KR20040054729A - 인간 글루카곤-유사-펩티드-1 모방체, 및 당뇨병 및 이와관련된 증상의 치료에 있어서 이의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 천연 GLP-1 펩티드의 생물학적 활성을 모방하여 GLP 활성과 관련된 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는데 유용한 신규의 인간 글루카곤-유사 펩티드-1 (GLP-1) 펩티드 모방체를 제공한다. 또한, 본 발명은 II형 당뇨병에서 인슐린 분비를 자극시킬 뿐만 아니라, 그밖의 이로운 인슐린 분비 반응을 생성하는 신규의 화학적으로 개질된 펩티드를 제공한다. 이러한 합성 펩티드 GLP-1 모방체는 단백질 가수분해에 대해 증가된 안정성을 나타내기 때문에, 경구 또는 비경구 투여를 위한 이상적인 치료적 후보자가 될 수 있다.

Description

인간 글루카곤-유사-펩티드-1 모방체, 및 당뇨병 및 이와 관련된 증상의 치료에 있어서 이의 용도 {HUMAN GLUCAGON-LIKE-PEPTIDE-1 MIMICS AND THEIR USE IN THE TREATMENT OF DIABETES AND RELATED CONDITIONS}

GLP-1은 글루코스 대사 및 위장의 분비 및 대사에서 조절 기능을 가진 중요한 소화관 호르몬이다. 인간 GLP-1은 예비프로글루카곤 (preproglucagon)으로부터 발생되는 30개의 아미노산 잔기 펩티트이며, 예를 들어 말단 회장, 췌장 및 뇌의 L-세포에서 합성된다. 예비프로글루카곤을 프로세싱 (processing)하면 GLP-1 (7-36) 아미드가 생성되고, L-세포에서는 GLP-2가 주로 생성된다. GLP-1은 일반적으로 음식 섭취에 반응하여 분비되고, 특히 탄수화물 및 지질이 GLP-1 분비를 자극시킨다. GLP-1은 인슐린 방출에 대해 매우 중요하고 효능있는 자극제로서 인정되어 왔다. GLP-1는 글루카곤 농도를 낮추고, 위배출 시간을 늦추고, 인슐린 생합성을자극하고, 인슐린 민감도를 강화시킨다 (문헌 [Nauck, 1997, Horm. Metab. Res. 47: 1253-1258] 참조). 또한 GLP-1은 손상된 글루코스 내성을 가진 환자에서 B-세포의 글루코스 감지 능력 및 대응 능력을 강화시킨다 (문헌 [Byrne, Eur. J. Clin. Invest., 28: 72-78, 1998] 참조). 인간에서 GLP-1의 인슐린 분비 작용은, 부분적으로는 증가된 인슐린 농도에 의해 그리고 부분적으로는 강화된 인슐린 민감도에 의해 글루코스 대사율을 증가시킨다 (문헌 [D'Alessio, Eur. J. Clin. Invest., 28: 72-78, 1994] 참조). GLP-1의 상기한 약리학적 특성은 GLP-1을 II형 당뇨병의 치료에 매우 바람직한 치료제로 만든다. 또한, 최근의 연구는 대략 초생리학적 양의 GLP-1의 주입이 정상 환자에서 포만감을 상당히 강화시켜 음식 섭취를 감소시켰다는 것을 보여주었다 (문헌 [Flint, A., Raben, A., Astrup, A. and Holst, J. J., J. Clin. Invest, 101: 515-520, 1998]; [Gutswiller, J. P., Goke, B., Drewe, J., Hildebrand, P., Ketterer, S., Handschin, D., Winterhaider, R., Conen, D and Beglinger, C. Gut 44: 81-86, 1999] 참조). 또한 음식 섭취 및 포만감에 대한 효과가 비만증 환자에서도 유지되는 것으로 보고되었다 (문헌 [Naslund, E., Barkeling, B., King, N., Gutniak, M., Blundell, J. E., Holst, J. J., Rossner, S., and Hellstrom, P. M., Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord., 23: 304-311, 1999] 참조). 상기한 연구에서는 GLP-1이 위배출에도 현저한 영향을 미칠 것이라고 추측하였다. 위배출은 식후 글루코스 운동을 야기시킨다. 또한 GLP-1이 인슐린 분비의 자극 이외에, B-세포 신생을 자극시키면서 전사 인자 IDX-1의 발현을 자극시켜 당뇨병을 효과적으로 치료 및(또는) 예방하는 약제가 될 수 있다는 것이 제시되었다 (문헌 [Stoffers, D. A., Kieffer, T. J. Hussain, M. A., Drucker, D. J., Bonner-Weir, S., Habener, J. F. and Egan, J. M. Diabetes, 40: 741-748, 2000] 참조). 또한 GLP-1이 위산 분비를 억제시키고 (문헌 [Wettergren, A., Schjoldager, B., Mortensen, P. E., Myhre, J., Christiansen, J., Holst, J. J., Dig. Dis. Sci., 38: 665-673, 1993] 참조), 위궤양에 대해 보호 작용을 할 수 있다는 것이 제시되었다.

GLP-1은 인크레틴 (incretin) 호르몬, 예를 들어 식사-유도된 인슐린 분비를 강화시키는 장 호르몬이다 (문헌 [Holst, J. J., Curr. Med. Chem., 6: 1005-1017, 1999] 참조). 이것은 프로글루카곤을 코딩한 글루카곤 유전자의 생성물이다. 이 유전자는 췌장의 A-세포에서 뿐만 아니라, 장점막의 내분비선 L-세포에서도 발현된다. 프로글루카곤은 160개의 아미노산을 함유한 펩티드 (단백질)이다. 프로글루카곤을 더 프로세싱하면 a) 글루카곤, b) N-말단, 아마도 비활성인 단편, 및 c) 보통 "주요 프로글루카곤 단편"으로 칭해지는 거대 C-말단 단편이 발생된다. 이 단편은 생물학적으로 불활성일 것으로 여겨진다. 이 단편은 췌장 및 소화관의 L-세포에 모두 존재하지만, 보통 GLP-1 및 GLP-2로서 칭해지는 2개의 고도의 동종성 펩티드를 생성하는 "주요 프로글루카곤 단편"의 파괴 생성물은 장에서만 관찰된다. 이러한 2개의 펩티드는 중요한 생물학적 활성을 가지고 있다. 그러한 것으로서, L-세포에 존재하는 GLP-1의 아미노산 서열은 프로글루카곤의 78-107 부분과 동일하다.

본 발명은 천연 펩티드의 생물학적 활성을 복제하여 당뇨병 증상을 경감시키는데 유용한 신규의 GLP-1 펩티드 모방체를 제공한다.

GLP-1-형 분자의 사용을 포함하는 현행 치료법은 이러한 펩티드의 혈청 반감기가 매우 짧기 때문에 상당한 문제점이 존재한다. 예를 들어, GLP-1 (7-37)은 혈청 반감기가 겨우 3 내지 5분이다. 따라서 광범위한 약력학적 프로필을 가진 생물학적으로 활성인 GLP-1 모방체에 대한 중대한 필요성이 존재한다.

<발명의 개요>

본 발명에 따라, 하기 화학식 I의 구조를 갖는 합성 단리된 폴리펩티드가 제공된다.

상기 식에서,

X_aa1-9는 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

Y 및 Z는 아미노산 잔기이고;

여기서, Y 및 Z의 알파-탄소 원자에서 치환체 중 하나는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 상기 1차 치환체 헤테로시클릴알킬은 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 또는 헤테로아릴기로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고; 임의의 상기 1차 또는 2차 치환체는 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 또는 포스포닉기 중 하나 이상으로 더 치환될 수 있고; 여기서, 상기 1차 또는 2차 치환체는 공유 결합에 의해 임의로 가교되어 하나 이상의 서로 융합된 시클릭 또는 헤테로시클릭 계를 형성할 수 있고;

여기서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

여기서, Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

A 및 B는 임의로 존재하고;

여기서, A가 존재하면, A는 수소, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 약 1 내지 약 15개 함유하는 펩티드, R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂이고;

여기서, 상기 R은 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;

여기서, 상기 R₄및 R₅는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;

여기서, X_aa1의 알파-아미노기는 수소 또는 알킬기로 치환되고, 상기 알킬기는 임의로 A와 고리를 형성할 수 있고;

여기서, B가 존재하면, B는 OR₁, NR₁R₂, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 15개, 바람직하게는 1 내지 10개, 보다더 바람직하게는 1 내지 5개 함유하고, C-말단에서 카르복스아미드, 치환된 카르복스아미드, 에스테르, 유리 카르복실산 또는 아미노-알코올로서 종결되는 펩티드이고;

여기서, 상기 R₁및 R₂는 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴옥시알킬로부터 독립적으로 선택된다.

Y 및 Z의 알파-탄소 원자 상 바람직한 치환체는 헤테로아릴아릴메틸, 아릴헤테로아릴메틸, 또는 비페닐알라닌 잔기를 형성하는 비페닐메틸로 구성된 군으로부터 선택되고, 이중 임의의 치환체가 또한 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬,머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 및 포스포닉기 중 하나 이상으로 임의로 치환된다.

추가의 실시양태에는, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 수소, 메틸 또는 에틸로 치환되고; Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 수소, 메틸 또는 에틸로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드가 포함된다.

추가의 실시양태에는,

X_aa1이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 및 아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체이고, 상기 1차 치환체는 헤테로아릴 또는 헤테로시클릴로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa2가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 시클로알킬이고, 상기 알킬기는 임의로 X_aa2의 질소와 고리를 형성할 수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa3이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복시알킬, 비스-카르복시알킬, 술포닐알킬, 헤테로알킬 및 머캅토알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa4가, 알파-탄소가 치환되지 않거나, 또는 알파-탄소에서 치환체 중 하나가 아미노알킬, 카르복시알킬 헤테로아릴알킬 및 헤테로시클릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa5가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 히드록시알킬이고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa6이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릴, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬기로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa7이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 히드록실알킬기인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa8이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 히드록실알킬, 헤테로아릴알킬 및 카르복스아미도알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

X_aa9가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복실알킬, 비스-카르복실알킬, 카르복실아릴, 술포닐알킬, 카르복실아미도알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

A가 수소, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 약 1 내지 약 5개 함유하는 펩티드, R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂인 상기한 바와 같은 단리된 폴리펩티드를 포함한다.

단리된 펩티드는

X_aa1이 L-His, D-His, L-N-메틸-His, D-N-메틸-His, L-4-티아졸릴Ala 및 D-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa2가 L-Ala, D-Ala, L-Pro, Gly, D-Ser, D-Asn, L-N-메틸-Ala, D-N-메틸-Ala, L-4-티오Pro, L-Pro(t-4-OH), L-2-Pip, L-2-Azt, Aib, S- 또는 R-Iva 및 Acc₃으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa3이 L-Glu, L-N-메틸-Glu, L-Asp, D-Asp, L-His, L-Gla, L-Adp, L-Cys 및 L-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa4가 Gly, L-His, L-Lys 및 L-Asp로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa5가 L-Thr, D-Thr, L-Nle, L-Met, L-Nva 및 L-Aoc로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa6이 L-Phe, L-Tyr, L-Tyr(Bzl), Tyr(3-NO₂), L-Nle, L-Trp, L-Phe(펜타-플루오로), D-Phe(펜타-플루오로), Phe(2-플루오로), Phe(3-플루오로), Phe(4-플루오로), Phe(2,3-디-플루오로), Phe(3,4-디-플루오로), Phe(3,5-디-플루오로), L- Phe(2,6-디-플루오로), Phe(3,4,5-트리-플루오로), Phe(2-요오도), Phe(2-OH), Phe(2-O메틸), Phe(3-O메틸), Phe(3-시아노), Phe(2-클로로), Phe(2-NH₂), Phe(3-NH₂), Phe(4-NH₂), Phe(4-NO₂), Phe(4-메틸), Phe(4-알릴), Phe(n-부틸), Phe(4-시클로헥실), Phe(4-시클로헥실옥시), Phe(4-페닐옥시), 2-나프틸Ala, 2-피리딜Ala, L-4-티아졸릴Ala, L-2-Thi, L-α-Me-Phe, D-α-Me-Phe, L-α-Et-Phe, D-α-Et-Phe, L-α-Me-Phe(2-플루오로), D-α-Me-Phe(2-플루오로), L-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), L-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), L-α-Me-Phe(펜타-플루오로) 및 D-α-Me-Phe(펜타-플루오로)로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa7이 L-Thr, D-Thr, L-Ser 및 L-hSer로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa8이 L-Ser, L-hSer, L-His, L-Asn 및 L-α-Me-Ser로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

X_aa9가 L-Asp, L-Glu, L-Gla, L-Adp, L-Asn 및 L-His로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기인 것이 바람직하다.

추가의 실시양태에는

Y가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et),D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Et), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필), L-Bip(2-n-프로필, 4-OMe), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(2,3-디-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4-디-Et), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Et), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3-디-OMe), L-Bip(2,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2-Et, 4,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-Et, 4,5-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-CH₂0H, 4-OMe), L-Bip(2-Ac), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(4-NH-Ac), L-Bip(2,3-디-클로로), L-Bip(2,4-디-클로로), L-Bip(2,5-디-클로로), L-Bip(3,4-디-클로로), L-Bip(4-플루오로), L-Bip(3,4-디-플루오로), L-Bip(2,5-디-플루오로), L-Bip(3-n-프로필), L-Bip(4-n-프로필), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(3-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(4-tert-부틸), L-Bip(3-페닐), L-Bip(2-클로로), L-Bip(3-클로로), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(3-플루오로), L-Bip(2-CF₃), L-Bip(3-CF₃), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(3-NO₂), L-Bip(3-OCF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(3-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-OH), L-Bip(3-OH), L-Bip(4-OH), L-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe[4-(1-프로파르길)],L-Phe[4-(1-프로페닐)], L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(2-벤조(b)푸란)-Phe, 4-(4-디벤조푸란)-Phe, 4-(4-페녹사티인)-Phe, 4-(2-벤조(b)티오펜)-Phe, 4-(3-티오펜)-Phe, 4-(3- 퀴놀린)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 4-(4-(3,5-디메틸이속사졸))-Phe, 4-(2,4-디메톡시피리미딘)-Phe, homoPhe, Tyr(Bzl), Phe(3,4-디-클로로), Phe(4-요오도), 2-나프틸-Ala, L-α-Me-Bip 및 D-α-Me-Bip로 구성된 군으로부터 선택되고;

Z가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et), D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3,4,5-테트라-Me), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(2-페닐), L-Bip(4-페닐), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-CH₂-COOH), D-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(2'-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe(3-페닐), L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(3-피리딜)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 2-나프틸-Ala, 2-플루오레닐-Ala, L-α-Me-Bip, D-α-Me-Bip, L-Phe(4-NO₂) 및 L-Phe(4-요오도)로 구성된 군으로부터 선택되고;

A가 H, 아세틸, β-Ala, Ahx, Gly, Asp, Glu, Phe, Lys, Nva, Asn, Arg, Ser, Thr, Val, Trp, Tyr, 카프로락탐, L-Bip, L-Ser(Bzl), 3-피리딜Ala, Phe(4-Me), Phe(펜타-플루오로), 4-메틸벤질, 4-플루오로벤질, n-프로필, n-헥실, 시클로헥실메틸, 6-히드록시펜틸, 2-티에닐메틸, 3-티에닐메틸, 펜타-플루오로벤질, 2-나프틸메틸, 4-비페닐메틸, 9-안트라세닐메틸, 벤질, (S)-(2-아미노-3-페닐)프로필, 메틸, 2-아미노에틸 및 (S)-2-아미노프로필로 구성된 군으로부터 선택되고;

B가 OH, NH₂, Trp-NH₂, 2-나프틸Ala-NH₂, Phe(펜타-플루오로)-NH₂, Ser (Bzl)-NH₂, Phe(4-NO₂)-NH₂, 3-피리딜Ala-NH₂, Nva-NH₂, Lys-NH₂, Asp-NH₂, Ser-NH₂, His-NH₂, Tyr-NH₂, Phe-NH₂, L-Bip-NH₂, D-Ser-NH₂, Gly-OH, β-Ala-OH, GABA-OH 및 APA-OH로 구성된 군으로부터 선택된 것이 포함된다.

A가 존재하지 않으면, X_aa1은 R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂이고;

여기서, 상기 R은 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴옥시알킬 및 헤테로아릴알콕시알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;

여기서, 상기 R₄및 R₅는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된다.

B가 존재하지 않으면, Z는 OR₁, NR₁R₂또는 아미노-알코올이고;

여기서, 상기 R₁및 R₂는 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴옥시알킬로부터 독립적으로 선택된다.

X_aa1(적합할 경우), X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-알킬화된, 바람직하게는 N-메틸화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드가 바람직하다.

바람직하게는 단리된 폴리펩티드는 10-mer 내지 15-mer이고, 이러한 폴리펩티드는 GLP-1 수용체에 결합되어 GLP-1 수용체를 활성화시킨다.

또한 본 발명은 폴리펩티드 수용체 작용제의 활성을 모방하는 폴리펩티드의 제조 방법을 제공한다.

본 발명에 따라, 본 명세서에 기재된 단리된 합성 펩티드는 GLP 펩티드의 생물학적 활성을 모방할 수 있는 능력을 가지고 있고, 우선적으로 GLP-1을 모방한다. 이러한 합성 펩티드 GLP-1 모방체는, 바람직한 생체내 특성을 나타내기 때문에, 경구 또는 비경구 투여를 위한 이상적인 치료적 후보자가 될 수 있다.

또한 본 발명은 화학식 I에 따른 단리된 폴리펩티드 (여기서, 폴리펩티드는 글루카곤-유사-펩티드 유도체, 바람직하게는 글루카곤-유사-펩티드-1 유도체임)를제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물, 이러한 화합물을 이용한 제약 조성물, 및 이러한 화합물을 이용하는 방법을 제공한다. 특히, 본 발명은 치료적 유효량의 화학식 I의 화합물을 단독으로, 또는 제약학적으로 허용가능한 담체와 조합으로 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

추가로 본 발명은 치료적 유효량의 화학식 I의 화합물을 치료를 필요로 하는 포유류, 예를 들어 인간 환자에게 투여하는, 망막병증, 신경병증, 신장병증 및 상처 치료를 포함하는 당뇨병의 합병증을 비롯한, 당뇨병, 특히 II형 당뇨병, 및 인슐린 저항증 (손상된 글루코스 항상성), 고혈당증, 고인슐린혈증, 지방산 또는 글리세롤의 상승된 혈중 수치, 비만증, 고중성지방혈증을 비롯한 고지혈증, 증후군 X, 죽상경화증 및 고혈압과 같은 관련된 질환의 진행 및 발병을 치료 또는 지연시키는 방법, 및 고밀도 리포단백질 농도를 증가시키는 방법을 제공한다.

본 발명의 화합물은 단독으로, 본 발명의 다른 화합물과 조합으로, 또는 본 명세서에 기재된 치료 영역에서 활성인 하나 이상의 그밖의 약제와 조합으로 이용할 수 있다.

또한, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 및 항산화제, 고지혈증제 또는 항비만증제와 같은 하나 이상의 그밖의 종류의 치료제와의 조합물의 치료적 유효량을 치료를 필요로 하는 인간 환자에게 투여하는, 상기 및 이후에 정의되는 당뇨병 및 관련된 질환의 치료 방법을 제공한다.

본 출원은 2001년 10월 18일에 제출된 가출원인 미국 출원번호 제60/342,015호의 이점을 청구하며, 이는 본 명세서에 개시된 전문이 참고로 인용된다.

본 발명은 천연 펩티드의 생물학적 활성을 복제하고, GLP-1 천연 서열에 비해서 단백질 가수분해에 대한 안정성이 증가되어 당뇨병 증상을 경감시키는데 유용한, 신규의 인간 글루카곤-유사-펩티드-1 (GLP-1) 펩티드 모방체에 관한 것이다.

도 1은 래트에서 화합물 A 및 GLP-1의 정맥내 주입이 scGTT에서 혈장 글루코스에 미치는 영향을 도시하고 있다.

도 2는 래트에서 화합물 B 및 GLP-1의 정맥내 주입이 scGTT에서 혈장 글루코스에 미치는 영향을 도시하고 있다.

도 3은 래트에서 화합물 A 및 GLP-1의 피하 주사가 scGTT에서 혈장 글루코스에 미치는 영향을 도시하고 있다.

도 4는 래트에서 화합물 B 및 GLP-1의 피하 주사가 scGTT에서 혈장 글루코스에 미치는 영향을 도시하고 있다.

도 5는 래트에서 화합물 C의 피하 주사가 ipGTT 모델에서 혈장 글루코스에 미치는 영향을 도시하고 있다.

도 6은 래트에서 화합물 D의 피하 주사가 ipGTT 모델에서 혈장 글루코스에 미치는 영향을 도시하고 있다.

도 7은 래트에서 GLP-1의 피하 주사가 ipGTT 모델에서 혈장 글루코스에 미치는 영향을 도시하고 있다.

하기의 정의는 특별한 예에 한정되지 않으면서, 본 명세서를 통해 사용되는 용어에 적용된다.

달리 지시되지 않는다면, 본 명세서에서 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "아미노-알코올"이라는 용어는, 카르복시기가 발리놀, 글리시놀, 알라니놀, 아릴알라니논, 헤테로아릴알라니놀과 같은 메틸 알코올로 대체 (환원)된천연 또는 비천연 아미노산을 포함한다.

