KR20090127292A - Ｈｃｖ 감염의 치료를 위한 세린 프로테아제 억제제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염에 관한 것이다. 상기 화합물은 세린 프로테아제, 특히 C형 간염 바이러스 NS3-NS4A 프로테아제를 억제한다.

<화학식 I>

세린 프로테아제 억제제, C형 간염 바이러스, NS3-NS4A 프로테아제, 면역조정제, HCV 오염

Description

ＨＣＶ 감염의 치료를 위한 세린 프로테아제 억제제 {INHIBITORS OF SERINE PROTEASES FOR THE TREATMENT OF HCV INFECTIONS}

상호 참조

본 출원은 2007년 2월 27일자로 출원된 미국 특허 출원 제11/711,845호를 우선권 주장하며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다.

본 발명은 세린 프로테아제 활성, 특히 C형 간염 바이러스 NS3-NS4A 프로테아제의 활성을 억제하는 화합물에 관한 것이다. 이에 따라, 이것들은 C형 간염 바이러스의 생활 주기를 저해하여 작용하며, 항-바이러스제로서도 유용하다. 추가로, 본 발명은 생체외 사용하거나 HCV 감염을 앓고 있는 환자에게 투여하기 위한, 상기 화합물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물을 투여하여 환자에서 HCV 감염을 치료하는 방법에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스 ("HCV")의 감염은 불가피한 인간 의료 문제이다. HCV는 A형, B형 간염이 아닌 대부분의 사례에서 원인이 되는 인자로 인식되며, 전세계적으로 인간 혈청-유병률이 3％인 것으로 추정된다 [A. Alberti et al., "Natural History of Hepatitis C," J. Hepatology, 31 (Suppl. 1), pp. 17-24 (1999)]. 미국에서만 거의 400만명이 감염되어 있을 수 있다 ([M.J. Alter et al., "The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States, Gastroenterol. Clin. North Am., 23, pp. 437-455 (1994)], [M. J. Alter "Hepatitis C Virus Infection in the United States," J. Hepatology, 31., (Suppl. 1), pp. 88-91 (1999)]).

HCV에 처음 노출시에는 감염된 개체의 약 20％에서만 급성 임상적 간염이 발병하는 반면, 나머지는 상기 감염이 자연 치유되는 것으로 보인다. 그러나, 상기 예의 거의 70％에서는 상기 바이러스가 수십년 동안 지속되는 만성 감염을 수립한다 ([S. Iwarson, "The Natural Course of Chronic Hepatitis," FEMS Microbiology Reviews, 14, pp. 201-204 (1994)], [D. Lavanchy, "Global Surveillance and Control of Hepatitis C," J. Viral Hepatitis, 6, pp. 35-47 (1999)]). 이것은 통상적으로 재발성이고 점진적으로 악화되는 간 염증을 일으키며, 종종 경변증 및 간세포 암종과 같은 더욱 중증의 질환 상태를 초래한다 ([M. C. Kew, "Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma", FEMS Microbiology Reviews, 14, pp. 211-220 (1994)], [I. Saito et. al., "Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma," Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 6547-6549 (1990)]). 불행하게도, 만성 HCV의 진행을 약화시키기 위한 널리 효과적인 치료법은 없다.

HCV 게놈은 3010개 내지 3033개 아미노산의 폴리단백질을 코딩한다 ([Q.L. Choo, et. al., "Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus." Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, pp. 2451-2455 (1991)], [N. Kato et al., "Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non-A, Non-B Hepatitis," Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 9524-9528 (1990)], [A. Takamizawa et. al., "Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers," J. Virol., 65, pp. 1105-1113 (1991)]). HCV 비-구조 (NS) 단백질은 바이러스 복제에 필수적인 촉매 기구를 제공한다고 추정된다. 상기 NS 단백질은 상기 폴리단백질의 단백질분해 절단에 의해 유래된다 ([R. Bartenschlager et. al., "Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine-Type Proteinase Required for Cleavage at the NS3/4 and NS4/5 Junctions," J. Virol., 67, pp. 3835-3844 (1993)], [A. Grakoui et. al., "Characterization of the Hepatitis C Virus-Encoded Serine Proteinase: Determination of Proteinase-Dependent Polyprotein Cleavage Sites," J. Virol., 67, pp. 2832-2843 (1993)], [A. Grakoui et. al., "Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products," J. Virol., 67, pp. 1385-1395 (1993)], [L. Tomei et. al., "NS3 is a serine protease required for processing of hepatitis C virus polyprotein", J. Virol., 67, pp. 4017-4026 (1993)]).

HCV NS 단백질 3 (NS3)은 대다수의 바이러스 효소 프로세싱을 돕는 세린 프로테아제 활성을 보유하고, 이에 따라 바이러스 복제 및 감염성에 필수적이라고 여겨진다. 황열 바이러스 NS3 프로테아제에서의 돌연변이는 바이러스 감염성을 감소 시키는 것으로 공지되어 있다 [Chambers, T.J. et. al., "Evidence that the N-terminal Domain of Nonstructural Protein NS3 From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site-Specific Cleavages in the Viral Polyprotein", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 8898-8902 (1990)]. NS3의 처음 181개 아미노산 (바이러스 폴리단백질의 잔기 1027 내지 1207)은 HCV 폴리단백질의 모든 4개 하류 부위를 프로세싱하는 NS3의 세린 프로테아제 도메인을 함유하는 것으로 밝혀졌다 [C. Lin et al., "Hepatitis C Virus NS3 Serine Proteinase: Trans-Cleavage Requirements and Processing Kinetics", J. Virol., 68, pp. 8147-8157 (1994)].

HCV NS3 세린 프로테아제 및 그의 관련 보조인자 NS4A는 상기 모든 바이러스 효소의 프로세싱을 돕기 때문에, 바이러스 복제에 필수적이라고 여겨진다. 이러한 프로세싱은 바이러스 효소 프로세싱에도 관여하는 인간 면역결핍 바이러스 아스파르틸 프로테아제가 수행하는 것과 유사하다고 여겨진다. 바이러스 단백질 프로세싱을 억제하는 HIV 프로테아제 억제제는 인간에서 강력한 항-바이러스제이며, 이는 바이러스 생활 주기 중 상기 단계를 저해하면 치료 활성제를 얻을 수 있음을 나타낸다. 결과적으로, HCV NS3 세린 프로테아제 또한 약물 개발에 있어서 매력적인 표적이다.

현재, 어떠한 만족스런 항-HCV 작용제 또는 치료제도 존재하지 않는다. 최근까지, HCV 질환에 대하여 유일하게 수립된 요법은 인터페론 처치였다. 그러나, 인터페론은 유의한 부작용이 있고 ([M. A. Walker et al., "Hepatitis C Virus: An Overview of Current Approaches and Progress," DDT, 4, pp. 518-29 (1999)], [D. Moradpour et al., "Current and Evolving Therapies for Hepatitis C," Eur. J. Gastroenterol. Hepatol., 11, pp. 1199-1202 (1999)], [H. L. A. Janssen et al. "Suicide Associated with Alfa-Interferon Therapy for Chronic Viral Hepatitis," J. Hepatol., 21, pp. 241-243 (1994)], [P.F. Renault et al., "Side Effects of Alpha Interferon," Seminars in Liver Disease, 9, pp. 273-277 (1989)]), 사례 중 일부에서만 (약 25％) 장기 완화를 유도한다 [O. Weiland, "Interferon Therapy in Chronic Hepatitis C Virus Infection", FEMS Microbiol. Rev., 14, pp. 279-288 (1994)]. 최근, PEG화(pegylated) 형태의 인터페론 (PEG-인트론(PEG-INTRON)^® 및 페가시스(PEGASYS)^®) 및 리바비린과 PEG화 인터페론의 조합 요법제 (레베트롤(REBETROL)^®)의 도입으로 인해 완화율은 단지 중간 정도로만 개선되었고, 부작용은 부분적으로만 감소하였다. 추가로, 효과적인 항-HCV 백신에 대한 전망도 불확실하다.

따라서, 보다 효과적인 항-HCV 요법제가 요구된다. 이러한 억제제는 프로테아제 억제제, 특히 세린 프로테아제 억제제, 더욱 특히 HCV NS3 프로테아제 억제제로서 치료 잠재력을 갖는다. 구체적으로, 이러한 화합물은 항-바이러스제, 특히 항-HCV 작용제로서 유용할 수 있다.

발명의 요약

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염에 관한 것이다:

상기 식에서,

각각의 A는 -(CX₁X₂)_a-이고,

각각의 B는 -(CX₁X₂)_b-이고,

각각의 X₁은 독립적으로 수소, 할로, 아미노, 술파닐, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴 또는 -O-X_1A이고,

각각의 X₂는 독립적으로 수소, 할로, 아미노, 술파닐, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴 또는 -O-X_1B이고,

X_1A 및 X_1B는 각각 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는

X₁과 X₂가 함께 옥소기를 형성하고,

각각의 R₁은 -Z^AR₄이고, 여기서의 각각의 Z^A는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 지방족으로 Z^A의 최대 3개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^A-, -C(O)NR^ANR^A-, -C(O)O-, -NR^AC(O)O-, -O-, -NR^AC(O)NR^A-, -NR^ANR^A-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^A-, -SO₂NR^A- 또는 -NR^ASO₂NR^A-로 대체되지만, 이때의 -NR^ANR^A-, -NR^AC(O)NR^A- 또는 -NR^ASO₂NR^A-는 화학식 I의 질소 고리 원자에 직접 결합하지 않고,

각각의 R₄는 독립적으로 R^A, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이고,

각각의 R^A는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R₂는 -Z^BR₅이고, 여기서의 각각의 Z^B는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 지방족으로 Z^B의 최대 3개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^B-, -C(O)NR^BNR^B-, -C(O)O-, -NR^BC(O)O-, -NR^BC(O)NR^B-, -NR^BNR^B-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^B-, -SO₂NR^B- 또는 -NR^BSO₂NR^B-로 대체되지만, 이때의 -SO-, -SO₂- 또는 -SO₂NR^B-은 화학식 I의 카르보닐에 직접 결합하지 않고,

각각의 R₅는 독립적으로 R^B, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂, 알콕시 또는 할로알콕시이고,

각각의 R^B는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는

R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 헤테로지환족 고리를 형성하고,

각각의 R₃은 임의로 치환된 지방족, 아미노, 술포닐, 술파닐, 술피닐, 술폰아미드, 술파미드, 술포, -O-R_3A, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R_3A는 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

Y 및 Y' 각각은 독립적으로 -Z^DR₇이고, 여기서의 각각의 Z^D는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C_{1 -6} 지방족 쇄로 Z^D의 최대 2개의 탄소 단 위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^D-, -C(O)NR^DNR^D-, -C(O)O-, -NR^DC(O)O-, -O-, -NR^DC(O)NR^D-, -NR^DNR^D-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^D-, -SO₂NR^D-, -NR^DSO₂- 또는 -NR^DSO₂NR^D-로 대체되거나, 또는 Y와 Y'가 함께 =O 또는 =S를 형성하고,

각각의 R₇은 독립적으로 R^D, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이고,

각각의 R^D는 독립적으로 수소, 또는 임의로 치환된 아릴이며,

a 및 b 각각은 독립적으로 O, 1, 2 또는 3이지만, a와 b의 합은 2 또는 3이다.

본 발명은 또한 하기 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:

<화학식 I>

상기 화학식에서,

각각의 A는 -CH₂-이고,

각각의 B는 -CH₂-이고,

각각의 R₁은 -Z^AR₄이고, 여기서의 각각의 Z^A는 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^A-, -C(O)NR^ANR^A-, -C(O)O-, -NR^AC(O)O-, -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^A- 또는 -SO₂NR^A-이고,

각각의 R₄는 독립적으로 R^A, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂, 알콕시 또는 할로알콕시이고,

각각의 R^A는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R₂는 -Z^BR₅이고, 여기서의 각각의 Z^B는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 지방족으로 Z^B의 최대 4개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^B-, -C(O)NR^BNR^B-, -C(O)O-, -C(O)C(O)-NR^B-, -NR^BC(O)O-, -NR^BC(O)NR^B-, -NR^BNR^B-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^B-, -SO₂NR^B- 또는 -NR^BSO₂NR^B-로 대체되지만, 이때의 -SO-, -SO₂- 또는 -SO₂NR^B-는 화학식 I의 카르보닐에 직접 결합하지 않고,

각각의 R₅는 독립적으로 R^B, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂, 알콕시 또는 할로알콕시이고,

각각의 R^B는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는

R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 헤테로지환족 고리를 형성하고,

각각의 R₃은 임의로 치환된 지방족, 아미노, 술포닐, 술파닐, 술피닐, 술폰아미드, 술파미드, 술포, -O-R_3A, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R_3A는 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며,

Y 및 Y' 각각은 H이다.

본 발명은 또한 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 제공한다:

<화학식 I>

상기 화학식 I에서,

각각의 A는 -CH₂-이고,

각각의 B는 -CH₂-이고,

각각의 R₁은 -Z^AR₄이고, 여기서의 Z^A는 -C(O)-이고, R₄는 치환된 알킬이고,

각각의 R₂는 -Z^BR₅이고, 여기서의 각각의 Z^B는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 지방족으로 Z^B의 최대 4개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(O)NR^B-, -C(O)C(O)-NR^B- 또는 -NR^B-로 대체되고,

각각의 R₅는 독립적으로 R^B, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂, 알콕시 또는 할로알콕시이고,

각각의 R^B는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 또는 임의로 치환된 지환족이거나, 또는

R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 6원 헤테로지환족 고리를 형성하고,

각각의 R₃은 임의로 치환된 아미노, -0-R_3A, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R_3A는 독립적으로 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며,

Y 및 Y' 각각은 H이다.

일부 측면에서, 본 발명은 표 1에 하기한 화합물 595 내지 1044를 특징으로 한다.

일부 측면에서, 본 발명은 세린 프로테아제 억제 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 및 허용가능한 담체, 보조제 또는 비히클을 포함하는 제약 조성물을 특징으로 한다. 상기 조성물은 면역조정제, 항-바이러스제, HCV 프로테아제의 제2 억제제, HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제, 및 사이토크롬 P-450 억제제, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 추가의 작용제를 포함할 수 있다. 상기 면역조정제는 α-인터페론, β-인터페론, γ-인터페론 또는 티모신이거나, 상기 항-바이러스제는 리바비린, 아만타딘 또는 텔비부딘이거나, 또는 상기 HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제는 HCV 헬리카제, 폴리머라제 또는 메탈로프로테아제의 억제제이다. 사이토크롬 P-450 억제제는 리토나비르일 수 있다.

다른 측면에서, 세린 프로테아제의 활성 억제 방법은 상기 세린 프로테아제를 화학식 I의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 세린 프로테아제는 HCV NS3 프로테아제일 수 있다. 상기 방법은 또한 화학식 I의 화합물을 투여하여 환자에서 HCV 감염을 치료하는 것을 포함한다. 상기 방법은 또한 상기 환자에게 면역조정제, 항-바이러스제, HCV 프로테아제의 제2 억제제, HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 추가의 작용제를 투여하는 것을 포함할 수 있고, 여기서의 상기 추가의 작용제는 상기 환자에게 세린 프로테아제 억제제와 동일한 투여 형태로 투여되거나 별도의 투여 형태로 투여된다. 상기 면역조정제는 α-인터페론, β-인터페론, γ-인터페론 또는 티모신이거나, 상기 항-바이러스제는 리바바린 또는 아만타딘이거나, 또는 상기 HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제는 HCV 헬리카제, 폴리머라제 또는 메탈로프로테아제의 억제제이다.

다른 측면에서, 생물학적 샘플 또는 의료 또는 실험 장비의 HCV 오염을 제거하거나 감소시키는 방법은 상기 생물학적 샘플 또는 의료 또는 실험 장비를 화학식 I의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 상기 샘플 또는 장비는 혈액, 다른 체액, 생물학적 조직, 수술 기구, 수술복, 실험 기구, 실험복, 혈액 또는 다른 체액 수집 장치, 혈액 또는 다른 체액 저장 물질로부터 선택될 수 있다.

본원에 기재한 바와 같이, 본 발명의 화합물은 또한 유리한 PK 성질 및/또는 증가된 역가를 나타낸다.

본 발명은 또한 상기 화합물을 포함하는 조성물 및 그의 용도, 화학식 I의 화합물의 제조 방법, 및 세린 프로테아제 활성에 대한 화합물의 검정 방법에 관한 것이다. 이러한 조성물은 환자에게 삽입되어 생물학적 샘플을 치료하고 환자에게 직접 투여하기 위한 사전 처리 장치에 사용될 수 있다. 각각의 경우에서, 상기 조성물은 HCV 감염의 위험 또는 중증도를 감소시키기 위해 사용된다.

정의

본 발명의 목적상, 화학 원소는 CAS 버전의 문헌 [Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed]에 기재된 원소 주기율표에 따라 확인된다. 추가로, 유기 화학의 일반 원리는 문헌 (["Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999] 및 ["Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M. B. and March, J., John Wiley ＆ Sons, New York: 2001])에 기재되어 있으며, 상기 문헌의 전체 내용은 본원에 참고로 포함된다.

본원에 기재한 바와 같이, 본 발명의 화합물은 앞서 일반적으로 설명하거나 본 발명의 특정 부류, 하위 부류 및 종으로 예시한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "지방족"은 알킬, 알케닐, 알키닐이라는 용어를 포함하며, 이들 각각은 하기하는 바와 같이 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알킬"기는 1개 내지 12개 (예를 들어, 1개 내지 10개, 1개 내지 8개, 1개 내지 6개 또는 1개 내지 4개)의 탄소 원자를 함유하는 포화 지방족 탄화수소기를 지칭한다. 알킬기는 선형 또는 분지형일 수 있다. 알킬기의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, n-헵틸 또는 2-에틸헥실을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 알킬기 는 1개 이상의 치환기, 예컨대 할로, 포스포, 지환족 (예를 들어, 시클로알킬 또는 시클로알케닐), 헤테로지환족 (예를 들어, 헤테로시클로알킬 또는 헤테로시클로알케닐), 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, 아로일, 헤테로아로일, 아실 (예를 들어, (지방족)카르보닐, (지환족)카르보닐 또는 (헤테로지환족)카르보닐), 니트로, 시아노, 아미도 (예를 들어, (시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬)카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아르알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐, 시클로알킬아미노카르보닐, 헤테로시클로알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐 또는 헤테로아릴아미노카르보닐), 아미노 (예를 들어, 지방족아미노, 지환족아미노 또는 헤테로지환족아미노), 술포닐 (예를 들어, 지방족-SO₂-), 술피닐, 술파닐, 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 옥소, 카르복시, 카르바모일, 지환족옥시, 헤테로지환족옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 아르알킬옥시, 헤테로아릴알콕시, 알콕시카르보닐, 알킬카르보닐옥시 또는 히드록시로 치환 (즉, 임의로 치환)될 수 있다. 치환된 알킬의 일부 예는 카르복시알킬 (예를 들어, HOOC-알킬, 알콕시카르보닐알킬 및 알킬카르보닐옥시알킬), 시아노알킬, 히드록시알킬, 알콕시알킬, 아실알킬, 아르알킬, (알콕시아릴)알킬, (술포닐아미노)알킬 (예를 들어, (알킬-SO₂-아미노)알킬), 아미노알킬, 아미도알킬, (지환족)알킬 또는 할로알킬을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알케닐"기는 2개 내지 12개 (예를 들어, 2개 내지 8개, 2개 내지 6개 또는 2개 내지 4개)의 탄소 원자 및 1개 이상의 이중 결합을 함유하는 지방족 탄소기를 지칭한다. 알킬기와 마찬가지로, 알케닐기는 선형 또는 분지형일 수 있다. 알케닐기의 예는 알릴, 이소프레닐, 2-부테닐 및 2-헥세닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 알케닐기는 1개 이상의 치환기, 예컨대 할로, 포스포, 지환족 (예를 들어, 시클로알킬 또는 시클로알케닐), 헤테로지환족 (예를 들어, 헤테로시클로알킬 또는 헤테로시클로알케닐), 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, 아로일, 헤테로아로일, 아실 (예를 들어, (지방족)카르보닐, (지환족)카르보닐 또는 (헤테로지환족)카르보닐), 니트로, 시아노, 아미도 (예를 들어, (시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬)카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아르알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐, 시클로알킬아미노카르보닐, 헤테로시클로알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐 또는 헤테로아릴아미노카르보닐), 아미노 (예를 들어, 지방족아미노, 지환족아미노, 헤테로지환족아미노 또는 지방족술포닐아미노), 술포닐 (예를 들어, 알킬-SO₂-, 지환족-SO₂- 또는 아릴-SO₂-), 술피닐, 술파닐, 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 옥소, 카르복시, 카르바모일, 지환족옥시, 헤테로지환족옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 아르알킬옥시, 헤테로아르알콕시, 알콕시카르보닐, 알킬카르보닐옥시 또는 히드록시로 임의로 치환될 수 있다. 치환된 알케닐의 일부 예는 시아노알케닐, 알콕시알케닐, 아실알케닐, 히드록시알케닐, 아르알케닐, (알콕시아릴)알케닐, (술포 닐아미노)알케닐 (예를 들어, (알킬-SO₂-아미노)알케닐), 아미노알케닐, 아미도알케닐, (지환족)알케닐 또는 할로알케닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알키닐"기는 2개 내지 12개 (예를 들어, 2개 내지 8개, 2개 내지 6개 또는 2개 내지 4개)의 탄소 원자 및 1개 이상의 삼중 결합을 함유하는 지방족 탄소기를 지칭한다. 알키닐기는 선형 또는 분지형일 수 있다. 알키닐기의 예는 프로파르길 및 부티닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 알키닐기는 1개 이상의 치환기, 예컨대 아로일, 헤테로아로일, 알콕시, 시클로알킬옥시, 헤테로시클로알킬옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 카르복시, 시아노, 할로, 히드록시, 술포, 메르캅토, 술파닐 (예를 들어, 지방족술파닐 또는 지환족술파닐), 술피닐 (예를 들어, 지방족술피닐 또는 지환족술피닐), 술포닐 (예를 들어, 지방족-SO₂-, 지방족아미노-SO₂- 또는 지환족-SO₂-), 아미도 (예를 들어, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 알킬카르보닐아미노, 시클로알킬아미노카르보닐, 헤테로시클로알킬아미노카르보닐, 시클로알킬카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬)카르보닐아미노, (시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아르알킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노 또는 헤테로아릴아미노카르보닐), 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 알콕시카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 지환족, 헤테로지환족, 아릴, 헤테로아릴, 아실 (예를 들어, (지환족)카르보닐 또는 (헤테로지환족)카르보닐), 아미노 (예를 들어, 지방족아미노), 술폭시, 옥소, 카르복시, 카르바모 일, (지환족)옥시, (헤테로지환족)옥시 또는 (헤테로아릴)알콕시로 임의로 치환될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아미도"는 "아미노카르보닐" 및 "카르보닐아미노"를 둘다 포함한다. 이들 용어는 단독으로 사용되거나 또다른 기와 함께 사용되며, 말단에 사용되는 경우에는 -N(R^X)-C(O)-R^Y 또는 -C(O)-N(R^X)₂와 같은 아미도기, 내부에 사용되는 경우에는 -C(O)-N(R^X)- 또는 -N(R^X)-C(O)-를 지칭하고, 여기서의 R^X 및 R^Y는 하기 정의된다. 아미도기의 예는 알킬아미도 (예를 들어, 알킬카르보닐아미노 또는 알킬아미노카르보닐), (헤테로지환족)아미도, (헤테로아르알킬)아미도, (헤테로아릴)아미도, (헤테로시클로알킬)알킬아미도, 아릴아미도, 아르알킬아미도, (시클로알킬)알킬아미도 또는 시클로알킬아미도를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아미노"기는 -NR^XR^Y (여기서, R^X 및 R^Y 각각은 독립적으로 수소, 지방족, 지환족, (지환족)지방족, 아릴, 아르지방족, 헤테로지환족, (헤테로지환족)지방족, 헤테로아릴, 카르복시, 술파닐, 술피닐, 술포닐, (지방족)카르보닐, (지환족)카르보닐, ((지환족)지방족)카르보닐, 아릴카르보닐, (아르지방족)카르보닐, (헤테로지환족)카르보닐, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐, (헤테로아릴)카르보닐 또는 (헤테로아르지방족)카르보닐이고, 이들 각각은 본원에서 정의되고 임의로 치환됨)를 지칭한다. 아미노기의 예는 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 아릴아미노를 포함한다. 용어 "아미노"가 말단기 (예를 들어, 알킬카르보닐 아미노)가 아닌 경우, 이것은 -NR^X-로 표시된다. R^X는 상기 정의한 것과 동일한 의미를 갖는다.

본원에서 사용된 바와 같이, 단독으로 사용되거나 "아르알킬", "아르알콕시" 또는 "아릴옥시알킬"에서와 같이 보다 커다란 부분의 일부로 사용되는 "아릴"기는 모노시클릭 (예를 들어, 페닐), 바이시클릭 (예를 들어, 인데닐, 나프탈레닐, 테트라히드로나프틸, 테트라히드로인데닐) 및 트리시클릭 (예를 들어, 플루오레닐 테트라히드로플루오레닐 또는 테트라히드로안트라세닐, 안트라세닐) 고리 시스템으로서, 상기 모노시클릭 고리 시스템이 방향족이거나, 바이시클릭 또는 트리시클릭 고리 시스템의 1개 이상의 고리가 방향족인 경우를 지칭한다. 바이시클릭 및 트리시클릭의 기는 벤조-융합된 2원 또는 3원 카르보시클릭 고리를 포함한다. 예를 들어, 벤조-융합된 기는 2개 이상의 C_{4 -8} 카르보시클릭 부분과 융합된 페닐을 포함한다. 아릴은 1개 이상의 치환기, 예컨대 지방족 [예를 들어, 알킬, 알케닐 또는 알키닐], 지환족, (지환족)지방족, 헤테로지환족, (헤테로지환족)지방족, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, (지환족)옥시, (헤테로지환족)옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, (아르지방족)옥시, (헤테로아르지방족)옥시, 아로일, 헤테로아로일, 아미노, 옥소 (벤조-융합된 바이시클릭 또는 트리시클릭 아릴의 비-방향족 카르보시클릭 고리에 있는 경우), 니트로, 카르복시, 아미도, 아실 (예를 들어, (지방족)카르보닐, (지환족)카르보닐, ((지환족)지방족)카르보닐, (아르지방족)카르보닐, (헤테로지환족)카르보닐, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐 또는 (헤테로아르지방족)카르보닐), 술 포닐 (예를 들어, 지방족-SO₂- 또는 아미노-SO₂-), 술피닐 (예를 들어, 지방족-S(O)- 또는 지환족-S(O)-), 술파닐 (예를 들어, 지방족-S-), 시아노, 할로, 히드록시, 메르캅토, 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드 또는 카르바모일로 임의로 치환된다. 별법으로, 아릴은 치환되지 않을 수도 있다.

치환된 아릴의 비-제한적인 예는 할로아릴 (예를 들어, 모노-, 디- (예를 들어, p,m-디할로아릴) 및 트리- (예를 들어, 할로) 아릴), (카르복시)아릴 (예를 들어, (알콕시카르보닐)아릴, ((아르알킬)카르보닐옥시)아릴 및 (알콕시카르보닐)아릴), (아미도)아릴 (예를 들어, (아미노카르보닐)아릴, (((알킬아미노)알킬)아미노카르보닐)아릴, (알킬카르보닐)아미노아릴, (아릴아미노카르보닐)아릴 및 (((헤테로아릴)아미노)카르보닐)아릴), 아미노아릴 (예를 들어, ((알킬술포닐)아미노)아릴 또는 ((디알킬)아미노)아릴), (시아노알킬)아릴, (알콕시)아릴, (술파모일)아릴 [예를 들어, (아미노술포닐)아릴], (알킬술포닐)아릴, (시아노)아릴, (히드록시알킬)아릴, ((알콕시)알킬)아릴, (히드록시)아릴, ((카르복시)알킬)아릴, (((디알킬)아미노)알킬)아릴, (니트로알킬)아릴, (((알킬술포닐)아미노)알킬)아릴, ((헤테로지환족)카르보닐)아릴, ((알킬술포닐)알킬)아릴, (시아노알킬)아릴, (히드록시알킬)아릴, (알킬카르보닐)아릴, 알킬아릴, (트리할로알킬)아릴, p-아미노-m-알콕시카르보닐아릴, p-아미노-m-시아노아릴, p-할로-m-아미노아릴 또는 (m-(헤테로지환족)-o-(알킬))아릴을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아르알킬"기와 같은 "아르지방족"은 아릴기로 치환된 지방족 기 (예를 들어, C_{1 -4} 알킬기)를 지칭한다. "지방족", "알킬" 및 "아릴"은 본원에 정의되어 있다. 아르알킬기와 같은 아르지방족의 예는 벤질이다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아르알킬"기는 아릴기로 치환된 알킬기 (예를 들어, C_{1 -4} 알킬기)를 지칭한다. "알킬" 및 "아릴"은 둘다 앞서 정의된 바 있다. 아르알킬기의 예는 벤질이다. 아르알킬은 1개 이상의 치환기, 예컨대 지방족 (예를 들어, 알킬, 알케닐 또는 알키닐, 예컨대 카르복시알킬, 히드록시알킬 또는 할로알킬, 예컨대 트리플루오로메틸), 지환족 (예를 들어, 시클로알킬 또는 시클로알케닐), (시클로알킬)알킬, 헤테로시클로알킬, (헤테로시클로알킬)알킬, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, 시클로알킬옥시, 헤테로시클로알킬옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 아르알킬옥시, 헤테로아르알킬옥시, 아로일, 헤테로아로일, 니트로, 카르복시, 알콕시카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아미도 (예를 들어, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐아미노, 시클로알킬카르보닐아미노, (시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬)카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노 또는 헤테로아르알킬카르보닐아미노), 시아노, 할로, 히드록시, 아실, 메르캅토, 알킬술파닐, 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 옥소 또는 카르바모일로 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "바이시클릭 고리 시스템"은 2개의 고리를 형성하는 8원 내지 12원 (예를 들어 9원, 10원 또는 11원) 구조를 포함하고, 여기서의 2개의 고리는 1개 원자를 공통적으로 (예를 들어, 1개 원자 또는 2개 원자를 공통적으로) 갖는다. 바이시클릭 고리 시스템은 바이지환족 (예를 들어, 바이시클로알킬 또는 바이시클로알케닐), 바이시클로헤테로지방족, 바이시클릭 아릴 및 바이시클릭 헤테로아릴을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "지환족"기는 "시클로알킬"기 및 "시클로알케닐"기를 포함하고, 이것들 각각은 이하 기재한 바와 같이 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "시클로알킬"기는 3개 내지 12개 (예를 들어, 5개 내지 12개) 탄소 원자의 포화 카르보시클릭 모노- 또는 바이시클릭 (융합된 또는 가교된) 고리를 지칭한다. 시클로알킬기의 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 아다만틸, 노르보르닐, 쿠빌, 옥타히드로-인데닐, 데카히드로-나프틸, 스피로[5.5]운데카닐, 스피로[2.5]옥타닐, 바이시클로[3.2.1]옥틸, 바이시클로[2.2.2]옥틸, 바이시클로[3.3.1]노닐, 바이시클로[3.3.2]데실, 바이시클로[2.2.2]옥틸, 아다만틸 또는 ((아미노카르보닐)시클로알킬)시클로알킬을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "시클로알케닐"기는 1개 이상의 이중 결합을 갖는, 3개 내지 12개 (예를 들어, 4개 내지 8개) 탄소 원자의 비-방향족 카르보시클릭 모노- 또는 바이시클릭 고리를 지칭한다. 시클로알케닐기의 예는 시클로펜테닐, 1,4-시클로헥사-디-에닐, 시클로헵테닐, 시클로옥테닐, 헥사히드로-인데닐, 옥타히드로-나프틸, 시클로헥세닐, 시클로펜테닐, 스피로[5.5]운데크-3-에닐, 스피로[2.5]옥트-5-에닐, 바이시클로[2.2.2]옥테닐 또는 바이시클로[3.3.1]노네닐을 포 함한다.

시클로알킬기 또는 시클로알케닐기는 1개 이상의 치환기, 예컨대 포스포르, 지방족 (예를 들어, 알킬, 알케닐 또는 알키닐), 지환족, (지환족)지방족, 헤테로지환족, (헤테로지환족)지방족, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, (지환족)옥시, (헤테로지환족)옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, (아르지방족)옥시, (헤테로아르지방족)옥시, 아로일, 헤테로아로일, 아미노, 아미도 (예를 들어, (지방족)카르보닐아미노, (지환족)카르보닐아미노, ((지환족)지방족)카르보닐아미노, (아릴)카르보닐아미노, (아르지방족)카르보닐아미노, (헤테로지환족)카르보닐아미노, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐아미노, (헤테로아릴)카르보닐아미노 또는 (헤테로아르지방족)카르보닐아미노), 니트로, 카르복시 (예를 들어, HOOC-, 알콕시카르보닐 또는 알킬카르보닐옥시), 아실 (예를 들어, (지환족)카르보닐, ((지환족)지방족)카르보닐, (아르지방족)카르보닐, (헤테로지환족)카르보닐, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐 또는 (헤테로아르지방족)카르보닐), 시아노, 할로, 히드록시, 메르캅토, 술포닐 (예를 들어, 알킬-SO₂- 및 아릴-SO₂-), 술피닐 (예를 들어, 알킬-S(O)-), 술파닐 (예를 들어, 알킬-S-), 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 옥소 또는 카르바모일로 임의로 치환될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로지환족"은 헤테로시클로알킬기 및 헤테로시클로알케닐기를 포함하고, 이것들 각각은 이하 기재한 바와 같이 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "헤테로시클로알킬"기는 1개 이상의 고리 원자가 헤테로원자 (예를 들어, N, O, S 또는 이들의 조합)인, 3원 내지 12원의 모노- 또는 바이시클릭 (융합된 또는 가교된) (예를 들어, 5원 내지 12원의 모노- 또는 바이시클릭) 포화 고리 구조를 지칭한다. 헤테로시클로알킬기의 예는 피페리딜, 피페라질, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로푸릴, 1,4-디옥솔라닐, 1,4-디티아닐, 1,3-디옥솔라닐, 옥사졸리딜, 이속사졸리딜, 모르폴리닐, 티오모르폴릴, 옥타히드로벤조푸릴, 옥타히드로크로메닐, 옥타히드로티오크로메닐, 옥타히드로인돌릴, 옥타히드로피리디닐, 데카히드로퀴놀리닐, 옥타히드로벤조[b]티오페닐, 2-옥사-바이시클로[2.2.2]옥틸, 1-아자-바이시클로[2.2.2]옥틸, 3-아자-바이시클로[3.2.1]옥틸, 3-옥사스피로[5.5]운데크-3-에닐, 6-옥사스피로[2.5]옥트-5-에닐 및 2,6-디옥사-트리시클로[3.3.1.0^3,7]노닐을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "헤테로시클로알케닐"기는 1개 이상의 이중 결합을 가지며 1개 이상의 고리 원자가 헤테로원자 (예를 들어, N, O 또는 S)인, 모노- 또는 바이시클릭 (예를 들어, 5원 내지 10원의 모노- 또는 바이시클릭) 비-방향족 고리 구조를 지칭한다.

모노시클릭 및 바이시클로헤테로지방족은 표준 화학 명명법에 따라 번호를 매긴다. 헤테로시클로알킬기 또는 헤테로시클로알케닐기는 1개 이상의 치환기, 예컨대 포스포르, 지방족 [예를 들어, 알킬, 알케닐 또는 알키닐], 지환족, (지환족)지방족, 헤테로지환족, (헤테로지환족)지방족, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, (지환 족)옥시, (헤테로지환족)옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, (아르지방족)옥시, (헤테로아르지방족)옥시, 아로일, 헤테로아로일, 아미노, 아미도 (예를 들어, (지방족)카르보닐아미노, (지환족)카르보닐아미노, ((지환족)지방족)카르보닐아미노, (아릴)카르보닐아미노, (아르지방족)카르보닐아미노, (헤테로지환족)카르보닐아미노, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐아미노, (헤테로아릴)카르보닐아미노 또는 (헤테로아르지방족)카르보닐아미노), 니트로, 카르복시 (예를 들어, HOOC-, 알콕시카르보닐 또는 알킬카르보닐옥시), 아실 (예를 들어, (지환족)카르보닐, ((지환족)지방족)카르보닐, (아르지방족)카르보닐, (헤테로지환족)카르보닐, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐 또는 (헤테로아르지방족)카르보닐), 니트로, 시아노, 할로, 히드록시, 메르캅토, 술포닐 (예를 들어, 알킬술포닐 또는 아릴술포닐), 술피닐 (예를 들어, 알킬술피닐), 술파닐 (예를 들어, 알킬술파닐), 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 옥소 또는 카르바모일로 임의로 치환될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "헤테로아릴"기는 4개 내지 15개의 고리 원자를 가지며 1개 이상의 고리 원자가 헤테로원자 (예를 들어, N, O, S 또는 이들의 조합)인 모노시클릭, 바이시클릭 또는 트리시클릭 고리 시스템으로서, 상기 모노시클릭 고리 시스템이 방향족이거나, 바이시클릭 또는 트리시클릭 고리 시스템의 1개 이상의 고리가 방향족인 경우를 지칭한다. 헤테로아릴기는 2개 또는 3개의 고리를 갖는 벤조-융합된 고리 시스템을 포함한다. 예를 들어, 벤조-융합된 기는 1개 또는 2개의 4원 내지 8원의 헤테로지환족 부분과 융합된 벤조 (예를 들어, 인돌리질, 인돌릴, 이소인돌릴, 3H-인돌릴, 인돌리닐, 벤조[b]푸릴, 벤조[b]티오페닐, 퀴놀리 닐 또는 이소퀴놀리닐)을 포함한다. 헤테로아릴의 일부 예는 아제티디닐, 피리딜, 1H-인다졸릴, 푸릴, 피롤릴, 티에닐, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이미다졸릴, 테트라졸릴, 벤조푸릴, 이소퀴놀리닐, 벤즈티아졸릴, 크산텐, 티오크산텐, 페노티아진, 디히드로인돌, 1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린, 이소인돌린, 벤조[1,3]디옥솔, 벤조[b]푸릴, 벤조[b]티오페닐, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤즈티아졸릴, 퓨릴, 신놀릴, 퀴놀릴, 퀴나졸릴, 신놀릴, 프탈라질, 퀴나졸릴, 퀴녹살릴, 이소퀴놀릴, 4H-퀴놀리질, 벤조-1,2,5-티아디아졸릴 또는 1,8-나프티리딜이다.

모노시클릭 헤테로아릴은 푸릴, 티오페닐, 2H-피롤릴, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 2H-피라닐, 4H-피라닐, 피리딜, 피리다질, 피리미딜, 피라졸릴, 피라질 또는 1,3,5-트리아질을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 모노시클릭 헤테로아릴은 표준 화학 명명법에 따라 번호를 매긴다.

바이시클릭 헤테로아릴은 인돌리질, 인돌릴, 이소인돌릴, 3H-인돌릴, 인돌리닐, 벤조[b]푸릴, 벤조[b]티오페닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 인돌리질, 이소인돌릴, 인돌릴, 벤조[b]푸릴, 벤조[b]티오페닐, 인다졸릴, 벤즈이미다질, 벤즈티아졸릴, 퓨리닐, 4H-퀴놀리질, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 신놀릴, 프탈라질, 퀴나졸릴, 퀴녹살릴, 1,8-나프티리딜 또는 프테리딜을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 바이시클릭 헤테로아릴은 표준 화학 명명법에 따라 번호를 매긴다.

헤테로아릴은 1개 이상의 치환기, 예컨대 지방족 (예를 들어, 알킬, 알케닐 또는 알키닐), 지환족, (지환족)지방족, 헤테로지환족, (헤테로지환족)지방족, 아 릴, 헤테로아릴, 알콕시, (지환족)옥시, (헤테로지환족)옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, (아르지방족)옥시, (헤테로아르지방족)옥시, 아로일, 헤테로아로일, 아미노, 옥소 (바이시클릭 또는 트리시클릭 헤테로아릴의 비-방향족 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리에 있는 경우), 카르복시, 아미도, 아실 (예를 들어, 지방족카르보닐, (지환족)카르보닐, ((지환족)지방족)카르보닐, (아르지방족)카르보닐, (헤테로지환족)카르보닐, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐 또는 (헤테로아르지방족)카르보닐), 술포닐 (예를 들어, 지방족술포닐 또는 아미노술포닐), 술피닐 (예를 들어, 지방족술피닐), 술파닐 (예를 들어, 지방족술파닐)), 니트로, 시아노, 할로, 히드록시, 메르캅토, 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드 또는 카르바모일로 임의로 치환된다. 별법으로, 헤테로아릴은 치환되지 않을 수도 있다.

