KR20000069310A - 세포외 매트릭스의 생산 촉진제 - Google Patents

Abstract

세포외 매트릭스, 보다 구체적으로는, 히알루론산 등의 산성 무코다당과, 콜라겐 등의 섬유성 단백질의 생산을 촉진하여, 세포외 매트릭스의 활성화와 피부 조직의 정상화, 또는 표피와 진피 사이의 결합력의 강화에 의한 뛰어난 피부 노화 방지 효과를 발휘할 수 있는 약제이다. 이 약제는, 미시마사이코 등의 부플레우룸(Bupleurum) 속에 속하는 식물로부터의 추출물, 또한 이 추출물 중에 존재하는 사이코사포닌 또는 사이코게닌을 유효 성분으로 한다. 이 약제를 피부외용제 등으로서 사용함으로써 상기의 산성 무코다당 및 섬유성 단백질 등의, 섬유아세포 등에 있어서 생산을 촉진시키는 것이 가능하다.

Description

세포외 매트릭스의 생산 촉진제{Extracellular matrix production promoter}

진피는, 표피의 아래에 있는, 결합 조직으로 이루어지는 조직이다. 진피에서는, 표피만큼 세포가 치밀하게 메워져 있지 않고, 오히려, 세포외 공간이 많으며, 이 부분은, 「세포외 매트릭스」라고 불리는 거대 분자의 망상 구조에 의해서 채워져 있다.

이 세포외 매트릭스는, 진피내의 섬유아세포 등에서 생산되고 있고, 히알루론산이나 데르마탄 황산 등의 산성 무코다당이라고 불리는 다당류와, 콜라겐, 엘라스틴 등의 섬유성 단백질로 구성되어 있다.

세포외 매트릭스는, 피부의 탄력성, 생기, 싱싱함, 신진 대사 등에 직접적으로 관계하고 있고, 섬유아세포 등에 있어서의 세포외 매트릭스의 생산이 둔해지면, 피부의 탄력성이나 싱싱함을 잃게되고, 주름, 잔주름, 피부의 거칠어짐이 발생하기 쉽게 되어, 피부 노화를 초래하는 하나의 원인이 된다.

따라서, 현재, 이 세포외 매트릭스의 생산을 촉진시킴에 의해, 생기가 있는 싱싱한 피부를 유지하여, 피부에 젊음을 제공하는 방법을 찾아내는 시도가 이루어지고 있다.

본 발명이 해결해야 할 과제는, 상술한 바와 같이, 피부를 생생하게 유지하는데 있어서, 지극히 중요한 역할을 담당하고 있는, 세포외 매트릭스의 생산을 촉진하는 성분을 발견하여, 이 성분을 유효 성분으로 함에 의해, 주름, 잔주름, 피부의 거칠어짐 등으로 상징되는 피부 노화를 방지하는 것이 가능하고, 더구나 안전성에 있어서도 문제가 없는 피부외용제 등의 약제를 제공하는 것에 있다.

발명의 개시

본 발명자는, 이 과제의 해결을 향하여 예의 검토를 한 결과, 미시마사이코 등의 부플레우룸(Bupleurum) 속에 속하는 식물의 추출물이나 이 속에 포함되는 사이코사포닌 등의 성분이 피부내의 표피 세포나 섬유아세포에 작용함에 의해, 세포외 매트릭스의 생산을 촉진하여, 세포외 매트릭스를 활성화시켜, 피부 조직을 정상화시키는 작용을 갖는 것을 발견하여, 본 발명을 완성하였다.

즉, 본 발명은, 부플레우룸 속에 속하는 식물로부터의 추출물을 유효 성분으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제(이하, 본 발명 생산 촉진제라고도 한다), 특히 부플레우룸 속에 속하는 식물이 미시마사이코인 생산 촉진제를 제공한다.

본 발명은, 피부외용제 등의 약제에 관한 기술 분야의 발명이다. 보다 구체적으로는, 본 발명은, 히알루론산 등의 산성 무코다당이나 콜라겐 등의 섬유성 단백질 등으로 이루어진, 진피를 형성시키는 세포외 매트릭스의 생산을 촉진하는 피부외용제 등의 약제에 관한 발명이다.

도 1은 사람 표피 세포에 있어서의 히알루론산 생산 시험의 결과를 나타내는 도면이다.

도 2는 사람 피부 유래 섬유아세포에 있어서의 히알루론산 생산 시험의 결과를 나타내는 도면이다.

도 3A 내지 도 3C는 사람 표피 세포에 있어서의 VII형 콜라겐 생산 시험의 결과를 나타내는 생물의 형태 사진이다.

도 4A 내지 도 4C는 사람 피부 유래 섬유아세포에 있어서의 VII형 콜라겐 생산 시험의 결과를 나타내는 생물의 형태 사진이다.

이하, 본 발명의 실시의 형태에 관해서 설명한다.

본 발명 생산 촉진제는, 부플레우룸 속에 속하는 식물로부터의 추출물을 유효 성분으로서 사용할 수 있다.

본 발명 생산 촉진제의 유효 성분으로 할 수 있는 추출물을 제공하는 부플레우룸 속에 속하는 식물의 식물체는, 사이코사포닌 또는 사이코게닌을 함유할 수 있는 한 특별히 한정되는 것은 아니다.

