KR20010108509A

KR20010108509A - 에스트로겐 수용체-β리간드

Info

Publication number: KR20010108509A
Application number: KR1020017013143A
Authority: KR
Inventors: 버나드 크리스토프 발람; 티모시 마틴 파이저
Original assignee: 다비드 에 질레스; 아스트라제네카 아베
Priority date: 1999-04-16
Filing date: 2000-04-11
Publication date: 2001-12-07
Also published as: HUP0200740A3; SK14762001A3; WO2000062765A2; CA2370126A1; CN1358091A; TR200102992T2; JP2002542187A; IL145839A0; US6518301B1; EE200100526A; AU4128800A; MXPA01010423A; WO2000062765A3; BG106103A; ZA200108409B; BR0009814A; HUP0200740A2; AR043085A1; IS6108A; NO20015015D0

Abstract

식

(K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 1

을 만족하며, 임의로 하기 화학식의 일반적인 구조를 갖는 화합물을 치료상 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 에스트로겐 수용체-β 관련 질환의 치료 방법.

Description

에스트로겐 수용체-β 리간드{Estrogen Receptor-β Ligands}

에스트로겐 보충 요법 ("ERT")은 알츠하이머병의 발병을 감소시키고 알츠하이머 환자의 인지 능력을 향상시킨다 (니콜로브 (Nikolov) 등의 문헌 [Drugs of Today, 34(11),927-933 (1998)] 참조). 또한 ERT는 골다공증 및 심혈관계 질환에서 유익한 효과를 보이며 불안치료제 및 항우울제로서의 치료 능력을 가지고 있는 듯하다. 그러나, ERT는 자궁 및 유방에 해로운 부작용을 보여 그 사용이 제한되고 있다.

폐경후의 인간 여성에게 ERT의 유익한 효능은 난소 절제된 쥐 (rat) 모델에서의 인지 능력, 불안, 우울증, 뼈 손실 및 심혈관계 손상에 관련된 모델에 대한 에스트로겐의 유익한 효능으로도 반영된다. 또한 에스트로겐은 인간의 자궁 및 유방 조직의 분열 촉진 효과를 의미하는 자궁 및 유방 조직의 비대증을 동물 모델에서 유발한다.

폐경후의 인간 여성에게 ERT의 유익한 효능은 난소 절제된 쥐 (rat) 모델에서의 인지 능력, 불안, 우울증, 뼈 손실 및 심혈관계 손상에 관련된 모델에 대한 에스트로겐의 유익한 효능으로도 반영된다. 특히, 여러 다른 효능 중에서 중추신경계 ("CNS")의 콜린계 작용 증가, 뉴로트로핀 / 뉴로트로핀 수용체 발현의 증가, 아밀로이드 전구 단백질 프로세싱의 변화, 다양한 손상에 대한 신경보호작용의 제공 및 글루타메이트계 시냅스 전달 증가가 실험 결과들을 통해 증명되었다. 전임상 연구에서 에스트로겐 효능에 대한 대체적인 CNS 프로필은 인지 능력의 향상과 알츠하이머병 진행의 지연을 위한 임상적 용도와 부합한다. 또한 에스트로겐은 자궁 및 유방 조직에 분열 촉진 효과를 유발하여 인간의 상기 조직에 대한 해로운 부작용을 나타내고 있다.

인간, 쥐 (rat) 및 생쥐 (mouse)의 에스트로겐 수용체 ("ER")는 두 가지 아유형인 ER-α 및 ER-β 로 존재하며, 이들은 리간드 결합 도메인에서 약 50％의 동일성을 공유하고 있다 (쿠퍼 (Kuiper) 등의 문헌 [Endocrinology 139(10)4252-4263 (1998)] 참조). 상기 아유형의 차이 때문에 일부 작은 화합물이 다른 아유형보다 한 아유형에 대해 우선적인 결합을 보이게 된다 (쿠퍼 등).

