JPH0645549B2 - 抗歯周病剤 - Google Patents

抗歯周病剤

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JPH0645549B2
JPH0645549B2 JP2132461A JP13246190A JPH0645549B2 JP H0645549 B2 JPH0645549 B2 JP H0645549B2 JP 2132461 A JP2132461 A JP 2132461A JP 13246190 A JP13246190 A JP 13246190A JP H0645549 B2 JPH0645549 B2 JP H0645549B2
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periodontal disease
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Description

【発明の詳細な説明】 [産業上の利用分野] 本発明は、歯周病の予防および治療に有効な抗歯周病剤
に関し、更に詳しくは、歯周病病原菌として知られるバ
クテロイデス・ジンジバリス(Bacteroides gingivali
s)の生育を阻害し、更にこの歯の産生するコラゲナー
ゼを阻害する作用を有し、天然植物に由来する抗歯周病
剤に関する。
[従来の技術] バクテロイデス・ジンジバリスは、歯周病患者の歯周ポ
ケット底部から高頻度に分離されることが報告されてお
り、歯周病で最も多い成人性歯周炎の病原菌として有力
視されている。したがって、歯周炎の症状改善のために
は、病巣においてこの菌の生育を阻害することが重要で
あり、このためには、この菌に対して有効な抗菌性物質
の応用が効果的であると考えられる。
従来はこの目的のために、テトラサイクリン、ミノサイ
クリン等の抗生物質が用いられていたが、これは作用が
強力である反面、耐性菌の出現や副作用等からその使用
は制限されている。
本発明者らは、副作用等の心配のない古くから用いられ
ている天然物を試料として、歯周病の病原菌として有力
視されているバクテロイデス・ジンジバリスの生育阻害
試験において有効性を示す物質の探索を行った結果、特
定の植物の抽出物が顕著な効果を示すことを突き止め
た。更にこの植物の抽出物は、バクテロイデス・ジンジ
バリスの産生するコラゲナーゼ阻害活性をも有してお
り、非常に有効な抗歯周病剤であることを突き止めた。
[発明が解決しようとする課題] 本発明は、副作用等の心配のない古くから用いられてい
る天然物に由来し、歯周病病原菌として知られるバクテ
ロイデス・ジンジバリスの生育を阻害し、更にこの菌の
産生するコロナゲナーゼを阻害する作用を有し、歯周病
の予防および治療に有効な抗歯周病剤を提供することを
目的とする。
[課題を解決するための手段] 本発明によれば、歯周病病原菌バクテロイデス・ジンジ
バリス(Bacteroides gingivalis)の生育阻害作用を有
し、更にバクテロイデス・ジンジバリスの産生するコラ
ゲナーゼ阻害作用を有する抗歯周病剤であって、ケイヒ
(Cinnamomi cortex)抽出物を有効成分として含有する
ことを特徴とする抗歯周病剤が提供される。
ケイヒから抽出物を抽出する抽出溶剤として、水、アル
コール、または水とアルコールとの混合液を用いれば好
適である。
ケイヒから精油成分を除去したものを原料とし、抽出物
を抽出する抽出溶剤として、水、アルコール、または水
とアルコールとの混合液を用いれば好適である。
本発明品は、ケイヒの抽出物を有効成分とする抗歯周病
剤である。ケイヒの抽出方法については特に限定されな
いが、高極性物質が高濃度で抽出されるような方法であ
ることが望ましく、抽出溶剤としては、水、アルコー
ル、または水とアルコールとの混合液が最適である。
本発明の抗歯周病剤の原料となるケイヒは、精油を含有
