KR20070051854A

KR20070051854A - 칼슘 결핍증 예방 및/또는 치료용 제제

Info

Publication number: KR20070051854A
Application number: KR1020077003415A
Authority: KR
Inventors: 다다시 사토; 도모카즈 나카이; 츠토무 아리츠카; 데츠오 난부; 히로오 사도야; 에츠오 이무라
Original assignee: 니혼 텐사이 세이토 가부시키가이샤; 가부시키가이샤환케루
Priority date: 2004-08-13
Filing date: 2004-08-13
Publication date: 2007-05-18
Also published as: CN101027063B; WO2006016424A8; DK1776956T3; JPWO2006016424A1; JP4693777B2; CN101027063A; EP1776956B1; KR101203023B1; US8048866B2; EP1776956A4; US20090209484A1; WO2006016424A1; EP1776956A1

Abstract

본 발명은 인간 또는 동물에 대한 항칼슘결핍증, 항부종 및 이뇨 중 하나 이상의 작용을 가진 제제를 개발하고, 분만후 혈중 칼슘 농도 저하를 방지함으로써 모체의 건강을 유지하고 수유 및 급유를 원활히 하고자 한다. 2 개의 프룩토오스 분자가 서로 결합된 2 당류로 이루어진 디프룩토오스 무수물 (DFA) 이 투여된다. 특히, 분만후 혈중 칼슘 농도 저하를 방지하기 위해, DFA III 및/또는 DFA IV 를 출산 전 (젖소의 경우, 분만 예정일 전) 에 투여한다. 필요에 따라, 칼슘제 또는 비타민 D 와의 병용이 가능하다.

Description

칼슘 결핍증 예방 및/또는 치료용 제제{PREVENTIVE AND/OR THERAPEUTIC AGENT FOR CALCIPENIA}

본 발명은, 디프룩토오스 무수물 (DFA, 이하, DFA 라고 할 때도 있다) 을 유효 성분으로서 함유하는 혈중 또는 유(乳)중의 칼슘 결핍증의 예방 및/또는 치료용 제제에 관한 것이다.

더욱 상세하게는, 본 발명은, 디프룩토오스 무수물 I (이하, DFA I 라고 할 때도 있다), 디프룩토오스 무수물 II (이하, DFA II 라고 할 때도 있다), 디프룩토오스 무수물 III (이하, DFA III 라고 할 때도 있다), 디프룩토오스 무수물 IV (이하, DFA IV 라고 할 때도 있다) 및 디프룩토오스 무수물 V (이하, DFA V 라고 할 때도 있다) 로부터 선택된 1 가지 이상을 유효 성분으로서 함유하는 혈중 또는 유중의 칼슘 결핍증의 예방 및/또는 치료용 제제에 관한 것이다.

식습관이 개선되었다고는 해도, 특히, 일본인의 칼슘 섭취량은 영양 필요량을 밑돌아, 그 점의 개선이 요구되고 있다. 그러나, 일본인의 평균적인 식습관에서는, 충분한 양의 칼슘을 섭취하는 것은 실질적으로 곤란하다.

칼슘은, 막의 보전과 조절, 수축, 분비 또는 흥분 프로세스의 제어, 위장의 지지 등의 생리적 기능을 가져, 인체 필수 미네랄의 하나로서, 극히 중요하다는 것 은 공지되어 있다. 그리고, 특히 산후 (분만후) 의 임산부에게 있어서는, 혈중 칼슘농도가 저하되어 있어, 수유중의 임산부는 더욱 유중 칼슘농도 또는 산유량 의 추가적 저하의 경향이 관찰된다. 모유 중의 칼슘농도의 저하에 더하여, 모체 자체에도 저칼슘혈증 등이 생겨 모체의 건강에도 지장이 온다. 이들에 대처하기 위해, 칼슘제 또는 비타민 D 가 투여되지만, 충분히 만족할 결과는 제공되지 않았다.

젖소와 같은 포유류에 대해도, 칼슘에 관한 문제점은 상기한 인간의 경우와 같다. 포유동물인 젖소의 젖에 대한 칼슘의 공급원은 혈중 칼슘이며, 사료 중 또는 뼈와 같은 체조직 칼슘으로부터 제공된다. 포유동물의 전형인 젖소의 혈중 칼슘농도는 통상 9 내지 11 mg/dl 이다. 과잉으로 칼슘을 제공되면, 장관으로부터의 흡수가 감소하며, 분뇨 중에의 배출량이 증가한다. 결과적으로, 젖의 칼슘은 젖소의 품종이나 젖 성분의 영향을 받지만, 거의 일정하게 유지되고 있다.

젖소에서, 분만 전후의 주산기에 혈중 칼슘농도가 저하되어, 저칼슘혈증의 병태를 나타낸다. 저칼슘혈증에서는 혈중 칼슘농도가 7 mg/dl 미만이다. 5 mg/dl 미만이 되면, 기립 불능이 되어 심각한 경우 폐사한다. 이것은 수유열이라고도 지칭되며, 미국에서 젖소의 약 6% 에서 발병한다. 유방염 (대장균성) 이나, 제 4 위 변위, 태반 정체 및 케톤증 등의 대사성 질환이 발병하기 쉽다. 추가로, 임상적 병후 발생을 유도하지 않는 잠재성 저칼슘 혈증은 경산우의 66% 정도에서 발병하여, 분만 직후의 소가 식욕 부진이 되도록 하여, 케톤증, 태반 정체, 제 4 위 변위 및 유방염과 같은 질병의 발병이 쉽게 된다. 저칼슘 혈증이 장기 화되면, 젖 자체의 칼슘농도가 저하되는 경우가 있다.

젖소는, 비유개시에 의해 분만을 경계로서 칼슘의 균형이 극적으로 변화한다. 즉, 비유개시에 의해 초유 안에 대량의 칼슘이 분비되는 한편, 혈중 칼슘농도가 저하된다. 심하게 저하되는 경우, 젖소는 기립 불능에 걸리게 된다.

젖소의 저칼슘 혈증을 개선시키는 방법으로서 비타민 D 를 제공하거나 또는 수유열소에 대해서는 칼슘제의 정맥내 투여가 일반적으로 수행된다. 그러나, 혈중 칼슘농도의 회복 또는 유지가 곤란한 증례가 공지되어 있다. 또, 최근에는 유전적 개량에 의해 젖생산 능력이 상향되었다. 따라서, 분만후 비유량도 많다. 이들 현안은 한층 더 저칼슘 혈증의 소를 증가시켜, 기립 불능과 같은 심각한 상태를 유도하여, 부작용을 유발한다. 젖소에 있어서의 칼슘 결핍증을 극복할 것이 요망된다.

또, 저칼슘 혈증을 예방하는 사육 관리법으로서, 건유기 (1 비유기의 착유 중단 후, 다음의 분만일까지 착유를 행하지 않는 기간) 에 사료 안의 칼슘 및 인을 제한하는 것이 권장되고 있다. 그러나, 예를 들어 칼슘 함량이 1일 50 g 미만인 사료는 사실상 조달 불가능하다. 따라서, 당업자에게 있어서 상기 이 사육 방법을 실제의 낙농 업에 적용해 저칼슘 혈증을 예방할 수 없다.

더욱이, 이뇨 작용이 인간의 건강 유지 또는 질병의 완화에 중요하다는 것은 널리 공지되어 있다. 이 점은 또한 동물에 대해도 마찬가지이다. 예를 들어, 젖소와 같은 포유류 (반추동물) 에 있어서도, 건강 유지, 질병의 완화에 이뇨 효과는 매우 중요하다. 특히 분만 전후의 젖소에서는 유방 부종이 발생한다. 중증의 경우, 유두가 외상을 받기 쉽고, 유방염이 발병하는 경향이 있다. 또, 유방제방 인대가 약화되어, 유방의 하수에 의해 착유하기 어려워진다. 유방 부종의 치료에 대해서는, 혈액 순환 개선을 위해 운동이나 마사지와 같은 관리 방법의 개선, 이뇨제에 의한 치료, 외과 수술 등이 공지되어 있다. 그러나, 충분한 효과를 제공하지는 못한다.

한편, 프룩토오스 2 분자가 결합하여 이루어진 올리고당인 디프룩토오스 무수물 (DFA) 에는 디프룩토오스 무수물 I (DFA I), 디프룩토오스 무수물 II (DFA II), 디프룩토오스 무수물 III (DFA III), 디프룩토오스 무수물 IV (DFA IV) 및 디프룩토오스 무수물 V (DFA V) 이 공지되어 있고, 그의 구조식은 하기와 같다.

