KR20060024343A

KR20060024343A - 귀금속 미립자를 함유하는 의약

Info

Publication number: KR20060024343A
Application number: KR1020057015425A
Authority: KR
Inventors: 유세이 미야모토; 히데아키 요시다; 마사시 카지타; 히로시 시미즈; 타다미치 시미즈
Original assignee: 가부시키가이샤 시테크
Priority date: 2003-02-20
Filing date: 2004-02-18
Publication date: 2006-03-16
Also published as: EP1598072A1; AU2004212824A1; JPWO2004073723A1; US20070141173A1; WO2004073723A1; EP1598072A4; CA2518313A1; TW200423948A

Abstract

근위축성 측색경화증이나 알츠하이머병 등의 신경변성질환, 만성관절 류마티스 등의 류마티스성 질환, 심근경색 등의 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 의약이며, 백금 등의 귀금속 또는 귀금속을 포함하는 합금의 미립자(예를 들어, 백금 콜로이드)를 유효성분으로 함유하는 의약.

백금 콜로이드, 근위축성 측색경화증, ALS, 귀금속 미립자

Description

귀금속 미립자를 함유하는 의약{Medical Drug Containing Fine Particle of Noble Metal}

본 발명은 귀금속 미립자를 포함하며, 근위축성 측색경화증 등의 신경변성 질환, 류마티스성 질환, 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증의 예방 및/또는 치료를 위한 의약에 관한 것이다.

근위축성 측색경화증(Amyotrophic lateral sclerosis: 이하, 본 명세서에서 「ALS」로 약하는 경우가 있음)은 대뇌피질로부터 척수에 이르는 상위운동뉴런 및 척수로부터 근육에 이르는 하위운동뉴런이 선택적으로 장해되는 진행성 신경변성 질환이다. ALS의 발증빈도는 높으며, 일본에서도 다수의 환자가 있다. 임상적으로는 근위축과 근력저하가 특징적이며, 병이 진행되면 근력저하로 인한 언어장해, 연하(嚥下)장해, 호흡장해 등을 일으킨다. 병세의 진전은 비교적 빠르며, 인공호흡기 등을 이용하지 않으면 2 내지 4년 만에 사망에 이른다. 그러나, ALS에는 근본적인 치료법이 없기 때문에, 이 질환에 관해서는 환자의 간호를 포함하여 사회적으로 큰 문제가 되고 있다.

ALS는 그 발증형태에 따라 고발성(孤發性)과 가족성으로 나뉜다. 가족성의 ALS에는 우성과 열성의 유전자가 알려져 있다. 최근, 우성 유전자의 ALS1 형의 원인 유전자로 활성산소의 대사효소인 Cu/Zn Superoxide Dismutase(구리ㆍ아연 슈퍼옥사이드 디스뮤타제: SOD1)가 동정되었다. ALS의 대부분은 고발성이며, 유전성인 것은 20%에도 미치지 못한다. ALS1이 전체 ALS에서 차지하는 비율은 2% 이하이기 때문에, ALS 발증의 분자기구 해명과 치료법의 개발에는 SOD1 유전자 이외의 ALS 원인 유전자의 발견이 기다려지고 있지만, 열성유전형식을 가지는 ALS2 형의 원인 유전자로서 새롭게 ALS2CR6 유전자가 단리ㆍ동정되고 있다. 한편, ALS 등의 신경변성 질환에서 활성산소가 발생하는 기작에 관해서는, 돌연변이 등으로 변이한 단백질이 응집하여 활성산소의 발생을 유발하는 설이 유력하다(참조: Current Topic in Medical Chemistry 1:507-517, 2001).

ALS에 대해서는 약물요법을 포함하여 근본적인 치료법은 아직 확립되어 있지 않다. 약물로는, ALS의 진행을 늦추는 약제로 리루졸(「리루텍」)이 이용되고 있으며, 이외에 근이완약, 진통제, 정신안정제, 수면제, 비타민 B 등이 이용되고 있지만, 어느 것도 대증요법으로서의 약물요법에 지나지 않는다.

류마티스성 질환은 결합조직의 염증, 변성 또는 대사장해에 의한 각종의 이상을 특징으로 하는 질환이며, 관절, 근육, 뼈, 인대 등의 운동기가 장해되어 통증과 경직증상을 동반하는 질환이다. 전형적인 류마티스성 질환은 만성관절 류마티스이며, 전신의 결합조직에 변화가 일어나는 교원병(膠原病)의 전신성 에리테마토데스(SLE)나 자기면역질환도 류마티스성 질환에 포함된다.

만성관절 류마티스(RA)에 대해서는 근본 치료법이 없으며, 경험적으로 대증요법이 이루어지고 있다. 치료방법으로는 약물요법 이외에, 기초요법(안정, 환자교육 및 이학요법 등), 수술요법 등이 이루어지지만 치료의 원칙은 약물요법이다. 약물요법으로는 RA에 의한 활막염을 억제하고 동통을 경감하기 위하여 아스피린, 인도메타신, 디클로페낙 등의 비스테로이드성 항염증제(NSAID)가 범용되고 있지만, 중증예에는 프레드니솔론 등의 스테로이드제가 이용되는 경우도 있다. 또한, RA의 면역이상을 시정하여 골파괴의 진행을 지연시키기 위하여, 항 류마티스제가 이용되고 있다. 항 류마티스제로는 예를 들어, 금제제(금사과산나트륨이나 오라노핀 등)나 메토트렉세이트 등의 면역 억제제가 이용되고 있다.

심장의 관동맥의 죽상경화 등에 의해 혈관의 협착 또는 폐색이 생겨 관혈류가 감소하기 때문에 일어나는 심기능장해는 심근에 허혈상태를 가져오기 때문에, 허혈성 심질환이라 불러진다. 허혈성 심질환의 대표적 질환은 협심증 및 심근경색이다. 심근경색은 혈전으로부터 지속적인 허혈이 생겨 심근괴사를 일으키고, 때에 따라서 죽음에 이르게 된다. 보다 경증인 일과성의 협심증에서는 발작시에 격렬한 흉통이 발생한다.

