KR20030074625A - 삶의 질을 개선하는 의약 및 식품 및 그 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은, 생리활성을 나타내는 단백질을 경구투여할 경우, 효과적으로 생리활성을 발휘시키는 방법을 행하는 의약 및 식품에 관한 것이다.

본 발명의 경구용 조성물은, 생리활성을 가지는 단백질의 1종 이상을 활성성분으로서 포함하고, 방출제어수단을 가진다. 본 발명의 조성물에 의해, 활성성의 적어도 10% 이상이 활성을 유지한 채로 하부소화관 내에 보내어진다. 생리활성을 가진 단백질이 위에서 분해되지 않고 소장에 보내어지는 것에 의해, 지금까지 알려지지 않았던 작용이 발휘되거나, 작용이 확실하게 발휘된다. 본 발명의 조성물에 포함된 생리활성 단백질은, 바람직하게는 락토페린, 면역 글로불린, 리소자임(lysozyme), 아밀라아제, 프로테아제, 리파아제 또는 소화효소 저해제이다.

Description

삶의 질을 개선하는 의약 및 식품 및 그 제조방법{DRUGS AND FOODS IMPROVING THE QUALITY OF LIFE AND PROCESS FOR PRODUCING THE SAME}

음식물의 소화흡수를 관장하는 소장점막은, 벽면이 미세한 돌기로 모두 덮여져 있고 또 각각의 돌기는 한층 더 미세한 돌기에 의해 피복된 구조라서, 그에 따라 현저히 넓어진 표면적을 가지고 있다. 일설에 의하면, 사람 소화관의 표면적은 테니스 코트의 1.5배 면적이라고 하며, 그 면적의 절반 이상은 소장이 차지하고 있다. 장관의 내강은 생체에 있어서는 외계이고, 150조 개라고 알려진 장내 세균이 살아서 번식하고 있다. 이 정도로 넓은 면적에 걸쳐 외계와 접촉하고 있지만, 외계와의 사이를 갈라놓고 있는 것은 극히 얇은 한 층으로 된 점막층 뿐이다. 이 얇은 점막층은 외계로부터 가해지는 각종 자극에 대해 반응하고 있다고 생각되어지지만, 어떠한 자극물질이 점막과 접촉하면 어떻게 반응하는가, 자극을 받아들이는 점막상의 부위는 어디인가 등등 구체적인 것은 거의 알려지지 않고 수수께끼는 풀리지 않았다. 어쨌든 간에, 소화관 점막이 생체에 있어서 더없이 중요한 기능을 담당하고 있다는 것은 확실하다.

장관점막이 자극에 반응하고 있는 것을 보여주는 좋은 예는, 장내 세균의 침입을 방어하는 점막 배리어로서의 기능이다. 즉, 동물이 건강상태인 한 장내세균이 배리어를 넘어 침입하는 것은 드물지만, 외과수술, 외상, 화상 등의 스트레스가 걸릴 경우, 혹은 사망하면 장내세균은 바로 점막층을 넘어서 체내로 침입하기 시작한다. 즉, 건강상태에서는, 끊임없이 침입하고자 하는 장내세균을 막는 어떤 방어장치가 당연히 작동하고 있는 것이다. 장내세균 외에도 장관점막을 자극하는 것은, 바이러스, 음식물에 포함된 독물 등이 고려되고 있다. 넓은 면적을 지닌 장관점막에는, 자극을 받아들이는 센서와 센서의 정보를 바탕으로 반응하는 반응기 등이 당연히 존재하겠지만, 어떠한 센서가 작용하는 것인가도 거의 알려져 있지 않다. 예를 들면, 락토페린은 장관점막에 수용체가 존재한다는 것이 알려져 있지만, 수용체에 결합하면 어떠한 반응이 일어나는 것인가에 대해서는 전혀 알려져 있지 않다.

위는 염산을 분비하여 내부가 pH 1.0 ~ 3.0의 강산성을 유지하고 있다. 위가 강산성으로 유지되고 있다는 것은, 병원성 세균으로 오염된 식품 혹은 음료수를 섭취할 경우, 오염시키는 병원균의 살균에 있어서는 대단히 효과적이다. 더욱이 위액은, 산성에 가장 적당한 pH를 지닌 산성 프로테아제, 펩신을 함유하여, 단백질을 펩타이드로 가수분해한다. 음식물을 오염시키고 있는 병원균의 대부분은 강한 산성조건 하에서 펩신 작용에 노출되는 것에 의해 사멸된다고 생각해도 좋다. 요컨대, 위는 병원균의 침입을 격퇴하는 첫번째 관문인 것이다. 상태가 나쁜 것에 생리활성을 나타내는 단백질을 경구적으로 섭취하여 작용의 발휘를 기대하는 경우, 위에 있어서의 분해가 최대의 장벽이 된다. 위에 유입된 생리활성 단백질은 강산성의 조건하에서, 접혀진 삼차원 구조가 붕괴되어 펩신에 의해 펩타이드로 가수분해되기 때문이다. 이런 상태에서는 단백질이 지니고 있는 생리활성은 완전히 상실된다고 생각해도 좋다.

음식물의 소화흡수를 보조하기 위해 유당분해효소, 아밀라아제, 프로테아제 혹은 리파아제 등의 가수분해효소가 경구적으로 투여되고 있다. 그러나, 이들 가수분해효소가 사람의 체내에서 정말로 음식물을 가수분해하여 소화흡수를 돕고 있는가 어떤가는 의심스럽다. 이들 소화효소를 50 ㎍/ml의 펩신을 함유하는 pH 1.2의 인공위액에 1% 농도로 녹이고, 37℃에서 1.5 시간 동안 인큐베이팅하면 효소활성은 완전히 사라지기 때문이다. 위에서 음식물이 체류하는 시간은 약 1.5 ~ 2.0 시간으로 볼 수가 있으므로, 가수분해효소를 내복하여도 병상태 개선효과를 기대할 수 없는 것은 자명하다.

