KR20090127178A - 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 HIV-1 역전사 효소를 억제하고, HIV-1 감염의 예방과 치료, 및 AIDS 및/또는 ARC의 치료를 위한 방법을 제공하는 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 HIV-1 감염의 예방과 치료, 및 AIDS 및/또는 ARC의 치료에 유용한 화학식 I의 화합물을 함유하는 조성물에 관한 것이다:

화학식 I

상기 식에서,

R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar은 본원에 정의된 바와 같다.

Description

비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제{NON-NUCLEOSIDE REVERSE TRANSCRIPTASE INHIBITORS}

본 발명은 항바이러스 치료 분야, 특히 인체 면역 결핍 바이러스(HIV) 역전사 효소를 억제하고 HIV 매개 질병 치료에 유용한 비뉴클레오시드 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 HIV 매개 질병인 후천성 면역 결핍 증후군(AIDS) 또는 AIDS-관련 증후군(ARC)의 치료 또는 예방을 위한 화학식 I의 신규한 트라이아졸론 화합물을 제공하는데, 이 화합물은 단독 요법 또는 병용 요법에 사용된다.

인체 면역 결핍 바이러스 HIV는 후천성 면역 결핍 증후군(AIDS)의 원인 물질이고, AIDS는 면역 체계, 특히 CD4⁺ T-세포 파괴의 특징을 가지며 기회 감염에 수반되는 감수성을 갖는 질병이다. HIV 감염은 또한 전구체인 AIDS-관련 증후군(ARC)과 연관되어 있는데, ARC는 지속성 전신성 림프선증, 발열 및 체중 감소와 같은 증상의 특징을 갖는 증후군이다.

다른 레트로바이러스와 공통적으로, HIV 게놈은 gag 및 gag-pol로 알려진 단 백질 전구체를 코딩하는데, 이는 바이러스 단백질 분해 효소에 의해 가공되어 단백질 분해 효소, 역전사 효소(RT), 엔도뉴클레아제/인테그라제 및 바이러스 핵의 성숙한 구조 단백질을 제공한다. 이러한 가공의 방해는 정상적인 감염성 바이러스의 생산을 막는다. 바이러스로 코딩된 효소를 억제하여 HIV를 조절하는 방향으로 상당한 노력이 행해져왔다.

현재 이용가능한 화학요법은 2개의 중요한 바이러스 효소를 표적으로 한다(문헌[J. S. G. Montaner et al., Antiretroviral therapy: 'the state of the art', Biomed & Pharmacother. 1999 53:63-72; R. W. Shafer and D. A. Vuitton, Highly active retroviral therapy (HAART) for the treatment of infection with human immunodeficiency virus type, Biomed. & Pharmacother. 1999 53:73-86; E. De Clercq, New Developments in Anti-HIV Chemotherap. Curr. Med. Chem. 2001 8:1543-1572]). RTI 억제제의 2개의 일반적인 부류, 즉 뉴클레오시드 역전사 효소 억제제(NRTI) 및 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제가 동정되었다. 현재, CCR5 보조수용체가 항-HIV 화학요법의 잠재적인 표적으로 드러났다(문헌[D. Chantry, Expert Opin. Emerg. Drugs 2004 9(1):1-7; C. G. Barber, Curr. Opin. Invest. Drugs 2004 5(8):851-861; D. Schols, Curr. Topics Med. Chem. 2004 4(9):883-893; N. A. Meanwell and J. F. Kadow, Curr. Opin. Drug Discov. Dev. 2003 6(4):451-461]).

HIV-1 인테그라제 억제제의 N-치환된 하이드록시 피리미딘온 카복스아마이드 억제제는 2003년 5월 1일자로 공개된 크레스센지(B. Crescenzi) 등의 국제특허공개 제2003/035077호에 개시되어 있고, MK-0518은 거의 승인 단계에 있다.

전형적으로, NRTI는 바이러스 RT와 상호작용하기 앞서 인산화되어야 하는 2',3'-다이데옥시뉴클레오시드(ddN) 유사체이다. 상응하는 삼인산염은 바이러스 RT에 대한 경쟁 억제제 또는 대체 기질로서 기능한다. 핵산에 결합한 후, 뉴클레오시드 유사체는 쇄 연장 과정을 종결시킨다. HIV 역전사 효소는 뉴클레오시드 유사체를 절단하고 연장을 계속함으로서 내성 변종(strain)이 차단을 극복할 수 있게 하는 DNA 편집 능력을 갖는다. 현재 임상적으로 사용되는 NRTI는 지도부딘(AZT), 다이다노신(ddI), 잘시타빈(ddC), 스타부딘(d4T), 라미부딘(3TC) 및 테노포비르(PMPA)를 포함한다.

NNRTI는 1989년에 처음으로 발견되었다. NNRTI는 알로스테릭 억제제로 HIV 역전사 효소에 있는 비기질-결합 부위에 가역적으로 결합하여 활성 부위의 모양을 바꾸거나 중합 효소 활성을 차단한다(문헌[R. W. Buckheit, Jr., Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors: perspectives for novel therapeutic compounds and strategies for treatment of HIV infection, Expert Opin. Investig. Drugs 2001 10(8) 1423-1442; E. De Clercq, The role of non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTIs) in the therapy of HIV infection, Antiviral Res. 1998 38:153-179; E. De Clercq, New Developments in Anti-HIV Chemotherapy, Current medicinal Chem. 2001 8(13):1543-1572; G. Moyle, The Emerging Roles of Non-Nucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors in Antiviral Therapy, Drugs 2001 61 (l):19-26]). 30개가 넘는 NNRTI의 구조 부 류가 실험실에서 동정되었음에도, 단지 3개의 화합물, 즉 에파비렌즈, 네비라핀 및 델라비르딘이 HIV 치료에 승인되었다.

처음에 유망한 부류의 화합물로 보여진 대로, 시험관내 및 생체내 연구로 NNRTI가 약물 내성 HIV 변종의 출현 및 부류-특이적인 독성에 대해 낮은 장벽을 제공한다는 것이 빠르게 밝혀졌다. 약물 내성은 빈번하게 RT에서, 단지 단일 지점 돌연변이로 전개된다. NRTI, PI 및 NNRTI의 병용 요법은 많은 경우, 극적으로 바이러스 개수를 줄이고 질병의 진행을 둔화시키지만, 중요한 치료상 문제가 남아있다(문헌[R. M. Gulick, Eur. Soc. Clin. Microbiol. and Inf. Dis. 2003 9(3):186-193]). 혼합물은 모든 환자에게 효과적이지 않고, 잠재적으로 심각한 부작용 반응이 자주 발생하며 급속하게 재생되는 HIV 바이러스는 야생형(wild type) 단백질 분해 효소 및 역전사 효소의 변종 약물-내성 변형을 만드는 데 있어 뛰어난 것으로 증명되었다. 야생형 및 일반적으로 발생하는 HIV의 내성 변종에 대한 활성을 가진 보다 안전한 약물의 필요성이 남아있다.

2-벤조일 페닐-N-[페닐]-아세트아마이드 화합물 1a 및 1b는 HIV-1 역전사 효 소를 억제하는 것으로 나타났다(문헌[P. G. Wyatt et al., J. Med. Chem. 1995 38(10):1657-1665]). 추가 스크리닝은 역전사 효소를 또한 억제하는 관련 화합물, 예컨대 2-벤조일 페닐옥시-N-[페닐]-아세트아마이드 2a, 및 설폰아마이드 유도체 2b를 동정하였다(문헌[J. H. Chan et al., J. Med Chem. 2004 47(5):1175-1182; K. Romimes et al., J. Med. Chem. 2006 49(2):727-739; C. L. Webster et al., WO 01/17982]). 2006년 3월 30일자로 공개된 본뉴(P. Bonneau) 등의 미국특허공개 제 20060069261호는 HIV 역전사 효소의 억제제인 4-{4-[2-(2-벤조일-펜옥시)-아세틸아미노]-페닐}-2,2-다이메틸-부트-3-인산 화합물 3을 개시한다.

피리디진온 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제 4는 2004년 3월 23일자로 제출원된 둔(J. P. Dunn) 등의 미국특허공개 및 2005년 3월 22일자로 출원된 둔 등의 미국특허공개 제2005021554호에 기술되어 있다. 5-아르알킬-2,4-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-3-온, 5-아르알킬-3H-[1,3,4]옥사다이아졸-2-온 및 5-아르알킬-3H-[1,3,4]티아다이아졸-2-온 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제 5는 2004년 3월 23일자로 출원된 둔 등의 미국특허공개 제20040192704호 및 2005년 6월 27일자로 출원된 둔 등의 미국특허공개 제20060025462호에 개시되어 있다. 관련 화합물은 2006년 9월 29일자로 출원된 사이토(Y. D. Saito) 등의 미국특허공개 제 20070078128호에 개시되어 있다. 페닐아세트아마이드 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제 6은 2005년 10월 27일자로 공개된 둔 등의 미국특허공개 제20050239881호에 개시되어 있고, 페닐아세트아마이드 화합물을 사용한 레트로바이러스 감염의 치료 방법은 2005년 10월 27일자로 공개된 둔 등의 미국특허공개 제20050239880호, 2006년 10월 18일자로 출원된 미르자데간(T. Mirzadegan) 및 실바(T. Silva)의 미국특허공개 제20070088015호, 및 2006년 10월 18일자로 출원된 스위니(Z. K. Sweeney) 및 실바의 미국특허공개 제20070088053호에 개시되어 있다. 이러한 출원은 이의 전체 내용이 본원에 참고로서 혼입되어 있다.

효소 역전사 효소에 결합하고, 이들의 조절제, 특히 억제제인 바이아릴 에터 유도체 7 및 이를 함유하는 조성물은 2006년 6월 26일자로 공개된 존스(L. H. Jones) 등의 국제특허공개 제2006/067587호에 개시되어 있다. 화학식 8의 HIV 역전사 효소 억제제는 2007년 1월 25일자로 공개된 사가(S. A. Saggar) 등의 미국특허공개 제20070021442호에 개시되어 있다.

발명의 개요

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다:

상기 식에서,

X는 CH₂ 또는 NH이고,

Y는 CH₂ 또는 O이되, X 및 Y중 하나 이상은 CH₂이고;

R¹은 수소 또는 C_1-6 알킬이고;

R²는 C(=O)Ar 또는 OAr이고;

R³ 및 R⁴는 독립적으로 수소, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고;

R⁵는 수소, CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH, CH₂OC(=O)C_1-6 알킬 또는 CH₂OC(=O)CHR^5aNH₂이고;

n은 2 내지 5이고;

R^5a는 페닐 또는 C_1-6 저급 알킬이고;

Ar은 할로겐, 사이아노, C_1-6 할로알킬, C_3-5 사이클로알킬 및 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 기로 치환된 페닐이다.

화학식 I의 화합물은 HIV-1 역전사 효소를 억제하고, HIV-1 감염의 예방과 치료 및 AIDS 및/또는 ARC의 치료를 위한 방법을 제공한다. HIV-1은 유전 코드를 손쉽게 돌연변이시켜 현재의 치료 선택사항을 가진 요법에 대해 감소된 감수성을 가지는 변종을 야기한다. 본 발명은 또한 HIV-1 감염의 예방과 치료 및 AIDS 및/또는 ARC의 치료에 유용한 화학식 I의 화합물을 함유하는 조성물에 관한 것이다. 추가로 본 발명은 단독 요법 또는 다른 항바이러스제와의 병용 요법에 유용한 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

본원에 사용된 "하나"의 실체는 하나 이상의 이러한 실체를 지칭한다. 예를 들어, 화합물은 하나 이상의 화합물, 또는 적어도 하나의 화합물을 지칭한다. 이와 같이, 용어 "하나", "하나 이상" 및 "적어도 하나"는 본원에서 상호교환적으로 사용될 수 있다.

어구 "상기 정의된 바와 같은"은 발명의 개요 또는 가장 넓은 청구의 범위에 제공된 각각의 기에 대한 가장 넓은 정의를 지칭한다. 하기 제공되는 다른 모든 양태에서, 명료히 정의되지 않고 각각의 양태에 존재할 수 있는 치환기는 발명의 개요에서 제공된 가장 넓은 정의를 갖는다.

본원에서 사용된 기술 및 과학 용어는, 달리 정의되지 않는 한, 본 발명에 관한 기술 분야에서의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 의미를 갖는다. 당업자에게 공지된 여러 방법 및 물질이 본원에 참고로 인용된다. 약리학의 일반 원리를 설명하는 표준 참고 문헌은 문헌[Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10^th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001)]을 포함한다. 당업자에게 공지된 임의의 적합한 물질 및/또는 방법이 본 발명의 실시에 이용될 수 있다. 그러나, 바람직한 물질 및 방법은 기술되어 있다. 하기 발명의 상세한 설명 및 실시예에서 참고된 물질, 시약 등은 달리 지시되지 않는 한 상업적 공급원으로부터 입수가능하다.

본 명세서(이행 구(transitional phrase) 또는 청구의 범위의 본문에서)에서 사용된 용어 "포함하다" 및 "포함하는"은 개방적 의미를 갖는 것으로 해석된다. 즉, 상기 용어는 어구 "~을 적어도 갖는" 또는 "~을 적어도 포함하는"과 동일하게 해석된다. 공정의 설명에서 사용되는 경우, 용어 "포함하는"은 상기 공정이 적어도 인용된 단계를 포함하며, 추가의 단계를 포함할 수 있음을 의미한다. 화합물 또는 조성물의 설명에서 사용되는 경우, 용어 "포함하는"은 상기 화합물 또는 조성물이 적어도 인용된 특징 또는 성분을 포함하며, 추가의 특징 또는 성분을 추가로 포함할 수 있음을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "선택적인" 또는 "선택적으로"는 후속적으로 기술된 사건 또는 환경이 필수적으로 일어나지는 않지만, 기재내용이 그러한 사건 또는 환경이 발생하는 경우, 및 발생하지 않는 경우를 포함함을 의미한다. 예를 들어, "선택적으로 치환된"은 선택적으로 치환된 잔기가 수소 또는 치환기를 포함할 수 있음을 의미한다.

어구 "선택적인 결합"은 이러한 결합이 존재할 수 있거나 존재할 수 없음을 의미하고, 이러한 기재내용은 단일, 이중 또는 삼중 결합을 포함한다. 치환기가 "결합" 또는 "부재"를 나타내는 경우, 치환기에 결합된 원자는 직접 연결된다.

임의의 변수(예컨대, R¹, R^4a, Ar, X¹ 또는 Het)가 본 발명에서 사용되거나 청구된 화합물을 묘사하거나 기술하는 임의의 잔기 또는 화학식에서 1회 초과로 나올 때, 각각의 경우에서의 정의는 모든 다른 경우에서 독립적으로 정의된다. 또한, 치환기 및/또는 변수의 조합은 그러한 화합물이 안정된 화합물일 경우에만 허용된다.

달리 명백히 언급되지 않는 한, 본원에 인용된 모든 범위는 포괄적이다. 예를 들어, "1 내지 4개의 헤테로원자"를 함유하는 것으로서 기술된 헤테로환형 고리는 고리가 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 함유할 수 있는 것을 의미한다. 본원에 인용된 임의의 범위는 이의 범위내에 있는 모든 부분을 이의 범위내에 포함하는 것으로 또한 이해된다. 따라서, 예를 들어 "1 내지 5개의 치환기"로 선택적으로 치환된 것으로 기술된 아릴 또는 헤테로아릴은 이의 양상으로서 1 내지 4개의 치환기, 1 내지 3개의 치환기, 1 또는 2개의 치환기, 2 내지 5개의 치환기, 2 내지 4개의 치환기, 2 또는 3개의 치환기, 3 내지 5개의 치환기, 3 또는 4개의 치환기, 4 또는 5개의 치환기, 1개의 치환기, 2개의 치환기, 3개의 치환기, 4개의 치환기 또는 5개의 치환기로 선택적으로 치환된 임의의 아릴을 포함하는 것으로 이해된다.

결합의 말단에 있는 기호 "*" 또는 각각의 결합을 관통하여 그려진 "-----"는 작용기 또는 다른 화학적 잔기가 전체 분자의 부분인 분자의 나머지에 부착되는 지점을 의미한다. 따라서, 예컨대 다음과 같다:

본원에 기술된 정의는 부가되어 화학적으로 관련된 조합, 예컨대 "헤테로알킬아릴" "할로알킬헤테로아릴" "아릴알킬헤테로사이클릴" "알킬카본일" "알콕시알킬" 등을 형성할 수 있는 것으로 고려된다. 용어 "알킬"이 "페닐알킬" 또는 "하이드록시알킬"에서와 같이 다른 용어에 이어서 접미사로서 사용되는 경우, 이는 다른 구체적으로 명명된 기로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기로 치환된, 상기 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭하는 것으로 의도된다. 따라서, 예를 들어 "페닐알킬"은 1 또는 2개의 페닐 치환기를 갖는 알킬 기를 지칭하고, 이에 따라 벤질, 페닐에틸 및 바이페닐을 포함한다. "알킬아미노알킬"은 1 또는 2개의 알킬아미노 치환기를 갖는 알킬 기이다. "하이드록시알킬"은 2-하이드록시에틸, 2-하이드록시프로필, 1-(하이드록시메틸)-2-메틸프로필, 2-하이드록시부틸, 2,3-다이하이드록시부틸, 2-(하이드록시메틸), 3-하이드록시프로필 등을 포함한다. 따라서, 본원에 사용된 용어 "하이드록시알킬"은 하기 정의된 헤테로알킬 기의 부분 집합을 정의하기 위해 사용된다. 용어 -(아르)알킬은 치환되지 않은 알킬 또는 아르알킬 기를 지칭한다. 용어 (헤테로)아릴 또는 (헤트)아릴은 아릴 또는 헤테로아릴 기를 지칭한다.

본 발명의 한 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X 및 Y가 상기 정의된 바와 같되, X 및 Y중 하나 이상이 CH₂인 화학식 I의 화합물이 제공된다.

본 발명의 다른 양태에서, R²가 C(=O)Ar 또는 OAr이고; Ar이 할로겐, 사이아노, C_1-6 할로알킬 및 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 기로 치환된 페닐이고; R¹, R³, R⁴, R⁵, X 및 Y가 상기 정의된 바와 같되, X 및 Y중 하나 이상이 CH₂인 화학식 I의 화합물이 제공된다.

본 발명의 또 다른 양태에서, X가 CH₂이고, R¹, R², R³, R⁴, R⁵ 및 Y가 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 2 양태에서, R¹, R³, R⁴, R⁵, Ar, X 및 Y가 상기 정의된 바와 같은 하기 화학식 IIa의 화합물이 제공된다:

본 발명의 제 3 양태에서, X가 CH₂이고, R³이 플루오로이고; R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 수소이고; Ar 및 Y가 상기 정의된 바와 같은 화학식 IIa의 화합물이 제공된다.

본 발명의 또 다른 양태에서, R³이 플루오로이고; R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; X가 CH₂이고; R⁵가 수소, CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH 또는 CH₂OC(=O)C_1-6 알킬이고, n이 2 내지 5이고; R¹, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 IIa의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 4 양태에서, R³이 플루오로이고; R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 수소이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬인 하기 화학식 IVa의 화합물이 제공된다:

본 발명의 다른 양태에서, R³이 플루오로이고; R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH 또는 CH₂OC(=O)C_1-6 알킬이고, n이 2 내지 5이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬인 화학식 IVa의 화합물이 제공된다.