するため強い香気を有する。本発明品を、例えば種々の
食品に応用するに当ってその香気が好ましくない場合、
原料とするケイヒを水蒸気蒸留またはヘキサン等の溶剤
により脱精油した後、水、アルコール、または水とアル
コールとの混合液等で抽出を行うことにより、強い香気
の緩和を図ることができる。
ケイヒからの抽出は、具体的には例えば次のようにして
行うことができる。
ケイヒ500 gを粉砕し、ヘキサン5を用いて24時間程
度抽出を行い、ケイヒの脱精油を行う。脱精油したケイ
ヒに50%エタノール10を加え、80℃で3時間還流しな
がら抽出を行う。抽出液をろ別し、乾固または凍結乾燥
することにより、本発明品を35g程度得ることができ
る。
本発明品の原料であるケイヒは天然物であり、古くから
シナモンとして食品の賦香等に用いられていることか
ら、その安全性について全く問題はない。したがって、
本発明品を種々の用途に利用することが可能であり、抗
生物質でみられるような副作用の心配は全くないことか
ら、例えばチューインガム、キャンディー、錠菓、含そ
う剤、練り歯磨等に配合して日常的な利用を図ることが
可能であり、またそのような利用方法が効果的である。
本発明品を製品に添加する場合、0.001 〜10重量%とな
るように添加すれば好適である。
[作用] 本発明は、副作用等の心配のない古くから用いられてい
る天然物を試料とし、バクテロイデス・ジンジバリスの
生育阻害試験を行った結果、ケイヒ抽出物にその効果を
見出し、更にこのケイヒ抽出物は、バクテロイデス・ジ
ンジバリスの産生するコラゲナーゼ阻害活性をも有して
おり、非常に有効な抗歯周病剤であることを突き止めて
完成されたものである。ケイヒ抽出物のこのような作用
は従来は知られておらず、本発明によって始めて明らか
にされたものである。
歯周病は細菌性由来の炎症性疾患であり、歯周病原性プ
ラーク細菌の増加、細菌の組織内侵入、感染に対する宿
主応答といったものがその要因となっている。歯周病で
最も多い成人性歯周炎の病原菌として最も有力視されて
いるのはバクテロイデス・ジンジバリスであり、歯周病
患者の歯周ポケット低部から高頻度に分離されることが
報告されている。この菌は、血液平板上で黒色のコロニ
ーを形成する非運動性のグラム陰性の桿菌であり、その
病原性因子については多くが知られている。この菌種を
含むバクテロイデスは、コラゲナーゼ、フォスフォリパ
ーゼA、アルカリフォスファターゼ、酸フォスファター
ゼ等のタンパク分解酵素を産生する。なかでもコラゲナ
ーゼは歯周組織のコラーゲンを分解し、組織破壊を導く
直接的な因子といわれている。
よって、歯周病を予防したり治療したりするためには、
歯周ポケット内のバクテロイデス・ジンジバリスの生育
を抑えること、更にはその病原性因子を阻害することが
重要であり、これらの機能を有する物質を口腔内におい
て応用することが効果的である。
また、これらの効果を有する素材を検討する場合、口腔
内で応用することを考慮し、比較的安全性が高い天然物
であることが望ましく、異味異臭がなく、しかも唾液と
の親和性の良い高極性の物質であることが好ましい。こ
れらの条件を踏まえ鋭意研究を行った結果、ケイヒ抽出
物が、バクテロイデス・ジンジバリスの生育阻害作用、
更にコラゲナーゼ阻害作用を有することを突き止め、本
発明を完成するに至ったものである。
ケイヒはシナモンとして食品の賦香等に用いられてお
り、その安全性については古くから実証済みである。し
たがって、本発明による抗歯周病剤を、チューインガ
ム、キャンディー、錠菓、含そう剤、練り歯磨等に配合
することにより、歯周病予防効果を有する製品の提供が
可能である。
[発明の効果] 本発明によれば、副作用等の心配のない古くから用いら
れている天然物に由来し、歯周病病原菌として知られる
バクテロイデス・ジンジバリスの生育を阻害し、更にこ
の菌の産生するコラゲナーゼを阻害する作用を有し、歯
周病の予防および治療に有効な抗歯周病剤が提供され
る。