치환된 헤테로아릴의 비-제한적인 예는 (할로)헤테로아릴 (예를 들어, 모노- 및 디-(할로)헤테로아릴), (카르복시)헤테로아릴 (예를 들어, (알콕시카르보닐)헤테로아릴), 시아노헤테로아릴, 아미노헤테로아릴 (예를 들어, ((알킬술포닐)아미노)헤테로아릴 및 ((디알킬)아미노)헤테로아릴), (아미도)헤테로아릴 (예를 들어, 아미노카르보닐헤테로아릴, ((알킬카르보닐)아미노)헤테로아릴, ((((알킬)아미노)알킬)아미노카르보닐)헤테로아릴, (((헤테로아릴)아미노)카르보닐)헤테로아릴, ((헤테로지환족)카르보닐)헤테로아릴 및 ((알킬카르보닐)아미노)헤테로아릴), (시아노알킬)헤테로아릴, (알콕시)헤테로아릴, (술파모일)헤테로아릴 [예를 들어, (아미노술포닐)헤테로아릴], (술포닐)헤테로아릴 [예를 들어, (알킬술포닐)헤테로아릴] , (히드록시알킬)헤테로아릴, (알콕시알킬)헤테로아릴, (히드록시)헤테로아릴, ((카르복시)알킬)헤테로아릴, (((디알킬)아미노)알킬)헤테로아릴, (헤테로지환족)헤테로아릴, (지환족)헤테로아릴, (니트로알킬)헤테로아릴, (((알킬술포닐)아미노)알킬)헤테로아릴, ((알킬술포닐)알킬)헤테로아릴, (시아노알킬)헤테로아릴, (아실)헤테로아릴 [예를 들어, (알킬카르보닐)헤테로아릴], (알킬)헤테로아릴 및 (할로알킬)헤테로아릴 (예를 들어, 트리할로알킬헤테로아릴)을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "헤테로아르지방족" (예를 들어, 헤테로아르알킬기)은 헤테로아릴기로 치환된 지방족 기 (예를 들어, C_{1 -4} 알킬기)를 지칭한다. "지방족", "알킬" 및 "헤테로아릴"은 앞서 정의된 바 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "헤테로아르알킬"기는 헤테로아릴기로 치환된 알킬기 (예를 들어, C_{1 -4} 알킬기)를 지칭한다. "알킬" 및 "헤테로아릴"은 둘다 앞서 정의된 바 있다. 헤테로아르알킬은 1개 이상의 치환기, 예컨대 알킬 (예컨대 카르복시알킬, 히드록시알킬 및 할로알킬, 예컨대 트리플루오로메틸), 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, (시클로알킬)알킬, 헤테로시클로알킬, (헤테로시클로알킬)알킬, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, 시클로알킬옥시, 헤테로시클로알킬옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 아르알킬옥시, 헤테로아르알킬옥시, 아로일, 헤테로아로일, 니트로, 카르복시, 알콕시카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐아미노, 시클로알킬카르보닐아미노, (시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬)카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아르알킬카르보닐아미 노, 시아노, 할로, 히드록시, 아실, 메르캅토, 알킬술파닐, 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 옥소 또는 카르바모일로 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아실"기는 포르밀기 또는 R^X-C(O)- (예를 들어 알킬-C(O)- ("알킬카르보닐"이라 지칭되기도 함)) (여기서, R^X 및 "알킬"은 앞서 정의된 바 있음)를 지칭한다. 아세틸 및 피발로일은 아실기의 예이다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아로일" 또는 "헤테로아로일"은 아릴-C(O)- 또는 헤테로아릴-C(O)-를 지칭한다. 아로일 또는 헤테로아로일의 아릴 및 헤테로아릴 부분은 앞서 정의한 바와 같이 임의로 치환된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알콕시"기는 알킬-O-기 (여기서, "알킬"은 앞서 정의된 바 있음)를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "카르바모일"기는 구조식 -O-CO-NR^XR^Y 또는 -NR^X-CO-O-R^Z (여기서, R^X 및 R^Y는 앞서 정의된 바 있고, R^Z는 지방족, 아릴, 아르지방족, 헤테로지환족, 헤테로아릴 또는 헤테로아르지방족일 수 있음)를 갖는 기를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "카르복시"기는 말단기로 사용되는 경우에는 -COOH, -COOR^X, -OC(O)H, 0C(O)R^X, 내부기로 사용되는 경우에는 -OC(O)- 또는 -C(O)O-를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "할로지방족"기는 1개 내지 3개의 할로겐으로 치환된 지방족 기를 지칭한다. 예를 들어, 용어 '할로알킬'은 -CF₃기를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "메르캅토"기는 -SH를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "술포"기는 말단에 사용되는 경우에는 -SO₃H 또는 -SO₃R^X, 내부에 사용되는 경우에는 -S(O)₃-을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "술파미드"기는 말단에 사용되는 경우에는 구조식 -NR^X-S(O)₂-NR^YR^Z, 내부에 사용되는 경우에는 -NR^X-S(O)₂-NR^Y- (여기서, R^X, R^Y 및 R^Z는 앞서 정의된 바 있음)를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "술폰아미드"기는 말단에 사용되는 경우에는 구조식 -S(O)₂-NR^XR^Y 또는 -NR^X-S(O)₂-R^Z, 내부에 사용되는 경우에는 -S(O)₂-NR^X- 또는 -NR^X-S(O)₂- (여기서, R^X, R^Y 및 R^Z는 앞서 정의되어 있음)를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "술파닐"기는 말단에 사용되는 경우에는 -S-R^X (여기서, R^X는 상기 정의되어 있음), 내부에 사용되는 경우에는 -S-를 지칭한다. 술파닐의 예는 지방족-S-, 지환족-S-, 아릴-S- 등을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "술피닐"기는 말단에 사용되는 경우에는 -S(O)-R^X (여기서, R^X는 앞서 정의된 바 있음), 내부에 사용되는 경우에는 -S(O)-를 지칭 한다. 예시적인 술피닐기는 지방족-S(O)-, 아릴-S(O)-, (지환족(지방족))-S(O)-, 시클로알킬-S(O)-, 헤테로지환족-S(O)-, 헤테로아릴-S(O)- 등을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "술포닐"기는 말단에 사용되는 경우에는 -S(O)₂-R^X (여기서, R^X는 앞서 정의된 바 있음), 내부에 사용되는 경우에는 -S(O)₂-를 지칭한다. 예시적인 술포닐기는 지방족-S(O)₂-, 아릴-S(O)₂-, (지환족(지방족))-S(O)₂-, 지환족-S(O)₂-, 헤테로지환족-S(O)₂-, 헤테로아릴-S(O)₂-, (지환족(아미도(지방족)))-S(O)₂- 등을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "술폭시"기는 말단에 사용되는 경우에는 -O-SO-R^X 또는 -SO-O-R^X (여기서, R^X는 앞서 정의된 바 있음), 내부에 사용되는 경우에는 -O-S(O)- 또는 -S(O)-O-를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "할로겐" 또는 "할로"기는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알콕시카르보닐"은 용어 '카르복시'에 포함되고, 단독으로 사용되거나 또다른 기와 함께 사용되며, 알킬-O-C(O)-와 같은 기를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알콕시알킬"은 알킬-O-알킬- (여기서, 알킬은 앞서 정의된 바 있음)과 같은 알킬기를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "카르보닐"은 -C(O)-를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "옥소"는 =O를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "포스포"는 포스피네이트 및 포스포네이트를 지칭한다. 포스피네이트 및 포스포네이트의 예는 -P(O)(R^P)₂ (여기서, R^p는 지방족, 알콕시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, (지환족)옥시, (헤테로지환족)옥시아릴, 헤테로아릴, 지환족 또는 아미노임)를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아미노알킬"은 구조식 (R^X)₂N-알킬-을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "시아노알킬"은 구조식 (NC)-알킬-을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "우레아"기는 구조식 -NR^X-CO-NR^YR^Z를 지칭하고, "티오우레아"기는 말단에 사용되는 경우에는 구조식 -NR^X-CS-NR^YR^Z, 내부에 사용되는 경우에는 -NR^X-CO-NR^Y- 또는 -NR^X-CS-NR^Y- (여기서, R^X, R^Y 및 R^Z는 앞서 정의된 바 있음)를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "구아니딘"기는 구조식 -N=C(N(R^XR^Y))N(R^XR^Y) 또는 -NR^X-C(=NR^X)NR^XR^Y (여기서, R^X 및 R^Y는 앞서 정의된 바 있음)를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "아미디노"기는 구조식 -C=(NR^X)N(R^XR^Y) (여기서, R^X 및 R^Y는 앞서 정의된 바 있음)를 지칭한다.

일반적으로, 용어 "이웃 자리(vicinal)"는 2개 이상의 탄소 원자를 포함하는 기 상에서의 인접한 탄소 원자에 부착된 치환기의 배치를 지칭한다.

일반적으로, 용어 "같은 자리(geminal)"는 2개 이상의 탄소 원자를 포함하는 기 상에서의 동일한 탄소 원자에 부착된 치환기의 배치를 지칭한다.

용어 "말단" 및 "내부"는 치환기 내에서 기의 위치를 지칭한다. 치환기의 끝에 위치하고 화학 구조식의 나머지 부분에 추가로 결합되어 있지 않은 경우의 기가 말단에 위치한 기이다. 카르복시알킬, 즉 R^XO(O)C-알킬은 말단에 사용된 카르복시기의 예이다. 화학 구조식의 치환기 중간에 존재하는 경우의 기가 내부에 위치한 기이다. 알킬카르복시 (예를 들어, 알킬-C(O)O- 또는 알킬-OC(O)-) 및 알킬카르복시아릴 (예를 들어, 알킬-C(O)O-아릴- 또는 알킬-O(CO)-아릴-)이 내부에 사용된 카르복시기의 예이다.

본원에서 사용된 바와 같이, "시클릭기" 또는 "시클릭 부분"은 지환족, 헤테로지환족, 아릴 또는 헤테로아릴 (이들은 각각 앞서 정의된 바 있음)을 비롯한 모노-, 바이- 및 트리-시클릭 고리 시스템을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "가교된 바이시클릭 고리 시스템"은 고리가 가교된 바이시클릭 헤테로시클릭지방족 고리 시스템 또는 바이시클릭 지환족 고리 시스템을 지칭한다. 가교된 바이시클릭 고리 시스템의 예는 아다만타닐, 노르보르나닐, 바이시클로[3.2.1]옥틸, 바이시클로[2.2.2]옥틸, 바이시클로[3.3.1]노닐, 바이시클로[3.2.3]노닐, 2-옥사바이시클로[2.2.2]옥틸, 1-아자바이시클로[2.2.2]옥틸, 3-아자바이시클로[3.2.1]옥틸 및 2,6-디옥사-트리시클로[3.3.1.0^3,7]노닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 가교된 바이시클릭 고리 시스템은 1개 이상의 치환기, 예컨대 알킬 (예컨대 카르복시알킬, 히드록시알킬 및 할로알킬, 예컨대 트리플루오로메틸), 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, (시클로알킬)알킬, 헤테로시클로알킬, (헤테로시클로알킬)알킬, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, 시클로알킬옥시, 헤테로시클로알킬옥시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 아르알킬옥시, 헤테로아르알킬옥시, 아로일, 헤테로아로일, 니트로, 카르복시, 알콕시카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐아미노, 시클로알킬카르보닐아미노, (시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬)카르보닐아미노, (헤테로시클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아르알킬카르보닐아미노, 시아노, 할로, 히드록시, 아실, 메르캅토, 알킬술파닐, 술폭시, 우레아, 티오우레아, 술파모일, 술파미드, 옥소 또는 카르바모일로 임의로 치환될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "지방족 쇄"는 분지형 또는 선형 지방족기 (예를 들어, 알킬기, 알케닐기 또는 알키닐기)를 지칭한다. 선형 지방족 쇄는 구조식 -(CH₂)_v- (여기서, v는 1 내지 6임)을 갖는다. 분지형 지방족 쇄는 1개 이상의 지방족 기로 치환된 선형 지방족 쇄이다. 분지형 지방족 쇄는 구조식 -(CHQ)_v- (여기서, Q는 수소 또는 지방족기임)를 갖지만, 이때의 Q는 1개 이상이 지방족 기여야 한다. 용어 '지방족 쇄'는 알킬 쇄, 알케닐 쇄 및 알키닐 쇄를 포함하고, 여기서 의 알킬, 알케닐 및 알키닐은 앞서 정의되어 있다.

어구 "임의로 치환된"은 "치환되거나 치환되지 않은"이라는 어구와 서로 구별없이 사용된다. 본원에 기재한 바와 같이, 본 발명의 화합물은 앞서 일반적으로 설명하거나 본 발명의 특정 부류, 하위 부류 및 종으로 예시한 바와 같은 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 본원에 기재한 바와 같이, 가변기 A, B, R₁, R₂, R₃, Y 및 Y', 및 본원에 기재한 화학식에 함유된 다른 가변기는 특정 기, 예컨대 알킬 및 아릴을 포함한다. 달리 언급하지 않는다면, 가변기 A, B, R₁, R₂, R₃, Y 및 Y', 및 이들에 함유된 다른 가변기에 대한 각각의 특정 기들은 본원에 기재된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 특정 기의 각각의 치환기는 할로, 시아노, 옥소, 알콕시, 히드록시, 아미노, 니트로, 아릴, 지환족, 헤테로지환족, 헤테로아릴, 할로알킬 및 알킬 중 1 내지 3개로 추가로 임의로 치환된다. 예를 들어, 알킬기는 알킬술파닐로 치환될 수 있고, 알킬술파닐은 할로, 시아노, 옥소, 알콕시, 히드록시, 아미노, 니트로, 아릴, 할로알킬 및 알킬 중 1 내지 3개로 임의로 치환될 수 있다. 추가의 예로서, (시클로알킬)카르보닐아미노의 시클로알킬 부분은 할로, 시아노, 알콕시, 히드록시, 니트로, 할로알킬 및 알킬 중 1 내지 3개로 임의로 치환될 수 있다. 2개의 알콕시기가 동일한 원자 또는 인접 원자들에 결합된 경우, 상기한 2개의 알콕시기는 이들이 결합되어 있는 원자(들)과 함께 고리를 형성할 수 있다.

일반적으로, 용어 "치환된"은 용어 "임의로"에 의해 수식되든 수식되지 않든 간에 주어진 구조의 수소 라디칼이 특정 치환기의 라디칼로 대체되는 것을 지칭한다. 특정 치환기는 상기 정의 부분 및 하기 화합물의 설명 부분 및 이들의 예에 기재되어 있다. 달리 나타내지 않는 한, 임의로 치환된 기는 그 기의 각각의 치환가능한 위치에 치환기를 가질 수 있고, 임의의 주어진 구조에서 1개 초과의 위치가 특정 기로부터 선택된 1개 초과의 치환기로 치환될 수 있는 경우에 그 치환기는 모든 위치에서 동일하거나 상이할 수 있다. 헤테로시클로알킬과 같은 고리 치환기는 시클로알킬과 같은 또다른 고리에 결합되어 스피로-바이시클릭 고리 시스템, 예를 들어 2개의 고리가 모두 1개의 공통 원자를 공유하는 고리 시스템을 형성할 수 있다. 당업자가 인식하게 되는 바와 같이, 본 발명에서 고려하는 치환기들의 조합은 안정한 또는 화학적으로 적합한 화합물이 형성되도록 하는 조합이다.

본원에서 사용된 바와 같이, 어구 "안정한 또는 화학적으로 적합한"은 화합물의 생성, 검출, 바람직하게는 이들의 회수, 정제, 및 본원에 개시된 목적들 중 하나 이상에서의 사용을 허용하는 조건에 적용하였을 때 실질적으로 변경되지 않는 화합물을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 안정한 화합물 또는 화학적으로 적합한 화합물은 적어도 1주 동안 수분의 존재하에 또는 다른 화학적으로 반응성인 조건하에 40℃ 이하의 온도를 유지하였을 때 실질적으로 변경되지 않는 것이다.

본원에서 사용된 바와 같이, 유효량은 치료를 받는 환자에게 치료 효과를 부여하는데 필요한 양으로 정의되고, 전형적으로는 환자의 연령, 표면적, 체중 및 상태를 기초로 하여 결정된다. 동물과 인간에 대한 투여량의 상호관계 (신체 표면적 1 m² 당 mg을 기초로 함)는 문헌 [Freireich et al., Cancer Chemother. Rep., 50:219 (1966)]에 기재되어 있다. 신체 표면적은 환자의 신장 및 체중으로부터 대략적으로 결정될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, New York, 537 (1970)]을 참조한다. 본원에서 사용된 바와 같이, "환자"는 인간을 비롯한 포유동물을 지칭한다.

달리 언급하지 않는다면, 본원에 도시된 구조는 또한 상기 구조의 모든 이성질체 (예를 들어, 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 기하이성질체 (또는 형태 이성질체)) 형태, 예를 들어 각각의 비대칭 중심에 대한 R 및 S 배위, (Z) 및 (E) 이중 결합 이성질체, 및 (Z) 및 (E) 형태 이성질체를 포함하는 것을 의미한다. 따라서, 본 발명의 화합물의 단일 입체화학 이성질체 뿐만이 아니라 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 기하이성질체 (또는 형태 이성질체) 혼합물은 본 발명의 범위 내에 속한다.

달리 언급하지 않는다면, 본 발명의 화합물의 모든 호변이성질체 형태는 본 발명의 범위 내에 속한다. 추가로, 달리 언급하지 않는다면, 본원에 도시된 구조는 또한 1개 이상의 동위원소-풍부 원자가 존재한다는 점에서만 상이한 화합물을 포함하는 것을 의미한다. 이러한 화합물은, 예를 들어 생물학적 검정에서의 분석용 도구 또는 프로브, 또는 치료제로서 유용하다.

다른 측면에서, 본 발명은 이하에서 일반적으로 그리고 구체적으로 기재한 바와 같은 특정 화합물을 특징으로 한다. 이러한 구체적인 기재는 단지 예시를 위 한 것이며, 상기 화합물 또는 그의 용도의 범위를 제한하는 것이 아니다.

I. 화합물

A. 일반적인 화합물

일부 측면에서, 본 발명은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 I의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 I의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

<화학식 I>

상기 식에서,

각각의 A는 -(CX₁X₂)_a-이고,

각각의 B는 -(CX₁X₂)_b-이고,

각각의 X₁은 독립적으로 수소, 할로, 아미노, 술파닐, 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방족, 임의로 치환된 아릴 또는 -O-X_1A이고,

각각의 X₂는 독립적으로 수소, 할로, 아미노, 술파닐, 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방족, 임의로 치환된 아릴 또는 -O-X_1B이고,

X_1A 및 X_1B는 각각 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는

X₁과 X₂가 함께 옥소기를 형성하고,

각각의 R₁은 -Z^AR₄이고, 여기서의 각각의 Z^A는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 분지형 또는 선형 C_{1 -12} 지방족 쇄로 Z^A의 최대 3개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^A-, -C(O)NR^ANR^A-, -C(O)O-, -NR^AC(O)O-, -O-, -NR^AC(O)NR^A-, -NR^ANR^A-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^A-, -SO₂NR^A- 또는 -NR^ASO₂NR^A-로 대체되지만, 이때의 -NR^ANR^A-, -NR^AC(O)NR^A- 또는 -NR^ASO₂NR^A-는 화학식 I의 질소 고리 원자에 직접 결합하지 않고,

각각의 R₄는 독립적으로 R^A, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이고,

각각의 R^A는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R₂는 -Z^BR₅이고, 여기서의 각각의 Z^B는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 분지형 또는 선형 C_{1 -12} 지방족 쇄로 Z^B의 최대 3개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^B-, -C(O)NR^BNR^B-, -C(O)O-, -NR^BC(O)O-, -NR^BC(O)NR^B-, -NR^BNR^B-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^B-, -SO₂NR^B- 또는 -NR^BSO₂NR^B-로 대체되지만, 이때의 -SO-, -SO₂- 또는 -SO₂NR^B-은 화학식 I의 카르보닐에 직접 결합하지 않고,

각각의 R₅는 독립적으로 R^B, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이고,

각각의 R^B는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는

R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 헤테로지환족 고리를 형성하고,

각각의 R₃은 임의로 치환된 지방족, 아미노, 술포닐, 술파닐, 술피닐, 술폰아미드, 술파미드, 술포, -O-R_3A, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R_3A는 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

Y 및 Y' 각각은 독립적으로 -Z^DR₇이고, 여기서의 각각의 Z^D는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C_{1 -6} 지방족 쇄로 Z^D의 최대 2개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^D-, -C(O)NR^DNR^D-, -C(O)O-, -NR^DC(O)O-, -O-, -NR^DC(O)NR^D-, -NR^DNR^D-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^D-, -SO₂NR^D-, -NR^DSO₂- 또는 -NR^DSO₂NR^D-로 대체되거나, 또는 Y와 Y'가 함께 =O 또는 =S를 형성하고,

각각의 R₇은 독립적으로 R^D, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이고,

각각의 R^D는 독립적으로 수소, 또는 임의로 치환된 아릴이며,

a 및 b 각각은 독립적으로 O, 1, 2 또는 3이지만, a와 b의 합은 2 또는 3이다.

또다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 제공한다:

<화학식 I>

상기 화학식에서,

각각의 A는 -CH₂-이고,

각각의 B는 -CH₂-이고,

각각의 R₁은 -Z^AR₄이고, 여기서의 Z^A는 -C(O)-이고, R₄는 치환된 알킬이고,

각각의 R₂는 -Z^BR₅이고, 여기서의 각각의 Z^B는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 지방족으로 Z^B의 최대 4개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(O)NR^B-, -C(O)C(O)-NR^B- 또는 -NR^B-로 대체되고,

각각의 R₅는 독립적으로 R^B, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂, 알콕시 또는 할로알콕시이고,

각각의 R^B는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 또는 임의로 치환된 지환족이거나, 또는

R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 6원 헤테로지환족 고리를 형성하고,

각각의 R₃은 임의로 치환된 아미노, -O-R_3A, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R_3A는 독립적으로 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며,

Y 및 Y' 각각은 H이다.

B. 구체적인 화합물

1. 치환기 R ₁ :

각각의 R₁은 -Z^AR₄이고, 여기서의 각각의 Z^A는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 분지형 또는 선형 C_{1 -12} 지방족 쇄로 Z^A의 최대 3개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^A-, -C(O)NR^ANR^A-, -C(O)O-, -NR^AC(O)O-, -O-, -NR^AC(O)NR^A-, -NR^ANR^A-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^A-, -SO₂NR^A- 또는 -NR^ASO₂NR^A-로 대체되지만, 이때의 -NR^ANR^A-, -NR^AC(O)NR^A- 또는 -NR^ASO₂NR^A-는 화학식 I의 질소 고리 원자에 직접 결합하지 않는다.

각각의 R₄는 독립적으로 R^A, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이다.

각각의 R^A는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이다.

여러 실시양태에서, R₁은 1개 내지 4개의 치환기로 임의로 치환된다.

특정 실시양태에서, R₁은 -Q₄-W₄-Q₃-W₃-Q₂-W₂-Q₁이고, 여기서의 W₂, W₃ 및 W₄ 각각은 독립적으로 결합, -C(O)-, -C(S)-, -C(O)N(Q₅)-, -C(O)O-, -O-, -N(Q₅)C(O)N(Q₅)-, -SO₂-, -N(Q₅)SO₂-, -S-, -N(Q₅)-, -SO-, -OC(O)-, -N(Q₅)C(O)O- 또는 -SO₂N(Q₅)-이고, Q₁, Q₂, Q₃ 및 Q₄ 각각은 독립적으로 결합, 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 또는 수소 (Q₁, Q₂, Q₃ 또는 Q₄가 R₁의 말단기인 경우)이며, 각각의 Q₅는 독립적으로 수소 또는 임의로 치환된 지방족이다. 일부 구체적인 실시양태에서, Q₄는 결합이다.

여러 실시양태에서, R₁은 임의로 치환된 아실기이다. 여러 예에서, R₁은 임의로 치환된 알킬카르보닐이다. R₁의 추가 예는 (아미노)알킬카르보닐, (할로)알킬카르보닐, (아릴)알킬카르보닐, (지환족)알킬카르보닐 또는 (헤테로지환족)알킬카르보닐을 포함한다. 상기 예에는 R₁이 (헤테로시클로알킬(옥시(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐, (헤테로아릴(카르보닐(아미노(알킬(카르보닐(아미노)))))알킬카르보닐, (바이시클로아릴(술포닐(아미노)))알킬카르보닐, (아릴(알콕시(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐, (알킬(카르보닐(아미노)))알킬카르보닐, (알케닐(알콕시(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐, (지환족(알킬(아미노(카르보닐(아미노)))))알킬카르보닐, (헤테로아릴(카르보닐(아미노(알킬(카르보닐(아미노))))))알킬카르보닐, (알킬(아미노(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐 또는 (바이시클로아릴(아미노(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐이고, 이것들 각각이 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 실시양태가 포함된다.

여러 실시양태에서, R₁은 임의로 치환된 카르복시기이다. 한 예에서, R₁은 임의로 치환된 알콕시카르보닐이다. R₁의 또다른 예는 C_{1 -4} 알콕시카르보닐 또는 (트리시클릭 아릴)알콕시카르보닐을 포함하고, 이것들 각각은 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 다른 카르복시기는 (지방족(옥시))카르보닐, (헤테로아르알킬(옥시))카르보닐, (헤테로지환족(옥시))카르보닐, (아르알킬(옥시))카르보닐을 포함하고, 이것들 각각은 1개 내지 3개의 할로, 알콕시, 지방족, 지환족, 헤테로지환족, 아릴, 헤테로아릴, 또는 이들의 조합으로 임의로 치환된다.

여러 실시양태에서, R₁은 임의로 치환된 아미노카르보닐이다. R₁의 예는 (알콕시(아릴(알킬)))아미노카르보닐, (알킬)아미노카르보닐 또는 (아릴(알콕시(카르보닐(알킬(아미노(카르보닐(알킬)))))))아미노카르보닐을 포함하고, 이것들 각각은 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된다.

여러 실시양태에서, R₁은 임의로 치환된 헤테로아릴이다. 한 예에서, R₁은 임의로 치환된 옥사졸릴, 피롤릴, 푸릴, 티오페닐, 트리아지닐, 피리디닐, 피라지닐, 피리미디닐 또는 피리다지닐이다.

여러 실시양태에서, R₁은 알킬술포닐, 아미노술포닐, 아릴술포닐, 헤테로아릴술포닐, 지환족술포닐 또는 헤테로지환족술포닐을 포함하고, 이것들 각각은 1개 내지 4개의 치환기로 임의로 치환된다.

여러 실시양태에서, R₁은 임의로 치환된 알킬술포닐이다. R₁의 예는 (아릴)알킬술포닐 또는 (알킬(아미노))알킬술포닐, 알킬술포닐, 아미노술포닐, 아릴술포닐, 헤테로아릴술포닐, 지환족술포닐 또는 헤테로지환족술포닐을 포함하고, 이것들 각각은 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 특정 실시양태에서, R₁은 임의로 치환된 알킬술포닐이다.

여러 실시양태에서, R₁은 (아릴)알킬술포닐 또는 (알킬(아미노))알킬술포닐이고, 이것들 각각은 임의로 치환된다.

일부 구체적인 실시양태에서, R₁은 (아미노)알킬카르보닐, (할로)알킬카르보닐, (아릴)알킬카르보닐, (지환족)알킬카르보닐 또는 (헤테로지환족)알킬카르보닐, (헤테로시클로알킬(옥시(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐, (헤테로아릴(카르보닐(아미노(알킬(카르보닐(아미노)))))알킬카르보닐, (바이시클로아릴(술포닐(아미노)))알킬카르보닐, (아릴(알콕시(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐, (알킬(카르보닐(아미노)))알킬카르보닐, (알케닐(알콕시(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐, (지환족(알킬(아미노(카르보닐(아미노)))))알킬카르보닐, (헤테로아릴(카르보닐(아미노(알킬(카르보닐(아미노))))))알킬카르보닐, (알킬(아미노(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐 또는 (바이시클로아릴(아미노(카르보닐(아미노))))알킬카르보닐이고, 이것들 각각은 임의로 치환된다.

다른 구체적인 실시양태에서, R₁은 헤테로아릴카르보닐, (지환족(알킬(아미도(알킬))))카르보닐, (헤테로지환족(옥시(아미도(알킬))))카르보닐, (아릴(술포닐(아미노(알킬))))카르보닐, (아르알킬(옥시(아미도(알킬))))카르보닐, (지방족(옥시(아미도(알킬))))카르보닐, (지환족(알킬(아미도(알킬))))카르보닐, (헤테로지환족)카르보닐 또는 (헤테로아릴(아미도(알킬(아미도(알킬))))카르보닐이고, 이것들 각각은 1개 내지 4개의 할로, 지방족, 지환족, 아실, 알콕시, 또는 이들의 조합으로 임의로 치환된다.

다른 실시양태에서, R₁은 아미도이다. 예를 들어, R₁은 (알콕시(아릴(알킬)))아미노카르보닐, (알킬)아미노카르보닐 또는 (아릴(알콕시(카르보닐(알킬(아미노(카르보닐(알킬)))))))아미노카르보닐이고, 이것들 각각은 임의로 치환된다.

여러 실시양태에서, R₁은

이고, 여기서의 T는 결합, -C(O)-, -OC(O)-, -NHC(O)-, -S(O)₂N(H)-, -C(O)C(O)- 또는 -SO₂-이고, 각각의 R은 독립적으로 수소, 아미노, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고, R₈ 및 R'₈ 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며, 각각의 R₉는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 헤테로아릴, 또는 임의로 치환된 페닐이거나, 또는 인접한 원자에 결합된 R₈과 R₉가 이들이 부착된 원자와 함께 5원 내지 7원의 임의로 치환된 모노시클릭 헤테로지환족 또는 6원 내지 12원의 임의로 치환된 바이시클릭 헤테로지환족을 형성하거나, 또는 R₈과 R₉가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 지환족 또는 임의로 치환된 헤테로지환족을 형성한다. 명확성을 위해서, R₁이 QVI인 경우에는 각각의 서브유닛 내의 R₈, R'₈ 및 R₉ 각각이 상기한 바와 같이 독립적으로 선택될 수 있다. 한 서브유닛에서의 R₈, R'₈ 및 R₉ 가변기 세트가 다른 서브유닛에서의 R₈, R'₈ 및 R₉ 가변기 세트와 반드시 동일할 필요는 없다.

다른 실시양태에서, R₁은 QI 또는 QII이다.

일부 실시양태에서, QI, QII, QIII, QIV, QV 또는 QVI의 치환기 중의 R은

이다.

다른 실시양태에서, R₁은 QVI이고, R은

이다.

다른 실시양태에서, QI, QII, QIII, QIV, QV 또는 QVI의 치환기 중의 R은

이고, 여기서의 R₁₀ 및 R'₁₀ 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 지환족이거나, 또는 R₁₀과 R'₁₀이 이들이 둘다 결합된 원자와 함께 임의로 치환된 지환족 또는 임의로 치환된 헤테로지환족을 형성하고, 각각의 K는 독립적으로 결합, C_{1 -12} 지방족, -O-, -S-, -S(O)₂-, -NR₁₄-, -C(O)- 또는 -C(O)NR₁₄-이고, 여기서의 R₁₄는 수소 또는 임의로 치환된 C_{1 -12} 지방족이며, n은 1 내지 3이다. 명확성을 위해서, 1개 초과의 R₁₀이 QI, QII, QIII, QIV, QV 또는 QVI에 존재하는 경우에는 각각의 R₁₀이 동일한 것일 수도 있고 상이한 것일 수도 있다. 여러 실시양태에서, R₁₀ 또는 R'₁₀는 [C_3-10 시클로알킬 또는 시클로알케닐]-C_{1 -12} 지방족, (3원 내지 10원)-헤테로지환족, (3원 내지 10원)-헤테로지환족-C_{1 -12} 지방족-, (5원 내지 10원)-헤테로아릴 또는 (5원 내지 10원)-헤테로아릴-C_{1 -12} 지방족-이다.

다른 실시양태에서, QI, QII, QIII, QIV, QV 또는 QVI의 치환기 중의 R은

이다.

추가의 실시양태에서, QI, QII, QIII, QIV, QV 또는 QVI의 치환기 중의 R은

이고, 여기서의 각각의 Z는 독립적으로 -O-, -S-, -NR₅₀- 또는 -C(R_5O)₂-이고,

은 독립적으로 단일 결합 또는 이중 결합이고, 각각의 R₅₀은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 지환족이며, n은 1 또는 2이다.

여러 실시양태에서, R₁은

이고, 여기서의 T는 결합, -C(O)-, -OC(O)-, -NHC(O)-, -S(O)₂N(H)-, -C(O)C(O)- 또는 -SO₂-이고, 각각의 R은 독립적으로 수소, 아미노, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고, R₈ 및 R'₈ 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며, 각각의 R₉는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 헤테로아릴, 또는 임의로 치환된 페닐이거나, 또는 인접한 원자에 결합된 R₈과 R₉가 이들이 부착된 원자와 함께 5원 내지 7원의 임의로 치환된 모노시클릭 헤테로지환족 또는 6원 내지 12원의 임의로 치환된 바이시클릭 헤테로지환족 (여기서는 각각의 헤테로지환족 고리)을 형성하거나, 또는 R₈과 R'₈이 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 지환족 또는 임의로 치환된 헤테로지환족을 형성하고, R₁₁ 및 R'₁₁ 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 페닐, 임의로 치환된 지환족, 또는 임의로 치환된 헤테로지환족이거나, 또는 R₁₁과 R'₁₁이 이들이 둘다 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 3원 내지 7원의 지환족 또는 헤테로지환족 고리를 형성하며, 각각의 R₁₂는 독립적으로 수소 또는 보호기이다.

일부 실시양태에서, R₁₁과 R'₁₁은 이들이 부착된 원자와 함께 3원 내지 7원의 고리를 형성한다. 비-제한적인 예는 다음을 포함한다:

R₈ 및 R₁₁의 비-제한적인 예는 다음을 포함한다:

.

별법으로, R₈과 R₁₁은 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 5원 내지 7원의 모노시클릭 헤테로지환족 또는 임의로 치환된 6원 내지 12원의 바이시클릭 헤테로지환족을 형성할 수 있고, 여기서의 각각의 헤테로지환족 또는 아릴 고리는 O, S 및 N으로부터 선택된 추가의 헤테로원자를 임의로 함유한다.

또한, R₈과 R₉는 이들이 부착된 원자와 함께 고리를 형성할 수 있고, R₇ 및 R₈과 R₉에 의해 형성된 고리 시스템은 임의로 치환된 8원 내지 14원의 바이시클릭 융합 고리 시스템을 형성하고, 여기서의 바이시클릭 융합 고리 시스템은 임의로 치환된 페닐과 임의로 추가로 융합되어 임의로 치환된 10원 내지 16원의 트리시클릭 융합 고리 시스템을 형성한다.

여러 실시양태에서, R₁은

이고, 여기서의 T는 -C(O)-이고, R은

이다.

여러 실시양태에서, R₁은 하기로부터 선택된 기이다:

.

여러 실시양태에서, R₁은

이고, 여기서의 U는 결합 또는 -O-이고, V는 알킬이고, T는 -C(O)-이며, R은 지방족, 지환족, 헤테로지환족, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시 또는 시클로알콕시이다. R₁의 예는

(여기서, R, U, 및 V는 바로 앞에서 정의한 바와 같음)를 포함한다.

일부 실시양태에서, R은 지방족, 지환족 또는 헤테로지환족이어서, R₁의 예는 다음을 포함한다:

다른 실시양태에서, R은 알콕시 또는 시클로알콕시여서, R₁의 예는 다음을 포함한다:

추가의 실시양태에서, R은 시아노, 할로, 지방족, 지환족, 헤테로지환족, 아릴 또는 헤테로아릴로 임의로 치환된 시클로프로필이어서 R₁은 하기로 구성된 군에서 선택된다:

.

일부 실시양태에서, R₁은

이고, 여기서의 X₉₉는 OR, OC(NH)R 또는

이고, X₁₀₀은 NH, CH₂이며, R은 상기 정의되어 있다.

일부 실시양태에서, R₁은

이고, 여기서의 U는 결합 또는 -O-이고, V는 알킬 (예를 들어, 메틸)이고, T는 -C(O)-이며, R은 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시 또는 (시클로알킬)옥시이고, 이것들 각각은 각각 독립적으로 할로, 히드록시, 시아노, 아미노, 니트로, 지방족, 할로지방족, (지방족)옥시, (할로(지방족))옥시, (지방족(옥시(아릴)))옥시, 아릴, 헤테로아릴, 할로아릴, 지환족 또는 헤테로지환족으로 구성된 군에서 선택된 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된다.

R의 예는 1개 내지 4개의 임의의 치환기를 갖는 시클로프로필이고, 각각의 치환기는 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 시클로알킬, 알킬, 알케닐, 시아노 또는 할로이며, 임의의 카르보닐 링커를 통해 시클로프로필에 부착되거나, 또는 2개의 임의의 치환기가 이들이 부착된 원자(들)과 함께 헤테로시클로알킬 또는 시클로알킬을 형성한다. 이러한 R의 구체적인 예는 다음을 포함한다:

.

R의 또다른 예는 임의로 치환된 시클로부틸 (예를 들어,

) 또는 임의로 치환된 헤테로시클로부틸이다.

R의 또다른 예는 임의로 치환된 헤테로아릴 (예를 들어,

)이다.

R의 또다른 추가의 예는 임의로 치환된 알콕시 또는 임의로 치환된 시클로알킬옥시이다. 이러한 R의 구체적인 예는 다음을 포함한다:

R의 또다른 예는 임의로 치환된 알킬이다. 이러한 R의 구체적인 예는 다음을 포함한다:

본 발명에 따른 화합물의 R₁의 구체적인 예는 다음을 포함한다:

R₁의 추가의 예는 PCT 공개 WO 2004/103996 A1, WO 2004/72243 A2, WO 03/064456 A1, WO 03/64455 A2, WO 03/064416 A1, 및 미국 특허 공개 US 2005/0090450 및 또한 본원에서 언급된 다른 간행물에 예시되어 있고, 이들 문헌 각각은 그 전문이 참고로 포함된다.

2. 치환기 R ₂ :

여러 실시양태에서, R₂는 -Z^BR₅이고, 여기서의 각각의 Z^B는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 분지형 또는 선형 C_{1 -12} 지방족 쇄로 Z^B의 최대 3개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(S)-, -C(O)NR^B-, -C(O)NR^BNR^B-, -C(O)O-, -NR^BC(O)O-, -NR^BC(O)NR^B-, -NR^BNR^B-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^B-, -SO₂NR^B- 또는 -NR^BSO₂NR^B-로 대체되지만, 이때의 -SO-, -SO₂- 또는 -SO₂NR^B-는 화학식 I의 카르보닐에 직접 결합하지 않는다. 각각의 R₅는 독립적으로 R^B, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이다. 각각의 R^B는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이다.

추가의 실시양태에서, R₂는 -Z₁-V₁-Z₂-V₂-Z₃-V₃이고, 여기서의 V₁, V₂ 및 V₃ 각각은 독립적으로 결합, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 또는 수소 (V₁, V₂, V₃이 R₂의 말단기인 경우)이고, Z₁, Z₂ 및 Z₃ 각각은 독립적으로 결합, -C(O)-, -C(O)C(O)-, -C(S)-, -C(O)N(Q₆)-, -N(Q₆)C(O)-, -C(O)C(O)N(Q₆)-, -O-, -SO-, -SO₂-, -N(Q₆)SO₂-, -N(Q₆)C(O)N(Q₆)-, -N(Q₆)C(S)N(Q₆)-, -N(Q₆)-, -N(Q₆)SO₂-, -SO₂N(Q₆)-, -C(O)N(Q₆)SO₂-, -SO₂N(Q₆)C(O)- 또는 수소 (Z₁, Z₂ 또는 Z₃이 R₂의 말단기인 경우)이며, 이때의 각각의 Q₆은 독립적으로 수소, 또는 임의로 치환된 지방족이다.

다른 실시양태에서, R₂는 임의로 치환된 (지방족)아미노로 R₂의 지방족 부분은 -Z₂-V₂-Z₃-V₃ 또는 -Z₃-V₃이고, 여기서의 Z₂ 및 Z₃ 각각은 독립적으로 결합, -C(O)-, -N(Q₅)-, -CH(OH)-, -C(O)N(Q₆)- 또는 -C(O)C(O)N(Q₆)-이고, V₂는 독립적으로 결합, 임의로 치환된 지방족, 또는 임의로 치환된 지환족이며, V₃은 수소, 임의로 치환된 지방족, 또는 임의로 치환된 지환족이다.

추가의 실시양태에서, Z₂는 -CH(OH)-이고 V₂는 결합이고 Z₃은 -C(O)N(Q₆)-여서, R₂는 -N(Q₆)-CH(OH)-C(O)-N(V₃)(Q₆)이다.

특정 실시양태에서, R₂는 임의로 치환된 (지방족)아미노, 임의로 치환된 (지환족)아미노, 임의로 치환된 알콕시, 또는 히드록시이다.

또다른 실시양태에서, R₂는 1개 내지 3개의 할로, 히드록시, 지방족, 지환족 또는 헤테로지환족으로 임의로 치환된 알콕시이다.

여러 실시양태에서, R₂는 아미노이다. R₂의 예는 일치환된 아미노이다. R₂의 추가의 예는

(지환족(카르보닐(카르보닐(알킬))))아미노,

(아미노(카르보닐(카르보닐(지방족))))아미노,

(지방족(카르보닐(카르보닐(지방족))))아미노, 또는

(아릴(아미노(카르보닐(카르보닐(지방족)))))아미노

를 포함하고, 이것들 각각은 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된다.

여러 실시양태에서, R₂는 -NR_2ZR'_2Z, -SR_2Y 또는 -NR_2Y-CR_2XR'_2X-L₁-NR_2Z-R_2W이고, 여기서의 R_2Y는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고, 각각의 R_2W는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 지환족이고, R_2X 및 R'_2X 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 페닐, 임의로 치환된 지환족, 또는 임의로 치환된 헤테로지환족이거나, 또는 R_2X와 R'_2X가 이들이 둘다 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 3원 내지 7원의 지환족 또는 헤테로지환족 고리를 형성하고, 각각의 L₁은 -CH₂-, -C(O)-, -CF₂-, -C(O)C(O)-, -C(O)O-, -S(O)- 또는 -SO₂-이고, R_2Z 또는 R'_2Z 각각은 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는 R_2Z와 R'_2Z가 이들이 둘다 부착된 질소와 함께 임의로 치환된 3원 내지 7원의 헤테로지환족 고리를 형성할 수 있다.

여러 실시양태에서, R_2X 및 R'_2X 각각은 독립적으로 수소, 또는 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 또는 임의로 치환된 (지환족)지방족이다.

여러 실시양태에서, L₁은 -C(O)C(O)- 또는 -SO₂-이다.

여러 다른 실시양태에서, 각각의 R_2W는 수소 또는 임의로 치환된 지환족이다.

여러 실시양태에서, R₂는 -NH-CHR_2X-C(O)-C(O)-N(R_2Z)R_2W이다.

여러 실시양태에서, R₂는 -NH-CHR_2X-CH(OH)-C(O)-N(R_2Z)R_2W이다.

여러 실시양태에서, R₂는 -NH-CHR_2X-C(O)-C(O)-NHR_2Z이고, 여기서의 -NHR_2Z는 -NH-시클로프로필, -NH-Me, -NH-Et, -NH-iPr, -NH-nPr이다.

여러 실시양태에서, R₂는 -NR_2ZR'_2Z 또는 -SR_2Z이고, 여기서의 R_2Z 및 R'_2Z 각각은 독립적으로 수소, 알킬, 시클로알킬 또는 아르알킬이다. R_2Z의 비-제한적인 예는 메틸, 에틸, t-부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 및 벤질을 포함한다.

다른 실시양태에서, R₂는 (-NH-CR_2XR'_2X-L₁-C(O))_i-M이고, 여기서의 각각의 M은 독립적으로 -OH, -R_2X, -NR_2ZR'_2Z 또는 -OR_2X이고, 각각의 i는 1 또는 2이며, L₁, R_2Z, R_2X 및 R'_2Z는 상기 정의되어 있다.

여러 실시양태에서, R₂는 (-NH-CR_2ZR'_2Z-L₁-C(O))_i-M이고, 여기서의 L₁은 -C(O)-이고, i는 1이며, M은 독립적으로 -R_2X, -N(R_2XR'_2X), -OR_2X, -NHSO₂R_2X 또는 -SR_2X이다.

일부 실시양태에서, R'_2Z는 H이고, R_2Z는 지방족, (아릴)지방족 또는 지환족이다. R_2X의 비-제한적인 예는 수소,

을 포함한다.

일부 실시양태에서, R'_2X는 H이고, R_2X는 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 아르알킬, 임의로 치환된 헤테로지방족, 또는 임의로 치환된 헤테로아르알킬이다. R_2X의 일부 비-제한적인 예는 다음을 포함한다:

(여기서, c는 0, 1, 2 또는 3임).

여러 실시양태에서, R₂는

이고, 여기서의 R_2X는

이고, R_2W는

또는 수소이다.

일부 실시양태에서, R₂는 하기로 구성된 군에서 선택된다:

.

일부 실시양태에서, R₂는 하기로 구성된 군에서 선택된다:

.

일부 실시양태에서, R₂는 하기로 구성된 군에서 선택된다:

.

일부 실시양태에서, R₂는

이다.

일부 실시양태에서, R₂는

이고, 여기서의 각각의 R₅₆은 독립적으로 임의로 치환된 C_{1 -6} 지방족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 지환족, 또는 임의로 치환된 헤테로지환족이고, 각각의 R₅₇은 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 또는 임의로 치환된 아미노이고, m은 1 또는 2이며, R_2X 및 R'_2X 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는 R_2X와 R'_2X가 이들이 둘다 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 3원 내지 7원의 지환족 또는 헤테로지환족 고리를 형성한다.

일부 다른 실시양태에서, R₂는

이고, 여기서의 R₅₈ 및 R₅₉는 각각 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 알콕시, 임의로 치환된 아릴옥시, 임의로 치환된 헤테로아릴옥시, 임의로 치환된 (지환족)옥시, 임의로 치환된 (헤테로지환족)옥시, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 지환족, 또는 임의로 치환된 아미노로부터 선택되고, R_2X 및 R'_2X 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는 R_2X와 R'_2X가 이들이 둘다 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 3원 내지 7원의 지환족 또는 헤테로지환족 고리를 형성한다.

