명은 개시된 특정 실시양태에 제한되어서는 안되며, 상기 변형 및 다른 실시양태가, 첨부된 청구범위 내에 포함되는 것으로 의도됨을 이해해야 한다. 특정 용어가 본원에서 사용되었지만, 이는 포괄적이고 기술적 의미로만 사용되는 것이며, 제한을 목적으로 하지 않는다.
추가 실시양태
실시양태 1. 하기 화학식 I의 화합물:
[화학식 I]
Figure pct01522
상기 식에서,
R1은 수소, 할로겐, 메틸, CF3, CHF2, CH2OH 또는 시아노이고;
R2는 (a) O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3 또는 4개의 치환기 R6, R7, R8 및 R8'[이들은 각각 독립적으로 (i) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일 또는 C1-6 알켄일렌(이때, 상기 알킬, 알켄일 및 알켄일렌은 1 내지 4개의 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Ry, SONRy, -(CO)NRyRz 또는 -NRy(CO)Rz로 임의적으로 치환될 수 있고, Ry 및 Rz는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); (ii) NRyRz-C(O)-(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); (iii) 하이드록시(C1-6 알킬); (iv) C1-6 알콕시(이때, 상기 알콕시는 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); (v) C3-9 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 C6 아릴, 치환된 또는 비치환된 5원 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴; (vi) 할로겐; (vii) 아미노; (viii) 시아노; (ix) -NRy(CO)Rz(이때, Ry 및 Rz는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음); (x) -SO2R'(이때, R'는 H 또는 C1-6 알킬임); (xi) -SO2NR'R"(이때, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); 및 (xii) 상기 헤테로사이클릴에 내포되고, 결합된 산소와 함께 카보닐을 형성할 수 있는 탄소로 이루어진 군으로부터 선택됨]로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이거나,
R2는 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C3-4 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌 및 사이클로알킬은 아미노, 하이드록실, 시아노, 할로겐, 아미드, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Rc, -SONRd, -(CO)NRcRd 또는 -NRc(CO)Rd로 치환될 수 있고, Rc 및 Rd는 각각 독립적으로 수소 및 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 알킬은 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있음)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기를 갖는 C6-10 아릴이거나,
R2는 수소 또는 -SO2NH2이고;
R3은 C1-6 알킬, 수소, 시아노 또는 할로겐이고;
R4는 A-C(O)-이고, A는 (i) C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴[이때, 상기 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 1, 2, 3 또는 4개의 R5로 임의적으로 치환될 수 있고, R5는 수소, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌(이때, 상기 알킬, 알켄일 및 알켄일렌은 아미노, C1-6 알콕시, 하이드록실, 할로겐, -SO2Re 또는 아미노로 치환될 수 있음); 할로겐, 하이드록시(C1-6 알킬), 할로(C1-6 알킬), 시아노, 시아노(C1-6 알킬), 하이드록실, C1-6 알콕시, 아미노, C2-9 헤테로아릴, -SO2Re 및 NReRf-C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되고, Re 및 Rf는 독립적으로 수소, 및 분지형 또는 선형 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴은 2개의 R5와 함께 이환형 또는 스피로 고리를 형성하고, 상이한 원자에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 이환형을 형성하거나, 동일한 탄소에 부착된 2개의 R5는 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 스피로 고리를 형성함]; 또는 (ii) -NHRg[이때, Rg는 (a) 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C3-5 사이클로알킬 C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴 및 C3-7 사이클로알킬(이때, 상기 알킬, 알켄일, 알켄일렌, 헤테로사이클릴 및 사이클로알킬은 하이드록실, 할로겐, -CF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -(CO)NR'R" 또는 -NR'(CO)R"로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임); 및 (b) C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴(이때, 상기 헤테로아릴은 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고, 상기 아릴 및 헤테로아릴은 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, 하이드록실, 할로겐, -CF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -(CO)NR'R" 및 -NR'(CO)R"로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환될 수 있고, R' 및 R"는 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬임)로 이루어진 군으로부터 선택됨]이거나,
R4는 D이고, D는 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴이다.
실시양태 2. 실시양태 1에 있어서, R3이 수소인, 화합물.
실시양태 3. 실시양태 2에 있어서, R1이 수소, 플루오로 또는 시아노인, 화합물.
실시양태 4. 실시양태 3에 있어서, R5가 수소가 아닌, 화합물.
실시양태 5. 실시양태 4에 있어서, R4가 A-C(O)-이고, A가
Figure pct01523
이고, v가 0, 1, 2, 3 또는 4이고, X, Y 및 Z가 각각 독립적으로 부재하거나 -CH2-이고, 존재하는 경우, 각각의 X, Y 및 Z 상의 0, 1 또는 2개의 H가 R5일 수 있는, 화합물.
실시양태 6. 실시양태 4에 있어서, R4가 A-C(O)-이고, A가
Figure pct01524
이고, v가 0, 1, 2, 3 또는 4이고, X, Y 및 Z가 각각 독립적으로 부재하거나 -CH2-이고, 존재하는 경우, 각각의 X, Y 및 Z 상의 0, 1 또는 2개의 H가 R5일 수 있는, 화합물.
실시양태 7. 실시양태 2에 있어서, R4가 A-C(O)-이고, A가
Figure pct01525
이고, v가 0, 1 또는 2인, 화합물.
실시양태 8. 실시양태 7에 있어서, A가
Figure pct01526
이고, v가 0, 1 또는 2인, 화합물.
실시양태 9. 실시양태 8에 있어서, R5가 수소가 아니고, A가
Figure pct01527
인, 화합물.
실시양태 10. 실시양태 7에 있어서, A가
Figure pct01528
이고, v가 0, 1 또는 2인, 화합물.
실시양태 11. 실시양태 10에 있어서, R5가 수소가 아니고, A가
Figure pct01529
인, 화합물.
실시양태 12. 실시양태 2에 있어서, R5가 수소, 불소, 시아노, NH2-C(O)-, C2-9 헤테로아릴, 시아노(C1-6 알킬) 및 하이드록시(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물.
실시양태 13. 실시양태 12에 있어서, R5가 플루오로 또는 시아노인, 화합물.
실시양태 14. 실시양태 13에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01530
Figure pct01531
Figure pct01532
Figure pct01533
Figure pct01534
Figure pct01535
Figure pct01536
Figure pct01537
Figure pct01538
.
실시양태 15. 실시양태 12에 있어서, R5가 C2-9 헤테로아릴인, 화합물.
실시양태 16. 실시양태 15에 있어서, 상기 C2-9 헤테로아릴이 하나 이상의 질소를 함유하는 임의적으로 치환된 헤테로아릴인, 화합물.
실시양태 17. 실시양태 16에 있어서, 상기 헤테로아릴이 1 또는 2개의 질소 원자를 함유하는 임의적으로 치환된 5원 헤테로아릴인, 화합물.
실시양태 18. 실시양태 17에 있어서, 상기 5원 헤테로아릴이 임의적으로 치환된 피라졸인, 화합물.
실시양태 19. 실시양태 18에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01539
Figure pct01540
.
실시양태 20. 실시양태 12에 있어서, 하나 이상의 R5가 시아노(C1-6 알킬)인, 화합물.
실시양태 21. 실시양태 20에 있어서, 하나 이상의 R5가 시아노-CH2-인, 화합물.
실시양태 22. 실시양태 21에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01541
.
실시양태 23. 실시양태 12에 있어서, R5가 수소인, 화합물.
실시양태 24. 실시양태 23에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01542
Figure pct01543
.
실시양태 25. 실시양태 1에 있어서, R4가 D이고, D가 하나 이상의 질소를 함유하는 임의적으로 치환된 헤테로아릴인, 화합물.
실시양태 26. 실시양태 25에 있어서, 상기 헤테로아릴이 1 또는 2개의 질소 원자를 함유하는 임의적으로 치환된 5원 헤테로아릴인, 화합물.
실시양태 27. 실시양태 26에 있어서, 상기 5원 헤테로아릴이 임의적으로 치환된 피라졸인, 화합물.
실시양태 28. 실시양태 27에 있어서, 상기 임의적으로 치환된 피라졸이
Figure pct01544
이고, 물결선이 N의 부착 지점을 나타내고, RA가 분지형 또는 선형 C1-6 알킬이고, 상기 알킬이 1 내지 4개의 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노- 또는 -NRy(CO)Rz로 임의적으로 치환될 수 있고, Ry 및 Rz가 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬인, 화합물.
실시양태 29. 실시양태 28에 있어서, RA가 하이드록실, 할로겐, 니트릴 또는 아미노로 치환된 선형 C1-6 알킬인, 화합물.
실시양태 30. 실시양태 29에 있어서, 상기 선형 C1-6 알킬이 니트릴로 치환된 에틸인, 화합물.
실시양태 31. 실시양태 30에 있어서, RA가
Figure pct01545
인, 화합물.
실시양태 32. 실시양태 31에 있어서, RA가
Figure pct01546
인, 화합물.
실시양태 33. 실시양태 31에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01547
Figure pct01548
.
실시양태 34. 실시양태 1에 있어서, R2가 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로사이클릴인, 화합물.
실시양태 35. 실시양태 34에 있어서, R2가
Figure pct01549
Figure pct01550
Figure pct01551
로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이들 각각이 1, 2 또는 3개의 치환기 R6, R7 및 R8로 임의적으로 치환될 수 있는, 화합물.
실시양태 36. 실시양태 35에 있어서, R2가
Figure pct01552
인, 화합물.
실시양태 37. 실시양태 36에 있어서, R2가
Figure pct01553
인, 화합물.
실시양태 38. 실시양태 37에 있어서, R2가
Figure pct01554
인, 화합물.
실시양태 39. 실시양태 38에 있어서, R2가
Figure pct01555
인, 화합물.
실시양태 40. 실시양태 39에 있어서, R6이 C1-6 알킬 또는 하이드록시(C1-6 알킬)인, 화합물.
실시양태 41. 실시양태 40에 있어서, R6이 메틸인, 화합물.
실시양태 42. 실시양태 41에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01556
Figure pct01557
Figure pct01558
Figure pct01559
.
실시양태 43. 실시양태 35에 있어서, R2가
Figure pct01560
인, 화합물.
실시양태 44. 실시양태 43에 있어서, R2가
Figure pct01561
인, 화합물.
실시양태 45. 실시양태 44에 있어서, R2가
Figure pct01562
인, 화합물.
