KR20080077383A

KR20080077383A - 신속 진단용 검사 장치

Info

Publication number: KR20080077383A
Application number: KR1020087015069A
Authority: KR
Inventors: 빠스깔 메르땅; 로랑스 드로르므; 띠에리 르끌립뙤
Original assignee: 코리스 바이오컨셉
Priority date: 2005-12-08
Filing date: 2006-12-08
Publication date: 2008-08-22
Also published as: ATE527543T1; KR101337020B1; MY147027A; EP1957984B1; US8389209B2; JP4934147B2; CA2636796A1; US20090162833A1; CN101326441A; WO2007065695A1; EP1957984A1; ES2372868T3; CN101326441B; JP2009518636A

Abstract

본 발명은, 고체 지지부를 포함하며, 이 고체 지지부상에 나란히 배치된 다수의 구역이 마련되며, 이에 의해 시료가 시료 수용 구역으로부터 시료 검출 구역을 향해 이동할 수 있으며, 존재하는 경우의 분석물이 검출되고, 상기 양 구역들은 이 구역들을 통해 시료의 모세관 흐름을 허여하는 재료를 포함하고 있는 장치로서, 모세관 재료가 없는 시료 운반 중간 구역이 상기 구역들 사이에 마련되어, 수직한 상태로 놓인 지지부 상의 중력에 의해 시료를 이동시키게 하는 것을 특징으로 하는 생체 시료 내에서 분석물 또는 그 유사물을 검출하기 위한 장치에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 생체 시료 내에서 분석물 또는 그 유사물을 검출하기 위한 방법에 관한 것이다.

Description

신속 진단용 검사 장치{TEST DEVICE FOR RAPID DIAGNOSTICS}

본 발명은, 생체 시료에서 분석물 또는 그 유사물을 검출하기 위한 방법 및 장치에 관한 것이다. 본 발명은 "딥스틱(dipstick)" 장치와 같이 개선된 신속한 검사 장치에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 단일 또는 복합 검출, 정량적이거나 준 정량적인 검출을 허여하기 위해서, 하나 이상의 활성측면으로 이루어진 검사 장치에 관한 것이다. 본 발명에서 개시한 장치는 1회 조작으로 다양한 생체 물질 또는 화학 물질을 검출하거나 식별할 수 있다.

예컨대 면역크로마토그래피에 의한 진단 실험실에서의 정기 진단을 위한 생체 시료에서 분석물을 검출하기 위해 여러 접근법이 개발되었다.

EP 0 088 636, EP 0 186 799, EP 0 284 232 및 WO 88/08534는 적어도 제1 구역 또는 영역 및 제2 구역 또는 영역을 포함하는 시트형 크로마토그래피 장치를 개시하고 있다. 이들 문헌에 개시된 종래 기술의 장치는 이하를 포함한다:

- 특정 시약이 코팅된 감응 영역으로 액체가 이동할 수 있도록 하는 다공성 활성 재료를 함유한 제1 영역 또는 구역. 상기 제1 구역 또는 영역은 그 위에서 건조되거나 그 안으로 주입된 검출 시약을 포함한다. 상기 제1 구역 또는 영역은 도포 (소)구역 및/또는 흡수 (소)구역을 더 포함할 수 있다. 상기 제1 구역은 일반적 으로 도포 구역이라 불린다.

- 검출 구역이라고도 불리는, 특정 시약이 흡착된 다공성 활성 재료로 이루어진 제2 영역 또는 구역. 장치의 제2 영역의 소구역(예컨대, 라인) 위에 놓인 이들 시약의 일부는 검출될 분석물에 대해 특정되어 시료 분석물 표지화 시약 착물과 반응하여야 하는 반면에, 제2 영역의 다른 소구역(예컨대, 다른 라인) 위에 결과적으로 놓인 불특정 시약은 검출 시약의 여분과 반응하는데에만 사용된다. 바람직하게는 니트로셀룰로오스로 이루어진, 상기 제2 영역 또는 구역은, 바람직하게는 검출 구역 뒤에서 대조용 소구역을 포함할 수도 있다.

- 제1 영역 및 제2 영역을 통해 나오는 액체의 여분을 흡수하는데에만 이용되는 다공성 재료로 이루어진 제3 영역 또는 구역. 일반적으로 이 영역은 흡수제 또는 흡수 영역으로 불린다.

종래 기술의 (면역)크로마토그래피 장치는 플라스틱 또는 다른 받침 지지부를 구비할 수 있고 및/또는 불투수성 하우징 내에 포함될 수 있다.

상기 세 영역은 도포 구역에서부터 제3 영역으로 액체 이동이 가능하도록 모세관 현상을 통한 접촉 상태에 있다.

유용하지만, 검사 스트립을 이용하는 종래의 입수 가능한 크로마토그래피 장치는 여러 단점을 갖고 있다. 배설물 시료(fecal sample)와 같은 많은 시료는, 크로마토그래피 배지의 기공을 막아 면역크로마토그래피 공정을 매우 방해할 수 있는 미립자 물질을 포함하고 있다. 게다가, 기존의 크로마토그래피 검사 장치로는, 결합이 발생하는 영역에 시료가 균일한 직선의 형태로 도달하는 것을 보증하기 위해 서 시료의 선단(sample front)은 크로마토그래피 배지에 걸쳐 균일하게 이동하도록 시료를 크로마토그래피 배지에 도포하는 것이 종종 어렵다.

시료의 준비 및 폐기물의 발생은, 면역크로마토그래피를 위한 종래의 입수 가능한 장치 및 기술이 갖는 다른 문제의 원인이다. 시료[배설물(feces) 등] 또는 시료 채취 장치[인후 면봉(throat swab) 등]을 크로마토그래피 배지에 직접 도포하는 것은 거의 불가능하다. 시료가 크로마토그래피 배지에 도포될 수 있기 전에, 대개 여러 번의 추출 및 사전 처리 반응이 요구된다. 일반적으로, 검사를 수행하는 내과 의사 또는 기술자에 의해 이들 반응은 검사 튜브 또는 미세원침관과 같은 여러 개의 소형 용기에서 실시되는데, 피펫과 같은 운반 장치를 이용할 것을 요한다. 이 때, 이들 장치는 각각 오염되므로, 특별한 예방 조치를 취하여 폐기함으로써, 폐기물에 부주의하게 접촉할 수 있는 작업자 또는 사람이 오염되지 않게 해야 한다.

따라서, 추출 용기 및 운반 장치에 대한 필요를 없애도록 오염 가능성이 있는 시료 또는 시료 제조 장치를 직접 수용할 수 있는 크로마토그래피 분석 장치를 구비하는 것이 바람직하다. 바람직하게는 검사 스트립 형태의 상기 장치는, 클로깅(clogging) 없이 또는 방해 없이 미립자를 함유한 시료 상에서 분석을 실행할 수 있어야 하고, 시료를 크로마토그래피 배지에 균등하고 고르게 전달하여 검사의 정확성 및 정밀성을 증진시킬 수 있어야 한다. 이러한 태양의 개선된 분석 장치는, 특히 위음성 및 위양성을 피하는데 중요하다.

본 발명은, 용액 또는 생체 시료에서 다수의 분석물 또는 그 유사물을 검출하기에 적절한 매우 유연한 시트형 장치를 제공하는 것을 목적으로 하는 데, 이러한 검출은 동일한 장치상에서 수행된다. 이 시트형 장치는 중력 및 모세관 현상에 의해 액체가 이동할 수 있도록 구성된다.

제1 태양에서, 본 발명은, 액체 시료를 장치의 상이한 반응 구역과 접촉하게 할 중력 구동 처리를 통해, 단일 또는 복합 검출, 정량적이거나 준 정량적인 검출을 허여하기 위해서, 하나 이상의 활성측면으로 이루어진 (중력 구동) 검사 장치를 제공한다.

특히, 본 발명은, 고체 지지부를 포함하며, 이 고체 지지부상에 나란히 배치된 다수의 구역이 마련되며, 이에 의해 시료가 시료 수용 구역으로부터 시료 검출 구역을 향해 이동할 수 있으며, 존재한다면 적어도 하나의 분석물이 검출되고, 상기 양 구역들은 이 구역들을 통해 시료의 모세관 흐름을 허여하는 재료를 포함하고 있는 검사 장치로서, 모세관 재료가 없는 시료 운반 중간 구역이 상기 구역들 사이에 마련되어, 수직한 상태로 놓여 있을 때 지지부 상의 중력에 의해 시료를 이동시키게 하는 것을 특징으로 하는 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치를 제공한다.

본 발명의 특정 실시예에서, 본 발명의 중력 구동 검사 장치는 특히 면역검출에 적합하고, 면역시약인 포획 시약(capture reagent)을 포함한다.

제2 태양에서, 본 발명은, 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법으로서, 시료와 본 발명에 따른 검사 장치를 접촉하고 중력에 의해 비모세관 구역을 통과하여 장치의 상단부터 장치의 하단까지 시료를 이동시키는 단계, 및 상기 적어도 하나의 분석물을 검출하는 단계를 포함하는 것인 분석물 검출 방법을 제공한다.

특히, 분석물 검출 방법은, 장치의 시료 수용 구역을 시료와 접촉시키는 단계, 시료를 모세관 현상에 의해 시료 수용 구역을 통과하여 비모세관 구역으로 이동하게 하는 단계, 시료를 중력에 의해 비모세관 구역을 통과하여 검출 구역으로 이동하게 하는 단계 및 시료를 모세관 현상에 의해 검출 구역을 통과하여 이동하게 하고 분석물을 검출하는 단계를 포함한다.

특정 실시예에서, 상기 검사 장치(1)는, 고체 지지부(18)의 하나 이상의 측면에서 장치의 일단으로부터 장치의 타단까지 배치된

- 시료 도포 구역(2)을 포함하는 제1 모세관 구역;

- 검출 구역(4), 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 중간 구역(6), 및 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 흡수 구역 또는 영역(5)을 포함하고, 상기 검출 구역(4)은 선택적으로 대조 소구역을 포함하는 것인 제2 모세관 구역; 및

- 검출 구역(4) 또는 선택적인 중간 구역(6)으로부터 시료 도포 구역(2)을 분리하는 비모세관 구역(14)

을 포함하고, 상기 검출 구역(4)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물을 특정하게 인식하는 적어도 하나의 포획 시약을 포함하며;

시료 도포 구역(2)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함한다. 중간 구역(6)이 장치에 존재하거나 존재하지 않을 수 있고 선택적으로 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함할 수 있다.

특히 본 발명의 특정 실시예에서, 분석물 검출 방법은, 검사 장치를 수직으로 위치 설정하는 단계, 장치의 상단에 시료를 도포하는 단계, 시료를 시료 도포 구역(2)을 통해 운반하고 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트를 수화시키는 단계, 상기 시료 내의 적어도 하나의 분석물을 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트와 반응하게함으로써 적어도 하나의 착물을 형성하게 하는 단계, 적어도 하나의 착물을 비모세관 구역(14)에 도달하게 하여, 중력에 의해 비모세관 구역(14)을 통과하여 선택적인 중간 구역(6)과 접촉하고 통과하여 이동하고 검출 구역(4)을 관통하게 함으로써 적어도 하나의 포획 시약과 반응시키는 단계 및 검출 가능 신호를 발전시켜 상기 적어도 하나의 분석물을 검출하는 단계를 포함한다.

다른 태양에서, 본 발명은, 분석 장치와 시료를 접촉시키는 단계, 시료를 중력에 의해 상기 장치의 상단부터 하단까지 이동시키는 단계, 및 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물을 검출하는 단계를 포함하고, 상기 분석 장치는 본 발명에 따른 (중력 구동) 검사 장치, 검사 스트립, 딥스틱, 진단 스트립, 관통 유동 장치 및 측면 유동 장치로부터 선택되는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법을 제공한다.

본 발명의 중력 구동 검사 장치 및 방법은, 한정되지는 않지만 시료 내의 분석물의 검출에 특히 적합하며, 구체적으로, 작은와포자층, 톡소포자층, 람블편모층, 클로스트리듐 디피실리균, 대장균, 이질아메바, RSV(호흡기 신시티아 바이러스), 인플루엔자 A 및 B 바이러스, 로타바이러스, 아데노바이러스형 40 & 41 또는 기타 아데노바이러스 군, 레지오넬라균 소변 항원, 인간 및 동물 근원의 코로나바이러스 및 인간 메타뉴모바이러스를 포함하는 (해로운) 미생물로부터 하나 이상의 분석물 또는 유사물을 검출하는데 적합하다.

본 발명의 중력 구동 검사 장치 및 방법은, 많은 유형의 분석물에 적용 가능하지만, 특히 종래의 고상 면역분석법을 개선하기 위해 면역분석법 또는 올리고크로마토그래피 신속 분석법에 이용될 때 유리하다.

또한, 본 발명에 따라 제조된 장치는, 종래 기술의 분석법과 비교하여, 비교적 사용하기 쉽고, 절차적인 단계를 거의 요구하지 않으며 덜 복잡한 분석 기술이고, 또한 미지의 시료의 검사에 대한 신속한 정량적, 준정량적 또는 정성적 결과에서 추가적인 이점을 제공한다. 게다가, 상기 장치는, 예컨대 상기 분석의 정확성 및 신뢰성을 평가하기 위한 제어 장치로서의 유리한 이용에 대해 적합하다. 또한, 제작 중에, 본 발명의 장치는 비교적 쉽게 제조될 수 있다. 본 발명의 상기 장치를 이용하는 분석이 다양한 수준의 분석물에 매우 민감한 것으로 발견되기도 하였다. 전술한 이점뿐만 아니라 다른 이점이, 본 명세서에서 설명한 바와 같은 본 발명의 상세한 설명, 도면 및 이를 예시하는 실시예로부터 명백할 것이다.

