KR20140023441A

KR20140023441A - 퀴놀린일 글루카곤 수용체 조절제

Info

Publication number: KR20140023441A
Application number: KR1020147001432A
Authority: KR
Inventors: 매리 디덕; 케빈 제이 필립스키; 엔젤 거즈만-페레즈; 에스더 씨 리; 제프리 에이 페퍼콘; 벤자민 스티븐슨; 메이후아 투
Original assignee: 화이자 인코포레이티드
Priority date: 2011-07-22
Filing date: 2012-07-12
Publication date: 2014-02-26
Also published as: ES2550345T3; JP5647379B2; IL230537A0; AU2012288493A1; RU2013157388A; US20150099882A1; NZ620022A; AU2012288493B2; US20150353508A1; MX2014000855A; EP2734503A1; CA2841237A1; EP2734503B1; CN103732578B; US8927577B2; US9139538B2; ZA201309425B; CA2841237C; JP2014524930A; US20140135338A1

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다. 하기 화학식 I의 화합물은 글루카곤 길항제 또는 역 작용제로서 작용하는 것으로 발견되었다. 결론적으로, 화학식 I의 화합물 및 이의 약학 조성물은 글루카곤에 의해 매개되는 질병, 질환 또는 상태의 치료에 유용하다:
화학식 I

상기 식에서,
R¹, R², R³, A¹, A², A³, B¹, B², B³ 및 B⁴는 본원에 정의된 바와 같다.

Description

퀴놀린일 글루카곤 수용체 조절제{QUINOLINYL GLUCAGON RECEPTOR MODULATORS}

본 발명은 글루카곤 수용체의 길항제, 혼합된 작용제/길항제, 부분 작용제, 음성 알로스테릭 조절제 또는 역 작용제인 화합물, 상기 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 상기 화합물 또는 상기 조성물의 용도에 관한 것이다.

당뇨병은 이의 증가하는 출현율 및 연관된 건강 위협으로 인해 주요한 공공 건강 관심사이다. 상기 질병은 적절한 혈당 수준을 유지하지 못하게 하는 탄수화물의 생성 및 이용에서의 대사 결함을 특징으로 한다. 2개의 주요 형태의 당뇨병이 공지되어 있다. 1형 당뇨병(또는 인슐린-의존 진성 당뇨병(IDDM T1DM))은 인슐린의 절대 결핍의 결과이다. 2형 당뇨병(또는 비인슐린-의존 진성 당뇨병(NIDDM T2DM))은 종종 정상 수준의 인슐린 또는 심지어 증가된 수준의 인슐린으로 발생하고, 인슐린에 적절하게 응답하는 조직 및 세포의 불능의 결과인 것으로 보인다. 약물을 사용한 NIDDM T2DM의 공격적인 제어가 필수적이고, 그렇지 않으면 이는 β-세포 장애 및 인슐린-의존으로 진행할 수 있다.

글루카곤은 췌장의 α 세포로부터 간문맥내로 분비되어 비간 조직보다 간을 이 호르몬의 더 높은 수준에 노출하는 29개의 아미노산 펩티드이다. 혈장 글루카곤 수준은 고혈당증, 고인슐린혈증, 증가된 혈장 비에스터화된 지방산 수준 및 소마토스타틴에 대응하여 감소하는 반면, 글루카곤 분비는 저혈당증 및 증가된 혈장 아미노산 수준에 대응하여 증가한다. 글루카곤은 이의 수용체의 활성화를 통해 글리코겐 분해 및 글루코스 신생합성을 활성화함으로써 간 글루코스 생성의 잠재적인 활성화제이다.

글루카곤 수용체는 글루카곤에 의해 활성화된 62 kDa 단백질이고 수용체의 G-단백질 커플링된 패밀리인 부류 B의 일원이다. 다른 밀접하게 관련된 G-단백질 커플링된 수용체는 글루카곤-유사 펩티드-1 수용체(GLP-1), 글루카곤-유사 펩티드-2 수용체(GLP-2) 및 위 억제 폴리펩티드 수용체를 포함한다. 글루카곤 수용체는 인간의 GCGR 유전자에 의해 암호화되고 이들 수용체는 간에서 주로 발현되고 신장, 심장, 지방 조직, 비장, 흉선, 부신, 췌장, 대뇌 피질 및 위장관에서는 매우 적은 양으로 발견된다. 글루카곤 수용체의 자극은 아데닐레이트 시클라아제의 활성화 및 세포내 cAMP의 증가된 수준을 야기한다.

GCGR 유전자의 드문 미스센스 돌연변이가 진성 당뇨병 2형과 관련되어 있음을 나타내는 보고서가 있고, 인간에서 글루카곤 수용체의 불활성화 돌연변이가 글루카곤에 대한 저항을 야기하고 췌장 α-세포 과형성, 췌소도세포증, 글루카곤과잉혈증 및 신경 내분비 췌장 종양과 연관되어 있음이 보고되어 있다. GCGR 녹아웃 마우스 및 GCGR 안티센스 올리고뉴클레오티드로 처리된 마우스에 관한 설치류 연구에서, 마우스는 개선된 단식 글루코스, 글루코스 내성 및 췌장 β-세포 기능을 나타내었다. 건강한 대조군 동물, 및 1형 및 2형 당뇨병 동물 모델 둘다에서, 선택적이고 특이적인 항체를 사용한 순환 글루카콘의 제거는 혈당 수준의 감소를 야기하였다. 더욱 구체적으로는, GCGR-길항 항체(mAb B 및 mAb Ac)로 처리한 마우스 및 시노몰구스 원숭이 둘다는 저혈당증을 야기하지 않고 혈당 조절을 개선함을 나타내었다. 최근 마우스 연구는 글루카곤 수용체의 길항작용이 기능적인 GLP-1 수용체를 필요로 하는 기작을 통해 개선된 글루코스 항상성을 야기함을 또한 나타내었다. 글루카곤 수용체의 길항작용은 췌장 α-세포로부터와 같은 GLP-1의 보상적 과잉생성을 야기하고, 이는 소도 내 규제 및 β-세포 기능의 유지에서 중요한 역할을 할 수 있다.

당뇨병 연구의 유망 구역은 글루카곤 수용체의 소 분자 길항제, 혼합된 작용제/길항제, 부분 작용제, 음성 알로스테릭 조절제 또는 역 작용제를 순환 글루카곤의 수준을 낮추고 이로써 혈당 수준을 낮추는데 사용함을 포함한다. 치료적으로, 글루카곤 수용체의 불활성화는 간 글루코스 생산을 감소시키고 글루코스 자극된 인슐린 분비를 정상화함으로써 혈당을 낮추는데 효과적인 전략이 되리라고 예상된다. 결론적으로, 글루카곤 길항제, 혼합된 작용제/길항제, 부분 작용제, 음성 알로스테릭 조절제 또는 역 작용제는 NIDDM T2DM, IDDM T1DM 및 관련된 합병증, 특히 고혈당증, 이상지질혈증, 인슐린 저항성 증후군, 고인슐린혈증, 고혈압 및 비만에 대한 치료적인 치료를 제공할 수 있다.

하기 5개의 주요 범주에서 여러 약물(각각 상이한 기작에 의해 작용함)은 고혈당증 및 이어서, NIDDM T2DM(문헌[Moller, D. E., "New drug targets for Type 2 diabetes and the metabolic syndrome" Nature 414; 821-827, (2001)])을 치료하는데 이용가능하다: (A) 인슐린 분비 촉진제(설폰일-우레아(예를 들어, 글리피지드, 글리메피리드, 글리부리드)를 포함) 및 메글리티니드(예를 들어, 나테글리딘 및 레파글리니드)는 췌장 β-세포에서 작용함으로써 인슐린 분비를 강화한다. 이 요법이 혈당 수준을 감소시킬 수 있는 반면, 이는 체중 증가 및 종종 저혈당증을 야기하는 제한된 효능 및 내성을 갖는다. (B) 바이구아니드(예를 들어, 메트포름인)는 주로 간 글루코스 생성을 감소시킴으로써 작용하는 것으로 생각된다. 바이구아니드는 종종 위장내 장애 및 젖산증을 야기하여, 이들의 사용을 추가로 제한한다. (C) α-글루코시다아제(예를 들어, 아카보스)의 억제제는 장내 글루코스 흡수를 감소시킨다. 이들 약제는 종종 위장내 장애를 야기한다. (D) 티아졸리딘다이온(예를 들어, 피오글리타존, 로시글리타존)은 간, 근육 및 지방 조직의 특이적 수용체(퍼옥시좀 증식-활성화된 수용체-γ)에 작용한다. 이들은 지질 대사를 조절하여 이어서 인슐린의 작용에 대한 이들 조직의 반응을 강화한다. 이들 약물의 빈번한 사용은 체중 증가를 야기할 수 있고 부종 및 빈혈증을 유도할 수 있다. (E) 인슐린은 더욱 심각한 경우에 단독으로 또는 상기 약제와 조합으로 사용된다.

이상적으로, NIDDM T2DM에 대한 효과적인 신규 치료는 하기 기준을 충족시킬 수 있다: (a) 저혈당증의 유도를 포함하는 유의한 부작용이 없을 것; (b) 체중 증가를 야기하지 않을 것; (c) 인슐린의 작용에 비의존적인 기작을 통해 작용함으로써 적어도 부분적으로 인슐린을 대체할 것; (d) 바람직하게 대사적으로 안정하여 덜 빈번한 사용을 허용할 것; 및 (e) 본원의 약물 목록의 범주 중 임의의 허용가능한 양과 조합하여 사용가능할 것.

글루카곤 수용체에서 작용하는 비펩티드 화합물을 개시하는 다수의 문헌을 나타내었다. 예를 들어, 국제특허출원공개 제 03/048109 호, 국제특허출원공개 제 2004/002480 호, 국제특허출원공개 제 2005/123668 호, 국제특허출원공개 제 2005/118542 호, 국제특허출원공개 제 2006/086488 호, 국제특허출원공개 제 2006/102067 호, 국제특허출원공개 제 2007/106181 호, 국제특허출원공개 제 2007/114855 호, 국제특허출원공개 제 2007/120270 호, 국제특허출원공개 제 2007/123581 호, 국제특허출원공개 제 2009/110520 호 및 문헌[Kurukulasuriya et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2004, 14(9), 2047-2050]은 각각 글루카곤 수용체 길항제로서 작용하는 비펩티드 화합물을 개시하고 있다. 비록 조사가 계속되고 있지만, 여전히 당뇨병, 특히 NIDDM 및 IDDM에 대한 보다 효과적이고 안전한 치료에 대한 필요성이 존재한다.

본 발명은 글루카곤 수용체 조절제, 특히 글루카곤 길항제로서 작용하고, 따라서 이러한 길항작용에 의해 매개되는 질병(예를 들어, 2형 당뇨병, 1형 당뇨병, 및 당뇨병-관련된 및 비만-관련된 중복이환과 관련된 질병)의 치료에 사용될 수 있는 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명의 제 1 실시양태는 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다:

[화학식 I]

상기 식에서,

R¹은 1 내지 3개의 플루오로, 하이드록시 또는 메톡시로 임의적으로 치환된 (C₁-C₆)알킬, 1 또는 2개의 플루오로 또는 1 내지 3개의 플루오로로 각각 임의적으로 치환된 1 또는 2개의 (C₁-C₃)알킬로 임의적으로 치환된 (C₃-C₇)사이클로알킬이되, 상기 (C₃-C₇)사이클로알킬의 1개의 탄소는 O로 대체될 수 있거나, 또는 (C₃-C₇)사이클로알킬-(C₁-C₆)알킬이되, 상기 (C₃-C₇)사이클로알킬-(C₁-C₆)알킬의 (C₃-C₇)사이클로알킬 기는 각각 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 1 또는 2개의 (C₁-C₃)알킬로 임의적으로 치환되고;

R²는 수소 또는 (C₁-C₃)알킬이고;

R³은 테트라졸릴, -CH₂-테트라졸릴, -(CH₂)₂SO₃H, -(CH₂)₂CO₂H, -CH₂CHFCO₂H 또는 -CH₂CH(OH)CO₂H이고;

A¹, A² 및 A³은 각각 독립적으로 CR⁴ 또는 N이되, A¹, A² 및 A³ 중 적어도 하나 그러나 둘 이하는 N이고;

각각의 경우에 R⁴는 독립적으로 수소, 할로, 시아노, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알킬, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알콕시, 또는 (C₃-C₅)사이클로알킬이고;

B¹, B², B³ 및 B⁴는 각각 독립적으로 CR⁵ 또는 N이되, B¹, B², B³ 및 B⁴ 중 둘 이하는 N이고;

각각의 경우에 R⁵는 독립적으로 수소, 할로, 시아노, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알킬, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알콕시, 또는 (C₃-C₅)사이클로알킬이다.

본 발명의 제 2 실시양태는 R²가 수소이고, R³이 -(CH₂)₂CO₂H인 제 1 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 3 실시양태는 R¹이 1 내지 3개의 플루오로로 각각 임의적으로 치환된 에틸, 프로필, 이소프로필, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 네오펜틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로프로필메틸이되, 상기 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실이 각각 1 또는 2개의 메틸로 임의적으로 치환된 전술된 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 4 실시양태는 B¹, B², B³ 및 B⁴가 각각 CR⁵인 전술된 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 5 실시양태는 A¹ 및 A²가 각각 CR⁴이고, A³이 N이고; 각각의 경우에 R⁴가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸 또는 에틸이고; 각각의 경우에 R⁵가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, 트라이플루오로메틸 또는 메톡시인 전술된 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 6 실시양태는 A¹이 N이고, A² 및 A³이 각각 CR⁴이고; 각각의 경우에 R⁴가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸 또는 에틸이고; 각각의 경우에 R⁵가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, 트라이플루오로메틸 또는 메톡시인 제 1 실시양태 내지 제 4 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 7 실시양태는 A¹ 및 A³이 각각 CR⁴이고, A²가 N이고; 각각의 경우에 R⁴가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸 또는 에틸이고; 각각의 경우에 R⁵가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, 트라이플루오로메틸 또는 메톡시인 제 1 실시양태 내지 제 4 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 8 실시양태는 A¹ 및 A²가 각각 CR⁴이고, A³이 N이고; B¹, B², B³ 및 B⁴가 각각 CR⁵인 제 2 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 9 실시양태는 R¹이 1 내지 3개의 플루오로로 각각 임의적으로 치환된 에틸, 프로필, 이소프로필, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 네오펜틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로프로필메틸이되, 상기 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실이 각각 1 또는 2개의 메틸로 임의적으로 치환된 제 8 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 10 실시양태는 각각의 경우에 R⁴가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸 또는 에틸이고; 각각의 경우에 R⁵가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, 트라이플루오로메틸 또는 메톡시인 제 9 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 11 실시양태는 A² 및 A³이 각각 CR⁴이고, A¹이 N이고; B¹, B², B³ 및 B⁴가 각각 CR⁵인 제 2 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.^.

본 발명의 제 12 실시양태는 R¹이 1 내지 3개의 플루오로로 각각 임의적으로 치환된 에틸, 프로필, 이소프로필, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 네오펜틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로프로필메틸이되, 상기 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실이 각각 1 또는 2개의 메틸로 임의적으로 치환된 제 11 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 제 13 실시양태는 각각의 경우에 R⁴가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸 또는 에틸이고; 각각의 경우에 R⁵가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, 트라이플루오로메틸 또는 메톡시인 제 12 실시양태의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다:

(+/-)-3-(4-(1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판산;

(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[1-(7-플루오로-퀴나졸린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[1-(8-메톡시-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(3-메틸-퀴녹살린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴녹살린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(4-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[1-(7-플루오로-4-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[1-(8-클로로-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴나졸린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(7-(트라이플루오로메틸)퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판산;

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(6-(트라이플루오로메틸)퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판산;

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(2-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(4-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;

(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(7-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산;

(+/-)-3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도) 프로판산;

(+/-)-3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도) 프로판산;

(+/-)-3-(4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;

(+/-)-3-(4-((6,7-다이플루오로퀴놀린-3-일아미노)(3,3-다이메틸사이클로부틸)메틸)벤즈아미도)프로판산;

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(7-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(8-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(6-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산; 및

(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(5-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산.

본 발명의 또 다른 실시양태는 하기 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다:

(+)-3-(4-(1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;

(-)-3-(4-(1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;

(+)-3-(4-(3-메틸-1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산; 및

(-)-3-(4-(3-메틸-1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산.

본 발명의 또 다른 양상은 (1) 본 발명의 화합물, 및 (2) 약학적으로 허용되는 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물이다. 바람직하게는, 조성물은 치료 효과량의 본 발명의 화합물을 포함한다. 또한, 조성물은 하나 이상의 추가 약제(본원에 기재됨)를 함유할 수 있다. 바람직한 약제는 항비만제 및/또는 항당뇨병제(본원의 하기에 기재됨)를 포함한다.

본 발명의 또 다른 양상은 치료를 필요로 하는 포유동물, 바람직하게는 인간에게 치료 효과량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 포유동물에서 글루카곤에 의해 매개되는 질병, 상태 또는 질환, 특히 글루카곤 수용체의 탈활성화를 치료하는 방법이다.

글루카곤에 의해 매개되는 질병, 질환 또는 상태는 2형 당뇨병, 1형 당뇨병, 고혈당증, 대사 증후군, 손상된 글루코스 내성, 당뇨, 백내장, 당뇨병성 신경병증, 당뇨병성 신장증, 당뇨병성 망막증, 비만, 이상지질혈증, 고혈압, 고인슐린혈증 및 인슐린 저항성 증후군을 포함한다. 바람직한 질병, 질환 또는 상태는 2형 당뇨병, 고혈당증, 손상된 글루코스 내성, 비만 및 인슐린 저항성 증후군을 포함한다. 2형 당뇨병, 1형 당뇨병, 고혈당증 및 비만이 더욱 바람직하다. 2형 당뇨병 및 1형 당뇨병이 가장 바람직하다.

본 발명의 또 다른 양상은 치료를 필요로 하는 포유동물에게 치료 효과량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 포유동물, 바람직하게는 인간에서 혈당의 수준을 감소시키는 방법이다.

본 발명의 화합물은 다른 약제(특히, 본원의 하기에 기재된 항비만제 및 항당뇨병제)와 조합으로 투여될 수 있다. 조합 요법은 (a) 본 발명의 화합물, 본원에 기재된 하나 이상의 추가 약제 및 약학적으로 허용되는 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 단일 약학 조성물; 또는 (b) (i) 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용되는 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 제 1 조성물, 및 (ii) 본원에 기재된 하나 이상의 추가 약제 및 약학적으로 허용되는 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 제 2 조성물을 포함하는 2개의 별도의 약학 조성물로서 투여될 수 있다. 약학 조성물은 동시에 또는 순차적으로 및 임의의 순서로 투여될 수 있다.

정의

본원에 사용된 용어 "알킬"은 화학식 C_nH_2n+1의 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 알칸 라디칼은 선형 또는 분지형일 수 있다. 예를 들어, 용어 "(C₁-C₆)알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 1가 선형 또는 분지형 지방족 기(예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, i-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, 1-메틸부틸, 2-메틸부틸, 3-메틸부틸, 네오펜틸, 3,3-다이메틸프로필, 헥실, 2-메틸펜틸, 등)를 지칭한다. 유사하게, 알콕시, 아실(예를 들어, 알칸오일), 알킬아미노, 다이알킬아미노, 알킬설폰일 및 알킬티오 기의 알킬 부분(즉, 알킬 잔기)은 상기한 바와 동일한 정의를 갖는다. "임의적으로 치환된" 것으로 나타내는 경우, 알칸 라디칼 또는 알킬 잔기는 비치환되거나 하나 이상의 치환기(일반적으로, 할로겐 치환기, 예컨대 퍼클로로 또는 퍼플루오로알킬의 경우를 제외하고 1 내지 3개의 치환기)로 치환될 수 있다.

용어 "사이클로알킬"은 완전히 수소화되고 단일 고리, 이환형 고리 또는 나선형 고리로서 존재할 수 있는 비방향족 고리를 지칭한다. 달리 명시하지 않으면, 탄소환형 고리는 일반적으로 3 내지 8 원 고리이다. 예를 들어, (C₃-C₇)사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헥세닐, 사이클로헵틸, 노보닐(바이사이클로[2.2.1]헵틸) 기 등과 같은 기를 포함한다. 특정 실시양태에서 사이클로알킬 중 하나 이상의 탄소 원자는 예컨대 O, S, NH 또는 N-알킬로 명시된 바와 같은 헤테로원자로 대체될 수 있다.

용어 "사이클로알킬-알킬"은 특정한 크기의 알킬 기의 라디칼에 부착된 특정한 크기의 사이클로알킬의 라디칼을 의미한다. 예를 들어, 용어(C₃-C₇)사이클로알킬-(C₁-C₆)알킬은 1 내지 6 원 알킬 기에 부착된 3 내지 7 원 사이클로알킬, 예컨대 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로헵틸을 의미한다.

어구 "치료 효과량"은 (i) 특정 질병, 상태 또는 질환을 치료하거나 예방하거나, (ii) 특정 질병, 상태 또는 질환의 하나 이상의 증상을 약화시키거나, 개선하거나, 제거하거나, (iii) 본원에 기재된 특정 질병, 상태 또는 질환의 하나 이상의 증상의 발병을 막거나 지연시키는 본 발명의 화합물의 양을 의미한다.

용어 "동물"은 인간(남성 또는 여성), 반려 동물(예를 들어, 개, 고양이 및 말), 식품원 동물, 동물원 동물, 해양 동물, 조류 및 다른 유사한 동물 종(species)을 지칭한다. "식용 동물"은 식품원 동물, 예컨대 소, 돼지, 양 및 가금류를 지칭한다.

어구 "약학적으로 허용되는"은 물질 또는 조성물이 제형을 포함하는 다른 성분 및/또는 이로 치료된 포유동물과 화학적으로 및/또는 독물학적으로 호환되어야 함을 나타낸다.

용어 "치료하는", "치료하다" 또는 "치료"는 예방적인 치료, 즉 예방 및 대기 요법 둘다를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "매개되는", "매개하는" 또는 "매개하다"는 달리 언급하지 않으면, 본 발명의 화합물의 작용의 결과로서 글루카곤 수용체의 활성의 변화를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "매개되는", "매개하는" 또는 "매개하다"는 달리 언급하지 않으면, (i) 특정 질병, 상태 또는 질환의 치료 또는 예방, (ii) 특정 질병, 상태 또는 질환의 하나 이상의 증상의 약화, 개선 또는 제거, 또는 (iii) 글루카곤의 조절에 의한 본원에 기재된 특정 질병, 상태 또는 질환의 하나 이상의 증상의 발병의 예방 또는 지연을 지칭한다.

용어 "본 발명의 화합물"은 (달리 명확하게 언급하지 않으면) 화학식 I의 화합물 및 화합물의 임의의 약학적으로 허용되는 염뿐만 아니라 모든 입체이성질체(부분입체이성질체 및 거울상이성질체를 포함함), 호변이성질체, 형태이성질체, 및 동위원소로 표지된 화합물을 지칭한다. 본 발명의 화합물의 수화물 및 용매화물은 화합물이 각각 물 또는 용매와 관련된 본 발명의 조성물로 간주된다.

본원에 사용된 기호 "_*"는 (R) 또는 (S) 절대 입체화학을 갖는 키랄 중심 (탄소 원자)을 의미한다. 키랄 중심은 51% 이상의 (R) 또는 (S), 바람직하게는 80% 이상의 (R) 또는 (S), 가장 바람직하게는 95% 초과의 (R) 또는 (S)이다.

본 발명의 화합물은, 특히 본원에 함유된 기재 내용에 비추어, 화학 분야에 널리 공지된 것과 유사한 방법을 포함하는 합성 경로에 의해 합성될 수 있다. 출발 물질은 일반적으로 상업적인 공급원, 예컨대 알드리치 케미칼스(Aldrich Chemicals, 미국 위스콘신주 밀워키 소재)로부터 이용가능하거나 당업자에게 널리 공지된 방법을 사용하여 용이하게 제조된다(예를 들어, 일반적으로 문헌[Louis F. Fieser and Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-19, Wiley, New York (1967-1999 ed.)] 또는 문헌[Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin](첨부자료 포함)(또한 베일스테인 온라인 데이타베이스를 통해 이용가능함)에 기재된 방법에 의해 제조됨).

예시적인 목적을 위해, 하기 도시된 반응식은 본 발명의 화합물뿐만 아니라 주요 중간체를 합성하기 위한 잠재적인 경로를 제공한다. 개별적인 반응 단계의 더욱 구체적인 설명을 위해 하기 실시예 부분을 참조한다. 당업자는 다른 합성 경로가 본 발명의 화합물을 합성하는데 사용될 수 있음을 인지할 것이다. 비록 특정 출발 물질 및 시약이 반응식에 도시되고 하기에 논의되었을지라도, 다른 출발 물질 및 시약이 다양한 유도체 및/또는 반응 조건을 제공하도록 용이하게 치환될 수 있다. 또한, 하기 설명된 방법에 의해 제조된 많은 화합물은 당업자에게 널리 공지된 통상적인 화학물질을 사용하여 본원의 개시 내용에 비추어 추가로 개질될 수 있다.

본 발명의 화합물의 제조에서, 중간체의 원격 작용기(예를 들어, 1차 또는 2차 아민)의 보호가 필요할 수 있다. 이러한 보호의 필요는 원격 작용기의 특성 및 제조 방법의 조건에 따라 변할 것이다. 적합한 아미노-보호기(NH-Pg)는 아세틸, 트라이플루오로아세틸, t-부톡시카본일(BOC), 벤질옥시카본일(CBz) 및 9-플루오렌일메틸렌옥시카본일(Fmoc)을 포함한다. 유사하게, "하이드록시-보호기"는 하이드록시 작용기를 차단하거나 보호하는 하이드록시 기의 치환기를 지칭한다. 적합한 하이드록실-보호기(O-Pg)는 예를 들어, 알릴, 아세틸, 실릴, 벤질, 파라-메톡시벤질, 트라이틸 등을 포함한다. 적합한 카복실산-보호기(C(O)O-Pg)는 예를 들어, 메틸, 에틸, t-부톡시, 벤질, 파라-메톡시벤질 및 다이페닐메틸렌과 같은 기를 포함한다. 이러한 보호의 필요는 당업자에 의해 용이하게 결정된다. 보호기 및 이의 사용의 일반적인 서술에 대해서는 문헌[T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, 1991]을 참조한다.

하기 반응식 I 내지 IV는 화학식 I의 화합물을 제조하기 위해 사용될 수 있는 일반적인 경로를 제공한다. 하기 반응식은 예시이고 임의의 방식으로 제한되는 것으로 해석되지 않음이 이해되어야 한다.

하기 반응식 I은 화학식 I의 본 발명의 화합물을 제공하기 위해 사용될 수 있는 일반적인 과정을 요약한다.