또, 항염증 작용을 나타내는 세라치오펩티다아제, 혈청 콜레스테롤을 저하시키는 것으로 알려진 엘라스타아제 등의 생리활성 단백질도, 약물로서 환자에게 경구투여되고 있다. 이들 생리활성 단백질도 위 내에서 용해한 경우에는, 가수분해효소와 마찬가지로 분해되어 활성을 잃는 것은 자명하다.

또, 난백 리소자임(lysozyme)은 대부분의 대중 대상 종합감기약에 유효성분의 하나로서 첨가되어, 감기약의 정번(定番:유행에 좌우되지 않고 안정된 매상을 유지하는 상품)이라고도 일컬어지는 유명한 성분이다. 리소자임은 눈물, 타액, 소화액 등 점막을 피복하는 분비액에 함유되어, 세균의 세포벽을 구성하는 무라밀펩타이드를 가수분해하는 효소활성을 지니고 있기 때문에, 살균효소라고 생각되어지고 있었다. 그러나 이상하게, 감기 환자에게 경구투여하면, 인후통 등의 급성염증에 대해 진통소염작용을 발휘한다고 말해지고 있다. 당연히, 리소자임과 결합하는 수용체가 점막표면에 존재하여, 리소자임이 결합하면 생체내 마약인 오피오이드가 방출된다는 메카니즘이 추정되지만, 실험적으로는 증명되어 있지 않다. 그 진통소염작용에 더하여, 포유동물에 대해 전혀 독성을 나타내지 않기 때문에, 안심하고 첨가 가능한 점이 감기약의 유효성분으로서 보급된 원인일 것이다. 리소자임이 진통소염작용을 발휘하는 장소는, 점막면적의 대부분을 차지하는 소장이라고 생각되지만, 이 점을 포함하여 차후의 검토가 필요하다. 이 경우에도, 감기약 정제가 위 내에서 붕괴하면, 리소자임도 펩신에 의한 가수분해작용을 면할 수 없다. 펩신에 의한 가수분해를 면하고 소장에 유입되는 리소자임은 극히 일부라고 추정된다.

그 밖에, 면역 글로불린, 락토페린 등의 비교적 큰 단백질도 건강을 증진시키기 위해 식품으로서 적극적으로 섭취되고 있다. 전자는, 젖소를 복수의 세균항원으로 면역시키고, 세균항원에 대한 항체(IgG1)를 우유 중에 분비시켜 탈지한 탈지면역우유분말이 건강증진에 유용한 것으로서 칭찬되고 있다. 그러나 우유 중의 면역 글로불린 IgG1은 펩신 감수성이고, 위를 통과할 때에 대부분이 분해되므로, 건강증진효과를 기대할 수 있는가 어떤가는 의문이다.

또, 젖소가 분만 1주일 이내에 분비하는 젖은 초유로서 착유를 금지시키고 있다. 초유는 분만 1주일 이후의 젖소가 분비하는 보통 우유와는 질적으로 달라, 다량의 면역 글로불린 IgG1을 함유하고 있기 때문에 저온살균 혹은 고온순간멸균하면 두부상으로 응고되어 살균할 수 없기 때문이다. 이 초유를 탈지하고, 면역 글로불린의 활성 상실을 피하기 위해 저온에서 분무건조한 탈지초유분말도, 일부 국가들에서 건강증진 소재로서 보급되기 시작하고 있다. 예를 들면, 미국에서 탈지초유분말은, 관절염 및 고혈압증상의 개선효과를 주장하는 문구로 하는 건강식품으로서 판매되고 있다. 이 경우에도 면역우유와 마찬가지로, 대부분의 면역 글로불린은 위 내에서 분해된다.

최근, 우유에서 유래된 락토페린도 대장암의 발암예방효과가 보고되어, 발암을 예방하기 위한 소재로서 주목받고 있다. 더욱이, C형 간염환자에 우유의 락토페린을 대량으로 경구투여하면, 혈중 바이러스·타이터가 낮은 경증환자에서는 병상태의 개선이 인정된다고 하는 연구성적이 보고되었다. C형 간염환자의 80%는 간경변으로부터 간암으로 이행하여 사망하는 만큼, 이 연구결과가 다른 의료시설에서도 확인된다면, 환자에게 있어서 커다란 복음임에 틀림없다. 한편으론, 투여량이 1일당 3.6g으로 많은 것이 실용화를 막는 장해로 되고 있다. 투여량을 줄여 1일당 1.8g으로는 유의한 병상태의 개선이 확인되지 않는다. 이 경우에도, 경구투여된 락토페린의 대부분은 위 내에서 가수분해되고 있는 것이 확실하다. 위 내에서 가수분해되지 않고 십이지장에 유입되어 비로소 락토페린을 방출하는 제제로 임상실험을 행하여, 투여량의 저감을 꾀함과 동시에 중증의 C형 간염환자에서도 병상태개선이 인정되도록 제제의 개량을 꾀해야만 할 것이다.

소화관의 전체 표면적은 테니스 코트의 1.5 배 면적이지만, 위의 표면적은 겨우 900 ㎠에 지나지 않는다. 더구나, 위에서는 영양물 및 약물 등의 흡수는 일어나지 않고, 리소자임, 면역 글로불린 내지 락토페린과 같은 생리활성 단백질이 위벽에 결합하는 것에 의해 병상태를 개선하는 것은 보고되어 있지 않다. 더욱이, 위벽은 두꺼운 점액층으로 피복되어 있기 때문에, 이들 생리활성 단백질이 펩신에 의해 가수분해되기 이전에 점액층을 통과하여 점막에 결합하는 것은 기대하기 어렵다. 생리활성을 나타내는 단백질을 경구적으로 섭취하여 약효를 발휘시키는 경우, 최대의 장해는 위에서의 분해와 불활성화이고, 그 해결이 없이는, 건강증진을 목적으로 하는 의약품 내지 식품으로서 생리활성 단백질의 실용화는 있을 수 없다.