여러 실시양태에서, R₁의 일부와 R₂의 일부가 함께 시클릭 구조, 예를 들어 5원 내지 18원 시클로헤테로지방족 고리 (예를 들어, 임의로 치환된 6원 헤테로시클로알킬 고리)를 형성할 수 있다. 이로써 형성되는 화합물의 일부 비-제한적인 예는 다음을 포함한다:

.

여러 실시양태에서, R₂는 하기로부터 선택된다:

여러 실시양태에서, R₂는

이고, 여기서의 X₂₀₀은 -OX_2O2 또는 -X₂₀₂이고, 이때의 X₂₀₂는 지방족, 지환족, 헤테로지환족, 아릴 또는 헤테로아릴이다.

다른 실시양태에서, R₂는

이다.

일부 실시양태에서, R₂는

이다.

R₂의 추가의 예는 PCT 공개 WO 2004/103996 A1, WO 2004/72243 A2, WO 03/064456 A1, WO 03/64455 A2, WO 03/064416 A1, 및 미국 특허 공개 US 2005/0090450, 및 또한 본원에서 언급된 다른 간행물에 예시되어 있고, 이들 문헌 각각은 그 전문이 참고로 포함된다.

3. 치환기 R ₃ :

각각의 R₃은 지방족, 지환족, 헤테로지환족, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이것들 각각은 임의로 치환된다.

여러 실시양태에서, 각각의 R₃은 독립적으로 -Z^CR₆이고, 여기서의 각각의 Z^C는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 지방족으로 Z^C의 최대 2개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -CS-, -C(O)NR^C-, -C(O)NR^CNR^C-, -C(O)O-, -NR^CC(O)O-, -O-, -NR^CC(O)NR^C-, -NR^CNR^C-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^C-, -SO₂NR^C- 또는 -NR^CSO₂NR^C-로 대체된다. 각각의 R₆은 독립적으로 R^C, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂, 알콕시 또는 할로알콕시이다. 각각의 R^C는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족기, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이다. 그러나, 많은 실시양태에서, Z^C가 결합이고 R₆이 R^C인 경우에는 R^C가 독립적으로 임의로 치환된 지방족기, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이다.

다른 실시양태에서, 각각의 R₃은 임의로 치환된 지방족, 아미노, 술포닐, 술파닐, 술피닐, 술폰아미드, 술파미드, 술포, -O-R_3A, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며, 여기서의 각각의 R_3A는 독립적으로 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이다.

일부 실시양태에서, R₃은 임의로 치환된 아미노, -O-R_3A, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며, 여기서의 R_3A는 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이다.

여러 실시양태에서, R₃은 임의로 치환된 아릴이다. 일부 예에서, R₃은 모노시클릭, 바이시클릭 또는 트리시클릭 아릴이고, 이것들 각각은 임의로 치환된다. 예를 들어, R₃은 임의로 치환된 페닐, 임의로 치환된 나프틸, 또는 임의로 치환된 안트라세닐이다. 다른 예에서, R₃은 모노시클릭, 바이시클릭 또는 트리시클릭 아릴이고, 이것들 각각은 1개 내지 4개의 할로, 히드록시, 시아노, 니트로, 지방족, 할로지방족, (지방족)옥시, (할로(지방족))옥시, (지방족(옥시(아릴)))옥시, 아릴, 헤테로아릴, 할로아릴, 지환족, 헤테로지환족, 또는 이들의 조합으로 임의로 치환된다. 여러 예에서, R₃은 임의로 치환된 융합된 바이시클릭 아릴이다. 여러 예에서, R₃은 임의로 치환된 융합된 트리시클릭 아릴이다.

여러 실시양태에서, R₃은 임의로 치환된 헤테로아릴이다. 여러 예에서, R₃은 모노시클릭 또는 바이시클릭 헤테로아릴이고, 이것들 각각은 1개 내지 4개의 할로, 히드록시, 시아노, 니트로, 지방족, 할로지방족, (지방족)옥시, (할로(지방족))옥시, (지방족(옥시(아릴)))옥시, 아릴, 헤테로아릴, 할로아릴, 지환족, 헤테로지환족, 또는 이들의 조합으로 임의로 치환된다.

일부 실시양태에서, R₃은 임의로 치환된 지방족, 예컨대 메틸, 에틸 또는 프로필이고, 이것들 각각은 임의로 치환된다.

다른 실시양태에 따라, R₃은 임의로 치환된 지방족이다.

다른 실시양태에 따라, R₃은 임의로 치환된 C_{1 -5} 지방족이다.

여러 예에서, R₃은

이다.

여러 실시양태에서, R₃은 하기로부터 선택된 것이다:

일부 실시양태에서, R₃은 하기로 구성된 군에서 선택된다:

일부 실시양태에서, R₃은 임의로 치환된 모노시클릭, 바이시클릭 또는 트리시클릭 헤테로아릴이고, 이것들 각각은 1개 내지 3개의 할로, 히드록시, 시아노, 니트로, 지방족, 할로지방족, (지방족)옥시, (할로(지방족))옥시, (지방족(옥시(아릴)))옥시, 아릴, 헤테로아릴, 할로아릴, 지환족, 헤테로지환족, 또는 이들의 조합으로 임의로 치환된다.

추가의 실시양태에서, R₃은 하기로 구성된 군에서 선택된다:

다른 실시양태에서, R₃은 임의로 치환된 아미노 또는 임의로 치환된 아릴옥시이다.

일부 실시양태에서, R₃은 하기로 구성된 군에서 선택된다:

.

4. A기:

각각의 A는 -(CX₁X₂)_a-이고, 여기서의 X₁ 및 X₂ 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방족, 또는 임의로 치환된 아릴이거나, 또는 X₁과 X₂가 함께 옥소기를 형성하며, 각각의 a는 0 내지 3이다.

여러 실시양태에서, X₁ 또는 X₂는 수소이다.

여러 실시양태에서, X₁ 또는 X₂는 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방족이다. X₁ 또는 X₂의 예는 트리플루오로메틸, 또는 임의로 치환된 에틸, 프로필, 부틸, 또는 이들의 이성질체를 포함한다.

여러 실시양태에서, X₁ 또는 X₂는 임의로 치환된 아릴이다. X₁ 또는 X₂의 예는 임의로 치환된 페닐, 나프틸 또는 아줄레닐을 포함한다.

5. B기:

각각의 B는 -(CX₁X₂)_b-이고, 여기서의 X₁ 및 X₂ 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방족, 또는 임의로 치환된 아릴이거나, 또는 X₁과 X₂가 함께 옥소기를 형성하며, 각각의 b는 0 내지 3이다.

여러 실시양태에서, X₁ 또는 X₂는 수소이다.

여러 실시양태에서, X₁ 또는 X₂는 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방족이다. X₁ 또는 X₂의 예는 트리플루오로메틸, 또는 임의로 치환된 에틸, 프로필, 부틸, 또는 이들의 이성질체를 포함한다. 여러 추가의 예에서, X₁ 또는 X₂는 임의로 치환된 일치환 또는 이치환된 (아미노)-C_{1 -4} 지방족이다.

여러 실시양태에서, X₁ 또는 X₂는 임의로 치환된 아릴이다. X₁ 또는 X₂의 예는 임의로 치환된 페닐, 나프틸, 인데닐 또는 아줄레닐을 포함한다.

6. 치환기 Y 및 Y':

여러 실시양태에서, Y 및 Y' 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 또는 임의로 치환된 아릴이다.

Y 및 Y' 각각은 독립적으로 -Z^DR₇이고, 여기서의 각각의 Z^D는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 (C_{1 -6})-지방족 쇄로 Z^D의 최대 2개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -CS-, -C(O)NR^D-, -C(O)NR^DNR^D-, -C(O)O-, -OC(O)-, -NR^DC(O)O-, -O-, -NR^DC(O)NR^D-, -OC(O)NR^D-, -NR^DNR^D-, -NR^DC(O)-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^D-, -SO₂NR^D-, -NR^DSO₂- 또는 -NR^DSO₂NR^D-로 대체된다. 각각의 R₇은 독립적으로 R^D, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂ 또는 -OCF₃이다. 각각의 R^D는 독립적으로 수소, 또는 임의로 치환된 아릴이다.

여러 실시양태에서, Y 및 Y' 중 하나는 수소이다.

여러 실시양태에서, Y 및 Y' 중 하나는 임의로 치환된 지방족이다.

여러 실시양태에서, Y 및 Y' 중 하나는 임의로 치환된 아릴이다.

여러 실시양태에서, Y 및 Y'는 둘다 수소이다.

여러 실시양태에서, Y 또는 Y' 중 하나는 수소이고, 다른 하나는 불소이다.

여러 실시양태에서, Y 및 Y'는 둘다 불소이다.

추가의 예에서, Y 또는 Y' 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메톡시카르보닐이거나, Y 또는 Y' 중 하나는 수소이고 다른 하나는 히드록시이거나, 또는 Y와 Y'가 함께 옥소기를 형성하거나 =S를 형성한다.

7. 예외:

화학식 I의 화합물에서, a와 b의 합은 2 또는 3이다. 예를 들어, a는 0이고 b는 3이거나, a는 1이고 b는 2이거나, a는 2이고 b는 1이거나, 또는 a는 3이고 b는 0이다.

C. 하위 부류의 일반적 화합물

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 Ia의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 Ia의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R₃, A, B, Y 및 Y'는 화학식 I에서 상기 정의되어 있다.

각각의 R_1a는 -Q₄-W₄-Q₃-W₃-Q₂-W₂-Q₁이고, 여기서의 W₂, W₃ 및 W₄ 각각은 독립적으로 결합, -C(O)-, -C(S)-, -C(O)N(Q₅)-, -C(O)O-, -O-, -N(Q₅)C(O)N(Q₅)-, -SO₂-, -N(Q₅)SO₂-, -S-, -N(Q₅)-, -SO-, -N(Q₅)C(O)-, -OC(O)-, -N(Q₅)C(O)O- 또는 -SO₂N(Q₅)-이고, Q₁, Q₂, Q₃ 및 Q₄ 각각은 독립적으로 결합, 임의로 치환된 C_{1 -4} 지방 족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 또는 수소 (Q₁, Q₂, Q₃ 또는 Q₄가 R₁의 말단기인 경우)이며, 각각의 Q₅는 독립적으로 수소 또는 임의로 치환된 지방족이다.

각각의 R_2a는 -Z₁-V₁-Z₂-V₂-Z₃-V₃이고, 여기서의 V₁, V₂ 및 V₃ 각각은 독립적으로 결합, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 또는 수소 (V₁, V₂, V₃이 R₂의 말단기인 경우)이고, Z₁, Z₂ 및 Z₃ 각각은 독립적으로 결합, -C(O)-, -C(O)C(O)-, -C(S)-, -C(O)N(Q₅)-, -N(Q₅)C(O)-, -C(O)C(O)N(Q₅)-, -O-, -SO-, -SO₂-, -N(Q₅)SO₂-, -N(Q₅)C(O)N(Q₅)-, -N(Q₅)C(S)N(Q₅)-, -N(Q₅)-, -N(Q₅)SO₂-, -SO₂N(Q₅)-, -C(O)N(Q₅)SO₂-, -SO₂N(Q₅)C(O)- 또는 수소 (Z₁, Z₂ 또는 Z₃이 R₂의 말단기인 경우)이며, 이때의 각각의 Q₆은 독립적으로 수소, 또는 임의로 치환된 지방족이다.

여러 예에서, R_2a는 임의로 치환된 (지방족)아미노, 임의로 치환된 알콕시, 또는 히드록시이다.

여러 예에서, R_2a는 질소 원자가 -Z₂-V₂-Z₃-V₃ 또는 -Z₃-V₃으로 임의로 치환된 (지방족)아미노이고, 여기서의 Z₂ 및 Z₃ 각각은 독립적으로 결합, -C(O)-, -N(Q₅)- 또는 -C(O)C(O)N(Q₅)-이고, V₂ 및 V₃ 각각은 독립적으로 결합, 임의로 치환된 지방 족, 또는 임의로 치환된 지환족이다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 Ib의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 Ib의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R₃, R₈, R, T, A, B, Y 및 Y'는 화학식 I에서 상기 정의되어 있다.

각각의 G는 O, S 및 N으로부터 선택된 1개 내지 3개의 헤테로원자를 임의로 함유하는, 2개 내지 15개 원자의 임의로 치환된 지방족 쇄이다.

화학식 Ib의 화합물의 예는

를 포함하며, 여기서의 T, R 및 R₃은 화학식 I에서 상기 정의되어 있다.

화학식 Ib의 다른 예는

이고, 여기서의 각각의 R_2W는 독립적으로

또는 수소이고, 각각의 T는 독립적으로 결합, -C(O)-, -OC(O)-, -NHC(O)-, -S(O)₂N(H)-, -C(O)C(O)- 또는 -SO₂-이고, 각각의 R은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며, 각각의 R₉는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 헤테로아릴, 또는 임의로 치환된 페닐이다.

화학식 Ib의 화합물의 추가의 구체적인 예는

이다.

화학식 Ib의 화합물의 다른 예는 다음을 포함한다:

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 II의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 II의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서,

각각의 R₃은 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R_2Y는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R₉는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 지환족이고,

R_2X 및 R'_2X 각각은 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 페닐, 임의로 치환된 지환족, 또는 임의로 치환된 헤테로지환족이거나, 또는 R_2X와 R'_2X가 이들이 둘다 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 3원 내지 7원의 지환족 또는 헤테로지환족 고리를 형성하거나, 또는 R_2X와 R_2Y가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 5원 내지 7원의 헤테로지환족 고리를 형성 하고,

각각의 R_1b는 -Z^ER₂₁이고, 여기서의 Z^E는 -CH₂-, -NH-, -CH(R_1Z)- 또는 -O-이며, R₂₁은 임의로 치환된 6원 또는 7원의 지환족, 또는 임의로 치환된 tert-부틸이고,

각각의 R_1Z는 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

각각의 R_2Z는 수소, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 지방족이며,

각각의 R_2W는 수소, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 지방족이거나, 또는 R_2Z와 R_2W가 이들이 부착된 질소 원자와 함께 임의로 치환된 헤테로지환족을 형성한다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 III의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 III의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서,

R_1e는

이고,

R_2e는

이고,

R'_2e는

또는 수소이며,

R_3e는 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 IV의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 IV의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서,

R_1e는

이고,

R_2e는

이고,

R'_2e는

또는 수소이며,

R_3f 및 R'_3f 각각은 독립적으로 수소, 술폰아미드, 술포닐, 술피닐, 임의로 치환된 아실, 임의로 치환된 지방족, 임의로 치환된 지환족, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는 R_3f와 R'_3f가 이들이 부착된 질소 원자와 함께 임의로 치환된 포화, 부분적 불포화 또는 완전 불포화의 5원 내지 8원 헤테로지환족 또는 헤테로아릴을 형성한다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 V의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 V의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R_1e, R_2e 및 R'_2e는 화학식 III에서 상기 정의되어 있다.

각각의 D는 독립적으로 -CR₈-, N, S 또는 O이지만, 2개 이하의 D는 독립적으로 S 또는 O이고, R₈는 화학식 I에서 상기 정의되어 있다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 VI의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 VI의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R_1e, R_2e 및 R'_2e는 화학식 III에서 상기 정의되어 있다.

각각의 R_3g는 치환된 아릴 또는 치환된 헤테로아릴이다. 일부 실시양태에서, R_3g는

이다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 VII의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 VII의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R_1e, R_2e 및 R'_2e는 화학식 III에서 상기 정의되어 있고, R_3g는 화학식 VI에서 정의되어 있다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 VIII의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 VIII의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R_1e, R_2e 및 R'_2e는 화학식 III에서 상기 정의되어 있고, R_3g는 화학식 VI에서 정의되어 있다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 IX의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 IX의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R_1e, R_2e 및 R'_2e는 화학식 III에서 상기 정의되어 있고, R_3g는 화학식 VI에서 정의되어 있다.

본 발명의 또다른 측면은 세린 프로테아제 활성을 억제하는데 유용한 하기 화학식 X의 화합물, 및 세린 프로테아제 활성의 억제 방법을 제공한다. 화학식 X 의 화합물은 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 포함한다:

상기 식에서, R_1e, R_2e 및 R'_2e는 화학식 III에서 상기 정의되어 있고, R_3g는 화학식 VI에서 정의되어 있다.

D. 실시양태의 조합

다른 실시양태는 상기 언급한 치환기 R₁, R₂, R₃, A, B, Y 및 Y'의 임의의 조합을 포함한다.

E. 예시적인 화합물

본 발명은 R₁ 및 R₂가 세린 프로테아제 억제제의 구조적 요소를 함유하는 화합물을 포함한다. 세린 프로테아제 억제제의 구조적 요소를 갖는 화합물은 하기 문헌의 화합물을 포함하지만 이에 제한되지 않으며, 이들 문헌 각각은 본원에 참고로 포함된다:

본 발명의 화합물의 구체적인 예를 하기 표 1에 나타내었다:

II . 화합물의 합성

화학식 I의 화합물은 하기 제시되는 예시적인 합성 경로를 이용하여 시판되는 출발 물질로부터 쉽게 합성될 수 있다. 화학식 I의 화합물을 제조하는 예시적인 합성 경로는 하기하는 제조예, 방법, 실시예 및 반응식에서 제공된다. 예를 들어, 스피로이속사졸린 부분은 쿠르트 엠. 제이.(Kurth, M. J.) 등이 문헌 [J. Org. Chem., 2002, 67, pp. 5673-5677]에서 보고하고 하기 반응식 1에 예시된 바와 같이 니트릴 옥시드와 메틸렌 프롤린 사이의 1,3-쌍극성 첨가에 의해 제조될 수 있다. 니트릴 옥시드는 공지의 방법을 이용하여 클로로옥심 또는 니트로알칸으로부터 생성될 수 있다.

반응식 1은 화학식 I의 화합물의 제조 방법을 일반적으로 대표한다. 이것의 전체 전략은 화학식 1h의 화합물을 구축한 후에 PG₂는 존재하게 하면서 보호기 PG₁을 선택적으로 제거하여 중간체 1j를 제공하는 것이다. 이후, 치환기 R₁이 1j와 커플링될 수 있고, 이것으로 R₁을 함유하는 화학식 1k의 중간체가 제공된다. 일부 실시양태에서, R₁은 그 자체가 PG₂는 존재하게 하면서 선택적으로 제거된 후에 추가로 변형될 수 있는 보호기를 함유할 수 있다. R₁ 부분의 첨가 후에 PG₂기가 제거되어 중간체 1m이 제공된다. 이후, 1m과 R₂ 부분의 커플링으로 화학식 I의 펩티드모방체(peptidomimetic) 화합물이 생성된다.

다시 반응식 1에서, 한 예에서는 공지의 방법을 이용하여 히드록시 프롤린 1a가 Boc 유도체로서 보호되어 (즉, 단계 ia) 보호된 프롤린 1b (여기서, PG₁은 t-부틸옥시카르보네이트임)가 생성된다. 예를 들어, 문헌 [T.W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd edition, John Wiley and Sons, Inc. (1999)]을 참조한다. 1b의 산화 (즉, 단계 ib)에 의해 케토-피롤리딘산 1c가 생성된다. 상기 산화는 적합한 시약, 예를 들어 TEMPO 존재하의 차아염소산나트륨을 사용하여 달성된다. 다음으로, 단계 ic에서는 상기 케토-피롤리딘산 1c가 비티그(Wittig) 시약, 예를 들어 화학식 (Ph)₃P=C(Y)(Y')의 트리페닐포스포늄 일리드와 공지의 조건하에 반응하여 화학식 1d의 엑소메틸렌 화합물이 제공된다. 유리 산 1c를 사용하여 상응하는 유리 산 1d를 제공하는 것이 유리한데, 이는 산 1d를 수성 염기성 용액으로 간단하게 추출함으로써 1d가 중성 또는 염기성 부산물로부터 적합하게 정제될 수 있기 때문이다. 이후, 산 1d를 적합한 보호기, 예를 들어 t-부틸 에스테르로 공지 조건 (상기 문헌)하에 보호 (단계 id)하면 중간체 1e가 제공된다.

1e를 니트릴 옥시드 1f와 반응시키면 스피로이속사졸린 1g 및 1h의 신(syn)- 및 안티(anti)-이성질체들의 혼합물이 제공된다. 본원에서 언급한 바와 같이, 신-은 프롤린 고리의 2-카르복실 부분 및 이속사졸린 고리의 산소가 프롤린 고리의 평면에 대해 동일한 면에 존재함을 의미한다. 용어 안티-는 프롤린 고리의 2-카르복실 부분 및 이속사졸린 고리의 산소가 프롤린 고리의 평면에 대해 서로 반대 면에 존재함을 의미한다. 따라서, 1g는 본 발명의 신-화합물을 나타내고, 1h는 본 발명의 안티-화합물을 나타낸다.

일부 실시양태에서, PG₁이 Boc이고 PG₂가 t-부톡시인 경우에 보호기 PG₂는 존재하게 하면서 1g 및 1h로부터 보호기 PG₁을 선택적으로 제거하는 것은, 약 -40℃ 내지 약 40℃, 약 -20℃ 내지 약 20℃, 및 약 -5℃ 내지 약 5℃의 온도에서 적합한 유기 용매 중 술폰산, 예를 들어 메탄 술폰산을 사용하여 달성될 수 있다. 적합한 유기 용매는 예를 들어 염화메틸렌 및 테트라히드로푸란을 포함한다.

이성질체 1i 및 1j는 상응하는 유기 산 염의 혼합물을 결정화하여 분리될 수 있으며, 이는 보다 복잡한 방법, 예를 들어 크로마토그래피를 피한다는 점에서 유리하다. 적합한 유기 염은 유기 카르복실산, 예를 들어 아세트산, 임의로 치환된 벤조산, 타르타르산, 말론산, 푸마르산, 옥살산, 만델산, 시트르산, p-톨루오일 타르타르산 및 말레산, 유기 술폰산, 예를 들어 메탄 술폰산, 임의로 치환된 벤젠 술폰산, 트리플루오로메탄 술폰산 및 캄포르 술폰산의 염을 포함한다.

단일 스피로이속사졸린 이성질체, 예를 들어 1j는 커플링 시약, 예를 들어 EDCI의 존재하에 산 R₁COOH와 커플링되어 중간체 스피로이속사졸린 1k를 생성한다. R₁ 측쇄의 절단 또는 라세미화를 최소화하면서 1k의 보호기 PG₂를 선택적으로 제거하여 1m을 생성하는 것은, 약 -40℃ 내지 약 40℃, 약 -20℃ 내지 약 20℃, 및 약 -5℃ 내지 약 5℃의 온도에서 적합한 유기 용매 중 적합한 무기 산을 사용하여 달성된다. 적합한 무기산은 예를 들어 진한 염산 또는 진한 황산을 포함한다. 적합한 유기 용매는 예를 들어 염화메틸렌 및 테트라히드로푸란을 포함한다. 이후, 스피로이속사졸린 1m은 아민 부분 R₂와 커플링되어 화학식 I의 화합물을 제공한다.

다시 반응식 1에서, PG₁(CO)-는 아민 보호기 (여기서, PG₁은 예를 들어 메톡시카르보닐, t-부틸옥시카르보닐, 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐 또는 벤질옥시카르보닐임)일 수 있고, PG₂(CO)-는 산 또는 산 보호기 (여기서, PG₂는 예를 들어 -OH, 메톡시, t-부틸옥시 또는 벤질옥시임)일 수 있다.

PG₁기 및 PG₂기 각각은 공지의 방법을 이용하여 본원에 추가로 기재된 바와 같이 개별적으로 또는 함께 코어 스피로이속사졸린 구조에 혼입될 수 있다. 예를 들어, 원하는 R₁ 치환기가 PG₁기 (예를 들어 보호기) 이외의 기인 경우에는 상기 PG₁기가 제거되어 유리 아민기를 갖는 화합물이 제공될 수 있다. 상기 아민기 및 적절한 부분이 공지된 커플링 조건하에 커플링되어 R₁이 프로테아제 억제제 부분인 화합물이 제공될 수 있다. 예를 들어, PG₂ 부분이 보호된 경우에는 상기 보호기가 제거될 수 있고 R₂ 부분이 도입될 수 있다.

본 발명의 화합물을 제조하는 또다른 방법이 하기 반응식 2에서 예시된다.

반응식 2에서, 기호

은 반응물질들이 관능기를 통해 결합되어 있는 중합체 수지를 나타내며, 상기 관능기는 생성물의 추가 변형 후에 생성물을 수지로부터 제거할 수 있게 한다. 적합한 수지는 엘만(Ellman) 등이 문헌 [Tetrahedron Letters, 1994, 35, 9333]에 기재한 바와 같은 중합체-결합된 디히드로피란 (DHP) 수지이다.

단계 iia에서, 아민과 산 둘다의 동시 탈보호는 프롤린 1e를 산, 예를 들어 트리플루오로아세트산과 염화메틸렌 중에서 접촉시켜 아미노산 2a를 제공하여 달성될 수 있다. 단계 iib에서, 2a를 활성화된 Fmoc 유도체, 예를 들어 N-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐옥시)숙신이미드 (Fmoc-OSu)와 온화한 무기 염기, 예컨대 탄산나트륨의 존재하에 반응시키면 Fmoc 유도체 2b가 생성된다.

수지-결합된 펩티드 2d의 제조는 단계 iic에서 Fmoc 유도체 2b를 유리 산 2b와 반응하는 DHP 수지-결합된 아미노-알콜 2c와 커플링 시약, 예를 들어 O-벤조트리아졸-N,N,N',N'-테트라메틸-우로늄-헥사플루오로-포스페이트 (HBTU), 라세미화 저해제, 예를 들어 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBT) 및 3차 아민, 예를 들어 디-이소프로필에틸 아민 (DIEA)의 존재하에 반응시켜 달성될 수 있다.

반응식 1에서와 같이, R₃-치환된 니트릴 옥시드 1f에서는 수지-결합된 펩티드 2d와의 쌍극성 고리화첨가 반응이 일어나서 화합물 2e의 2종의 이성질체, 신- 및 안티-가 생성될 수 있다. 다음으로, 단계 iid에서는 2e를 2차 아민, 예를 들어 피페리딘과 극성 용매, 예컨대 디메틸포름아미드 중에서 접촉시켜 Fmoc 보호기를 제거하면 2f가 형성된다. 단계 iie를 통한 펩티드 2g의 형성은, 2f를 카르복실산과 커플링 시약, 예컨대 HBTU, 라세미화 저해제, 예컨대 HOBt, 및 3차 아민, 예컨대 DIEA의 존재하에 반응시켜 달성될 수 있다. 단계 iif에서 펩티드-수지 2g의 절단에 의한 알파-히드록시-아미드 2h의 생성은, 2g를 강산, 예를 들어 트리플루오로아세트산 및 물과 접촉시켜 달성될 수 있다.

최종 단계인 iig에서는 알파-히드록시-아미드 2h를 데스-마르틴(Dess- Martin) 페리오디난 산화 또는 피츠너-모파트(Pfitzner-Moffat) 산화를 이용하여 2i로 산화시킨다.

별법으로, 화학식 I의 화합물은 하기 반응식 3에서 예시된 바와 같이 수지-결합된 시약을 사용하여 제조될 수도 있다:

반응식 3에서, PG₂는 존재하게 하면서 PG₁을 선택적 제거 (단계 if)하는 것은 스피로이속사졸린 이성질체(들) 1i 및/또는 1j를 제공한다. 단계 iiia에서 1i 및/또는 1j를 활성화된 Fmoc 유도체, 예를 들어 N-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐옥시)숙신이미드 (Fmoc-OSu)와 온화한 무기 염기, 예를 들어 탄산나트륨의 존재하에 반응시키면 Fmoc 유도체 3a가 생성된다.

수지-결합된 펩티드 2e의 제조는 단계 iiib를 통해 Fmoc 유도체 3a를 유리 산 3b와 반응하는 DHP 수지-결합된 아미노-알콜 2c와 커플링 시약 (예를 들어, O-벤조트리아졸-N,N,N',N'-테트라메틸-우로늄-헥사플루오로-포스페이트 (HBTU)), 라세미화 저해제 (예를 들어, 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBT)) 및 3차 아민 (예를 들어, 디-이소프로필에틸 아민 (DIEA))의 존재하에 반응시켜 수행될 수 있다.

단계 iid에서, 2e를 2차 아민, 예를 들어 피페리딘과 극성 용매, 예컨대 디메틸포름아미드 중에서 접촉시켜 Fmoc 보호기를 제거하면 2f가 생성된다. 펩티드 2g의 형성은 예를 들어 2f를 카르복실산과 커플링 시약 (예를 들어, HBTU), 라세미화 저해제 (예를 들어, HOBt) 및 3차 아민 (예를 들어, DIEA)의 존재하에 반응시켜 달성될 수 있다. 펩티드-수지 2g를 절단하여 유리 펩티드 2h를 수득하는 것은, 예를 들어 2g를 강산 (예를 들어, 트리플루오로아세트산) 및 물과 접촉시켜 달성될 수 있다.

최종 단계인 iig에서, 알콜인 2h를 예를 들어 데스-마르틴 페리오디난 또는 차아염소산나트륨 및 TEMPO를 사용하여 2i로 산화시킬 수 있다.

하기 반응식 4는 R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 거대고리형 헤테로지환족을 형성한 화학식 I의 화합물의 합성 경로를 예시한다.

반응식 4에서, 스피로이속사졸린산 E4가 커플링 시약의 존재하에 아미노 에스테르 H1과 반응하여 중간체 H2를 생성한다. H2의 거대고리화로 화합물 H3이 생성된다. 에스테르 H2의 가수분해로 산 H4가 생성된다. 산 H4가 커플링 시약의 존재하에 술폰아미드 또는 술파미드와 반응하여 생성물 H5를 생성한다.

이하에 나타낸 반응식 5, 6, 7, 8 및 9는 상기한 방법 중 하나에 따른 화학식 I의 화합물의 전체 합성법의 예이다.

반응식 5에서, 보호된 t-부틸디메틸실릴-히드록시벤즈알데히드 5b는 앞서 기재한 바와 같이 히드록사모일 클로라이드 5d로 전환된다. 5d가 엑소메틸렌 피롤리딘과 반응하면 스피로이속사졸린 5e가 생성된다. 5e를 탈보호하여 5f를 수득한 후에 트리플루오로메탄술폰산 무수물과 반응시키면 트리플레이트 5g가 생성된다. 5f를 아민 HNU₁U₂와 반응시키면 중간체 스피로이속사졸린 5h가 생성되고, 이것을 앞서 기재한 바와 같은 본 발명의 화합물로 전환시킨다.

별법으로, 히드록시-스피로이속사졸린 중간체 5f는 알킬화되어 중간체 5k를 제공할 수 있고, 이것은 본 발명의 화합물로 유사하게 전환시킬 수 있다.

반응식 6에서, 2-보호된 피롤리디논을 HMPT 및 아연의 존재하에 디플루오로디브로모메탄과 반응시키면 디플루오로엑소메틸렌 중간체 6b가 생성된다. 앞서 기재한 바와 같은 니트릴 옥시드 1f와의 쌍극성 첨가로 디플루오로스피로이속사졸린 6c가 생성된다. 유사한 방식으로, 중간체 6b 및 6f는 각각 6a 및 6e로부터 제조되고, 상응하는 치환된 이소옥사졸린 6d 및 6g로 전환된다. 다른 변형법에서, 중간 체 6h를 예시된 시약으로 브롬화시켜 6j를 생성할 수도 있고, 또는 알킬화시켜 6k를 생성할 수도 있으며, 또는 산화시켜 6m을 생성할 수도 있다.

반응식 7에서, 나타낸 엑소메틸렌 피롤리딘을 1f (여기서, R₃은 -COOEt임)로 쌍극성 첨가하면 에스테르 7a가 생성된다. 7a의 에틸 에스테르를 가수분해하여 산 클로라이드로 전환 (나타내지 않음)시켜 암모니아와 반응시키면 아미드 7c가 생성된다. 7c를 트리플루오로아세트산 무수물과 반응시키면 니트릴 7d가 생성되고, 이것을 앞서 기재한 방법에 따라 펩티드 중간체 7e로 전환시킨다. 중간체 7e는 아지드 U₄N₃과 반응하여 테트라졸 7f를 생성하고, 이것을 본 발명의 화합물 7g로 산화시킨다. 상기 반응식의 변형법에서, 에스테르 7a는 트리아졸 7h로 전환된 후에 본 발명의 화합물 7i로 전환될 수도 있다.

반응식 8에서, 앞서 기재한 바와 같으나 히드록시카르본이미드 디브로마이드를 사용한 쌍극성 첨가로 브로모이속사졸린 8a가 생성된다. 8a가 아릴보론산과 팔라듐 촉매의 존재하에 반응 (스즈끼(Suzuki) 조건)하면 중간체 8b가 생성되고, 이것을 앞서 기재한 방법에 따라 본 발명의 화합물로 전환시킨다. 단계 8a 및 8b에서의 AR은 아릴 또는 헤테로아릴을 나타낸다.

반응식 9에서, 비티그 생성물 9a에서 쌍극성 첨가가 일어나 스피로이속사졸린 9b가 생성된다. 9b를 예를 들어 DIBAL로 환원시키면 알콜 9c가 생성되고, 이것을 알킬화하여 중간체 9e를 수득할 수 있으며, 이후에 이것을 앞서 기재한 방법에 따라 본 발명의 화합물로 전환시킬 수 있다. 에스테르 9b를 예를 들어 LiOH로 가수분해하면 카르복실산 9d가 생성되고, 이것을 본원에 기재한 바와 같은 화학식 I의 화합물로 전환시킬 수 있다.

반응식 10에서, 2-보호된 피페리디논 10b에서 비티그형 반응이 일어나서 엑소메틸렌 화합물 10c가 생성되고, 여기서 앞서 기재한 바와 같은 쌍극성 첨가가 일어나서 4.5-스피로이속사졸린 10d가 생성되고, 이것을 앞서 기재한 바와 같이 본 발명의 화합물로 전환시킬 수 있다.

III . 제제화, 투여 및 용도

본 발명의 또다른 실시양태는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염 또는 상기 염의 혼합물을 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 또다른 실시양태에 따라, 화학식 I의 화합물은 샘플 또는 환자에서 바이러스 생활 주기에 필요한 세린 프로테아제를 코딩하는 바이러스의 부하량을 감소시키는데 유효한 양으로 존재하며, 상기 조성물은 제약상 허용가능한 담체를 포함한다.

본 발명의 화합물의 제약상 허용가능한 염이 이들 조성물에 사용되는 경우, 이들 염은 바람직하게는 무기산 또는 유기산 및 염기로부터 유래된다. 이러한 산 염 중에는 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 벤젠 술포네이트, 비술페이트, 부티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포르 술포네이트, 시클로펜탄-프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 푸마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 헤미술레이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로요오다이드, 2-히드록시에탄술포네이트, 락테이트, 말레에이트, 메탄술포네이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐 프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 토실레이트 및 운데카노에이트가 포함된다. 염기 염은 암모늄 염, 알칼리 금속 염, 예컨대 나트륨 및 칼륨 염, 알칼리 토금속 염, 예컨대 칼슘 및 마그네슘 염, 유기 염기와의 염, 예컨대 디시클로헥실아민 염, N-메틸 D-글루카민, 및 아미노산, 예컨대 아르기닌, 리신 등과의 염을 포함한다.

또한, 염기성 질소 함유 기는 저급 알킬 할라이드, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필 및 부틸 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드, 디알킬 술페이트, 예컨대 디메틸, 디에틸, 디부틸 및 디아밀 술페이트, 장쇄 할라이드, 예컨대 데실, 라우릴, 미리스틸 및 스테아릴 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드, 아르알킬 할라이드, 예컨대 벤질 및 페네틸 브로마이드 등과 같은 작용제로 4차화시킬 수 있다. 이에 따라 물 또는 오일에 가용성이거나 분산가능한 생성물이 수득된다.

본 발명의 조성물 및 방법에 사용되는 화합물은 또한 적절한 관능기를 추가 하여 개질시킴으로써 선택적 생물학적 특성을 향상시킬 수 있다. 이러한 개질은 당업계에 공지되어 있으며, 주어진 생물학적 시스템 (예를 들어, 혈액, 림프계, 중추 신경계)으로의 생물학적 침투를 증가시키는 것, 경구 이용가능성을 증가시키는 것, 용해도를 증가시켜 주사에 의한 투여를 허용하는 것, 대사를 변경시키는 것, 및 배출 속도를 변경시키는 것을 포함한다.

이들 조성물에 사용될 수 있는 제약상 허용가능한 담체는 이온 교환제, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예컨대 포스페이트, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분적 글리세리드 혼합물, 물, 염 또는 전해질, 예컨대 프로타민 술페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연 염, 콜로이드상 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스 기재 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌 폴리옥시프로필렌 블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

또다른 실시양태에 따라, 본 발명의 조성물은 포유동물로의 제약 투여를 위해 제제화된다. 한 실시양태에서, 상기 포유동물은 인간이다.

본 발명의 이러한 제약 조성물은 경구, 비경구, 흡입 스프레이에 의해, 국소, 직장, 비측(nasally), 협측(buccally), 질내 또는 이식된 저장소를 통해 투여될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "비경구"는 피하, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액낭내, 흉골내, 경막내(intrathecal), 간내, 병소내 및 두개내 주사 또 는 주입 기술을 포함한다. 바람직하게는, 조성물은 경구 또는 정맥내 투여된다.

본 발명의 조성물의 멸균 주사용 형태는 수성 또는 유성 현탁액제일 수 있다. 이들 현탁액제는 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하는 당업계에 공지된 기술에 따라 제제화될 수 있다. 멸균 주사용 제제는 또한 비경구 허용가능한 비독성 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사용 용액제 또는 현탁액제, 예를 들어 1,3-부탄디올 중의 용액제일 수 있다. 사용될 수 있는 허용가능한 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액(Ringer's solution) 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 정유가 용매 또는 현탁 매질로서 통상적으로 사용된다. 이 목적을 위해, 합성 모노글리세리드 또는 디글리세리드를 비롯한 임의의 시판되는 정유가 사용될 수 있다. 올레산 및 그의 글리세리드 유도체와 같은 지방산이 주사용 제제의 제조에 유용하며, 제약상 허용가능한 천연 오일, 예컨대 올리브유 또는 피마자유, 특히 이들의 폴리옥시에틸화된 형태가 유용하다. 이들 오일 용액제 또는 현탁액제는 또한 장쇄 알콜 희석제 또는 분산제, 예컨대 카르복시메틸 셀룰로스, 또는 에멀젼제 및 현탁액제를 비롯한 제약상 허용가능한 투여 형태의 제제에 통상적으로 사용되는 유사한 분산제를 함유할 수 있다. 또한, 통상적으로 사용되는 다른 계면활성제, 예컨대 트윈(Tween), 스판(Span), 및 제약상 허용가능한 고체, 액체 또는 다른 투여 형태의 제조에 통상적으로 사용되는 다른 유화제 또는 생체이용률 증진제가 제제화 목적을 위해 사용될 수도 있다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 프로테아제 억제제 화합물의 약 0.01 내지 약 100 mg/kg (체중)/일의 투여량 수준이 항-바이러스, 특히 항-HCV 매개 질환의 예방 및 치료를 위한 단일요법에 유용하다. 또다른 실시양태에서, 본원에 기재된 프로테아제 억제제 화합물의 약 0.5 내지 약 75 mg/kg (체중)/일의 투여량 수준이 항-바이러스성, 특히 항-HCV 매개 질환의 예방 및 치료를 위한 단일요법에 유용하다. 전형적으로, 본 발명의 제약 조성물은 1일 약 1회 내지 약 5회, 별법으로는 연속 주입에 의해 투여될 것이다. 이러한 투여는 장기 또는 단기 요법으로 사용될 수 있다. 담체 물질과 조합되어 단일 투여 형태를 제공할 수 있는 활성 성분의 양은 치료를 받는 숙주 및 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 전형적인 제제는 활성 화합물을 약 5％ 내지 약 95％ (w/w) 함유할 것이다. 한 실시양태에서, 이러한 제제는 활성 화합물을 약 20％ 내지 약 80％ 함유한다.

본 발명의 조성물이 화학식 I의 화합물 및 1종 이상의 추가의 치료제 또는 예방제의 조합물을 포함하는 경우, 상기 화합물과 추가의 작용제는 모두가 단일요법 처방에 통상적으로 투여되는 투여량의 약 10％ 내지 100％의 투여량 수준으로 존재해야 한다. 다른 실시양태에서, 추가의 작용제는 단일요법 처방에 통상적으로 투여되는 투여량의 약 10％ 내지 80％의 투여량 수준으로 존재해야 한다.

본 발명의 제약 조성물은 캡슐제, 정제, 수성 현탁액제 또는 용액제를 포함하지만 이에 제한되지 않는 임의의 경구 허용가능한 투여 형태로 경구 투여될 수 있다. 경구 사용을 위한 정제의 경우에 통상적으로 사용되는 담체는 락토스 및 옥수수 전분을 포함한다. 전형적으로, 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제도 첨가된다. 캡슐 형태로 경구 투여하는 경우에 유용한 희석제는 락토스 및 건조된 옥수수 전분을 포함한다. 경구 사용을 위한 수성 현탁액제가 필요한 경우, 활성 성분 은 유화제 및 현탁화제와 배합된다. 원한다면, 특정 감미제, 향미제 또는 착색제가 첨가될 수도 있다.

별법으로, 본 발명의 제약 조성물은 직장 투여를 위한 좌제 형태로 투여될 수 있다. 이것들은 상기 작용제를 실온에서는 고체이지만 직장 온도에서는 액체여서 직장에서 용융되어 약물을 방출하는 적합한 무자극 부형제와 혼합하여 제조할 수 있다. 이러한 물질은 코코아 버터, 밀랍 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.

또한, 본 발명의 제약 조성물은, 특히 치료 표적이 안구, 피부 또는 하위 장관의 질환을 포함하는, 국소 적용에 의해 쉽게 접근할 수 있는 영역 또는 장기를 포함하는 경우에 국소 투여될 수도 있다. 적합한 국소 제제는 상기 영역 또는 장기 각각에 맞게 쉽게 제조된다.

하위 장관에 대한 국소 적용은 직장 좌제 제제 (상기 참조) 또는 적합한 관장 제제로 실시될 수 있다. 국소 경피 패치가 사용될 수도 있다.

국소 적용의 경우, 제약 조성물은 1종 이상의 담체 중에 현탁 또는 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 연고제로 제제화될 수 있다. 본 발명의 화합물의 국소 투여에 사용되는 담체는 광유, 액상 바셀린, 백색 바셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 별법으로, 제약 조성물은 1종 이상의 제약상 허용가능한 담체 중에 현탁 또는 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 로션제 또는 크림제로 제제화될 수 있다. 적합한 담체는 광유, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알콜, 2-옥틸도데칸올, 벤질 알콜 및 물을 포함하지만 이 에 제한되지 않는다.

안과용 제약 조성물은 벤질알코늄 클로라이드와 같은 보존제를 사용하거나 사용하지 않고, 등장성이며 pH 조정된 멸균 염수 중의 미분된 현탁액제, 또는 바람직하게는 등장성이며 pH 조정된 멸균 염수 중의 용액제로 제제화될 수 있다. 별법으로, 안과용 제약 조성물은 바셀린과 같은 연고제로 제제화될 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 또한 비측 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수도 있다. 이러한 조성물은 제약 제제화 분야에 공지된 기술에 따라 제조되며, 벤질 알콜 또는 다른 적합한 보존제, 생체이용률을 증진시키기 위한 흡수 촉진제, 플루오르화탄소 및/또는 통상적인 가용화제 또는 분산제를 사용하여 염수 중의 용액제로 제조될 수 있다.