예를 들어, 부플레우룸 속에 속하는 식물, 예를 들어, 미시마사이코[일본 약국방 제13개정 기재 명칭: Bupleurum falcatum Linne], 별명 만슈미시마사이코의 명칭으로 불리는 북시호(Bupleurum chinese DC.), 별명 오크미시마사이코의 명칭으로 불리는 협엽시호(Bupleurum scorzonerifolium Willd.), 막록시호(Bupleurum marginatum Wall. ex DC.), 장백시호(Bupleurum komarovianum Lincz.), 대엽시호(Bupleurum longiradiatum Turcz.), 흥안시호(Bupleurum sibiricum Vest), 장경시호(Bupleurum longicaule Wall. ex DC.), 소시호(Bupleurum tenue Buch. -Ham ex D. Don), 별명 아엽시호의 명칭으로 불리는 금황시호(Bupleurum aureum Fisch.) 또는 다엽시호(Bupleurum mulutinerve DC.) 등을 본 발명 생산 촉진제의 유효 성분으로서 배합할 수 있는 추출물의 원료로서 들 수 있다.

상기 식물체에서 선택되어야 할 부위도, 사이코사포닌 또는 사이코게닌을 함유할 수 있는 부위인 한 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 상기 미시마사이코의 경우에는, 사이코사포닌 및 사이코게닌이 함유되어 있는 것이 공지되어 있는 뿌리부를 선택하는 것이 바람직하다.

또한, 이들의 식물체로서, 천연의 식물체를 선택하는 것이 가능한 것은 물론이지만, 인공적으로 배양한 식물체, 예를 들어, 사이코사포닌 내지 사이코게닌의 생성 효율을 향상시키기 위해서 상기 식물체의 특정 부위를 배양하여 유도한 캘러스 또는 이 캘러스를 다시 분화시켜 특정 부위의 기관 배양을 한 식물체를 사용할 수 있다.

또한, 유전자 공학적 방법, 예를 들어, 사이코사포닌 또는 사이코게닌을 대량으로 생성시키는 것을 목적으로 하여 새로 만들어낸 유전자 도입주나 세포융합주를 사용하는 것도 가능하다.

또한, 사이코사포닌 및/또는 사이코게닌을 생성하는 식물로서 바람직하게 선택되는 미시마사이코에 관해서, 식물 배양에 제공하는 원형질체는, 니코틴산, 염산피리독신, D-판토텐산칼슘, p-아미노안식향산, 염화콜린, 아스코르빈산, 비타민 A, 비타민 D₃, 비타민 B₁₂, 피루브산나트륨, 구연산, 사과산나트륨, 푸마르산 또는 카자미노산 중 적어도 1종류의 비타민 또는 유기산을 포함하는 배양 배지 중에서 배양하는 것이 바람직하다(일본 특허공개 제(평)2-245180호 공보 참조).

또한, 미시마사이코의 뿌리의 기관 배양에 있어서는, 이 기관 배양을 계속하더라도 더이상 실질적으로 곁뿌리의 수가 증가하지 않는 상태가 될 때까지, 이 기관 배양 배지의 당류 성분(슈크로즈, 글루코즈 또는 프럭토즈 등)의 농도를 배지 전체에 대하여 2.0중량% 미만으로 제한하여 배양하는 것이, 이 기관 배양에 있어서의 사이코사포닌의 생산 효율을 향상시킬 수 있다고 하는 점에서 바람직하다(일본 특허공개 제(평)5-23069호 공보 참조). 또한, 배양 배지 중에, 쿠말린, m-하이드록시안식향산, o-하이드록시페닐아세트산, p-하이드록시페닐아세트산, o-쿠말린산, 클로로겐산, 플로로글루시놀 또는 움베리페논 등의 페놀 유도체를 첨가하는 것도, 이 기관 배양에 있어서의 사이코사포닌의 생산 효율을 향상시킬 수 있다고 하는 점에서 바람직하다(일본 특허공개 제(평)5-184379호 공보 참조).

또한, 미시마사이코 등의 부플레우룸 속에 속하는 식물에의, 예를 들어, 사이코사포닌 합성 유전자 등의 사이코사포닌의 생성을 향상시킬 수 있는 유전자의 도입에 있어서는, 이러한 유전자 암호를 포함하는 DNA를 유전자 도입 대상인 부플레우룸 속에 속하는 식물의 원형질체와 공존시켜, 전기 펄스를 주거나 또는 세포융합제를 첨가하는 것이 효율적으로 목적하는 유전자 도입을 실현할 수 있다고 하는 점에서 바람직하다(일본 특허공개 제(평)6-90771호 공보 참조).

이렇게 하여 제공되는 부플레우룸 속에 속하는 식물의 식물체의 추출물의 제조는, 이 추출물을 수득하기 위한 통상 공지의 방법, 예를 들어, 용매 추출 등에 의해 수행하는 것이 가능하다. 또한, 여기서 말하는 추출물은, 식물체의 파쇄물 유래인 경우는 물론, 기관 배양 등의 식물 조직 배양을 수행한 배지 유래인 경우도 포함한다.

이러한 용매 추출에 있어서 사용되는 용매로서는, 예를 들어, 정제수 등의 물; 메탄올, 에탄올 등의 1급 저급 알콜류; 올레일 알콜, 스테아릴 알콜, 옥틸도데칸올 등의 1급 고급 알콜류; 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 글리세린, 1,3-부틸렌 글리콜 등의 폴리올류; 아세톤 등의 케톤류; 아세트산에틸 에스테르 등의 에스테르류; 헥산, 클로로포름, 벤젠 등의 탄화수소계 용제 등을 들 수 있고, 이들은 단독 또는 2종류 이상을 혼합하여 사용할 수 있다. 이들 중에서는, 생체에의 폭넓은 적용이 가능하다고 하는 관점에서, 물, 에탄올, 글리세린, 1,3-부틸렌 글리콜의 단독 또는 2종류 이상의 혼합물이 적당하다. 이렇게 하여, 목적하는 부플레우룸 속에 속하는 식물의 식물체의 추출물(이하, 추출물이라 칭하기도 한다)을 수득할 수 있다.