DFA III 및 DFA IV 에 대하여, 활성 성분으로서 DFA 를 함유하는 칼슘 흡수 촉진 조성물 및 활성 성분으로서 DFA IV 를 함유하는 칼슘 흡수 촉진 조성물이 이미 각각 개시되어 있다 (예를 들어, 특허문헌 1 및 특허문헌 2). 그러나, 상기 문헌들은 상기 조성물들이 포유류의 칼슘혈증 또는 유방염의 예방 또는 치료에 유효하다는 것을 기재하지 않았다. 특히, 4 개의 위를 가진 반추동물, 특히 젖소에 대한 DFA 의 생리학적 활성은 전적으로 비공지이다. 말할 필요도 없이, 위장에서 DFA 가 분해되지 않아 혈중 칼슘 또는 젖의 칼슘에 대한 칼슘혈증 및 유방 염의 예방 및/또는 치료 및 이뇨에 유효한지 여부가 전혀 나타나지 않는다.

더욱이, 분만 전 DFA 의 투여로써 분만후 칼슘혈증이 예방 및/또는 치료된다는 것이 전적으로 비공지이다. 따라서, 이는 인간 및 기타 포유류에 대한 신규한 지식이다.

특허문헌 1

일본 특허 제 3514955 호

특허문헌 2

JP-A-2000-204042

산후 (분만후) 의 모체에 있어서, 혈중 칼슘농도가 저하되어 건강을 위협한다. 수유시, 그의 영향력은 점점 증가하여, 모체 뿐만 아니라 신생아에게도 영향을 준다. 이는 특히 출산율 급감의 강한 경향으로 현재 사회에서 주목받고 있다.

칼슘 농도 감소로 인한 건강 상의 상기 부작용은 포유류에게 있어서 일반적인 것이다. 예를 들어, 젖소에서, 혈중 칼슘 농도는 분만후 이미 급격히 감소한다. 더 많이 감소될수록, 생활력 및 식욕이 더 많이 떨어지며, 회복이 지연되는 경향이 있다. 이러한 상태가 더 진행되는 경우, 기립불능이 발생한다. 수유시, 상기 경향은 더해져, 젖소의 우유 생산이 감소하여, 젖소로서의 수명이 단축된다.

이뇨 활성은 건강 유지 및 질병 완화에 중요하며, 부종 감소 (예방) 활성이 중요하다. 상기 활성을 가진 탁월한 시스템의 개발이 또한 동시에 필요하다. 상기 문제점은 인간 뿐만 아니라 포유류 및 기타 동물에게도 적용된다.

상기 기술적 상황 하에, 본 발명은 산후, 특히 산후 (분만후) 모체의 혈중 칼슘 농도의 저하를 방지하며, 인간 및 기타 동물에서 부종 방지 및 이뇨를 유효하게 수행하도록 한다.

문제를 해결하기 위한 수단

본 발명은 상기 목적 달성을 위한 것이다. 특별한 목적의 관점에서, 본 발명은 실제의 인간에 대한 임상시험 대신에 행해지는 동물실험 자체를 다시 고려해 볼 필요가 있다는 관점으로부터 확립되었다. 본 발명자들은 동물실험에 사용되는 동물에 주목했다. 통상, 실험동물로서는, 마우스나 래트 등의 포유류가 사용된다. 그러나, 이들은 인간에 비해 크기에 있어 더 작다. 본 발명의 목적이 출산후 모체의 혈중 칼슘농도의 저하를 억제하는 것이며, 본 발명이 모유와도 깊이 관련된다. 따라서, 본 발명자들은 젖소를 실험 동물로서 이용하는 것으로 결정했다.

젖소는 마우스 또는 래트에 비해 매우 큰 포유류이고, 우유에 관한 메카니즘도 인간의 모유와 공통되고 있는 부분이 많다. 따라서, 젖소에서 수득된 데이터는 마우스 또는 래트로 수득된 데이터보다 훨씬 인간에 가깝고, 신뢰도도 높다고 할 수 있다. 그러나, 젖소는 마우스 또는 래트와 달리, 관리가 어렵고 시험 기간이 매우 길고, 비용이 크다는 큰 문제점을 갖고 있다. 그러나, 본 발명은 이러한 점을 극복하고 젖소를 이용한 동물실험에 성공했으며, 이 점이 본 발명의 큰 특징의 하나이다. 물론, 인간이 아닌 젖소의 경우, 수득한 데이터는 그대로 이용 가능하며, 다른 포유류의 경우에 젖소의 데이터를 적절하게 이용할 수 있다.

본 발명의 발명자들은 젖소를 이용해 혈중 칼슘 농도 저하를 억제하는 각종 물질을 스크리닝 한 결과, DFA 에 주목했다. 본 발명자들은 각 방면으로부터 부단한 연구를 수행하여, 통상의 포유동물과는 달리 4 개의 위장을 가진 독특한 소화계를 갖는 소에 있어서, 복잡하고 독특한 위장의 구성에도 불구하고, DFA 가 분해되지 않는 것을 최초로 발견했다. 이들은 상기 신규한 유용한 식견을 바탕으로 더욱 연구를 진행시켰다. 그 결과, DFA 는 칼슘 흡수를 촉진하고, 혈중 칼슘 양을 상승시켜 우유의 칼슘농도를 상승시킴과 동시에, 저칼슘 혈증을 개선하는 매우 유용한 작용을 갖는다는 것을 발견했다. 또한, 이들 작용이 확실하게 행해져 재현성이 있다는 것도 확인했다.

일반적으로, 젖소는, 특히 분만후 혈중 칼슘농도가 감소해, 그 결과, 각종 질병에 걸리기 쉬워져, 생산성이 저하되는 위험성이 높다. 분만의 횟수가 늘면, 그만큼 칼슘 양도 감소하므로, 우유 생산은 더욱더 감소한다. 따라서, 소, 특히 젖소 특유의 문제점의 해결이 희구되고 있었다. 본 발명은 소에 독특한 상기 문제점을 성공적으로 해결했다. 따라서, 본 발명에 따른 DFA 의 소, 특히 분만 전후의 주산기의 젖소에 대한 투여는 극히 유효하다.

본 발명에서 DFA 의 가장 유효한 투여 시기에 대해도 검토가 이루어졌다는 점은 더욱 주목할 만하다. 구체적으로는, 혈중 칼슘농도를 유지 내지 상승시키는 것이 필요한 경우, 그 시기에 DFA 를 투여하는 것이 일반적이다. 이러한 기술 상식에 따라, 본 발명의 목적의 하나인 분만후의 혈중 칼슘농도의 저하 억제를 위해서, 분만후의 젖소에 DFA III 를 제공한 결과, 혈중 칼슘농도의 저하 억제에 유효하다는 것을 발견했다. 그러나, 본 발명자들은, 이에 만족하지 않고, 더욱 유효한 시스템을 개발할 것을 결정했다. 집중적인 검토 결과, 발상을 역전함으로써 목적하는 더욱 뛰어난 신규 시스템의 개발에 성공했다.

즉, 본 발명자들은, 상기한 것처럼, 각 방면으로부터 예의검토한 결과, DFA III 의 제공 방법 내지 제공 시기가 중요하다는 관점을 떠나, 연구를 실시했다. 그러나, 더욱 유효한 시스템의 구축에는 이르지 않았다. 본 발명자들은, 여기서 발상의 전환을 통감했다. 분만후의 칼슘농도의 저하 억제에 관련되는 시스템을 기술 상식에 따라 분만후에 실시하는 것이 아니라, 발상을 전환하기보다는 발상을 역전해, 전혀 예측되거나 또는 기대되지 않는 분만 전에, 분만후의 칼슘농도의 저하 억제를 위한 시스템을 실시해 보았다.

결과적으로, DFA III 를 "분만 전" 의 건유기에 제공함으로써 "분만후" 에 제공하는 경우보다 혈중 칼슘농도가 보다 증가한다는, 기술 상식 및 기술 수준을 크게 초월한 신규한 식견을 얻었다. 연구를 더 계속한 결과, 다음과 같은 새로운 사실을 처음으로 발견했다.

(1) 건유기에 DFA III 를 제공하면, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 그것을 제공하지 않는 젖소보다 증가한다.

(2) 건유기에 DFA III 를 제공하면, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 연령에 의한 칼슘 농도의 저하의 영향을 받지 않는다.

(3) 건유기에 DFA III 를 제공하지 않는 경우, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 산차가 나아감에 따라 저하되어, 1 산차 마다의 저하량은 0.6 mg/dl 정도로 예상되었다.

(4) 건유기에 DFA III 를 제공하면, 노화로 인해 정상치로 늦게 돌아오는 경향이 있는, 그것을 제공하지 않은 젖소와는 달리 혈중 칼슘농도가 정상치로 신속하게 돌아온다.

(5) DFA III 공급에 의한 혈중 칼슘농도 증가 효과는 분만 직후보다 건유기에 그 효과가 더 크다.