한 실시양태에서, 제약 조성물은 경구 투여용으로 제제화된다.

또다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 또다른 항-바이러스제, 바람직하게는 항-HCV 작용제를 추가로 포함한다. 이러한 항-바이러스제는 면역조정제, 예컨대 α-인터페론, β-인터페론 및 γ-인터페론, PEG화(pegylated)-유도체화된 인터페론-α 화합물 및 티모신; 다른 항-바이러스제, 예컨대 리바비린, 아만타딘 및 텔비부딘; C형 간염 프로테아제의 다른 억제제 (NS2-NS3 억제제 및 NS3-NS4A 억제제); HCV 생활 주기의 다른 표적의 억제제, 예컨대 헬리카제 및 폴리머라제 억제제; 내부 리보좀 진입 억제제; 광범위 바이러스 억제제, 예컨대 IMPDH 억제제 (예를 들어, 미국 특허 제5,807,876호, 동 제6,498,178호, 동 제6,344,465호 및 동 제6,054,472호, WO 97/40028, WO 98/40381, WO 00/56331의 화합물, 및 미코페놀산 및 그의 유도체, 예컨대 (이에 제한되지 않음) VX-497, VX-148 및/또는 VX-944), 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 또한, 문헌 [W. Markland et al., Antimicrobial ＆ Antiviral Chemotherapy, 44, p. 859 (2000)] 및 미국 특허 제6,541,496호를 참조한다.

하기 정의가 본원에서 사용된다 (본 출원의 출원일에 입수가능한 제품에 대한 상표명을 사용함):

"PEG-인트론(Peg-Intron)"은 미국 뉴저지주 케닐워쓰 소재의 쉐링 코포레이션(Schering Corporation)으로부터 입수가능한 페그인터페론(peginteferon) 알파-2b인 PEG-인트론^®을 의미한다.

"인트론(Intron)"은 미국 뉴저지주 케닐워쓰 소재의 쉐링 코포레이션으로부터 입수가능한 인터페론 알파-2b인 인트론-A(INTRON-A)^®을 의미한다.

"리바비린"은 리바비린 (미국 캘리포니아주 코스타 메사 소재의 ICN 파마슈티칼스, 인크.(ICN Pharmaceuticals, Inc.)로부터 입수가능하고 문헌 [Merck Index, entry 8365, Twelfth Edition]에 기재되어 있는 1-베타-D-리보푸라노실-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복스아미드. 또한, 미국 뉴저지주 케닐워쓰 소재의 쉐링 코포레이션으로부터 레베트롤^®로 입수가능하거나 또는 미국 뉴저지주 뉴틀리 소재의 호프만-라 로쉐(Hoffmann-La Roche)로부터 코페가수스(COPEGASUS)^®로 입수가능함)을 의미한다.

"파가시스"는 미국 뉴저지주 뉴틀리 소재의 호프만-라 로쉐로부터 입수가능한 페그인터페론 알파-2a인 페가시스^®을 의미한다.

"로페론"은 미국 뉴저지주 뉴틀리 소재의 호프만-라 로쉐로부터 입수가능한 재조합 인터페론 알파-2a인 로페론(ROFERON)^®을 의미한다.

"베레포르"는 미국 코넥티커트주 리지필드 소재의 베링거 잉겔하임 파마슈티칼, 인크.(Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc.)로부터 입수가능한 인터페론 알파2인 베레포르(BEREFOR)^®를 의미한다.

수미페론(SUMIFERON)^®은 천연 알파 인터페론의 정제된 블렌드, 예컨대 일본 소재의 스미또모(Sumitomo)로부터 입수가능한 수미페론(Sumiferon)이다.

웰페론(WELLFERON)^®은 영국 소재의 글락소-웰컴 리미티드(Glaxo-Wellcome LTd.)로부터 입수가능한 인터페론 알파 n1이다.

알페론(ALFERON)^®은 인터페론 사이언시즈(Interferon Sciences)가 제조하고 미국 코넥티커트주 소재의 퍼듀 프레데릭 컴퍼니(Purdue Frederick Co.)로부터 입수가능한 천연 알파 인터페론들의 혼합물이다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "인터페론"은 바이러스 복제 및 세포내 증 식을 억제하고 면역 반응을 조정하는 고도의 상동성 종-특이적 단백질 부류의 구성원, 예컨대 인터페론 알파, 인터페론 베타 또는 인터페론 감마를 의미한다 [The Merck Index, entry 5015, Twelfth Edition].

본 발명의 한 실시양태에 따라, 인터페론은 α-인터페론이다. 또다른 실시양태에 따라, 본 발명의 치료 조합물은 천연 알파 인터페론 2a를 사용한다. 또는, 본 발명의 치료 조합물은 천연 알파 인터페론 2b를 사용한다. 또다른 실시양태에서, 본 발명의 치료 조합물은 재조합 알파 인터페론 2a 또는 2b를 이용한다. 또다른 실시양태에서, 인터페론은 PEG화 알파 인터페론 2a 또는 2b이다. 본 발명에 적합한 인터페론은 하기를 포함한다:

(a) 인트론-A^® (인터페론-알파 2B, 쉐링 플로(Schering Plough)),

(b) PEG-인트론^®,

(c) 페가시스^®,

(d) 로페론^®,

(e) 베레포르^®,

(f) 수미페론^®,

(g) 웰페론^®,

(h) 미국 캘리포니아주 뉴버리 파크 소재의 암젠, 인크.(Amgen, Inc.)로부터 입수가능한 컨센서스(consensus) 알파 인터페론,

(i) 알페론^®,

(j) 비라페론(VIRAFERON)^®,

(k) 인페르겐(INFERGEN)^® 및

(l) 알부페론(ALBUFERON)™.

당업자가 인식하고 있는 바와 같이, 프로테아제 억제제는 경구 투여되는 것이 바람직하다. 전형적으로, 인터페론은 경구 투여되지 않는다. 하지만, 본 발명의 방법 또는 조합물은 본원에서 임의의 특정 투여 형태 또는 처방으로 제한되지 않는다. 따라서, 본 발명에 따른 조합물의 각각의 성분은 별도로, 함께 또는 이들의 임의의 조합으로 투여될 수 있다.

한 실시양태에서, 프로테아제 억제제 및 인터페론은 별도의 투여 형태로 투여된다. 한 실시양태에서, 임의의 추가의 작용제는 프로테아제 억제제와 함께 단일 투여 형태의 일부로 또는 별도의 투여 형태로 투여된다. 본 발명은 화합물들의 조합물을 포함하기 때문에, 각 화합물의 구체적인 양은 조합물에 포함된 각각의 다른 화합물의 구체적인 양에 따라 달라질 수 있다. 당업자가 인식하고 있는 바와 같이, 인터페론의 투여량은 전형적으로 IU로 표시된다 (예를 들어, 약 4,000,000 IU 내지 약 12,000,000 IU).

따라서, 본 발명의 화합물과 조합하여 사용될 수 있는 작용제 (면역조정제로 작용하거나 또는 다르게 작용하는 작용제)는 알부페론™ (알부민-인터페론 알파) (휴먼 게놈 사이언시즈(Human Genome Sciences)로부터 입수가능함), PEG-인트론^® (미국 뉴저지주 케닐워쓰 소재의 쉐링 코포레이션으로부터 입수가능한 페그인터페론 알파-2b), 인트론-A^® (미국 뉴저지주 케닐워쓰 소재의 쉐링 코포레이션으로부터 입수가능한 인터페론 알파-2b), 리바비린 (미국 캘리포니아주 코스타 메사 소재의 ICN 파마슈티칼스, 인크.로부터 입수가능하고 문헌 [Merck Index, entry 8365, Twelfth Edition]에 기재되어 있는 1-베타-D-리보푸라노실-1H-1,2,4-트리아졸-3-카르복스아미드), 레베트롤^® (미국 뉴저지주 케닐워쓰 소재의 쉐링 코포레이션), 코페구스(COPEGUS)^® (미국 뉴저지주 뉴틀리 소재의 호프만-라 로쉐), 페가시스^® (미국 뉴저지주 뉴틀리 소재의 호프만-라 로쉐로부터 입수가능한 페그인터페론 알파-2a), 로페론^® (미국 뉴저지주 뉴틀리 소재의 호프만-라 로쉐로부터 입수가능한 재조합 인터페론 알파-2a), 베레포르^® (미국 코넥티커트주 리지필드 소재의 베링거 잉겔하임 파마슈티칼, 인크.로부터 입수가능한 인터페론 알파 2), 수미페론^® (천연 알파 인터페론의 정제된 블렌드, 예컨대 일본 소재의 스미또모로부터 입수가능한 수미페론), 웰페론^® (영국 소재의 글락소-웰컴 리미티드로부터 입수가능한 인터페론 알파 n1), 알페론^® (인터페론 사이언시즈가 제조하고 미국 코넥티커트주 소재의 퍼듀 프레데릭 컴퍼니로부터 입수가능한 천연 알파 인터페론들의 혼합물), α-인터 페론, 천연 알파 인터페론 2a, 천연 알파 인터페론 2b, PEG화 알파 인터페론 2a 또는 2b, 컨센서스 알파 인터페론 (미국 캘리포니아주 뉴버리 파크 소재의 암젠, 인크.), 비라페론^®, 인페르겐^®, 레베트론(REBETRON)^® (쉐링 플로, 인터페론-알파 2B + 리바비린), PEG화 인터페론 알파 [Reddy, K.R. et al. "Efficacy and Safety of Pegylated (40-kd) Interferon alpha-2a Compared with Interferon alpha-2a in Noncirrhotic Patients with Chronic Hepatitis C (Hepatology, 33, pp. 433-438 (2001)], 컨센서스 인터페론 [Kao, J. H., et al., "Efficacy of Consensus Interferon in the Treatment of Chronic Hepatitis" J. Gastroenterol. Hepatol. 15, pp. 1418-1423 (2000)], 림프아구양 또는 "천연" 인터페론, 인터페론 타우 [Clayette, P. et al., "IFN-tau, A New Interferon Type I with Antiretroviral activity" Pathol. Biol. (Paris) 47, pp. 553-559 (1999)], 인터루킨-2 [Davis, G. L. et al., "Future Options for the Management of Hepatitis C." Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)], 인터루킨-6 [Davis et al. "Future Options for the Management of Hepatitis C." Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)], 인터루킨-12 [Davis, G.L. et al., "Future Options for the Management of Hepatitis C." Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)], 및 제1형 헬퍼 T 세포 반응의 발생을 증진시키는 화합물 [Davis et al., "Future Options for the Management of Hepatitis C." Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103-112 (1999)]을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 또한, 세 포에서 인터페론의 합성을 자극하는 화합물 [Tazulakhova, E. B. et al., "Russian Experience in Screening, analysis, and Clinical Application of Novel Interferon Inducers" J. Interferon Cytokine Res., 21 pp. 65-73], 예를 들어 이중 가닥 RNA 단독, 또는 이중 가닥 RNA와 토브라마이신의 조합물, 및 이미퀴모드(Imiquimod) (3M 파마슈티칼스(3M Pharmaceuticals); 문헌 [Sauder, D.N. "Immunomodulatory and Pharmacologic Properties of Imiquimod" J. Am. Acad. Dermatol, 43 pp. S6-11 (2000)]) (이에 제한되지 않음)도 포함된다.

세포에서 인터페론의 합성을 자극하는 화합물 [Tazulakhova, E. B. et al., "Russian Experience in Screening, analysis, and Clinical Application of Novel Interferon Inducers" J. Interferon Cytokine Res., 21 pp. 65-73]은 이중 가닥 RNA 단독, 또는 이중 가닥 RNA와 토브라마이신의 조합물, 및 이미퀴모드 (3M 파마슈티칼스; 문헌 [Sauder, D.N. "Immunomodulatory and Pharmacologic Properties of Imiquimod" J. Am. Acad. Dermatol, 43 pp. S6-11 (2000)])를 포함하지만 이에 제한되지 않는다

다른 비-면역조정 또는 면역조정 화합물이 본 발명의 화합물과 조합하여 사용될 수 있으며, 이들은 WO 02/18369 (본원에 참고로 포함됨) (예를 들어, 제273면 제9행 내지 제22행, 및 제274면 제4행 내지 제276면 제11행 참조)에 명시된 것을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

다른 작용제는 여러 공개된 미국 특허 출원서에 기재된 것들을 포함한다. 이들 공개공보는 본 발명의 방법에서 특히 간염의 치료를 위해 VX-950과 조합하여 사용될 수 있는 화합물 및 방법에 대한 추가의 교시를 제공한다. 임의의 이러한 방법 및 조성물이 본 발명의 방법 및 조성물과 조합하여 사용될 수 있음이 고려된다. 간략화를 위해서, 이들 공개공보의 개시 내용은 해당 공개공보의 번호를 언급하는 것으로 대신하지만, 상기 화합물에 관한 개시내용이 특히 본원에 참고로 구체적으로 포함됨을 주지해야 한다. 예시적인 이러한 공개공보는 하기를 포함한다: 미국 특허 공개 제20040058982호, 미국 특허 공개 제20050192212호, 미국 특허 공개 제20050080005호, 미국 특허 공개 제20050062522호, 미국 특허 공개 제20050020503호, 미국 특허 공개 제20040229818호, 미국 특허 공개 제20040229817호, 미국 특허 공개 제20040224900호, 미국 특허 공개 제20040186125호, 미국 특허 공개 제20040171626호, 미국 특허 공개 제20040110747호, 미국 특허 공개 제20040072788호, 미국 특허 공개 제20040067901 호, 미국 특허 공개 제20030191067호, 미국 특허 공개 제20030187018호, 미국 특허 공개 제20030186895호, 미국 특허 공개 제20030181363호, 미국 특허 공개 제20020147160호, 미국 특허 공개 제20040082574호, 미국 특허 공개 제20050192212호, 미국 특허 공개 제20050187192호, 미국 특허 공개 제20050187165호, 미국 특허 공개 제20050049220호. 및 미국 특허 공개 제US 2005/0222236호.

본 발명은 또한 사이토크롬 P450 모노옥시게나제 억제제를 투여하는 것을 포함할 수 있다. CYP 억제제는 CYP에 의해 억제된 화합물의 간 농도를 증가시키고/시키거나 혈액 수준을 증가시키는데 유용할 수 있다.

본 발명의 한 실시양태가 CYP 억제제를 포함하는 경우, 관련 NS3/4A 프로테 아제의 약동학을 개선시키는 임의의 CYP 억제제가 본 발명의 방법에 사용될 수 있다. 이들 CYP 억제제는 리토나비르 (WO 94/14436), 케토코나졸, 트롤레안도마이신, 4-메틸 피라졸, 시클로스포린, 클로메티아졸, 시메티딘, 이트라코나졸, 플루코나졸, 미코나졸, 플루복사민, 플루옥세틴, 네파조돈, 세르트랄린, 인디나비르, 넬피나비르, 암프레나비르, 포스암프레나비르, 사퀴나비르, 로피나비르, 델라비르딘, 에리트로마이신, VX-944 및 VX-497을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 바람직한 CYP 억제제는 리토나비르, 케토코나졸, 트롤레안도마이신, 4-메틸 피라졸, 시클로스포린 및 클로메티아졸을 포함한다. 리토나비르의 바람직한 투여 형태에 대해서는 미국 특허 제6,037,157호 및 여기서 언급된 문헌인 미국 특허 제5,484,801호, 미국 출원 제08/402,690호, WO 95/07696 및 WO 95/09614를 참조한다.

화합물이 사이토크롬 P450 모노옥시게나제 활성을 억제하는 능력을 측정하는 방법은 알려져 있다. 예를 들어, 미국 특허 제6,037,157호 및 문헌 [Yun, et al. Drug Metabolism ＆ Disposition, vol. 21, pp. 403-407 (1993)]을 참조한다.

환자의 상태가 호전되면, 필요에 따라 본 발명의 화합물, 조성물 또는 조합물의 유지 투여량을 투여할 수 있다. 이후에, 상기한 호전된 상태가 유지되는 수준까지 증상에 대한 함수로서 투여량 또는 투여 빈도 또는 이것들 모두가 감소될 수 있고, 증상이 원하는 수준으로 경감되었을 때 처치를 중단해야 한다. 그러나, 환자는 임의의 질환 증상의 재발시에 장기간의 간헐적 처치를 필요로 할 수 있다.

또한, 임의의 특정 환자에 대한 구체적인 투여량 및 치료 처방은 사용되는 구체적인 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적 건강상태, 성별, 식이 요법, 투여 시 간, 배출 속도, 약물 조합, 처치 의사의 판단, 및 치료할 특정 질환의 중증도를 비롯한 다양한 요인에 따라 달라진다는 것을 이해해야 한다. 활성 성분의 양은 또한 특정 기재한 화합물 및 조성물 내의 추가의 항-바이러스제의 존재 또는 부재 및 이들의 특성에 따라 달라진다.

또다른 실시양태에 따라, 본 발명은 바이러스의 생활 주기에 필요한 바이러스-코딩된 세린 프로테아제를 특징으로 하는 바이러스로 감염된 환자에게 본 발명의 제약상 허용가능한 조성물을 투여하여 상기 환자를 치료하는 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 방법은 HCV 감염을 앓고 있는 환자를 치료하는데 사용된다. 이러한 처치는 바이러스 감염을 완전하게 근절시키거나 또는 그의 중증도를 감소시킬 수 있다. 또다른 실시양태에서, 환자는 인간이다.

별법의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 상기 환자에게 항-바이러스제, 바람직하게는 항-HCV 작용제를 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 이러한 항-바이러스제는 면역조정제, 예컨대 α-인터페론, β-인터페론, γ-인터페론, PEG화-유도체화된 인터페론-α 화합물 및 티모신; 다른 항-바이러스제, 예컨대 리바비린, 아만타딘 및 텔비부딘; C형 간염 프로테아제의 다른 억제제 (NS2-NS3 억제제 및 NS3-NS4A 억제제); HCV 생활 주기의 다른 표적의 억제제 (헬리카제 및 폴리머라제 억제제를 포함하지만 이에 제한되지 않음); 내부 리보좀 진입 억제제; 광범위 바이러스 억제제, 예컨대 IMPDH 억제제 (예를 들어 VX-497, 및 미국 특허 제5,807,876호 및 동 제6,498,178호에 개시된 다른 IMPDH 억제제, 미코페놀산 및 그의 유도체); 사이토크롬 P-450의 억제제, 예컨대 리토나비르, 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하지 만 이에 제한되지 않는다.

이러한 추가의 작용제는 본 발명의 화합물과 추가의 항-바이러스제를 둘다 포함하는 단일 투여 형태의 일부로서 상기 환자에게 투여될 수 있다. 별법으로, 추가의 작용제가 본 발명의 화합물과는 별도로 다중 투여 형태의 일부로서 투여될 수 있으며, 이때 상기 추가의 작용제는 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물을 투여하기 전에, 그와 동시에 또는 그 후에 투여된다.

제약 조성물은 또한 전체 치료 과정의 물질을 단일 패키지, 통상적으로는 블리스터 팩에 함유하는 "환자 팩(pack)"으로 환자에게 처방될 수도 있다. 환자 팩은 약사가 의약품을 대량 공급물 중 해당 환자의 공급물로 나누는 종래의 처방에 비해, 환자가 언제나 종래의 처방물에는 일반적으로 없는 환자 팩에 함유된 패키지 삽입물을 접한다는 점에서 유리하다. 패키지 삽입물을 포함시키면, 의사의 지시에 대한 환자 순응도가 개선되는 것으로 나타났다.

환자에게 본 발명의 올바른 사용에 대해 지시하는 패키지 삽입물을 내부에 함유하는 단일 환자 팩, 또는 각 제제의 환자 팩을 통해 본 발명의 조합물을 투여하는 것은 본 발명의 바람직한 추가의 특징이라는 점이 이해될 것이다.

본 발명의 추가의 측면은, 화학식 I의 1종 이상의 화합물 (본 발명에 따른 투여량으로 포함함) 및 본 발명의 조합물의 사용에 대한 지침을 함유하는 정보 삽입물을 포함하는 팩이다. 임의의 조성물, 투여 형태, 치료 처방 또는 본 발명의 다른 실시양태는 제약 팩으로 제공될 수 있다. 본 발명의 별법의 실시양태에서, 상기 제약 팩은 본원에 기재한 바와 같은 1종 이상의 추가의 작용제를 추가로 포함 한다. 추가의 작용제(들)은 동일 팩에서 제공될 수도 있고, 또는 별도의 팩에서 제공될 수도 있다.

본 발명의 또다른 측면은 각 제약 성분의 단일 또는 복수개의 제약 제제, 상기 제약 제제(들)을 저장 동안과 투여 전에 담고 있는 용기, 및 HCV 감염을 치료하거나 예방하는데 효과적인 방식으로 약물 투여를 수행하기 위한 지침을 포함하는, 환자가 HCV 감염의 치료 또는 HCV 감염의 예방에 사용하는 (또는 본 발명의 또다른 방법에 사용하는) 패키지된 키트를 포함한다.

따라서, 본 발명은 소정 용량의 화학식 I의 1종 이상의 화합물 (및 임의로는 추가의 작용제)을 동시 투여하거나 순차적으로 투여하기 위한 키트를 제공한다. 전형적으로, 이러한 키트는 예를 들어 제약상 허용가능한 담체 (및 1개 또는 복수 개의 제약 제제) 중의 각각의 화합물 및 임의의 추가의 작용제(들)의 조성물, 및 동시 투여 또는 순차적 투여를 위한 서면 지침서를 포함할 것이다.

또다른 실시양태에서, 자가 투여를 위한 1개 이상의 투여 형태; 상기 투여 형태를 저장 동안과 사용 전에 담고 있는, 바람직하게는 밀폐된 용기 수단; 및 환자가 약물 투여를 수행하기 위한 지침을 함유하는 패키지된 키트가 제공된다. 상기 지침은 전형적으로 패키지 삽입물상의 서면 지침서, 라벨, 및/또는 상기 키트의 다른 성분에 존재할 것이고, 상기 투여 형태(들)은 본원에 기재한 바와 같다. 각각의 투여 형태는 각 투여 형태가 예를 들어 개개의 셀 또는 버블에서 서로 분리되어 들어 있는 금속 호일-플라스틱 적층지 시트로서 개별적으로 담겨 있을 수도 있고, 상기 투여 형태가 예를 들어 플라스틱 병과 같은 단일 용기에 담겨 있을 수도 있다. 본 발명의 키트는 또한 전형적으로 개개의 키트 성분, 즉 투여 형태, 용기 수단, 및 사용을 위한 서면 지침서를 패키징하는 수단을 포함할 것이다. 이러한 패키지 수단은 보드지 또는 종이 상자, 플라스틱 또는 호일 파우치 등의 형태를 취할 수 있다.

본 발명에 따른 키트는 임의의 조성물, 투여 형태, 치료 처방, 또는 제약 팩과 같은 본 발명의 임의의 측면을 구현할 수 있다. 본 발명에 따른 팩 및 키트는 복수개의 조성물 또는 투여 형태를 임의로 포함한다. 따라서, 하나의 조성물 또는 하나 초과의 조성물을 함유하는 팩 및 키트는 본 발명의 범위 내에 포함된다.

또다른 실시양태에서, 본 발명은 환자에게 투여할 생물학적 물질을 본 발명의 화합물을 포함하는 제약상 허용가능한 조성물과 접촉시키는 단계를 포함하는, 환자에게 투여할 생물학적 물질을 사전 처리하는 방법을 제공한다. 이러한 생물학적 물질은 혈액 및 그의 성분, 예컨대 혈장, 혈소판, 혈액 세포의 하위집단 등; 장기, 예컨대 신장, 간, 심장, 폐 등; 정자 및 난자; 골수 및 그의 성분, 및 환자에게 주입되는 다른 유체, 예컨대 염수, 덱스트로스 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

또다른 실시양태에 따라, 본 발명은 바이러스 생활 주기에 필요한 바이러스-코딩된 세린 프로테아제를 특징으로 하는 바이러스와 잠재적으로 접촉할 수 있는 물질의 처리 방법을 제공한다. 이 방법은, 상기 물질을 본 발명에 따른 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 이러한 물질은, 수술 기구 및 수술복 (예를 들어, 의류, 장갑, 에이프런, 가운, 마스크, 안경, 신발 등); 실험 기구 및 실험복 (예를 들어, 의류, 장갑, 에이프런, 가운, 마스크, 안경, 신발 등); 혈액 수집 장치 및 물질; 및 침투 장치, 예를 들어 션트(shunt) 및 스텐트(stent)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

또다른 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 바이러스-코딩된 세린 프로테아제의 단리를 돕기 위한 실험 도구로 사용될 수 있다. 이 방법은, 고체 지지체에 부착된 본 발명의 화합물을 제공하는 단계, 상기 고체 지지체를 바이러스 세린 프로테아제가 상기 고체 지지체에 결합하게 하는 조건하에 상기 프로테아제를 함유하는 샘플과 접촉시키는 단계, 및 상기 고체 지지체로부터 상기 세린 프로테아제를 용출시키는 단계를 포함한다. 한 실시양태에서, 상기 방법에 의해 단리된 바이러스 세린 프로테아제는 HCV NS3-NS4A 프로테아제이다.

본 명세서에서 인용된 모든 참고문헌은 본원에 참고로 포함된다.

IV . 방법 및 실시예

본원에 기재된 본 발명이 보다 완전하게 이해될 수 있도록 하기 위해서, 하기하는 방법 및 실시예가 제공된다. 이러한 방법 및 실시예는 단지 예시를 목적으로 하는 것이지 어떠한 방식으로도 본 발명을 제한하려는 것이 아님을 이해해야 한다.

A. 화학식 I의 화합물을 위한 중간체의 제조

이하, 화학식 I의 화합물을 합성하는데 사용될 수 있는 중간체를 제조하는 다양한 방법을 기재한다.

3-( 벤질옥시카르보닐아미노 )-4-시클로부틸-2- 히드록시부탄산의 제조

진한 HCl (12 mL) 중 WO 04/113294에 기재된 방법에 따라 제조한 시아노히드린 (1 g, 3.65 mmol)의 용액을 18시간 동안 환류 가열하였다. 상기 반응물을 진공하에 농축시켜 원하는 아미노산을 HCl 염 (1.7 g)으로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. THF 중 상기 HCl 염의 용액을 DIPEA (2.68 g) 및 Z-OSu (5.16 g)로 처리하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 톨루엔 및 HCl (12 N, pH = 1이 될 때까지)로 희석하였다. 분리한 후에 유기 층을 포화 NaHCO₃ (50 mL, 2회)으로 추출하였다. 수성 층을 HCl (6 N)을 사용하여 pH = 1이 될 때까지 산성화시키고 EtOAc (200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조시키고 진공하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다 (0.6 g). (M + 1) 308.

벤질 1- 시클로부틸 -3-히드록시-4-( 메틸아미노 )-4- 옥소부탄 -2- 일카르바메이트의 제조

DCM (20 mL) 중 3-(벤질옥시카르보닐아미노)-4-시클로부틸-2-히드록시부탄산 (250 mg, 0.81 mmol)의 용액에 HOSu (140 mg, 1.22 mmol) 및 EDC (234 mg, 1.22 mmol)를 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후에 THF 중의 메틸아민 (2 N, 0.81 mL)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 18시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨(Gilson) 정제용으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (135 mg).

벤질 1- 시클로부틸 -4-( 시클로프로필아미노 )-3-히드록시-4- 옥소부탄 -2- 일카르바메이트의 제조

DCM (20 mL) 중 3-(벤질옥시카르보닐아미노)-4-시클로부틸-2-히드록시부탄산 (600 mg, 1.95 mmol)의 용액에 HOSu (337 mg, 2.93 mmol), EDC (562 mg, 2.93 mmol)를 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 시클로프로필아민 (223 mg, 3.9 mmol)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 이어서, 합한 유기 층을 HCl (1 N), 물, NaHCO₃ 및 염수로 세척한 후에 진공하에 농축시켜 벤질 1-시클로부틸-4-(시클로프로필아미노)-3-히드록시-4-옥소부탄-2-일카르바메이트를 수득하였다 (530 mg). (M + 1) 347.

3-아미노-4- 시클로부틸 -N- 시클로프로필 -2- 히드록시부탄아미드의 제조

MeOH (30 mL) 중 CBz 아미드 (530 mg, 1.53 mmol)의 용액에 Pd(OH)₂/C (106 mg)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 H₂ (1 atm)하에 18시간 동안 교반하였다. 여과한 후에 여액을 진공하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다 (300 mg).

하기하는 화합물은 적절한 아민을 사용하여 3-아미노-4-시클로부틸-N-시클로프로필-2-히드록시부탄아미드의 제조와 유사한 방식으로 제조하였다:

.

3-아미노-N- 시클로프로필 -2- 히드록시헵트 -6- 인아미드의 제조

3-아미노-N-시클로프로필-2-히드록시헵트-6-인아미드를 엔. 고바야시(N. Kobayashi) 등이 US 2003/153788 (상기 문헌은 그 전문이 본원에 참고로 포함됨)에 기재한 바와 같이 하여 제조하였다.

Cbz -보호된 (3S)-3-아미노-4- 시클로프로필 -2-히드록시-N- 메틸부탄아미드의 제조

단계 1: 벤질 (2S)-1- 시아노 -3- 시클로프로필 -1-히드록시프로판-2- 일카르바메이트의 제조

MeOH (50 mL) 중 알데히드 (7.9 g, 32 mmol)의 용액에 10℃에서 Na₂S₂O₄ (6.13 g, 35.2 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온으로 가온시켜 2시간 동안 교반한 후에 10℃로 냉각시켰다. 상기 반응 혼합물에 물 중 KCN의 용액 (50 mL)을 첨가하였다. 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 상기 혼합물을 TBME (100 mL, 2회)로 추출하였다. 합한 유기 층들을 물 및 염수로 세척하여 건조시키고 진공하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다 (8 g). (M + 1) 275.

단계 2: (3S)- 메틸 3-( 벤질옥시카르보닐아미노 )-4- 시클로프로필 -2- 히드록시부타노에이트의 제조

MeOH (15 mL) 중 시아노히드린 (1 g, 3.65 mmol)의 용액에 -20℃에서 건조 HCl 기체 스트림을 30분 동안 버블링하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 질소 기체로 30분 동안 퍼징(purging)한 후에 농축시켰다. 잔류물을 0℃에서 빙수로 켄칭(quenching)한 후에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 NaHCO₃, 물 및 염수로 세척하고 진공하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다 (0.5 g).

단계 3: (3S)-3-( 벤질옥시카르보닐아미노 )-4- 시클로프로필 -2- 히드록시부탄산의 제조

THF (8 mL) 및 물 (6.63 mL) 중 단계 2의 메틸 에스테르 (400 mg, 1.3 mmol)의 용액에 LiOH (1 N, 1.37 mL)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후에 1.0 N HCl을 사용하여 pH = 약 3 내지 4로 산성화시켰다. 상기 혼합물을EtOAc (20 mL, 2회)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물과 염수로 세척한 후에 진공하에 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다 (370 mg). (M + 1) 294.

단계 4: 벤질 (2S)-1- 시클로프로필 -3-히드록시-4-( 메틸아미노 )-4- 옥소부탄 -2-일 카르바메이트 의 제조

DCM (20 mL) 중 (3S)-3-(벤질옥시카르보닐아미노)-4-시클로프로필-2-히드록시부탄산 (180 mg, 0.26 mmol)의 용액에 HOSu (105 mg, 0.92 mmol) 및 EDC (175 mg, 0.92 mmol)를 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후에 THF 중 메틸아민 (2 N, 0.92 mL)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 18시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 길슨 정제용으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (50 mg).

하기하는 화합물은 적절한 아민을 사용한 후에 수소화를 수행하여 유사한 방식으로 제조할 수 있다:

.

하기하는 화합물은 퍼니 알.(Perni, R.) 등이 WO 01/74768에 기재한 방법으로 제조할 수 있고, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다:

.

(S)-2-( 시클로펜틸옥시카르보닐아미노 )-3,3- 디메틸부탄산의 제조

5 L의 RB 플라스크에서 포화 중탄산나트륨 (11배 부피) 중에 t-부틸 글리신 (74 g, 0.56 mol, 1.02 당량)을 용해시켰다. 시클로펜틸 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 카르보네이트 (126 g, 0.55 mol, 1 당량)를 아세톤 (5.5배 부피) 중에 용해하고, 상기 용액을 상기 글리신 용액에 첨가 깔때기를 통해 실온에서 서서히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 완료시까지 (대략 4시간) 실온에서 교반하였다. 아세톤을 감압하에 제거하고, 남아있는 수용액을 헥산 중 30％ 에틸 아세테이트 (3회, 5.5배 부피씩)로 추출하였다. 유기 층들을 버렸다. 수성 층의 pH를 2 N HCl을 사용하여 2가 되도록 한 후에 에틸 아세테이트 (3회, 5.5배 부피)로 추출하였다. 합한 유기 층들을 건조 (Na₂SO₄)시켜 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여 투명한 오일을 수득하였고, 이것은 서서히 결정화되었다. 조 생성물을 헥산/에틸 아세테이트로부터 결정화하여 (S)-2-(시클로펜틸옥시카르보닐아미노)-3,3-디메틸부탄산을 백색 고체로서 수득하였다 (82 g). 모액을 스트리핑(stripping)하고, 두번째 결정 수집물을 수득하였다 (합한 수득량: 105.54 g).

술포닐 화합물의 제조

상기한 화합물 S1, S2, S3 및 S4를 WO 2005/095403 및 PCT/US2005/010494에 기재된 절차에 따라 제조하였고, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다. 구체적으로, CH₂Cl₂ (200 mL) 중 클로로술포닐이소시아네이트 (10 mL, 115 mmol)의 용액에 0℃에서 t-BuOH (11 mL, 1 당량)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 60분 동안 교반한 후에 캐뉼라를 통해 CH₂Cl₂ (200 mL) 중 시클로프로필아민 (6.6 g)의 용액에 트리에틸아민 (30 mL)과 함께 0℃에서 첨가하면서 CH₂Cl₂ (100 mL) 중 트리에틸아민 (50 mL)의 용액을 첨가 깔때기를 통해 첨가하였다. 내부 온도는 8℃ 미만으로 유지시켰다. 첨가 완료 후에 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 CH₂Cl₂로 희석하여 분별 깔때기로 옮기고, 1 N HCl (2회, 400 mL씩) 및 염수 (300 mL)로 세척하여 건조 (MgSO₄)시켜 여과하고 농축시켰다. 생성물을 에틸 아세테이트/헥산으로부터 재결정화하여 S3 16.8 g (71.3 mmol)을 수득하였다. 화합물 S3을 CH₂Cl₂ 중 트리플루오로아세트산으로 탈보호하여 화합물 S4를 수득하였다.

암모니아 기체를 기체 분산 튜브를 통해 0℃로 냉각시킨 THF (40 mL)로 5분 동안 버블링하였다. 상기 용액에 0℃에서 시클로프로필술포닐클로라이드 (1 g, 7.1 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 밤새 교반한 후에 실리카 겔 플러그를 통해 여과한 후, EtOAc로 용출시켜 시클로프로필술폰아미드 750 mg (6.19 mmol)을 수득하였다.

THF (30 mL) 중 화합물 XX5 (1.37 g, 6.41 mmol)의 용액에 0℃에서 보란-디메틸술피드 (3.85 mL, 7.8 mmol, 톨루엔 중 2.0 M)를 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하면서 실온으로 점차 가온시키고, H₂O (20 mL)로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (3회, 30 mL씩)로 추출하였다. 합한 유기물들을 건조시키고 감압하에 농축시켜 무색의 오일 1.3 g을 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. CH₂Cl₂ (15 mL, 무수) 중 염화옥살릴 (2.24 mL, 25.6 mmol)에 -78℃에서 불활성 대기하에 CH₂Cl₂ (8 mL) 중 DMSO (2.73 mL, 38.5 mmol)의 용액을 적가하였다. 10분 동안 교반한 후에 CH₂Cl₂ (6 mL) 중 상기 알콜 (1.3 g, 6.41 mmol)의 용액을 적가하였다. 10분이 더 지난 후에 CH₂Cl₂ 중 트리에틸아민 (7.15 mL, 51.3 mmol)을 첨가하고, 상기 반응물을 30분 더 교반하면서 0℃로 점차 가온시켰다. 상기 반응 혼합물을 1 M HCl (20 mL)로 세척한 후에 염수 (20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 생성된 오일을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 알데히드 XX6을 748 mg (2개 단계에 걸친 수득량) 수득하였다.

MeOH (15 mL) 중 화합물 XX6 (581 mg, 2.9 mmol) 및 K₂CO₃ (811 mg, 5.9 mmol)의 용액에 디메틸 1-디아조-2-옥소프로필포스포네이트 (676 mg, 3.5 mmol. [Synlett 1996, p. 521])를 첨가하였다. 상기 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하여 Et₂O (20 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃ 용액 (10 mL, 수성)으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켜 알킨 XX7을 600 mg 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

THF/H₂O/MeOH (25 mL, 2:1:2)의 용액 중 화합물 XX7 (600 mg, 2.9 mmol)의 용액에 LiOH 일수화물 (850 mg, 20.3 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하여 1 N HCl (25 mL)로 산성화하고, EtOAc (3회, 15 mL씩)로 추출하였다. 합한 유기물들을 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 카르복실산 XX8을 533 mg 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

CH₂Cl₂ (2.5 mL) 중 화합물 XX5 (100 mg, 0.5 mmol)의 용액에 EDC (107 mg, 0.6 mmol), HOBt (76 mg, 0.6 mmol) 및 트리에틸아민 (195 ㎕, 1.4 mmol)을 첨가하였다. 상기 활성화된 산 용액에 메틸아민 히드로클로라이드 (38 mg, 0.6 mmol)를 첨가하고, 상기 반응물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 H₂O (2 mL), 1 N HCl (2 mL) 및 포화 NaHCO₃ 용액 (2 mL)으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 아미드 XX9를 100 mg 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

THF/H₂O/MeOH (3 mL, 2:1:2)의 용액 중 화합물 XX9 (100 mg, 0.5 mmol)의 용액에 LiOH 일수화물 (124 mg, 3 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하고, 1 N HCl (4 mL)로 산성화하여 EtOAc (3×5 mL)로 추출하였다. 합한 유기물들을 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 카르복실산 XX10을 87 mg 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

중간체 XX12를 상기 기재한 중간체 XX10의 제조 절차에 따라 제조하되, 메틸아민 히드로클로라이드 대신에 피롤리딘을 시약으로 사용하였다.

CCl₄ (23 mL) 중 화합물 XX5 (1 g, 4.7 mmol) 및 HgO 황색 (1.01 g, 4.7 mmol)의 용액에 CCl₄ (5 mL) 중 브롬 (264 ㎕, 5.1 mmol)의 용액을 30분에 걸쳐 환류하에 적가하였다. 상기 반응물을 환류하에 1시간 동안 교반하여 실온으로 냉각시키고, CH₂Cl₂ (20 mL)로 희석하여 1 N HCl (10 mL), H₂O (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켜 화합물 XX13 1.3 g을 무색의 오일로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

DMSO (12 mL) 중 화합물 XX13 (578 mg, 2.3 mmol)의 용액에 수소화붕소나트륨 (177 mg, 4.7 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하여 H₂O (10 mL)로 희석하고 헥산 (3×15 mL)으로 추출하였다. 합한 유기물들을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. EtOAc/석유 에테르로 용출시키는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 XX14를 204 mg 수득하였다.

중간체 XX15를 상기 기재한 중간체 XX10의 제조 절차에 따라 제조하되, XX9 대신에 기질 XX14를 사용하였다.

(S)-2-아미노-3,3-디메틸부탄산 (787 mg, 6.0 mmol), 브로모벤젠 (632 ㎕, 6.0 mmol), K₂CO₃ (1.24 g, 9.0 mmol) 및 CuI (114 mg, 0.6 mmol)의 용액에 N,N-디메틸아세트아미드 (7.5 mL)를 첨가하였다. 상기 내용물을 밀폐된 압력 용기에서 16시간 동안 90℃에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 H₂O (15 mL)로 희석하여 0℃로 냉각시키고, 1 N HCl을 사용하여 pH 약 5로 산성화하였다. 상기 혼합물을 EtOAc (3×20 mL)로 추출하고, 합한 유기물들을 염수 (1×15 mL)로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 XX16을 150 mg 수득하였다.

중간체 XX17을 XX16의 제조 절차에 따라 제조하되, 브로모벤젠 대신에 1-브로모-3-메톡시벤젠을 시약으로 사용하였다.

CH₂Cl₂ (6 mL) 중 (S)-3-(메톡시카르보닐)-4-메틸펜탄산 (200 mg, 1.2 mmol)의 용액에 EDC (264 mg, 1.4 mmol), HOBt (186 mg, 1.4 mmol) 및 트리에틸아민 (481 ㎕, 3.5 mmol)을 첨가하였다. 활성화된 산 용액에 시클로헥실아민 (158 ㎕, 1.4 mmol)을 첨가하고, 상기 반응물을 4시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 H₂O (3 mL), 1 N HCl (3 mL) 및 포화 NaHCO₃ 용액 (3 mL)으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켜 화합물 XX18을 290 mg 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다.

중간체 XX19를 상기 기재한 화합물 XX10의 제조 절차에 따라 제조하되, 화합물 XX9 대신에 기질 XX18을 시약으로 사용하였다. ES (+) MS: m/e 256 (M + H)⁺.

중간체 XX20을 상기 기재한 화합물 XX18 또는 XX19의 제조 절차에 따라 제조하되, 시클로헥실아민 대신에 이소프로필아민을 시약으로 사용하였다. ES (+) MS: m/e 216 (M + H)⁺.

중간체 XX21을 상기 기재한 XX18 또는 XX19의 제조 절차에 따라 제조하되, 시클로헥실아민 대신에 벤질아민을 시약으로 사용하였다. ES (+) MS: m/e 264 (M + H)⁺.

글리신 메틸 에스테르 히드로클로라이드 (50.0 g)를 MTBE (300 mL) 중에 실온에서 현탁하였다. 여기에 벤즈알데히드 (40.5 mL) 및 무수 Na₂SO₄ (33.9 g)를 첨가하였다. 상기 현탁액을 빙수조에서 20분 동안 냉각시킨 후에 트리에틸아민 (80 mL)을 15분에 걸쳐 적가하였다. 5분 후에 상기 반응물을 빙수조에서 꺼내어 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 상기 반응물을 빙수 혼합물 200 mL로 켄칭하고, 유기 층을 분리하였다. 수성 층을 MTBE (200 mL)로 추출하였다. 유기 층들을 합하고, 염수 및 포화 NaHCO₃ (수성)의 1:1 혼합물로 세척하여 건조 (MgSO₄)시키고 농축시켜 N-벤질 이민 62.83 g을 황색 오일로서 수득하였다.

