KR20010010154A - 프로시아니딘를 유효성분으로 하는 약효제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 프로시아니딘(Procyanidin)를 유효성분으로 하는 약효제에 관한 것으로서, 결합조직의 세포외 기질과 기저막의 주성분을 분해하는 기질 금속단백질분해효소 (Matrix metalloproteinase)의 활성 억제에 효과적인 것을 확인하여 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 활성과 관련된 상처, 암전이, 치주질환, 류마토이드 관절염, 염증, 부갑상선항진증, 당뇨병, 각막궤양, 골다공증, 위궤양, 외상, 주름, 여드름, 에이즈, 화상, 동맥경화, 골절과 같은 질환을 예방 및 치료하는데 사용되는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제를 제공한다.

Description

프로시아니딘를 유효성분으로 하는 약효제{MEDICINE HAVING EFFECTIVE COMPOSITION OF PROCYANIDINE}
[산업상 이용분야]
본 발명은 프로시아니딘(Procyanidin)을 유효성분으로 하는 약효제에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 프로시아니딘이 결합조직의 세포외 기질과 기저막의 주성분을 분해하는 기질 금속단백질 분해효소(Matrix metalloproteinase, 이하 "MMP"이라 한다)의 활성 억제에 효과적인 것을 확인하여 기질 금속단백질 분해효소 (MMP)의 활성과 관련된 상처, 암전이, 치주질환, 류마토이드 관절염, 염증, 부갑상선항진증, 당뇨병, 각막궤양, 골다공증, 위궤양, 외상, 주름, 여드름, 에이즈, 화상, 동맥경화 및 골절과 같은 질환을 예방 및 치료하는데 사용되는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제에 관한 것이다.
[종래 기술]
프로시아니딘(도 1)은 카테킨(Catechin), 에피카테킨(Epicatechin), 카테킨갈레이트(Catechin gallate), 에피카테킨갈레이트(Epicatechin gallate),　갈로카테킨갈레이트(Gallocatechin gallate) 또는 에피갈로카테킨갈레이트 (Epigallocatechin gallate)를 기본 골격(Backbone)으로 하고, 이중체(Dimer) 이상의 올리고머(Oligomer) 및 다중체(Polymer)를 통칭하는 명칭으로, 광범위한 식물체에 함유되어 있는 비가수 분해성 탄닌이다. 프로시아니딘은 단백질과의 결합능을 가지고 있다고 알려져 있으며, 이중체 (Dimer)는 항염증 효능이 있다고 보고되어 있다. 특히, 녹차 탄닌으로 알려져 있는 카테킨은 탁월한 항암효과까지 있는 것으로 보고되어 있다. 또한 프로시아니딘은 항산화효과 및 항세균효과와 관련해서 특허에 등록(미국특허 제5,494,661호, 미국특허 제4,797,421호, WO 9,324,106 등)이 되어 있으며, 그 외에도 의약품(유럽특허 제812,592호, 일본특허 제6,183,958호 등), 화장품(유럽특허 제694,305호, 일본특허 제6,336,420호 등), 식품첨가제(일본특허 제10,004,923호, 일본특허 제9,549,333호 등) 및 프로시아니딘 제조방법(일본특허 제63,267,774, ZA 8,205,023 등)과 관련된 특허도 있다. 미국 등지에서는 포도씨에서 추출한 제품도 출시되어 있다. 그러나, 프로시아니딘과 관련된 이러한 연구 중에서도 아직까지 기질 금속단백질 분해효소(MMP) 저해와 관련해서는 연구가 많이 되어있지 않다.
기질 금속단백질 분해효소(MMP)는 다형핵성호중구(Polymorphonuclear neutrophil), 대식세포(Macrophage), 치은섬유아세포(Fibroblast), 골세포(Bone cell)와 같은 세포로부터 분비되는 칼슘 및 아연 의존성 엔도펩티다제 (Endopeptidase)로 중성 pH에서 작용하며, 기질로써 여러가지 세포외기질을 이용한다. 이러한 단백질 분해효소는 배발생, 조직의 형성, 타액선 형성, 치아발생과 같은 수많은 생리학적 과정 뿐만아니라, 상처, 암전이, 치주질환, 류마토이드 관절염, 염증, 부갑상선항진증, 당뇨병, 각막궤양, 골다공증, 위궤양, 외상, 주름, 여드름, 에이즈, 화상, 동맥경화, 골절과 같은 병리학적 과정과 각종 질환에 관여하는 것으로 알려져 있다. 이러한 효소는 12 개의 군으로 나누어지며, 성장인자 및 사이토카인에 의하여 유전자가 발현되어 효소가 분비되는 것으로 알려져 있다. 또한 혈관, 결합조직 및 림프관으로 발생되는 중배엽조직의 간엽세포와 각질세포에서는 성장인자 및 인터루킨-1β, 종양괴사인자-α, 혈소판유래성장인자, 표피성장인자와 같은 사이토카인이 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 유전자 발현을 촉진하는 반면, 인터페론-α와 글루티코르티코이드 및 변형성장인자-β는 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 유전자 발현을 억제시킨다. 그리고 골흡수와 관련하여 부갑상선호르몬 및 세포내독소, 프로스타글란딘은 기질 금속단백질 분해효소 (MMP)의 합성을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 이러한 유전적 조절기작을 살펴보면 원종양유전자인 c-fos와 c-jun과 같은 전사인자에 의하여 유전자에 대한 활성인자 단백질-1이 변형되고 부가적으로 PEA3 와 NIP 단백질 결합부위가 상승작용으로 치은섬유아세포의 콜라제나제와 스트로멜리신(Stromelysin) 프로모터에서의 전사활성을 최대수준으로 유발시킨다. 호중구의 기질 금속단백질 분해효소(MMP) 조절은 전사수준에서보다는 리소좀의 과립에 의하여 일차적으로 조절된다.
기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 분자구조는 일반적으로 다섯개의 지역인 신호펩타이드, 프로펩타이드, 촉매부위, 경첩부위, 펙신과 같은 부위로 특징화된다. 젤라티나제, MMP-2 및 MMP-9는 1개의 파이브로넥틴과 같은 콜라젠 부위를 가지고 있으며, MMP-9는 부가적으로 또 하나의 타입V 콜라젠 부위를 가지고 있다. 이러한 효소는 세포에서 저장되지 않고 불활성화된 프로엔자임 및 자이모젠 (Zymogen)으로 분비되며 신호펩타이드가 상실되면서 활성을 찾는다. 프로펩타이드의 기능은 효소의 불활성을 유지하는데 관련되며 여러단계로 절단된다. 이러한 효소의 활성을 유발시키는데는 세정제, 산화제, 유기금속물질 및 트립신이나 플라스민과 같은 효소가 관여하여 효소촉매 부위의 아연을 시스테인으로부터 떨어져 나가게 하며, 유리된 아연은 물과 상호작용을 하여 기질을 가수 분해시킨다. 호중구 및 다형핵성 백혈구의 기질 금속단백질 분해효소(MMP)는 산화적 과정에 의하여 일차적으로 활성화되는데, 그 과정은 먼저 세포 내에서 과산화수소가 발생되면 염소이온의 존재하에서 미엘로페록시다제 (Myeloperoxidase)에 의하여 차아염소산으로 전환되고 이것이 기질 금속단백질 분해효소(MMP)를 활성화시킨다. 섬유아세포의 기질 금속단백질 분해효소(MMP)는 트립신 및 플라스민과 같은 단백질 분해효소에 의하여 활성화된다. 이렇게 활성화된 효소는 불과 소량만이 정해진 생리학적 기능을 수행하는데 과량으로 분비되어 활성화되면 앞에서 언급한 각종 질환을 유발시키게 된다.