본 발명은, 상기한 유용한 발견사실에 기초하여 추가 연구의 결과로서 완성되었다. 기본적인 기술 사상의 하나는 출산전 (분만전) 에 DFA III 및/또는 DFA IV를 투여함으로써, 출산후 (분만후) 의 혈중 칼슘농도의 저하를 억제한다는 것이다. 더욱이, 본 발명은, DFA III 및/또는 DFA IV 를 투여할 뿐만 아니라, 각 시기에 있어서의 유중 칼슘농도의 저하를 억제하는 것이, 출산전을 포함한 각 시기에 있어서의 혈중 칼슘농도의 저하를 억제하는 것을 광범위하게 포함하는 칼슘 결핍증의 예방 및/또는 치료에 유효하다는 것을 최초로 발견했다. 추가로, DFA III 및 DFA IV 는 뛰어난 이뇨 작용을 가져, 유방 부종 등의 부종의 예방 및/또는 치료에도 유효하다는 유용한 신규한 사실을 예상치않게 수득했다.

더욱이, 이들의 유용한 작용은 칼슘 및/또는 비타민 D 에 의해 증강된다는 것도 새로이 발견했다.

본 발명은, 이들의 유용한 신규한 발견을 기초로 하여 된 것으로서, DFA III 및 DFA IV 에 의해 제공되는 항칼슘결핍증 작용, 이뇨 작용, 항부종 작용을 최초로 발견했다. 게다가, 본 발명은 실험동물로서 마우스나 래트가 아니고, 더욱 인간에 가까운 소, 그것도 젖소로 이들 작용을 확인한 점을 특징으로 한다.

물론, 본 발명에 있어서 소를 대상으로 하는 경우는 그 데이터가 그대로 사용할 수 있고, 다른 동물을 대상으로 하는 경우도 소의 경우와 같게 해 이들의 신규 생리작용을 확인할 수 있다.

도면의 간단한 설명

도 1 은 루멘 배양에 의한 DFA III 및 DFA IV 함량의 변화를 나타낸다. 그러나, 그 변화에 있어서, 두 배양액 사이의 차이는 발견되지 않았다. 따라서, 두 배양액 함량의 평균치를 사용했다.

도 2 는 동일한 젖소에 건유시 DFA III 제공의 분만 직후의 혈중 칼슘농도에 대해 미치는 영향을 나타낸다. 분만 전, DFA III 는 전산우 (전회 출산한 젖소) 전부에게 전혀 제공되지 않았다. DFA III 는 현산우 (금번 출산한 소) 에게 분만 20 일 전부터 (매일 50 g 씩) 제공했다. 도 2 의 우단의 수치는 젖소의 개체수 및 하이픈으로 이어진 이번 출산 차수 (출산 횟수를 표시) 를 나타낸다.

도 3 은 건유시의 DFA III 제공이 분만 직후의 혈중 칼슘농도에 미치는 영향 (산차에 따른 영향) 을 나타낸다.

도 4 는 분만후의 혈중 칼슘농도의 변화를 나타낸다. 또한, 분만후 채혈 시간은 분만 직후의 채혈 시간을 기점으로 한 경과시간이다. 범례안의 "있음·금산차" 는 건유시에 DFA III 를 제공한, 이번에 출산한 소의 평균값 (8 마리) 이다. "있음·전산차" 는 전산차에서 건유시 DFA III 를 제공하지 않은 "있음·금산차" 젖소의 전산차 데이터이다. "없음·금산차" 는 건유시에 DFA III 를 제공하지 않고, 이번에 출산한 소의 평균치 (7 마리) 이다. "없음·전산차" 는 "없음·금산차" 젖소의 전산차의 데이터로서, 건유기에 DFA III 를 제공하지 않은 젖소의 데이터이다. "없음·전체 평균" 은 건유기에 DFA III 를 제공하지 않은 모든 데이터 평균치(38 마리)를 나타낸다.

이하, 본 발명은 하기에 상세하게 기재한다.

본 발명은, 하기와 같은 것이다.

1. 디프룩토오스 무수물 (DFA) 을 유효 성분으로 포함하는 인간 또는 동물용의 칼슘 결핍증, 부종, 뇨량 감소 중 하나 이상에 대한 예방 및/또는 치료용 제제.

2. 상기 1. 항에 있어서, 디프룩토오스 무수물 (DFA) 이, 디프룩토오스 무수물 I (DFA I), 디프룩토오스 무수물 II (DFA II), 디프룩토오스 무수물 III (DFA III), 디프룩토오스 무수물 IV (DFA IV), 디프룩토오스 무수물 V (DFA V) 로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 인간 또는 동물용의 칼슘 결핍증, 부종, 뇨량 감소 중 하나 이상에 대한 예방 및/또는 치료용 제제.

3. 디프룩토오스 무수물 III (DFA III) 및/또는 디프룩토오스 무수물 IV (DFA IV) 를 유효 성분으로서 포함하는 인간 또는 동물용의 칼슘 결핍증, 부종, 뇨량 감소 중 하나 이상에 대한 예방 및/또는 치료용 제제.

4. 상기 1. 항 내지 3. 항 중 어느 하나에 있어서, 추가로 칼슘 및/또는 비타민 D 를 병용하는 제제.

5. 상기 1. 항 내지 4. 항 중 어느 하나에 있어서, 동물이, 반순동물, 그 외의 포유동물, 애완동물 및 조류로부터 선택되는 적어도 하나인 제제.

6. 상기 1. 항 내지 5. 항 중 어느 하나에 있어서, 칼슘 결핍증이 혈중 및/또는 유중 칼슘농도의 저감인 제제.

7. 상기 1. 항 내지 6. 항 중 어느 하나에 있어서, 동물이 분만전 또는 분만후의 젖소인 제제.

8. DFA III 및/또는 DFA IV 를 유효 성분으로서 함유하는 분만전의 인간 또는 동물 투여용 저칼슘 혈증의 예방 및/또는 치료용 제제.

9. 상기 1. 항 내지 8. 항 중 어느 하나에 기재된 제제를 경구적 및/또는 비경구적으로 투여하는 것을 포함하는, 칼슘결핍증, 부종 및 뇨량 감소 중 하나 이상을 예방 및/또는 치료하는 방법.

10. 상기 9. 항에 있어서, 분만전 및/또는 분만후에 투여를 실시하는 방법.

1l. 상기 9. 항 또는 10. 항에 있어서, 분만 전에 경구투여함으로써 분만후에 혈중 칼슘농도의 저감을 억제하는 방법.

12. DFA III 및/또는 DFA IV 를 분만전에 인간 또는 동물에 투여하는 것을 포함하는 분만후의 혈중 칼슘농도의 저감을 억제하는 방법.

13. 상기 12. 항에 있어서, 칼슘 및/또는 비타민이 추가로 병용되는 방법.

14. 상기 12. 항 또는 13. 항에 있어서, 분만 예정일의 2 주 전, 바람직하게는 3 주 전부터 투여를 개시하는 방법.

15. DFA III 및/또는 DFA IV 를 건유기의 젖소에 투여하는 것을 포함하는 분만후의 혈중 칼슘농도의 저감를 억제하는 방법.

16. 상기 15. 항에 있어서, 젖소 1 마리에 대해, DFA III 또는 DFA IV 를 1 내지 200 g, 바람직하게는 5 내지 100 g, 더욱 바람직하게는 8 내지 80 g, 특히 바람직하게는 10 내지 70 g 의 1일 투여량으로 경구투여하는 것을 특징으로 하는 방법.

17. DFA III 및/또는 DFA IV 를 함유하며, 항칼슘결핍증, 항부종 및 이뇨 활성 중 하나 이상의 작용을 갖는, 칼슘 결핍증 또는 부종 개선 또는 이뇨에 사용되는 것으로 표시된 식음료 또는 사료.

18. DFA III 및/또는 DFA IV 를 함유하며, 분만후의 혈중 칼슘농도의 저감을 억제하는 작용을 갖는, 분만후의 혈중 칼슘농도 저감 억제를 위해서 분만전에 사용되는 것으로 표시된 식음료 또는 사료.

19. 상기 18. 항에 있어서, 인간 또는 동물용인 식음료 또는 사료.

20. 상기 19. 항에 있어서, 동물이 소, 염소, 양, 물소, 낙타, 말, 돼지 및 애완동물로부터 선택되는 하나 이상인 사료.

21. 상기 20. 항에 있어서, 소가 젖소인 사료.