본 발명자들은 오랜 시간에 걸쳐 효소, 단백질효소 저해제 및 생리활성 단백질을, 병상태개선 및 건강증진을 위해 경구투여하는 연구를 행해 왔다. 단백질은, 리신과 같은 예외도 있지만, 대개 안전성이 높고, 경구투여로 약효가 발현되면 이상적인 치료약으로 될 수 있기 때문이다. 검토의 대상으로 한 것은, 주로 락토페린 및 면역 글로불린이다. 락토페린은 분자량이 8만 정도의 고분자이지만 점막과 접촉하면 생체에 변화를 일으키기 쉽다. 하나는 병원균 감염에 대한 방어능을 높이는 것이고, 또 하나는 오피오이드와 같은 진통작용이다. 이런 작용으로 보아, 점막상에는 락토페린·센서라고도 이름붙일 만한 구조가 존재하는 것으로 생각되지만, 그상세한 것에 관해서는 거의 알려져 있지 않다.

그러나, 이들 단백질을 실험동물에 경구투여하여 생리활성의 발현을 본 경우, 같은 양을 같은 조건의 동물에 투여해도 작용이 발현하는 경우와 발현하지 않는 경우가 있어, 현저히 재현성이 결여된다. 예를 들면, BALB/c 마우스에 5-플루오로우라실(5-FU)을 50 mg/kg 경구투여하여 박테리아 전위(bacterial translocation, BT)로부터 균혈증을 야기시켜 다장기부전에 의해 마우스가 사망하는 실험계에서, 5-FU를 투여하기 1일 전 ~ 동시에 우유 유래의 락토페린을 경구투여하면, 어떤 경우에는 BT를 저지하여 마우스를 생존시킬 수 있다. 더구나, 이 BT저지작용은 락토페린을 1회 2 mg/kg으로 하여 소량투여한 것 만으로, 통계적으로 고도의 유의차를 지닌 채 발현되었다. 2 mg/kg의 경구투여로 마우스의 항암제 투여에 따른 BT를 억제할 수 있다면, 외과수술, 암, 스트레스등으로 야기되는 사람의 BT를 억제하여, 감염증으로 인한 전신성 염증반응 증후군에 따른 다장기부전을 억제할 수 있고, 의료에 대단한 영향을 줄 수 있다.

한편으로, 완전히 동일한 조건에서 100 mg/kg 경구투여해도 발현하지 않는 경우도 있다. 이 표현은 단지 기록상의 진실이다. 왜냐하면, 완전히 동일한 조건이라고 본 발명자들은 생각하고 있을 뿐, 실제로는 조건이 다르기 때문에 동일한 현상이 발현되지 않았을 뿐이기 때문이다. 락토페린의 BT 저지효과가 재현성을 결한 원인을 밝혀내본 결과, 소화관에서의 락토페린의 분해로 결론지었다. 요컨대, 생리활성 단백질은 작용부위에 그 구조가 완전히 유지되어 도달해야지 만이 생리작용을 발휘하는 것이며, 작용부위에 도달하기 이전에 분해되는 것은 작용을 발휘할 수 없다고 하는 결론에 이를 수 있었다.

즉, 락토페린 등의 생리활성 단백질은 경구투여하면, 그 대부분은 위를 통과할 때에 부분적으로 분해되어 작용을 상실하는 것이다. 이들 생리활성 단백질을 경구투여하여 우연히 작용을 발휘하는 경우가 있다고 하면, 위를 통과할 때 분해를 면한 극히 소량이 십이지장에 흘러들어 작용을 발휘하는 것이다. 따라서 본 발명자들은, 생리활성 단백질을 병상태개선 및 건강증진을 위해 경구투여하는 경우, 분해의 원인으로 되는 위를 분해되는 것 없이 통과하고, 십이지장에 유입되어 비로소 용해하는 방법을 찾는 검토를 행했다.

본 발명은 생리활성을 보이는 단백질을 경구투여하는 경우, 효과적으로 생리활성을 발휘시키는 방법을 행하는 의약 및 식품에 관한 것이다. 즉, 본 발명은, 경구투여된 생리활성을 나타내는 단백질이 활성을 잃지 않게 위를 통과하고, 생리활성을 상실하지 않은 채 작용부위인 십이지장으로부터 하부 소화관에 도달하도록 하는 의약 및 식품에 관한 것이다. 또한 본 발명은, 이러한 의약 또는 식품이 새롭게 치료/예방을 가능하게 하는 질병에 관한 것이다. 본 발명의 방법은, 생리활성 단백질이 분해되지 않고 작용부위에 도달하게 하므로, 작용을 발휘시키는 면에서는 비할 바 없이 유효하다.