[반응식 I]

상기 반응식 I의 제 1 단계는 화학식 IV'의 친핵성 아민 및 화학식 IV의 퀴놀린 N-옥사이드로 친핵 치환 반응을 수행하여 화학식 IIIa의 화합물을 수득하는 경로를 제시한다. 화학식 IV'의 화합물에서 기 R은 적합한 카복실산 보호기(즉, 상기 기재된 바와 같이 보호된 산 기 C(O)O-Pg 내의 기 Pg), 전형적으로 저급 알킬, 예컨대 메틸, 에틸 또는 t-부틸, 또는 기, 예컨대 벤질, 파라-메톡시벤질 또는 다이페닐메틸렌을 나타낸다. 화학식 IV의 N-옥사이드는 전형적으로 고온, 예컨대 80 ℃에서 1 내지 24 시간 동안 적합한 산화제, 예컨대 아세트산 중 과산화수소로 처리하여 상응하는 화합물을 비산화된 질소로 산화하여 제조된다. 전형적으로, 아민 IV'을 퀴놀린 N-옥사이드에 친핵성 첨가하는 것은 적합한 염기 및 용매의 존재하에 활성제로서 적합한 포스포늄 염을 사용하여 온화한 조건하에 수행될 수 있다. 예를 들어, 화학식 IV와 IV'의 화합물 사이의 반응은 상온에서 1 내지 24 시간 동안 적합한 용매, 예컨대 다이클로로메탄 또는 테트라하이드로푸란 중에서 적합한 염기, 예컨대 다이이소프로필에틸아민의 존재하에 PyBroP(브로모-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트)를 사용하여 수행되어(문헌[Londregan, A. T. et al; in Org. Lett. 2010, 12, 5254-5257 and Org. Lett. 2011, 13(7), 1840-1843] 참조) 화학식 IIIa의 화합물을 제공할 수 있다. 이어서, 화학식 IIIa의 화합물의 에스터 잔기를 적합한 탈보호 조건하에 탈보호하여 화학식 IIa의 자유 카복실산 화합물을 제공할 수 있다. 화학식 IIIa의 화합물 중 기 R이 메틸 또는 에틸 기를 나타내는 경우, 탈보호는 염기 촉매된 가수분해를 사용하여 수행될 수 있다. 예를 들어, 화학식 IIIa의 화합물은 실온에서 1 내지 24 시간 동안 테트라하이드로푸란 및 메탄올 중 적합한 염기, 예컨대 수산화 나트륨 또는 리튬 하이드록사이드로 처리될 수 있다. 화학식 IIIa의 화합물 중 기 R이 t-부틸, 파라-메톡시벤질 또는 다이페닐메틸렌인 경우, 탈보호는 적합한 용매, 예컨대 다이클로로메탄 중에서 적합한 산, 예컨대 염산 또는 트라이플루오로아세트산으로 처리하여 수행될 수 있다.

이어서, 화학식 IIa의 자유 산 화합물을 아민 HNR²R^3'(II')과 펩티드 커플링 반응시켜 화학식 Ia'의 화합물을 제공할 수 있다. 펩티드 커플링은 표준 문헌 조건을 사용하여 수행된다. 화학식 IIa의 산은 적합한 온도, 전형적으로 0 ℃ 내지 실온에서 적합한 용매, 예컨대 다이클로로메탄 또는 톨루엔 중에서, 임의적으로는 촉매 DMF의 존재하에 적합한 염소화제, 예컨대 옥살릴 클로라이드 또는 티온일 클로라이드를 사용하여 상응하는 산 클로라이드로 전환될 수 있다. 이어서, 산 클로라이드는 0 ℃ 내지 실온에서 적합한 용매, 예컨대 다이클로로메탄 또는 톨루엔 중에서 염기, 예컨대 트라이에틸아민 또는 다이이소프로필에틸아민의 존재하에 화학식 R^3'R²NH의 아민과 반응될 수 있다. R^3'은 R³ 자체를 나타내거나, R³을 수득하기 위해 이후에 탈보호될 수 있는 R³의 보호된 버전을 나타낼 수 있다. 다르게는, 화학식 IIa의 산은 적합한 용매, 예컨대 다이클로로메탄, 아세토니트릴 또는 DMF 중에서 커플링제, 예컨대 EDCI.HCl, HBTU, HATU, PyBop, DCC 또는 CDI를 사용하여 적합하게 활성화된 종으로 전환될 수 있다. EDCI.HCl, HOBT의 존재하에 전형적으로 첨가된다. EDCI는 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카보다이이미드이고; HBTU는 O-벤조트라이아졸-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트이고; HATU는 O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트이고; PyBop는 벤조트라이아졸-1-일옥시트라이피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트이고; DCC는 다이사이클로헥실카보다이이미드이고; CDI는 N,N'-카본일다이이미다졸이고; HOBT는 1-하이드록시 벤조트라이아졸이다. 또한, 적합한 염기, 예컨대 트라이에틸아민 또는 다이이소프로필에틸아민이 사용되고, 반응은 전형적으로 실온에서 수행된다. 이어서, R^3'이 R³의 보호된 버전을 나타내는 경우, 이후의 탈보호는 당해 분야에 공지된 방법으로 수행되어 R³을 제공할 수 있다. 예를 들어, R³이 에스터인 경우, 적합한 산 또는 염기 촉매된 가수분해는 상기 기재된 바와 같이 수행되어 화학식 Ia의 화합물 중 상응하는 자유 산을 제공할 수 있다.

[반응식 II]

상기 반응식 II는 화학식 I의 화합물의 또 다른 제조 방법을 제공한다. 반응식 II의 단계 1에서, 화학식 V의 화합물 및 화학식 IV'의 화합물은 커플링된다. 화학식 V의 화합물 중 기 Lg는 적합한 이탈기, 예컨대 할라이드, 메실레이트 또는 트라이플레이트를 나타낸다. 화학식 IV'의 화합물 중 기 R은 적합한 카복실산 보호기, 전형적으로 저급 알킬, 예컨대 메틸, 에틸 또는 t-부틸, 또는 기, 예컨대 벤질, 파라-메톡시벤질 또는 다이페닐메틸렌을 나타낸다. 화합물 V와 IV' 사이의 커플링 반응은 다양한 조건하에 수행될 수 있다. 예를 들어, 화학식 V의 화합물은 문헌[Buchwald, S. et al., in J. Am. Chem. Soc., 2008, 130(21), 6686-6687]; 문헌[J. Am. Chem. Soc., 2008, 130(41), 13552-13554] 및 문헌[J. Am. Chem. Soc., 2010, 132(45), 15914-15917]에 기재된 팔라듐 촉매된 아릴 아미노화 반응 조건을 사용하여 화합물 IV'과 커플링될 수 있다. 팔라듐 촉매된 커플링은 리간드로서 2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2'-4'-6'-트라이-i-프로필-1,1'-바이페닐(브렛포스) 및 전촉매로서 클로로[2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2'-4'-6'-트라이-i-프로필-1,1'-바이페닐][2-(2-아미노에틸)페닐]팔라듐(II)(브렛포스 팔라다사이클)을 사용하여 수행될 수 있다. 반응은 실온 내지 100 ℃의 온도에서 1 내지 24 시간 동안 적합한 용매, 예컨대 다이옥산 중에서 수행된 후 후처리하여 화학식 III의 화합물을 제공할 수 있다. 이어서, 화학식 III의 에스터 화합물은 탈보호되어 이후에 아민 R^3'R²NH와 펩티드 커플링 반응에 이용될 수 있는 화학식 II의 자유 산 화합물을 제공한 후, 필요한 경우 탈보호되어 화학식 I의 화합물을 제공할 수 있다. 아민 R^3'R²NH 중 기 R^3'은 R³ 자체를 나타내거나, R³을 제공하기 위해 요구되는 바와 같이 이후에 탈보호될 수 있는 R³의 보호된 버전을 나타낼 수 있다.

[반응식 III]

상기 반응식 III은 화학식 I을 갖는 본 발명의 화합물을 제공하기 위해 사용될 수 있는 또 다른 일반적인 과정을 요약한다. 화학식 V의 화합물은 반응식 II의 제 1 단계에 기재된 바와 같은 방법을 사용하여 화학식 IV"의 화합물과 커플링하여 화학식 I'의 화합물을 제공할 수 있다. 이어서, 화학식 I'의 화합물은 상기 기재된 바와 같이 필요에 따라 탈보호되어 화학식 I의 화합물을 제공할 수 있다.

[반응식 IV]

상기 반응식 IV는 화학식 I의 화합물을 제조하기 위한 또 다른 방법을 제공한다. 단계 1에서 화학식 VII의 아민 화합물은 화학식 VI의 화합물과 커플링하여 화학식 III의 화합물을 제공한다. 화학식 VI의 화합물에서 기 Lg는 적합한 이탈기, 예컨대 메실레이트, 트라이플레이트 또는 할라이드를 나타낸다. 화합물 VII과 VI 사이의 친핵성 치환 반응은 전형적으로 상온 내지 80 ℃ 범위의 온도 내에서 1 내지 24 시간 동안 적합한 용매, 예컨대 아세토니트릴 중에서 적합한 염기, 예컨대 칼륨 카보네이트 또는 칼륨 포스페이트의 존재하에 수행된다. 또한, 특정 경우에 화학식 VI의 화합물 중 기 Lg는 카본일 산소 원자를 나타낼 수 있고, 이어서, 화학식 VII의 아민은 전형적인 환원성 아미노화 조건하에 기 Lg와 반응하여 화학식 III의 화합물을 제공할 수 있다. 이어서, 화학식 III의 화합물은 반응식 I에 기재된 바와 같이 화학식 II, I' 및 I의 화합물로 순차적으로 전환될 수 있다.

본 발명의 화합물은 단리되고, 그 자체로 사용되거나 가능한 경우 이의 약학적으로 허용되는 염의 형태일 수 있다. 용어 "염"은 본 발명의 화합물의 무기염 및 유기염을 지칭한다. 이들 염은 화합물의 최종 단리 및 정제 동안, 또는 별도로 화합물을 적합한 유기산 또는 무기산, 또는 유기 염기 또는 무기 염기와 반응시켜 형성된 염을 단리함으로써 동일반응계에서 제조될 수 있다. 대표적인 염은 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 하이드로요오다이드, 설페이트, 바이설페이트, 니트레이트, 아세테이트, 트라이플루오로아세테이트, 옥살레이트, 베실레이트, 팔미티에이트, 파모에이트, 말론에이트, 스테아레이트, 라우레이트, 말레이트, 보레이트, 벤조에이트, 락테이트, 포스페이트, 헥사플루오로포스페이트, 벤젠 설폰에이트, 토실레이트, 포름에이트, 시트레이트, 말레에이트, 푸마레이트, 숙신에이트, 타르트레이트, 나프틸레이트, 메실레이트, 글루코헵톤에이트, 락토바이오네이트 및 라우릴설폰에이트 염 등을 포함한다. 이들은 알칼리 및 알칼리 토금속 기제의 양이온, 예컨대 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등뿐만 아니라 비독성 암모늄, 4차 암모늄, 및 비제한적으로 암모늄, 테트라메틸암모늄, 테트라에틸암모늄, 메틸아민, 다이메틸아민, 트라이메틸아민, 트라이에틸아민, 에틸아민 등을 포함하는 아민 양이온을 포함할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Berge, et al., J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977)]을 참조한다.

본 발명의 화합물은 비대칭 또는 키랄 중심을 함유할 수 있고, 따라서 다양한 입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 달리 명시하지 않으면, 본 발명의 화합물의 모든 입체이성질체 형태뿐만 아니라 라세미 혼합물을 포함하는 이의 혼합물은 본 발명의 일부 형태로 간주된다. 또한, 본 발명은 모든 기하이성질체를 포괄한다. 예를 들어, 본 발명의 화합물이 이중 결합 또는 융합된 고리를 혼입하는 경우, 시스-형태 및 트랜스-형태 둘다 뿐만 아니라 혼합물은 본 발명의 범주내에 포괄된다.

부분입체이성질체 혼합물은 당업자에게 널리 공지된 방법, 예컨대 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화에 의해 이의 물리적 화학적 차이에 기초하여 개별적인 부분입체이성질체로 분리될 수 있다. 거울상이성질체는 적합한 광학 활성 화합물(예를 들어, 키랄 보조제, 예컨대 키랄 알코올 또는 모셔 산 클로라이드)과 반응시켜 거울상이성질체 혼합물을 부분입체이성질체 혼합물로 전환하는 단계, 부분입체이성질체를 분리하는 단계 및 각각의 부분입체이성질체를 상응하는 순수 거울상이성질체로 전환(예를 들어, 가수분해)하는 단계에 의해 분리될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물의 일부는 아트로프이성질체(예를 들어, 치환된 바이아릴)일 수 있고 본 발명의 부분으로서 간주된다. 또한, 거울상이성질체는 키랄 HPLC 컬럼을 사용하여 분리될 수 있다. 다르게는, 특이적 입체이성질체는 광학 활성 출발 물질의 사용에 의해, 광학 활성 시약, 기질, 촉매 또는 용매를 사용하는 비대칭 합성에 의해, 또는 하나의 입체이성질체를 비대칭 변환에 의해 다른 입체이성질체로 전환하는 단계에 의해 합성될 수 있다.

또한, 본 발명의 중간체 및 화합물은 다양한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있고, 모든 이러한 형태가 본 발명의 범주 내에 포괄될 수 있다. 용어 "호변이성질체" 또는 "호변이성질체 형태"는 낮은 에너지 장벽을 통해 상호전환될 수 있는 상이한 에너지의 구조이성질체를 지칭한다. 예를 들어, 양성자 호변이성질체(또한 양성자성 호변이성질체로서 공지됨)는 양성자의 이동, 예컨대 케토-엔올 및 이민-엔아민 이성질체화를 통한 상호전환을 포함한다. 양성자 호변이성질체의 구체적 예는 양성자가 2개의 고리 질소 사이를 이동할 수 있는 이미다졸 잔기이다. 원자가 호변이성질체는 일부 결합 전자의 재조직에 의한 상호전환을 포함한다.

본 발명의 특정 화합물은 분리될 수 있는 다양한 안정한 배좌 형태로 존재할 수 있다. 비대칭 단일 결합에 관한 제한된 회전에 기인하여, 예를 들어 입체 장애 또는 고리 긴장으로 인한 비틀림 비대칭은 다양한 형태이성질체의 분리를 허용할 수 있다.

또한, 본 발명은 본원에 인용된 것과 동일하지만 하나 이상의 원자가 천연에서 일반적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량 수와 상이한 원자 질량 또는 질량 수를 갖는 원자로 대체된, 본 발명의 동위원소-표지된 화합물을 포괄한다. 본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 불소, 요오드 및 염소의 동위원소, 예컨대 각각 ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F, ¹²³I,¹²⁵I 및 ³⁶Cl을 포함한다.

본 발명의 특정 동위원소-표지된 화합물(예를 들어, ³H 및 ¹⁴C로 표지된 것)은 화합물 및/또는 기질 조직 분포 분석에 유용하다. 삼중수소(즉, ³H) 및 탄소-14(즉, ¹⁴C) 동위원소는 이의 용이한 제조 및 검출능에 대해 특히 바람직하다. 또한, 중질 동위원소, 예컨대 중수소(즉, ²H)로 치환하여 더 큰 대사 안정성(예를 들어, 증가된 생체 내 반감기 또는 감소된 투여 요건)으로부터 야기하는 특정 치료 장점을 수득할 수 있으므로 일부 경우에 바람직할 수 있다. 양전자 방출 동위원소, 예컨대 ¹⁵O, ¹³N, ¹¹C, 및 ¹⁸F는 기질 점유를 검사하기 위한 양전자 방출 단층촬영법(PET) 연구에 유용하다. 본 발명의 동위원소로 표지된 화합물은 일반적으로 비동위원소로 표지된 시약을 동위원소로 표지된 시약으로 대체함으로써 본원의 반응식 및/또는 하기 실시예에 개시된 것과 유사한 과정에 따라 제조될 수 있다.

본 발명의 특정 화합물은 하나 초과의 결정 형태(일반적으로 "다형체"로서 지칭됨)로 존재할 수 있다. 다형체는 다양한 조건하에, 예를 들어, 재결정화를 위한 상이한 용매 또는 상이한 용매 혼합물의 사용; 상이한 온도에서 결정화; 및/또는 결정화 동안 매우 빠른 냉각으로부터 매우 느린 냉각까지의 다양한 방식의 냉각하에 결정화로 제조될 수 있다. 또한, 다형체는 본 발명의 화합물을 가열 또는 용융시킨 후 점진적으로 또는 빠르게 냉각함으로써 수득될 수 있다. 다형체의 존재는 고체 탐침 NMR 스펙트럼법, IR 스펙트럼법, 시차주사 열량 측정법, 분말 X-선 회절 또는 이러한 다른 기술에 의해 측정될 수 있다.

본 발명의 화합물은 글루카곤에 의해 매개되는 질병, 상태 및/또는 질환을 치료하는데 유용하므로, 본 발명의 또 다른 실시양태는 치료 효과량의 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용되는 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물이다. 또한, 본 발명의 화합물(본원에 사용된 조성물 및 과정을 포함함)은 본원에 기재된 치료 적용을 위한 약제의 제조에 사용될 수 있다.

전형적인 제형은 본 발명의 화합물 및 담체, 희석제 또는 부형제를 혼합하여 제조된다. 적합한 담체, 희석제 및 부형제는 당업자에게 널리 공지되어 있고, 탄수화물, 왁스, 수용성 및/또는 팽창성 중합체, 친수성 또는 소수성 물질, 젤라틴, 오일, 용매, 물 등과 같은 물질을 포함한다. 사용된 특정 담체, 희석제 또는 부형제는 본 발명의 화합물이 적용될 수단 및 목적에 따라 다를 수 있다. 용매는 일반적으로 포유동물에 투여되기에 안전한 것(GRAS)으로서 당업자에게 인지된 용매를 기초로 선택된다. 일반적으로, 안전한 용매는 비독성 수성 용매, 예컨대 물 및 물에 가용성 또는 혼화성인 다른 비독성 용매이다. 적합한 수성 용매는 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(예를 들어, PEG400, PEG300) 등 및 이들의 혼합물을 포함한다. 또한, 제형은 하나 이상의 완충제, 안정화제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 에멀젼화제, 현탁제, 방부제, 산화방지제, 불투명화제, 활주제, 가공보조제, 착색제, 감미료, 향미제, 착향제 및 약물(즉, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물)의 우아한 제조를 제공하기 위한 다른 공지된 첨가제 또는 약학 생성물(즉, 약제)의 제조에서 보조제를 포함할 수 있다.

제형은 통상적인 용해 및 혼합 공정을 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들어, 벌크 약물 물질(즉, 본 발명의 화합물 또는 화합물의 안정화된 형태(예를 들어, 사이클로덱스트린 유도체 또는 다른 공지된 착화제와의 착체))은 상기 기재된 하나 이상의 부형제의 존재하에 적합한 용매 중에서 용해된다. 본 발명의 화합물은 전형적으로 약학 투여량 형태로 제형되어 용이하게 조절될 수 있는 약물의 투여량을 제공하고 환자에게 우아하고 용이하게 다룰 수 있는 생성물을 제공한다.

또한, 약학 조성물은 화학식 I의 화합물의 용매화물 및 수화물을 포함한다. 용어 "용매화물"은 하나 이상의 용매 분자를 갖는 화학식 I에 의해 나타낸 화합물(이의 약학적으로 허용되는 염을 포함)의 분자 착체를 지칭한다. 상기 용매 분자는 약학 업계에서 통상적으로 사용되는 것이고, 이는 수용체에 무해한 것으로 공지된, 예를 들어, 물, 에탄올, 에틸렌 글리콜 등이다. 용어 "수화물"은 용매 분자가 물인 착체를 지칭한다. 용매화물 및/또는 수화물은 바람직하게는 결정질 형태로 존재한다. 다른 용매, 예컨대 메탄올, 메틸 t-부틸 에터, 에틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, (S)-프로필렌 글리콜, (R)-프로필렌 글리콜, 1,4-부틴-다이올 등은 더욱 바람직한 용매화물의 제조에서 중간체 용매화물로서 사용될 수 있다.

적용하기 위한 약학 조성물(또는 제형)은 약물을 투여하기 위해 사용된 방법에 따라 다양한 방식으로 포장될 수 있다. 일반적으로, 분포를 위한 제품은 적합한 형태로 약학 제형이 내부에 침적된 용기를 포함한다. 적합한 용기는 당업자에게 널리 공지되어 있고, 병(플라스틱 및 유리), 샤쉐(sachet), 앰플, 플라스틱 백, 금속 실린더 등과 같은 물질을 포함한다. 또한, 용기는 포장의 내용물에 무분별한 접근을 막기 위해 쉽게 조작할 수 없는 군집물을 포함할 수 있다. 또한, 용기는 용기의 내용물을 설명하는 표지가 부착되어 있다. 또한, 표지는 적합한 경고를 포함할 수 있다.

본 발명은 치료 효과량의 본 발명의 화합물, 또는 효과량의 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용되는 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물을 치료를 필요로 하는 동물에게 투여함을 포함하는, 동물에서 글루카곤에 의해 매개되는 질병, 상태 및/또는 질환의 치료 방법을 추가로 제공한다. 상기 방법은 특히 당뇨병, 섭식 질환(예를 들어, 폭식 질환, 거식증, 과식증, 체중 감소 또는 조절, 및 비만), 비만의 예방 및 인슐린 저항을 포함하는 글루카곤의 조절로 득을 보는 질병, 상태 및/또는 질환의 치료에 유용하다.

본 발명의 일 양상은 비만 및 비만-관련된 질환(예를 들어, 과체중, 체중 증가 또는 체중 유지)의 치료이다.

비만 및 과체중은 일반적으로 체질량 지수(BMI)로 정의되고, 이는 총 체지방과 관련이 있고 질병의 상대적인 위험 요인을 추산한다. BMI는 중량(kg)을 제곱미터 높이(m²)로 나누어 계산된다(kg/m²). 과체중은 전형적으로 25 내지 29.9 kg/m²의 BMI로서 정의되고, 비만은 전형적으로 30 kg/m²의 BMI로서 정의된다. 예를 들어, 문헌[National Heart, Lung, and Blood Institute, Clinical Guidelines on the Identification, Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults, The Evidence Report, Washington, DC: U.S. Department of Health and Human Services, NIH publication no. 98-4083 (1998)]을 참조한다.

본 발명의 또 다른 양상은 당뇨병 또는 1형(인슐린-의존 진성 당뇨병, 또한"IDDM"으로서 지칭됨) 및 2형(비인슐린-의존 진성 당뇨병, 또한 "NIDDM"으로서 지칭됨) 당뇨병을 포함하는 당뇨병-관련된 질환, 손상된 글루코스 내성, 인슐린 저항, 고혈당증, 및 당뇨성 합병증(예컨대 아테롬성 동맥경화증, 관상 동맥 질병, 뇌졸중, 말초 혈관 질병, 신장병, 고혈압, 신경증 및 망막증)의 진행 또는 발병을 치료하거나 지연하기 위한 것이다.

본 발명의 또 다른 양상은 당뇨병- 또는 비만-관련된 중복이환, 예컨대 대사 증후군의 치료이다. 대사 증후군은 질병, 상태 또는 질환, 예컨대 이상지질혈증, 고혈압, 인슐린 저항, 당뇨병(예를 들어, 2형 당뇨병), 체중 증가, 관상 동맥 질병 및 심장 장애를 포함한다. 대사 증후군에 대한 더욱 상세한 정보를 위해, 예를 들어, 문헌[Zimmet, P.Z., et al., "The Metabolic Syndrome: Perhaps an Etiologic Mystery but Far From a Myth - Where Does the International Diabetes Federation Stand?," Diabetes and Endocrinology, 7(2), (2005)]; 및 문헌[Alberti, K.G., et al., "The Metabolic Syndrome - A New Worldwide Definition," Lancet, 366, 1059-62 (2005)]을 참조한다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물의 투여는 약물을 함유하지 않고 비히클을 조절하는 것과 비교하여 하나 이상의 심혈관계 질병 위험 인자, 예컨대 혈장 렙틴, C-반응성 단백질(CRP) 및/또는 콜레스테롤의 저하에서 통계적으로 유의한(p<0.05) 감소를 제공한다. 또한, 본 발명의 화합물의 투여는 글루코스 혈청 수준에서 통계적으로 유의한(p<0.05) 감소를 제공할 수 있다.

본 발명의 또 다른 양상에서, 치료된 상태는 손상된 글루코스 내성, 고혈당증, 당뇨성 합병증, 예컨대 당 백내장, 당뇨병성 신경병증, 당뇨병성 신장증, 당뇨병성 망막증 및 당뇨성 심근증, 거식증, 과식증, 악액질, 고뇨산혈증, 고인슐린혈증, 고콜레스테롤혈증, 고지질혈증, 이상지질혈증, 혼합된 이상지질혈증, 고중성 지방혈증, 비알코올성 지방간 질병, 아테롬성 동맥경화증, 동맥경화증, 급성 심장 장애, 울혈성 심장 장애, 관상 동맥 질병, 심근증, 심근경색, 협심증, 고혈압, 저혈압, 뇌졸중, 국소성 빈혈, 허혈성 재관류 손상, 동맥류, 재발 협착증, 맥관 협착증, 고체 종양, 피부암, 흑색종, 림프종, 유방암, 폐암, 대장암, 위암, 식도암, 췌장암, 전립선암, 신장암, 간암, 방광암, 자궁경부암, 자궁암, 고환암 및 난소암이다.

또한, 본 발명은 인간을 포함하는 포유동물에서 상기 기재된 상태를 치료하기 위한 치료 방법에 관한 것이고, 이때 본 발명의 화학식 I의 화합물은 치료의 이점을 수득하기 위해 고안된 적합한 투여 양생법의 일부로서 투여된다. 적합한 투여 양생법, 투여된 각각의 투여량 및 화합물의 투여량 사이의 간격은 사용되는 본 발명의 화학식 I의 화합물, 사용되는 약학 조성물의 유형, 치료되는 대상체의 특성 및 상태의 심각성에 따를 것이다.

일반적으로, 본 발명의 화합물에 대한 효과적인 투여량은 단일 투여 또는 분할 투여 중 활성 화합물의 0.01 mg/kg/일 내지 30 mg/kg/일, 바람직하게는 0.01 mg/kg/일 내지 5 mg/kg/일의 범위이다. 그러나, 치료되는 대상체의 연령 및 체중, 의도된 경로의 투여, 투여되는 특정 화합물 등에 따라 일반적인 투여량 범위에서 일부 변동이 요구될 수 있다. 특정 환자에 대한 투여량 범위 및 최적의 투여량의 결정은 본원의 이점을 갖는 당업자의 능력내이다. 전문가는 "kg"이 킬로그램 단위로 측정된 환자의 체중을 지칭함을 인지할 것이다.

본 발명의 화합물 또는 조성물은 단일 투여량(예를 들어, 하루에 한번) 또는 다중 투여량 또는 지속적 주입을 통해 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물은 단일 투여량 또는 다중 투여량 중 단독으로 또는 약학적으로 허용되는 담체, 비히클 또는 희석제와 조합으로 투여될 수 있다. 적합한 약학 담체, 비히클 및 희석제는 불활성 고체 희석제 또는 충전제, 무균 수용액 및 다양한 유기 용매를 포함한다.