본 발명에 있어서, 유효 성분으로서 DFA (DFA I, DFA II, DFA III, DFA IV 및/또는 DFA V) 를, 특히 DFA III 및/또는 IV 를 사용한다. 필요에 따라 추가로 칼슘 및/또는 비타민 D 도 병용한다. 본 발명에서 유효 성분으로서 사용하는 DFA III (디프룩토오스 무수물 III) 는, 프룩토오스 2 분자가 1,2' 및 2,3' (디-D-프룩토퓨라노오스-1,2: 2,3' 디안하이드라이드) 에 결합되어 있는 2 당류이다. DFA III 는 최근 공업적 생산이 행해지게 되었다. 또, 유효 성분으로서 이용하는 DFA IV (디프룩토오스 무수물-IV) 는, 프룩토오스 2 분자가 2,6':6,2' (디-D-프룩토퓨라노오스-2,6: 6,2' 디안하이드라이드) 에 결합되어 있는 2 당류이다.

유효 성분으로서는 DFA I, DFA II, DFA III, DFA IV 및/또는 DFA V 의 정제품, 조 정제품, 제조 공정에서 생성되는 중간생성물, 동폐액 및 이들의 처리물 (농축물, 페이스트, 건조물, 희석물, 현탁물, 유화물 중 하나 이상) 이 포함된다. 또, 시판품도 적절하게 사용 가능하다.

본 발명에 따라, 상기한 유효 성분을 이용해 동물용 식음료, 즉 사료 또는 사료 조성물 (음료 포함) 및/또는 동물 의약 (영양 강화제, 경구투여제 등)을 제조한다. 이 때, DFA I, DFA II, DFA III, DFA IV 및/또는 DFA V 는, 사료 혹은 음료로서 제공하는 경우, 1일 1 내지 3 회, 동물의 체중 1 kg 에 대해 10 mg 내지 1000 mg, 바람직하게는 100 내지 300 mg 로 하며, 영양 강화제, 경구투여제에서는 1일 1 내지 3 회, 동물의 체중 1 kg 에 대해 10 mg 내지 1000 mg, 바람직하게는 100 내지 300 mg 로 한다. 이들의 제공량은 상기 범위에 제한되지 않으며, 상기 범위를 벗어날 수 있다.

또, 본 발명에 있어서 유효 성분으로서 사용하는 DFA I, DFA II, DFA III, DFA IV 및/또는 DFA V 는, 사료나 의약 조성물 중의 칼슘에 대해서, 사료 혹은 음료로서 제공하는 경우, 중량비로 0.1 내지 2 배 이상, 바람직하게는 0.5 내지 1.5 배로 하며, 영양 강화제, 경구투여제에서는 중량비로 0.2 내지 3 배 이상, 바람직하게는 1 내지 2 배이다. 그러나, 장기간 제공하거나 또는 질병에 대한 개선 효과를 기대하는 경우는, 상기 비율이 상기 범위를 벗어날 수 있다.

인간에 투여하는 경우, 유효 성분의 투여량은, 하기에 기재된 바와 같이, 분만전 투여의 경우와 동일할 수 있다. 혈중 칼슘농도 저하 억제 이외의 경우도, 마찬가지로 이것을 모방해 적절하게 용법, 용량을 규정하면 좋다.

본 발명에 있어서, 동물이란, 인간을 제외하는 동물로서, 인간이 사육하는 동물 일반을 의미한다. 반추동물 뿐만 아니라, 특정의 목적이나 애완용으로 사육, 번식시키는 포유류 및 조류이다. 그의 예시에는 돼지, 말, 개, 고양이, 토끼, 햄스터, 모르모트, 캥거루, 원숭이, 닭, 집오리, 메추리, 타조, 칠면조, 애완동물 및 동물원 등에서 사육되고 있는 동물 및 조류가 포함된다. 반추동물은 소, 염소, 양, 낙타, 물소와 같은 가축 및 원래 야생의 반추동물도 널리 포함한다. 반추동물은, 반순위를 갖는 등의 통상의 포유동물과는 상이한 독특한 소화계를 갖는 것으로서, 통상의 포유동물에 있어서의 기술 상식이 그대로 적용될 수 없는 독특한 동물이다.

본 발명은, 인간외 반추동물을 포함한 가축 동물의 칼슘 결핍증의 예방 및/또는 치료에 유효하다. 칼슘 결핍증의 예시로서는, 예를 들어, 칼슘의 흡수 저해, 혈중 칼슘농도의 저하, 유중 칼슘 함량의 저하 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 유효 성분은 뛰어난 이뇨 작용을 가지므로, 유방 부종 등의 예방 및/또는 치료에도 유효하다.

이에 따라, 본 발명은, 비유 동물 (lactation animal) 의 유중 칼슘 강화나 저칼슘 혈증개선에도 유효하고, 혈중 칼슘농도의 저하도 치료 또는 예방할 수 있다. 따라서, 저칼슘 혈증에 기인하는 질병의 치료나 예방도 달성되며, 분만에 의한 혈중 칼슘농도의 저하도 치료 또는 예방할 수도 있다. 이뇨 작용에 의해 유방 부종의 치료 또는 예방도 가능하다. 본 발명은, 인간 및 특히 젖소와 같은 비유 반추동물에 대해서 매우 유효하다.

본 발명의 유효 성분에 의한 칼슘농도 저하 억제에 관해서는, 본 발명자들은 추가 연구의 결과, 예상치않게 분만후의 혈중 칼슘의 저하 억제가 본 발명의 목적이긴 하지만, DFA III 를 분만후 투여가 아닌 분만전 투여하여 목적을 달성할 수 있다는 완전히 예상밖의 효과를 최초로 발견했다. 분만전 투여에 의한 분만후의 혈중 칼슘농도 저하 억제라고 하는 신규한 발명을 완성했다.

본 발명은 유효 성분으로서 DFA III 를 이용하여 이하에 상술된다.

DFA III 는, 분만전(출산전)에 투여할 수 있다. 분만 예정일(출산 예정일)의 1 주 전, 더욱 바람직하게는 2 내지 5 주 전, 통상, 3 주 전 (약 20 일 전) 에 투여를 개시한다. 투여 개시시기는 분만 예정일을 기준으로 하고 있으므로, 약간의 어긋남은 어쩔 수 없다. 필요한 경우, 이에 한정되는 일 없이, 분만 전이면 임의의 시기도 가능하다. 투여량을 증가하는 방법 등에 따르면, 분만 예정일 1주간 전보다 분만 예정일에 더 가까운 시기로 할 수 있다.

DFA III 의 투여량은, 경구투여의 경우, 임산부 1 인당, 1 일에, 0.05 내지 10 g, 바람직하게는 0.1 내지 5 g, 더욱 바람직하게는 0.2 내지 0.7 g 이다. 예를 들어, 이는 일반적으로는 0.5 g 로 한다. 투여는 전량을 단번에, 또는 2 내지 3 회 정도로 나누어 실시할 수 있다. 투여는 매일 연속 투여를 원칙으로 한다. 격일과 같이 간격을 두고 투여하는 것도 가능하다.

DFA III 의 투여량은 상기 범위로 특별히 한정되는 것은 아니다. 장기간 보건상 또는 건강 유지의 목적으로 섭취하는 경우에는, 투여량은 상기 범위보다 더 적을 수 있다. 활성 성분은, 안전성에 문제가 없기 때문에, 상기 범위보다 다량으로 사용해도 전혀 지장이 없다. 실제로 마우스를 이용한 10 일간의 급성 독성시험의 결과, 1,000 mg/kg 의 경구투여에서도 폐사는 관찰되지 않았다.

DFA III 의 상기 투여 양태는 또한 젖소에도 적용된다. DFA III 는 건유기에 투여하는 것이 유효하다. 구체적 투여 시기는 상기와 같다. DFA III 의 투여량은 인간의 경우보다 높다. 이는 젖소 1 마리 당, 1 일 1 내지 200 g, 바람직하게는 5 내지 100 g, 더욱 바람직하게는 8 내지 80 g, 특히 바람직하게는 10 내지 70 g 이다. 실시예에서 50 g 를 투여했다.

DFA III 는 직접 투여하거나 또는 사용시 제제 형성을 위해 제자리에서 물, 식품, 사료에 첨가함으로써 투여할 수 있다. 보충물로서 DFA III 를 투여하거나 또는 DFA III 를 미리 첨가하여 제조되는 식품 및 음료 또는 사료를 제공하는 것도 가능하다. DFA III 는 의약으로서 제형화될 수도 있다.

즉, 본 발명에서, 활성 성분 (그의 처리물) 은 적절하게 그대로 또는 일반적인 방식으로 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 활성 성분을 이용하는 조성물은 고체 (분말, 과립 등), 페이스트, 액체 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 이는 감미료, 산미료, 비타민제 및 드링크제 제조에 상용되는 각종 성분을 이용해 건강 드링크로 제형화될 수 있다. 이는 사료나 사료 첨가물의 경우도 동일하다.