협심증의 약물요법에는 아질산아밀, 니트로글리세린, 질산이소소르비드 등의 아질산제, β블로커, 칼슘 길항제, 디피리다몰 등의 관확장제가 이용된다. 심근경색에 대해서는, 급성기에 말초혈관 확장제, 유로키나제 등의 혈전용해제, 헤파린나트륨 등의 혈액응고 방지제, 아스피린이나 티클로피딘 등의 항 혈소판제 등이 이용된다. 그러나, 특히 심근경색의 급성기에 있어서 심근괴사를 효과적으로 억제할 수 있는 약제는 아직 제공되고 있지 않다.

또한, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증에 있어서도 각종 의약의 적용이 시험되고 있지만 만족할 만한 치료효과를 달성할 수 있는 의약은 거의 제공되고 있지 않으며, 새로운 약제의 개발이 절실한 실정이다.

한편, 백금 콜로이드가 활성산소의 일종인 과산화수소를 분해한다고 알려져 있다(참고: 특개평 제 10-68008호 공보, [0040]단락). 그러나, 전기 공보에는 ALS 등의 신경변성 질환, 류마티스성 질환, 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 또는 고지혈증의 치료제 및/또는 예방에 있어서 백금콜로이드의 유효성을 보여준 것은 아니다.

발명의 개시

본 발명의 과제는 ALS나 알츠하이머병 등의 신경변성 질환, 만성관절 류마티스 등의 류마티스성 질환, 심근경색 등의 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증의 예방 및/또는 치료를 위한 의약을 제공하는 데 있다. 본 발명자들은 상기의 과제를 해결함으로써 상기의 각 질환의 예방 및/또는 치료를 이룰 수 있음을 확인하였다. 본 발명은 상기의 지견을 기초로 하여 완성된 것이다.

즉, 본 발명에 의하면, 신경변성 질환, 류마티스성 질환, 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한, 귀금속 또는 귀금속을 포함하는 합금의 미립자를 유효성분으로 함유하는 의약이 제공된다.

본 발명의 바람직한 실시태양에 의하면, 신경변성 질환이 근위축성 측색경화증, 알츠하이머병 또는 파킨슨병인 상기의 의약; 신경변성 질환이 근위축성 측색경화증인 상기의 의약; 류마티스성 질환이 만성관절 류마티스인 상기의 의약; 허혈성 심질환이 급성기의 심근경색인 상기의 의약; 및, 스트레스성 궤양이 스트레스성 위궤양 또는 스트레스성 십이지장 궤양인 상기의 의약이 제공된다.

또한, 본 발명의 바람직한 실시태양에 의하면, 귀금속이 루테늄, 로듐, 팔라듐 및 백금으로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 귀금속인 상기의 의약; 귀금속이 백금인 상기의 의약; 및, 귀금속의 미립자가 평균입경 10nm 이하의 백금콜로이드인 상기의 의약이 제공된다.

본 발명의 다른 관점에 의하면, 본 발명은 신경변성 질환, 류마티스성 질환, 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 질환의 예방 및/또는 치료방법을 제공하며, 귀금속의 미립자를 사람을 포함하는 포유류 동물에 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다. 또한, 본 발명에 의해 상기 의약의 제조를 위한 귀금속 미립자의 사용도 제공된다.

발명을 실시하기 위한 최량의 형태

본 발명의 의약은 신경변성 질환, 류마티스성 질환, 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 의약으로서, 귀금속의 미립자를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다. 이 때, 귀금속의 종류는 특별히 한정되지 않으며, 금, 루테늄, 로듐, 팔라듐, 오스뮴, 이리듐 또는 백금 중 어느 것을 사용해도 무방하지만, 바람직한 귀금속은 루테늄, 로듐, 팔라듐 또는 백금이다. 귀금속의 미립자는 2종 이상의 귀금속을 포함하여도 무방하다. 또한, 적어도 1종의 귀금속을 포함하는 합금의 미립자 또는 1종이나 2종 이상의 귀금속 미립자와 귀금속 이외의 1종이나 2종 이상의 금속 미립자를 포함하는 혼합물을 이용할 수도 있다. 예를 들어, 금 및 백금으로 구성되는 합금 등을 이용하여도 무방하며, 이들 중 바람직한 것은 백금 또는 백금을 포함하는 합금이며, 특히 바람직한 것은 백금이다.

귀금속의 미립자로는, 비표면적이 크고, 표면반응성이 우수한 콜로이드 상태를 형성가능한 미립자가 바람직하다. 미립자의 입경은 특별히 한정되지 않지만, 50nm 이하의 평균입경을 가지는 미립자를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 평균입경이 20nm 이하, 보다 바람직하게는 평균입경이 10nm 이하, 가장 바람직하게는 평균입경 1 내지 6nm 정도의 미립자를 이용할 수 있다. 보다 가는 미립자를 이용하는 것도 가능하다.

귀금속 미립자의 제조방법은 여러가지가 알려져 있으며(참조: 특공소 제 57-43125호 공보, 특공소 제 59-120249호 공보 및 특개평 제 9-225317호 공보, 특개평 제 10-176207호 공보, 특개 제 2001-79382호 공보, 특개 제 2001-122723호 공보 등), 당업자는 이들의 방법을 참조하여 미립자를 용이하게 제조할 수 있다. 예를 들어, 귀금속 미립자의 제조방법으로서 침전법 또는 금속염 환원반응법이라 일컫어지는 화학적 방법 또는 연소법이라 일컬어지는 물리적 방법 등을 이용할 수 있다. 본 발명의 의약의 유효성분으로는 어느 방법으로 제조된 미립자를 이용하여도 무방하지만, 제조의 용이성과 품질면에서 금속염 환원반응법으로 제조된 미립자를 이용하는 것이 바람직하다.