실시양태 46. 실시양태 45에 있어서, R6이 분지형 또는 선형 C1-6 알킬이고, 상기 알킬이 1 내지 4개의 하이드록실 또는 할로겐으로 임의적으로 치환될 수 있는, 화합물.
실시양태 47. 실시양태 46에 있어서, R2가
Figure pct01563
인, 화합물.
실시양태 48. 실시양태 47에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01564
.
실시양태 49. 실시양태 35에 있어서, R2가
Figure pct01565
인, 화합물.
실시양태 50. 실시양태 49에 있어서, R2가
Figure pct01566
인, 화합물.
실시양태 51. 실시양태 50에 있어서, R6이 분지형 또는 선형 C1-6 알킬인, 화합물.
실시양태 52. 실시양태 51에 있어서, R6이 메틸, 에틸 또는 이소프로필인, 화합물.
실시양태 53. 실시양태 52에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01567
Figure pct01568
.
실시양태 54. 실시양태 35에 있어서, R2가
Figure pct01569
인, 화합물.
실시양태 55. 실시양태 54에 있어서, R2가
Figure pct01570
인, 화합물.
실시양태 56. 실시양태 55에 있어서, R2가
Figure pct01571
인, 화합물.
실시양태 57. 실시양태 56에 있어서, R6이 분지형 또는 선형 C1-6 알킬인, 화합물.
실시양태 58. 실시양태 57에 있어서, R6이 메틸인, 화합물.
실시양태 59. 실시양태 58에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01572
.
실시양태 60. 실시양태 35에 있어서, R2가
Figure pct01573
인, 화합물.
실시양태 61. 실시양태 35에 있어서, R6, R7 및 R8 중 하나가 O이고, 부착된 탄소와 함께 카보닐을 형성하는, 화합물.
실시양태 62. 실시양태 61에 있어서, R2가
Figure pct01574
이고, R7이 수소 또는 C1-6 알킬인, 화합물.
실시양태 63. 실시양태 62에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01575
Figure pct01576
.
실시양태 64. 실시양태 1에 있어서, 하기 구조 중 하나의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct01577
.
실시양태 65. 실시양태 1 내지 64 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물.
실시양태 66. 실시양태 65에 있어서, 화학치료제를 추가로 포함하는 약학 조성물.
실시양태 67. 실시양태 66에 있어서, 상기 화학치료제가 면역치료제인, 약학 조성물.
실시양태 68. HPK1을 효과량의 실시양태 1 내지 64 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 실시양태 65 내지 67 중 어느 한 실시양태에 따른 약학 조성물과 접촉시키는 단계를 포함하는, HPK1을 억제하는 방법.
실시양태 69. 효과량의 실시양태 1 내지 64 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 실시양태 65 내지 67 중 어느 한 실시양태에 따른 약학 조성물을 면역 반응의 강화를 필요로 하는 대상에게 투여함을 포함하는, 상기 대상에서 면역 반응을 강화시키는 방법.
실시양태 70. 실시양태 69에 있어서, 대상 내의 T 세포가, 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전과 비교하여, 강화된 프라이밍, 강화된 활성화, 강화된 이전, 강화된 증식, 강화된 이동, 강화된 증식, 강화된 생존 및 강화된 세포용해 활성 중 하나 이상을 갖는, 방법.
실시양태 71. 실시양태 70에 있어서, T 세포 활성화가, 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전과 비교하여, γ-IFN+ CD8 T 세포의 증가된 빈도, 또는 T 세포에 의한 IL-2 또는 그랜자임 B 생산의 강화된 수준에 의해 특징지어지는, 방법.
실시양태 72. 실시양태 71에 있어서, T 세포의 수가, 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전과 비교하여, 증가되는, 방법.
실시양태 73. 실시양태 70 내지 72 중 어느 한 실시양태에 있어서, T 세포가 항원-특이적 CD8 T 세포인, 방법.
실시양태 74. 실시양태 73에 있어서, 대상 내의 항원 제시 세포가, 화합물 또는 약학 조성물의 투여 전과 비교하여, 강화된 성숙화 및 활성화를 갖는, 방법.
실시양태 75. 실시양태 74에 있어서, 항원 제시 세포가 수지상 제포인, 방법.
실시양태 76. 실시양태 74에 있어서, 항원 제시 세포의 성숙화가 CD83+ 수지상 세포의 증가된 빈도에 의해 특징지어지는, 방법.
실시양태 77. 실시양태 74에 있어서, 항원 제시 세포의 활성화가 수지상 세포 상의 CD80 및 CD86의 증가된 발현에 의해 특징지어지는, 방법.
실시양태 78. 실시양태 68 내지 77 중 어느 한 실시양태에 있어서, 상기 대상이 암을 갖는, 방법.
실시양태 79. 효과량의 실시양태 1 내지 64 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 실시양태 65 내지 67 중 어느 한 실시양태에 따른 약학 조성물을 치료를 필요로 하는 대상에게 투여함을 포함하는, HPK1-의존성 장애를 치료하는 방법.
실시양태 80. 실시양태 79에 있어서, 상기 HPK1-의존성 장애가 암인, 방법.
실시양태 81. 실시양태 78 또는 80에 있어서, 암이 대장암, 흑색종, 비-소세포 폐암, 난소암, 유방암, 췌장암, 혈액학적 악성 종양 및 신장 세포 암종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 암을 포함하는, 방법.
실시양태 82. 실시양태 78, 80 및 81 중 어느 한 실시양태에 있어서, 암이 증가된 수준의 T 세포 침윤을 갖는, 방법.
실시양태 83. 실시양태 78, 80, 81 및 82 중 어느 한 실시양태에 있어서, 대상 내의 암 세포가 선택적으로, 화합물 또는 조성물의 투여 전과 비교하여, MHC 클래스 I 항원 발현의 증가된 발현을 갖는, 방법.
실시양태 84. 실시양태 78, 80, 81, 82 및 83 중 어느 한 실시양태에 있어서, 화학치료제를 상기 대상에게 투여함을 추가로 포함하는 방법.
실시양태 85. 실시양태 84에 있어서, 상기 화학치료제가 상기 화합물 또는 상기 조성물과 동시에 상기 대상에게 투여되는, 방법.
실시양태 86. 실시양태 84에 있어서, 상기 화학치료제가 상기 화합물 또는 상기 조성물의 투여 전에 상기 대상에게 투여되는, 방법.
실시양태 87. 실시양태 84에 있어서, 상기 화학치료제가 상기 화합물 또는 상기 조성물의 투여 후에 상기 대상에게 투여되는, 방법.
SEQUENCE LISTING <110> F. HOFFMANN-LA ROCHE AG <120> ISOQUINOLINES AS INHIBITORS OF HPK1 <130> P34138-WO-2 <140> PCT/US2018/025573 <141> 2018-03-30 <150> PCT/CN2017/078790 <151> 2017-03-30 <150> PCT/CN2018/076908 <151> 2018-02-15 <160> 4 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 2502 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 atggacgtcg tggaccctga cattttcaat agagaccccc gggaccacta tgacctgcta 60 cagcggctgg gtggcggcac gtatggggaa gtctttaagg ctcgagacaa ggtgtcaggg 120 gacctggtgg cactgaagat ggtgaagatg gagcctgatg atgatgtctc cacccttcag 180 aaggaaatcc tcatattgaa aacttgccgg cacgccaaca tcgtggccta ccatgggagt 240 tatctctggt tgcagaaact ctggatctgc atggaattct gtggggctgg ttctctccag 300 gacatctacc aagtgacagg ctccctgtca gagctccaga ttagctatgt ctgccgggaa 360 gtgctccagg gactggccta tttgcactca cagaagaaga tacacaggga catcaaggga 420 gctaacatcc tcatcaatga tgctggggag gtcagattgg ctgactttgg catctcggcc 480 cagattgggg ctacactggc cagacgcctc tctttcattg ggacacccta ctggatggct 540 ccggaagtgg cagctgtggc cctgaaggga ggatacaatg agctgtgtga catctggtcc 600 ctgggcatca cggccatcga actggccgag ctacagccac cgctctttga tgtgcaccct 660 ctcagagttc tcttcctcat gaccaagagt ggctaccagc ctccccgact gaaggaaaaa 720 ggcaaatggt cggctgcctt ccacaacttc atcaaagtca ctctgactaa gagtcccaag 780 aaacgaccca gcgccaccaa gatgctcagt catcaactgg tatcccagcc tgggctgaat 840 cgaggcctga tcctggatct tcttgacaaa ctgaagaatc ccgggaaagg accctccatt 900 ggggacattg aggatgagga gcccgagcta ccccctgcta tccctcggcg gatcagatcc 960 acccaccgct ccagctctct ggggatccca gatgcagact gctgtcggcg gcacatggag 1020 ttcaggaagc tccgaggaat ggagaccaga cccccagcca acaccgctcg cctacagcct 1080 cctcgagacc tcaggagcag cagccccagg aagcaactgt cagagtcgtc tgacgatgac 1140 tatgacgacg tggacatccc cacccctgca gaggacacac ctcctccact tccccccaag 1200 cccaagttcc gttctccatc agacgagggt cctgggagca tgggggatga tgggcagctg 1260 agcccggggg tgctggtccg gtgtgccagt gggcccccac caaacagccc ccgtcctggg 1320 cctcccccat ccaccagcag cccccacctc accgcccatt cagaaccctc actctggaac 1380 ccaccctccc gggagcttga caagccccca cttctgcccc ccaagaagga aaagatgaag 1440 agaaagggat gtgcccttct cgtaaagttg ttcaatggct gccccctccg gatccacagc 1500 acggccgcct ggacacatcc ctccaccaag gaccagcacc tgctcctggg ggcagaggaa 1560 ggcatcttca tcctgaaccg gaatgaccag gaggccacgc tggaaatgct ctttcctagc 1620 cggactacgt gggtgtactc catcaacaac gttctcatgt ctctctcagg aaagaccccc 1680 cacctgtatt ctcatagcat ccttggcctg ctggaacgga aagagaccag agcaggaaac 1740 cccatcgctc acattagccc ccaccgccta ctggcaagga agaacatggt ttccaccaag 1800 atccaggaca ccaaaggctg ccgggcgtgc tgtgtggcgg agggtgcgag ctctgggggc 1860 ccgttcctgt gcggtgcatt ggagacgtcc gttgtcctgc ttcagtggta ccagcccatg 1920 aacaaattcc tgcttgtccg gcaggtgctg ttcccactgc cgacgcctct gtccgtgttc 1980 gcgctgctga ccgggccagg ctctgagctg cccgctgtgt gcatcggcgt gagccccggg 2040 cggccgggga agtcggtgct cttccacacg gtgcgctttg gcgcgctctc ttgctggctg 2100 ggcgagatga gcaccgagca caggggaccc gtgcaggtga cccaggtaga ggaagatatg 2160 gtgatggtgt tgatggatgg ctctgtgaag ctggtgaccc cggaggggtc cccagtccgg 2220 ggacttcgca cacctgagat ccccatgacc gaagcggtgg aggccgtggc tatggttgga 2280 ggtcagcttc aggccttctg gaagcatgga gtgcaggtgt gggctctagg ctcggatcag 2340 ctgctacagg agctgagaga ccctaccctc actttccgtc tgcttggctc ccccaggctg 2400 gagtgcagtg gcacgatctc gcctcactgc aacctcctcc tcccaggttc aagcaattct 2460 cctgcctcag cctcccgagt agctgggatt acaggcctgt ag 2502 <210> 2 <211> 833 