리튬 tert-부톡시드 (15.13 g)를 실온에서 무수 톨루엔 (200 mL) 중에 현탁하였다. 여기에 톨루엔 (100 mL) 중 글리신 메틸 에스테르의 N-벤질 이민 (16.89 g) 및 1,4-디브로모-2-부텐 (19.28 g)의 용액을 40분에 걸쳐 적가하였다. 상기 적색 용액을 100분 동안 교반한 후에 H₂O (200 mL)로 켄칭시켰다. 내용물을 분별 깔때기로 옮겨 MTBE (200 mL)로 희석하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 MTBE로 추출하였다. 합한 유기 층들을 1 N HCl (수성) (500 mL)과 함께 3시간 동안 교반하였다. 층들을 분리하고, 유기 층을 H₂O (100 mL)로 추출하였다. 수성 층들을 합하여 NaCl (250 g) 및 MTBE (700 mL)를 첨가하고, 10 N NaOH (수성)를 사용하여 pH가 약 13이 되도록 하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 MTBE (2회, 300 mL씩)로 추출하였다. 유기 층들을 합하여 건조 (MgSO₄)시키고, 약 400 mL의 부피로 농축시켰다. 상기 용액에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (25.0 g)를 첨가하고, 상기 반응물을 3일 동안 교반하였다. 디-tert-부틸 디카르보네이트 (5.6 g)를 더 첨가한 후에 상기 반응물을 60℃ 조에서 1시간 동안 가열하였다. 상기 반응물을 EtOAc/헥산 (1:9)을 용출액으로서 사용한 플래시(flash) 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 라세미 N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-아미노-2-비닐시클로프로판 카르복실산 메 틸 에스테르 10.89 g을 수득하였다. 예를 들어, WO 00/09558 및 문헌 [Beaulieu, P. L. et al., J. Org. Chem., 70(15), 5869-5879, 2005]을 참조한다.

라세미 N-Boc-(1R,2S)/(1S,2R)-1-아미노-2-비닐시클로프로판 카르복실산 메틸 에스테르 (4.2 g)를 아세톤 (80 mL) 중에 용해한 후에 물 (160 mL)로 희석하였다. pH를 0.2 N NaOH (수성)를 사용하여 7.8로 조정하였다. 섭틸리신 A(Subtilisin A) (미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마(Sigma)가 제조한 제품 P-5380) (4.5 g)를 상기 용액에 첨가하였다. 0.1 N NaOH (수성)를 적가하여 이것의 pH를 3일 동안 7.4 내지 8.7로 유지시켰다. 상기 반응물의 HPLC 분석 (키랄파크 AD(Chiralpak AD), 일본 도쿄 소재의 다이셀 케미칼 인더스트리스(Daicel Chemical Industries), 4.6 mm×250 mm, 0.5 mL/분, 10분에 걸쳐 10％→85％ 2-프로판올/헥산, 215.4 nm에서 모니터링)에서는 오직 (1R,2S)-거울상이성질체만이 존재하는 것으로 나타났고 ((1R,2S)의 체류 시간: 6.2분, (1S,2R)의 체류 시간: 5.9분), 2 N NaOH (수성)를 사용하여 pH를 8.5로 만들었다. 상기 반응의 내용물을 분별 깔때기로 옮기고, MTBE (3×400 mL)로 추출하였다. 추출물들을 포화 NaHCO₃ (수성) 용액 (3×150 mL) 및 물 (2×200 mL)로 세척하고 건조 (MgSO₄)시켰다. 상기 용 액을 여과하여 농축시키고, CH₂Cl₂로 희석하고 건조 (MgSO₄)시켜 여과하고 농축시켜 N-Boc-(1R,2S)-1-아미노-2-비닐시클로프로판 카르복실산 메틸 에스테르 1.95 g을 수득하였다.

N-Boc-(1R,2S)-1-아미노-2-비닐시클로프로판 카르복실산 메틸 에스테르 (125 mg, 0.52 mmol)를 CH₂Cl₂/TFA (1:1, 2 mL) 중에 실온에서 90분 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하여 (1R,2S)-1-아미노-2-비닐시클로프로판 카르복실산 메틸 에스테르 트리플루오로아세트산 염을 수득하였다.

화합물 XX1 (2.34 g, 9.71 mmol)을 THF/H₂O/THF (3:1:0.5, 22 mL) 중 LiOH·H₂O (0.45 g, 10.7 mmol)와 함께 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 남아있는 고체를 CH₂Cl₂/EtOAc 및 1 N HCl (수성) 중에 취하였다. 수성 층을 CH₂Cl₂로 추출하고, 합한 유기 추출물들을 건조 (MgSO₄)시켜 여과하고 농축시켰다. 상기 물질을 CH₂Cl₂ (10 mL) 중에 실온에서 용해하고, 트리플루오로아세트산 (10 mL)으로 처리하였다. 제70분의 HPLC 분석에서는 출발 물질이 존재하지 않는 것으로 나타났다. 용매를 진공하에 제거하여 점성의 밝은 색상 오일을 수득하였다. 이것을 추가의 CH₂Cl₂ (30 mL) 중에 취하고, 회전 증발기에서 증발시켜 황갈색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 포화 NaHCO₃ (수성) 및 아세톤 (1:1, 50 mL) 중에 용해하고, Fmoc-Cl (2.65 g, 10.2 mmol)로 처리하였다. 4시간 후에, 상기 플라스크의 내용물을 CH₂Cl₂를 사용하여 분별 깔때기로 옮겨 2 N HCl (수성)로 산성화하였다. 수성 층을 CH₂Cl₂로 추출하고, 합한 유기 층들을 건조 (MgSO₄)시켜 여과하고 농축시켜 XX2 1.86 g (5.3 mmol)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. (M + 1) = 350.1

PS-왕(PS-Wang) 수지 (2.0 g, 1.0 당량)를 DMF (상기 수지를 포함할 정도의 충분량) 중에서 팽윤시켰다. (1R,2S)-1-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-2-비닐시클로프로판카르복실산 (XX3) (922 mg, 1.1 당량)을 DCM 중에서 교반하였다. 디이소프로필카르보디이미드 (409 ㎕, 1.1 당량)를 상기 DCM 용액에 첨가하고, 4℃에서 2시간 동안 교반한 후에 수지 및 DMF에 첨가하였다. DMF 중 디메틸아미노피리딘 (29 mg, O.1 당량)을 상기 수지 용액에 첨가하고, 5시간 동안 진탕시켰다. 배수시키고, DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 XX4를 수득하였다.

2-( 바이시클로[4.1.0]헵탄 -1-일)아세트산 X2 의 제조

시판되는 화합물 X1 (미국 위스콘신주 밀워키 소재의 알드리치 케미칼 컴퍼니(Aldrich Chemical Co.))을 이. 제이. 칸토로우스키(E. J. Kantorowski) 등이 문헌 [J. Org Chem., 1999, 64, 570-580]에 기재한 방법에 따라 X2로 전환시켰다.

2-(1- 히드록시시클로헥실 )아세트산 X5 의 제조

화합물 X4를 본질적으로 문헌 [Bull. Chem. Soc. Jpn., 1971, 44, 1090]에 기재된 절차를 이용하여 제조하였다. 구체적으로, 톨루엔 중 에틸브로모아세테이트 (8.3 mL) (미국 위스콘신주 밀워키 소재의 알드리치 케미칼 컴퍼니)의 용액을 80℃에서 30분에 걸쳐 톨루엔 중 시클로헥사논 X3 (4.9 g) 및 아연 분말 (4.9 g)의 철저하게 교반된 혼합물에 적가하였다. 상기 적가를 조심스럽게 모니터링하고, 온도를 80℃에서 유지시켰다. 적가가 완료된 후에는 상기 혼합물을 90분 동안 환류시켜 냉각하고, 1 N 수성 HCl로 분리하여 Et₂O로 추출하였다. 유기물들을 물 및 수성 NaHCO₃으로 세척하여 건조 (MgSO₄)시키고 진공하에 농축시켜 X4를 수득하였다 (5.9 g).

MeOH 중 X4 (510 mg)의 용액에 1 N 수성 NaOH를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 물로 희석하여 Et₂O로 세척하고, 수성 층을 1 N 수성 시트르산으로 산성화하고 EtOAc로 추출하였다. 유기물들을 건조 (MgSO₄)시키고 진공하에 농축시켜 재결정화 후에는 화합물 X5를 수득하였다 (220 mg).

2-(1- 메틸시클로헥실 )아세트산 ( X8 )의 제조

시판되는 화합물 X6 (미국 위스콘신주 밀워키 소재의 알드리치 케미칼 컴퍼니)을 앤. 아사오(N. Asao) 등이 문헌 [Tetrahedron Lett., 2003, 44, 4265]에 기재한 방법에 따라 화합물 X7로 전환시켰다.

EtOH 중 화합물 X7의 용액에 1 N 수성 NaOH를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반한 후에 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 물로 희석 하여 Et₂O로 세척하고, 수성 층을 1 N 수성 시트르산으로 산성화하여 CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기물들을 건조 (MgSO₄)시키고 진공하에 농축시켜 화합물 X8을 수득하였다.

2-(4- 메틸테트라히드로 -2H-피란-4-일)아세트산 ( X12 )의 제조

톨루엔 중 디히드로-2H-피란-4(3H)-온 (X9) (3.13 g, 알드리치)의 용액에 (카르브에톡시메틸렌)-트리페닐포스포란 (12.0 g, 알드리치)을 첨가하였다. 상기 용액을 110℃에서 3일 동안 교반하였다. 생성된 짙은 색상의 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼으로 바로 정제하여 화합물 X10 (4.54 g)을 투명한 액체로서 수득하였다.

화합물 X11 및 X12를 화합물 X7 및 X8에 대해 기재한 것과 유사한 방식으로 수득하였다.

2-( 시스 -2,6- 디메틸테트라히드로 -2H-피란-4-일)아세트산 ( X16 )의 제조

중간체 X13을 시판되는 2,6-디메틸-g-피론 (미국 위스콘신주 밀워키 소재의 알드리치 케미칼 컴퍼니)으로부터 제조하였다. 상기 g-피론의 용액을 EtOH 중에 용해하고, 10％ Pd/C를 사용하여 2시간에 걸쳐 수소화 (2 atm의 H₂)하였다. 이후, 촉매를 여과해 내고, 상기 용액을 진공하에 농축시켜 조 X13을 수득하였고, 이것을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 순수한 화합물 X13을 수득하였다.

이어서, 화합물 X10에 대해 기재한 것과 유사한 방식으로 하여 화합물 X13으로부터 화합물 X14를 수득하였다.

이어서, EtOAc 중 화합물 X14의 용액을 10％ 습윤 Pd/C를 사용하여 1시간에 걸쳐 수소화 (1 atm의 H₂)하였다. 이후, 촉매를 여과해 내고, 상기 용액을 진공하에 농축시켜 조 화합물 X15를 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. 이어서, 화합물 X8에 대해 기재한 것과 유사한 방식으로 하여 화합물 X15로부터 화합물 X16을 수득하였다.

2-(1,4- 디옥사스피로[4.5]데칸 -8-일)아세트산 X20 의 제조

화합물 X16의 제조에 대하여 상기 기재한 절차에 따라 화합물 X17 (알드리치)로부터 화합물 X20을 제조하였다.

2-(트랜스-2,6- 디메틸테트라히드로 -2H-피란-4-일)아세트산 25의 제조

화합물 X21 및 X22를 에스. 다니쉐프스키(S. Danishefsky) 등이 문헌 [J. Org. Chem. 1982, 47, 1597-1598]에 기재한 방법과 디. 에스. 레디(D. S. Reddy) 등이 문헌 [J. Org. Chem. 2004, 69, 1716-1719]에 기재한 방법 각각에 따라 제조하였다. 화합물 X16의 제조에 대하여 상기 기재한 방법에 따라 화합물 X22로부터 화합물 X25를 제조하였다.

2-(4-히드록시-4- 메틸시클로헥실 )아세트산 X27 의 제조

디옥산 중 화합물 X20의 용액을 디옥산 중 4 N HCl로 처리하였다. 상기 반응 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켜 조 화합물 X26을 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. THF 중 화합물 X26의 교반된 용액에 MeMgBr (THF 중 3 N)을 서서히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 교반하여 1 N 수성 시트르산으로 켄칭시키고 EtOAc로 희석하였다. 상들을 분리하고, 유기물들을 건조 (MgSO₄)시켜 진공하에 농축시키고, 실리카 겔에서의 크로마토그래피로 정제하여 화합물 X27을 2종의 부분입체이성질체들의 혼합물로서 수득하였다.

2-(2,2- 디메틸테트라히드로 -2H-피란-4-일)아세트산의 제조

THF (21.5 mL), MeOH (21.5 mL) 및 물 (10.75 mL) 중 메틸 에스테르 (500 mg, 2.69 mmol)의 용액에 LiOH (1 N, 10.75 mL)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 상기 반응물을 HCl (1 N, pH = 5)로 산성화시켰다. 생성물을 EtOAc (2회, 20 mL씩)로 추출하였다. 이어서, 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고 진공하에 농축시켜 2-(2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)아세트산 420 mg을 수득하였다.

EtOAc (1.5 L) 중 화합물 X30 (64 g, 237 mmol) 및 EDC (226 g, 1.19 mol)의 용액에 DMSO (400 mL)를 첨가하고, 생성된 현탁액을 0℃로 냉각시켰다. 상기 혼합물에 EtOAc 중 디클로로아세트산의 용액 (1:1 v/v, 130 mL)을 첨가하면서 내부 반응 온도는 25℃ 미만으로 유지시켰다. 상기 반응물을 실온으로 가온하여 15분 동안 교반하고 0℃로 냉각시켜 1 N HCl (1 L)로 켄칭시켰다. 유기 층을 분리하고, H₂O (2×500 mL)로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 생성된 오일을 EtOAc/헥산으로 용출시키는 실리카 플러그를 통해 여과하여 화합물 X31 48 g을 백색 고체로서 수득하였다.

수지 X32 (WO 00/23421에 기재된 절차에 따라 제조함) (100 g, 0.88 mmol/g)에 THF (650 mL) 중 X31 (48 g, 179 mmol)의 용액을 첨가한 후에 AcOH (30 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 16시간 동안 진탕시키고, 수지를 여과하여 THF (4회, 400 mL씩) 및 CH₂Cl₂ (4회, 400 mL씩)로 세척하여 진공하에 건조시켰다. 여액 및 세척액을 합하여 농축시키고, 상기 절차를 반복하여 수지 X33을 대략 0.4 mmol/g의 부하량으로 수득하였다.

알데히드 화합물의 제조

5-클로로니코틴알데히드를 디. 엘. 코민스(D. L. Comins) 등이 문헌 [Hetereocycles, 1987, 26(8), pp. 2159-2164]에 기재한 방법에 따라 제조하였다.

2-플루오로-5-클로로벤즈알데히드, 2-메톡시-3-메틸 벤즈알데히드, 2-메톡시니코틴알데히드, 2,3-디히드로벤조푸란-7-카르브알데히드와 같은 일부 다른 알데히드는 하기하는 절차를 기초로 하여 상응하는 산으로부터 제조할 수 있다:

2,3- 디히드로벤조푸란 -7- 카르브알데히드의 제조

2,3-디히드로벤조푸란-7-카르복실산 (820 mg, 5 mmol)을 THF (10 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액에 TEA (0.7 mL, 5 mmol) 및 메틸클로로포르메이트 (0.43 mL, 5 mmol)를 첨가하였다. 상기 용액을 0.5시간 동안 교반하였다. 백색 침전물 을 여과로 제거하고, 여액을 H₂O (5 mL) 중 NaBH₄ (437 mg, 12.5 mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 2 M 수성 HCl 용액으로 중화시킨 후에 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하여 무수 Na₂SO₄에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 조 알콜을 DCM 중에 용해하였다. 상기 용액에 PCC (1.83 g, 7.5 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하고, 디에틸 에테르로 희석한 후에 에테르 층들을 경사분리하였다. 합한 유기 층을 셀라이트(Celite)^® 층을 통해 여과하였다. 여액을 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 10％ EtOAc/헥산을 사용한 컬럼에서 정제하여 2,3-디히드로벤조푸란-7-카르브알데히드 450 mg을 약간 황색의 고체로서 수득하였다. HPLC 4.3분.

4- 클로로피콜린알데히드의 제조

CHCl₃ 중 MnO₂ (7.3 g, 84 mmol) 및 (4-클로로-피리딘-2-일)메탄올 (1 g, 7 mmol)의 현탁액을 90분 동안 환류 가열하였다. 상기 혼합물을 셀라이트^® 층을 통해 여과하고 진공하에 농축시켜 4-클로로피콜린알데히드 520 mg을 백색 고체로서 수득하였다. HPLC 1.8분 및 MS 142 (M = 1 피크).

3- 클로로 -5- 메톡시벤즈알데히드의 제조

3-클로로-5-메톡시벤질 알콜 (5.0 g, 28.9 mmol) 및 피리디늄 클로로크로메이트 (알루미나상 20％, 40 g, 37.8 mmol)의 혼합물이 1.25시간 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 디에틸 에테르 (200 mL)를 첨가한 후에 침전물을 여과하였다. 여액을 감압하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 40％ 디클로로메탄, 60％ 석유 에테르를 용출액으로서 사용한 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 3-클로로-5-메톡시벤즈알데히드 3.8 g을 수득하였다.

1-( 브로모메틸 )-3- 클로로 -5-메틸벤젠의 제조

사염화탄소 중 m-클로르옥실렌 (0.96 g, 6.8 mmol)의 용액에 N-브로모숙신이미드 (1.4 g, 7.5 mmol) 및 이후에는 벤조일 퍼옥시드 (1.6 g, 6.8 mmol)를 환류하에 첨가하였다. 상기 반응물이 20분 동안 교반되도록 하여 실온으로 냉각시키고, 침전물을 여과해 내어 여액을 감압하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 석유 에테르를 용출액으로 사용한 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1-(브로모메틸)-3-클로로-5-메틸벤젠을 0.89 g 수득하였다.

3- 클로로 -5- 메틸벤즈알데히드의 제조

에탄올 중 나트륨 금속 (52 mg, 2.3 mmol)의 용액에 2-니트로프로판 (0.23 g, 2.4 mmol)을 첨가한 후에 3-클로로-5-메틸벤질브로마이드 (0.5 g, 2.3 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응물이 3시간 동안 교반되도록 하고, 형성된 침전물을 여과해 냈다. 여액을 감압하에 농축시켜 디에틸에테르 중에 재용해하고, 1 N 수산화나트륨 (2회) 및 물로 세척하여 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고, 여액을 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 10％ 디클로로메탄 및 90％ 석유 에테르를 사용한 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 3-클로로-5-메틸벤즈알데히드 0.15 g을 수득하였다.

THF (40 mL) 중 3-클로로-5-플루오로-4-히드록시벤즈알데히드 (1.0 g, 5.7 mmol)를 물 (5 mL) 및 요오도에탄 (1 mL, 2.2 당량) 중 KOH (534 mg, 9.5 mmol, 1.7 당량)와 함께 17시간 동안 환류 가열하였다. 이어서, 상기 반응물을 물을 사용하여 분별 깔때기로 옮겨 염화메틸렌 (3회, 150 mL씩)으로 추출하였다. 합한 유 기 층들을 10％ 수성 HCl (40 mL)로 세척하여 건조 (MgSO₄)시키고, 점성의 오렌지색 액체로 농축하여 3-클로로-4-에톡시-5-플루오로벤즈알데히드 1.13 g을 수득하였다.

4-에톡시-3,5-디메틸벤즈알데히드를 3-클로로-4-에톡시-5-플루오로벤즈알데히드의 제조와 유사한 방식으로 제조하였다.

4-이소프로폭시-3,5-디메틸벤즈알데히드를 4-에톡시-3,5-디메틸벤즈알데히드의 제조와 유사한 방식으로 제조하였다.

4-(시클로프로필메톡시)-3,5-디메틸벤즈알데히드를 4-에톡시-3,5-디메틸벤즈알데히드의 제조와 유사한 방식으로 제조하였다.

(S)-1-( tert - 부톡시카르보닐 )-4- 옥소피롤리딘 -2- 카르복실산의 제조

이소프로필 아세테이트 (5배 부피) 중 (2S,4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-히드록시피롤리딘-2-카르복실산 (1.0 당량)의 용액을 0℃로 냉각시키고, TEMPO (0.05 당량)를 첨가하였다. 이어서, 표백제(bleach) (12.5 wt％, 1.2 당량, 2.6배 부피)의 용액을 1시간에 걸쳐 서서히 첨가하면서 온도를 0℃ 내지 5℃로 유지시켰다. 상기 혼합물을 교반하고, HPLC로 완료되었음을 확인한 후에 수성 10％ KHSO₄ (2.5배 부피)를 첨가하고 10분 동안 교반한 후에 상들을 분리하였다. 유기 상을 수성 5％ Na₂SO₃ (2배 부피)으로 세척한 후에 염수 (1배 부피)로 세척하고, 이후에는 공비 건조시키고 농축하여 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. 상기 고체를 아세토니트릴 (1.0배 부피)로 연화처리(trituration)하여 잔류 색상 및 불순물을 제거하였다.

(S)-1- tert - 부톡시카르보닐 )-4- 메틸렌피롤리딘 -2- 카르복실산의 제조

2-메틸 테트라히드로푸란 (3배 부피) 중 메틸 트리페닐포스포늄 브로마이드 (2.2 당량)의 현탁액에 고체 칼륨 tert-부톡시드 (2.3 당량)를 신속하게 첨가하면서 온도를 0℃ 정도로 유지하였다. 온도를 +20℃에서 2시간 동안 유지 (현탁액이 유지됨)하고, 0℃로 재냉각시켰다. 온도를 6℃ 미만으로 유지하면서, (S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-옥소피롤리딘-2-카르복실산 (1 당량)을 40분에 걸쳐 첨가하였다. 상기 반응물을 실온으로 가온시켜 16시간 동안 교반한 후에 0℃로 냉각시켰다. 상기 반응물을 포화 NaHCO₃ (5배 부피) 및 물 (2배 부피)로 켄칭시키고, 수성 층을 분리하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃/물 (1.8배 부피/1.8배 부피)로 추출하고, 합한 수성 층들을 셀라이트^®를 통해 여과하였다. 수성 층을 6 N HCl (2.6배 부피)로 주위 온도에서 산성화하고, 이소프로필 아세테이트로 2회 (16배 부피, 이후에는 8배 부피) 추출하였다. 유기 상을 건조 (MgSO₄)시키고, 용매를 제거하였다. 조 생성물을 이소프로필 아세테이트 (10배 부피) 중에 용해하고, 0.5 M NaOH (10배 부피, 이후에는 1배 부피)로 추출하였다. 합한 수성 층들을 주위 온도에서 6 N HCl을 사용하여 pH = 3으로 산성화하고, 에틸 아세테이트로 2회 (10배 부피, 이후에는 8배 부피) 추출하였다. 합한 추출물들을 건조 (Na₂SO₄)시켜 용매를 제거하고, 조 생성물을 시클로헥산 (5배 부피)으로부터 재결정화하여 표제 화합물을 수득하였다.

(5S,8S)- tert -부틸 3-(3- 클로로페닐 )-1-옥사-2,7- 디아자스피로[4.4]논 -2-엔-8-카 르복실레이트 의 제조

EtOAc (2.1 L) 중 3-클로로-N-히드록시벤즈이미도일 클로라이드 (175 g, 0.919 mol)의 용액을 EtOAc (2.0 L) 중 (S)-디-tert-부틸 4-메틸렌피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (200 g, 0.707 mol)의 용액에 실온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 빙조에서 10℃ 미만으로 냉각시킨 후에 트리에틸아민 (128 mL, 0.919 mol)을 서서히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반한 후에 물 (3 L)로 켄칭하였다. 상들을 분리하고, 유기 상을 물 (2×1.0 L)로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고, 용매를 제거하여 신- 및 안티-스피로이속사졸린의 혼합물을 오일로서 수득하였다.

이성질체들의 혼합물을 THF (0.72 L) 중에 용해하고 20℃로 냉각시켰다. 메탄술폰산 (150 mL)을 서서히 첨가하면서 20℃ 내지 30℃를 유지시켰다. 상기 혼합물을 25℃에서 교반하고, 7시간 후에는 물 (1 L) 중 K₂CO₃ (300 g)의 용액을 조심스 럽게 첨가하여 켄칭시켰다. 상들을 분리하고, 수성 상을 이소프로필 아세테이트 (1 L)로 추출하였다. 유기 상들을 합하고, 용매의 대략 절반을 진공하에 제거하였다. 상기 용액을 포화 염수 (250 mL) 및 물 (250 mL)의 1:1 혼합물로 세척하였다. 수성 상을 이소프로필 아세테이트 (200 mL)로 추출하고, 유기 상들을 합한 후에 K₂CO₃에서 건조시키고 여과하여 균질한 용액을 수득하였다. 용액 부피를 이소프로필 아세테이트 첨가로 3 L로 만든 후에 이소프로필 아세테이트 (400 mL) 중 옥살산 (20 g)의 용액을 서서히 첨가하였다. 고체를 여과로 단리하여 진공 오븐에서 건조시켰다. 상기 고체를 이소프로필 아세테이트 (1.5 L) 및 물 (1.0 L) 중에 현탁한 후, 고체가 완전히 용해될 때까지 K₂CO₃을 서서히 첨가하였다. 유기 층을 단리하여 K₂CO₃에서 건조시키고 여과한 후에 이소프로필 아세테이트 (250 mL) 중 옥살산 (12.5 g)의 용액을 서서히 첨가하였다. 고체를 여과로 단리하고 진공 오븐에서 건조시켜서 스피로이속사졸린을 부분입체이성질체들의 98:2의 안티-:신- 혼합물로서 수득하였다.

화합물 M2B (1.0 g, 1.0 당량)를 벤젠 20 mL 중에서 벤조일니트로메탄 (583 mg, 1.0 당량) 및 촉매량의 트리에틸아민과 함께 교반하였다. 페닐 이소시아네이트 (88O ㎕)를 서서히 첨가하고, 40시간 동안 교반하였다. 짙은 색상의 침전물을 여과해 내어 여액에 물 2 mL를 첨가하고, 상기 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 유기물들을 분리하여 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→90％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 X37을 350 mg 수득하였다. (M + H = 431.2)

화합물 X37 (1.35 g. 1.0 당량)을 1/1 TFA/DCM 20 mL 중에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 농축시키고, 여기에 아세톤 20 mL, 포화 중탄산나트륨 용액 20 mL 및 FMOC-Cl (1.22 g, 1.5 당량)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 교반하여 에틸 아세테이트로 희석하고, 수성 물질이 산성이 될 때까지 2 N HCl 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 교반하여 수성 물질을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기물들을 황산마그네슘에서 건조시켜 여과하고 농축시켰다. 농축물을 실리카 겔 크로마토그래피 (100％ DCM→10％MeOH/DCM 구배)로 정제하여 화 합물 X38을 수득하였다. (M + H = 497.1).

에탄올 (5 mL) 중 2,3-디히드로벤조푸란 5-카르복스알데히드 (1 g, 6.75 mmol)의 용액에 2.4 M NH₂OH (3.3 mL, 8.1 mmol) 용액을 첨가한 후에 1.2 M Na₂CO₃ (3.3 mL, 4.05 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다 (HPLC에서는 출발 물질이 남아 있지 않은 것으로 나타났음). 상기 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하여 염수로 세척하고 Na₂SO₄에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 이것으로, 생성물 1.0 g을 백색 고체로서 수득하였다. ES-MS 164 (M + 1 피크).

DMF (5 mL) 중 알독심 (426 mg, 2.6 mmol)의 용액에 NCS (697 mg, 5.2 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 상기 용액에 (S)-디-tert-부틸 4-메틸렌피롤리딘-1,2-디카르복실레이트, 화합물 1 (600 mg, 2.1 mmol)을 첨가한 후에 DMF (2 mL) 중 TEA (0.37 mL, 2.6 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반한 후에 50℃ 내지 60℃로 2시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 EtOAc (20 mL)로 희석하여 H₂O 및 염수로 세척하고 Na₂SO₄에서 건조시켜 진공하에 농축시켰다. 조 생성물을 30％ EtOAc/헥산으로 용출시키는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 S 이성질체 (500 mg 내지 600 mg) (Rf = 0.3) 및 R 이성질체 (150 mg) (Rf = 0.2)를 수득하였다. ES-MS 479 (M + 1 피크).

B. 화학식 I의 예시적인 화합물의 합성

화학식 I의 특정한 예시적인 화합물은 하기 예시한 바와 같이 방법 1로 제조할 수 있다.

방법 1 :

방법 1에서, 엑소메틸렌 화합물 A1을 탈보호하여 A2를 생성하고, 이것을 상응하는 Fmoc 유도체 A3으로 전환시킨다. 수지-결합된 아미노알콜 A4를 커플링 시 약의 존재하에 A3과 반응시키면 수지-결합된 생성물 A5가 생성된다. A5와 니트릴 옥시드 1f (계내 생성됨)의 쌍극성 첨가 반응으로 수지-결합된 스피로이속사졸린 A6이 생성되고, 이것을 탈보호하면 수지-결합된 스피로이속사졸린 A7이 생성된다. A7을 R₁-카르복실산과 커플링제의 존재하에 반응시키면 A8이 생성된다 (여기서, R₁은 R₄C(O)-임). 상기 수지로부터 스피로이속사졸린을 절단하면 알콜 A9가 생성된다. 산화 시약, 예를 들어 데스-마르틴 페리오디난 또는 차아염소산나트륨을 사용하여 TEMPO의 존재하에 A9를 산화시키면, 최종 화합물 A10이 생성된다.

일부 예에서, R₄는 아민 관능기를 함유할 수 있다. R₄가 보호된 아민을 함유하는 경우, 상기 보호된 아민을 탈보호하여 유리 아민을 생성한 후에 활성화된 산과 반응시키면 추가로 변형된 R₄가 생성된다. 별법으로, R₄의 유리 아민을 상응하는 p-니트로페닐카르바메이트로 전환시킨 후에 아민 또는 알콜과 반응시켜서 카르바메이트 또는 우레아 관능기를 함유하는 R4 화합물을 수득할 수 있다.

알릴 1-( 시클로프로필아미노 )-2-(6-( 히드록시메틸 ) 테트라히드로 -2H-피란-2-일옥시)-1- 옥소헥산 -3- 일카르바메이트 ( M1B )의 제조

단계 1: 알릴 1-( 시클로프로필아미노 )-2-히드록시-1- 옥소헥산 -3- 일카르바메이트 ( M1A )

염화메틸렌 (250 mL) 중 (3S)-3-아미노-N-시클로프로필-2-히드록시헥산아미드 (10 g, 53.7 mmol) 및 DIEA (28 mL, 161 mmol, 3 당량)의 용액에 0℃에서 DCM (50 mL) 중 알릴클로로포르메이트 (6.8 mL, 64.4 mmol, 1.2 당량)의 용액을 적가하였다. 상기 반응 용액을 실온으로 가온시켜 4시간 동안 교반하였다. 이어서, 물 (300 mL)을 서서히 첨가한 후에 수성 HCl (1.0 N, 300 mL)을 첨가하였다. 상들을 분리하고, 유기물들을 포화 수성 NaHCO₃ (300 mL) 및 염수 (300 mL)로 세척하여 MgSO₄로 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켰다. 생성된 회백색 고체를 EtOAc 중 30％ 헥산 (120 mL)으로부터 재결정화하여 표제 화합물 M1A를 백색 고체로서 수득하였다. 모액을 진공하에 농축시키고 EtOAc 중 50％ 헥산으로부터 재결정화하여 M1A를 4.04 g 더 수득하였다. 두번째 재결정화로부터의 모액을 셀라이트^®에서 진공하에 농축시키고, 생성된 셀라이트^® 플러그를 플래시 크로마토그래피 (이스코 컴패니언(Isco Companion)^®, SiO₂, DCM→DCM 중 70％ EtOAc)로 정제하여 M1A를 1.46 g 수득하였다. 화합물 M1A의 총량은 13.4 g이었다. (Rf = 1:1 DCM:EtOAc 중 약 0.40, CAM 검출).

단계 2: 알릴 1-( 시클로프로필아미노 )-2-(6-( 히드록시메틸 ) 테트라히드로 -2H-피란-2- 일옥시 )-1- 옥소헥산 -3- 일카르바메이트 결합된 수지 ( M1B )

상부위쪽 기계적 교반기 및 환류 응축기가 장착된 500 mL의 2구 둥근 바닥 플라스크에 M1A (9.08 g, 33.6 mmol, 3 당량), 피리디늄 p-톨루엔술포네이트 (5.6 g, 22.4 mmol, 2 당량), DHP-수지 (10.2 g, 11.2 mmol, 노바바이오켐(Novabiochem) 카탈로그 번호 01-64-0192, 부하량: 1.1 mmol/g) 및 디클로로에탄 (84 mL, [0.4]_I)을 충전하였다. 상기 혼합물을 80℃에서 3일 동안 부드럽게 교반한 후에 50℃로 냉각시켜 여과하였다. 수지를 DCM (200 mL)으로 세척하고, 합한 여액을 진공하에 농축시켜 수지 M1B를 수득하였고, 이것을 DCM (2회), DMF (3회), DCM-MeOH (3회 연속) 및 Et₂O로 추가로 세척하고 진공하에 밤새 건조시켜 밝은 갈색 수지를 수득하였다. 수지 M1B의 부하량은 90％ 수성 TFA를 사용하여 수지의 분취액 (176 mg)을 취하여 결정하였다. 부하량: 0.48 mmol/g.

(9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 2-(1-( 시클로프로필아미노 )-2-히드록시-1- 옥소헥산 -3-일 카르바모 일)-4- 메틸렌피롤리딘 -1- 카르복실레이트 결합된 수지 ( M1E )의 제조

단계 1: 3-아미노-N- 시클로프로필 -2- 히드록시헥산아미드 결합된 수지 ( M1D )

알릴 1-(시클로프로필아미노)-2-히드록시-1-옥소헥산-3-일카르바메이트 결합된 수지 M1B (30 g, 1.0 당량)를 DCM으로 팽윤시켰다. 1,3-디메틸바르비투르산 (24.17 g, 12 당량) 및 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (1.49 g, 0.1 당량)을 첨가하고, 상기 혼합물을 밤새 진탕시켰다. 상기 혼합물을 여과하고, DMF 및 DCM으로 세척하여 수지 M1D를 수득하였다.

단계 2: (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 2-(1-( 시클로프로필아미노 )-2-히드록시-1-옥소헥산-3- 일카르바모일 )-4- 메틸렌피롤리딘 -1- 카르복실레이트 결합된 수지 ( M1E )

수지 M1D (1.0 g, 1.0 당량)를 DMF 중에서 FMOC-4-엑소메틸렌프롤린 카르복실산 (248 mg, 1.1 당량), HBTU (0.5 M DMF 용액, 4.8 mL, 5.0 당량), HOBt (1.0 M DMF 용액, 2.4 mL, 5.0 당량), DIEA (836 ㎕, 10.0 당량)과 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 배수시키고, DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 표제 화합물 M1E를 수득하였다.

Fmoc -보호된 이속사졸린 화합물 결합된 수지 ( M1F )의 제조

THF 중 수지 M1E (2 g, 0.94 mmol)를 3-클로로벤즈알독심 (5 당량) 및 표백제 (5％ NaOCl) (15 당량)과 함께 18시간 동안 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하고 물, DMF 및 DCM으로 세척하여 수지 화합물 M1F를 수득하였다. 상기 수지의 분취액을 취하여 LC-질량 분석용 샘플로 사용하였다 (M + 1 = 671).

Fmoc- 보호된 이속사졸린 결합된 수지 화합물 ( M1G )의 제조

수지 M1F를 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시켜 여과하고, DMF 및 DCM으로 세척하였다. THP 수지-결합된 스피로이속사졸린 프롤린 (0.14 mmol, 0.3 g)을 DMF 2.3 mL 중 FMOC-L-3-벤조티에닐-ALA (0.56 mmol, 0.25 g), HOBT (0.56 mmol, 0.075 g), N,N-디이소프로필에틸아민 (0.56 mmol, 0.072 g) 및 HBTU (0.56 mmol, 0.21 g)와 혼합하고, 48시간 동안 교반하였다. 상기 수지를 여과하고, DMF, 디클로로메탄 및 에테르로 세척하여 수지 화합물 M1G를 수득하였다.

7-((S)-3-( 벤조[b]티오펜 -3-일)-2-(2- 시클로헥실아세트아미도 ) 프로파노일 )-3-(3-클 로로 페닐)-N-((3R)-1-( 시클로프로필아미노 )-2-히드록시-1- 옥소헥산 -3-일)-1-옥사-2,7- 디아자스피로[4.4]논 -2-엔-8- 카르복스아미드 ( M1H )의 제조

THP-수지-결합된 FMOC-보호된 스피로이속사졸린 M1G에 DMF (3 mL) 중 20％ 피페리딘을 첨가하였다. 상기 혼합물을 1시간 동안 교반하여 여과하고, DMF 및 디클로로메탄으로 세척하였다. 이어서, 상기 수지를 DMF 2.3 mL 중 시클로헥실아세트산 (0.56 mmol, 80 mg), HOBT (0.56 mmol, 0.075 g), N,N-디이소프로필에틸아민 (0.56 mmol, 0.072 g), HBTU (0.56 mmol, 0.21 g)과 혼합하여 48시간 동안 교반하였다. 수지를 여과하고, DMF, 디클로로메탄 및 에테르로 세척하였다. 이어서, 수득된 수지를 트리플루오로아세트산, 디클로로메탄 및 트리이소프로필 실란의 용액 (50:45:5) (3 mL)과 혼합하고, 밤새 교반하였다. 상기 반응물을 여과하고, 디클로로메탄으로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시키고, 40％ 에틸 아세테이트/60％ 디클로로메탄→100％ 에틸 아세테이트의 구배를 사용한 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 알콜 M1H를 수득하였다.

실시예 1: 화합물 336

에틸 아세테이트 0.38 mL 중 히드록시아미드 M1H (14 mg, 0.018 mmol)의 용액에 EDC (35 mg, 0.18 mmol)를 첨가한 후에 DMSO (0.070 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (0.15 mL) 중 디클로로아세트산 (15 mg, 0.12 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온으로 가온시켜 15분 동안 교반되도록 한 후에 빙조에서 냉각시켜 1.0 N HCl (0.21 mL)로 켄칭시켰다. 상기 용액을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 상을 물로 세척하여 황산나트륨에서 건조시키고 용매를 진공하에 증발시켰다. 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트 및 헥산 (3:1)을 용출액으로 사용한 실리카 겔에서의 크로마토그래피로 정제하여 화합물 336을 백색 고체로서 수득하였다.

(9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 8-((3S)-1-( 시클로프로필아미노 )-2-히드록시-1- 옥소헥산 -3- 일카르바모일 )-3- 페닐 -1-옥사-2,7- 디아자스피로[4.4]논 -2-엔-7- 카르복실레이트 ( M1N )의 제조

단계 1: Fmoc -보호된 페닐 -치환된 이속사졸린 결합된 수지 ( M1L )

THF 중 수지 M1E (2 g, 0.94 mmol)를 옥심 (5 당량) 및 표백제 (5％ NaOCl) (15 당량) 중에서 18시간 동안 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하여 물, DMF 및 DCM로 세척하여 Fmoc-보호된 페닐-치환된 이속사졸린 결합된 수지 M1L을 수득하였다. 수지의 분취액을 취하여 LC-질량 분석에 사용하였다 (M + 1 = 637).

수지 M1L (0.47 mmol)을 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시킨 후에 여과하고 DMF 및 DCM으로 세척하였다. 생성된 수지를 Fmoc-tBG-OH (480 mg, 3.0 당량), HOBT (DMF 중 0.5 M, 2.82 mL, 3.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 2.82 mL, 3.0 당량) 및 DIEA (0.493 mL, 6.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하고 DMF 및 DCM으로 세척하여 수지 화합물 M1M을 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 반응에 사용하였다.

단계 2: 화합물 M1N

수지 M1M (0.47 mmol)을 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시켰다. 수지를 여과하여 DMF 및 DCM으로 세척하였다. 생성된 수지 (140 mg, 0.065 mmol)를 벤질이소시아네이트 (176 mg, 20.0 당량)와 함께 밤새 진탕시킨 후에 여과하고, DMF 및 DCM으로 세척하였다. 상기 수지를 물 중 90％ TFA와 함께 30분 동안 진탕시켰다. 생성된 용액을 진공하에 농축시켜 화합물 M1N (0.065 mmol)을 수득하였고 ((M + 1) 661), 이것을 추가의 정제 없이 다음 반응에 사용하였다.

실시예 2: 화합물 107

DCM (3 mL) 중 아미드 화합물 M1N의 용액을 데스-마르틴 페리오디난 (54 mg, 2 당량) 및 t-BuOH (54 ㎕)와 함께 1시간 동안 교반한 후에 상기 혼합물에 티오황산나트륨을 첨가하였다. 상기 생성물을 EtOAc로 추출한 후에 합한 유기 층을 물, NaHCO₃ 및 염수로 세척하여 진공하에 농축하고, 길슨 정제용 HPLC로 정제하여 화합물 107을 수득하였다. (M + 1) 659.

실시예 3: 화합물 283

THP 수지 M1M (0.065 mmol)을 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시킨 후에 여과하고, DMF 및 DCM으로 세척하였다. 생성된 수지를 2-(피리딘-3-일)아세트산 (0.25 mmol 3.0 당량), HOBT (DMF 중 0.5 M, 0.5 mL, 3.85 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 0.5 mL, 3.85 당량) 및 DIEA (0.5 mmol, 7.69 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하고, DMF 및 DCM으로 세척하여 물 중 90％ TFA와 함께 30분 동안 진탕시켰다. 생성된 용액을 진공하에 농축시켜 히드록실 아미드 화합물 M1P (0.065 mmol)를 수득하였고, 이것을 다음 반응에 추가의 정제 없이 사용하였다. (M + 1) 647.

DCM (3 mL) 중 히드록실 아미드 M1P (0.065 mmol)의 용액을 데스-마르틴 페 리오디난 (41 mg, 1.5 당량) 및 t-BuOH (41 ㎕)와 함께 교반하였다. 1시간 동안 교반한 후에 상기 혼합물에 티오황산나트륨을 첨가하였다. 상기 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 이어서, 합한 유기 층을 물, NaHCO₃ 및 염수로 세척하여 진공하에 농축시키고, 길슨 정제용 HPLC로 정제하여 화합물 283을 수득하였다 (4 mg). (M + 1) 645.

실시예 4: 화합물 61

화합물 M1E (750 mg, 1.0 당량)를 벤젠 중에서 1-니트로프로판 (315 ㎕, 10.0 당량) 및 페닐이소시아네이트 (385 ㎕, 10.0 당량)와 함께 교반하였다. 트리에틸아민 (5 ㎕)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 진탕시켜 배수시키고, DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하였다. 이 과정을 반복하여 화합물 M1Q를 수득하였다. (M + H = 589.0).

이어서, 화합물 M1Q (750 mg, 1.0 당량)를 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시켰다. 수지를 여과하고, DMF (3회)로 세척한 후에 DCM (3회)으로 세척하였다. 이 과정을 반복하였다. 생성된 수지를 DMF 중 (S)-3,3-디메틸-2-(((S)-테트라히드로푸란-3-일옥시)카르보닐아미노)부탄산 (216 mg, 2.5 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 1.76 mL, 3.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 0.88 mL, 2.5 당량) 및 DIEA (307 ㎕, 5.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하여 DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 M1R을 수득하였다. (M + H = 593.9).

화합물 M1R (750 mg, 1.0 당량)을 1/1 TFA/DCM 중에서 3시간 동안 교반하였다. 수지를 배수시키고, DCM (3회)으로 세척하였다. 유기물들 모두를 농축시키고 DCM을 첨가한 후에 데스-마르틴 페리오디난 (50 mg, 3.0 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하여 1 N Na₂S₂O₃을 첨가하고, 다시 교반하였다. 화합물 61의 라세미 혼합물을 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→90％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 61을 1종의 부분입체이성질체로서 수득하였다. (M + H = 591.8).