도 1 내지 도 3은 본 발명의 실시예에 따른 중력 구동 검사 장치의 측단면도 를 도시한다.

도 4는 본 발명의 실시예에 따른 중력 구동 검사 장치의 측단면도(4a, 4a1, 4a2, 4a3) 및 정단면도(4b, 4c, 4d 및 4e)를 도시한다.

도 5는 본 발명의 실시예에 따른 패키지의 사시도(5a) 및 분해도(5b)를 도시한다.

도 6은 본 발명의 실시예에 따른 패키지의 단면도(6a) 및 준 분해 정면도(6b)를 도시한다.

도 7은 본 발명의 실시예에 따른 패키지의 단면도(7a) 및 배면도(7b)를 도시한다.

실시예에서, 본 발명은 고체 지지부(18)를 포함하며, 이 지지부는, 지지부의 일단부터 타단까지 나란히 배치된, (ⅰ) 시료 수용 구역(2)인 제1 모세관 구역, (ⅱ) 비모세관 구역(14), 및 (ⅲ) 시료 검출 구역(4)인 제2 모세관 구역을 구비하고 있는, 시료에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한, "시트형 중력 구동 검사 장치"라고 불리기도 하는 검사 장치(1)를 제공한다. 본 발명에 따르면, 상기 장치는 지지부의 종축의 양단에 배치되어 비모세관 구역을 통해 서로 유체 연통된 두 개의 모세관 구역을 포함하고, 검사될 시료는 중력에 의해 흐를 수 있다. 상기 고체 지지부는 한정되는 것은 아니지만 직사각형, 정사각형, 삼각형 또는 임의의 다른 형상을 포함하는 임의의 적절한 형상일 수 있다. 바람직하게는, 상기 고체 지지부(18)는 실질적으로 직사각형 형상이다.

본 발명의 실시예에 따라, 검사 장치의 시료 수용 구역은 시료 도포 구역(2)을 포함하고, 시료 검출 구역은 검출 구역(4) 및 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 중간 구역(6)을 포함하며, 상기 검출 구역(4)은 선택적으로 대조용 소구역을 포함한다. 바람직하게는, 상기 중간 구역(6) 및 상기 검출 구역(4)은 서로 접촉한다.

또 다른 실시예에서, 상기 검출 구역은, 검출 구역(4) 옆에 배치되고 서로 모세관을 통해 흐름 연통된 흡수 구역 또는 영역(5)을 포함한다.

특정 실시예에 따라, 시료에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치(1)는, 고체 지지부(18)의 하나 이상의 측면에서, 장치의 일단부터 타단까지 배치되는,

(a) 시료 도포 구역(2)을 포함하는 제1 모세관 구역,

(b) 검출 구역(4), 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 중간 구역(6), 및 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 흡수 구역 또는 영역(5)을 포함하고, 상기 검출 구역(4)은 선택적으로 대조용 소구역을 포함하는 것인 제2 모세관 구역, 및

(c) 제2 모세관 구역의 검출 구역(4) 또는 선택적인 중간 구역(6)으로부터 제1 모세관 구역의 시료 도포 구역(2)을 분리하는 비모세관 구역(14)

을 포함하고, 상기 시료 도포 구역(2), 상기 비모세관 구역(14) 및 상기 검출 구역(4) 또는 상기 선택적인 중간 구역(6)은, 장치의 이용시에, 시료가 중력에 의해 시료 도포 구역(2)에서부터 검출 구역(4) 또는 선택적인 중간 구역(6)으로 흐 를 수 있게 하는 방식으로 배치된다.

특정 실시예에 따라, 검출 구역(4)은, 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물을 특정하게 인식하는 적어도 하나의 포획 시약을 포함하고, 시료 도포 구역(2)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트(conjugate)를 포함한다. 다른 특정 실시예에 따라, 중간 구역(6)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함할 수 있다.

또 다른 특정 실시예에 따라, 검출 구역(4)은, 적어도 두 개의 분석물 또는 그 유사물을 특정하게 인식하는 적어도 두 개의 포획 시약을 포함하고, 시료 도포 구역(2)은 적어도 두 개의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 적어도 두 개의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함한다.

또 다른 특정 실시예에 따라, 검출 구역(4)은, 적어도 세 개의 분석물 또는 그 유사물을 특정하게 인식하는 적어도 세 개의 포획 시약을 포함하고, 시료 도포 구역(2)은 적어도 세 개의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 적어도 세 개의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함한다.

특히, 본 발명은 2종 이상의 분석물을 검출하는데 적합하다.

본 명세서에 사용된 바와 같은, "검사 장치" 및 "중력 구동 검사(GDT; gravity driven test) 장치"라는 용어는 번갈아가면서 사용될 수 있는 것으로서, 장치의 상이한 구역이, 장치의 이용시에, 시료가 중력에 의해 비모세관 구역(14)을 통과하여 시료 도포 구역(2)으로부터 검출 구역(4)까지 흐를 수 있도록 배치된 검사 장치를 지칭한다. 본 발명에 따른 장치의 비모세관 구역(14)은, 혼합 구역을 제공하고, 그에 따라 시약을 정확하고 빠르게 혼합하여 개선된 분석 정확성 및 정밀성을 야기하게 하도록 한다. 본 발명의 장치를 이용한 검사는, 시료가 점성이 있을지라도 신속하게 실시될 수 있다. 이는 실시하는데에 훨씬 더 긴 시간이 걸리는 종래의 검사와 대비된다. 상기 비모세관 구역(14) 때문에 장치는 수직 상태로만 이용될 수 있다.

도면의 도 1 내지 도 4를 참조하여, 본 발명의 중력 구동 검사 장치의 특정 실시예가 전체적으로 도면부호 1로 나타난다. 본 발명에 따른 장치(1)는 시트형 장치, 예컨대 실질적으로 직사각형(특히, 스틱)의 장치이고, 실질적으로 평면의, 연질, 경질, 또는 반경질의 지지부(18)를 포함하며, 지지부(18)의 하나 이상의 측면에서, 시료 도포 구역(2), 선택적인 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 선택적으로 흡수 구역(5)을 포함하고, 상기 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 본 발명의 실시예에 따라, 비모세관 구역(14)은 시료 도포 구역(2)으로부터 중간 구역(6)을 분리한다. 구역(2)은 비모세관 구역(14)에 의해 구역(6, 4, 5)과 분리된다. 고체 지지부 상의 구역들은 스트립의 종축을 따라, 서로의 옆에 마련된다. 도 4a는 중간 구역(6)이 없는 본 발명의 특정 실시예에 따른 장치를 도시한다. 도 4a에서 장치는 경질 또는 반경질 지지부(18)의 하나 이상의 측면에서 시료 도포 구역(2), 검출 구역(4), 및 선택적으로 흡수 구역(5)을 포함하고, 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)이 서로 모세관 유동으로 연통된다. 시료 도포 구역(2)이 고 체 지지부의 일단에 마련되고, 어떤 모세관 재료도 없는 구역(14)에 의해 검출 구역(4)(도 4a) 또는 선택적인 중간 구역(6)(도 4a1)과 분리된다.

일 실시예에서, 시료 도포 구역(2)은 반응 구역(3)을 포함한다. 특정 실시예에서, 시료 도포 구역(2)은 본 명세서에서 "제1 흡수막(12)"이라 불리는 하나 또는 여러 흡수막(들)(12) 및 반응 구역(3) 내의 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 본 명세서에서 사용되고 있는 바와 같이 "콘쥬게이트 영역(13)" 또는 "콘쥬게이트 패드(13)"는 번갈아가면서 사용될 수 있다. 시료 도포 구역(2)은, 상기 분석물 또는 그 유사물의 검출을 가능하게 하는 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 여러 분석물 특정 콘쥬게이트를 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함하는 제1 반응 구역(3) 내에 포함할 수 있다. 시료 도포 구역(2)은 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함한다.

대안적인 실시예에서, 시료 도포 구역(2)은 흡수막(12)을 포함하고 중간 구역(6)은 콘쥬게이트 영역 또는 패드를 포함하는 반응 구역을 포함할 수 있다. 중간 구역(6)은, 상기 분석물 또는 그 유사물의 검출을 가능하게 하는 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 여러 분석물 특정 콘쥬게이트를 콘쥬게이트 영역 또는 패드를 포함하는 반응 구역 내에 포함할 수 있다.

다른 대안적인 실시예에서, 상기 시료 도포 구역(2) 및/또는 중간 구역(6) 모두는 반응 구역을 포함하고, 상기 반응 구역은 상기 분석물 또는 그 유사물의 검출을 가능하게 하는 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 하나 이상의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함하는 콘쥬게이트 영역 또는 패드를 포함한다.

일 실시예에서, 상기 시료 도포 구역(2)은 "이동 대조 콘쥬게이트"라 불리는 적어도 하나의 대조 콘쥬게이트를 더 포함할 수 있다. 특정 콘쥬게이트 및/또는 이동 대조 콘쥬게이트는, 한정되는 것은 아니지만, 콘쥬게이트 금속 콜로이드, 콘쥬게이트 폴리스티렌 미소구체, 특정한 색을 갖는 탄소 나노튜브 및 마이크로 입자 또는 나노 입자, 형광 탄소 나노튜브 및 형광 마이크로 입자 또는 형광 나노 입자를 포함하는 군으로부터 선택된 표지를 포함한다. 일 실시예에서, 특정 콘쥬게이트 및/또는 이동 대조 콘쥬게이트는 금 입자 및/또는 폴리스티렌 미소구체 및/또는 탄소 나노튜브 중 어느 하나를 직접적인 표지로서 포함하고 대조 신호 및 검사 신호의 출현을 야기한다.

일 실시예에서, 중간 구역(6)은 본 명세서에서 "제2 흡수막(15)"이라 불리는 하나 또는 여러 흡수막(15)을 포함하고 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있을 수 있다.

일 실시예에서, 검출 구역(4)은, 도포 구역에 배치되거나 검사될 시료 내에 존재하는 다른 시약과 상호작용하는 시약에 의해 코팅될 수 있는, 니트로셀룰로오스 또는 기타 매트릭스로 이루어진 활성막(16)을 포함한다. 바람직하게는, 검출 구역(4)은 활성막(16)으로서 예컨대 니트로셀룰로오스를 포함한다. 일 실시예에서, 상기 검출 구역(4)은 대조 소구역을 구비할 수 있다. 검출 구역은, 검사 시료에서 검출될 분석물 또는 그 유사물을 특정하게 인식하거나, 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)내에 배치된 대조 콘쥬게이트만을 인식하는 여러 포획 시약(7, 7')을 포함할 수 있다. 포획 시약(7, 7')은 검출 구역(4)의 상이한 레벨에서 코팅될 수 있다. 포 획 시약은 분석물 특정 포획 시약(7) 또는 대조(참조) 포획 시약(7') 중 어느 하나일 수 있다. 본 발명의 실시예에서, 검출 구역(4)은, 도포 구역(2) 또는 중간 구역(6)에서 대조 콘쥬게이트를 특정하게 인식하는 적어도 하나의 대조 포획 시약(7')을 이용한 적어도 하나의 대조 검사 라인을 포함한다.

본 발명의 실시예에서, 분석물 특정 콘쥬게이트 및/또는 대조 콘쥬게이트는, 한정되는 것은 아니지만, 콘쥬게이트 금속 콜로이드, 콘쥬게이트 폴리스티렌 미소구체, 탄소 나노튜브, 특정 색을 갖는 마이크로입자 및 형광 마이크로 입자를 포함하는 군으로부터 선택된 표지, 바람직하게는 금 입자 및 폴리스티렌 미소구체로부터 선택된 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 포함한다.

일 실시예에서, 흡수 구역(5)은 본 명세서에서 "제3 흡수막(17)"이라 불리는 흡수막(17)을 포함한다.

본 발명에 따라, 비모세관 구역(14)은, 검출 구역(4)으로부터 또는 존재한다면 중간 구역(6)의 제2 흡수막으로부터 시료 도포 구역(2)을 멀리 유지시킨다. 상기 비모세관 구역은, 장치가 이용중일 때 개선된 분석 정확성 및 정밀성을 야기하는 혼합 구역으로서 작동한다. 게다가, 비모세관 구역은, 상기 시료의 이동을 억제하는 어떠한 모세관도 존재하지 않기 때문에 장치를 가로질러 시료를 신속하게 운반하게 한다. 또한, 클로깅을 막는다.

선택적으로, 본 발명의 장치는 하우징 내에 수용될 수 있고, 상기 하우징은 시료 도포 구역의 적어도 일부를 상기 하우징의 외부와 연통하게 하여 시료가 상기 장치에 도포될 수 있게 하며, 상기 하우징은 상기 장치의 적어도 일부분에 걸쳐 나 란히 배치된 창을 더 포함하고, 상기 부분상에 배치된 시료 검출 구역은 하우징의 외부에 시각적으로 연통한다.

선택적으로, 본 발명의 장치는 시료가 상기 장치에 도포될 수 있도록 특정 폴리머로 제조된 하우징형 시스템 내에 매립될 수 있다. 창이 상기 장치의 적어도 일부분에 걸쳐 나란하게 배치될 수 있는데, 다시 말해 그러한 부분에 위치한 시료 검출 구역이, 폴리머 매립부와 시각적으로 연통하게 된다.