이 추출물의 본 발명 생산 촉진제에 있어서의 배합량은, 이의 구체적인 추출 재료나 본 발명 생산 촉진제의 제형, 또는, 특히 생산 촉진을 도모해야 할 세포외 매트릭스의 성분에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 특별히 한정되는 것은 아니다.

예를 들어, 미시마사이코의 뿌리의 추출물을 본 발명 생산 촉진제의 유효 성분으로 하는 경우에는, 약제 전체에 대하여 추출물의 고형분 환산으로 0.00001 내지 10.0중량%의 넓은 범위에서 적절히 선택하는 것이 대략 바람직하다.

또한, 본 발명 생산 촉진제 중에는, 상기 추출물 중에 포함되는 것이 알려져 있는 사이코사포닌 및/또는 사이코게닌을 유효 성분으로서 배합할 수 있다.

사이코사포닌은, 상기 미시마사이코의 뿌리를 건조시킨 것이고, 종래부터 해열, 해독, 진통, 강장, 항염증의 주요 약제로서 사용되어 온 중요한 한방 원료의 하나인 「시호(사이코)」의 주요한 약리 성분으로서 알려져 있다.

이 사이코사포닌은, 오레아난형 트리테루페노이드사포닌으로, 지금까지 a, c, d, b1, b2 등 13종류가 단리되어 구조가 결정되어 있다.

본 발명 생산 촉진제 중에는, 이들의 통상 공지의 방법으로 단리된 사이코사포닌을 배합할 수 있다.

또한, 본 발명 생산 촉진제 중에는, 대량 입수하기 위한 방법을 시행한 사이코사포닌을 배합하는 것도 가능하다(사이코사포닌은, 상기 미시마사이코의 천연 뿌리 중에 0.5 내지 1.5중량% 정도밖에 함유되어 있지 않다.).

이 대량 입수 수단의 일례로서, 사이코사포닌을 함유하는 상기 추출물을 일단 흡착제에 흡착시켜, 이에 여러가지의 방법을 강구함으로, 목적하는 종류의 사이코사포닌을 대량으로 입수할 수 있는 방법을 들 수 있다.

보다 구체적으로는, 상기 추출물을 흡착제에 접촉시켜 사이코사포닌을 흡착제에 흡착시키고, 사이코사포닌 이외의 상기 추출물 중의 성분을 이 흡착제로부터 제거한 후(흡착 공정), 이 흡착제에 흡착한 사이코사포닌을 용출시켜, 정제된 천연형 사이코사포닌(이중 결합이 13위치만인 것으로 대표되는 천연물 중에 그대로 존재하는 사이코사포닌: 사이코사포닌 a, 사이코사포닌 c 및 사이코사포닌 d)을 수득할 수 있다.

또한, 이 상기 추출물의 흡착제에의 흡착 공정 종료후, 흡착제에 흡착한 사이코사포닌에 철(III) 이온을 접촉시켜[예를 들어, 염화철(FeCl₃) 등의 철(III) 염 용액 등의 철(III) 이온의 용액을 직접 이 천연형 사이코사포닌에 접촉시킬 수 있다], 디엔 구조를 갖는 사이코사포닌(예를 들어, 이중 결합이 13위치 및 14a위치에 있는 형의 사이코사포닌인 사이코사포닌 b1, 사이코사포닌 h 및 사이코사포닌 b2 등)을 수득할 수 있다.

또한, 천연형의 사이코사포닌 a를 변환하여 수득되는 디엔 구조를 갖는 사이코사포닌은, 사이코사포닌 b1이고, 동일하게 사이코사포닌 c에 대하여는 사이코사포닌 h가 대응하고, 사이코사포닌 d에 대하여는 사이코사포닌 b2가 대응한다.

이들의 공정에서 사용되는 흡착제로서는, 예를 들어, 활성탄, 스티렌-디비닐벤젠계의 합성 흡착제, 아크릴계의 합성 흡착제 등을 들 수 있다. 또한, 실리카 겔과 소수기를 조합시킨 소재의 합성 흡착제, 폴리아미드 겔, 수식 덱스트란 겔 등을 언급하는 것도 가능하다.

이들의 흡착제에 흡착된, 목적하는 종류의 사이코사포닌을 적절한 용출액을 사용하여 용출시켜, 이를 필요에 따라서 고속 액체 크로마토그래피 등을 사용하여 정제함에 의해, 목적하는 사이코사포닌을 입수할 수 있다.

이의 제조 방법을 위에 예시한 사이코사포닌 이외의 사이코사포닌, 예를 들어, 사이코사포닌 e, 사이코사포닌 f, 사이코사포닌 g 등도 통상 공지의 방법에 의해 제조할 수 있다.

본 발명 생산 촉진제에는, 이들의 사이코사포닌 a, 사이코사포닌 b1, 사이코사포닌 b2, 사이코사포닌 c, 사이코사포닌 d, 사이코사포닌 e, 사이코사포닌 f, 사이코사포닌 g 또는 사이코사포닌 h의 어느 쪽의 사이코사포닌도 배합하는 것이 가능하다.