본 발명의 화합물 또는 조성물은 경구적 및 비경구적(예를 들어, 정맥내, 피하 또는 골수내)을 포함하는 다양한 통상적인 투여 경로에 의해 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여될 수 있다. 추가로, 본 발명의 약학 조성물은 좌제로서, 또는 "플래시" 제형, 즉, 약제가 물을 사용할 필요 없이 입안에 용해되도록 허용하는 것을 사용하여 비강내에 투여될 수 있다.

또한, 본 발명의 화합물은 지속 방출, 제어 방출 및 지연 방출 제형에서 사용될 수 있고, 이들 제형은 또한 당업자에게 널리 공지된 형태임이 주목된다.

또한, 본 발명의 화합물은 본원에 기재된 질병, 상태 및/또는 질환의 치료를 위해 다른 약제와 함께 사용될 수 있다. 따라서, 다른 약제와 조합으로 본 발명의 화합물을 투여함을 포함하는 치료 방법이 또한 제공된다. 본 발명의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 적합한 약제는 항비만제(식욕 억제제 포함함), 항당뇨병제, 항고혈당제, 지질저하제 및 항고혈압제를 포함한다.

적합한 항당뇨병제는 아세틸-CoA 카복실라아제-(ACC) 억제제(예컨대, 국제특허출원공개 제 2009144554 호, 제 2003072197 호, 제 2009144555 호 및 제 2008065508 호에 기재된 것), 다이아실글리세롤 O-아실전이효소 1(DGAT-1) 억제제(예컨대, 국제특허출원공개 제 09016462 호 또는 제 2010086820 호에 기재된 AZD7687 또는 LCQ708), 다이아실글리세롤 O-아실전이효소 2(DGAT-2) 억제제, 모노아실글리세롤 O-아실전이효소 억제제, 포스포다이에스터라아제(PDE)-10 억제제, AMPK 활성제, 설폰일우레아(예를 들어, 아세토헥사미드, 클로로프로파미드, 다이아바이네스, 글리벤클라미드, 글리피지드, 글리부리드, 글리메피리드, 글리클라지드, 글리펜티드, 글리퀴돈, 글리솔라미드, 톨라자미드 및 톨부타미드), 메글리티니드, α-아밀라아제 억제제(예를 들어, 텐다미스타트, 트레스타틴 및 AL-3688), α-글루코시드 하이드롤라아제 억제제(예를 들어, 아카보스), α-글루코시다아제 억제제(예를 들어, 아디포신, 카미글리보스, 에미글리테이트, 미글리톨, 보글리보스, 프라디미신-Q 및 살보스타틴), PPARγ 작용제(예를 들어, 발라글리타존, 시글리타존, 다르글리타존, 엔글리타존, 이사글리타존, 피오글리타존, 로시글리타존 및 트로글리타존), PPAR α/γ 작용제(예를 들어, CLX-0940, GW-1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767 및 SB-219994), 비구아니드(예를 들어, 메트포름인), 글루카곤-유사 펩티드 1(GLP-1) 조절제, 예컨대 작용제(예를 들어, 엑센딘-3 및 엑센딘-4), 리라글루티드, 알비글루티드, 엑세나티드(바이에타(Byetta: 등록상표)), 알비글루티드, 타스포글루티드, 릭시세나티드, 둘라글루티드, 세마글루티드, NN-9924, TTP-054, 단백질 티로신 포스파타아제-1B(PTP-1B) 억제제(예를 들어, 트로더스퀴민, 하이르티오살 추출물, 및 문헌[Zhang, S., et al., Drug Discovery Today, 12(9/10), 373-381 (2007)])에 기재된 화합물, SIRT-1 억제제(예를 들어, 레스베라트롤, GSK2245840 또는 GSK184072), 다이펩티딜 펩티다아제 IV(DPP-IV) 억제제(예를 들어, 국제특허출원공개 제 2005116014 호에 기재된 것, 시타글립틴, 빌다글립틴, 알로글립틴, 두토글립틴, 리나글립틴 및 사사글립틴), 인슐린 분비촉진제, 지방산 산화 억제제, A2 길항제, c-jun 아미노-말단 키나아제(JNK) 억제제, 글루코키나아제 활성제(GKa)(예컨대, 국제특허출원공개 제 2010103437 호, 제 2010103438 호, 제 2010013161 호, 제 2007122482 호에 기재된 것, TTP-399, TTP-355, TTP-547, AZD1656, ARRY403, MK-0599, TAK-329, AZD5658 또는 GKM-001)), 인슐린, 인슐린 모방체, 글리코겐 포스포릴라아제 억제제(예를 들어, GSK1362885), VPAC2 수용체 작용제, SGLT2 억제제(예컨대, 다파글리플로진, 카나글리플로진, BI-10733, 토포글리플로진(CSG452), ASP-1941, THR1474, TS-071, ISIS388626 및 LX4211을 포함하는 문헌[E. C. Chao et al., Nature Reviews Drug Discovery 9, 551-559 (July 2010)]에 기재된 것, 및 국제특허출원공개 제 2010023594 호에 기재된 것), 글루카곤 수용체 조절제(예컨대, 문헌[Demong, D. E. et al., Annual Reports in Medicinal Chemistry 2008, 43. 119-137]에 기재된 것), GPR119 조절제, 특히 작용제(예컨대, 국제특허출원공개 제 2010140092 호, 제 2010128425 호, 제 2010128414 호, 제 2010106457 호, 문헌[Jones, R.M. et al., in Medicinal Chemistry 2009, 44, 149-170]에 기재된 것(예를 들어, MBX-2982, GSK1292263, APD597 및 PSN821)), FGF21 유도체 또는 유사체(예컨대, 문헌[Kharitonenkov, A. et al., Current Opinion in Investigational Drugs 2009, 10(4) 359-364]에 기재된 것), TGR5(또한, GPBAR1로 지칭됨) 수용체 조절제, 특히 작용제(예컨대, 문헌[Zhong, M., Current Topics in Medicinal Chemistry, 2010, 10(4), 386-396]에 기재된 것), INT777, GPR40 작용제(예컨대, 비제한적으로 TAK-875를 포함하는 문헌[Medina, J.C., Annual Reports in Medicinal Chemistry, 2008, 43, 75-85]에 기재된 것), GPR120 조절제, 특히 작용제, 고친화성 니코틴산 수용체(HM74A) 활성제, 및 SGLT1 억제제, 예컨대 GSK1614235, 및 SGLT2 억제제, 예컨대 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-2,3,4-트라이올, 세르글리플로진, 레모글리플로진, 다파글리플로진, 카나글리플로진, TA-7584, YM543, BI10773을 포함한다. 본 발명의 화합물과 조합될 수 있는 항당뇨병제의 추가의 대표적인 목록은, 예를 들어, 국제특허출원공개 제 2011005611 호의 28 면 35 행 내지 30 면 19 행에서 발견될 수 있다. 바람직한 항당뇨병제는 메트포름인, DPP-IV 억제제(예를 들어, 시타글립틴, 빌다글립틴, 알로글립틴, 두토글립틴, 리나글립틴 및 사사글립틴) 및 SGLT2 억제제이다. 다른 항당뇨병제는 카르니틴 팔미토일 전이효소 효소의 억제제 또는 조절제, 프룩토스 1,6-다이포스파타아제의 억제제, 알도즈 환원효소의 억제제, 무기질코르티코이드 수용체 억제제, TORC2의 억제제, CCR2 및/또는 CCR5의 억제제, PKC 이소폼(예를 들어, PKCα, PKCβ, PKCγ)의 억제제, 지방산 합성효소의 억제제, 세린 팔미토일 전이효소의 억제제, GPR81, GPR39, GPR43, GPR41, GPR105의 조절제, Kv1.3, 레티놀 결합 단백질 4, 글루코코르티코이드 수용체, 소마토스타틴 수용체(예를 들어, SSTR1, SSTR2, SSTR3 및 SSTR5), PDHK2 또는 PDHK4의 억제제 또는 조절제, MAP4K4의 억제제, IL-1β를 포함하는 IL-1 패밀리의 조절제, RXRα의 조절제를 포함할 수 있다. 또한, 적합한 항당뇨병제는 문헌[Carpino, P.A., Goodwin, B. Expert Opin. Ther. Pat, 2010, 20(12), 1627-51]에 나열된 매카니즘을 포함한다.

적합한 항비만제(또한, 일부는 항당뇨병제로서 작용할 수 있음)는 11β-하이드록시 스테로이드 탈수소효소-1(11β-HSD 1형) 억제제, 스테아로일-CoA 불포화효소-1(SCD-1) 억제제, MCR-4 작용제, 콜레시스토키닌-A(CCK-A) 작용제, 모노아민 재흡수 억제제(예컨대, 시부트라민), 교감신경 흥분제, β₃ 아드레날린 작용제, 도파민 작용제(예컨대, 브로모크립틴), 멜라닌 세포자극 호르몬 유사체, 5HT2c 작용제, 멜라닌 농축 호르몬 길항제, 렙틴(OB 단백질), 렙틴 유사체, 렙틴 작용제, 갈라닌 길항제, 리파아제 억제제(예컨대, 테트라하이드로립스타틴, 즉, 오를리스타트), 식욕감퇴제(예컨대, 봄베신 작용제), 뉴로펩티드-Y 길항제(예를 들어, NPY Y5 길항제, 예컨대, 벨네페리트), PYY₃ _-36(이의 유사체를 포함함), BRS3 조절제, 오피오드 수용체 아형의 혼합된 길항제, 갑상선 유사제, 디하이드로에피안드로스테론 또는 이의 유사체, 글루코코르티코이드 작용제 또는 길항제, 오렉신 길항제, 글루카곤-유사 펩티드-1 작용제, 섬모 향신경성 인자(예컨대, 리제네론 파마슈티칼스 인코포레이티드(Regeneron Pharmaceuticals, Inc.), 미국 뉴욕주 태리타운 소재) 및 프록터 앤드 갬블 캄파니(Procter and Gamble Company), 미국 오하이오주 신시내티 소재)로부터 이용가능한 악소킨(Axokine: 상표)), 인간 아구티-관련된 단백질(AGRP) 억제제, 히스타민 3 길항제 또는 역 작용제, 뉴로메딘 U 작용제, MTP/ApoB 억제제(예를 들어, 소화관-선택적인 MTP 억제제, 예컨대, 디를로타피드, JTT130, 우시스타피드, SLX4090), 오피오이드 길항제, 비제한적으로 GSK1521498을 포함하는 무 오피오이드 수용체 조절제, 비제한적으로, ZGN-433을 포함하는 MetAp2 억제제, 2개 이상의 글루카곤에서 혼합된 조절 활성을 갖는 약제, GIP 및 GLP1 수용체(예컨대, MAR-701 또는 ZP2929), 노레피네프린 운반 억제제, 칸나비노이드-1-수용체 길항제/역 작용제, 그렐린 작용제/길항제, 옥신토모둘린 및 유사체, 모노아민 섭취 억제제(예컨대, 비제한적으로 테소페신), 오렉신 길항제, 조합 제제(예컨대, 부프로피온 + 조니사미드, 프람린티드 + 메트렐렙틴, 부프로피온 + 날트렉손, 펜테르민 + 토피라메이트) 등을 포함한다.

본 발명의 조합 양상에서 사용하기에 바람직한 항비만제는 소화관-선택적인 MTP 억제제(예를 들어, 디를로타피드, 미트라타피드 및 임플리타피드, R56918(CAS 번호 403987) 및 CAS 번호 913541-47-6), CCKa 작용제(예를 들어, PCT 출원 국제특허출원공개 제 2005/116034 호 또는 미국 특허 제 2005-0267100 A1 호에 기재된 N-벤질-2-[4-(1H-인돌-3-일메틸)-5-옥소-1-페닐-4,5-다이하이드로-2,3,6,10b-테트라아자-벤조[e]아줄렌-6-일]-N-이소프로필-아세트아미드), 5HT2c 작용제(예를 들어, 로르카세린), MCR4 작용제(예를 들어, 미국 특허 제 6,818,658 호에 기재된 화합물), 리파아제 억제제(예를 들어, 세틸리스타트), PYY₃ _-36(본원에 사용된 "PYY₃ _-36"은 유사체, 예컨대 페길화된 PYY₃ _-36, 예를 들어, 미국 특허 제 2006/0178501 호에 기재된 것을 포함함), 오피오이드 길항제(예를 들어, 날트렉손), 올레오일-에스트론(CAS 번호 180003-17-2), 오비네피티드(TM30338), 프람린티드(심린(Symlin: 등록상표)), 테소펜신(NS2330), 렙틴, 브로모크립틴, 오를리스타트, AOD-9604(CAS 번호 221231-10-3) 및 시부트라민을 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물 및 조합 요법은 운동 및 합리적인 식습관과 함께 투여된다.

상기 인용된 모든 미국 특허 및 문헌은 참고로써 본원에 혼입된다.

본 발명의 실시양태는 하기 실시예로 예시된다. 그러나, 본 발명의 실시양태가 이들 실시예의 특정 세부사항으로 국한되지 않음으로써 당업자에게 이의 다른 변형이 공지되거나 본원에 비추어 명백함이 이해되어야 한다.

실시예

달리 명시하지 않으면, 출발 물질은 일반적으로 상업적인 공급원, 예컨대 알드리치 케미칼스 캄파니(Aldrich Chemicals Co.; 미국 위스콘신주 밀워키 소재), 란카스터 신데시스 인코포레이티드(Lancaster Synthesis, Inc.; 미국 뉴햄프셔주 윈더험 소재), 아크로스 오가닉스(Acros Organics; 미국 뉴저지주 페어론 소재), 메이브릿지 케미칼 캄파니 리미티드(Maybridge Chemical Company, Ltd.; 영국 콘왈 소재), 타이거 사이언티픽(Tyger Scientific; 미국 뉴저지주 프린스톤 소재) 및 아스트라제네카 파마슈티칼스(AstraZeneca Pharmaceuticals; 영국 런던 소재)로부터 입수가능하다.

일반적인 실험 과정

400 MHz에서 양성자에 대하여 실온에서 바리안 유니티(Varian Unity: 상표) 400(바리안 인코포레이티드(Varian Inc.; 캐나다 팔로 알토 소재)로부터 입수가능함) 상에 NMR 스펙트럼을 기록하였다. 화학 이동을 내부 기준으로서 잔여 용매와 비교하여 ppm(δ)으로 나타내었다. 피크 형태를 하기와 같이 나타내었다: s, 일중항; d, 이중항; dd, 이중항의 이중항; t, 삼중항; q, 사중항; quin, 오중항; sxt, 육중항; m, 다중항; bs, 광범위한 일중항; 2s, 2개의 일중항. 대기압 화학 이온화 질량 스펙트럼(APCI)을 피손스(Fisons: 상표) 플랫폼 II 스펙트럼계(담체 기체: 아세토니트릴; 마이크로매스 리미티드(Micromass Ltd.; 영국 맨체스터 소재)로부터 이용가능함) 상에 수득하였다. 화학 이온화 질량 스펙트럼(CI)을 휴렛 팩커드(Hewlett-Packard: 상표) 5989 기기(암모니아 이온화, PBMS: 휴렛 팩커드 캄파니(캐나다 팔로 알토 소재)로부터 이용가능함) 상에 수득하였다. 전자분무 이온화 질량 스펙트럼(ES)을 워터스(Waters: 상표) ZMD 기기(담체 기체: 아세토니트릴: 워터스 코포레이션(Waters Corp.; 미국 메사추세츠주 밀포드 소재)으로부터 이용가능함)로 수득하였다. 고해상도 질량 스펙트럼(HRMS)을 비과 시간 방법을 사용하여 아질런트(Agilent: 상표) 모델 6210 상에 수득하였다. 염소 또는 브롬-함유 이온의 강도가 기재된 경우, 예상된 강도비가 관찰되고(³⁵Cl/³⁷Cl-함유 이온에 대하여 약 3:1 및 ⁷⁹Br/⁸¹Br-함유 이온에 대하여 약 1:1), 더 낮은 질량 이온의 강도만이 주어진다. 일부 경우에만 대표적인 ¹H NMR 피크만이 주어진다. 지시된 온도에서 나트륨 D 라인(λ = 589 nm)을 사용하여 광학회전을 퍼킨엘머(PerkinElmer: 상표) 241 편광계(퍼킨엘머 인코포레이티드(PerkinElmer Inc.; 미국 메사추세츠주 웰즐리 소재)로부터 이용가능함)에서 측정하고 [α]_D ^온도, 농도(c = g/100 mL) 및 용매로서 기록하였다.

낮은 질소 압력하에 유리 컬럼 또는 플래시 40 바이오타지(Biotage: 상표) 컬럼(아이에스씨 인코포레이티드(ISC, Inc.; 미국 코네티컷주 셸톤 소재)에서 베이커(Baker: 상표) 실리카 겔(40 μm; 제이.티. 베이커(J.T. Baker), 미국 뉴저지주 필립스버그 소재) 또는 실리카 겔 50(이엠 사이언시스(EM Sciences: 상표), 미국 뉴저지주 깁스타운 소재), 또는 바이오타지(상표) 에스엔에이피(SNAP) 카트리지 케이피실(KPsil) 또는 레디셉 알에프(Redisep Rf) 실리카(텔레딘(Teledyne: 상표) 이스코(Isco: 상표)로부터)를 사용하여 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다. 키랄 SFC(초임계 유체 크로마토그래피)를 명시된 바와 같이 키랄 컬럼으로 수행하였다.

하기 약어를 본원에서 나타낼 수 있다:

BSA = 소 혈청 알부민;

cAMP = 사이클릭 아데노신 모노포스페이트;

CsOAc = 세슘 아세테이트;

DCM = 다이클로로메탄;

DIEA = 다이이소프로필에틸아민;

DMEM-F12 = 둘베코 개질된 이글 배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 영양 혼합물 F-12;

DMF = N,N-다이메틸포름아미드;

DMSO = 다이메틸설폭사이드;

EtOAc = 에틸 아세테이트;

EtOH = 에탄올;

g = 그램;

h = 시간;

IBMX = 3-이소부틸-1-메틸잔틴;

i-PrOH = 이소프로판올;

L = 리터;

LCMS = 액체 크로마토그래피 질량 분석;

MeOH = 메탄올;

mg = 밀리그램;

mL = 밀리리터;

mmol = 밀리몰;

min = 분;

N = 노말;

PVT = 폴리비닐 톨루엔;

RT = 실온;

SPA = 섬광 근접 측정법;

TEA = 트라이에틸아민;

THF = 테트라하이드로푸란; 및

WGA = 밀 배아 응집소.

출발 물질 및 중간체의 제조

중간체 1: 에틸 4-부티릴벤조에이트

-40 ℃에서, 이소프로필마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드(15.3 mL, THF 중 1.3 M, 19.9 mmol)를 테트라하이드로푸란(30 mL) 중 에틸 4-요오드벤조에이트(5000 mg, 18.11 mmol)의 용액에 적가하였다. 용액을 -40 ℃에서 40 분 동안 교반하였다. 부티르알데하이드(1830 mg, 25.4 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3 시간에 걸쳐서 실온으로 가온시켰다. 반응 생성물을 1 N HCl로 급랭하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 에틸 4-(1-하이드록시부틸)벤조에이트를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.02(d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.41(d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.83-4.66(m, 1H), 4.38(q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.86(d, J = 3.7 Hz, 1H), 1.83-1.61(m, 2H), 1.51-1.42(m, 1H), 1.39(t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.36-1.23(m, 1H), 0.94(t, J = 7.6 Hz, 3H).

다이클로로메탄(16.7 mL) 중 조질 알코올(1.0 g, 4.5 mmol), 다이메틸설폭사이드(4.79 mL) 및 트라이에틸아민(2.28 g, 22.5 mmol)의 혼합물을 0 ℃로 냉각하였다. 삼산화황 피리딘 착체(2.15 g, 13.5 mmol)를 나누어 첨가하고 혼합물을 0 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 실온으로 가온시키고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 염수로 급랭하고 다이클로로메탄으로 희석하였다. 층을 분리하고 수성을 다이클로로메탄으로 다시 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 30% 에틸 아세테이트)로 정제하여 에틸 4-부티릴벤조에이트(중간체 1)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.05-8.17(m, 2 H), 8.04-7.92(m, 2 H), 4.40(q, J = 7.15 Hz, 2 H), 2.96(t, J = 7.22 Hz, 2 H), 1.86-1.69(m, 2 H), 1.40(t, J = 7.12 Hz, 3 H), 1.00(t, J = 7.22 Hz, 3 H).

중간체 2: 에틸(+/-)-4-(1-아미노부틸)벤조에이트

나트륨 시아노보로하이드라이드(29.8 g, 0.450 mol)를 메탄올(1000 mL) 중 중간체 1(66.1 g, 0.300 mol) 및 암모늄 아세테이트(236 g, 3.00 mol)의 용액에 첨가하였다. 용액을 환류 응축기에 장착하고 60 ℃로 16 시간 동안 가열하였다. 용액을 실온으로 냉각시켰다. 반응 생성물을 1 N HCl(300 mL)을 적가하여 급랭하고 실온에서 1 시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 농축하여 메탄올을 제거하였다. 이 혼합물을 1 N NaOH(500 mL)을 조심스럽게 첨가하여 희석한 후 다이클로로메탄(3 x 500 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)로 정제하여 에틸(+/-)-4-(1-아미노부틸)벤조에이트(중간체 2)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.01(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.40(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 4.38(q, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.98(t, J = 6.9 Hz, 1 H), 1.95(br. s., 2 H), 1.74-1.56(m, 2 H), 1.40(t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.16-1.37(m, 2 H), 0.91(t, J = 7.4 Hz, 3 H).

중간체 3: 3-메틸퀴놀린 1-옥사이드

3-메틸퀴놀린(30.0 mL, 224 mmol)을 아세트산(85 mL) 중에서 용해하고, 30% 수성 과산화수소(30.4 mL)를 첨가하였다. 반응 생성물을 80 ℃에서 16 시간 동안 교반한 후 빙욕에서 냉각하였다. 10% 수성 Na₂SO₃(199 mL, 0.5 당량)을 첨가한 후 나트륨 요오다이드(2.358 g, 0.05 당량)를 첨가하였다. 이 혼합물을 5 분 동안 교반하였다. 과산화물 시험 스트립은 과산화물이 남아있지 않음을 나타내었다. 이어서, 내부 온도를 24 ℃ 미만으로 유지하면서 5 N 수성 NaOH를 첨가하였다. 용액은 염기성(pH 10으로서 시험됨)임을 나타내는 암색을 형성하였다. 용액을 다이클로로메탄의 4 분량으로 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액을 감압하에 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(메탄올/에틸 아세테이트)로 정제하여 황색 고체로서 3-메틸퀴놀린 1-옥사이드(중간체 3, 32.09 g)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.69(d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.42(s, 1 H), 7.77(d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.68(td, J = 7.8, 1.1 Hz, 1 H), 7.56-7.63(m, 1 H), 7.52(s, 1 H), 2.45(s, 3 H); MS(M+1): 160.2.

중간체 4: 에틸(+/-)-4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤조에이트

중간체 2(22.9 g, 104 mmol)를 3-메틸퀴놀린-N-옥사이드(중간체 3, 17.3 g, 109 mmol) 및 다이클로로메탄(414 mL)과 합하였다. 다이이소프로필에틸아민(68.0 mL, 389 mmol)을 첨가한 후, 브로모트라이피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(61.0 g, 130 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 12 시간 동안 교반한 후 포화 수성 NaHCO₃(400 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 400 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액을 감압하에 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 에틸(+/-)-4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤조에이트(중간체 4)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.99(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.65-7.58(m, 2 H), 7.56-7.48(m, 3 H), 7.43(t, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.16(t, J = 7.4 Hz, 1 H), 5.50(q, J = 7.2 Hz, 1 H), 4.79(d, J = 7.0 Hz, 1 H), 4.35(q, J = 7.0 Hz, 2 H), 2.30(s, 3 H), 2.04-1.83(m, 2 H), 1.54-1.39(m, 2 H), 1.37(t, J = 7.1 Hz, 3 H), 0.98(t, J = 7.4 Hz, 3 H).

중간체 5: (+/-)-4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤조산

테트라하이드로푸란(234 mL) 및 메탄올(234 mL) 중 중간체 4(34.29 g, 94.60 mmol)의 용액에 1 N 수성 수산화 나트륨(473 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용액을 감압하에 농축하여 테트라하이드로푸란 및 메탄올을 제거하였다. 3 N 수성 염산을 pH 2가 되도록 적가하였다. 생성된 슬러리를 여과하고, 고체를 물(300 mL, 이어서 100 mL)로 세척하였다. 고체를 먼저 톨루엔으로 물을 공비제거한 후, 헵탄(7 x 100 mL)으로 공비제거하여 건조한 후, 감압하에 70 ℃로 가열하여 (+/-)-4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤조산(중간체 5)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 8.09(s, 1 H), 8.02(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.84(d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.72(d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.66-7.58(m, 3 H), 7.40(t, J = 7.6 Hz, 1 H), 5.56(dd, J = 6.0, 8.6 Hz, 1 H), 2.49(s, 3 H), 2.24-2.10(m, 1 H), 2.08-1.95(m, 1 H), 1.66-1.52(m, 1 H), 1.52-1.39(m, 1 H), 1.03(t, J = 7.4 Hz, 3 H).

중간체 6: 메틸 (+)-3-(4-(1-((3- 메틸퀴놀린 -2-일)아미노)부틸) 벤즈아미도 ) 프로판오에이트 및 중간체 7: 메틸 (-)-3-(4-(1-((3- 메틸퀴놀린 -2-일)아미노)부틸)벤 즈아미도 ) 프로판오에이트

중간체 5(31.64 g, 94.61 mmol), β-알라닌 에틸 에스터 하이드로클로라이드(45.9 g, 284 mmol) 및 1-하이드록시벤조트라이아졸 하이드레이트(80%, 20 중량% 물, 47.9 g, 284 mmol)를 다이클로로메탄(946 mL) 중에서 현탁하였다. 트라이에틸아민(119 mL, 852 mmol)을 첨가한 후 N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(46.0 g, 237 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 10 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(3 x 900 mL)로 세척한 후, 포화 수성 NaCl(300 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액을 감압하에 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제한 후 키랄 SFC(키랄팩 AD-H 컬럼, 30 x 250, 20% 메탄올/이산화탄소 용리액, 0.2% 이소프로필아민 개질제)로 정제하여 메틸(+)-3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판오에이트(중간체 6, 분석적인 키랄 SFC 4.6 분 체류) 및 메틸(-)-3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판오에이트(중간체 7, 분석적인 키랄 SFC 6.5 분 체류)를 수득하였다(주: 반응 및/또는 정제 순서 동안 에틸 에스터를 메틸 에스터로 전환하였다). ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.71(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.64-7.58(m, 2 H), 7.55-7.48(m, 3 H), 7.44(t, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.16(t, J = 7.4 Hz, 1 H), 6.76(t, J = 5.5 Hz, 1 H), 5.48(q, J = 7.2 Hz, 1 H), 4.78(d, J = 7.0 Hz, 1 H), 3.76(q, J = 6.0 Hz, 2 H), 3.70(s, 3 H), 2.64(t, J = 5.9 Hz, 2 H), 2.29(s, 3 H), 2.04-1.82(m, 2 H), 1.52-1.29(m, 2 H), 0.98(t, J = 7.3 Hz, 3 H).