실시예 5: 화합물 146

화합물 M1E (50 mg, 1.0 당량)를 DCM 중에서 (Z)-에틸 2-클로로-2-(히드록시이미노)아세테이트 (7.1 mg, 2.0 당량)와 함께 교반하였다. 상기 혼합물에 DCM 중 TEA (6.6 ㎕, 2.0 당량)를 서서히 첨가하고, 상기 혼합물을 3시간 동안 진탕시킨 후에 배수시키고, DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하였다. 이 과정을 반복하여 화합물 M1S를 수득하였다. (M + H = 632.4).

화합물 M1S (1.0 g, 1.0 당량)를 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시켰다. 상기 수지를 여과하고, DMF (3회)로 세척한 후에 DCM (3회)으로 세척하였다. 이 과정을 반복하였다. 생성된 수지를 DMF 2 mL 중 (S)-3,3-디메틸-2-(((S)테트라히드로푸란-3-일옥시)카르보닐아미노)부탄산 (230 mg, 2.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 1.88 mL, 2.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 0.94 mL, 2.0 당량) 및 DIEA (327 ㎕, 4.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하 고, DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 M1T를 수득하였다. (M + H = 638.0).

화합물 M1T (750 mg, 1.0 당량)를 THF 중에서 KOTMS (133 mg, 3.0 당량)와 함께 3시간 동안 진탕시켰다. 이어서, 상기 혼합물을 배수시키고, THF/물 (1/1), THF, DMF 및 DCM (각각 3회씩)으로 세척하여 화합물 M1U를 수득하였다. (M + H = 609.5).

화합물 M1U (250 mg, 1.0 당량)를 DMF 중 에틸아민 (22 mg, 3.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 0.54 mL, 3.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 0.27 mL, 3.0 당량) 및 DIEA (47 ㎕, 3.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하고 DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 M1V를 수득하였다. (M + H = 637.2).

화합물 M1V (0.4 g, 1.0 당량)를 1/1 TFA/DCM 중에서 2시간 동안 교반한 후에 배수시키고, DCM (3회)으로 세척하였다. 유기 상들을 합하여 건조시키고, 여기에 DCM을 첨가한 후에 데스-마르틴 페리오디난 (97 mg, 3.0 당량)을 첨가하였다. 상기 용액을 1시간 동안 교반하고, 여기에 1 N Na₂S₂O₃을 첨가하고, 상기 혼합물을 추가로 교반하였다. 상기 용액을 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→90％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 146을 6.1 mg 수득하였다. (M + H = 635.0).

화학식 I의 하기 화합물은 방법 1 및 상기 항목 아래에 기재된 제법에 따라 제조될 수도 있다.

표 2 및 본원의 모든 다른 표에 기재된 R₃에 대한 모든 출발 물질은 시판되는 것 (니트로 또는 옥심)이거나, 또는 상응하는 알데히드 전구체로부터 쉽게 제조하였다.

추가로, 화합물 20, 22, 53, 81, 103, 116, 166, 187, 189, 194, 197, 200, 220, 223, 226, 245, 252, 271, 204, 307, 319, 339, 354, 360, 361, 371, 392, 393, 435, 449, 506, 514, 531 및 585 역시 방법 1을 이용하여 제조하였다.

본 발명의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 2로 제조할 수 있다.

방법 2 :

방법 2에서, 보호된 스피로이속사졸린 B1을 탈보호하면 B2가 생성되고, 이후에 이것을 Fmoc 유도체 B3으로 전환시킨다. B3을 수지-결합된 아미노알콜 A4와 반응시키면 수지-결합된 스피로이속사졸린 A6이 생성되고, 이것을 방법 1에 기재된 바와 같이 하여 A10으로 전환시킨다.

실시예 6: 화합물 281

화합물 M2A (5.0 g, 1.0 당량)를 아세토니트릴 100 mL 중에서 교반하고, 상기 혼합물에 디-tert-부틸디카르보네이트 (9.6 g, 2.0 당량), 디메틸아미노피리딘 (537 mg, 0.2 당량) 및 트리에틸아민 (6.13 mL, 2.0 당량)을 첨가하고, 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 농축시켜 에틸 아세테이트를 첨가하고, 상기 혼합물을 1.0 N HCl로 세척하고 황산나트륨에서 건조시켜 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→30％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 M2B를 수득하였다. (M + H = 284.0).

화합물 M2B (2.0 g, 1.0 당량)를 DCM 35 mL 중에서 벤즈알독심 (2.67 g, 2.0 당량)과 함께 교반하였다. 상기 용액을 빙조에서 냉각시키고, 여기에 표백제 (5％ NaOCl) (34.9 mL)를 서서히 첨가하였다. 이어서, 상기 혼합물을 실온으로 가온시켜 2시간 동안 교반하였다. 수성 층을 분리하고, DCM으로 2회 추출하였다. 유기물들을 합하고 황산마그네슘에서 건조시켜 여과하고 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피 (5％→30％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 M2C를 수득하였다. (M + H = 403.1).

화합물 M2C를 1/1 TFA/DCM 중에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 농축시켰다. 농축된 혼합물에 DMF 17 mL, 물 5 mL, 탄산나트륨 (713 mg, 2.5 당량) 및 FMOC-OSu (951 mg, 1.05 당량)을 첨가하고, 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 에틸 아세테이트를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1.0 N HCl로 세척한 후에 염수로 세척하였다. 이것을 황산마그네슘에서 건조시켜 여과하고 농축시켜 화합물 M2D를 수득하였다. (M + H = 468.9).

화합물 M2D (1.26 g, 2.0 당량)를 DMF 중에 M1D (2.5 g, 1.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 12 mL, 5.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 6 mL, 5.0 당량) 및 휘니그(Huenig's) 염기 (2.09 mL, 10.0 당량)와 함께 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 배수시키고, DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 M11을 수득하였다. (M + H = 637.0).

화합물 M1L (0.4 g, 1.0 당량)을 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시킨 후에 여과하고 DMF (3회)로 세척한 후에 DCM (3회)으로 세척하였다. 상기 과정을 반복하였다. 생성된 수지를 DMF 2 mL 중 FMOC-tert-부틸글리신 (200 mg, 3.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 1.15 mL, 3.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 0.58 mL, 3.0 당량) 및 DIEA (167 ㎕, 5.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하고 DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 M1M을 수득하였다. (M + H = 750.1).

화합물 M1M (0.4 g, 1.0 당량)을 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시키고, 상기 수지를 여과하여 DMF (3회)로 세척한 후에 DCM (3회)으로 세척하였다. 이 과정을 반복하여 화합물 M2H를 수득하였다.

화합물 M2H (0.4 g, 1.0 당량)를 DMF 2 mL 중 FMOC-시클로헥실글리신 (218 mg, 3.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 1.15 mL, 3.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 0.58 mL, 3.0 당량) 및 DIEA (167 ㎕, 5.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하여 DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하였다. 이어서, 상기 수지를 20％ 피페리딘/DMF로 10분 동안 처리하였다. 수지를 여과하고 DMF (3회)로 세척한 후에 DCM (3회)으로 세척하였다. 이 과정을 반복하여 화합물 M2I를 수득하였다.

화합물 M2I (0.4 g, 1.0 당량)를 DMF 2 mL 중 피라진 카르복실산 (71 mg, 3.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 1.15 mL, 3.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 0.58 mL, 3.0 당량) 및 DIEA (167 ㎕, 5.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하여 DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 M2J를 수득하였다. (M + H = 772.9).

화합물 M2J (0.4 g, 1.0 당량)를 1/1 TFA/DCM 중에서 2시간 동안 교반하였다. 수지를 배수시키고, DCM (3회)으로 세척하였다. 모든 유기물들을 농축시키고, DCM을 첨가한 후에 데스-마르틴 페리오디난 (97 mg, 3.0 당량)을 첨가하였다. 1시간 동안 교반하여 1 N Na₂S₂O₃을 첨가하고 교반하였다. 상기 용액을 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→90％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 281를 42 mg 수득하였다. (M + H = 771.0).

하기 표 3은 방법 2로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물을 기재한다:

화학식 I의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 3으로 제조할 수 있다.

방법 3 :

방법 3에서, 방법 1에서와 같이 하여 제조된 수지-결합된 Fmoc 엑소메틸렌 화합물 A5를 탈보호하여 C1을 수득한다. C1을 커플링 시약의 존재하에 R₁ 카르복실산과 반응시키면 C2가 생성된다 (여기서, R₁은 R₄C(O)-임). C2를 니트릴 옥시드 1f와 반응시키면 A8이 생성되고, 이것을 방법 1에서 예시한 바와 같이 하여 A10으로 전환시킨다.

실시예 7: 화합물 239

수지 M1E (0.47 mmol)를 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시킨 후에 여과하고 DMF 및 DCM으로 세척하였다. 생성된 수지를 Cbz-tBG-OH (374 mg, 3.0 당량), HOBT (DMF 중 0.5 M, 2.82 mL, 3.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 2.82 mL, 3.0 당량) 및 DIEA (0.493 mL, 6.0 당량)의 용액과 함께 다시 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하고 DMF 및 DCM으로 세척하여 수지 화합물 M3A (0.47 g)를 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 반응에 사용하였다.

THF 중 Cbz 수지 M3A (0.0611 mmol)를 3-브로모-페닐 옥심 (10 당량) 및 표백제 (5％ NaOH) (20 당량)와 함께 12시간 동안 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하여 물, DMF 및 DCM으로 세척하여 수지 M3B를 수득하였다.

수지 M3B를 물 중 95％ TFA와 함께 30분 동안 진탕시키고, 생성된 용액을 진공하에 농축시켜 화합물 M3C (0.031 mmol) ((M + 1) = 740)를 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 반응에 사용하였다.

DCM (3 mL) 중 화합물 M3C (0.031 mmol)의 용액을 데스-마르틴 페리오디난 (26 mg, 2 당량) 및 t-BuOH (26 ㎕)와 함께 교반하였다. 1시간 동안 교반한 후, 티오황산나트륨을 상기 혼합물에 첨가하였다. 상기 생성물을 EtOAc로 추출한 후에 합한 유기 층을 물, NaHCO₃ 및 염수로 세척하여 진공하에 농축하고, 길슨 정제용 HPLC로 정제하여 화합물 239를 수득하였다. (M + 1) = 738.

실시예 8: 화합물 535

화합물 M1E (10.0 g, 1.0 당량)를 20％ 피페리딘/DMF 중에서 10분 동안 진탕시켰다. 상기 수지를 여과하고 DMF (3회)로 세척한 후에 DCM (3회)으로 세척하였다. 상기 과정을 반복하였다. 생성된 수지를 DMF 중 (S)-2,3-디메틸-2-(((S)-테트라히드로푸란-3-일옥시)카르보닐아미노)부탄산 (3.46 g, 3.0 당량), HBTU (DMF 중 0.5 M, 28.2 mL, 3.0 당량), HOBt (DMF 중 1.0 M, 14.1 mL, 3.0 당량) 및 DIEA (4.91 mL, 6.0 당량)의 용액과 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 여과하고 DMF (3회) 및 DCM (3회)으로 세척하여 화합물 M3E를 수득하였다. (M + H = 523.1).

화합물 M3E (300 mg, 1.0 당량)을 THF 중에서 교반하고, 2-니트로-1-페닐에타논 (272 mg, 10.0 당량)을 상기 혼합물에 첨가한 후에 페닐 이소시아네이트 (179 ㎕, 10.0 당량) 및 촉매량의 TEA (10 ㎕)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 진탕시켜 배수시키고 DMF, THF 및 DCM (각각 3회씩)로 세척하여 화합물 M3F을 수득하였다. (M + H = 669.8).

화합물 M3F (0.4 g, 1.0 당량)를 1/1 TFA/DCM 중에서 2시간 동안 교반하였다. 수지를 배수시켜 DCM (3회)으로 세척하고, 모든 유기물들을 농축시키고, DCM을 첨가한 후에 데스-마르틴 페리오디난 (97 mg, 3.0 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고 1 N Na₂S₂O₃을 첨가하고 다시 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→90％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 535를 수득하였다. (M + H = 668.1).

하기 표 4는 방법 3으로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물을 기재한다:

화학식 I의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 4로 제조할 수 있다.

방법 4 :

방법 4에서, Fmoc 유도체 A3은 방법 1에서 기재한 바와 같이 하여 제조된다. A3을 커플링 시약의 존재하에 수지-결합된 이미노 아미드 D1과 반응시키면 화합물 결합된 수지 D2가 생성된다. 상기 수지-결합된 이미노 아미드 D1은 디케토 화합물 X31로부터 아미노 수지, 예를 들어 유도체화된 아미노메틸화 폴리스티렌, 예를 들어 X32와의 반응을 통해 제조될 수 있다. D2를 탈보호하면 D3이 생성되고, 이것은 커플링 시약의 존재하에 R₁ 카르복실산과 반응하여 D4가 생성된다 (여기서, R₁은 R₄C(O)-임). D4를 니트릴 옥시드 1f와 반응시키면 D5가 생성되고, 이것을 수지로부터 가수분해하면 A10이 생성된다.

실시예 9: 화합물 303

DCM (100 mL) 중 X33과 동일한 구조를 갖는 수지 M4A의 현탁액 (20 g, 0.4 mmol/g, 8 mmol)에 PPh₃ (21 g, 80 mmol), 디메틸 바르비투르산 (12.5 g, 80 mmol) 및 Pd(PPh₃)₄ (920 mg, 0.8 mmol)를 첨가하였다. 상기 현탁액을 밤새 진탕시켜 배수시키고, DMF (10회) 및 DCM (4회)으로 세척하였다. N-Fmoc-4-메틸렌프롤린 (3.0 g, 8.8 mmol), HBTU (3.3 g, 8.8 mmol) 및 HOBt (1.1 g, 8.8 mmol) 및 DIEA (1.6 mL, 8.8 mmol)를 DMF (100 mL) 중에 용해하였다. 상기 용액을 수지에 첨가하고, 밤새 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 배수시키고, DMF (10회) 및 DCM (4회)으로 세척하고 건조시켜 수지 M4B를 수득하였다.

수지 M4B (20 g, 8 mmol)에 DMF 중 20％ 피페리딘 (100 mL)을 첨가하여 1시간 동안 진탕시킨 후에 DMF (10회) 및 DCM (4회)으로 세척하였다. 상기 수지에 DMF (100 mL) 중 Fmoc-tert-부틸 글리신 (5.6 g, 16 mmol), HBTU (6.1 g, 16 mmol), HOBt (2.2 g, 16 mmol) 및 (iPr)₂NEt (2.9 mL, 16 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 상기 현탁액을 밤새 진탕시켜 배수시키고, DMF (10회) 및 DCM (4회)으로 세척하고 건조시켜 수지 M4C를 수득하였다.

수지 M4C (20 g, 8 mmol)에 DMF 중 20％ 피페리딘 (100 mL)을 첨가하여 1시간 동안 진탕시킨 후에 DMF (10회) 및 DCM (4회)으로 세척하였다. 상기 수지에 DMF (100 mL) 중 시클로헥실아세트산 (1.42 g, 10 mmol), HBTU (3.8 g, 10 mmol), HOBt (1.35 g, 10 mmol) 및 (iPr)₂NEt (1.8 mL, 10 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 상기 현탁액을 밤새 진탕시켜 배수시키고, DMF (10회) 및 DCM (4회)으로 세척하고 건조시켜 수지 M4D를 수득하였다.

DMF (3 mL) 중 3-피리딘알독심 (M4E) (122 mg, 1 mmol)의 용액에 NCS (134 mg, 1 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 50℃ 내지 60℃로 30분 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후에 3-피리딘클로르옥심 (M4F) 용액을 수지 M4D (300 mg, 0.12 mmol)에 첨가하였다. 상기 혼합물에 TEA (0.14 mL, 1 mmol)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 50℃ 내지 60℃로 4시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 배수시키고, DMF (6회) 및 DCM (6회)으로 세척하였다. 상기 수지를 95％ TFA로 5시간 동안 처리하였다. 상기 혼합물을 배수시키고, DCM으로 세척하였다. 여액을 진공하에 농축시키고, 50％→100％ EtOAc/Hex을 사용한 컬럼으로 정제하여 무색의 고체 7 mg을 생성물인 화합물 303으로서 수득하였다. HPLC 5.7분 내지 6.4분; MS 651.5 및 LC-MS 3.9분.

하기 표 5는 방법 4로 제조된 추가의 화합물을 기재한다:

방법 4로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물

화합물 번호	P 1 에 대한 출발 물질	C 1 에 대한 출발 물질	R 3 에 대한 출발 물질
41	N-FMOC-L-tert- 부틸글리신	2-시클로헥실아세트산	5-브로모피리딘-3-카르브알데히드
179	N-FMOC-L-tert- 부틸글리신	2-시클로헥실아세트산	5-브로모-2-푸르알데히드
230	N-FMOC-L-tert- 부틸글리신	2-시클로헥실아세트산	2-메틸벤조푸란-3-카르브알데히드
303	N-FMOC-L-tert- 부틸글리신	2-시클로헥실아세트산	3-피리딘-카르브알데히드
495	N-FMOC-L-tert- 부틸글리신	2-시클로헥실아세트산	4-클로로-1-메틸-1H-피라졸-3- 카르브알데히드
552	N-FMOC-L-tert- 부틸글리신	2-시클로헥실아세트산	2,3-디히드로벤조[b]푸란-5- 카르복스알데히드

본 발명의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 5A 및 5B로 제조할 수 있다.

방법 5A :

방법 5A에서, 엑소메틸렌 산 화합물 A1을 보호하여 디-t-부틸 디카르복실레이트 E1을 생성한다. E1을 화학식 1f의 니트릴 옥시드와 반응시켜 중간체 B1을 생성하고, 이것을 아미노산 유도체 E2로 변환시킨다. E2를 아미노알콜 E5와 반응시켜 A9를 생성한다. 화합물 A9를 방법 1에 기재한 바와 같이 하여 A10으로 전환시킨다.

방법 5B :

방법 5B에서, 중간체 화합물 B1을 아미노산 에스테르 E6으로 변환시킨다. E6을 커플링 시약의 존재하에 R₁ 카르복실산과 반응시켜 E7을 생성한다 (여기서, R₁은 R₄C(O)-임). E7을 탈보호하여 E2를 생성하고, 이것을 방법 1에 기재된 바와 같이 하여 A10으로 전환시킨다.

실시예 10: 화합물 422

화합물 10A (5.0 g, 1.0 당량)를 아세토니트릴 100 mL 중에서 교반하고, 상기 용액에 디-tert-부틸디카르보네이트 (9.6 g, 2 당량), 디메틸 아미노피리딘 (537 mg, 0.2 당량) 및 트리에틸아민 (6.13 mL, 2.0 당량)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 교반하고 농축시켜 에틸 아세테이트를 첨가하고, 1.0 N HCl로 세척하여 황산나트륨에서 건조시켜 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→30％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 M2B를 수득하였다. (M + H = 284.0).

화합물 10B (10.0 g, 1.0 당량)를 DCM 175 mL 중에서 피페로날옥심 (11.5 g, 2.0 당량)과 함께 교반하였다. 상기 용액을 빙조에서 냉각시키고, 여기에 표백제 (175 mL)를 서서히 첨가하였다. 이어서, 상기 혼합물을 실온으로 가온시키고 2시간 동안 교반하여 분리하고, 이것의 수성 층을 DCM으로 2회 추출하였다. 유기물들을 합하여 황산마그네슘에서 건조시켜 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 정제하고, 부분입체이성질체들을 실리카 겔 크로마토그래피 (5％→30％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 분리하여 화합물 10C 4.1 g을 수득하였다. (M + H = 446.9).

별법으로, 화합물 10B는 하기 절차로 제조하였다:

제조예 : (S)-디- tert -부틸 4- 메틸렌피롤리딘 -1,2- 디카르복실레이트

절차 1

트리에틸아민 (2 당량)을 아세토니트릴 (10배 부피) 중 (S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-메틸렌피롤리딘-2-카르복실산 (1.0 당량), 디-tert-부틸디카르보네이트 (2.0 당량) 및 DMAP (0.2 당량)의 용액에 주위 온도에서 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 16시간 동안 교반한 후에 이소프로필 아세테이트 (25배 부피)로 희석하였다. 물 (20배 부피, 2회)로 세척한 후에 Na₂SO₄에서 여과하고 용매를 제거하였다. 조 생성물을 실리카 겔 패드를 통한 여과 (37배 부피의 실리카, 헵탄 (80배 부피)을 사용한 제1 세정(flushing), 헵탄 중 10％ 에틸 아세테이트 (30배 부피)를 사용한 제2 세정)로 정제하였다. 제2 세정액으로부터 용매를 제거하여 화합물 10B를 수득하였다.

절차 2

MTBE 중 디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.1 당량)의 용액 (2배 부피)을 MTBE (8배 부피) 및 t-부탄올 (1.75배 부피) 중 (S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-메틸렌피롤리딘-2-카르복실산 (1.0 당량) 및 DMAP (0.2 당량)의 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 1시간 동안 교반하였고, 이 시점에 기체 방출이 멈추었다. 상기 혼합물을 1 N HCl (3배 부피)로 세척한 후에 포화 수성 NaHCO₃ (3배 부피)으로 세척한 후에 염수 (3배 부피)로 세척하였다. 이어서, 용매를 제거하여 화합물 10B를 수득하였다.

화합물 10C (4.0 g, 1.0 당량)를 1/1 TFA/DCM 중에서 3시간 동안 교반하고, 상기 용액을 농축시켰다. 상기 농축물에 아세톤 10O mL, 포화 중탄산나트륨 용액 10O mL 및 디-tert부틸디카르보네이트를 첨가하고, 생성된 용액을 밤새 교반한 후에 1.0 N HCl 용액으로 산성화하고 에틸 아세테이트 (3회)로 추출하였다. 유기물들을 염수 용액으로 세척하여 황산마그네슘에서 건조시켜 여과하고 농축시켜 화합물 10D를 4.0 g 수득하였다. (M + H = 391.1).

화합물 10D (50 mg, 1.0 당량)를 DMF 0.5 mL 중에서 EDC (37 mg, 1.5 당량), PS-HOBt (137 mg, 1.5 당량) 및 NMM (56 ㎕, 4.0 당량)과 함께 교반하고, 상기 용액에 DCM 0.5 mL를 첨가하여 수지가 팽윤되도록 도왔다. 상기 혼합물에 3-아미노-2-히드록시헥산아미드 (30 mg, 1.3 당량)를 첨가하고, 상기 혼합물을 밤새 교반하고 여과하여 에틸 아세테이트로 희석하고, 1.0 N HCl로 세척하여 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 농축시켰다. 상기 용액을 실리카 겔 크로마토그래피 (100％ DCM→5％ MeOH/DCM 구배)로 정제하여 조 생성물 21 mg을 수득하였고, 이후에 이것을 4.0 N HCl/디옥산 중에서 2시간 동안 교반하고 농축시켜 화합물 10E를 HCl 염으로서 수득하였다. (M + H = 419.0).

화합물 10E (21 mg, 1.0 당량)를 DMF 중에서 NMM (13 ㎕, 1.4 당량)과 함께 교반하고, 상기 용액에 DMF 중 (S)-3,3-디메틸-2-(((S)-테트라히드로푸란-3-일옥시)카르보닐아미노)부탄산 (14 mg, 1.4 당량), EDC (11 mg, 1.4 당량) 및 PS-HOBt (40 mg, 1.4 당량)의 용액을 충분량의 DCM과 함께 첨가하여 상기 수지를 팽윤시켰다. 상기 혼합물을 밤새 교반하여 여과하고, 1.0 N HCl로 세척하여 황산나트륨에서 건조시켜 여과한 후에 농축시켜 화합물 10F를 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. (M + H = 646.4).

화합물 10F를 DCM 중에서 교반하고, 상기 용액에 데스-마르틴 페리오디난 (약 3.0 당량)을 첨가하였다. 상기 용액을 1시간 동안 교반하고, 여기에 1.0 N Na₂S₂O₃을 첨가하고 교반하였다. 상기 혼합물을 실리카 겔 크로마토그래피 (10％→90％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 422를 9 mg 수득하였다. (M + H = 644.3).

실시예 11: 화합물 562

DMF (135 mL) 중 2,4-디메톡시벤즈알독심 (4.5 g, 24.8 mmol)에 2시간에 걸쳐 실온에서 DMF (135 mL) 중 N-클로로숙신이미드 (6.6 g, 49.7 mmol)의 용액을 적가하였다. 상기 반응물을 14시간 동안 교반하고, 화합물 M2B (5.2 g, 18.4 mmol)를 첨가한 후에 1시간에 걸쳐 DMF 중 트리에틸아민 (2.6 mL, 18.4 mmol, 15 mL 중)의 용액을 적가하였다. 3시간 동안 교반한 후에 상기 반응 혼합물을 H₂O로 세척하여 MgSO₄에서 건조시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 11B 5.8 g을 황갈색 고체로서 수득하였다. ES (+) MS: m/e 497 (M + H)⁺.

CH₂Cl₂ (30 mL) 중 화합물 11B (5.5 g, 11.1 mmol)에 트리플루오로아세트산 (30 mL)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 90분 동안 실온에서 교반하고 감압하에 농축시켜 황갈색 고체를 수득하였고, 이것을 MeOH (60 mL) 중에 용해하고 환류 가열하였다. 진한 황산 (약 5 mL)을 적가하고 상기 반응물을 3시간 동안 환류시키고, 이후에는 용매를 감압하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 CH₂Cl₂ (75 mL) 중에 용해하여 pH 약 9가 될 때까지 포화 NaHCO₃ 용액을 조심스럽게 처리하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 중간체 아미노 에스테르를 수득하였다. CH₂Cl₂ (60 mL) 중 N-Boc-tert-부틸글리신 (3.1 g, 13.6 mmol)에 EDC (2.6 g, 13.6 mmol), HOBt (1.8 g, 13.6 mmol) 및 트리에틸아민 (5.5 mL, 39.5 mmol)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후에 상기 아미노 에스테르를 첨가하고, 상기 반응물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 H₂O, 1 N HCl 및 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 진공하에 농축시켜 화합물 11C 5.6 g (3개 단계에 걸친 수득량)을 갈색 고체로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. ES (+) MS: m/e 568 (M + H)⁺.

CH₂Cl₂ (3 mL) 중 화합물 11C (600 mg, 1.1 mmol)에 트리플루오로아세트산 (3 mL)을 첨가하였다. 상기 반응물을 1시간 동안 교반하고 감압하에 농축시켜 원하는 아민 생성물을 TFA 염으로서 수득하였다. CH₂Cl₂ (6 mL) 중 시클로헥실아세트산 (181 mg, 1.3 mmol)에 EDC (243 mg, 1.3 mmol), HOBt (171 mg, 1.3 mmol) 및 트리에틸아민 (516 ㎕, 3.7 mmol)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후에 상기 아민을 첨가하고, 상기 반응물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 H₂O, 1 N HCl 및 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시켜 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 11D 460 mg (2개 단계에 걸친 수득량)을 회백색 고체로서 수득하였다. ES (+) MS: m/e 592 (M + H)⁺.

THF/H₂O (5 mL, 3:1 v/v) 용액 중 화합물 11D (460 mg, 0.8 mmol)에 LiOH 일수화물 (82 mg, 1.9 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하고, 1 N HCl을 사용하여 산성화하고 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켜 화합물 11E를 405 mg 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. ES (+) MS: m/e 578 (M + H)⁺.

CH₂Cl₂ (1 mL) 중 화합물 11E (80 mg, 0.14 mmol)에 EDC (38 mg, 0.2 mmol), HOBt (27 mg, 0.2 mmol) 및 트리에틸아민 (68 ㎕, 0.5 mmol)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후에 화합물 11F를 첨가하고, 상기 반응물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 H₂O, 1 N HCl 및 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 진공하에 농축시켜 화합물 11G 95 mg을 갈색 고체로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. ES (+) MS: m/e 718 (M + H)⁺.

CH₂Cl₂ (1 mL) 중 화합물 11G (95 mg, 0.14 mmol)에 데스-마르틴 페리오디난 (71 mg, 0.17 mmol)을 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후에 상기 반응물을 1 N Na₂S₂O₃으로 켄칭시켰다. 유기 층을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 562, 즉, 상기 나타낸 화합물 11H를 백색 고체로서 수득하였다. ES (+) MS: m/e 716 (M + H)⁺.

실시예 12: 화합물 362

4-메톡시-3,5-디메틸벤즈알데히드 (1.86 g, 11.3 mmol)를 에탄올 (30 mL) 중에 용해하고, 히드록실아민 히드로클로라이드 (2.4 M 수용액, 5.65 mL, 1.2 당량) 및 Na₂CO₃ (1.2 M 용액, 5.65 mL, 0.6 당량)과 함께 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 60℃로 가열하고, 히드록실아민 히드로클로라이드 및 Na₂CO₃을 더 첨가하였다. 상기 혼합물을 60℃에서 다시 밤새 교반하고, 분별 깔때기로 옮겨 EtOAc로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 상기 생성물을 EtOAc/헥산 용출액을 사용한 ISCO 크로마토그래피로 정제하여 4-메톡시-3,5-디메틸벤즈알데히드 옥심 1.55 g (8.56 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. (M + 1 = 180.0).

DMF (10 mL) 중 4-메톡시-3,5-디메틸벤즈알데히드 옥심 (1.34 g, 7.48 mmol)의 용액에 N-클로로숙신이미드 (1.76 g, 13.2 mmol)를 첨가하였다. HPLC에서 출발 물질이 소모된 것으로 나타날 때까지 상기 용액을 교반하였다. 이어서, 상기 용액에 DMF (5 mL) 중 (S)-디-tert-부틸 4-메틸렌피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (2.1 g, 1.0 당량)의 용액을 첨가하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (1.2 당량)을 적가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 EtOAc로 희석하고, 유기 상을 물 및 염수로 세척하여 건조 (MgSO₄)시켜 여과하고 농축시켰다. 상기 생성물을 EtOAc/헥산을 용출액으로서 사용한 ISCO 콤비플래시(Combiflash)에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 12A 912 mg (1.98 mmol)을 수득하였다. (M + 1 = 461.4).

화합물 12A (910 mg, 1.98 mmol)를 CH₂Cl₂/트리플루오로아세트산 (1:1, 20 mL) 중에서 HPLC로 출발 물질이 완전히 탈보호된 것으로 나타날 때까지 교반하였다. 중간체 아미노산을 농축시킨 후에 메탄올 (30 mL) 중에 용해하고, HPLC에서 출발 물질이 소모된 것으로 나타날 때까지 진한 H₂SO₄와 함께 환류 가열하였다. 상기 물질을 진공하에 농축한 후에 EtOAc 중에 용해하고, NaHCO₃ 및 염수로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 화합물 12B를 수득하였다. (M + 1 = 319.0).

화합물 12B (727 mg, 2.28 mmol)를 DMF (3 mL) 중에 Boc-t-부틸글리신 (686 mg, 3.0 mmol), EDC·HCl (659 mg, 3.43 mmol), HOBt (460 mg, 3.4 mmol) 및 DIEA (1.2 mL, 6.89 mmol)와 함께 용해하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 분별 깔때기로 옮겨 EtOAc로 희석하였다. 유기 층을 1 N HCl (2회, 20 mL씩), 포화 수성 NaHCO₃ (25 mL), 물 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켰다. 조 생성물 12C를 EtOAc/헥산을 용출액으로서 사용한 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 12C 231 mg (0.435 mmol)을 투명한 무색의 오일로서 수득하였다. LCMS (M + 1) = 532.45.

화합물 12C (231 mg, 0.435 mmol)를 디옥산 중 4 N HCl (15 mL) 중에서 90분 동안 교반하고, 이 시점의 TLC 분석에서는 반응 혼합물 중에 출발 물질이 존재하지 않는 것으로 나타났다. HCl 및 디옥산을 증발시켜 회백색 발포체를 수득하였다. 상기 중간체의 일부 (0.35 mmol), EDC·HCl (96 mg, 0.50 mmol), HOBt (72 mg, 0.53 mmol) 및 시클로헥산아세트산 (78 mg, 0.55 mmol)을 DMF (3.5 mL) 중에서 교반하였다. 여기에 DIEA (0.18 mL, 1.0 mmol)를 첨가하고, 상기 반응물을 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 EtOAc로 희석하고, 분별 깔때기로 옮겨 층들을 분리하고, 유기 상을 1.0 N HCl, 포화 수성 NaHCO₃ 및 염수로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켰다. 상기 생성물을 EtOAc/헥산을 용출액으로서 사용한 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 12D 219 mg (0.394 mmol)을 투명한 오일로서 수득하였다. (M + 1 = 556.4).

THF/H₂O/MeOH (4:1:1, 6 mL) 중 화합물 12D (219 mg, 0.394 mmol)를 LiOH·H₂O (1.5 당량)와 함께 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 1.0 N HCl로 산성화하고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 화합물 12E를 207 mg (0.382 mmol) 수득하였다. (M + 1 = 548.4).

화합물 12E (207 mg, 0.382 mmol)를 DMF (2.0 mL) 중 HOBt (107 mg, 0.792 mmol), EDC·HCl (144 mg, 0.764 mmol) 및 히드록시아민 히드로클로라이드 (168 mg, 0.75 mmol)와 함께 실온에서 교반하고, DIEA (0.400 mL, 2.3 mmol)로 처리하였다. 상기 반응물을 밤새 교반하고 EtOAc로 희석하여 1 N HCl 및 포화 NaHCO₃으로 세척하고, 합한 수성 층들을 EtOAc로 역추출하였다. 유기 층들을 합하고 MgSO₄에서 건조시켜 농축시키고, EtOAc/헥산을 용출액으로서 사용한 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 12F 227 mg (0.320 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. (M + TFA) M - 1 = 822.6.

화합물 12F (227 mg, 0.320 mmol)를 실온에서 CH₂Cl₂ (4 mL) 중에 용해하고, 데스-마르틴 페리오디난 (142 mg, 1.0 당량)으로 처리하였다. 15분 후에, TLC에서는 반응이 완료된 것으로 나타났고, 상기 반응 용액을 물 첨가로 켄칭시키고 격렬하게 교반하였다. CH₂Cl₂를 더 첨가하여 유기 층을 분리하고, EtOAc/헥산을 용출액으로서 사용한 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 362 159 mg (0.225 mmol)을 수득하였다. FIA MS (M + 1) = 708.42.

실시예 13: 화합물 247

화합물 13A (222 mg, 0.5 mmol)의 용액에 TEA (0.14 mL) 및 t-부틸이소시아네이트 (0.6 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 밤새 교반한 후에 EtOAc (20 mL)로 희석하고 물 (10 mL)로 세척하여 Na₂SO₄에서 건조시키고 진공하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔에서의 크로마토그래피로 정제하여 화합물 13B를 백색 고체로서 수득하였다 (190 mg). HPLC 8.48분, LC-MS m/z 507.2 ES⁺.

화합물 13B를 THF 중에 용해하고, 상기 용액을 1.0 N 수성 LiOH 및 물로 처리하였다. 상기 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 물로 희석하여 Et₂O로 세척하고, 1 N 수성 HCl로 산성화시켰다. 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂로 2회 추출하고, 합한 유기물들을 MgSO₄에서 건조시켜 여과하고 진공하에 농축시켜 조 화합물 13C를 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS m/z 493.22 ES⁺, 491.21 ES^-.

CH₂Cl₂ (800 ㎕) 중 화합물 13C (20.6 mg)의 용액을 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (10 mg) 및 히드록시벤조트리아졸 (7 mg)로 1시간 동안 처리하였다. 이어서, 디이소프로필아민 (16 ㎕) 및 3-아미노-4-시클로부틸-2-히드록시부탄아미드 D (10.5 mg)를 한번에 첨가하고, 생성된 반응 용액을 16시간 더 실온에서 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 1 N 수성 HCl, 1 N 수성 K₂CO₃:1 N 수성 NaHCO₃의 1:1 용액 및 염수를 연속적으로 사용하여 세척하였다. 이어서, 유기물들을 건조 (MgSO₄)시켜 진공하에 농축하고, 실리카에서의 크로마토그래피 (CH₂Cl₂ 중 0％→4％ MeOH)로 정제하여 화합물 13D를 수득하였다 (11.6 mg). LC-MS m/z 647.25 ES⁺.

CH₂Cl₂ (1 mL) 중 화합물 13D (11.6 mg)의 용액에 데스-마르틴 페리오디난 (8.4 mg)을 충전하고, 상기 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 생성된 백색 혼합물을 1.0 N 수성 Na₂S₂O₃으로 세척하여 상들을 분리하고, 유기물들을 MgSO₄에서 건조시켜 진공하에 농축하고 실리카에서의 크로마토그래피 (헥산 중 30％→65％ EtOAc)로 정제하여 화합물 247 6.7 mg을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 14: 화합물 57

디옥산 중 화합물 14A (512 mg)의 용액을 디옥산 중 4 N HCl로 처리하였다. 상기 반응 용액을 실온에서 45분 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 소량의 CH₂Cl₂ 중에 용해하고, Et₂O/헥산으로부터 결정화하여 화합물 14B를 백색 고체로서 수득하였다 (362 mg). LC-MS m/z 468.24 ES⁺.

CH₂Cl₂ (4 mL) 중 시클로헵탄 아세트산 (83 mg, 미국 위스콘신주 밀워키 소재의 알드리치 케미칼 컴퍼니)의 용액을 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (103 mg) 및 히드록시벤조트리아졸 (72 mg)로 1시간 동안 처리하였다. 이어서, 디이소프로필아민 (160 ㎕) 및 중간체 14B (179 mg)를 한번에 첨가하고, 생성된 반응 용액을 실온에서 2시간 더 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 1 N 수성 HCl, 1 N 수성 K₂CO₃:1 N 수성 NaHCO₃의 1:1 용액 및 염수를 연속적으로 사용하여 세척하였다. 유기물들을 건조 (MgSO₄)시켜 진공하에 농축하고 실리카에서의 크로마토그래피 (헥산 중 15％→60％ EtOAc)로 정제하여 화합물 14C를 수득하였다 (188 mg). LC-MS m/z 606.25 ES⁺.

화합물 14C (186 mg)를 THF (3 mL) 중에 용해하고, 상기 용액을 1 N 수성 LiOH (620 ㎕) 및 물 (1 mL)로 처리하였다. 상기 반응 혼합물을 45분 동안 실온에서 교반하고 진공하에 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 물로 희석하고 Et₂O로 세척하여 1 N 수성 HCl로 산성화하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc로 2회 추출하고, 합한 유기물들을 MgSO₄에서 건조시키고, 여과하고 진공하에 농축시켜 조 화합물 14D를 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. LC-MS m/z 592.25 ES⁺, 590.35 ES^-.

CH₂Cl₂ (1 mL)/DMF (1 mL) 중 화합물 14D (89 mg)의 용액을 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (44 mg) 및 히드록시벤조트리아졸 (31 mg)로 1시간 동안 처리하였다. 이어서, 디이소프로필아민 (70 ㎕) 및 (3S)-3-아미노-4-시클로프로필-2-히드록시부탄아미드 (35 mg)를 한번에 첨가하고, 생성된 반응 용액을 실온에서 16시간 더 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물을 1 N HCl, 1 N 수성 K₂CO₃:1 N 수성 NaHCO₃의 1:1 용액 및 염수를 연속적으로 사용하여 세척하였다. 유기물들을 MgSO₄에서 건조시켜 진공하에 농축하고, 실리카에서의 크로마토그래피 (CH₂Cl₂ 중 0％→5％ MeOH)로 정제하여 화합물 14F를 96 mg 수득하였다. LC-MS m/z 732.21 ES⁺.

CH₂Cl₂ (1.5 mL) 중 화합물 14F (96 mg)의 용액에 데스-마르틴 페리오디난 (83 mg)을 충전하고, 상기 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 생성된 백색 혼합물을 1 N 수성 Na₂S₂O₃으로 세척하고, 상들을 분리하여 유기물들을 MgSO₄에서 건조시키고, 진공하에 농축하고 실리카에서의 크로마토그래피 (헥산 중 10％→95％ EtOAc)로 정제하여 화합물 57 (44 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 15: 화합물 600

화합물 600은 표 1의 화합물 266과 동일한 구조를 갖는다.

CH₂Cl₂ (10 mL) 중 (R)-2-시클로헥실부트-3-인산 (430 mg, 2.4 mmol)의 용액에 EDC (458 mg, 2.4 mmol), HOBt (324 mg, 2.4 mmol) 및 트리에틸아민 (836 ㎕, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후에 화합물 15A (800 mg, 2.0 mmol)를 첨가하고, 상기 반응물을 16시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 H₂O, 1 N HCl 및 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켜 조 화합물 15B를 1.23 g 수득하였고, 이것을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. ES (+) MS: m/e 570 (M + H)⁺.

THF/H₂O (2 mL, 3:1 v/v) 중 화합물 15B (220 mg, 0.4 mmol)의 용액에 LiOH 일수화물 (115 mg, 3 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 교반하여 1 N HCl (6 mL)로 산성화하고, EtOAc (3회, 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기물들을 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 무색의 오일을 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. 상기 오일을 CH₂Cl₂ (2 mL) 중에 용해한 후에 EDC (90 mg, 0.5 mmol), HOBt (63 mg, 0.5 mmol) 및 트리에틸아민 (163 ㎕, 1.2 mmol)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후에 (3S)-3-아미노-N-시클로프로필-2-히드록시헥산아미드 (87 mg, 0.5 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응물을 12시간 동안 교반하여 H₂O, 1 N HCl 및 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켜 화합물 15C 215 mg을 무색의 오일로서 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. ES (+) MS: m/e 724 (M + H)⁺.

CH₂Cl₂ (0.5 mL) 중 화합물 15C (53 mg, 0.07 mmol)의 용액에 데스-마르틴 페리오디난 (41 mg, 0.1 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분 동안 교반하여 1 Na₂S₂O₃으로 켄칭시키고 분리하였다. 유기 층을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 600을 20 mg 수득하였다.

실시예 16: 화합물 602

화합물 602는 표 1의 화합물 212와 동일한 구조를 갖는다.

tert-부탄올/H₂O (120 ㎕, 1:1 v/v) 중 앞서 제조한 화합물 15C (20 mg, 0.03 mmol) 및 아지도메틸 피발레이트 (4 mg, 0.03 mmol. 문헌 [Syn. Lett., 2005, 18, pp. 2847-2850]에 따라 제조함)의 용액에 아스코르브산나트륨의 수용액 (10 ㎕, 0.01 mmol, 1.0 M)을 첨가한 후에 황산구리(II) 오수화물 수용액 (5 ㎕, 0.001 mmol, 0.3 M)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하여 H₂O로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기물들을 5％ 수산화암모늄으로 세척한 후에 염수로 세척하고, MgSO₄에서 건조시키고 감압하에 농축시켜 조 화합물 16B를 25 mg 수득하였고, 이것을 추가의 정제 없이 사용하였다. ES (+) MS: m/e 881 (M + H)⁺.

MeOH (120 ㎕) 중 화합물 16B의 용액에 수성 NaOH (120 ㎕, 1 M)를 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후에 1 M HCl (120 ㎕)로 처리한 후에 H₂O (120 ㎕)로 처리하였다. 상기 혼합물을 CH₂Cl₂ (3회, 200 ㎕씩)로 추출하였다. 합한 추출물들을 염수로 세척하고, 대략 100 ㎕의 부피로 농축시켰다. 상기 용액에 데스-마르틴 페리오디난 (17 mg, 0.04 mmol)을 첨가하고, 상기 반응물을 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 1 M Na₂S₂O₃ (150 ㎕)으로 켄칭시켜 유기 층을 분리하고, 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 602를 3 mg 수득하였다. ES (+) MS: m/e 765 (M + H)⁺.

하기 표 6은 방법 5A 및 5B로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물을 기재한다:

화학식 I의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 6으로 제조할 수 있다.