달리 지시되지 않는다면, 본 명세서에서 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "알킬"이라는 용어는, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, t-부틸, 이소부틸, 펜틸, 헥실, 이소헥실, 헵틸, 4,4-디메틸펜틸, 옥틸, 2,2,4-트리메틸펜틸, 노닐, 데실, 운데실, 도데실, 이들의 다양한 분지쇄 이성질체 등과 같은, 표준쇄에서 탄소 1 내지 40개, 바람직하게는 탄소 1 내지 20개, 보다더 바람직하게는 탄소 1 내지 8개를 함유한 직쇄 및 분지쇄 탄화수소를 모두 포함한다. 또한, 본 명세서에서 정의된 알킬기는 임의의 이용가능한 탄소 원자 상에서 일반적으로 이러한 알킬쇄에 부착되는, 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 히드록시, 아릴알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 알콕시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로아릴알킬옥시, 알카노일, 할로, 히드록실, 티오, 니트로, 시아노, 카르복실, 카르보닐, 카르복스아미도, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 아미도, 알킬아미노, 아릴아미도, 헤테르아릴아미도, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 포스포닉, 포스피닉, 술포닉, 술폰아미도, 할로아릴, CF₃, OCF₂, OCF₃, 아릴옥시, 헤테로아릴, 시클로알킬알콕시알킬, 시클로헤테로알킬 등과 같은 (그러나, 이들 예에 한정되지는 않음) 하나 이상의 관능기로 임의로 치환되어 트리플루오로 메틸, 3-히드록시헥실, 2-카르복시프로필, 2-플루오로에틸, 카르복시메틸, 시아노부틸 등과 같은 알킬기를 형성할 수 있다.

달리 지시되지 않는다면, 본 명세서에 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "알케닐"이라는 용어는, 임의의 탄소가 "알킬"에 대해 상기 기재된 바와 같이 임의로 치환될 수 있는, 표준쇄에 하나 이상의 이중 결합과 함께 탄소 2 내지 40개, 바람직하게는 1 내지 3개의 이중 결합과 함께 탄소 2 내지 20개, 보다더 바람직하게는 1 내지 2개의 이중 결합과 함께 탄소 2 내지 8개를 함유하는 직쇄 및 분지쇄 탄화수소를 모두 포함한다.

달리 지시되지 않는다면, 본 명세서에 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "알키닐"이라는 용어는, 임의의 탄소가 "알킬"에 대해 상기 기재된 바와 같이 임의로 치환될 수 있는, 표준쇄에 하나 이상의 삼중 결합과 함께 탄소 2 내지 40개, 바람직하게는 1 내지 3개의 삼중 결합과 함께 탄소 2 내지 20개, 보다더 바람직하게는 1 내지 2개의 삼중 결합과 함께 탄소 2 내지 8개를 함유하는 직쇄 및 분지쇄 탄화수소를 모두 포함한다.

달리 지시되지 않는다면, 본 명세서에 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "시클로알킬"이라는 용어는, 고리를 형성하는 총 3 내지 20개의 탄소, 바람직하게는 각 고리를 형성하는 4 내지 7개의 탄소를 함유하는 모노시클릭 알킬, 비시클릭 알킬 및 트리시클릭 알킬을 비롯한 부착되거나 융합된, 1 내지 3개의 고리를 함유하는 포화 또는 부분적으로 불포화된 (1 또는 2개의 이중 결합을 함유함) 시클릭 탄화수소기를 포함하고; 이는 아릴에 대해 기재된 1개의 방향족 고리로 융합될 수 있으며, 예로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 시클로데실, 시클로도데실, 시클로헥세닐,을 들 수 있고, 임의의 기는 임의의 이용가능한 탄소 원자를 통해 수소, 할로, 할로알킬, 알킬, 알콕시, 할로알콕시, 알케닐, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 알키닐, 시클로알킬알킬, 플루오레닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알킬알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시, 아릴옥시알킬, 아릴알콕시, 아릴티오, 아릴아조, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 히드록시, 니트로, 옥소, 시아노, 카르복실, 카르보닐, 카르복스아미도, 아미노, 치환된 아미노 (여기서, 아미노는 1 또는 2개의 치환체 (알킬, 아릴 또는 정의에서 언급되는 그밖의 아릴 화합물임)를 포함함), 아미도, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 포스포닉, 포스피닉, 술포닉, 술폰아미도, 티올, 알킬티오, 아릴티오, 헤테로아릴티오, 아릴티오알킬, 알콕시아릴티오, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아릴술피닐, 아릴술피닐알킬, 아릴술포닐아미노 또는 아릴술폰아미노카르보닐, 또는 상기 기재된 임의의 알킬 치환체로부터 선택된 하나 이상의 기로 임의로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "아릴"이라는 용어는, 고리 부분에 탄소 6 내지 10개를 함유하는 모노시클릭 및 비시클릭 방향족기를 의미하고 (예를 들어, 페닐 또는 나프틸), 임의로 "아릴"에 융합된 1 내지 3개의 추가의 고리를 포함할 수 있고 (예를 들어, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 고리), 임의로 임의의 이용가능한 탄소 원자를 통해 수소, 알킬, 할로, 할로알킬, 알콕시, 할로알콕시, 알케닐, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 알키닐, 시클로알킬알킬, 플루오레닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알킬알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시, 아릴옥시알킬, 아릴알콕시, 아릴티오, 아릴아조, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로아릴옥시, 헤트로아릴알킬옥시, 헤트로아릴알킬옥시알킬, 히드록시, 니트로, 옥소, 시아노, 아미노, 치환된 아미노 (여기서 아미노는 1 또는 2개의 치환체 (알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴, 아릴 또는 정의에서 언급되는 그밖의 아릴 화합물임)를 포함함), 티올, 알킬티오, 아릴티오, 헤테로아릴티오, 아릴티오알킬, 알콕시아릴티오, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 시클로알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐, 헤테로아릴아미노카르보닐, 헤테로아릴알킬아미노카르보닐 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아릴술피닐, 아릴술피닐알킬, 아릴술포닐아미노 또는 아릴술폰아미노카르보닐, 또는 상기 기재된 임의의 알킬 치환체로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "아릴알킬"이라는 용어는, 벤질, 펜에틸 또는 나프틸프로필과 같은 아릴 치환체를 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 의미하며, 상기 아릴 및(또는) 알킬기는 임의로 상기 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.

본 명세서에서 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "알콕시", "아릴옥시", "헤테로아릴옥시", "아릴알킬옥시" 또는 "헤테로아릴알킬옥시"라는 용어는, 산소 원자를 통해 가교된, 상기 정의된 바와 같은 알킬 또는 아릴기를 포함한다.

본 명세서에서 사용된 "헤테로시클로", "헤테로시클", "헤테로시클릴" 또는 "헤테로시클릭"이라는 용어는, 포화 또는 불포화 될 수 있는 비치환된 또는 치환된 안정한 4-, 5-, 6- 또는 7-원 모노시클릭 고리 계를 나타내며, 이는 탄소 원자, 및 질소, 황, 산소 및(또는) SO 또는 SO₂기로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자로 구성되고, 여기서 질소 및 황 헤테로원자는 임의로 산화될 수 있고, 질소 헤테로원자는 임의로 4급화될 수 있다. 헤테로시클릭 고리는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에 부착되어 안정한 구조를 형성할 수 있다. 이러한 헤테로시클릭기의 예로는 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로티오페닐 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 옥소피롤리디닐, 옥소피페라지닐, 옥소피페리디닐 및 옥사디아졸릴을 들 수 있으나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다. 임의로 헤테로시클로기는 "알킬" 또는 "아릴"에 대해 기재된 것과 같은 하나 이상의 관능기로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "헤테로시클로알킬"이라는 용어는, 헤테로시클로알킬 치환체를 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 의미하고, 상기 "헤테로시클로" 및(또는) 알킬기는 상기 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 사용된 "헤테로아릴"이라는 용어는, 질소, 황, 산소 및(또는) SO 또는 SO₂기로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5-, 6- 또는 7-원 방향족 헤테로시클릭 고리를 의미한다. 이러한 고리는 또다른 아릴 또는 헤테로아릴 고리와 융합될 수 있고, 가능한 N-산화물을 포함할 수 있고; 이러한 헤테로아릴기의 예로는 푸란, 피롤, 티오펜, 피리딘, 이속사졸, 옥사졸, 이미다졸 등을 들 수 있으나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다. 임의로 헤테로아릴기는 "알킬" 또는 "아릴"에 대해 기재된 것과 같이, 일반적으로 이러한 쇄에 부착된 하나 이상의 관능기로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 단독으로 또는 또다른 기의 일부분으로서 사용된 "헤테로아릴알킬"이라는 용어는, 헤테로아릴 치환체를 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 의미하며, 상기 헤테로아릴 및(또는) 알킬기는 상기 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"당뇨병 및 이와 관련된 질환 또는 관련된 증상"이라는 용어는, II형 당뇨병, I형 당뇨병, 손상된 글루코스 저항증, 비만증, 고혈당증, 증후군 X, 난대사 증후군 (dysmetabolic syndrome), 당뇨병 합병증 및 고인슐린혈증을 의미한다.

본 명세서에서 사용된 "지질-조정" 또는 "지질 저하"제는 LDL을 낮추고(거나) HDL을 상승시키고(거나) 트리글리세리드를 낮추고(거나) 총 콜레스테롤을 낮추는 약제, 및(또는) 지질 장애를 치료하기 위한 그밖의 공지된 메카니즘을 의미한다.

본 발명의 치료제의 투여는 치료적 유효량의 본 발명의 약제의 투여를 포함한다. 본 명세서에 사용된 "치료적 유효량"이라는 용어는, 본 발명의 조성물을 투여함으로써 치료될 수 있는 증상을 치료 또는 예방하기 위한 치료제의 양을 의미한다. 상기 양은 검출가능한 치료적 또는 예방적 또는 완화적 효과를 나타내기에 충분한 양이다. 효과로는, 예를 들어 본 명세서에 열거된 증상의 치료 또는 예방을 들 수 있다. 환자에 대한 정확환 유효량은 환자의 크기 및 건강, 치료될 증상의 성질 및 정도, 치료하는 의사의 권고, 및 투여를 위해 선택된 치료제 또는 치료제의 조합물에 따라 달라질 것이다. 따라서, 미리 정확한 유효량을 상술하는 것은 유용하지 않다.

본 명세서에 기재된 펩티드 및 이의 유사체는 문헌 [G. Barany and R. B. Merrifield, "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology" ; Volume 2-"Special Methods in Peptide Synthesis, Part A", pp. 3-284, E. Gross and J. Meienhofer, Eds., Academic Press, New York, 1980] 및 문헌 [J. M. Stewart and J. D. Young, "Solid-Phase Peptide Synthesis", 2nd Ed., Pierce Chemical Co., Rockford, IL, 1984]에 기재된 바와 같이 다양한 고상 (solid-phase)기술을 이용한 화학 합성법에 의해 제조될 수 있다. 본 발명에서 이용되는 바람직한 방법은, 아미노산 측쇄의 일시적인 보호를 위한 tert-부틸기와 조합으로, α-아미노기의 일시적인 보호를 위한 Fmoc (9-플루오레닐메틸메틸옥시카르보닐)기를 기재로 한다 (예를 들어, 문헌 [E. Atherton and R. C. Sheppard,"The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group", in "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology"; Volume 9-"Special Methods in Peptide Synthesis, Part C", pp. 1-38, S. Undenfriend and J. Meienhofer, Eds., Academic Press, San Diego, 1987] 참조).

펩티드는 불용성 중합체 지지체 ("수지"로도 일컬음) 상에서 펩티드의 C-말단으로부터 출발하는 단계적인 방식으로 합성될 수 있다. 합성은, 아미드 또는 에스테르 가교의 형성을 통해 펩티드의 C-말단 아미노산을 수지에 부착시킴으로써 개시된다. 이것은 궁극적으로, 각각 C-말단 아미드 또는 카르복실산으로서 생성된 펩티드를 방출할 수 있게한다. 대안적으로, C-말단 아미노 알코올이 존재할 경우에, 본 명세서에 기재된 바와 같이 C-말단 잔기를 2-메톡시-4-알콕시벤질 알코올 수지 (사스린 (SASRIN; 상표명), 미국 펜실베니아주 킹 오브 프러시아 소재의 바헴 바이오사이언스 인크. (Bachem Bioscience, Inc.) 제조)에 부착시킬 수 있고, 펩티드 서열 조합이 완결된 후, 생성된 펩티드 알코올을 THF 중 LiBH₄에 의해 방출시킨다 (J. M. Stewart과 J. D. Young의 상기 문헌 p. 92 참조).

상기 합성에 사용되는 C-말단 아미노산 및 모든 그밖의 아미노산은, (존재한다면) 합성하는 동안 α-아미노 보호기를 선택적으로 제거할 수 있도록 상이하게 보호된 α-아미노기 및 측쇄 관능기를 가져야 한다. 아미노산의 커플링은, 이의 카르복실기를 활성 에스테르로서 활성화시키고, 수지에 부착된 N-말단 아미노산의 비차단된 α-아미노기와 반응시킴으로써 수행된다. α-아미노기 탈보호 및 커플링의 순서는 전체 펩티드 서열이 조립될 때까지 반복된다. 이후에 펩티드는, 일반적으로 적합한 스캐빈저 (scavenger)의 존재하에 측쇄 관능기를 탈보호하면서 동시에수지로부터 방출되어 측쇄 반응을 제한시킨다. 생성된 펩티드는 마지막으로 역상 HPLC에 의해 정제된다.

최종 펩티드에 대한 전구체로서 필요한 펩티딜-수지의 합성법은 시판용 가교된 폴리스티렌 중합체 수지 (노바비오켐 (Novabiochem), 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재)를 이용한다. 본 발명에서는, C-말단 아미노산이 이미 부착되거나 부착되지 않을 수 있는 4-(2',4'-디메톡시페닐-Fmoc-아미노메틸)-페녹시아세틸-p-메틸 벤즈히드릴아민 수지 (링크 (Rink) 아미드 MBHA 수지) 또는 p-벤질옥시벤질 알코올 수지 (HMP 수지)를 이용하는 것이 바람직하다. C-말단 아미노산이 부착되지 않을 경우에는, 각각 DIC 또는 DIC/HOAT와 반응하여 형성된 Fmoc-보호된 아미노산의 O-아실리소우레아 또는 HOAT 활성 에스테르를 이용한 DMAP-촉매화된 에스테르화에 의해 부착시킬 수 있다. 이어서 아미노산의 커플링은 각각 DIC/HOBT 또는 DIC/HOAT로부터 생성된 HOBT 또는 HOAT 활성 에스테르를 이용하여 수행될 수 있다.

본 명세서에 기재된 11-mer 펩티드 유사체의 합성은 어드밴스드 켐테크 멀티플 펩티드 신테사이저 (Advanced Chemtech Multiple Peptide Synthesizer) (MPS396) 또는 어플라이드 바이오시스템즈 인크. (Applied Biosystems Inc.)의 펩티드 합성기 (ABI 433A)와 같은 펩티드 합성기를 이용함으로써 수행될 수 있다. MPS396을 사용할 경우, 최대 96개 이하의 펩티드가 동시에 합성된다. ABI 433A 합성기를 사용할 경우, 개별 펩티드가 연속적으로 합성된다. 두 경우에, 단계적인 고상 펩티드 합성법은 본 명세서에 기재된 Fmoc/t-부틸 보호 방법을 이용하여 수행되었다. 위치 11 및 위치 10에 존재하는 비천연 비상업용 아미노산을 2개의 방법중 하나에서 펩티드쇄에 도입하였다. 첫번째 접근법에서, 적합한 유기 합성 방법을 이용하여 Boc- 또는 Fmoc-보호된 비천연 아미노산이 용액 중에서 제조되었다. 이후에 생성된 유도체를 펩티드의 단계적 합성법에 사용하였다. 대안적으로 합성 유기 화학 방법을 이용하여 필요한 비천연 아미노산을 수지 상에 직접적으로 제조하였다. 비천연 비상업용 아미노산을 필요에 따라 X_aa6위치 또는 임의의 다른 X_aa위치에 도입해야 할 경우, 필요한 Fmoc-보호된 비천연 아미노산을 용액 중에서 합성하였다. 이후에 이러한 유도체를 단계적인 고상 펩티드 합성법에 사용하였다.

본 발명에서는 하기에 도시된 Fmoc 아미노산 유도체를 사용하는 것이 바람직하다.

개개의 펩티드에 대한 펩티딜-수지 전구체를 문헌 (예를 들어, 문헌 [D. S. King et al. Int. J. Peptide Protein Res. 36, 1990, 255-266] 참조)에 기재된 임의의 표준 방법을 이용하여 분해시키고 탈보호시킬 수 있다. 본 발명에 사용된 바람직한 방법은 스캐빈저로서 물 및 TIS의 존재하에 TFA를 사용하는 것이다. 전형적으로, 펩티딜-수지를 실온에서 1.5 내지 2시간 동안 TFA/물/TIS (94:3:3, v:v:v; 펩티딜 수지 1 mL/100 mg) 중에서 교반한다. 이후에 소모된 수지를 여과 제거하고 TFA 용액을 농축하거나 감압하에 건조한다. 생성된 조 펩티드를 침전시키고 Et₂O로 세척하거나, 정제 HPLC에 의한 정제를 위하여 DMSO 또는 50％ 수성 아세트산에 직접적으로 재용해시킨다.

원하는 순도를 가진 펩티드는 정제 HPLC, 예를 들어 워터스 모델 (Waters Model) 4000 또는 시마쯔 모델 (Shimadzu Model) LC-8A 액체 크로마토그래프를 이용한 정제에 의해 수득될 수 있다. 조 펩티드의 용액을 YMC S5 ODS (20 X 100 mm) 컬럼에 주사하고, 220 nm에서 UV 흡수에 의해 용출을 모니터링하면서 유속 14 내지 20 m/분으로 물 중 MeCN (모두 0.1％ TFA로 완충시킨 것)의 선형 기울기로 용리한다. 정제된 펩티드의 구조는 전자 분사 MS 분석으로 확인할 수 있다.

하기의 약어가 실시예 및 다른 경우에서 사용된다:

Ph = 페닐

Bn = 벤질

i-Bu = 이소-부틸

Me = 메틸

Et = 에틸

Pr = n-프로필

Bu = n-부틸

TMS = 트리메틸실릴

TIS = 트리이소프로필실란

Et₂O = 디에틸 에테르

HOAc 또는 AcOH = 아세트산

MeCN = 아세토니트릴

DMF = N,N-디메틸포름아미드

EtOAc = 에틸 아세테이트

THF = 테트라히드로푸란

TFA = 트리플루오로아세트산

Et₂NH = 디에틸아민

NMM = N-메틸 모르폴린

NMP = N-메틸피롤리돈

DCM = 디클로로메탄

n-BuLi = n-부틸리튬

Pd/C = 탄소 상 팔라듐

PtO₂= 산화백금

TEA = 트리에틸아민

min = 분

h 또는 hr = 시간

L = 리터

mL = 밀리리터

㎕ = 마이크로리터

g = 그램

mg = 밀리그램

mol = 몰

mmol = 밀리몰

meq = 밀리당량

rt = 실온

sat 또는 sat'd = 포화

aq. = 수성

mp = 용융점

Bip = 비페닐알라닌

LiBH₄= 수소화붕소리튬

PyBOP 시약 = 벤조트리아졸-1-일옥시-트리피롤리디노 포스포늄 헥사플루오로포스페이트

DMAP = 4-(디메틸아미노)피리딘

EDAC = 3-에틸-3'-(디메틸아미노)프로필-카르보디이미드 히드로클로라이드 (또는 1-[(3-(디메틸)아미노)프로필])-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드)

FMOC = 플루오레닐메톡시카르보닐

Boc 또는 BOC = tert-부톡시카르보닐

Cbz = 카르보벤질옥시 또는 카르보벤족시 또는 벤질옥시카르보닐

HOBT 또는 HOBTㆍH₂0 = 1-히드록시벤조트리아졸 수화물

HOAT = 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸

TLC = 박막 크로마토그래피

HPLC = 고성능 액체 크로마토그래피

LC/MS = 고성능 액체 크로마토그래피/질량 분광분석법

MS 또는 Mass Sec = 질량 분광분석법

NMR = 핵자기 공명

펩티드 화학 분야의 기술자는 아미노산 잔기가 D 및 L 이성질체 모두로서 생성되고, 본 발명이 본 명세서에 기재된 펩티드의 합성에 도입된 아미노산 잔기에 대한 이성질체 중 어느 하나 또는 이성질체의 혼합물을 사용하려 한다는 것을 알고 있다.

하나의 실시양태에서, 본 발명은 메시지 (message) 서열 및 어드레스 (address) 서열을 갖는 폴리펩티드 수용체 작용제의 활성을 모방한 하기 화학식 II의 폴리펩티드의 제조 방법을 제공한다.

이 실시양태에서, 폴리펩티드의 어드레스 서열은 폴리펩티드가 수용체에 결합할 수 있게 하고, 메시지 서열은 폴리펩티드가 상기 수용체에 결합시 수용체 매개된 신호 변환을 유도시킬 수 있다. 폴리펩티드의 제조 방법은 폴리펩티드 수용체 작용제의 메시지 서열을 아미노산 잔기인 Y 및 Z로 대체시키는 것을 포함하며;

여기서, Y 및 Z의 알파-탄소 원자에서 치환체 중 하나는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 상기 1차 치환체 중 헤테로시클릴알킬은 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 또는 헤테로아릴기로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고; 임의의 상기 1차 또는 2차 치환체는 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 또는 포스포닉기 중 하나 이상으로 더 치환될 수 있고; 여기서, 상기 1차 또는 2차 치환체는 공유 결합에 의해 임의로 가교되어 하나 이상의 서로 융합된 시클릭 또는 헤테로시클릭 계를 형성할 수 있고;

여기서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

여기서, Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있다.