도 1 및 도 4a3 및 도 2a는 특히 장치(1)가 중공형 케이스 또는 열간 성형 케이스 또는 하우징(11)에 포함되어 있는 상이한 실시예를 도시하고 있다. 통상적으로, 상기 하우징(11)은 중공 케이스 구조물을 포함하고, 예컨대 적절한 플라스틱 재료와 같은 불투수성 고체 재료로 제조된다. 하우징(11)은 시료 도포 구역(2)의 적어도 일부가 상기 하우징(11)의 외부와 직접 연결 가능하도록 하여, 상기 시료가 케이스 수용 영역(10)을 통해 상기 장치(1)에 도포될 수 있다.

또한 하우징(11)은 장치(1)의 적어도 일부에 걸쳐 나란히 배치된 창을 포함하여, 적어도 상기 장치(1)에 포함된 검출 구역(4)이 하우징(11)의 외부와 시각적으로 연통된다. 상기 창은, 적어도 검출 구역(4)을 명확하게 볼 수 있게 하기에 적절한 임의의 형상일 수 있다. 일 실시예에서, 상기 창은 직사각형 형상일 수 있고, 바람직하게는 장치(1)의 폭보다 다소 좁은 폭을 가질 수 있다.

도 2b, 도 4a, 도 4a1, 도 4a2 및 도 3은 장치(1)가 중공형 케이스(11)를 갖고 있지 않는 본 발명의 상이한 실시예를 도시하고 있다. 도 2b, 도 4a2 및 도 3은 본 발명에 따른 장치(1)를 예시하고 있고 스티커(20)가 시료 도포 구역(2), (시료 가 중력에 의해 자유롭게 이동할 수 있는 공간을 형성하도록) 비모세관 구역(14), 및 중간 구역(6)을 덮을 수 있으며 부분적으로 검출 구역(4)과 오버랩된다. 또한 제2 스티커(21)가 흡수 구역(5)을 덮을 수 있다. 스티커들(20, 21)은, 스틱 표면에서 벗어나지 않고 액체를 상이한 막(12, 13, 15, 16, 17)으로 이동시키게 하는데 이용될 수 있다. 대안적인 실시예에서, 도 2b 및 도 3에 도시한 장치(1)는, 스틱의 측면에서 액체의 임의 누출을 막기 위해서, 스티커에 의해 또는 가열 몰딩된 플라스틱 튜브 내에 싸이거나 특정 폴리머 내에 매립된다. 도 4a 및 도 4a1은 중공형 케이스가 없고 스티커가 없는 본 발명의 실시예에 따른 장치(1)를 도시한다.

도 1을 참조하면, 본 발명의 실시예에 따른 장치(1)는 지지부(18)를 포함하는 것으로 예시되고, 이 지지부(18)는 그 일면에 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 포함하고, 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 시료 도포 구역(2)은 비모세관 구역(14)에 의해서 중간 구역(6)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 구역은, 서로 옆에서 스트립의 종축을 따라 마련된다. 시료 도포 구역(2)은 상기 시료 도포 구역(2)의 일단에 위치한 반응 구역(3)을 포함한다. 특히, 시료 도포 구역(2)은 제1 흡수막(12) 및 상기 시료 도포 구역(2)의 반응 구역(3) 내의 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 중간 구역(6)은 제2 흡수막(15)을 포함한다. 일 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 또 다른 실시예에서, 상기 제2 흡수막(15)은 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 제3 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 패드(13) 및 상기 제2 흡수막(15) 모두는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 검출 구역(4)은 분석물 특정 포획 시약(7) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성막(16)을 포함한다. 흡수 구역(5)은 흡수막(17)을 포함한다. 장치(1)는 제1 흡수막(12)의 적어도 일부가 하우징(11)의 외부와 직접 연통 가능하게 하는 하우징(11) 내에 수용되어, 시료가 케이스 수용 영역(10)을 통해 상기 장치(1)에 도포될 수 있다.

도 2a를 참조하면, 본 발명의 또 다른 실시예에 따른 장치(1)는 지지부(18)를 포함하는 것으로 도시되고, 이 지지부(18)는, 그 일측에 장치의 일단부터 타단으로 가면서, 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)의 양측에 마련된 제1 흡수막(12), 비모세관 구역(14), 제2 흡수막(15), 분석물 특정 포획 시약(7)과 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성 막(16) 및 제3 흡수막(17)을 포함한다. 제2 흡수막(15), 활성 막(16) 및 제3 흡수막(17)은 서로 접촉한다. 제1 흡수막(12)은 비모세관 구역(14)에 의해 제2 흡수막(15)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 막 및 패드는 스트립의 종축을 따라 서로의 옆에 마련된다. 일 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 또 다른 실시예에서, 상기 제2 흡수막(15)은 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 제3 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13) 및 상기 제2 흡수막(15) 모두는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 장치(1)는 제1 흡수막(12)의 적어도 일부가 상기 하우징(11)의 외부와 직접 연통 가능하게 하는 하우징(11) 내에 수용되어, 시료가 케이스 수용 영역(10)을 통해 상기 장치(1)에 도포될 수 있다.

도 2b를 참조하면, 본 발명의 한층 다른 실시예에 따른 장치(1)는 지지부(18)를 포함하는 것으로 예시되고, 지지부(18)는 그 일측에 반응 구역(3), 비모세관 구역(14), 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 포함하고, 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 반응 구역(3)은 비모세관 구역(14)에 의해 중간 구역(6)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 구역들은 스트립의 종축을 따라 서로의 옆에 마련된다. 반응 구역(3)은 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 중간 구역(6)은 제2 흡수막(15)을 포함한다. 일 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 다른 실시예에서, 상기 제2 흡수막(15)은 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 제3 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)와 상기 제2 흡수막(15) 모두는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 검출 구역(4)은 분석물 특정 포획 시약(7) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성 막(16)을 포함한다. 흡수 구역(5)은 흡수막(17)을 포함한다. 스티커(20)는 반응 구역(3), 비모세관 구역(14), 및 중간 구역(6)을 덮고 검출 구역(4)에 부분적으로 오버랩된다. 제2 스티커(21)는 흡수 구역(5)을 덮는다.

도 3을 참조하면, 본 발명의 다른 실시예에 따른 장치(1)가 예시된다. 상기 장치(1)는 지지부(18)를 포함하고, 이 지지부(18)는 그 일측에 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 포함하고, 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 시료 도포 구역(2)은 비모세관 구역(14)에 의해 중간 구역(6)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 구역들은 스트립의 종축을 따라 서로의 옆에 마련된다. 시료 도포 구역(2)은 상기 시료 도포 구역(2)의 일단에 위치한 반응 구역(3)을 포함한다. 특히. 시료 도포 구역(2)은 제1 흡수막(12) 및 상기 시료 도포 구역(2)의 반응 구역(3) 내에 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 중간 구역(6)은 제2 흡수막(15)을 포함한다. 일 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 또 다른 실시예에서, 상기 제2 흡수막(15)은 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 제3 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)와 상기 제2 흡수막(15) 모두는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 검출 구역(4)은 분석물 특정 포획 시약(7) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성 막(16)을 포함한다. 흡수 구역(5)은 흡수막(17)을 포함한다. 스티커(20)는 반응 구역(3), 비모세관 구역(14), 및 중간 구역(6)을 덮고 검출 구역(4)과 부분적으로 오버랩된다. 제2 스티커(21)는 흡수 구역(5)을 덮는다.

도 4a는 중간 구역(6)이 없는 그리고 중공형 케이스 및 스티커가 없는 본 발명의 특정 실시예에 따른 장치(1)를 도시한다. 도 4a에서, 장치(1)는 지지부(18)를 포함하고, 지지부(18)는 그 위에 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 마련하고 있으며, 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 시료 도포 구역(2)은 비모세관 구역(14)에 의해 검출 구역(4)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 구역들이 스트립의 종축을 따라 서로의 옆에 마련된 다. 시료 도포 구역(2)은 상기 시료 도포 구역(2)의 일단에 위치한 반응 구역(3)을 포함한다. 특히, 시료 도포 구역(2)은 제1 흡수막(12) 및 상기 시료 도포 구역(2)의 반응 구역(3) 내의 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 검출 구역(4)은 분석물 특정 포획 시약(7) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성 막(16)을 포함한다. 흡수 구역(5)은 흡수막(17)을 포함한다.

도 4a1은 중공형 케이스 및 스티커가 없는 본 발명의 특정 실시예에 따른 장치(1)를 도시한다. 도 4a1에서, 장치(1)는 지지부(18)를 포함하고, 이 지지부(18)는 그 위에 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 마련하고 있고, 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 시료 도포 구역(2)은 비모세관 구역(14)에 의해 중간 구역(6)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 구역들은 스트립의 종축을 따라 서로의 옆에 마련된다. 시료 도포 구역(2)은 상기 시료 도포 구역(2)의 일단에 위치한 반응 구역(3)을 포함한다. 특히, 시료 도포 구역(2)은 제1 흡수막(12) 및 상기 시료 도포 구역(2)의 반응 구역(3) 내의 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 중간 구역(6)은 제2 흡수막(15)을 포함한다. 일 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 또 다른 실시예에서, 상기 제2 흡수막(15)은 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 제3 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 패드(13) 및 상기 제2 흡수막(15) 모두는 하나 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 운반한다. 검출 구역(4)은 분석물 특 정 포획 시약(7) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성 막(16)을 포함한다. 흡수 구역(5)은 흡수막(17)을 포함한다.

도 4a2는 다중 분석을 실시하기 위한 본 발명의 특정 실시예에 따른 장치(1)를 도시한다. 이 장치(1)는 지지부(18)를 포함하고, 이 지지부(18)의 위에는 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 포함하고, 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 시료 도포 구역(2)은 비모세관 구역(14)에 의해 중간 구역(6)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 구역들은 스트립의 종축을 따라 서로의 옆에 마련된다. 시료 도포 구역(2)은 상기 시료 도포 구역(2)의 일단에 위치한 반응 구역(3)을 포함한다. 특히, 시료 도포 구역(2)은 제1 흡수막(12) 및 상기 시료 도포 구역(2)의 반응 구역(3) 내의 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 중간 구역(6)은 제2 흡수막(15)을 포함한다. 일 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 두 개 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 또 다른 실시예에서, 상기 제2 흡수막(15)은 두 개 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 제3 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13) 및 상기 제2 흡수막(15) 모두는 두 개 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 검출 구역(4)은 적어도 두 개의 분석물 특정 포획 시약(71, 72) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성 막(16)을 포함한다. 흡수 구역(5)은 흡수막(17)을 포함한다. 스티커(20)는 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(4), 및 중간 구역(6)을 덮고 검출 구역(4)과 부분적으로 오버랩된다. 제2 스티커(21)는 흡수 구역(5)을 덮는다.

도 4a3은 다중 분석을 실시하기 위한 본 발명의 특정 실시예에 따른 장치(1)를 도시한다. 이 장치(1)는 지지부(18)를 포함하고, 이 지지부(18) 위에 시료 도포 영역(2), 비모세관 구역(14), 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 포함하고, 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 흡수 구역(5)은 서로 접촉한다. 시료 도포 구역(2)은 비모세관 구역(14)에 의해 중간 구역(6)으로부터 분리된다. 고체 지지부 상의 구역들은 스트립의 종축을 따라 서로의 옆에 마련된다. 시료 도포 구역(2)은 상기 시료 도포 구역(2)의 일단에 위치한 반응 구역(3)을 포함한다. 특히, 시료 도포 구역(2)은 제1 흡수막(12) 및 상기 시료 도포 구역(2)의 반응 구역(3) 내에 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 포함한다. 중간 구역(6)은 제2 흡수막(15)을 포함한다. 일 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)는 세 개 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 또 다른 실시예에서, 상기 제2 흡수막(15)은 적어도 세 개의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 제3 실시예에서, 상기 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13) 및 상기 제2 흡수막(15) 모두는 세 개 이상의 특정 및/또는 대조 콘쥬게이트를 갖고 있다. 검출 구역(4)은 세 개의 분석물 특정 포획 시약(71, 72, 73) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함하는 활성 막(16)을 포함한다. 흡수 구역(5)은 흡수막(17)을 포함한다. 장치(1)는 제1 흡수막(12)의 적어도 일부가 상기 하우징(11)의 외부와 직접 연통 가능하게 하는 하우징(11) 내에 수용되어, 시료가 케이스 수용 영역(10)을 통해 상기 장치(1)에 도포될 수 있다.

바람직하게는, 본 발명의 장치는 면역중력(immunogravity) 구동 검사 장치이다. 본 발명의 실시예에서, 도 4b 내지 도 4e는 상기 장치(1) 상에서 결과가 표시 될 수 있는 방식을 개략적으로 도시한다. 즉, 도 4b는 검사 전의 장치(1)를 도시하고 있는데, 여기서 시료 검출 구역은 하나의 분석물 특정 포획 시약(7) 및 대조(참조) 포획 시약(7')을 포함한다. 도 4c는 양성적(positive) 결과를 도시하고 있는데, 여기서 착물이 분석물 특정 콘쥬게이트와 검출된 분석물 사이에 형성되고, 포획 시약(7)이 특히 착물을 인식하는 시료 검출 구역에서 채색된 라인(8)이 생성된다. 대조 포획 시약(7')과 참조의 콘쥬게이트 간의 반응이 대조 라인(9)을 생성한다. 도 4d는 음성적(negative) 결과를 도시하고 있는데, 검출된 분석물이 존재하지 않고 그에 따라 채색된 라인(8)이 존재하지 않으며, 대조 포획 시약(7')과 참조 콘쥬게이트 간의 반응이 대조 라인(9)을 생성한다. 도 4e는 유효하지 않은 결과를 도시하고 있는데. 대조 포획 시약(7')과 참조 콘쥬게이트 간에 어떠한 반응도 존재하지 않으며 그에 따라 대조 라인(9)도 존재하지 않는다.