방법 6 :

방법 6에서, 중간체 A1을 Boc-메틸 에스테르 F1로 전환시킨다. F1에서 Boc기를 제거하여 아민-에스테르 F2를 생성하고, 이것을 커플링 시약의 존재하에 R₁ 카르복실산과 반응시키면 F3이 생성된다 (여기서, R₁은 R₄C(O)-임). F3을 니트릴 옥시드 1f와 반응시키고 상응하는 메틸 에스테르 E3을 가수분해한 후에 스피로이속사졸린산 E4가 생성된다. E4를 방법 5A에서 기재한 바와 같이 하여 E7로 전환시킨다.

실시예 17: 화합물 267

THF (100 mL) 중 4-히드록시-3,5-디메틸벤즈알데히드 (2.5 g, 16.6 mmol)를 KOH (1 N 수용액, 1.5 당량, 25 mL) 및 2-요오도프로판 (2.0 당량)으로 처리하고, 5일 동안 환류 가열하였다. 이어서, 상기 반응물을 냉각시키고, 분별 깔때기로 옮겨 MTBE로 희석하고, H₂O, 1 N NaOH (2회), 0.5 N HCl (수성) 및 염수로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켰다. 상기 생성물을 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 4-이소프로폭시-3,5-디메틸벤즈알데히드 1.99 g (10.34 mmol)을 무색의 액체로서 수득하였다.

EtOH (60 mL) 중 4-(이소프로폭시)-3,5-디메틸벤즈알데히드 (1.98 g, 10.3 mmol)를 히드록실아민 히드로클로라이드 (2.4 M 수용액, 5.2 mL, 1.2 당량) 및 Na₂CO₃ (1.2 M 용액, 5.2 mL, 0.6 당량)와 함께 실온에서 2시간 동안 60℃로 가열하였다. 상기 반응물을 분별 깔때기로 옮겨 EtOAc로 희석하고, 유기 층을 분리하여 염수로 세척하고 건조 (MgSO₄)시켜 여과하고 농축시켜 4-(이소프로폭시)-3,5-디메틸벤즈알데히드 옥심 710 mg (3.24 mmol)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.

DMF (3 mL) 중 4-(이소프로폭시)-3,5-디메틸벤즈알데히드 옥심 (166 mg, 0.801 mmol)을 NCS (130 mg, 0.974 mmol)와 함께 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 반응물에 DMF (1.5 mL) 및 트리에틸아민 (1.2 당량) 중 메틸 에스테르 (257 mg, 0.679 mmol)를 첨가하였다. 이것을 밤새 실온에서 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 EtOAc/헥산 (4:1)으로 희석하고, 1 N HCl (수성)로 세척하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 EtOAc/헥산 (4:1)으로 역추출하였다. 유기 층들을 합하고, 염수로 세척하고 건조 (MgSO₄)시켜 농축시켰다. 상기 화합물을 EtOAc/헥산을 용출액으로서 사용한 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 17A 173 mg (0.296 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (M + 1) = 584.3.

화합물 17A (173 mg, 0.30 mmol)를 THF/MeOH/H₂O (4:1:1, 3 mL) 중 LiOH·H₂O (1.1 당량)와 함께 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 반응물을 EtOAc로 희석하여 1 N HCl (수성)로 산성화하고, 층들을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc로 역추출하고, 유기 층들을 합하여 염수로 세척하여 건조 (MgSO₄)시키고 농축시켜 화합물 17B 171 mg (0.30 mmol)을 백색 고체로서 수득하였다. FIA MS (M + 1) = 570.3.

카르복실산 17B (83 mg, 0.146 mmol), EDCl·HCl (37 mg, 1.3 당량), HOBt (26 mg, 1.3 당량), (3S)-3-아미노-N-시클로프로필-2-히드록시헥산아미드 히드로클로라이드 (64 mg, 2.0 당량) 및 DIEA (0.100 mL, 4.0 당량)를 DMF (0.9 mL) 중에서 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하여 1 N HCl (수성) (2회)로 세척하였다. 수성 층을 분리하고, EtOAc로 역추출하였다. 유기 층들을 합하고, 염수로 세척하고 건조 (MgSO₄)시켜 농축시켰다. 상기 생성물을 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 17C를 85 mg (0.115 mmol) 수득하였다. LCMS (M + 1) = 738.3

CH₂Cl₂ (1.0 mL) 중 화합물 17C (85 mg, 0.115 mmol)를 데스-마르틴 페리오디난 (54 mg, 1.1 당량)으로 30분 동안 처리하였다. 상기 반응물을 동일 부피 (약 1 mL)의 포화 수성 NaHCO₃ 및 1 N Na₂S₂O₃ (수성)으로 켄칭시켰다. 유기 층을 분리하고, ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 바로 정제하여 화합물 267을 77 mg (0.105 mmol) 수득하였다. FIA MS (M + 1) = 736.2.

실시예 18: 화합물 556

4-에톡시벤즈알데히드 옥심 (204 mg, 1.24 mmol)을 DMF 중에 용해 (0.2 M이 되도록 함)하고 NCS (1 당량)로 처리하였다. 상기 반응물을 출발 물질이 소모될 때까지 교반하였다. 반응물 부피의 절반을 제거하고, NCS (1.5 당량)를 더 처리하고 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 용액에 DMF (0.3 mL) 및 트리에틸아민 (0.10 mL, 1.1 당량) 중 메틸 에스테르 (200 mg, 0.85 당량)를 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 실온에서 교반한 후에 EtOAc로 희석하고, 1 N HCl (수성)로 세척하고 염수로 세척하였다. 수성 층을 EtOAc로 역추출하고, 합한 유기 층들을 염수로 세척하고 건조 (MgSO₄)시켜 짙은 색상의 오일로 농축시켰다. 상기 생성물을 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 18A를 97 mg (0.168 mmol) 수득하였다. LCMS (M + 1) = 576.3.

화합물 18A (97 mg, 0.168 mmol)를 THF/MeOH/H₂O (8:1:1, 5 mL) 중에 용해하고, LiOH·H₂O (1.1 당량)로 실온에서 밤새 처리하였다. 상기 반응물을 농축시켜 EtOAc 및 메탄올 중에 희석하고, 1 N HCl (수성)로 세척하였다. 수성 층을 분리하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층들을 염수로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 화합물 18B를 76 mg (0.135 mmol) 수득하였다. FIA MS (M - 1) = 560.4.

화합물 18B (35 mg, 0.062 mmol), EDC·HCl (15 mg, 1.3 당량), HOBt (12 mg, 1.3 당량), 아미노 알콜 히드로클로라이드 (55 mg, 2.0 당량) 및 DIEA (0.044 mL, 4.0 당량)를 DMF (0.7 mL) 중에서 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 EtOAc로 희석하고 1 N HCl (수성) (2회)로 세척하였다. 수성 층을 분리하고, EtOAc로 역추출하였다. 유기 층들을 합하고, 염수로 세척하고 건조 (MgSO₄)시켜 농축시켰다. 상기 생성물을 ISCO 콤비플래시에서의 실리카 겔로 정제하여 화합물 18C를 28 mg (0.038 mmol) 수득하였다. LCMS (M + 1) = 730.2.

CH₂Cl₂ (0.7 mL) 중 화합물 18C (28 mg, 0.038 mmol)를 데스-마르틴 페리오디난 (18 mg, 1.1 당량)으로 30분 동안 처리하였다. 상기 반응물을 동일 부피 (약 1 mL)의 포화 수성 NaHCO₃ 및 1 N Na₂S₂O₃ (수성)으로 켄칭시켰다. 유기 층을 분리하고, ISCO 옵틱스(Optix) 1Ox에서의 실리카 겔로 바로 정제하여 화합물 556을 24 mg (0.033 mmol) 수득하였다. FIA MS (M + 1) = 728.2.

하기 표 7은 방법 6으로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물을 기재한다:

화학식 I의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 7로 제조할 수 있다.

방법 7 :

방법 7에서, Cbz 히드록시산 G1을 메틸 에스테르 G2로 전환하고 탈보호하여 아미노-에스테르 G3을 생성한다. G3을 커플링 시약의 존재하에 스피로이속사졸린산 G4와 반응시키면 중간체 G5가 생성된다. G5의 메틸 에스테르를 가수분해하면 히드록시산 G6이 생성되고, 이것을 예를 들어 데스-마르틴 페리오디난으로 산화시키면 케토산 G7이 생성된다. G7을 커플링 시약의 존재하에 아민 R₁₃R₁₀NH와 반응시키면 최종 생성물 G8이 생성된다.

실시예 19: 화합물 275

단계 1: 화합물 Q의 제조

산 19A 1.00 g을 메탄올 14 mL 중에 용해하고 환류 가열하였다. 진한 H₂SO₄를 2 방울 첨가하고, 상기 반응물을 밤새 환류시켰다. 상기 혼합물을 실온으로 냉각시켜 NaHCO₃ (포화 수성) 50 mL로 중화시켰다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 50 mL로 3회 추출하였다. 합한 유기 추출물들을 황산마그네슘에서 건조시키고 증발시켜 화합물 19B 1.01 g을 백색 분말로서 수득하였다.

CBz-보호된 메틸 에스테르 19B 1.00 g을 메탄올 11 mL 중에 용해하였다. Pd(OH)₂ (탄소상 20 wt％) 150 mg을 첨가하고, 상기 혼합물을 1 atm의 수소 기체로 세정하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 메탄올성 용액을 셀라이트^® 플러그를 통해 여과하고, 필터 패드를 추가의 메탄올로 헹구었다. 증발 후에 밝은 황색 오일이 수집되었고, 이것을 DCM 5 mL 중에 재용해하고 디옥산 중 4 M HCl 용액 1.5 mL로 처리하였다. 상기 반응물을 1분 동안 교반한 후에 증발시켰다. 화합물 19C 0.65 g을 백색 분말로 수집하였고, LCMS로 특징규명하였다 (M + 1 = 162.0).

화합물 19D의 스피로이속사졸린산 0.80 g을 HOBt 0.33 g, HBTU 0.81 g 및 DMF 15 mL와 함께 교반하였다. 상기 용액을 교반하면서 여기에 DIPEA 807 ㎕를 첨가하여 10분 동안 교반하였다. 히드로클로라이드 염 19C를 0.33 g 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 EtOAc 200 mL를 첨가하고, 상기 혼합물을 NaHCO₃ (포화 수성) 100 mL로 2회 세척한 후에 염수 100 mL로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄에서 건조시키고 증발시켰다. 조 반응 혼합물을 실리카 겔 컬럼 (40 g 컬럼, 구배 용출, 40％→55％ EtOAc:헥산)을 통해 용출시켜 정제하여 화합물 19E 1.02 g을 백색 분말로서 수득하였고, 이것을 LCMS로 확인하였다 (M + 1 = 661.3).

메틸 에스테르 19E 1.04 g을 THF 6 mL 중에서 교반하고, 이 용액에 1 M LiOH (수성) 3 mL를 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였고, 이때 HPLC에 의해 완료된 것으로 결정되었다. 상기 반응물을 1 M HCl 6 mL로 처리하여 에틸 아세테이트 15 mL로 3회 추출하였다. 합한 추출물들을 증발시켜 화합물 Q 1.00 g을 베이지색 고체로서 수득하였고, 이것을 다음 단계에 사용하였다.

단계 2: 화합물 R의 제조

CH₂Cl₂ (15 mL) 중 화합물 Q (0.300 g, 0.46 mmol)의 용액에 CH₂Cl₂ 중 데스-마르틴 페리오디난의 0.16 M 용액 5.58 mL를 적가하였다. 이것을 4시간 동안 실온에서 교반한 후에 1 M Na₂S₂O₃ 용액 10 mL를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 30분 동안 주위 온도에서 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 물로 세척하여 Na₂SO₄에서 건조시키고 여과하여 농축시켰다. 조 혼합물을 CH₂Cl₂ 중에 재용해하고, 헥산으로 침전시키고 여과하여 화합물 R을 230 mg 수득하였다. LC/MS: m/z 645.7 (M + H)⁺, 1.99분 (10％→99％ CH₃CN (0.035％ TFA)/H₂O (0.05％ TFA)).

단계 3: 화합물 275의 제조

무수 아세토니트릴 중 화합물 R (20 mg, 0.031 mmol)의 현탁액에 피리딘 (10 ㎕, 0.124 mmol), 2-클로로-1-메틸-피리디늄 요오다이드 (15.3 mg, 0.06 mmol) 및 HOBt (6.8 mg, 0.05 mmol)를 첨가한 후에 무수 아세토니트릴 중 이소프로필아민 (3.7 mg, 0.062 mmol)의 50 ㎕ 용액을 첨가하였다. 상기 반응물이 실온에서 교반되고 2시간 후에 완료되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 1 mL로 켄칭시켜 층들을 분리하고, 수성 층을 CH₂Cl₂로 3회 추출하였다. 합한 유기물들을 Na₂SO₄에서 건조시켜 여과하고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂ 1.5 mL 중에 용해하고, 정상(normal phase) HPLC (10％→99％ EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 275를 수득하였다. LC/MS: m/z 686.7 (M + H)⁺, 2.01분 (10％→99％ CH₃CN (0.035％ TFA)/H₂O (0.05％ TFA)).

실시예 20: 화합물 181

무수 1,4-디옥산 중 R (20 mg, 0.031 mmol)의 현탁액에 피리딘 (7.6 ㎕, 0.093 mmol)을 첨가한 후에 펜타플루오로페닐 트리플루오로아세테이트 (8.8 ㎕, 0.05 mmol)를 첨가하고, 1.5시간 동안 실온에서 교반되도록 한 후에 여기에 7-아미노-4-메틸-1H-퀴놀린-2-온 (14 mg, 0.08 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물이 실온에서 교반되고 1시간 후에 완료되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 1 mL로 켄칭시켜 층들을 분리하고, 수성 층을 CH₂Cl₂로 3회 추출하였다. 합한 유기물들을 Na₂SO₄에서 건조시켜 여과하고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂ 1.5 mL 중에 용해하고, 정상 HPLC (10％→99％ EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 181을 수득하였다. LC/MS: m/z 801.7 (M + H)⁺, 2.06분 (10％→99％ CH₃CN (0.035％ TFA)/H₂O (0.05％ TFA)).

실시예 21: 화합물 605

(3S)-3-((5S,8S)-3-(3-클로로페닐)-7-((S)-2-(2-시클로헥실아세트아미도)-3,3-디메틸부타노일)-1-옥사-2,7-디아자스피로[4.4]논-2-엔카르복스아미도)-2-히드록시헥산산 (0.02 g, 0.03 mmol), (3,5-디메톡시페닐)메탄아민 (5.68 mg, 0.033 mmol), HOBt (6.8 mg, 0.05 mmol), DIPEA (22 ㎕, 0.124 mmol) 및 CH₂Cl₂ (70 ㎕)의 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 이어서, 상기 혼합물에 아세토니트릴 200 ㎕ 중 무까이야마(Mukaiyama's) 시약 (2-클로로-1-[4-(1H,1H,2H,2H-퍼플루오로-9-메틸데실)벤질]피리디늄 헥사플루오로포스페이트)의 용액을 첨가하고, 상기 반응물을 실온에서 교반하였다. 5시간 후에 CH₂Cl₂ 중 0.3 M 데스-마르틴 페리오디난 1.34 mL를 첨가하고, 상기 혼합물을 교반하였다. 2시간 후, 상기 산화제를 포화 NaHCO₃ 1.0 mL 및 1 N Na₂S₂O₃ 1 mL로 켄칭시키고 격렬하게 교반하였다. 유기 층을 분리하고, Na₂SO₄에서 건조시켜 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂ 1.5 mL 중에 용해하고, 정상 HPLC (10％→99％ 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 화합물 605, (5S,8S)-3-(3-클로로페닐)-7-((S)-2-(2-시클로헥실아세트아미도)-3,3-디메틸부타노일)-N-((S)-1-(3,5-디메톡시벤질아미노)-1,2-디옥소헥산-3-일)-1-옥사-2,7-디아자스피로[4.4]논-2-엔-8-카르복스아미드를 수득하였다. LC/MS: m/z 794.7 (M + H)⁺, 4.11분 (10％→99％ CH₃CN (0.035％ TFA)/H₂O (0.05％ TFA)).

하기 표 8은 방법 7로 화학식 I의 추가의 화합물을 제조하는데 사용된 시약을 기재한다:

방법 7로 화학식 I의 추가의 화합물을 제조하는데 사용된 시약

화합물 번호	R 2Z R 2W NH
2	tert-부틸아민
6	2-아미노인단
17	벤조[d]티아졸-2-아민
49	3-((테트라히드로푸란-3-일)메톡시)아제티딘
58	(R)-(+)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민
69	6-메톡시트립트아민
73	4-1H-피라졸-1-일-벤질아민
77	벤질아민
79	아제티딘
84	2,5-디메톡시아닐린
91	(4-(4-메톡시페닐)테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민
96	3-시아노-4-메틸아닐린
99	시클로헥실아민
113	N,N-디에틸아민
120	페닐-2-피리딘메틸아민
127	3',5'-디메톡시벤질아민
133	3-에톡시아제티딘
138	1-(3-(2-아미노프로필)-1H-인돌-5-일)에타논
140	에틸아민
141	2,3-디히드로-1,4-벤조디옥신-2-일메틸아민
143	이소부틸아민
148	N-(3-아미노페닐)메탄술폰아미드
176	(2-페닐-1,3-티아졸-4-일)메틸아민
181	7-아미노-4-메틸퀴놀린-2(1H)-온
182	N-메틸에틸아민
186	(3R)-(+)-3-아세트아미도피롤리딘
206	베타-알라닌-4-메톡시-베타나프틸아미드
221	N-에틸-3,4-메틸렌디옥시암페타민
238	(R)-3-((테트라히드로푸란-2-일)메톡시)아제티딘
253	디메틸아민
255	(S)-(-)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민
265	시클로프로필메틸아민
275	이소프로필아민
277	(S)-(+)-테트라히드로푸르푸릴아민
293	3-아미노이속사졸
296	(S)-알파-메틸벤질아민
298	3-피라졸-1-일-벤질아민
300	1-(에틸)프로필아민
302	5-메톡시트립트아민
347	(R)-(-)-2-(메톡시메틸)피롤리딘
350	N-메틸-N-프로필아민

화합물 번호	R 2Z R 2W NH
355	3-아미노벤즈아미드
368	3-(테트라히드로푸란-3-일옥시)아제티딘
372	시클로펜틸아민
399	1-아미노시클로프로판-1-카르복실산 메틸 에스테르
401	시클로부틸아민
404	2-메톡시에틸아민
408	3-(아미노에틸)피리딘
410	모르폴린
426	3-히드록시-3-메틸아제티딘
429	1-페닐시클로프로필아민
433	[3-(4-클로로페닐)-5-이속사졸릴]메탄아민
441	푸르푸릴아민
447	2-(3-피리딜)에틸아민
452	(R)-2-부틸아민
458	3-(2-아미노에틸)인돌린-2-온
461	4-(아미노메틸)피리딘
479	2-플루오로에틸아민
488	2-메톡시페녹시에틸아민
493	메틸아민
496	피롤리딘
507	(S)-2-아미노-1,1-디페닐-1-프로판올
508	(S)-(+)-2-(메톡시메틸)피롤리딘
521	3,3-디플루오로-아제티딘
537	프로필아민
540	2-(3-메톡시페닐)에틸아민
546	(R)-알파-메틸벤질아민
565
567	2-아미노메틸 벤즈아미다졸
568	피페콜린
573	3,4-디플루오로아닐린
588	3-시아노아닐린

표 8에 기재된 시판되지 않는 아제티딘의 제조

N-벤즈히드릴-3-메탄술포닐아제티딘 (104 mg)을 에탄올 (1.0 mL)과 합하고, 밀폐된 바이알 중에 95℃에서 밤새 가열하였다. 상기 반응을 TLC (30％ EtOAc:헥산)로 모니터링하였다. 포화 탄산칼륨 용액 1 mL를 첨가하고 에틸 아세테이트 0.5 mL로 2회 추출하여 후처리를 실시하였다. 합한 유기 추출물들을 실리카 (4 g 컬럼, 구배 용출, 0％→30％ EtOAc:헥산)에서 정제하였다. N-벤즈히드릴-3-에톡시아제티딘 49 mg을 투명한 무색의 오일로서 수득하였다. LCMS (M + 1 = 268.2).

N-벤즈히드릴-3-에톡시아제티딘 (49 mg)을 메탄올 1 mL 중에 용해하였다. 10％ Pd/C (데구사(Degussa)형) 22 mg을 첨가하고, 상기 반응을 수소 대기하에 수행하였다. 상기 반응물을 실온에서 64시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 셀라이트^®를 통해 여과하고, 메탄올로 철저하게 세척하고 증발시켜 황색 오일을 수득하였다 (30 mg). 상기 오일은 디페닐메탄 및 유리 아제티딘의 혼합물로 구성되어 있었다. 조 오일 혼합물을 이후의 변환에서 과량으로 사용하였다.

하기하는 아제티딘은 상응하는 알콜을 사용하여 상기한 것과 유사한 방식으로 제조하였다:

아제티딘

은 프리골라 제이.(Frigola, J.) 등이 문헌 [J. Med. Chem., 36 (1993), 801-810]에 기재한 방법으로 제조하였다.

화학식 I의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 8로 제조할 수 있다.

방법 8 :

방법 8에서, 스피로이속사졸린산 E4를 커플링 시약의 존재하에 아미노 에스테르 H1과 반응시켜 중간체 H2를 생성한다. H2를 거대고리화하면 화합물 H3이 생성된다. 에스테르 H2를 가수분해하여 산 H4를 생성한다. 산 H4를 커플링 시약의 존재하에 술폰아미드 또는 술파미드와 반응시켜 생성물 H5를 생성한다.

실시예 22: 화합물 409

미국 매사추세츠주에 소재하는 알에스피 아미노 애시드(RSp Amino Acid)로부터 구입한 (S)-2-(tert-부톡시카르보닐아미노)논-8-엔산 (179 mg, 1.0 당량)을 DMF 중에서 HBTU (376 mg, 1.5 당량), HOBt (94 mg, 1.05 당량) 및 DIEA (345 ㎕, 3.0 당량)와 함께 15분 동안 교반하였다. 화합물 22A (194 mg, 1.0 당량)를 첨가하고 밤새 교반하였다. 상기 용액에 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 상기 용액을 1 N HCl (3회)로 세척한 후에 염수로 세척하여 황산나트륨에서 건조시키고 여과하여 농축시키고, 실리카 크로마토그래피 (10％→30％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 22B를 수득하였다 (253 mg). (M + H = 548.2).

화합물 22B (253 mg, 1.0 당량)를 THF (1 mL) 및 메탄올 (0.5 mL) 중에서 교반하였다. 상기 용액에 물 (0.5 mL) 중 수산화리튬 (97 mg, 5.0 당량)을 첨가하고, 2시간 더 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하여 1 N HCl로 세척한 후에 염수로 세척하고, 상기 용액을 MgSO₄에서 건조시켜 여과하고 농축시켜 화합물 22C (235 mg)를 순수한 백색 고체로서 수득하였다. (M + H = 534.2).

화합물 22C (247 mg, 1.0 당량)를 아세토니트릴 1 mL 중에서 교반하였다. 상기 용액에 TBTU (297 mg, 2.0 당량) 및 DIEA (241 ㎕, 3.0 당량)를 첨가한 후에 (1R,2S)-메틸-1-아미노-2-비닐시클로프로판카르복실레이트 (86 mg, 1.2 당량)를 첨가하고 밤새 교반하였다. 상기 용액을 에틸 아세테이트로 희석하여 1 N HCl로 세척한 후에 염수로 세척하고, 황산나트륨에서 건조시키고 여과하여 농축시키고, 실리카 크로마토그래피 (10％→70％ 에틸 아세테이트/헥산 구배)로 정제하여 화합물 22D를 수득하였다 (230 mg). (M + H = 657.2).

화합물 22D (230 mg, 1.0 당량)를 CH₂Cl₂ 70 mL 중에서 호베이다-그룹스(Hoveyda-Grubbs) 촉매 (22 mg, 0.1 당량)와 함께 환류하에 1시간 동안 교반하고, 상기 용액을 실온으로 냉각시켜 실리카 크로마토그래피 (10％→70％ 에틸 아세테이트/헥산)로 정제하여 화합물 22E를 수득하였다 (172 mg).

화합물 22E (172 mg, 1.0 당량)를 THF (1 mL) 및 메탄올 (0.5 mL) 중에서 교반하였다. 상기 용액에 물 0.5 mL 중 LiOH (46 mg, 4.0 당량)를 첨가하고, 상기 용액을 2시간 더 교반하였다. 다시 상기 용액에 에틸 아세테이트를 첨가하고, 1 N HCl 및 염수로 세척하고 황산마그네슘에서 건조시켜 여과하고 농축시켜 화합물 22F (155 mg)를 순수한 백색 고체로서 수득하였다. (M + H = 617.1).

화합물 22F (155 mg, 1.0 당량)를 DMF 1 mL 중에서 카르보닐디이미다졸 (49 mg, 1.2 당량)과 함께 80℃에서 15분 동안 교반하였다. 상기 용액에 시클로프로판술폰아미드 (49 mg, 1.6 당량)를 첨가한 후에 DBU (36 ㎕, 1.0 당량)를 첨가하고, 10분 더 80℃에서 교반하였다. 이어서, 상기 용액에 에틸 아세테이트를 첨가하고, 상기 용액을 1 N HCl 및 염수로 세척하여 MgSO₄에서 건조시키고 여과하여 농축시켰다. 상기 생성물을 실리카 크로마토그래피 (100％ DCM→5％ 메탄올/DCM 구배)로 정제하여 화합물 409를 수득하였다 (64 mg, 35％). (M + H = 718.1).

하기 표 9는 방법 8로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물을 기재한다:

방법 8로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물

화합물 번호	W에 대한 출발 물질	R 3 에 대한 출발 물질
1	OH	7-클로로-2,3-디히드로벤조[b]푸란-5- 카르복스알독심
137	OH	3-클로로벤즈알독심
163	시클로프로판 술폰아미드	페닐글리옥실로히드록스아밀 클로라이드
232	시클로프로판 술폰아미드	3-클로로벤즈알독심
320	OH	페닐글리옥실로히드록스아밀 클로라이드
386	시클로프로판 술폰아미드	7-클로로-2,3-디히드로벤조[b]푸란-5- 카르복스알독심
409	시클로프로판 술폰아미드	3-클로로벤즈알독심
470	OH	3-클로로벤즈알독심

화학식 I의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 9로 제조할 수 있다.

방법 9 :

방법 9에서, 보호된 스피로이속사졸린 B3 (방법 2로 제조함)을 수지-결합된 이미노-아민 D1과 반응시켜 중간체 11를 생성한다. 11을 탈보호하여 아민 12를 생성하고, 이것을 커플링 시약의 존재하에 R₁ 카르복실산과 반응시키면 13이 생성된다 (여기서, R₁은 R₄C(O)-임). 13을 가수분해하여 최종 화합물 A10을 생성한다.

당업자는 공지의 합성 방법과 함께 본원에 기재한 실시예 및 방법을 이용하여 상기 예시한 방법 9에 따라 화학식 I의 화합물을 합성할 수 있다.

하기 표 10은 방법 9로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물을 기재한다:

방법 9로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물

화합물 번호 P ¹

46 5-브로모인돌-2-카르복실산

54 아세틸-D-에티오닌

60 2-(R)-[[(4-메틸페닐)술포닐]아미노]-2-페닐아세트산

65 2-옥소-1-페닐피롤리딘-3-카르복실산

88 아세틸-D-메틸티로신-OH

98 N-아세틸-L-루이신

100 2-[[(4-플루오로페닐)술포닐]아미노]-3-메틸부탄산

157 5,6-디메톡시인돌-2-카르복실산

218 Pyr-Val-OH

227 1-카르바모일시클로프로판카르복실산

246 5-(2,4-디메틸페닐아미노)-5-옥소펜탄산

248 4-클로로-2-(6-메톡시피리딘-3-일아미노)벤조산

309 3-[[(4-아세트아미도페닐)술포닐]아미노]-3-프로판산

328 3-(3,4-디히드로이소퀴놀린-2(1H)-일술포닐)벤조산

332 (S)-2-아세트아미도-3-(4-이소프로폭시페닐)프로판산

376 3-(2-옥소벤조[d]옥사졸-3(2H)-일)프로판산

380 4-트리플루오로메톡시페닐아세트산

395 2-[[(4-메톡시페닐)술포닐]아미노]-3-메틸부탄산

397 2-((S)-2-옥소-4-페닐옥사졸리딘-3-일)아세트산

412 아세틸-D-티로신-OH

416 2-(R)-[[(4-클로로페닐)술포닐]아미노]-3-메틸펜탄산

420 3-(2-디에틸아미노)-2-옥소에틸)-1H-인돌-2-카르복실산

421 트랜스-2-페닐-1-시클로프로판카르복실산

466 2-[[(4-플루오로페닐)술포닐]아미노]-2-페닐아세트산

476 2-(S)-[[(4-메틸페닐)술포닐]아미노]-2-페닐아세트산

483 3-(N-페닐페닐술폰아미도)프로판산

489 2-(R)-[[(4-메톡시페닐)술포닐]아미노]-3-메틸부탄산

501 2-[(페닐술포닐)아미노]-2-페닐아세트산

534 2-(R)-[[(4-메톡시페닐)술포닐]아미노]-3-메틸펜탄산

574 2-(1-옥소이소인돌린-2-일)프로판산

586 6-(2,5-디메톡시페닐)-2-옥소-1,2,3,6-테트라히드로피리미딘

-4-카르복실산

587 2-(R)-[[(4-메톡시페닐)술포닐)아미노]-4-메틸펜탄산

화학식 I의 특정 다른 화합물들은 하기 예시하는 바와 같이 방법 10으로 제조할 수 있다.

방법 10 :

방법 10에서, 보호된 스피로이속사졸린 B3 (예를 들어, R₁은 Fmoc임)을 M10A (R"는 예를 들어 메틸일 수도 있고, 또는 PS-왕 수지에 고정시킬 수도 있음)와 반응시켜 중간체 M10B를 생성한다. M10B를 가수분해하여 카르복실산 M10C가 생성되었고, 이후에 이것을 적절한 술폰아미드와 커플링시켜 최종 화합물 M10D를 생성한다. M10C가 화학식 I의 최종 화합물일 수도 있다.

유사하게, 당업자는 공지의 합성 방법과 함께 본원에 기재한 실시예 및 방법을 이용하여 상기 예시한 방법 10에 따라 화학식 I의 화합물을 합성할 수 있다.

하기 표 11은 방법 10으로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물을 기재한다:

방법 10으로 제조된 화학식 I의 추가의 화합물

화합물 번호	W 출발 물질	P 1 출발 물질	C 1 출발 물질	R 3 출발 물질
35	시클로프로판 술폰아미드	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	NA	3-클로로벤즈알독심
45	시클로프로판 술폰아미드	N-((S)-테트라 히드로푸란 -3-일옥시)카르보닐) -L-tert-부틸글리신	NA	3-클로로벤즈알독심
57	시클로프로판 술폰아미드	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	NA	7-클로로-2,3- 디히드로벤조[b]푸란 -5-카르복스알독심
115		N-Boc-L-tert- 부틸글리신	2-시클로 헥실아세트산	3-클로로벤즈알독심
130	시클로프로판 술폰아미드	N-Alloc-L-tert- 부틸글리신	NA	3-클로로벤즈알독심
144	OH	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	2-시클로 헥실아세트산	3-클로로벤즈알독심
162	시클로프로판 술폰아미드	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	2-시클로 헥실아세트산	3-클로로벤즈알독심
190	시클로프로판 술폰아미드	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	시클로펜틸 2,5- 디옥소피롤리딘- 1-일 카르보네이트	3-클로로벤즈알독심
269	OH	N-((S)-테트라 히드로푸란 -3-일옥시)카르보닐) -L-tert-부틸글리신	NA	3-클로로벤즈알독심
272	OH	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	시클로펜틸 2,5- 디옥소피롤리딘-1- 일 카르보네이트	니트로프로판
359	시클로프로판 술폰아미드	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	2-(테트라히드로- 2H-피란-4-일) 아세트산	3-클로로벤즈알독심

화합물 번호	W 출발 물질	P 1 출발 물질	C 1 출발 물질	R 3 출발 물질
384	OH	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	2-(테트라히드로- 2H-피란-4-일) 아세트산	3-클로로벤즈알독심
438	시클로프로판 술폰아미드	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	시클로펜틸 2,5- 디옥소피롤리딘- 1-일 카르보네이트	니트로프로판
439	OH	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	NA	3-클로로벤즈알독심
443	OH	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	시클로펜틸 2,5- 디옥소피롤리딘- 1-일 카르보네이트	3-클로로벤즈알독심
457	OH	N-Boc-L-tert- 부틸글리신	tert-부틸이소시아네이트	3-클로로벤즈알독심
460	OH	N-Alloc-L-tert- 부틸글리신	NA	3-클로로벤즈알독심

본 발명의 추가의 화합물은 방법 11의 반응식에 예시한 바와 같이 하여 제조할 수 있다.

방법 11 :

방법 11에서, 메틸렌 화합물 M11A를 온화한 염기, 예를 들어 중탄산나트륨의 존재하에 1,1-디브로모포름알독심과 반응시켜 브로모스피로이속사졸린 M11B를 생성한다. M11B를 아민 R^XR^YNH 또는 아릴알콜 R^XOH와 반응시키면 중간체 M11C (여기서, R₃은 임의로 치환된 아미노 또는 임의로 치환된 아릴옥시임)가 생성된다. M11C를 탈보호하여 상응하는 산을 생성한 후에 앞서 기재한 절차에 따라 적절한 아미노 화합물과 반응시키면 본 발명의 화합물이 생성된다.

실시예 23: R ₃ 이 아미노 또는 아릴옥시인 화합물을 위한 중간체의 제조

단계 1:

화합물 M11D (6.96 g, 1.0 당량)를 에틸 아세테이트 85 mL 중에서 교반하였다. 중탄산나트륨 (6.30 g, 4.4 당량)을 첨가한 후에 디브로모포름알독심 (4.11 g, 1.2 당량)을 첨가하고, 상기 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 물 (85 mL)을 첨가하고, 상기 혼합물을 투명해질 때까지 교반하였다. 상들을 분리하고, 수성 상을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기 상들을 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 농축시켰다. 에틸 아세테이트/헥산 구배를 사용한 실리카 컬럼에서의 크로마토그래피로 화합물 M11E 5.55 g 및 그의 부분입체이성질체 0.93 g (6:1 비율)을 수득하였다.

화합물 M11F (100 mg, 1.0 당량)를 이소인돌린 270 ㎕ 중에 95℃에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하여 1 N HCl로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 농축시켰다. 에틸 아세테이트/헥산을 사용한 실리카에서의 크로마토그래피로 화합물 M11G를 83 mg 수득하였다.

페놀 (20 mg, 1.1 당량)을 DMF 350 ㎕ 중에서 교반하였다. 수소화나트륨 (8.3 mg, 1.1 당량, 60％)을 첨가하고, 상기 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 화합물 M11F를 첨가하고, 상기 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 1 N HCl와 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기 상을 황산나트륨에서 건조시켜 여과하고 농축시켜 화합물 M11H를 70 mg 수득하였다.

추가의 실시예

실시예 23: 화합물 610

옥심 23A (6.29 g, 40.4 mmol)를 DMF (63 mL) 중에 용해하고, 상기 용액을 교반하면서 N-클로로숙신이미드 (5.39 g, 40.4 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 3시간 동안 실온에서 계속 교반하였고, 이때 전환율이 56％인 것으로 결정 (HPLC로 결정함)되었다. 70℃에서 45분 동안 부드럽게 가열하여 반응이 완료되도록 하였다. 4-메틸렌프롤린 유도체 (8.81 g, 31.1 mmol)를 첨가하고, DMF (5 mL)를 사용하여 상기 용액을 헹구었다. 트리에틸아민 (5.7 mL)을 30분에 걸쳐 조심스럽게 적가하였다. 이어서, 상기 반응물을 실온에서 16시간 동안 밤새 교반하였다. 분취액을 HPLC로 분석하였고, 이것은 4:1 비율의 고리화첨가 부분입체이성질체들을 함유하는 것으로 결정되었다. 에틸 아세테이트 (200 mL)를 첨가하고, 유기 상을 물 (3회, 200 mL씩) 및 염수 (200 mL)로 세척하였다. 이어서, 유기 상을 황산마그네슘에서 건조시키고 증발시켰다. 조 오일을 2개 부분으로 나누어, 각각을 330 g의 실리카 컬럼이 장착된 ISCO 콤비플래시 (10％→20％ EtOAc:석유 에테르, 72분)로 정제하였다. 원하는 생성물은 소량의 이성질체보다 먼저 컬럼에서 용출된 주요 이성질체였고, 23B 9.42 g을 오렌지색 오일로서 수득하였다. 소량의 이성질체도 단리하고 EtOAc:헥산으로부터 재결정화하여 회백색 결정질 분말로서 수득하였다 (1.53 g).

화합물 23B (9.42 g)를 트리플루오로아세트산 (12 mL) 중에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 메탄올 (50 mL)로 대체하였다. 상기 용액을 환류 가열하고, H₂SO₄ (3.0 mL)를 적가하였다. 상기 반응물을 총 6시간 동안 환류시켰고, 이때 HPLC에서 메틸에스테르로의 전환율이 95％를 초과하는 것으로 결정되었다. 상기 반응물을 냉각시키고 증발시켜 잉여 메탄올을 제거하였다. 생성된 오일을 CH₂Cl₂ (200 mL) 중에 재용해하고, 포화 중탄산나트륨 (200 mL)으로 중화시켰다. 유기 상을 수집하고, 수성 상을 CH₂Cl₂ (2회, 100 mL씩)로 추출하였다. 유기 추출물들을 합하고, 황산마그네슘에서 건조시키고 증발시켜 화합물 23C 5.09 g을 오일로서 수득하였고, 이것을 다음 단계에 바로 사용하였다.

아미노 에스테르 23C (1.25 g, 4.24 mmol)를 THF/H₂O (3:1, 10 mL) 중 LiOH·H₂O (186 mg, 4.4 mmol)로 45분 동안 처리하였다. 용매를 진공하에 제거하여 고체를 수득하였다. 상기 고체를 아세톤 (20 mL) 및 포화 NaHCO₃ (수성) (20 mL) 중에 실온에서 슬러리화하였다. Fmoc-Cl (1.12 g, 4.33 mmol)을 첨가하고, 상기 반응을 HPLC로 모니터링하였다. 20분 후에, 상기 반응 플라스크의 내용물을 CH₂Cl₂로 분별 깔때기에 옮겨 2 N HCl (수성)로 산성화하였다. 수성 상을 CH₂Cl₂ (2회, 100 mL씩)로 추출하였다. 생성된 유화액을 여과하여 유기 층들을 합하고, MgSO₄에서 건조시키고 농축시켜 화합물 23D를 수득하였다.

화합물 XX4를 DMF 중 20％ 피페리딘의 용액 (20 mL) 중에서 60분 동안 진탕시켰다. 상기 수지를 DMF (3회) 및 CH₂Cl₂ (3회)로 세척하고 반복하였다. 이어서, 생성된 수지를 DMF (10 mL) 중 화합물 23D (437 mg, 0.87 mmol), HATU (392 mg, 1.03 mmol) 및 DIEA (0.300 mL, 1.72 mmol)와 함께 밤새 진탕시켰다. 이어서, 생성된 화합물 결합된 수지 23F를 DMF (3회) 및 CH₂Cl₂ (3회)로 세척하고 반복하였다. (M + 1) = 612.26.

화합물 결합된 수지 23F를 DMF 중 20％ 피페리딘 (8 mL) 중에서 2시간 동안 진탕시켰다. 이어서, 상기 수지를 DMF (3회) 및 CH₂Cl₂ (3회)로 세척하고 반복하였다. (M + 1) = 390.1. 이어서, 상기 수지를 (S)-2-(시클로펜틸옥시카르보닐아미노)-3,3-디메틸부탄산 (3 당량), HOBT (3 당량), HBTU (3 당량) 및 DIEA (6 당량)와 함께 밤새 DMF 중에서 진탕시켰다. 상기 수지를 DMF (3회) 및 CH₂Cl₂ (3회)로 세척하고 반복한 후에 100분 동안 TFA (5 mL) 중에서 진탕시켰다. 생성된 수지를 여과하여 여액을 농축시키고, 역상 크로마토그래피로 정제하여 화합물 443 9.4 mg을 백색 고체로서 수득하였다. (M + 1) = 615.6.

화합물 23G (6.6 mg, 0.011 mmol)를 DMF (0.5 mL) 중에서 CDI (2.8 mg, 0.017 mmol)와 함께 1시간 동안 80℃에서 교반하였다. 시클로프로필 술폰아미드 (3.8 mg, 0.031 mmol) 및 DBU (0.01 mL)를 첨가하여 가열을 중단하고, 상기 반응물을 밤새 실온에서 교반하였다. 상기 반응물을 역상 크로마토그래피로 정제하여 화합물 190을 2.8 mg (0.0039 mmol) 수득하였다. (M + 1) = 718.1.

실시예 24: 화합물 618

카르복실산 24A (69 mg, 0.13 mmol), HATU (50 mg, 0.13 mmol), 화합물 24B (0.13 mmol) 및 DIEA (0.045 mL, 0.26 mmol)를 아세토니트릴 (1.5 mL) 중에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기 반응물을 EtOAc 중에 희석하여 포화 NaHCO₃ (수성) 및 염수로 세척하여 건조 (MgSO₄)시키고 농축시켰다. 실리카 겔에서 정제하여 화합물 24C를 76 mg (0.12 mmol) 수득하였다. LCMS (M + 1) = 614.4.

메틸 에스테르 24C (76 mg, 0.12 mmol)를 THF/H₂O (5:1, 2 mL) 중에 용해하고 LiOH·H₂O (1.5 당량)와 함께 밤새 교반하였다. 반응물을 1 N HCl (수성)로 산성화하고 농축시켰다. 잔류물을 CH₂Cl₂/MeOH (93:7) 중에 용해하고, 실리카 겔 플러그를 통해 용출시켜 화합물 144를 75 mg (0.11 mmol) 수득하였다. LCMS (M + 1 = 627.4).

카르복실산 22D (18.5 mg, 0.029 mmol)를 DMF (1.5 mL) 중 CDI (6.0 mg)와 함께 80℃에서 10분 동안 교반하였다. 상기 반응물을 실온으로 냉각시키고, DBU (4 당량)를 함유하는 DMF (0.15 mL) 중 화합물 24E를 첨가하고, 상기 반응물을 80℃ 조에서 20분 동안 가열하였다. 상기 반응물을 역상 크로마토그래피로 바로 정제하여 화합물 115를 7.6 mg 수득하였다. LCMS (M + 1 = 745.2).

하기 표 12는 화학식 I의 예시적 화합물들의 몇가지 물리적 데이타를 기재한다.

LC/MS 데이타는 하기를 사용하여 획득하였다:

질량 분광계: PESciex API-150-EX 또는 워터스(Waters)/마이크로매쓰(Micromass) ZQ 또는 워터스/마이크로매쓰 콰트로(Quattro) II 또는 워터스/마이크로매쓰 ZMD; 펌프: 시마즈(Shimadzu) LC-8A 또는 아질런트(Agilent) 1100; 오토샘플러(Autosampler): 길슨 215 또는 길슨 819.