효소의 기질 특이성은 헤모펙신 혹은 비트로넥틴 부위의 특이성에 따라 결정되며 기본적으로 콜라제나제는 독특하게 섬유상 콜라젠에 대한 특이성을 보여주는 반면에 젤라티나제는 변성된 콜라젠 및 기저막의 타입Ⅳ 콜라젠을 분해한다. 구체적으로 언급하면, MMP-1에는 간질의 효소인 섬유아세포타입 콜라제나제가 속하며, 기질로는 콜라젠 타입Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅶ, Ⅷ, Ⅹ 및 젤라틴이 있으며, MMP-2에는 72-kD의 젤라티나제(A)가 속하며 기질로는 젤라틴, 콜라젠 타입Ⅳ, Ⅴ, Ⅶ, Ⅹ, 엘라스틴 및 파이브로넥틴이 있다. MMP-3에서는 스트로멜리신-1 이 속하며, 그 기질에는 프로테오글리칸, 파이브로넥틴, 라미닌, 프로콜라제나제, 콜라젠 타입Ⅳ, Ⅴ, Ⅸ, Ⅹ과 엘라스틴이 있다. MMP-7에는 마트리리신(Matrilysin)이 속하며, 기질에는 라민, 파이브로넥틴, 콜라젠 타입Ⅳ, 젤라틴, 프로콜라제나제, 프로테오글리칸, 유로키나제가 있다. MMP-8에는 다형핵성백혈구의 콜라제나제가 속하며, 그 기질은 MMP-1의 기질과 같다. MMP-10에는 스트로멜리신-2가 속하며, 그 기질은 MMP-3의 기질과 같다. MMP-11에는 스트로멜리신-3이 속하며, 기질은 결정되어 있지 않다. MMP-12에는 대식세포의 메탈로에스탈라제가 속하며, 기질은 엘라스틴이다.
특히, 기질 금속단백질 분해효소(MMP) 중에서 타입Ⅳ 콜라제나제인 72-kD 및 92-kD 콜라제나제는 암전이의 첫번째 장벽인 기저막의 주요 구조적인 성분인 타입Ⅳ 콜라젠을 분해하는 효소로 암세포의 침윤과 전이에 있어서 가장 중요한 효소라 할 수 있다. 타입Ⅳ 콜라제나제에 대한 저해제의 탐색 및 개발은 암의 침윤과 전이 그리고 콜라젠성 결합조직의 분해가 원인이 되는 류마토이드, 치주질환, 각막궤양의 치료에 유용한 약제의 탐색 및 개발이라는 기능을 가지고 있다.
치주질환에서 중요한 기질 금속단백질 분해효소(MMP)는 섬유아세포와 다형핵성백혈구, 상피세포 및 대식세포에 의하여 분비되는 콜라제나제로, 이들 효소의 생성 기작을 살펴보면 먼저 박테로이드(Bacteroids)와 악티노바실러스 (Actinobacillus) 와 같은 혐기성 그람 음성균의 세포벽 구성분인 리포폴리새커라이드(Lipopolysaccharide)와 같은 내독소에 의하여 직접 조직이 파괴되거나 생체 면역계가 자극을 받는다. 자극을 받는 체액성 및 세포성 면역계가 여러 작용에 의하여 활성산소, 프로스타글란딘 (Prostaglandins) 혹은 인터루킨 (Interleuckins)과 같은 여러종류의 사이토카인 (Cytokine) 등을 세포 외부로 분비한다. 세포 외부로 분비된 활성 산소와 사이토카인은 잇몸 염증을 유발하고, 이들 염증 매개체의 자극에 의하여 분비된 콜라제나제 및 세균으로부터 분비된 콜라제나제에 의하여 치주조직의 기질인 콜라젠이 분해되어 잇몸퇴축이 일어나고, 계속 방치하게 되면 치주질환으로 진행된다.
현재까지 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 활성을 억제시킬 수 있는 약효제로는 테트라사이클린계(테트라사이클린, 미노사이클린, 독시사이클린), 비스-포스포네이트 및 펩타이드 유도체가 있다.
미국 특허 제4,666,897호 에서는 테트라사이클린(Tetracycline), 미노사이클린(Minocycline), 독시사이클린(Doxycycline)을 사용하여 지나친 콜라제나제 활성을 정상수준으로 회복시킬 수 있다는 것을 확인하였고, 미국 특허 제5,652,227호 에서는 클로드로네이트(Clodronate),에티드로네이트 (Etidronate), 파미드로네이트(Pamidronate), 알렌드로네이트(Alendronate)와 같은 비스-포스포네이트(Bis- phosphonates)를 사용하여 결합조직 기질 단백질 구성분의 분해를 억제하여 상처, 암전이, 치주질환, 류마토이드 관절염, 에이즈, 골절과 같은 질환을 예방 및 치료하는 것이 가능하다는 것을 제시하였고, 미국 특허 제5,514,677호 에서는 하이드록사믹산(Hydroxamic acid)을 사용하여 콜라제나제 억제를 통하여 류마토이드 관절염, 염증, 피부질환, 골흡수질환, 암전이 및 상처치료가 가능하다는 것을 제시하였고, 미국 특허 제5,387,610호 에서는 펩타이드 유도체로써 콜라제나제의 억제를 보여 주었다.
따라서 본 발명은 상기 기존의 기질 금속단백질 분해효소(MMP) 관련 효소 억제제들의 문제점 및 프로시아니딘의 용도를 고려하여, 각종 질환의 예방 및 치료제로서 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
도 1은 프로시아니딘의 화학구조를 나타낸 구조도이며,
도 2는 프로시아니딘-4,5 분획물의 분리 및 정제를 나타내는 다이어그램 이며,
도 3은 프로시아니딘-4,5 분획물의 젤 투과 크로마토그래피를 나타내는 그래프이다.
[과제를 해결하기위한 수단]
본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여,
질환을 예방 및 치료하는 약효제에 있어서, 상처, 암전이, 류마토이드 관절염, 염증, 부갑상선항진증, 당뇨병, 각막궤양, 골다공증, 위궤양, 외상, 주름, 여드름, 에이즈, 화상, 치주질환, 동맥경화, 골절 부상 등과 같이 기질 금속단백질 분해 효소(MMP)의 활성과 관련된 병증에 사용되는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제를 제공한다.
상기 프로시아니딘은 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 활성 억제제로 사용되는 것이 바람직하다. 상기 기질 금속단백질 분해효소(MMP)는 콜라제노리틱 (Collagenolytic) 효소, MMP-1, MMP-8 및 MMP-2와 MMP-9의 타입Ⅳ 콜라제나제로 이루어진 군으로부터 선택된다.
상기 프로시아니딘의 제형은 정제, 캡슐, 분말, 연고, 용액, 젤, 페이스트 (Paste), 첩포제, 과립상 등이 바람직하다. 상기 제형에 포함되는 프로시아니딘 함량은 0.0001 내지 5 중량%인 것이 바람직하다.
상기 프로시아니딘은 유백피, 포도씨, 대황, 하수오, 녹나무, 계피, 측백, 동백, 수수, 메밀, 떡갈나무로 이루어진 군으로부터 선택되는 식물체를 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세롤, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트 및 아세톤으로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택되는 혼합 극성 용매로 추출된 1차 추출물인 것이 바람직하다. 상기 프로시아니딘은 식물체로 부터 극성용매로 추출한 1차 추출물을 n-헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 n-부탄올로 용매 분획을 하였을 때 얻어지는 n-부탄올 분획물인 것이 바람직하다. 상기 프로시아니딘은 n-부탄올 분획물을 이용하여 물-메탄올을 단독 혹은 혼합하여 용출 용매로 사용하는 Sephadex LH-20 칼럼 크로마토그래피를 실시하였을 때 얻어지는 100% 메탄올 분획물인 것이 바람직하다.