금속염 환원반응법에서는 예를 들어, 수용성 또는 유기용매 가용성의 귀금속염 또는 귀금속 착체의 수용액 또는 유기용매용액을 제조하고, 이 용액에 수용성 고분자를 가한 후, 용액의 pH를 9 내지 11에 조절하여, 불활성가스 분위기 하에서 가열환류함으로써 환원하여 금속 미립자를 수득할 수 있다. 귀금속의 수용성 또는 유기용매 가용성의 염의 종류는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어, 초산염, 염화물, 황산염, 질산염, 술폰산염 또는 인산염 등을 이용할 수 있으며, 이들 착체를 이용하여도 무방하다.

금속염 환원반응법에 이용하는 수용성 고분자의 종류는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어, 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알콜, 폴리아크릴산, 시클로덱스트린, 아미노펙틴 또는 메틸셀룰로스 등을 이용할 수 있으며, 이들을 2종 이상 혼합하여 이용하여도 무방하다. 바람직하게는 폴리비닐피롤리돈을 이용할 수 있으며, 보다 바람직하게는 폴리(1-비닐-2-피롤리돈)을 이용할 수 있다. 또한, 수용성 고분자를 대체하여 또는 수용성 고분자와 함께 각종의 계면활성제, 예를 들어 음이온성, 비이온성 또는 지용성 등의 계면활성제를 사용하는 것도 가능하다. 알콜을 이용하여 환원할 때에는 에틸알콜, n-프로필알콜, n-부틸알콜, n-아밀알콜 또는 에틸렌글리콜 등을 이용할 수 있다. 그러나, 귀금속 미립자의 제조방법은 상기 설명한 방법에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 의약은 신경변성 질환, 류마티스성 질환, 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 질환의 예방 및/또는 치료에 이용할 수 있다.

신경변성 질환의 예로서는, 근위축성 측색경화증, 알츠하이머병, 파킨슨병 등을 예시할 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 의약의 바람직한 적용대상은 근위축성 측색경화증이다.

류마티스성 질환으로는, 예를 들어, 만성관절 류마티스, 약년성(若年性) 관절 류마티스, 에리테마토데스(원판상 루프스, 전신성 에리테마토데스, 약제관련 루프스 등), 강피증(强皮症), 광범성 근막증, 다발성 염증, 괴사성 혈관염 및 기타의 혈관증, 쇼그렌증후군(Sjogren's syndrome), 중복증후군(over-lap syndrome) 등의 광범성 결합조직 이상, 척수염을 동반하는 관절염, 변성 관절질환(골관절증, 변형성 관절증), 감염 병원체에 동반하는 관절염, 류마티스 증상을 동반하는 대사성 및 내분비성 질환, 신생물(종양), 신경ㆍ혈관이상, 뼈 및 연골질환, 관절외질환, 관절증상의 어떤 여러가지 질환 등을 예시할 수 있지만(참조: Decker J. L. et al., Arth. Rheum., 26(8), 1983), 이들에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 의약의 바람직한 적용대상은 만성 관절 류마티스이다.

본 명세서에서 사용되는 허혈성 심질환의 용어는 적어도 협심증 및 심근경색을 포함하고 있으며, 각각 여러가지 병의 형태를 포함한다. 예를 들어, 협심증에는 노작성(勞作性) 협심증 및 자발성 협심증 등이 있으며(참조: 海老原 등, 「협심증과 β차단제 -임상약리와 임상응용-」, 임상의학연구회, 1989), 노작성 협심증과 불안정 협심증으로 분류되는 경우도 있다(참조: American Health Association). 심근경색으로는 일반적으로 관동맥의 큰 분지에 폐색이 발생하여, 그 관류역(灌流域)에 광범위한 괴사가 발생한다. 허혈성 심질환은 노작성 협심증, 심근경색증(급성 및 진구성(陳舊性)을 포함), 중간형 및 무통성 허혈성 심질환(무증상성 및 만성 심근장해를 포함)으로 분류되기도 한다(참조: 安部 등, 「협심증」, 금원출판, 1985). 또한, 심근경색의 치료로 행해지는 PTCA(Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty)에 있어서 풍선 또는 카테터 처치 후에 혈관 재협착 또는 재폐색이 고빈도로 발생한다고 알려져 있지만, 이들의 처치에 의하여 일어나는 혈관재협착 또는 재폐색을 동반하는 심질환도 허혈성 심질환에 포함된다. 본 명세서에서 사용되는 허혈성 심질환의 용어는 이들 질환을 전부 포함하도록 가장 광의로 해석하지 않으면 안되며, 어느 의미에 있어서도 한정적으로 해석해서는 안된다.

스트레스성 궤양에는 소화성 궤양이 포함되며, 보다 구체적으로 위궤양 및 십이지장 궤양이 포함된다. 소화성 궤양의 제 1차 병인으로 스트레스가 외인성의 병인이 된다고 알려져 있으며, 스트레스가 주된 병인으로 되는 궤양에 대하여 본 발명의 의약을 적용할 수 있다. 본 발명의 의약은 원인이 되는 스트레스가 명확한 경우 이외에, 그 존재가 의심되는 경우에도 적용이 가능하다.

피부염에는 예를 들어, 독성화학물질이나 빛의 접촉에 의하여 발생되는 접촉피부염(일시 자극성 접촉 피부염, 알레르기성 접촉 피부염, 광독성(光毒性) 접촉 피부염 및 광 알레르기성 접촉 피부염 등, 참조: 大城戶 등, 「피부과 치료 핸드북」 남산당, 1989) 이외에, 습진군(급성 습진 및 만성 습진 등), 아토피성 피부염(신생아 내지 유아기, 유아기 내지 학동기 및 성인기에서의 아토피성 피부염 등), 지루성 피부염, 자가감작성 피부염, 약진(藥疹) 등이 포함된다. 본 발명의 의약은 전신투여 이외에, 피부염의 부위로의 국소투여도 가능하다.