종래의 제제에서는, 경구적으로 투여한 락토페린은 일과성으로 구강과 식도의 점막에 접촉할 뿐, 위에 유입되면 펩신에 의해 폴리펩타이드로 분해되어 효과를 잃는 것으로 생각된다. 이 산성 프로테아제에 대한 높은 감수성이, 종래 락토페린이 널리 응용되는 것을 막아 왔다. 락토페린은 우유 중의 미량성분으로 비교적 고가이다. 펩신 및 파파인과 같은 산성 프로테아제에 감수성이 높아, 쉽게 가수분해되는 것이 최대의 약점이었다. 그러나 그 밖의 프로테아제에 대해서는 현저한 저항성으로, 분변 중에 1주일간 방치해도 거의 분해되지 않는 것이 알려져 있다(본 명세서의 실시예 4 참조). 따라서 분해되지 않고 위를 통과하여 십이지장에 유입되는 것이 가능하다면, 소량의 경구투여로 병상태개선 및 건강증진작용을 발휘하는 것이 가능하다고 추정되어, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉 본 발명은, 생리활성을 가지는 단백질의 하나 이상을 활성성분으로서 포함하고, 그 활성성분의 일정 이상이 거의 분해되지 않고 활성을 유지한 채로 하부 소화관 내로 방출시키기 위한 방출제어수단을 가지는 경구용 조성물을 제공한다.

본 명세서에서 "경구용 조성물"이라고 함은, 경구적으로 섭취되는 모든 형태의 의약조성물 및/또는 식품을 포함한다. 본 발명의 의약조성물은, 정제, 캅셀제, 환제, 과립제, 산제의 각종 의약제제의 형태라고 할 수 있다. 또, 식품에는 기능성 식품, 건강식품 및 영양보조식품이 포함된다.

본 발명의 조성물은 방출제어수단을 가질 필요가 있다. 여기에서 말하는 방출제어수단은, 조성물 내의 활성성분 중에서 적어도 10% 이상, 바람직하게는 20% 이상, 보다 바람직하게는 50% 이상, 더 바람직하게는 80% 이상을, 위장 내에서는 비가역적으로 활성을 잃지 않도록 보호하면서(예를 들면, 유효성분을 위장 내에서는 방출하지 않거나 또는 용해시키지 않아서 변성 및/또는 분해시키지 않는다), 활성을 유지시킨 채로 하부소화관(십이지장, 소장)에 도달시키기 위한 수단이다.

본 발명의 조성물을 위한 방출제어수단으로서는, 종래의 약물방출제어를 위한 다양한 수법을 적용할 수 있다. 이러한 수법으로는, 예를 들면, 활성성분을 포함한 모핵을 장용성 피막으로 또는 적절한 두께의 소수성 물질로 이루어진 피막으로 피복하는 것, 활성성분을 매트릭스에 담지시켜 소정의 환경하에서 유효성분을 방출시키도록 하는 것이 포함된다.

본 발명은, 위장 내에서 변성 및/또는 분해되어 활성을 잃을 수 있는 모든 단백질성 활성성분에 적용가능하다. 이러한 활성성분에는 산성 프로테아제, 즉, 펩신 및 파파인으로 활성을 잃는 생리활성을 가지는 단백질이 포함된다. 보다 구체적으로는, 면역부활작용 및 진통소염작용을 나타내는 락토페린 및 리소자임 등의 염기성 단백질, 병원균의 생육을 저해하는 면역 글로불린, 소장에서 음식물의 소화흡수를 돕기 위한 가수분해효소, 그들 가수분해효소의 활성을 저해하는 단백질성 또는 펩타이드성의 저해제가 포함된다. 음식물의 소화흡수를 돕는 가수분해효소로는, 각종 프로테아제, 아밀라아제 및 리파아제 등을 들 수 있다. 특히 바람직한 활성성분은 락토페린이다. 락토페린은, 지금까지 치료가 어려웠던 여러가지 질환에 대해 즉효성의 치료효과를 줄 수 있다(본 명세서의 실시예 중, 치료효과 항 참조).

또 본 발명은, 전신성 염증반응 증후군; 염증성 장질환; 비만, 당뇨병 또는 고혈압증을 포함하는 생활습관병; 악성 종양; C형 간염 바이러스, 로타바이러스, 헤르페스바이러스 또는 사이토메갈로바이러스를 포함한 병원 바이러스에 의한 감염증; 병원성 미생물에 의한 감염증; 자기면역질환의 치료를 위함과 더불어/또는 이들 질환 또는 상태에 수반하여 환자의 삶의 질을 떨어뜨리는 각종 증상의 치료 또는 개선을 위해 적용할 수 있다.

전신성 염증반응 증후군은 각종 다양한 질환환자에 있어서 광범위한 염증이고, 감염증, 췌장염, 허혈, 다중외상, 출혈성 쇼크, 면역중개성 장기손상, 및 패혈증과 더불어 전신성 염증반응 증후군에서 흔히 일어나는 합병증(급성 폐손상; 쇼크; 신부전; 및 다장기부전 증후군 및 기관계 기능이상의 발생)을 포함한다. 크론병(Crohn's disease) 및 궤양성 대장염을 포함한다.

본 발명의 실시태양의 하나는, 락토페린 과립 내지는 정제의 표면을, 위에서는 용해되지 않고 장에 유입되어 용해되는 장용성(腸溶性) 피막으로 피복한 조성물이다. 보다 상세하게는, 다음과 같다.

우유유래 락토페린 동결건조분말은 부피비중이 대단히 작아 직접 정제로 타정하기는 곤란하다. 또, 수분과 고온에서 불안정하므로, 건조상태에서 제제화할 것이 요망된다. 그러므로, 락토페린과 부형제, 결합제, 붕괴제를 혼합하고, 혼합물을 슬러그 머신(slug machine)으로 강압성형하여 얇고 큰 편평 원반을 만들고, 그것을 분쇄한 후 체로 쳐서 일정한 크기의 과립을 한데 모은다. 이 과립을 장용성 피막으로 덮고, 일정량을 하드 캅셀에 충진하여 제품화할 수 있다. 정제로서 제품화하는 경우에는 과립에 활택제를 넣어서 타정하고, 정제를 장용성 피막으로 덮어서 제품화할 수 있다.