[実施例] 以下に実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本
発明は以下の実施例にのみ限定されるものではない。
まず、本発明の製造例を示し、次に本発明品のバクテロ
イデス・ジンジバリスに対する生育阻害作用を試験した
試験例を示し、次に本発明品のバクテロイデス・ジンジ
バリスのコラゲナーゼに対する活性阻害作用を試験した
試験例を示し、更に実施例として本発明品を使用した種
々の食品の応用例を示す。
製造例 ケイヒ500 gを粉砕し、ヘキサン5を用いて24時間程
度抽出を行い、ケイヒの脱精油を行った。脱精油したケ
イヒに50%エタノール10を加え、80℃で3時間還流し
ながら抽出を行った。抽出液をろ別し、乾固または凍結
乾燥することにより、本発明品を35g程度得た。
試験例1 前記した方法により調製した本発明品(ケイヒ50%エタ
ノール抽出物)の歯周病原性バクテロイデス・ジンジバ
リスに対する生育阻害作用を以下の方法により測定し
た。
使用菌株 Bacteroides gingivalis FDC 381 Bacteroides gingivalis ATCC 33277 試験用培地 トリプチケイス・ソイ・ブロス 30 g (Tripticase soy broth) ヘミン(hemin) 5 mg メナジオン(menedione) 0.5mg 精製水 1000 ml 試験方法 試験用培地に供試菌を接種し、37℃で48時間嫌気状態で
前培養で行った。別に、試験用培地に本発明品を規定量
溶解したものを調製し、内径16mmの試験管に5mlずつ分
注した。前培養菌液50μを接種し、嫌気条件下にて37
℃で培養し、菌の増殖速度を測定した。測定は、ディジ
タル・カロリメータ(Digital Calorimator、ICM社
製)を用いて660 nmで濁度の測定を行い、コントロール
との差により求めた。嫌気培養は嫌気ボックスを用い、
混合ガス(CO:H:N=1:1:8)を注入して
行った。本発明品(ケイヒ50%エタノール抽出物)濃度
は、終濃度で200、100、50、0μg/mlとした。
それぞれの濃度での濁度の変化を第1図および第2図に
示す。
本発明品は、バクテロイデス・ジンジバリスFDC 381、A
TCC 33277いずれの菌株に対しても強い生育阻害効果を
示した。
試験例2 本発明品(ケイヒ50%エタノール抽出物)のバクテロイ
デス・ジンジバリスのコラゲナーゼ阻害活性の測定を以
下の方法により行った。コラゲナーゼ活性の測定は、コ
ラゲノキットCLN-100(コラーゲン技術研修会)を用い
て行った。コラゲナーゼ活性阻害試料として、本発明品
およびコラゲナーゼ活性阻害効果が確認されている塩酸
テトラサイクリンを用いて、その効果の比較を行った。
使用菌株 Bacteroides gigivalis FDC 381 試験用培地 [血液平板培地] トリプチケイス・ソイ・ブロス 40 g (Tripticase soy broth) ヘミン(hemin) 5 mg メナジオン(menedione) 0.5mg 馬脱繊維血液 100 ml 精製水 900 ml [酵素抽出用液体培地] トリプチケイス・ソイ・ブロス 30 g (Tripticase soy broth) ヘミン(hemin) 5 mg メナジオン(menedione) 0.5mg 精製水 1000 ml コラゲナーゼ調製法 本試験で用いたバクテロイデス・ジンジバリスのコラゲ
ナーゼ溶液は、以下の方法により調製した。
血液平板培地により4日間嫌気的に培養を行ったバクテ
ロイデス・ジンジバリスFDC 381 を酵素抽出用液体培地
1500mlに接種し、37℃で3日間嫌気的に培養した。培養
液を遠沈(12000×G、20分間)し、上清を80%硫酸ア
ンモニウム飽和し、遠沈(12000×G、20分間)して、8
0%硫酸アンモニウム画分を集めた。この画分を5mM塩
化カルシウムを含む0.05Mトリス−塩酸緩衝液(pH 7.