그리고, 이들의 사이코사포닌 중에서도, 사이코사포닌 a, 사이코사포닌 b1, 사이코사포닌 b2, 사이코사포닌 c 또는 사이코사포닌 d는, 특히 히알루론산 생산 촉진 작용이 강하여, 본 발명 생산 촉진제의 유효 성분으로서 바람직하다.

본 발명 생산 촉진제에 있어서의 상기의 사이코사포닌의 배합량은, 선택하는 사이코사포닌의 종류나 본 발명 생산 촉진제의 구체적 제형, 또는, 특히 생산 촉진을 도모해야 할 세포외 매트릭스의 성분에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 특별히 한정되는 것이 아니라, 대략 약제 전체에 대하여 0.000001 내지 10.0중량%의 넓은 범위에서, 바람직하게 선택한다.

본 발명 생산 촉진제 중에는, 상기 사이코사포닌의 게닌 성분인 사이코게닌을 배합하는 것도 가능하다.

사이코게닌은, 상기 사이코사포닌의 게닌 성분, 즉, 사이코사포닌의 비당질 부분이다.

구체적으로는, 사이코사포닌 b1의 게닌 부분인 사이코게닌 A, 사이코사포닌 h의 게닌 부분인 사이코게닌 C, 사이코사포닌 b2의 게닌 부분인 사이코게닌 D, 사이코사포닌 c의 게닌 부분인 사이코게닌 E, 사이코사포닌 a의 게닌 부분인 사이코게닌 F, 사이코사포닌 d의 게닌 부분인 사이코게닌 G 등을 본 발명 생산 촉진제 중에 배합할 수 있다.

이들의 사이코게닌은, 상기 사이코사포닌을 가수분해함에 의해 수득할 수 있다.

구체적으로는, 염산 또는 황산 등에 의한 산성 조건하의 당이탈 반응에 의해서 상기의 사이코게닌을 수득할 수 있다.

본 발명 생산 촉진제에 있어서의 상기의 사이코게닌의 배합량은, 선택하는 사이코게닌의 종류나 본 발명 생산 촉진제의 구체적 제형, 또는, 특히 생산 촉진을 도모해야 할 세포외 매트릭스의 성분에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 특별히 한정되어야 할 것은 아니고, 대략 약제 전체에 대하여 0.000001 내지 10.0중량%의 넓은 범위에서 바람직하게 선택한다.

이렇게 하여 제조되는 상술한 유효 성분인, 부플레우룸 속에 속하는 식물의 추출물, 사이코사포닌 또는 사이코게닌을, 1종 혹은 2종 이상 조합시켜 약제 중에 배합함에 의해, 세포외 매트릭스의 생산이 촉진되고, 또한 이 세포외 매트릭스의 생산 촉진에 따라서, 피부 조직도 정상화됨에 따라, 주름, 잔주름 등이 억제되어, 피부가 싱싱하게 되는 등, 뛰어난 피부 노화 방지 효과를 발휘하는 것이 가능한 본 발명 생산 촉진제가 제공된다.

본 발명 생산 촉진제의 작용에 의해, 생산이 촉진되는 세포외 매트릭스는, 상술한 바와 같이, 주로 섬유아세포에 의해 생산되고, 구체적으로는, 히알루론산, 데르마탄 황산 등의 산성 무코다당과, 콜라겐, 엘라스틴, 피브로넥틴, 라미린 등의 섬유성 단백질로 구성된다.

산성 무코다당은, 대량의 물을 이의 분자내에 유지하여 겔상을 나타내고, 이 겔내의 물이 영양분, 대사산물, 호르몬 등을 혈관으로부터 조직 중의 세포까지 침투시키는 작용을 담당하고 있다. 따라서, 세포외 매트릭스에 있어서의 산성 무코다당의 생산이 촉진되면, 피부가 싱싱하게 될뿐만 아니라, 피부의 신진 대사가 촉진되어, 피부 노화를 방지하는 것이 가능하게 된다.

또한, 섬유성 단백질은, 조직의 형태를 유지하거나, 피부에 탄성을 부여하는 등의 기능을 담당하고 있다. 따라서, 세포외 매트릭스에 있어서의 섬유성 단백질의 생산이 촉진되면, 피부에 탄력을 주게 되어, 주름 또는 잔주름이 억제된다.

본 발명 생산 촉진제는, 이들 쌍방의 세포외 매트릭스의 구성 성분의 생산을 촉진시키는 것이 가능하다.

이러한 의미에서, 본 발명 생산 촉진제는,「산성 무코다당 생산 촉진제」로서의 측면과, 「섬유성 단백질 생산 촉진제」로서의 측면의 쌍방을 갖는, 세포외 매트릭스 생산 촉진제이다.

특히, 본 발명 생산 촉진제는, 산성 무코다당 중, 히알루론산의 생산을 강하게 촉진시키고, 섬유성 단백질 중, 콜라겐의 생산을 강하게 촉진시킨다.

이러한 의미에서, 상기의 본 발명에 관계되는 산성 무코다당 생산 촉진제는, 특히, 1. 「히알루론산 생산 촉진제」로서의 측면을 가지며, 본 발명에 관계되는 섬유성 단백질 생산 촉진제는, 특히, 2. 「콜라겐 생산 촉진제」로서의 측면을 갖는다.