쥐 (rat)에서, ER-β는 ER-α에 비해 뇌, 뼈 및 혈관 내피에서 강하게 발현되지만, 자궁 및 유방에서는 약하게 발현된다. 게다가, ER-α녹아웃 (ERKO-α) 생쥐는 불임이고 생식 조직의 호르몬 반응이 미미하게 나타나거나 전무하였다. 반면, ER-β녹아웃 (ERKO-β) 생쥐는 가임이고 자궁 및 유방 조직의 발달 및 기능이정상적으로 나타났다. 이러한 관찰 결과는 ER-α보다 ER-β를 선택적인 표적으로 하는 것이 생식계의 부작용에 대한 부담 없이 인간의 여러 중요 질환, 예를 들어 알츠하이머병, 불안 장애, 우울 장애, 골다공증 및 심혈관계 질환에 유익한 효과를 제공한다는 것을 시사한다. 자궁 및 유방보다 ER-β발현 조직 (CNS, 뼈 등)에 더 선택적인 효과는 ER-α보다 ER-β에 선택적으로 결합하는 약물에 의해 달성될 수 있다.

본 발명의 목적은 ERT가 치료상 유리한 질환을 치료하는데 유용한 ER-β 선택적 리간드를 확인하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 뇌, 뼈 및 심혈관계 기능에서 ERT의 이로운 효과를 모방하는 ER-β 선택적 리간드를 확인하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 인지 능력을 향상시키고 알츠하이머병의 진행을 지연시키는 ER-β 선택적 리간드를 확인하는 것이다.

<발명의 개요>

본 발명은 ER-β 선택적 리간드로서 ERT와 유사하지만, 바람직하지 않은 부작용은 없는, 하기 화학식의 화합물의 용도에 관한 것이다.

이러한 화합물은 특히 다음의 식

(K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 1,

바람직하게는

(K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 30,

더 바람직하게는

(K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 100

을 만족하며, 여기서 K_iαA는 ER-α에 대한 상기 리간드의 K_i값이고, K_iβA는 ER-β에 대한 상기 리간드의 K_i값이고, K_iαE는 ER-α에 대한 에스트로겐의 K_i값이고, K_iβE는 ER-β에 대한 에스트로겐의 K_i값이다.

본 발명은 에스트로겐 수용체-α보다는 에스트로겐 수용체-β에 대한 선택성이 에스트로겐보다 높은 일련의 리간드 및 특히 에스트로겐 수용체-β 리간드뿐만 아니라 그 제조법과 에스트로겐 수용체-β관련 질환, 특히 알츠하이머병, 불안 장애, 우울 장애, 골다공증, 심혈관계 질환, 류마티스성 관절염 및 전립선암의 치료 용도에 관한 것이다.

본 발명은 (K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 1 의 식 (식 중, K_iαA는 ER-α에 대한 아고니스트 (agonist)의 K_i값이고, K_iβA는 ER-β에 대한 아고니스트의 K_i값이고, K_iαE는 ER-α에 대한 에스트로겐의 K_i값이고, K_iβE는 ER-β에 대한 에스트로겐의 K_i값임)을 만족하는 화합물을 치료상 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 에스트로겐 수용체-β관련 질환의 치료 방법을 포함한다. 바람직하게, 상기 화합물은 (K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 100 의 식을 만족한다. 바람직한 에스트로겐 수용체-β관련 질환은 알츠하이머병, 불안 장애, 우울 장애, 골다공증, 심혈관계 질환, 류마티스성 관절염 및 전립선암으로부터 선택된다. 더 바람직하게, 상기 질환은 알츠하이머병 또는 우울 장애이다.

본 발명의 화합물은 하기 화학식의 구조를 갖는 ER-β선택적 리간드이다.

상기 식에서 L¹은 -C(=O)-, =C(R⁶)-, -CH(R⁶)-, O, S 또는 NR^a이며 바람직하게는 -C(=O)-, =C(R⁶)-, =CH(R⁶)- 또는 O이고; L²는 =C- 또는 -CH-이고; L³은 =C(R⁶)-, -CH(R⁶)- 또는 -C(=O)-이고, L⁴는 -C(=O)-, CH₂, O, S 또는 NR^a이며, 바람직하게는 -C(=O)-, CH₂또는 O이며, 다만 L¹이 -C(=O)-인 경우 L⁴는 CH₂, O, S 또는 NR^a이고; L⁴가 -C(=O)-이면 L¹은 CH₂, O, S 또는 NR^a이고; L³이 -C(=O)-이면 L₁은 =C(R⁶)- 또는 -CH(R⁶)- 이고 L⁴는 O 또는 NR^a이다. 추가로, L¹이 =C(R⁶)-이면 L²는 =C-이고; L¹이 -CH(R⁶)-이면 L²는 -CH-이고; L³이 =C(R⁶)-이면 L²는 =C-이고; L³이 -CH(R⁶)-이면 L²는 -CH-이다.는 L¹-L⁴의 혼성화에 따라 단일 결합 혹은 이중 결합인 것을 나타낸다. L²는 네 번째 결합이 R¹에 대한 단일 결합이기 때문에 세개의 결합손만이 나타난다.