본 발명의 또 다른 양태에서, R³이 플루오로이고; R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬 또 는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH이고, n이 2 내지 5이고; R⁷이 할로겐, 사이아노 또는 C_1-6 할로알킬인 화학식 IVa의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 5 양태에서, R³이 플루오로이고; R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 수소이고; R⁷이 할로겐, 사이아노 또는 C_1-6 할로알킬인 화학식 IVb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 6 양태에서, R³이 플루오로이고; R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH이고, n이 2 내지 5이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬인 화학식 IVb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 7 양태에서, R²가 OAr이고; R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁵가 수소인 화학식 IIb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 양태에서, R²가 OAr이고; R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁵가 CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH 또는 CH₂OC(=O)C_1-6 알킬이고, n이 2 내지 5인 화학식 IIb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 8 양태에서, R²가 OAr이고; R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁵가 수소이고; X가 O이고; Y가 CH₂인 화학식 IIb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 다른 양태에서, R²가 OAr이고; R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁵가 CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH 또는 CH₂OC(=O)C_1-6 알킬이고, n이 2 내지 5이고; X가 O이고; Y가 CH₂인 화학식 IIb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 9 양태에서, R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬이고; R⁵가 수소인 화학식 Va의 화합물이 제공된다.

본 발명의 또 다른 양태에서, R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬이고; R⁵가 CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH 또는 CH₂OC(=O)C_1-6 알킬이고, n이 2 내지 5인 하기 화학식 Va의 화합물이 제공된다:

본 발명의 제 10 양태에서, R²가 C(=O)Ar이고; R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; X가 CH₂이고; Y가 O이고; R⁵가 수소인 화학식 IIb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 11 양태에서, R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬이고; R⁵가 수소인 화학식 Vb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 또 다른 양태에서, R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬이고; R⁵가 CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH 또는 CH₂OC(=O)C_1-6 알킬이고, n이 2 내지 5인 화학식 Vb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 12 양태에서, R³이 할로겐이고, R⁴가 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬이고; R⁵가 수소인 화학식 Vb의 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 13 양태에서, R¹이 수소 또는 C_1-6 알킬이고; R²가 수소, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 수소, CH₂OH 또는 CH₂OC(=O)(CH₂)₂C(=O)OH이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬인 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이 제공된다.

본 발명의 제 14 양태에서, R¹이 수소 또는 C_1-6 알킬이고; R²가 수소, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R⁵가 수소이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬인 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이 제공된다.

본 발명의 제 15 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 치료적 효과량을 이를 필요로 하는 수용자에게 투여함을 포함하는, HIV-1 감염의 치료, HIV-1 감염의 예방, 또는 AIDS 또는 ARS의 치료를 위한 방법이 제공된다.

본 발명의 제 16 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 치료적 효과량, 및 HIV의 단백질 분해 효소 억제제, 뉴클레오시드 역전사 효소 억제제, 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제, 인테그라제 억제제, CCR5 길항제 및 바이러스 융합 억제제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 화합물의 치료적 효과량을 이를 필요로 하는 수용자에게 병용-투여함을 포함하는, HIV-1 감염의 치료, HIV-1 감염의 예방, 또는 AIDS 또는 ARS의 치료를 위한 방법이 제공된다.

본 발명의 제 17 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 치료적 효과량, 및 지도부딘, 라미부딘, 다이다노신, 잘시타빈, 스타부딘, 레스크립터, 수스티바, 비라문, 에파비렌즈, 네비라핀, 델라비르딘, 사퀴나비르, 리토나비르, 넬피나비르, 인디나비르, 암프레나비르, 로피나비르 및 엔푸비르티드로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 화합물의 치료적 효과량을 이를 필요로 하는 수용자에게 병용-투여함을 포함하는, HIV-1 감염의 치료, HIV-1 감염의 예방, 또는 AIDS 또는 ARS의 치료를 위한 방법이 제공된다.

본 발명의 제 18 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 치료적 효과량을 투여함을 포함하는, HIV-1에 의해 감염된 수용자의 HIV-1 역전사 효소를 억제하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 19 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 치료적 효과량을 투여함을 포함하는, 야생형 HIV-1에 비해 하나 이상의 돌연변이를 갖는 역전사 효소를 발현하는 HIV-1의 변종에 의해 감염된 수용자의 HIV 역전사 효소를 억제하는 방법이 제공된다.

본 발명의 다른 제 20 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 치료적 효과량을 투여함을 포함하는, 야생형 역전사 효소에 비해 에파비렌즈, 네비라핀 또는 델라비르딘에 대한 감소된 감수성을 나타내는 역전사 효소를 발현하는 HIV-1의 변종에 의해 감염된 수용자의 HIV 역전사 효소를 억제하는 방법이 제공된다.

본 발명의 양태에서, R¹이 수소 또는 C_1-6 알킬이고; R²가 수소, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R³이 수소, CH₂OH 또는 CH₂OC(=O)(CH₂)₂C(=O)OH이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할 로알킬인 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 치료적 효과량을 이를 필요로 하는 수용자에게 투여함을 포함하는, HIV-1 감염의 치료, HIV-1 감염의 예방, 또는 AIDS 또는 ARS의 치료를 위한 방법이 제공된다.

본 발명의 제 21 양태에서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X, Y 및 Ar이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다. 본 발명의 한 양태에서, R¹이 수소 또는 C_1-6 알킬이고; R²가 수소, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고; R³이 수소, CH₂OH 또는 CH₂OC(=O)(CH₂)₂C(=O)OH이고; R⁷이 할로겐, 사이아노, C_3-5 사이클로알킬 또는 C_1-6 할로알킬인 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다. 본 발명의 다른 양태에서, 표 1의 화합물 I-1 내지 I-21로부터 선택된 화합물이 제공된다.

본원에 사용된 용어 "야생형"은 역전사 효소 억제제에 노출되지 않은 정상적인 집단에서 자연적으로 발생하는 우성 유전자형을 갖는 HIV 바이러스 변종을 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "야생형 역전사 효소"는 서열화된 야생형 변종에 의해 발현되고, 등록 번호 P03366으로 스위스프로트(SwissProt) 데이터베이스에 기탁된 역전사 효소를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "감소된 감수성"은 동일한 실험 시스템에서 야생형 바이러스에 의해 나타난 감수성에 비해 특정 바이러스 단리물의 감수성이 약 10배 이상 변하는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "뉴클레오시드 및 뉴클레오티드 역전사 효소 억제제"("NRTI")는 HIV-1 역전사 효소, 즉 바이러스 게놈 HIV-1 RNA의 프로바이러스 HIV-1 DNA로의 전환을 촉매화하는 효소의 활성을 억제하는 뉴클레오시드, 뉴클레오티드 및 이들의 유사체를 의미한다. RT1 및 PI 억제제의 개발에 있어서 최근의 진척은 문헌[F. M. Uckun and O. J. D'Cruz, Exp. Opin. Ther. Pat. 2006 16:265-293; L. Menendez-Arias, Eur. Pharmacother. 2006 94-96 and S. Rusconi and O. Vigano, Future Drugs 2006 3(1):79-88]을 검토한다.

반담(A-M. Vandamme) 등(문헌[Antiviral Chemistry & Chemotherapy, 1998 9:187-203])은 적어도 삼중 약물 병용을 비롯한, 인간의 HIV-1 감염의 현재의 고도로 활성인 항레트로바이러스 요법(HAART) 임상 치료를 개시한다. HAART는 뉴클레오시드 역전사 효소 억제제(NRTI), 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제(NNRTI) 및 단백질 분해 효소 억제제(PI)를 사용하는 병용 요법으로 전통적으로 구성되어 있다. 이러한 화합물은 바이러스 복제에 필요한 생화학적인 과정을 억제한다. HAART가 HIV 감염된 개인의 예후를 극적으로 변경시키는 반면, 고도의 복합 복용법을 비롯한 현재의 요법에 대한 많은 결점 및 매우 심각할 수 있는 부작용이 존재한다(문헌[A. Carr and D. A. Cooper, Lancet 2000 356(9239):1423-1430]). 또한, 이러한 다중약물 요법은 HIV-1을 제거하지 못하고, 장기 치료는 통상적으로 다중약물 내성을 야기하므로, 장기 요법에서의 이의 이용을 제한한다. 보다 양호한 HIV-1 치료를 제공하기 위해 NRTI, NNRTI, PI 및 바이러스 융합 억제제과 조합되어 사용될 수 있는 신규한 치료법의 개발이 여전히 우선적으로 필요하다.

전형적으로 적합한 NRTI는 지도부딘(AZT; 레트로비르(RETROVIR, 등록상표명)); 다이다노신(ddl; 비덱스(VIDEX, 등록상표명)); 잘시타빈(ddC; 히비드(HIVID, 등록상표명)); 스타부딘(d4T; 제리트(ZERIT, 등록상표명)); 라미부딘(3TC; 에피비르(EPIVIR, 등록상표명)); 아바카비르(지아겐(ZIAGEN, 등록상표명)); 아데포비르 다이피복실(bis(POM)-PMEA; 프레본(PREVON, 등록상표명)); 유럽특허 제0358154호 및 제0736533호에 개시된 뉴클레오시드 역전사 효소 억제제인 로부카비르(BMS-180194); 바이오켐 파마(Biochem Pharma)에서 개발중인 역전사 효소 억제제인 BCH-10652(BCH-10618 및 BCH-10619의 라세미 혼합물의 형태); 트라이앵글 파마슈티컬스(Triangle Pharmaceuticals)에서 개발중인 에미트라이시타빈[(-)-FTC]; 비욘 파마슈티컬스(Vion Pharmaceuticals)에 인가된 β-L-FD4(소위 β-L-D4C로 지칭되고, β-L-2',3'-다이클레옥시-5-플루오로-사이티덴으로 명명됨); 유럽특허 제0656778호에 개시되고, 트라이앵글 파마슈티컬스에 인가된 푸린 뉴클레오시드인 DAPD((-)-β-D-2,6-다이아미노-푸린 다이옥솔란); 및 유.에스. 바이오사이언스 인코포레이티드(U.S. Bioscience Inc.)에서 개발중인 산에 안정한 푸린계 역전사 효소 억제제인 로데노신(FddA; 9-(2,3-다이데옥시-2-플루오로-β-D-트레오-펜토푸라노실)아데닌)을 포함한다.

3개의 NNRTI가 미국에서 승인되었다: 뵈링거 인겔하임(Boehringer Ingelheim; BI)에서 시판중인 네비라핀(BI-RG-587; 비라문(VIRAMUNE, 등록상표명)); 화이자(Pfizer)에서 시판중인 델라비라딘((BHAP, U-90152; 레스크립터(RESCRIPTOR, 등록상표명)); 비엠에스(BMS)에서 시판중인 벤족사진-2-온인 에파비렌즈(DMP-266, 수스티바(SUSTIVA, 등록상표명)). 현재 조사중에 있는 다른 NNRTI는 화이자에 의해 개발중인 푸로피리딘-티오-피리미드인 PNU-142721; 시오노기(Shionogi) 및 화이자에 의한 카프라비린(S-1153 또는 AG-1549; 5-(3,5-다이클로로페닐)-티오-4-이소프로필-1-(4-피리딜)메틸-1H-이미다졸-2-일메틸 카본에이트); 미츠비시 케미칼 캄파니(Mitsubishi Chemical Co.) 및 트라이앵글 파마슈티컬스에 의한 에미비린(MKC-442; (1-(에톡시-메틸)-5-(1-메틸에틸)-6-(페닐메틸)-(2,4(1H,3H)-피리미딘다이온)); NIH의 미국특허 제5,489,697호에 개시되고, 사라워크/어드밴스트 라이프 사이언시스(Sarawak/Advanced Life Sciences)에 인가된 쿠마린 유도체인 (+)-칼라놀리드 A(NSC-675451) 및 B; 티보텍-비르코(Tibotec-Virco) 및 존슨 앤드 존슨(Johnson & Johnson)에 의한 에트라비린(TMC-125; 4-[6-아미노-5-브로모-2-(4-사이아노-페닐아미노)-피리미딘-4-일옥시]-3,5-다이메틸-벤조나이트릴) 및 DAPY(TMC120; 4-{4-[4-((E)-2-사이아노-비닐)-2,6-다이메틸-페닐아미노]-피리미딘-2-일아미노}-벤조나이트릴); 뵈링거-인겔하임에 의한 BILR-355 BS(12-에틸-8-[2-(1-하이드록시-퀴놀린-4-일옥시)-에틸]-5-메틸-11,12-다이하이드로-5H-1,5,10,12-테트라아자-다이벤조[a,e]사이클로옥텐-6-온; 패러다임 파마슈티칼스(Paradigm Pharmaceuticals)에 의한 PHI-236(7-브로모-3-[2-(2,5-다이메톡시-페 닐)-에틸]-3,4-다이하이드로-1H-피리도[1,2-a][1,3,5]트라이아진-2-티온) 및 PHI-443(TMC-278; 1-(5-브로모-피리딘-2-일)-3-(2-티오펜-2-일-에틸)-티오우레아를 포함한다.

본원에 사용된 "단백질 분해 효소 억제제"("PI")는 바이러스 다중단백질 전구체(예를 들어, 바이러스 GAG 및 GAG-Pol 다중단백질)의, 감염성 HIV-1에서 발견되는 개별적인 기능성 단백질로의, 단백질 분해적 분열에 필요한 효소인 HIV-1 단백질 분해 효소의 억제제를 의미한다. HIV 단백질 분해 효소 억제제는 펩티드유사성(peptidomimetic) 구조, 고분자량(7,600달톤) 및 실질적인 펩티드 특징을 갖는 화합물, 예를 들어, 크릭시반(CRIXIVAN, 등록상표명), 및 비펩티드 단백질 분해 효소 억제제, 예를 들어, 비라셉트(VIRACEPT, 등록상표명)를 포함한다.

전형적으로 적합한 PI는 로슈로부터의 인비라세(INVIRASE, 등록상표명)와 같은 경질 겔 캡슐 및 포르토바세(FORTOVASE, 등록상표명)와 같은 연질 겔 캡슐 형태의 사퀴나비르; 노르비르(NORVIR)로서 아보트 래보러토리스(Abbott Laboratories)에서 시판중인 리토나비르(ABT-538); 또한 아보트에서 시판중인 로피나비르(ABT-378); 아보트 래보러토리스에서 시판중인 로피나비르 및 하위 치료 용량의 리토나비르의 병용-제형인 칼레트라(KALETRA, 등록상표명); 메르크 앤드 캄파니(Merck & Co.)에서 크릭시반(등록상표명)으로 시판중인 인디나비르(MK-639); 아구론 파마슈티칼스 인코포레이티드(Agouron Pharmaceuticals, Inc.)에서 비라셉트(VIRACEPT, 등록상표명)로 시판중인 넬프나비르(AG-1343); 베르텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드(Vertex Pharmaceuticals, Inc.) 및 GSK에서 아게네라세(AGENERASE, 등록상표 명)로 시판중인 암프레나비르(141W94); BI에서 압티부스(APTIVUS, 등록상표명)로 시판중인 티프라나비르(PNU-140690); BMS에 의한 라시나비르(BMS-234475/CGP-61755); BMS에 의해 제 2 세대 HIV-1 PI로서 개발중인 아자펩티드인 BMS-2322623; GSK 및 베르텍스 간의 협력하에 개발중인 GW-640385X(VX-385); 아구론/화이자에 의해 예비임상 개발중인 AG-001859; 스미토모 파마슈티칼스(Sumitomo Pharmaceuticals)에 의해 개발중인 SM-309515를 포함한다.

예비임상 개발중인 추가의 PI는 BMS에 의한 N-사이클로알킬글리신, 에난타 파마슈티칼스(Enanta Pharmaceuticals)에 의한 α-하이드록시아릴부탄아마이드; α-하이드록시-γ-[[(탄소환형- 또는 헤테로환형-치환된)아미노)카본일]알칸아마이드 유도체; 메르크(Merck)에 의한 γ-하이드록시-2-(플루오로알킬아미노카본일)-1-피페라진펜탄아마이드; 화이자에 의한 다이하이드로피론 유도체 및 α- 및 β-아미노산 하이드록시에틸아미노 설폰아마이드; 및 프로사이언(Procyon)에 의한 N-아미노산 치환된 L-리신 유도체를 포함한다.

표적 세포내로의 HIV의 도입은 CD-4 세포 표면 수용체 및 CCR5(M-향성 변종) 및 CXCR4(T-향성 변종) 케모카인 보조-수용체를 필요로 한다. 케모카인으로의 바이러스 결합을 봉쇄하는 케모카인 길항제는 바이러스 감염의 유용한 억제제이다. 다케다(Takeda)의 확인된 TAK-779(문헌[M. Shiraishi et al., J. Med. Chem. 2000 43(10):2049-2063; M. Babba et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 1999 96:5698-5703]) 및 TAK-220(문헌[C. Tremblay et al., Antimicrob. Agents Chemother. 2005 49(8):3483-3485])은 잠재적 CCR5 길항제이다. 국제특허공개 제00/39125호(아모 르(D. R. Armour) 등) 및 제01/90106호(페로스(M. Perros) 등)는 잠재적이고 선택적인 CCR5 길항제인 헤테로환형 화합물을 개시한다. 미라비록(Miraviroc)(영국특허 제427,857호; MVC)은 화이자에 의해 상 III 임상 실험으로 발전되고, HIV-1 단리물 및 실험실 변종에 대한 활성을 보여준다(문헌[P. Dorr et al., Antimicrob. Agents Chemother. 2005 49(11):4721-4732; A. Wood and D. Armour, Prog. Med. Chem. 2005 43:239-271; C. Watson et al., Mol. Pharm. 2005 67(4): 1268-1282; M. J. Macartney et al., 43^rd Intersci. Conf. Antimicrob. Agents Chemother. September 14-17, 2003, Abstract H-875]).

쉐링(Schering)은 Sch-351125(SCH-C)를 상 I/II 임상 연구로 발전시키고, 보다 강력한 사후 화합물, 비크로비록(Vicroviroc)(Sch-417690, SCH-D)의 상 I 연구의 발전을 보고하였다(문헌[S. W. McCrombie et al., WO00/066559; B. M. Baroudy et al., WO00/066558; A. Palani et al., J. Med. Chem. 2001 44(21):3339-3342; J. R. Tagat et al., J. Med. Chem. 2001 44(21):3343-3346; J. A. Este, Cur. Opin. Invest. Drugs 2002 3(3):379-383; J. M. Struzki et al., Proc. Nat. Acad Sci. USA 2001 98:12718-12723]). 메르크는 CCR5 수용체에 대한 양호한 친화성 및 강력한-HIV 활성을 갖는 (2S)-2-(3-클로로페닐)-1-N-(메틸)-N-(페닐설폰일)아미노]-4-[스피로(2,3-다이하이드로벤조티오펜-3,4'-피페리딘-1'-일)부탄 S-옥사이드(1) 및 관련 유도체의 제조를 개시한다(문헌[P. E. Finke et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:265-270; P. E. Finke et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:2469-2475; P. E. Finke et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:2475-2479; J. J. Hale et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:2741-22745; D. Kim et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:3099-3102; C. L. Lynch et al., Org Lett. 2003 5:2473-2475; R. S. Veazey et al., J. Exp. Med. 2003 198:1551-1562]). GSK-873140(ONO-4128, E-913, AK-602)은 구마모토 대학(Kumamoto University)에서 시작된 프로그램에서 확인되었고(문헌[K. Maeda et al., J. Biol. Chem. 2001 276:35194-35200; H. Nakata et al., J. Virol. 2005 79(4):2087-2096]), 임상 실험으로 발전되었다. 국제특허공개 제00/166525호; 제00/187839호; 제02/076948호; 제02/076948호; 제02/079156호, 제2002/070749호, 제2003/080574호, 제2003/042178호, 제2004/056773호 및 제2004/018425호에서, 아스트라 제네카(Astra Zeneca)는 CCR5 길항제인 4-아미노 피페리딘 화합물을 개시한다. 미국특허공개 제2005/0176703호(2005년 8월 11일자로 공개됨)에서, 가브리엘(S. D. Gabriel) 및 로트스타인(D. M. Rotstein)은 HIV 세포 도입을 방지할 수 있는 헤테로환형 CCR5 길항제를 개시하였다. 미국특허공개 제2006/0014767호(2006년 1월 19일)에서, 리(E. K. Lee) 등은 HIV 세포 도입을 방지할 수 있는 헤테로환형 CCR5 길항 물질을 개시하였다.