5)300 mlに溶解し、同緩衝液を用いて十分に透析を行
った。透析内液をろ過(0.22μm、MILLIPORE)したも
のをバクテロイデス・ジンジバリスコラゲナーゼ溶液と
した。
コラゲナーゼ阻害試験 コラゲノキットCLN-100 は、FITC標識コラーゲンを基質
としコラゲナーゼとの反応後に生じる分解物のみを35℃
で選択的に変性させてからエタノールで抽出し、この抽
出された分解物の螢光光度を測定することによりコラゲ
ナーゼ活性を定量するものである。
実験系としては、バクテロイデス・ジンジバリスコラゲ
ナーゼ溶液200 μ、基質コラーゲン溶液200 μ、試
料溶液100 μの、計500 μとし、35℃で2時間の反
応により、それぞれのコラゲナーゼ活性を測定した(た
だし、1U=1μgのコラーゲン分解/分とする)。
試料のコラゲナーゼ阻害活性は、コントロールのコラゲ
ナーゼ活性を100 とし、試料添加時におけるコラゲナー
ゼ活性の減少度合を%で表示した。試験結果を第1表に
示す。
本発明品は、コラゲナーゼ阻害剤として知られている塩
酸テトラサイクリンよりも強いバクテロイデス・ジンジ
バリスコラゲナーゼ阻害効果を有していた。
応用例 本発明による抗歯周病剤を使用して、次の処方によりチ
ューインガム、キャンディー、錠菓、含そう剤並びに練
り歯磨を製造した。
実施例1 チューインガムの処方 ガムベース 20.0% 砂糖 55.0 グルコース 15.0 水飴 9.3 香料 0.5ケイヒ50%エタノール抽出物 0.2 100.0% 実施例2 キャンディーの処方 砂糖 50.0% 水飴 34.0 クエン酸 1.0 ケイヒ50%エタノール抽出物 0.2水 14.8 100.0% 実施例3 錠菓の処方 砂糖 76.4% グルコース 19.0 ショ糖脂肪酸エステル 0.2 ケイヒ50%エタノール抽出物 0.1水 4.3 100.0% 実施例4 含そう剤の処方 エタノール 30.0% 香料 1.0 銅クロロフィリンナトリウム 0.1 サッカリン 0.05 塩酸クロルヘキシジン 0.01 ケイヒ50%エタノール抽出物 0.2水 68.64 100.0% 実施例5 練り歯磨の処方 炭酸カルシウム 50.0% グリセリン 20.0 カラゲーナン 0.5 カルボキシメチルセルロース 1.0 ラウリルエタノールアマイド 1.0 ショ糖モノラウレート 2.0 ケイヒ50%エタノール抽出物 0.2 銅クロロフィリンナトリウム 0.1 塩酸クロルヘキシジン 0.01 サッカリン 0.1水 25.09 100.0%
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明による抗歯周病剤のバクテロイデス・ジ
ンジバリスFDC 381 に対する生育阻害試験結果を示す
図、第2図は本発明による抗歯周病剤のバクテロイデス
・ジンジバリスATCC 33277に対する生育阻害試験結果を
示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 FI 技術表示箇所 A61K 35/78 ADZ 7167−4C

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】歯周病病原菌バクテロイデス・ジンジバリ
    ス(Bacteroides gingivalis)の生育阻害作用を有し、
    更にバクテロイデス・ジンジバリスの産生するコラゲナ
    ーゼ阻害作用を有する抗歯周病剤であって、ケイヒ(Ci
    nnamomi cortex)抽出物を有効成分として含有すること
    を特徴とする抗歯周病剤。
  2. 【請求項2】ケイヒから抽出物を抽出する抽出溶剤とし
    て、水、アルコール、または水とアルコールとの混合液
    を用いた請求項1記載の抗歯周病剤。
  3. 【請求項3】ケイヒから精油成分を除去したものを原料
    とし、抽出物を抽出する抽出溶剤として、水、アルコー
    ル、または水とアルコールとの混合液を用いた請求項1
    記載の抗歯周病剤。
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JP2001258480A (ja) * 2000-03-17 2001-09-25 Ota Isan:Kk 動物糞尿臭消臭用飼料
KR20200077090A (ko) * 2018-12-20 2020-06-30 동의대학교 산학협력단 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 통증 예방 또는 치료용 조성물

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