동맥경화증은 동맥벽의 개축(改築), 경화 및 기능저하를 나타내는 한국성(限局性) 동맥병변의 총칭이며, 중막경화(中膜硬化), 세동맥경화 및 죽상(아테롬)경화 등의 병태를 포함한다. 본 발명의 의약 제공대상이 되는 동맥경화증은 이들 중 어느 것이든 좋고, 동맥의 부위도 특별히 한정되지 않으며, 예를 들어 관상동맥, 능동맥, 신동맥 및 사지동맥 등 어느 것이어도 좋다. 또한, 본 발명의 의약 적용대상은 동맥경화의 병변의 초기에 있어서의 혈관내피세포의 포말세포화(泡沫細胞化), 포말세포의 세포괴사 및 아테롬경화소로의 지질퇴적 등 어느 것의 병변기에서의 동맥경화이어도 좋다. 본 발명의 의약 제공대상은 완성된 동맥경화 이외에, 동맥경화가 형성되는 과정의 병변도 포함하며, 가장 광의적으로 해석할 필요가 있다. 또한, 본 발명의 의약은 혈중지질 저하작용을 가지고 있으며, 고지혈증의 예방 및/또는 치료에 이용할 수 있다.

본 명세서에 있어서, 「예방 및/또는 치료」라는 용어는 상기 질환의 발증의 예방 및 발증 후의 상기 질환의 치료 이외에, 상기 질환의 진행의 억제, 상기 질환의 개선 또는 경감, 상기 질환의 재발예방 등을 포함하여 가장 광의적으로 해석하지 않으면 안되며, 어떠한 의미에 있어서도 한정적으로 해석해서는 안된다.

본 발명 의약의 투여경로는 특별히 한정되지 않으며, 경구투여 또는 비경구투여 중 어느 것의 투여경로를 선택하여도 무방하다. 본 발명의 의약으로서는 상기에 설명한 방법에 의하여 조제된 콜로이드 상태의 귀금속 분산물 또는 건조상태의 귀금속 미립자를 그대로 이용하여도 좋다. 수중, 유기용매 중 또는 물과 유기용매의 혼합물 중에 제조된 금속 미립자는 콜로이드 상태로 존재하고 있지만, 이 콜로이드 상태의 귀금속 분산물을 본 발명의 의약으로서 그대로 이용할 수 있다. 또한, 귀금속 미립자가 합쳐져서 클러스터를 형성한 수성의 현탁제를 본 발명의 의약으로서 이용하여도 좋다. 또한, 용매를 제거하는 것이 바람직한 경우에는 가열등의 조작에 의하여 용매를 제거해서 건조상태의 미립자를 수득할 수 있지만, 그 조작에 의하여 얻어진 건조 미립자를 본 발명의 의약으로서 이용하여도 좋다. 청량음료수로 백금 미립자를 포함하는 물(예를 들어「백금현수(白金玄水)」, 아이노벡스 주식회사)과 급성위장염 또는 만성위장카타르의 치료제로서 백금ㆍ팔라듐 콜로이드제제(「내복용 파프랄」, 주식회사 동양후생제약소) 등을 본 발명의 의약으로서 이용할 수도 있다.

또한, 본 발명의 의약은 당업자에게 주지의 방법에 따라 제조가능한 경구용 또는 비경구용의 의약조성물로서 투여할 수 있다. 경구투여에 적합한 의약용 조성물로서는 예를 들어, 정제, 캡슐제, 산제, 세립제, 과립제, 액제 및 시럽제 등을 들 수 있으며, 비경구투여에 적합한 의약조성물로서는 예를 들어, 주사제, 점적제, 좌제, 흡입제, 점안제, 점비제, 점이제, 연고제, 크림제, 경피흡수제, 경점막흡수제, 및 첩부제 등을 들 수 있다. 상기의 의약조성물은 유효성분인 귀금속 미립자와 함께 1종 또는 2종 이상의 제제용 첨가물을 이용해서 제조할 수 있다. 제제용 첨가물로서는 예를 들어, 부형제, 붕괴제 내지 붕괴보조제, 결합제, 윤택제, 코팅제, 색소, 희석제, 기제, 용해제 내지 용해보조제, 등강화제, pH조절제, 안정화제, 분사제 및 점착제 등을 들 수 있지만, 이것들은 의약용 조성물의 형태에 따라 당업자가 적절히 선택할 수 있다.

본 발명의 의약 투여량은 특별히 한정되지 않으며, 질환의 종류, 예방 및 치료의 목적, 환자의 연령, 체중, 증상 등에 따라 적절히 선택할 수 있지만, 예를 들어, 경구투여의 경우에는 성인 1일당 귀금속 미립자 중량으로서 0.001 내지 1,000mg 정도의 범위에서 이용할 수 있다.

도 1은 근위축성 측색경화증의 모델 마우스에 본 발명의 의약을 투여하여, 마우스의 운동량을 적외선 센서로 측정한 결과를 도시한 그래프이다. ○은 정상 마우스, ■은 본 발명의 의약 투여군(0.5㎍/kg), ●은 의약 비투여군(병태 마우스)의 결과를 도시한다.

도 2는 실시예 4에서의 부종율(浮腫率)에 대한 본 발명의 의약의 결과를 도시한 그래프이다. ○은 대조군(생리식염수 투여군), ●은 본 발명의 의약 투여군(5μmol/kg/day)의 결과를 도시한다.

도 3은 실시예 4에서의 골파괴에 대한 본 발명의 의약의 효과를 도시한 그래프이다.

도 4는 실시예 7에 있어서 UVA(20J/cm²) 조사 10일째의 마우스의 귓바퀴 모습을 도시한 사진이다. 좌측은 양성 대조의 결과를 나타내고, 우측은 본 발명의 의약을 도포한 마우스의 결과를 나타낸다.