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Asp Val Val Asp Pro Asp Ile Phe Asn Arg Asp Pro Arg Asp His 1 5 10 15 Tyr Asp Leu Leu Gln Arg Leu Gly Gly Gly Thr Tyr Gly Glu Val Phe 20 25 30 Lys Ala Arg Asp Lys Val Ser Gly Asp Leu Val Ala Leu Lys Met Val 35 40 45 Lys Met Glu Pro Asp Asp Asp Val Ser Thr Leu Gln Lys Glu Ile Leu 50 55 60 Ile Leu Lys Thr Cys Arg His Ala Asn Ile Val Ala Tyr His Gly Ser 65 70 75 80 Tyr Leu Trp Leu Gln Lys Leu Trp Ile Cys Met Glu Phe Cys Gly Ala 85 90 95 Gly Ser Leu Gln Asp Ile Tyr Gln Val Thr Gly Ser Leu Ser Glu Leu 100 105 110 Gln Ile Ser Tyr Val Cys Arg Glu Val Leu Gln Gly Leu Ala Tyr Leu 115 120 125 His Ser Gln Lys Lys Ile His Arg Asp Ile Lys Gly Ala Asn Ile Leu 130 135 140 Ile Asn Asp Ala Gly Glu Val Arg Leu Ala Asp Phe Gly Ile Ser Ala 145 150 155 160 Gln Ile Gly Ala Thr Leu Ala Arg Arg Leu Ser Phe Ile Gly Thr Pro 165 170 175 Tyr Trp Met Ala Pro Glu Val Ala Ala Val Ala Leu Lys Gly Gly Tyr 180 185 190 Asn Glu Leu Cys Asp Ile Trp Ser Leu Gly Ile Thr Ala Ile Glu Leu 195 200 205 Ala Glu Leu Gln Pro Pro Leu Phe Asp Val His Pro Leu Arg Val Leu 210 215 220 Phe Leu Met Thr Lys Ser Gly Tyr Gln Pro Pro Arg Leu Lys Glu Lys 225 230 235 240 Gly Lys Trp Ser Ala Ala Phe His Asn Phe Ile Lys Val Thr Leu Thr 245 250 255 Lys Ser Pro Lys Lys Arg Pro Ser Ala Thr Lys Met Leu Ser His Gln 260 265 270 Leu Val Ser Gln Pro Gly Leu Asn Arg Gly Leu Ile Leu Asp Leu Leu 275 280 285 Asp Lys Leu Lys Asn Pro Gly Lys Gly Pro Ser Ile Gly Asp Ile Glu 290 295 300 Asp Glu Glu Pro Glu Leu Pro Pro Ala Ile Pro Arg Arg Ile Arg Ser 305 310 315 320 Thr His Arg Ser Ser Ser Leu Gly Ile Pro Asp Ala Asp Cys Cys Arg 325 330 335 Arg His Met Glu Phe Arg Lys Leu Arg Gly Met Glu Thr Arg Pro Pro 340 345 350 Ala Asn Thr Ala Arg Leu Gln Pro Pro Arg Asp Leu Arg Ser Ser Ser 355 360 365 Pro Arg Lys Gln Leu Ser Glu Ser Ser Asp Asp Asp Tyr Asp Asp Val 370 375 380 Asp Ile Pro Thr Pro Ala Glu Asp Thr Pro Pro Pro Leu Pro Pro Lys 385 390 395 400 Pro Lys Phe Arg Ser Pro Ser Asp Glu Gly Pro Gly Ser Met Gly Asp 405 410 415 Asp Gly Gln Leu Ser Pro Gly Val Leu Val Arg Cys Ala Ser Gly Pro 420 425 430 Pro Pro Asn Ser Pro Arg Pro Gly Pro Pro Pro Ser Thr Ser Ser Pro 435 440 445 His Leu Thr Ala His Ser Glu Pro Ser Leu Trp Asn Pro Pro Ser Arg 450 455 460 Glu Leu Asp Lys Pro Pro Leu Leu Pro Pro Lys Lys Glu Lys Met Lys 465 470 475 480 Arg Lys Gly Cys Ala Leu Leu Val Lys Leu Phe Asn Gly Cys Pro Leu 485 490 495 Arg Ile His Ser Thr Ala Ala Trp Thr His Pro Ser Thr Lys Asp Gln 500 505 510 His Leu Leu Leu Gly Ala Glu Glu Gly Ile Phe Ile Leu Asn Arg Asn 515 520 525 Asp Gln Glu Ala Thr Leu Glu Met Leu Phe Pro Ser Arg Thr Thr Trp 530 535 540 Val Tyr Ser Ile Asn Asn Val Leu Met Ser Leu Ser Gly Lys Thr Pro 545 550 555 560 His Leu Tyr Ser His Ser Ile Leu Gly Leu Leu Glu Arg Lys Glu Thr 565 570 575 Arg Ala Gly Asn Pro Ile Ala His Ile Ser Pro His Arg Leu Leu Ala 580 585 590 Arg Lys Asn Met Val Ser Thr Lys Ile Gln Asp Thr Lys Gly Cys Arg 595 600 605 Ala Cys Cys Val Ala Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Pro Phe Leu Cys 610 615 620 Gly Ala Leu Glu Thr Ser Val Val Leu Leu Gln Trp Tyr Gln Pro Met 625 630 635 640 Asn Lys Phe Leu Leu Val Arg Gln Val Leu Phe Pro Leu Pro Thr Pro 645 650 655 Leu Ser Val Phe Ala Leu Leu Thr Gly Pro Gly Ser Glu Leu Pro Ala 660 665 670 Val Cys Ile Gly Val Ser Pro Gly Arg Pro Gly Lys Ser Val Leu Phe 675 680 685 His Thr Val Arg Phe Gly Ala Leu Ser Cys Trp Leu Gly Glu Met Ser 690 695 700 Thr Glu His Arg Gly Pro Val Gln Val Thr Gln Val Glu Glu Asp Met 705 710 715 720 Val Met Val Leu Met Asp Gly Ser Val Lys Leu Val Thr Pro Glu Gly 725 730 735 Ser Pro Val Arg Gly Leu Arg Thr Pro Glu Ile Pro Met Thr Glu Ala 740 745 750 Val Glu Ala Val Ala Met Val Gly Gly Gln Leu Gln Ala Phe Trp Lys 755 760 765 His Gly Val Gln Val Trp Ala Leu Gly Ser Asp Gln Leu Leu Gln Glu 770 775 780 Leu Arg Asp Pro Thr Leu Thr Phe Arg Leu Leu Gly Ser Pro Arg Leu 785 790 795 800 Glu Cys Ser Gly Thr Ile Ser Pro His Cys Asn Leu Leu Leu Pro Gly 805 810 815 Ser Ser Asn Ser Pro Ala Ser Ala Ser Arg Val Ala Gly Ile Thr Gly 820 825 830 Leu <210> 3 <211> 2466 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 3 atggacgtcg tggaccctga cattttcaat agagaccccc gggaccacta tgacctgcta 60 cagcggctgg gtggcggcac gtatggggaa gtctttaagg ctcgagacaa ggtgtcaggg 120 gacctggtgg cactgaagat ggtgaagatg gagcctgatg atgatgtctc cacccttcag 180 aaggaaatcc tcatattgaa aacttgccgg cacgccaaca tcgtggccta ccatgggagt 240 tatctctggt tgcagaaact ctggatctgc atggaattct gtggggctgg ttctctccag 300 gacatctacc aagtgacagg ctccctgtca gagctccaga ttagctatgt ctgccgggaa 360 gtgctccagg gactggccta tttgcactca cagaagaaga tacacaggga catcaaggga 420 gctaacatcc tcatcaatga tgctggggag gtcagattgg ctgactttgg catctcggcc 480 cagattgggg ctacactggc cagacgcctc tctttcattg ggacacccta ctggatggct 540 ccggaagtgg cagctgtggc cctgaaggga ggatacaatg agctgtgtga catctggtcc 600 ctgggcatca cggccatcga actggccgag ctacagccac cgctctttga tgtgcaccct 660 ctcagagttc tcttcctcat gaccaagagt ggctaccagc ctccccgact gaaggaaaaa 720 ggcaaatggt cggctgcctt ccacaacttc atcaaagtca ctctgactaa gagtcccaag 780 aaacgaccca gcgccaccaa gatgctcagt catcaactgg tatcccagcc tgggctgaat 840 cgaggcctga tcctggatct tcttgacaaa ctgaagaatc ccgggaaagg accctccatt 900 ggggacattg aggatgagga gcccgagcta ccccctgcta tccctcggcg gatcagatcc 960 acccaccgct ccagctctct ggggatccca gatgcagact gctgtcggcg gcacatggag 1020 ttcaggaagc tccgaggaat ggagaccaga cccccagcca acaccgctcg cctacagcct 1080 cctcgagacc tcaggagcag cagccccagg aagcaactgt cagagtcgtc tgacgatgac 1140 tatgacgacg tggacatccc cacccctgca gaggacacac ctcctccact tccccccaag 1200 cccaagttcc gttctccatc agacgagggt cctgggagca tgggggatga tgggcagctg 1260 agcccggggg tgctggtccg gtgtgccagt gggcccccac caaacagccc ccgtcctggg 1320 cctcccccat ccaccagcag cccccacctc accgcccatt cagaaccctc actctggaac 1380 ccaccctccc gggagcttga caagccccca cttctgcccc ccaagaagga aaagatgaag 1440 agaaagggat gtgcccttct cgtaaagttg ttcaatggct gccccctccg gatccacagc 1500 acggccgcct ggacacatcc ctccaccaag gaccagcacc tgctcctggg ggcagaggaa 1560 ggcatcttca tcctgaaccg gaatgaccag gaggccacgc tggaaatgct ctttcctagc 1620 cggactacgt gggtgtactc catcaacaac gttctcatgt ctctctcagg aaagaccccc 1680 cacctgtatt ctcatagcat ccttggcctg ctggaacgga aagagaccag agcaggaaac 1740 cccatcgctc acattagccc ccaccgccta ctggcaagga agaacatggt ttccaccaag 1800 atccaggaca ccaaaggctg ccgggcgtgc tgtgtggcgg agggtgcgag ctctgggggc 1860 ccgttcctgt gcggtgcatt ggagacgtcc gttgtcctgc ttcagtggta ccagcccatg 1920 aacaaattcc tgcttgtccg gcaggtgctg ttcccactgc cgacgcctct gtccgtgttc 1980 gcgctgctga ccgggccagg ctctgagctg cccgctgtgt gcatcggcgt gagccccggg 2040 cggccgggga agtcggtgct cttccacacg gtgcgctttg gcgcgctctc ttgctggctg 2100 ggcgagatga gcaccgagca caggggaccc gtgcaggtga cccaggtaga ggaagatatg 2160 gtgatggtgt tgatggatgg ctctgtgaag ctggtgaccc cggaggggtc cccagtccgg 2220 ggacttcgca cacctgagat ccccatgacc gaagcggtgg aggccgtggc tatggttgga 2280 ggtcagcttc