결합 억제제는 바이러스 외피 단백질 및 케모카인 수용체 또는 CD40 단백질 사이의 상호작용을 효과적으로 차단한다. TNX-355는 CD4의 도메인 2상의 형태적 에피토프(epitope)에 결합한 인간화된 IgG4 단일클론 항체이다(문헌[L. C. Burkly et al., J. Immunol. 1992 149:1779-87]). TNX-355는 CCR5-, CXCR4- 및 이중/혼합 된 향성 HIV-1 변종의 바이러스 결합을 억제할 수 있다(문헌[E. Godofsky et al., In Vitro Activity of the Humanized Anti-CD4 Monoclonal Antibody, TNX-355, against CCR5, CXCR4, and Dua1-Tropic Isolates and Synergy with Enfuvirtide, 45th Annual Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy(ICAAC). December 16-19, 2005, Washington DC. Abstract # 3844; D. Norris et al., TNX-355 in Combination with Optimized Background Regime(OBR) Exhibits Greater Antiviral Activity than OBR Alone in HIV-Treatment Experienced Patients, 45th Annual Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy (ICAAC). December 16-19, 2005, Washington DC. Abstract # 4020.]).

다른 항바이러스제는 하이드록시우레아, 리바비린, IL-2, IL-12, 펜타푸시드를 포함한다. 하이드록시우레아(드록시아(Droxia)), 리보뉴클레오시드 3인산염 환원효소 억제제는 다이다노신의 활성에 상승 효과를 주는 것으로 나타났고, 스타부딘과 함께 연구되고 있다. IL-2(알데스류킨; 프로류킨(PROLEUKIN, 등록상표명))는 아지노모토(Ajinomoto)의 유럽특허 제EP0142268호, 다케다(Takeda)의 제EP0176299호, 및 치론(Chiron)의 미국특허 제RE 33,653호, 제4,530,787호, 제4,569,790호, 제4,604,377호, 제4,748,234호, 제4,752,585호 및 제4,949,314호에 개시되어 있다. 펜타푸시드(푸전(FUZEON, 등록상표명))는 표적 막으로의 HIV-1의 융합을 억제하는 36-아미노산 합성 펩티드이다. 펜타푸시드(3 내지 100mg/일)는 에파비렌즈 및 2 PI와 함께 삼중 병용 요법에 대한 내성이 있는 HIV-1 양성 환자로의 연속적인 피하 주입 또는 주사로서 제공된다. 100mg/일의 사용이 바람직하다. 리바비린, 1-β-D-리보푸라노실-1H-1,2,4-트라이아졸-3-카복스아마이드는 시판중이다.

본원에 통상적으로 사용된 약어는 다음과 같다: 아세틸(Ac), 수성(aq.), 대기(Atm), tert-부톡시카본일(Boc), 다이-tert-부틸 피로카본에이트 또는 Boc 무수물(BOC₂O), 벤질(Bn), 부틸(Bu), 화학 초록 등록 번호(Chemical Abstracts Registration Number; CASRN), 벤질옥시카본일(CBZ 또는 Z), 1,5-다이아자바이사이클로[4.3.0]논-5-엔(DBN), 1,8-다이아자바이사이클로[5.4.0]운데크-7-엔(DBU), N,N'-다이사이클로헥실카보다이이미드(DCC), 1,2-다이클로로에탄(DCE), 다이클로로메탄(DCM), 다이에틸 아조다이카복실레이트(DEAD), 다이-이소-프로필아조다이카복실레이트(DIAD), 다이-이소-부틸알루미늄하이드라이드(DIBAL 또는 DIBAL-H), 다이-이소-프로필에틸아민(DIPEA), N,N-다이메틸 아세트아마이드(DMA), 4-N,N-다이메틸아미노피리딘(DMAP), N,N-다이메틸폼아마이드(DMF), 다이메틸 설폭사이드(DMSO), 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(EDCI), 에틸(Et), 에틸 아세테이트(EtOAc), 에탄올(EtOH), 2-에톡시-2H-퀴놀린-1-카복실산 에틸 에스터(EEDQ), 다이에틸 에터(Et₂O), O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N, N,N'N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 아세트산(HATU), 아세트산(HOAc), 1-N-하이드록시벤조트라이아졸(HOBt), 고압 액체 크로마토그래피(HPLC), 이소-프로판올(IPA), 메탄올(MeOH), 융점(mp), MeSO₂-(메실 또는 Ms), 메틸(Me), 아세토나이트릴(MeCN), m-클로로퍼벤조산(MCPBA), 질량 스펙트럼(ms), 메틸 tert-부 틸 에터(MTBE), N-메틸모폴린(NMM), N-메틸피롤리돈(NMP), 페닐(Ph), 프로필(Pr), 이소-프로필(i-Pr), 제곱 인치 당 파운드(psi), 피리딘(pyr), 실온(rt 또는 RT), 포화된(satd.), tert-부틸다이메틸실릴 또는 t-BuMe₂Si(TBDMS), 트라이에틸아민(TEA 또는 Et₃N), 트라이플레이트 또는 CF₃SO₂-(Tf), 트라이플루오로아세트산(TFA), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU), 박막 크로마토그래피(TLC), 테트라하이드로푸란(THF), 트라이메틸실릴 또는 Me₃Si(TMS), p-톨루엔설폰산 1수화물(TsOH 또는 pTsOH), 4-Me-C₆H₄SO₂- 또는 토실(Ts), N-우레탄-N-카복시언하이드라이드(UNCA). 접두어 노말(n-), 이소(i-), 2차(sec-), 3차(tert-) 및 네오(neo-)를 비롯한 전통적인 명명법이 알킬 잔기와 함께 사용되는 경우 이들의 통상적인 의미를 갖는다(문헌[J. Rigaudy and D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.]).

본 발명에 의해 포괄되고 본 발명의 범위내인 대표적인 화합물의 예가 하기 표에 제공되었다. 이러한 예 및 이어지는 제조 방법은 당업자가 본 발명을 보다 명백히 이해하고 실시하도록 제공되었다. 이러한 예는 본 발명의 범위를 제한하려는 것이 아니고, 단지 예시적이고 대표적인 것으로 간주되어야 한다.

일반적으로, 본원에 사용된 명명법은 IUPAC 체계적 명명법의 생성을 위한 바일스타인 인스티튜트(Beilstein Institute) 전산화된 시스템인 오토놈(AUTONOM; 상표명)을 기초로 한다. 도시된 화학식 및 화학식에 제공된 명칭에 불일치가 있는 경우, 도시된 화학식에 더욱 비중을 둔다. 또한, 화학식 또는 화학식의 일부분의 입체화학이, 예를 들어 굵은 글씨체 또는 점선으로 지시되지 않은 경우, 화학식 또는 화학식의 일부분은 이의 모든 입체 이성질체를 포괄하는 것으로서 해석되어야 한다.

본 발명의 화합물은 하기 제시되고 기술된 예시적 합성 반응식에 도시된 다양한 방법에 의해 제조될 수 있다. 이들 화합물의 제조시 사용되는 출발 물질 및 시약은 일반적으로 상업적 공급업체, 예컨대 알드리치 케미칼 캄파니(Aldrich Chemical Co.)에서 시판중이거나, 또는 예컨대 문헌[Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, Volumes 1-21; R. C. LaRock, Comprehensive Organic Transformations, 2^nd edition, Wiley-VCH, New York 1999; Comprehensive Organic Synthesis, B. Trost and I. Fleming(Eds), vol. 1-9 Pergamon, Oxford, 1991; Comprehensive Heterocyclic Chemistry, A. R. Katritzky and C. W. Rees(Eds), Pergamon, Oxford 1984, vol. 1-9; Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, A. R. Katritzky and C. W. Rees(Eds), Pergamon, Oxford 1996, vol. 1-11; and Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40]에 제시된 절차에 따라서 당업자에게 공지된 방법에 의해 제조된다. 하기 합성 반응식은 단지 일부 방법을 예시하는 것으로서, 이에 의해 본 발명의 화합물이 합성될 수 있고, 이러한 합성 반응식은 다양하게 개질될 수 있고, 본원에 포함된 개시내용을 참고하여 당업자에 의해 인식될 것이다.

합성 반응식의 출발 물질 및 중간체는 필요할 경우, 비제한적으로 여과, 증류, 결정화, 크로마토그래피 등을 비롯한 통상적인 기술에 의해 단리되고 정제될 수 있다. 이러한 물질은 물리적 상수 및 스펙트럼 데이터를 비롯한 통상적인 수단을 사용하여 특징화될 수 있다.

달리 지시되지 않는 한, 본원에 기술된 반응은 바람직하게는 불활성 대기하에 대기압 및 약 -78 내지 약 150℃의 반응 온도 범위에서, 보다 바람직하게는 약 0 내지 약 125℃에서, 가장 바람직하고 편리하게는 약 실온(상온), 예를 들어 약 20℃에서 실행된다.

하기 반응식의 일부 화합물은 일반화된 마쿠쉬(Markush) 구조로 도시되어 있지만, 당업자는 R 기의 성질 및 개수가 합성 반응식의 적용성을 변화시키지 않음을 즉시 인지할 것이다. 반응식의 화학식 및 반응 순서는 예시적으로 의도되고, 첨부된 청구의 범위에 정의된 본 발명의 범위를 제한하려는 것이 아니다. 또한, 반응 조건은 예시적이고, 선택적인 조건이 널리 공지되어 있다. 하기 실시예의 반응 순서는 청구의 범위에 제시된 본 발명의 범위를 제한하는 것을 의미하지는 않는다.

Y가 O인 매달린 트라이아졸롤 쇄가 아릴옥시 잔기에 대해 메타 위치인 본 발명의 화합물(반응식 A)은 적절하게 치환된 페놀에 의한 2-플루오로의 친핵성 방향족 치환, 및 N-O 결합의 분해를 야기하는 조건하에 벤즈알데하이드 옥심을 사용한 4-플루오로의 후속 치환을 포함하는 2 단계 공정에 의해, 2,3,4-트라이플루오로나이트로벤젠 또는 2,4-다이나이트로벤젠으로부터 제조될 수 있는 4-나이트로-3-아릴옥시페놀(A-5)로부터 제조된다(문헌[R. D. Knudsen and H. R. Snyder, J. Org. Chem. 1974 39(23):3343-3346]). 당업자는 상기 반응이 아릴 고리상의 다양한 치환기 및 치환 패턴을 가능하게 하도록 다양한 페놀을 사용하여 수행될 수 있음을 인식할 것이다.

플루오로나이트로방향족 화합물은 약한 친핵체에 의한 친핵성 공격에 통상적으로 민감한 것으로 공지되어 있다. 불소 치환기는 다른 할로겐 치환기보다 일반적으로 상당히 보다 불안정하다. 물 및 하이드록사이드와 같은 강한 친핵체가 플루오라이드를 치환하지 못하는 반면에, 페놀, 이미다졸, 아민, 티올 및 일부 아마 이드와 같은 약학 친핵체는 심지어 실온에서도 용이한 치환을 겪는다(문헌[D. Boger et al., Biorg. Med. Chem. Lett. 2000 10: 1471-75; F. Terrier Nucleophilic Aromatic Displacement: The Influence of the Nitro Group VCH Publishers, New York, NY 1991]). 1994년 3월 8일자로 허여된 파펜푸스(Papenfuhs) 등의 미국특허 제5,292,967호는 A-2를 알칼리 금속 하이드록사이드 및 알칼리 토 금속 하이드록사이드로 처리함으로써 양호한 수율 및 높은 선택도를 갖는, 2,3-다이플루오로-6-나이트로-페놀의 제조 방법을 개시한다. 마리오트(J. H. Marriott) 등(문헌[J. Chem. Soc. Perkin I 2000 4265-4278])은 압도적으로 파라 위치의 펜타플루오로-나이트로-벤젠으로의 상-전이 조건(DCM/aq NaOH/Bu₄N⁺HSO₄ ^-/RT)하의 알칼리 알콕사이드의 첨가를 개시한다. 2,4-다이플루오로-나이트로-벤젠은 비-레지오선택적으로 반응하여 파라 및 오르토 치환 둘다를 가능하게 한다. 메탄올중 나트륨 메톡사이드와 2,3,4-트라이플루오로나이트로벤젠의 반응은 상응하는 2- 및 4-모노메톡시 및 2,4-다이메톡시 유도체의 분리할 수 없는 혼합물을 가능하게 하는 것으로 보고되었다(문헌[P. M. O'Neill et al., J. Med. Chem. 1994 37:1362-70]). 아민 친핵체에 의한 2,4-다이플루오로-나이트로벤젠의 오르토-불소의 치환이 또한 보고되었다(문헌[W. C. Lumma, Jr. et al., J. Med. Chem. 1981 24:93-101]).

4-메틸-2,4-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-3-온 잔기의 도입은 반응식 B에 도시된 바와 같이 제조된 3-요오도메틸-5-메탄설폰일-4-메틸-4H-[1,2,4]트라이아졸 을 사용한 A-5의 O-알킬화에 의해 수행된다. 에틸 하이드록시 아세테이트 및 4-메틸-3-티오세미카바자이드의 축합은 S-알킬화된 5-에틸-4-메틸-2,4-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-3-티온(B-3)을 생성하고(단계 2), 클로로메틸 화합물로 전환되고(단계 3), 설폰으로 산화되고(단계 4), 핀켈스타인(Finkelstein) 반응을 통해 목적 요오도메틸 화합물 B-5b로 전환된다(단계 5).

A-7a의 나이트로 치환기는 다이아조화되고 이어서 다양한 친핵체에 의해 치환될 수 있는 상응하는 아민으로의 환원에 의해 다른 작용기로 용이하게 전환될 수 있다. 나이트로 기의 환원은 다양한 널리 공지된 환원제, 예를 들어, 활성화된 금속, 예컨대 활성화된 철, 아연 또는 주석(예를 들어, 철 분말을 묽은 염산과 같은 묽은 산으로 세척함으로써 제조됨)을 사용하여 수행될 수 있다. 이러한 환원은 또한 수소화 반응을 촉진하는데 효과적인 금속, 예컨대 플래티늄 또는 팔라듐의 존재하에 불활성 용매의 존재하에 수소 대기하에 수행될 수 있다. 나이트로 화합물을 아민으로 환원하는데 사용될 수 있는 다른 시약은 AlH₃-AlCl₃, 하이드라진 및 촉매, TiCl₃, Al-NiCl₂-THF, 폼산 및 Pd/C, 및 설파이드, 예컨대 NaHS, (NH₄)₂S 또는 폴리설파이드(즉, 진(Zinn) 반응)를 포함한다. 방향족 나이트로 기는 NiCl₂ 및 CoCl₂와 같은 촉매의 존재하에 NaBH₄ 또는 BH₃을 사용하여 환원되었다. 따라서, 예를 들어 환원은 충분히 활성화된 금속, 예컨대 Fe 및 용매 또는 희석제, 예컨대 H₂O 및 알콜, 예를 들어 MeOH 또는 EtOH의 존재하에 50 내지 150℃의 범위의 온도, 편리하게는 약 70℃에서 나이트로 기를 가열함으로써 수행될 수 있다(문헌[J. March, Advanced Organic Chemistry, John Wiley & Sons: New York, NY, 1992, p 1216]).

아릴 할라이드로의 아릴 아민의 전환은 아민의 다이아조화에 의해 수행되었고, 할라이드를 사용한 생성된 다이아조늄 기의 치환은 표준 샌드마이어(Sandmeyer) 조건을 사용하여 수행되었다. 아릴 아민의 다이아조화는 아민을, 묽은 HCl중 아민의 용액을 0 내지 10℃에서 나트륨 나이트라이트 수용액으로 처리함으로써 통상적으로 형성된 아질산으로 처리함으로써 수행된다. 클로라이드 대이온이 바람직하지 않은 경우, 다른 무기 산, 예컨대 황산 및 인산이 사용될 수 있다. 아민의 다이아조화는 유기 용매, 예컨대 HOAc, MeOH, EtOH, 폼아마이드 및 DMF중에서, 아질산 에스터, 예컨대 부틸 나이트라이트 및 펜틸 나이트라이트의 존재하에 수행될 수 있다(문헌[K. Schank, Preparation of diazonium groups, In The chemistry of diazonium and diazo groups, Part 2; S. Patai, Ed.; John Wiley & Sons: New York, NY, 1978, p. 647-648]). 생성된 다이아조늄 염의 염소 또는 브롬으로의 전환은 각각 HCl/Cu(I)Cl 또는 HBr/Cu(I)Br중에서 수행된다. 아릴 브로 마이드 및 클로라이드는 또한 아민을 65℃에서 tert-부틸 나이트라이트 및 무수 CuCl₂ 또는 CuBr₂로 처리하거나, 또는 실온에서 tert-부틸 티오나이트라이트 또는 tert-부틸-티오나이트레이트 및 CuCl₂ 또는 CuBr₂로 처리함으로써 1차 방향족 아민으로부터 제조될 수 있다(문헌[J. March, Advanced Organic Chemistry, John Wiley & Sons: New York, NY, 1992, p 723]).

본 발명의 다른 화합물은 펜옥시아세트산의 4-위치에서 알킬 또는 사이클로알킬 기로 치환된다. 알킬 및 알켄일 기는 할로아렌과의 유기아연 할라이드, 다이알킬 아연 또는 다이알켄일 아연의 네기쉬(Negishi) 커플링을 이용하여 도입될 수 있고, 트라이플레이트는 아렌으로의 알킬 기의 부착을 위한 효과적인 수단이다(문헌[E.-I. Negishi, Acc. Chem. Res. 1982 15:340-348]). 상기 반응은 팔라듐 Pd(0)에 의해 촉진되고, 팔라듐은 바람직하게는 Pd(dppf)Cl₂ 및 Pd(dppe)Cl₂를 비롯한 두자리 리간드로 결찰된다(문헌[J. M. Herbert Tetrahedron Lett. 2004 45:817-819]). 전형적으로, 반응은 불활성인 비양성자성 용매중에서 수행되고, 통상적인 에터성 용매는 다이옥산 및 DME를 포함하고, THF가 적합하다. 반응은 통상적으로 승온에서 실행된다. 네기쉬 반응이 이용되어 메틸 및 에틸 치환기를 도입한다.

4-사이클로프로필 치환기는 에텐일트라이메틸주석 매개된 치환물의 아릴 브로마이드와의 팔라듐-촉매화된 커플링(스틸(Stille) 반응) 및 생성된 올레핀의 사이클로프로판화에 의해 2 단계에 도입된다. 사이클로프로판화는 다이아조 메탄의 Pd(OAc)₂ 촉매화된 고리 첨가 반응에 의해 달성된다. 다른 사이클로프로판화는 당 업계에 널리 공지되어 있고, 상기 기질에 적용될 수 있다.

스틸 크로스-커플링 반응은 아릴 또는 비닐 스탄난과 아릴 또는 비닐 할라이드 또는 -설폰일옥시 화합물의 팔라듐-촉매화된 커플링이다(문헌[J. K. Stille Angew. Chem. Int. Ed. 1986 25:508-524; A. F. Littke and G. C. Fu Angew. Chem. Int. Ed. 1999, 38:2411-2413]). 시판중인 Pd 시약, 예컨대 Pd(PPh₃)₄, Pd(OAc)₂ 및 Pd₂(dba)₃이 사용될 수 있다. 포스핀 리간드가 팔라듐 촉매의 성분이 아닌 경우에, 포스핀 리간드는 유용한 속도 촉진제이다. 비교적 불충분한 전자-공여 리간드가 가장 높은 속도 촉진을 제공하는 경향이 있다(문헌[V. Farina and B. Krishnan, J. Am. Chem. Soc. 1991 113:9585-9595]). CuI를 비롯한 첨가제가 속도 촉진을 제공하기 위하여 혼입된다(문헌[V. Farina et al., J. Org. Chem. 1994 59:5905-5911]). 반응은 전형적으로 승온에서 비양성자성 용매중에서 수행된다.