상기 프로시아니딘은 카테킨을 기본 골격으로하며, 평균 중합도가 약 4.3인 것이 바람직하다. 상기 프로시아니딘은 카테킨의 사중체(Tetramer)와 오중체 (Pentamer)를 99% 이상 함유하고있는 것이 바람직하다.
이하 본 발명의 상세한 설명은 다음과 같다.
본 발명에 사용된 프로시아니딘(Procyanidin)은 유백피, 포도씨, 대황, 하수오, 녹나무, 계피, 측백, 동백, 수수, 메밀, 떡갈나무 등 프로시아니딘을 많이 함유하고 있다고 알려진 식물에서 추출, 정제하였다. 그러나 프로시아니딘은 일반적으로 식물에 많이 함유되어 있다고 알려져 있으므로 위에서 언급한 식물뿐 아니라 그 이외의 식물에서도 추출, 정제하여 사용할 수 있다.
추출 및 정제는 다음과 같이 하였다.(도 2)
식물체를 10 내지 200 메쉬 크기로 분쇄하고, 분쇄된 식물체 분말에 추출용매를 첨가하여 상온에서 72시간 냉침한 후 여과하고, 여과한 추출원액을 농축하여 1차 추출물을 얻었다. 이때 사용 가능한 추출 용매로는 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세롤, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트 및 아세톤으로 구성된 군 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 혼합용매가 있다. 여기서 얻어진 1차 추출물을 물에 현탁시킨 후 n-헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 n-부탄올을 이용하여 순차적으로 용매 분획을 하여 각각의 분획물을 얻었다. 용매 분획 후 남은 여액은 물 분획물로 하였다. 용매 분획을 통하여 얻어진 5종의 용매 분획물을 이용하여 기질 금속단백질분해효소(MMP)의 한 종류인 콜라제나제의 활성억제 실험을 실시하였다. 그 결과, n-헥산 분획물과 디클로로메탄 분획물에서는 전혀 효소 활성 억제 효능이 나타나지 않았으나, 에틸아세테이트 분획물과 n-부탄올 분획물, 물 분획물에서는 활성 억제 효능이 나타났다. 이때, 콜라제나제의 활성 억제 효능은 단순한 금속이온에 의해서도 나타나기도 하므로 이러한 금속이온이 많이 함유되어 있을 수 있는 물 분획에 대해서는 실험을 보류하였다. 효소 활성 억제효능이 나타난 에틸아세테이트 분획물과 n-부탄올 분획물의 유효성분을 밝히기 위하여 먼저 에틸아세테이트 분획물을 가지고 실험을 계속하였다.
얻어진 에틸아세테이트 분획물을 시료로하여 실리카 젤 칼럼 크로마토그래피 (Silica Gel Column Chromatography)를 실시하였다. 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤 및 메탄올을 순차적으로 용출 용매로 사용하여 각각 실리카 클로로포름 분획물, 실리카 에틸아세테이트 분획물, 실리카 아세톤 분획물 및 실리카 메탄올 분획물을 얻었다. 이 분획물들의 콜라제나제에 대한 활성 억제 효능 실험을 수행한 결과, 실리카 에틸아세테이트 분획물에서 높은 활성 억제 효능이 나타났다. 실리카 에틸아세테이트 분획물을 이용하여 분취용 박층 크로마토그래피 (Preparative Thin Layer Chromatography)를 실시하여 유효 성분을 단일 성분으로 분리, 정제하였다. 분리, 정제된 실리카 에틸아세테이트 분획물의 유효 성분을 액체 크로마토그래피-질량분석기(Liquid Chromatography-Mass Spectrometer)로 분석한 결과, 카테킨과 2종의 프로시아니딘 이중체, 1종의 프로시아니딘 삼중체로 나타났다. 각 성분들에 대하여 콜라제나제 활성억제 실험을 실시한 결과, 각 성분 모두 콜라제나제 활성 억제 효능을 나타내었으나, 기존에 약효제로 사용되어 오던 독시사이클린에 비하여 그다지 좋은 효능을 나타내지는 않았다.
한편, 1차 추출물의 용매 분획을 통하여 얻어진 n-부탄올 분획물을 이용하여 Sephadex LH-20 칼럼 크로마토그래피를 실시하였다. 이때 20% 메탄올, 50% 메탄올, 80% 메탄올 및 100% 메탄올을 용출 용매로 사용하여 각각 20% 메탄올 분획물, 50% 메탄올 분획물, 80% 메탄올 분획물 및 100% 메탄올 분획물을 얻었다. 여기에서 얻어진 20% 메탄올 분획물, 50% 메탄올 분획물, 80% 메탄올 분획물 및 100 % 메탄올 분획물에 대하여 콜라제나제 활성 억제 실험을 한 결과, 20% 메탄올 분획물과 50% 메탄올 분획물에서는 효능이 나타나지 않았으나, 80% 메탄올 분획물과 100% 메탄올 분획물에서 효능이 나타났다. 특히, 100% 메탄올 분획물에서는 그 효능이 탁월하여 기존의 약효제인 독시사이클린에 비해 높은 효소 억제 활성을 보였다. 여기에서 얻어진 100% 메탄올 분획물을 최종 프로시아니딘 분획물로써 본 발명에 사용하였으며, 이하에서는 프로시아니딘-4,5 분획물로 언급하기로 하겠다.
프로시아니딘-4,5 분획물의 조성은 젤 투과 크로마토그래피(Gel Permeation Chromatography)를 실시하여 확인하였다(도 3). 젤 투과 크로마토그래피의 표준물질은 폴리스티렌(Polystyrene)을 사용하였다. 그 결과 본 발명의 프로시아니딘-4,5 분획물은 평균 중합도(Average Degree of Polymerization)가 약 4.3으로 나타났으며, 사중체(Tetramer)와 오중체(Pentamer)가 전체 함량의 99.9%이상을 차지하였다. 또한 프로시아니딘-4,5 분획물의 기본 골격을 확인하기 위하여 플로로글루시놀 산가수분해(Phloroglucinol Acidolysis) 실험을 수행하였다. 플로로글루시놀 산가수분해란, 고분자와 플로로글루시놀을 산성 조건하에서 반응시켰을 경우 플로로글루시놀이 고분자 내의 단량체 간의 결합을 끊으면서 첨가 반응을 일으켜 그 반응 산물로 단량체-플로로글루시놀 화합물을 생성하는 반응이다. 플로로글루시놀과 프로시아니딘-4,5 분획물을 산성 조건하에서 반응시킨 후 생성된 반응산물을 고속 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography)를 이용하여 분리, 정제하였다. 분리, 정제된 반응 산물을 액체 크로마토그래피-질량분석기 (Liquid Chromatography - Mass Spectroscopy) 및 핵자기공명법 (Nuclear Magnetic Resonance)을 이용하여 분석을 한 결과 카테킨-4-플로로글루시놀 (Catechin-4-phloroglucinol)로 판명되었다. 따라서 본 발명에서 사용된 프로시아니딘-4,5 분획물의 기본 골격은 카테킨임을 알 수 있었다.