aggccttctg gaagcatgga gtgcaggtgt gggctctagg ctcggatcag 2340 ctgctacagg agctgagaga ccctaccctc actttccgtc tgcttggctc ccccaggcct 2400 gtagtggtgg agacacgccc agtggatgat cctactgctc ccagcaacct ctacatccag 2460 gaatga 2466 <210> 4 <211> 821 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Met Asp Val Val Asp Pro Asp Ile Phe Asn Arg Asp Pro Arg Asp His 1 5 10 15 Tyr Asp Leu Leu Gln Arg Leu Gly Gly Gly Thr Tyr Gly Glu Val Phe 20 25 30 Lys Ala Arg Asp Lys Val Ser Gly Asp Leu Val Ala Leu Lys Met Val 35 40 45 Lys Met Glu Pro Asp Asp Asp Val Ser Thr Leu Gln Lys Glu Ile Leu 50 55 60 Ile Leu Lys Thr Cys Arg His Ala Asn Ile Val Ala Tyr His Gly Ser 65 70 75 80 Tyr Leu Trp Leu Gln Lys Leu Trp Ile Cys Met Glu Phe Cys Gly Ala 85 90 95 Gly Ser Leu Gln Asp Ile Tyr Gln Val Thr Gly Ser Leu Ser Glu Leu 100 105 110 Gln Ile Ser Tyr Val Cys Arg Glu Val Leu Gln Gly Leu Ala Tyr Leu 115 120 125 His Ser Gln Lys Lys Ile His Arg Asp Ile Lys Gly Ala Asn Ile Leu 130 135 140 Ile Asn Asp Ala Gly Glu Val Arg Leu Ala Asp Phe Gly Ile Ser Ala 145 150 155 160 Gln Ile Gly Ala Thr Leu Ala Arg Arg Leu Ser Phe Ile Gly Thr Pro 165 170 175 Tyr Trp Met Ala Pro Glu Val Ala Ala Val Ala Leu Lys Gly Gly Tyr 180 185 190 Asn Glu Leu Cys Asp Ile Trp Ser Leu Gly Ile Thr Ala Ile Glu Leu 195 200 205 Ala Glu Leu Gln Pro Pro Leu Phe Asp Val His Pro Leu Arg Val Leu 210 215 220 Phe Leu Met Thr Lys Ser Gly Tyr Gln Pro Pro Arg Leu Lys Glu Lys 225 230 235 240 Gly Lys Trp Ser Ala Ala Phe His Asn Phe Ile Lys Val Thr Leu Thr 245 250 255 Lys Ser Pro Lys Lys Arg Pro Ser Ala Thr Lys Met Leu Ser His Gln 260 265 270 Leu Val Ser Gln Pro Gly Leu Asn Arg Gly Leu Ile Leu Asp Leu Leu 275 280 285 Asp Lys Leu Lys Asn Pro Gly Lys Gly Pro Ser Ile Gly Asp Ile Glu 290 295 300 Asp Glu Glu Pro Glu Leu Pro Pro Ala Ile Pro Arg Arg Ile Arg Ser 305 310 315 320 Thr His Arg Ser Ser Ser Leu Gly Ile Pro Asp Ala Asp Cys Cys Arg 325 330 335 Arg His Met Glu Phe Arg Lys Leu Arg Gly Met Glu Thr Arg Pro Pro 340 345 350 Ala Asn Thr Ala Arg Leu Gln Pro Pro Arg Asp Leu Arg Ser Ser Ser 355 360 365 Pro Arg Lys Gln Leu Ser Glu Ser Ser Asp Asp Asp Tyr Asp Asp Val 370 375 380 Asp Ile Pro Thr Pro Ala Glu Asp Thr Pro Pro Pro Leu Pro Pro Lys 385 390 395 400 Pro Lys Phe Arg Ser Pro Ser Asp Glu Gly Pro Gly Ser Met Gly Asp 405 410 415 Asp Gly Gln Leu Ser Pro Gly Val Leu Val Arg Cys Ala Ser Gly Pro 420 425 430 Pro Pro Asn Ser Pro Arg Pro Gly Pro Pro Pro Ser Thr Ser Ser Pro 435 440 445 His Leu Thr Ala His Ser Glu Pro Ser Leu Trp Asn Pro Pro Ser Arg 450 455 460 Glu Leu Asp Lys Pro Pro Leu Leu Pro Pro Lys Lys Glu Lys Met Lys 465 470 475 480 Arg Lys Gly Cys Ala Leu Leu Val Lys Leu Phe Asn Gly Cys Pro Leu 485 490 495 Arg Ile His Ser Thr Ala Ala Trp Thr His Pro Ser Thr Lys Asp Gln 500 505 510 His Leu Leu Leu Gly Ala Glu Glu Gly Ile Phe Ile Leu Asn Arg Asn 515 520 525 Asp Gln Glu Ala Thr Leu Glu Met Leu Phe Pro Ser Arg Thr Thr Trp 530 535 540 Val Tyr Ser Ile Asn Asn Val Leu Met Ser Leu Ser Gly Lys Thr Pro 545 550 555 560 His Leu Tyr Ser His Ser Ile Leu Gly Leu Leu Glu Arg Lys Glu Thr 565 570 575 Arg Ala Gly Asn Pro Ile Ala His Ile Ser Pro His Arg Leu Leu Ala 580 585 590 Arg Lys Asn Met Val Ser Thr Lys Ile Gln Asp Thr Lys Gly Cys Arg 595 600 605 Ala Cys Cys Val Ala Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Pro Phe Leu Cys 610 615 620 Gly Ala Leu Glu Thr Ser Val Val Leu Leu Gln Trp Tyr Gln Pro Met 625 630 635 640 Asn Lys Phe Leu Leu Val Arg Gln Val Leu Phe Pro Leu Pro Thr Pro 645 650 655 Leu Ser Val Phe Ala Leu Leu Thr Gly Pro Gly Ser Glu Leu Pro Ala 660 665 670 Val Cys Ile Gly Val Ser Pro Gly Arg Pro Gly Lys Ser Val Leu Phe 675 680 685 His Thr Val Arg Phe Gly Ala Leu Ser Cys Trp Leu Gly Glu Met Ser 690 695 700 Thr Glu His Arg Gly Pro Val Gln Val Thr Gln Val Glu Glu Asp Met 705 710 715 720 Val Met Val Leu Met Asp Gly Ser Val Lys Leu Val Thr Pro Glu Gly 725 730 735 Ser Pro Val Arg Gly Leu Arg Thr Pro Glu Ile Pro Met Thr Glu Ala 740 745 750 Val Glu Ala Val Ala Met Val Gly Gly Gln Leu Gln Ala Phe Trp Lys 755 760 765 His Gly Val Gln Val Trp Ala Leu Gly Ser Asp Gln Leu Leu Gln Glu 770 775 780 Leu Arg Asp Pro Thr Leu Thr Phe Arg Leu Leu Gly Ser Pro Arg Pro 785 790 795 800 Val Val Val Glu Thr Arg Pro Val Asp Asp Pro Thr Ala Pro Ser Asn 805 810 815 Leu Tyr Ile Gln Glu 820

Claims (60)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
    [화학식 I]
    Figure pct01578

    상기 식에서,
    R1은 수소, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 하이드록시알킬, 하이드록실, C1-6 알콕실, 임의적으로 치환된 아미노 또는 임의적으로 치환된 아실아미노이고;
    R2는 (a) O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴; (b) 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴; (c) 수소, 할로겐, 시아노; 또는 Ra가 각각 독립적으로 C1-6 알킬이고, Rb가 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이거나, Ra 및 Rb가 이들이 부착된 원자와 함께 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로사이클릴을 형성하는, -NRbC(O)Ra, -NRbSO2Ra, -SO2NRaRb 또는 -SO2Ra; (d) Ra1이 각각 독립적으로 C6-10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬; 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이고, 상기 C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴이 임의적으로 치환된, -ORa1 또는 -(C1-6 알킬렌)-ORa1; (e) 1 내지 5개의 치환기로 각각 임의적으로 치환된 C1-6 알킬, C2-6 알켄일 또는 C2-6 알킨일; (f) 1 내지 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-8 사이클로알킬; (g) Ra2가 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고, Rb2가 수소, C1-6 알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴이거나, Ra2 및 Rb2가 이들이 부착된 원자와 함께 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로사이클릴을 형성하고, C1-6 알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴 및 5 내지 10원 헤테로사이클릴이 임의적으로 치환된, -C(O)NRa2Rb2 또는 -NRa2(CO)Rb2; 또는 (h) 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6-10 아릴 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴이고, 이때 R2의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
    R3은 수소, 시아노, 할로겐, 임의적으로 치환된 C1-6 알킬, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로사이클릴 또는 임의적으로 치환된 C1-6 알콕시이고;
    R4는 A-C(O)- 또는 D이고;
    A는 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴, C2-9 헤테로사이클릴, -NHRg 또는 -ORh이고, 이때 A의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 및 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
    Rg 및 Rh는 독립적으로 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴이고, 이때 Rg 및 Rh의 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, C2-9 헤테로아릴 및 C2-9 헤테로사이클릴은 독립적으로 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
    D는 수소, C6-10 아릴; O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 10원 헤테로아릴; 또는 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-8 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합된 5 내지 10원 헤테로아릴이고, 이때 D의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환되되,
    상기 화합물은 N-(8-아미노-3-이소퀴놀린일)-N'-에틸-우레아, 5-[(8-아미노-3-이소퀴놀린일)아미노]-2-피라진카보니트릴 및 5-[(8-아미노-3-이소퀴놀린일)아미노]-3-[(1R)-2-(다이메틸아미노)-1-메틸에톡시]-2-피라진카보니트릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염이 아니다.