2-아릴옥시-페놀은 매달린 트라이아졸론 쇄가 아릴옥시 잔기에 대해 오르토 위치인 본 발명의 화합물에 대한 전구체이다. 2-아릴옥시-페놀은 당업계에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 다이아릴 에터의 제조가 검토되었다(문헌[J. S. Sawyer, Recent Advances in Diaryl Ether Synthesis, Tetrahedron 2000 56:5045-5065]). 아릴옥시 에터의 도입은 종종 구이아콜에 의한, 이탈기 및 전자 유인성 기, 예컨대 3-플루오로-이소-프탈로나이트릴[CASRN 453565-55-4]로 치환된 방향족 고리상의 직접적인 S_NAr 치환 반응 및 생성된 페놀의 탈메틸화에 의해 수행될 수 있다. 본 발명의 화합물에 또한 유용한 다른 아릴 플루오라이드는 비제한적으로 3-클로로-5-플루오로-벤조나이트릴[CASRN 327056-73-5], 3-다이플루오로메틸-3-플루오로-벤조나이트릴[CASRN 867366-77-6] 및 3,5-다이플루오로-벤조나이트릴[CASRN 64248-63-1]을 포함한다(문헌[L. H. Jones and C. Mowbray, Syn. Lett. 2006, 9:1404-1406]).

아릴 에터는 또한 치환된 벤젠 보론산 및 페놀의 Cu(OAc)₂ 촉매화된 축합에 의해 효과적으로 제조될 수 있다(문헌[D. A. Evans et al., Tetrahedron Lett. 1998 39:2937-2940 and D. M. T. Chan et al., Tetrahedron Lett. 1998 39:2933-2936]). 다양한 다른 치환기를 갖는 벤젠 보론산이 널리 이용가능하다. 선택적으로, Cu(I) 염에 의해 촉매화된 울만(Ullmann) 다이아릴 에터 합성의 변형(문헌[J.-F. Marcoux et al., J. Am. Chem. Soc. 1997 119:10539-540; E. Buck et al., Org. Lett. 2002 4(9):1623-1626]) 또는 팔라듐-촉매화된 커플링 과정이 또한 보고되었다(문헌[G. Mann et al., J. Am. Chem. Soc. 1999 121:3224-3225]). 이러한 프로 토콜은 S_NAr 치환을 위해 아릴 플루오라이드를 활성화하기 위해서 강한 전기음성 치환기를 필요로 하지 않는다. 당업자는 최적 과정이 커플링되는 아릴 고리상의 치환기의 성질 및 위치에 따라 변할 수 있고, 커플링에 유용한 조건이 과도한 실험 없이 확인될 수 있음을 인식할 것이다.

매달린 트라이아졸론 쇄가 아릴옥시 잔기에 대해 오르토 위치인 본 발명의 화합물을 생성하는 선택적인 경로는 적절하게 치환된 페놀로 처리된 오르토 플루오로 벤즈알데하이드 유도체 D-1d를 이용하여 폼일 치환기에 대해 오르토 위치인 불소의 치환을 야기하는 것이다. 바이엘-빌리거(Baeyer-Villiger) 산화 및 이어지는 생성된 폼에이트 에스터의 가수분해는 D-2a의 폼일 기를 반응식 A에 도시된 바와 같이 제조된 A-6일 수 있는 페놀 D-2b로 전환하였다. 유사한 변형을 거쳐 본 발명의 화합물을 생성할 수 있는 다른 유용한 출발 물질은 2,4-다이플루오로-3-메틸-나이트로벤젠[CASRN 79562-49-5] 및 3-클로로-2,4-다이플루오로-나이트로벤젠[CASRN 3847-58-3]을 포함한다.

치환된 아로일 클로라이드를 사용하는 치환된 페놀의 아실화에 의한 2-아로일-페놀 중간체의 제조는 반응식 E에 도시된 바와 같은 프라이스(Fries) 재배열(시퀀스 (a)), 또는 아니솔 유도체의 오르토-금속화 및 적절하게 치환된 N,O-다이메틸-N-하이드록시-벤즈아마이드와의 축합(시퀀스 (b))으로 이어진다(문헌[P. G. Wyatt et al., J. Med. Chem. 1995 38(10):1657-1665; J. H. Chan et al., J. Med Chem. 2004 47(5):1175-1182; K. Romines et al., J. Med. Chem. 2006 49(2):727-739; C. W. Andrews et al., WO01/017982 published March 15, 2002; and J. H. Chan et al., WO02/070470, published September 12, 2002]). 상기 참고문헌은 이의 전체 내용이 참고로서 본원에 혼입되어 있다.

C-3b, D-2b 또는 E-1로의 4-메틸-2,4-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-3-온 잔기의 도입은 3-요오도메틸-5-메탄설폰일-4-메틸-4H-[1,2,4]트라이아졸을 사용한 F-1c의 O-알킬화 및 이어지는, 반응식 A에 도시된 바와 같은 메틸 설폰의 가수분해에 의해 수행된다. 적절하게 치환된 페놀 F-1c는 또한 tert-부틸 브로모아세테이트에 의해 알킬화되어, 이의 전체 내용이 참고로서 본원에 혼입되고, 2004년 9월 30일자로 공개된 둔 등의 미국특허공개 제2004/0192704호에 기술된 바와 같이 트라이아졸론으로 전환될 수 있다(반응식 F, 단계 4 내지 7).

2개의 탄소 연결기(X=Y=CH₂)를 사용한 트라이아졸론의 제조는 벤즈알데하이드 D-2a와 같은 중간체의 동족체화에 의해 제조될 수 있는 적절하게 치환된 2-아릴-프로피온산상에 트라이아졸론 고리를 생성시킴으로써 용이하게 수행될 수 있다. 상응하는 알콜 및 브로마이드 치환물로의 D-2a의 환원은 tert-부틸 아세테이트에 의해 알킬화되어 F-2a(X=CH₂)를 생성할 수 있는 F-1b를 생성한다. 당업자는 D-2a를 F-2b로 전환(예를 들어, 에틸 (트라이페닐-λ⁵-포스판일리덴)-아세테이트를 사용한 호너-에몬스-워즈워드(Horner-Emmons-Wadsworth) 동족체화 및 이어지는 올레핀의 환원)시키거나, 또는 F-1a를 F-2b로 전환(예를 들어, tert-부틸 메틸 말론에이트를 사용한 알킬화, 및 이어지는 가수분해 및 탈카복실화)시키기 위한 선택적인 반응 순서가 공지되어 있음을 인식할 것이다.

치환된 벤질아미노-4-메틸-2,4-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-3-온 유도체 G-2는 5-위치에 이탈기를 함유하는 4-메틸-2,4-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-3-온 유도체(G-1)를 축합시킴으로써 제조될 수 있다. 예를 들어, 5-브로모-4-메틸-2,4-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-3-온[CASRN 22354-80-9]은 촉매적인 팔라듐 종의 존재하에 아민 G-3으로 처리될 수 있다. (헤테로)아릴 고리상의 이탈기의 치환에 의한 1차 또는 2차 아민의 도입은 부크월드-하트위그(Buchwald-Hartwig) 팔라듐-촉매화된 크로스-커플링 과정에 의해 수행될 수 있다(문헌[J. P. Wolfe and S. L. Buchwald, J. Org. Chem 2000 65:1144-1157 and Acc. Chem. Res. 1998 31:805-818; J. P. Wolfe et al., J. Org. Chem. 2000 65:1158; J. F. Hartwig, Angew. Chem. Int. Ed. 1998 37:2046-2067]). 전형적인 조건은 염기, 예컨대 나트륨 tert-부톡사이드 또는 Cs₂CO₃, 및 비양성자성 용매의 존재하의 Pd(dppf)Cl₂를 포함한다. 전형적인 이탈기는 할로겐 및 트라이플레이트를 포함하고, 최적 이탈기는 정확한 반응물에 따라 변한다. N-아실옥시메틸 유도체 I(R⁵=CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH); 이때, n은 2 내지 5이다)은, 본원에 이의 전체 내용이 참고로서 혼입되고 2006년 2월 2일자로 공개된 둔 등의 미국특허공개 제2006/0025462호에 기술된 바와 같이, 트라이아졸론을 폼알데하이드에 노출시키고, 생성된 하이드록시메틸 유도체를 아실화시킴으로써 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 다양한 경구 투여형 및 담체로 제형화될 수 있다. 경구 투여는 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 유화액, 시럽, 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 본 발명의 화합물은 다른 투여 경로중에서도 연속(정맥내 적가) 국소 비경구, 근육내, 정맥내, 피하, 경피(침투 강화제를 포함할 수 있음), 볼, 비강, 흡입 및 좌제 투여를 비롯한 다른 투여 경로에 의해 투여될 경우 효과적이다. 투여의 바람직한 방식은 일반적으로 적절한 1일 투여 요법을 사용하는 경구 투여로서, 이는 고통의 정도 및 활성 성분에 대한 환자의 반응에 따라 조정될 수 있다.

본 발명의 화합물 및 이들의 약학적으로 사용가능한 염은 하나 이상의 통상적인 부형제, 담체 또는 희석제와 함께 약학 조성물 및 단위 투여형의 형태를 갖출 수 있다. 약학 조성물 및 단위 투여형은 추가의 활성 화합물 또는 성분의 존재 및 부재하에 통상적인 비율의 통상적인 성분으로 구성될 수 있고, 단위 투여형은 사용 되는 목적 1일 투여 범위에 맞게 임의의 적합한 효과량의 활성 성분을 함유할 수 있다. 약학 조성물은 고체, 예컨대 정제 또는 충전된 캡슐, 반고체, 분말, 서방성 제형으로서, 또는 액체, 예컨대 용액, 현탁액, 유화액, 엘릭시르, 또는 경구 사용을 위한 충전된 캡슐로서; 직장 또는 질 투여용 좌제 형태로; 또는 비경구 사용을 위한 멸균 주사용 용액의 형태로 이용될 수 있다. 전형적인 제제는 약 5 내지 약 95%의 활성 화합물(중량/중량)을 함유한다. 용어 "제제" 또는 "투여형"은 활성 화합물의 고체 및 액체 제형을 포함하도록 의도되고, 당업자는 활성 성분이 표적 기관 또는 조직, 및 목적하는 용량 및 약동력학적 매개변수에 따라 상이한 제제로 존재할 수 있음을 인식할 것이다.

본원에 사용된 용어 "부형제"는 일반적으로 안전하고 무독성이며 생물학적으로나 달리 비적합하지 않은, 약학 조성물을 제조하는데 유용한 화합물을 지칭하고, 인간 약학 용도뿐만 아니라 수의학적 용도에 적합한 부형제를 포함한다. 본 발명의 화합물은 단독으로 투여될 수 있지만, 일반적으로 목적 투여 경로 및 표준 약학 실무를 고려하여 선택된 하나 이상의 적합한 약학 부형제, 희석제 또는 담체와 혼합하여 투여될 것이다.

"약학적으로 허용되는" 물질은 일반적으로 안전하고 무독성이며 생물학적으로나 달리 비적합하지 않고, 인간 약학 용도에 허용되는 물질을 포함하는 약학 조성물을 제조하는데 유용하다. 활성 성분의 "약학적으로 허용되는 염" 형태는 또한 먼저 비-염 형태에는 부재하는 활성 성분에 대한 바람직한 약동력학적 특성을 수여할 수 있고, 심지어 신체내의 치료 활성에 관하여 활성 성분의 약력학에 긍정적인 영향을 줄 수 있다. 화합물의 "약학적으로 허용되는 염"이라는 어구는 약학적으로 허용되고 모 화합물의 목적하는 약리학적 활성을 갖는 염을 의미한다. 이러한 염은 다음과 같은 것을 포함한다: (1) 무기 산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등에 의해 형성된 산 부가 염; 또는 유기 산, 예컨대 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 사이클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄-다이설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄포설폰산, 4-메틸바이사이클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, 3차-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 무콘산 등에 의해 형성된 산 부가 염; 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어 알칼리 금속 이온, 알칼리 토 금속 이온, 또는 알루미늄 이온에 의해 대체될 때 형성되는 염; 또는 유기 염기, 예컨대 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, 트로메트아민, N-메틸글루카민 등과 배위될 때 형성되는 염. 약학적으로 허용되는 염에 대한 모든 언급은 동일한 산 부가 염의, 본원에서 정의된 바와 같은 용매 부가 형태(용매화물) 또는 결정 형태(다형체)를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

고체 형태 제제는 분말, 정제, 환제, 캡슐, 교갑, 좌제 및 분산성 과립을 포함한다. 고체 담체는 희석제, 향미제, 가용화제, 윤활제, 현탁제, 결합제, 보존 제, 정제 붕해제, 또는 캡슐화 물질로서 작용할 수 있는 하나 이상의 물질일 수 있다. 분말에서, 담체는 일반적으로 미분된 고체로서, 이는 미분된 활성 성분의 혼합물이다. 정제에서, 활성 성분은 일반적으로 필수 결합 능력을 갖는 담체와 적합한 비율로 혼합되고, 목적하는 형태 및 크기로 압축된다. 적합한 담체는 비제한적으로 마그네슘 카본에이트, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 설탕, 락토즈, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈, 저 용융 왁스, 코코아 버터 등이 포함된다. 고체 형태 제제는 활성 성분 외에 착색제, 향미제, 안정화제, 완충제, 인공 및 천연 감미제, 분산제, 증점제, 가용화제 등을 함유할 수 있다.

경구 투여에 적합한 액체 제형은 또한 유화액, 시럽, 엘릭시르, 수용액 및 수성 현탁액을 포함하는 액체 제형을 포함한다. 이들은 사용 직전에 액체 형태 제제로 전환되도록 의도되는 고체 형태 제제를 포함한다. 유화액은 용액으로, 예를 들어 프로필렌 글리콜 수용액으로 제조될 수 있거나, 유화제, 예컨대 레시틴, 소르비탄 모노올리에이트, 또는 아카시아를 함유할 수 있다. 수용액은 물에 활성 성분을 용해시키고, 적합한 착색제, 향미제, 안정화제 및 증점제를 첨가함으로써 제조될 수 있다. 수성 형탁액은 물에 미분된 활성 성분을 점성 물질, 예컨대 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈, 및 다른 널리 공지된 현탁제와 함께 분산시킴으로써 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비경구 투여(예를 들어, 주사, 예컨대 거환 주사 또는 연속 주입에 의해)를 위해 제형화될 수 있고, 앰플, 예비-충전 주사기, 작은 부피 의 주입액내의 단위-투여 형태에, 또는 첨가된 보존제와 함께 다중-투여 용기에 존재할 수 있다. 조성물은 유성 또는 수성 비히클중 현탁액, 용액 또는 유화액, 예를 들어 수성 폴리에틸렌 글리콜중 용액과 같은 형태를 취할 수 있다. 유성 또는 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일(예: 올리브유) 및 주사가능한 유기 에스터(예: 에틸 올리에이트)를 포함하고, 보존제, 습윤제, 유화제 또는 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형화제를 함유할 수 있다. 선택적으로, 활성 성분은 멸균 고체의 무균 단리에 의해 수득되거나, 또는 적합한 비히클, 예를 들어 멸균 발열원-부재 물에 의한 사용 이전에 구성을 위한 용액으로부터 동결건조함으로써 수득되는 분말 형태일 수 있다.

본 발명의 화합물은 표피에 국소 투여하기 위해 연고, 크림 또는 로션으로서, 또는 경피 패치로서 제형화될 수 있다. 연고 및 크림은, 예를 들어 적합한 증점제 및/또는 겔화제의 첨가에 의해 수성 또는 유성 기제에 의해 제형화될 수 있다. 로션은 수성 또는 유성 기제로 제형화될 수 있고, 일반적으로 또한 하나 이상의 유화제, 안정화제, 분산제, 현탁제, 증점제, 또는 착색제를 함유한다. 구강내에 국소 투여하기에 적합한 제형은 향미 기제, 일반적으로 수크로즈 및 아카시아 또는 트라가칸트중에 활성제를 포함한 로젠지; 불활성 기제, 예컨대 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로즈 및 아카시아중에 활성 성분을 포함하는 향정; 및 적합한 액체 담체중에 활성 성분을 포함하는 구강세정제를 포함한다.

본 발명의 화합물은 좌제로서 투여하기 위해 제형화될 수 있다. 저 용융 왁 스, 예컨대 지방산 글리세라이드 또는 코코아 버터의 혼합물이 먼저 용융되고, 활성 성분은, 예를 들어 교반에 의해 균질하게 분산된다. 이어서, 용융된 균질한 혼합물을 적절한 크기의 주형에 붓고, 냉각하고, 고체화한다.

본 발명의 화합물은 질 투여를 위해 제형화될 수 있다. 활성 성분 외에 당업계에 공지된 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 포말 또는 비말이 적절하다.

본 발명의 화합물은 비강 투여를 위해 제형화될 수 있다. 용액 및 현탁액은 통상의 수단, 예를 들어 적가기, 피펫 또는 스프레이에 의해 비강에 직접 적용된다. 제형은 단일 또는 다중투여 형태로 제공될 수 있다. 적가기 또는 피펫의 다중투여의 경우, 이는 환자가 적절한 소정 부피의 용액 또는 현탁액을 투여함으로써 달성될 수 있다. 스프레이의 경우에, 이는 예를 들어 계량 분무 스프레이 펌프에 의해 달성될 수 있다.

본 발명의 화합물은 특히 기도로의 에어로졸 투여, 예를 들어 비강내 투여를 위해 제형화될 수 있다. 화합물은 일반적으로, 예를 들어 약 5㎛ 이하의 작은 입자 크기를 가질 것이다. 이러한 입자 크기는 당업계에 공지된 수단, 예를 들어 미세화에 의해 수득될 수 있다. 활성 성분은 적합한 추진제, 예컨대 클로로플루오로카본(CFC), 예를 들어, 다이클로로다이플루오로메탄, 트라이클로로플루오로메탄 또는 다이클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소 또는 다른 적합한 기체에 의해 가압된 팩내에 제공된다. 에어로졸은 적절하게는 또한 레시틴과 같은 계면활성제를 함유할 수 있다. 약물의 용량은 계량 밸브로 제어될 수 있다. 선택적으로, 활성 성분은 무수 분말, 예를 들어 적합한 분말 기제, 예컨대 락토즈, 전분, 전분 유도체, 예컨대 하이드록시프로필메틸 셀룰로즈 및 폴리비닐피롤리딘(PVP)중 화합물의 분말 믹스의 형태로 제공될 수 있다. 분말 담체는 비강에서 겔을 형성한다. 분말 조성물은 분말이 흡입기에 의해 투여될 수 있는, 예컨대 젤라틴 또는 블리스터 팩의 캡슐 또는 카트리지중의 단위 투여 형태로 존재할 수 있다.

필요한 경우, 제형은 활성 성분의 지속적이거나 제어된 방출 투여를 위해 적용되는 장용 코팅에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 경피 또는 피하 약물 전달 장치로 제형화될 수 있다. 이러한 전달 시스템은 화합물의 지속적 방출이 필요하고 치료 요법에 대한 환자의 순응성이 중요한 경우 유리하다. 경피 전달 시스템에서의 화합물은 종종 피부-접착 고체 지지체에 부착된다. 해당 화합물은 또한 침투 강화제, 예를 들어, 아존(Azone)(1-도데실아자-사이클로헵탄-2-온)과 조합될 수 있다. 서방성 전달 시스템은 수술 또는 주사에 의해 피하 층으로 피하 삽입된다. 피하 이식물은 화합물을 지용성 막, 예를 들어 실리콘 고무, 또는 생분해성 중합체, 예컨대 폴리액트산중에 캡슐화한다.

약학 담체, 희석제 및 부형제를 갖는 적합한 제형은 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania]에 기재되어 있다. 숙련된 제형학자는 본 명세서의 교시내의 제형을 개질하여 본 발명의 조성물을 불안정하게 하거나 이들의 치료 활성을 손상시키지 않으면서 특정 투여 경로를 위한 다수의 제형을 제공할 수 있다.