이상에서 본 발명에 사용된 프로시아니딘-4,5 분획물에 관해 다시 간략하게 언급하면 다음과 같다. 즉, 식물체에서 적절한 용매로 추출하여 농축한 후 용매 분획을 하여 5종의 용매 분획물을 얻었다. 용매 분획물 중 n-부탄올 분획물을 정제하여 프로시아니딘-4,5 분획물을 얻었다. 프로시아니딘-4,5 분획물은 카테킨 (Catechin)을 기본 골격으로 하고 있으며, 평균 중합도가 약 4.3으로, 사중체(Tetramer)와 오중체(Pentamer)가 전체 함량의 99%이상을 차지하고 있다.
본 발명에서 사용된 방법 이외에 프로시아니딘-4,5 분획물을 얻을 수 있는 방법으로는 탄네이즈(Tannase) 등의 효소를 이용하는 방법 등이 있을 수 있다. 즉, 프로시아니딘 다중체를 단량체나 올리고머로 가수 분해하는 효소인 탄네이즈를 프로시아니딘과 반응시켰을 때 생성되는 반응 산물을 정제하여 프로시아니딘-4,5 분획물을 얻을 수 있다. 이때 효소 반응에 사용되는 프로시아니딘으로는 식물에서 얻은 1차 추출물 이나 그 가공물, 혹은 프로시아니딘 관련 제품이 사용될 수 있다.
본 발명에서의 프로시아니딘-4,5 분획물은 콜라제나제와 같은 MMP의 활성 억제를 위하여 어떠한 형태로도 제조될 수가 있다. 그러한 형태로는 정제, 캡슐, 분말, 연고, 용액, 젤, 페이스트(Paste), 첩포제, 과립상 등이 가능하나 본 발명에서는 연고제로 실험하였다. 이때 사용되는 프로시아니딘-4,5 분획물의 함량은 0.0001 내지 5 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 1 중량%를 사용하는 것이 적당하다. 프로시아니딘-4,5 분획물의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우에서는 효소 활성 억제에 대한 효능, 효과를 기대 할 수 없다. 또한, 5 중량%를 초과할 경우에는 프로시아니딘-4,5 분획물이 갈색으로 변하는 정도가 너무 심하여 사용하기가 쉽지 않다.
이하의 실시예 및 비교예를 통하여 본 발명을 구체적으로 설명한다.
단, 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이지 본 발명을 한정하는 것은 아니다.
[실험예]
실험예 1
적색 콜라젠 기질인 아조콜을 이용한 기질 금속단백질 분해효소 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
포유동물의 콜라제노리틱(Collagenolytic)효소, MMP-1(섬유아세포 콜라제나제), MMP-8(다형핵형 백혈구 콜라제나제)에 대한 억제효과를 아래와 같은 방법으로 측정하였다.
16개의 1.5 ml 에펜도르프(Eppendorf) 튜브에 2%의 적색 콜라젠 기질인 아조콜(Azocoll)용액 100 ㎕를 각각 첨가한 후 한 개의 에펜도르프 튜브는 블랭크 (Blank)로 사용하고, 효소의 표준 활성도 곡선을 작성하기 위하여 3개의 튜브에는 시그마로 부터 구입한 콜라제노리틱(Collagenolytic) 효소 표준 용액을 각각 10, 100, 200 ppm 되게 첨가하였다. 나머지 16개의 튜브 각각에는 콜라제노리틱 효소 표준 용액 100 ㎕와 프로시아니딘-4,5 분획물, 테트라사이클린, 미노사이클린 및 독시사이클린을 0.0001, 0.001, 0.005, 0.01%의 4가지 농도가 되도록 하여 각각 10 ㎕ 처리하였다. 완충용액(0.05M Tris-HCl, 1nM CaCl2,pH 7.8)을 총 반응액이 500 ㎕되도록 첨가하여 37℃ 항온기에서 18시간 동안 반응시킨 후 에펜도르프 튜브를 10,000 g에서 5분 동안 원심 분리시켜 분해되지 않은 콜라젠은 침전시켰다. 분해된 콜라젠을 함유하는 상등액을 취하여 540 nm에서 흡광도를 측정하여 표준활성도 곡선을 작성하고 표준곡선으로부터 효소의 활성 농도를 환산하여 실험군과 대조군의 효소활성도를 비교평가 하였다. MMP-1과 MMP-8에 대한 활성 억제 효과 실험도 위와 동일한 방법으로 하였으며, 각 효소 표준 용액은 칼바이오캠으로부터 구입하였다.
하기 수학식 1에 따라서 계산하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
[수학식 1]
[표 1-1] 포유동물의 콜라제노리틱(Collagenolytic)효소 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
실험군(단위: %) 0.0001% 0.001% 0.005% 0.01%
테트라사이클린 100 100 100 70
미노사이클린 100 100 80 60
독시사이클린 100 100 50 40
프로시아니딘-4,5 분획물 80 50 20 0
[표 1-2] MMP-1(섬유아세포 콜라제나제) 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
실험군(단위: %) 0.0001% 0.001% 0.005% 0.01%
테트라사이클린 100 100 100 80
미노사이클린 100 100 80 50
독시사이클린 100 100 60 30
프로시아니딘-4,5 분획물 80 50 20 0
[표 1-3] MMP-8(다형핵성 백혈구 콜라제나제) 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
실험군(단위: %) 0.0001% 0.001% 0.005% 0.01%
테트라사이클린 100 100 90 70
미노사이클린 100 100 80 50
독시사이클린 100 100 50 20
프로시아니딘-4,5 80 50 20 0
상기 표 1-1 내지 1-3에서 나타낸 바와 같이 프로시아니딘-4,5 분획물은 콜라제노리틱 효소, MMP-1 및 MMP-8의 효소 활성에 대한 억제 효과가 테트라사이클린계보다 탁월하였으며, 3가지 효소 모두에 대하여 0.01% 이상의 농도에서 100% 억제효과가 있었다는 것을 알 수 있다. 테트라사이클린계 중에서는 독시사이클린의 효능이 가장 우수하였고 그 다음으로는 미노사이클린이었으며, 테트라사이클린의 효능은 가장 낮았음을 알 수 있다.
실험예 2
콜라제노 키트(CLN-100, 일본)를 이용한 기질 금속단백질 분해효소 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
이 시험방법은 형광물질인 플루오르스세인이소시오시아네이트 (Fluorosceinisothiocyanate=FITC)와 컨쥬게이트된(conjugated) 콜라젠 I형(Collagen type-I)에 콜라제나제를 처리하면 분해된 콜라젠만이 35℃에서 변성되어 에탄올에 의하여 추출된다는 사실에 기반을 둔 것으로, 반응액을 원심분리한 후 상등액을 520nm(EM)/495(EX)에서 형광강도(FI)를 분광형광도계로 측정하였다.