이렇게 하여 제조한 락토페린의 장용성 정제 및 장용성 과립은, 염화나트륨 2.0g 에 묽은 염산 24 ml 및 물을 가하여 녹이고 1000ml로 한 제 1액(pH 1.2) 및 0.2M 인산2수소칼륨 시액 250ml 에 0.2N 수산화나트륨 시액 118ml 및 물을 가하여 1000ml로 한 제 2액(pH 6.8)을 사용하여 붕괴성을 시험했다(일본약국방(9개정), 일반시험법 41; 또는 일본약국방(13개정) 일반시험법 47, 붕괴시험법, (6) 장용성 제제, 참조). 본 발명의 방법으로 제조한 정제 내지 과립은, 제 1액에 120분간 담가두어도 붕괴하지 않고, 제 2액 중에서는 60분간 담가두자 붕괴했다. 즉, 위에서는 붕괴하여 용해되지 않고, 십이지장에 유입되어 비로소 붕괴해서 락토페린이 용출되는 정제를 완성할 수 있다.

본 발명의 장용성 제제를 제조할 때에 사용되는 부형제로는 유당, 자당, 글루코스 등의 단당 내지 이당류, 옥수수 녹말, 감자 녹말과 같은 전분류, 결정 셀룰로스, 무기물로서는 경질 실리카겔, 합성 규산알루미늄, 메타규산알루민산마그네슘, 인산수소칼슘 등이 있다. 또 결합제로서는 전분류, 카르복시메틸셀룰로스(CMC), 히드록시프로필셀룰로스(HPC), 카르복시메틸셀룰로스·나트륨염, 폴리비닐피롤리돈 등이 있다. 또, 하부소화관에서 본래의 1차입자로까지 붕괴시키는 것을 목적으로 사용되는 붕괴제로는 전분, 카르복시메틸셀룰로스·나트륨염, 카르복시메틸셀룰로스·칼슘염, 크로스칼메로스 나트륨, 카르복시메틸스타치 나트륨 등이 있다. 정제 및 과립을 장용성으로 피복하기 위한 피막제로는, pH 5 ~ 6 에서 용해하는 히드록시프로필메틸셀룰로스·프탈레이트, 카르복시메틸에틸셀룰로스, 초산프탈산셀룰로스, 메타크릴산 공중합체나 알칼리성 영역에서 용해하는 셸락(shellac) 등이 있다.

본 발명의 조성물은 일반적으로는, 활성성분으로서 1일당 약 0.1 mg ~ 약 100,000mg, 바림직하게는 약 1mg ~ 약 50,000mg, 보다 바람직하게는 약 10 mg ~ 약 10,000mg을 한번에 또는 나누어서, 본 발명의 조성물에 의한 치료 또는 상태 개선이 필요로 되고 있는 환자에게 투여할 수 있다. 투여량은, 투여될 환자의 연령, 체중 및 투여목적에 따라 개별적으로 정할 수 있다.

<실시예 1(유문부결찰 랫트 사용 실험; 1)>

하룻밤을 절식시킨 체중 약 300g 의 와이스타(wistar)계 수컷 랫트 6마리를, 에테르 마취하에서 유문의 상부에 해당하는 복부를 조금 절개하고, 위 내용물이 십이지장으로 흘러내리지 않도록 유문과 십이지장의 접합부를 수술실로 가볍게 묶고나서 재빨리 절개부를 봉합했다. 랫트가 마취에서 깨어나고 1시간 후, 우유에서 추출한 락토페린 및 면역 글로불린(타츠아·밀크·바이오로직스사 제조, 각각 순도 약 90% 및 75%) 각각 50 mg 을 5 ml의 증류수에 용해하여 경구투여했다. 랫트는 락토페린 투여 15분, 30분 및 1시간 후에 2마리씩 도살하여 위 내용물을 300ml 비이커에 씻어내고, 또 위벽을 생리식염수로 충분히 세정했다. 위 내용물과 세정액을 하나로 합하여 액량을 정확히 200ml로 하여 피검액으로 했다. 피검액에 용해되어 있는 락토페린 및 면역 글로불린 IgG1은 고속액체 크로마토그래피에 의해 정량했다.

결과는 표에 나타난 대로, 잔존하는 락토페린은 투여 15분 후에 4.6%, 30분 후에 흔적정도, 60분 후에는 0이었다.

표 1

위 내에서의 생리활성 단백질의 가수분해

경과시간(분)	락토페린(mg/위)	IgG1(위)
15	2.1(4.6%)	3.1(8.3%)
30	흔적정도	흔적정도
60	0	0

( ) 안은 투여량에 대한 잔존량 비율

<실시예 2(유문부결찰 랫트 사용 실험; 2)>

하룻밤을 절식시킨 체중 약 250g 의 와이스타계 수컷 랫트 6마리를, 에테르 마취하에서 유문의 상부에 해당하는 복부를 조금 절개하고, 유문과 십이지장의 접합부를 수술실로 가볍게 묶은 뒤 재빨리 절개부를 봉합했다. 랫트가 마취에서 깨어나고 1시간 후에, 우유에서 추출한 락토페린 및 면역 글로불린 IgG1(타츠아·밀크·바이오로직스사 제조) 각각 100mg 과 5mg의 펩스타틴(펩신저해제)을 5ml의 생리식염수에 용해하여 경구투여했다. 랫트는 락토페린 투여 15분, 30분 및 1시간 후에 2마리씩 도살하여 실시예 1에 나타낸 요령대로 위 내용물을 씻어내고, 액량을 정확히 200ml로 하여, 용해되어 있는 락토페린을 고속액체 크로마토그래피에 의해 정량했다.