본 발명의 화합물을 물 또는 다른 비히클에서 보다 가용성으로 만드는 본 발명의 화합물의 개질은, 예를 들어 당업자에게 공지된 소수 개질(염 제형화, 에스터화 등)에 의해 용이하게 달성될 수 있다. 또한, 환자에서 최대한의 유리한 효과를 위해 본 발명의 화합물의 약동력학을 다루도록 특정 화합물의 투여 경로 및 투여 요법을 바꾸는 것은 당업계의 통상적인 기술내에 속한다.

본원에 사용된 용어 "치료적 효과량"은 개인의 질병 증상을 감소시키는데 필요한 양을 의미한다. 용량은 각각의 특정 경우에 개개의 요건에 따라 조정된다. 이러한 투여량은 치료될 질병의 중증도, 환자의 연령 및 일반적 건강 상태, 환자를 치료하는 다른 약제, 투여 경로 및 형태, 및 담당 의료진의 선호도 및 경험과 같은 다수의 인자에 따라 넓은 범위내에서 변할 수 있다. 경구 투여를 위해, 1일 당 약 0.01 내지 약 1,000mg/kg 체중의 1일 투여량이 단독 치료법 및/또는 병용 치료법에서 적절하다. 바람직한 1일 투여량은 1일 당 약 0.1 내지 약 500mg/kg 체중이고, 0.1 내지 약 100mg/kg 체중이 보다 바람직하고, 1.0 내지 약 10mg/kg 체중이 가장 바람직하다. 따라서, 70kg의 사람에게 투여하기 위해, 투여량 범위는 1일 당 약 7mg 내지 0.7g이다. 1일 투여량은 단일 투여량으로서 또는 분할된 투여량으로서, 전형적으로 1일 당 1 내지 5회 투여량으로 투여될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 용량 미만인 보다 적은 투여량으로 개시된다. 이후, 투여량은 개개 환자에 대한 최적 효과에 도달될 때까지 작은 증분으로 증가된다. 본원에 기재된 질환을 치료하는 당업자라면 과도한 실험 없이, 개인의 지식, 경험 및 본원의 개시내용을 바탕으로 소정 질환 및 환자를 위한 본 발명의 화합물의 치료적 효과량을 확인할 수 있을 것이다.

참고예 1

3-요오도메틸-5-메탄설폰일-4-메틸-4H-[1,2,4]트라이아졸(B-5b: 반응식 B)

단계 1- 에틸 하이드록시아세테이트(99.8g; 1.05당량, 95%) 및 4-메틸-3-티오세미카바자이드(96.0g; 1.00당량, 97%)를 교반기 및 환류 액화기가 장착된 2ℓ-반응기에서 합하였다. 반응물을 교반하고, 환류하에 밤새 가열하였다(상기 기간에 걸쳐 내부 온도는 약 130℃부터 4-메틸-3-티오세미카바자이드 90℃까지 강하하였다). 반응기를 증류를 위해 배열하고, 내부 온도가 130℃에 도달할 때까지 증류를 계속한 후, 약 100℃까지 강하할 때까지 환류하에 유지하였다. 다시 반응기를 증류를 위해 배열하고, 증류하면서 130℃까지 가열한 후, 1시간 동안의 환류를 위해 배열하였다. 최종적으로, 반응기를 다시 증류를 위해 배열하고, 600㎖ 물을 첨가하고, 증류액을 물로 계속 대체하면서 증류를 수행하여 잔류하는 에탄올을 제거하였다. 용액을 60℃까지 냉각하면, 이때 생성물의 결정화가 시작되었다. 슬러리를 5℃까지 냉각하고, 여과하고("C"-등급 필터 프릿), 물로 1회 세척하였다. 60℃에서 진공 건조하여 92.7g(70%)의 B-3을 수득하였다.

단계 2 및 3- 2ℓ 반응기중 B-3(92.0g), 메틸 톨루엔설폰에이트(129.7g, 1.1당량) 및 MeOH(1ℓ)의 용액을 환류하에 15시간 동안 가열하였다. 증류액을 DCE로 계속 대체하면서 증류함으로써 MeOH를 완전히 제거하였다. 티온일 클로라이 드(48.5㎖, 1.05당량)를 1 회분으로 생성된 DCE 용액에 첨가한 후, 72.5g TEA(1.13당량)를 2분에 걸쳐 교반하면서 첨가하였다. 온도는 50℃까지 상승하였다. 용액을 29℃까지 냉각하면, 결정이 형성되기 시작하였다. 포화 Na₂CO₃(1.1ℓ) 수용액을 H₂O(200㎖)와 합하고, 15분에 걸쳐 혼합물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 포화 Na₂CO₃(100㎖)으로 세척하였다. 원래의 수용액을 DCE(500㎖)로 추출한 후, 상기 추출물을 포화 Na₂CO₃(100㎖)으로 세척하였다. 유기 상을 합하고, 활성화된 차콜(15g)로 처리하고, 여과하였다. 여액을 진공 증류에 의해 이의 부피의 1/3까지 농축한 후, 톨루엔을 계속 첨가하여 내부 온도가 43℃에 도달할 때까지 증류된 용매를 대체하였고, 이때 생성물이 용액으로부터 결정화되기 시작하였다. 증류를 중단하고, 슬러리를 6℃까지 냉각하고, 여과하였다("C"-등급 필터). 필터 케이크를 충분히 빙랭된 톨루엔만으로 1회 세척하여 케이크를 완전히 적셨다. 케이크를 건조하여 69.6g(2 단계에 걸쳐 61.9%)의 B-4를 수득하였다.

단계 4- B-4(69.5g) 및 HCO₂H(100㎖)의 용액을 45℃까지 가열하였다. 냉각된 30% H₂O₂ 수용액(89.3g)을 1 회분으로 상기 용액에 첨가하였다. 실온의 물의 회분을 사용하여 반응 용액을 25분 동안 50 내지 60℃ 사이로 유지하였다. 다른 95g의 냉각된 30% H₂O₂ 수용액을 1 회분으로 첨가하고, 플라스크에 가열 맨틀을 장착하고, 필요한 경우 맨틀을 제거하면서 1시간 동안 55 내지 65℃에서 유지하였다. 물을 수 분에 걸쳐 생성된 용액에 첨가하여, 49℃에서 시작하여 33℃까지 냉각하면서 반응 생성물의 결정화를 야기하였다. 슬러리를 10℃까지 냉각하고, 여과하고("C"-등급 필터), 충분한 물로 세척하여 잔류하는 H₂O₂(여액의 NaI 시험)를 제거하였다. 케이크를 50℃에서 건조하여 65.4g(79.7%)의 B-5a를 수득하였다.

단계 5- B-5a(65.3g) 및 NaI(56.0g, 1.2당량)의 혼합물을 450㎖ 아세톤에 교반하면서 용해시켰다. 온도는 32℃까지 상승한 후, 감소하였다. 약 22℃에서 2시간 후, 반응이 충분히 완료되었다. 반응 슬러리를 여과하고("M"-등급 필터), 케이크를 아세톤으로 2회 세척하였다. 필터 플라스크를 교환하고, 아세톤 여액을 저장하였다. 이어서, 케이크를 물(200㎖)로 세척하고, 수집하였다. 수성 여액을 폐기하고, 생성된 케이크 및 종전 아세톤 여액을 합하고, 생성된 슬러리를 가열하여 증류액을 물로 대체하면서 아세톤을 증류하였다. 온도가 84℃에 도달한 경우, 가열을 중단하고, 용액을 냉각하여 반응 생성물의 결정화를 야기하였다. 슬러리를 실온에서 여과하고, 케이크를 물로 세척하고, 60℃에서 건조하여 B-5b(76.4g, 81.4%)를 수득하였다.

참고예 2

페놀

3-클로로-5-하이드록시-벤조나이트릴(CASRN 473923-97-6)의 제조

단계 1- 100㎖ 환저 플라스크를 질소 스팀하에 3,5-다이클로로벤조나이트릴(R-3a, 7.0g, 40.69mmol) 및 무수 DMF(75㎖)로 충전하였다. 나트륨 메톡사이드(2.26g, 44.76mmol)를 상기 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 24시간 동 안 더욱 교반하였다. 반응이 완료된 경우, 수성 10% HCl을 상기 반응 용기에 적가하였다. 조질 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 수성 산, 물 및 염수로 순차적으로 세척하였다. EtOAc 추출물을 건조하고(Na₂SO₄), 여과하고, 용매를 진공중에 제거하여 조질 고체를 수득하고, 헥산/아세톤으로 재결정화하여 5.9g(86%)의 5-클로로-3-메톡시-벤조나이트릴을 수득하였다.

단계 2- 250㎖ 플라스크를 5-클로로-3-메톡시-벤조나이트릴(7.0g, 41.766mmol) 및 2,4,6-콜리딘(100㎖)으로 충전하였다. 혼합물을 170℃까지 가열하고, LiI(16.76g, 125.298mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 가열하였다. R-3b가 소비된 경우, 반응물을 실온까지 냉각하고, 10% 수성 HCl로 급랭시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 물 및 염수로 세척하였다. EtOAc 추출물을 건조하고(Na₂SO₄), 여과하였다. 용매를 진공중에 제거하여 황색 오일을 수득하고, EtOAc/헥산(10:90)에 의해 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 6.0g(94%)의 3-클로로-5-하이드록시-벤조나이트릴을 수득하였다.

5-하이드록시-이소프탈로나이트릴[CASRN 79370-78-8]의 제조

5-하이드록시-이소프탈로나이트릴을 2004년 3월 25일자로 공개된 모우베리(C. E. Mowbary) 등의 국제특허공개 제2004/024147호의 과정 1 내지 3에 기술된 바와 같이 제조하였다.

3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페놀[CARN 874974-85-3]

단계 1- 1,3-다이브로모-5-플루오로-벤젠[CASRN 1435-51-4], MeONa(1당량) 및 DMF의 용액을 실온에서 N₂ 대기하에 밤새 교반하였다. 휘발성 용매를 진공중에 제거하고, 잔사를 Et₂O 및 물 사이에서 분할하였다. 유기 상을 5% NaOH, 물 및 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 1,3-다이브로모-5-메톡시-벤젠을 수득하였다.

단계 2- 1,3-다이브로모-5-메톡시-벤젠(60g, 0.2256mol) 및 무수 Et₂O(1ℓ)의 용액을 -78℃까지 냉각하고, Ar 대기하에 유지하고, 30분에 걸쳐 n-BuLi(100㎖, 0.2482mol, 헥산중 2.5M)를 적가하였다. 황색 용액을 -78℃에서 20분 동안 교반하였다. 무수 DMF(19㎖, 248.2mmol)를 15분에 걸쳐 반응 혼합물에 적가하고, 반응물을 냉각 욕이 제거되기 전에 -78℃에서 10분 동안 교반하고, 반응물을 30분에 걸쳐 -30℃까지 가온하였다. 반응 용기를 빙수 욕에 위치시키고, -10℃까지 가온하였다. 혼합물을 빙랭 포화 NH₄Cl 수용액(400㎖)에 천천히 첨가하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 상을 Et₂O로 3회 추출하였다. 합한 추출물을 물로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 방치하면 고체화되는 오일을 수득하였다. 조질 생성물을 헥산/EtOAc 구배(3 내지 5% EtOAc)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-5-메톡시-벤즈알데하이드를 수득하였다.

단계 3- DMF(2㎖)중 3-브로모-5-메톡시-벤즈알데하이드(1mmol)의 용액을 DMF(15㎖)중 Zn(CN)₂(0.7당량) 및 Pd(PPh₃)₄(0)(0.2당량)를 함유하는 환저 플라스크 에 첨가하였다. 반응물을 아르곤 대기하에 90℃에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 증발 건조하였다. 조질 잔사를 EtOAc에 용해시키고, 염수 용액으로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 증발시켰다. 조질 생성물을 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 3-폼일-5-메톡시-벤조나이트릴을 수득하였다.

단계 4- DAST(21.04㎖, 519mmol)를 질소하에 날젠(NALGENE, 등록상표명) 병에 함유된 3-폼일-5-메톡시-벤조나이트릴(15.1g, 94mmol) 및 DCM(100㎖)의 용액에 첨가하였다. EtOH(0.013㎖, 0.23mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃의 수용액에 천천히 첨가하였다. 발포를 멈춘 후, DCM(50㎖)을 첨가하고, 층을 분리하였다. 유기 층을 염수(30㎖)로 세척하고, 건조하였다(MgSO₄). 용매를 제거하고, 조질 생성물을 EtOAc/헥산 구배(0% 내지 10% EtOAc)에 의해 용리하는 2개의 플래시 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 3-다이플루오로메틸-5-메톡시-벤조나이트릴을 수득하였다.

단계 5- 3-다이플루오로메틸-5-메톡시-벤조나이트릴을 48% 수성 HBr 및 빙상 HOAc의 용액에서 탈메틸화하고, 탈메틸화가 완료될 때까지 120℃까지 가열하였다. 휘발성 용매를 제거하고, 물 및 DCM 사이에서 분할하여 3-다이플루오로메틸-5-하이드록시-벤조나이트릴을 수득하였다.

3-브로모-5-사이아노-페놀[CASRN 770718-92-8]의 제조

단계 1- n-BuLi(2.6㎖의 1.6M 용액, 1.1당량)를 N₂ 대기하에 -78℃까지 냉각 된 Et₂O(20㎖)중 1,3-다이브로모-5-메톡시-벤젠(1.0g, 3.8mmol, CASRN 74137-36-3)의 용액에 천천히 첨가하였다. 용액을 45분 동안 교반하고, DMF를 주사기를 사용하여 첨가하였다. 용액을 실온까지 천천히 가온하고, 포화 암모늄 클로라이드에 첨가하고, 에터로 추출하였다. 유기 상을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 0.80g(98%)의 1-브로모-3-폼일-벤즈알데하이드를 수득하였다.

단계 2- 1-브로모-3-폼일-벤즈알데하이드(12.0g, 56mmol), 하이드록실아민 하이드로클로라이드(19.4g, 5당량), EtOH(100㎖) 및 피리딘(10㎖)의 용액을 16시간 동안 65℃까지 가열하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 50% EtOAc/헥산 및 물 사이에서 분할하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 건조하였다(MgSO₄). 휘발성 물질을 증발시켜 12.4g(97%)의 옥심을 수득하였다. 이러한 물질을 무수 다이옥산(100㎖) 및 피리딘(26㎖, 6당량)에 용해시켰다. 용액을 0℃까지 냉각하고, TFAA(15㎖, 2당량)를 첨가하고, 혼합물을 실온까지 가온하였다. 용액을 2일 동안 교반하고, 1시간 동안 60℃까지 가온하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 빙수에 주의하면서 첨가하였다. 혼합물을 DCM으로 추출하고, 합한 유기 층을 물, 1M HCl 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 건조하고(MgSO₄), 증발시켜 10.4g(90%)의 3-브로모-5-메톡시-벤조나이트릴을 수득하였다.

단계 3- 무수 콜리딘(100㎖)을 3-브로모-5-메톡시-벤조나이트릴(10.4g, 49mmol) 및 LiI(19.6g, 3당량)을 함유하는 무수 플라스크에 첨가하였다. 용액을 질소하에 밤새 150℃까지 가열하고, 실온까지 냉각하고, 1M HCl 빙랭 용액에 부었 다. 혼합물을 1:1 EtOAc/헥산 용액으로 추출하고, 물로 세척하고, 건조하였다(MgSO₄). 진공 농축하여 8.7g(89%)의 3-브로모-5-하이드록시-벤조나이트릴을 수득하였다.

실시예 1

3-클로로-5-[6-클로로-2-플루오로-3-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-벤조나이트릴; 폼에이트 염(I-2; 반응식 A)

단계 1- 고체 KOtBu(9.7g, 1.05당량)를 0℃에서 THF(350㎖)중 A-1(Ar= 3-클로로-5-사이아노-페닐, 12.7g, 83mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 20분 동안 교반하고, A-2(10㎖, 1.05당량)를 첨가하였다. 용액을 실온까지 가온하고, 2시간 동안 숙성하였다. 혼합물을 NH₄Cl 수용액에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 휘발성 물질을 증발시켰다. MeOH로부터 생성된 고체를 재결정화하여 A-3을 수득하였다.

단계 2- NaH(3.6g의 55% 현탁액, 2.1당량)를 무수 DMSO(125㎖)에 첨가하고, 생성된 현탁액을 30분 동안 70℃까지 가열하였다. 용액을 가열 욕으로부터 잠시 제거하고, 벤즈알독심(9.5g, 2당량)을 적가하였다. 혼합물을 70℃에서 추가로 30분 동안 교반하였다. 진한 황색 용액을 실온까지 냉각하고, A-3(Ar= 3-클로로-5-사이아노-페닐, 12.2g, 39mmol) 및 DMSO(100㎖)의 용액을 적가하였다. 반응 용액이 균질하게 될 때까지 혼합물을 가열하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 물에 부었다. 생성된 혼합물을 Et₂O로 추출하고, 건조하고, 여과하고, 증발시켜 MeOH(8.5g, 70%)로부터 재결정화될 수 있는 고체로서 A-5를 수득하였다.

단계 3- K₂CO₃(0.22g, 1.2당량)을 아세톤중 A-5(Ar= 3-클로로-5-사이아노-페닐, 0.42g, 1.4mmol) 및 A-6(0.41g, 1당량)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃까지 가열하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 H₂O/EtOAc 혼합물에 붓고, 수성 층을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 농축하였다. 상기 물질을 MeOH/DCM 구배(0% 내지 5% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 0.42g(65%)의 A-7a를 수득하였다.

단계 4- EtOH(7㎖) 및 H₂O(7㎖)중 전해 Fe(0.19g, 5당량), NH₄Cl(0.18g, 5당량) 및 A-7a(0.32g, 0.66mmol)의 현탁액을 환류하에 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트(Celite, 등록상표명)를 통해 여과하고, 케이크를 DCM으로 세척하였다. 층을 분리하고, 유기 층을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하였다. 용액을 진공중에 농축하여 연갈색 고체로서 A-7b를 수득하였다.

단계 5- CuBr₂ 및 LiBr을 각각 CuCl₂ 및 LiCl로 대체한 것을 제외하고는 실시예 3의 단계 5에 기술된 바와 같이 다이아조화 및 염소화를 수행하여 A-7c(Ar= 3-클로로-5-사이아노-페닐)를 수득하였다.

단계 6- 무수 아세트산(0.05㎖, 1.8당량)을 HOAc(2㎖)중 A-7c(Ar= 3-클로로-5-사이아노-페닐, 0.13g, 0.28mmol)의 용액에 첨가하고, 용액을 16시간 동안 100℃까지 가열하였다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 농축하고, 역상 HPLC로 정제하여 0.01g(9%)의 I-2를 수득하였다.

실시예 2

3-클로로-5-[5-클로로-2-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-벤조나이트릴(I-3)

K₂CO₃(0.041g, 1.2당량)을 아세톤(2㎖)중 3-클로로-5-(5-클로로-2-하이드록시펜옥시)벤조나이트릴(CASRN 895572-24-4, 0.070g, 0.25mmol) 및 A-6(0.075g, 1당량)의 용액에 첨가하고, 용액을 1시간 동안 35℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고, 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 유기 상을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 목적 에터를 수득하였다. 알킬화로부터의 생성물을 HOAc(2㎖)에 용해시키고, 약 0.06㎖의 무수 아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 100℃까지 가열하였다. 상기 물질을 역상 HPLC로 정제하여 0.03g(30%)의 I-3을 수득하였다.

실시예 3

3-[6-브로모-2-플루오로-3-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-다이플루오로메틸-벤조나이트릴; 트라이플루오로-아세트산과의 화합물(I-4)

단계 1- 3-클로로-5-하이드록시-벤조나이트릴을 3-다이플루오로메틸-5-하이드록시-벤조나이트릴로 대체한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1에 기술된 바와 같이 3-다이플루오로메틸-5-(2,3-다이플루오로-6-나이트로-펜옥시)-벤조나이트릴을 제조하였다.