바람직한 실시양태에서, 본 발명은 내생적인 폴리펩티드 수용체 작용제의 활성을 모방한 폴리펩티드의 제조 방법을 제공한다. 또다른 바람직한 실시양태에서, 폴리펩티드 수용체 작용제는 GLP-1이다.

또다른 측면에서, 폴리펩티드의 제조 방법은 폴리펩티드의 메시지 서열을 수용체 매개된 신호 변환을 유도시킬 수 있는 다양한 메시지 서열로 대체시키는 것을더 포함한다. 다양한 메시지 서열은 폴리펩티드 수용체 작용제의 하나 이상의 아미노산 잔기를 대체시키거나 개질시킴으로써 제조될 수 있다.

실시예 1

GLP-1 11-mer 펩티드 모방체의 동시 고상 펩티드 합성

위치 10 및 11에 비천연 비상업적 아미노산 잔기를 함유하는 디펩티딜 수지를 하기 매뉴얼 방법을 이용하여 배치식 형태로 제조한 후, 자동 동시 합성 프로토콜을 이용하여 MPS-396 펩티드 합성기 상에서 펩티드 사슬 신장을 계속하였다. 매뉴얼 커플링에 사용된 Na-Fmoc-보호된 비페닐알라닌 유도체의 합성은 실시예 8 내지 10에 기재되어 있다.

몇 가지 11-mer 유사체를 합성하는데 충분한 양의 4-(2',4'-디메톡시페닐-Fmoc-아미노메틸)-페녹시아세틸-p-메틸 벤질히드릴아민 수지 (결합 아미드 MBHA 수지; 로딩량: 0.5 mmol/g)를 DMF (4 x 10 mL/g, 5분)로 세척함으로써 팽윤시켰다. 그런 다음, Fmoc 기를 DMF (10 mL/g) 중 20％ 피페리딘으로 각각 3분 및 18분씩 2회 처리하여 제거하였다. 수지를 DMF (4 x 10 mL/g) 및 NMP (4 x 10 mL/g)로 세척하였다. Fmoc-L-비페닐알라닌-OH (2.0 당량) 또는 그의 유사체의 0.5 M 용액, 및 NMP 중 HOAt (2.0 당량)를, 이어서 NMP 중 DIC (2.05 당량)의 1.0 M 용액을 수지에 첨가하였다. 그런 다음, 수지를 16 내지 24시간 동안 진탕 또는 볼텍싱하였다. 커플링의 완료를 정성적 닌히드린 시험을 이용하여 모니터링하였다. 수지를 탈수하고, NMP (3 x 10 mL/g) 및 DMF (3 x 10 mL/g)로 세척하고, DMF (8 mL/g) 중 20％아세트산 무수물로 각각 5분 및 20분씩 2회 처리하였다. DMF (4 x 10 mL/g)로 세척한 후, DMF 중 20％ 피페리딘으로 Fmoc 기를 제거하는 것으로 출발하고, 커플링 단계에서 동일하거나 상이한 Fmoc-보호된 비페닐알라닌을 이용하여 2차 매뉴얼 커플링 싸이클을 상기 기재된 것과 같이 수행하였다. 상기 합성 반응식으로 목적하는 Fmoc-보호된 디펩티딜-결합 아미드 MBHA 수지를 제조하였다.

또한, 고상 스즈끼 축합 반응을 이용한 실시예 5 내지 7에 기재된 또다른 방법에 의해 유사한 디펩티딜 수지를 수득하였다.

그런 다음, 설계된 유사체의 세트를 합성하는데 필요한 이러한 디펩티딜 수지를 하기 방법으로 1회 운행 당 96 펩티드 이하의 자동 MPS 합성에 이용하였다. 디펩티딜 수지를 반응기 웰 당 0.01 내지 0.025 mmol (20 내지 50 mg)의 수지에 상응하는 부피로, 어드밴스트 켐텍 (Advanced ChemTech) MPS 396 합성기의 96 웰 반응기에 디클로로메탄/DMF (60:40) 중 현탁액으로서 로딩하였다. 반응기를 기기에 정치하고 배수하였다. 그런 다음, 웰을 DMF (0.5 내지 1.0 mL, 3x2분)로 세척하고, 예비 프로그래밍된 서열 합성표에 의해 결정된 것과 같이 각각의 펩티드 서열을 조립하는데 필요한 수의 자동 커플링 싸이클을 수행하였다. 96 화합물의 전형적인 0.01 mmol/웰 동시 합성에 사용된 상세한 단계적 합성 프로토콜은 하기에 기재되어 있다. 상기 프로토콜은 개별 운행 당 12 내지 96의 범위의 유사체 어레이의 동시 합성을 위한 것이다. 일반적 합성 프로토콜은 반응식 I에 나타나 있다.

합성을 시작하기 전에, 하기 시약 용액을 제조하고, 필요한 대로 기기에 정치시켰다: DMF 중 1.5 M (15％) 피페리딘; NMP 중 0.5 M DIEA; NMP 중 0.36 M DIC; DMF 중 1 M (10％) 아세트산 무수물. 필요한 Fmoc-보호된 아미노산을 0.36 M HOAt/NMP 중 0.36 M 용액으로서 제조하고, 32-위치 아미노산 랙 (rack)의 적합한 위치에 정치시켰다.

상기 제조된 Fmoc-보호된 디펩티딜 수지를 DMF 중 1.5 M (15％) 피페리딘 (0.6 mL; 1 x 3분; 1 x 18분)으로 처리함으로써 탈보호하였다. 그런 다음, 수지를 DMF (4 x 0.5 mL), DMF/EtOH (80:20) (1 x 0.5 mL) 및 NMP (3 x 0.5 mL)로 세척하였다.

다음 아미노산 잔기, 전형적으로 Fmoc-Asp(OtBu)-OH 또는 필요할 경우 적절히 직교 보호된 또다른 Fmoc-아미노산의 커플링은 적절한 Fmoc-아미노산 (0.072 mmol, 7.2 당량)의 0.36 M 용액 및 NMP (0.2 mL) 중 HOAt (7.2 당량)를 모든 96 웰에 자동 첨가함으로써 수행하였다. 이어서, 모든 96 웰에 NMP (0.2 mL) 중 DIC(0.072 mmol, 7.2 당량)의 0.36 M 용액을 첨가하였다. 커플링을 2시간 동안 진행하였다. 질소압 (3 내지 5 psi)에 의해 반응기를 배수하고 NMP (1x0.5 mL)로 웰을 세척한 후, 상기 기재된 것과 같이 커플링을 반복하였다. 커플링 싸이클의 마지막에, 웰을 DMF 중 1M 아세트산 무수물 (1X0. 5 mL, 30분)로 처리하고, 최종적으로 DMF (3X0.5 mL)로 세척하였다.

다음 커플링 싸이클은 상기 기재된 것과 같이 Fmoc 기의 제거로 출발하였으며, Fmoc-Ser(tBu)-OH 또는 상기 위치에서 목적하는 서열의 치환에 의해 요구되는 것과 같은 상이한 필요한 Fmoc-아미노산 중 하나의 커플링을 포함하였다. Fmoc-Asp(OtBu)-OH에 대해 기재된 것과 동일한 방식으로 커플링을 수행하였다. 다음 커플링 단계는 Fmoc-Thr(tBu)-OH 또는 임의의 다른 선택된 Fmoc-아미노산 중 하나를 필요한 대로 상기 서열 위치에 혼입하는 동일한 방법으로 수행하였다.

다음 Fmoc-아미노산 (예를 들어 Fmoc-Phe-OH)을 상기 기재된 것과 같이 커플링하였다. 상기 단계에서 신규의 상업적으로 시판되지 않는 방향족 또는 비방향족 아미노산 유사체의 혼입을 요구하는 서열에 대해, 커플링을 하기와 같이 변형시켰다: 통상의 방법으로 Fmoc를 탈보호한 후, Fmoc-아미노산 (5 당량) 및 HOAt (5 당량)을 NMP 중 0.36 M 용액 (0.139 mL)으로서 수동으로 첨가하였다. 그런 다음, NMP 중 DIC의 0.36 M 용액 (0.139 mL)을 기기에 의해 첨가하고, 커플링을 16 내지 24시간 동안 진행하였다. 이 경우에는 커플링을 반복하지 않았다. 통상의 커플링후 세척 후, 펩티딜 수지를 기재된 것과 같이 아세트산 무수물로 캡핑하였다.

다음 커플링 단계는 Fmoc-Thr(tBu)-OH 또는 상기 위치에서 서열의 대체에 의해 요구되는 것과 같은 치환 유사체 중 하나를 포함하였다. 커플링은 Fmoc-Asp(OtBu)-OH 및 그의 유사체의 초기 MPS 커플링에 대해 기재된 것과 같이 수행하였다. 목적하는 96개의 11-mer 펩티드 유사체의 서열 조립을 완결하기 위해, 상기 동일한 커플링 프로토콜을 추가로 4회 반복하였다. 특정 서열 위치에서 필요한 상업적으로 시판되는, 그리고 상업적으로 시판되지 않는 비천연 아미노산의 커플링을 위해, 위치 6 (X_aa6)의 신규한 아미노산에 대해 상기 기재된 것과 유사한 단일 커플링 프로토콜을 사용하였다.

최종적으로, Fmoc 기를 상기 기재된 것과 같이 DMF 중 20％ 피페리딘으로 제거하고, 펩티딜 수지를 DMF (4 X 0.5 mL) 및 DCM (4 X 0.5 mL)로 세척하였다. 그런 다음, 일정한 압력의 질소 기체 (5 psi)를 10 내지 15분 동안 적용함으로써 반응기 블록 상에서 건조하였다.

절단/탈보호

목적하는 펩티드를 하기와 같이 TEA 절단 혼합물로 처리함으로써 그의 각각의 펩티딜 수지로부터 절단/탈보호하였다.

TFA/물/트리-이소프로필실란 (94:3:3) (1.0 mL)의 용액을 반응기 블록의 각 웰에 첨가한 다음, 2시간 동안 볼텍싱하였다. 웰로부터의 TFA 용액을 반응기 바닥의 매칭 96 바이얼 블록에 위치한 미리 구멍낸 바이얼 내로 양압에 의해 수집하였다. 웰 내의 수지를 추가의 TFA 칵테일 0.5 mL로 2회 세정하고, 세정액을 바이얼의 용액과 합하였다. 이를 스피드백 (SpeedVac)(TM) (사반트 (Savant))에서 건조하여 조성 펩티드를 전형적으로 100％ 초과의 수율 (20 내지 40 mgs)로 수득하였다. 조성 펩티드를 에테르로 세척하거나, 보다 빈번히는 DMSO 2 mL 또는 50％ 수성 아세트산에 직접 재용해하여 하기와 같이 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

조성 펩티드의 분취용 HPLC 정제

분취용 HPLC를 와터스 모델 (Waters Model) 4000 또는 시마즈 모델 (Shimadzu Model) LC-8A 액체 크로마토그래피 상에서 수행하였다. 조성 펩티드의 각 용액을 YMC S5 ODS (20 X 100 mm) 컬럼 내로 주입하고, 모두 0.1％ TFA로 완충된 물 중 MeCN의 선형 구배를 이용하여 용리하였다. 사용된 전형적인 구배는 0.1％ TFA/물 중 20％ 내지 70％ 0.1％ TFA/MeCN으로, 15분에 걸쳐, 유속 14 mL/분으로 220 nm에서 유출 UV 검출이었다. 전형적으로 10 내지 11분 후, 목적하는 생성물을 불순물로부터 잘 분리하여 용리하고, 통상적으로 분획 수집기 상에서 단독의 10 내지 15 mL 분획으로 수집하였다. 목적하는 펩티드를 HPLC 분획의 동결건조에 의해 무정질 백색 분말로서 수득하였다.

정제된 펩티드의 HPLC 분석

상기 기재된 것과 같이 분취용 HPLC에 의해 정제한 후, 각 펩티드를 SCL-10A 시스템 조절기, SIL-10A 자동 주입기, SPD10AV 또는 SPD-M6A UV/VIS 검출기, 또는 SPD-M1OA 다이오드 어레이 검출기로 구성된 시마즈 LC-10AD 또는 LC-10AT 분석용 HPLC 시스템 상에서 분석용 RP-HPLC에 의해 분석하였다. YMC ODS S3 (4.6 X 50 mm) 컬럼을 사용하였고, 용리는 하기 구배 중 하나를 이용하여 수행하였다: A 중 10 내지 70％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 A); A 중 5 내지 80％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 B); A 중 5 내지 70％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 C); A 중 25 내지 75％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 D); A 중 20 내지 75％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 E); A 중 15-70％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 F); A 중 10 내지 90％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 G); A 중 20 내지 65％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 H); A 중 5-90％ B, 8분에 걸쳐, 2.0 mL/분 (방법 I); A 중 5 내지 90％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 J); A 중 20 내지 80％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 K); A 중 10 내지 100％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 L); A 중 10 내지 75％ B, 8분에 걸쳐, 2.5 mL/분 (방법 M). 이동상 A: 0.1％ TFA/물; 이동상 B: 0.1％ TFA/아세토니트릴. 순도는 전형적으로 90％ 초과였다.

질량 분광법에 의한 특성화

각 펩티드를 유동 주입 또는 LC/MS 모드 중 하나로 전기분사 질량 분광법 (ES-MS)에 의해 특성화하였다. 핀니간 (Finnigan) SSQ7000 단일 4중극 질량 분광계 (미국 캘리포니아주 산 조스 (San Jose) 소재, 써모핀니간 (ThermoFinnigan))를 모든 분석에서 양성 및 음성 이온 전기분사 모드로 사용하였다. 전체 스캔 데이타를 1.0초의 스캔 시간 동안 300 내지 2200의 질량 범위에 걸쳐 수득하였다. 4중극을 단위 해상도에서 작동시켰다. 유동 주입 분석을 위해, 질량 분광계를 워터스 616 HPLC 펌프 (미국 메사추세스주 밀포드 (Milford) 소재, 워터스 코포레이션 ((Waters Corp.))에 접속시키고, HTS PAL 자동 시료주입기 (스위스 츠빙겐 (Zwingen) 소재, CTC 어낼리틱스 (CTC Analytics))를 장착하였다. 시료를 0.1％ 수산화암모늄을 갖는 50:50 물:아세토니트릴을 함유하는 이동상 내로 주입하였다.분석을 위한 유속은 0.42 mL/분이고, 주입 부피는 6 ㎕였다. 써모세퍼레이션스 콘스타메트릭 (ThermoSeparations Constametric) 3500 액체 크로마토그래피 (미국 캘리포니아주 산 조스 소재, 써모세퍼레이션 프로덕츠 (ThermoSeparation Products)) 및 HTS PAL 자동 시료주입기를 LC/MS 분석을 위해 사용하였다. 5 미크론 컬럼, 2 x 30 mm의 루나 (Luna) C₁₈, (미국 캘리포니아주 토란스 (Torrance) 소재, 페노메넥스 (Phenomenex))를 이용하여 크로마토그래피 분리를 하였다. 분석을 위한 유속은 1.0 mL/분이고, 전기분사 계면 내로의 유동이 400 ㎕/분이 되도록 컬럼 용리액을 분배하였다. 이동상 A는 10 mM 아세트산암모늄을 갖는 98:2 물:아세토니트릴이고, 이동상 B는 10 mM 아세트산암모늄을 갖는 10:90 물:아세토니트릴인, A 중 0％ 내지 100％ B의 선형 구배를 4분에 걸쳐 운행시켰다. UV 반응을 220 nm에서 모니터링하였다. 시료를 200 ㎕의 50:50 H₂0:MeCN (0.05％ TFA)에 용해하였다. 주입 부피는 5 ㎕였다.

모든 경우에, 실험적으로 측정된 분자량은 0.5 달톤의 계산된 일동위원소 분자량 내였다.

실시예 2

N-아실화 및 N-알킬화 11-mer 펩티드 유사체의 합성

(A) 환원 알킬화에 의한 N-알킬화 11-mer 펩티드 유사체의 합성을 위한 일반적 방법

N-알킬화 11-mer 펩티드 유사체의 합성은 보호된 중간체 11-mer 펩티딜 수지(1) (0.025 mmol)로부터 출발하였으며, 이는 본 명세서에 기재된 일반적 방법에 의해 제조하였다. Fmoc 기를 상기 방법에 기재된 방법을 이용하여 제거하여 보호된 수지 중간체 2를 수득하였다. 이를 DMF에서 팽윤시키고, 1％ AcOH/DMF로 3회 세척한 다음, 2 내지 20 당량의 알데히드 또는 N-Boc-보호된 아미노알데히드 (하기 합성 참조)로 처리하고, 1％ AcOH/DMF (또는 CH₂Cl₂) (1 M) 및 알데히드의 양과 동일한 과량의 Na(AcO)₃BH에 용해하였다. 밤새 반응시킨 후, 수지를 탈수하고, DMF 및 DCM로 각각 3회 세척하고, 건조하였다. 환원적으로 알킬화된 펩티드 (4)를 TFA/트리-이소프로필실란/물 (90:5:5, 부피:부피:부피; 1 내지 2 mL)로 2시간 동안 처리함으로써 절단 및 탈보호하였다. 수지를 여과하고, 1 mL의 절단 용액으로 세정하고, 이를 여액과 합하고, 스피드백(TM) (사반트)에서 건조하여 조생성물을 수득하였다. 이를 본 명세서에 개요된 일반적 펩티드 합성 방법에 기재된 것과 같이 분취용 HPLC에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물의 순도 및 확인을 분석용 HPLC 및 전기분사 MS로 확인하였다.

N-Boc-보호된 아미노알데히드를 카스트로 (Castro) 방법 (문헌 [Fehrentz, J. A., and Castro, B.,Synthesis, 1983, 676-678])을 이용하여 하기와 같이 합성하였다. Boc-보호된 아미노산 (2.0 mmol)을 5 mL DCM에 용해하였다. BOP 시약 (1.1 당량) 및 DIEA (1.15 당량)를 첨가하였다. 5분 후, 5 mL DCM 중 N,O-디메틸히드록실아민 (1.2 당량) 및 DIEA (1.3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하고, DCM (30 mL)으로 희석하고, 2N HC1 (3x), 포화 NaHCO₃(3x) 및 염수 (1x)로 세척하였다. 유기 추출물을 MgS0₄상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켜 건조하여 와인렙 (Weinreb) 아미드를 수득하였다. 그런 다음, 이를 에테르 또는 THF (10 mL/mmol)에 용해하고, THF 중 LiAlH₄(2 mL/mmol의 히드록시메이트)의 1 M 용액과 30분 동안 반응시켰다. 반응 혼합물을 0.35 M KHS0₄5 mL로 켄칭하고, 에테르 (20 mL)로 희석하였다. 수성상을 분리하고, 에테르 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 에테르 추출물을 2N HC1 (2x), 포화 NaHC0₃(2x) 및 염수 (1x)로 세척하고, MgS0₄상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켜 건조하여 Boc-보호된 알데히드를 20 내지 30％ 수율로 수득하였다. 알데히드를¹H-NMR 및 전기분사 MS에 의해 특성화하고, 추가의 정제 없이 환원 알킬화 단계에 사용하였다.

(B) N-아실화 11-mer 펩티드 유사체의 합성을 위한 일반적 방법

유사하게, N-아실화 11-mer 펩티드 유사체의 합성은 본 명세서에 기재된 것과 같이 제조된 보호된 11-mer 펩티딜 수지 중간체 (1) (0.025 mmol)로부터 출발하였다. Fmoc 기를 본 명세서에 기재된 방법을 이용하여 제거하고, 본 명세서에 기재된 일반적 방법에 기재된 커플링 프로토콜을 이용하여, 수득된 수지 중간체 2를 상응하는 Fmoc-보호된 아미노산 또는 카르복실산과 커플링하였다. 적절한 무수물이 이용가능할 경우, 10 당량의 NMP 중 무수물을 이용하여 N-아실화를 수행하였다. 본 명세서에 기재된 일반적 방법에 따라, 수득된 12-mer 유사체 (3)를 절단/탈보호하고, 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

(C) 11-mer 펩티드 유사체의 N-카르바메이트 유도체의 합성을 위한 일반적방법

11-mer 펩티드 유사체의 N-카르바메이트 유도체의 합성은 본 명세서에 기재된 것과 같이 제조된 보호된 11-mer 펩티딜 수지 중간체 (1) (0.025 mmol)로부터 출발할 수 있다. Fmoc 기를 본 명세서에 기재된 방법을 이용하여 제거하고, 수득된 수지 중간체 2를 삼차 아민과 같은 적절한 염기의 존재 하에서 상응하는 클로로포르메이트와 반응시키거나, 디-카르보네이트, 또는 p-니트로페닐 또는 페닐 카르보네이트와 같은 활성화 카르보네이트와 반응시킨다. 유사하게, 10-mer 펩티드 유사체의 N-카르바메이트 유도체는 보호된 10-mer 펩티딜 수지 중간체로부터 출발하여, Fmoc를 제거하고, 수득된 펩티딜 수지 중간체를 상응하는 클로로포르메이트, 디-카르보네이트 또는 활성화 카르보네이트와 반응시켜 제조할 수 있다.

(D) 11-mer 펩티드 유사체의 N-우레아 유도체의 합성을 위한 일반적 방법

11-mer 펩티드 유사체의 N-우레아 유도체의 합성은 본 명세서에 기재된 것과 같이 제조된 보호된 11-mer 펩티딜 수지 중간체 (1) (0.025 mmol)로부터 출발할 수 있다. Fmoc 기를 본 명세서에 기재된 방법을 이용하여 제거하고, 수득된 수지 중간체 2를, 예를 들어 문헌 [K. Burgess et al., J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 1556-1564]에서와 같이 제조된 상응하는 이소시아네이트와 반응시키거나, 별법으로, 수지 중간체 2를 상응하는 카르바밀 클로라이드와 반응시킬 수 있다. 유사하게, 10-mer 펩티드 유사체의 N-우레아 유도체는 보호된 10-mer 펩티딜 수지 중간체로부터 출발하여, Fmoc를 제거하고, 수득된 펩티딜 수지 중간체를 상응하는 이소시아네이트 또는 카르바밀 클로라이드와 반응시켜 제조할 수 있다.