본 발명에 있어서, 의약품으로서 사용하는 경우, 상기 활성 성분은 여러 가지 투여 형태로 투여된다. 정제, 캡슐제, 과립제, 산제, 시럽제와 같은 투여 형태의 경구투여를 언급할 수 있다. 상기 약제학적 제제는, 통상적인 방법에 따라, 제 내에 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 교미교취제, 용해보조제, 현탁제 및 코팅제와 같은 약물 제형화 기술 분야에 있어서 통상 사용할 수 있는 공지된 보조제를 이용해 제형화할 수가 있다. 그의 사용량은 병후, 연령, 체중, 투여 방법 및 제형에 따라 가변적이다. 일반적으로, 성인에 대해서, 1일, 정맥내 투여의 경우는, 체중 1 kg 당 0.01 mg 내지 1,000 mg 를 투여할 수가 있고, 근육내 투여의 경우는 체중 1 kg 당 0.01 mg 내지 1,000 mg 를 투여할 수 있고, 경구투여의 경우는 체중 kg 당 0.05 내지 10 g, 바람직하게는 체중 kg 당 0.1 내지 5 g 의 범위로 투여할 수 있다.

본 발명에 있어서, DFA III 는 분만 전에 투여한다. 그러나, 필요한 경우 분만후에 투여할 수 있다. 예를 들어, 분만 직후, 및 분만 6 시간 후, 필요하다면 분만 12 시간 후에, 각각 상기한 1일 투여량 내지 상기 투여량의 2 배 정도 범위로 투여할 수 있다.

DFA III 를 투여할 때, 비타민 D 및 필요하다면 칼슘을 (바람직하게는 분만후에) 병용할 수 있다. 이들의 투여량은 특별히 한정되지 않는다. 통상, 비타민 D 는, 비타민 D₃ 로서 일반적으로 0.5 내지 7 ㎍, 바람직하게는 1 내지 4 ㎍, 더욱 바람직하게는 1.5 내지 3.5 ㎍ 를 투여한다. 칼슘은, 일반적으로 50 내지 500 mg, 바람직하게는 200 내지 450 mg, 더욱 바람직하게는 300 내지 400 mg 를 투여한다. 이들의 시판품도 사용가능하다. 비타민 D₃ 및 칼슘은, 비타민 D₃ 가 2.5 ㎍, 칼슘이 350 mg 가 되도록 정제의 갯수를 조정하여 투여할 수 있다.

젖소의 경우는, 임시적인 기준으로서 비타민 D 는 1일 또는 1 회당 5,000 내지 20,000 IU, 바람직하게는 8,000 내지 15,000 IU 를 투여할 수 있다. 칼슘은 탄산칼슘을 사용했을 경우, 1 회 당 50 내지 200 g, 바람직하게는 80 내지 120 g 를 투여할 수 있다.

비타민 D 제의 예시에는 비타민 D₂, 비타민 D₃ 및 이들의 전구물질이 포함된다. 이는 칼슘 흡수 효과의 보완 또는 증강을 목적으로 제공할 수 있다.

칼슘제는 사료 및 식품으로서 사용이 허가된 모든 제제를 지칭한다. 그의 구체적인 예시에는, 글루콘산 칼슘, 프로피온산 칼슘, 탄산칼슘, 제 1 인산칼슘, 제 2 인산칼슘, 제 3 인산칼슘, 염화칼슘, 굴 껍질, 골분 등이 포함되나, 이는 제한기준이 아니다. 비타민 D 및/또는 칼슘은 항칼슘결핍 활성 뿐만 아니라, 이뇨나 항부종 활성을 위해서도 DFA 와 병용할 수 있다.

발명의 장점

본 발명은, DFA 를 유효 성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 인간 또는 동물용 의약 혹은 인간 또는 동물용 식음료 또는 사료 조성물을 사용하여, 인간이나 동물의 혈중 칼슘 농도를 증가시켜, 분만시 저칼슘혈증을 개선할 뿐만 아니라 젖의 생산성이 향상되어 주산기 질환을 감소시키는 효과를 제공하는 것이다. 더욱이, 본 발명의 유효 성분은, 이뇨 작용을 가져, 인간 또는 동물의 건강 유지 및 유방 부종과 같은 질병의 완화에 도움이 된다.

본 발명은 또한, 분만후의 혈중 칼슘농도의 저하의 억제를 DFA 를, 분만후가 아닌 분만전에 투여하는 극히 독특한 아이디어로 처음으로 성공적으로 달성하고, 분만후보다 분만전에 투여하는 것이 더욱 유효한 것을 확인한 점이 특징적이다. 따라서 본 발명에 의하면, 혈중 칼슘농도의 저하를 억제하거나, 또는 혈중 칼슘농도를 유지하고 더 나아가 증가시키는 것도 가능하다.

혈중 칼슘농도의 저하가 억제됨으로써, 특히 분만후에 칼슘농도가 저하되기 쉬운 임산부에 있어서, 건강을 유지하고, 모유량의 저하를 억제하고, 모유 조성의 저하를 억제할 수 있다.

또, 젖소에 대해서, 상기와 같은 특출한 효과가 제공되고, 또한 젖소에 특별히 해당되는 효과도 제공된다. 즉, 혈중 칼슘농도의 저하는 기립 불능 및 분만에서의 다수의 질병에 영향을 주는 식욕 저하를 유도한다. 그러나, 건유기에서의 DFA III 제공은 연령에 의한 영향력을 제거하며, 혈중 칼슘 농도의 저하를 방지하며, 정상 상태로의 회복을 가속시킨다. 따라서, 낙농 업계에 큰 기여를 한다. 이밖에도, 본 발명에 따르면, 젖소로서의 수명을 연장시킬 수 있어 경제적으로도 매우 유익하다. 낙농업계에서는 저칼슘 혈증의 예방을 위한 사육 관리법으로서 건유기에 사료 안의 칼슘 및 인을 제한하는 것이 권장되고 있다. 그러나 사료 중의 칼슘 및 인의 함량을 권장 범위까지 저하시키는 것은 극히 곤란하거나 또는 실질적으로 불가능하다. 본 발명에 의하면, 이러한 사육 관리를 할 필요도 없다.

게다가, 본 발명에 있어서는, 실험동물로서 마우스나 래트가 아니고, 대형이며 산유하는 점에서 인간 임산부와 상당히 근접한 젖소를 이용한 점을 특징으로 하며, 해당 데이터는 인간에 있어서도 신뢰도가 높다. 물론, 젖소 자체의 저칼슘 혈증의 예방 및/또는 치료에는 이들 데이터가 그대로 이용될 수 있는 것은 말할 필요도 없고, 다른 포유류에 대한 작용 효과도 이들의 데이터로부터 충분히 예측될 수 있다.

본 발명은 이하의 실시예에 의해 더욱 자세하게 설명한다. 그러나, 본 발명은 실시예로만 한정되지 않는다.

실시예 1

반추동물에 있어서, DFA III 및 DFA IV 가 칼슘 흡수를 가속시키기 위해서는, 반추위에서의 미생물에 의한 분해를 피해 장관에 도달해야 한다. 따라서, DFA III 및 DFA IV 의 반추위에 있어서의 분해성을 검토했다.

젖소의 영양 관리를 상정해 농축사료를 4 kg 로 제공하여 건초를 자유 채식으로 하고 있는 캐뉼라를 장착한 홀스타인 거세소 (Holstein steer) 및 유량 30 kg로 제공 사료 안의 농축사료 비율이 55% 인 젖소로부터, 각각 제 1 위 내 용액을 채취했다. 상기 액체를 4 겹 가아제로 여과하여 접종원을 형성했다.

완충용액은, O.25 M 인산완충액 (KH₂PO₄ 6.8045 g + Na₂HPO₄·12 H₂O 26.8605 g/500 ml, pH 7.0)을 사용해, 이 완충용액 100 ml 당 DFA III 또는 DFA IV 를 1 g 첨가했다.

200 ml 용 삼각플라스크에 접종원 30 ml 및 완충용액 20 ml 를 더했다. 탄산가스로 내부의 공기를 치환한 후, 분젠밸브를 장착한 고무마개로 마개를 해, 39℃의 인큐베이터로 배양했다. 배양 0, 1, 2, 4, 6, 8, 12 및 24 시간마다 플라스크를 채취해, 배양액을 분석에 제공했다.

플라스크에 들어간 배양액을 교반했다. 20 ml 의 배양 용액을 채취 후, 설포살리실산 (20% 용액) 을 0.1 ml 더해 제단백했다. 8,000 회전으로 10 분간 원심분리 후, 0.45 μm 의 여과지로 여과해, 액체크로마토그래피로 DFA III 및 DFA IV 를 분석했다.