단계 2- 환저 플라스크를 NaH(0.55g의 55% 현탁액, 2.1당량) 및 무수 DMSO(20㎖)로 충전하고, 생성된 현탁액을 30분 동안 70℃까지 가열하였다. 용액을 가열 욕으로부터 잠시 제거하고, 벤즈알독심(1.56g, 2당량)을 적가하였다. 혼합물을 70℃에서 추가로 30분 동안 교반하였다. 진한 황색 용액을 실온까지 냉각하고, A-3(Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐, 2.1g, 6.4mmol) 및 DMSO(10㎖)의 용액을 적가하였다. 반응 용액이 균질하게 될 때까지 혼합물을 가열하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 물에 부었다. 수용액을 에터로 추출하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 주황색 고체로서 2.1g(100%)의 A-5를 수득하였다.

단계 3- K₂CO₃(0.7g, 3당량)을 아세톤(6㎖)중 A-5(Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐, 0.59g) 및 A-6(0.55g, 1당량)의 빙랭 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온까지 가온하고, 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 H₂O에 붓고, 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 단리된 갈색 고체를 EtOAc/헥산에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 0.50g(55%)의 A-7a(Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐)를 수득하였다.

단계 4- 전해 철(0.42g, 5당량)을 EtOH(4㎖) 및 H₂O(3㎖)중 A-7a(0.75g, 1.5mmol, Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐)의 용액에 첨가하였다. 용액을 4시간 동안 100℃까지 가열하고, 실온까지 냉각하고, 셀라이트(등록상표명)를 통해 여과하였다. 혼합물을 DCM으로 추출하고, 유기 층을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 MeOH/DCM 구배(0% 내지 10% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 0.6g(71%)의 A-7b를 수득하였다.

단계 5- 환저 플라스크를 CuBr₂(0.16g, 1.2당량), LiBr(0.16g, 3당량), tert-BuONO(0.09㎖, 1.3당량) 및 MeCN(3㎖)으로 충전하고, 용액을 60℃까지 가열하였다. MeCN(2㎖)중 A-7b(0.28g, 0.6mmol, Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐)의 용액을 적가하고, 용액을 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각하고, 5% HCl로 급랭시키고, EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공중에 농축하였다. 조질 생성물을 MeOH/DCM 구배(0 내지 2% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 0.28g(88%)의 A-7c(Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐)을 수득하였다.

I-4로의 5-메탄설폰일-4-메틸-4H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시 치환기의 전환을 실시예 1의 단계 6에 기술된 바와 같이 수행하였다.

실시예 4

3-[6-클로로-2-플루오로-3-(5-메탄설폰일-4-메틸-4H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-다이플루오로메틸-벤조나이트릴(I-5)

CuBr₂ 및 LiBr을 각각 CuCl₂ 및 LiCl로 대체한 것을 제외하고는 실시예 3의 단계 5에 기술된 바와 같이 다이아조화 및 염소화를 수행하여 A-7b로부터 A-7c(Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐)를 70% 수율로 수득하였다.

단계 6- A-7c(Ar= 3-사이아노-5-다이플루오로메틸-페닐, 0.165g), HOAc(2㎖) 및 무수 아세트산(0.1㎖)의 용액을 2일 동안 100℃까지 가열하고, 실온으로 냉각하고, 잔사를 역상 HPLC로 정제하여 0.025g(17%)의 3-[6-클로로-2-플루오로-3-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-다이플루오로메틸-벤조나이트릴(I-5)을 수득하였다.

실시예 5

5-[3-브로모-2-플루오로-6-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-이소프탈로나이트릴(I-7, 반응식 D)

단계 1- n-BuLi(100㎖, 1.00mol, 헥산중 10M)를 15분에 걸쳐 -78℃까지 냉각되고 N₂ 대기하에 유지된 THF(500㎖)중 다이-이소-프로필아민(150㎖, 108.3g, 1.07mol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. D-1a(45㎖, 52.110g, 0.457mol) 및 클로로트라이메틸실란(130.0㎖, 111.28g, 1.024mol)의 혼합물을 내부 반응 온도가 -50℃ 미만으로 유지되는 속도로 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 1M H₂SO₄를 첨가함으로써 -78℃에서 급랭시키고, MTBE로 희석하고, 혼합물을 고체 NaCl로 포화시켰다. 상을 분리하고, 수성 상을 MTBE(300㎖)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조하 고(MgSO₄), 여과하고, 용매를 증발시켜 백색 고체로서 118g(100%)의 D-1b를 수득하였다.

단계 2- 고체 D-1b(126.23g, 0.500mol)를 내부 온도를 20 내지 45℃로 유지하면서 빙 욕에서 0℃까지 냉각된 순수한 브롬(76.9㎖, 1.50mol)에 분할식으로 첨가하였다(주의: 발열 반응). 반응 혼합물을 58℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 기간 1시간 경과 후, 추가의 브롬(45.48g)을 첨가하고, 첨가 깔대기를 사이클로헥산(10㎖)으로 세척하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각하고, 포화 NaHSO₃ 빙랭 용액에 천천히 부었다. 첨가 후, 생성된 혼합물을 고체 NaCl로 포화시키고, MTBE(500㎖ 및 200㎖)로 추출하고, 건조하고(MgSO₄), 진공중에 농축시켜 191g의 D-1c를 수득하였다. 반응 혼합물을 약 60mbar에서 증류시켜, 110℃에서 비등하고 약 11%의 모노브로모 유도체를 함유하는 161.53g의 무색 액체를 수득하였다. 생성물을 약 50mbar에서 발포 볼 컬럼을 통해 재증류하여 99.6% 초과의 순도를 갖고 93 내지 94℃의 비등점을 갖는 141.3g(78.5%)의 D-1c를 수득하였다.

단계 3(이소-PrMgCl·LiCl의 제조)- LiCl(4.56g, 107.6mmol)의 샘플을 열 분사기를 사용하여 높은 진공하에 10분 동안 건조하였다. 이소-PrMgCl(53.8㎖, 107.6mmol, THF중 2M 용액)을 N₂ 대기하에 23℃에서 무수 고체에 첨가하고, 생성된 혼합물을 23℃에서 3일 동안 교반하였다.

이소-PrMgCl·LiCl 용액(5.5㎖, 11mmol, THF중 2.0M)을 반응 온도를 -30℃ 미만으로 유지하는 속도로 -40℃에서 THF(5㎖)중 D-1c(1.29㎖, 10mmol)의 용액에 첨가하였다. -35 내지 -30℃에서 계속 교반한 후, 추가로 1시간 동안 -7℃까지 가온하였다. 반응 혼합물을 -30℃까지 냉각하고, DMF(1.00㎖, 13mmol)를 한 분획으로 첨가하고(온도가 -23℃까지 상승함), -25 내지 15℃에서 3.5시간 동안 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 1M H₂SO₄ 및 얼음에 붓고, 생성된 혼합물을 고체 NaCl로 포화시키고, MTBE로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공중에 농축하여 백색 고체로서 2.17g(98%)의 D-1d를 수득하였다.

단계 4- K₂CO₃(5.5g, 39.8mmol)을 부티로나이트릴(70㎖)중 N,N'-다이-tert-부틸-5-하이드록시-이소프탈아마이드(11.11g, 38.0mmol)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 질소 대기하에 80℃에서 70분 동안 가열하였다. D-2a(8.0g, 36.2mmol)를 생성된 혼합물에 첨가하고, 80℃에서 밤새 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 및 이어서 염수로 세척하였다. 유기 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공중에 농축하여 연황색 고체로서 13.8g(73.4%)의 D-2b(Ar= N,N'-다이-tert-부틸 3,5-다이-카복스아미도-페닐)를 수득하였다.

단계 5a- 무수 트라이플루오로아세트산(1.3㎖, 12당량) 및 H₂O₂(0.24㎖, 2.5당량)를 0℃에서 합하고, 2시간 동안 교반하였다. 트라이플루오로퍼아세트산을 함유하는 혼합물을 0℃에서 DCM중 단계 4로부터의 5-(3-브로모-2-플루오로-6-폼일-펜옥시)-N,N'-다이-tert-부틸-이소프탈아마이드(0.4g, 0.81mmol) 및 칼륨 포스페이 트(2.2g, 20당량)의 혼합물에 첨가하고, 반응 혼합물을 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 나트륨 바이설파이트 및 염수로 순차적으로 세척하였다. 폼에이트 에스터를 함유하는 용액을 진공중에 농축하고, 잔사를 THF(4㎖)에 용해시키고, H₂O(1㎖)중 LiOH·H₂O(0.43g, 3당량)의 용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, HCl(수성), 물 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 건조하고(Na₂SO₄), 여과하고, 증발시켜 0.300g(75%)의 5-(3-브로모-2-플루오로-6-하이드록시-펜옥시)-N,N'-다이-tert-부틸-이소프탈아마이드(D-2b, Ar= 3,5-다이-tert-부틸-다이카복스아미도-페닐)를 수득하였다.

단계 5b- POCl₃(0.29㎖, 5당량)을 60℃까지 가열된 MeCN 및 D-2b(Ar= 3,5-다이-tert-부틸-다이카복스아미도-페닐, 0.3g, 0.624mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 70℃까지 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 냉각하고, H₂O를 첨가하였다. 혼합물을 여과하여 조질 물질을 수득한 후, 메탄올에 용해시켰다. 유기 여액을 증발시켜 0.080g(35%)의 D-2b(Ar= 3,5-다이사이아노-페닐)를 수득하였다.

단계 6 및 7- D-2b(Ar= 3,5-다이사이아노-페닐, 80mg, 0.242mmol), A-6(0.07g, 1당량), K₂CO₃(0.74g, 1.2당량) 및 아세톤의 혼합물을 35℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 및 MeOH/DCM 사이에서 분할하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 증발시켜 조질 물질을 수득하고, HOAc(1㎖) 및 무수 아세트산(5 점적)에 용해시키고, 24시간 동안 110℃까지 가열하였다. 반응물을 냉각하고, 물을 첨가하고, 반응물을 45℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, EtOAc로 추출하고, 물 및 이어서 NaHCO₃ 및 이어서 염수로 세척하였다. 유기 층을 건조하고(Na₂SO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 MeOH/DCM 구배(0 내지 10% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂로 정제하여 0.020g(2 단계에 걸쳐 19%)의 I-7을 수득하였다.

3-클로로-5-하이드록시-벤조나이트릴 및 4-브로모-2,3-다이플루오로-벤즈알데하이드로부터 제조된 3-(3-브로모-2-플루오로-6-하이드록시-펜옥시)-5-클로로-벤조나이트릴을 5-(3-브로모-2-플루오로-6-폼일-펜옥시)-N,N'-다이-tert-부틸-이소-프탈아마이드 대신에 사용한 것을 제외하고는 I-6을 유사하게 제조하였다.

실시예 6

3-클로로-5-[3-에틸-2-플루오로-6-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-벤조나이트릴(I-8)

Pd(dppf)₂(0.014g, 0.1당량) 및 DIBAL-H(0.035mL, 0.2당량)를 함유하는 용액을 0℃에서 THF(0.3㎖)중에서 합하고, 30분 동안 교반하였다. 반응물을 실온까지 가온하고, I-6(0.08g, 0.176mmol)을 첨가하였다. 다이에틸 아연(1.5당량의 2M 용액)을 적가한 후, 반응물을 6시간 동안 60℃까지 가열하였다. 반응물을 냉각하고, 차가운 수성 NH₄Cl에 붓고, EtOAc/MeOH로 추출하였다. 유기 층을 증발시키고, 조질 물질을 분석용 HPLC로 정제하여 0.005g(7%)의 I-8을 수득하였다.

실시예 7

3-클로로-5-[5-클로로-2-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-벤조일]-벤조나이트릴(I-1)

단계 2- 고체 NaBH₄를 0℃까지 냉각된 H₂O(1㎖) 및 EtOH(5㎖)의 혼합물중 20b(0.55g)의 용액에 한 분획으로 첨가하였다. 용액을 실온까지 가온하고, 30분 동안 교반하였다. 5% HCl의 용액을 천천히 첨가하고, 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 휘발성 물질을 증발시켜 0.55g(99%)의 22a를 수득하였다.

단계 3- TFA(2㎖)를 실온에서 DCM(6㎖)중 22a(0.55g)의 용액에 첨가하였다. 5시간 동안 교반한 후, 휘발성 물질을 증발시키고, 제거하였다. 잔류하는 물질을 DCM에 용해시키고, NaHCO₃의 포화 수용액에 첨가하였다. 용액을 5% 수성 HCl로 천천히 산성화시키고, DCM으로 추출하였다. 휘발성 물질을 증발시켜 중간체 산을 수득하고, DCM(2㎖) 및 MeOH(2㎖)의 혼합물에 용해시키고, 트라이메틸실릴다이아조메 탄(헥산중 1.0M)의 용액을 황색이 지속될 때까지 첨가하였다. 반응물을 HOAc로 급랭시키고, 휘발성 물질을 증발시켜 0.39g(79%)의 22b를 수득하였다.

단계 4- 하이드라진(0.29㎖, 9당량)을 EtOH(10㎖)중 22b(0.38g, 1.0mmol)의 용액에 첨가하였다. 용액을 5분 동안 가열 환류하고, 실온까지 냉각하고, 1시간 동안 교반하였다. 휘발성 반응물을 증발시키고, 잔사를 DCM에 용해시키고, 염수로 세척하고, 건조하고(Na₂SO₄), 여과하고, 증발시켜 0.38g(100%)의 22c를 수득하였다.

단계 5- 메틸 이소사이안에이트(0.07㎖, 1.05당량)를 무수 THF(5㎖)중 22c(0.38g, 1.0mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 휘발성 물질을 제거하였다. THF 및 DCM을 사용하여 타이투레이션함으로써 물질을 정제하여 0.41g(93%)의 22d를 수득하였다.

단계 6- 고체 KO-tert-Bu(0.01g, 0.1당량)를 tert-BuOH(9㎖)중 22d(0.41g, 0.97mmol)의 용액에 첨가하고, 용액을 24시간 동안 환류하에 가열하였다. 용액을 냉각하고, 포화 NH₄Cl 수용액에 첨가하고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 MeOH/DCM 구배에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 0.12g(31%)의 24를 수득하였다.

단계 7- 1,1,1-트라이아세톡시-1,1-다이하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온(데스 마틴(Dess Martin) 시약, 0.11g, 1.5당량)을 DCM(3㎖)중 24(0.07g, 0.17mmol)의 용액에 첨가하였다. 1시간 후, SiO₂를 반응 혼합물에 첨가하고, 휘발 성 물질을 제거하였다. SiO₂상에 흡착된 생성물을 SiO₂ 컬럼상에 부하하고, MeOH/DCM 구배(0% 내지 10% MeOH)에 의해 용리하여 0.062g(89%)의 I-1을 수득하였다.

실시예 8

3-{6-브로모-2-플루오로-3-[2-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일)-에틸]-펜옥시}-5-클로로-벤조나이트릴(I-9)

단계 1- PBr₃(8.35g, 1.1당량)을 0℃까지 냉각된 DCM(80㎖)중 26a(10g, 28mmol)의 용액에 첨가하고, 용액을 실온까지 가온하였다. 2시간 후, 반응물을 NaHCO₃에 천천히 붓고, 수성 층을 EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 농축하여 황색 오일을 수득하였다. 상기 물질을 헥산/EtOAc에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 7.25g(62%)의 26b를 수득하였다.

단계 2- nBuLi(헥산중 1.6M 용액 5.48㎖, 1당량)를 0℃까지 냉각된 THF(20㎖)중 다이이소프로필아민(1.18㎖, 1당량)의 용액에 첨가하였다. 용액을 -78℃까지 냉각하고, tert-BuOAc(1.18㎖, 1당량)를 첨가하였다. 용액을 30분 동안 숙성하 고, -50℃까지 가온하고, THF(10㎖)중 26b(3.6g, 8.8mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 천천히 가온하고, 수성 NH₄Cl로 급랭시켰다. 수성 층을 EtOAc로 추출하고, 합한 유기 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 농축하여 추가 정제 없이 사용되는 황색 오일로서 3.8g(96%)의 26c를 수득하였다

실시예 7의 단계 3 내지 6에 기술된 바와 같이 에스터 26c를 트라이아졸론으로 전환시켰다. 단계 7에서, 용매를 증발시켜 천천히 고체화되는 투명한 오일로서 0.036g(60%)의 I-9를 수득하였다

실시예 9

2-아미노-3-메틸-부티르산 3-[4-브로모-3-(3-클로로-5-사이아노-펜옥시)-2-플루오로-벤질]-4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-[1,2,4]트라이아졸-1-일메틸 에스터, 하이드로클로라이드 염

단계 1 및 2- I-9(4.3mmol), MeOH(90㎖) 및 37% 수성 CH₂O(18㎖)의 용액을 환류하에 가열하였다. 1.5시간 후, 용액을 질소의 스트림하에 냉각하였다. 반응물을 농축하고, 부피가 약 30㎖까지 감소된 경우, 고체를 침전시키고, 10g의 얼음을 첨가하였다. 고체를 여과하고, 50℃에서 밤새 진공중에 저장하여 30a를 수득하였다. TEA(0.2당량)와 DMF(1㎖)의 용액 및 N-Boc-발린 N-카복시언하이드라이 드(CASRN 141468-55-5, 3.66mmol)와 DMF(2㎖)의 용액을 30a(3.05mmol) 및 DMF(5㎖)의 용액에 순차적으로 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 및 EtOAc 사이에서 분할하였다. 수성 층을 EtOAc로 추출하고, 합한 유기 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 1% TEA를 함유하는 MeOH/MeOH 에 의해 전개되는 제조용 TLC로 정제하여 30b를 수득할 수 있다.

단계 3- Et₂O중 HCl의 용액(3.5당량의 HCl, Et₂O중 1M 용액)을 N₂ 대기하에 유지된 30b 및 Et₂O의 혼합물에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 고체를 원심분리기에 침전시키고, 용매를 경사분리하였다. 생성된 고체를 EtOAc/헥산으로 2회 트라이투레이션(trituration)하고, 상청액을 폐기하였다. 고체를 진공중에 건조하여 30c를 수득하였다.

단계 4- 숙신에이트 유사체를 다음과 같이 제조하였다. 하이드록시메틸 부가제 30a(3.05mmol), 무수 숙신산(3.2mmol), DMAP(20mg, 0.15mmol) 및 NMM(0.40㎖, 3.7mmol)을 DCM(35㎖)에 용해시키고, 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0.5M 수성 KHSO₄에 붓고, DCM으로 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고(Na₂SO₄), 여과하고, 증발시켜 조질 생성물을 수득하고, 구배(2:1 내지 3:1 EtOAc/헥산, 및 이어서 0.5% HOAc를 갖는 3:1 EtOAc/헥산)에 의해 용리하는 SiO₂의 패드를 통해 여과하여 30d를 수득하였다.

실시예 10

3-다이플루오로메틸-5-[3-에틸-2-플루오로-6-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-벤조나이트릴(I-15)

단계 1- 부티로나이트릴(15㎖)중 32(1g, 5.9mmol) 및 K₂CO₃(0.98g, 7.04mmol)의 용액을 80℃까지 가열하고, 부티로나이트릴(8㎖)중 34(1.25g, 1.25mmol; CASRN 644985-24-0)의 용액을 첨가하고, 밤새 계속 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, H₂O(40㎖) 및 EtOAc(40㎖) 사이에서 분할하였다. 유기 상을 염수로 추출하고, 염수 층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 EtOAc 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 고체를 DCM/헥산(1:1)으로 재결정화하여 황색 고체로서 1.24g의 36a를 수득하였다: ms[M+H]⁺= 371.