20개의 1.5 ml 에펜도르프(Eppendorf) 튜브에 0.05%의 FITC-콜라젠 200 ㎕를 각각 첨가하였다. 이 중 한개의 에펜도르프 튜브는 블랭크(Blank)로 사용하고, 효소의 표준 활성도 곡선을 작성하기 위하여 3개의 튜브에는 칼바이오캠으로부터 구입한 MMP-1 표준 효소 용액을 각각 10, 100, 200 ppm이 되도록 첨가하였다. 나머지 16개의 튜브 각각에는 효소 표준 용액 100 ㎕와 프로시아니딘-4,5 분획물, 테트라사이클린, 미노사이클린 및 독시사이클린을 0.001, 0.01, 0.03, 0.05%의 4가지 농도가 되도록 하여 각각 10 ㎕ 처리하였다. 완충용액(0.05M Tris-HCl, 1nM CaCl2, pH 7.8)을 총반응용액이 500 ㎕ 되도록 첨가한 후 37℃ 항온기에서 18시간 동안 반응시켰다. 반응정지액으로 50% 에탄올에 녹인 80 mM o-페난트롤린 (Phenanthroline) 10 ㎕를 첨가하고 37℃ 항온기 속에서 1시간 동안 유지한 후 냉각시켰다. 냉각된 에펜도르프 튜브에 70% 에탄올 0.5 ml를 첨가한 후 3000rpm에서 10분 동안 원심 분리시켰으며, 원심 분리후 각 튜브로부터 500 ㎕의 상등액을 취하여 520 nm(EM)/495(EX)에서 형광강도(FI)를 분광형광도계로 측정하여 먼저 효소 활성도에 대한 표준 곡선을 작성하였다. 작성된 표준 곡선으로부터 효소의 활성 농도를 환산하여 실험군과 대조군의 효소 활성도를 비교하였다. MMP-8에 대한 활성 억제 실험도 위와 동일한 방법으로 하였고 하기 수학식 1에 따라서 계산하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
[수학식 1]
[표 2-1] MMP-1 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
실험군(단위: %) 0.001% 0.01% 0.03% 0.05%
테트라사이클린 100 80 60 40
미노사이클린 100 65 50 30
독시사이클린 100 45 20 10
프로시아니딘-4,5 분획물 60 15 0 0
[표 2-2] MMP-8 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
실험군(단위: %) 0.001% 0.01% 0.03% 0.05%
테트라사이클린 100 75 50 35
미노사이클린 100 55 35 20
독시사이클린 100 40 20 10
프로시아니딘-4,5 분획물 50 10 1 0
상기 표 2-1 내지 2-2에서 나타낸 바와 같이 프로시아니딘-4,5 분획물은 테트라사이클린계보다 기질 금속단백질분해효소 활성에 대한 억제효과가 탁월하였으며, 0.03%의 농도에서 두 효소(MMP-1, MMP-8)에 대하여 거의 100% 활성 억제 효과가 있었으며, 0.001%의 농도에서도 MMP-1, MMP-8에 대하여 각각 40%, 50%의 활성 억제 효과가 있었다는 것을 알 수 있다. 테트라사이클린계 중에서는 앞에서와 마찬가지로 독시사이클린의 효능이 가장 우수하여 0.05%의 농도에서 MMP-1, MMP-8에 대하여 모두 90%의 활성 억제 효과가 있었으며, 그 외의 테트라사이클린과 미노사이클린의 효소 활성 억제 효능은 이보다 낮았다는 것을 알 수 있다.
실험예 3
타입Ⅳ 콜라제나제(MMP-2, MMP-9) 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
20개의 1.5 ml 에펜도르프(Eppendorf) 튜브를 준비하여 한 개의 에펜도르프 튜브는 블랭크(Blank)로 사용하고, 효소의 표준 활성도 곡선을 작성하기 위하여 3개의 튜브에는 칼바이오캠으로부터 구입한 MMP-2 효소 표준 용액을 10, 100, 200ppm 되게 첨가하였다. 나머지 16개의 튜브 각각에는 효소 표준 용액 100 ㎕와 프로시아니딘-4,5 분획물, 테트라사이클린, 미노사이클린 및 독시사이클린을 0.0001, 0.001, 0.005, 0.01%의 4가지 농도가 되도록 하여 각각 10 ㎕ 처리한 후 소디움도데실설페이트(Sodiumdodecylsulfate, SDS) 완충용액(4% SDS, 125 mM Tris-HCl, pH 6.8, 10% Glycerol)을 총반응액이 500 ㎕ 되도록 첨가하여 혼합한 뒤 전기영동을 하였다. 전기영동에 사용되는 아크릴아마이드젤에는 타입Ⅳ 콜라제나제의 기질인 젤라틴을 1 mg/ml 첨가하여 젤을 제조하였다. 전기영동 후 젤을 2.5% 트리톡스(Tritox) X - 100 이 포함된 50 mM Tris-HCl (pH 7.5) 완충용액으로 30분간 2회 세척하여 SDS를 제거하였다. SDS를 제거한 젤을 반응 완충용액(50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 10 mM CaCl2, 0.01% NaN3)에 넣은 후 37℃에서 5시간 동안 반응시킨 다음, 젤을 0.1% 쿠마시 브릴리언트 블루(Coomasie brilliant blue)로 염색시킨 후 탈색하여 젤라틴 분해능을 덴시토메터(Densitometer)로 측정하여 표준 활성도 곡선을 작성하고 표준 곡선으로부터 효소의 활성 농도를 환산하여 실험군과 대조군의 효소 활성도를 비교하였다. 또 다른 타입Ⅳ 콜라제나제인 MMP-9에 대한 활성 억제 실험도 위와 동일한 방법으로 수행하였고 하기 수학식 1에 따라서 계산하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
[수학식 1]
[표 3-1] MMP-2 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
실험군(단위: %) 0.0001% 0.001% 0.005% 0.01%
테트라사이클린 100 100 80 60
미노사이클린 100 100 80 55
독시사이클린 100 90 55 20
프로시아니딘-4,5 분획물 80 50 20 0
[표 3-2] MMP-9 활성에 대한 프로시아니딘-4,5 분획물의 억제 효과 평가
실험군(단위: %) 0.0001% 0.001% 0.005% 0.01%
테트라사이클린 100 100 85 60
미노사이클린 100 100 80 50
독시사이클린 100 100 50 15
프로시아니딘-4,5 분획물 80 50 20 0
상기 표 3-1 내지 3-2에서 나타낸 바와 같이 프로시아니딘-4,5 분획물은 테트라사이클린계보다 MMP-2, MMP-9과 같은 타입Ⅳ 콜라제나제 효소 활성에 대한 억제효과가 뛰어났으며, 0.01%의 농도에서 MMP-2, MMP-9의 활성에 대하여 모두 100% 억제 효과를 나타냈으며, 0.005% 농도에서도 각 효소에 대하여 모두 80%의 활성 억제 효과를 나타냈다는 것을 알 수 있다. 테트라사이클린계 중에서는 독시사이클린의 효능이 가장 우수하여, 0.01%의 농도에서 MMP-2, MMP-9의 활성에 대하여 각각 80%, 85%의 억제효과를 나타냈으며, 0.005%의 농도에서는 각각 45%, 50%의 억제 효과를 나타냈으며, 0.001% 이하의 농도에서는 억제 효과가 나타나지 않았다는 것을 알 수 있다. 그 외의 미노사이클린과 테트라사이클린의 효능은 낮았다는 것을 알 수 있다.
실험예 4
포유동물의 콜라제노리틱(Collagenolytic) 효소 활성에 대한 본 발명 연고(실시예 1 내지 8)의 효과 평가
본 발명의 실시예에 사용된 연고제 조성물은 다음과 같은 방법으로 제조할 수 있다. 프로시아니딘-4,5 분획물, 플루로닉, 저급알코올, 글리세린, 젤라틴, 펙틴, 카르복시메틸셀룰로스, 폴록사머(Poloxamer 407), 모노글리세라이드 (Myverol 18-99), 프로필렌글리콜 혹은 폴리에틸렌글리콜, 멘톨 및 방부제로 구성된 혼합물을 완충용액에 용해 및 젤화시켜 제조하였다. 비교예에서는 프로시아니딘-4,5 분획물 대신에 독시사이클린을 사용 하였으며, 그 이외에는 위와 동일한 방법을 사용하였다.