1. 히알루론산 등의 산성 무코다당 생산 촉진제에 관해서

히알루론산은, 세포 간극에 있어서의 수분의 유지, 조직내에 젤리상의 매트릭스를 형성시키는 것에 근거하는 세포의 유지, 조직의 윤활성과 유연성의 유지, 기계적 장해 등의 외력에의 저항 및 세균 감염의 방지 등의 많은 기능을 갖고 있다(BIO INDUSTRY. 제8권, 346페이지, 1991년). 예를 들어, 피부의 히알루론산 량은, 나이가 듬에 따라서 감소하고, 이에 따라 잔주름이나 거칠음 등의 피부 노화가 나타난다고 알려져 있다. 이러한 노화한 피부의 개선제로서, 콜라겐이나 히알루론산을 배합한 화장품가 수많이 제안되어 있지만, 이들은 피부 표면에 있어서 보습 효과를 발휘할 뿐이고, 본질적으로 노화 피부를 개선할 수 있는 것은 아니었다.

본 발명 생산 촉진제는, 산성 무코다당인 히알루론산의 섬유아세포나 표피 세포 등에 있어서 생산을 촉진시킴에 의해, 피부를 내측으로부터 활성화하여, 이러한 종래 기술이 안고 있는 과제를 해결하는 것이 가능하다.

본 발명 생산 촉진제를, 특히, 히알루론산 등의 산성 무코다당의 생산을 촉진하는 것을 목적으로 하여 사용하고, 또한, 상술한 추출물을 유효 성분으로 하는 경우에 있어서, 추출물의 본 발명 생산 촉진제에 있어서 배합량은, 이의 추출 재료나 본 발명 생산 촉진제의 제형에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 특별히 한정되는 것은 아니다.

예를 들어, 미시마사이코의 뿌리의 추출물을 유효 성분으로 하여 사용하는 경우는, 약제 전체에 대하여, 추출물의 고형분 환산으로 0.00001 내지 10.0중량%가 바람직하고, 특히 바람직하게는, 마찬가지로 하여 0.00005 내지 5.0중량%이다.

또한, 본 발명 생산 촉진제를, 특히, 히알루론산 등의 산성 무코다당의 생산을 촉진하는 것을 목적으로 하여 사용하고, 또한, 상술한 사이코사포닌을 유효 성분으로 하는 경우에 있어서, 사이코사포닌의 본 발명 생산 촉진제에 있어서 배합량은, 선택하는 사이코사포닌의 종류나 본 발명 생산 촉진제의 구체적 제형 등에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 반드시 일의적으로 확정할 수 있는 것은 아니지만, 대략 약제 전체에 대하여 0.000001 내지 10.0중량%가 바람직하고, 특히 바람직하게는, 마찬가지로 하여 0.00001 내지 1.0중량%의 범위이다.

또한, 본 발명 생산 촉진제를, 특히, 히알루론산 등의 산성 무코다당의 생산을 촉진하는 것을 목적으로 하여 사용하고, 또한, 상술한 사이코게닌을 유효 성분으로 하는 경우에 있어서, 사이코게닌의 본 발명 생산 촉진제에 있어서 배합량은, 선택하는 사이코게닌의 종류나 본 발명 생산 촉진제의 구체적 제형 등에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 반드시 일의적으로 확정할 수 있는 것이 아니지만, 대략 약제 전체에 대하여 0.000001 내지 10.0중량%가 바람직하고, 특히 바람직하게는, 마찬가지로 하여 0.00001 내지 1.0중량%의 범위이다.

또한, 상기 사이코사포닌이 피부 부활 효과를 갖는 것은, 이전부터 알려지고 있었지만(일본 특허공고 제(평)4-36137호 공보 참조), 이의 피부 부활 효과는, 사람 피부 섬유아세포의 증식 촉진 효과나, 이 효과로부터 파생하는 래트 창상 치유 촉진 효과나, 사람 실사용 시험에 있어서 피부의 거칠어짐의 개선 효과에 한정되고, 섬유아세포 증식 촉진 작용 이외의 구체적인 작용 기작에 관해서는 전혀 알려지고 있지 않았다.

당연한 일이지만, 사이코사포닌의, 히알루론산 등의 산성 무코다당의 생산 촉진 작용은 물론, 세포외 매트릭스의 생산 촉진 작용에 관해서는 전혀 알려지고 있지 않았다.

2. 콜라겐 등의 섬유성 단백질 생산 촉진제에 관해서

피부는, 크게 각층, 표피, 기저막 및 진피으로 이루어지는 구조를 하고 있다. 그리고, 전자현미경에 의해 관찰되는 기저막과 진피와의 사이에 있는 섬유성 구조체가 앵커링 섬유이다. 1군의 앵커링 섬유의 한 끝은 기저막의 라미나덴서로 들어가고, 다른 끝은 IV형 콜라겐 및 라미닌 등을 포함하는 물질로 이루어진 「앵커링 플라크」에 들어가고 있다. 또한, 별도의 군의 앵커링 섬유는, 또한 깊게 진피내로 신장하고, 기타의 앵커링 플라크와 응집하여, 거대한 네트워크 구조를 형성시킬 수 있다. 이러한 네트워크 구조가 표피와 진피 사이의 결합에 중요한 역할을 담당하고 있다고 생각되고 있다(Keene, J. Cell Biol., 104:611-621, 1987).