(E) 11-mer 펩티드 유사체의 N-술폰아미드의 합성을 위한 일반적 방법

11-mer 펩티드 유사체의 N-술폰아미드의 합성은 본 명세서에 기재된 것과 같이 제조된 보호된 11-mer 펩티딜 수지 중간체 (1) (0.025 mmol)로부터 출발할 수 있다. Fmoc 기를 본 명세서에 기재된 방법을 이용하여 제거하고, 수득된 수지 중간체 2를 상응하는 술포닐 클로라이드와 반응시킨다. 유사하게, 10-mer 펩티드 유사체의 N-술폰아미드는 보호된 10-mer 펩티딜 수지 중간체로부터 출발하여, Fmoc를 제거하고, 수득된 펩티딜 수지 중간체를 상응하는 술포닐 클로라이드와 반응시켜 제조할 수 있다.

(F) 11-mer 펩티드 유사체의 N-술포닐우레아 유도체의 합성을 위한 일반적 방법

11-mer 펩티드 유사체의 N-술포닐우레아 유도체의 합성은 본 명세서에 기재된 것과 같이 제조된 보호된 11-mer 펩티딜 수지 중간체 (1) (0.025 mmol)로부터 출발할 수 있다. Fmoc 기를 본 명세서에 기재된 방법을 이용하여 제거하고, 수득된 수지 중간체 2를 상응하는 술파모일 클로라이드 R₄R₅N-SO₂-Cl과 반응시켜 술포닐 우레아 중간체를 수득한다 (예를 들어, 문헌 [P. Davern et al. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2, 1994 (2), 381-387] 참조). 유사하게, 10-mer 펩티드 유사체의 N-술포닐 우레아 유도체는 보호된 10-mer 펩티딜 수지 중간체로부터 출발하여, Fmoc를 제거하고, 수득된 펩티딜 수지 중간체를 상응하는 술파모일 클로라이드 R₄R₅N-SO₂-Cl과 반응시켜 제조할 수 있다.

실시예 3

10-mer 펩티드 유사체의 N-아릴알킬 아미드의 합성

10-mer 펩티드 유사체의 N-아릴알킬 아미드의 합성은 하기 실시예와 같이 상응하는 아릴알킬아민의 알콕시벤즈알데히드 수지와의 환원 알킬화 반응으로 출발하였다. 2-(3,5-디메톡시-4-포르밀페녹시)에톡시메틸 폴리스티렌 수지 (노바바이오켐 (Novabiochem), 1.12 mmol/g, 0.025 mmol, 27.3 mg)를 DCM 중 1％ 아세트산 (5 x 3 mL)으로 세척하였다. DCM (3 mL) 중 2-(2-펜타플루오로페닐)에틸 아민 (0.125 mmol, 26.4 mg)의 용액을 수지에 첨가하였다. 5분 후, 고체 NaBH(OAc)₃(0.125 mmol, 26.5 mg)을 첨가하고, 반응물을 16시간 동안 볼텍싱하였다. 수지를 DMF (5 x 3 mL) 및 DCM (5 x 3 mL)으로 세정하였다. Fmoc-[BIP(2-Et)]-OH (0.05 mmol, 25.3 mg) 및 NMP (0.5 mL) 중 HOAt (0.05 mmol, 6.81 mg)를, 이어서 DIC (0.05 mmol, 7.82 RL)를 수지에 첨가하였다. 반응물을 16시간 동안 볼텍싱하였다. 수지를 NMP (5 x 3 mL)로 세정하였다. 그런 다음, 목적하는 10-mer N-아릴알킬 아미드 유사체의 남은 서열을 실시예 1에 기재된 것과 같이 모았다.

실시예 4

어플라이드 바이오시스템스 모델 (Applied Biosystems Model) 433A 펩티드 합성기를 이용한 11-mer 펩티드 유사체의 고상 합성

다음은 개량된 어플라이드 바이오시스템스 모델 433A 펩티드 합성기를 이용한, 전형적인 11-mer 펩티드 유사체의 고상 합성에 대한 일반적 기재이다. 합성기의 개량된 하드웨어 및 소프트웨어는 커플링을 되먹임 조절하면서 Fmoc 탈보호 단계의 전도성 모니터링할 수 있도록 한다. 프로토콜은 0.05 내지 1.0 mmol의 합성 규모의 범위를 허용한다.

2개의 비천연 C-말단 아미노산 잔기의 혼입은 11-mer 유사체의 동시 합성에 관련하여 앞서 기재하였다. 이러한 Fmoc-보호된 디펩티딜 수지를 상기 ABI 합성에 사용하였다. Fmoc-보호된 디펩티딜 수지 (0.1 mmol)를 기기 상의 적절한 크기의 용기 내에 정치하고, NMP로 6회 세척하고, 22％ 피페리딘/NMP로 2회 (각각 2분 및 8분) 처리하여 탈보호하였다. 모니터링 옵션의 조건 (마지막 2개의 전도성 기재 탈보호 피크 간의 차이가 10％ 미만)이 만족될 때까지 1 또는 2의 추가의 모니터링된 탈보호 단계를 수행하였다. 총 탈보호 시간은 10 내지 12분이었다. 탈보호된 디펩티딜 수지를 NMP로 6회 세척한 다음, 다음 아미노산과 커플링하였다. 상기 방법은 다음 단계에 사용된 실시예에 의해 예시되어 있다. 즉, 하기 방법을 이용하여 Fmoc-Asp(OtBu)-OH 를 다음으로 커플링하였다: Fmoc-Asp(OtBu)-OH (1 mmol, 10 당량)을 2 mL의 NMP에 용해하고, 이어서 DMF (2.2 mL) 중 0.45 M HBTU/HOBt 및 2 M DIEA/NMP (1 mL)을 첨가하여 활성화시켰다. 그런 다음, 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산의 용액을 반응 용기로 옮기고, 탈보호 단계로부터의 되먹임에 따라 커플링을 30 내지 60분 동안 진행하였다. 그런 다음, 수지를 NMP로 6회 세척하고, 목적하는 서열의 조립을 완결하기 위해 8회의 추가의 탈보호/커플링 싸이클을 수행하였다. 서열적으로 사용된 Fmoc-아미노산은 Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Ala-OH 및Fmoc-His(Trt)-OH이었다. 최종적으로, Fmoc 기를 상기 기재된 것과 같이 NMP 중 22％ 피페리딘으로 제거하고, 펩티딜 수지를 NMP 및 DCM로 6회 세척하고, 진공에서 건조하였다.

별법으로, 이어서 NMP (2 mL) 중 0.5 M HOAt 및 1 M DIC/NMP (1 mL)를 첨가하여 Fmoc-보호된 아미노산 (1 mmol)을 활성화시키고, 반응 용기에 옮기고, 1 내지 2시간 동안 커플링하는 변형된 커플링 프로토콜을 사용하였다.

절단/탈보호

목적하는 펩티드를 TFA/물/트리-이소프로필실란 (94:3:3)의 용액 (2.5 mL)으로 2시간 동안 처리함으로써 각각의 펩티딜 수지 (0.141 g)로부터 절단/탈보호하였다. 수지를 여과하고, TFA 절단 용액 (0.5 mL)으로 세정하고, 합한 TFA 여액을 진공에서 건조하였다. 수득된 고체를 연화처리하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 최종적으로 건조하여 35.6 mg (58％)의 조성 펩티드 생성물을 백색 고체로서 수득하였다. 이를 본 명세서에 기재된 것과 같이 분취용 HPLC에 의해 정제하였다. 사용된 구배는 15분에 걸쳐 0.1％ TFA/물 중 20％ 내지 75％ 0.1％ TFA/MeCN이었다. 순수한 생성물을 함유하는 분획을 동결건조하여 7.2 mg (20％ 회수율)의 순수한 생성물을 수득하였다.

실시예 5

위치-10 및 위치-11에서의 비페닐알라닌 유사체의 합성

위치-10 및 위치-11 잔기가, 치환된 페닐알라닌 유사체, 즉 비페닐알라닌 유사체 (Bip-유사체)로 나타내어진 상기 유사체에 대해, 2가지 접근법 중 하나로 상기 유사체를 펩티드 사슬에 혼입하였다.

접근법 A: 고상 스즈끼 축합

접근법 A에서, 표적 펩티드를 수득하기 위해 후속의 고상 펩티드 합성을 수행하는데 적합한 방법으로, 고상 스즈끼 축합을 실행하여 필요한 변형 페닐알라닌 잔기를 제조하였다. 표적 펩티드의 위치-11에서 아미노산이 변형 페닐알라닌 잔기로 나타내어질 경우, 이는 반응식 3에 나타난 것과 같이 제조하였다. Boc α-아미노 보호기를 제거한 후, 목적하는 11-mer 펩티드 또는 그의 유도체를 수득하기 위한 전술한 단략에 기재된 것과 같은 다중 펩티드 합성을 이용하여 사슬 신장을 계속하였다. 변형 페닐알라닌 유사체가 표적 펩티드의 위치-10에 있을 경우, 반응식 4에 나타난 것과 같은 적합한 디펩티드 수지를 이용하여 필요한 아미노산을 제조하였다. 그런 다음, 필요한 변형 페닐알라닌 유도체를 함유하는 수득된 디펩티딜 수지를 이용하여 표적 11-mer 펩티드 또는 그의 유도체를 합성하였다. 위치-10 및 위치-11 둘 다가 신규한 비페닐알라닌 잔기를 필요로 할 경우, 반응식 5에 나타난 것과 같이 2회의 연속적인 고상 스즈끼 반응을 수행하였다.

위치-11에 비페닐알라닌 잔기를 함유하는 수지의 제조를 위한 일반적 방법 (스즈끼 커플링)

방법 A:

노어 (Knorr) 결합 (Boc-아미노산-수지)을 통해, 또는 아미노산-노어 결합 (Boc-디펩티드-수지)을 통해 직접적으로 부착된 N^α-Boc-4-요오도페닐알라닌 잔기로 유도화된 폴리스티렌 (1％ DVB 가교됨) 수지 (50 mg, 0.025 mmole)를, 스크류캡을 갖는 13 X 100 mm 유리 배양관 내로 중량하였다. 아릴-보론산 (0.5 mmole)을 N-메틸피롤리디논 중 25 부피％ 디이소프로필에틸아민 0.75 ml에 용해하고, 수지에 첨가하고, 이어서 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(O) 촉매 (촉매량 3.5 mole％) 1.0 mg을 함유하는 N-메틸피롤리디논 0.05 ml을 첨가하였다. 수득된 혼합물을 질소 증기로 덮고, 반응 용기를 긴밀히 캡핑하고, 85 내지 90℃에서 17 내지 20시간 동안 주기적으로 진탕하면서 유지하였다. 수지를 5 X 1 ml의 N-메틸피롤리디논 및 5 X 1 ml의 디클로로메탄으로 세척하고, Boc 기를 절단하였다 (하기 일반적 방법참조).

방법 B:

상이한 촉매를 사용한 것을 제외하고는 일반적 방법 A와 같이 반응을 수행하였다. 팔라듐(II) 아세테이트 9.0 mg 및 2-(디시클로헥실포스피노)비페닐 56 mg을 N-메틸피롤리디논 2.0 ml에 용해함으로써 촉매 용액을 제조하였다. 0.025 mmole 범위 반응을 위해, 0.038 ml (촉매량 3 mole％)의 촉매 용액을 사용하였다.

Boc 기의 절단을 위한 방법

방법 A: 일반적 방법 A 또는 B에 기재된 것과 같이 제조된 Boc-보호된 수지를 트리메틸실릴 트리플루오로메탄술포네이트, 2,6-루티딘 및 디클로로메탄 (부피비 1:1:3)으로 구성된 시약 용액 0.5 ml로 처리하였다. 1시간 동안 이러한 3가지 시약으로 각각 진탕하면서 처리한 후, 수지를 4 X 1 ml의 디클로로메탄, 3 X 1 ml의 N,N-디메틸포름아미드, 3 X 1 ml의 N,N-디메틸포름아미드 중 20％ MeOH 및 4 X 1 ml의 디클로로메탄으로 세척한 후, 자동 펩티드 합성기에 옮겼다.

방법 B: 일반적 방법 A 또는 B에 기재된 것과 같이 제조된 Boc-보호된 수지를 무수 1,4-디옥산 중 1N HCl 1.0 ml로 1시간 동안 실온에서 진탕하면서 처리하였다. 수지를 4 X 1 ml의 디클로로메탄, 3 X 1 ml의 디클로로메탄 중 5％ 디이소프로필에틸아민 (부피:부피), 3 X 1 ml의 디클로로메탄, 및 5 X 1 ml의 N-메틸피롤리디논으로 처리하여 다음 아실화 (커플링 반응) 단계를 준비하는 유리 아미노 수지를 수득하였다.

실시예 6

위치-10에 변형 비페닐알라닌 잔기를 함유하는 수지의 제조를 위한 일반적 방법

반응식 4에 나타난 것과 같이, 스즈끼 커플링에 대해 상기 기재된 일반적 방법 (A 또는 B)을 이용하여, 아미노산 (위치-11) 결합 수지로 출발하여 위치-10에 변형 Phe를 함유하는 필요한 디펩티딜 수지를 수득하였다.

실시예 7

위치 10 및 11 둘 다에 비페닐알라닌 잔기를 함유하는 수지의 제조를 위한 일반적 방법

반응식 5에 예시된 것과 같이, 위치 11 변형 유사체에 대해 기재된 방법 (반응식 1)을 이용하고, 스즈끼 커플링 방법을 2회 연속 수행하여 위치-10 및 -11 둘 다에 변형 페닐알라닌 잔기를 함유하는 디펩티딜 수지를 제조하였다.

접근법 B: 용액 내의 스즈끼 축합을 이용한 Fmoc-비페닐알라닌 유도체의 합성

Fmoc-2-메틸-비페닐알라닌의 합성에 의해 예시된 상기 방법을 이용하여, 몇 가지 N-α-Fmoc 보호된 비페닐알라닌 유도체를 제조하였다. 이를 본 명세서에 기재된 것과 같은 11-mer 및 다른 펩티드 유사체의 고상 합성을 위해 이용하였다.

실시예 8

Fmoc-2-메틸-비페닐알라닌의 합성

하기 반응식 6은 Fmoc-2-메틸-비페닐알라닌의 합성을 기재한다.

Boc-L-티로신-O-트리플레이트: -15℃에서 N₂하에서 유지된 무수 디클로로메탄 114 mL 중 Boc-티로신 메틸 에스테르 37 g (126 mmol), 및 피리딘 25.4 mL (314 mmol, 2.5 당량)을 트리플산 무수물 25.4 mL (151 mmol, 1.2 당량)을 천천히 첨가하였다. 용액을 -15℃에서 15분 동안 교반하였다. HPLC 분석은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 물 150 mL을 첨가하여 반응을 켄칭하였다. 층을 분리하고, 유기층을 2 x 150 mL의 0.5M NaOH, 및 2 x 150 mL의 15％ 시트르산 용액으로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하고, 진공에서 건조하여 조생성물을 적색 오일로서 수득하였다 (조성 수율은 90％ 내지 정량적 사이에서 다양하였다).

Boc-(2-Me) 비페닐알라닌 메틸 에스테르: 상기 적색 오일을 톨루엔 70 mL에 용해하고, 80℃에서 예비가열된 톨루엔 580 mL 중 o-톨릴보론산 19.Og (140 mmol, 1.2 당량), 탄산칼륨 24.1 g (175 mmol, 1.5 당량) 및 테트라키스(트리페닐포스핀) 팔라듐 (O) 4.6g (4.0 mol, 0.034 당량)을 함유하는 탈기된 현탁액에 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 N₂하에서 3시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각한 다음, 셀라이트를 통해 여과하였다. 반응 혼합물을 2 x 150 mL의 0.5％의 NaOH 및 2 x 150 mL 의 15％ 시트르산 용액으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 농축하였다. 이렇게 수득된 조성 혼합물을 용리액으로서 에틸 아세테이트/헵탄 (1:9)을 이용한 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하였고 [조성 혼합물을 실리카겔 상에 예비흡수시키고 (2 g 실리카겔/g 조성 혼합물), 컬럼용으로 1:35 혼합물:실리카겔을 이용하였다], 수율은 50 내지 80％로 다양하였다.

Boc-(2-Me) 비페닐알라닌: 실온에서 유지된 메탄올 147 mL 및 테트라히드로푸란 442 mL 중 Boc-(2-Me) 비페닐알라닌 메틸 에스테르 44.5 g (120 mmol)의 용액에 1N NaOH (147 mmol, 1.2 당량) 147.4 mL을 첨가하였다. HPLC 분석은 반응이 1시간 후에 완료되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축하고, 물 500 mL와 에테르 300 mL 사이에 분배시켰다. 에테르성 용액을 버렸다. 수성층을 1 N HCl 용액 160 mL로 산성화시킨 다음, 2 x 250 mL의 에틸 에테르로 추출하였다. 에테르성 용액을 합하고, 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 여과, 농축 및 건조 후, 41.5 g의 생성물을 수득하였다.

Fmoc-(2-Me) 비페닐알라닌: 실온에서 유지된 디클로로메탄 1 L 중 Boc-(2-Me) 비페닐알라닌 41.5 g (117 mmol)의 용액에 기체성 HCl에서 버블링하였다. 백색 고체가 약 5분에 침전하기 시작하였다. 2시간 후에 얻은 HPLC는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 혼합물을 농축하였다. 잔류물을 테트라히드로푸란 600 mL 및 물 150 mL에 용해하고, 혼합물의 pH가 염기성이 될 때까지 (백색 고체가 침전될 때까지) 고체 NaHCO₃을 천천히 첨가하고, 이어서 Fmoc-Osu 38.9 g (115 mmol, 1 당량)을 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 실온에서 교반하였다. 균질한 이상성 용액을 1시간 내에 수득하였다. 실온에서 N₂하에서 밤새 교반을 계속하였다. 층을 분리하였다. 테트라히드로푸란 층을 58 mL 2N HCl로 산성화시킨 다음, 에틸 아세테이트 400 mL로 희석하였다. 층을 분리하고, 유기층을 2 x 100 mL의 물로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 농축하였다. 조생성물을 용리액으로서 디클로로메탄을 이용한 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 이용하여, 대부분의 불순물이 제거될 때까지 정제하였다. 그런 다음, 용매를 1％ 아세트산을 함유하는 헵탄 중 25％ 에틸 아세테이트 [약 23 g 실리카겔/g 조성 혼합물을 컬럼용으로 사용하였다]로 바꾸었다. 수율은 3 단계에 대해 90％ 초과였다.

실시예 9

다양한 Fmoc-비페닐알라닌 유도체 합성을 위한 일반적 합성

상기 기재된 방법을 이용하여, 상업적으로 시판되는 페놀 유도체 (예를 들어, Boc-티로신 메틸 에스테르)로 출발하여 다양한 비페닐 알라닌 유도체의 합성을수행하여 트리플레이트를 제조하고, 적절한 보론산을 이용하여 비페닐알라닌 유사체를 제조하였다. 필요한 보론산이 상업적 공급원으로부터 시판되지 않을 경우, 상기 중간체의 합성은 하기 실시예에 예시된 것과 같이 수행하였다.

2-에틸페닐 보론산: 오븐 건조된 3목 플라스크에서 -78℃에서 유지된 무수 테트라히드로푸란 280 mL 중 1-브로모-2-에틸벤젠 25 g (135 mmol)의 용액에 헥산 용액 중 2.5N n-부틸 리튬 (169 mmol, 1.25 당량) 67.5 mL을 천천히 (온도를 -68℃ 미만으로 유지하면서) 첨가하였다. 반응물을 추가의 1시간 동안 교반한 후, 트리에틸보레이트 69 mL (405 mmol, 3 당량)을 온도를 -68℃ 미만으로 유지하면서 천천히 첨가하였다. 반응물을 추가의 40분 동안 교반한 다음, 건조 빙조를 제거하고, 반응물을 실온으로 가온한 다음, 빙냉 포화 염화암모늄 용액 300 mL에 부었다. 빙냉 에틸 아세테이트 200 mL을 첨가하고, 혼합물을 추가의 30분 동안 교반하였다. 층을 분리하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하였다. 그런 다음, 이를 황산마그네슘 상에서 건조하고, 농축하여 19 g (92％ 수율)의 생성물을 수득하였다. 보론산을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.

실시예 10

내부 페닐 고리에 치환을 갖는 Fmoc-보호된 비페닐알라닌 유사체의 합성

아미노산 부분의 β-탄소 (내부 고리)에 직접 부착된 페닐 고리에 치환을 갖는 Fmoc-보호된 비페닐알라닌 유사체의 합성을 하기 반응식 7에 나타난 것과 같이 수행하였다.

일반적 방법으로서, 먼저 아연 매개 축합을 이용하여, Boc-β-요오도 알라닌을 필요한 4-요오도페닐 유도체와 반응시킴으로써 적합하게 보호된 티로신 유도체를 제조하였다. 상기 반응으로부터의 생성물을 본 명세서에 기재된 것과 같이 스즈끼 축합 반응시켜, 아미노산 부분의 β-탄소 (내부 고리)에 직접 부착된 페닐 고리의 치환을 갖는 필요한 Fmoc-보호된 비페닐알라닌 유사체를 수득하였다. 특정 실시예인 Fmoc-2'-메틸-2-메틸-비페닐알라닌의 합성이 하기에 주어져 있다.