결과는 표에 나타난 대로, 잔존하는 락토페린은 투여 15분 후에 53%, 30분 후에 23%, 60분 후에는 10%였다. 실시예 1과 비교하면, 락토페린의 잔존량은 뚜렷하게 많고, 위 내에서 그 분해에 관계하고 있는 것이 펩신임이 명확하다.

표 2

펩신 저해제 존재하에 위 내에서의 생리활성 단백질의 가수분해

경과시간(분)	락토페린(mg/위)	IgG1(위)
15	47.7(53%)	15.7(20.9%)
30	20.7(23%)	8.3(11.1%)
60	0.9(10%)	11.0(14.7%)

( ) 안은 투여량에 대한 잔존량 비율

<실시예 3>

사료 및 물을 자유섭취한 체중 약 300g 의 와이스타계 수컷 랫트 6마리의 복부를 에테르 마취하에서 조금 절개하고, 유문부와 맹장의 상부에서 회장부를 묶어 소장 루프를 만들었다. 다음으로 우유 락토페린 및 면역 글로불린 IgG1(타츠아·밀크·바이오로직스사 제조, 순도 약 90%) 각각 100mg을 5 ml의 생리식염수에 용해하여, 주사기를 이용해 소장 루프에 주입했다. 복부의 절개부를 재빨리 봉합한 뒤 랫트를 케이지에 넣고, 30, 60 및 120분 후에 루프를 적출하여 내용물을 비이커로 옮기고, 장관벽을 생리식염수로 세정하고 내용물을 하나로 합쳐 피검액으로 했다. 고속액체 크로마토그래피에 의해 피검액에 함유된 락토페린을 정량하여 표에 나타낸 값이 얻어졌다.

표 3

소장 내에서의 생리활성 단백질의 분해

경과시간(분)	락토페린(mg/위)	IgG1(위)
15	83(92%)	47(63%)
30	89(99%)	22(29%)
60	80(89%)	7(9%)

( ) 안은 투여량에 대한 잔존량 비율

표 3에서 알 수 있듯이, 락토페린은 소장 내에서 완전히 분해되지 않는다. 그러나 면역 글로불린 IgG1은 반감기가 약 30분으로 서서히 분해된다.

<실시예 4>

와이스타계 수컷 랫트의 신선한 분변 10g을 50ml의 증류수에 넣고, 폴리트론·균질기를 사용해 균질화했다. 균질화된 액 10ml에 우유유래 락토페린 및 면역 글로불린 IgG1을 각각 100mg 가하여 용해하고, 37℃의 질소치환혐기항아리 내에서 24, 72 및 168시간 인큐베이팅한 후, 용해되어 있는 락토페린 및 면역 글로불린을 고속액체 크로마토그래피에 의해 측정했다.

결과는 표 4에 나타나 있듯이, 락토페린은 분변과 1주간 인큐베이팅하여도 거의 분해되지 않지만, 면역 글로불린은 72 시간 인큐베이팅하면 완전히 소실되었다. 따라서, 면역 글로불린 IgG1은 장내 세균에 의해 가수분해되지만 락토페린은 장내 세균이 생산하는 프로테아제에 대해 현저한 저항성이 있음을 알았다.

표 4

장내 세균에 의한 생리활성 단백질의 분해

경과시간(분)	락토페린(mg/위)	IgG1(위)
15	72(80%)	13(17%)
30	70(78%)	0(0%)
60	76(84%)	0(0%)

( ) 안은 투여량에 대한 잔존량 비율

<실시예 5>

pH 3.0 이하의 산성에서는 용해되지 않고 중성 내지 약알칼리성에서 용해되는 히드록시알킬셀룰로스(신에쯔화학공업제, 상품명 HP-55)를 성형가공하여 제조한 일본약국방 1호의 장용성 하드캅셀에, 락토페린 10부와 카르복시메틸셀룰로스칼슘 5부의 미립상물(양자를, 물을 가하지 않고 건조상태로 혼합하여 건조상태 그대로 슬러그 머신으로 강압성형하여 얇고 큰 편평원반을 만들고, 그것을 분쇄하고 16메쉬(mesh)의 체에 통과시켜 입경 0.1mm 정도 크기의 과립으로 한 것) 150 mg을 충진하고 감합부를 장용성 기재로 밀봉하여, 장용성 락토페린·하드캅셀 제제를 제조했다.

<실시예 6>

면역 글로불린 8%를 함유한 소의 탈지초유 10부를 미결정 셀룰로스 10부와 혼합하고, 실시예 5와 마찬가지 방법에 의해 미립상물로 한 것을, 실시예 5의 하드캅셀에 150mg을 충진하고, 감합부를 장용성 기재로 밀봉하여, 장용성 탈지초유 제제를 제조했다.

<실시예 7>

락토페린 분말 및 유당, 셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스·칼슘염을, 물을 가하지 않고 건조상태에서 혼합하여, 혼합물을 건조상태 그대로 슬러그 머신으로 강압성형하여 얇고 큰 편평원반을 만들고, 그것을 분쇄하고 16메쉬(mesh)의 체에 통과시켜 일정한 크기의 과립으로 하고, 이것에 자당지방산에스테르를 가하여 타정하는 것에 의해, 락토페린 50mg을 함유한 직경 8mm의 정제를 얻었다. 젤라틴 10부와 리보핵산나트륨 20부에 물을 가해 가온용해시켜 제조한 두께 0.7mm의 막을 사용해, 평판법에 따라 외피를 형성시킨 후 건조하여 장용성 제제를 제조했다.

<실시예 8>

코팅기(후로인트 산업(주) 제, 하이코우터 HCT-48N)에, 실시예 7의 외피형성전의 락토페린 50mg을 함유하는 직경 8mm, 중량 180mg의 정제를 넣고, 카르복시메틸에틸셀룰로스 9%, 글리세린지방산에스테르 1%, 에탄올 45%, 염화메틸렌 45%로 이루어진 장용성 코팅액을 분무하여 정제에 대한 중량비로 12%의 장용성 코팅을 실시한 제품으로 했다.