바람직한 실시예에서, 장치가 이용중에, 양성적 반응의 경우, 즉 하나 이상의 착물이 분석물 특정 콘쥬게이트와 검출될 분석물 사이에 형성되는 경우, 포획 시약(7)이 도포된 검출 구역(4)에 특정한 신호가 생성된다. 포획 시약(7)은 착물을 특정하게 인식하여 채색된 라인(8)을 생성한다. 바람직한 실시예에서, 대조 포획 시약(7')과 참조 콘쥬게이트 간의 반응은 검출 구역(4)에서 볼 수 있는 대조 라인(9)을 생성한다.

상기한 바와 같이, 본 발명의 실시예에 따라, 장치(1)의 검출 구역(4)은 하나 이상의 검사 시약(분석물 특정 포획 시약)(7) 및 이동 대조 포획 시약(들)(대조 포획 시약)(7')으로 감응할 수 있다. 검사 시약(7)은 시료에서 검출될 분석물의 직 접적인 검출 또는 간접적인 검출을 목표로 하고, 이동 대조 포획 시약(7')은 직접적인 표지에 결합된 반분석물 항체(anti-analyte antibody)에 대항하거나 검출될 분석물과 관련없는 특정 콘쥬게이트에 대항하는 것을 목표로 한다.

바람직하게는 포획 시약(7, 7') 및 콘쥬게이트 시약은 면역시약, 올리고뉴클레오티드, 리간드 또는 수용체 분자 또는 그 유사물이다. 포획 시약(7, 7') 및 콘쥬게이트 시약은 올리고뉴클레오티드 또는 그 유사물, 다클론 항체 또는 단일 클론성 항체 또는 고변이 항체 단편, 또는 IgG, IgA, IgE 및 IgM과 같은 혈청 화합물에 의해 인식되는 항원 또는 비오틴-스트렙트아비딘과 같은 결합체(리간드-수용체)의 특정 시약 중 하나 등으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

바람직하게는, 검출 표지는, 직접적인 미립자 표지, 특히 콘쥬게이트 금속성 콜로이드, 콘쥬게이트 폴리스티렌 미소구체, 특정한 색을 갖는 마이크로입자 또는 나노입자 또는 나노튜브, 및 형광 마이크로입자 또는 형광 나노입자 또는 형광 나노튜브를 포함하는 군으로부터 선택된 직접적인 표지이다.

특히, 본 발명은 폴리머로 제조된 경질 또는 반경질의 고체 지지부(18) 상에 적층된 폴리머 물질로 이루어진 중력 구동 검사 장치(1)에 관한 것이다. 특정 실시예에서, 경질 고체 지지부(18)는 플라스틱과 같은 가소성 받침이다. 유리하게는, 본 발명의 장치는 활성 막(16)에서 달리 반응할 수 있는 상이한 분석물 또는 그 유사물을 검출하게 한다.

특정 실시예에서, 시료 도포 구역(2)의 막은 유리 섬유로 제조되고, 제1 반응 구역(3)은 폴리에스테르 또는 다른 매트릭스로 제조된다. 특정 실시예에서, 검 출 구역(4)의 막은 니트로셀룰로오스로 제조되고, 중간 구역(6)의 막은 유리 섬유, 폴리에스테르 또는 셀룰로오스로 제조되며, 흡수 구역(5)의 막은 셀룰로오스로 제조된다. 시료 도포 구역(2) 및 제1 반응 구역(3)은 동일한 재료로 제조될 수 있다. 대안적으로, 콘쥬게이트는 시료 도포 구역(2) 위에 직접 주입될 수 있다.

본 발명의 장치(1)는 용액 또는 생체 시료와 같은 검사 시료에 존재할 가능성이 있는 여러 분석물 또는 그 유사물의 검출에 매우 적합하다. 분석물 또는 그 유사물은, 한정되는 것은 아니지만, 작은와포자층, 톡소포자층, 람블편모층, 클로스트리듐 디피실리균, 클로스트리듐 디피실리균 독소, 대장균, 이질아메바, RSV(호흡기 신시티아 바이러스), 인플루엔자 A 및 B 바이러스, 로타바이러스, 아데노바이러스형 40 & 41 또는 기타 아데노바이러스 군, 레지오넬라균 소변 항원, 인간 및 동물 근원의 코로나바이러스 및 인간 메타뉴모바이러스를 포함하는 (해로운) 미생물로부터 얻어질 수 있거나 이들에 의해 생성될 수 있다.

본 발명의 바람직한 실시예에서, 하나 이상의 분석물 또는 그 유사물이 본 발명에 따른 하나의 장치로 검출된다. 본 발명의 중력 구동 검사 장치(1)는 다중 검출에 매우 적합하다. 예컨대, 동일한 장치에서 인플루엔자 A 및 인플루엔자 B 또는 아데노바이러스 및 RSV의 존재를 검출하는 것이 가능하다. 로타바이러스 및 장 아데노바이러스 검출 또는 작은와포자층, 클로스트리듐 디피실리균 독소, 람블편모층 및 이질아메바의 검출이 다른 예이다.

본 발명의 특정 실시예는, 경질 또는 반경질 고체 지지부(18) 상에 선택적으로 콘쥬게이트 영역 또는 패드(13)를 갖는 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 선택적인 중간 구역(6) 및 가능하면 대조 소구역을 갖는 검출 구역(4), 및 선택적으로 흡수 구역(5)을 포함하는 시트형 면역중력 구동 검사 장치(1)에 관한 것이다. 이 장치(1)의 검출 구역(4)은 검사 시약(7)에 감응하게 된다. 또한, 검출 구역(4)은 대조 항체(7')에 감응하게 된다. 비모세관 구역(14)은 시료 도포 구역과 시료 검출 구역 사이의 임의의 직접적인 접촉 및 모세관 접촉을 피하게 하는데, 이 모세관 접촉은 종래 기술의 장치에서 통상 관찰되고 개시하고 있는 것이다.

바람직하게는, 콘쥬게이트는 제1 반응 구역(3) 상의 시료 도포 구역의 하부에서 건조되어 있다.

특정 실시예에서, 항체가 검출 구역(4)에서 사용된다. 바람직하게는, 대조 항체(들), 특히 이동 대조 항체(7')는 검출 구역(4)의 대조 영역에 코팅되고, 상기 대조 영역은 검사 항체, 특히 분석물 특정 항체가 코팅되는 검사 영역 아래에 배치된다. 전술한 바와 같이, 검사 및 대조 콘쥬게이트는, 올리고뉴클레오티드 또는 그 유사물, 또는 다클론 항체 또는 단일 클론성 항체 또는 이를 테면 고변이 항체 단편, 또는 이를 테면 IgG, IgA, IgE 및 IgM과 같은 혈청 화합물에 의해 인식되는 항원 또는 비오틴-스트렙트아비딘과 같은 결합체의 특정 시약 중 하나일 수 있다. 검사 또는 특정 콘쥬게이트의 표지 및 대조 콘쥬게이트의 표지는 직접적인 표지, 특히 콘쥬게이트 금속 콜로이드, 콘쥬게이트 폴리스티렌 입자 및 뚜렷한 특정 색을 갖거나 형광성의 마이크로입자 또는 나노입자 또는 나노튜브로 이루어진 군으로부터 선택된 직접적인 표지일 수 있다.

유리하게는, 본 발명의 장치(1)에 존재하는 대조 콘쥬게이트는, 존재할 것으 로 짐작되는 분석물 또는 그 유사물의 검출을 방해하지 않는다. 유리하게는, 대조 콘쥬게이트는, 특정 신호에 의존하는 일정한 강도를 갖는 신호를 생성한다. 상기 대조 콘쥬게이트는 검출된 분석물 또는 그 유사물을 정량화하거나 준정량화한다.

본 발명에 따른 시트형 중력 구동 검사 장치(1)는 이용 및 취급이 용이하고 그 이용에 있어서 매우 탄력적이다. 본 발명의 중력 구동 검사 장치(1)는, 동일한 장치(1)에서 예컨대 상이한 종류의 입자 및/또는 상이한 종류의 시료 및/또는 콘쥬게이트 패드를 이용하게 한다. 따라서, 본 발명은, 취급이 용이하고 신속하지만 정확한 검출 및/또는 검사 시료에서 다중 분석물의 진단(다중 검출)을 허여하는 장치(1)를 제공한다.

본 발명의 특정 실시예는 본 발명에 따른 중력 구동 검사 장치(1)에 관한 것으로서, 8, 10, 12, 15 ㎛ 등의 활성 막(16)의 다공성이 선택될 수 있다.

본 발명의 또 다른 실시예는 중력 구동 검사 장치(1)에 관한 것으로서, 활성 막(16)은 유사하거나 상이한 다공성을 갖는 상이한 재료로 제조된다. 예컨대, 활성 막은 니트로셀룰로오스 또는 Predator^TM (Pall) 또는 Porex 막으로 이루어질 수 있다. 당업자는 다른 가능성을 인식한다. 검출 구역(4)에서 이용하기 위한 가능한 활성 막(16)은, 한정되는 것은 아니지만, 셀룰로오스, 니트로셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트, 유리 섬유, 나일론, 아크릴 공중합체/나일론, 폴리에테르술폰, 폴리에틸렌 및 폴리에스테르를 포함한다.

또한, 본 발명은 분석물 또는 그 유사물의 존재를 확인하는데 이용될 수 있 는 상기의 중력 구동 검사 장치 중 하나를 이용하는 검출 방법에 관한 것이다. 검출은, 육안으로 및/또는 분석물 또는 그 유사물의 검출 및/또는 정량화를 위한 특정 소프트웨어 프로그램 및 스트립리더(stripreader)의 도움을 빌려 자동으로 실시될 수 있다.

본 발명의 특정 실시예는, 상기한 바와 같은 방법에 관한 것으로서, 검사 또는 분석물 특정 포획 시약(7)의 고정 위치에서 신호(예컨대 채색된 신호)의 발생 여부가 분석물 또는 그 유사물의 존재 여부를 표시한다.

유리하게는, 이동 대조 항체와 같은 대조 포획 시약(7')의 고정 위치에서의 신호(예컨대 채색된 신호)의 발생은, 시료가 본 발명에 따른 (면역)중력 구동 검사 장치(1)의 활성 막 위에서 움직였다는 것을 나타낸다.

유리하게는, 대조 항체와 같은 대조 시약의 고정 위치에서의 신호(예컨대 채색된 신호)의 발생은, 본 발명에 따른 시트형 (면역)중력 구동 검사 장치의 정확한 이용 및 양호한 상태, 건조된 콘쥬게이트의 우수성뿐만 아니라 면역학적 반응과 같은 포획 반응의 완성을 나타낸다.

유리하게는, 대조 항체와 같은 대조 포획 시약(이동 및 가능한 참조 대조 시약)의 고정 위치에서 신호(예컨대 채색된 신호)의 발생은, 시료에서 검출된 분석물 또는 그 유사물의 존재 여부에 의존한다.

따라서, 본 발명은 분석물 또는 그 유사물의 신속한 검출을 위한 새로운 장치 및 생체 시료와 같은 검사 시료에 아마도 존재하는 (다중) 분석물 또는 그 유사물의 검출에서의 상기 장치의 이용을 제공한다. 본 발명에 따른 장치는 종래의 장 치보다 더 양호한 반응성을 나타낸다. 비모세관 구역을 구비하고 중력 구동 이동을 구비하는 것은, 배양 상청액; 비인두 분비물, 혈액, 혈청, 소변, 정액, 타액, 또는 대변과 같은 생체 분비물을 포함하는 다양한 시료를 취급하게 한다. 특히, 본 발명의 장치는 대변 시료, 슬러리, 콜로이드 등과 같은 점성 유형의 시료를 클로깅(clogging) 없이 검사하게 한다. 본 발명의 장치는, 그 이용중에 시료 점성 또는 복잡성에 무관하게 장치를 가로질러 시료가 신속하게 이동하게 한다. 바람직한 장치는, 지지 폴리머(18)의 하나 이상의 측면에서, 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 중간 구역(6), 검출 구역(4), 및 흡수 구역(5)을 포함한다. 검출 구역(4)은, 각각 하나 이상의 특정 분석물, 분석물 군 또는 특정 분석 생산물의 검출에만 사용되는 여러 획정된 소구역, 바람직하게는 라인을 포함할 수 있다. 적어도 하나의 대조 구역이 포함될 수 있다. 본 발명의 장치는 단일체의 시트형 장치일 수 있거나 서로 접촉하는 여러 부품으로 이루어질 수 있다.

EP 0 088 636, EP 0 186 799, EP 0 284 232 및 WO 88/08534 등의 종래 기술 문헌은 (면역)크로마토그래피 장치의 원리 및 분석물, 콘쥬게이트와 같은 상이한 화합물과 면역시약과 같은 포획 시약 사이의 반응에 관하여 참조된다. 이들 문헌의 명세는 그 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다.