  2. 제1항에 있어서,
    R2가 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴 또는 5 내지 10원 헤테로사이클릴인, 화합물.
  3. 제2항에 있어서,
    R2가 각각 임의적으로 치환된
    Figure pct01579

    Figure pct01580

    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물.
  4. 제2항에 있어서,
    R2가 각각 임의적으로 치환된
    Figure pct01581

    Figure pct01582

    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물.
  5. 제4항에 있어서,
    R2가
    Figure pct01583
    이고;
    R6, R7 및 R8이 각각 독립적으로 i) 알킬, 알켄일 및 알켄일렌이 하이드록실, 할로겐, 니트릴, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노-, 다이(C1-6 알킬)아미노-, -SO2Ry, -S(O)NRy, -(CO)NRyRz 및 -NRy(CO)Rz로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고, Ry 및 Rz가 각각의 경우에 독립적으로 수소; 또는 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬인, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일 또는 C1-6 알켄일렌; ii) Ry 및 Rz가 각각 독립적으로 수소; 또는 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬인, NRyRz-C(O)-; iii) 하이드록시(C1-6 알킬); iv) 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알콕시; v) C3-9 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 C6 아릴, 치환된 또는 비치환된 5원 헤테로아릴, 또는 C2-9 헤테로사이클릴; vi) 할로겐; vii) 아미노; viii) 시아노; ix) Ry 및 Rz가 각각 독립적으로 수소; 또는 하이드록실 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬인, -NRyC(O)Rz; x) R'가 H 또는 C1-6 알킬인, -SO2R'; xi) R' 및 R"가 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬인. -SO2NR'R"; xii) R'가 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"가 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴인, -NR'C(O)OR", -NR'SO2NR" 또는 -NR'S(O)R"; 및 xiii) 상기 헤테로사이클릴에 내포되고, 결합된 산소와 함께 카보닐을 형성할 수 있는 탄소로 이루어진 군으로부터 선택되는,
    화합물.
  6. 제5항에 있어서,
    R2가
    Figure pct01584
    인, 화합물.
  7. 제6항에 있어서,
    R2가
    Figure pct01585
    인, 화합물.
  8. 제7항에 있어서,
    R2가
    Figure pct01586
    이고; R6, R7 및 R8이 각각 독립적으로 수소, 하이드록실, 아미노, C1-6 알킬, C1-6 알콕시 및 모노(C1-6 알킬)아미노로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물.
  9. 제8항에 있어서,
    R6이 C1-6 알킬이고; R7이 수소, 아미노 또는 모노(C1-6 알킬)아미노이고; R8이 수소, 하이드록실 또는 C1-6 알콕시인, 화합물.
  10. 제9항에 있어서,
    R6이 메틸인, 화합물.
  11. 제10항에 있어서,
    R7이 아미노인, 화합물.
  12. 제10항에 있어서,
    R2가
    Figure pct01587
    인, 화합물.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 -A-C(O)-인, 화합물.
  14. 제13항에 있어서,
    A가 i) 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴이 수소, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌, 할로겐, 시아노, 하이드록실, C1-6 알콕시, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf, -NReSO2Rf 및 NReRf-C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 R5로 임의적으로 치환되고, R5의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일 또는 C2-6 알켄일렌이 C1-6 알콕시, 하이드록실, 할로겐, 시아노, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf 및 -C(O)NReRf로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고, Re 및 Rf가 각각의 경우에 독립적으로 수소, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴; 또는 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴이 2개의 R5와 함께 이환형 또는 스피로 고리를 형성하고, 상이한 원자에 부착된 2개의 R5가 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 이환형을 형성하거나, 동일한 탄소에 부착된 2개의 R5가 이들 각각이 부착된 탄소와 함께 스피로 고리를 형성하는, C3-7 사이클로알킬, C2-9 헤테로아릴 또는 C2-9 헤테로사이클릴; ii) Rg 및 Rh가 독립적으로 a) 알킬, 알켄일, 알켄일렌, 헤테로사이클릴 및 사이클로알킬이 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R", -NR'C(O)R", -NR'C(O)OR", -NR'C(O)NR"R"', -NR'SO2NR"R"' 및 -NR'S(O)R"로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고, R' 및 R"'가 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"가 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴이거나, R" 및 R"'가 이들이 부착된 질소와 함께 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클릴을 형성하는, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴 또는 C3-7 사이클로알킬; 및 b) 헤테로아릴이 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고, 아릴 및 헤테로아릴이 분지형 또는 선형 C1-6 알킬, C1-6 알켄일, C1-6 알켄일렌, C2-9 헤테로사이클릴, C3-7 사이클로알킬, 하이드록실, 할로겐, -CHF2, -CF3, 아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 시아노, C3-7 사이클로알킬, C1-6 알콕시, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R" 및 -NR'C(O)R"로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고, R' 및 R"가 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬인, C2-9 헤테로아릴 또는 C6-10 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는, -NHRg 또는 -ORh; 또는 iii) 하이드록실, 할로겐, 시아노, C1-6 알콕시, 아미노, 모노(C1-6 알킬)아미노, 다이(C1-6 알킬)아미노, C3-7 사이클로알킬, C6-10 아릴, 5 내지 10원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴; 및 R' 및 R"'가 독립적으로 H 또는 C1-6 알킬이고, R"가 독립적으로 C1-6 알킬, 할로(C1-6 알킬), 또는 C1-6 알킬로 임의적으로 치환된 C6-10 아릴이거나, R" 및 R"'가 이들이 부착된 질소와 함께 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하는, -SO2R', -SO2NR'R", -C(O)NR'R", -NR'C(O)R", -NR'C(O)OR", -NR'C(O)NR"R"', -NR'SO2NR"R"' 또는 -NR'S(O)R"로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-6 알킬인, 화합물.
  15. 제14항에 있어서,
    A가 임의적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬인, 화합물.
  16. 제15항에 있어서,
    R4가
    Figure pct01588
    이고; v가 0, 1, 2 또는 3이고; R5가 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일, C2-6 알켄일렌, 할로겐, 시아노, 하이드록실, C1-6 알콕시, 임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf, -NReSO2Rf 및 NReRf-C(O)-로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 R5의 C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, C2-6 알켄일 및 C2-6 알켄일렌이 C1-6 알콕시, 하이드록실, 할로겐, 시아노, -SO2Re, -NReRf, -NReC(O)Rf 및 -C(O)NReRf로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고, Re 및 Rf가 각각의 경우에 독립적으로 수소, 분지형 또는 선형 C1-6 알킬 및 C3-7 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물.
  17. 제16항에 있어서,
    R5가 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C3-7 사이클로알킬, 할로겐, 시아노, 하이드록실, C1-6 알콕시 및 C2-9 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 알킬, 사이클로알킬 및 헤테로아릴이 임의적으로 치환되는, 화합물.
  18. 제17항에 있어서,
    하나 이상의 R5가 C1-6 알킬인, 화합물.
  19. 제18항에 있어서,
    C1-6 알킬이 메틸 또는 에틸인, 화합물.
  20. 제17항에 있어서,
    R5 중 하나가 C2-9 헤테로아릴로 임의적으로 치환되는, 화합물.
  21. 제20항에 있어서,
    임의적으로 치환된 C2-9 헤테로아릴이 임의적으로 치환된 C3 헤테로아릴인, 화합물.
  22. 제21항에 있어서,
    임의적으로 치환된 C3 헤테로아릴이 임의적으로 치환된 피라졸인, 화합물.
  23. 제22항에 있어서,
    임의적으로 치환된 피라졸이
    Figure pct01589
    이고; 물결선이 사이클로프로필 고리에 대한 부착 지점을 나타내고; RB1이 C1-6 알킬인, 화합물.
  24. 제17항에 있어서,
    R4가
    Figure pct01590
    인, 화합물.
  25. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 D인, 화합물.
  26. 제25항에 있어서,
    D가 O, S 및 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖고 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 5 내지 10원 헤테로아릴이고, 이때 상이한 원자에 부착된 2개의 치환기가 이들 각각이 부착된 원자와 함께 임의적으로 치환된 이환형 또는 삼환형을 형성하거나, 5 내지 10원 헤테로아릴이 5 또는 6원 헤테로아릴, 5 내지 10원 헤테로사이클릴, C6 아릴 및 C3-8 사이클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 고리와 융합되고, D의 5 내지 10원 헤테로아릴 및 융합된 고리가 임의적으로 치환되고, 상기 융합된 고리가 임의적으로 치환된 이환형 또는 삼환형 시스템을 형성하는, 화합물.
  27. 제26항에 있어서,
    D가 하나 이상의 질소를 함유하는 임의적으로 치환된 헤테로아릴인, 화합물.
  28. 제27항에 있어서,
    임의적으로 치환된 5원 헤테로아릴이 임의적으로 치환된 피라졸인, 화합물.
  29. 제28항에 있어서,
    임의적으로 치환된 피라졸이 다른 환형 잔기와 융합되어 임의적으로 치환된 이환형 또는 삼환형을 형성하는, 화합물.
  30. 제29항에 있어서,
    이환형 또는 삼환형이
    Figure pct01591
    이고; X' 및 Y'가 각각 독립적으로 C, N, S 또는 O이고; 상기 이환형이 수소, 하이드록실, 아미노 및 C1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고; 2개의 치환기가 이들이 부착된 원자와 함께 C3-C5 스피로 또는 C2-9 헤테로아릴 고리를 형성할 수 있고; 상기 C2-9 헤테로아릴 고리가 상기 이환형에 융합되어 삼환형을 형성할 수 있는, 화합물.
  31. 제30항에 있어서,
    X' 및 Y' 중 하나 이상이 N인, 화합물.