Boc-2'-메틸-티로신 벤질 에테르 메틸 에스테르: 오븐 건조된 아연 더스트 2.2 g (33 mmol)을 질소 하에서 오븐 건조된 플라스크에 정치시켰다. 무수 테트라히드로푸란 5.2 mL 및 1,2-디브로모에탄 140 ㎕ (1.6 mmol)을 첨가하고, 용매가 비등하기 시작할 때까지 혼합물을 열 총으로 간단히 가온한 다음, 수 분 동안 강하게 교반하였다. 이 과정을 5회 반복한 다음, 반응 혼합물을 35℃로 냉각하였다. 클로로트리메틸실란 40 ㎕ (0.32 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 35℃에서 30분 동안 강하게 교반하였다. 1:1 테트라히드로푸란: 디메틸아세트아미드 중 Boc-요오도알라닌 메틸 에스테르 1.04 g (3.17 mmol)의 용액 3 mL를 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반하였다. 4-요오도-2-메틸-1-벤질옥시벤젠 819 mg (2.5 mmol)을 함유하는 1:1 테트라히드로푸란:디메틸아세트아미드의 용액 3 mL을 천천히 첨가하고, 이어서 트리-o-톨릴포스핀 338 mg (1.11 mmol) 및 Pd₂(dba)₃288 mg (0.31 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 탈기시킨 다음 60℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 2 x 25 mL의 1N HCl로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 생성물을 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하였다 (72％ 수율).

Boc-2'-메틸-티로신 메틸 에스테르: 테트라히드로푸란 30 mL 중 상기 화합물 (Boc-2'-메틸-티로신 벤질 에테르 메틸 에스테르) 7.5g (18.7 mmol)의 현탁액, 및 10％ 데구사 (Degussa) 형 탄소상 10％ 팔라듐 2.25 g을 수소 분위기 하에서 실온에서, 및 대기압에서 2일 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 농축하였다. 생성물을 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하였다 (74％ 수율).

Fmoc-2'-메틸-2-메틸-비페닐 알라닌: 상기 화합물은 Boc-2'-메틸-티로신 메틸 에스테르를 출발 물질로 이용하여, 본 명세서에 기재된 스즈끼 축합 방법을 이용하여 제조하였다. 상기 스즈끼 축합 반응에서 수득된 생성물은 본 명세서에 기재된 조건을 이용하여 Boc-기의 제거 및 Fmoc-기의 재보호 후에 목적하는 생성물을 수득하였다.

실시예 11

본 명세서에 기재된 합성 방법을 이용하여 하기 GLP-1 모방체 펩티드를 제조하였다.

실시예 12

GLP-1의 "메시지" 서열에 상응하는 펩티드, 및 "어드레스" 비페닐알라닌 디펩티드 단위가 C-말단에 부착된 동일한 펩티드의 합성 및 시험

본 발명에서 GLP-1의 "메시지" 서열로 지칭되는 GLP-1의 N-말단 1 내지 9 서열, His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-NH2에 상응하는 펩티드, 및 GLP-1의 메시지 서열 및 C-말단 비페닐알라닌 디펩티드 단위를 포함하는 GLP-1 11-mer 펩티드 유사체 His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Bip-Bip-NH2를 본 명세서에 기재된 방법을 이용하여 제조하고, 실시예 13에 기재된 cAMP 세포 기재 분석에서 시험하였다. GLP-1 11-mer 펩티드 유사체는 실시예 13에서 측정된 1.1 마이크로몰의 EC₅₀값에 상응하는 투여량 반응 방식으로 cAMP 생성을 자극하였다. 동일한 분석에서, GLP-1의 "메시지" 서열에 상응하는 펩티드에 대해 측정된 EC₅₀값은 1 밀리몰 초과였다. 분석에서 양성 대조군으로 사용된 GLP-1의 EC₅₀값은 0.100 나노몰 미만이었다.

실시예 13

고리형 AMP 측정

GLP-1 수용체는 G-단백질 커플링된 수용체이다. 생물학적 활성 형태인 GLP-1 (7-36)-아미드는 GLP-1 수용체에 결합하고, 단일 형질도입을 통해 아데닐레이트 시클라제를 활성화시키며, 세포내 cAMP 수치를 증가시킨다. GLP-1 수용체를 자극하는데 있어서 펩티드 화합물의 작용성을 모니터링하기 위해서, 세포 cAMP 수치를 분석함으로써 아데닐 시클라제 활성을 모니터링하였다. 전장 인간 글루카곤 유사 펩티드 1 수용체가 CHO-K1 세포에서 안정하게 발현되었다. 클론을 GLP-1R의 가장 우수한 발현에 대해 스크리닝하고, CHO-GLP1R-19를 선택하였다. 세포를 햄 (Ham)F12 영양 배지 (지브코 (Gibco) #; 11765-054), 10％ FBS, lx L-글루타민, lx 펜/스트렙 (Pen/Strep), 및 0.4 mg/ml G418에서 배양하였다. CHO-GLP-1R-19 세포 (배지 100 ㎕에 2,500)를 96 웰 조직 배양 마이크로타이터 플레이트의 각 웰에 평판 배양하고, 5％ CO₂분위기에서 37℃에서 72시간 동안 인큐베이션하였다. 분석하는 날에 세포를 PBS 100 ㎕로 1회 세척하였다. 각 웰의 세포에 화합물 10 ㎕ 및 반응 배지 (저 글루코스의 페놀 레드가 없는 DMEM 배지 (지브코 # 11054-020), 0.1％ BSA (시그마 (Sigma) # A7284), 0.3 mM IBMX (3-이소부틸-1 메틸크산틴, 시그마 # I5879) 90 ㎕를 첨가하고, 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 화합물을 cAMP의 자극에 대해 1 μM 및 10 μM에서 초기에 스크리닝하였다. 50％의 최대 GLP-1를 나타내는 (100 nM에서) 화합물에 대한 투여량 의존성을 1/2 로그 농도에서 중복으로 측정하였다. 인큐베이션 후, 배지를 제거하고, 세포를 PBS 100 ㎕로 1회 세척하였다. 고리형 AMP SPA 키트로부터의 용해 시약 (아머샴 파마시아 바이오텍 (Amersham Pharmacia Biotech), RPA 559; 시약은 키트의 지시에 따라 재구성되었음) 50 ㎕을 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 15분 동안 진탕하였다. 용해물 20 ㎕을 96 웰 옵티플레이트 (OptiPlate) (패커드 (Packard) # 6005190)의 각 웰에 옮기고, 키트로부터의 SPA 면역시약 60 ㎕을 첨가하였다. 실온에서 15 내지 18시간 동안 인큐베이션한 후, 플레이트를 톱카운트 (TopCount) NXT (패커드)로 각 2분/웰을 계수하였다.

각 96 웰 플레이트에 GLP-1 (대조군) 및 5개의 화합물 (중복으로)을 7의 1/2로그 투여량에서 작동시켰다. 10 nM GLP-1을 10개의 추가의 웰에 평판 배양하여 최대 활성의 측정을 위한 참고 표준으로 하였다. 얻어진 데이타를 엑셀-적합 데이타베이스로 프로세싱하였다. 고리형 AMP 표준 곡선으로부터, 방출된 cAMP의 양을 측정하고, ％ 최대 활성을 계산하고, 로그 화합물 농도에 대해 플롯팅하였다. 데이타를 비직선 굽이 곡선 적합 (시그모이드 투여량)에 의해 분석하여 화합물의 EC₅₀을 결정하였다.

실시예 14

생체내 연구

래트 모델에서 4개의 대표적인 11-mer 펩티드인 화합물 A, 화합물 B, 화합물 C 및 화합물 D에 대한 생체내 글루코스 저하 특성이 하기에 기재되어 있다. 화합물 A 및 화합물 B의 연속적인 정맥내 주입은 피하 글루코스 내성 시험 (scGTT)에서 식후 글루코스 운동 곡선을 상당하게 감소시켰다 (도 1 및 도 2 참조). 그리고, 피하 주사에 의해 투여된 상기 2개의 11-mer 펩티드는 또한 상기 모델에서 상당한 글루코스 저하 효과를 가져왔다 (도 3 및 도 4 참조). 유사체의 연속적 정맥내 주입 및 피하 농축괴 주사 둘 다에 따라 이들의 글루코스 저하 효과에 대해 명백한 투여량-반응 관계를 관찰하였다. 화합물이 연속적 주입에 의해 투여되었을 때, 각각 12 및 120 pmol/kg/분에서 화합물 A 및 화합물 B에 대한 상당한 글루코스 저하 효과를 관찰하였다. 피하 투여에 대해, 화합물 A 및 화합물 B에 대한 최대 유효 투여량은 각각 약 2 및 20 nmol/kg이었다.

화합물 C 및 D에 대해, 래트 복강내 글루코스 내성 시험 (ipGTT) 모델을 이용한 연구는 상당한 글루코스 운동 감소가 투여량 관련 방식으로 두 화합물 모두에 대해 일어날 수 있음을 보여주었다 (도 5 및 도 6 참조). 도 7은 상기 모델에서 천연 GLP-1의 효과를 보여준다.

유용성 및 조합물

A. 유용성

본 발명은 GLP-1을 모방하는데 선호성을 갖는 신규한 GLP 펩티드 모방체를 제공하며, 본 발명의 화합물은 GLP-1 수용체에 대한 작용제 활성을 갖는다. 그리고, 본 발명의 GLP 펩티드 모방체는 GLP-1 천연 서열에 비하여 단백질 가수분해 절단에 대해 증가된 안정성을 나타낸다.

따라서, 본 발명의 화합물은 당뇨병 (바람직하게는 II형, 손상된 글루코스 내성, 인슐린 저항증, 및 신장병증, 망막병증, 신경병증 및 백내장과 같은 당뇨병 합병증), 고혈당증, 고인슐린혈증, 고콜레스테롤혈증, 유리 지방산 또는 글리세롤의 상승된 혈중 수치, 고지혈증, 고중성지방혈증, 비만증, 상처 치료, 조직 허혈, 죽상경화증, 고혈압, AIDS, 장 질환 (예를 들어, 괴사장염, 미세융모 포함물 질환 또는 복강 질환), 염증성 장 증후군, 화학요법 유도 장 점막 위축 또는 손상, 신경성 식욕부진, 골다공증, 이상대사 증후군, 및 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양결장염)의 진행 또는 발병의 치료 또는 지연을 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 증상 및 장애의 치료를 위해, 포유동물, 바람직하게는 인간에게 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 고밀도 지단백질 (HDL)의 혈중 수치를 증가시키는데 이용될 수 있다.

그리고, 문헌 [JohannssonJ. Clin. Endocrinol. Metab., 82, 727-34 (1997)]에 상세화된 "증후군 X" 또는 대사 증후군으로 집합적으로 지칭되는 증상, 질환 및 질병은 본 발명의 화합물을 이용하여 치료할 수 있다.

B. 조합물

본 발명은 활성 성분으로서 치료학적 유효량의 하나 이상의 화학식 I의 화합물을 단독으로 또는 제약학적 담체 또는 희석제와 조합으로 포함하는 제약 조성물을 그 범위 내에 포함한다. 임의로, 본 발명의 화합물은 단독으로, 또는 본 발명의 다른 화합물과 조합으로, 또는 하나 이상의 다른 치료제(들), 예를 들어 항당뇨제 또는 다른 제약학적 활성 물질과 조합으로 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물은 다른 GLP-1 펩티드 모방체, 또는 항당뇨제; 항고혈당제; 저지혈/지질 저하제; 항비만증제 (식욕 억제제/조절제 포함) 및 항고혈압제를 포함한 상술한 장애의 치료에 유용한 다른 적합한 치료제와 조합으로 사용될 수 있다. 그리고, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 하기 치료제; 불임증제, 다낭난소 증후군 치료용 약제, 성장 장애 치료용 약제, 허약증의 치료용 약제, 관절염 치료용 약제, 이식에서 동종이식 거부반응 예방용 약제, 자가면역 질환 치료용 약제, 항-AIDS 약제, 항골다공증제, 염증성 질환 치료용 약제, 항혈전제, 심혈관 질환 치료용 약제, 항생제, 항정신병제, 만성 염증성 장 질환 또는 증후군 치료용 약제 및(또는) 신경성 식욕부진 치료용 약제와 조합될 수 있다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용하기에 적합한 항당뇨제의 예로는 비구아니드 (예를 들어, 메트포르민 또는 펜포르민), 글루코시다제 억제제 (예를 들어, 아카르보스 또는 미글리톨), 인슐린 (인슐린 세크레타고그 또는 인슐린 센시타이저 포함), 메글리티니드 (예를 들어, 레파글리니드), 술포닐우레아 (예를 들어, 글리메피리드, 글리부리드, 글리클라지드, 클로르프로파미드 및 글리피지드), 비구아니드/글리부리드 조합물 (예를 들어, 글루코반스 (Glucovance)(R)), 티아졸리딘디온 (예를 들어, 트로글리타존, 로시글리타존 및 피오글리타존), PPAR-알파 작용제, PPAR-감마 작용제, PPAR 알파/감마 이중 작용제, 글리코겐 포스포릴라제 억제제, 지방산 결합 단백질 (aP2)의 억제제, DPP-IV 억제제 및 SGLT2 억제제를 들 수 있다.

다른 적합한 티아졸리딘디온의 예로는 미츠비시 (Mitsubishi)의 MCC-555 (미국 특허 제 5,594,016호에 개시됨), 글락소-웰컴 (Glaxo-Welcome)의 GL-262570, 엔글리타존 (CP-68722, 화이자 (Pfizer)) 또는 다르글리타존 (CP-86325, 화이자), 이사글리타존 (MIT/J&J), JTT-501 (JPNT/P&U), L-895645 (머크), R-119702 (산쿄 (Sankyo)/WL), NN-2344 (Dr. 레디 (Reddy)/NN), 또는 YM-440 (야마노우찌 (Yamanouchi))를 들 수 있다.

적합한 PPAR 알파/감마 이중 작용제의 예로는 AR-H039242 (아스트라/제네카 (Astra/Zeneca)), GW-409544 (글락소-웰컴), KRP297 (키오린 머크 (Kyorin Merck)), 및 문헌 [Murakami et al, "A Novel Insulin Sensitizer Acts As a Coligand for Peroxisome Proliferation - Activated Receptor Alpha (PPAR alpha) and PPAR gamma. Effect on PPAR alpha Activation on Abnormal Lipid Metabolismin Liver of Zucker Fatty Rats", Diabetes 47,1841-1847 (1998)], 및 2000년 9월 18일자로 출원된 미국 특허 출원 제 09/644,598호에 개시된 것들을 들 수 있으며, 상기 출원의 개시 사항은 본 명세서에 참고로 인용되며, 그에 기재된 투여량을 사용하고, 바람직한 것으로 명시된 화합물은 본원에 사용하기에 바람직하다.

적합한 aP2 억제제의 예로는 1999년 9월 7일자로 출원된 미국 특허 출원 제 09/391,053호, 2000년 3월 6일자로 출원된 미국 특허 출원 제 09/519,079호에 개시된 것들을 들 수 있으며, 본 명세서에 개시된 투여량을 사용한다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 적합한 DPP4 억제제의 예로는 W099/38501호, W099/46272호, W099/67279호 (프로바이오드럭 (PROBIODRUG)), W099/67278호 (프로바이오드럭), W099/61431호 (프로바이오드럭), 문헌 [Hughes et al, Biochemistry, 38 (36), 11597-11603, 1999]에 개시된 NVP-DPP728A (1- [[[2-[(5-시아노피리딘-2-일)아미노]에틸]아미노]아세틸]-2-시아노-(S)-피롤리딘) (노파르티스 (Novartis)), TSL-225 (트립토필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-3-카르복실산 (문헌 [Yamada et al, Bioorg. & Med. Chem. Lett. 8 (1998) 1537-1540]에 개시됨), 문헌 [Ashworth et al, Bioorg. & Med. Chem. Lett., Vol. 6, No. 22, pp 1163-1166 및 2745-2748 (1996)]에 개시된 2-시아노피롤리디드 및 4-시아노피롤리디드를 들 수 있으며, 상기 참고문헌에 기재된 투여량을 사용한다.

적합한 메글리티니드의 예로는 나테글리니드 (노파르티스) 또는 KAD1229 (PF/키세이 (Kissei))를 들 수 있다.

본 발명의 GLP-1 모방체와 조합으로 사용될 수 있는 다른 적합한 글루카곤유사 펩티드-1 (GLP-1) 화합물의 예로는 GLP-1 (1-36) 아미드, GLP-1 (7-36) 아미드, GLP-1 (7-37) (하베너 (Habener)의 미국 특허 제 5,614,492호에 개시됨), 및 AC2993 (아밀린 (Amylin)), LY-315902 (릴리 (Lilly)) 및 NN-2211 (노보노르디스크 (NovoNordisk))을 들 수 있다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용하기에 적합한 저지혈/지질 저하제의 예로는 하나 이상의 MTP 억제제, HMG CoA 환원효소 억제제, 스쿠알렌 합성효소 억제제, 피브린산 유도체, ACAT 억제제, 리폭시게나제 억제제, 콜레스테롤 흡수 억제제, 회장 Na⁺/담즙산 조수송체 억제제, LDL 수용체 활성의 상향조절제, 담즙산 격리제, 콜레스테롤 에스테르 전이 단백질 억제제 (예를 들어, CP-529414 (화이자)) 및(또는) 니코틴산 및 그의 유도체를 들 수 있다.

상기 기재된 것과 같이 사용될 수 있는 MTP 억제제의 예로는 미국 특허 제 5,595,872호, 동 제 5,739,135호, 동 제 5,712,279호, 동 제 5,760,246호, 동 제 5,827,875호, 동 제 5,885,983 및 동 제 5,962,440호에 개시된 것들을 들 수 있다.

하나 이상의 화학식 I의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 HMG CoA 환원효소 억제제의 예로는 미국 특허 제 3,983,140호에 개시된 것과 같은 메바스타틴 및 관련 화합물, 동 제 4,231,938에 개시된 것과 같은 로바스타틴 (메비놀린) 및 관련 화합물, 동 제 4,346,227호에 개시된 것과 같은 프라바스타틴 및 관련 화합물, 동 제 4,448,784 및 제 4,450,171호에 개시된 것과 같은 심바스타틴 및 관련 화합물을들 수 있다. 본원에 사용될 수 있는 다른 HMG CoA 환원효소 억제제의 예로는 미국 특허 제 5,354,772호에 개시된 플루바스타틴, 동 제 5,006,530호 및 5,177,080호에 개시된 것과 같은 세리바스타틴, 동 제 4,681,893호, 제 5,273,995호, 제 5,385,929호 및 제 5,686,104호에 개시된 것과 같은 아토르바스타틴, 동 제 5,011,930호에 개시된 것과 같은 아타바스타틴 (닛산/산쿄 (Nissan/Sankyo)의 니스바스타틴 (NK-104)), 동 제 5,260,440호에 개시된 것과 같은 비사스타틴 (시노기 (Shionogi)-아스트라/제네카 (ZD-4522)), 및 동 제 5,753,675호에 개시된 관련 스타틴 화합물, 동 제 4,613,610호에 개시된 것과 같은 메발로노락톤 유도체의 피라졸 유사체, PCT 출원 제 WO 86/03488호에 개시된 것과 같은 메발로노락톤 유도체의 인덴 유사체, 미국 특허 제 4,647,576호에 개시된 것과 같은 6-[2-(치환-피롤-1-일)-알킬)피란-2-온 및 그의 유도체, 썰 (Searle)의 SC-45355 (3-치환 펜탄디오산 유도체) 디클로로아세테이트, PCT 출원 제 WO 86/07054호에 개시된 것과 같은 메발로노락톤의 이미다졸 유사체, 프랑스 특허 제 2,596,393호에 개시된 것과 같은 3-카르복시-2-히드록시-프로판-포스폰산 유도체, 유럽 특허 출원 제 0221025호에 개시된 것과 같은 2,3-이치환 피롤, 푸란 및 티오펜 유도체, 미국 특허 제 4,686,237호에 개시된 메발로노락톤의 나프틸 유사체, 동 제 4,499,289호에 개시된 것과 같은 옥타히드로나프탈렌, 유럽 특허 출원 제 0142146 A2에 개시된 것과 같은 메비놀린 (로바스타틴)의 케토 유사체, 및 미국 특허 제 5,506,219호 및 제 5,691,322호에 개시된 것과 같은 퀴놀린 및 피리딘 유도체를 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

바람직한 저지혈제는 프라바스타틴, 로바스타틴, 심바스타틴, 아토르바스타틴, 플루바스타틴, 세리바스타틴, 아타바스타틴 및 ZD-4522이다.

그리고, GB 2205837호에 개시된 것들과 같은 HMG CoA 환원효소를 억제하는데 유용한 포스핀산 화합물은 본 발명의 화합물과 조합으로 사용하기에 적합하다.

본원에 사용하기에 적합한 스쿠알렌 합성효소 억제제의 예로는 미국 특허 제 5,712,396호에 개시된 α-포스포노-술포네이트, 이소프레노이드 (포스피닐-메틸)포스포네이트를 포함한, 문헌 [Biller et al, J. Med. Chem., 1988, Vol. 31, No. 10, pp 1869-1871]에 개시된 것들, 및 다른 공지된 스쿠알렌 합성효소 억제제, 예를 들어, 미국 특허 제 4,871,721호 및 제 4,924,024호, 및 문헌 [Biller, S. A., Neuenschwander, K., Ponpipom, M. M., 및 Poulter, C. D., Current Pharmaceutical Design, 2, 1-40 (1996)]에 개시된 것을 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

그리고, 본원에 사용하기에 적합한 다른 스쿠알렌 합성효소 억제제의 예로는 문헌 [P. Ortiz de Montellano et al, J. Med. Chem. , 1977,20, 243-249]에 개시된 테르페노이드 피로포스페이트, 문헌 [Corey and Volante, J. Am. Chem. Soc., 1976, 98, 1291-1293]에 개시된 파르네실 디포스페이트 유사체A및 프리스쿠알렌 피로포스페이트 (PSQ-PP) 유사체, 문헌 [McClard, R. W. et al, J.A.C.S., 1987,109, 5544]에 보고된 포스피닐포스네이트, 및 문헌 [Capson, T.L. , PhD dissertation, June, 1987, Dept. Med. Chem. U of Utah, Abstract, Table of Contents, pp 16, 17, 40-43, 48-51, Summary]에 보고된 시클로프로판을 들 수 있다.