R¹은 L²에 단일 결합으로 결합되어 있고, 페닐, 치환된 페닐, Het 또는 하기에 정의된 바에 따라 치환된 Het이다. R¹은 바람직하게 하기 화학식과 같다.

여기서 R⁷은 H, Cl 또는 메틸이고; R⁸은 Br, Cl, F, R^a, OR^a또는 알릴이고; R⁹는 H, OH, NH₂, Br 또는 Cl이고; R¹⁰은 H 또는 메틸이거나; 또는 R⁸과 R⁹는 -OCH₂O-로 연결되어 페닐기 외부에 제2의 5원 고리 구조를 형성할 수도 있다. 또는, R¹은의 구조를 갖는 치환된 또는 비치환 헤테로시클릭 치환기일 수도 있으며 바람직하게는 치환되지 않은형태를 취한다.

R², R³, R⁴및 R⁵는 각각 독립적으로 -R^a, -OR^a, -SR^a, -NR^aR^a, -NC(=O)R^a, -NS(=O)R^a, -NS(=O)₂R^a, 할로겐, 시아노, -CF₃, -CO₂R^a, -C(=O)R^a, -C(=O)NHR^a, 니트로, -S(=O)R^a또는 -S(=O)₂R^a이며 바람직하게는 R^a, OR^a, NR^a ₂, NC(=O)R^a, CF₃또는 할로겐, 바람직하게는 수소, 하이드록실 또는 메틸이다.

R⁶은 R^a, 페닐 또는 CF₃이다.

각각의 R^a는 독립적으로 H 또는 (C₁-C₅)알킬이다.

L¹이 -C(=O)- 이고, R²가 하이드록시 또는 수소이고, R³이 수소이고, R⁴가 하이드록시이고, R⁵가 수소이고 R⁶이 수소인 경우, R¹은 파라-페놀이 아니다.

본 발명의 목적상, 페닐 또는 이종원자 고리의 변형을 나타내는 데 사용되는 "치환된"의 의미는 하나 이상의 위치에서 독립적으로 -R^a, -OR^a, -SR^a, -NR^aR^a, -NC(=O)R^a, -NS(=O)R^a, -NS(=O)₂R^a, 할로겐, 시아노, -CF₃, -CO₂R^a, -C(=O)R^a, -C(=O)NHR^a, 니트로, -S(=O)R^a또는 -S(=O)₂R^a으로 치환된 고리를 의미한다.

또한, 본 발명의 목적상, "Het"은 치환된 또는 비치환된 하나 또는 두 개의고리로 된 하기 화학식의 헤테로시클릭 화합물을 의미한다.

여기서 십자 모양으로 교차된 결합은 그 교차 고리 상의 임의의 위치에서 헤테로시클릭 화합물이 결합될 수 있음을 나타낸다.

에스트로겐 수용체 결합 측정

임의 화합물의 ER에 대한 결합능은 방사성 표지된 에스트로겐인 [¹²⁵I]-16α-요오드-3,17β-에스트라디올 (NEN, 카탈로그 번호 NEX-144)과의 결합 경쟁 능력을 통해 측정한다. 이하에서 방사성 리간드는 [¹²⁵I]-에스트라디올로 표시하였다.

ER-β (Gen Bank 기탁번호 X99101) cDNA 또는 ER-α (Gen Bank 기탁번호 M12674) cDNA를 발현 벡터 pSG5 (스트라타젠, Stratagene)에 클로닝하여 이. 콜라이 (e.coli) 균주 DHαF'을 형질전환시키고, 음이온 교환수지 컬럼 (콰이아젠(Qiagen) 카탈로그 번호 12125)으로 정제하였다. 수용체 단백질은 TNT T7 퀵-커플드 (Quick-Coupled) 망상적혈구 용해물 시스템 (프로메가 (Promega) 카탈로그 번호 L1170)을 사용하여 이들 플라스미드를 시험관내 전사 및 번역함으로써 제조하였다. 망상적혈구 용해물 (12.5mL)을 90분 동안 30℃에서 ER-α플라스미드 312.5 ㎍ 및 ER-β플라스미드 625 ㎍과 함께 인큐베이션하였다. 처리 결과로 얻어진 용해물은 분취하여 -80℃에서 동결 보관하였다.