본 발명에 따른 장치(1)는 다공성 폴리머 물질로 구성되고, 이 물질은 바람직하게는 기계적인 강도를 제공하기 위해서 본 발명의 장치(1)의 취급을 용이하게 하는 강성 또는 준강성 폴리머(18)의 하나 이상의 측면에 적층된다. 폴리머 물질의 다공성은, 스틱의 상단에서 하단까지 유체 및 그 성분의 이동, 즉 재수화된 콘쥬게 이트를 따르는 이동이 어떠한 방해 없이 중력으로 인해 이루어지도록 되어야 한다. 또한, 이러한 특징은 상기 폴리머의 친수성에 의해 허여된다. 적절한 폴리머의 예는 셀룰로오스, 니트로셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트, 유리 섬유, 나일론, 아크릴 공중합체/나일론, 폴리에테르술폰, 폴리에틸렌 및 폴리에스테르이다.

"분석물 또는 그 유사물" 또는 "분석물"이라는 용어는, 번갈아 가면서 사용될 수 있는 것으로, 생체 시료 내의 검출될 분자뿐만 아니라, 분석물 자체와 실질적으로 동일한 방식으로 분석에 사용되는 다른 분자와 결합하는 경우의 그 유사물 또는 유도체를 지칭한다. 상기 분자의 비한정적인 예는, 단백질; 당단백질; 지질단백질; 펩티드; 당펩티드; 합텐; 다당류; 지질다당류; 핵산; 바이러스 입자; 박테리아, 바이러스, 원생동물 및 기생충과 같은 일부 미생물; 또는 임의 기원의 화학적 화합물을 포함한다.

본 발명에 따른 장치(1)는, 한정되는 것은 아니지만, 작은와포자층 접합자, 람블편모층 포낭, RSV(호흡기 신시티아 바이러스), 대장균, 클로스트리듐 디피실리균, 클로스트리듐 디피실리균 독소, 이질아메바, 인플루엔자 A 및 B 바이러스, 로타바이러스, 아데노바이러스형 40 & 41, 아데노바이러스 군, 레지오넬라균 소변 항원, 인간 및 동물 근원의 코로나바이러스 및 인간 메타뉴모바이러스를 포함하는 해로운 미생물 또는 그 화합물을 생체 시료에서 검출하는데 특히 유리하다. 유리하게는, 장치는, 하나의 단일 검사(1)를 통하여 여러 개의 상기 분석물 또는 그 유사물을 검출을 허여 및/또는 대장균 시가(shiga)형 독소 Ⅰ및 Ⅱ와 같은 주어진 분석물에 의해 생성된 2 이상의 해로운 화합물의 검출을 허여 및/또는 병원체에 의해 감 염된 후에 발생된 IgG, IgA 및 IgM과 같은 다중 혈청 화합물의 검출을 허여하도록 구성될 수 있다.

분석물 또는 그 유사물을 포함하는 것으로 추측되는 검사 시료, 바람직하게는 액체 검사 시료는, 한정되는 것은 아니지만 배양 상청액, 비인두 분비물, 대변 시료, 혈청 등을 포함하는 임의의 생체 시료로부터 얻어질 수 있다. 예컨대 대변 시료와 같은 시료는, 도포에 앞서 바람직하게는 장치(1)를 통해 액체가 이동할 수 있게 하는 용액 내에 현탁 상태로 된다. 본 발명의 시스템으로 검사될 수 있는 시료는, 바람직하게는 인간 피실험자로부터의 혈액, 소변, 정액, 타액, 또는 대변과 같은 생체 시료를 포함한다. 동물, 식물, 식품, 물, 하수 및 토양으로부터의 시료도 검사될 수 있다.

분석물 또는 그 유사물에 대하여 특정된 특정 표지화 시약이 아마도 시료에 존재하는 분석물 또는 그 유사물을 검출 및/또는 정량하기 위해 제공된다. 특정 표지화 시약(콘쥬게이트)은 개별 분석물 또는 그 유사물과 착물을 개별적으로 형성할 것이고, 상기 착물은 분석물 특정 시약(7)에 의해 포획된다. 표지화 시약은, 바람직하게는 제2 다공성 영역 또는 구역 상에서 흡수된 대조 시약과 최종적으로 반응하는데 이용될 수 있다. 포획 시약(7, 7')은 올리고뉴클레오티드 또는 그 유사물, 또는 다클론 항체 또는 단일 클론성 항체 또는 당해 기술 분야에서 알려진 고변이 항체 단편, 또는 IgG, IgA, IgE 및 IgM과 같은 혈청 화합물에 의해 인식되는 항원 또는 비오틴-스트렙트아비딘과 같은 결합체의 특정 시약 중 하나일 수 있다. 바람직하게는 단일 클론성 항체 또는 그의 고변이 단편이 이용된다. 일부 포획 시약(7, 7')이 유전 공학을 통해 생산될 수 있다.

표지화 시약 또는 검출 작용제는 불활성 재료 위에서 고정(함침)되고, 이 재료는 유리 섬유 또는 폴리에스테르이거나, 물리적 화학적 불활성인 한편, 입자 운동을 가능하게 하고 액체 시료가 표지화 시약에 도달할 때 표지화 시약을 쉽고 완전하게 재수화시키기에 충분한 다공성 및 습윤성을 갖는 임의의 재료일 수 있다. 액체 시료가 상기 재수화된 검출 작용제와 접촉할 때, 개개의 분석물이 분석물의 특정 표지화 시약과 착물을 형성할 것이며 이 착물은 시료 검출 구역에서 흡수된 착물의 특정 시약과 반응할 것이고, 반면에 표지화 대조 작용제는, 그와 함께 반응하는 대조 구역 상에서 흡수된 대조 시약에 이르기까지 자유롭게 이동할 것이다.

다양한 검출 시스템이 당해 기술분야에서 알려져 있다. 당해 기술분야에서 알려진 채색된 또는 가시적인 (직접의) 미립자 표지는, 한정되는 것은 아니지만 통상적으로 검출될 분석물과 반응하는 결합 시약에 콘쥬게이트될 수 있는, 폴리스티렌(라텍스) 폴리머로 제조된 입자, 금, 탄소, 리포좀, 은, 구리 등의 금속 콜로이드를 포함한다. 또한 형광용 검출 시스템이 이용될 수 있다. 정량화 및/또는 준정량화가 가능하다.

본 발명은, 본 발명에 따른 시트형 중력 구동 검사 장치(1)를 이용하여 생체 시료 또는 실험 시료로부터 다수의 병원체를 신속하고 명확하게 식별하기 위한 방법에 관한 것이다.

본 발명의 바람직한 실시예에서, 특정의 대조 콘쥬게이트는, 분석물 또는 그 유사물에 특정된 시약 또는 대조 시약이 결합된(그와 콘쥬게이트된) 가시적인 (직 접적인) 표지를 포함한다. 분석물 또는 그 유사물 또는 대조 시약과 그 콘쥬게이트 사이에 형성된 착물은, 검출 구역의 막(바람직하게는 니트로셀룰로오스)(4)과 마주치기 전에 중력에 의해 중간 구역(6)으로 이동할 것이고, 그 위에 코팅된 특정 분석물 또는 그 유사물 시약(7)이나 그 위에 코팅된 대조 시약(7')에 도달할 것이다. 분석물 또는 그 유사물 시약(7) 또는 대조 시약(7')과 착물 사이의 반응은, 입자가 축적되어 가시적인 신호(8, 9)를 생성할 것이기 때문에 가시화될 것이다. 이 신호는 사용자가 분석물 또는 그 유사물이 분석된 시료에 존재하는지를 구체적으로 식별하게 하고 바람직하게는 검사 시료에 존재하는 분석물 또는 그 유사물의 양을 [가능하면 대조 라인(9)을 통해] 정량화 또는 준정량화시키게 한다.

이하에서, 본 발명에 따른 특정 중력 구동 검사 장치의 일반적인 태양과 바람직한 구성 및 제조에 관해 보다 상세하게 설명한다.

중력 구동 검사 분석을 수행하기 위해서, 본 발명의 실시예에 따른 장치(1)는, 바람직하게는 종으로 나란히 (병치된) 5 개의 구역으로 분할되고, 이 구역은 장치(1)의 하나 이상의 측에 위치한 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), 가능하면 중간 구역(6), 검출 구역(4) 및 가능하면 흡수 구역(5)을 포함한다.

바람직한 실시예에서, 시료 도포 구역(2)의 막은 폴리에스테르로 제조된 콘쥬게이트 패드(13)를 구비한 상태로 유리 섬유 또는 셀룰로오스로 제조되고, 중간 구역(6)의 막은 유리 섬유 또는 셀룰로오스로 제조되며 검출 구역(4)의 막은 니트로셀룰로오스로 제조되고, 흡수 구역(5)의 막은 셀룰로오스로 제조된다. 특정 실시예에서, 시료 도포 구역(2) 및 콘쥬게이트 패드(13)는 동일한 물질 또는 재료로 제 조될 수 있다. 그러나, 콘쥬게이트는 시료 도포 구역(2) 위에 직접 주입될 수도 있다.

제1 반응 구역(3)은 제1 흡수막(12)에 의해 완전하게 또는 부분적으로 덮일 수 있다. 흡수막 및 콘쥬게이트 패드 모두는 동일한 물질 또는 재료로 제조될 수 있다. 가능하면, 이 경우에, 제1 흡수막(12) 내에 시료 액체를 흡수하기 위해 사용되기도 하는 폴리머 상에 콘쥬게이트가 직접 분무될 수 있다.

콘쥬게이트 패드는, 분석물 특정 콘쥬게이트를 형성하기 위해 단백질, 당단백질, 지질단백질, 펩티드, 당펩티드, 합텐, 다당류, 지질다당류, 핵산 또는 유사물(PNA, LNA, ...)을 포함할 수 있는 몇몇 화합물로 코팅된 입자가 주입된다. 이들 화합물은 특히 분석될 시료(들) 내에 존재할 수 있는 분석물 또는 그 유사물과 함께 어딘가에서 반응할 것이다. 적절한 입자의 예는, 한정되는 것은 아니지만, 콜로이드성 금 입자; 콜로이드성 황 입자; 콜로이드성 셀레늄 입자; 콜로이드성 황산바륨 입자; 콜로이드성 황산철 입자; 금속 요오드산염 입자; 할로겐화은 입자, 콜로이드성 은, 콜로이드성 팔라듐, 콜로이드성 백금, 콜로이드성 로듐, 실리카 입자; 콜로이드성 금속 (수소화) 산화물 입자; 콜로이드성 황화금속 입자; 콜로이드성 셀레나이드 납 입자; 콜로이드성 셀레나이드 카드뮴 입자; 콜로이드성 인산 금속 입자; 콜로이드성 페라이트 금속 입자; 탄소 나노튜브; 유기층 또는 무기층으로 코팅된 상기의 콜로이드성 입자 중 어느 것; 단백질 또는 펩티드 분자; 리포좀; 채색된 마이크로입자, 채색된 나노입자, 형광 마이크로입자 및 형광 나노입자 또는 유기적 폴리머 폴리스티렌 입자를 포함한다. 바람직한 실시예에서, 입자는 콜로이드성 금 입자 또는 폴리스티렌 (라텍스) 미소구체이다. 콜로이드성 금 입자는 약 5 내지 약 60 nm의 직경을 가질 수 있다. 바람직하게는, 약 20 nm 또는 약 40 nm 직경의 입자가 사용된다. 카르복실 작용기, 아민 작용기, 히드록실 작용기 및 설프히드릴 작용기과 같은 여러 화학적 작용기으로 활성화된 폴리스티렌 (라텍스) 미소구체가 이용될 수 있다. 바람직한 일 실시예에서, 비활성 및 아민 활성 폴리스티렌 미소구체가 이용된다. 바람직하게는, 약 20 nm 내지 1000 nm의, 바람직하게는 150 nm 내지 약 350 nm 직경의 미소구체가 이용된다.

다색 검출을 실행하기 위해서, 상이하게 채색된 미소구체가 이용된다(예컨대, 분석물 A에 대하여 붉은색, 분석물 B에 대하여 푸른색, 대조 라인에 대하여 초록색).

본 발명의 시트형 중력 구동 검사 장치(1)에서 이용될 분석물 특정 입자는, 특히 검출될 분석물 또는 그 유사물과 직접적 또는 간접적으로 결합하는 화합물로 코팅된다.

본 발명에 따른 시트형 중력 구동 검사 장치(1)의 검출 구역(4)은 셀룰로오스, 니트로셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트, 유리 섬유, 나일론, 아크릴 공중합체/나일론, 폴리에테르술폰, 폴리에틸렌 및 폴리에스테르로 제조될 수 있지만 바람직하게는 Advanced Microdevices Pvt, Ltd.의 니트로셀룰로오스로 제조될 수 있다. 다른 공급자(Schleicher & Schuell 또는 Millipore 또는 Porex 또는 Pall 또는 Whatman)의 막이 이용될 수도 있다. 바람직하게는, 적절한 완충제 내에서 시약(7, 7')을 희석시켜, 이를 접촉 시스템(예컨대, Imagen Technology의 IsoFlow)을 이용 하여 시약을 막[바람직하게는 니트로셀룰로오스(16)] 위에 분배시킴으로써 코팅이 실시된다. 분배 속도는 약 50 mm/sec 부터 약 10 mm/sec 까지 변할 수 있지만 바람직하게는 약 40 mm/sec에서 또는 훨씬 더 양호하게는 약 30 mm/sec에서 고정된다. 분포된 재료의 부피는 약 0.5 ㎕/cm 부터 약 3 ㎕/cm 까지, 바람직하게는 약 0.7 ㎕/cm 부터 약 2 ㎕/cm 까지, 더 정확하게는 약 1 ㎕/cm 부터 약 2 ㎕/cm 까지 변한다.