앵커링 섬유의 주 구성 성분은 VII형 콜라겐인 것이 공지되어 있다. 이 VII형 콜라겐 분자는, 분자량이 약 300KDa의 α1 사슬의 3개 사슬로 이루어지고, 분자간이 디설파이드 결합에 의해 이량체를 형성시키고, 이들이 또한 회합하여 섬유를 형성시킨다고 생각되고 있다. 따라서, 이 VII형 콜라겐이 표피와 진피 사이의 결합에 있어서 대단히 중요한 위치를 차지하는 것은 분명하다. 배양계에서는, 표피 세포도 섬유아세포도 미량이기는 하지만, VII형 콜라겐를 형성하고 있다. 그렇지만, 생체내에서의 VII형 콜라겐의 대사가 어떻게 제어되고 있는가에 관해서는 불명인 점도 많다.

피부에 있어서의 앵커링 섬유의 역할을 해명하기 위한 단서로서, VII형 콜라겐의 변이가 이의 원인의 하나로 되어있는 것이 명백하게 되어 있는 「선천성 표피 수포증」을 들 수 있다. 이 질환에서는, VII형 콜라겐 유전자 상의 변이 때문에 앵커링 섬유를 형성시킬 수 없어, 표피층과 진피층이 결합할 수 없게 되어, 그 결과, 원래의 피부 구조를 유지하는 것이 곤란하게 된다(Christiano, Nature Genet. 4:62­66, 1993).

정상의 피부에 있어서는, 생리적 노화 및 광노화에 따르는 앵커링 섬유의 수가 감소하는 것이 보고되어 있다(즈지타쿠오토, 일피회지, 105:963-975, 995. Tidman and Eady, J. Invest. Dermatol., 83:448-453, 1984). 시험관내 배양계에서는, 도너 에이지가 높은 피부 유래 섬유아세포일수록 앵커링 섬유의 주성분인 VII형 콜라겐의 생산이 단백질 수준 및 mRNA 수준과 함께 저하하고 있는 것도 보고되어 있다(Chen, J. Invest. Dermatol., 102;205-209, 1994).

레티노인산을 도포함에 의해, 주름 등의 노미 현상이 개선되는 것은 잘 알려져 있는 것이지만, 자외선으로 장해된 피부에 레티노인산을 연속 도포함에 의해, 앵커링 섬유의 수가 유의하게 증가하는 것도 보고되어 있다. 이는, 앵커링 섬유수의 회복이 주름의 개선에 관여하고 있는 것을 시사하는 것이다(Woodley, JAMA, 263:3057-3059, 1990).

이와 같이, 앵커링 섬유의 피부 노화 등과의 관련성이 명백하게 됨에 따라, 젊은 피부를 유지한다고 하는 목적에서, 이 앵커링 섬유의 수 또는 질을 유지하는 것의 중요성이 재인식되고 있다.

본 발명 생산 촉진제는, 섬유성 단백질인 콜라겐의 섬유아세포나 표피 세포 등에 있어서 생산을 촉진시킴에 의해, 앵커링 섬유의 수와 질을 향상시켜 세포외 매트릭스의 활성화와 피부 조직을 정상화시키고, 또한 표피와 진피와의 사이의 결합을 충실하게 하여, 주름 또는 잔주름 등을 방지하여, 젊은 시절의 피부 구조를 회복하고, 또한 피부의 노화를 방지하는 것이 가능하다.

본 발명 생산 촉진제를, 특히, 콜라겐 등의 섬유성 단백질의 생산을 촉진하는 것을 목적으로 하여 사용하고, 또한, 상술한 추출물을 유효 성분으로 하는 경우에 있어서, 추출물의 본 발명 생산 촉진제에 있어서 배합량은, 이의 추출 재료나 본 발명 생산 촉진제의 제형에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 특별히 한정되는 것은 아니다.

예를 들어, 미시마사이코의 뿌리의 추출물을 유효 성분으로 하여 사용하는 경우는, 약제 전체에 대하여, 추출물의 고형분 환산으로 0.00001 내지 10.0중량%가 바람직하고, 특히 바람직하게는, 마찬가지로 하여 0.00005 내지 5.0중량%이다.

또한, 본 발명 생산 촉진제를, 특히, 콜라겐 등의 섬유성 단백질의 생산을 촉진하는 것을 목적으로 하여 사용하고, 또한, 상술한 사이코사포닌을 유효 성분으로 하는 경우에 있어서, 사이코사포닌의 본 발명 생산 촉진제에 있어서 배합량은, 선택하는 사이코사포닌의 종류나 본 발명 생산 촉진제의 구체적 제형 등에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 반드시 일의적으로 확정할 수 있는 것이 아니지만, 대략 약제 전체에 대하여 0.000001 내지 10.0중량%가 바람직하고, 특히 바람직하게는, 마찬가지로 하여 0.00001 내지 1.0중량%의 범위이다.

또한, 본 발명 생산 촉진제를, 특히, 콜라겐 등의 섬유성 단백질의 생산을 촉진하는 것을 목적으로 하여 사용하고, 또한, 상술한 사이코게닌을 유효 성분으로 하는 경우에 있어서, 사이코게닌의 본 발명 생산 촉진제에 있어서 배합량은, 선택하는 사이코게닌의 종류나 본 발명 생산 촉진제의 구체적 제형 등에 따라서 적절히 선택하는 것이 가능하고, 반드시 일의적으로 확정할 수 있는 것이 아니지만, 대략 약제 전체에 대하여 0.000001 내지 10.0중량%가 바람직하고, 특히 바람직하게는, 마찬가지로 하여 0.00001 내지 1.0중량%의 범위이다.