배양액으로의 DFA III 및 DFA IV 첨가량은 400 mg/dl 로 설정했다. 그 결과, DFA III 및 DFA IV 는 어느 쪽의 접종원을 이용했을 경우에도 분해되지 않고, 각 배양 시간에 있어서도 거의 전량이 회수 되었다 (도 1). 루멘 미생물에 의해 분해되지 않으면, 젖소에 있어서도 DFA III 및 DFA IV 는 장관까지 도달해, 칼슘의 흡수를 충진하는 것이 인정되었다.

실시예 2

DFA III 및 DFA IV 의 제공이 젖소의 칼슘대사, 산유성 및 배뇨량에 미치는 효과를 검토했다.

홀스타인 젖소 (2 내지 4 산, 분만후 90 내지 20 일, 평균 체중 642 kg, 평균유량 36 kg) 9 마리를 3 개의 군으로 나누어 1 기 15일 (예비기 10일, 본기 5일) 로 하는 3×3 의 라틴방진으로 시험을 실시했다.

1일 사료 공급에 대해서는, 신선한 풀, 생옥수수 및 비트 펄프 (beat pulp) 를 건조 중량으로 각각 3, 4 및 2 kg 의 일정량으로 사용하고, 배합사료 (미정제 단백질 함량 18%, TDN 함량 74%) 는 유량의 1/3 로 했다. 더욱이, 미네랄제 및 비타민 제는 제공하지 않고, 각 젖소 개체마다 불충분한 사료는 건초 제공으로 보충했다. 이들 제공된 사료는 모든 젖소에 대해 동일한 내용물이었으며, 물은 자유섭취로 했다.

대조군에는 상기 제공물만을 제공했다. 제공되는 사료 및 100 g 의 DFA III 는 DFA III 군에 제공했고, 제공되는 사료 및 100 g 의 DFA IV 는 DFA IV 군에 제공했다.

젖소는, 대사 시험 시설에 수용해, 5 시와 17 시에 2 회 착유를 실시했다. 본기 5 일간은 유량, 우유 성분의 분석을 실시했다. 분뇨에 대해서는 본기 5 일간 각각을 전량 회수하고 계량해, 일정 비율을 혼합해 분석에 적용했다.

표 1 에 시험의 결과를 나타냈다. 그 결과로부터 건조 함량기준 물질 섭취량과 칼슘 섭취량에 있어서는 큰 차이는 없었다. 유량은 DFA III 및 DFA IV 군이 대조군보다 약 1 kg 증가했다. 유지방 비율 및 유단백질 비율도 군마다 차이는 없었다. 그러나, 유중 칼슘 비율은 대조군에 비해서 DFA III 및 DFA IV 군에서 유의미하게 증가했다 (P<0.05). 칼슘 배출량은, DFA III 및 DFA IV 군에 있어서, 분뇨 중 배출량이 유의미하게 감소해 (P<0.05), 유중 배출량이 유의미하게 증가했다 (P<O.05). 상기 결과는 DFA III 및 DFA IV 제공으로써 칼슘의 소화량은 증가했지만, 축적량에 대해서는 효과를 나타내지 않았다. 음수량은 각 군마다 차이는 없었지만, 뇨량은 DFA III 및 DFA IV 군에서 유의미하게 증가했다 (p<0.05). 표에서, TDN 는 소화가능한 양분의 총량을 나타낸다.

이상으로부터, DFA III 및 DFA IV 는 젖소의 칼슘 흡수에 있어서 뛰어난 효과를 제공하며, 또한 우유의 칼슘농도를 높이는 효과를 갖는다는 것이 확인되었다. 뇨량의 증가도 확인되었다.

DFA III 및 DFA IV 제공에 의한 칼슘 대사 및 유량
	대조군	DFA III 군	DFA IV 군
건조중량 기준 물질 흡수량 (kg/1일)	23.0	23.5	22.9
미정제 단백질 흡수량 (kg/1일)	3.38	3.42	3.37
TDN 흡수량 (kg/1일)	16.1	16.3	16.0
칼슘 흡수량 (kg/1일)	128	130	128
우유 생산량 (kg/1일)	34.2	35.6	35.2
유지방 비율 (%)	3.87	3.86	3.92
유단백질 비율 (%)	3.13	3.15	3.11
우유 칼슘 비율 (mg/100 ml)	105	121	118
칼슘 배출량
대변 중 (g/1일)	92.3	83.3	84.2
소변 중 (g/1일)	2.3	4.2	4.0
우유 중 (g/1일)	35.9	43.1	41.5
칼슘의 양
소화량 (kg/1일)	35.7	46.7	41.8
저장량 (g/1일)	-2.5	-0.6	-1.7
음용수량 (kg/1일)	113	114	110
뇨량 (kg/1일)	15.3	20.8	20.0

실시예 3

젖소의 분만시 혈중 칼슘농도에 대한, DFA III 및 DFA IV 의 영향을 검토했다.

시험용 젖소는 2 회 분만 이상의 홀스타인 분만소를 1 군 당 5 마리씩, 3 군 총 15 마리를 이용했다. 분만 직후에 꼬리 시작점으로부터 채혈을 실시했다. 대조군에서는 온수 300 ml 를 경구투여했다. DFA III 군 및 DFA IV 군에는 각각 DFA III 100 g 및 DFA IV 100 g 를 온수 250 ml 에 녹여 경구투여했다. 분만 직후의 채혈을 기점으로 하여 6 시간 및 60 시간 후에 꼬리 시작점으로부터 채혈을 실시했다. 촉진으로 유방 부종의 정도도 확인했다.

분만후의 제공 사료는, 신선한 풀, 생옥수수 및 배합사료를 포함한 TMR (이하 혼합 사료라고 한다: 사료 비율 47.8%) 를 20 kg/1일, 배합사료 4 kg 및 건초를 자유섭취로 했다. 제공한 사료의 내용물, 필요량 및 충족량을 하기 표 2 에 나타낸다. 필요량의 계산 조건은 다음과 같다: 분만후 경과일수 3 일, 2 회 분만, 체중 612 kg, 유량 20 kg, 유지방 비율 4.0%, 유단백질 비율 3.2%. 또, NEI 는 우유생산의 총 에너지를 나타내고, efNDF 는 유효 중성세제 불용성 섬유를 나타낸다.

제공되는사료의 내용물, 필요량 및 충족량
	제공량 kg	건조중량 기준 물질 %	NEI Mcal/kg	미정제 단백질 DM%	efNDF DM%	Ca DM%	F DM%
TMR	20.0	41.1	1.61	15.8	27.5	0.61	0.36
배합사료	4.0	88.0	1.93	21.6	5.6	0.85	0.56
건초	3.4	90.3	0.86	8.0	71.5	0.21	0.26
제공량 (kg, Mcal, g)		14.8	22.7	2.3	4.7	87	57
필요량 (kg, Mcal, g)		14.8	25.0	2.2	3.6	98	63
차이 (%)		100	91	104	130	89	90

혈액은 3,000 rpm 로 10 분간 원심분리해, 분석할 때까지 혈청 부분을 -30℃에서 보존했다. 칼슘의 분석은 0CPC 법으로 했다. 또, 부종의 정도는 촉진으로 진단했다. 중증은 4, 중도는 3, 경도는 2, 정상은 1 로 했다. 결과를 각각 표 3 및 표 4 에 나타냈다.

DFA III 및 DFA IV 의 경구 투여에 의한 혈중 칼슘 농도의 변화
최초 채혈 후 경과 시간	혈중 칼슘 농도 (mg/dl)
최초 채혈 후 경과 시간	대조군	DFA III 군	DFA IV 군
0	7.3	7.3	7.1
6	7.3	8.3	8.0
60	7.2	8.0	8.0

DFA III 및 DFA IV 의 경구 투여에 의한 유방 부종의 정도
최초 채혈 후 경과 시간	유방 부종의 정도*
최초 채혈 후 경과 시간	대조군	DFA III 군	DFA IV 군
0 시간	3.3	3.3	3.1
6 시간	3.5	3.0	2.8
60 시간	2.0	1.1	1.2
*; 심한 정도는 4 로, 중간 정도는 3 으로, 경증은 2 로, 정상은 1 로 함.

상기 결과로부터 분명하듯이, 분만 직후의 혈중 칼슘 농도은 각 군에서 7.1 내지 7.3 mg/dl 였다. 6 시간째의 혈중 칼슘 농도에 있어서, 대조군에서는 증가가 없었다. 한편, DFA III 군 및 DFA IV 군 모두에서 혈중 칼슘 농도는 분만 직후보다 약 1 mg/dl 증가해, 각각 8.3 mg/dl 및 8.0 mg/dl가 되었다. 그러나, 60 시간째에는 DFA III 군에서 8.0 mg/dl 가 되고, 증가 경향은 DFA IV 군에서도 6 시간째부터 관찰되지 않았다. 동시에, 어느 군에 있어서도 수유열 증상을 나타내는 소는 볼 수 없었다. 유방 부종의 정도에 있어서, 대조군은 6 시간째에 상승했다. 그러나, DFA III 군 및 DFA IV 군에서는 개선되었고, 60 시간째에는 거의 정상으로 되돌아왔다.