시약의 농도는 약 0.1 mg/ml부터 약 10 mg/ml 까지 변하고, 바람직하게는 약 0.15 mg/ml 부터 2 mg/ml 까지 변한다. 본 발명의 바람직한 실시예에서, 본 코팅을 위해 이용된 완충제는 약 pH 7.2로 인산염으로 완충된 식염수(NaCl)로 이루어졌다.

본 발명의 실시예에서, 본 발명의 시트형 중력 구동 검사 장치(1)는 니트로셀룰로오스(16)의 단부로 운반되었던 용액을 흡인시키는 흡수 구역(5)을 포함한다. 물질의 예는 셀룰로오스 및 유리 섬유를 포함한다. 셀룰로오스(MDI) 또는 유리 섬유(Schleicher & Schuell)가 바람직하게 이용되었다.

바람직하게는, 본 발명의 시트형 중력 구동 검사 장치(1)는, 바람직하게는 적어도 하나의 대조 라인을 포함하는 대조 소구역(그중에서도 특히 내부 대조 및/또는 이동 대조)을 포함하기도 한다. 이동 대조 콘쥬게이트는 특정 콘쥬게이트, 또는 분석물 자체, 또는 분석될 시료에 존재 가능한 어떠한 것과도 반응하지 않아야 한다. 바람직하게는, 이동 대조 라인은, 그 강도가 항상 동일하고 특정 신호와 그 강도에 의존하지 않는 방식으로 형성된다. 대조 시약의 코팅은 상기한 바와 같다. 이동 포획 콘쥬게이트는 특정 콘쥬게이트와 함께 콘쥬게이트 패드 내에 혼합되거 나, 단독으로 주입된다.

바람직하게는, 중력 구동 검사 장치는 홀더, 지지부 또는 빈 검사 튜브 내에 수직으로(즉, 직립 상태로) 놓인다.

본 명세서에 사용된 것으로서 "수직으로"라는 용어는 실질적으로 직립 상태를 지칭한다. 장치가 수직으로 위치 설정될 때, 본 발명에서 이용될 스틱은 수평면에서 45°부터 135°까지, 바람직하게는 60°부터 120°까지, 바람직하게는 80°부터 100°까지 변하는 각을 만들 수 있다. 검출될 분석물 또는 그 유사물을 함유하는 액체 시료가 장치(1)의 상단에 놓이고 제1 흡수막(12)을 통과하여 콘쥬게이트 패드(13)로 이동하며, 양 콘쥬게이트, 즉 특정 분석물 또는 그 유사물의 콘쥬게이트와 대조 콘쥬게이트를 재수화시킨다. 관련 분석물 또는 그 유사물이 존재한다면, 여러 착물이 형성될 것이다. 착물은 이들이 혼합되는 비모세관 구역(14)에 도달할 것이다. 중력에 의해 액체가 전진하기 때문에, 제2 흡수막(15)을 통과하여 바람직하게는 니트로셀룰로오스로 제조된 활성 막(16)에 도착한다. 상기 착물은 양성적 반응의 경우에 가시적인(예컨대, 붉은색, 푸른색, 초록색,...) 라인 또는 소구역을 발생시킬 것인 반면에, 대조 콘쥬게이트는 진행중에 코팅된 시약에 도달하여 그 시약과 반응하여 가시적인 채색 라인(초록색)을 생성하도록 진행하게 된다. 대조 신호는, 그 중에서도 특히 검사가 적절하게 실시되었다는 것을 표시하고, 특정 반응의 부재도 나타낸다. 대조 신호는 정량적인 참조로서도 제공될 수 있다. 특정 신호 및 대조 신호는 동일하거나 상이한 색일 수 있다. 대조 콘쥬게이트 및 특정 콘쥬게이트의 입자의 크기는 동일할 수 있거나 상이할 수 있다. 본 발명에 따른 특정 실 시예에서, 양(대조 및 특정) 콘쥬게이트, 바람직하게는 금 콘쥬게이트는 폴리에스테르 또는 나일론일 수 있는 고체 불활성 막 내에 주입된다. 폴리에스테르가 바람직하다. 본 명세서에서 이용된 폴리에스테르 막은 27 × 260 mm 의 크기를 갖고 Advanced Microdevices Pvt, Ltd (India)로부터 입수된다. 막은, 검사가 진행될 때 액체 시료에 의해 최적으로 재수화하기 위해 특정 완충제 내에서 희석하는 단계 이후에 바람직하게는 금 콘쥬게이트가 주입된다. 또한 Schleicher & Schuell의 AccuFlow G 막이 그러한 용도에 유용하고 콘쥬게이트가 흡수막 위에 직접 분무되는 이점을 갖는다.

본 발명에 따른 또 다른 특정 실시예에서, 양(대조 및 특정) 콘쥬게이트, 바람직하게는 폴리스티렌제 채색 미소구체는, 폴리에스테르 또는 유리 섬유일 수 있는 고체 불활성 막 내에 주입된다. 유리 섬유가 바람직하다. 본 명세서에서 이용된 유리 섬유 막은 27 × 260 mm 의 크기를 갖고 Whatman으로부터 입수된다.

Advanced Microdevices Pvt의 폴리에스테르 막을 이용할 때, 이 막은, 1,6 ml의 한정된 부피를 갖지만 이용된 주입 시스템에 따라 1,3 ml로 줄어들 수 있는 적절한 바이알(vial) 안에 침지시킴으로써 주입된다. 막은 상온에서 하룻밤 건조시킨다. 이어서, 막은 약 20분 동안 약 55℃로 오븐에서 건조된다. 건조 후에, 상기 막은 최대 10%의 상대 습도하에서 건조제와 함께 특정 박스에 저장된다. [콘쥬게이트 패드(13)로서 언급되는] 막은, 약 5 mm 폭의 조각으로 절단되고, 도 1, 도 2 및 도 3에 표시한 바와 같은 적층물의 제1 접착 부분 상에 부착된다. 이들 막의 위치는 특정 목적을 위해 예측되는 최대 검출 능력에 도달하는 것이 중요하다. 유리 섬 유, 또는 임의의 다른 흡수 물질로 제조된 흡수 페이퍼는, 제공된 스트립의 상부 접착부에 부착되고, 액체가 콘쥬게이트를 재수화시키게 하고 시료에 존재하는 분석물 또는 그 유사물과 반응하게 하기 위해 콘쥬게이트를 함유하는 폴리에스테르 막과 오버랩하여, 또는 에지간에서 접촉한다.

AccuFlow G 또는 Standard 14 또는 막 8964(Alstroehm) 막이 이용될 때, 콘쥬게이트는 Imagen Technology 사의 동기류 분무 노즐 시스템(IsoFlow Atomizing Nozzle System)으로 분무된다. 이 경우, 콘쥬게이트는, 1 내지 20 psi 범위의 압력으로 50 mm/sec의 속도에서 0.8 ㎕/mm 부터 3.0 ㎕/mm 까지의 범위의 양으로 분무된다. 막은 상온에서 하룻밤 동안 건조된다. 이어서 막은 약 10분 동안 약 55℃로 오븐에서 건조된다. 건조 후에, 상기 막은 최대 10%의 상대 습도하에서 건조제와 함께 특정 박스에 저장된다. [콘쥬게이트 패드(13)로서 언급되는] 막은, 약 5 내지 10mm 폭의 조각으로 절단되거나, 도 1, 도 2 및 도 3에 표시한 바와 같은 적층물의 상부 접착 부분 상에 절단되지 않은 상태로 부착된다. 이들 막의 위치는 특정 목적을 위해 예측되는 최대 검출 능력에 도달하는 것이 중요하다. 유리 섬유, 또는 임의의 다른 흡수 물질로 제조된 흡수 페이퍼(Whatman의 Fusion 5)는, 제공된 스트립의 상부 접착부에 부착되고, 액체가 콘쥬게이트를 재수화시키게 하고 시료에 존재하는 분석물 또는 그 유사물과 반응하게 하기 위해 콘쥬게이트를 함유하는 막과 에지간에서 접촉하거나, 막을 부분적으로 또는 완전하게 덮으면서 접촉한다.

몇몇 검사는 정량화를 실시할 것을 요하는데, 이는 예컨대 항원의 농도가 정해진 컷오프 레벨보다 높은지 낮은지 또는 예컨대 항원에 대한 혈청 반응이 컷오프 레벨보다 높은지 낮은지를 식별하기 위함이다. 이는, 검사 라인[특정 라인(8)]의 강도와 일정하거나 점진적인 강도의 하나 이상의 대조 라인(들)의 강도를 비교함으로써 행하여질 수 있다. 이렇게 얻어진 참조 크기는 라인 사이에서 상이한 강도를 갖는 여러 라인으로 구성되지만, 라인 각각에 대하여 일정하고 재현 가능하다. 바람직하게는, 각 콘쥬게이트는 일정한 강도를 얻기 위해 미리 정해진 농도에서 건조된다. 검사 라인 신호의 강도는 예컨대 항원의 농도에 비례할 것이고, 적어도 컷오프 레벨을 포함하는 소망의 미리 정해진 농도 범위에 있을 것이다.

또한, 본 발명은, 본 발명에 따른 장치에 결합하는 키트, 상기 장치에 결합하는 패키지, 단위화 하우징(unitized housing), 홀더 및 상기 장치를 지지하는 수단을 포함한다. 지지 부재라고도 불리는 상기 지지 수단은, 시료 도포 구역이 상기 위치의 상단에 위치하도록 하면서, 본 발명에 따른 중력 구동 검사 장치를 실질적으로 직립 상태로 유지할 수 있게 하는 재료를 말한다. 지지 수단으로 이용하기 위한 재료는, 한정되는 것은 아니지만, 유리, 플라스틱 등을 포함한다.

본 발명의 또 다른 태양에서, 시료 내에서 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물을 검출하기 위한 검사 키트가 제공된다. 별개로 패키징되거나 전체로서 패키징되는 이들 검사 키트는, 본 발명에 따른 시트형 중력 구동 장치 및 선택적으로 시료를 다루거나 추출하기 위한 임의의 추가적인 시약을 포함할 수 있다.

본 명세서에서 사용된 "키트"라는 용어는 본 발명의 방법을 수행하기 위해 이용될 수 있는 시약 또는 장치의 임의의 조합을 지칭한다. 본 발명의 키트는, 본 발명의 방법을 실시하기 위해, 본 명세서에서 설명되거나 당해 기술 분야에서 알려 진 필요한 임의의 추가 시약, 완충제, 첨가제, 컨테이너 및/또는 장치를 더 포함할 수 있다. 다른 키트 요소는 하나 이상의 장치 요소를 패키징하기 위한 컨테이너, 패키징 재료, 장치와 이용하기 위한 수용액 등을 포함할 수 있다. 상기 장치가 패키징될 수 있고 분석물 검출용 키트로 판매될 수 있다. 실로, 완비되고 이용에 편리한 상기 장치는 키트 그 자체이다.

본 발명에 따른 장치 또는 방법을 사용하는 것에 있어서 사용자를 지도하는 사용설명서의 한 세트가 통상적으로 포함될 것이다.

또 다른 태양에서, 본 발명은 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법을 제공하는데, 이 방법은 분석 장치를 시료와 접촉하고 시료를 중력에 의해 상기 장치의 상단에서 하단까지 이동시키는 단계, 및 분석물 또는 그 유사물을 검출하는 단계를 포함한다. 본 발명의 특정 실시예에서, 분석물 검출 방법은 분석 장치를 수직으로 위치 설정(즉, 실질적으로 직립 상태로 위치 설정)하는 단계, 시료를 장치의 상단에 도포하는 단계, 시료를 장치를 통해 이동하게 함으로써 상기 시료 내의 분석물을 포획 시약과 반응하게 하는 단계 및 검출 가능 신호를 발달시킴으로써 상기 분석물을 검출하는 단계를 포함한다.

본 명세서에서 사용된 것으로서 "분석 장치"라는 용어는 본 발명에 따른 중력 구동 검사 장치뿐만 아니라 검사 스트립, 딥스틱(dipstick), 진단 스트립, 관통 유동 장치, 측면 유동 장치 등을 포함한다. 검사 스트립, 딥스틱, 관통 유동 스틱 및 측면 측면 유동 스틱은 통상적인 형태이다. 따라서, 당업자는 상기 검사 스트립의 구성에 매우 익숙할 것이기 때문에, 본 명세서에서 상세하게 기술하지 않을 것 이다. 그러나, 각 검사 스트립, 딥스틱, 관통 유동 장치 및 측면 유동 장치는, 바람직하게는 서로 모세관 연결되는, (분석물 시료 내의 분석물의 존재에 대한 양성적 검사 결과를 표시하는) 분석물의 결합을 위한 검사 구역 및 (분석물의 정확한 작업을 표시하는) 트레이서의 결합을 위한 대조 구역을 구비할 것이다.

본 발명의 방법은, 시료 도포 구역이 상기 장치의 상단에 위치하게 하는, 실질적으로 직립 상태의 상기 분석 장치를 이용하는 것을 포함하여, 시료가 도포될 때, 이 시료는 장치의 상단에서 하단까지 이동한다. 놀랍게도, 클로깅과 점도 때문에 보통 이동이 어려운 시료에서조차 본 발명의 방법은, 시료가 장치의 하단에 도포되어 장치의 하단부터 장치의 상단까지 모세관 작용에 의해 이동하게 하는 종래의 방법에 비하여 상기 시료를 더 신속하고 더 쉽게 이동하게 한다는 점을 발견하였다.