화합물을 2회 반복 실험으로 10 pM 내지 3 μM의 범위의 하프-로그 농도로 시험하였다. 화합물을 DMSO 중 1 mM 원액으로 조제하여 결합 분석 시험 완충액 (HEPES 20 mM, NaCl 150 mM, EDTA 1 mM, 모노티오글리세롤 6 mM 및 Na₂MoO₄10 mM; 10％ 중량/부피 글리세롤, pH=7.9)으로 삼배수 농도의 단계 분취액 20 ㎕씩을 96 웰 플레이트에서 희석하였다. 수용체 분취액을 얼음에 놓고 해동시켜, 결합 분석 시험 완충액으로 적절히 희석 (하기 참조)시켰다. 희석된 수용체 (각 30 ㎕씩)을 웰에 각각 첨가하였다. 에탄올 용액 중의 제조품 원액 [¹²⁵I]-에스트라디올을 결합 분석 시험 완충액 중의 사용 용액 900 pM로 희석하였다. 최종 분석 부피는 60 ㎕이며, 본 발명에 따른 화합물 20 ㎕, 상기 얻어진 망상적혈구 용해액 30 ㎕ 및 900 pM [¹²⁵I]-에스트라디올 10 ㎕로 구성되었다. [¹²⁵I]-에스트라디올의 최종 농도는 150 pM이었다. 최종 분석 혼합물을 포함하는 플레이트를 진탕기에서 2분동안 혼합하여 밤새 (약 16시간) 4℃에서 인큐베이션하였다.

수용체-결합 방사성 리간드와 미결합 방사성 리간드를 세파덱스 컬럼으로 여과 분리하였다. 컬럼 (베드 부피 45㎕)은 건조 컬럼 매질 (파마시아 (Pharmacia) 카탈로그 번호 G-25)을 96 웰 컬럼 플레이트 (밀리포어 멀티스크린 플레이트 (Millipore MultiScreen Plates) 카탈로그 번호 MAHVN4510)에 넣어 만들었다. 결합 분석 시험 완충액 300 ㎕로 컬럼을 포화시키고 4℃에서 보관하였다. 사용하기 전에, 보관한 컬럼을 2000 RPM으로 10분간 회전시킨 후 새 결합 완충액 200 ㎕로 두 번 세척하였다. 그 후 결합 분석 혼합물 (각 50 ㎕)를 컬럼에 걸고, 추가로 용출 부피 35 ㎕를 즉시 컬럼에 걸었다. 수용체-결합 방사성 리간드를 2000 RPM으로 10분간 원심분리하여 컬럼으로부터 용출시켰다. 신틸레이션 칵테일 (145 ㎕)을 용출된 방사성 리간드/수용체 착물에 첨가하고 액체 섬광 계수기로 방사성 표지를 측정하였다.

비특이적 결합은 150 mM 디에틸스틸베스테롤 (DES)과의 경쟁을 통해 밝혀냈다. 결합 친화도는 하기 식을 이용해 농도와 특이적 결합 (SB) 백분율과의 관계를 핏팅(fit)하여 얻은 IC₅₀값으로 쳉-프루스호프 (Cheng-Prushoff) 식을 이용해 계산한 K_i값으로 표현한다.

％ SB = 최대값 - (최대값 - 최소값)/(1+10^{(logIC50-log[화합물])})

상기 분석 실험에서, 기준 에스트로겐 수용체 리간드인 에스트라디올과 DES는 ER-β 및 ER-α의 고친화성 (Ki < 1 nM) 비선택적 리간드로 확인되었다.

결합 분석 시험에서 수용체-처리 결과로 얻은 망상적혈구 용해물의 첨가된 부피는 제조된 수용체 각 회분에서 두 번의 측정을 통해 독립적으로 결정하였다.우선, K_i값들은 기준 화합물에 대해 수용체 조제물의 단계 희석액을 사용하여 측정하였다. 이 화합물들의 알려진 K_i값 및 허용 가능한 신호 대 잡음비 (약 10)가 나타나는 수용체 희석액에 대해 리간드 결합 친화도의 스캐차드 분석 (Scatchard analysis)을 수행하였다. 이 실험 결과,¹²⁵[I]-에스트라디올의 K_D값은 0.1 내지 1 nM이었고, B_max는 5 내지 30 pmol이었다.