중간체 8: (+/-)-4-(1-하이드록시-3-메틸-부틸)-벤조산 에틸 에스터

-40 ℃에서 테트라하이드로푸란 중 에틸 4-요오드벤조에이트(140 g, 507 mmol)의 용액에 내부 온도를 -30 ℃ 미만으로 유지하는 속도로 이소프로필마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드 착체 용액(테트라하이드로푸란 중 1.0 M, 429 mL, 558 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 이 지점에서 30 분 동안 교반하고, 온도를 -35 ℃ 미만으로 유지하면서 이소부티르알데하이드(61 g, 710 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 이 온도에서 15 분 동안 교반한 후 천천히 실온으로 가온하였다. 반응 생성물을 1 N HCl(3 L)로 급랭하고 혼합물을 에틸 아세테이트(2 L x 2)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수(1 L) 및 물(1 L)로 세척한 후, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 상기 유기물을 진공에서 농축하여 오일로서 (+/-)-4-(1-하이드록시-3-메틸-부틸)-벤조산 에틸 에스터(120 g, 100%)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.95(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.47(s, J = 7.2 Hz, 2 H), 4.76-4.73(m, 1 H), 4.33-4.28(m, 2 H), 1.71-1.60(m, 2 H), 1.46-1.41(m, 1 H), 1.39-1.31(m, 3 H), 0.92-0.87(m, 6 H).

중간체 9: (+/-)-4-(1-하이드록시-3-메틸-부틸)-벤조산

테트라하이드로푸란(63.5 mL) 중 중간체 8(15 g, 63 mmol)의 용액에 2 N NaOH(63.5 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 1 N HCl를 사용하여 pH 4까지 산성화한 후 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하여 황색 고체로서 (+/-)-4-(1-하이드록시-3-메틸-부틸)-벤조산(11 g, 83%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 8.06(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.51(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 4.81(q, J = 8.4 Hz, 5.2Hz, 1 H), 1.81-1.71(m, 2 H), 1.55-1.51(m, 1 H), 1.03(q, J = 6.4 Hz, 2.4 Hz, 6 H).

중간체 10: (+/-)-3-[4-(1-하이드록시-3-메틸-부틸)-벤조일 아미노 ]-프로피온산 t-부틸 에스터

실온에서 DMF(120 mL) 중 중간체 9(9.5 g, 46 mmol)의 용액에 HATU(34.7 g, 91.2 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20 분 동안 교반하고, 0 ℃에서 β-알라닌 t-부틸 에스터(13.2 g, 91.2 mmol) 및 다이이소프로필에틸아민(35.4 g, 274 mmol)을 반응 혼합물에 천천히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반한 후 에틸 아세테이트(50 mL) 및 염수(100 mL)를 첨가하였다. 분리된 수층을 에틸 아세테이트(4 x 50 mL)로 추출하고 합한 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하여 갈색 오일로서 조질 화합물(40 g)을 수득하였다. 상기 화합물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르)로 정제하여 황색 고체로서 (+/-)-3-[4-(1-하이드록시-3-메틸-부틸)-벤조일아미노]-프로피온산 t-부틸 에스터(14 g, 90%)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 7.84( d, J = 8.4 Hz, 2 H ), 7.50(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 4.80(dd, J = 8.4 Hz, 5.6 Hz, 1 H), 3.67(t, J = 7.2Hz, 2 H), 2.64(t, J = 5.6Hz, 2 H), 1.78-1.72(m, 2 H), 1.55-1.52(m, 1 H), 1.50(s, 9 H), 1.02(d, J = 6.4 Hz, 6 H).

중간체 11: (+/-)-3-{4-[1-(1,3- 다이옥소 -1,3- 다이하이드로 - 이소인돌 -2-일)-3-메틸-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산 t-부틸 에스터

테트라하이드로푸란 중 중간체 10(14 g, 42 mmol), 프탈이미드(12.3 g, 83.5 mmol) 및 PPh₃(21.9 g, 83.5 mmol)의 용액에 0 ℃에서 다이이소프로필 아조다이카복실레이트(16.9 g, 83.5 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후 물(60 mL) 및 에틸 아세테이트(50 mL)를 첨가하였다. 수층을 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고 합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여 황색 오일로서 조질 (+/-)-3-{4-[1-(1,3-다이옥소-1,3-다이하이드로-이소인돌-2-일)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산 t-부틸 에스터(26 g)를 수득하였다. 조질 화합물을 다음 단계에서 직접 사용하였다.

중간체 12: (+/-)-3-[4-(1-아미노-3-메틸-부틸)-벤조일아미노]-프로피온산 t-부틸 에스터

에탄올(100 mL) 중 조질 중간체 11(26 g, 26 mmol)의 용액에 하이드라진 하이드레이트(30 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 가열하고 밤새 교반하였다. 냉각한 후, 물(100 mL) 및 에틸 아세테이트(50 mL)를 첨가하고, 층을 분리하고, 수층을 에틸 아세테이트(3 x 75 mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여 황색 오일로서 조질 화합물(20 g)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)로 정제하여 황색 고체로서 (+/-)-3-[4-(1-아미노-3-메틸-부틸)-벤조일아미노]-프로피온산 t-부틸 에스터(6.8 g, 79%)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.72(d, J = 8.0 Hz, 2 H), 7.38(d, J = 8.0 Hz, 2 H), 6.87(s, 1 H), 4.01(t, J = 6.8 Hz, 1 H), 3.69(t, J = 6.0 Hz, 2 H), 2.55(t, J = 6.0 Hz, 2 H), 2.05-1.81(m, 2 H), 1.59-1.48(m, 3 H), 1.46(s, 9 H), 0.94-0.89(m, 6 H); MS(M+23): 357.3.

중간체 13: (E)- 메틸 3-(2-아미노-4-( 트라이플루오로메틸 ) 페닐 ) 아크릴레이트

자석 교반기가 장착된 100 mL 3목 플라스크를 2-브로모-5-(트라이플루오로메틸)아닐린(500 mg, 2.08 mmol), 메틸 아크릴레이트(538 mg, 6.25 mmol), Pd(OAc)₂(23.3 mg, 0.104 mmol), P(o-톨릴)₃(64 mg, 0.21mmol), 트라이에틸아민(422 mg, 4.7 mmol) 및 아세토니트릴(20 mL)로 충전하였다. 플라스크를 N₂로 퍼징하고 90 ℃로 밤새 가열하였다. 포화 수성 NH₄Cl(40 mL)을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 연녹색 고체로서 (E)-메틸 3-(2-아미노-4-(트라이플루오로메틸)페닐)아크릴레이트(180.9 mg, 37%)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.71(d, J = 16 Hz, 1H), δ 7.38(d, J = 8 Hz, 1H), δ 6.92(d, J = 8 Hz, 1H), δ 6.86(s, 1H), δ 6.34(d, J = 8 Hz, 1H), δ 4.05(s, 2H), δ 3.73(s, 3H).

중간체 14: 7-( 트라이플루오로메틸 )퀴놀린-2-올

자석 교반기가 장착된 100 mL 플라스크를 중간체 13(600 mg, 2.44 mmol), 농축 수성 HCl(893 mg), THF(6 mL) 및 물(6 mL)로 충전하였다. 혼합물을 밤새 환류 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 건조 증발시켰다. 조질 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 녹색 고체로서 7-(트라이플루오로메틸)퀴놀린-2-올(440 mg, 84.3%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.56(s, 1H), 7.99(d, J = 15.6 Hz, 1 H), 7.81(d, J = 8 Hz, 1H), 7.20(s, 1H), 6.97(d, J = 8 Hz, 1H), 6.59(d, J = 15.6 Hz, 1H).

중간체 15: 2- 클로로 -7-(트라이플 루오로메틸 )퀴놀린

자석 교반기가 장착된 50 mL 환저 플라스크를 중간체 14(100 mg, 0.47 mmol) 및 POCl₃(5 mL)으로 충전하였다. 혼합물을 3 시간 동안 환류 가열하였다. POCl₃을감압하에 제거하고 포화 수성 NaHCO₃(20 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 2-클로로-7-(트라이플루오로메틸)퀴놀린(27.7 mg, 25.4%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, MeOD) δ 8.35(d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.16(s, 1H), δ 8.08(d, J = 8.4 Hz, 1H), δ 7.75(d, J = 8.4 Hz, 1H), δ 7.57(d, J = 8.8 Hz, 1H).

중간체 16: (E)-메틸 3-(2-아미노-5-(트라이플 루오로메틸 )페닐)아크릴레이트

자석 교반기가 장착된 100 mL 3목 플라스크를 2-브로모-4-(트라이플루오로메틸)아닐린(500 mg, 2.08 mmol), 메틸 아크릴레이트(538 mg, 6.25 mmol), Pd(OAc)₂(23.3 mg, 0.104 mmol), P(o-톨릴)₃(64 mg, 0.21mmol), 트라이에틸아민(422 mg, 4.7 mmol) 및 아세토니트릴(20 mL)로 충전하였다. 플라스크를 N₂로 퍼징하고 90 ℃로 밤새 가열하였다. 포화 수성 NH₄Cl(40 mL)을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 건조 농축하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 (E)-메틸 3-(2-아미노-5-(트라이플루오로메틸)페닐)아크릴레이트(185.9 mg, 36.5%)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.69(d, J = 16 Hz, 1H), 7.53(s, 1H), 7.32(d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.67(d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.34(d, J = 16 Hz, 1H), 4.20(s, 2H), 3.74(s, 3H).

중간체 17: 2- 클로로 -6-( 트라이플루오로메틸 )퀴놀린

자석 교반기가 장착된 100 mL 플라스크를 중간체 16(740 mg, 3.02 mmol), 농축 수성 HCl(3.1 mL), THF(7 mL) 및 물(7 mL)로 충전하였다. 혼합물을 밤새 환류 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 증발시켜 황색 고체(560 mg)를 수득하였다. 조질 잔사를 POCl₃(20 mL) 중에서 용해하였다. 혼합물을 3 시간 동안 환류 가열하였다. POCl₃을 감압하에 제거하고 포화 수성 NaHCO₃(40 mL)을 첨가하였다. 용액을 에틸 아세테이트(3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 건조 농축하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 무색 고체로서 2-클로로-6-(트라이플루오로메틸)퀴놀린(438 mg, 63%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.14(d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.08-8.06(m, 2H), 7.85-7.90(m, 1H), 7.44(d, J = 8.4 Hz, 1H).

중간체 18: 3-아미노-2- 메틸퀴놀린

농축 HCl(8 mL) 중 2-메틸-3-니트로퀴놀린(400 mg, 2.13 mmol)의 용액을 50 ℃로 가열하였다. 주석(II) 클로라이드 다이하이드레이트(1.2 g, 5.3 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 50 ℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물(20 mL)로 희석하였다. pH를 수성 5 N NaOH를 첨가하여 9로 조정하였다. 혼합물을 4 ℃로 냉각하고 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 추출물을 빙냉수(40 mL)로 세척하고 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 황색 고체로서 3-아미노-2-메틸퀴놀린(270 mg, 80%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.84(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51(dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 1H), 7.39-7.30(m, 2H), 7.16(s, 1H), 3.77(s, 2H), 2.56(s, 3H).

중간체 19: 에틸 4-(3- 메틸 -1-( 메틸설폰일옥시 )부틸) 벤조에이트

무수 다이클로로메탄(20 mL) 중 중간체 8(350 mg, 1.48 mmol)의 0 ℃ 용액에 트라이에틸아민(449.4 mg, 16.7 mmol)을 첨가한 후, 메탄설폰일 클로라이드(186.8 mg, 1.63 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃에서 1 시간 동안 교반하고 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(10 mL)로 급랭하고 에틸 아세테이트(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하여 일부 트라이에틸암모늄 하이드로클로라이드를 함유하는 오일로서 에틸 4-(3-메틸-1-(메틸설폰일옥시)부틸)벤조에이트(180 mg, 39%)를 수득하였다. 이 물질을 추가 정제 없이 사용하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.01(d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.40(d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.56(m, 1H), 4.32(q, J = 7.2Hz, 2H), 2.01-1.92(m, 1H), 1.69-1.51(m, 2H), 1.31-1.40(m, 3H, 트라이에틸암모늄 하이드로클로라이드 피크와 중첩), 0.89-0.95(m, 6H).

중간체 20: 3-아미노-4-메틸퀴놀린

농축 HCl(10 mL) 중 4-메틸-3-니트로퀴놀린(500 mg, 2.66 mmol)의 용액을 50 ℃로 가열하였다. 주석(II) 클로라이드 다이하이드레이트(1.5 g, 6.6 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 50 ℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물(20 mL)로 희석하였다. 혼합물의 pH를 5 N 수성 수산화 나트륨을 첨가하여 9로 조정하였다. 혼합물을 4 ℃로 냉각하고 에틸 아세테이트(30 mL x 2)로 추출하였다. 합한 추출물을 빙냉수(40 mL)로 세척하고 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 황색 고체로서 3-아미노-4-메틸퀴놀린(340 mg, 80%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.42(s, 1H), 7.89-7.91(m, 1H), 7.79-7.82(m, 1H), 7.44-7.38(m, 2H), 3.77(br. s., 2H), 2.37(s, 3H).

중간체 21: 에틸 4-(3-메틸-1-(4-메틸퀴놀린-3- 일아미노 )부틸) 벤조에이트

아세토니트릴(10 mL) 중 중간체 20(200 mg, 1.26 mmol), 중간체 19(476 mg) 및 칼륨 카보네이트(349 mg, 2.53 mmol)의 혼합물을 80 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 염수(20 mL) 내에 붓고 에틸 아세테이트(30 mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(30 mL x 2) 및 물(30 mL)로 세척한 후, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 에틸 4-(3-메틸-1-(4-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸) 벤조에이트(40 mg, 10%)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.23(s, 1H), 7.91(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.86(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.80(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.42-7.33(m, 4H), 4.62-4.65(m, 1H), 4.27(q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.44(s, 3H), 1.78-1.70(m, 1H), 1.68-1.64(m, 2H), 1.17(q, J = 7.2 Hz, 3H), 0.97(d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.90(d, J = 6.4 Hz, 3H).

중간체 22: 3,3- 다이메틸사이클로부탄카본일 클로라이드

3,3-다이메틸-사이클로부탄카복실산(파크웨이 사이언티픽(Parkway Scientific), 미국 뉴욕주 뉴욕 소재)(500 mg, 3.90 mmol)을 다이클로로메탄(3 mL) 중에서 용해하고 옥살릴 클로라이드(1.02 mL, 11.7 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 4 시간 동안 교반한 후 진공에서 농축하여 3,3-다이메틸사이클로부탄카본일 클로라이드를 수득하였고, 이는 정제 없이 수행되었다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 3.49(quin, J = 8.9 Hz, 1 H) 2.15-2.27(m, 2 H) 2.06-2.14(m, 2 H) 1.18(s, 3 H) 1.12(s, 3 H).

중간체 23: 4-(3,3-다이메 틸 -사이클로부탄카본일)-벤조산 에틸 에스터

에틸 4-요오드벤조에이트(600 mg, 2.17 mmol)를 테트라하이드로푸란(6.0 mL) 중에서 용해하고 -40 ℃가 되게 하였다. 이소프로필마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드 착체 용액(테트라하이드로푸란 중 1.0 M, 0.365 mL, 2.17 mmol)을 적가하고 황적색 용액을 -40 ℃에서 40 분 동안 교반하였다. CuI(124 mg, 0.65 mmol)를 한번에 첨가한 후 혼합물을 -15 ℃에서 20 분 동안 교반하여 모든 고체를 용해하였다. 이어서, 황색 용액을 다시 -40 ℃가 되게 하고 3,3-다이메틸사이클로부탄카본일 클로라이드(중간체 22)(450 mg, 3.07 mmol)를 적가하였다 . 색상은 약간 녹색에서 황색으로 변한 후 적색으로 변한 후 황색으로 변하였다. 혼합물을 0 ℃로 2 시간에 걸쳐서 동일한 욕에서 가온하였다. 혼합물을 1 N HCl로 희석하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질 물질을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 부분적으로 정제하여 불순한 4-(3,3-다이메틸-사이클로부탄카본일)-벤조산 에틸 에스터(588 mg)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.11(d, J = 8.4 Hz, 2 H) 7.94(d, J = 8.4 Hz, 2 H) 4.38-4.48(m, 2 H) 3.90(quin, J = 8.8 Hz, 1 H) 2.16-2.29(m, 2 H) 2.04-2.13(m, 2 H) 1.42(t, J = 7.2 Hz, 3 H) 1.28(s, 3 H) 1.09(s, 3 H); MS(M+1): 261.4.

중간체 24: (+/-)-4-[아미노-(3,3-다이메 틸 -사이클로 부틸 )-메틸]-벤조산 에틸 에스터

4-(3,3-다이메틸-사이클로부탄카본일)-벤조산 에틸 에스터(중간체 23)(235 mg, 0.903 mmol)를 메탄올(5 mL) 중에서 용해하였다. 암모늄 아세테이트(710 mg, 9.03 mmol)를 첨가한 후 나트륨 시아노보로하이드라이드(89.6 mg, 1.36 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 60 ℃로 17 시간 동안 가열한 후 냉각하고 1 N HCl(3 mL)을 첨가하였다. 이를 15 분 동안 교반한 후 1 N NaOH(10 mL)를 첨가하였다. 물질을 2 분량의 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(메탄올/에틸 아세테이트)로 정제하여 담황색 오일로서 (+/-)-4-[아미노-(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-메틸]-벤조산 에틸 에스터(137 mg)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.99(d, J = 8.4 Hz, 2 H) 7.37(d, J = 8.2 Hz, 2 H) 4.38(q, J = 7.0 Hz, 2 H) 3.82(d, J = 9.2 Hz, 1 H) 2.39(sxt, J = 8.7 Hz, 1 H) 1.90-2.02(m, 1 H) 1.60-1.70(m, 1 H) 1.46-1.57(m, 2 H) 1.40(t, J = 7.1 Hz, 3 H) 1.11(s, 3 H) 1.06(s, 3 H); GCMS(M): 261.

중간체 25: (+/-)-4-[(3,3-다이메 틸 -사이클로 부틸 )-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산 에틸 에스터

(+/-)-4-[아미노-(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-메틸]-벤조산 에틸 에스터(중간체 24)(45 mg, 0.17 mmol)를 3-메틸퀴놀린-N-옥사이드(27.4 mg, 0.172 mmol, 알파 아에사(Alfa Aesar), 미국 메사추세츠주 왈드 힐 소재) 및 다이클로로메탄(2 mL)과 합하였다. 다이이소프로필에틸아민(0.112 mL, 0.645 mmol)을 첨가한 후 브로모트라이피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(109 mg, 0.224 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 28 시간 동안 교반한 후 에틸 아세테이트와 수성 포화 NaHCO₃ 사이에 배분하였다. 분리된 수층을 추가 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 투명한 오일로서 (+/-)-4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산 에틸 에스터(44.0 mg)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.96(d, J = 8.4 Hz, 2 H) 7.56-7.62(m, 2 H) 7.46-7.53(m, 3 H) 7.38-7.46(m, 1 H) 7.12-7.20(m, 1 H) 5.33(dd, J = 9.5, 6.7 Hz, 1 H) 4.77(d, J = 6.6 Hz, 1 H) 4.34(q, J = 7.2 Hz, 2 H) 2.67(sxt, J = 8.8 Hz, 1 H) 2.30(s, 3 H) 1.97(ddd, J = 11.1, 8.1, 3.2 Hz, 1 H) 1.74-1.85(m, 1 H) 1.66-1.73(m, 2 H) 1.36(t, J = 7.1 Hz, 3 H) 1.16(s, 3 H) 1.10(s, 3 H); MS(M+1): 403.3.

중간체 26: (+/-)-4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )- 메틸 ]-벤조산

(+/-)-4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산 에틸 에스터(중간체 25)(43 mg, 0.11 mmol)를 테트라하이드로푸란(3 mL) 및 메탄올(1 mL) 중에서 용해하고, 1.0 M NaOH(2 mL)를 첨가하였다. 이를 현탁액으로서 처음에 50 ℃에서, 이어서 투명한 용액으로서 4 시간 동안 교반한 후 실온으로 냉각하였다. 용액의 pH가 5가 될 때까지 1 N HCl을 첨가하였다. 이를 에틸 아세테이트로 2회 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 용액을 진공에서 농축하여 백색 고체로서 (+/-)-4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산(37.7 mg)을 수득하였다. MS(M+1): 375.1.

중간체 27: (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메 틸 -사이클로 부틸 )-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산 에틸 에스터

(+/-)-4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산(중간체 26)(37 mg, 0.099 mmol)을 1-하이드로벤조트라이아졸 하이드레이트(23.0 mg, 0.149 mmol), N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(29.0 mg, 0.149 mmol) 및 β-알라닌 에틸 에스터 하이드로클로라이드(18.0 mg, 0.119 mmol)과 합하였다. 무수 다이클로로메탄(5 mL)을 첨가한 후 트라이에틸아민(0.027 mL, 0.198 mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 3 일 동안 교반한 후 에틸 아세테이트와 수성 포화 암모늄 클로라이드 사이에 배분하였다. 분리된 수층을 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 투명한 오일로서 (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 에틸 에스터(37.9 mg)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.68(d, J = 8.2 Hz, 2 H) 7.59(t, J = 3.9 Hz, 2 H) 7.46-7.52(m, 3 H) 7.37-7.45(m, 1 H) 7.11-7.19(m, 1 H) 6.75(t, J = 5.8 Hz, 1 H) 5.32(dd, J = 9.7, 6.7 Hz, 1 H) 4.75(d, J = 6.6 Hz, 1 H) 4.10-4.21(m, 2 H) 3.70(q, J = 6.0 Hz, 2 H) 2.55-2.74(m, 3 H) 2.29(s, 3 H) 1.96(ddd, J = 11.1, 8.2, 2.9 Hz, 1 H) 1.75-1.84(m, 1 H) 1.64-1.73(m, 2 H) 1.26(m, 3 H) 1.16(s, 3 H) 1.09(s, 3 H); MS(M+1): 474.7.

중간체 28: 6-플루오로-3-메틸-퀴놀린

(4-플루오로-페닐)-카밤산 t-부틸 에스터(2.11 g, 10.0 mmol, ABCR(독일 카를스루에 소재))를 환저 플라스크에 첨가하고 질소로 퍼징하였다. 무수 테트라하이드로푸란(200 mL)을 첨가하여 고체를 용해하고 플라스크를 건조 빙/아세톤 욕(내부 온도가 -74 ℃로 교정되지 않음)에 방치하였다. t-부틸 리튬(펜탄 중 1.7 M, 14.2 mL, 24.0 mmol)을 황색으로 발전하도록 5 분간에 걸쳐서 첨가하였다. 첨가가 완료된 후 반응 생성물을 -20 ℃ 욕에서 1 시간 동안 교반하였다. 이 시점에서, 온도를 -19 ℃ 미만으로 유지하면서 3-에톡시메타크롤레인(1.43 mL, 12.0 mmol)을 5 분간에 걸쳐서 적가하였다. 반응 생성물을 -20 ℃에서 2 시간 동안 교반한 후 트라이플루오로아세트산(14 mL)을 5 분간에 걸쳐서 천천히 첨가하였다. 적색 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반한 후 1 N NaOH를 사용하여 pH 12가 되게 하였다. 상기 용액을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 불순한 목적 물질을 수득하였다. 이를 3 분량의 1 N HCl로 추출하고, 합한 수층의 pH를 6 N NaOH를 사용하여 12가 되게한 후, 2 분량의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고 진공에서 농축하여 주황색 오일로서 6-플루오로-3-메틸-퀴놀린(48.0 mg)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.74(s, 1 H) 8.07(dd, J = 9.1, 5.4 Hz, 1 H) 7.88(s, 1 H) 7.33-7.46(m, 2 H) 2.53(s, 3 H); MS(M+1): 162.1.

중간체 29: 6-플루오로-3-메틸-퀴놀린 1-옥사이드

6-플루오로-3-메틸-퀴놀린(중간체 28)(48.0 mg, 0.298 mmol)을 아세트산(1 mL) 중에서 용해하고 30% 수성 H₂O₂(0.040 mL, 0.396 mmol)를 첨가하였다. 이를 80 ℃에서 16 시간 동안 교반한 후 냉각하였다. Na₂SO₃의 10% 수용액을 몇 mL 첨가한 후 나트륨 요오다이드의 스파툴라 팁(spatula tip)을 첨가하였다. 이를 10 분 동안 교반한 후 에틸 아세테이트와 포화 NaHCO₃ 사이에 배분하였다. 분리된 수층을 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(메탄올/에틸 아세테이트)로 정제하여 백색 고체로서 6-플루오로-3-메틸-퀴놀린 1-옥사이드(29.4 mg)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.72(dd, J = 9.4, 5.3 Hz, 1 H) 8.38(s, 1 H) 7.36-7.50(m, 3 H) 2.46(s, 3 H); MS(M+1): 178.1.

중간체 30: 3-브로모-7-플루오로-퀴놀린

6-플루오로인돌(500 mg, 3.70 mmol)을 벤질트라이에틸암모늄 클로라이드(44.4 mg, 0.185 mmol)와 합하고 톨루엔(0.32 mL)을 첨가하였다. 브로모포름(0.342 mL, 3.70 mmol)을 첨가하고 온도를 40℃가 되게 하였다. 이어서, 물(2.22 mL) 중 NaOH(1.110 g, 7.50 mmol)의 용액을 15 분간에 걸쳐서 첨가하였다. 이는 매우 어두운 색을 형성하는 원인이 되었다. 반응 생성물을 이상 혼합물로서 40℃에서 16 시간 동안 교반한 후 냉각하고 에틸 아세테이트와 물 사이에 배분하였다. 분리된 수층을 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 백색 고체로서 3-브로모-7-플루오로-퀴놀린(171.9 mg)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.93(d, J = 2.1 Hz, 1 H) 8.33(d, J = 2.0 Hz, 1 H) 7.68-7.82(m, 2 H) 7.39(td, J = 8.6, 2.5 Hz, 1 H); MS(M+1): 226.0.

중간체 31: 7-플루오로-3-메틸-퀴놀린

3-브로모-7-플루오로-퀴놀린(중간체 30)(100 mg, 0.442 mmol)을 K₂CO₃(153 mg, 1.10 mmol), 무수 1,4-다이옥산(3 mL) 및 트라이메틸보록신(0.092 mL, 0.663 mmol)과 합하였다. 질소를 발포하여 탈기하고 반응 생성물 및 Pd(PPh₃)₄(50.9 mg, 0.044 mmol)를 첨가하였다. 이를 다시 탈기한 후 90℃로 5 시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 냉각하고 에틸 아세테이트와 포화 수성 NaHCO₃ 사이에 배분하였다. 분리된 수층을 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 황색 고체로서 7-플루오로-3-메틸-퀴놀린(52.7 mg)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.78(d, J = 1.8 Hz, 1 H) 7.93(s, 1 H) 7.65-7.79(m, 2 H) 7.32(td, J = 8.6, 2.5 Hz, 1 H) 2.52(s, 3 H); MS(M+1): 162.1.