또 다른 태양에서, 본 발명은, 용량을 표시하는 패키지 상의 또는 패키지와 결합된 선택적인 표지 및 설명서를 구비한 패키지 삽입부를 포함하는, 분석 장치의 패키징에 적합한 제작 또는 패키징 물품에 관한 것이다. 바람직하게는, 분석 장치는 본 발명에 따른 중력 구동 검사 장치, 검사 스트립, 딥스틱, 진단 스트립, 관통 유동 장치. 측면 유동 장치 등을 포함하는 군으로부터 선택된다. 바람직하게는, 각 검사 스트립의 검사 구역 및 대조 구역이 각 검사 스트립 상에서 동일한 위치에 있어서, 각각 나란한 방식으로 관찰될 수 있다. 본 발명에 따른 패키지는 신속한 접근, 단위 검사 장치 책임 및 검사 장치에 대한 양호한 물리적 보호를 제공한다.

도 5, 도 6 및 도 7은 중력 구동 검사에 적합한 패키지(30) 및/또는 면역크 로마토그래피 및 올리고크로마토그래피 분석 장치(34)의 상이한 실시예를 도시한다.

도 5a를 참조하면, 본 발명에 따른 패키지(30)는 하나 이상의 분석물 장치(34)를 수용하기 위한 홀더(31)로 구성된다. 홀더(31)는 적어도 부분적으로 커버 시트(32)로 밀봉될 수 있다. 선택적으로 홀더(31)의 일부는 벗겨낼 수 있는 제거 가능한 커버 시트(33)로 추가 밀봉되고, 상기 제거 가능한 커버(33)는 바람직하게는 커버 시트(32)의 오버래핑 부분이다. 도 5b는 본 발명의 실시예에 따른 패키지의 분해도를 도시한다. 본 발명에 따른 패키지(30)는 하나 이상의 스트립(34)을 수용하는 하나 이상의 롯지(311; lodge)를 포함하는 홀더(31)로 구성된다. 바람직하게는 상기 롯지(311)는 가열 형성된다. 각 롯지는 융기한 스페이서에 의해 홀더(31) 내에서 옆의 것과 분리된다. 통상적으로 롯지(311)는 직사각형 형태이고, 바람직하게는 분석 장치(34)의 폭보다 다소 좁은 폭을 갖는다. 일 실시예에서, 융기한 스페이서는 각 롯지를 서로 분리할 수 있도록 그 길이를 따라 약화될 수 있다(예컨대, 미리 잘릴 수 있다). 따라서, 커버 시트 및 홀더 상에서 밀봉된 제거 가능한 커버 시트는, 하나의 장치를 이루는 단위화된 패키지의 분리를 위해, 대응하는 미리 잘린 라인이 마련될 수도 있다.

바람직하게는, 상기 홀더(31)는 단일 금속층, 다중 금속층, 단일 플라스틱층, 다중 플라스틱층, 및 금속과 플라스틱 혼합층으로 이루어진 군으로부터 선택된 불투수성 고체 재료로 제조되고, 커버 시트(32 및/또는 33)는 단일 금속층, 다중 금속층, 금속과 플라스틱 혼합층, 금속과 페이퍼 혼합층 및 금속, 플라스틱과 페이 퍼의 혼합층으로 이루어진 군으로부터 선택된 시트이다. 바람직하게는, 상기 홀더(31)는 플라스틱 재료로 제조된다.

도 6을 참조하면, 패키지(30)는 하나 이상의 분석 장치(34)를 하우징하기 위해 하나 이상의 롯지(311)를 포함하는 홀더(31)로 이루어지고, 상기 롯지의 일단은 시료 도포 구역을 구비한 분석 장치(34)의 단부와 직접 연결될 수 있는 시료 도포 영역(312)을 포함하여, 시료는 시료 도포 영역(312)을 통해 상기 분석 장치(34)에 도포될 수 있다.

홀더는, 커버 시트(32) 및 선택적으로 상기 제1 커버 시트(32)를 부분 오버래핑하는 제거 가능한 커버 시트(33)로 부분적으로 밀봉된다. 도 7b는 본 발명의 실시예에 따른 패키지(30)의 배면도를 도시하고, 홀더(31)에는 분석 장치(34)의 적어도 일부에 걸쳐 병치된 관찰 창(35)이 선택적으로 마련되어 적어도 상기 분석 장치(34) 내에 포함된 검출 구역(4)이 홀더(31)의 외부와 시각적으로 연결된다. 대안적으로, 분석 장치(34)의 검출 구역 위에 덮인 홀더(31)의 부분은 관찰될 각 구역 내에 도시된 결과를 시각적으로 관찰가능하게 하도록 투명하다. 대안적으로, 커버 시트(32)는 관찰될 각 구역 내에 도시된 결과를 시각적으로 관찰가능하게 하도록 투명하다.

분석 장치(34)는 각 롯지의 바닥에 접착함으로써 롯지(311) 내에 고정될 수 있다. 그러나, 홀더(31) 위에 커버 시트(32)를 배치하는 것은 롯지(311) 내에 분석 장치(34)를 유지하는 것으로 충분하다. 이 때문에, 커버 시트(32) 및/또는 제거 가능한 커버 시트(33)는, 통상적으로 시료 검출 구역을 따라 검사 결과를 관찰하기 위해 형성된 적어도 하나의 투명 창을 갖는 불투명한 테이프로 구성될 수 있다. 홀더(31) 위에 커버 시트(32)를 고정하기 위해서뿐만 아니라 분석 장치(34)를 롯지(311) 내에 고정하기 위해서, 커버 시트(32)는 커버(32)와 홀더(31) 레일의 상부 에지 사이에 접착성 부착을 형성하기 위해서 제 위치에서 압박된다. 통상적으로, 커버(32) 및/또는 제거 가능한 커버 시트(33)에는 투명창이 마련되고, 이 투명창을 통해 분석 장치(34) 상의 표지가 관찰될 수 있다. 표지(미도시)는, 각 분석 장치로 검출할 수 있는 분석물의 정체성과 같은, 분석을 실행하는데 있어서의 이용 정보와 함께 찍힐 수 있다.

특히, 본 발명에 따른 패키지는 본 발명에 따른 검출 방법을 실시하는데 적합하고, 시료 도포 구역 상에 시료를 도포한 후의 분석 장치는, 시료 도포 구역이 장치의 상단에 있도록 수직으로 위치 설정되고, 시료는 중력에 의해 장치를 통해 운반되게 된다. 예컨대, 분석 장치를 수직으로 위치 설정하기 위해 패키지가 수직으로 위치 설정될 수 있다. 그 때문에, 패키지는 상기 패키지를 실질적으로 직립 상태로 유지하기 위해 추가적인 지지 수단을 포함할 수 있다.

이용시에, 하나 이상의 분석 장치(34)를 포함하는 패키지(30)는, 바람직하게는 상기 패키지(30)의 상단에 제거 가능한 커버 시트(33)가 있는 직립 상태로 놓인다. 제거 가능한 커버 시트(33)는 각각 시료 도포 영역(312) 및 장치(34)를 포함하는 하나 이상의 롯지(311)를 드러내기 위해 제거될 수 있다. 검출될 분석물 또는 그 유사물을 포함하는 액체 시료는, 장치(34)의 상단에 놓이고, 분석물의 결합을 위한 검사 구역 및 트레이서의 결합을 위한 대조 구역을 통해 이동하며 검출 가능 한 신호를 생성함으로써 상기 분석물을 검출한다.

또한, 본 발명은 어떠한 방식으로든 한정되는 것으로 의도되지 않는 이하의 실시예에 의해 구체화된다.

실시예

실시예 1: 로타바이러스 및 장 아데노바이러스 40/41(F군, 40 & 41계)의 검출

폴리스티렌 미소구체의 제조:

폴리스티렌 미소구체(Estapor)는 특정 세척 완충제(Coris BioConcept)로 세척된다. 그 후에, 미소구체는 1 mL의 부피를 회수하기 위해 5 내지 10분 동안 13,000 RPM에서 원심분리된다. 그 후에, 펠릿이 활성 완충제 내에서 다시 부유되고 한 시간 동안 혼합된다. 그 후에, 최종 원심분리 후에 결합 완충제 내에서 최종적으로 다시 부유되기 전에, 부유물이 세척 완충제 내에서 두 번 세척된다.

비활성된 항체와 아미노 활성된 폴리스티렌 미소구체의 결합:

폴리스티렌 미소구체에 시약을 결합하는 것은, 실질적으로 제조업자에 의해 제공된 프로토콜에 따라 실시되었다.

제1 결합은, 푸른색 NH₂-폴리스티렌 미소구체와 함께 로타바이러스 군 A 항원에 대한 마우스 단일클론 항체로 실시되었다.

제2 결합은, 장 아데노바이러스(40 및 41)에 대한 마우스 단일클론 항체와 함께 비활성 붉은색 폴리스티렌 미소구체로 실시되었다.

제3 결합은, 나이브 치킨(naive chicken) IgY와 함께 비활성 초록색 폴리스티렌 미소구체로 실시되었다.

면역중력 구동 검사 장치:

본 실시예의 시트형 면역중력 구동 검사 장치(1)는, 플라스틱 받침 고체 지지부(MDI)(18)로 구성되고, 이 지지부는, 그 위에, 세 개의 콘쥬게이트를 함유한 Standard 14(Whatman)으로 이루어진 콘쥬게이트 패드(13)를 덮는 Fusion 5(Whatman)으로 이루어진 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14), GFBR-1(MDI)로 이루어진 중간 구역(6), 니트로셀룰로오스(MDI)로 제조된 검출 구역(4) 및 셀룰로오스(MDI)로 제조된 흡수 영역(5)을 갖는다.

니트로셀룰로오스 막은 세 개의 시약으로 민감하게 된다. 마주친 제1 시약은 아데노바이러스에 대한 단일클론 항체이고 검출 구역(4)의 활성 막(16)의 상부에 집중된다. 이는 "Ad40/41 검사 라인"으로 정의된다. 시료와 마주치는 제2 시약은 로타바이러스에 대한 기니피그(guinea pig) 다클론 항체이고, 시료 검출 구역 내의 활성 막의 중간부에 증착된다. 이는 "로타 검사 라인"으로 정의된다. 제3 시약은 안티 치킨(anti-chicken) IgY 다클론 항체이고 검출 구역(4)의 활성 막(16)의 하부에 놓인다. 이것은 이동 대조 라인으로 정의된다. 세 개의 콘쥬게이트, 즉 푸른색 NH₂-폴리스티렌 미소구체에 접합된 로타바이러스에 대한 단일클론 항체, 붉은색 폴리스티렌 미소구체에 접합된 장 아데노바이러스(40 및 41)에 대한 단일클론 항체 및 초록색 폴리스티렌 미소구체에 접합된 치킨 IgY 다클론 항체가 이용된다. 이들 세 콘쥬게이트의 혼합물은 장치의 시료 도포 구역의 제1 반응 구역(3)(Whatman의 Standard 14)에 증착된다. 이 막은 제1 흡수막(12)(Whatman의 Fusion 5)에 의해 완전하게 덮인다.

중간 구역은, 활성 막(16)을 1 mm 까지 오버랩하는 GFBR-1(MDI) 막으로 이루어진다.

스티커는, 처음의 세 개의 구역, 즉 시료 도포 구역, 액체가 중력에 의해 자유롭게 이동하게 될 공간으로 인도하는 비모세관 구역 및 중간 구역 모두를 덮을 수 있다. 스티커는 활성 구역(16)에 2 mm 까지 부착하게 된다.

검사의 실시:

본 발명의 면역중력 구동 검사 장치를 이용한 검사는, 시료 도포 구역이 상부에 있도록, 장치를 검사 튜브 내에 수직으로 넣음으로써 실시된다.

로타바이러스 또는 장 아데노바이러스(40 또는 41)를 함유한 시료가 시료 완충제 내에서 희석된다. 이 용액의 100 내지 250 ㎕가 피펫으로 옮겨지고 장치의 상단에서 시료 도포 구역에 증착된다.

장 아데노바이러스(40 또는 41)의 존재는 시료 검출 구역의 상부 영역에서 붉은색 라인(Ad 40/41 검사 라인)의 출현에 의해 검출될 것이고, 로타바이러스의 존재는 검출 구역의 중간 영역에서 푸른색 라인(로타 검사 라인)의 출현에 의해 검출될 것이다. 치킨 초록색 폴리스티렌 콘쥬게이트의 이동은 초록색 이동 대조 라인을 발생시키는 코팅된 안티 치킨 IgY와 반응할 것이다. 검사는 10분 동안 실시된다.

모든 경우에서, 면역중력 구동 검사 장치(1)의 상단에서 하단까지 시료가 이동했음을 나타내는 이동 대조 라인이 출현한다.

실시예 2: 레지오넬라균 소변 항원의 검출

콜로이드성 금 입자의 제조:

약 40 nm의 콜로이드성 금 입자를 시중의 공급처(Diagram)로부터 구매하였다.