이하, 실시예에 의하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하지만, 본 발명의 범위가 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

아릴 냉각관과 삼방콕크를 접속한 100ml 2구 환저 플라스크에 폴리(1-비닐-2-피롤리돈)(와코순약주식회사 제품, 0.1467g)을 넣고, 증류수 23ml로 용해하였다. 이 용액을 10분간 교반한 후, 염화백금산(H₂PtCl₆ㆍ6H₂O, 와코순약주식회사 제품)을 증류수에 용해한 1.66 x 10^-2M 용액을 첨가해서 다시금 30분간 교반하였다. 반응계 내를 질소치환하여 특급에탄올 25ml를 첨가해서 질소분위기 하에서 100℃로 2시간 환류하였다. 반응액의 UV를 측정하여, 백금이온피크의 소실과 금속고체 특유의 산란에 의한 피크의 포화를 확인함으로써 환원반응을 종료하였다. 유기용매를 감압증류로 제거하여 백금 미립자(평균입경수 2.4±0.7nm)를 포함하는 백금 콜로이드수(水)를 조제하였다. 이하의 실시예에서 이 백금 콜로이드수는 PVP-Pt로 표시하였다. 동일한 방법으로, 폴리(1-비닐-2-피롤리돈) 대신에 폴리아크릴산 나트륨(알드리치사 제품, Pt에 대하여 단위 유닛으로 125배)을 이용하여, 평균입경 2.0±0.4nm의 백금 콜로이드수를 조제하였다. 이하의 실시예에서, 이 백금 콜로이드수를 PAA-Pt로 표시한다.

실시예 2

6 내지 8주 된 B6SJL-TgN(SODIG93A)GUr 마우스(근위축성 측색경화증의 모델 마우스)에게 0.66μM, 0.066μM 또는 6.6nM의 상기 백금콜로이드수(PVP-Pt)를 자유롭게 주면서 사육하였다. 16주쯤부터, 통상의 물로 사육한 대조군의 마우스에서는 근위축성 측색경화증의 전형적인 증상이 나타나고, 뒷다리가 움직이지 않게 되고, 앞다리로만 기어가게 되었다. 한편, 백금 콜로이드수를 투여한 마우스에서는 투여량에 비례하여 상기 증상의 개선이 확인되었다. 6.6nM 투여군의 마우스에서는 보행시 뒷다리가 비틀거리는 이상(異常)이 보였지만, 보행 자체는 가능하였다. 0.066μM 투여군의 마우스에서는 뒷다리에 떨림이 확인되었지만, 꽤 빨리 일어설 수 있는 상태이고, 0.66μM 투여군의 마우스에서는 어떠한 증상도 보이질 않고, 정상 마우스와 동일한 보행 능력을 나타내었다.

실시예 3

3주 및 7주 된 B6SJL-TgN(SODIG93A)GUr 마우스에게 0.5μM의 상기 백금 콜로이드수(PVP-Pt, 용량은 백금투여량)를 투여하고, 적외선 센서를 이용하여 마우스의 수신(受信)의 이동횟수를 측정하였다. 이동횟수가 적은 것은 근위축성 측색경화증의 발증에 의하여 운동량이 저하한 것을 의미하고 있다. 백금 콜로이드수 대신에 물을 투여한 B6SJL-TgN(SODIG93A)GUr 마우스를 비교군(병태 마우스)으로 하여, 정상 마우스와 비교하였다. 7주 된 마우스를 이용한 실험에 대한 결과를 도 1에 나타내었다. 본 발명의 의약을 투여한 군에서는, 근위축성 측색경화증의 발증에 의한 운동량 저하가 유의하게 억제되고 있었다.

실시예 4

랫(일본 찰스리버, LEW/CrJ계, 100 내지 130g, 나이: 7주)를 5일간의 검역기간 및 그 후 8일간의 순화기간 후에 실험에 사용하였다. 동물은 실온 20 내지 26℃, 습도 40 내지 70%, 명암 각 12시간의 조건에서 고형 사료(CRF-1, 오리엔탈 효모공업 주식회사)로 자유롭게 섭식하도록 하여 사육하였다. 기염용(起炎用) 시약(Mycobacterium butyricum, Difco사 제품)을 유동 파라핀으로 1.0mg/0.1mL의 농도가 되도록 현탁하고, 에테르 마취하에서 27G 주사바늘(망토바늘)이 달린 폴리프로필렌제 일회용 주사기를 이용하여 좌측 뒷다리 척피(蹠皮) 내에 투여하였다. 기염 용 시약은 약제 투여개시일의 약제 투여전에 마리당 0.1mL을 투여하였다.

본 발명의 의약으로서 상기의 백금 콜로이드수(PAA-Pt)를 25G 주사바늘이 달린 폴리프로필렌제 일회용 주사기를 이용하여 꼬리정맥 내에 투여하였다. 투여횟수는 1일 1회로 하고, 투여 개시일을 투여 1일로 해서 투여기간은 총 20일이었다. 투여량은 0.05μmol/kg, 0.5μmol/kg 및 5μmol/kg이었다. 대조군으로서 생리식염수를 동일하게 꼬리정맥 내에 투여하였다.

동물은 각 군당 10마리로 하고, 투여 제 1, 2, 4, 7, 9, 11, 14, 16 및 18일의 약제 투여전 및 부검일에 마우스ㆍ랫 뒷다리 척부종(蹠浮腫) 용적측정장치(TK-101CMP, 유한회사 유니콤)를 이용하여 양쪽 뒷다리 척부종 용적을 측정하였다. 투여 1일 및 각 측정일의 족척(足蹠)용적에서 이하의 식을 이용하여 부종율을 산출하였다.

부종율(△%) = (각 측정일의 족척용적(mL) - 투여 1일의 족척용적(mL)) ÷ 투여 1일의 족척용적(mL) × 100

부검일에 에테르마취로 복대동맥으로부터 방혈치사시킨 후, 양쪽 뒷다리를 대퇴골 중앙부에서 절단하여 20% 중성 완충 포르말린으로 고정하였다. 고정 후, 연(軟) X선 촬영장치(SOFROM SRO-505C, 주식회사 소프론)로 연X선 사진을 촬영하였다. 골 파괴는 투사기 상에 비춰진 연X선 필름을 관찰하여 파괴의 정도에 대하여 점수를 매겼다. 점수는 종골(踵骨), 족근골(足根骨), 중족골(中足骨) 및 경골(脛骨)에 대하여 이하의 판정기준에 따라 판정하여 4 부위의 합계 점수를 구하였다.