단계 2- 50㎖ 플라스크를 36a(1.24g, 3.35mmol), KH₂PO₄(9.13g, 67.1mmol) 및 DCM(15㎖)로 충전하고, 0℃까지 냉각하였다. 제 2 플라스크를 (CF₃CO)₂(TFAA, 4.76㎖, 10당량)로 충전하고, N₂ 대기하에 0℃까지 냉각하였다. H₂O₂(0.4㎖, 2당량, H₂O중 30%wt/vol)를 TFAA에 적가하였다. 생성된 트라이플루오로퍼아세트산 용액을 알데하이드를 함유하는 현탁액에 적가하고, 생성된 혼합물을 0℃에서 15분 동안, 이어서 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 5% 나트륨 바이설파이트(50㎖)로 급랭시킨 후, DCM(50㎖)을 첨가하였다. DCM 추출물을 분리하고, 50% 염수로 세척하였다. 염수 용액을 DCM으로 2회 역추출하였다. 합한 DCM 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 여전히 소량의 36a를 함유하는 1.39g의 황색 오일을 수득하였다. 오일을 THF(12㎖)에 용해시키고, 0℃까지 냉각하고, LiOH·H₂O(0.420g) 및 H₂O(3.7㎖)의 용액을 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 2% HCl(5㎖), H₂O(30㎖) 및 EtOAc(30㎖)를 첨가함으로써 반응물을 급랭시켰다. EtOAc 층을 분리하고, 수성 층을 DCM(2 x 25㎖)으로 2회 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 생성된 고체를 DCM/헥산으로부터 재결정화하여 백색 분말로서 520mg의 36b를 수득하였다. 모액을 30% EtOAc/헥산에 의해 전개되는 제조용 TLC로 더욱 정제하고, SiO₂로부터 용리된 고체를 재결정화하여 부가적인 315mg의 36b를 수득하였다.

단계 3- 무수 아세톤(10㎖)중 36b(583mg, 1.63mmol), 3-요오도메틸-5-메탄설 폰일-4-메틸-4H-[1,2,4]트라이아졸(490mg 1.68mmol) 및 K₂CO₃(271mg, 2mmol)의 혼합물을 2시간 동안 60℃까지 가열하였다. 용액을 실온까지 냉각하고, EtOAc(50㎖) 및 H₂O(50㎖) 사이에서 분할하였다. 수성 상을 EtOAc(2 x 40㎖)로 2회 추출하고, 합한 EtOAc 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 회수된 생성물을 고온 Et₂O/DCM/헥산(약 10/1/6)으로 트라이투레이션하여 황색 분말로서 796mg의 38a를 수득하였다: ms[M+H]⁺= 531 및 533.

단계 4- 오븐-건조된 플라스크를 1,1'-비스-(다이페닐포스핀)페로센 Pd(II) 클로라이드 DCM 착물(15.4mg) 및 무수 THF(2㎖)로 충전하고, 아르곤 대기하에 0℃까지 냉각하였다. DIBAL-H(0.026㎖, 톨루엔중 1.5M 용액)를 현탁액에 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 38a(0.1g, 0.198mmol) 및 무수 THF(1.5㎖)의 용액을 생성된 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 5분 동안 교반한 후, Et₂Zn(0.35㎖, 톨루엔중 1.1M)을 첨가하고, 생성된 용액을 60℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 급랭된 포화 수성 NH₄Cl(15㎖), 및 이어서 H₂O(20㎖) 및 EtOAc(30㎖)를 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 수성 상을 EtOAc로 2회 추출하였다. 합한 EtOAc 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 60% EtOAc/헥산에 의해 전개되는 제조용 TLC로 정제하고, 용리하여 백색 고체로서 135mg의 38b를 수득하였다: ms[M+H]⁺= 421.

단계 5- Ac₂O(0.05㎖)를 38b(135mg, 0.281mmol) 및 빙상 HOAc(2㎖)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 110℃에서 24시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, EtOAc(30㎖) 및 포화 수성 NaHCO₃(30㎖) 사이에서 분할하였다. 2 상(biphasic) 혼합물을 격렬하게 교반하고, 분리하였다. EtOAc 층을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 80% EtOAc/헥산에 의해 전개하는 2개의 제조용 SiO₂ TLC 플레이트상에서 정제하였다. 회수된 생성물을 5% MeOH/DCM으로 전개하는 제조용 SiO₂ TLC 플레이트상에서 더욱 정제하여 백색 분말로서 0.035g의 I-15를 수득하였다: 융점 160-161℃; [M+H]⁺= 419.

단계 5에 기술된 과정을 이용하여 38a를 가수분해함으로써 I-14를 제조하였다.

실시예 11

3-[3-브로모-2-플루오로-6-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-에틸-벤조나이트릴(I-17)

단계 1a- 이소-프로필마그네슘 클로라이드(THF중 2M)의 용액을 N₂ 대기하에 무수 THF(100㎖)중 1,3-다이브로모-5-(4-메톡시-벤질옥시)-벤젠(40a, 25g, 67.19mmol, CASRN 915410-93-4)의 용액에 15분에 걸쳐 적가하였다. 2.5시간 동안 교반한 후, 혼합물을 빙 욕에서 냉각하고, 무수 DMF(16㎖)로 급랭시켰다. 용액을 30분 동안 교반한 후, 실온까지 가온하였다. 잔사를 포화 수성 NH₄Cl 및 Et₂O 사이에서 분할하였다. 에터 층을 분리하고, 염수로 세척하였다. 수성 상을 에터로 추출하고, 합한 에터 추출물을 건조하고, 여과하고, 증발시켜 21.75g의 40b를 수득하였다.

단계 1b- 하이드록실아민 하이드로클로라이드(4.88g, 70mmol) 분말을 물(87㎖)중 NaHCO₃(5.86g, 70mmol)의 용액에 첨가하였다. 상기 투명한 용액을 MeOH/THF(4:1, 100㎖)중 40b(21.7g, 67mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 물질을 진공중에 액화하여 대부분의 휘발성 성분을 제 거하였다. 잔사를 EtOAc에 용해시키고, 분별 깔대기로 옮겼다. 유기 상을 단리하고, 염수 용액으로 세척하였다. 수성 상을 EtOAc로 추출하였다. 합한 EtOAc 추출물을 건조하고, 여과하고, 증발시켜 24.32g의 40c를 수득하였다.

단계 1c- 피리딘(32.4㎖)을 무수 다이옥산(250㎖)중 40c(24.32g, 약 67mmol)의 용액에 첨가하고, 이어서 TFAA(18.7㎖)를 천천히 적가하였다. 혼합물을 N₂ 대기하에 4시간 동안 가열한 후, 실온까지 냉각하고, 진공중에 농축하였다. 잔사를 DCM(160㎖) 및 수성 0.5% HCl(160㎖) 사이에서 분할하고, 분별 깔대기로 옮겼다. 유기 상을 단리하고, 염수로 세척하였다. 수성 상을 DCM으로 추출하고, 합하고, 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 생성물을 고온 DCM/헥산으로부터 결정화하여 17.33g의 40d를 수득하였다.

단계 2- 40d(6g, 18.86mmol), 트라이부틸-비닐주석(6㎖, 20.74mmol), (Ph₃P)₄P(2.15g, 1.9mmol) 및 무수 톨루엔(70㎖)의 용액을 2시간 동안 환류하에 가열하였다. 용매를 증발시키고, 조질 생성물을 아날로긱스(Analogix) 제조용 HPLC 컬럼(Sf-40-ISOG)에 흡착시키고, EtOAc/헥산 구배(10 내지 20% EtOAc에 의해 용리하여 연황색 고체로서 4.728g의 44a를 수득하였다.

단계 3- TFA(1.8㎖)를 44a(4.73g, 17.8mmol), 아니솔(5㎖) 및 톨루엔(28㎖)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 60℃까지 가열된 욕을 사용하여 휘발성 성분을 로토뱁(rotovap)상에서 제거하였다. 잔사를 EtOAc/헥산에 용해시키면, 생성물이 천천히 침전하였다. 생성물을 여과하고, EtOAc/헥산으로 세척하여 연황색 분말로서 2.04g의 44b를 수득하였다: [M-H]= 144.

단계 4 내지 6을 실시예 10의 단계 1 내지 3과 유사하게 수행하여 43을 수득하였다.

단계 7- EtOH(5㎖) 및 THF(약 6㎖)중 43(150mg, 0.296mmol) 및 PtO₂(10㎖)의 현탁액을 가온하여 43을 용해시킨다. 현탁액을 H₂ 대기(H₂ 볼룬)하에 1시간 동안 교반하였다. 용액을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, MeOH/THF로 세척하였다. 용매를 진공중에 증발시켜 연황색 고체로서 0.161g의 45a를 수득하였다.

단계 8- 실시예 10의 단계 5와 유사한 과정을 사용하여 45a로부터 I-19를 수득하였다; C₁₈H₁₆N₄O₃BrF에 대한 분석적인 계산치: C, 51.02; H, 3.61; N, 12.53. 측정치: C, 50.89; H, 3.59; N, 12.27.

실시예 10의 단계 4의 과정을 사용하는 Et₂Zn과의 팔라듐 촉매화된 커플링에 의해 45a를 45b로 전환시키고, 실시예 10의 단계 5와 유사한 과정을 사용하여 45b를 가수분해하는 것을 제외하고는 유사한 순서로 I-18을 제조하였다.

실시예 12

3-사이클로프로필-5-[3-에틸-2-플루오로-6-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-벤조나이트릴(I-19)

올레핀 46a를 상기 실시예에 기술된 과정을 사용하여 44a 및 34로부터 제조하였다.

단계 3- Pd(OAc)₂(20mg)를 46a(611mg, 1.77mmol), THF(20㎖) 및 Et₂O(5㎖)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 빙수 욕에서 냉각하였다. 30 내지 40㎖의 CH₂N₂/Et₂O를 상기 용액에 분할식으로 첨가하고, 생성된 용액을 25분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 증발시키고, 조질 생성물을 35% EtOAc/헥산에 의해 전개되는 제조용 TLC 플레이트상에서 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하였다. SiO₂를 용리하여 황색 분말로서 500mg의 46b를 수득하였다.

바이엘-빌리거 산화, 폼에이트 에스터의 비누화, 트라이아졸론일 측쇄의 도입 및 메틸 설폰일의 가수분해를 실시예 10의 단계 2 내지 5와 유사한 과정에 의해 수행하여 I-18을 수득하였다.

실시예 13

3-[3-브로모-2-플루오로-6-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-(2,2,2-트라이플루오로-에틸)-벤조나이트릴(I-20)

단계 2- Bu₄N⁺F^-(1.6㎖, THF중 1.0M)를 52b(5.14g, 16mmol), Me₃SiCF₃(3.75㎖, 24mmol) 및 무수 THF(70㎖)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 3.5시간 동안 교반하였다. 용액의 pH를 2N HCl을 사용하여 약 2로 조정하고, EtOAc(80㎖), H₂O(40㎖) 및 염수(60㎖)를 첨가하였다. EtOAc 상을 분리하고, 수성 상을 EtOAc(2 x 60㎖)로 2회 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 EtOAc/헥산 구배(0 내지 29% EtOAc)에 의해 용리하는 아날로긱스 HPLC상에서 정제하여 황색 오일로서 2.74g의 54a를 수득하였다: [M-H]^-= 389 및 391.

단계 3- 티오카본일다이이미다졸(1.4g, 90% 순수, 1.5당량)을 54a(1.98g, 5.06mmol) 및 무수 THF(20㎖)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 환류하에 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 밤새 교반하였다. EtOAc(60㎖) 및 염수(80㎖)를 첨가하였다. EtOAc 상을 분리하고, 수성 상을 EtOAc(2 x 50㎖)로 2회 추출하였다. 합한 EtOAc 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 금색 오일로서 2.9g의 티오카밤에이트를 수득하였다. 티오카밤에이트(1.0g, 2.0mmol), Bu₃SnH(0.79㎖. 1.5당량), AIBN(66mg, 0.2당량) 및 톨루엔(12㎖)의 혼합물을 85℃에서 3시간 동안 가열하고, 냉각하고, 휘발성 성분을 증발시켰다. 생성물을 EtOAc/헥산 구배(5 내지 9% EtOAc)에 의해 용리하는 SiO₂ HPLC로 정제하여 0.375g의 54b를 수득하였다: ms[M-H]= 375.

단계 4- 플라스크를 54b(4.89g, 13.69mmol), Zn(CN)₂(997mg, 0.62당량), Pd(PPh₃)₄(1.58g, 0.1당량) 및 무수 DMF(18㎖)로 충전하였다. 플라스크를 Ar로 플러싱하고, 약 15시간 동안 80℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, DMF를 진공중에 제거하였다. 잔사를 EtOAc(약 80㎖)에 용해시키고, 2M NH₄OH(70㎖)로 세척하였다. EtOAc 상을 분리하고, H₂O 및 염수로 순차적으로 세척하였다. 수성 층을 EtOAc(2 x 70㎖)로 2회 역추출하고, 합한 EtOAc 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 무수 컬럼을 장착하고, EtOAc/헥산 구배(5% 단계적 구배인 5 내지 25% EtOAc)에 의해 용리하는 SiO₂ HPLC로 정제하여 연황색 고체로서 33.35g의 56a를 수득하였다.

나머지 합성 단계를 실시예 10에 기술된 단계와 유사하게 수행하였다.

실시예 14

3-[6-클로로-2-메틸-3-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-클로로-벤조나이트릴(I-11)

단계 1- 56(0.75g, 4.9mmol), 58(0.86g, 4.9mmol), K₂CO₃(1.01g, 7.35mmol) 및 THF(12㎖)의 용액을 50℃까지 가열하고, N₂ 대기하에 교반하였다. 2시간 후, 부가적인 1당량의 K₂CO₃을 첨가하고, 밤새 계속 가열하였다. 22시간 후, 과량의 K₂CO₃을 첨가하면, 온도는 70℃까지 상승하였다. 3.5시간 후, 용액을 냉각하고, 포화 수성 NH₄Cl 및 EtOAc를 첨가하였다. EtOAc 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 건조하고, 여과하고, 증발시켜 1.2g의 60a를 수득하였다.

I-11의 합성을 실시예 1의 단계 2 내지 6에 기술된 과정에 따라 완료하였다.

단계 1에서 58을 3-클로로-2,4-다이플루오로-나이트로벤젠[CASRN 3847-58-3]으로 대체한 것을 제외하고는 I-21을 유사하게 제조하였다.

실시예 15

3-{3-브로모-2-플루오로-6-[2-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일)-에틸]-펜옥시}-5-클로로-벤조나이트릴(I-16)

32를 3-클로로-5-하이드록시-벤조나이트릴로 대체한 것을 제외하고는 실시예 10의 단계 1에 기술된 과정을 이용하여 출발 물질인 다이아릴 에터 64a를 제조하였다.

단계 1- NaBH₄(0.765g, 20.23mmol)를 THF/EtOH(1:1, 36㎖)중 64a(3.5g, 9.87mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 H₂O로 급랭시키고, 생성된 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 추출물을 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 약 2.5g의 64b를 수득하였다.

단계 2- 메실 클로라이드(0.81㎖, 10.52mmol)를 0℃까지 냉각된 DCM중 64b(2.5g, 7.01mmol) 및 TEA(1.7㎖, 12.27mmol)의 용액에 첨가하였다. 40분 후, 반응물을 5% H₂SO₄(40㎖)로 급랭시키고, 생성된 용액을 DCM으로 추출하고, 추출물을 포화 수성 KBr로 세척하고, 건조하고, 여과하고, 증발시켜 추가 정제에 의해 사용되는 3.1g의 64c를 수득하였다.

단계 3- 64c(3.0g, 6.881mmol), LiBr(1.195g, 86.84mmol) 및 THF의 용액을 환류하에 140분 동안 가열하고, 실온까지 냉각하고, 용해되지 않은 고체를 여과에 의해 제거하였다. 고체를 DCM 및 아세톤으로 세척하고, 합한 여액을 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서 2.8g의 64d를 수득하였다.

단계 4- tert-부틸 에틸 말론에이트(0.394g, 2.096mmol)의 용액을 0℃까지 냉각된 DMF 및 NaH(0.23g, 5.715mmol, 60% 광유 분산액)의 현탁액에 첨가하였다. 용액을 실온까지 가온하였다. 용액을 0℃까지 다시 냉각하고, 64d(0.8g, 1.905mmol) 및 DMF의 용액을 천천히 첨가하였다. 용액을 실온에서 1.75시간 동안 교반한 후, 포화 수성 NH₄Cl로 급랭시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 합한 추출물을 H₂O 및 염수로 순차적으로 세척한 후, 건조하고, 여과하고, 증발시켜 0.87g의 66a를 수득하였다.

단계 5- 0℃의 66a(0.87g), TFA(3㎖) 및 DCM(3.5㎖)의 용액을 실온까지 가온한 후, 70℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 냉각하고, 휘발성 용매를 증발시켰다. 잔사를 EtOAc에 용해시키고, NaHCO₃에 부었다. EtOAc 추출물을 건조하고, 여과하 고, 증발시켰다. 잔사를 소량의 H₂O 및 DMF(2㎖)에 용해시키고, 마이크로파 합성기에서 약 30분 동안 150℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, EtOAc로 추출하였다. 추출물을 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 높은 진공하에 밤새 방치하였다. 조질 생성물을 EtOAc/헥산 구배(0 내지 25% EtOAc)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 무색 오일로서 0.200g의 66b를 수득하였다.

단계 6- EtOH(1㎖)중 66b(0.11g, 0.258mmol) 및 하이드라진(0.081㎖)의 용액을 78℃까지 가열하였다. 3시간 후, 추가로 0.05㎖의 하이드라진을 첨가하고, 다시 2시간 후, 용액을 냉각하고, 휘발성 성분을 초기에는 로토뱁상에서, 이어서 높은 진공하에 제거하였다. 하이드라존 68a를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 7- THF중 68a(0.1g, 0.242mmol) 및 MeNCO(0.002g, 0.362mmol)의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 MeOH의 첨가에 의해 급랭시키고, 증발시켜 백색 고체로서 0.01g의 68b를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 8- tert-BuOH중 68b(0.1g, 0.213mmol) 및 칼륨 tert-부톡사이드(0.0084g, 0.75mmol)의 용액을 밤새 75℃까지 가열하였다. 반응물을 냉각하고, 차가운 수성 5% HCl에 붓고, 생성된 혼합물을 10% MeOH/DCM으로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 건조하고, 여과하고, 증발시켜 백색 고체로서 0.030g의 I-16을 수득하였다.

실시예 16

3-[2-브로모-5-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-클로로-벤조나이트릴(I-12)

단계 1- 칼륨 tert-부톡사이드(54.7㎖, 54.7mmol, THF중 1M 용액)의 용액을 0℃까지 냉각된 THF(95㎖) 및 56(7.0g, 45.58mmol)의 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1시간 동안 교반한 후, 다시 0℃까지 냉각하고, 70(7.25g, 45.58mmol) 및 THF(8.6㎖)의 용액을 첨가하고, 생성된 불균질한 용액을 실온까지 가온한 후, 2시간 동안 50℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 포화 수성 NH₄Cl에 붓고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시키고, 생성된 고체를 EtOH/H₂0로 트라이투레이션하여 백색 고체로서 16.75g의 72a를 수득하고, 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 2- DMSO(100㎖)중 NaH(3.8g, 95.72mmol, 60% 광유 분산액)의 현탁액을 용액이 균질하게 될 때까지 70℃에서 가열하였다. 플라스크를 오일 욕으로부터 제거하고, 벤즈알데하이드 옥심(11.0g, 91.164mmol)을 첨가하여 황색 페이스트를 형성하고, 생성된 혼합물을 70℃에서 추가로 0.5시간 동안 가온하였다. 용액을 다시 0℃까지 냉각하고, 72a(13.34g, 45.58mmol) 및 DMSO(100㎖)의 용액을 카눌라를 사용하여 첨가하였다. 용액을 1시간 동안 70℃까지 가온하고, 이때 황색 페이스트를 용해시키고, 반응을 완료하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 1M HCl에 부어 임의의 과량의 염기를 급랭시켰다. 생성된 용액을 EtOAc로 추출하고, 합한 추출물을 염수로 3회 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 황색 고체를 수득하였다. 고체를 Et₂O로 트라이투레이션하고, 생성된 고체를 여과에 의해 수집하여 6.20g(2 단계에 걸쳐 47%)의 72b를 수득하였다: ms[M-H]= 289.