중간체 32: 에틸 4-(3,3-다이메 틸사이클로부탄카본일 )벤조에이트

-30 ℃(열전대로 모니터링함)에서 무수 테트라하이드로푸란(148 mL) 중 에틸 4-요오드벤조에이트(25.0 g, 89.0 mmol)를 함유하는 3목 플라스크내에 이소프로필마그네슘 클로라이드(51.0 mL, 20.4 mmol)를 30 분간에 걸쳐서 적가한 후 동일한 온도에서 추가 105 분 동안 교반하였다. 이어서, 구리 요오다이드(5.07 g, 26.6 mmol)를 한번에 빠르게 첨가하였다. 혼합물을 25 분 동안 -20 ℃가 되게 하여 반드시 고체가 용해되게 하였다. 이어서, 반응 생성물을 다시 -40 ℃가 되게 하였다. 이어서, 3,3-다이메틸사이클로부탄카본일 클로라이드(15.6 g, 106 mmol)를 5 분간에 걸쳐서 첨가한 후, 반응 생성물을 0 ℃로 4 시간에 걸쳐서 가온하였다. 이어서, 혼합물을 1 N HCl로 희석하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 이어서, 합한 유기층을 염수로 2회 세척한 후 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 갈색 오일(26.6 g)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 5% 에틸 아세테이트)로 2회 정제하여 오일로서 에틸 4-(3,3-다이메틸사이클로부탄카본일)벤조에이트(17.2 g, 74% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.11(d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.93(d, J = 8.2 Hz, 2H), 4.40(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.89(quin, J = 8.8 Hz, 1H), 2.27-2.14(m, 2H), 2.12-2.02(m, 2H), 1.41(t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.27(s, 3H), 1.08(s, 3H). MS(M+1): 261.2.

중간체 33: 4-(3,3- 다이메틸사이클로부탄카본일 )벤조산

에틸 4-(3,3-다이메틸사이클로부탄카본일)벤조에이트(3.00 g, 12.0 mmol)를 함유하는 플라스크에 무수 테트라하이드로푸란(28.8 mL), 메탄올(28.8 mL) 및 1 N 수산화 나트륨(28.8 mL, 28.8 mmol)을 첨가하였다. 1 시간 후, 반응 생성물을 백색 고체로 농축하였다. 고체를 물(700 mL) 중에서 재용해하였다. 격렬하게 교반하면서, 1 N HCl(29.0 mL)을 적가하고 현탁액을 30 분 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 고체를 부흐너(Buchner) 깔때기로 수집하고 고체를 물로 2회 세척하였다. 이어서, 고체를 톨루엔으로 공비혼합하여 백색 고체로서 4-(3,3-다이메틸사이클로부탄카본일)벤조산(2.15 g, 92% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.21-8.15(m, 2H), 8.01-7.94(m, 2H), 3.91(quin, J = 8.9 Hz, 1H), 2.28-2.17(m, 2H), 2.15-2.04(m, 2H), 1.28(s, 3H), 1.09(s, 3H). MS(M-1): 231.4.

중간체 34: t-부틸 4-(3,3- 다이메틸사이클로부탄카본일 ) 벤조에이트

무수 메틸렌 클로라이드(20.3 mL) 중 4-(3,3-다이메틸사이클로부탄카본일)벤조산(1.89 g, 8.14 mmol)을 함유하는 플라스크에 2-t-부틸-1,3-다이이소프로필우레아(6.28 g, 31.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 24 시간 동안 환류하였다. 이어서, 반응 생성물을 메틸렌 클로라이드로 희석하고 포화 나트륨 바이카보네이트의 용액으로 급랭하였다. 수층을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 오일(3.09 g)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 10% 에틸 아세테이트)로 정제하여 백색 고체로서 t-부틸 4-(3,3-다이메틸사이클로부탄카본일)벤조에이트(1.33 g, 57% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.08-8.02(m, 2H), 7.94-7.88(m, 2H), 3.89(quin, J = 8.8 Hz, 1H), 2.24-2.16(m, 2H), 2.11-2.02(m, 2H), 1.62-1.59(m, 9H), 1.27(s, 3H), 1.08(s, 3H). MS(M+1): 289.3.

중간체 35: t-부틸 4-(아미노(3,3-다이메 틸사이클로부틸 )메틸)벤조에이트

무수 메탄올(25.3 mL) 중 t-부틸 4-(3,3-다이메틸사이클로부탄카본일)벤조에이트(1.46 g, 5.06 mmol) 및 암모늄 아세테이트(3.98 g, 50.6 mmol)의 용액에 나트륨 시아노보로하이드라이드(502 mg, 7.60 mmol)를 첨가하였다. 반응 생성물을 60 ℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 생성물을 실온으로 냉각하고 1 N 염산(18.6 mL)을 적가하였다. 투명한 무색 용액은 회백색이 되었다. 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 잔여 메탄올을 제거하고 1 N 수산화 나트륨(32.0 mL)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 오일(1.62 g)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헵탄 중 30 내지 100% 에틸 아세테이트)로 정제하여 오일로서 t-부틸 4-(아미노(3,3-다이메틸사이클로부틸)메틸)벤조에이트(860 mg, 59% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 7.92(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.34(d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.80(d, J = 9.2 Hz, 1H), 2.45-2.30(m, 1H), 2.01-1.88(m, 1H), 1.68-1.60(m, 2H), 1.60-1.56(m, 10H), 1.48(d, J = 9.0 Hz, 2H), 1.10(s, 3H), 1.05(s, 3H). MS(M+1): 290.2.

중간체 36: 3-브로모-6-플루오로퀴놀린

40 ℃에서 톨루엔(3.00 mL) 및 브로모포름(3.00 mL) 중 5-플루오로인돌(2.00 g, 14.8 mmol) 및 벤질트라이에틸암모늄 클로라이드(168.5 mg, 0.740 mmol)의 용액에 물(12.0 mL) 중 수산화 나트륨(4.44 g, 111 mmol)의 용액을 적가 방식으로 첨가하였다. 이어서, 반응 생성물을 40 ℃에서 48 시간 동안 교반하였다. 냉각한 후, 용매를 증발시키고 잔사를 메틸 t-부틸 에테르(100 mL) 및 물(100 mL)로 희석하였다. 수층을 메틸 t-부틸 에테르로 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 감압하에 농축하여 조질 물질(2.00 g)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(석유 에테르 중 0 내지 2% 에틸 아세테이트)로 정제하여 백색 고체로서 3-브로모-6-플루오로퀴놀린(503 mg, 15% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD, δ): 8.87(d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.27(d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.08(dd, J = 9.2, 5.6 Hz, 1H), 7.52-7.41(m, 1H), 7.35(dd, J = 8.8, 2.8 Hz, 1H). (M+1): 225.6.

중간체 37: t-부틸 4-((3,3- 다이메틸사이클로부틸 )(7- 플루오로퀴놀린 -3- 일아미노 ) 메틸 ) 벤조에이트

클로로(2-다이사이클로헥실포스피노-3,6-다이메톡시-2',4',6'-트라이이소프로필-1,1'-바이페닐)[2-(2-아미노에틸)페닐]팔라듐(II)(11.2 mg, 0.0140 mmol) 및 3-브로모-7-플루오로퀴놀린(65.6 mg, 0.290 mmol)(중간체 30)을 함유하는 용액에 무수 테트라하이드로푸란(1.00 mL) 및 무수 테트라하이드로푸란(0.380 mL) 중 t-부틸 4-(아미노(3,3-다이메틸사이클로부틸)메틸)벤조에이트(80.0 mg, 0.280 mmol)의 용액을 첨가하였다. 리튬 헥사메틸다이실라지드(0.690 mL, 0.690 mmol, THF 중 1 M)를 적가하였다. 투명한 연황색 용액이 녹색, 황색이 된 후 갈색이 되었다. 반응 생성물을 65 ℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 생성물을 실온으로 냉각하고 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 갈색 오일(138 mg)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 30% 에틸 아세테이트)로 정제하여 갈색 오일로서 t-부틸 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸) 벤조에이트(12.0 mg, 10% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.55-8.48(m, 1H), 7.97-7.90(m, 2H), 7.59-7.52(m, 1H), 7.42(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.40-7.33(m, 1H), 7.14(td, J = 8.7, 2.7 Hz, 1H), 6.71(d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.24(dd, J = 9.1, 4.2 Hz, 1H), 2.53(q, J = 8.8 Hz, 1H), 2.08-1.98(m, 1H), 1.72(t, J = 9.7 Hz, 2H), 1.67-1.59(m, 1H), 1.57(s, 9H), 1.13(s, 3H), 1.09(s, 3H). MS(M+1): 435.3.

중간체 38: 4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(7-플루오로 퀴놀린 -3-일아미노)메틸) 벤조산

t-부틸 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤조에이트(12.0 mg, 0.0280 mmol)를 함유하는 바이알에 메틸렌 클로라이드(0.140 mL) 및 트라이플루오로아세트산(0.140 mL, 0.0280 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고 톨루엔으로 공비혼합하여 오일로서 조질 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤조산(11 mg, 99% 수율)을 수득하였다. (M+1): 379.2.

중간체 39: 에틸 3-(4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(7-플루오로 퀴놀린 -3-일아미노) 메틸 ) 벤즈아미도 ) 프로판오에이트

4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤조산(11.0 mg, 0.0290 mmol)을 함유하는 바이알에 3-아미노프로피온산 에틸 에스터 하이드로클로라이드(4.90 mg, 0.0320 mmol), 1-하이드록시-7-아자벤조트라이아졸(4.80 mg, 0.0350 mmol) 및 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노 프로필)카보다이이미드 하이드로클로라이드(6.70 mg, 0.0350 mmol)을 첨가하였다. 무수 메틸렌 클로라이드(0.290 mL)를 첨가한 후 트라이에틸아민(0.005 mL, 0.0380 mmol)을 첨가하였다. 2 시간 후, 반응 생성물을 메틸렌 클로라이드로 희석하고 암모늄 클로라이드의 포화 용액으로 급랭하였다. 수층을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 물질(16.0 mg)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 70% 에틸 아세테이트)로 정제하여 황색 고체로서 에틸 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판오에이트(6.20 mg, 45% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.50(d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.75-7.68(m, 2H), 7.54(dd, J = 9.9, 2.5 Hz, 1H), 7.45-7.41(m, 2H), 7.38(dd, J = 9.1, 6.0 Hz, 1H), 7.14(td, J = 8.7, 2.7 Hz, 1H), 6.80(t, J = 5.9 Hz, 1H), 6.70(d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.40(s, 1H), 4.23(dd, J = 9.4, 4.1 Hz, 1H), 4.20-4.08(m, 2H), 3.70(q, J = 6.2 Hz, 2H), 2.62(t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.52(sxt, J = 8.8 Hz, 1H), 2.09-1.97(m, 1H), 1.71(dd, J = 19.7, 0.4 Hz, 2H), 1.63(dd, J = 8.0, 4.1 Hz, 1H), 1.31-1.21(m, 3H), 1.13(s, 3H), 1.09(s, 3H); (M+1): 478.3.

중간체 40: t-부틸 4-((3,3- 다이메틸사이클로부틸 )(6- 플루오로퀴놀린 -3- 일아미노 ) 메틸 ) 벤조에이트

2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2'-4'-6'-트라이-i-프로필-1,1'-바이페닐(16.3 mg, 0.0300 mmol), 클로로(2-다이사이클로헥실포스피노-3,6-다이메톡시-2',4',6'-트라이이소프로필-1,1'-바이페닐)[2-(2-아미노에틸)페닐]팔라듐(II)(25.0 mg, 0.0300 mmol) 및 3-브로모-6-플루오로퀴놀린(164 mg, 0.670 mmol)을 함유하는 용액에 무수 테트라하이드로푸란(6.00 mL) 및 t-부틸 4-(아미노(3,3-다이메틸사이클로부틸)메틸)벤조에이트(175 mg, 0.600 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 부드럽게 가온한 후 칼륨 t-부톡사이드(150 mg, 1.30 mmol)를 고체로서 첨가하였다. 이어서, 반응 생성물을 18 시간 동안 환류 가열하였다. 이어서, 반응 생성물을 실온으로 냉각하고 포화 수성 암모늄 클로라이드로 급랭하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 적색 오일(401 mg)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 갈색 오일로서 t-부틸 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸) 벤조에이트(14.0 mg, 5.3% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.43(s, 1H), 7.97-7.92(m, 2H), 7.86(dd, J = 9.1, 5.8 Hz, 1H), 7.43-7.37(m, 2H), 7.10(td, J = 8.7, 2.7 Hz, 1H), 7.01(dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 6.61(d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.25(dd, J = 9.3, 4.6 Hz, 1H), 2.59-2.46(m, 1H), 2.00(s, 1H), 1.76-1.67(m, 2H), 1.66-1.58(m, 1H), 1.56(s, 9H), 1.13(s, 3H), 1.09(s, 3H); MS(M+1): 435.3.

중간체 41: 4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(6-플루오로 퀴놀린 -3-일아미노)메틸) 벤조산

t-부틸 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤조에이트(13.0 mg, 0.0300 mmol)를 함유하는 플라스크에 무수 메틸렌 클로라이드(0.150 mL) 및 트라이플루오로아세트산(0.150 mL, 0.0300 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고 톨루엔으로 공비혼합하여 오일로서 조질 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤조산(11 mg, 96% 수율)을 수득하였다. (M+1): 379.2.

중간체 42: 에틸 3-(4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(6-플루오로 퀴놀린 -3- 일 아미노)메틸)벤즈아미도)프로판오에이트

4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤조산(11.0 mg, 0.0290 mmol)을 함유하는 바이알에 3-아미노프로피온산 에틸 에스터 하이드로클로라이드(4.90 mg, 0.0320 mmol), 1-하이드록시-7-아자벤조트라이아졸(4.80 mg, 0.0350 mmol) 및 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노 프로필)카보다이이미드 하이드로클로라이드(6.70 mg, 0.0350 mmol)를 첨가하였다. 무수 메틸렌 클로라이드(0.290 mL)를 첨가한 후 트라이에틸아민(0.005 mL, 0.0380 mmol)을 첨가하였다. 18 시간 후, 반응 생성물을 메틸렌 클로라이드로 희석하고 암모늄 클로라이드의 포화 용액으로 급랭하였다. 수층을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 물질(28.6 mg)을 수득하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 70% 에틸 아세테이트)로 정제하여 오일로서 에틸 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판오에이트(7.40 mg, 54% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 7.86(s, 1H), 7.72(d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.42(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.14-7.06(m, 1H), 7.05-6.96(m, 1H), 6.80(t, J = 5.9 Hz, 1H), 6.60(s, 1H), 4.45(s, 1H), 4.24(dd, J = 9.3, 4.4 Hz, 1H), 4.19-4.08(m, 2H), 3.70(q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.62(t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.58-2.44(m, 1H), 2.06-1.96(m, 1H), 1.75-1.67(m, 2H), 1.67-1.55(m, 2H), 1.28-1.22(m, 3H), 1.13(s, 3H), 1.09(s, 3H). (M+1): 478.3.

중간체 43: 에틸 4-((3,3- 다이메틸사이클로부틸 )(퀴놀린-3- 일아미노 ) 메틸 ) 벤조에이트

에틸 4-(3,3-다이메틸사이클로부탄카본일)벤조에이트(397 mg, 1.53 mmol)를 함유하는 플라스크를 톨루엔(13.9 mL), 퀴놀린-3-아민(200 mg, 1.39 mmol) 및 파라-톨루엔 설폰산(26.8 mg, 0.139 mmol)으로 충전하였다. 반응 생성물을 딘-스타크(Dean-Stark)를 사용하여 24 시간 동안 환류하였다. 반응 생성물을 물로 급랭하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 물질(508 mg)을 수득하였다. 이 조질 물질에 무수 메탄올(6.47 mL)을 첨가하고 용액을 0 ℃로 냉각하였다. 이어서, 나트륨 보로하이드라이드(147 mg, 3.88 mmol)를 첨가하였다. 5 시간 후, 반응 생성물을 부분적으로 농축하고 포화 수성 암모늄 클로라이드로 급랭하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 이어서, 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 물질(560 mg)을 수득하였다. 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 오일로서 에틸 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤조에이트(17.0 mg, 3.4% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.47(d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.03-7.97(m, 2H), 7.90-7.86(m, 1H), 7.46-7.42(m, 2H), 7.42-7.30(m, 3H), 6.69(d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.40-4.31(m, 2H), 4.27(dd, J = 9.2, 4.3 Hz, 1H), 2.58-2.47(m, 1H), 2.03(ddd, J = 11.2, 7.6, 4.2 Hz, 1H), 1.79-1.67(m, 2H), 1.67-1.55(m, 1H), 1.36(t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.14(s, 3H), 1.09(s, 3H). MS(M+1): 389.3.

중간체 44: 4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(퀴놀린-3- 일아미노 )메틸)벤조산

에틸 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(퀴놀린-3-일아미노) 메틸) 벤조에이트(17.0 mg, 0.0440 mmol)를 함유하는 플라스크에 테트라하이드로푸란(0.110 mL), 메탄올(0.110 mL) 및 1 N 수산화 나트륨(0.110 mL, 0.110 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 18 시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 이어서, 1 N 염산(0.110 mL)을 적가하여 pH가 3이 되게 하였다. 수층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 고체로서 4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(퀴놀린-3-일아미노)메틸) 벤조산(14.8 mg, 93% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.67(br. s., 1H), 8.06(d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.96(d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.48(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.46-7.32(m, 3H), 6.76(d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.30(d, J = 9.4 Hz, 1H), 2.62-2.50(m, 1H), 2.10-1.98(m, 1H), 1.80-1.69(m, 2H), 1.69-1.58(m, 1H), 1.14(s, 3H), 1.09(s, 3H). MS(M+1): 361.2.

중간체 45: 에틸 3-(4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도) 프로판오에이트

4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(퀴놀린-3-일아미노)메틸) 벤조산(14.0 mg, 0.0390 mmol)을 함유하는 바이알에 3-아미노프로피온산 에틸 에스터 하이드로클로라이드(6.60 mg, 0.0430 mmol), 1-하이드록시-7-아자벤조트라이아졸(6.40 mg, 0.0470 mmol) 및 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노 프로필)카보다이이미드 하이드로클로라이드(9.00 mg, 0.0470 mmol)를 첨가하였다. 무수 메틸렌 클로라이드(0.390 mL)를 첨가한 후 트라이에틸아민(0.007 mL, 0.0510 mmol)을 첨가하였다. 18 시간 후, 반응 생성물을 메틸렌 클로라이드로 희석하고 암모늄 클로라이드의 포화 용액으로 급랭하였다. 수층을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 물질(26.0 mg)을 수득하였다. 컬럼 크로마토그래피(헵탄 중 0 내지 70% 에틸 아세테이트)를 정제하여 오일로서 에틸 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판오에이트(11.9 mg, 66% 수율)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.48(d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.88(dd, J = 8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.74-7.67(m, 2H), 7.46-7.41(m, 2H), 7.41-7.29(m, 3H), 6.81(t, J = 6.1 Hz, 1H), 6.69(d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.42(br. s., 1H), 4.25(dd, J = 9.3, 4.4 Hz, 1H), 4.19-4.08(m, 2H), 3.70(q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.61(t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.59-2.45(m, 1H), 2.07-1.97(m, 1H), 1.76-1.67(m, 2H), 1.66-1.55(m, 1H), 1.28-1.21(m, 3H), 1.13(s, 3H), 1.09(m, 3H). MS(M+1): 460.4.

중간체 46: 에틸 4-(1-아미노-3-메틸부틸)벤조에이트

메탄올(17.1 mL) 중 4-(3-메틸-부티릴)-벤조산 에틸 에스터(2000 mg, 8.536 mM), 암모늄 아세테이트(6580 mg, 85.4 mM) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(1070 mg, 17.1 mmol)의 혼합물을 60 ℃로6 시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 냉각하고, NH₄Cl 용액(10 mL)으로 급랭하였다. MeOH를 감압하에 제거하였다. 수용액을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 용액을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하였다. 조질 물질을 DCM 중 0 내지 15% MeOH를 사용하는 HC 실리카 겔(40 g) 컬럼으로 분리하였다. 무색 오일성 물질로서 목적 생성물(1560 mg, 77.7%)을 수득하였다. ¹H NMR(500 MHz, CDCl₃) δ ppm 0.91(dd, J = 13.66, 6.59 Hz, 6 H) 1.40(t, J = 7.07 Hz, 3 H) 1.84-1.99(m, 3 H) 4.27-4.42(m, 3 H) 6.36(br. s., 2 H) 7.51(d, J = 8.05 Hz, 2 H) 8.05(d, J = 8.05 Hz, 2 H). GC: m/z 235.

중간체 47: 4-[3- 메틸 -1-(8- 메틸 -퀴놀린-3- 일아미노 )-부틸]-벤조산 에틸 에스터

4-(1-아미노-3-메틸-부티릴)-벤조산 에틸 에스터(340 mg, 1.5 mM)가 함유된 반응 바이알에 DMSO(4.88 mL), 3-브로모-8-메틸퀴놀린(325 mg, 1.46 mM)을 첨가한 후, CuI 촉매(27.8 mg, 0.146 mM) 및 CsOAc(562 mg, 2.93 mM)를 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 가스로 퍼징한 후 튜브를 밀봉하였다. 반응 혼합물을 100 ℃로 24 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, EtOAc(10 mL)로 희석하고, 물(3 x 5 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하였다. 조질 물질을 헵탄 중 0 내지 50% EtOAc를 사용하는 실리카 겔(40 g)로 분리하여 황색 고체 생성물(62 mg, 11%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ ppm 0.95(d, J = 6.25 Hz, 3 H) 1.00(d, J = 6.25 Hz, 3 H) 1.35(t, 3 H) 1.58-1.68(m, 1 H) 1.68-1.84(m, 2 H) 2.70(s, 3 H) 4.33(q, 2 H) 4.36-4.42(m, 1 H) 4.44-4.54(m, 1 H) 6.74(d, J = 2.93 Hz, 1 H) 7.18-7.30(m, 3 H) 7.43(d, J = 8.39 Hz, 2 H) 8.00(d, 2 H) 8.48(d, J = 2.93 Hz, 1 H). LCMS: m/z 377.2(M+1).

중간체 48: 4-[3- 메틸 -1-(8- 메틸 -퀴놀린-3- 일아미노 )-부틸]-벤조산

THF-MeOH(1:1, 3.3 mL) 중 4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조산 에틸 에스터(62 mg, 0.16 mM) 및 1 N 수성 NaOH 용액(0.413 mL, 0.413 mM)의 혼합물을 50 ℃로 4 시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 냉각하고, 농축하여 유기 용매를 제거하였다. 수용액을 DCM(5 mL)으로 희석하고, 1 N HCl 용액에 의해 pH를 3 내지 4로 산성화하였다. 유기 용액을 분리하고 수용액을 10% i-PrOH-DCM(5 x 5 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하여 황색 고체 생성물(45.7 mg, 79%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ ppm 0.98(d, J = 6.44 Hz, 3 H) 1.03(d, J = 6.25 Hz, 3 H) 1.56-1.68(m, 1 H) 1.73-1.93(m, 2 H) 2.68(d, 3 H) 4.60-4.68(m, 1 H) 7.23-7.35(m, 2 H) 7.38(d, 1 H) 7.44(d, 1 H) 7.48-7.61(m, 2 H) 7.96(d, 2 H) 8.53(dd, 1 H), 2개의 양성자(COOH 및 NH)를 교환하였다. 이 물질은 추가 후처리 없이 다음 반응 단계를 위해 사용될 수 있다.

중간체 49: 3-{4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터

DCM(1 mL) 중 4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조산(5)(45 mg, 0.131 mM)의 용액에 TEA(66.3 mg, 0.655 mM)를 첨가한 후 3-아미노-프로피온산 메틸 에스터 염산(6)(27.5 mg, 0.197 mM)을 첨가한 후 HBTU(59.5 mg, 0.157 mM)를 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(5 mL)로 희석하고 물(2 x 2 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하였다. 조질 물질을 헵탄 중 10 내지 80% EtOAc를 사용하는 실리카 겔(12 g) 컬럼으로 분리하여 목적 생성물(44 mg, 77%)을 수득하였다. ¹H NMR(500 MHz, CDCl₃) δ ppm 0.98(d, J = 6.34 Hz, 3 H) 1.05(d, 3 H) 1.62-1.71(m, 1 H) 1.71-1.86(m, 2 H) 2.62-2.67(m, 2 H) 2.72(s, 3 H) 3.67-3.79(m, 5 H) 4.39(d, J = 5.37 Hz, 1 H) 4.49-4.55(m, 1 H) 6.76(d, J = 2.44 Hz, 1 H) 6.77-6.85(m, 1 H) 7.20-7.27(m, 1 H) 7.28(s, 1 H) 7.30(d, J = 7.07 Hz, 1 H) 7.46(d, J = 8.05 Hz, 2 H) 7.74(d, J = 8.29 Hz, 2 H) 8.50(d, J = 2.68 Hz, 1 H). LCMS: m/z 434.2(M+1).

중간체 50: 4-[3- 메틸 -1-(7- 메틸 -퀴놀린-3- 일아미노 )-부틸]-벤조산 에틸 에스터

4-(1-아미노-3-메틸-부티릴)-벤조산 에틸 에스터(2)(440 mg, 1.9 mM)를 함유하는 반응 바이알에 DMSO(6.33 mL), 3-브로모-7-메틸퀴놀린(9)(420 mg, 1.9 mM)을 첨가한 후, CuI 촉매(36 mg, 0.19 mM) 및 CsOAc(726 mg, 3.78 mM)를 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 가스로 퍼징한 후 튜브를 밀봉하였다. 반응 혼합물을 100 ℃로 48 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, EtOAc(10 mL)로 희석하고, 물(3 x 5 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하였다. 조질 물질을 헵탄 중 0 내지 80% EtOAc를 사용하는 실리카 겔(40 g)로 분리하여 황색 생성물(108 mg, 15%)을 수득하였다. ¹H NMR(500 MHz, CDCl₃) δ ppm 0.98(d, J = 6.34 Hz, 3 H) 1.04(d, J = 6.34 Hz, 3 H) 1.39(t, 3 H) 1.61-1.71(m, 1 H) 1.71-1.86(m, 2 H) 2.46(s, 3 H) 4.36(q, 2 H) 4.38-4.43(m, 1 H) 4.47-4.56(m, 1 H) 6.75(d, J = 1.95 Hz, 1 H) 7.20(d, J = 8.29 Hz, 1 H) 7.36(d, J = 8.05 Hz, 1 H) 7.47(d, J = 8.29 Hz, 2 H) 7.69(s, 1 H) 8.03(d, 2 H) 8.47(br. s., 1 H). LCMS: m/z 377.2(M+1).