골파괴 점수

0 : 정상

1 : 경도의 골파괴, 밀도저하

2 : 중등도의 골파괴, 밀도저하

3 : 강도 골파괴 및 변형

도 2에서는 부종율에 대한 본 발명의 의약 효과를 나타내었다. 또한, 도 3에는 골파괴에 대한 본 발명의 의약 효과를 나타내었다. 본 발명의 의약이 부종 및 골파괴에 대하여 우수한 치료 효과를 가지고 있는 것이 명확하다. 병리소견에서는 환부의 염증 세포의 침윤은 약제 투여군과 대조군과의 사이에 차이가 확인되지 않았지만, 부종, 농양(膿瘍), 골파괴 등의 조직파괴상에서 약제 투여군은 대조군에 비해서 현저한 개선이 확인되었다.

실시예 5

토끼(키타야마 레베스 주식회사, Kb1:JW(SPF)계, 2.00 내지 2.80kg, 나이: 12주)를 5일간의 검역 및 2일 이상의 순화기간을 거친 후, 체중측정과 일반상태를 관찰하여 일반상태 및 체중추이에 이상이 발견되지 않은 동물을 실험에 사용하였 다. 동물은 실온 20 내지 26℃, 습도 40 내지 70%, 명암 각 12시간의 조건에서 고형 사료(RC4, 오리엔탈 효모공업 주식회사)를 1일 100g의 비율로 급식하여 사육하였다.

13 내지 16주 된 토끼에게 펜토바르비탈 나트륨을 귓바퀴 정맥에서 30mg/mL/kg으로 투여해서 마취한 후, 등 부위에 고정하였다. 기관에 기관카뉼레를 삽입한 후, 인공호흡기(NEW ENGLAND INSTRUMENTS INC., 141A)로 접속하여(설정조건: 40 내지 60회/분, 20 내지 30mL/회, 마취상황에 따라 범위 내에서 조정), 호흡을 유지시켰다. 혈압은 대퇴동맥에 삽입한 동맥카뉼레에 연결한 압(壓)트랜스듀서(TP-300T, 일본 코덴공업 주식회사)를 끼워서, 왜(歪)압력용 앰프(AP-601G, 일본 코덴공업 주식회사) 및 혈압측정 유닛(AP-611G, 일본 코덴공업 주식회사)으로 유도하여 레코더(WT-645G, 일본 코덴공업 주식회사) 상에 기록하였다. 심전도(제 2유도)는 침전극으로부터 생체전기용 앰프(AB-621G, 일본 코덴공업 주식회사)로 유도하여, 레코더(WT-645G, 일본 코덴공업 주식회사) 상에 기록하였다.

처치한 토끼의 좌측 제 4근골과 제 5근골 사이를 절개하여 개흉하였다. 심장의 막을 절개한 후, 심장을 흉곽 외로 노출시켜 좌측 관상동맥지(LCA)를 침 달린 봉합사(3/8 원형환침, 일본상사 주식회사)를 이용해 묶고 30분간 폐쇄(허혈)하였다. 폐쇄 30분 후에 묶여있던 봉합사를 풀고(봉합사는 LCA를 즉시 묶을 수 있도록 그대로 흉강 내에 남겨둔다), 혈관을 개방(재관류)하였다. 이 60분 후에 폐흉하여 동물을 사육실 내로 되돌려 놓았다.

개방 약 48시간 후에 펜토바르비탈로 상기와 동일하게 마취한 후, 동물을 총 경동맥으로부터 방혈치사시켰다. 개흉하여 심장을 적출하고 심장을 생리식염수로 세정하였다. 세정한 심장의 LCA를 묶어서 대동맥의 절개구로부터 0.5% 에반스 블루 1 내지 1.5mL 정도로 관류염색하였다. 염색 후, 심장을 좌심실만 심근을 심기부(心基部)에 평행으로 심돌부(心突部)로부터 5mm 간격으로 절개한 후(각 개체에 대하여 6 절개), 1% TTC 인산 완충액이 든 비이커에 넣고, 37℃로 설정한 항온조 내에서 10분간 가온하였다. 가온한 후, 절개된 심근을 사진 촬영하여, 비허혈영역(에반스 블루 염색영역: A), 허혈부 비경색영역(에반스 블루 비염색영역 중 TTC 염색영역: B) 및 경색영역(에반스 블루 비염색영역 중 TTC 비염색영역: C)으로 절단 분리하여, 각각의 중량을 측정하였다. 측정한 중량으로부터 전 좌심실 중량(A+B+C의 6 절개부분의 합계)에 대한 허혈영역 중량(B+C의 6 절개부분의 합계)의 비율 및 허혈영역 중량에 대한 경색영역 중량(C의 6 절개부분의 합계)의 비율을 계산하였다. 1% TTC 인산 완충액의 제조는 인산 완충정을 주사용수로 용해한 인산 완충액으로 TTC가 1%(w/v)가 되도록 용해하였다. 0.5% 에반스 블루의 제조는 에반스 블루를 주사용수로 0.5%(w/v)가 되도록 용해하였다.

PAA-Pt는 생리식염수로 희석해서 정맥 내에 투여하였다. 재관류 5분전부터 약제를 대퇴정맥으로부터 단회투여하고(0.5μg/kg), 계속해서 재관류 종료시까지 지속투여하였다(0.5μg/kg/hr). 투여액 양은 단회투여에서는 0.1mL/kg로 하고, 지속투여에서는 1mL/kg/hr로 하였다. 또한, 재관류 종료후 24시간 후에 다시 약제를 단회투여하였다. 대조군으로서 생리식염수를 상기 약제 투여군과 동일하게 단회투여 및 지속투여하고(투여액 양은 단회투여시 0.1mL/kg, 지속투여시 1mL/kg/hr), 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 표 1의 결과에서 본 발명의 의약이 심근허혈 재관류장해 모델에 있어서의 경색영역 및 허혈영역을 유의하게 감소시키고 있는 것이 명확하며, 특히 5μmol/kg 투여군에서는 극히 현저한 작용이 확인되었다.