하나 이상의 화학식 I의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 피브린산 유도체의 예로는 페노피브레이트, 겜피브로질, 클로피브레이트, 베자피브레이트, 시프로피브레이트, 클리노피브레이트 등, 미국 특허 제 3,674,836호에 개시된 것과 같은 프로부콜, 및 관련 화합물 (프로부콜 및 겜피브로질이 바람직함), 담즙산 격리제, 예를 들어, 콜레스티라민, 콜레스티폴 및 DEAE-세파덱스 (Sephadex) (세콜렉스 (Secholex)(R), 폴리섹시드 (Policexide)(R)), 및 리포스타빌 (론-폴렌크 (Rhone-Poulenc)), 에이사이 (Eisai) E-5050 (N-치환 에탄올아민 유도체), 이마닉실 (HOE-402), 테트라히드로리프스타틴 (THL), 이스티그마스타닐포스-포릴클로린 (SPC, 로슈 (Roche)), 아미노시클로덱스트린 (타나베 세이요꾸 (Tanabe Seiyoku)), 아지노모또 (Ajinomoto) AJ-814 (아줄렌 유도체), 멜린아미드 (스미또모 (Sumitomo)), 산도즈 (Sandoz) 58-035, 아메리칸 시아나미드 (American Cyanamid) CL-277,082 및 CL-283,546 (이치환 우레아 유도체), 니코틴산, 아시피목스, 아시프란, 네오마이신, p-아미노살리시클릭산, 아스피린, 미국 특허 제 4,759,923호에 개시된 것과 같은 폴리(디알릴메틸아민) 유도체, 동 제 4,027,009호에 개시된 것과 같은 사차 아민 폴리(디알릴디메틸암모늄 클로라이드) 및 이오넨, 및 기타 혈청 콜레스테롤 저하제를 들 수 있다.

하나 이상의 화학식 I의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 ACAT 억제제의 예로는 문헌 [Drugs of the Future 24, 9-15 (1999), (Avasimibe)]; "The ACAT inhibitor, Cl-1011 is effective in the prevention and regression of aorticfatty streak area in hamsters", Nicolosi et al, Atherosclerosis (Shannon, Irel). (1998), 137(1), 77-85; "The pharmacological profile of FCE 27677: a novel ACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression of the hepatic secretion of ApoB100-containing lipoprotein", Ghiselli, Giancarlo, Cardiovasc. Drug Rev. (1998), 16(1), 16-30; "RP 73163: a bioavailable alkylsulfinyl-diphenylimidazole ACAT inhibitor", Smith, C., et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. (1996), 6(1), 47-50]; "ACAT inhibitors: physiologic mechanisms for hypolipidemic and anti-atherosclerotic activities in experimental animals", Krause et al, Editor(s): Ruffolo, Robert R., Jr.; Hollinger, Mannfred A., Inflammation: Mediators Pathways (1995), 173-98, Publisher: CRC, Boca Raton, Fla.; "ACAT inhibitor: potential anti-atherosclerotic agents", Sliskovic et al, Curr. Med. Chem. (1994), 1(3), 204-25; "Inhibitors of acyl-CoA: cholesterol O-acyl transferase (ACAT) as hypocholesterolemic agents. 6. The first water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity. Ihibitors of acyl-CoA: cholesterolacyltransferase (ACAT). 7. Development of a series of substituted N-phenyl-N'-[(1- phenylcyclopentyl)methyl]ureas with enhanced hypocholesterolemic activity", Stout et al, Chemtracts: Org. Chem. (1995), 8(6), 359-62]에 개시된 것들, 또는 TS-962 (다이쇼 파마슈티칼 (주) (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd))를 들 수 있다.

저지혈제는 MD-700 (다이쇼 파마슈티칼 (주)) 및 LY295427 (일라이 릴리(Eli Lilly))와 같은 LD2 수용체 활성의 상향조절제일 수 있다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용하기에 적합한 콜레스테롤 흡수 억제제의 예로는 SCH48461 (쉐링-플로프 (Schering-Plough)), 및 문헌 [Atherosclerosis 115, 45-63 (1995) and J. Med. Chem. 41, 973 (1998)]에 개시된 것들을 들 수 있다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용하기에 적합한 회장 Na⁺/담즙산 조수송제 억제제의 예로는 문헌 [Drugs of the Future, 24, 425-430 (1999)]에 개시된 것들을 들 수 있다.

하나 이상의 화학식 I의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 리폭시게나제 억제제의 예로는 WO 97/12615호에 개시된 것과 같은 벤즈이미다졸 유도체와 같은 15-리폭시게나제 (15-LO) 억제제, WO 97/12613호에 개시된 것과 같은 15-LO 억제제, WO 96/38144호에 개시된 것과 같은 이소티아졸론, 및 문헌 [Sendobry et al "Attenuation of diet-induced atherosclerosis in rabbits with a highly selective 15-lipoxygenase inhibitor lacking significant antioxidant properties", Brit. J. Pharmacology (1997) 120, 1199-1206], 및 문헌 [Cornicelli et al,"15-Lipoxygenase and its Inhibition: A Novel Therapeutic Target for Vascular Disease", Current Pharmaceutical Design, 1999, 5, 11-20]에 개시된 것과 같은 15-LO 억제제를 들 수 있다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용하기에 적함한 항고혈압제의 예로는 베타아드레날린 차단제, 칼슘 채널 차단제 (L형 및 T형; 예를 들어, 딜티아젬, 베라파밀, 니페디핀, 암로디핀 및 미베프라딜), 이뇨제 (예를 들어, 클로로타이지드, 히드로클로로티아지드, 플루메티아지드, 히드로플루메티아지드, 벤드로플루메티아지드, 메틸클로로티아지드, 트리클로로메티아지드, 폴리티아지드, 벤즈티아지드, 에타크린산 트리크리나펜, 클로르탈리돈, 푸로세미드, 무솔리민, 부메타니드, 트리암트레넨, 아밀로리드, 스피로노락톤), 레닌 억제제, ACE 억제제 (예를 들어, 카프토프릴, 조페노프릴, 포시노프릴, 에날라프릴, 세라노프릴, 실라조프릴, 델라프릴, 펜토프릴, 퀴나프릴, 라미프릴, 리시노프릴), AT-1 수용체 길항제 (예를 들어, 로사르탄, 이르베사르탄, 발사르탄), ET 수용체 길항제 (예를 들어, 시탁센탄, 아트르센탄 및 미국 특허 제 5,612,359호 및 제 6,043,265호에 개시된 화합물), 이중 ET/AII 길항제 (예를 들어, WO 00/01389호에 개시된 화합물), 중성 엔도펩티다제 (NEP) 억제제, 바소펩시다제 억제제 (이중 NEP-ACE 억제제) (예를 들어, 오마파트릴라트 및 게모파트릴라트),및 니트레이트를 들 수 있다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용하기에 적합한 항비만증제의 예로는 NPY 수용체 길항제, MCH 길항제, GHSR 길항제, CRH 길항제, 베타 3 아드레날린 작용제, 리파제 억제제, 세로토닌 (및 도파민) 재흡수 억제제, 티로이드 수용체 베타 약물 및(또는) 식욕억제제를 들 수 있다.

본 발명의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 베타 3 아드레날린 작용제의 예로는 AJ9677 (다께다/다이닛뽄 (Takeda/Dainippon)), L750355 (머크), 또는 CP331648 (화이자), 또는 미국 특허 제 5,541,204호, 제 5,770,615호, 제5,491,134호, 제 5,776,983호 및 제 5,488,064호에 개시된 것과 같은 기타 베타 3 작용제를 들 수 있으며, AJ9677, L750,355 및 CP331648이 바람직하다.

임의로 본 발명의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 리파제 억제제의 예로는 오를리스타트 또는 ATL-962 (알리자임 (Alizyme))을 들 수 있으며, 오를리스타트가 바람직하다.

임의로 화학식 I의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 세로토닌 (및 도파민) 재흡수 억제제의 예로는 시부트라민, 토피라메이트 (존슨 & 존슨 (Johnson & Johnson)) 또는 악소킨 (리제네론 (Regeneron))을 들 수 있으며, 시부트라민 및 토피라메이트가 바람직하다.

임의로 본 발명의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 티로이드 수용체 베타 화합물의 예로는 티로이드 수용체 리간드, 예를 들어 W097/21993호 (U. Cal SF), W099/00353호 (카로바이오 (KaroBio)) 및 GB98/284425호 (카로바이오)에 개시된 것들을 들 수 있으며, 카로바이오 출원의 화합물이 바람직하다.

임의로 본 발명의 화합물과 조합으로 사용될 수 있는 식욕억제제의 예로는 덱삼페타민, 펜테르민, 페닐프로파놀아민 또는 마진돌을 들 수 있으며, 덱삼페타민이 바람직하다.

적합한 항정신병제의 예로는 클로자핀, 할로페리돌, 올란자핀 (지프렉사 (Zyprexa)(R)), 프로자크 (Prozac)(R) 및 아리피프라졸 (아빌리피 (Abilify)(R))을 들 수 있다.

상술한 특허 및 특허 출원은 본 명세서에 참고로 인용된다.

상기 기타 치료제는 본 발명의 화합물과 조합으로 사용될 경우, 예를 들어 문헌 [Physician's Desk Reference]에 지시된 양으로 상기 기재된 특허에서와 같이, 또는 다른 식으로는 당업자에 의해 결정된 것과 같이 사용될 수 있다.

투여량 및 제형

적합한 GLP-1 펩티드 모방체는 당뇨병 및 기타 관련 질환을 치료하기 위하여, 화합물 단독으로서 및(또는) 허용되는 담체와 혼합되어 제약 제제의 형태로 환자에게 투여될 수 있다. 당뇨병 치료의 당업자는 상기 치료의 필요가 있는 인간을 포함한 포유동물에게 투여되는 상기 화합물의 투여량 및 경로를 쉽게 결정할 수 있다. 투여 경로의 예로는 경구적, 구강내, 직장내, 경피적, 협측, 비강내, 폐내, 피하, 근육내, 진피내, 설하, 결장내, 안구내, 정맥내 또는 장내 투여를 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 상기 화합물은 허용되는 조제 관행 (문헌 [(Fingl et al., in The Pharmacological Basis of Therapeutics, Ch. 1, p. 1, 1975; Remington's Pharmaceutical Sciences, 18^thed., Mack Publishing Co, Easton, PA, 1990])에 근거한 투여 경로에 따라 제제화된다.

본 발명의 제약학적으로 허용되는 GLP-1 펩티드 모방체 조성물은 정제, 캡슐제 (각각은 서방성 또는 지효성 제제를 포함함), 환제, 분말제, 과립제, 엘릭시르, 원위치의 겔, 미소구체, 결정질 컴플리스, 리포좀, 마이크로에멀젼, 팅크제, 현탁액, 시럽제, 에어로졸 분사제 및 에멀젼과 같은 다중 투여 제형으로 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 또한 제약 분야의 당업자에게 널리 공지된 투여 제형을모두 이용하여 경구적으로, 정맥내로 (농축괴 또는 주입), 복막내로, 피하로, 경피적으로 또는 근육내 제형으로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로, 선택된 투여 경로 및 표준 제약 관행을 기준으로 선택된 제약학적 담체와 함께 투여될 것이다.

본 발명의 조성물을 위한 투여량 처방은, 물론 특정 약제의 약역학적 특성 및 투여 형태 및 경로; 수령자의 종, 연령, 성별, 건강, 의학적 상태 및 체중; 증상의 성질 및 정도; 동반 치료의 종류; 치료의 빈도; 투여 경로, 환자의 신장 및 간 기능 및 목적하는 효과와 같은 알려진 인자에 따라 다양할 것이다. 의사 또는 수의사는 질환 상태의 진행을 예방, 대항 또는 정지시키는데 필요한 약물의 유효량을 결정 및 처방할 수 있다.

일반적 기준에 의해, 효과가 나타나는데 사용될 경우 활성 성분의 일일 경구 투여량은 약 0.001 내지 1000 mg/체중 kg 사이, 바람직하게는 1일당 약 0.01 내지 100 mg/체중 kg 사이, 가장 바람직하게는 약 0.6 내지 20 mg/kg/일의 범위일 것이다. 정맥내로는, 효과가 나타나는데 사용될 경우 활성 성분의 일일 투여량은 일정 속도로 주입하는 동안 분당 0.001 ng 내지 100.0 ng/체중 Kg당 사이의 범위일 것이다. 이러한 일정한 정맥내 주입은 바람직하게는 분당 0.01 ng 내지 50 ng 체중 Kg당, 가장 바람직하게는 분당 0.1 ng 내지 10.0 mg 체중 Kg당의 속도로 투여될 것이다. 본 발명의 조성물은 1일 1회 투여로 투여될 수 있거나, 총 일일 투여량은 일일 2, 3 또는 4회의 분할 투여로 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 또한 필요한 대로 수일/수주/수개월의 기간에 걸쳐 약물이 서방되게 하는 데포 제제로 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 적합한 비강내 비히클의 국소적 사용을 통해 비강내 제형으로, 또는 경피적 피부 패치를 이용하여 경피적 경로로 투여될 수 있다. 경피적 전달 시스템의 형태로 투여될 경우, 투여량의 투여는 물론 간헐물보다 투여량 처방 내도록 연속적일 것이다.

상기 조성물은 전형적으로 의도하는 투여 제형, 즉 경구 정제, 캡슐제, 엘릭시르, 분사제가 있거나 없는 에어로졸 분사제 및 시럽과 같은 투여 제형과 관련되어 적합하게 선택된, 적합한 제약학적 희석제, 부형제 또는 담체 (본 명세서에서 집합적으로 제약학적 담체로 지칭됨)와의 혼합물로 투여되며, 통상의 제약 관행과 일치한다.

예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 제형으로 경구 투여하기 위해, 활성 약물 성분은 경구의 비독성 제약학적으로 허용되는 불활성 담체, 예를 들어 락토스, 전분, 스크로스, 글루코스, 메틸 셀룰로스, 스테아르산마그네슘, 인산칼슘, 황산칼슘, 만니톨 및 소르비톨 (이에 제한되지는 않음)과 조합될 수 있으며; 액체 제형으로 경구 투여하기 위해, 경구 약물 성분은 경구의 비독성 제약학적으로 허용되는 불활성 담체, 예를 들어 에탄올, 글리세롤 및 물 (이에 제한되지는 않음)과 조합될 수 있다. 더욱이, 목적하거나 필요할 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 착색제를 또한 혼합물에 혼입할 수 있다. 적합한 결합제의 예로는 전분, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토스와 같은 천연 슈가 (이에 제한되지는 않음), 옥수수 감미제, 아카시아, 트라가칸트 또는 알긴산나트륨과 같은 천연 및 합성 검, 카르복실메틸셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜 및 왁스를 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 상기 투여 제형에 사용되는 윤활제의 예로는 올레산나트륨, 스테아르산나트륨, 스테아르산마그네슘, 벤조산나트륨, 아세트산나트륨 및 염화나트륨을 들 수 있다. 붕해제의 예로는 전분, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토나이트 및 크산탄 검을 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 조성물은 또한 소 단일박막 소포, 대 단일박막 소포 및 다중박막 소포와 같은 혼합 마이셀 또는 리포좀 전달 시스템의 형태로 투여될 수 있다. 리포좀은 콜레스테롤, 스테아릴아민 또는 포스파티딜콜린과 같은 다양한 인지질로부터 형성될 수 있다. 약물 흡수를 증진시키기 위해 침투 증진제를 첨가할 수 있다.

약제의 수많은 바람직한 질 (즉, 가용성, 생체이용율, 제조성 등)을 향상시키기 위해 프로드러그가 공지되어 있기 때문에, 본 발명의 화합물은 프로드러그의 형태로 전달될 수 있다. 따라서, 본 발명은 현재 청구된 화합물의 프로드러그, 그의 전달 방법 및 그를 함유하는 조성물을 포괄하는 것으로 의도된다.

본 발명의 조성물은 또한 표적성 약물 담체로서의 가용성 중합체와 결부될 수 있다. 이러한 중합체의 예로는 폴리비닐-피롤리돈, 피란 공중합체, 폴리히드록시프로필-메타크릴아미드-페놀, 폴리히드록시에틸아스파르트아미드페놀 또는 팔미토일 잔기로 치환된 폴리에틸렌옥시드-폴리리신을 들 수 있다. 그리고, 본 발명의 조성물은 약물을 조절 방출하는데 유용한 생체분해성 중합체의 부류, 예를 들어 폴리락트산, 폴리글리콜산, 폴리락트산과 폴리글리콜산의 공중합체, 폴리엡실론, 카프로락톤, 폴리히드록시 부티르산, 폴리오르토에스테르, 폴리아세탈, 폴리디히드로피란, 폴리시아노아실레이트 및 히드로겔의 가교 또는 양극성 블록 공중합체와 조합될 수 있다.

투여에 적합한 투여 제형 (제약 조성물)은 투여 단위 당 약 0.1 mg 내지 약 500 mg의 활성 성분을 함유한다. 상기 제약 조성물에서, 활성 성분은 통상적으로 조성물의 총 중량을 기준으로 약 5 내지 95 중량％의 양으로 존재할 것이다.

젤라틴 캡슐은 활성 성분 및 분말 담체, 예를 들어 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 스테아르산마그네슘 및 스테아르산을 함유할 수 있다. 유사한 희석제가 압축 정제를 제조하기 위해 사용될 수 있다. 정제 및 캡슐제 둘 다는 서방형 제품으로 제조되어 수시간의 기간에 걸쳐 약물이 연속적으로 방출되게 할 수 있다. 압축 정제는 임의의 불쾌한 맛을 없애기 위해, 그리고 대기로부터 정제를 보호하기 위해 슈가 코팅 또는 필름 코팅되거나, 위장관에서의 선택적 붕해를 위해 장용성 코팅될 수 있다.

경구 투여용 액체 투여 제형은 환자의 수용성을 증가시키기 위해 착색제 및 향미제를 함유할 수 있다.

일반적으로, 물, 적합한 오일, 살린, 수성 덱스트로스 (글루코스) 및 관련 슈가 용액, 및 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 글리콜은 비경구 용액을 위한 적합한 담체이다. 비경구 투여용 용액은 바람직하게는 활성 성분의 수용성 염, 적합한 안정화제, 및 필요할 경우 완충 물질을 함유한다. 단독 또는 조합된 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제는 적합한 안정화제이다. 또한, 시트르산 및 그의 염 및 나트륨 EDTA가 사용될 수 있다. 그리고, 비경구 용액은 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올과 같은 보존제를 함유할 수 있다.

적합한 제약학적 담체는 당 분야의 표준 참고문헌인 문헌 [Remington : The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Edition, Mack Publishing Company, 1995]에 기재되어 있다.

본 발명의 화합물의 투여를 위한 대표적인 유용한 제약학적 투여 제형은 하기와 같이 예시될 수 있다.

캡슐제

많은 단위 캡슐제는 표준 2벌 경질 젤라틴 캡슐을 분말 활성 성분 100 mg, 락토스 150 mg, 셀룰로스 50 mg 및 스테아르산마그네슘 6 mg으로 충전함으로써 제조할 수 있다.

연질 젤라틴 캡슐제

대두유, 면실유 또는 올리브유와 같은 소화성 오일 중 활성 성분의 혼합물을 제조하고, 정변위 펌프에 의해 젤라틴 내로 주사하여 활성 성분 100 mg을 함유하는 연질 젤라틴 캡슐을 형성할 수 있다. 상기 캡슐은 세척 및 건조되어야 한다.

정제

정제는 통상의 방법으로 투여 단위가 예를 들어 활성 성분 100 mg, 콜로이드성 이산화규소 0.2 mg, 스테아르산마그네슘 5 mg, 미세결정질 셀룰로스 275 mg, 전분 11 mg 및 락토스 98.8 mg가 되도록 제조할 수 있다. 적합한 코팅을 도포하여 향미를 증가시키거나 흡수를 지연시킬 수 있다.

주사제

주사에 의한 투여에 적합한 비경구 조성물은 예를 들어 프로필렌 글리콜 및 물 10 부피％ 중 활성 성분 1.5 중량％를 교반함으로써 제조할 수 있다. 용액은 염화나트륨으로 등장성으로 만들고 무균화하여야 한다.

현탁액

수성 현탁액은 예를 들어 각 5 mL이 미분된 활성 성분 100 mg, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스 20 mg, 벤조산나트륨 5 mg, 소르비톨 용액 1.0 g, U.S.P. 및 바닐린 0.025 mL 또는 기타 향미제를 함유하도록 경구 및(또는) 비경구 투여용으로 제조할 수 있다.

생체분해성 미립자

주사에 의해 투여하기에 적합한 서방형 비경구 조성물은 예를 들어 적합한 생체분해성 중합체를 용매에 용해시키고, 중합체 용액에 혼입될 활성 성분을 첨가하고, 용매를 기질로부터 제거하여 활성 성분이 기질 중에 분포된 중합체의 기질을 형성함으로써 제조할 수 있다.