투여 및 용도

본 발명의 화합물은 ER-α에 비해 ER-β에 대해서 높은 선택성을 가지는 것으로 나타났으며 자궁에 대한 바람직하지 못한 효과 없이 ER-β에 대한 아고니스트 활성을 가진다. 따라서, 이러한 화합물 및 그를 포함하는 조성물은 다양한 ER-β 관련 CNS 질환, 예를 들어 알츠하이머병의 치료제로 사용될 수 있다.

또한 본 발명은 무독성 첨가염, 아미드 및 에스테르를 비롯한 본 발명의 화합물 유효량을 포함하는 조성물을 제공하며, 이는 상기 제시한 치료 효과를 제공한다. 또한 그러한 상기 조성물은 생리학적으로 허용되는 액체, 겔 또는 고체 희석제, 보조제 및 부형제와 함께 제공될 수 있다. 또한 본 발명의 화합물은 상기의 또는 다른 적용증에 대한 치료제로서 용도가 공지된 다른 화합물과 함께 사용될 수 있다.

상기 화합물 및 조성물은 유자격 건강 관리 전문가에 의해 다른 치료제와 유사한 방식으로 인간에게 또는 가축과 같은 수의과 용도로 기타 포유류에게 투여될수 있다. 일반적으로, 상기 조성물은 주사 가능하도록 제조되며 액체 용액 또는 현탁액, 주사 전에 액체로의 용해나 현탁에 적합한 고형 중 어느 형태로든 또한 제조 가능하다. 또한 상기 조제물은 유화될 수 있다. 흔히 활성 성분은 생리학적으로 허용 가능하고 활성 성분과 배합 가능한 부형제와 함께 혼합된다. 적합한 부형제는 예를 들어 물, 식염수, 덱스트로스, 글리세롤 등과 그 조합물이다. 게다가, 필요한 경우 조성물이 습윤제 또는 유화제, 안정제 또는 pH 완충제 등과 같은 보조 성분을 소량 함유할 수 있다.

상기 조성물은 통상 비경구적으로 주사에 의해, 예를 들어 피하주사 또는 정맥내 주사에 의해 투여된다. 다른 방식의 투여에 적합한 추가적인 제형으로는 좌약제, 비강내 에어로졸제 및 경우에 따라 경구용 제형 등이 있다. 좌약제의 경우 통상적인 결합제와 부형제에는 예를 들어 폴리알킬렌 글리콜 또는 트리글리세라이드가 포함되며 상기 좌약제는 활성 성분을 함유하는 혼합물을 원료로 하여 만들 수 있다. 경구용 제형은 일반적으로 사용되는 부형제, 예를 들어 약제학 등급의 만니톨, 유당, 전분, 스테아르산 마그네슘, 소듐 사카린, 셀룰로스, 탄산 마그네슘 등을 포함한다. 상기 조성물은 용액, 현탁액, 정제, 환제, 캡슐제, 지효성 제형 또는 분말의 형태이다.

본 발명의 화합물은 중성 또는 염의 형태로 조성물로 제제화할 수 있다. 약제학상 허용 가능한 무독성 염에는 산 첨가 염 (유리 아미노기와 함께 형성됨) 및 무기산, 예를 들어 염산 또는 인산이나 유기산, 예를 들어 아세트산, 옥살산, 타타르산, 만델산 등으로부터 형성된 산 첨가 염이 포함된다. 유리 카르복실기와 함께형성된 염은 무기 염기, 예를 들어 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화암모늄, 수산화칼슘 및 수산화철 및 유기 염기, 예를 들어 이소프로필아민, 트리메틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘, 프로캐인 등으로부터 유래될 수 있다.

ER-β 활성을 보이는 본 발명의 화합물에 추가하여, 본 발명의 화합물은 상기 유용한 화합물 합성에서의 중간체로서도 사용될 수 있다.