  32. 제30항에 있어서,
    이환형 또는 삼환형이
    Figure pct01592
    인, 화합물.
  33. 제25항에 있어서,
    D가 화학식
    Figure pct01593
    의 5원 헤테로아릴 또는 화학식
    Figure pct01594
    의 6원 헤테로아릴이고;
    Q가 NR20, CR20, O 또는 S이고;
    T가 각각 독립적으로 N 또는 CR21이고;
    Z가 각각 독립적으로 N 또는 C이되, 단지 하나의 Z가 N이고;
    R20 및 R21이 각각 독립적으로 수소, 알킬, 할로알킬, 알콕시, 할로겐, 하이드록실 또는 시아노이고;
    R22 및 R23이 이들이 부착된 원자와 함께 이환형을 형성하고, 이때 상기 이환형이 N, S 및 O로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 함유할 수 있고, 상기 이환형이 1, 2, 3, 4 또는 5개의 R30으로 임의적으로 치환되고;
    R30이 각각 독립적으로 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬, C3-7 헤테로사이클릴, 할로겐, 시아노, 옥소, -NR31R32, -SO2NR31R32, -C(O)NR31R32, -C(O)OR33, -OR33, -NR33C(O)R34, -NR33SO2R35 또는 -SO2R35이고, 이때 R30의 C1-6 알킬, C2-6 알켄일, C3-7 사이클로알킬 및 C3-7 헤테로사이클릴이 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환되거나, 2개의 R30 기가 이들이 부착된 모 잔기와 함께 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환된 고리를 형성하고;
    R31 및 R32가 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이거나, R31 및 R32가 이들이 부착된 질소 원자와 함께 1 내지 4개의 R40으로 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고;
    R33 및 R34가 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    R35가 C1-6 알킬이고;
    R40이 각각 독립적으로 할로겐, 시아노, 옥소, -NR41R42, -SO2NR41R42, -C(O)NR41R42, -C(O)OR43, -OR43, -NR43C(O)R44, -NR43SO2R45, -SO2R45, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C2-9 헤테로아릴, C6-10 아릴 및 옥소로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 2개의 R40 기가 이들이 부착된 모 잔기와 함께 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환된 고리를 형성하고;
    R41 및 R42가 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이거나, R41 및 R42가 이들이 부착된 질소 원자와 함께 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고;
    R43 및 R44가 각각 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    R45가 C1-6 알킬인,
    화합물.
  34. 제33항에 있어서,
    D가
    Figure pct01595
    이고; q가 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; R36이 독립적으로 수소 또는 R30이고; R20 및 R30이 제33항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  35. 제34항에 있어서,
    D가
    Figure pct01596
    이고; R36이 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고; R20이 수소인, 화합물.
  36. 제33항에 있어서,
    D가
    Figure pct01597
    이고; p가 0, 1, 2, 3 또는 4이고; R36이 독립적으로 수소 또는 R30이고; R20 및 R30이 제33항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  37. 제33항에 있어서,
    D가
    Figure pct01598
    이고; X가 CH2, N, O 또는 S이고; n이 1, 2, 3 또는 4이고; p가 0, 1, 2, 3 또는 4이고; R36이 수소 또는 R30이고; R20 및 R30이 제33항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  38. 제33항에 있어서,
    D가
    Figure pct01599
    이고; q가 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; R20 및 R30이 제33항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  39. 제33항에 있어서,
    D가
    Figure pct01600
    이고; Q가 NR20, O 또는 S이고; X가 CR38aR38b, NR36, O 또는 S이고; X'가 CR39aR39b, NR36, O, S 또는 SO2이고; R36, R37a, R37b, R38a 및 R38b가 독립적으로 수소 또는 R30이고; R39a 및 R39b가 독립적으로 수소 또는 R30이거나, R39a 및 R39b가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-7 사이클로알킬 또는 C3-7 헤테로사이클릴을 형성하고; R20 및 R30이 제33항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  40. 제39항에 있어서,
    D가
    Figure pct01601
    인, 화합물.
  41. 제33항에 있어서,
    D가
    Figure pct01602
    이고; q가 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; G가 독립적으로 C 또는 N이고; G'가 독립적으로 N, NR46, CR47, S 또는 O이고; R46 및 R47이 독립적으로 수소 또는 R40이거나, 2개의 기 R46 및 R47이 함께 고리를 형성하고; R20 및 R40이 제33항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  42. 제41항에 있어서,
    D가
    Figure pct01603
    인, 화합물.
  43. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 수소, 할로 또는 메틸인, 화합물.
  44. 제43항에 있어서,
    R1이 플루오로인, 화합물.
  45. 제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3이 수소인, 화합물.
  46. 제1항에 있어서,
    표 1의 화합물 번호 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 54, 55, 56, 57, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 78, 79, 80, 81, 82, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 113, 115, 116, 117, 118, 119, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 138, 139, 140, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 153, 154, 155, 156, 157, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229 및 230으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  47. 제1항에 있어서,
    표 1의 화합물 번호 9 내지 12, 29, 33 내지 36, 53, 58, 64, 83, 84, 96, 97, 111, 112, 114, 120, 121, 129, 137, 141, 142, 152 및 158, 및 표 2의 화합물 번호 231 내지 390으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  48. 제1항에 있어서,
    표 3의 화합물 번호 391 내지 528로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
  49. 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염; 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물.
  50. 제49항에 있어서,
    화학치료제를 추가로 포함하는 약학 조성물.
  51. 대상에서 HPK1(조혈 전구 키나제 1)을 효과량의 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제49항 또는 제50항에 따른 약학 조성물과 접촉시키는 단계를 포함하는, HPK1을 억제하는 방법.
  52. 효과량의 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제49항 또는 제50항에 따른 약학 조성물을 면역 반응의 강화를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상에서 면역 반응을 강화시키는 방법.
  53. 제51항 또는 제52항에 있어서,
    대상이 암을 갖는, 방법.
  54. 효과량의 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제49항 또는 제50항에 따른 약학 조성물을 치료를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, HPK1-의존성 장애를 치료하는 방법.
  55. 제54항에 있어서,
    HPK1-의존성 장애가 암인, 방법.
  56. 제53항 또는 제55항에 있어서,
    암이 대장암, 흑색종, 비-소세포 폐암, 난소암, 유방암, 췌장암, 혈액학적 악성 종양 및 신장 세포 암종으로부터 선택되는 하나 이상의 암을 포함하는, 방법.
  57. 제51항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서,
    화학치료제를 대상에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  58. 제51항 내지 제57항 중 어느 한 항에 따른 방법에 사용하기 위한, 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제49항 또는 제50항에 따른 약학 조성물.
  59. 제51항 내지 제57항 중 어느 한 항에 따른 방법에 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제49항 또는 제50항에 따른 약학 조성물의 용도.
  60. 제51항 내지 제57항 중 어느 한 항에 따른 방법에 있어서, 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제49항 또는 제50항에 따른 약학 조성물의 용도.
KR1020197031954A 2017-03-30 2018-03-30 Hpk1의 억제제인 이소퀴놀린 KR20190135029A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2017078790 2017-03-30
CNPCT/CN2017/078790 2017-03-30
CNPCT/CN2018/076908 2018-02-15
CN2018076908 2018-02-15
PCT/US2018/025573 WO2018183964A1 (en) 2017-03-30 2018-03-30 Isoquinolines as inhibitors of hpk1

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20190135029A true KR20190135029A (ko) 2019-12-05

Family

ID=62002510

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197031954A KR20190135029A (ko) 2017-03-30 2018-03-30 Hpk1의 억제제인 이소퀴놀린

Country Status (20)

Country Link
US (2) US20180282282A1 (ko)
EP (1) EP3601259B1 (ko)
JP (1) JP7129420B6 (ko)
KR (1) KR20190135029A (ko)
CN (2) CN117024411A (ko)
AU (1) AU2018243770A1 (ko)
BR (1) BR112019019555A2 (ko)
CA (1) CA3054161A1 (ko)
CL (2) CL2019002734A1 (ko)
CO (1) CO2019009927A2 (ko)
CR (1) CR20190424A (ko)
IL (1) IL268994A (ko)
MA (1) MA48994A (ko)
MX (1) MX2019010302A (ko)
PE (1) PE20200008A1 (ko)
PH (1) PH12019502258A1 (ko)
RU (1) RU2019133646A (ko)
SG (2) SG11201908940UA (ko)
TW (1) TW201843139A (ko)
WO (1) WO2018183964A1 (ko)

Families Citing this family (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI812494B (zh) 2017-01-20 2023-08-11 美商阿克思生物科學有限公司 用於治療癌症相關病症之唑嘧啶
RU2019133646A (ru) 2017-03-30 2021-04-30 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Изохинолины в качестве ингибиторов hpk1
JOP20180029A1 (ar) 2017-03-30 2019-01-30 Takeda Pharmaceuticals Co مركب حلقي غير متجانس
CN109111464B (zh) * 2017-06-23 2021-02-26 爱科诺生物医药股份有限公司 一种具有细胞坏死抑制活性的杂环化合物
WO2019079626A1 (en) 2017-10-19 2019-04-25 Samumed, Llc 6- (HETEROARYL 5-CHAIN) ISOQUINOLIN-3-YL CARBOXAMIDES, THEIR PREPARATION AND THEIR USE
US10413537B2 (en) 2017-10-27 2019-09-17 Samumed, Llc 6-(5-membered heteroaryl)isoquinolin-3-yl-(5-membered heteroaryl) carboxamides and preparation and use thereof
US10653688B2 (en) 2017-10-27 2020-05-19 Samumed, Llc 6-(6-membered heteroaryl and aryl)isoquinolin-3-yl carboxamides and preparation and use thereof
US10703748B2 (en) 2017-10-31 2020-07-07 Samumed, Llc Diazanaphthalen-3-yl carboxamides and preparation and use thereof
ES2925450T3 (es) 2017-11-06 2022-10-18 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de isofuranona útiles como inhibidores de HPK1
IL300572A (en) 2018-02-13 2023-04-01 Gilead Sciences Inc PD–1/PD–L1 inhibitors
BR112020015509A2 (pt) 2018-02-15 2021-01-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated macrociclos como moduladores de regulador da condutância transmembrana da fibrose cística, composições farmacêuticas dos mesmos, sua utilização no tratamento da fibrose cística, e processo para sua produção
CN111818923A (zh) 2018-02-16 2020-10-23 艾库斯生物科学有限公司 用唑并嘧啶化合物给药
EP3781556A1 (en) 2018-04-19 2021-02-24 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
KR20230159715A (ko) 2018-07-13 2023-11-21 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Pd-1/pd-l1 억제제
EP3826722A1 (en) * 2018-07-24 2021-06-02 F. Hoffmann-La Roche AG Isoquinoline compounds and uses thereof
CN113454070A (zh) * 2018-09-30 2021-09-28 豪夫迈·罗氏有限公司 噌啉化合物及用于hpk1依赖性疾患诸如癌症的治疗
TW202024053A (zh) * 2018-10-02 2020-07-01 美商建南德克公司 異喹啉化合物及其用途
US11612606B2 (en) 2018-10-03 2023-03-28 Genentech, Inc. 8-aminoisoquinoline compounds and uses thereof
WO2020072695A1 (en) * 2018-10-03 2020-04-09 Genentech, Inc. 8-aminoisoquinoline compounds and uses thereof
HRP20240541T1 (hr) * 2018-10-31 2024-07-05 Gilead Sciences, Inc. Supstituirani spojevi 6-azabenzimidazola kao inhibitori hpk1
TW202136261A (zh) 2018-10-31 2021-10-01 美商基利科學股份有限公司 經取代之6-氮雜苯并咪唑化合物
WO2020120257A1 (en) 2018-12-11 2020-06-18 Bayer Aktiengesellschaft Substituted pyrrolopyridine-derivatives
MA54551A (fr) * 2018-12-20 2021-10-27 Incyte Corp Composés d'imidazopyridazine et d'imidazopyridine utilisés en tant qu'inhibiteurs de la kinase 2 de type récepteur de l'activine
US20220169644A1 (en) 2019-03-26 2022-06-02 Janssen Pharmaceutica Nv Bicyclic hpk1 inhibitors
US20220177458A1 (en) 2019-03-26 2022-06-09 Janssen Pharmaceutica Nv Hpk1 inhibitors
WO2020237025A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
MX2021015452A (es) 2019-06-25 2022-02-11 Gilead Sciences Inc Proteinas de fusion flt3l-fc y metodos de uso.