이상의 결과로부터, DFA III 및 DFA IV 는 분만 직후의 혈중 칼슘농도를 높여 유방 부종을 경감시키는 것이 확인되었다.

실시예 4

젖소의 분만시 혈중 칼슘농도에 대한 DFA III 및 칼슘과 비타민 D 의 효과를 검토했다.

시험용 젖소로서는, 2 회 분만 이상의 홀스타인 분만소를 1 군당 5 마리, 3 군 총 15 마리를 이용했다. 분만 직후에 꼬리 시작점으로부터 채혈을 실시했다. DFA III 군에는 DFA III 100 g 를 온수 250 ml 에 녹여, 경구투여했다. DFA III + 칼슘군에는 DFA III 및 탄산칼슘을 각각 100 g 로 하여 온수 200 ml 에 녹여 경구투여했다. DFA III + 칼슘+ VD 군에는 DFA III 및 탄산칼슘을 각각 1OO g 로 더하고, 비타민 D 10,000 IU 를 온수 200 ml 에 녹여 경구투여했다. 또, 분만 직후의 채혈을 기점으로 6, 24 및 70시간 후에 꼬리 시작점으로부터 채혈을 실시했다.

사료 제공 및 혈중 칼슘 농도의 분석은 실시예 3 과 같게 했다. 결과를 하기 표 5 에 나타냈다.

DFA III 및 칼슘 및 비타민 D 에 의한 혈중 칼슘 농도의 변화
최초 채혈 후 경과 시간	혈중 칼슘 농도 (mg/dl)
최초 채혈 후 경과 시간	DFA III 군	DFA III + Ca 군	DFA III + CA + VD 군
0	6.7	6.4	7.4
6	7.9	8.4	9.1
24	7.7	8.0	9.3
70	8.5	9.1	9.1

상기 결과로부터 분명한 바와 같이, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 6.4 내지 7.4 mg/dl 이며, DFA III + 칼슘군에서 가장 낮았다. 6 시간째의 혈중 칼슘농도는 분만 직후보다, 각각 DFA III 군은 1.2 mg/dl, DFA III + 칼슘군은 2.0 mg/dl, DFA III + 칼슘 + VD 군은 1.7 mg/dl 만큼 각각 증가했다. 24 시간째에는, 6 시간째에서 보다 DFA III 군, DFA III + 칼슘군에서 저하되었다. 그러나, DFA III + 칼슘 + VD 군은 한층 더 증가해, 정상치라고 생각되는 9.3 mg/dl 에 이르렀다. 상기 농도는 70 시간째에도 유지되고 있었다. DFA III 군 및 DFA III + 칼슘군의 70 시간째 혈중 칼슘농도는, 각각 8.5 및 9.1 mg/dl 이며, DFA III + 칼슘군에서는 회복 정도의 개선이 관찰되었다.

이상의 결과로부터, DFA III 는 단독으로 투여하는 것보다도, 칼슘제와 병용 하거나, 또는 비타민 D 와 병용함으로써 그 효과가 증대되는 것을 확인했다.

실시예 5

분만후 젖소의 혈중 칼슘농도에 대한 건유기의 DFA III 제공 영향을 실제 젖소를 이용해 시험관내에서 시험했다.

(1) 목적

지금까지 분만후의 소에 DFA III 를 투여해, 혈중 칼슘농도 개선에 효과가 있다고 생각되었다. 한편, 분만 직후에는 혈중 칼슘농도가 이미 저하된다. 저하 정도가 클수록, 생활성 및 식욕은 약해지고, 늦게 회복되는 경향이 있다. 따라서, DFA III 를 건유기에 제공하여 분만 직후의 혈중 칼슘농도에 대한 DFA III 의 영향을 조사했다.

(2) 시험군

DFA III 제공; 분만 예정 3 주 전부터 분만일까지의 건유기에 DFA III (50 g/1일) 제공.

DFA III 비제공; 분만전에 DFA III 비제공.

DFA III 제공군 및 DFA III 비제공군에 모두 분만후 0 시간 및 6 시간 후에 1 회당 DFA III 를 90 g 으로 제공했다. 건유기에는, 두 군 모두에 비타민 D 를 12,000 IU 로 하여 4 kg 의 사료에 첨가한 사료를 1일 4 kg 로 제공했다.

(3) 시험 방법

1) 시험 젖소

2 회 분만 이상의 젖소를 이용했다.

DFA III 제공 젖소는 2004 년 4 월 30 일 이후 분만한 10 마리를 대상으로 했다. DFA III 비제공 젖소는 2002 년 7 월 14 일 이후 2004 년 4 월 18 일까지 분만해, 건유기에 DFA III 를 제공하지 않은 38 마리를 대상으로 했다. 시험은 2002 년 7 월 14 일부터 시작해, 시험 젖소에는 상기 기간 동안 2 회 분만한 소가 15 마리 (DFA lII 제공 젖소 8 마리, DFA lII 비제공 젖소 7 마리) 포함되어 있다.

2) 제공 사료

건유기 젖소는 분만 예정 2 개월전을 목표로 착유를 중지했다. 그 후 배합사료(미정제 단백질 함량 18%, TDN 72%, 칼슘 0.9%, P 0.5%) 를 분만 예정 3 주일전까지 1일 2 kg 씩 제공했다. 분만 예정 3 주 전부터 분만까지는 배합사료 (미정제 단백질 함량 20%, TDN 75%, 칼슘 0.2%, P 0.5%) 를 1일 4 kg 씩 제공했다. 또다른 사료로서, 건유기 전기간 동안 젖소에게 사료로서 건초 (미정제 단백질 함량 6 내지 8%, TDN 45 내지 55%, 칼슘 0.2 내지 0.3%, P 0.2%) 를 자유롭게 섭취하도록 했다. DFA III 제공 소는 분만 예정 3 주일 전의 배합사료 4 kg 에 DFA III 를 50 g 로 첨가해 제공했다. 분만후의 제공 사료는 신선한 목초, 생옥수수, 배합사료를 포함한 TMR (결점 사료 비율 47.8%) 를 1일 20 kg, 배합사료 (미정제 단백질 함량 18%, TDN 72%, 칼슘 0.9%, P 0.5%) 4 kg 및 건초를 자유롭게 섭취하도록 했다.

3) 분만후의 채혈 및 DFA III 투여 방법

모든 젖소에서, 분만 직후에 꼬리 시작점으로부터 채혈했다. 추가로, 분만 직후의 채혈을 기점 (0시간) 으로 하여 6 시간, 24 시간 및 72 시간 후에 동일한 꼬리 시작점으로부터 채혈을 실시했다. 채혈 0 및 6 시간째에 1 회당 DFA III 90 g, 탄산칼슘 100 g, 비타민 D 10,000 IU 를 온수에 용해해 경구투여했다.

4) 혈중 칼슘 분석 방법

혈액은 3,000 rpm 로 10 분간 원심분리해, 그 혈청 부분을 분석할 때까지 -30℃ 로 저장했다. 칼슘 농도의 측정은 OCPC 법으로 측정했다.

(결과)

1) 시험 젖소로서 2 회 분만한 소의 분만 직후 혈중 칼슘농도 (도 2 참조)

이전의 분만시 건유기에 DFA III 제공군 및 DFA III 비제공군에 DFA III 를 제공하지 않았다. 건유기의 DFA III 제공은 현산 DFA III 제공 젖소에게만 실시했다.

전산차 DFA III 제공 및 비제공 젖소에서 분만 직후 혈중 칼슘농도는 평균 7.2 및 7.l mg/d1 이며, 젖소의 두 군 간에 차이는 보이지 않았다. 금산차 젖소에 있어서는 DFA III 제공 젖소의 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 8.1 mg/dl 가 되어, 전산차 젖소와 비교하면 1.0 mg/dl 증가했다. 한편, DFA III 비제공 젖소는 6.5 mg/dl 이며, 전산 젖소보다 0.6 mg/dl 더 낮은 값이었다.

일반적으로, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 연령에 따라 저하된다고 일컬어진다. DFA III 비제공 젖소는 그것을 증명하는 결과를 제공했다. 그러나, 혈중 칼슘 농도가 DFA III 제공 젖소에서는 증가되었다. 이에 따라, 장관으로부터의 칼슘 흡수 가속 혹은 또는 뼈로부터 혈액으로의 칼슘 이행의 가속을 제공할 가능성이 높다고 간주되었다. 특히, 금산차 젖소에서 DFA III 제공 젖소는 혈중 칼슘 농도가 7 mg/dl 보다 더 낮은 젖소는 없었고, 연령이 높은 젖소에서 증가 비율이 높은 경향에 있었다. DFA III 비제공 젖소에서는 혈중 칼슘 농도는 7 mg/dl 보다 더 낮았다. 금산차 젖소의 분만 직후의 혈중 칼슘 농도에 대해서, DFA III 제공 젖소와 비제공 젖소 사이에 유의차 (p<0.01) 가 인정되었다.