하기 방법을 이용하였다: 3.0 mL/분 유속, 10％→99％ CH₃CN (0.035％ TFA)/H₂O (0.05％ TFA) 구배, 페노메넥스 루나(Phenomenex Luna) 5m C18 컬럼 (50×4.60 mm); 1.5 mL/분 유속, 10％→90％ CH₃CN (0.2％ 포름산)/H₂O (0.2％ 포름산), 3분, YMC-팩(YMC-Pack) 프로(Pro)-C18 컬럼 (50×4.6 mm); 1.0 mL/분 유속, 10％→90％ CH₃CN (0.2％ 포름산)/H₂O (0.2％ 포름산), 5분, YMC-프로-C18 컬럼 (50×2.0 mm); 1.5 mL/분 유속, 10％→90％ CH₃CN (0.1％ TFA))/H₂O (0.1 TFA), 3분, YMC-팩 프로-C18 컬럼 (50×4.60 mm).

추가의 화합물, 이들의 몇가지 물리적 데이타 및 합성 방법을 하기 표 13에 기재한다.

V. 화합물의 억제 성질을 검출하고 측정하는 검정

A. HCV 효소 검정

1. HCV NS3 세린 프로테아제 도메인의 구축 및 발현

HCV NS3 프로테아제의 잔기 Ala¹-Ser¹⁸¹을 코딩하는 DNA 단편 (진뱅크(GenBank) CAB46913)을 HCV Con1 레플리콘(replicon) 플라스미드, I₃₇₇neo/NS3-3'/wt (본 연구에서는 pBR322-HCV-Neo라고 재명명함) [V. Lohmann et al., Science, 285, pp. 110-113 (1999)]로부터의 PCR로 수득하고 pBEV11 (에스. 챔버(S. Chamber) 등. 개인적으로 연락함)로 삽입하여 C-말단 헥사-히스티딘 태그를 갖는 HCV 단백질이 이. 콜라이(E. coli) 내에서 발현되도록 하였다. 모든 구조물은 서열분석으로 확인하였다.

HCV NS3 세린 프로테아제 도메인을 위한 발현 구조물로 BL21/DE3 pLysS 이. 콜라이 세포 (스트라타진(Stratagene))를 형질전환시켰다. 새로 형질전환된 세포를 100 ㎍/mL 카르베니실린 및 35 ㎍/mL 클로르암페니콜이 보충된 BHI 배지 (디프코 래버러토리즈(Difco Laboratories)) 중에서 600 nm에서의 광학 밀도가 0.75가 될 때까지 37℃에서 성장시켰다. 1 mM IPTG를 사용한 유도를 4시간 동안 24℃에서 수행하였다. 세포 페이스트를 원심분리로 수거하고, -80℃에서 급속 냉동시켰다가 단백질 정제에 사용하였다. 모든 정제 단계는 4℃에서 수행하였다. 다음으로, 세포 페이스트 100 g을 완충제 A (50 mM HEPES (pH 8.0), 300 mM NaCl, 0.1％ n-옥틸-β-D-글루코피라노시드, 5 mM β-메르캅토에탄올, 10％ (v/v) 글리세롤) 1.5 L 중에서 용해하고, 30분 동안 교반하였다. 용해물을 마이크로플루이다지저(Microfluidizer) (미국 매사추세츠주 뉴튼 소재의 마이크로플루이딕스(Microfluidics))로 균질화한 후에 45분 동안 54,000×g로 초원심분리를 실시하였다. 5 mM 이미다졸을 함유하는 완충제 A로 사전 평형화시켜 둔 Ni-NTA 수지 2 mL와 함께 이미다졸을 최종 농도 5 mM이 될 때까지 상등액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 살살 흔들고, 20배 컬럼 부피의 완충제 A 및 5 mM 이미다졸로 세척하였다. HCV NS3 단백질을 300 mM 이미다졸을 함유하는 완충제 A 중에 용출시켰다. 용출액을 농축시키고, 완충제 A로 사전 평형화시켜 둔 하이-로드(Hi-Load) 16/60 수퍼덱스(Superdex) 200 컬럼에 로딩하였다. 정제된 HCV 단백질의 적절한 분획물들을 모아서 -80℃에 저장하였다.

2. HCV NS3 프로테아제 도메인 펩티드 절단 검정

본 검정은 란드로(Landro) 등이 기재한 검정법 [Landro JA, Raybuck SA, Luong YC, O'Malley ET, Harbeson SL, Morgenstern KA, Rao G and Livingston DL. Biochemistry 1997, 36, 9340-9348]을 변형시킨 것이고, 유전형 1a HCV에 대한 NS5A/NS5B 절단 부위를 기초로 하여 펩티드 기질 (NS5AB)을 사용하였다. 기질 원액 (25 mM)을 0.2 M DTT를 함유하는 DMSO 중에 제조하고 -20℃에서 저장하였다. 합성 펩티드 보조인자 (KK4A)를 NS4A의 중심 코어 영역에 대한 대체물로 사용하였다. 펩티드 서열은 하기 표에 나타내었다. 상기 반응은 50 mM HEPES (pH 7.8), 100 mM NaCl, 20％ 글리세롤, 5 mM DTT 및 25 μM KK4A를 함유하는 완충제 중에서 25 nM 내지 50 nM HCV NS3 프로테아제 도메인을 사용하여 96웰 미량역가 플레이트 포맷으로 수행하였다. 최종 DMSO 농도는 2％ v/v를 초과하지 않았다. 반응물을 트리플루오로아세트산 (TFA) 첨가로 켄칭시켜 최종 농도가 2.5％가 되게 하였다.

SMSY 생성물을 마이크로보어(microbore) 분리 방법을 이용하여 기질 및 KK4A로부터 분리하였다. 사용된 기구는 G1322A 탈기제가 장착된 아질런트 1100, G1312A 2원 펌프 또는 G1311A 4원 펌프, G1313A 오토샘플러, G1316A 컬럼 온도조절 챔버 및 G1315A 다이오드 어레이 검출기였다. 컬럼은 페노메넥스 주피터(Jupiter), 5 ㎛ C18, 300 Å, 150×2 mm, P/O 00F-4053-B0으로, 유속은 0.2 mL/분이었다. 컬럼은 40℃로 온도를 조절하였다. 이동 상은 HPLC 등급의 H₂O/0.1％ TFA (용매 A) 및 HPLC 등급의 CH₃CN/0.1％ TFA (용매 B)였다. SMSY 생성물 피크를 210 nM에서 수집한 데이타를 사용하여 정량하였다.

3. NS3 ·4A 프로테아제의 구축 및 발현

표준 재조합 DNA 기술을 이용하여, NS3 및 NS4A에 대한 서열을 코딩하는 cDNA 단편, N-말단 헥사-히스티딘 서열을 함유하는 HCV 아형 균주 1a로부터의 잔기 Ala₁₀₂₇ 내지 Cys₁₇₁₁을 바큘로바이러스 전달 벡터 pVL1392 [Webb NR and Summers MD (1990) Expression of proteins using recombinant baculoviruses, Techniques 2:173-188]로 클로닝하였다. pVL 1392-His-NS3·4A를 선형화된 오토그라파 캘리포니아(Autographa californica) 핵 다각체 바이러스 (AcMNPV) DNA와 함께 스포돕테라 프루고페르다(Spodoptera frugoperda) (Sf9) 곤충 세포에 동시-형질감염시켜서 NS3·4A를 함유하는 재조합 바큘로바이러스를 생성하였다. 이어서, 재조합 바큘로바이러스 클론을 함유하는 형질감염된 곤충 세포를 플라크 정제로 단리하였다. 고역가 클론 바큘로바이러스를 통상적으로 사용하여 Sf9 곤충 세포를 감염시켜 단백질이 생성되게 하였다. 생성시에, Sf9 세포를 2.0×10⁶개 세포/mL의 밀도에 도달할 때까지 27℃에서 성장시켰다. 이 시점에, 상기 곤충 세포를 바이러스로 감염시켰다. 72시간 후 또는 세포 생존률이 70％ 내지 80％일 때 배양물을 수거하고, 세포를 정제할 수 있게 준비해 두었다.

4. NS3 ·4A 단백질의 정제

NS3·4A 단백질 (서열 1)을 다음과 같이 정제하였다: 세포 페이스트를 세포 페이스트 1 g 당 적어도 5배 부피의 용해 완충제 (50 mM Na₂HPO₄ (pH 8.0), 10％ 글리세롤, 300 mM NaCl, 5 mM β-메르캅토에탄올, 0.2 mM PMSF, 2.5 ㎍/mL 류펩틴(Leupeptin), 1.0 ㎍/mL E64, 2.0 ㎍/mL 펩스타틴(Pepstatin)) 중에서 해동시켰다. 이어서, 상기 세포 페이스트를 다운스(Dounce) 균질화기를 사용하여 빙상에서 균질화하였다. 다음으로, 상기 세포를 마이크로플루이다지저 (미국 매사추세츠주 뉴튼 소재의 마이크로플루이딕스 코포레이션)에 1회 통과시켜 기계적으로 파괴하고, 세포 용해물을 빙상에서 수집하였다. 상기 세포 용해물을 100,000×g로 30분 동안 4℃에서 원심분리하고, 상등액을 경사분리하였다. 임의로는, 펠렛을 세척 완충제 (용해 완충제 + 0.1％ β-옥틸 글루코피라노시드) 중에 재현탁하고 다운스 균질화기로 균질화하여 100,000×g로 30분 동안 4℃에서 원심분리하였다. 2.5 mL/g 세포 페이스트를 추출 완충제 (용해 완충제 + 0.5％ 라우릴 말토시드) 중에 재현탁하여, 펠렛으로부터 불용성 NS3·4A를 추출하였다. 상기 혼합물을 다운스 균질화기로 균질화하고, 4℃에서 3시간 이상 혼합하였다. 상기 혼합물을 100,000×g로 30분 동안 4℃에서 원심분리하였다. 상등액을 경사분리하여 모았다.

NS3·4A 단백질을 니켈-NTA 금속 친화도 크로마토그래피로 추가로 정제하였다. 2 M 원액 (pH 8.0)으로부터 제조한 이미다졸 용액을 앞서 모은 상등액에 첨가하여, 이미다졸의 최종 농도가 10 mM이 되었다. 상기 상등액을 배치(batch)별로 용해 완충제 + 10 mM 이미다졸로 사전 평형화시켜 둔 니켈-NTA 친화도 수지와 함께 밤새 4℃에서 인큐베이션하였다. 예상되는 NS3·4A를 5 ㎍ 당 수지 1 mL로 하여 사용하였다. 다음으로, 상기 수지를 중력 또는 500×g에서 5분 동안의 원심분리로 침강시켰다. 다음으로, 상기 수지를 중력 유동 컬럼에 붓고, 10배 이상의 컬럼 부피의 니켈 세척 완충제 (용해 완충제 + 0.1％ 라우릴 말토시드 + 10 mM 이미다졸)로 세척하였다. 다음으로, 상기 컬럼을 3배 내지 4배의 컬럼 부피의 니켈 용출 완충제 (니켈 세척 완충제 + 300 mM 이미다졸)로 용출시켰다. 용출 분획물들을 빙상에서 수집하고, SDS-PAGE로 평가하였다. NS3-4A 단백질분해를 방지하기 위해서, 겔 샘플에 100 μM DFP 프로테아제 억제제를 첨가한 후에 SDS 샘플 완충제를 첨가하고 비등시켰다. 피크 분획물들을 모으고, 280 nm에서의 흡광도를 측정하고 흡광 계수 (e) (NS3·4A의 경우에는 1.01)로 나누어 단백질 농도를 결정하였다.

NS3·4A를 겔 여과 크로마토그래피를 사용하여 추가로 정제하였다. 수퍼덱스 200 26/60 컬럼을 3 mL/분 유속의 수퍼덱스 완충제 (20 mM HEPES (pH 8.0), 10％ 글리세롤, 300 mM NaCl, 10 mM β-메르캅토에탄올, 0.05％ 라우릴 말토시드)로 평형화시켰다. 필요하다면 니켈 정제된 NS3·4A를 센트리프렙 30(Centriprep 30)에서 2 mg/mL 초과로 농축시키고, 0.2 ㎛ 시린지 필터로 여과하고, 최대 10 mL를 상기 수퍼덱스 200 컬럼에 로딩하였다. 컬럼 부피의 0.3배를 통과시킨 후에 4 mL 내지 5 mL의 분획물들을 수집하였다. 분획물들을 SDS-PAGE로 평가하였다. NS3·4A 단백질은 2개의 피크에서 용출되었다. 피크 1은 응집된 NS3·4A를 함유하였고, 피크 2는 활성 단백질을 함유하였다. 피크 2의 분획물들을 모아 분취하고 -7O℃에서 냉동시켰다.

NS3 ·4A 단백질의 분석

분석	전체 단백질
길이	695개 아미노산
분자량	74,347.78
1 마이크로그램	13.450 피코몰
몰 흡광 계수	73430
1 A280이 상응하는 값	1.01 mg/mL
등전점	6.50
pH 7에서의 전하	-3.58

5. HCV NS3 펩티드 절단 검정

본 검정에서는 전장 C형 간염 바이러스 단백질 NS3·4A로 펩티드 기질을 절단하였다. 유전형 1a HCV에 대한 NS5A/NS5B 절단 부위를 기초로 하여 3종의 펩티드 기질 중 하나를 사용하여 효소 활성을 측정하였다. 모든 기질 원액 (25 mM)을 0.2 M DTT를 함유하는 DMSO 중에서 제조하고, -20℃에서 저장하였다. 합성 펩티드 보조인자 (NS4A 펩티드)를 사용하여 NS4A를 보충하였다. 펩티드 서열은 하기에 나타내었다. 가수분해 반응은 50 mM HEPES (pH 7.8), 100 mM NaCl, 20％ 글리세롤, 5 mM DTT 및 25 μM NS4A 펩티드를 함유하는 완충제 중에서 100 nM 내지 125 nM HCV NS3·4A를 사용하여 96웰 미량역가 플레이트 포맷으로 수행하였다. 최종 DMSO 농도는 2％ v/v을 초과하지 않았다. NS5AB 또는 NS5AB-EDANS를 기질로 사용한 반응물을 10％ 트리플루오로아세트산 (TFA) 첨가로 켄칭시켜 최종 TFA 농도가 2.5％가 되게 하였다. FITC-NS5AB-1을 기질로 사용한 반응물을 0.4 M 포름산 첨가로 켄칭시켜 최종 농도가 0.08 M 산이 되게 하였다.

효소 활성은 역상 HPLC로 기질과 생성물을 분리하여 평가하였다. 사용된 기구는 G1322A 탈기제가 장착된 아질런트 1100, G1312A 2원 펌프 또는 G1311A 4원 펌프, G1313A 오토샘플러, G1316A 컬럼 온도조절 챔버, G1321A 형광 검출기 및 G1315A 다이오드 어레이 검출기이었다. 컬럼은 40℃로 온도를 조절하였다. 기질 NS5AB의 경우에 컬럼은 페노메넥스 주피터, 5 ㎛ C18, 300 Å, 150×2 mm, P/O 00F-4053-B0으로, 유속은 0.2 mL/분이었고, HPLC 등급의 H₂O/0.1％ TFA (용매 A) 및 HPLC 등급의 CH₃CN/0.1％ TFA (용매 B)를 이동상으로 사용하였다. 210 nm에서 수집한 흡광 데이타를 이용하여 C-말단 생성물 피크 (NH2-SMSY-COOH)를 정량하였다. 기질 NS5AB-EDANS의 경우에 컬럼은 페노메넥스 아쿠아(Aqua), 5 ㎛ C18, 125 Å, 50×4.6 mm, P/O 00B-4299-E0으로, 유속은 1.0 mL/분이었고, HPLC 등급의 H₂O/0.1％ TFA (용매 A) 및 HPLC 등급의 CH₃CN/0.1％ TFA (용매 B)를 이동상으로 사용하였다. 350 nm 여기/490 nm 방출로 수집한 형광 데이타를 이용하여 C-말단 생성물 피크 (NH2-SMSYT-Asp(EDANS)-KKK-COOH)를 정량하였다. 기질 FITC-NS5AB-1의 경우에 컬럼은 페노메넥스 프로디지(Prodigy), 5 ㎛ ODS(2), 125 Å, 50×4.6 mm, P/O 00B-3300-E0으로, 유속은 1.0 mL/분이었고, HPLC 등급의 H₂O 중 10 mM 인산나트륨 (pH 7.0) (용매 A) 및 HPLC 등급의 H₂O 중 65％ HPLC 등급의 CH₃CN/35％ 10 mM 인산나트륨 (pH 7.0) (용매 B)을 이동상으로 사용하였다. 440 nm 여기/520 nm 방출로 수집한 형광 데이타를 이용하여 N-말단 생성물 피크 (FITC-Ahx-EDVV-(알파)Abu-C-COOH)를 정량하였다. 별법으로, N-말단 생성물:미반응 FITC-NS5AB-1 기질의 비율은 100 mM Tris (pH 7.0), 10 mM EDTA, 0.01％ (v/v) Brij-35 및 0.1％ (v/v) CR-3의 칩 완충제를 사용하여 488 nm 여기/530 nm 방출로 검출하는 칼리퍼(Caliper) LabChip 3000을 이용하여 결정하였다.

6. Km 및 Vmax 의 결정

역학적 파라미터 Km 및 Vmax를 결정하기 위해서, HCV NS3 프로테아제 도메인 또는 HCV NS3·4A를 상기한 검정 조건하에서 펩티드 기질과 반응시켰다. 펩티드 기질 농도는 3 μM 내지 200 μM로 다양했고, 모든 기질 농도마다 전환률이 20％ 미만이었다. 반응 시간에 대한 생성물 피크 면적 (역상 HPLC로 결정함)의 비율로 효소 촉매된 가수분해의 속도를 산출하였다. 이러한 비율 vs. 기질 농도 데이타 점을 비-선형 회귀를 이용하여 미카엘리스-멘텐(Michaelis-Menten) 식에 핏팅하였다. k_cat의 값은, 공칭 프로테아제 농도 및 완전히 절단된 기질 펩티드를 기구 보정 표준물로 사용하여 Vmax로부터 결정하였다.

7. 화합물 역가의 결정

겉보기 Ki 값을 평가하기 위해서, 시험 화합물 및 기질을 제외한 모든 성분들을 5분 내지 10분 동안 실온에서 사전 인큐베이션하였다. 이어서, DMSO 중에 용해한 시험 화합물을 상기 혼합물에 첨가하고, 15분 또는 60분 동안 30℃에서 인큐베이션하였다. 순수(neat) DMSO를 억제제 없는 대조군으로 포함시켰다. 펩티드 기질을 Km 또는 Km의 1/2의 농도로 첨가하여 절단 반응을 개시하고, 30℃에서 20분 동안 진행되게 하였다. 반응 종료시에 상기 혼합물을 켄칭시키고, 반응의 정도를 상기한 바와 같이 하여 측정하였다. 11가지 농도의 화합물을 사용하여 억제에 대한 효소 활성을 적정하였다. 활성 vs. 억제제 농도 데이타 점을 비-선형 회귀를 이용하여 경쟁적인 강한-결합 효소 억제에 관한 모리슨(Morrison) 식에 핏팅하였다 [Sculley MJ and Morrison JF. Biochim. Biophys. Acta, 1986, 874, 44-53].

화학식 I의 시험 화합물은 일반적으로 Ki 값이 약 0.008 μM 내지 약 20 μM인 것으로 나타났다. 일부 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 Ki 값이 약 0.008 μM 내지 약 0.100 μM인 것으로 나타났다. 일부 다른 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 Ki 값이 약 0.100 μM 내지 약 0.500 μM인 것으로 나타났다. 일부 다른 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 Ki 값이 0.500 μM 내지 약 5.000 μM인 것으로 나타났다.

세린 프로테아제 수용체 억제에 대한 화학식 I, Ia 및 Ib의 화합물의 활성 예를 하기 표 14에 나타냈다. HCV 효소 검정법을 이용하여 세린 프로테아제에 대해 측정한 화합물 활성의 경우에, 세린 프로테아제 활성을 활성이 0.1 μM 미만으로 측정된 경우에는 "+++"로 표시하였고, 활성이 0.1 μM 내지 0.5 μM로 측정된 경우에는 "++"로 표시하였고, 활성이 0.5 μM 초과로 측정된 경우에는 "+"로 표시하였으며, 데이타가 얻어지지 않은 경우에는 "-"로 표시하였다. 0％ 효능은 DMSO만 함유된 대조군으로 사용하여 얻어진 최소의 반응률임을 인지해야 한다. 효소 검정 1은 HCV NS3 프로테아제 도메인 펩티드 절단 검정을 의미하고, 효소 검정 2는 HCV NS3 펩티드 절단 검정을 의미한다.

B. HCV 세포 검정

uh-7 세포를 10％ 열-불활성화된 FBS (태아 소 혈청), 2 mM L-글루타민 및 비-필수 아미노산 (JRH)이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(Dulbecco's modified Eagle's medium) (DMEM, 미국 캔자스주 레넥사 소재의 JRH 바이오사이언시즈(JRH Biosciences)) 중에서 증식시켰다. 상기 세포를 상기 문헌 [Lohmann et al. (1999)]에 기재된 바와 같은 레플리콘 I₃₇₇neo/NS3-3'/wt와 동일한 시험관내 전사된 HCV 레플리콘 RNA로 형질감염시켰다. 안정한 세포 클론을 선별하고, 250 ㎍/mL G418 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로젠(Invitrogen))의 존재하에 유지시켰다. 클론 중 하나인 24-2를 이후의 HCV 레플리콘 검정에 사용하였다. 레플리콘 세포를 10％ FBS, 2 mM L-글루타민, 비-필수 아미노산 및 250 ㎍/mL G418이 보충된 DMEM 중에서 증식시켰다. 상기 세포가 전면성장에 이르면 신선한 배지 중에 1주 2회씩 나누었다. 레플리콘 세포 1개 당 대략 200개 내지 300개 카피의 HCV RNA가 있었다.

콴티젠(Quantigene) 디스커버 XL 키트 (미국 캘리포니아주 프레몬트 소재의 파노믹스 인크.(Panomics Inc.))를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 세포로부터의 HCV 레플리콘 RNA를 결정하였다. 요약하면, 화합물-처치된 레플리콘 세포를 용해시키고, HCV-특이적 올리고뉴클레오티드를 사용하여 포획 플레이트에 밤새 고정시키고, 올리고뉴클레오티드 프로브 세트를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 포획된 RNA의 상대적인 양을 측정하였다.

1. 2일간의 HCV 레플리콘 IC ₅₀ 검정

검정 전날, 10⁴개 레플리콘 세포를 96웰 플레이트의 각 웰에 플레이팅하고, 10％ 열-불활성화된 FBS (미국 캔자스주 레넥사 소재의 JRH 바이오사이언시즈), 2 mM L-글루타민 (인비트로젠), 비-필수 아미노산 (인비트로젠) 및 250 ㎍/mL G418 (인비트로젠)이 보충된 DMEM (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로젠) 중에서 밤새 부착되고 성장하도록 하였다. 화합물을 G418 없이 2％ FBS 및 0.5％ DMSO (미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마 케미칼 컴퍼니(Sigma Chemical Co.))를 함유하는 DMEM 중에 계열 희석하였다. 콴티젠 디스커버 XL 키트 (미국 캘리포니아주 프레몬트 소재의 파노믹스 인크.)를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 세포로부터의 HCV 레플리콘 RNA를 결정하였다. 요약하면, 화합물-처치된 레플리콘 세포를 용해시키고, HCV-특이적 올리고뉴클레오티드를 사용하여 포획 플레이트에 밤새 고정시키고, 올리고뉴클레오티드 프로브 세트를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 포획된 RNA의 상대적인 양을 측정하였다. 달리 나타내지 않는다면, 각각의 데이타 점은 3벌 실험 반복값의 평균을 나타낸다. IC₅₀은 세포 내 HCV 레플리콘 RNA 수준이 미처치 레플리콘 세포 대조군에 비해 50％ 감소되는 화합물의 농도이다. 세포 증식 또는 세포 생존율에 화합물이 미치는 효과를 모니터링하기 위해서, 계열 희석된 화합물을 레플리콘 세포에 48시간 동안 처치한 후, 세포 생존율을 CellTiter Glo 검정 (미국 위스콘신 매디슨 소재의 프로메가(Promega))로 결정하였다. 각각의 CC_5O은 3벌 실험 반복값으로부터 유도된 것이고, 이것은 살아있는 세포의 수가 미처치 세포 대조군에 비해 50％ 감소되는 화합물의 농도이다. IC₅₀ 및 CC_5O은 SoftMax Pro 프로그램 (미국 캘리포니아주 서니베일 소재의 몰레큘라 디바이시즈(Molecular Devices))의 4-파라미터 곡선 핏팅을 이용하여 결정하였다.

2. 5일간의 HCV 레플리콘 IC ₉₉ 검정

검정 전날, HCV 레플리콘 세포를 96웰 플레이트의 웰마다 2500개 세포의 낮은 밀도로 플레이팅하여, 세포가 5일간의 배양 기간 동안에 전면성장에 이르지 않도록 하였다. 화합물을 G418 없이 10％ FBS 및 0.5％ DMSO를 함유하는 DMEM 중에 계열 희석하였다. 제1일 및 제3일에 신선한 배지 및 화합물을 세포에 첨가하였다. 세포에 항-바이러스 화합물을 5일 동안 처리한 후, 콴티젠 디스커버 XL 키트 (미국 캘리포니아주 프레몬트 소재의 파노믹스 인크.)를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 세포로부터의 HCV 레플리콘 RNA를 결정하였다. 요약하면, 화합물-처치된 레플리콘 세포를 용해시키고, HCV-특이적 올리고뉴클레오티드를 사용하여 포획 플레이트에 밤새 고정시키고, 올리고뉴클레오티드 프로브 세트 (파노믹스)를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 포획된 RNA의 상대적인 양을 측정하였다. 각각의 데이타 점은 2벌 실험 반복값의 평균을 나타낸다. IC₉₉는 세포 내의 HCV 레플리콘 RNA 수준이 미처치 세포 대조군에 비해 2 로그값만큼 감소될 때의 화합물 농도이다. 화합물이 세포 증식 또는 세포 생존에 미치는 효과를 모니터링하기 위해서, 계열 희석한 화합물을 레플리콘 세포에 5일 동안 처치한 후에 CellTiter Glo 검정 (미국 위스콘신 매디슨 소재의 프로메가)을 이용하여 세포 생존률을 결정하였다. 각각의 CC₅₀은 2벌 실험 반복값으로부터 유도된 것이고, 이것은 살아있는 세포의 수가 미처치 세포 대조군에 비해 50％ 감소되는 화합물의 농도이다. IC₉₉ 및 CC_5O은 프리즘(Prism) 소프트웨어 (미국 캘리포니아주 샌 디에고 소재의 그래프패드 소프트웨어 인크.(GraphPad Software Inc.)) 및 엑셀(Excel) 프로그램 (미국 워싱톤주 레드몬드 소재의 마이크로소프트 코포레이션(Microsoft Corporation))을 이용한 4-파라미터 곡선 핏팅 방법으로 결정되었다.

상기한 검정법을 이용하여, 본 발명의 화합물은 유용한 세린 프로테아제 억제제인 것으로 결정되었다.

다른 실시양태

본 발명을 그의 상세한 설명과 관련하여 기재하였지만, 상기 상세한 설명은 예시하기 위한 것이지 첨부된 청구의 범위로 한정되는 본 발명의 범위를 한정하지는 않는다는 것을 이해해야 한다. 다른 측면, 이점 및 변형은 첨부된 청구의 범위에 포함된다.

SEQUENCE LISTING <110> Vertex Pharmaceuticals, Inc. <120> Inhibitors of Serine Proteases <130> 125805/00423 <160> 6 <170> PatentIn version 3.3 <210> 1 <211> 695 <212> PRT <213> Hepatitis C virus <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(10) <223> Histidine tag <400> 1 Met Ser His His His His His His Ala Met Ala Pro Ile Thr Ala Tyr 1 5 10 15 Ala Gln Gln Thr Arg Gly Leu Leu Gly Cys Ile Ile Thr Ser Leu Thr 20 25 30 Gly Arg Asp Lys Asn Gln Val Glu Gly Glu Val Gln Ile Val Ser Thr 35 40 45 Ala Thr Gln Thr Phe Leu Ala Thr Cys Ile Asn Gly Val Cys Trp Thr 50 55 60 Val Tyr His Gly Ala Gly Thr Arg Thr Ile Ala Ser Pro Lys Gly Pro 65 70 75 80 Val Ile Gln Met Tyr Thr Asn Val Asp Gln Asp Leu Val Gly Trp Pro 85 90 95 Ala Pro Gln Gly Ser Arg Ser Leu Thr Pro Cys Thr Cys Gly Ser Ser 100 105 110 Asp Leu Tyr Leu Val Thr Arg His Ala Asp Val Ile Pro Val Arg Arg 115 120 125 Arg Gly Asp Ser Arg Gly Ser Leu Leu Ser Pro Arg Pro Ile Ser Tyr 130 135 140 Leu Lys Gly Ser Ser Gly Gly Pro Leu Leu Cys Pro Ala Gly His Ala 145 150 155 160 Val Gly Leu Phe Arg Ala Ala Val Cys Thr Arg Gly Val Thr Lys Ala 165 170 175 Val Asp Phe Ile Pro Val Glu Asn Leu Glu Thr Thr Met Arg Ser Pro 180 185 190 Val Phe Thr Asp Asn Ser Ser Pro Pro Ala Val Pro Gln Ser Phe Gln 195 200 205 Val Ala His Leu His Ala Pro Thr Gly Ser Gly Lys Ser Thr Lys Val 210 215 220 Pro Ala Ala Tyr Ala Ala Gln Gly Tyr Lys Val Leu Val Leu Asn Pro 225 230 235 240 Ser Val Ala Ala Thr Leu Gly Phe Gly Ala Tyr Met Ser Lys Ala His 245 250 255 Gly Val Asp Pro Asn Ile Arg Thr Gly Val Arg Thr Ile Thr Thr Gly 260 265 270 Ser Pro Ile Thr Tyr Ser Thr Tyr Gly Lys Phe Leu Ala Asp Gly Gly 275 280 285 Cys Ser Gly Gly Ala Tyr Asp Ile Ile Ile Cys Asp Glu Cys His Ser 290 295 300 Thr Asp Ala Thr Ser Ile Leu Gly Ile Gly Thr Val Leu Asp Gln Ala 305 310 315 320 Glu Thr Ala Gly Ala Arg Leu Val Val Leu Ala Thr Ala Thr Pro Pro 325 330 335 Gly Ser Val Thr Val Ser His Pro Asn Ile Glu Glu Val Ala Leu Ser 340 345 350 Thr Thr Gly Glu Ile Pro Phe Tyr Gly Lys Ala Ile Pro Leu Glu Val 355 360 365 Ile Lys Gly Gly Arg His Leu Ile Phe Cys His Ser Lys Lys Lys Cys 370 375 380 Asp Glu Leu Ala Ala Lys Leu Val Ala Leu Gly Ile Asn Ala Val Ala 385 390 395 400 Tyr Tyr Arg Gly Leu Asp Val Ser Val Ile Pro Thr Asn Gly Asp Val 405 410 415 Val Val Val Ser Thr Asp Ala Leu Met Thr Gly Phe Thr Gly Asp Phe 420 425 430 Asp Ser Val Ile Asp Cys Asn Thr Cys Val Thr Gln Thr Val Asp Phe 435 440 445 Ser Leu Asp Pro Thr Phe Thr Ile Glu Thr Thr Thr Leu Pro Gln Asp 450 455 460 Ala Val Ser Arg Thr Gln Arg Arg Gly Arg Thr Gly Arg Gly Lys Pro 465 470 475 480 Gly Ile Tyr Arg Phe Val Ala Pro Gly Glu Arg Pro Ser Gly Met Phe 485 490 495 Asp Ser Ser Val Leu Cys Glu Cys Tyr Asp Ala Gly Cys Ala Trp Tyr 500 505 510 Glu Leu Met Pro Ala Glu Thr Thr Val Arg Leu Arg Ala Tyr Met Asn 515 520 525 Thr Pro Gly Leu Pro Val Cys Gln Asp His Leu Glu Phe Trp Glu Gly 530 535 540 Val Phe Thr Gly Leu Thr His Ile Asp Ala His Phe Leu Ser Gln Thr 545 550 555 560 Lys Gln Ser Gly Glu Asn Phe Pro Tyr Leu Val Ala Tyr Gln Ala Thr 565 570 575 Val Cys Ala Arg Ala Gln Ala Pro Pro Pro Ser Trp Asp Gln Met Trp 580 585 590 Lys Cys Leu Ile Arg Leu Lys Pro Thr Leu His Gly Pro Thr Pro Leu 595 600 605 Leu Tyr Arg Leu Gly Ala Val Gln Asn Glu Val Thr Leu Thr His Pro 610 615 620 Ile Thr Lys Tyr Ile Met Thr Cys Met Ser Ala Asp Leu Glu Val Val 625 630 635 640 Thr Ser Thr Trp Val Leu Val Gly Gly Val Leu Ala Ala Leu Ala Ala 645 650 655 Tyr Cys Leu Ser Thr Gly Cys Val Val Ile Val Gly Arg Ile Val Leu 660 665 670 Ser Gly Lys Pro Ala Ile Ile Pro Asp Arg Glu Val Leu Tyr Gln Glu 675 680 685 Phe Asp Glu Met Glu Glu Cys 690 695 <210> 2 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetically generated peptide <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(5) <223> (alpha) aminobutyric acid <400> 2 Glu Asp Val Val Xaa Cys Ser Met Ser Tyr 1 5 10 <210> 3 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetically generated peptide <400> 3 Lys Lys Gly Ser Val Val Ile Val Gly Arg Ile Val Leu Ser Gly Lys 1 5 10 15 <210> 4 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetically generated peptide <400> 4 Lys Lys Gly Ser Val Val Ile Val Gly Arg Ile Val Leu Ser Gly Lys 1 5 10 15 Pro Ala Ile Ile Pro Lys Lys 20 <210> 5 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetically generated peptide <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(5) <223> (alpha) aminobutyric acid <220> <221> MOD_RES <222> (12)..(12) <223> Asp(EDANS) <400> 5 Glu Asp Val Val Xaa Cys Ser Met Ser Tyr Thr Asp Lys Lys Lys 1 5 10 15 <210> 6 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetically generated peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> FITC-2-aminohexanoic acid <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> (alpha) aminobutyric acid <400> 6 Xaa Glu Asp Val Val Xaa Cys Ser Met Ser Tyr Thr Lys Lys 1 5 10

Claims (46)

1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염:

   <화학식 I>

   

   상기 식에서,

   각각의 A는 -CH₂-이고,

   각각의 B는 -CH₂-이고,

   각각의 R₁은 -Z^AR₄이고, 여기서의 Z^A는 -C(O)-이고, R₄는 치환된 알킬이고,

   각각의 R₂는 -Z^BR₅이고, 여기서의 각각의 Z^B는 독립적으로 결합 또는 임의로 치환된 지방족으로 Z^B의 최대 4개의 탄소 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(O)-, -C(O)NR^B-, -C(O)C(O)-NR^B- 또는 -NR^B-로 대체되고,

   각각의 R₅는 독립적으로 R^B, 할로, -OH, -CN, -NO₂, -NH₂, 알콕시 또는 할로 알콕시이고,

   각각의 R^B는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 지방족, 또는 임의로 치환된 지환족이거나, 또는

   R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께 임의로 치환된 6원 헤테로지환족 고리를 형성하고,

   각각의 R₃은 임의로 치환된 아미노, -O-R_3A, 임의로 치환된 헤테로지환족, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이고,

   각각의 R_3A는 독립적으로 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이며,

   Y 및 Y' 각각은 H이다.
2. 제1항에 있어서, R₃이 임의로 치환된 아릴인 화합물.
3. 제2항에 있어서, R₃이 모노시클릭, 바이시클릭 또는 트리시클릭 아릴이고, 각각 독립적으로 할로, 히드록시, 시아노, 아미노, 니트로, 지방족, 할로지방족, (지방족)옥시, (할로(지방족))옥시, (지방족(옥시(아릴)))옥시, 아릴, 헤테로아릴, 할로아릴, 지환족 또는 헤테로지환족으로 구성된 군에서 선택된 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 화합물.
4. 제3항에 있어서, R₃이

   

   인 화합물.
5. 제1항에 있어서, R₃이 모노시클릭, 바이시클릭 또는 트리시클릭 헤테로아릴이고, 각각 독립적으로 할로, 히드록시, 시아노, 아미노, 니트로, 지방족, 할로지방족, (지방족)옥시, (할로(지방족))옥시, (지방족(옥시(아릴)))옥시, 아릴, 헤테로아릴, 할로아릴, 지환족 또는 헤테로지환족으로 구성된 군에서 선택된 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 화합물.
6. 제5항에 있어서, R₃이

   

   인 화합물.
7. 제1항에 있어서, R₃이 임의로 치환된 아미노, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 아릴옥시인 화합물.
8. 제7항에 있어서, R₃이

   

   인 화합물.
9. 제1항에 있어서, R₁이

   

   이고,

   여기서,

   U는 결합 또는 -O-이고,

   V는 알킬이고,

   T는 -C(O)-이며,

   R은 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, 또는 (시클로알킬)옥시이고, 이것들 각각이 각각 독립적으로 할로, 히드록시, 시아노, 아미노, 니트로, 지방족, 할로지방족, (지방족)옥시, (할로(지방족))옥시, (지방족(옥시(아릴)))옥시, 아릴, 헤테로아릴, 할로아릴, 지환족 또는 헤테로지환족으로 구성된 군에서 선택된 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 화합물.
10. 제9항에 있어서, R₁이

    

    이고, V가 -CH₃인 화합물.
11. 제10항에 있어서, R이 1개 내지 4개의 임의의 치환기를 갖는 시클로프로필인 화합물.
12. 제10항에 있어서, 시클로프로필에 존재하는 1개 내지 4개의 임의의 치환기 각각이 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 시클로알킬, 알킬, 알케닐, 시아노 또는 할로이고, 임의의 카르보닐 링커를 통해 상기 시클로프로필에 부착되거나, 또는 상기 임의의 치환기 중 2개가 이들이 부착된 원자(들)과 함께 헤테로시클로알킬 또는 시클로알킬을 형성하는 화합물.
13. 제10항에 있어서, R이

    

    인 화합물.
14. 제10항에 있어서, R이 임의로 치환된 시클로부틸, 또는 임의로 치환된 헤테로시클로부틸인 화합물.
15. 제14항에 있어서, R이

    

    인 화합물.
16. 제10항에 있어서, R이 임의로 치환된 헤테로아릴인 화합물.
17. 제16항에 있어서, R이

    

    인 화합물.
18. 제10항에 있어서, R이 임의로 치환된 알콕시 또는 임의로 치환된 시클로알킬옥시인 화합물.
19. 제18항에 있어서, R이

    

    인 화합물.
20. 제10항에 있어서, R이 임의로 치환된 알킬인 화합물.
21. 제20항에 있어서, R이

    

    인 화합물.
22. 제9항에 있어서, R₁이

    

    인 화합물.
23. 제9항에 있어서, R₁이

    

    인 화합물.
24. 제9항에 있어서, R₁이

    

    인 화합물.
25. 제9항에 있어서, R₁이

    

    

    인 화합물.
26. 제9항에 있어서, R₁이

    

    인 화합물.
27. 제1항에 있어서, R₂가 (지환족(카르보닐(카르보닐(지방족))))아미노, (아미노(카르보닐(카르보닐(지방족))))아미노, 또는 (지방족(카르보닐(카르보닐(지방족))))아미노이고, 이것들 각각이 임의로 치환된 화합물.
28. 제27항에 있어서, R₂가

    

    로 구성된 군에서 선택된 화합물.
29. 제27항에 있어서, R₂가

    

    로 구성된 군에서 선택된 화합물.
30. 제27항에 있어서, R₂가

    

    로 구성된 군에서 선택된 화합물.
31. 제1항에 있어서, R₁과 R₂가 이들이 부착된 원자와 함께

    

    를 형성하는 화합물.
32. 하기 화학식 II의 화합물:

    <화학식 II>

    

    상기 식에서,

    각각의 R₁은 (시클로알킬(알킬)카르보닐))아미노)(알킬)카르보닐이고,

    각각의 R₂는 (시클로알킬아미노(카르보닐))(카르보닐)알킬))아미노 또는 (알킬아미노(카르보닐))(카르보닐)알킬))아미노이며,

    각각의 R₃은 임의로 치환된 아릴이다.
33. 제32항에 있어서, R₃이 각각 독립적으로 C_{1 -4} 알콕시, C_{1 -4} 알킬 및 할로로 구 성된 군에서 선택된 1개 내지 3개의 치환기로 치환된 페닐인 화합물.
34. 하기 화학식 II의 화합물:

    <화학식 II>

    

    상기 식에서,

    각각의 R₁은 (시클로알킬(알킬)카르보닐))아미노)(알킬)카르보닐이고,

    각각의 R₂는 (시클로알킬아미노(카르보닐))(카르보닐)알킬))아미노 또는 (알킬아미노(카르보닐))(카르보닐)알킬))아미노이며,

    각각의 R₃은 각각 독립적으로 C_{1 -4} 알콕시, C_{1 -4} 알킬 및 할로로 구성된 군에서 선택된 1개 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 헤테로아릴이다.
35. 하기 화학식 II의 화합물:

    <화학식 II>

    

    상기 식에서,

    각각의 R₁은 (시클로알킬(알킬)카르보닐))아미노)(알킬)카르보닐이고,

    각각의 R₂는 (시클로알킬아미노(카르보닐))(카르보닐)알킬))아미노 또는 (알킬아미노(카르보닐))(카르보닐)알킬))아미노이며,

    각각의 R₃은 임의로 치환된 아미노, 임의로 치환된 헤테로지환족, 또는 임의로 치환된 아릴옥시이다.
36. 화합물 595 내지 1044로 구성된 군에서 선택된 화합물.
37. 제1항 또는 제36항의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 및 제약상 허용가능한 담체, 보조제 또는 비히클을 포함하는 제약 조성물.
38. 제37항에 있어서, 면역조정제, 항-바이러스제, HCV 프로테아제의 제2 억제제, HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제, 및 사이토크롬 P-450 억제제로부터 선택된 추가의 작용제를 더 포함하는 조성물.
39. 제38항에 있어서, 상기 면역조정제가 α-인터페론, β-인터페론, γ-인터페론 또는 티모신이고, 상기 항-바이러스제가 리바비린, 아만타딘 또는 텔비부딘이며, 상기 HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제가 HCV 헬리카제, 폴리머라제 또는 메탈로프로테아제의 억제제인 조성물.
40. 제38항에 있어서, 상기 사이토크롬 P-450 억제제가 리토나비르인 조성물.
41. 세포를 제1항 또는 제36항의 화합물과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 세린 프로테아제를 억제하는 방법.
42. 제41항에 있어서, 상기 세린 프로테아제가 HCV NS3 프로테아제인 방법.
43. HCV로 감염된 환자에게 제1항 또는 제36항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, HCV로 감염된 환자의 치료 방법.
44. 제43항에 있어서, 상기 환자에게 면역조정제, 항-바이러스제, HCV 프로테아제의 제2 억제제, 및 HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제로부터 선택된 추가의 작용제를 투여하는 것을 더 포함하는 방법.
45. 제44항에 있어서, 상기 면역조정제가 α-인터페론, β-인터페론, γ-인터페론 또는 티모신이고, 상기 항-바이러스제가 리바바린 또는 아만타딘이며, 상기 HCV 생활 주기 중의 또다른 표적의 억제제가 HCV 헬리카제, 폴리머라제 또는 메탈로프로테아제의 억제제인 방법.
46. 생물학적 샘플 또는 의료 또는 실험 장비를 제1항 또는 제36항의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함하는, 생물학적 샘플 또는 의료 또는 실험 장비의 HCV 오염을 제거하거나 감소시키는 방법.