중간체 51: 4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3- 일아미노 )-부틸]-벤조산

THF-MeOH(1:1, 1.5 mL) 중 4-[3-메틸-1-(7-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조산 에틸 에스터(48 mg, 0.13 mM) 및 1 N 수성 NaOH 용액(0.318 mL, 0.318 mM)의 혼합물을 50 ℃로 5 시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 냉각하고, 농축하여 유기 용매를 제거하였다. 수용액을 DCM(5 mL)으로 희석하고, 1 N HCl 용액에 의해 pH를 3 내지 4로 산성화하였다. 유기 용액을 분리하고 수용액을 DCM(3 x 5 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하여 황색 고체 생성물(44 mg, 약 100%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ ppm 0.97(d, J = 6.44 Hz, 3 H) 1.02(d, J = 6.44 Hz, 3 H) 1.54-1.67(m, 1 H) 1.73-1.91(m, 2 H) 2.43(s, 3 H) 4.57-4.65(m, 1 H) 7.14(d, J = 2.54 Hz, 1 H) 7.28(dd, J = 8.49, 1.27 Hz, 1 H) 7.46-7.58(m, 4 H) 7.97(d, 2 H) 8.44(d, J = 2.34 Hz, 1 H), 2개의 양성자(COOH 및 NH)를 교환하였다. LCMS: m/z 349.1(M+1). 이 물질은 추가 후처리 없이 다음 반응 단계를 위해 사용될 수 있다.

중간체 52: 3-{4-[3-메틸-1-(7-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터

DCM(1 mL) 중 4-[3-메틸-1-(7-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조산(44 mg, 0.13 mM)의 용액에 TEA(63.6 mg, 0.629 mM), 이어서 3-아미노-프로피온산 메틸 에스터 염산(6)(26.4 mg, 0.189 mM)을 첨가한 후 HBTU(57.3 mg, 0.151 mM)를 첨가하였다. 반응 생성물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(5 mL)로 희석하고 물(2 x 2 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하였다. 조질 물질을 헵탄 중 10 내지 100% EtOAc를 사용하는 실리카 겔(12 g) 컬럼으로 분리하여 목적 생성물(49 mg, 90%)을 수득하였다. ¹H NMR(500 MHz, CDCl₃) δ ppm 0.98(d, J = 6.10 Hz, 3 H) 1.04(d, J = 6.34 Hz, 3 H) 1.61-1.70(m, 1 H) 1.71-1.86(m, 2 H) 2.66(t, 2 H) 2.82(s, 3 H) 3.68-3.76(m, 5 H) 4.36(d, J = 4.88 Hz, 1 H) 4.44-4.54(m, 1 H) 6.73(d, J = 2.20 Hz, 1 H) 6.80(t, J = 5.49 Hz, 1 H) 7.20(d, J = 8.29 Hz, 1 H) 7.35(d, J = 8.54 Hz, 1 H) 7.45(d, J = 8.29 Hz, 2 H) 7.67(s, 1 H) 7.75(d, 2 H) 8.45(d, J = 2.44 Hz, 1 H). LCMS: 434.2(M+1).

중간체 53: 3-브로모-6-메틸퀴놀린

6-메틸퀴놀린(1.9906 g, 13.903 mmol)을 탄소 테트라클로라이드(20 mL) 중에서 용해하였다. 브롬(0.72 mL, 14 mmol)을 반응 용액에 적가하고 현탁액을 환류 가열하였다(80 ℃). 반응 생성물을 80 ℃로 가열하면서 피리딘(1.15 mL, 13.9 mmol)을 첨가하고 반응 생성물을 환류에서 1.5 시간 동안 교반시켰다. 반응 생성물을 실온으로 냉각하고 다이클로로메탄으로 희석하였다. 반응 생성물을 물로 세척하고 유기물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 탁한 갈색 오일을 수득하였고, 이는 방치시 고체화되었다. 조질 고체를 헵탄 중 0% 내지 15%의 20% 에틸 아세테이트의 매우 느린 구배로 용리하는 실리카 겔(80 g) ISCO 컬럼으로 정제하여 목적 3-브로모-6-메틸퀴놀린을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ ppm 2.52(s, 3 H) 7.47(s, 1 H) 7.54(dd, J = 8.59, 1.95 Hz, 1 H) 7.95(d, J = 8.59 Hz, 1 H) 8.19(d, J = 2.15 Hz, 1 H) 8.81(d, J = 2.34 Hz, 1 H). GCMS = 2.93 분에서 221.

중간체 54: 에틸(+/-)-4-(4,4,4-트라이플 루오로 -1-하이드록시 부틸 )벤조에이트

-40 ℃에서 테트라하이드로푸란(12 mL) 중 에틸 4-요오드벤조에이트(1.21 ml, 7.24 mmol)의 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드 착체(6.13 ml, 7.97 mmol, 테트라하이드로푸란 중 1.3 M)를 적가하였다. 혼합물을 약 1 시간 교반하고 이에 4,4,4-트라이플루오로부타날(0.761 ml, 0.724 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 -40 ℃에서 15 분 동안 교반하고 상온에서 12 시간에 걸쳐서 천천히 가온하였다. 반응 생성물을 수성 1.0 M 염산으로 급랭하고, 수층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하여 에틸(+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-하이드록시부틸)벤조에이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

중간체 55: 에틸(+/-)-4-(4,4,4- 트라이플루오로 -1-(( 메틸설폰일 ) 옥시 )부틸)벤조에이트

t-부틸 메틸 에테르(4.8 mL) 중 에틸(+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-하이드록시부틸)벤조에이트(264 mg, 0.956 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(0.201 mL, 1.43 mmol)을 첨가한 후, 메탄설폰일 클로라이드(0.091 mL, 1.15 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 t-부틸 메틸 에테르(25 mL)로 희석하고 물(15 mL), 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(15 mL), 이어서 포화 수성 나트륨 클로라이드(15 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고 여액을 감압하에 농축하여 에틸(+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-((메틸설폰일)옥시)부틸)벤조에이트를 수득하였다. 이 물질을 추가 정제 없이 사용하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.12(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.48(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 5.63(dd, J = 7.9, 4.8 Hz, 1 H), 4.41(q, J = 7.0 Hz, 2 H), 2.77(s, 3 H), 2.39-2.08(m, 4 H), 1.41(t, J = 7.1 Hz, 3 H).

중간체 56: 에틸(+/-)-4-(4,4,4- 트라이플루오로 -1-(퀴놀린-3- 일아미노 )부틸)벤조에이트

아세토니트릴(1.74 mL) 중 에틸(+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-((메틸설폰일)옥시)부틸) 벤조에이트(123 mg, 0.347 mmol)의 용액에 3-아미노 퀴놀린(60.6 mg, 0.416 mmol)을 첨가한 후, 칼륨 포스페이트(155 mg, 0.694 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃로 20 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고 여액을 감압하에 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 에틸(+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤조에이트를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.51(d, J = 2.5 Hz, 1 H), 8.06(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.92(d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.50-7.44(m, 3 H), 7.44-7.35(m, 2 H), 6.81(d, J = 2.5 Hz, 1 H), 4.62-4.54(m, 1 H), 4.44-4.33(m, 3 H), 2.36-2.10(m, 4 H), 1.38(t, J = 7.1 Hz, 3 H).

중간체 57: (+/-)-4-(4,4,4- 트라이플루오로 -1-(퀴놀린-3- 일아미노 )부틸)벤조산

메탄올(1.2 mL) 및 테트라하이드로푸란(1.2 mL) 중 에틸(+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸) 벤조에이트(95 mg, 0.24 mmol)의 용액에 1 N 수성 수산화 나트륨(1.2 mL, 1.2 mmol)을 첨가하였다. 17 시간 후, 용액을 감압하에 농축하여 메탄올 및 테트라하이드로푸란을 제거하였다. 이어서, 1 N 수성 염산을 사용하여 혼합물의 pH를 5로 산성화하고 포화 수성 나트륨 클로라이드(20 mL)로 희석하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고 여액을 감압하에 농축하여 (+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤조산을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 8.50(br. s., 1 H), 8.02(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.80-7.73(m, 1 H), 7.57(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.53-7.47(m, 1 H), 7.40-7.32(m, 2 H), 6.95(d, J = 2.5 Hz, 1 H), 4.73-4.64(m, 1 H), 2.55-2.39(m, 1 H), 2.39-2.22(m, 1 H), 2.22-2.04(m, 2 H).

중간체 58: 에틸 (+/-)-3-(4-(4,4,4- 트라이플루오로 -1-(퀴놀린-3- 일아미노 )부틸) 벤즈아미도 ) 프로판오에이트

다이클로로메탄(2 mL) 중 (+/-)-4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸) 벤조산(74.0 mg, 0.200 mmol), β-알라닌 에틸 에스터 하이드로클로라이드(96.0 mg, 0.594 mmol) 및 1-하이드록시벤조트라이아졸 하이드레이트(80%, 20 중량% 물, 100 mg, 0.594 mmol)의 현탁액에 트라이에틸아민(0.250 mL, 1.78 mmol)을 첨가한 후 N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(96.3 mg, 0.495 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 19 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄(15 mL)으로 희석하고 물(3 x 15 mL)로 세척한 후 포화 수성 나트륨 클로라이드(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고 여액을 감압하에 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 에틸(+/-)-3-(4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판오에이트를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.69-8.59(m, 1 H), 7.96(d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.78(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.52-7.46(m, 3 H), 7.46-7.37(m, 2 H), 6.88-6.79(m, 2 H), 4.61-4.52(m, 1 H), 4.16(q, J = 7.0 Hz, 2 H), 3.72(q, J = 6.1 Hz, 2 H), 2.63(t, J = 5.9 Hz, 2 H), 2.37-2.08(m, 4 H), 1.26(t, J = 7.1 Hz, 4 H).

중간체 59: t-부틸 4-(3- 메틸부탄오일 ) 벤조에이트

다이클로로메탄(6 mL) 중 4-(3-메틸부탄오일)벤조산(499 mg, 2.42 mmol)의 슬러리에 O-t-부틸-N,N'-다이이소프로필이소우레아(1.82 g, 9.07 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 50 시간 동안 교반한 후 t-부틸 메틸 에테르(75 mL)로 희석하였다. 혼합물을 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(50 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 여액을 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 무색 오일로서 t-부틸 4-(3-메틸부탄오일)벤조에이트를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 8.09-8.04(m, 2 H), 8.00-7.94(m, 2 H), 2.86(d, J = 6.8 Hz, 2 H), 2.37-2.23(m, 1 H), 1.62(s, 9 H), 1.01(d, J = 6.7 Hz, 6 H).

중간체 60: t-부틸(+/-)-4-(1-아미노-3-메틸부틸)벤조에이트

메탄올(9.5 mL) 중 t-부틸 4-(3-메틸부탄오일)벤조에이트(500 mg, 1.91 mmol) 및 암모늄 아세테이트 (1.50 g, 19.1 mmol)의 용액에 나트륨 시아노보로하이드라이드(189 mg, 2.86 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 21 시간 동안 가열한 후 실온으로 냉각하였다. 1 N 염산(7 mL)을 적가하였다. 1 시간 후, 혼합물을 감압하에 농축하여 메탄올을 제거하였다. 1 N 수산화 나트륨(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 다이클로로메탄(3 x 25 mL)으로 추출하였다. 합한 유기물을 포화 수성 나트륨 클로라이드(15 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 여액을 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(메탄올/다이클로로메탄)로 정제하여 무색 오일로서 t-부틸(+/-)-4-(1-아미노-3-메틸부틸)벤조에이트를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.99-7.94(m, 2 H), 7.41-7.37(m, 2 H), 4.08-4.01(m, 1 H), 1.60(s, 9 H), 1.59-1.43(m, 3 H), 0.92(d, J = 6.5 Hz, 3 H), 0.90(d, J = 6.3 Hz, 3 H).

중간체 61: t-부틸(+/-)-4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2- 일 )아미노)부틸)벤조에이트

다이클로로메탄(8.0 mL) 중 t-부틸(+/-)-4-(3-메틸부탄오일)벤조에이트(527 mg, 2.00 mmol) 및 3-메틸퀴놀린 N-옥사이드(318 mg, 2.00 mmol)의 용액에 다이이소프로필에틸아민(1.31 mL, 7.50 mmol)을 첨가한 후 브로모트라이피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(1.18 g, 2.50 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(20 mL)로 희석하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고 여액을 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제하여 백색 고체로서 t-부틸(+/-)-4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤조에이트를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.94(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.63(d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.59(s, 1 H), 7.54-7.48(m, 3 H), 7.47-7.41(m, 1 H), 7.19-7.13(m, 1 H), 5.56(q, J = 7.4 Hz, 1 H), 4.73(d, J = 7.0 Hz, 1 H), 2.28(s, 3 H), 1.94-1.83(m, 1 H), 1.81-1.70(m, 1 H), 1.70-1.60(m, 1 H), 1.57(s, 9 H), 1.04(d, J = 6.6 Hz, 3 H), 0.97(d, J = 6.6 Hz, 3 H).

중간체 62: (+/-)-4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2- 일 )아미노)부틸)벤조산 트라이플 루오로아세트산 염

다이클로로메탄(8.0 mL) 중 t-부틸(+/-)-4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸) 벤조에이트(325 mg, 0.803 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(0.62 mL, 8.0 mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 17 시간 동안 교반한 후 감압하에 농축하였다. 톨루엔(3 mL)을 첨가하고, 용액을 다시 감압하에 농축하여 과량의 트라이플루오로아세트산을 제거하여 백색 고체로서 (+/-)-4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤조산 트라이플루오로아세트산 염을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 8.26(s, 1 H), 8.06(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.84(d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.80-7.75(m, 1 H), 7.75-7.69(m, 1 H), 7.58(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.55-7.48(m, 1 H), 5.50(dd, J = 5.0, 9.5 Hz, 1 H), 2.56(s, 3 H), 2.24-2.14(m, 1 H), 1.92-1.75(m, 2 H), 1.08(d, J = 6.4 Hz, 3 H), 1.05(d, J = 6.2 Hz, 3 H).

중간체 63: 에틸 3-(4-(3- 메틸 -1-((3- 메틸퀴놀린 -2-일)아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판오에이트 , 이성질체 1 및 이성질체 2

(+/-)-4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤조산 트라이플루오로아세트산 염(461 mg, 1.00 mmol), β-알라닌 에틸 에스터 하이드로클로라이드(645 mg, 3.99 mmol) 및 1-하이드록시벤조트라이아졸 하이드레이트(80%, 20 중량% 물, 674 mg, 3.99 mmol)를 다이클로로메탄(10.0 mL) 중에서 현탁하였다. 트라이에틸아민(1.40 mL, 9.97 mmol)을 첨가한 후 N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(776 mg, 3.99 mmol)을 첨가하고, 용액을 실온에서 66 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다이클로로메탄(40 mL)으로 희석하고, 물(3 x 30 mL) 및 포화 수성 NaCl(20 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 여액을 감압하에 농축하였다. 실리카 겔 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄)로 정제한 후 키랄 SFC(키랄팩 AD-H 컬럼, 10 mm x 250 cm, 25% 메탄올/이산화탄소 용리액, 0.2% 이소프로필아민 개질제)로 정제하여 에틸 3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판오에이트, 이성질체 1(분석적인 키랄 SFC 6.1 분 체류) 및 메틸 및 에틸 에스터의 혼합물로서 3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판오에이트, 이성질체 2(분석적인 키랄 SFC 6.7 분 체류)를 수득하였다. 에틸 에스터: ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.71(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.66-7.57(m, 2 H), 7.56-7.48(m, 3 H), 7.44(t, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.16(t, J = 7.4 Hz, 1 H), 6.81-6.73(m, 1 H), 5.60-5.52(m, 1 H), 4.73(d, J = 6.8 Hz, 1 H), 4.16(q, J = 7.0 Hz, 2 H), 3.71(q, J = 6.0 Hz, 2 H), 2.62(t, J = 5.9 Hz, 2 H), 2.28(s, 3 H), 1.93-1.82(m, 1 H), 1.81-1.70(m, 1 H), 1.69-1.60(m, 1 H), 1.26(t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.04(d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.97(d, J = 6.2 Hz, 3 H). 메틸 에스터: ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.71(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.66-7.57(m, 2 H), 7.56-7.48(m, 3 H), 7.44(t, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.16(t, J = 7.3 Hz, 1 H), 6.81-6.71(m, 1 H), 5.60-5.52(m, 1 H), 4.77-4.69(m, 1 H), 3.76-3.66(m, 5 H), 2.66-2.59(m, 2 H), 2.28(s, 3 H), 1.93-1.82(m, 1 H), 1.81-1.70(m, 1 H), 1.69-1.60(m, 1 H), 1.04(d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.97(d, J = 6.4 Hz, 3 H).

중간체 64: (+/-)-메틸 4-(1-하이드록시 부틸 )벤조에이트

테트라하이드로푸란(908 mL) 중 메틸 4-요오드벤조에이트(151.3 g, 565.8 mmol)의 용액을 -30 ℃로 냉각하였다. 이 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드 용액(테트라하이드로푸란 중 2 M, 325.4 mL, 650.7 mmol)을 20 분간에 걸쳐서 적가하였다. 반응 생성물을 -33 ℃에서 1 시간 동안 교반한 후, 부타날(61.09 mL, 679.0 mmol)을 15 분간에 걸쳐서 적가하였다. 반응 생성물을 0 ℃로 가온하였다. 메틸 t-부틸 에테르(1000 mL) 및 시트르산 용액(5 중량% 수성, 1000 mL)을 첨가하고, 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 유기상을 물(500 mL)로 세척하였다. 합한 수상을 메틸 t-부틸 에테르(250 mL)로 다시 추출하였다. 합한 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 진공하에 농축하여 황색 오일로서 중간체 64를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 7.97-8.02(m, 2 H), 7.40(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 4.74(dd, J = 7.8, 5.7 Hz, 1 H), 3.90(s, 3 H), 1.61-1.82(m, 2 H), 1.23-1.49(m, 2 H), 0.92(t, J = 7.32 Hz, 3 H).

중간체 65: 메틸 4-부티릴벤조에이트

다이클로로메탄(129.5 mL) 중 중간체 64(129.5 g, 565.9 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(394.4 mL, 2.83 mol)을 첨가하였다. 용액을 10 ℃로 냉각한 후, 내부 온도를 15 ℃ 미만으로 유지하면서 다이메틸 설폭사이드(777.0 mL) 중 삼산화황 피리딘 착체(202.2 g, 1.24 mol)의 용액을 30 분간에 걸쳐서 천천히 첨가하였다. 반응 생성물을 25 ℃로 가온하였다. 16 시간 후, 혼합물을 염산(물 중 1.22 M, 2780 mL)으로 천천히 희석하였다. 반응 생성물을 15 분 동안 교반한 후 층을 분리하였다. 유기층을 물(1000 mL)로 세척한 후, 다르코(Darco) KB-B(13 g), 마그네슘 설페이트(13 g) 및 셀라이트로 처리하고 30 분 동안 슬러리하였다. 슬러리를 여과하고 고체를 메틸 t-부틸 에테르(250 mL)로 세척하였다. 여액을 약 500 mL의 부피까지 대기압(내부 온도 55 내지 58 ℃)에서 농축하였다. 이 용액을 2 ℃/분 내지 15 ℃/분으로 냉각하였다. 헵탄(250 mL)을 첨가하고, 슬러리를 10 ℃로 냉각하고 1 시간 동안 교반하였다. 슬러리를 여과하고 고체를 메틸 t-부틸 에테르:헵탄(1:2, 260 mL, 5 ℃로 냉각함)으로 세척한 후 헵탄(250 mL)으로 세척하였다. 생성된 회백색 고체를 진공하에 건조하여 중간체 X202를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.08-8.13(m, 2 H), 7.97-8.01(m, 2 H), 3.94(s, 3 H), 2.96(t, J = 7.3 Hz, 2 H), 1.77(m, 2 H), 1.00(t, J = 7.4 Hz, 3 H).

중간체 66: (S)- 메틸 4-(1- 하이드록시부틸 ) 벤조에이트

20 ℃에서 테트라하이드로푸란(154 mL) 중 보란-다이에틸아닐린 착체(49.79 mL, 280.0 mmol) 및 (R)-(+)-2-메틸-CBS-옥사보롤리딘 용액(톨루엔 중 1 M, 18.67 mL, 18.67 mmol)의 용액에 테트라하이드로푸란(385 mL) 중 중간체 65(77.00 g, 373.4 mmol)의 용액을 2 시간에 걸쳐서 첨가하였다. 10 분 동안 교반한 후, 온도를 20 ℃ 미만으로 유지하면서 반응 생성물에 메탄올(34.75 mL, 858.7 mmol)을 30 분간에 걸쳐서 천천히 첨가하여 급랭하였다. 이어서, 온도를 20 ℃ 미만으로 유지하면서 염산(물 중 1 N, 373.4 mL, 373.4 mmol)을 10 분간에 걸쳐서 첨가하였다. 메틸 t-부틸 에테르(385 mL)를 첨가하고 혼합물을 30 분 동안 교반하였다. 층을 분리하였다. 염산(물 중 1 N, 373.4 mL)을 유기층에 첨가하고, 혼합물을 10 분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 유기층을 물(77.0 mL)로 희석하였다. 혼합물을 5 분 동안 교반한 후, 층을 분리하였다. 합한 수층을 메틸 t-부틸 에테르(2 x 150 mL)로 다시 추출하였다. 합한 유기층을 250 mL의 용액이 남을 때까지 대기압(80 ℃ 미만의 온도)에서 증류하였다. 이어서, 용액을 헵탄(847 mL)으로 희석하고 650 mL의 용매가 증류될 때까지 대기압(100 내지 110 ℃)에서 증류하였다. 다시, 헵탄(462 mL)을 첨가하고, 내부 온도가 100 ℃에 도달할 때까지 용액을 대기압(100 내지 110 ℃)에서 증류하였다. 헵탄을 700 mL의 총 부피에 첨가하였다. 이어서, 용액을 격렬하게 교반하면서 -15 ℃로 냉각하였다. 슬러리를 15 ℃로 가온하고 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 -15 ℃로 냉각하고 3.5 시간 동안 교반하였다. 생성된 슬러리를 여과하고 고체를 헵탄(50 mL, 0 ℃로 냉각함)으로 세척하였다. 생성된 고체를 진공하에 건조하여 중간체 66을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ):7.97-8.02(m, 2 H), 7.40(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 4.74(dd, J = 7.8, 5.7 Hz, 1 H), 3.90(s, 3 H), 1.61-1.82(m, 2 H), 1.23-1.49(m, 2 H), 0.92(t, J = 7.32 Hz, 3 H).

중간체 67: (R)- 메틸 4-(1- 아미노부틸 ) 벤조에이트

테트라하이드로푸란(120 mL) 중 중간체 66(20.00 g, 96.04 mmol)의 용액을 5 ℃로 냉각하였다. 반응 온도를 20 ℃ 미만으로 유지하면서 트라이에틸아민(10.24 g, 101.2 mmol)을 첨가한 후 메탄설폰일 클로라이드(11.75 g, 102.6 mmol)를 첨가하였다. 생성된 슬러리를 여과하고 고체를 테트라하이드로푸란(40 mL)으로 세척하였다. 합한 여액에 아지도트라이메틸실란(18.80 g, 163.2 mmol)을 첨가하였다. 유동 시스템은 2개의 공급 스트림, 즉 반응 용액 및 테트라부틸암모늄 플루오라이드(물 중 75 중량%)를 사용하였다. 시스템을 통해 즉각적인 화학량론이 중간체 66에 비해 테트라부틸암모늄 플루오라이드의 1.6 당량에서 유지되는 속도로 스트림을 합하였다. 합한 스트림을 아연 분진(14.6 g, 223.3 mmol) 및 암모늄 포름에이트(14.3 g, 226.8 mmol)로 예비 충전된 질소-퍼징된 반응기 내로 방출하였다. 혼합물을 반응이 완료될 때까지 격렬하게 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고 생성된 고체를 테트라하이드로푸란으로 세척하였다. 합한 여액을 포화 수성 칼륨 카보네이트(300 mL) 및 물(900 mL)로 희석하였다. 층을 분리하고, 수층을 메틸 t-부틸 에테르(5 x 700 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고 여과하였다. 여액을 감압하에 농축하여 황색 오일로서 중간체 67을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.03-7.98(m, 2 H), 7.42-7.37(m, 2 H), 3.97(t, J = 6.9 Hz, 1 H), 3.92(s, 3 H), 1.73-1.59(m, 4 H), 1.43-1.20(m, 2 H), 0.91(t, J = 7.3 Hz, 3 H).

중간체 68: (R)- 메틸 4-(1-((3- 메틸퀴놀린 -2-일)아미노)부틸) 벤조에이트

중간체 67을 사용하여, 중간체 4에 대하여 기재된 것과 유사한 방법으로 표제 화합물을 제조하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 8.01-7.96(m, 2 H), 7.64-7.59(m, 2 H), 7.55-7.49(m, 3 H), 7.43(ddd, J = 8.5, 7.0, 1.5 Hz, 1 H), 7.17(ddd, J = 8.0, 7.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.51(q, J = 7.2 Hz, 1 H), 4.79(d, J = 7.2 Hz, 1 H), 3.89(s, 3 H), 2.30(d, J = 0.8 Hz, 3 H), 2.04-1.82(m, 2 H), 1.39(s, 2 H), 1.02-0.94(m, 3 H).

중간체 69: (R)-에틸 3-(4-(1-((3- 메틸퀴놀린 -2-일)아미노)부틸) 벤즈아미도 )프로판오에이트

중간체 68을 사용하여, 중간체 6에 대하여 기재된 것과 유사한 방법으로 표제 화합물을 제조하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 7.73-7.68(m, 2 H), 7.64-7.59(m, 2 H), 7.54-7.49(m, 3 H), 7.43(ddd, J = 8.4, 6.9, 1.5 Hz, 1 H), 7.16(ddd, J = 8.0, 6.9, 1.2 Hz, 1 H), 6.78(t, J = 5.9 Hz, 1 H), 5.48(q, J = 7.2 Hz, 1 H), 4.78(d, J = 7.0 Hz, 1 H), 4.16(q, J = 7.0 Hz, 2 H), 3.71(q, J = 6.0 Hz, 2 H), 2.65-2.58(m, 2 H), 2.29(d, J = 1.0 Hz, 3 H), 2.04-1.82(m, 2 H), 1.53-1.30(m, 2 H), 1.26(t, J = 7.1 Hz, 3 H), 0.97(t, J = 7.4 Hz, 3 H).