표 1

실시예 6

랫(일본 찰스리버, Crj:CD(SD)IGS계, 140~210g, 수컷, 나이: 6주)를 5일간의 검역 및 그 후 2일간의 순화 후 실험에 사용하였다. 동물은 실온 20 내지 26℃, 습도 40 내지 70%, 명암 각 12시간의 조건에서 고형 사료(CRF-1, 오리엔탈 효모공업 주식회사)로 자유롭게 섭식하도록 하여 사육하였다. 본 발명의 의약으로서, 상기의 백금 콜로이드수(PAA-Pt)를 25G 주사바늘이 달린 폴리프로필렌제 일회용 주사기를 이용해서 1일 1회 꼬리정맥 내(2mL/kg) 또는 경구적(5mL/kg)으로 투여하였다. 대조군으로서 생리식염수를 동일하게 꼬리정맥 내에 투여하였다.

검체를 투여하고 30분 후에 구속용 스테인레스제 케이지(4.5×4.5×18cm, 10개 연결)에 넣고, 23℃±1의 수조 안에 흉부검상돌기(胸部劍狀突起)까지 담궜다. 물에 담근지 7시간 후에 경추탈구로 랫을 안락사시켜 위를 적출하였다. 적출한 위는 내부에 생리식염수를 10mL 충진하고, 다시 그것을 1% 포르말린에 담궈 다음 날까지 고정하였다. 고정한 후, 대만부위를 따라 절개하고 생리식염수로 가볍게 세정한 다음, 궤양의 길이를 측정하였다. 단경/장경 중 장경을 계측하여 총합을 그 개체의 값으로 하였다.

궤양의 장경은 각 군마다 평균치±표준오차(mm)를 산출하였다. 유의차 검정은 투여경로마다 매체군과 PAA-Pt군 사이에서 비교하고, F검정 후, 등분산의 경우는 Student의 t검정을, 부등분산의 경우는 Aspin-Welch의 t검정을 실행하였다. 또한, 유의수준은 5%미만을 유의로 하고, 5%미만(P<0.05)과 1%미만(P<0.01)으로 나눠서 표시하였다. 구속 3시간에 있어서 생리식염수 투여군의 궤양직경(평균치)은 19.86mm(표준편차 8.41mm)이며, PAA-Pt 투여군의 궤양직경(평균치)은 7.27mm(표준 편차 2.57mm, p=0.00566353)이었다. 또한, 구속 7시간에 있어서 생리식염수 투여군의 궤양의 직경(평균치)은 43.88mm(표준편차 11.96mm)이며, PAA-Pt 투여군의 궤양의 직경(평균치)은 19.84mm(표준편차 7.50mm, p=0.00191338)이었다.

실시예 7

BALB/c계 마우스를 각 군당 4마리씩 이용하고 뉴퀴놀론계 합성 항균제인 로메플록사신(LFLX, 광감작을 일으키는 것이 알려져 있다)을 이용하여, 광감작에 의한 피부염에 대한 본 발명의 의약의 작용을 검토하였다(참조: Tokura, Y. et al., J. Immunol., 160, pp.3719-3728, 1998; Watanabe, H., et al., J. Biol. Chem., 279, pp.1676-1683, 2004). LFLX 2mg/0.2ml(i.p.)을 투여한 마우스에게 UVA(12J/cm²)를 복부 체모부분에 조사(照射)하여 광감작하였다. 2%의 카르복시비닐폴리머를 포함하는 수용액에 1mM의 PAA-Pt를 첨가해서 젤 연고를 조제하고, 감작 다음 날로부터 5일째(5일째는 광 조사후에 도포)까지 0.3g/ear을 양쪽 귓바퀴에 도포하였다. 양성 대조군에는 2%(w/w) 카르복시비닐폴리머만을 도포하였다. 5일째에 2mg/0.2ml의 LFLX를 복강내(i.p.) 투여하고 UVA(20J/cm²)를 양쪽 귓바퀴에 조사하였다. 비감작군에 대해서는 5일째에 2mg/0.2ml(i.p.)의 LFLX 투여와 UVA(20J/cm²) 조사만을 행하였다. 그 결과, 조사 24시간 후(6일째)의 백금 콜로이드 도포군에서 양성 대조군과 비교해서 유의하게 귓바퀴의 종창(腫脹)이 약함을 보 였다. 또한 UVA(20J/cm²) 조사 10일째의 발적(發赤)을 관찰한 바, 백금 콜로이드 도포군에서 명확하게 귓바퀴의 홍반, 종창은 조금씩 나아지고 있었다(참조: 도 4).

표 2

마우스군	귓바퀴 종창(평균치±SEM, ㎛)
양성 대조군	52.5±4.5
PAA-Pt 도포군	26.9±4.1*
음성 대조군	11.3±3.5

*: p<0.001 (n=8)

실시예 8

BALB/c계 마우스를 각 군당 4 내지 6마리 이용하고 시험개시일 및 그 다음 날에 1% TCSA(3,3',4',5-테트라클로로살리실아닐리드, 올리브 오일 아세톤(1:4) 혼합물)를 마우스의 등 부위 체모 부분에 100㎕ 도포하고, 도포부분에 UVA(16J/cm²)를 조사해서 광감작하였다(참조: Suzuki K. et al., J. Dermatol. Sci., 23, pp.138-144, 2000). 감작 다음 날로부터 5일째(5일째는 광 조사후에 도포)까지 0.3g/ear을 양쪽 귓바퀴에 도포하고 귓바퀴에 하프텐(haptene) 도포하였다. 양성 대조군에는 2%(w/w) 카르복시비닐폴리머 만을 도포하였다. 5일째에 마우스의 양쪽 귓바퀴에 0.1% TCSA 40㎕를 도포하고, 40cm의 거리로부터 UVA(16J/cm²)를 조사하였다. 비감작군에 대해서는 5일째에 40μl의 0.1% TCSA의 도포와 UVA(16J/cm²)의 조 사만을 행하였다. 조사 24시간 후에 귓바퀴의 두께를 측정하였다. 그 결과, 백금 콜로이드 도포군에 있어서 광접촉피부염 반응은 양성 대조군과 비교해서 약했다.