다시 상세히 설명하면 본 발명에 사용된 저급알코올로는 에탄올, 이소프로필알코올을 각각 혹은 혼용하여 0 내지 20 중량% 사용하고, 연고 조성물의 상태 안정성을 위하여 사용되는 플루로닉유도체로는 플루로닉 F-127 혹은 플루로닉 F-108을 5 내지 30 중량% 사용할 수 있다. 연고 조성물의 상태 유지 및 건조 방지를 위하여 습윤제를 사용하는데, 이러한 습윤제로는 글리세린, 소르비톨액, 폴리에틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜, 폴록사머(Poloxamer 407), 모노글리세라이드(Myverol 18-99) 등을 단독 또는 2종 이상 혼합하여 5 내지 30 중량% 사용한다. 특히, 폴리에틸렌글리콜로는 폴리에틸렌글리콜 200, 폴리에틸렌글리콜 400, 폴리에틸렌글리콜 600, 폴리에틸렌글리콜 1000을 사용할 수 있다. 그리고 피부 조직내로의 유효 성분 약효의 전달 시스템으로 젤라틴 및 펙틴을 단독 또는 2종 이상 혼합하여 1 내지 20 중량% 사용하고, 연고조성물의 pH를 조정하는 완충제로는 정인산(ο-Phosphate) 의 알카리금속염, 특히 제1인산나트륨, 제2인산나트륨, 제3인산나트륨 그리고 구연산 및 구연산나트륨, 인산, 염산, 수산화나트륨 또는 피로인산나트륨(Sodium Pyrophosphate) 및 피로인산염 등이 있는데 본 발명에 의한 연고 조성물 에서는 제1인산나트륨, 제2인산나트륨, 제3인산나트륨 중 2종을 적당히 혼합하여 pH를 5 내지 8.0으로 조정하여 사용하였다.
그 외에 프로시아니딘-4,5 분획물의 변색을 방지하기 위하여 소디움메타바이설파이트(Sodium ｍ-bisulfite)를 사용하는데, 연고 조성물 중에 0.05 내지 1 중량% 사용한다. 기타 향료로는 주로 천연 향료인 페파민트와 스피아민트 오일이 많이 사용되며 연고 조성물 중에 0.1 내지 1 중량% 사용한다. 또, 연고 조성물의 제조 및 사용 중에 발생할 우려가 있는 미생물의 오염을 방지하기 위하여 일반적으로 식품 및 의약품에 사용이 허가되어 있는 파라옥시안식향산메칠 , 파라옥시안식향산프로필, 안식향산, 안식향산나트륨, 살리실산 등을 단독 또는 혼합하여 0.01 내지 0.5 중량% 사용한다.
본 발명의 연고 조성물은 이하 실시예 및 비교예에 의거하여 더욱 상세히 하면 다음과 같다.
[표 4-1] (단위: 중량%)
구 분 성 분 실시예 1 실시예 2 비교예 1 비교예 2
습윤제 글리세린 5 5
폴리에틸렌글리콜 5 5
카르복시메틸셀룰로스
폴록사머 407 0.1 0.1
노글리세라이드(Myverol 18-99) 10 15 10 15
약효전달시스템 젤라틴 5 5 5 5
펙틴 5 5 5 5
계면활성제 플루로닉 F-127 20 20
플루로닉 F-108 20 20
저급알코올 에탄올 5 5
이소프로필알코올 5 5
방부제 파라옥시안식향산메칠 0.1 0.1 0.1 0.1
파라옥시안식향산프로필 0.05 0.05 0.05 0.05
변색방지제 소디움메타바이설파이트 0.1 0.2 0.1 0.2
완충액 제1인산나트륨 0.1 0.2 0.1 0.2
제3인산나트륨 0.05 0.05 0.05 0.05
약효성분 프로시아니딘-4,5 분획물 0.0001 0.001
독시사이클린 0.0001 0.001
향료 0.75 0.75 0.75 0.75
식용색소 0.0002 0.0002
정제수 나머지 나머지 나머지 나머지
[표 4-2] (단위: 중량%)
구분 성분 실시예 3 실시예 4 비교예 3 비교예 4
습윤제 글리세린 10 10
폴리에틸렌글리콜 5 5
카르복시메틸셀룰로오스 0.5 0.1 0.5 0.1
폴록사머 407
모노글리세라이드(Myverol 18-99) 10 20 10 20
약효전달 시스템 젤라틴 3 2 3 2
펙틴 3 2 3 2
계면활성제 플루로닉 F-127 15 15
플루로닉 F-108 15 15
저급알코올 에탄올 5 5
이소프로필알코올 5 5
방부제 파라옥시안식향산메칠 0.1 0.1 0.1 0.1
파라옥시안식향산프로필 0.05 0.05 0.05 0.05
변색방지제 소디움메타바이설파이트 0.1 0.2 0.1 0.2
완충액 제1인산나트륨 0.1 0.2 0.1 0.2
제3인산나트륨 0.05 0.05 0.05 0.05
약효성분 프로시아니딘-4,5 분획물 0.005 0.01
독시사이클린 0.005 0.01
향료 0.75 0.75 0.75 0.75
식용색소 0.0002 0.0002
정제수 나머지 나머지 나머지 나머지
[표 4-3] (단위: 중량%)
구분 성분 실시예 5 실시예 6 비교예 5 비교예 6
습윤제 글리세린 15 15
폴리에틸렌글리콜 5 5
카르복시메틸셀룰로스 0.5 1 0.5 1
폴록사머 407
모노글리세라이드(Myverol 18-99) 5 5 5 5
약효전달 시스템 젤라틴 1 10 1 10
펙틴 1 5 1 5
계면활성제 플루로닉 F-127 10 10
플루로닉 F-108 10 10
저급알코올 에탄올 5 5
이소프로필알코올 5 5
방부제 파라옥시안식향산메칠 0.1 0.1 0.1 0.1
파라옥시안식향산프로필 0.05 0.05 0.05 0.05
변색방지제 소디움메타바이설파이트 0.1 0.2 0.1 0.2
완충액 제1인산나트륨 0.1 0.2 0.1 0.2
제3인산나트륨 0.05 0.05 0.05 0.05
약효성분 프로시아니딘-4,5 분획물 0.05 0.1
독시사이클린 0.05 0.1
향료 0.75 0.75 0.75 0.75
식용색소 0.0002 0.0002
정제수 나머지 나머지 나머지 나머지
[표 4-4] (단위: 중량%)
구분 성분 실시예 7 실시예 8 비교예 7 비교예 8
습윤제 글리세린 20 20
폴리에틸렌글리콜 5 5
카르복시메틸셀룰로오스
폴록사머 407
모노글리세라이드(Myverol 18-99) 10 20 10 20
약효전달시스템 젤라틴 5 20 5 20
펙틴 5 5 5 5
계면활성제 플루로닉 F-127 5 5
플루로닉 F-108 5 5
저급알코올 에탄올 10 10
이소프로필알코올 10 10
방부제 파라옥시안식향산메칠 0.1 0.1 0.1 0.1
파라옥시안식향산프로필 0.05 0.05 0.05 0.05
변색방지제 소디움메타바이설파이트 0.1 0.2 0.1 0.2
완충액 제1인산나트륨 0.1 0.2 0.1 0.2
제3인산나트륨 0.05 0.05 0.05 0.05
약효성분 프로시아니딘-4,5 분획물 1 5
독시사이클린 1 5
향료 0.75 0.75 0.75 0.75
식용색소 0.0002 0.0002
정제수 나머지 나머지 나머지 나머지
상기 표 4-1 내지 4-4에서 나타낸 바와 같이 본 연고를 가지고 포유동물의 콜라제노리틱(Collagenolytic) 효소에 대한 억제효과를 실시한 실험 과정 및 결과는 다음과 같다.