TWI848141B (zh) * 2019-07-04 2024-07-11 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 及其用途
WO2021004547A1 (en) * 2019-07-11 2021-01-14 Guangdong Newopp Biopharmaceuticals Co., Ltd. Heterocyclic compounds as inhibitors of hpk1
KR20220064366A (ko) 2019-08-14 2022-05-18 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Cftr 조절제의 결정질 형태
US11795223B2 (en) 2019-10-18 2023-10-24 Forty Seven, Inc. Combination therapies for treating myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia
CN114599392A (zh) 2019-10-31 2022-06-07 四十七公司 基于抗cd47和抗cd20的血癌治疗
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
US11845723B2 (en) 2019-12-24 2023-12-19 Gilead Sciences, Inc. Diacylglycerol kinase modulating compounds
US11692038B2 (en) 2020-02-14 2023-07-04 Gilead Sciences, Inc. Antibodies that bind chemokine (C-C motif) receptor 8 (CCR8)
CN113336747A (zh) * 2020-03-03 2021-09-03 轶诺(浙江)药业有限公司 新型hpk1抑制剂及其制备方法和应用
EP4143194A1 (en) 2020-05-01 2023-03-08 Gilead Sciences, Inc. Cd73 inhibiting 2,4-dioxopyrimidine compounds
WO2021249913A1 (en) 2020-06-09 2021-12-16 Bayer Aktiengesellschaft 2'-(quinolin-3-yl)-5',6'-dihydrospiro[azetidine-3,4'-pyrrolo[1,2-b]pyrazole]-1-carboxylate derivatives and related compounds as map4k1 (hpk1) inhibitors for the treatment of cancer
CA3195193A1 (en) * 2020-10-29 2022-05-05 Peter H. Fuller N-linked isoquinoline amides as lrrk2 inhibitors, pharmaceutical compositions, and uses thereof
CN114437074A (zh) 2020-11-03 2022-05-06 北京伯汇生物技术有限公司 一种化合物、含该化合物的药物组合物及其用途
EP4240363A1 (en) * 2020-11-09 2023-09-13 Merck Sharp & Dohme LLC 7-phenyl substituted 2-aminoquinazoline inhibitors of hpk1
CN114516857A (zh) * 2020-11-20 2022-05-20 深圳智药信息科技有限公司 Hpk1抑制剂及其用途
CN112625030A (zh) * 2020-12-25 2021-04-09 杭州澳赛诺生物科技有限公司 一种一锅法合成n-保护3-溴代吡唑的合成方法
US20240174683A1 (en) 2021-02-05 2024-05-30 Bayer Aktiengesellschaft Map4k1 inhibitors
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
WO2022222951A1 (zh) * 2021-04-22 2022-10-27 浙江海正药业股份有限公司 芳香稠合环类衍生物及其制备方法和用途
WO2022245671A1 (en) 2021-05-18 2022-11-24 Gilead Sciences, Inc. Methods of using flt3l-fc fusion proteins
AU2022299051A1 (en) 2021-06-23 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
JP2024522594A (ja) 2021-06-23 2024-06-21 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
WO2022271659A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
WO2022271677A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
EP4373817A1 (en) 2021-07-20 2024-05-29 Astrazeneca AB Substituted pyrazine-2-carboxamides as hpk1 inhibitors for the treatment of cancer
CN115838373A (zh) 2021-09-18 2023-03-24 北京伯汇生物技术有限公司 氮杂吲唑大环化合物及其用途
EP4408427A1 (en) * 2021-10-01 2024-08-07 Merck Sharp & Dohme LLC System and method for static and dynamic mri shimming
WO2023076983A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Gilead Sciences, Inc. Pyridizin-3(2h)-one derivatives
WO2023077030A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2023107954A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Dragonfly Therapeutics, Inc. Antibodies targeting 5t4 and uses thereof
US20230203202A1 (en) 2021-12-08 2023-06-29 Dragonfly Therapeutics, Inc. Proteins binding nkg2d, cd16 and 5t4
CA3239528A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
AU2022417491A1 (en) 2021-12-22 2024-05-23 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
CN116672450A (zh) * 2022-02-23 2023-09-01 智宠制药（北京）有限公司 Hpk1抑制剂在治疗干扰素相关疾病中的应用
EP4245756B1 (en) 2022-03-17 2024-10-09 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
US20230355796A1 (en) 2022-03-24 2023-11-09 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
TW202345901A (zh) 2022-04-05 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
US20230374036A1 (en) 2022-04-21 2023-11-23 Gilead Sciences, Inc. Kras g12d modulating compounds
TW202400612A (zh) * 2022-05-10 2024-01-01 德商馬克專利公司 作為HPK1抑制劑之四氫吡啶并[3,4-d]嘧啶化物
US20240116928A1 (en) 2022-07-01 2024-04-11 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
US20240091351A1 (en) 2022-09-21 2024-03-21 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPa DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY
WO2024137852A1 (en) 2022-12-22 2024-06-27 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
DE3034001A1 (de) 1980-09-10 1982-04-22 Hoechst Ag, 6000 Frankfurt Isochinolinderivate, verfahren zu ihrer hersellung, sie enthaltende pharmazeutische zubereitungen und ihre verwendung
PL176081B1 (pl) 1995-06-06 1999-04-30 Politechnika Warszawska Sposób wytwarzania 3-aminoizochinoliny i jej N-mono oraz N,N-dipodstawionych pochodnych
JP2003500385A (ja) 1999-05-24 2003-01-07 コア・セラピューティクス，インコーポレイテッド Ｘａ因子阻害剤
US7199149B2 (en) 2003-10-01 2007-04-03 Bristol Myers Squibb Company Monocyclic and bicyclic lactams as factor Xa inhibitors
US20090143399A1 (en) 2003-10-14 2009-06-04 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Protein Kinase Inhibitors
US20090099165A1 (en) 2003-10-14 2009-04-16 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Protein Kinase Inhibitors
JP2007008816A (ja) 2003-10-15 2007-01-18 Ube Ind Ltd 新規イソキノリン誘導体
EP1655295A1 (en) 2004-11-03 2006-05-10 Schering Aktiengesellschaft Anthranilamide pyridinureas as VEGF receptor kinase inhibitors
EP1657241A1 (en) 2004-11-03 2006-05-17 Schering Aktiengesellschaft Novel anthranilamide pyridinureas as VEGF receptor kinase inhibitors
US20060156485A1 (en) 2005-01-14 2006-07-20 The Procter & Gamble Company Keratin dyeing compounds, keratin dyeing compositions containing them, and use thereof
WO2007000240A1 (en) 2005-06-28 2007-01-04 Sanofi-Aventis Isoquinoline derivatives as inhibitors of rho-kinase
DK1907424T3 (en) 2005-07-01 2015-11-09 Squibb & Sons Llc HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES TO PROGRAMMED death ligand 1 (PD-L1)
US20070087988A1 (en) 2005-09-30 2007-04-19 New York University Hematopoietic progenitor kinase 1 for modulation of an immune response
PE20070640A1 (es) 2005-10-28 2007-08-10 Lilly Co Eli Compuestos derivados de pirazol-isoquinolina urea como inhibidores de la cinasa p38
US7572809B2 (en) 2005-12-19 2009-08-11 Hoffmann-La Roche Inc. Isoquinoline aminopyrazole derivatives
EP1981884B1 (en) 2006-01-18 2012-06-13 Amgen, Inc Thiazole compounds as protein kinase b (pkb) inhibitors
JP2009535393A (ja) 2006-05-01 2009-10-01 ファイザー・プロダクツ・インク 置換２−アミノ縮合複素環式化合物
JP5405316B2 (ja) 2006-12-27 2014-02-05 サノフイ シクロアルキルアミン置換イソキノリン誘導体
EP1975166A1 (en) 2007-03-30 2008-10-01 Bayer Schering Pharma AG Synthesis of anthranilamides
EP2146964A2 (en) 2007-04-17 2010-01-27 Novartis Ag Ethers of naphtalene carboxylic acid amides as cancer cure
EP2008658A1 (en) 2007-06-28 2008-12-31 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Synergistic combination of anthranilamide pyridinureas and benzamide derivatives
WO2009023193A1 (en) 2007-08-15 2009-02-19 Cytokinetics, Incorporated Certain chemical entities, compositions, and methods
GB0803018D0 (en) 2008-02-19 2008-03-26 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds and their use
US7863291B2 (en) 2008-04-23 2011-01-04 Bristol-Myers Squibb Company Quinuclidine compounds as alpha-7 nicotinic acetylcholine receptor ligands
US8309577B2 (en) 2008-04-23 2012-11-13 Bristol-Myers Squibb Company Quinuclidine compounds as α-7 nicotinic acetylcholine receptor ligands
GB0812969D0 (en) 2008-07-15 2008-08-20 Sentinel Oncology Ltd Pharmaceutical compounds
CA2735006A1 (en) 2008-08-25 2010-03-11 Amplimmune, Inc. Pd-1 antagonists and methods of use thereof
TWI491610B (zh) 2008-10-09 2015-07-11 必治妥美雅史谷比公司 作為激酶抑制劑之咪唑并嗒腈
JP2013512251A (ja) 2009-11-24 2013-04-11 アンプリミューン、インコーポレーテッド Ｐｄ−ｌ１／ｐｄ−ｌ２の同時阻害
HUE049647T2 (hu) 2009-11-24 2020-09-28 Medimmune Ltd Targetált kötõdõ ágensek B7-H1 ellen
PT2512474E (pt) 2009-12-16 2014-12-23 Pfizer Derivados de ácido hidroxâmico n-ligado úteis como agentes antibacterianos
CN104341401B (zh) 2009-12-18 2017-02-15 北京凯因科技股份有限公司 C型肝炎病毒复制的新型抑制剂
EP2937345B1 (en) 2009-12-29 2018-03-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Type ii raf kinase inhibitors
MX2012010666A (es) 2010-03-31 2012-10-05 Actelion Pharmaceuticals Ltd Derivados de isoquinolin-3-ilurea antibacterianos.