합성

본 발명의 범위 내의 화합물은 당업계에 널리 공지된 방식에 의해 화학적으로 합성할 수 있다. 하기 실시예는 일반적인 합성 개요를 보여주기 위한 것으로 시판 중인 수종의 출발 물질을 이용하여 다수의 다양한 변이체를 제조하는데 사용될 수 있다. 하기 실시예는 단지 본 발명의 범위 내에 있는 일부 화합물의 제조법을 안내하기 위한 것이며 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석해서는 안된다.

실시예 1 (A 경로)

-(3-브로모-4-하이드록시페닐)-5,7-디하이드록시-4H-1-벤조피란-4-온

1,3,5-트리하이드록시벤즈알데히드 (1.01 g, 6.25 mmol) 및 3-브로모-4-하이드록시페닐아세트산 (1.44 g, 6.25 mmol)을 POCl₃(4 ml)에 현탁시켰다. 1분 후에, 발열반응이 일어났다. 상기 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 염화 아연 (1M 에테르 용액, 4.7 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 75℃에서 1 시간동안 가열하였다. 냉각 후, 상기 혼합물을 아세트산 에틸 및 1M 염산 수용액 중에 분배하였다. 유기층은 염수로 세척하여 MgSO₄로 건조시켰다. 실리카겔 (MeOH/디클로로메탄, 농도구배) 상에서 정제하여 1-(2,4,6-트리하이드록시페닐)-2-(3-브로모-4-하이드록시페닐)에타논 (390 mg)을 황갈색 고체 형태로 얻었다.

질소 하에서 DMF (5 ml) 중의 1-(2,4,6-트리하이드록시페닐)-2-(3-브로모-4-하이드록시페닐)에타논 (370 mg)에 BF₃-Ft₂O (0.83 ml, 6.55 mmol)를 적가하고, 이어서 메탄설포닐 클로라이드 (0.507 ml, 6.55 mmol)을 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 10분간 교반하고 55℃에서 30분간 가열하였다. 냉각 후, 상기 혼합물은 아세트산 에틸 / 1M HCl 수용액 중에 분배하였다. 상기 유기층은 1M HCl과 염수로 세척하고 C₁₈HPLC로 정제하여 표제 화합물 (55 mg)을 얻었다.

실시예 2 (화합물 제28번, B 경로)

3-(4-하이드록시페닐)-7-하이드록시-4-메틸쿠마린

무수 아세트산 (10 ml) 중의 2,4-디하이드록시아세토페논 (1.1 g, 7.24 mmol), 4-하이드록시페닐아세트산 (1.45 g, 9.5 mmol) 및 아세트산 칼륨 (0.9 g, 9.2 mmol) 용액을 18시간동안 환류 하에서 가열하였다. 냉각 후, 상기 혼합물을 얼음물에 부어 넣었다. 생성된 고체를 여과하고, 에테르로 세척하고 진공 상태에서 건조하여 3-(4-아세트옥시페닐)-7-아세트옥시-4-메틸쿠마린 (1.83 g)을 얻었다.

THF (10 ml) 및 1N 수산화나트륨 수용액 중의 3-(4-아세트옥시페닐)-7-아세트옥시-4-메틸쿠마린 (500 mg) 현탁액을 1 시간동안 교반하였다. 상기 혼합물을 농축된 HCl로 pH=1로 산성화시켰고 EtOAc / 물로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시키고 에테르로 잔여물을 분쇄하여 표제 화합물 (140 mg)을 얻었다.

HPLC 조건 (HPLC 4.6 x 250 mm C₁₈5 ㎛ 바이닥스 (Vydax) 218TP54 컬럼, 유속: 1.5 ml/분, 아세토니트릴 / 물 0.1％ TFA를 30 분 동안 10:90 내지 50:50으로 선형 농도 구배 , UV 검출: 254 nm)이 A 조건이다.

HPLC 조건 (HPLC 2.1 x 30 mm C₁₈3.5 ㎛ 조르닥스 래피드 레졸루션 (Zordax Rapid Resolution) 컬럼, 유속: 0.7 ml/분, 물 - 0.05％ TFA를 0.5 분 동안 건 후 90％ 아세토니트릴 수용액 / 물 0.05％ TFA를 9.5 분 동안 0:100 내지 80:20으로 선형 농도 구배 , UV 검출)이 B 조건이다.

하기 화합물은 상기 경로들에 따라 관련 출발 물질을 사용하여 제조하였다.