<실시예 9>

코팅기(후로인트 산업(주) 제, HC-MINI)에, 실시예 7의 외피형성전의 락토페린 50mg을 함유하는 직경 8mm, 중량 180mg의 정제를 넣고, 옥수수 알갱이로부터 얻어진 단백질, 제인(zein) 8부, 글리세린 2부를 70% 에탄올 150부에 용해한 액을 계산량만큼 분무하여, 정제에 대한 중량비로 10%의 코팅을 실시한 정제를 얻었다.

<실시예 10>

코팅기(후로인트 산업(주) 제, HC-MINI)에, 실시예 7의 외피형성전의 락토페린 50mg을 함유하는 직경 8mm, 중량 180mg의 정제를 넣고, 셸락 30부, 피마자유 7부를 이소프로판올 63부에 용해한 액을 계산량만큼 분무하여, 정제에 대한 중량비로 10%의 코팅을 실시한 정제를 제조했다.

<치료효과>

이렇게 하여 제조한 장용성 조성물의 효과는 놀랄 만한 것이다. 예를 들면, 락토페린 장용성 제제는, 지금까지 치료가 어려웠던 여러가지 질환에 대해 즉효성의 치료효과를 보였다.

(1) 수혈을 통해 C형 간염에 감염되면, 급성간염 증상을 나타낸 후, 만성간염에서 간경변으로 이행하여 최종적으로는 간암으로 발전하여 환자는 사망한다. C형 간염 환자가 간암으로 발전하는 비율은 높아서 약 80%에 도달한다고 알려져 있다. C형 간염이 진행하여 간암으로 발전해서 복수가 차 있는 입원환자에게 락토페린 장용제(위에서 기술한 실시예 8 또는 9에서 제조된 것)를 내복시켜 치료한 효과는 믿어지지 않을 정도로 극적이었다. 즉, 1일당 0.9g의 락토페린을 내복한 것 만으로 3일 후에는 복수가 흡수되어 소실되고, 황달이 개선되며, C형 간염 바이러스의 혈중 표지가 큰 폭으로 저하한 것이었다. 주치의로부터 남은 수명이 수개월이라고 선고받았던 이 환자는 내복을 시작한 1주일 후에는 걸어서 퇴원할 수 있었다.

(2) 또, 악성 림프종이 발병한 어느 의사는, 화학요법으로 암을 억제하고 있지만 그에 수반하는 많은 부작용의 발생에 괴로워하며 잠을 잘 이루지 못하였다. 이러한 상태에서 벗어나기 위해 이런저런 약물을 시도해 보았으나 효과가 없고, 몇 번인가 민간요법에까지 손을 뻗어 보았으나 증상의 개선은 보이질 않았다. 그러나, 위에서 기술한 실시예 8 또는 9에서 제조된 락토페린 장용정(락토페린으로 1일당 0.45g)을 내복한 2일 후에 식욕이 살아나고, 더욱이 3일 후에는 임상시험의 검사치가 담당의사가 놀랄 정도로 개선되었다. 이 환자의 경우 나른함, 구토, 잦은 감염증 발생, 식욕감퇴 등으로 괴로워하여 삶의 질이 매우 낮은 상태였다. 따라서, 락토페린 장용정의 내복에 의해 삶의 질이 개선된 것은 명확하였다.

(3) 위암 수술 후에 재발하여, 암성 복수가 찬 증상 사례에 락토페린 장용정을 내복시켰다. 이 증상 사례는, 고통을 덜어주기 위해 복수를 여러 차례에 걸쳐 뽑아내어 왔다. 그러나, 위에서 기술한 실시예 8 또는 9에서 제조된 락토페린 장용정(락토페린으로 1일당 0.45 g)을 내복하기 시작하여 1주일 후에, 복수는 완전히 흡수되어 소실되었다. 이 환자는 미열이 계속되고 맥박이 1분에 95회, 호흡수가 1분에 23회로 전형적인 전신성 염증반응 증후군(systemic inflammatory response syndrome: SIRS)의 증상을 보이고 있었으나, 락토페린 장용정의 내복을 개시하고 1주일 후에, 이들 증상은 소실되고 식욕도 회복하였다.

(4) 13년 전부터 아토피성 피부염에 걸려, 전신성 소양감으로 야간에 숙면이 어려웠던 여성환자에게, 위에서 기술한 실시예 8 또는 9에서 제조된 장용성 락토페린 정(락토페린으로 1일당 0.45 g)을 투여했다. 내복 2일 후부터 아토피성 피부염에 의한 피부의 발진이 경감되기 시작하고, 그와 함께 소양감으로부터 해방되어 숙면을 취할 수 있게 되었다. 즉, 락토페린에는 자기면역질환에 의한 스트레스로부터 환자를 해방시키는 효과가 있음이 확인되었다. 또, 셰그렌 증후군 때문에 타액의 분비가 감소하고 있는 환자에게 락토페린 장용정을 경구투여한 바, 타액의 pH가 상승함과 동시에 분비량이 증가하여 구강의 건조가 크게 개선되었다. 따라서, 락토페린은 자기면역질환에 따른 삶의 질 저하를 뚜렷하게 개선하는 효과가 있다.