20 개의 1.5 ml 에펜도르프(Eppendorf) 튜브에 적색 콜라젠 기질인 2% 아조콜(Azocoll) 용액 100 ㎕를 각각 첨가하여 한개의 에펜도르프 튜브는 블랭크 (Blank)로 사용하고, 효소의 표준 활성도 곡선을 작성하기 위하여 3개의 튜브에는 시그마로부터 구입한 콜라제노리틱(Collagenolytic) 효소 표준 용액을 각각 10, 100, 200 ppm 되도록 첨가하였다. 실험군 연고(실시예 1 내지 8)와 비교군 연고(비교예 1 내지 8) 각각을 증류수와 1:2의 비율로 혼합 및 균질화시킨 후 5,000 g 에서 10분 동안 원심 분리시켜 얻은 상등액 10 ㎕와 효소 표준 용액 100 ㎕를 16개의 나머지 튜브 각각에 처리하였다. 완충용액(0.05M Tris-HCl, 1nM CaCl2, pH 7.8)을 총반응액이 500 ㎕ 되도록 첨가하여 37℃ 항온기에서 18 시간 동안 반응시킨 후, 에펜도르프 튜브를 10,000 g 에서 5분 동안 원심 분리시켜 분해되지 않은 콜라젠은 침전시켰다. 분해된 콜라젠을 함유하는 상등액을 취하여 540 nm에서 흡광도를 측정하여 표준 활성도 곡선을 작성하고, 그 표준 곡선으로부터 효소의 활성 농도를 환산하여 실험군과 대조군의 효소 활성도를 비교 평가하였다. 하기 수학식 1에 따라서 계산하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
[수학식 1]
[표 5]
연고조성물 1 2 3 4 5 6 7 8
비교예(단위: %) 100 100 70 40 10 0 0 0
실시예(단위: %) 90 56 30 5 0 0 0 0
상기 표 5에서 나타낸 바와 같이 0.05% 이하의 농도에서의 콜라제노리틱 효소의 활성에 대한 억제 효과는 프로시아니딘-4,5 분획물을 함유하고 있는 실시예 1, 2, 3, 4, 5가 독시사이클린을 함유하고 있는 비교예 1, 2, 3, 4, 5 보다 탁월하였으며, 특히 0.001% 이하의 농도에서의 경우, 비교예에서는 효소 활성 억제 효과가 없었던 반면에, 실시예 1, 2에서는 여전히 각각 10%, 44%의 콜라제노리틱 효소의 활성에 대한 억제효과가 있었다는 것을 알 수 있다.
실험예 5
본 발명 연고(실시예 1 내지 8)의 효능, 효과 평가를 위한 동물 실험
본 발명 연고를 가지고 한 동물 임상 실험 방법은 다음과 같다.
에테르로 가볍게 마취시킨 체중 200 내지 250 g의 위스타 수컷 랫트 중 오른쪽 뒷발바닥에 컴플리트 프로인트 어져번트(Complete Freund's Adjuvant)를 주사한 군을 실험 대상군으로 설정하였으며, 0.1 ml의 유동파라핀만을 주사한 군을 대조군으로 정하였다. 주사 5일 후부터 19일 후까지 실험 대상군 쥐의 오른쪽 뒷발바닥에 실험군 연고(실시예 1 내지 8)와 비교군 연고(비교예 1 내지 8)를 이틀 간격으로 같은 시간에 바른 후 초기, 10일, 20일째에 발바닥부피를 측정하고 하기 수학식 2에 따라서 계산하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
[수학식 2]
[표 5-1] (단위: %)
구분 초기 10일 20일
실시예 비교예 실시예 비교예 실시예 비교예
대조군 100 140 241
1 100 100 138 139 199 235
2 100 100 126 135 153 228
3 100 100 123 131 144 201
4 100 100 117 130 141 166
5 100 100 115 127 133 150
6 100 100 118 120 127 132
7 100 100 114 118 123 122
8 100 100 113 112 125 130
상기 표 5-1에서 나타낸 바와 같이 프로시아니딘-4,5 분획물을 함유한 본 발명 연고(실시예 1 내지 8)의 족부종발생에 대한 억제 효과는 10일에서 20일 경과시까지 독시사이클린을 함유한 비교예(1 내지 8)보다 그 효능이 뛰어나다는 것을 알 수 있다. 특히, 20일 경과시의 경우 0.005% 이하의 독시사이클린을 함유한 비교예 1 내지 3은 초기 족부종 보다 2배의 증가율을 보인 반면, 프로시아니딘-4,5 분획물을 함유한 실시예 1 내지 3은 각각 199%, 153%, 144%의 증가율 만을 나타낸다는 것을 알 수 있다.
본 발명의 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제는 기질 금속단백질 분해효소 (MMP) 활성을 억제하는데 있어서 기존의 기질 금속단백질 분해효소(MMP) 관련 효소(예: 콜라제나제) 억제제보다 효능이 탁월하여 상처, 암전이, 치주질환, 류마토이드 관절염, 염증, 부갑상선항진증, 당뇨병, 각막궤양, 골다공증, 위궤양, 외상, 주름, 여드름, 에이즈, 화상, 동맥경화, 골절과 같은 질환을 예방 및 치료하는데 효과가 있다.

Claims (10)

  1. 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 활성과 관련된 병증의 예방 및 치료에 사용되는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 병증은 상처, 암전이, 류마토이드 관절염, 염증, 부갑상선항진증, 당뇨병, 각막궤양, 골다공증, 위궤양, 외상, 주름, 여드름, 에이즈, 화상, 치주질환, 동맥경화, 및 골절부상으로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 기질 금속단백질 분해효소(MMP)는 콜라제노리틱 (Collagenolytic) 효소, MMP-1, MMP-8 및 MMP-2와 MMP-9의 타입Ⅳ 콜라제나제로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 프로시아니딘의 제형이 정제, 캡슐, 분말, 연고, 용액, 젤, 페이스트(Paste), 첩포제, 및 과립상으로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  5. 제 4항에 있어서, 상기 제형에 포함되는 프로시아니딘 함량은 0.0001 내지 5 중량% 인 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 프로시아니딘은 유백피, 포도씨, 대황, 하수오, 녹나무, 계피, 측백, 동백, 수수, 메밀, 및 떡갈나무로 이루어진 군으로부터 선택되는 식물체를 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세롤, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트 및 아세톤으로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택되는 혼합 극성 용매로 추출된 1차 추출물인 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  7. 제 1항에 있어서, 상기 프로시아니딘은 제 6항의 1차 추출물을 n-헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 n-부탄올로 용매 분획을 하였을 때 얻어지는 n-부탄올 분획물인 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  8. 제 1항에 있어서, 상기 프로시아니딘은 n-부탄올 분획물을 이용하여 물-메탄올을 단독 혹은 혼합하여 용출 용매로 사용하는 Sephadex LH-20 칼럼 크로마토그래피를 실시하였을 때 얻어지는 100% 메탄올 분획물인 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  9. 제 1항에 있어서, 상기 프로시아니딘은 카테킨을 기본 골격으로하며, 평균 중합도가 약 4.3인 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
  10. 제 1항에 있어서, 상기 프로시아니딘은 카테킨의 사중체(Tetramer)와 오중체(Pentamer)를 99% 이상 함유하고있는 프로시아니딘을 유효성분으로 하는 약효제.