Claims

하기 식을 만족하는 화합물을 치료상 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 에스트로겐 수용체-β 관련 질환의 치료 방법.

(K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 1

식 중에서,

K_iαA는 ER-α에 대한 아고니스트의 K_i값이고,

K_iβA는 ER-β에 대한 아고니스트의 K_i값이고,

K_iαE는 ER-α에 대한 에스트로겐의 K_i값이고,

K_iβE는 ER-β에 대한 에스트로겐의 K_i값이다.
제1항에 있어서, 상기 화합물은 식

(K_iαA/K_iβA)/(K_iαE/K_iβE) > 100

을 만족하는 것인 방법.
제2항에 있어서, 상기 치료 질환은 알츠하이머병, 불안 장애, 우울 장애, 골다공증, 심혈관계 질환, 류마티스성 관절염 및 전립선암으로 구성된 군으로부터 선택된 것인 방법.
제3항에 있어서, 상기 화합물이 하기 화학식의 화합물 또는 그의 약제학상 허용되는 염인 방법.

식 중에서,

L¹은 -C(=O)-, =C(R⁶)-, -CH(R⁶)-, O, S 또는 NR^a이고;

L²는 =C- 또는 -CH-이고;

L³은 =C(R⁶)-, -CH(R⁶)- 또는 -C(=O)-이고;

L⁴는 -C(=O)-, CH₂, O, S 또는 NR^a이며;

여기서

L¹이 -C(=O)-이면 L⁴는 CH₂, O, S 또는 NR^a이고;

L⁴가 -C(=O)-이면 L¹은 CH₂, O, S 또는 NR^a이고;

L³이 -C(=O)-이면 L₁은 =C(R⁶)- 또는 -CH(R⁶)-이고 L⁴는 O 또는 NR^a이고;

L¹이 =C(R⁶)-이면 L²는 =C-이고;

L¹이 -CH(R⁶)-이면 L²는 -CH-이고;

L³이 =C(R⁶)-이면 L²는 =C-이고;

L³이 -CH(R⁶)-이면 L²는 -CH-이며;

각각의 R^a는 독립적으로 H 또는 (C₁-C₅)알킬이고;

R¹은 페닐, 치환된 페닐 또는 Het이고;

R², R³, R⁴및 R⁵는 -R^a, -OR^a, -SR^a, -NR^aR^a, -NC(=O)R^a, -NS(=O)R^a, -NS(=O)₂R^a, 할로겐, 시아노, -CF₃, -CO₂R^a, -C(=O)R^a, -C(=O)NHR^a, 니트로, -S(=O)R^a또는 -S(=O)₂R^a으로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;

R⁶는 H, (C₁-C₅)알킬, 페닐 또는 CF₃이며;

L¹이 -C(=O)- 이고, R²가 하이드록시 또는 수소이고, R³이 수소이고, R⁴가 하이드록시이고, R⁵가 수소이고, R⁶이 수소인 경우에는, R¹은 파라-페놀이 아니다.
제4항에 있어서, R¹은 Het인 방법
제4항에 있어서,

R¹은 하기 화학식의 구조를 갖거나,

(여기서, R⁷은 H, Cl 또는 메틸이고; R⁸은 Br, Cl, F, R^a, OR^a또는 알릴이고; R⁹는 H, OH, NH₂, Br 또는 Cl이고; R¹⁰은 H 또는 메틸이거나; 또는 R⁸과 R⁹는 -OCH₂O-로 연결됨) 또는

R¹은 하기의 구조를 갖는 치환된 또는 비치환 형태인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환이 알츠하이머병 또는 우울 장애인 방법.
제6항에 있어서, R², R³, R⁴및 R⁵는 R^a, OR^a, NR^a ₂, NC(=O)R^a, CF₃또는 할로겐으로 구성된 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 것인 방법.
제8항에 있어서, R²는 하이드록실 또는 수소이고, R³은 수소 또는 메틸이고,R⁴는 하이드록실 또는 수소이고, R⁵는 수소 또는 하이드록실기인 방법.
제8항에 있어서, L⁴는 -C(=O)-인 방법.
제8항에 있어서, L³은 -C(=O)-인 방법.
제8항에 있어서, L¹은 -C(=O)-인 방법.
제9항에 있어서, R¹은의 비치환 형태인 방법.