단계 3- 아세톤(56㎖)중 72b(3.27g, 11.25mmol), A-6(3.387g, 11.25mmol) 및 K₂CO₃(1.87g, 13.49mmol)의 현탁액을 60℃에서 110분 동안 가열한 후, 실온까지 냉각하였다. 과량의 K₂CO₃을 여과에 의해 제거하고, 잔류하는 용액을 물 및 EtOAc 사이에서 분할하였다. 수성 층을 EtOAc로 추출하고, 합한 유기 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 황색 오일로서 74a를 수득하였다.

단계 4- NH₄Cl(2.4g, 44.99mmol) 및 철 분말(2.5g, 44.992mmol)을 EtOH(50㎖)/H₂O(12㎖)중 74a(5.2g, 11.25mmol)의 현탁액에 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 45분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, EtOAc로 세정하였다. 수성 층을 분리하고, EtOAc로 추출하고, 합한 유기 상을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 고압 진공하의 녹색 포말로서 4.085g의 74b를 형성하는 녹색 오일을 수득하였다.

단계 5- tert-부틸 나이트라이트(1.2g, 12.1mmol)를 60℃까지 가온된 MeCN(12㎖), CuBr₂(1.78g, 6.914mmol) 및 LiBr(1.8g, 20.742mmol)의 용액에 첨가하였다. 흑색 반응 혼합물을 60℃에서 25분 동안 가열하였다. 74b(3g, 6.914mmol) 및 MeCN(16㎖)의 용액을 첨가하고, 반응물을 75분 동안 다시 60℃까지 가열한 후, 실온까지 냉각하고, 5% 수성 HBr로 희석하였다. EtOAc를 첨가하고, 수성 상을 EtOAc로 추출하였다. 합한 EtOAc 추출물을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 MeOH/DCM 구배(3 내지 5% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 백색 포말로서 2.348g의 74c(68%)를 수득하였다.

단계 6- 74c(0.300g, 0.604mmol), Ac₂O(0.102㎖, 1.087mmol) 및 HOAc(3㎖)의 용액을 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, H₂O로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 EtOAc 추출물을 포화 수성 NaHCO₃ 및 1N NaOH로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 MeOH/DCM 단계적 구배(3, 4 및 5% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하였다. 회수된 잔사를 THF(2㎖)에 용해시키고, 0℃까지 냉각하고, H₂O(1㎖)중 LiOH·H₂O(0.038g)의 용액을 첨가하였다. 용액을 1시간 동안 교반하면서 실온까지 가온하고, 1N HCl로 급랭시키고, 수성 층을 EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과 하고, 증발시켜 0.065g의 I-12를 수득하였다.

실시예 17

3-[2-브로모-5-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-5-클로로-벤조나이트릴(I-10)

단계 5의 브롬화를 하기 한 바와 같은 유사한 염소화(실시예 16의 단계 7)로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 16에서 I-12에 대해 기술한 바와 같이 I-10을 제조하였다.

단계 7- tert-부틸 나이트라이트 74b(0.208g, 2.01mmol)를 60℃까지 가온된 MeCN, CuCl₂(0.178g, 1.32mmol) 및 LiCl(0.098g, 2.305mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 25분 동안 가열하고, 74b(0.50g, 1.15mmol) 및 MeCN의 용액을 첨가하였다. 용액을 2시간 동안 다시 60℃까지 가열한 후, 실온까지 냉각하고, 포화 수성 NH₄Cl로 희석하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 합한 EtOAc 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 MeOH/DCM 구배(3 내지 5% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 주황색 포말로서 0.422g(81%)의 74d를 수득하였다.

단계 6- 74d(0.422g, 0.931mmol), Ac₂O(0.157㎖, 1.676mmol) 및 HOAc의 용액을 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고, H₂O 및 EtOAc 사이에서 분할하였다. 유기 추출물을 포화 NaHCO₃으로 조심스럽게 세척하고, 합한 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 적색 오일을 수득하였다. 회수된 잔사를 THF(2㎖)에 용해시키고, 0℃까지 냉각하고, H₂O(1㎖)중 LiOH·H₂O(0.038g)의 용액을 첨가하였다. 용액을 1시간 동안 교반하면서 실온까지 가온하고, 1N HCl로 급랭시키고, 수성 층을 EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 0.0985g의 I-10을 수득하였다.

실시예 18

3-클로로-5-[6-에틸-2-플루오로-3-(4-메틸-5-옥소-4,5-다이하이드로-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-일메톡시)-펜옥시]-벤조나이트릴(I-13)

단계 1- 칼륨 tert-부톡사이드(54.7㎖, 54.7mmol, THF중 1M 용액)의 용액을 0℃까지 냉각된 THF(95㎖) 및 56(7.0g, 45.58mmol)의 용액에 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온까지 가온하고, 1시간 동안 교반한 후, 0℃까지 다시 냉각하고, 75(7.25g, 40.8mmol) 및 THF(10㎖)의 용액을 첨가하고, 생성된 불균질한 혼합물을 실온까지 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용액을 포화 수성 NH₄Cl에 붓 고, EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켜 점성 황색 오일을 수득하였다. 조질 생성물을 15% EtOAc/헥산에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 6.203g(44%)의 76a를 수득하였다.

단계 2 내지 5를 실시예 16의 단계 2 내지 5에 기술된 과정과 유사하게 수행하여 궁극적으로 78c를 수득하였다.

단계 6- Pd(dppf)Cl₂·DCM(0.158g, 0.194mmol), 다이에틸아연(3.53㎖, 3.88mmol, 톨루엔중 1.1M 용액) 및 2-다이메틸아미노-에탄올(0.039㎖, 0.388mmol)을 78c(1g, 1.939mmol) 및 THF(6㎖)의 용액에 순차적으로 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각하고, 포화 수성 NH₄Cl에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 증발시켰다. 조질 생성물을 MeOH/DCM 단계적 구배(3, 5 및 10% MeOH)에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하여 0.779(86%)의 78d를 수득하였다.

단계 2- 78d(0.779g, 1.676mmol), 무수 아세트산(0.471㎖, 5.0mmol) 및 HOAc(4㎖)의 용액을 100℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시키고, 잔사를 EtOAc 및 포화 수성 NaHCO₃ 사이에서 분할하였다. EtOAc 상을 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 실온에서 1시간 동안 H₂O(1.5㎖)중 LiOH·H₂O(0.211g)로 처리하였다. 염기성 용액을 1N HCl로 산성화시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기 추출 물을 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 잔사를 5% MeOH/DCM에 의해 용리하는 SiO₂ 크로마토그래피로 정제하였다. 회수된 생성물을 DCM 및 DCM/MeOH/NH₄OH(60:10:1)의 1:1 용액에 의해 전개되는 제조용 SiO₂ TLC 플레이트상에서 추가로 정제하여 0.129g의 I-13을 수득하였다.

실시예 19

HIV-1 역전사 효소 분석

RNA-의존 DNA 중합 효소 활성을 바이오틴화된 프라이머 올리고뉴클레오티드와 삼중수소 dNTP 기질을 사용하여 측정하였다. 새롭게 합성된 DNA를 스트렙타비딘 코팅된 섬광 근접 측정법(SPA) 비드(아머샴(Amersham))상에 바이오틴화된 프라이머 분자를 포착함으로써 정량화하였다. 중합 효소 분석 기질의 서열은 다음과 같다: 18nt DNA 프라이머, 5'-바이오틴/GTC CCT GTT CGG GCG CCA-3'; 47nt RNA 주형, 5'-GGG UCU CUC UGG UUA GAC CAC UCU AGC AGU GGC GCC CGA ACA GGG AC-3'. 바이오틴화된 DNA 프라이머는 인테그레이티드 디엔에이 테크놀로지스 인코포레이티드(Integrated DNA Technologies Inc.)에서 입수하였고, RNA 주형은 다마콘(Dharmacon)에 의해 합성하였다. DNA 중합 효소 분석(최종 부피 50㎕)은 45mM 트리스-HCl, pH 8.0, 45mM NaCl, 2.7mM Mg(CH₃COO)₂, 0.045% 트리톤(Triton) X-100w/v, 0.9mM EDTA에서, 32nM 바이오틴화된 DNA 프라이머, 64nM RNA 기질, dGTP, dCTP, dTTP(각 5μM에서), 103nM [³H]-dATP(특이적 활성도= 29μCi/mmol)를 포함하 였다. 반응물은 IC₅₀ 측정을 위해 100% DMSO중 일련의 화합물의 희석액 5㎕를 포함하고, DMSO의 최종 농도는 10%였다. 반응은 30㎕의 HIV-RT 효소(1 내지 3nM의 최종 농도)를 첨가함으로써 개시되었다. 단백질 농도는 30분 이상의 배양 시간 동안 선형 생성물 형성을 제공하도록 조절되었다. 30분 동안 30℃에서의 배양 후에, 200mM EDTA(pH 8.0) 50㎕ 및 2mg/㎖ SA-PVT SPA 비드(아머샴, RPNQ0009, 20mM 트리스-HCl, pH 8.0, 100mM EDTA 및 1% BSA에서 재가공되었다)를 첨가하여 반응물을 급랭시켰다. 비드를 밤새 침전시키고, SPA 신호를 96-웰 탑 카운터-NXT(팩커드(Packard))로 계수하였다. IC₅₀ 값을 그래프패드(GraphPad)를 사용하여 S자 회귀 분석에 의해 얻었다.

실시예 20

항바이러스 분석 방법

항-HIV 항바이러스 활성을 포웰즈(Pauwels) 등의 문헌[J. Virol. Methods 1988 20:309-321]의 방법의 변형을 사용하여 평가하였다. 방법은 감염에 의해 매개된 세포-사멸로부터 HIV-감염된 T 림포블라스토이드 세포(MT4 세포)를 보호하는 화합물의 능력에 기초한다. 분석의 종말점은 배양균내의 세포 생존율이 50%만큼 보존되는 화합물의 농도("50% 억제 농도"; IC₅₀)로서 계산되었다. 배양균의 세포 생존율은 가용성 황색 3-[4,5-다이메틸티아졸-2-일]-2,5-다이페닐테트라졸륨 브로마이드(MTT)의 흡수, 및 보라색 불용성 포르마잔 염으로의 이의 환원에 의해 측정되었다. 가용화 후, 분광광도 방법이 포르마잔 생성물의 양을 측정하는데 사용되 었다.

MT4 세포를 200 내지 500㎕의 총 부피에서 세포 당 0.0001 감염성 바이러스 단위의 다중도로 HIV의 HXB2-변종에 의해 감염된 총 2 x 10⁶개의 세포 및 대수적-상 성장이 되도록 제조하였다. 바이러스를 제거하기 전에 37℃에서 1시간 동안 세포를 바이러스와 함께 배양하였다. 이어서, 세포를 0.01M 포스페이트 완충 식염수(pH 7.2)에서 세척하고, 시험 화합물의 일련의 희석액으로 배양균에서 배양하기 위한 배양 매질에 재현탁하였다. 사용된 배양 매질은 페놀 레드가 없고, 페니실린, 스트렙토마이신, L-글루타민 및 10% 소 태아 혈청(GM10)이 보충된 RPMI 1640이었다.

시험 화합물을 다이메틸 설폭사이드(DMSO)중 2mM 용액으로서 제조하였다. 이어서, GM10중 2배 희석액인 4개의 사본을 제조하고, 50㎕ 양을 1.22 내지 625의 최종 나노몰농도 범위로 나누어 96-웰 플레이트에 위치시켰다. 이어서, 50㎕ GM10 및 3.5 x 10⁴개의 감염된 세포를 각각의 웰에 첨가하였다. 세포를 함유하지 않는 대조 배양균(블랭크), 감염되지 않은 세포를 함유하는 대조 배양균(100% 생존율; 4개의 사본) 및 화합물 없이 감염된 세포를 함유하는 대조 배양균(전체 바이러스-매개된 세포-사멸; 4개의 사본)을 또한 제조하였다. 이어서, 배양균은 공기중 5% CO₂의 습한 대기에서 5일 동안 37℃에서 배양하였다.

5mg/㎖ MTT의 새로운 용액을 0.01M 포스페이트 완충 염수(pH 7.2)에서 제조하고, 각각의 배양균에 20㎕ 첨가하였다. 배양균을 추가로 2시간 동안 전과 동일 하게 배양하였다. 이어서, 산성화된 이소프로판올중 트리톤(Triton) X-100 170㎕(이소프로판올중 농축 HCl의 1:250 혼합물중 10% v/v 트리톤 X-100)를 위 아래로 피펫팅함으로써 혼합하였다. 더욱 혼합함으로써 포르마잔 침착물을 완전히 가용하고, 배양균의 흡광도(OD)를 540nm 및 690nm 파장에서 측정하였다(690nm 판독을 웰 사이의 결과를 위한 블랭크로서 사용하였다). 이어서 각각의 처리된 배양균에 대한 보호율(%)를 하기 수학식 I로부터 계산하였다:

IC₅₀을 보호율(%) 대 log₁₀ 약물 농도의 그래프로부터 얻었다. 대표적인 화합물에 대한 IC₅₀ 데이터를 하기 표 II에 열거한다:

화합물	항바이러스 분석 IC50(vM)
I-2	0.0015
I-4	0.0007

실시예 21

수개의 경로를 통한 투여를 위한 대상 화합물의 약학 조성물을 본 실시예에 기술된 바와 같이 제조하였다.

경구 투여용 조성물(A)

성분	%중량/중량
활성 성분	20.0%
락토즈	79.5%
마그네슘 스테아레이트	0.5%

성분을 혼합하고, 각각 약 100mg을 함유하는 캡슐에 분배하고, 하나의 캡슐은 대략 총 일일 투여량이다.

경구 투여용 조성물(B)

성분	%중량/중량
활성 성분	20.0%
마그네슘 스테아레이트	0.5%
크로스카멜로즈 나트륨	2.0%
락토즈	76.5%
PVP(폴리비닐피롤리딘)	1.0%

성분을 합하고, 메탄올과 같은 용매를 사용하여 과립화한다. 이어서, 제형을 건조하고, 적절한 정제기를 사용하여 정제(약 20mg의 활성 화합물을 함유함)로 제조한다.

경구 투여용 조성물(C)

성분
활성 성분	1.0g
푸마르산	0.5g
나트륨 클로라이드	2.0g
메틸 파라벤	0.15g
프로필 파라벤	0.05g
과립화 당	25.5g
소르비톨(70% 용액)	12.85g
비검(Veegum) K (반더빌트 캄파니(Vanderbilt Co.))	1.0g
향미제	0.035㎖
착색제	0.5mg
증류수	100㎖가 되도록 하는 적정량

성분을 혼합하여 경구 투여용 현탁액을 제조한다.

상기 명세서 또는 하기 청구의 범위에 이의 특이한 형태로 또는 개시된 기능을 수행하기 위한 수단으로, 또는 개시된 결과를 얻고자 하는 방법 또는 공정의 형태로 개시된 특징은, 적절하게는, 개별적으로 또는 이러한 특징의 임의의 조합으로 발명을 다양한 형태로 실현하는 데 이용될 수 있다.

상기 발명은 명확성과 이해의 목적으로 설명 및 예시에 의해 상세하게 기재되었다. 하기 첨부된 청구의 범위의 범위내에서 변경과 개질이 행해질 수도 있음이 당업자에게 명확할 것이다. 따라서, 상기 명세서는 예시적인 목적이고, 한정하고자 함이 아닌 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 본 발명의 범위는 상기 명세서를 참고하는 것이 아니라, 하기 첨부된 청구의 범위와 권리가 주어지는 청구의 범위에 대한 등가물의 모든 범위를 참고하여 결정되어야 한다.

본원에서 인용된 모든 특허, 공개공보 및 과학 문헌은 당업자의 지식을 정한 것이고, 각각이 구체적이고 개별적으로 참고로서 혼입되도록 지시된 것과 동일한 정도로 이의 전체 내용이 본원에 참고로서 혼입되어 있다. 본원에 인용된 임의의 참고 문헌과 본 명세서의 구체적인 교시 사이의 임의의 불일치는 후자에 따라 해석되어야 한다. 마찬가지로, 당업계에서 이해되는 단어 또는 어구의 정의와 본 명세서에서 구체적으로 교시된 단어 또는 어구의 정의 사이의 불일치는 후자에 따라 해석되어야 한다.

Claims (18)

1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:

   화학식 I

   

   상기 식에서,

   X는 CH₂ 또는 NH이고,

   Y는 CH₂ 또는 O이되, X 및 Y중 하나 이상은 CH₂이고;

   R¹은 수소 또는 C_1-6 알킬이고;

   R²는 C(=O)Ar 또는 OAr이고;

   R³ 및 R⁴는 독립적으로 수소, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고;

   R⁵는 수소, CH₂OH, CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH, CH₂OC(=O)C_1-6 알킬 또는 CH₂OC(=O)CHR^5aNH₂이고;

   n은 2 내지 5이고;

   R^5a는 페닐 또는 C_1-6 저급 알킬이고;

   Ar은 할로겐, 사이아노, C_1-6 할로알킬, C_3-5 사이클로알킬 및 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 기로 치환된 페닐이다.
2. 제 1 항에 있어서,

   하기 화학식 IIa의 구조를 갖는 화합물:

   화학식 IIa

   
3. 제 2 항에 있어서,

   X가 CH₂이고, R³이 플루오로이고, R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_3-5 사이클로알킬이고, R⁵가 수소인 화합물.
4. 제 3 항에 있어서,

   Y가 O이고, Ar이 하기 화학식 i의 잔기이고, R⁶이 사이아노이고, R⁷이 할로겐, 사이아노 또는 C_1-6 할로알킬인 화합물:

   
5. 제 3 항에 있어서,

   X 및 Y가 둘다 CH₂이고, Ar이 제 4 항에 정의된 바와 같은 화학식 i의 잔기인 화합물.
6. 제 2 항에 있어서,

   X가 CH₂이고, R³이 플루오로이고, R⁴가 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_3-5 사이클로알킬이고, R⁵가 CH₂OC(=O)(CH₂)_nC(=O)OH이고, n이 2 내지 5인 화합물.
7. 제 1 항에 있어서,

   하기 화학식 IIb의 구조를 갖고, R²가 OAr이고, R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고, R⁵가 수소인 화합물:

   화학식 IIb

   
8. 제 7 항에 있어서,

   Y가 O이고, X가 CH₂인 화합물.
9. 제 8 항에 있어서,

   Ar이 하기 화학식 i의 잔기이고, R⁶이 사이아노이고, R⁷이 할로겐, 사이아노 또는 C_1-6 할로알킬인 화합물:

   화학식 i

   
10. 제 1 항에 있어서,

    제 7 항에 정의된 바와 같은 화학식 IIb의 구조를 갖고, R²가 C(=O)Ar이고, R³ 및 R⁴가 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C_1-6 알킬이고, X가 CH₂이고, Y가 O이고, R⁵가 수소인 화합물.
11. 제 10 항에 있어서,

    Ar이 제 4 항에 정의된 바와 같은 화합물.
12. 제 11 항에 있어서,

    R³이 할로겐이고, R⁴가 할로겐 또는 C_1-6 알킬인 화합물.
13. 제 1 항에 있어서,

    하기 화학식 III의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:

    

    상기 식에서,

    R¹이 수소 또는 C_1-6 알킬이고;

    R²가 수소, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시 또는 C_3-5 사이클로알킬이고;

    R⁵가 수소, CH₂OH 또는 CH₂OC(=O)(CH₂)₂C(=O)OH이고;

    R⁷이 할로겐, 사이아노 또는 C_1-6 할로알킬이다.
14. 제 13 항에 있어서,

    R⁵가 수소인 화합물.
15. 제 1 항 내지 제 14 항중 어느 한 항에 있어서,

    약제로서 사용하기 위한 화합물.
16. 인간 면역 결핍 바이러스-1(HIV-1) 감염의 치료용, 또는 HIV-1 감염의 예방용 약제의 제조를 위한 제 1 항 내지 제 14 항중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
17. 제 1 항 내지 제 14 항중 어느 한 항에 따른 화합물의 치료적 효과량, 및 하나 이상의 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물.
18. 상기한 바와 같은 발명.