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CN00810429A CN1364082A (zh) 1999-07-16 2000-07-14 抑制细胞基质金属蛋白酶的矢车菊苷配质低聚体和以此为有效成分的药物
MXPA02000598A MXPA02000598A (es) 1999-07-16 2000-07-14 Oligomeros de procianidina los cuales inhiben las metaloproteinasas de matriz y un medicamento que contiene la composicion efectiva de los mismos.
BR0012431-1A BR0012431A (pt) 1999-07-16 2000-07-14 OligÈmeros de procianidina e composições farmacêuticas respectivas
CA002379489A CA2379489A1 (en) 1999-07-16 2000-07-14 Procyanidin oligomers inhibiting matrix metalloproteinases and medicine having effective composition of the same
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AU57130/00A AU5713000A (en) 1999-07-16 2000-07-14 Procyanidin oligomers for inhibiting matrix metalloproteinases and medicine having effective composition of same
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20030032359A (ko) * 2001-10-17 2003-04-26 주식회사 엘지생활건강 유백피 추출물을 함유하는 치주질환 치료용 경구 약제조성물
KR100441131B1 (ko) * 2001-08-22 2004-07-21 애경산업(주) 천연 향유를 함유하는 여드름 화장료 조성물
KR100441565B1 (ko) * 2001-09-27 2004-07-23 이형주 항염증 활성을 가지는 메밀 및/또는 메밀껍질 추출물, 및 이를 유효성분으로 포함하는 항염증 식품 조성물
US6858235B2 (en) 2002-08-09 2005-02-22 Eromlife Co. Ltd. Antioxidant composition and method of preparation thereof
KR100687522B1 (ko) * 2005-05-28 2007-02-27 한국화학연구원 2,2-디메틸-3-에스테르-4-알콕시-6-알킬 아미노벤조피란 유도체를 유효성분으로 함유하는 pge2 활성에 관련된 염증질환 치료제
KR101438517B1 (ko) * 2012-06-13 2014-09-17 경희대학교 산학협력단 플라반-3-올 다합체, 그 유도체 또는 이들의 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 여드름 예방, 개선 및 치료용 조성물

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1256335A1 (de) * 2001-05-10 2002-11-13 Cognis France S.A. Verwendung von oligomeren Procyanolidinen
KR100439627B1 (ko) * 2001-06-18 2004-07-12 주식회사 엘지생활건강 피부주름 예방 및 치료용 조성물
US6906036B2 (en) * 2001-08-16 2005-06-14 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Anti-aging and wound healing compounds
KR20070097581A (ko) * 2004-03-26 2007-10-04 아사히비루 가부시키가이샤 치근막 보호제
FR2873026B1 (fr) * 2004-07-13 2009-10-30 Oreal Procede de traitement cosmetique pour prevenir ou retarder les signes du vieillissement
EP1616551A1 (fr) * 2004-07-13 2006-01-18 L'oreal Procédé de traitement cosmétique pour prévenir ou retarder les signes du vieillissement cutané
KR101366187B1 (ko) * 2005-02-25 2014-02-21 고쿠리츠다이가쿠호진 나가사키다이가쿠 프로안토시아니딘 올리고머의 제조방법
US20060194746A1 (en) * 2005-02-28 2006-08-31 Peter Rohdewald Method and composition to inhibit infections with Helicobacter pylori by intake of procyanidins from type B and C
US20060293258A1 (en) * 2005-06-23 2006-12-28 Peter Rohdewald Method and composition to treat skin ulcers
JP4942953B2 (ja) * 2005-06-30 2012-05-30 サントリーホールディングス株式会社 プロシアニジンの分析方法
US8669232B2 (en) * 2008-03-05 2014-03-11 Council Of Scientific & Industrial Research Flavonol compounds, a bioactive extract/fraction from Ulmus wallichiana and its compounds for prevention for treatment of osteo-health related disorders
JP5602416B2 (ja) * 2009-11-13 2014-10-08 日油株式会社 ヒアルロニダーゼ活性阻害剤
BR112015002030B8 (pt) * 2012-08-07 2022-11-29 Indus Biotech Private Ltd Uso de uma composição que compreende procianidina do tipo a pentamérica, procianidina trimérica e procianidina tetramérica, opcionalmente, juntamente com excipiente farmaceuticamente aceitável
US20140179774A1 (en) * 2012-12-26 2014-06-26 Industrial Technology Research Institute Methods for inhibition of shc-1/p66 to combat aging-related diseases
KR101760691B1 (ko) * 2014-09-26 2017-07-24 연천군 췌장선암 예방용 건강기능성 식품
CN105998037A (zh) * 2016-06-16 2016-10-12 汕头大学 多西环素在制备治疗或预防衰老性疾病的药物中的用途
EP3501496A1 (en) 2017-12-22 2019-06-26 Cosmo Technologies Ltd. Liquid delivery composition
KR102074067B1 (ko) * 2018-05-02 2020-02-06 주식회사 마크로케어 살비아놀산 함유 캡슐 및 이의 용도

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1219732B (it) * 1988-06-28 1990-05-24 Tecnofarmaci Spa Frazioni oligomeriche procianidoliche,loro procedimento di preparazione e composizioni farmaceutiche che le contengono
FR2672800B1 (fr) * 1991-02-15 1995-03-10 Dolisos Lab Nouvelle utilisation en therapeutique de pycnogenols pour la preparation de medicaments a activite anti-inflammatoire.
WO1993024106A1 (fr) * 1992-05-27 1993-12-09 L'oreal Composition comprenant un oligomere proanthocyanidinique encapsule dans un liposome
US5646178A (en) * 1992-10-09 1997-07-08 Jlb, Inc. Cranberry extract and biologically active compounds derived therefrom
US5554645A (en) * 1994-10-03 1996-09-10 Mars, Incorporated Antineoplastic cocoa extracts and methods for making and using the same
JP3450080B2 (ja) * 1995-02-01 2003-09-22 有限会社野々川商事 プロシアニジンを配合した健康食品および医薬品
US6294190B1 (en) * 1995-12-26 2001-09-25 Suntory Limited Antiobestic agent containing procyanidin as the active ingredient
FR2770228B1 (fr) * 1997-10-27 1999-12-10 Greentech Sa Procede d'obtention d'oligomeres de proanthocyanidines par biofermentation et leur utilisation dans des compositions cosmetiques, dietetiques, pharmaceutiques, chimiques et alimentaires

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100441131B1 (ko) * 2001-08-22 2004-07-21 애경산업(주) 천연 향유를 함유하는 여드름 화장료 조성물
KR100441565B1 (ko) * 2001-09-27 2004-07-23 이형주 항염증 활성을 가지는 메밀 및/또는 메밀껍질 추출물, 및 이를 유효성분으로 포함하는 항염증 식품 조성물
KR20030032359A (ko) * 2001-10-17 2003-04-26 주식회사 엘지생활건강 유백피 추출물을 함유하는 치주질환 치료용 경구 약제조성물
US6858235B2 (en) 2002-08-09 2005-02-22 Eromlife Co. Ltd. Antioxidant composition and method of preparation thereof
KR100687522B1 (ko) * 2005-05-28 2007-02-27 한국화학연구원 2,2-디메틸-3-에스테르-4-알콕시-6-알킬 아미노벤조피란 유도체를 유효성분으로 함유하는 pge2 활성에 관련된 염증질환 치료제
KR101438517B1 (ko) * 2012-06-13 2014-09-17 경희대학교 산학협력단 플라반-3-올 다합체, 그 유도체 또는 이들의 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 여드름 예방, 개선 및 치료용 조성물

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