MX2013004733A (es) 2010-10-29 2013-07-02 Pfizer Inhibidores de n1/n2-lactama acetil-coa carboxilasa.
JP6026427B2 (ja) 2010-12-17 2016-11-16 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 置換６，６−縮合窒素複素環化合物及びその使用
WO2012137099A1 (en) 2011-04-08 2012-10-11 Pfizer Inc. Imidazole, pyrazole, and triazole derivatives useful as antibacterial agents
EP2723730A4 (en) 2011-06-23 2014-12-31 Viamet Pharmaceuticals Inc METALLOENZYMHEMMERVERBINDUNGEN
WO2013003315A2 (en) 2011-06-26 2013-01-03 President And Fellows Of Harvard College Methods for preparing isoquinolines
WO2013169793A2 (en) 2012-05-09 2013-11-14 Ipierian, Inc. Methods and compositions for tdp-43 proteinopathies
RU2644947C2 (ru) 2012-08-27 2018-02-15 Аррэй Байофарма Инк. Ингибиторы серин/треонин киназы для лечения гиперпролиферативных заболеваний
GB201216018D0 (en) 2012-09-07 2012-10-24 Cancer Rec Tech Ltd Pharmacologically active compounds
KR20150054833A (ko) 2012-09-14 2015-05-20 이터니티 바이오사이언스 인코퍼레이티드 단백질 키나제 억제제로서의 아미노이소퀴놀린 유도체
WO2014123900A1 (en) 2013-02-05 2014-08-14 Sirenas Marine Discovery Anti-cancer and anti-hiv compounds
CN105492437B (zh) 2013-07-03 2018-05-11 卡尔约药物治疗公司 取代的苯并呋喃基和苯并噁唑基化合物及其用途
WO2016014674A1 (en) 2014-07-22 2016-01-28 University Of Maryland, College Park Linked diaryl compounds with anticancer properties and methods of using the same
EP3227337A1 (en) 2014-12-05 2017-10-11 F. Hoffmann-La Roche AG Methods and compositions for treating cancer using pd-1 axis antagonists and hpk1 antagonists
PL3322711T3 (pl) * 2015-06-25 2021-10-25 University Health Network Inhibitory hpk1 i sposoby ich zastosowania
AU2016340798A1 (en) 2015-10-20 2018-04-26 Axovant Sciences Gmbh Aminoisoxazoline compounds as agonists of alpha7-nicotinic acetylcholine receptors
WO2017106556A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Gilead Sciences, Inc. Tank-binding kinase inhibitor compounds
AU2017228870B2 (en) 2016-03-07 2021-02-18 Merck Sharp & Dohme Llc Bicyclic aryl monobactam compounds and methods of use thereof for the treatment of bacterial infections
CN107163022B (zh) 2016-03-07 2021-07-16 上海如絮生物科技有限公司 一种异喹啉类化合物、其中间体、制备方法和应用
GB201604647D0 (en) 2016-03-18 2016-05-04 Mission Therapeutics Ltd Novel compounds
CN107266421B (zh) 2016-04-08 2020-12-04 正大天晴药业集团股份有限公司 取代的苯并咪唑类衍生物
AR108326A1 (es) 2016-04-27 2018-08-08 Samumed Llc Isoquinolin-3-il carboxamidas y preparación y uso de las mismas
AR108325A1 (es) 2016-04-27 2018-08-08 Samumed Llc Isoquinolin-3-il carboxamidas y preparación y uso de las mismas
CA3036358A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Incyte Corporation Pyrazolopyridine derivatives as hpk1 modulators and uses thereof for the treatment of cancer
US10280164B2 (en) 2016-09-09 2019-05-07 Incyte Corporation Pyrazolopyridone compounds and uses thereof
TWI771327B (zh) 2016-10-05 2022-07-21 英商使命醫療公司 新穎化合物
EP3548479A1 (en) 2016-11-30 2019-10-09 ARIAD Pharmaceuticals, Inc. Anilinopyrimidines as haematopoietic progenitor kinase 1 (hpk1) inhibitors
US20180177784A1 (en) 2016-12-22 2018-06-28 Incyte Corporation Heterocyclic compounds as immunomodulators
TWI812494B (zh) 2017-01-20 2023-08-11 美商阿克思生物科學有限公司 用於治療癌症相關病症之唑嘧啶
JOP20180029A1 (ar) 2017-03-30 2019-01-30 Takeda Pharmaceuticals Co مركب حلقي غير متجانس
RU2019133646A (ru) 2017-03-30 2021-04-30 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Изохинолины в качестве ингибиторов hpk1
JP6453507B2 (ja) 2017-03-30 2019-01-16 アムジエン・インコーポレーテツド Ｍｃｌ−１タンパク質を阻害する化合物
IL271149B2 (en) 2017-06-14 2024-05-01 Trevena Inc Compounds for modulating S1P1 activity and methods of using them
WO2019079626A1 (en) 2017-10-19 2019-04-25 Samumed, Llc 6- (HETEROARYL 5-CHAIN) ISOQUINOLIN-3-YL CARBOXAMIDES, THEIR PREPARATION AND THEIR USE
US10653688B2 (en) 2017-10-27 2020-05-19 Samumed, Llc 6-(6-membered heteroaryl and aryl)isoquinolin-3-yl carboxamides and preparation and use thereof
CN111836802A (zh) 2018-02-12 2020-10-27 拜耳公司 杀真菌的*二唑
EP3826722A1 (en) 2018-07-24 2021-06-02 F. Hoffmann-La Roche AG Isoquinoline compounds and uses thereof
TW202024053A (zh) 2018-10-02 2020-07-01 美商建南德克公司 異喹啉化合物及其用途
US11612606B2 (en) 2018-10-03 2023-03-28 Genentech, Inc. 8-aminoisoquinoline compounds and uses thereof
WO2020072695A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Genentech, Inc. 8-aminoisoquinoline compounds and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
MX2019010302A (es) 2019-11-21
CN110709392B (zh) 2023-09-29
CL2020000856A1 (es) 2020-08-21
TW201843139A (zh) 2018-12-16
US20180282282A1 (en) 2018-10-04
RU2019133646A (ru) 2021-04-30
CL2019002734A1 (es) 2020-01-17
US11566003B2 (en) 2023-01-31
EP3601259B1 (en) 2022-02-23
BR112019019555A2 (pt) 2020-04-22
MA48994A (fr) 2020-02-05
CN110709392A (zh) 2020-01-17
EP3601259A1 (en) 2020-02-05
PH12019502258A1 (en) 2020-07-06
CR20190424A (es) 2019-11-04
IL268994A (en) 2019-10-31
AU2018243770A1 (en) 2019-09-19
JP2020515603A (ja) 2020-05-28
PE20200008A1 (es) 2020-01-06
US20210163417A1 (en) 2021-06-03
CO2019009927A2 (es) 2019-09-30
SG11201908940UA (en) 2019-10-30
WO2018183964A1 (en) 2018-10-04
SG10201914112VA (en) 2020-03-30
JP7129420B2 (ja) 2022-09-01
RU2019133646A3 (ko) 2021-07-30
CN117024411A (zh) 2023-11-10
JP7129420B6 (ja) 2024-02-02
CA3054161A1 (en) 2018-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7129420B2 (ja) Ｈｐｋ１阻害剤としてのイソキノリン
US11034692B1 (en) Naphthyridines as inhibitors of HPK1
JP7386841B2 (ja) イソキノリン化合物及びその使用
JP5808869B2 (ja) 二環式ピペラジン化合物
AU2018201557A1 (en) Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds as inhibitors of Btk activity
JP2022547719A (ja) Ｈｐｋ１アンタゴニストおよびその使用
KR20190076976A (ko) Ret 키나제 억제제로서의 치환된 피라졸로[1,5-a]피리딘 화합물
KR20230022402A (ko) PI3Kα 억제제 및 이의 사용 방법
JP6864674B2 (ja) ビアリールキナーゼ阻害剤
EA025520B1 (ru) N-(ГЕТЕРО)АРИЛПИРРОЛИДИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРАЗОЛ-4-ИЛ-ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИНОВ И ПИРРОЛ-3-ИЛ-ПИРРОЛО[2,3-d]ПИРИМИДИНОВ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ЯНУС-КИНАЗЫ
WO2021133917A1 (en) Smarca inhibitors and uses thereof
JP2023545545A (ja) 複素環スピロ化合物及び使用方法
EP4370124A1 (en) PI3Ka INHIBITORS AND METHODS OF USE THEREOF
US20240239799A1 (en) (s)-1-(5-((pyridin-3-yl)thio)pyrazin-2-yl)-4&#39;h,6&#39;h-spiro[piperidine-4,5&#39;-pyrrolo [1,2-b]pyrazol]-4&#39;-amine derivatives and similar compounds as shp2 inhibitors for the treatment of e.g. cancer
US20240109900A1 (en) Azabicyclic shp2 inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application