(5) 지금까지 설명한 것처럼, 생리활성을 나타내는 다양한 단백질은, 그 작용이 발휘되는 장소가 십이지장보다 하부의 소화관인 경우가 많다. 이 명세서에서는 락토페린을 중심으로 설명했지만, 변화없이 위를 통과하여 소장에 유입되어서야 비로소 용해된다면, 지금까지 알려지지 않았던 작용을 발휘하거나, 투여량을 큰 폭으로 감소시킬 수 있는 생리활성 단백질이 락토페린만은 아니다. 면역 글로불린 및 리소자임은, 장용성 제제화하는 것에 의해 락토페린과 유사한 효과를 보이는 단백질이다. 또, 음식물의 소화흡수를 돕기 위해 경구투여되는 아밀라아제, 프로테아제, 리파아제는 작용을 발휘하는 장소가 소장이므로, 장용성 제제화할 필요가 있다. 더욱이 주목해야 할 것은, 현대인에게 많은 비만은, 생체에서 분비되는 소화효소 저해제를 식후에 투여하면 영양소의 흡수가 감소되기 때문에 저지될 수 있는 것이다. 식물유래의 어떤 종류의 단백질은 생체가 분비하는 소화효소를 저해하는 것으로 알려져 있기 때문에, 아밀라아제, 리파아제, 프로테아제의 저해제를 장용화하여 식후에 경구투여하면, 비만을 방지하고, II형 당뇨병, 고혈압증, 동맥경화 등의생활습관병을 뚜렷하게 개선한다. 따라서 본 발명은, 단순히 락토페린에 그치지 않고, 넓은 범위의 생리활성을 보이는 단백질에 적용가능한 것이다.

Claims (10)

1. 효소, 락토페린, 면역 글로불린, 리소자임, 아밀라아제 저해제, 리파아제 저해제 및 프로테아제 저해제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 생리활성을 가지는 단백질의 1종 이상을 활성성분으로서 포함하는 경구용 조성물로서, 방출제어수단을 가지고, 그 활성성분의 적어도 10% 이상이 활성을 유지한 채로 하부 소화관 내에서 방출되는 조성물.
2. 제 1항에 있어서, 활성성분은 락토페린인 것을 특징으로 하는 경구용 조성물.
3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 전신성 염증반응 증후군; 염증성 장질환; 비만, 당뇨병 또는 고혈압증을 포함하는 생활습관병; 악성 종양; C형 간염 바이러스, 로타바이러스, 헤르페스바이러스 또는 사이토메갈로바이러스를 포함하는 병원 바이러스에 의한 감염증; 병원성 미생물에 의한 감염증; 및 자기면역질환; 및/또는 이들 질환 또는 상태에 수반되는 증상의 치료 또는 개선을 위한 것을 특징으로 하는 경구용 조성물.
4. 효소, 락토페린, 면역 글로불린, 리소자임, 아밀라아제 저해제, 리파아제 저해제 및 프로테아제 저해제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 생리활성을 가지는단백질의 1종 이상을 활성성분으로서 포함하는 경구용 조성물로서, 방출제어수단을 가지고, 그 방출제어수단이 장용성 피막을 포함하는 것인 경구용 조성물.
5. 제 4항에 있어서, 활성성분은 락토페린인 것을 특징으로 하는 경구용 조성물.
6. 제 4항 또는 제 5항에 있어서, 전신성 염증반응 증후군; 염증성 장질환; 비만, 당뇨병 또는 고혈압증을 포함하는 생활습관병; 악성 종양; C형 간염 바이러스, 로타바이러스, 헤르페스바이러스 또는 사이토메갈로바이러스를 포함하는 병원 바이러스에 의한 감염증; 병원성 미생물에 의한 감염증; 및 자기면역질환; 및/또는 이들 질환 또는 상태에 수반되는 증상의 치료 또는 개선을 위한 것을 특징으로 하는 경구용 조성물.
7. 제 4항 내지 제 6항중 어느 한 항에 있어서, 장용성 피막은 셸락(shellac), 제인(zein), 히드록시프로필메틸셀룰로스·프탈레이트, 카르복시메틸에틸셀룰로스, 초산프탈산셀룰로스, 메타크릴산 공중합체, 수불용성 에틸셀룰로스 및 아미노알킬메타크릴레이트 공중합체로 이루어진 군으로부터 선택되는 기제를 포함하는 것을 특징으로 하는 경구용 조성물.
8. 제 4항에 있어서, 활성성분은 락토페린이고, 산제, 과립제, 산제 또는 과립의 일정량이 충진된 캅셀제 또는 정제의 형태인 것을 특징으로 하는 경구용 조성물로서, 다음의 공정을 포함하는 제조방법에 의해 얻어질 수 있는 경구용 조성물:

   락토페린 분말 및 의약으로서 허용되는 첨가제를 건조상태에서 혼합하고;

   원하는 바에 따라, 혼합물을 건조상태에서 강압성형하고, 그 다음으로 성형물을 일정한 크기의 미립상물 또는 과립으로 하고; 그리고

   미립상물 또는 과립을 장용성 피막으로 피복하던가, 또는 혼합물, 미립상물 또는 과립을 타정하고, 타정물을 장용성 피막으로 피복한다.
9. 다음의 공정을 포함하는, 산제, 과립제, 산제 또는 과립의 일정량이 충진된 캅셀제 또는 정제의 형태인 장용성 경구용 조성물의 제조방법:

   락토페린 분말 및 의약으로서 허용되는 첨가제를 건조상태에서 혼합하고;

   원하는 바에 따라, 혼합물을 건조상태에서 강압성형하고, 그 다음으로 성형물을 일정한 크기의 미립상물 또는 과립으로 하고; 그리고

   미립상물 또는 과립을 장용성 피막으로 피복하던가, 또는 혼합물, 미립상물 또는 과립을 타정하고, 타정물을 장용성 피막으로 피복한다.
10. 제 4항에 있어서, 활성성분은 락토페린이고, 일본약국방·일반시험법에 있어서 장용성 제제를 위한 붕괴시험에 적합한 것을 특징으로 하는 경구용 조성물.