명백하게, 본 발명의 많은 변형 및 변경이 상기 기술의 측면에서 가능하다. 따라서, 첨부된 청구항의 범위 내에서 본 발명은 본 명세서에 특정하게 기재된 것보다 다른 식으로 수행될 수 있는 것으로 이해된다.

본 발명은 본 발명의 개별 측면의 한 예시로서 의도되는 기재된 특정 실시양태에 의해 범위가 제한되지 않아야 한다. 본 명세서에 보여지고 기재된 것 뿐 아니라 기능적으로 등가의 방법 및 구성 요소는 상기 기재 및 첨부된 도면으로부터당업자에게 명백해질 것이다. 이러한 변형은 첨부된 청구항의 범위 내에 있는 것으로 의도된다.

Claims (61)

1. 하기 화학식 I의 서열을 갖는 단리된 폴리펩티드.

   <화학식 I>

   상기 식에서,

   X_aa1-9는 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   Y 및 Z는 아미노산 잔기이고;

   여기서, Y 및 Z의 알파-탄소 원자에서 치환체 중 하나는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 상기 1차 치환체 헤테로시클릴알킬은 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 또는 헤테로아릴기로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고; 임의의 상기 1차 또는 2차 치환체는 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도,알킬 술포닐, 아릴 술포닐 또는 포스포닉기 중 하나 이상으로 더 치환될 수 있고; 여기서, 상기 1차 또는 2차 치환체는 공유 결합에 의해 임의로 가교되어 하나 이상의 서로 융합된 시클릭 또는 헤테로시클릭 계를 형성할 수 있고;

   여기서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

   여기서, Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

   A 및 B는 임의로 존재하고;

   여기서, A가 존재하면, A는 수소, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 약 1 내지 약 15개 함유하는 펩티드, R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂이고;

   여기서, 상기 R은 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;

   여기서, 상기 R₄및 R₅는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;

   여기서, X_aa1의 알파-아미노기는 수소 또는 알킬기로 치환되고, 상기 알킬기는 임의로 A와 고리를 형성할 수 있고;

   여기서, B가 존재하면, B는 OR₁, NR₁R₂, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 15개 함유하고, C-말단에서 카르복스아미드, 치환된 카르복스아미드, 에스테르, 유리 카르복실산 또는 아미노-알코올로서 종결되는 펩티드이고;

   여기서, 상기 R₁및 R₂는 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴옥시알킬로부터 독립적으로 선택된다.
2. 제1항에 있어서, Y 및 Z의 알파-탄소 원자 상 치환체가 헤테로아릴아릴메틸, 아릴헤테로아릴메틸, 또는 비페닐알라닌 잔기를 형성하는 비페닐메틸로 구성된 군으로부터 선택되고, 또한 이중 임의의 치환체가 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 및 포스포닉기 중 하나 이상으로 임의로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
3. 제1항에 있어서, B가 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 약 10개 함유하는 펩티드인 단리된 폴리펩티드.
4. 제3항에 있어서, B가 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 약 5개 함유하는 펩티드인 단리된 폴리펩티드.
5. 제1항에 있어서, X_aa1, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-알킬화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
6. 제5항에 있어서, X_aa1, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-메틸화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
7. 제1항에 있어서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 수소, 메틸 또는 에틸로 치환되고; Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 수소, 메틸 또는 에틸로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
8. 제1항에 있어서,

   X_aa1이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 및 아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체이고, 상기 1차 치환체는 헤테로아릴 또는 헤테로시클릴로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa2가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 시클로알킬이고, 상기 알킬기는 임의로 X_aa2의 질소와 고리를 형성할 수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa3이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복시알킬, 비스-카르복시알킬, 술포닐알킬, 헤테로알킬 및 머캅토알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa4가, 알파-탄소가 치환되지 않거나, 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 아미노알킬, 카르복시알킬 헤테로아릴알킬 및 헤테로시클릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa5가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 히드록시알킬이고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa6이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릴, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬기로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa7이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 히드록실알킬기인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa8이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 히드록실알킬, 헤테로아릴알킬 및 카르복스아미도알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   X_aa9가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복실알킬, 비스-카르복실알킬, 카르복실아릴, 술포닐알킬, 카르복실아미도알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

   A가 수소, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 약 1 내지 약 5개 함유하는 펩티드, R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂인 단리된 폴리펩티드.
9. 제8항에 있어서,

   X_aa1이 L-His, D-His, L-N-메틸-His, D-N-메틸-His, L-4-티아졸릴Ala 및 D-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa2가 L-Ala, D-Ala, L-Pro, Gly, D-Ser, D-Asn, L-N-메틸-Ala, D-N-메틸-Ala, L-4-티오Pro, L-Pro(t-4-OH), L-2-Pip, L-2-Azt, Aib, S- 또는 R-Iva 및 Acc₃으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa3이 L-Glu, L-N-메틸-Glu, L-Asp, D-Asp, L-His, L-Gla, L-Adp, L-Cys 및 L-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa4가 Gly, L-His, L-Lys 및 L-Asp로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa5가 L-Thr, D-Thr, L-Nle, L-Met, L-Nva 및 L-Aoc로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa6이 L-Phe, L-Tyr, L-Tyr(Bzl), Tyr(3-NO₂), L-Nle, L-Trp, L-Phe(펜타-플루오로), D-Phe(펜타-플루오로), Phe(2-플루오로), Phe(3-플루오로), Phe(4-플루오로), Phe(2,3-디-플루오로), Phe(3,4-디-플루오로), Phe(3,5-디-플루오로), L- Phe(2,6-디-플루오로), Phe(3,4,5-트리-플루오로), Phe(2-요오도), Phe(2-OH), Phe(2-O메틸), Phe(3-O메틸), Phe(3-시아노), Phe(2-클로로), Phe(2-NH₂), Phe(3-NH₂), Phe(4-NH₂), Phe(4-NO₂), Phe(4-메틸), Phe(4-알릴), Phe(n-부틸), Phe(4-시클로헥실), Phe(4-시클로헥실옥시), Phe(4-페닐옥시), 2-나프틸Ala, 2-피리딜Ala, L-4-티아졸릴Ala, L-2-Thi, L-α-Me-Phe, D-α-Me-Phe, L-α-Et-Phe, D-α-Et-Phe, L-α-Me-Phe(2-플루오로), D-α-Me-Phe(2-플루오로), L-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), L-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), L-α-Me-Phe(펜타-플루오로) 및 D-α-Me-Phe(펜타-플루오로)로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa7이 L-Thr, D-Thr, L-Ser 및 L-hSer로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa8이 L-Ser, L-hSer, L-His, L-Asn 및 L-α-Me-Ser로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

   X_aa9가 L-Asp, L-Glu, L-Gla, L-Adp, L-Asn 및 L-His로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
10. 제1항에 있어서,

    Y가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et), D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Et), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필), L-Bip(2-n-프로필, 4-OMe), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(2,3-디-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4-디-Et), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Et), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3-디-OMe), L-Bip(2,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2-Et, 4,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-Et, 4,5-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-CH₂0H, 4-OMe), L-Bip(2-Ac), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(4-NH-Ac), L-Bip(2,3-디-클로로), L-Bip(2,4-디-클로로), L-Bip(2,5-디-클로로), L-Bip(3,4-디-클로로), L-Bip(4-플루오로), L-Bip(3,4-디-플루오로), L-Bip(2,5-디-플루오로), L-Bip(3-n-프로필), L-Bip(4-n-프로필), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(3-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(4-tert-부틸), L-Bip(3-페닐), L-Bip(2-클로로), L-Bip(3-클로로), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(3-플루오로), L-Bip(2-CF₃), L-Bip(3-CF₃), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(3-NO₂), L-Bip(3-OCF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(3-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-OH), L-Bip(3-OH), L-Bip(4-OH), L-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe[4-(1-프로파르길)], L-Phe[4-(1-프로페닐)], L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(2-벤조(b)푸란)-Phe, 4-(4-디벤조푸란)-Phe, 4-(4-페녹사티인)-Phe, 4-(2-벤조(b)티오펜)-Phe, 4-(3-티오펜)-Phe, 4-(3- 퀴놀린)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 4-(4-(3,5-디메틸이속사졸))-Phe, 4-(2,4-디메톡시피리미딘)-Phe, homoPhe, Tyr(Bzl), Phe(3,4-디-클로로), Phe(4-요오도), 2-나프틸-Ala, L-α-Me-Bip 및 D-α-Me-Bip로 구성된 군으로부터 선택되고;

    Z가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et), D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3,4,5-테트라-Me), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(2-페닐), L-Bip(4-페닐), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-CH₂-COOH), D-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(2'-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe(3-페닐), L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(3-피리딜)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 2-나프틸-Ala, 2-플루오레닐-Ala, L-α-Me-Bip, D-α-Me-Bip, L-Phe(4-NO₂) 및 L-Phe(4-요오도)로 구성된 군으로부터 선택되고;

    A가 H, 아세틸, β-Ala, Ahx, Gly, Asp, Glu, Phe, Lys, Nva, Asn, Arg, Ser, Thr, Val, Trp, Tyr, 카프로락탐, L-Bip, L-Ser(Bzl), 3-피리딜Ala, Phe(4-Me), Phe(펜타-플루오로), 4-메틸벤질, 4-플루오로벤질, n-프로필, n-헥실, 시클로헥실메틸, 6-히드록시펜틸, 2-티에닐메틸, 3-티에닐메틸, 펜타-플루오로벤질, 2-나프틸메틸, 4-비페닐메틸, 9-안트라세닐메틸, 벤질, (S)-(2-아미노-3-페닐)프로필,메틸, 2-아미노에틸 및 (S)-2-아미노프로필로 구성된 군으로부터 선택되고;

    B가 OH, NH₂, Trp-NH₂, 2-나프틸Ala-NH₂, Phe(펜타-플루오로)-NH₂, Ser (Bzl)-NH₂, Phe(4-NO₂)-NH₂, 3-피리딜Ala-NH₂, Nva-NH₂, Lys-NH₂, Asp-NH₂, Ser-NH₂, His-NH₂, Tyr-NH₂, Phe-NH₂, L-Bip-NH₂, D-Ser-NH₂, Gly-OH, β-Ala-OH, GABA-OH 및 APA-OH로 구성된 군으로부터 선택된 것인 단리된 폴리펩티드.
11. 제1항에 있어서, 10-mer 내지 15-mer이고, GLP-1 수용체에 결합되어 GLP-1 수용체를 활성화시키는 단리된 폴리펩티드.
12. 하기 화학식 I의 서열을 갖는 단리된 폴리펩티드.

    <화학식 I>

    상기 식에서,

    X_aa1-9는 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    Y 및 Z는 아미노산 잔기이고;

    여기서, Y 및 Z의 알파-탄소 원자에서 치환체 중 하나는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 상기 1차 치환체는 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 또는 헤테로아릴기로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고; 임의의 상기 1차 또는 2차 치환체는 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 또는 포스포닉기 중 하나 이상으로 더 치환될 수 있고; 여기서, 상기 1차 또는 2차 치환체는 공유 결합에 의해 임의로 가교되어 하나 이상의 서로 융합된 시클릭 또는 헤테로시클릭 계를 형성할 수 있고;

    여기서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

    여기서, Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

    A 및 B는 임의로 존재하고;

    여기서, A가 존재하지 않으면, X_aa1은 R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂이고;

    여기서, 상기 R은 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴,헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴옥시알킬 및 헤테로아릴알콕시알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;

    여기서, 상기 R₄및 R₅는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;

    여기서, B가 존재하면, B는 OR₁, NR₁R₂, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 15개 함유하고, C-말단에서 카르복스아미드, 치환된 카르복스아미드, 에스테르, 유리 카르복실산 또는 아미노-알코올로서 종결되는 펩티드이고;

    여기서, 상기 R₁및 R₂는 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴옥시알킬로부터 독립적으로 선택된다.
13. 제5항에 있어서, Y 및 Z의 알파-탄소 원자 상 치환체가 헤테로아릴아릴메틸, 아릴헤테로아릴메틸, 또는 비페닐알라닌 잔기를 형성하는 비페닐메틸로 구성된 군으로부터 선택되고, 이중 임의의 치환체가 또한 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 및 포스포닉기 중 하나 이상으로 임의로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
14. 제12항에 있어서, B가 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 약 10개 함유하는 펩티드인 단리된 폴리펩티드.
15. 제14항에 있어서, B가 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 약 5개 함유하는 펩티드인 단리된 폴리펩티드.
16. 제12항에 있어서, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-알킬화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
17. 제16항에 있어서, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-메틸화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
18. 제12항에 있어서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 수소, 메틸 또는 에틸로 치환되고; Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 수소, 메틸 또는 에틸로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
19. 제12항에 있어서, R, R₄및 R₅가 헤테로아릴알킬 또는 헤테로시클로알킬이거나, R, R₄및 R₅가 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 아릴, 아릴알킬, 또는 헤테로아릴 또는 헤테로시클로 치환된 아릴옥시알킬인 단리된 폴리펩티드.
20. 제12항에 있어서,

    X_aa2가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 시클로알킬이고, 상기 알킬기는 임의로 X_aa2의 질소와 고리를 형성할 수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa3이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복시알킬, 비스-카르복시알킬, 술포닐알킬, 헤테로알킬 및 머캅토알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa4가, 알파-탄소가 치환되지 않거나, 또는 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 아미노알킬, 카르복시알킬 헤테로아릴알킬 및 헤테로시클릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa5가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 히드록시알킬이고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa6이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클, 시클로알킬알킬, 헤테로시클알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬기로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa7이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 히드록실알킬기인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa8이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 히드록실알킬, 헤테로아릴알킬 및 카르복스아미도알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa9가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복실알킬, 비스-카르복실알킬, 카르복실아릴, 술포닐알킬, 카르복실아미도알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
21. 제20항에 있어서,

    X_aa2가 L-Ala, D-Ala, L-Pro, Gly, D-Ser, D-Asn, L-N-메틸-Ala, D-N-메틸-Ala, L-4-티오Pro, L-Pro(t-4-OH), L-2-Pip, L-2-Azt, Aib, S- 또는 R-Iva 및 Acc₃으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa3이 L-Glu, L-N-메틸-Glu, L-Asp, D-Asp, L-His, L-Gla, L-Adp, L-Cys 및 L-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa4가 Gly, L-His, L-Lys 및 L-Asp로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa5가 L-Thr, D-Thr, L-Nle, L-Met, L-Nva 및 L-Aoc로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa6이 L-Phe, L-Tyr, L-Tyr(Bzl), Tyr(3-NO₂), L-Nle, L-Trp, L-Phe(펜타-플루오로), D-Phe(펜타-플루오로), Phe(2-플루오로), Phe(3-플루오로), Phe(4-플루오로), Phe(2,3-디-플루오로), Phe(3,4-디-플루오로), Phe(3,5-디-플루오로), L- Phe(2,6-디-플루오로), Phe(3,4,5-트리-플루오로), Phe(2-요오도), Phe(2-OH), Phe(2-O메틸), Phe(3-O메틸), Phe(3-시아노), Phe(2-클로로), Phe(2-NH₂), Phe(3-NH₂), Phe(4-NH₂), Phe(4-NO₂), Phe(4-메틸), Phe(4-알릴), Phe(n-부틸), Phe(4-시클로헥실), Phe(4-시클로헥실옥시), Phe(4-페닐옥시), 2-나프틸Ala, 2-피리딜Ala, L-4-티아졸릴Ala, L-2-Thi, L-α-Me-Phe, D-α-Me-Phe, L-α-Et-Phe, D-α-Et-Phe, L-α-Me-Phe(2-플루오로), D-α-Me-Phe(2-플루오로), L-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), L-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), L-α-Me-Phe(펜타-플루오로) 및 D-α-Me-Phe(펜타-플루오로)로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa7이 L-Thr, D-Thr, L-Ser 및 L-hSer로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa8이 L-Ser, L-hSer, L-His, L-Asn 및 L-α-Me-Ser로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa9가 L-Asp, L-Glu, L-Gla, L-Adp, L-Asn 및 L-His로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
22. 제12항에 있어서,

    Y가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et), D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Et), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필), L-Bip(2-n-프로필, 4-OMe), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(2,3-디-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4-디-Et), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Et), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3-디-OMe), L-Bip(2,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2-Et, 4,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-Et, 4,5-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-CH₂0H, 4-OMe), L-Bip(2-Ac), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(4-NH-Ac), L-Bip(2,3-디-클로로), L-Bip(2,4-디-클로로), L-Bip(2,5-디-클로로), L-Bip(3,4-디-클로로), L-Bip(4-플루오로), L-Bip(3,4-디-플루오로), L-Bip(2,5-디-플루오로), L-Bip(3-n-프로필), L-Bip(4-n-프로필), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(3-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(4-tert-부틸), L-Bip(3-페닐), L-Bip(2-클로로), L-Bip(3-클로로), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(3-플루오로), L-Bip(2-CF₃), L-Bip(3-CF₃), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(3-NO₂), L-Bip(3-OCF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(3-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-OH), L-Bip(3-OH), L-Bip(4-OH), L-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe[4-(1-프로파르길)], L-Phe[4-(1-프로페닐)], L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(2-벤조(b)푸란)-Phe, 4-(4-디벤조푸란)-Phe, 4-(4-페녹사티인)-Phe, 4-(2-벤조(b)티오펜)-Phe, 4-(3-티오펜)-Phe, 4-(3- 퀴놀린)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 4-(4-(3,5-디메틸이속사졸))-Phe, 4-(2,4-디메톡시피리미딘)-Phe, homoPhe, Tyr(Bzl), Phe(3,4-디-클로로), Phe(4-요오도), 2-나프틸-Ala, L-α-Me-Bip 및 D-α-Me-Bip로 구성된 군으로부터 선택되고;

    Z가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et), D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3,4,5-테트라-Me), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(2-페닐), L-Bip(4-페닐), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-CH₂-COOH), D-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(2'-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe(3-페닐), L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(3-피리딜)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 2-나프틸-Ala, 2-플루오레닐-Ala, L-α-Me-Bip, D-α-Me-Bip, L-Phe(4-NO₂) 및 L-Phe(4-요오도)로 구성된 군으로부터 선택되고;

    B가 OH, NH₂, Trp-NH₂, 2-나프틸Ala-NH₂, Phe(펜타-플루오로)-NH₂, Ser (Bzl)-NH₂, Phe(4-NO₂)-NH₂, 3-피리딜Ala-NH₂, Nva-NH₂, Lys-NH₂, Asp-NH₂, Ser-NH₂, His-NH₂, Tyr-NH₂, Phe-NH₂, L-Bip-NH₂, D-Ser-NH₂, Gly-OH, β-Ala-OH, GABA-OH 및 APA-OH로 구성된 군으로부터 선택된 것인 단리된 폴리펩티드.
23. 제12항에 있어서, 10-mer 내지 15-mer이고, GLP-1 수용체에 결합되어 GLP-1 수용체를 활성화시키는 단리된 폴리펩티드.
24. 하기 화학식 I의 서열을 갖는 단리된 폴리펩티드.