또한, 상술한 것 같이, 사이코사포닌이 피부 부활 효과를 갖는 것은, 이전부터 공지되어 있었지만(일본 특허공고 제(평)4-36137호 공보 참조), 이의 피부 부활 효과는, 사람 피부 섬유아세포의 증식 촉진 효과나, 이 효과로부터 파생하는 래트 창상 치유 촉진 효과나, 사람 실사용 시험에 있어서의 피부의 거칠어짐의 개선 효과에 한정되고, 섬유아세포 증식 촉진 작용 이외의 구체적인 작용 기작에 관해서는 전혀 공지되어 있지 않았다.

당연한 일이지만, 사이코사포닌의, 콜라겐 등의 섬유성 단백질 생산 촉진 작용에 관해서는 전혀 알려져 있지 않았다.

본 발명 생산 촉진제는, 예를 들어, 수용액, 오일액, 기타 용액, 유액, 크림, 겔, 현탁액, 마이크로캡슐, 분말, 과립, 캡슐, 고형제 등의 형태를 채택하여 수득할 수 있다. 종래부터 공지의 방법으로 이들의 형태로 제조한 뒤에, 로션제제, 유액제, 크림제, 연고제, 경고제, 파프제, 에어졸제, 물-오일 2층계, 물-오일-분말 3층계, 주사제, 내복제(정제, 산제, 과립제, 환제, 시럽제, 트로키제 등), 좌제 등으로 하여, 신체에 도포, 첨부, 분무, 주사, 음용, 삽입할 수 있다. 이들의 제형 중에서도, 로션제제, 유액제, 크림제, 연고제, 경고제, 파프제, 에어졸제 등의 피부외용제가, 본 발명의 목적에 적합한 제형이다. 또한, 여기에 기재한 피부외용제에는, 의약품, 의약부외품(연고제 등), 화장품[세안료, 유액, 크림, 젤, 엣센스(미용액), 팩·마스크 등의 기초 화장품; 파운데이션, 립스틱 등의 메이크업 화장품; 구강 화장품, 방향 화장품, 모발 화장품, 바디 화장품 등]이 포함되고, 이하 같은 의미로 사용된다.

이들의 형태나 제형을 채택하여 수득할 수 있는 본 발명 생산 촉진제에 있어서는, 목적하는 제형에 따라서 통상 공지의 부형제나 향료 등을 비롯하여, 유지류, 고급 지방산 , 고급 알콜, 합성 에스테르유, 계면활성제, 방부제, 금속 이온 봉쇄제, 수용성 고분자, 증점제, 안료 등의 분말 성분, 자외선 방어제, 보습제, 산화방지제, pH 조정제, 세정제, 건조제, 유화제 등이 적절히 배합된다. 또한, 그 밖의, 약효 성분 등의 성분을 본 발명 생산 촉진제에 배합하는 것은, 이러한 배합에 의해 소기의 효과를 손상하지 않는 범위내에서 가능하다.

유지류로서는, 아보가드유, 동백유, 달맞이꽃유, 터틀유, 마카데미아 너츠유, 옥수수유, 밍크유, 올리브유, 유채유, 난황유, 참깨유, 퍼시크유, 소맥배아유, 애기동백유, 피마자유, 아마씨유, 잇꽃유, 면실유, 들깨유, 대두유, 낙화생유, 차실유, 비자유, 쌀겨유, 중국 동유, 일본 동유, 호호바유, 배아유, 트리글리세린, 트리옥탄산 글리세린, 트리이소팔미틴산 글리세린 등의 액체 유지; 카카오유, 야자유, 마지, 경화 야자유, 팜유, 우지, 양지, 경화 우지, 팜핵유, 돈지, 우골지, 목랍핵유, 경화유, 우각유, 목랍, 경화 피마자유 등의 고체 유지; 밀랍, 칸델릴라 왁스, 면왁스, 카르나우바 왁스, 베이베리 왁스, 쥐똥나무왁스, 고래 왁스, 몬탄 왁스, 쌀겨 왁스, 라놀린, 판야 왁스, 아세트산라놀린, 액상 라놀린, 사탕수수 왁스, 라놀린 지방산 이소프로필, 라우린산헥실, 환원 라놀린, 호호바 왁스, 경질 라놀린, 세락 왁스, 폴리옥시에틸렌(이하 POE라 약기한다) 라놀린 알콜 에테르, POE 라놀린 알콜 아세테이트, POE 콜레스테롤 에테르, 라놀린 지방산 폴리에틸렌 글리콜, POE 수소첨가 라놀린 알콜 에테르 등의 왁스류; 유동 파라핀, 오조케라이트, 스쿠알란, 프리스탄, 파라핀, 세레신, 스쿠알렌, 와세린, 미정질 왁스 등의 유분 등을 들 수 있다.

고급 지방산으로서는, 예를 들어, 라울린산, 미리스틴산, 팔미틴산, 스테아린산, 베헨(베헤닌)산, 올레인산, 12-하이드록시스테아린산, 운데실렌산, 토르산, 이소스테아린산, 리놀산, 리놀레인산, 에이코사펜타인산(EPA), 도코사헥사엔산(DHA) 등을 들 수 있다.

고급 알콜로서는, 예를 들어, 라우릴 알콜, 세틸 알콜, 스테아릴 알콜, 베헤닐 알콜, 미리스틸 알콜, 올레일 알콜, 세토스테아릴 알콜 등의 직쇄 알콜; 모노스테아릴 글리세린 에테르(바틸 알콜), 2-데실테트라데시놀, 라놀린 알콜, 콜레스테롤, 피트스테롤, 헥실도데칸올, 이소스테아릴 알콜, 옥틸도데칸올 등의 측쇄 알콜 등을 들 수 있다.