항체를 콜로이드성 금 입자에 결합:

항체를 콜로이드성 금 입자에 결합하는 것은 당해 기술 분야에 알려져 있다. 본 실시예에서, 레지오넬라균 소변 항원에 대한 정제된 래빗 항체가 이용되었다. 정제된 다혈청은, 소망의 pH를 얻기 위해서 탄산칼륨 용액으로 완충된 콜로이드성 금 입자와 반응하였다. 상기 pH는 미리 결정되었으며 각 면역학적 시약에 대하여 상이할 수 있다. 결합 공정에서 이용될 정제된 다혈청의 희석물은, 예비 실험에서 정해졌다.

예비 실험에서, 증가한 다혈청의 희석물은 완충된 콜로이드성 금 입자와 3분 동안 반응하였고 약 1%의 최종 농도에 도달하기 위해서 염화나트륨이 첨가되었다. 630 nm의 흡광도가 기록되었다. 다혈청의 저희석물에서 얻어진 흡광도와 동일하거나 유사한 흡광도를 갖는 다혈청의 최대 희석물이, 시약을 콜로이드성 금 입자와 결합하기 위한 참조 희석물로서 선택되었다.

본래 결합을 위해서, 선택된 희석물의 다혈청 및 완충된 콜로이드성 금 입자가 3분 동안 반응하였다. 이어서, 이러한 소위 콘쥬게이트는, 임의의 접합되지 않 은 항체를 제거하기 위해 세척 완충제 내에서의 원심분리 및 재부유에 의해 여러번 포화되고 세척되었으며, 최종적으로 보존 완충제 내에서 재부유되었다.

정제된 치킨 IgY 다클론 항체로 제조된 제2 콘쥬게이트가 대조 콘쥬게이트로서 이용되었고 본 명세서에서 상기한 바와 같은 동일한 프로토콜에 따라 결합되었다.

면역중력 구동 검사 장치:

본 실시예의 시트형 면역중력 구동 검사 장치(1)는, 도포 구역, 비모세관 구역, 중간 구역, 검출 구역 및 흡수 구역을 구비하는 플라스틱 받침 고체 지지부(MDI)(18)로 구성된다.

시료 도포 구역(2)은 AccuflowG(Whatman-Schleicher & Schuell)로 구성되고, 중간 구역(6)은 GFBR-1(MDI)로 구성되며, 검출 구역(4)은 바람직하게는, 한정되는 것은 아니지만, 10 ㎛의 다공성을 갖는 니트로셀룰로오스(MDI)로 제조되고, 흡수 영역(5)은 셀룰로오스(MDI)로 제조된다.

니트로셀룰로오스 막은 두 개의 시약으로 민감하게 된다. 제1 시약은 레지오넬라균 소변 항원에 대한 정제된 래빗 다혈청 시약이고, 검출 구역(4) 내의 활성 막(16)의 상부에 증착된다. 이는 "Lp 검사 라인"으로 정의된다. 제2 시약은 정제된 래빗 다혈청 안티 치킨 IgY이고 콜로이드성 금 입자와 결합된 치킨 IgY 다클론 항체와 반응할 것이다. 제2 시약은 검출 구역(4)의 활성 막(16)의 하부 영역에 증착된다. 이는 "이동 대조 라인"으로서 정의된다. 특정 레지오넬라균 소변 항원 콘쥬게이트와 치킨 IgY 대조 콘쥬게이트 모두는 AccuflowG(Whatman-Schleicher & Schuell), 즉 시료 도포 구역(2) 내에 주입된다. 바람직한 실시예에서, 희석 완충제가 AccuFlow G 막의 상단에 분무되고, 검사에는 어떠한 액체 완충제도 필요하지 않게 된다.

검사의 실시:

본 검사는, 본 발명의 면역중력 구동 검사 장치(1)를 이용하여 레지오넬라균 소변 항원을 검출하는 것을 목적으로 한다. 검사는 제1 실시예에서 설명한 것과 유사하게 실시된다.

레지오넬라균 소변 항원을 함유한 소변 시편은 3V/V의 비율로 특정 버퍼 내에서 희석된다. 시료 도포 구역이 상부에 있도록, 본 발명의 면역중력 구동 검사 장치(1)를 검사 튜브 내에 수직으로 넣음으로써 실시된다. 특정 희석 완충제가 AccuFlow G 시료 막 위에 이미 주입되고, 소변 시료를 도포 구역 내에 직접 넣는다.

이 용액의 100 내지 250 ㎕가 피펫으로 옮겨지고 장치의 상단에서 시료 도포 구역에 증착된다.

본 검사에는 다음의 특성이 나타났다. 즉, "Lp 검사 라인"이 레지오넬라균 소변 항원을 함유한 시료에서 출현하고, 시료의 희석도가 증가함에 따라 강도가 감소한다.

유사하게, "대조 라인"이 모든 경우에 출현하는데, 이는 시료가 소변 항원에 대하여 음성적이었을 때에도 동일한 강도로 출현한다. 검사는 15분 동안 실시된다.

Claims

고체 지지부를 포함하며, 이 고체 지지부 상에 나란히 배치된 다수의 구역이 마련되며, 이에 의해 시료가 시료 수용 구역으로부터 시료 검출 구역을 향해 이동할 수 있으며, 존재하는 경우의 분석물이 검출되고, 상기 양 구역들은 이 구역들을 통해 시료의 모세관 흐름을 허여하는 재료를 포함하고 있는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치로서,

모세관 재료가 없는 시료 운반 중간 구역이 상기 구역들 사이에 마련되어, 상기 지지부 상에서 중력에 의해 시료를 이동시키게 하는 것을 특징으로 하는 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제1항에 있어서, 상기 시료 수용 구역은 시료 도포 구역(2)을 포함하고,

상기 시료 검출 구역은 검출 구역(4) 및 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 중간 구역(6)을 포함하며, 상기 검출 구역(4)은 선택적으로 대조 소구역을 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항에 있어서, 시료 검출 구역은, 서로 모세관을 통한 흐름 연통 상태로, 검출 구역(4) 옆에 배치된 흡수 구역 또는 영역(5)을 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치로서,

고체 지지부(18)의 하나 이상의 측면에서, 장치의 일단으로부터 장치의 타단까지 배치된,

(a) 시료 도포 구역(2)을 포함하는 제1 모세관 구역,

(b) 검출 구역(4), 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 중간 구역(6), 및 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 흡수 구역 또는 영역(5)을 포함하고, 상기 검출 구역(4)은 선택적으로 대조 소구역을 포함하는 것인 제2 모세관 구역; 및

(c) 상기 제2 모세관 구역의 검출 구역(4) 또는 선택적인 중간 구역(6)으로부터 제1 모세관 구역의 시료 도포 영역(2)을 분리하는 비모세관 구역(14)

을 포함하고, 상기 시료 도포 구역(2), 상기 비모세관 구역(14) 및 상기 검출 구역(4) 또는 상기 선택적인 중간 구역(6)은, 장치가 이용중일 때 시료가 중력에 의해서만 시료 도포 구역(2)부터 검출 구역(4) 또는 선택적인 중간 구역(6)까지 흐를 수 있도록 하는 방식으로 배치되는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 검출 구역(4)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물을 특정하게 인식하는 적어도 하나의 포획 시약을 포함하고, 상기 시료 도포 구역(2)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또한 간접적인 표지를 갖는 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게 이트를 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 시료 도포 구역(2)은 적어도 하나의 대조 콘쥬게이트를 더 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 검출 구역(4)은, 특히 도포 구역(2)의 대조 콘쥬게이트를 특정하게 인식하는 적어도 하나의 대조 포획 시약(7')을 이용한 적어도 하나의 대조 검사 라인을 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 분석물 특정 콘쥬게이트 및/또는 대조 콘쥬게이트는, 콘쥬게이트 금속 콜로이드, 콘쥬게이트 폴리스티렌 미소구체, 특정한 색을 갖는 탄소 나노튜브 및 마이크로 입자 또는 나노 입자, 및 형광 마이크로 입자 또는 나노 입자를 포함하는 군으로부터 선택된 표지를 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 검출 구역(4)은, 도포 구역에 배치되거나 검사될 시료 내에 존재하는 다른 시약과 상호 작용하는 시약으로 코 팅될 수 있는, 니트로셀룰로오스 또는 기타 매트릭스로 제조된 활성막(16)을 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중간 구역(6)은 흡수막(15)을 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 스티커(20)가 시료 도포 구역(2), 비모세관 구역(14) 및 중간 구역(6)을 덮고, 검출 구역(4)에 부분적으로 오버랩되는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 장치는 중공형 케이스 또는 열간 성형 케이스 내에 마련되거나, 폴리머 내에 매립되는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제2항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포획 시약은 면역 시약, 올리고뉴클레오티드 또는 그 유사물인 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
제13항에 있어서, 포획 시약 및 콘쥬게이트 시약은, 올리고뉴클레오티드 또는 그 유사물, 또는 다클론 항체 또는 단일 클론 항체 또는 고변이 항체 단편, 또 는 IgG, IgA, IgE 및 IgM과 같은 혈청 화합물에 의해 인식되는 항원 또는 비오틴- 스트렙트아비딘과 같은 결합체의 특정 시약 중 하나를 포함하는 군으로부터 선택되는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 검사 장치.
시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법으로서,

시료와 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 검사 장치를 접촉시키는 단계, 중력에 의해 비모세관 구역을 통과하여 장치의 상단부터 장치의 하단까지 시료를 이동시키는 단계, 및 분석물을 검출하는 단계를 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.
제15항에 있어서, 장치의 시료 수용 구역을 시료와 접촉하는 단계, 시료를 모세관 현상에 의해 시료 수용 구역을 통과하여 비모세관 구역으로 이동하게 하는 단계, 중력에 의해 비모세관 구역을 통과하여 검출 구역으로 이동하게 하는 단계, 시료를 모세관 현상에 의해 검출 구역을 통과하여 이동시키는 단계 및 분석물을 검출하는 단계를 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.
제15항 또는 제16항에 있어서, 상기 검사 장치(1)는, 고체 지지부(18)의 하나 이상의 측면에서, 장치의 일단으로부터 장치의 타단까지 배치된,

- 시료 도포 구역(2)을 포함하는 제1 모세관 구역;

- 검출 구역(4), 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 중간 구역(6), 및 선택적으로 상기 검출 구역(4) 옆에 배치된 흡수 구역 또는 영역(5)을 포함하고, 상기 검출 구역(4)은 선택적으로 대조 소구역을 포함하는 것인 제2 모세관 구역; 및

- 검출 구역(4) 또는 선택적인 중간 구역(6)으로부터 시료 도포 영역(2)을 분리하는 비모세관 구역(14)

을 포함하고, 상기 검출 구역(4)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물을 특정하게 인식하는 적어도 하나의 포획 시약을 포함하며;

상기 시료 도포 구역(2)은 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물의 검출을 위한 직접적인 표지 또는 간접적인 표지를 갖는 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트를 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.
제17항에 있어서, 상기 검사 장치를 수직으로 위치 설정하는 단계, 시료를 장치의 상단에 도포하는 단계, 시료를 상기 시료 도포 구역(2)을 통해 이동시키고 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트를 수화시키는 단계, 상기 시료 내의 적어도 하나의 분석물을 적어도 하나의 분석물 특정 콘쥬게이트와 반응하게 함으로써 적어도 하나의 착물을 형성하게 하는 단계, 적어도 하나의 착물을 비모세관 구역에 도달하게 하여, 이 비모세관 구역을 중력에 의하여 통과시킴으로써, 선택적인 중간 구역(6)과 접촉하고 이를 통해 이동하게 하여 검출 구역(4)을 관통하며, 이에 의해 적어도 하나의 포획 시약과 반응시키는 단계, 및 검출 가능 신호를 발생시켜 상기 적어도 하나의 분석물을 검출하는 단계를 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.
제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 작은와포자층, 톡소포자층, 람블편모층, 대장균, 이질아메바, 클로스트리듐 디피실리균, 클로스트리듐 디피실리균 독소, RSV(호흡기 신시티아 바이러스), 인플루엔자 A 및 B 바이러스, 로타바이러스, 아데노바이러스형 40 & 41 또는 기타 아데노바이러스 군, 레지오넬라균 소변 항원, 인간 및 동물 근원의 코로나바이러스 및 인간 메타뉴모바이러스를 포함하는 (해로운) 미생물로부터 분석물 또는 유사물을 검출하기 위한 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.
제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포획 시약은, 올리고뉴클레오티드 또는 그 유사물, 다클론 항체 또는 단일 클론성 항체 또는 고변이 항체 단편, 또는 IgG, IgA, IgE 및 IgM과 같은 혈청 화합물에 의해 인식되는 항원 또는 비오틴 스트렙트아비딘과 같은 결합체의 특정 시약 중 하나를 포함하는 군으로부터 선택된 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.
시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법으로서,

분석 장치와 시료를 접촉시키는 단계, 시료를 중력에 의해 상기 장치의 상단부터 하단까지 이동시키는 단계, 및 적어도 하나의 분석물 또는 그 유사물을 검출하는 단계를 포함하고, 상기 분석 장치는 제1항 내지 제11항에 따른 검사 장치, 검사 스트립, 딥스틱, 진단 스트립, 관통 유동 장치 및 측면 유동 장치로부터 선택되는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.
제21항에 있어서, 검사 장치를 수직으로 위치 설정하는 단계, 시료를 장치의 상단에 도포하는 단계, 시료를 장치를 통해 이동시킴으로써 상기 시료 내의 분석물을 포획 시약과 반응하게 하는 단계 및 검출 가능한 신호를 발생시켜 상기 분석물을 검출하는 단계를 포함하는 것인 시료 내에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석물 검출 방법.