중간체 70: 3-{4-[(3,3-다이메 틸 -사이클로 부틸 )-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 1

중간체 27에 대한 실험에 기재된 것과 유사한 방식으로, (+/-)-4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산(중간체 26, 1.0 당량), 1-하이드로벤조트라이아졸 하이드레이트(1.2 당량), N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(1.2 당량), β-알라닌 메틸 에스터 하이드로클로라이드(1.1 당량) 및 트라이에틸아민(1.3 당량)을 무수 다이클로로메탄 중에서 합하여 (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터를 수득하고, 이를 키랄 크로마토그래피를 통해 분할하여 표제 화합물을 수득하였다. 분취용 키랄 SFC: (키랄팩 AD-H 컬럼, 21 mm x 25 cm, 40% 메탄올/이산화탄소 용리액, 0.2% 이소프로필아민 개질제, 65.0 mL/분 유속, 2.71 체류 시간);¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.63-7.69(m, 2H), 7.58(t, J = 3.9 Hz, 2H), 7.45-7.51(m, 3H), 7.41(ddd, J = 8.4, 7.0, 1.6 Hz, 1H), 7.14(ddd, J = 8.0, 6.9, 1.2 Hz, 1H), 6.72(t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.31(dd, J = 9.7, 6.7 Hz, 1H), 4.75(d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.69(q, J = 6.2 Hz, 5H), 2.55-2.71(m, 3H), 2.28(d, J = 0.8 Hz, 3H), 1.95(ddd, J = 11.2, 8.0, 3.0 Hz, 1H), 1.78(dd, J = 11.1, 9.0 Hz, 1H), 1.64-1.72(m, 2H), 1.15(s, 3H), 1.08(s, 3H); MS(M+1): 460.4.

중간체 71: 3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 2

(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터를 키랄 크로마토그래피를 통해 분할하여 표제 화합물을 수득하였다. 분취용 키랄 SFC: (키랄팩 AD-H 컬럼, 21 mm x 25 cm, 40% 메탄올/이산화탄소 용리액, 0.2% 이소프로필아민 개질제, 65.0 mL/분 유속, 5.17 체류 시간); ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.67(d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.60(br. s., 2H), 7.46-7.55(m, 3H), 7.36-7.46(m, 1H), 7.15(br. s., 1H), 6.73(t, J = 5.7 Hz, 1H), 5.30(br. s., 1H), 4.73(br. s., 1H), 3.62-3.75(m, 5H), 2.56-2.74(m, 3H), 2.30(br. s., 3H), 1.95(ddd, J = 11.2, 8.1, 2.5 Hz, 1H), 1.75-1.88(m, 1H), 1.61-1.75(m, 2H), 1.14(s, 3H), 1.09(s, 3H); MS(M+1): 460.4.

중간체 72: (+/-)-4-[(3,3-다이메 틸 -사이클로 부틸 )-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산 에틸 에스터

중간체 25에 대한 실험에 기재된 것과 유사한 방식으로 중간체 29를 처리하여 표제 화합물을 제조하였다.

중간체 73: (+/-)-4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )((6-플루오로-3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)메틸)벤조산

중간체 26에 대한 실험에 기재된 것과 유사한 방식으로 (+/-)-4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조산 에틸 에스터(중간체 72)를 처리하여 표제 화합물을 제조하였다.

중간체 74: 3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(6- 플루오로 -3- 메틸 -퀴놀린-2-일 아미 노)- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 1

중간체 27에 대한 실험에 기재된 것과 유사한 방식으로, (+/-)-4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸) 벤조산(중간체 73, 1.0 당량), 1-하이드로벤조트라이아졸 하이드레이트(1.2 당량), N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(1.2 당량), β-알라닌 메틸 에스터 하이드로클로라이드(1.1 당량) 및 트라이에틸아민(1.3 당량)을 무수 다이클로로메탄 중에서 용해하여 (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터를 수득하고, 이를 키랄 크로마토그래피로 분할하여 표제 화합물을 수득하였다. 분취용 키랄 SFC: (키랄팩 AD-H 컬럼, 10 mm x 25 cm, 30% 프로판올/이산화탄소 용리액, 10.0 mL/분 유속, 4.16 체류 시간); ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.67(d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.50-7.59(m, 2H), 7.42-7.50(m, 2H), 7.08-7.22(m, 2H), 6.65-6.80(m, 1H), 5.18-5.28(m, 1H), 4.68-4.75(m, 1H), 3.62-3.75(m, 5H), 2.55-2.72(m, 3H), 2.28(s, 3H), 1.95(ddd, J = 11.1, 8.1, 3.0 Hz, 1H), 1.73-1.83(m, 1H), 1.61-1.73(m, 2H), 1.14(s, 3H), 1.09(s, 3H); MS(M+1): 478.3.

중간체 75: 3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(6- 플루오로 -3- 메틸 -퀴놀린-2-일 아미 노)- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 2

(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터를 키랄 크로마토그래피를 통해 분할하여 표제 화합물을 수득하였다. 분취용 키랄 SFC: (키랄팩 AD-H 컬럼, 10 mm x 25 cm, 30% 프로판올/이산화탄소 용리액, 10.0 mL/분 유속, 5.88 체류 시간); ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.67(d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.51-7.59(m, 2H), 7.47(d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.08-7.22(m, 2H), 6.66-6.78(m, 1H), 5.19-5.27(m, 1H), 4.72(d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.62-3.74(m, 5H), 2.52-2.71(m, 3H), 2.28(s, 3H), 1.90-2.00(m, 1H), 1.71-1.81(m, 1H), 1.62-1.71(m, 2H), 1.14(s, 3H), 1.08(s, 3H); MS(M+1): 478.3.

화학식 I의 화합물의 제조

실시예 1: (+)-3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산

테트라하이드로푸란(210 mL) 및 메탄올(210 mL) 중 중간체 6(17.66 g, 42.10 mmol)의 용액에 1 N 수성 수산화 나트륨(210 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 10 분 동안 교반하였다. 용액을 감압하에 농축하여 테트라하이드로푸란 및 메탄올을 제거하였다. 1 N 수성 염산을 pH 4.75까지 적가하였다. 생성된 슬러리를 여과하고 고체를 물(2 x 50 mL)로 세척하였다. 고체를 진공 오븐에서 16 시간 동안 건조하였다. 생성된 고체를 물 및 에틸 아세테이트 중에서 슬리리하였다. 혼합물을 여과하고 생성된 이상 여액을 분리하였다. 수층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 이어서, 수층을 사용하여 여과된 고체를 슬러리하였다. 1 N 수성 NaOH를 사용하여 pH를 4로 조정한 후, 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 고체가 남지 않을 때까지 여과, 분리, 추출, 재슬러리 및 pH 조정의 과정을 반복하였고, 박층 크로마토그래피는 수층에 잔여 생성물이 없음을 나타내었다. 합한 유기층을 감압하에 농축하고 진공 오븐에서 건조하여 (+)-3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판산(실시예 1)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.18(s, 1 H), 8.40(t, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.74(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.68(s, 1 H), 7.57(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.53(d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.45-7.40(m, 1 H), 7.40-7.33(m, 1 H), 7.13-7.06(m, 1 H), 6.62(br. s., 1 H), 5.46-5.35(m, 1 H), 3.48-3.38(m, 2 H), 2.48(t, J = 7.1 Hz, 2 H), 2.32(s, 3 H), 2.06-1.93(m, 1 H), 1.85-1.74(m, 1 H), 1.52-1.38(m, 1 H), 1.38-1.23(m, 1 H), 0.92(t, J = 7.3 Hz, 3 H); HPLC: XBridge C₁₈ 150 mm x 4.6 mm, 5 μm 컬럼, 유속 1.50 mL/분, 11 분간에 걸쳐서 5% 아세토니트릴/물(0.1% 트라이플루오로아세트산 개질제) 내지 100% 아세토니트릴의 선형 구배, 체류 시간 = 6.34 분; MS(M+1): 406.5.

실시예 1의 (+)-3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산 하이드로클로라이드염의 추가 제조 방법은 하기와 같다:

테트라하이드로푸란(161 mL) 및 메탄올(161 mL) 중 중간체 69(33.55 g, 77.38 mmol)의 용액에 수산화 나트륨(물 중 1 N, 161 mL, 161 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 용액을 10 분 동안 교반하고 감압하에 농축하여 테트라하이드로푸란 및 메탄올을 제거하였다. 염산(물 중 1 N, 130 mL)을 격렬하게 교반하면서 적가하였다. 1.5 시간 후, 슬러리를 포화 수성 나트륨 클로라이드(600 mL)로 희석하고 다이클로로메탄(3 x 1000 mL)으로 추출하였다. 이어서, 수층의 pH를 염산을 사용하여 5로 산성화하고 다이클로로메탄(5 x 500 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고 여과하였다. 여액을 감압하에 농축하여 황색 점착성 고체를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.18(s, 1 H), 8.40(t, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.74(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.68(s, 1 H), 7.57(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.53(d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.45-7.40(m, 1 H), 7.40-7.33(m, 1 H), 7.13-7.06(m, 1 H), 6.62(br. s., 1 H), 5.46-5.35(m, 1 H), 3.48-3.38(m, 2 H), 2.48(t, J = 7.1 Hz, 2 H), 2.32(s, 3 H), 2.06-1.93(m, 1 H), 1.85-1.74(m, 1 H), 1.52-1.38(m, 1 H), 1.38-1.23(m, 1 H), 0.92(t, J = 7.3 Hz, 3 H); HPLC: XBridge C₁₈ 150 mm x 4.6 mm, 5 μm 컬럼, 유속 1.50 mL/분, 11 분간에 걸쳐서 5% 아세토니트릴/물(0.1% 트라이플루오로아세트산 개질제) 내지 100% 아세토니트릴의 선형 구배, 체류 시간 = 6.34 분; MS(M+1): 406.5.

이 황색 점착성 고체에 다이클로로메탄(1520 mL)을 첨가하였다. 고체를 완전히 용해하는데 혼합물의 경미한 가온이 요구되었다. 염화 수소(다이에틸 에테르 중 2 M, 37.7 mL, 75.5 mmol)를 30 분간에 걸쳐서 적가하였다. 생성된 백색 슬러리를 10 분 동안 교반한 후 여과하였다. 생성된 고체를 진공하에 건조하였다. 고체를 물(250 mL) 중에서 현탁하고 60 ℃로 가열하였다. 모든 고체가 용해될 때까지 교반하면서 메탄올(280 mL)을 천천히 첨가하였다. 용액을 실온으로 가온시켰다. 11 시간 후, 혼합물을 0 ℃로 2 시간에 걸쳐서 냉각하였다. 생성된 백색 고체를 여과하고 고체를 진공하에 건조시 실시예 1의 하이드로클로라이드염을 수득하였다. 여액을 진공하에 약 300 mL의 총 부피까지 농축하고 생성된 슬러리를 여과하여 추가 고체를 수득할 수 있다.

실시예 2: (-)-3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산

중간체 7로부터 실시예 1과 유사한 방식으로 실시예 2를 제조하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.18(s, 1 H), 8.40(t, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.74(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.68(s, 1 H), 7.57(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.53(d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.45-7.40(m, 1 H), 7.40-7.33(m, 1 H), 7.13-7.06(m, 1 H), 6.62(br. s., 1 H), 5.46-5.35(m, 1 H), 3.48-3.38(m, 2 H), 2.48(t, J = 7.1 Hz, 2 H), 2.32(s, 3 H), 2.06-1.93(m, 1 H), 1.85-1.74(m, 1 H), 1.52-1.38(m, 1 H), 1.38-1.23(m, 1 H), 0.92(t, J = 7.3 Hz, 3 H); HPLC: XBridge C₁₈ 150 mm x 4.6 mm, 5 μm 컬럼, 유속 1.50 mL/분, 11 분간에 걸쳐서 5% 아세토니트릴/물(0.1% 트라이플루오로아세트산 개질제) 내지 100% 아세토니트릴의 선형 구배, 체류 시간 = 6.34 분; MS(M+1): 406.5.

실시예 3: (+/-)-3-{4-[3- 메틸 -1-(퀴놀린-3- 일아미노 )-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

중간체 12를 용해하여 1,4-다이옥산 중 0.1 M 용액을 형성하였다. 3-브로모-퀴놀린(100 μmol, 1.0 당량)을 8 mL 바이알에 첨가한 후 중간체 12의 다이옥산 용액(1 mL, 100 μmol, 1.0 당량)을 첨가하였다. 상기 바이알에 나트륨 t-부톡사이드(19 mg, 200 μmol, 2.0 당량), 브렛포스-전촉매(4 mg, 5 μmol, 0.05 당량) 및 브렛포스(3 mg, 5 μmol, 0.05 당량)를 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 질소로 퍼징하고, 80 ℃에서 16 시간 동안 진탕하였다. 상기 바이알에 물(100 μL)을 첨가하여 반응 생성물을 급랭하였다. 다이옥산을 스피드백(Speedvac)으로 제거하였다. 포화 수성 NaHCO₃(2 mL)을 첨가하고 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(2 mL x 2)로 추출하였다. 유기상을 수집하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 여액을 스피드백으로 농축하였다. 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 개질제) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 DIKMA 다이아몬실(2) C₁₈ 200 x 20 mm, 5 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.356 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)로 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물로 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 506.

실시예 4: (+/-)-3-{4-[1-(7- 플루오로 - 퀴나졸린 -2- 일아미노 )-3- 메틸 -부틸]-벤조일아미노}-프로피온산

단계 A: 중간체 12를 용해하여 DMSO 중 0.1 M 용액을 형성하였다. 2-클로로-7-플루오로-퀴나졸린(100 μmol, 1.0 당량)을 8 mL 바이알에 첨가한 후 중간체 12의 DMSO 용액(1 mL, 100 μmol, 1.0 당량)을 첨가하였다. 다이이소프로필에틸아민(35 μL, 200 μmol, 2.0 당량)을 첨가하고 바이알을 캡핑하고 80 ℃에서 16 시간 동안 진탕하였다. 동결 건조하여 용매를 제거하고 잔사를 다음 단계에서 사용하였다.

단계 B: 다이클로로메탄(v/v = 1:4) 중 트라이플루오로아세트산의 용액을 제조하였다. 이 용액(1.0 mL)을 단계 A로부터의 잔사를 함유하는 바이알에 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고 30 ℃에서 2 시간 동안 진탕하였다. 용매를 스피드백으로 제거하였다. 물(0.225% 포름산 개질제) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 아젤라 베누실(Agella Venusil) ASB C₁₈ 150 x 21.2 mm x 5 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[1-(7-플루오로-퀴나졸린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.456 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 425.

실시예 5: (+/-)-3-{4-[3- 메틸 -1-(퀴놀린-2- 일아미노 )-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

2-클로로-퀴놀린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니(Phenomenex Gemini) C₁₈ 250 x 21.2 mm, 8 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.263 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 406.

실시예 6: (+/-)-3-{4-[1-(8- 메톡시 -퀴놀린-2- 일아미노 )-3- 메틸 -부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

2-클로로-8-메톡시-퀴놀린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니 C₁₈ 250 x 21.2 mm, 8 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[1-(8-메톡시-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.342 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 436.

실시예 7: (+/-)-3-{4-[3- 메틸 -1-( 퀴녹살린 -2- 일아미노 )-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

2-클로로-퀴녹살린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니 C₁₈ 250 x 21.2 mm, 8 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴녹살린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.689 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 407.

실시예 8: (+/-)-3-{4-[3- 메틸 -1-(3- 메틸 - 퀴녹살린 -2- 일아미노 )-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

2-클로로-3-메틸-퀴녹살린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 개질제) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 DIKMA 다이아몬실(2) C₁₈ 200 x 20 mm, 5 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(3-메틸-퀴녹살린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.837 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 421.

실시예 9: (+/-)-3-{4-[1-(이소퀴놀린-3- 일아미노 )-3- 메틸 -부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산 트라이플루오로아세테이트

3-클로로-이소퀴놀린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. 물(0.1% 트라이플루오로아세트산 개질제) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 DIKMA 다이아몬실(2) C₁₈ 200 x 20 mm, 5 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[1-(이소퀴놀린-3-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산 트라이플루오로아세테이트를 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.423 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 406.

실시예 10: (+/-)-3-{4-[3- 메틸 -1-(4- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

2-클로로-4-메틸-퀴놀린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니 C₁₈ 250 x 21.2 mm, 10 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(4-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.368 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 420.

실시예 11: (+/-)-3-{4-[3- 메틸 -1-(3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

2-클로로-3-메틸-퀴놀린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니 C₁₈ 250 x 21.2 mm, 10 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.326 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 420.

실시예 12: (+/-)-3-{4-[1-(7- 플루오로 -4- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )-3- 메틸 -부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

2-클로로-7-플루오로-4-메틸-퀴놀린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니 C₁₈ 250 x 21.2 mm, 8 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[1-(7-플루오로-4-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.404 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 438.

실시예 13: (+/-)-3-{4-[1-(8- 클로로 -퀴놀린-2- 일아미노 )-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산

2,8-다이클로로-퀴놀린을 사용하여, 실시예 3과 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니 C₁₈ 250 x 21.2 mm, 8 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[1-(8-클로로-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.462 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 440.

실시예 14: (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴나졸린-2- 일아미노 )-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산

2-클로로-퀴나졸린을 사용하여, 실시예 4와 유사한 과정으로 이 실시예를 합성하였다. NH₄OH(pH 10) 중 아세토니트릴의 구배를 사용하여 용리하는 페노메넥스 게미니 C₁₈ 250 x 21.2 mm, 10 μm 컬럼 상에서 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴나졸린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.401 분(Xbridge C₁₈ 2.1 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 10% 아세토니트릴(0.01875% 트라이플루오로아세트산 개질제)/물(0.0375% 트라이플루오로아세트산 개질제)을 0.5 분 동안 보유, 3.5 분간에 걸쳐서 100% 아세토니트릴로 선형 구배, 0.3 분간에 걸쳐서 10% 아세토니트릴/물로 선형 구배, 0.4 분 동안 10% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 0.8 mL/분); MS(M+1): 407.

실시예 15: (+/-)-3-(4-(3- 메틸 -1-(7-( 트라이플루오로메틸 )퀴놀린-2- 일아미노 )부틸) 벤즈아미도 )프로판산

자석 교반기가 장착된 10 mL 바이알을 중간체 17(150 mg, 0.65 mmol), 중간체 12(240 mg, 0.72 mmol), 2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2'-4'-6'-트라이-i-프로필-1,1'-바이페닐(17 mg, 0.032 mmol), Pd(OAc)₂(26 mg, 0.032 mmol), 나트륨 t-부톡사이드(153 mg, 1.37 mmol) 및 THF(7 mL)로 채웠다. 바이알을 N₂로 퍼징하고, 밀봉하고, 90 ℃로 밤새 가열하였다. 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 건조 증발시켰다. 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 무색 오일로서 (+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(7-(트라이플루오로메틸)퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산(26.5 mg, 8.6%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, MeOD) δ 7.79(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.64(m, 4H), 7.44(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.24(d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.83(d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.29-5.28(m, 1H), 3.52-3.49(m, 2H), 2.51-2.48(m, 2H), 1.8-1.73(m , 1 H), 1.70-1.64(m, 1H), 1.59-1.52(m, 1H), 0.94-0.90(m, 6H). MS(M+1) =474.2.

실시예 16: (+/-)-3-(4-(3- 메틸 -1-(6-( 트라이플루오로메틸 )퀴놀린-2- 일아미노 )부틸) 벤즈아미도 )프로판산

자석 교반기가 장착된 50 mL 바이알을 중간체 17(150 mg, 0.65 mmol), 중간체 12(240 mg, 0.72 mmol), 2-(다이사이클로헥실포스피노)-3,6-다이메톡시-2'-4'-6'-트라이-i-프로필-1,1'-바이페닐(17 mg, 0.032 mmol), Pd(OAc)₂(26 mg, 0.032 mmol), 나트륨 t-부톡사이드(153 mg, 1.37 mmol) 및 THF(7 mL)로 채웠다. 바이알을 N₂로 퍼징하고, 밀봉하고, 90 ℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 건조 농축하였다. 조질 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 무색 고체로서 (+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(6-(트라이플루오로메틸)퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산(20 mg, 6.5%)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 7.91(d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.75(d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.62(m, 2H), 7.53(d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.90(d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.40(br. s., 1H), 3.62-3.58(m, 2H), 2.62-2.58(s, 2H), 1.89-1.83(m , 1 H), 1.82-1.68(m, 1H), 1.65-1.62(m, 1H), 1.04-1.00(m, 6H). MS(M+1) =474.0.

실시예 17: (+/-)-3-(4-(3- 메틸 -1-(2- 메틸퀴놀린 -3- 일아미노 )부틸) 벤즈아미도 ) 프로판산

아세토니트릴(10 mL) 중 중간체 18(200 mg, 1.26 mmol), 중간체 19(476 mg) 및 칼륨 카보네이트(349 mg, 2.53 mmol)의 혼합물을 밤새 80 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 나트륨 클로라이드(20 mL) 내에 붓고 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(2 x 30 mL) 및 물(30 mL)로 세척한 후, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하였다. 조질 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 에틸 4-(3-메틸-1-(2-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤조에이트(50 mg, 12%)를 수득하였다. 이 물질을 메탄올(6 mL) 중에서 용해하고 0 ℃로 냉각하였다. 수성 2 N 수산화 나트륨(6 mL, 12 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 환류 가열하고 90 분 동안 교반하였다. 1 N 수성 HCl 용액을 첨가하여 혼합물의 pH를 3으로 산성화하고 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하여 황색 고체로서 조질 4-(3-메틸-1-(2-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤조산(42 mg, 94%)을 수득하였다. 조질산을 DMF(6 mL) 중에서 용해하였다. HATU(114 mg, 0.3 mmol), 다이이소프로필아민(40 mg, 0.3 mmol) 및 메틸 3-아미노프로피오네이트 하이드로클로라이드(27 mg, 0.18 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 염수(20 mL) 내에 붓고 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하여 오일로서 조질 메틸 3-(4-(3-메틸-1-(2-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판오에이트(55 mg, 98%)를 수득하였다. 조질 에스터를 THF(4 mL) 중에서 용해하고 0 ℃로 냉각하였다. 2 N 수성 리튬 하이드록사이드(4 mL, 8 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 수성 1 N HCl을 첨가하여 혼합물의 pH를 3으로 산성화하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 농축하였다. 물(0.225% 포름산 개질제) 중 22% 내지 42% 아세토니트릴을 사용하여 용리하는 페노메넥스 시네르기(Phenomenex Synergi) C₁₈ 150 x 30 mmx 4 μm 컬럼 상에서 분취용 HPLC로 정제하여 황색 고체로서 (+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(2-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산(17.2 mg)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 7.76-7.78(m, 3H), 7.57(d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.50-7.52(m, 1H), 7.40-7.35(m, 2H), 7.03(s, 1H), 4.69-4.65(m, 1H), 3.62-3.58(m, 2H), 2.75(s, 3H), 2.59-2.62(m, 2H), 2.03-1.97(m, 1H), 1.86-1.83(m, 1H), 1.72-1.66(m, 1H), 1.07(d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.00(d, J = 6.4 Hz, 3H). MS(M+1) = 420.1.

실시예 18: (+/-)-3-(4-(3- 메틸 -1-(4- 메틸퀴놀린 -3- 일아미노 )부틸) 벤즈아미도 ) 프로판산

메탄올(4 mL) 중 중간체 21(40 mg, 0.11 mmol)의 0 ℃ 용액에 2 N 수성 수산화 나트륨(4 mL, 8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 가열하고 1.5 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 1 N 수성 HCl을 첨가하여 혼합물의 pH를 3으로 산성화하고 에틸 아세테이트(30 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 황색 고체를 수득하고, 이를 DMF(5 mL) 중에서 용해하였다. HATU(98 mg, 0.25 mmol), 다이이소프로필에틸아민(32 mg, 0.25 mmol) 및 메틸 3-아미노프로피오네이트 하이드로클로라이드(22 mg, 0.15 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 염수(20 mL) 내에 붓고 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 오일(50 mg)을 수득하고, 이를 THF(4 mL) 중에서 용해하였다. 2 N 수성 리튬 하이드록사이드(4 mL, 8 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 1 N 수성 HCl를 첨가하여 혼합물의 pH를 3으로 산성화하고 에틸 아세테이트(30 mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고 농축하였다. 물(0.225% 포름산 개질제) 중 49% 내지 69% 아세토니트릴을 사용하여 용리하는 페노메넥스 시네르기 C₁₈ 150 x 30 mm x 4 μm 컬럼 상에서 HPLC로 정제하여 황색 고체로서 3-(4-(3-메틸-1-(4-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산(12.2 mg)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 8.26(s, 1H), 8.02(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.74-7.77(m, 3H), 7.54-7.45(m, 4H), 4.82-4.78(m, 1H), 3.57-3.61(m, 2H), 2.58-2.62(m, 5H), 2.03-1.97(m, 1H), 1.86-1.83(m, 1H), 1.73-1.68(m, 1H), 1.07(d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.00(d, J = 6.4 Hz, 3H). MS(M+1) = 420.1.

실시예 19: (+/-)-3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산

(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 에틸 에스터(중간체 27)(36 mg, 0.076 mmol)를 테트라하이드로푸란(3 mL) 및 메탄올(1 mL) 중에서 용해하고, 1.0 M 수산화 나트륨(2 mL)을 첨가하였다. 이를 용액으로서 실온에서 45 분 동안 교반한 후 1 N HCl을 첨가하여 pH를 4.5로 조정하였다. 이를 에틸 아세테이트로 2회 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하였다. 용액을 진공에서 농축하여 에틸 아세테이트를 갖는 백색 고체로서 불순한 (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산(40.8 mg)을 수득하였다. MS(M+1): 446.3. HPLC: XBridge C₁₈ 150 mm x 4.6 mm, 5 μm 컬럼, 유속 1.50 mL/분, 11 분간에 걸쳐서 5% 아세토니트릴/물(0.1% 트라이플루오로아세트산 개질제) 내지 100% 아세토니트릴의 선형 구배, 체류 시간 = 7.046 분.

실시예 20: (+/-)-3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(6- 플루오로 -3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산

중간체 29로부터 중간체 27과 유사한 방식으로 제조된, (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 에틸 에스터(14.3 mg, 0.029 mmol)를 테트라하이드로푸란(1.5 mL) 및 메탄올(0.5 mL) 중에서 용해하고, 1.0 M 수산화 나트륨(1 mL)을 첨가하였다. 이를 용액으로서 실온에서 20 분 동안 교반한 후 1 N HCl을 첨가하여 pH 5로 조정하였다. 이를 에틸 아세테이트로 2회 추출하고 합한 유기물을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산(10 mg)을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.3998 분(워터스 아틀란틱(Waters Atlantic) dC₁₈ 4.6 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 4.0 분간에 걸쳐서 5% 아세토니트릴/물(0.05% 트라이플루오로아세트산 개질제) 선형 구배 내지 95% 아세토니트릴/물, 1.0 분 동안 95% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 2.0 mL/분); MS(M+1): 464.0.

실시예 21: (+/-)-3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(7- 플루오로 -3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산

중간체 31로부터 실시예 20과 유사한 방식으로 실시예 21을 제조하였다. 역상 HPLC로 정제하여 (+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(7-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산(9.6 mg)을 수득하였다. 분석적인 LCMS: 체류 시간 2.4302 분(워터스 아틀란틱 dC₁₈ 4.6 x 50 mm, 5 μm 컬럼; 4.0 분간에 걸쳐서 5% 아세토니트릴/물(0.03% NH₄OH 개질제) 선형 구배 내지 95% 아세토니트릴/물, 1.0 분 동안 95% 아세토니트릴/물에서 보유; 유속 2.0 mL/분); MS(M+1): 464.0.