    <화학식 I>

    상기 식에서,

    X_aa1-9는 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    Y는 아미노산 잔기이고;

    여기서, Y의 알파-탄소 원자에서 치환체 중 하나는 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 상기 1차 치환체는 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 또는 헤테로아릴기로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고; 임의의 상기 1차 또는 2차 치환체는 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클릴옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노,구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 또는 포스포닉기 중 하나 이상으로 더 치환될 수 있고; 여기서, 상기 1차 또는 2차 치환체는 공유 결합에 의해 임의로 가교되어 하나 이상의 서로 융합된 시클릭 또는 헤테로시클릭 계를 형성할 수 있고;

    여기서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

    A 및 B는 임의로 존재하고;

    여기서, A가 존재하면, A는 수소, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 약 1 내지 약 15개 함유하는 펩티드, R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂이고;

    여기서, 상기 R은 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;

    여기서, 상기 R₄및 R₅는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;

    여기서, X_aa1의 알파-아미노기는 수소 또는 알킬기로 치환되고, 상기 알킬기는 임의로 A와 고리를 형성할 수 있고;

    여기서, B가 존재하지 않으면, Z는 OR₁, NR₁R₂또는 아미노-알코올이고;

    여기서, 상기 R₁및 R₂는 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴옥시알킬로부터 독립적으로 선택된다.
25. 제24항에 있어서, Y의 알파-탄소 원자 상 치환체가 헤테로아릴아릴메틸, 아릴헤테로아릴메틸, 또는 비페닐알라닌 잔기를 형성하는 비페닐메틸로 구성된 군으로부터 선택되고, 이중 임의의 치환체가 또한 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 및 포스포닉기 중 하나 이상으로 임의로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
26. 제24항에 있어서, B가 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 약 10개 함유하는 펩티드인 단리된 폴리펩티드.
27. 제26항에 있어서, B가 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 1 내지 약 5개 함유하는 펩티드인 단리된 폴리펩티드.
28. 제24항에 있어서, X_aa1, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-알킬화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
29. 제28항에 있어서, X_aa1, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-메틸화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
30. 제24항에 있어서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 수소, 메틸 또는 에틸로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
31. 제24항에 있어서,

    X_aa1이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 및 아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체이고, 상기 1차 치환체는 헤테로아릴 또는 헤테로시클릴로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa2가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 시클로알킬이고, 상기 알킬기는 임의로 X_aa2의 질소와 고리를 형성할 수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa3이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복시알킬, 비스-카르복시알킬, 술포닐알킬, 헤테로알킬 및 머캅토알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa4가, 알파-탄소가 치환되지 않거나, 또는 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 아미노알킬, 카르복시알킬 헤테로아릴알킬 및 헤테로시클릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa5가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 히드록시알킬이고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa6이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클, 시클로알킬알킬, 헤테로시클알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬기로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa7이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 히드록실알킬기인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa8이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 히드록실알킬, 헤테로아릴알킬 및 카르복스아미도알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa9가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복실알킬, 비스-카르복실알킬, 카르복실아릴, 술포닐알킬, 카르복실아미도알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    A가 수소, 아미노산, 또는 아미노산 잔기를 약 1 내지 약 5개 함유하는 펩티드, R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂인 단리된 폴리펩티드.
32. 제31항에 있어서,

    X_aa1이 L-His, D-His, L-N-메틸-His, D-N-메틸-His, L-4-티아졸릴Ala 및 D-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa2가 L-Ala, D-Ala, L-Pro, Gly, D-Ser, D-Asn, L-N-메틸-Ala, D-N-메틸-Ala, L-4-티오Pro, L-Pro(t-4-OH), L-2-Pip, L-2-Azt, Aib, S- 또는 R-Iva 및 Acc₃으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa3이 L-Glu, L-N-메틸-Glu, L-Asp, D-Asp, L-His, L-Gla, L-Adp, L-Cys 및 L-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa4가 Gly, L-His, L-Lys 및 L-Asp로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa5가 L-Thr, D-Thr, L-Nle, L-Met, L-Nva 및 L-Aoc로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa6이 L-Phe, L-Tyr, L-Tyr(Bzl), Tyr(3-NO₂), L-Nle, L-Trp, L-Phe(펜타-플루오로), D-Phe(펜타-플루오로), Phe(2-플루오로), Phe(3-플루오로), Phe(4-플루오로), Phe(2,3-디-플루오로), Phe(3,4-디-플루오로), Phe(3,5-디-플루오로), L- Phe(2,6-디-플루오로), Phe(3,4,5-트리-플루오로), Phe(2-요오도), Phe(2-OH), Phe(2-O메틸), Phe(3-O메틸), Phe(3-시아노), Phe(2-클로로), Phe(2-NH₂), Phe(3-NH₂), Phe(4-NH₂), Phe(4-NO₂), Phe(4-메틸), Phe(4-알릴), Phe(n-부틸), Phe(4-시클로헥실), Phe(4-시클로헥실옥시), Phe(4-페닐옥시), 2-나프틸Ala, 2-피리딜Ala, L-4-티아졸릴Ala, L-2-Thi, L-α-Me-Phe, D-α-Me-Phe, L-α-Et-Phe, D-α-Et-Phe, L-α-Me-Phe(2-플루오로), D-α-Me-Phe(2-플루오로), L-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), L-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), L-α-Me-Phe(펜타-플루오로) 및 D-α-Me-Phe(펜타-플루오로)로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa7이 L-Thr, D-Thr, L-Ser 및 L-hSer로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa8이 L-Ser, L-hSer, L-His, L-Asn 및 L-α-Me-Ser로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa9가 L-Asp, L-Glu, L-Gla, L-Adp, L-Asn 및 L-His로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
33. 제24항에 있어서,

    Y가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et), D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Et), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필), L-Bip(2-n-프로필, 4-OMe), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(2,3-디-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4-디-Et), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Et), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3-디-OMe), L-Bip(2,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2-Et, 4,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-Et, 4,5-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-CH₂0H, 4-OMe), L-Bip(2-Ac), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(4-NH-Ac), L-Bip(2,3-디-클로로), L-Bip(2,4-디-클로로), L-Bip(2,5-디-클로로), L-Bip(3,4-디-클로로), L-Bip(4-플루오로), L-Bip(3,4-디-플루오로), L-Bip(2,5-디-플루오로), L-Bip(3-n-프로필), L-Bip(4-n-프로필), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(3-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(4-tert-부틸), L-Bip(3-페닐),L-Bip(2-클로로), L-Bip(3-클로로), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(3-플루오로), L-Bip(2-CF₃), L-Bip(3-CF₃), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(3-NO₂), L-Bip(3-OCF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(3-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-OH), L-Bip(3-OH), L-Bip(4-OH), L-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe[4-(1-프로파르길)], L-Phe[4-(1-프로페닐)], L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(2-벤조(b)푸란)-Phe, 4-(4-디벤조푸란)-Phe, 4-(4-페녹사티인)-Phe, 4-(2-벤조(b)티오펜)-Phe, 4-(3-티오펜)-Phe, 4-(3- 퀴놀린)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 4-(4-(3,5-디메틸이속사졸))-Phe, 4-(2,4-디메톡시피리미딘)-Phe, homoPhe, Tyr(Bzl), Phe(3,4-디-클로로), Phe(4-요오도), 2-나프틸-Ala, L-α-Me-Bip 및 D-α-Me-Bip로 구성된 군으로부터 선택되고;

    A가 H, 아세틸, β-Ala, Ahx, Gly, Asp, Glu, Phe, Lys, Nva, Asn, Arg, Ser, Thr, Val, Trp, Tyr, 카프로락탐, L-Bip, L-Ser(Bzl), 3-피리딜Ala, Phe(4-Me), Phe(펜타-플루오로), 4-메틸벤질, 4-플루오로벤질, n-프로필, n-헥실, 시클로헥실메틸, 6-히드록시펜틸, 2-티에닐메틸, 3-티에닐메틸, 펜타-플루오로벤질, 2-나프틸메틸, 4-비페닐메틸, 9-안트라세닐메틸, 벤질, (S)-(2-아미노-3-페닐)프로필,메틸, 2-아미노에틸 및 (S)-2-아미노프로필로 구성된 군으로부터 선택된 것인 단리된 폴리펩티드.
34. 제24항에 있어서, 10-mer 내지 15-mer이고, GLP-1 수용체에 결합되어 GLP-1 수용체를 활성화시키는 단리된 폴리펩티드.
35. 하기 화학식 I의 서열을 갖는 단리된 폴리펩티드.

    <화학식 I>

    상기 식에서,

    X_aa1-9는 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    Y는 아미노산 잔기이고;

    여기서, Y의 알파-탄소 원자에서 치환체 중 하나는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 상기 1차 치환체는 시클로알킬, 헤테로시클, 아릴 또는 헤테로아릴기로부터 선택된 1차 또는 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고; 임의의 상기 2차 치환체는 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 또는 포스포닉기 중 하나 이상으로 더 치환될 수 있고; 여기서, 상기 1차 또는 2차 치환체는 공유 결합에 의해 임의로 가교되어 하나 이상의 서로 융합된 시클릭 또는 헤테로시클릭 계를 형성할 수 있고;

    여기서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

    A 및 B는 임의로 존재하고;

    여기서, A가 존재하지 않으면, X_aa1은 R기, R-C(O)(아미드)기, 카르바메이트기 RO-C(O), 우레아 R₄R₅N-C(O), 술폰아미도 R-SO₂또는 R₄R₅N-SO₂이고;

    여기서, 상기 R은 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴옥시알킬 및 헤테로아릴알콕시알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;

    여기서, 상기 R₄및 R₅는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 및 헤테로아릴옥시알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;

    여기서, B가 존재하지 않으면, Z는 OR₁, NR₁R₂또는 아미노-알코올이고;

    여기서, 상기 R₁및 R₂는 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시알킬, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴옥시알킬로부터 독립적으로 선택된다.
36. 제35항에 있어서, Y의 알파-탄소 원자 상 치환체가 헤테로아릴아릴메틸, 아릴헤테로아릴메틸, 또는 비페닐알라닌 잔기를 형성하는 비페닐메틸로 구성된 군으로부터 선택되고, 이중 임의의 치환체가 또한 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 및 포스포닉기 중 하나 이상으로 임의로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
37. 제35항에 있어서, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-알킬화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
38. 제37항에 있어서, X_aa2및 X_aa3이 N-H 또는 N-메틸화된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
39. 제35항에 있어서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체가 메틸 또는 에틸로 치환된 것인 단리된 폴리펩티드.
40. 제35항에 있어서, R, R₄및 R₅가 헤테로아릴알킬 또는 헤테로시클로알킬이거나, R, R₄및 R₅가 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클, 아릴, 아릴알킬, 또는 헤테로아릴 또는 헤테로시클로 치환된 아릴옥시알킬인 단리된 폴리펩티드.
41. 제35항에 있어서,

    X_aa2가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 시클로알킬이고, 상기 알킬기는 임의로 X_aa2의 질소와 고리를 형성할 수 있고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa3이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복시알킬, 비스-카르복시알킬, 술포닐알킬, 헤테로알킬 및 머캅토알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa4가, 알파-탄소가 치환되지 않거나, 또는 알파-탄소에서 치환체 중 하나는아미노알킬, 카르복시알킬 헤테로아릴알킬 및 헤테로시클릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa5가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬 또는 히드록시알킬이고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa6이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클, 시클로알킬알킬, 헤테로시클알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa7이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 히드록실알킬기인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa8이 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 알킬, 히드록실알킬, 헤테로아릴알킬 및 카르복스아미도알킬로 구성된 군으로부터 선택되고, 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소 또는 알킬인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기이고;

    X_aa9가 알파-탄소에서 치환체 중 하나는 카르복실알킬, 비스-카르복실알킬, 카르복실아릴, 술포닐알킬, 카르복실아미도알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 것인 천연 또는 비천연적으로 생성된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
42. 제41항에 있어서,

    X_aa2가 L-Ala, D-Ala, L-Pro, Gly, D-Ser, D-Asn, L-N-메틸-Ala, D-N-메틸-Ala, L-4-티오Pro, L-Pro(t-4-OH), L-2-Pip, L-2-Azt, Aib, S- 또는 R-Iva 및 Acc₃으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa3이 L-Glu, L-N-메틸-Glu, L-Asp, D-Asp, L-His, L-Gla, L-Adp, L-Cys 및 L-4-티아졸릴Ala로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa4가 Gly, L-His, L-Lys 및 L-Asp로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa5가 L-Thr, D-Thr, L-Nle, L-Met, L-Nva 및 L-Aoc로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa6이 L-Phe, L-Tyr, L-Tyr(Bzl), Tyr(3-NO₂), L-Nle, L-Trp, L-Phe(펜타-플루오로), D-Phe(펜타-플루오로), Phe(2-플루오로), Phe(3-플루오로), Phe(4-플루오로), Phe(2,3-디-플루오로), Phe(3,4-디-플루오로), Phe(3,5-디-플루오로), L- Phe(2,6-디-플루오로), Phe(3,4,5-트리-플루오로), Phe(2-요오도), Phe(2-OH), Phe(2-O메틸), Phe(3-O메틸), Phe(3-시아노), Phe(2-클로로), Phe(2-NH₂), Phe(3-NH₂), Phe(4-NH₂), Phe(4-NO₂), Phe(4-메틸), Phe(4-알릴), Phe(n-부틸), Phe(4-시클로헥실), Phe(4-시클로헥실옥시), Phe(4-페닐옥시), 2-나프틸Ala, 2-피리딜Ala,L-4-티아졸릴Ala, L-2-Thi, L-α-Me-Phe, D-α-Me-Phe, L-α-Et-Phe, D-α-Et-Phe, L-α-Me-Phe(2-플루오로), D-α-Me-Phe(2-플루오로), L-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,3-디-플루오로), L-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), D-α-Me-Phe(2,6-디-플루오로), L-α-Me-Phe(펜타-플루오로) 및 D-α-Me-Phe(펜타-플루오로)로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa7이 L-Thr, D-Thr, L-Ser 및 L-hSer로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa8이 L-Ser, L-hSer, L-His, L-Asn 및 L-α-Me-Ser로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기이고;

    X_aa9가 L-Asp, L-Glu, L-Gla, L-Adp, L-Asn 및 L-His로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 잔기인 단리된 폴리펩티드.
43. 제35항에 있어서,

    Y가 L-Bip, D-Bip, L-Bip(2-Me), D-Bip(2-Me), L-Bip(2'-Me), L-Bip(2-Et), D-Bip(2-Et), L-Bip(3-Et), L-Bip(4-Et), L-Bip(2-n-프로필), L-Bip(2-n-프로필, 4-OMe), L-Bip(2-n-프로필, 2'-Me), L-Bip(3-Me), L-Bip(4-Me), L-Bip(2,3-디-Me), L-Bip(2,4-디-Me), L-Bip(2,6-디-Me), L-Bip(2,4-디-Et), L-Bip(2-Me, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Me), L-Bip(2-Et, 2'-Et), L-Bip(2-Me, 4-OMe), L-Bip(2-Et, 4-OMe), D-Bip(2-Et, 4-OMe), L-Bip(3-OMe), L-Bip(4-OMe), L-Bip(2,4,6-트리-Me), L-Bip(2,3-디-OMe), L-Bip(2,4-디-OMe), L-Bip(2,5-디-OMe), L-Bip(3,4-디-OMe), L-Bip(2-Et, 4,5-디-OMe), L-Bip(3,4-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-Et, 4,5-메틸렌-디-옥시), L-Bip(2-CH₂0H, 4-OMe), L-Bip(2-Ac), L-Bip(3-NH-Ac), L-Bip(4-NH-Ac), L-Bip(2,3-디-클로로), L-Bip(2,4-디-클로로), L-Bip(2,5-디-클로로), L-Bip(3,4-디-클로로), L-Bip(4-플루오로), L-Bip(3,4-디-플루오로), L-Bip(2,5-디-플루오로), L-Bip(3-n-프로필), L-Bip(4-n-프로필), L-Bip(2-이소-프로필), L-Bip(3-이소-프로필), L-Bip(4-이소-프로필), L-Bip(4-tert-부틸), L-Bip(3-페닐), L-Bip(2-클로로), L-Bip(3-클로로), L-Bip(2-플루오로), L-Bip(3-플루오로), L-Bip(2-CF₃), L-Bip(3-CF₃), L-Bip(4-CF₃), L-Bip(3-NO₂), L-Bip(3-OCF₃), L-Bip(4-OCF₃), L-Bip(2-OEt), L-Bip(3-OEt), L-Bip(4-OEt), L-Bip(4-SMe), L-Bip(2-OH), L-Bip(3-OH), L-Bip(4-OH), L-Bip(2-CH₂-COOH), L-Bip(3-CH₂-COOH), L-Bip(4-CH₂-COOH), L-Bip(2-CH₂-NH₂), L-Bip(3-CH₂-NH₂), L-Bip(4-CH₂-NH₂), L-Bip(2-CH₂-OH), L-Bip(3-CH₂-OH), L-Bip(4-CH₂-OH), L-Phe[4-(1-프로파르길)], L-Phe[4-(1-프로페닐)], L-Phe[4-n-부틸], L-Phe[4-시클로헥실], Phe(4-페닐옥시), L-Phe(펜타-플루오로), L-2-(9,10-디히드로페난트레닐)-Ala, 4-(2-벤조(b)푸란)-Phe, 4-(4-디벤조푸란)-Phe, 4-(4-페녹사티인)-Phe, 4-(2-벤조(b)티오펜)-Phe, 4-(3-티오펜)-Phe, 4-(3- 퀴놀린)-Phe, 4-(2-나프틸)-Phe, 4-(1-나프틸)-Phe, 4-(4-(3,5-디메틸이속사졸))-Phe, 4-(2,4-디메톡시피리미딘)-Phe, homoPhe, Tyr(Bzl),Phe(3,4-디-클로로), Phe(4-요오도), 2-나프틸-Ala, L-α-Me-Bip 및 D-α-Me-Bip로 구성된 군으로부터 선택된 것인 단리된 폴리펩티드.
44. 제35항에 있어서, 10-mer 내지 15-mer이고, GLP-1 수용체에 결합되어 GLP-1 수용체를 활성화시키는 단리된 폴리펩티드.
45. 폴리펩티드 수용체 작용제의 어드레스 서열을 Y 및 Z로 대체시키는 것을 포함하는, 폴리펩티드 수용체 작용제의 활성을 모방하고, B G-단백질 커플링된 수용체의 군에 의해 인지된 하기 화학식 II의 폴리펩티드의 제조 방법.

    <화학식 II>

    상기 식에서, Y 및 Z는 아미노산 잔기이고;

    상기 Y 및 Z의 알파-탄소 원자에서 치환체 중 하나는 각각 수소, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 구성된 군으로부터 선택된 1차 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 상기 1차 치환체 중 헤테로시클릴알킬은 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 또는 헤테로아릴기로부터 선택된 2차 치환체로 임의로 치환될 수 있고; 임의의 상기 1차 또는 2차 치환체는 수소, 알킬, 시클로알킬, 아릴알킬, 아릴, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 알케닐, 알키닐, 할로, 히드록시, 머캅토, 니트로, 시아노, 아미노, 아실아미노, 아지도, 구아니디노, 아미디노, 카르복실, 카르복스아미도, 카르복스아미도 알킬, 포르밀, 아실, 카르복실 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클옥시, 아실옥시, 머캅토, 머캅토 알킬, 머캅토아릴, 머캅토 아실, 할로, 시아노, 니트로, 아지도, 아미노, 구아니디노 알킬, 구아니디노 아실, 술포닉, 술폰아미도, 알킬 술포닐, 아릴 술포닐 또는 포스포닉기 중 하나 이상으로 더 치환될 수 있고; 여기서, 상기 1차 또는 2차 치환체는 공유 결합에 의해 임의로 가교되어 하나 이상의 서로 융합된 시클릭 또는 헤테로시클릭 계를 형성할 수 있고;

    여기서, Y의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

    여기서, Z의 알파-탄소에서 그밖의 치환체는 수소, 알킬, 아미노알킬, 히드록시알킬 또는 카르복시알킬로 치환될 수 있고;

    여기서, X_aa1내지 X_aan은 수용체 매개된 신호 변환을 유도시킬 수 있는 메시지 서열이다.
46. 제45항에 있어서, 폴리펩티드가 내생적인 폴리펩티드 수용체 작용제의 활성을 모방하는 방법.
47. 제45항에 있어서, 폴리펩티드 수용체 작용제가 GLP-1인 방법.
48. 제45항에 있어서, 폴리펩티드 수용체 작용제의 메시지 서열을, 수용체 매개된 신호 변환을 유도시킬 수 있는 다양한 메시지 서열로 대체시키는 것을 더 포함하는 방법.
49. 제1항, 제5항, 제9항 또는 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화합물로부터 선택된 단리된 폴리펩티드.
50. 제1항, 제5항, 제9항 또는 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화합물로부터 선택된 단리된 폴리펩티드.
51. 제1항, 제5항, 제9항 또는 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화합물로부터 선택된 단리된 폴리펩티드.
52. 제1항, 제12항, 제24항 또는 제35항 중 어느 한 항에서 정의된 화합물 및 이를 위한 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제약 조성물.
53. 제1항, 제12항, 제24항 또는 제35항 중 어느 한 항에서 정의된 화합물, 및 항당뇨병제, 항비만증제, 항고혈압제, 항죽상경화증제 및 지질 저하제로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치료제를 포함하는 제약 조합물.
54. 제53항에 있어서, 항당뇨병제가 비구아니드, 술포닐 우레아, 글루코시다제억약제, PPAR γ작용제, PPAR α/γ 이중 작용제, aP2 억약제, DP4 억약제, 인슐린 센시타이저 (sensitizer), 글루카곤-유사 펩티드-1 (GLP-1), 인슐린 및 메글리티니드로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 약제인 조합물.
55. 제54항에 있어서, 항당뇨병제가 메트포르민, 글리부리드, 글리메피리드, 글리피리드, 글리피지드, 클로르프로파미드, 글리클라지드, 아카르보스, 미글리톨, 피오글리타존, 트로글리타존, 로시글리타존, 인슐린, Gl-262570, 이사글리타존, JTT-501, NN-2344, L895645, YM-440, R-119702, AJ9677, 레파글리니드, 나테글리니드, KAD1129, AR-HO39242, GW-409544, KRP297, AC2993, LY315902 및 NVP-DPP-728A로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 약제인 조합물.
56. 제54항에 있어서, 항비만증제가 베타 3 교감신경효능제, 리파제 억약제, 세로토닌 (및 도파민) 재흡수 억약제, 갑상선 수용체 베타 화합물 및 식욕 억약제로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 약제인 조합물.
57. 제56항에 있어서, 항비만증제가 올리스타트, ATL-962, AJ9677, L750355, CP331648, 시부트라민, 토피라메이트, 악소킨, 덱삼페타민, 펜테르민, 페닐프로판올아민 및 마진돌로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 약제인 조합물.
58. 제54항에 있어서, 지질 저하제가 MTP 억약제, 콜레스테롤 에스테르 운반 단백질, HMG CoA 환원효소 억약제, 스쿠알렌 합성효소 억약제, 피브르산 유도체, LDL 수용체 활성 상승 조절제, 리폭시제나제 억약제 또는 ACAT 억약제로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 약제인 조합물.
59. 제58항에 있어서, 지질 저하제가 프라바스타틴, 로바스타틴, 심바스타틴, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 플루바스타틴, 니스바스타틴, 비사스타틴, 페노피브레이트, 겜피브로질, 클로피브레이트, 아바시미베, TS-962, MD-700, CP-529414, 및(또는) LY295427로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 약제인 조합물.
60. 치료를 필요로 하는 표유류 종에게 치료적 유효량의 제1항, 제12항, 제24항 또는 제35항 중 어느 한 항에서 정의된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 당뇨병, 당뇨병성 망막병증, 당뇨병성 신경병증, 당뇨병성 신장병증, 상처 치료, 인슐린 저항증, 고혈당증, 고인슐린혈증, 증후군 X, 당뇨병 합병증, 유리 지방산 또는 글리세롤의 상승된 혈중 수치, 고지혈증, 비만증, 고중성지방혈증, 죽상경화증 및 고혈압의 진행 또는 발병을 치료 또는 지연시키는 방법.
61. 제60항에 있어서, 항당뇨병제, 항비만증제, 항고혈압제, 항죽상경화증제 및 지질 저하제로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 추가의 치료제를 치료적 유효량으로 동시에 또는 순차적으로 투여하는 것을 더 포함하는 방법.