표 3

마우스군	귓바퀴 종창(평균치±SEM, μm)
양성 대조군(n=4)	36.2±5.5
PAA-Pt 도포군(n=6)	14.2±4.0*
음성 대조군(n=4)	9.2±3.2

*: p<0.05 v.s. 양성대조

실시예 9

Kbl:JW계 토끼(SPF, 수컷, 체중 1.80 내지 2.70kg, 키타야마 라베스 주식회사)를 5일간의 검역기간, 그 후 9일간의 순화기간을 두어 사육하고, 이 기간동안 매일 체중측정 3회 및 일반상태를 관찰하였다. 사료로는 고형 사료(RC4, 오리엔탈 효모공업 주식회사)를 이용하였다. 그 후, 0.5% 콜레스테롤 사료(0.5% 콜레스테롤, 3% 피넛 오일, 3% 코코넛 오일함유 사료)로 14일간 순화시켰다. 콜레스테롤 총 수치가 양호하게 상승한 동물을 선별해서, 각 군당 체중과 콜레스테롤 총 수치의 평균이 거의 같아지도록 1군당 10마리씩 4군으로 나누었다. 동물은 실온 20 내지 26℃, 습도 40 내지 70%, 명암 각 12시간(조명: 오전 6시~ 오후 6시), 환기횟수 12회/시(필터에 의하여 제균한 신선공기)로 유지시킨 사육실에서 사육하였다. 동물은 알루미늄제 케이지(W:350×D:580×H:350mm, 자동세정 및 자동급수장치부)를 이용하여 개별사육하였다. 급사량은 전 기간 100g/마리/1일로 하였으며, 음료수는 수도물을 자동급수장치를 이용해서 자유롭게 섭취하도록 하였다.

PAA-Pt는 생리식염수로 희석해서 주사바늘(23G, 테르모 주식회가)이 달린 폴리프로필렌제 일회용 주사기(테르모 주식회사)를 이용하여 귓바퀴 정맥 내에 1일 1회 투여하였다. 투여기간은 70일간(10주간)으로 하였다. 콜레스테롤 부하전, 투여개시전, 투여 4주, 7주 및 10주 후에 전일로부터 약 18시간 단식시켜 귓바퀴 동맥으로부터 채혈관(테르모 주식회사, VP-AS054)에 약 4mL 채혈해서 냉각원심기(CF 8DL, 히타치코우키 주식회사)로 원심분리(약 4℃, 3000rpm, 15분간)한 혈청에 대하여 총 콜레스테롤(TC, CODㆍPOD법), 트리글리세라이드(TG, GPOㆍHDAOS법), HDL-C(직접법) 및 과산화지질(LPO, 야기(八木)별법)을 측정하였다.

투여기간 종료 다음 날에 펜토바르비탈 나트륨(넨브탈 주사액, 다이니뽄세이야꾸 주식회사) 마취 하에서 개복하여 복대동맥으로부터 방혈치사 시킨후, 개흉하여 부검소견을 기록하였다. 그 후, 대동맥(대동맥 기시부(起始部)로부터 장골동맥)을 적출하여 10% 중성 완충 포르말린으로 고정한 후, oil Red o 염색을 하였다. 염색 후의 대동맥은 디지털 카메라(Finepix S1 Pro, 후지사진필름주식회사)를 이용해서 촬영하고, 화상해석에 따라 모든 대동맥 면적에 대한 적염부위의 비율을 산출하였다. 수득된 수치는 각 군에서 평균치±표준편차를 산출하였다. 유의차 검정은 매체군과 각 투여군 사이에서 실행하고 위험율 5% 미만을 유의로 한 검정법은 Bartlett의 검정 후, 등분산의 경우는 Dunnett 검정을, 부등분산의 경우는 Steel 검정을 이용하였다. 생리식염수 투여군에서는 동맥경화 손상역(%)의 평균치는 45.5%(p=13.5)이었다. 백금 콜로이드 투여군에서는 동맥경화 손상역(%)의 평균치는 0.005μmol/kg 투여군에서 18.7%(p=6.7), 0.05μmol/kg 투여군에서 19.8%(p=4.0) 및 0.5μmol/kg 투여군에서 19.2%(p=4.1)이었다.

본 발명의 의약은 근위축성 측색경화증과 알츠하이머병 등의 신경변성 질환, 만성관절 류마티스 등의 류마티스성 질환, 심근경색 등의 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증의 예방 및/또는 치료에 대한 의약으로서 유용하다.

Claims

신경변성 질환, 류마티스성 질환, 허혈성 심질환, 스트레스성 궤양, 피부염, 동맥경화증 및 고지혈증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한, 귀금속 또는 귀금속을 포함하는 합금의 미립자를 유효성분으로 함유하는 의약.
제 1항에 있어서,

상기 질환은 신경변성 질환인 것을 특징으로 하는

의약.
제 2항에 있어서,

상기 신경변성 질환은 근위축성 측색경화증, 알츠하이머병 또는 파킨 슨 병인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항에 있어서,

상기 질환은 류마티스성 질환인 것을 특징으로 하는

의약.
제 4항에 있어서,

상기 류마티스성 질환은 만성관절 류마티스인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항에 있어서,

상기 질환은 허혈성 심질환인 것을 특징으로 하는

의약.
제 6항에 있어서,

상기 허혈성 심질환은 급성기의 심근경색인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항에 있어서,

상기 질환은 스트레스성 궤양인 것을 특징으로 하는

의약.
제 8항에 있어서,

상기 스트레스성 궤양은 스트레스성 위궤양 또는 스트레스성 십이지장 궤양인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항에 있어서,

상기 질환은 피부염인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항에 있어서,

상기 질환은 동맥경화증인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항 내지 제 11항에 있어서,

상기 귀금속은 루테늄, 로듐 및 백금으로 구성되는 군으로부터 선택되 는 1종 또는 2종 이상의 귀금속인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항 내지 제 11항에 있어서,

상기 귀금속은 백금인 것을 특징으로 하는

의약.
제 1항 내지 제 13항에 있어서,

상기 귀금속의 미립자는 평균입경 10nm 이하의 백금 콜로이드인 것을 특징으로 하는

의약.