실시예 22: (+/-)-3-(4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(7-플루오로 퀴놀린 -3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판산

에틸 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판오에이트(6.20 mg, 0.0130 mmol)를 함유하는 플라스크에 테트라하이드로푸란(0.0330 mL), 메탄올(0.0330 mL) 및 1 N 수산화 나트륨(0.0330 mL, 0.0330 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 18 시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 이어서, 1 N 염산(0.0330 mL)을 적가하여 pH가 3이 되게 하였다. 수층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 고체로서 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판산(3.5 mg, 60% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD, δ): 8.53(d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.45(t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.80-7.72(m, 2H), 7.59-7.51(m, 3H), 7.43(dd, J = 10.0, 2.6 Hz, 1H), 7.23(td, J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.99(d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.38(d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.67-3.57(m, 2H), 2.67-2.60(m, 3H), 2.16-2.06(m, 1H), 1.78(d, J = 2.5 Hz, 2H), 1.63-1.52(m, 1H), 1.18(s, 3H), 1.13(s, 3H). (M+1): 450.3.

실시예 23: (+/-)-3-(4-((3,3- 다이메틸사이클로부틸 )(6- 플루오로퀴놀린 -3- 일아미노 ) 메틸 ) 벤즈아미도 )프로판산

에틸 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판오에이트(7.4 mg, 0.0420 mmol)를 함유하는 플라스크에 테트라하이드로푸란(0.105 mL), 메탄올(0.105 mL) 및 1 N 수산화 나트륨(0.105 mL, 0.105 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 4.5 시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 이어서, 1 N 염산(0.105 mL)을 적가하여 pH가 3이 되게 하였다. 수층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 고체로서 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판산(6.7 mg, 99% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD, δ): 8.46(d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.83-7.72(m, 3H), 7.57-7.50(m, 2H), 7.17-7.09(m, 2H), 6.85(d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.38(d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.62(t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.69-2.54(m, 3H), 2.11(ddd, J = 11.4, 7.7, 4.2 Hz, 1H), 1.77(ddd, J = 11.2, 9.0, 2.6 Hz, 2H), 1.63-1.52(m, 1H), 1.18(s, 3H), 1.13(s, 3H). (M+1): 450.3.

실시예 24: 3-(4-((3,3-다이메 틸사이클로부틸 )(퀴놀린-3- 일아미노 )메틸)벤즈아미도) 프로판산

에틸 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판오에이트(11.9 mg, 0.0650 mmol)를 함유하는 플라스크에 테트라하이드로푸란(0.0650 mL), 메탄올(0.0650 mL) 및 1 N 수산화 나트륨(0.0650 mL, 0.0650 mmol)을 첨가하였다. 반응 생성물을 18 시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 생성물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 이어서, 1 N 염산(0.0650 mL)을 적가하여 pH가 3이 되게 하였다. 수층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 고체로서 3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도)프로판산(9.3 mg, 83% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ 8.50(d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.45(t, J = 5.8 Hz, 1H), 7.81-7.70(m, 3H), 7.61-7.52(m, 2H), 7.52-7.41(m, 1H), 7.41-7.21(m, 2H), 6.93(d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.39(d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.69-3.55(m, 2H), 2.71-2.51(m, 3H), 2.11(ddd, J = 11.4, 7.8, 4.1 Hz, 1H), 1.85-1.70(m, 2H), 1.57(ddd, J = 11.3, 7.8, 4.1 Hz, 1H), 1.18(s, 3H), 1.13(s, 3H). MS(M+1): 432.3.

실시예 25: 3-{4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3- 일아미노 )-부틸]-벤조일아미노} 프로피온산

THF/MeOH(1 mL)의 1:1 혼합물 중 3-{4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터(44 mg, 0.1 mM)의 혼합물에 1 N NaOH 용액(0.25 mL, 0.25 mM)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 유기 용매를 제거하였다. 수용액을 DCM(5 mL)으로 희석하고, 1 N HCl 용액으로 pH 3 내지 4까지 산성화하였다. 유기 용액을 분리하고 수용액을 10% i-PrOH-DCM(3 x 5 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하여 황색 고체 생성물(약 100%)을 수득하였다. ¹H NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.93(d, J = 6.59 Hz, 3 H) 0.98(d, J = 6.34 Hz, 3 H) 1.56(dt, J = 13.30, 6.77 Hz, 1 H) 1.71(dt, J = 13.36, 6.62 Hz, 1 H) 1.76-1.85(m, 1 H) 2.46(t, J = 7.07 Hz, 2 H) 2.59(s, 3 H) 3.36-3.46(m, 2 H) 4.64(t, J = 7.07 Hz, 1 H) 7.10(br. s., 1 H) 7.21(br. s., 1 H) 7.26(d, J = 6.83 Hz, 1 H) 7.32(t, J = 7.56 Hz, 1 H) 7.45(d, J = 8.05 Hz, 1 H) 7.53(d, J = 8.05 Hz, 2 H) 7.76(d, J = 8.29 Hz, 2 H) 8.42(t, J = 5.49 Hz, 1 H) 8.60(d, J = 2.44 Hz, 1 H), 1개의 양성자를 교환하였다. LCMS: 420.2(M+1).

실시예 26: 3-{4-[3- 메틸 -1-(7- 메틸 -퀴놀린-3- 일아미노 )-부틸]- 벤조일아미노 }-프로피온산

THF/MeOH(1 mL)의 1:1 혼합물 중 3-{4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터(12)(49 mg, 0.11 mM)의 혼합물에 1 N NaOH 용액(0.283 mL, 0.283 mM)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 유기 용매를 제거하였다. 수용액을 DCM(5 mL)으로 희석하고, 1 N HCl 용액으로 pH 3 내지 4까지 산성화하였다. 유기 용액을 분리하고 수용액을 10% i-PrOH-DCM(3 x 5 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 농축하여 황색 고체 생성물(약 78%)을 수득하였다. ¹H NMR(500 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 0.93(d, J = 6.59 Hz, 3 H) 0.98(d, J = 6.59 Hz, 3 H) 1.53-1.60(m, 1 H) 1.70(dt, J = 13.72, 6.68 Hz, 1 H) 1.76-1.83(m, 1 H) 2.43(s, 3 H) 2.47(t, J = 7.07 Hz, 2 H) 3.35-3.46(m, 2 H) 4.65(t, 1 H) 7.23(br. s., 1 H) 7.37(d, J = 8.54 Hz, 1 H) 7.41(br. s., 1 H) 7.54(d, J = 8.29 Hz, 2 H) 7.59-7.67(m, 2 H) 7.76(d, J = 8.29 Hz, 2 H) 8.43(t, J = 5.49 Hz, 1 H) 8.61(d, J = 2.68 Hz, 1 H), 1개의 양성자를 교환하였다. LCMS: m/z 420.2(M+1).

실시예 27: N-(4-{3- 메틸 -1-[(6- 메틸퀴놀린 -3-일)아미노]부틸} 벤조일 )-β-알라닌

3-브로모-6-메틸퀴놀린을 사용하여, 실시예 25의 3-{4-[3-메틸-1-(8-메틸-퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산과 유사하게 표제 화합물을 제조하였다. m/z(M+1) = 420.2.

실시예 28: 3-(4-((6,7- 다이플루오로퀴놀린 -3- 일아미노 )(3,3- 다이메틸사이클로부틸 ) 메틸 ) 벤즈아미도 ) 프로판산

실시예 27과 유사한 방법으로 표제 화합물을 제조할 수 있다.

실시예 29: (+/-)-3-(4-(4,4,4- 트라이플루오로 -1-(퀴놀린-3- 일아미노 )부틸)벤즈아미도) 프로판산

메탄올(0.78 mL) 및 테트라하이드로푸란(0.78 mL) 중 에틸(+/-)-3-(4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판오에이트(74 mg, 0.16 mmol)의 용액에 1 N 수성 수산화 나트륨(0.78 mL, 0.78 mmol)을 첨가하였다. 10 분 후, 용액을 감압하에 농축하여 메탄올 및 테트라하이드로푸란을 제거하였다. 이어서, 1 N 수성 염산을 사용하여 혼합물의 pH를 4까지 산성화하고 포화 수성 나트륨 클로라이드(10 mL)로 희석하였다. 수층을 에틸 아세테이트(3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고 여액을 감압하에 농축하여 (+/-)-3-(4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.18(br. s., 1 H), 8.56(d, J = 2.7 Hz, 1 H), 8.44(t, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.78(d, J = 8.4 Hz, 2 H), 7.76-7.72(m, 1 H), 7.54(d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.52-7.48(m, 1 H), 7.37-7.27(m, 2 H), 7.03(d, J = 7.8 Hz, 1 H), 6.86(d, J = 2.5 Hz, 1 H), 4.73-4.61(m, 1 H), 3.46-3.37(m, 2 H), 2.47(t, J = 7.0 Hz, 2 H), 2.39-2.23(m, 1 H), 2.14-1.92(m, 2 H), 1.20-1.13(m, 1 H); (M+1): 446.2.

실시예 30: 3-(4-(3- 메틸 -1-((3- 메틸퀴놀린 -2-일)아미노)부틸) 벤즈아미도 ) 프로판산, 이성질체 1

테트라하이드로푸란(1.1 mL) 및 메탄올(1.1 mL) 중 에틸 3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판오에이트, 이성질체 1(96.2 mg, 0.215 mmol)의 용액에 1 N 수성 수산화 나트륨(1.1 mL, 1.1 mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 10 분 동안 교반하였다. 용액을 감압하에 농축하여 테트라하이드로푸란 및 메탄올을 제거하였다. 1 N 수성 염산을 pH 6까지 적가하였다. 수층을 에틸 아세테이트(4 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 감압하에 농축하고 진공 오븐에서 건조하여 단일 이성질체로서 3-(4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.67-8.57(m, 1 H), 7.73-7.66(m, 3 H), 7.59-7.51(m, 3 H), 7.45-7.40(m, 1 H), 7.39-7.32(m, 1 H), 7.09(ddd, J = 7.9, 6.7, 1.4 Hz, 1 H), 6.61(d, J = 8.6 Hz, 1 H), 5.56-5.45(m, 1 H), 3.40-3.33(m, 2 H), 2.34-2.25(m, 5 H), 2.01-1.90(m, 1 H), 1.71-1.57(m, 2 H), 0.96(d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.91(d, J = 6.2 Hz, 3 H); 분석적인 키랄 SFC(키랄팩 AD-H 컬럼, 4.6 mm x 25 cm, 25% 메탄올/이산화탄소 용리액, 0.2% 이소프로필아민 개질제, 3.75 분 체류 시간); MS(M+1): 420.3.

실시예 31: 3-(4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판산, 이성질체 2

3-(4-(1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판오에이트 메틸 및 에틸 에스터 혼합물, 이성질체 2로부터 실시예 30과 유사한 방법으로 3-(4-(3-메틸-1-((3-메틸퀴놀린-2-일)아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산, 이성질체 2를 제조하였다. ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.86-8.76(m, 1 H), 7.73-7.65(m, 3 H), 7.59-7.49(m, 3 H), 7.45-7.39(m, 1 H), 7.39-7.33(m, 1 H), 7.09(ddd, J = 8.0, 6.7, 1.2 Hz, 1 H), 6.61(d, J = 8.0 Hz, 1 H), 5.56-5.45(m, 1 H), 3.36-3.29(m, 2 H), 2.30(d, J = 1.0 Hz, 3 H), 2.17(t, J = 6.9 Hz, 2 H), 2.01-1.90(m, 1 H), 1.71-1.57(m, 2 H), 0.96(d, J = 6.5 Hz, 3 H), 0.91(d, J = 6.3 Hz, 3 H); 분석적인 키랄 SFC(키랄팩 AD-H 컬럼, 4.6 mm x 25 cm, 25% 메탄올/이산화탄소 용리액, 0.2% 이소프로필아민 개질제, 4.81 분 체류 시간); MS(M+1): 420.3.

실시예 32: 3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산, 이성질체 1

실시예 19에 기재된 것과 유사한 방식으로, 3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 1(중간체 70)을 메탄올/THF 중 1 N NaOH(2.5 당량)로 처리하여 표제 화합물을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다. 분석적인 키랄 SFC: (키랄팩 AD-H 컬럼, 4.6 mm x 25 cm, 30% 메탄올/이산화탄소 용리액, 2.5 mL/분 유속, 2.78 체류 시간); ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.66(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.56-7.63(m, 2H), 7.44-7.52(m, 3H), 7.37-7.44(m, 1H), 7.11-7.19(m, 1H), 5.30(d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.67(q, J = 5.9 Hz, 2H), 2.62-2.70(m, 3H), 2.29(s, 3H), 1.94(ddd, J = 11.2, 8.2, 3.0 Hz, 1H), 1.70-1.82(m, 1H), 1.62-1.70(m, 2H), 1.13(s, 3H), 1.08(s, 3H); MS(M+1): 446.4.

실시예 33: 3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(3- 메틸 -퀴놀린-2- 일아미노 )- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산, 이성질체 2

실시예 19에 기재된 것과 유사한 방식으로, 3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 2(중간체 71)를 메탄올/THF 중 1 N NaOH(2.5 당량)로 처리하여 표제 화합물을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다. 분석적인 키랄 SFC: (키랄팩 AD-H 컬럼, 4.6 mm x 25 cm, 30% 메탄올/이산화탄소 용리액, 2.5 mL/분 유속, 4.60 체류 시간); ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.66(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.58-7.63(m, 2H), 7.44-7.51(m, 3H), 7.37-7.44(m, 1H), 7.10-7.18(m, 1H), 6.81(t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.30(d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.67(q, J = 5.9 Hz, 2H), 2.52-2.70(m, 3H), 2.29(s, 3H), 1.94(ddd, J = 11.1, 8.0, 3.1 Hz, 1H), 1.72-1.82(m, 1H), 1.63-1.72(m, 2H), 1.13(s, 3H), 1.08(s, 3H); MS(M+1): 446.3.

실시예 34: 3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(6- 플루오로 -3- 메틸 -퀴놀린-2-일 아미 노)- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산, 이성질체 1

실시예 19에 기재된 것과 유사한 방식으로, 3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 1(중간체 74)을 메탄올/THF 중 1 N NaOH(2.5 당량)로 처리하여 표제 화합물을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다. 분석적인 키랄 SFC: (키랄팩 IC 컬럼, 4.6 mm x 25 cm, 25% 메탄올/이산화탄소 용리액, 2.5 mL/분 유속, 4.33 체류 시간); ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.14(s, 1H), 8.38(br. s., 1H), 7.63-7.76(m, 3H), 7.55(d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.39-7.50(m, 1H), 7.30-7.39(m, 1H), 7.21-7.30(m, 1H), 6.45-6.60(m, 1H), 5.11-5.28(m, 1H), 3.41(dd, J = 12.7, 7.1 Hz, 2H), 2.75-2.91(m, 1H), 2.46(t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.29(s, 3H), 1.92-2.00(m, 1H), 1.56-1.67(m, 2H), 1.42-1.55(m, 1H), 1.12(s, 3H), 1.07(s, 3H); MS(M+1): 464.3.

실시예 35: 3-{4-[(3,3- 다이메틸 - 사이클로부틸 )-(6- 플루오로 -3- 메틸 -퀴놀린-2-일 아미 노)- 메틸 ]- 벤조일아미노 }-프로피온산, 이성질체 2

실시예 19에 기재된 것과 유사한 방식으로 3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산 메틸 에스터, 이성질체 2(중간체 75)를 메탄올/THF 중 1 N NaOH(2.5 당량)로 처리하여 표제 화합을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다. 분석적인 키랄 SFC: (키랄팩 IC 컬럼, 4.6 mm x 25 cm, 25% 메탄올/이산화탄소 용리액, 2.5 mL/분 유속, 4.81 체류 시간); ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.13(s, 1H), 8.37(t, J = 5.5 Hz, 1H), 7.65-7.71(m, 3H), 7.54(d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.39-7.47(m, 1H), 7.29-7.37(m, 1H), 7.19-7.29(m, 1H), 6.53(d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.13-5.23(m, 1H), 3.41(dd, J = 12.4, 6.8 Hz, 2H), 2.77-2.90(m, 1H), 2.46(t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.28(s, 3H), 1.92-2.00(m, 1H), 1.56-1.66(m, 2H), 1.42-1.53(m, 1H), 1.11(s, 3H), 1.07(s, 3H); MS(M+1): 464.2.

생물학적 데이타

글루카곤 cAMP 분석

글루카곤 유도된 cAMP 생성을 차단하는 글루카곤 길항제의 능력을 측정하기 위해 시스바이오(Cisbio) cAMP 검출 분석을 사용하였다. 잠재적인 글루카곤 길항제를 재현탁하고 100% DMSO 중에 희석하였다. 글루카곤 cAMP 분석을 사용하기 전에 100x DMSO 화합물 스톡(stock)을 0.1% 또는 4% BSA를 함유하는 DMEM-F12 배지(인비트로젠(Invitrogen))로 20 배 희석하였다. 5x 화합물 스톡(2μL)을 낮은 결합 백색 고체 바닥 384-웰 플레이트(코닝(Corning))의 적합한 웰에 스폿팅하였다. 5% DMSO(2μL) 또는 공지된 글루카곤 길항제(2μL)를 각각 플레이트에 첨가하여 분석 창을 한정하였다. 인간 글루카곤 수용체로 안정하게 형질감염된 CHOK1 세포를 세포 해리 완충제를 사용하여 배양 플라스크로부터 제거하였다. 4% BSA 및 200 μM IBMX가 존재하거나 부재하는 DMEM-F12 중 8.3e⁵ 세포/mL의 농도에서 세포 펠렛을 재현탁하였다. 세포 현탁액(6μL)을 분석 플레이트에 첨가하였다. 플레이트를 20 분 동안 실온에서 배양한 후 100 pM 도전 용량의 글루카곤을 첨가하였다. 별도의 플레이트 상에서 글루카곤 용량 반응 곡선을 실행하여 글루카곤의 EC₅₀을 측정하였다. 실온에서 30 분 배양한 후 cAMP 검출 시약을 함유하는 용해 완충제를 첨가하여 반응을 종결하였다. 플레이트를 추가 60 분 동안 실온에서 배양한 후 퍼킨 엘머 형광 플레이트 판독기로 판독하였다. 원 자료를 cAMP 표준 곡선에 근거하여 생성된 cAMP의 nM으로 전환하였다. 이어서, 전환된 데이타를 화이자(Pfizer) 데이타 분석 프로그램을 사용하여 분석하였다. 생성된 S자형 용량 반응 곡선으로부터 IC₅₀ 값을 측정하였다. 변형 쳉-프루소프(Cheng-Prusoff) 방정식을 사용하여 Kb 값을 산출하였다.

cAMP 데이타

실시예	N	cAMP Kb(nM)
실시예 1	28	110
실시예 2	24	520
실시예 3	10	270
실시예 4	2	5100
실시예 5	8	380
실시예 6	2	620
실시예 7	2	1000
실시예 8	2	1000
실시예 9	6	450
실시예 10	6	220
실시예 11	6	91
실시예 12	6	310
실시예 13	6	140
실시예 14	1	3100
실시예 15	6	1100
실시예 16	6	800
실시예 17	8	880
실시예 18	8	100
실시예 19	8	64
실시예 20	10	64
실시예 21	5	160
실시예 22	2	47
실시예 23	4	63
실시예 24	4	140
실시예 25	-	-
실시예 26	-	-
실시예 27	4	250
실시예 28	-	-
실시예 29	9	930
실시예 30	6	69
실시예 31	6	1300
실시예 32	6	23
실시예 33	6	1820
실시예 34	2	1180
실시예 35	2	33

인간 글루카곤 SPA 분석

글루카곤 수용체에 대한 글루카곤-세스(cex)의 결합을 차단하는 시험 화합물의 능력을 측정하기 위해 글루카곤 SPA 분석을 사용하였다. 시험 화합물을 재현탁하고 100% DMSO 중에 연속적으로 희석하였다. 목적 농도에서 시험 화합물(1μL)을 96-웰 낮은 결합 백색 투명 바닥 플레이트(코닝)의 적합한 웰에 스폿팅하였다. DMSO(1μL)를 전체 결합 웰에 스폿팅하였다. 20μM의 농도에서 공지된 글루카곤 길항제(1μL)를 비특이적 결합 웰에 첨가하였다. 인간 글루카곤 수용체(밀리포어(Millipore))로 안정하게 형질감염된 chem-1 세포로부터의 0.3 내지 0.75 μg의 막, [¹²⁵I]글루카곤-세스(퍼킨 엘머)(125 pM) 및 WGA PVT SPA 비드(퍼킨 엘머)(175μg)를 분석 플레이트의 모든 웰에 첨가하였다. 시험 화합물 외의 모든 분석 성분을 완충제(50 mm Hepes pH 7.4; 5 mm MgCl₂; 1 mm CaCl; 5% 글리세롤 및 0.2% BSA)에 재현탁하였다. 실온에서 6 내지 10 시간 배양한 후 세포 막에 결합하는 핫 리간드의 양을 왈락 트릴룩스(Wallac Trilux) 방사선 배출 탐지기 상에서 플레이트를 판독하여 측정하였다. 화이자의 데이타 분석 프로그램을 사용하여 데이타를 분석하였다. 이어서, 생성된 S자형 용량 반응 곡선으로부터 IC₅₀값을 측정하였다. 쳉-프루소프 방정식을 사용하여 Ki값을 산출하였다.

SPA 결합 데이타

실시예	N	결합 Ki(nM)
실시예 1	11	173
실시예 2	5	280
실시예 3	5	240
실시예 4	1	7355
실시예 5	5	452
실시예 6	1	1855
실시예 7	-	-
실시예 8	1	979
실시예 9	4	531
실시예 10	4	198
실시예 11	4	101
실시예 12	4	242
실시예 13	4	199
실시예 14	-	-
실시예 15	4	479
실시예 16	4	91
실시예 17	3	360
실시예 18	3	109
실시예 19	4	74
실시예 20	3	39
실시예 21	2	133
실시예 22	2	25
실시예 23	2	50
실시예 24	-	-
실시예 25	-	-
실시예 26	-	-
실시예 27	2	160
실시예 28	-	-
실시예 29	4	930
실시예 30	2	76
실시예 31	1	1237
실시예 32	2	53
실시예 35	2	14

Claims

하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
화학식 I

상기 식에서,
R¹은 1 내지 3개의 플루오로, 하이드록시 또는 메톡시로 임의적으로 치환된 (C₁-C₆)알킬이거나, 1 또는 2개의 플루오로 또는 1 내지 3개의 플루오로로 각각 임의적으로 치환된 1 또는 2개의 (C₁-C₃)알킬로 임의적으로 치환된 (C₃-C₇)사이클로알킬이되, 상기 (C₃-C₇)사이클로알킬의 1개의 탄소는 O로 대체될 수 있거나, 또는 (C₃-C₇)사이클로알킬-(C₁-C₆)알킬이되, 상기 (C₃-C₇)사이클로알킬-(C₁-C₆)알킬의 (C₃-C₇)사이클로알킬 기는 각각 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 1 또는 2개의 (C₁-C₃)알킬로 임의적으로 치환되고;
R²는 수소 또는 (C₁-C₃)알킬이고;
R³은 테트라졸릴, -CH₂-테트라졸릴, -(CH₂)₂SO₃H, -(CH₂)₂CO₂H, -CH₂CHFCO₂H 또는 -CH₂CH(OH)CO₂H이고;
A¹, A² 및 A³은 각각 독립적으로 CR⁴ 또는 N이되, A¹, A² 및 A³ 중 적어도 하나 그러나 둘 이하는 N이고;
각각의 경우에 R⁴는 독립적으로 수소, 할로, 시아노, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알킬, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알콕시 또는 (C₃-C₅)사이클로알킬이고;
B¹, B², B³ 및 B⁴는 각각 독립적으로 CR⁵ 또는 N이되, B¹, B², B³ 및 B⁴중 둘 이하는 N이고;
각각의 경우에 R⁵는 독립적으로 수소, 할로, 시아노, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알킬, 1 내지 3개의 플루오로로 임의적으로 치환된 (C₁-C₃)알콕시 또는 (C₃-C₅)사이클로알킬이다.
제 1 항에 있어서,
R²가 수소이고, R³이 -(CH₂)₂CO₂H인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
제 2 항에 있어서,
R¹이 1 내지 3개의 플루오로로 각각 임의적으로 치환된 에틸, 프로필, 이소프로필, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 네오펜틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로프로필메틸이되, 상기 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실이 각각 1 또는 2개의 메틸로 임의적으로 치환된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
제 3 항에 있어서,
B¹, B², B³ 및 B⁴가 각각 CR⁵인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
제 4 항에 있어서,
A¹ 및 A²가 각각 CR⁴이고, A³이 N이고;
각각의 경우에 R⁴가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸 또는 에틸이고;
각각의 경우에 R⁵가 독립적으로 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, 트라이플루오로메틸 또는 메톡시인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
제 1 항에 있어서,
(+/-)-3-(4-(1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴놀린-3-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[1-(7-플루오로-퀴나졸린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[1-(8-메톡시-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(3-메틸-퀴녹살린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴녹살린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(4-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[1-(7-플루오로-4-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[1-(8-클로로-퀴놀린-2-일아미노)-3-메틸-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[3-메틸-1-(퀴나졸린-2-일아미노)-부틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(7-(트라이플루오로메틸)퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판산;
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(6-(트라이플루오로메틸)퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도) 프로판산;
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(2-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(4-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(7-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산;
(+/-)-3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(6-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도) 프로판산;
(+/-)-3-(4-((3,3-다이메틸사이클로부틸)(7-플루오로퀴놀린-3-일아미노)메틸)벤즈아미도) 프로판산;
(+/-)-3-(4-(4,4,4-트라이플루오로-1-(퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(+/-)-3-(4-((6,7-다이플루오로퀴놀린-3-일아미노)(3,3-다이메틸사이클로부틸)메틸)벤즈아미도)프로판산;
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(7-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(8-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(6-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산; 및
(+/-)-3-(4-(3-메틸-1-(5-메틸퀴놀린-3-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산
으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
제 1 항에 있어서,
(+)-3-(4-(1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(-)-3-(4-(1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산;
(+)-3-(4-(3-메틸-1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산; 및
(-)-3-(4-(3-메틸-1-(3-메틸퀴놀린-2-일아미노)부틸)벤즈아미도)프로판산
으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산, 이성질체 1 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산, 이성질체 2 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산, 이성질체 1 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
3-{4-[(3,3-다이메틸-사이클로부틸)-(6-플루오로-3-메틸-퀴놀린-2-일아미노)-메틸]-벤조일아미노}-프로피온산, 이성질체 2 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
(i) 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및
(ii) 약학적으로 허용되는 부형제, 희석제 또는 담체
를 포함하는 약학 조성물.
비만 및 비만-관련 질환의 치료용 약제의 제조를 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
2형 당뇨병, 1형 당뇨병 및 당뇨병-관련 질환의 진행 또는 발병의 치료용 또는 지연용 약제의 제조를 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
글루카곤 수용체의 탈활성화에 의해 조절되는 질병, 상태 또는 질환의 치료용 약제의 제조를 위한 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.