2) 산차 (분만 횟수) 및 분만 직후의 혈중 칼슘농도 (도 3 참조)

도 3 은 각 산차에 대한 분만 직후의 혈중 칼슘농도를 나타내며, 시험한 모든 젖소의 데이터 (DFA III 제공 젖소 l0 두, DFA III 비제공 젖소 38 마리) 를 제공한다. 건유기에 DFA III 를 제공하지 않았던 소는 산차가 나아감에 따라 혈중 칼슘농도는 저하되어, 분만 직후의 혈중 칼슘농도 = -0.6×산차 + 8.8 의 관계식이 인정되었다 (p < 0.01). 한편, DFA III 제공 젖소는 산차의 증가에 따라 분만 직후의 혈중 칼슘농도가 저하되지 않았다. DFA III 제공 젖소의 회귀식에서, 사례수가 적기 때문에 유의차는 인정되지 않았다.

3) 분만후의 혈중 칼슘농도의 변화 (도 4 참조)

도 4 는 분만후의 경과시간에 의한 혈중 칼슘농도를 나타낸 것이다. 범례에서 "있음·금산차" 는 금산차의 건유시에 DFA III 를 제공한 젖소 8 마리의 평균치이다. "있음·전산차" 는 "있음·금산차" 젖소의 전산차의 데이터이다. 그러나, 전산차에 있어서는 건유시에 DFA III 는 제공하지 않았다. "없음·금산차" 는, 금산차의 건유기에 DFA III 를 제공하지 않은 젖소 7 마리의 평균값이다. "없음·전산차" 는 "없음·금산차" 젖소의 전산차의 데이터로, 건유시에 DFA III 는 제공하지 않았다. "없음·전체 젖소 평균" 은 건유기에 DFA III 를 제공하지 않았던 젖소 38 마리 전부의 평균값이다.

"있음·전산차" 및 "없음·전산차" 에서, 혈중 칼슘 농도는 24 시간 내의 혈중 칼슘농도를 제외하고 거의 비슷하게 변동했다. 한편, "있음·금산차" 는 전산차보다 많이 변동했고, "없음·금산차" 가 전산차보다 더 적게 변동한 것과는 크게 차이가 났다 (0, 6 및 24 시간 후는 모두 P<O.01 의 유의차 있음). 혈중 칼슘농도의 정상치는 9 내지 11 mg/dl 이다. 건유기에 DFA III 를 제공하고 6 시간 후에는 정상치에 이르는 것으로 여겨진다. 그러나, 건유기에 DFA III 를 제공하지 않았다면, 혈중 칼슘농도가 정상치로 돌아오기 위해서는 약 3 일이 걸렸다. 그 회복의 정도는 산차가 나아감에 따라 늦어질 것으로 예상되었다.

(5) 통계

상기 시험의 결과, 이하가 확인되었다.

1) 건유기에 DFA III를 제공하면, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 그것을 제공하지 않는 소보다 증가한다. 그 결과, 기립 불능이 되지 않고, 소의 건강 회복이 빠르고, 유량도 증가한다.

2) 건유기에 DFA III 를 제공하면, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 연령에 의한 저하의 영향을 받지 않는 것이 확인되었다. 그 결과, 폐사 및 도태 비율이 줄어들어, 젖소로서의 수명이 늘어나게 되었다.

3) 건유기에 DFA III 를 제공하지 않는 경우, 분만 직후의 혈중 칼슘농도는 산 차가 나아감에 따라 저하되어, 1 산차마다 저하량은 0.6 mg/dl 정도로 예상되었다.

4) 건유기에 DFA III 를 제공하면, 연령에 의해 늦게 회복되는 경향이 있는 비제공 젖소와는 달리 혈중 칼슘 농도가 정상치로 빨리 돌아온다.

5) DFA III 급여의 혈중 칼슘농도 증가 효과는 분만 직후보다 건유기가 그 효과가 크다.

혈중 칼슘농도의 저하는 기립 불능 및 식욕을 저하를 유도하여, 분만시 많은 질병에 영향을 주는 것으로 일컬어지고 있다. 건유기의 DFA III 제공은 연령에 의한 영향이 없고, 혈중 칼슘농도의 저하를 미리 막고, 정상으로의 회복도 빠르다. 따라서, DFA III 의 제공은 낙농계에 막대한 공헌을 하는 것으로 증명되었다.

Claims

디프룩토오스 무수물 (DFA) 을 유효 성분으로서 포함하는, 인간 또는 동물용의 칼슘 결핍증, 부종 및 뇨량의 저감 중 하나 이상에 대한 예방 및/또는 치료용 제제.
제 1 항에 있어서, 디프룩토오스 무수물 (DFA) 이, 디프룩토오스 무수물 I (DFA I), 디프룩토오스 무수물 II (DFA II), 디프룩토오스 무수물 III (DFA III), 디프룩토오스 무수물 IV (DFA IV) 및 디프룩토오스 무수물 V (DFA V) 로부터 선택되는 하나 이상을 포함하는, 인간 또는 동물용의 칼슘 결핍증, 부종 및 뇨량의 저감 중 하나 이상에 대한 예방 및/또는 치료용 제제.
디프룩토오스 무수물 III (DFA III) 및/또는 디프룩토오스 무수물 IV (DFA IV)를 유효 성분으로서 포함하는, 인간 또는 동물용의 칼슘 결핍증, 부종 및 뇨량의 저감 중 하나 이상에 대한 예방 및/또는 치료용 제제.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 칼슘 및/또는 비타민 D를 병용하는 제제.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 동물이, 반추동물, 그 외의 포유동물, 애완동물 및 조류로부터 선택되는 하나 이상인 제제.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 칼슘 결핍증이 혈중 및/또는 유(乳)중 칼슘농도의 저감인 제제.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 동물이 분만전 또는 분만후의 젖소인 제제.
DFA III 및/또는 DFA IV 를 유효 성분으로서 포함하는, 분만전의 인간 또는 동물 투여용 저칼슘혈증의 예방 및/또는 치료용 제제.
제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 제제를 경구 및/또는 비경구 투여하 는 것을 포함하는 칼슘 결핍증, 부종 및 뇨량의 저감 중 하나 이상을 예방 및/또는 치료하는 방법.
제 9 항에 있어서, 분만전 및/또는 분만후에 투여를 실시하는 방법.
제 9 항 또는 제 10 항에 있어서, 분만전에 경구투여함으로써 분만후에 혈중 칼슘농도의 저감을 억제하는 방법.
DFA III 및/또는 DFA IV 를 분만전에 인간 또는 동물에 투여하는 분만후의 혈중 칼슘농도의 저감을 억제하는 방법.
제 12 항에 있어서, 추가로 칼슘 및/또는 비타민 D 를 병용하는 방법.
제 12 항 또는 제 13 항에 있어서, 분만 예정일의 2 주전, 바람직하게는 3 주 전부터 투여를 개시하는 방법.
DFA III 및/또는 DFA IV 를 건유기의 젖소에 투여하는 것을 포함하는 분만후의 혈중 칼슘농도의 저감을 억제하는 방법.
제 15 항에 있어서, 젖소 1 마리에 대해, DFA III 또는 DFA IV 를 1일 1 내지 200 g, 바람직하게는 5 내지 100 g, 더욱 바람직하게는 8 내지 80 g, 특히 바람직하게는 10 내지 70 g 으로 경구투여하는 방법.
DFA III 및/또는 DFA IV 를 함유하고, 항칼슘결핍증, 항부종 및 이뇨 중 하나 이상의 작용을 갖는, 칼슘 결핍증, 또는 부종의 개선, 또는 이뇨 작용을 위해 사용되도록 표시되어 있는 식음료 또는 사료.
DFA III 및/또는 DFA IV 를 함유하고, 분만후의 혈중 칼슘농도의 저감을 억제 하는 작용을 갖는, 분만후의 혈중 칼슘농도 저감 억제를 위해서 분만전에 사용되도록 표시되어 있는 식음료 또는 사료.
제 18 항에 있어서, 인간 또는 동물용인 식음료 또는 사료.
제 19 항에 있어서, 동물이 소, 염소, 양, 물소, 낙타, 말, 돼지 및 애완동물로부터 선택되는 하나 이상인 사료.
제 20 항에 있어서, 소가 젖소인 사료.