합성 에스테르유로서는, 예를 들어, 미리스틴산이소프로필, 옥탄산세틸, 미리스틴산옥틸도데실, 팔미틴산이소프로필, 스테아린산부틸, 라우린산헥실, 미리스틴산미리스틸, 올레인산데실, 디메틸옥탄산헥실데실, 락트산세틸, 락트산미리스틸, 아세트산라놀린, 스테아린산이소세틸, 이소스테아린산이소세틸, 12-하이드록시스테아린산콜레스테릴, 디-2-에틸헥실산 에틸렌 글리콜, 디펜타에리스리톨 지방산 에스테르, 모노이소스테아린산 N-알킬 글리콜, 디카프린산네오펜틸 글리콜, 사과산디이소스테아릴, 디-2-헵틸운데칸산 글리세린, 트리-2-에틸헥실산트리메틸올프로판, 트리이소스테아린산트리메틸올프로판, 테트라-2-에틸헥실산펜탄에리스리톨, 트리-2-에틸헥실산 글리세린, 트리이소스테아린산트리메틸올프로판, 세틸 2-에틸헥사노에이트, 2-에틸헥실팔미테이트, 트리미리스틴산 글리세린, 트리-2-헵틸운데칸산 글리세라이드, 피마자유 지방산 메틸 에스테르, 올레인산 올레일, 세토스테아릴 알콜, 아세토글리세라이드, 팔미틴산 2-헵틸운데실, 아디프산디이소부틸, N-라울로일-L-글루타민산-2-옥틸도데실 에스테르, 아디프산 디-2-헵틸운데실, 에틸 라울레이트, 세바틴산 디-2-에틸헥실, 미리스트산 2-헥실데실, 팔미틴산 2-헥실데실, 아디프산 2-헥실데실, 세바틴산디이소프로필, 호박산 2-에틸헥실, 아세트산에틸, 아세트산부틸, 구연산트리에틸 등을 들 수 있다.

실리콘류로서는, 예를 들어, 디메틸폴리실록산, 메틸페닐폴리실록산, 메틸하이드로겐폴리실록산 등의 쇄상 폴리실록산; 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸폴리실록산, 테트라메틸테트라하이드로겐폴리실록산 등의 환상 폴리실록산; 3차원 망상 구조를 형성하고 있는 실리콘 수지, 실리콘 고무 등을 들 수 있다.

계면활성제로서는, 음이온 계면활성제, 양이온 계면활성제, 양성 계면활성제, 비이온 계면활성제의 어느 쪽도 본 발명 생산 촉진제에 배합할 수 있다.

음이온 계면활성제로서는, 예를 들어, 비누용 기재물, 우린산나트륨, 팔미틴산나트륨 등의 지방산 비누, 라우릴 황산나트륨, 라우릴 황산칼륨 등의 고급 알킬황산에스테르염, POE 라우릴황산트리에탄올아민, POE 라우릴황산나트륨 등의 알킬 에테르 황산 에스테르염, 라울로일 사르코신 나트륨 등의 N-아실사르코신산; N-미리스트일-N-메틸타우린 나트륨, 야자유 지방산 메틸타우라이드 나트륨, 라우릴메틸타우라이드 나트륨 등의 고급 지방산 아미드설폰산염; POE 올레일 에테르 인산나트륨, POE 스테아릴 에테르 인산 등의 인산 에스테르 염; 디-2-에틸헥실설포호박산나트륨, 모노라울로일모노에탄올아미드폴리옥시에틸렌설포호박산나트륨, 라우릴폴리프로필렌 글리콜설포호박산나트륨 등의 설포호박산염; 리니아도데실벤젠설폰산나트륨, 리니아도데실벤젠설폰산트리에탄올아민, 리니아도데실벤젠설폰산 등의 알킬벤젠설폰산 또는 이의 염; N-라울로일글루타민산 모노나트륨, N-스테아로일글루타민산 디나트륨, N-미리스트일-L-글루타민산 모노나트륨 등의 N-아실글루타민산염, 경화 야자유 지방산 글리세린 황산나트륨 등의 고급 지방산 에스테르 황산 에스테르염; 로트유 등의 황산화유; POE 알킬 에테르 카복실산, POE 알킬알릴 에테르 카복실산염, α-올레핀설폰산염, 고급 지방산 에스테르 설폰산염, 2급 알콜 황산 에스테르 염, 고급 지방산 알킬올아미드 황산 에스테르염, 라울로일 모노에탄올 아미드호박산나트륨, N-팔미트일아스파라긴산 디트리에탄올아민, 카제인나트륨 등을 들 수 있다.

양이온 계면활성제로서는, 예를 들어, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 염화라우릴트리메틸암모늄 등의 알킬트리메틸암모늄 염; 염화디스테아릴디메틸암모늄 등의 디알킬디메틸암모늄 염; 염화폴리(N,N'-디메틸-3,5-메틸렌피페리디늄), 염화세틸피리디늄 등의 알킬피리디늄 염; 알킬 4급 암모늄 염, 알킬디메틸벤질암모늄 염, 알킬이소퀴놀리늄 염, 디알킬몰포늄 염, POE 알킬아민, 알킬아민 염, 폴리아민 지방산 유도체, 아밀알콜 지방산 유도체, 염화 벤잘코늄, 염화 벤제토늄 등을 들 수 있다.

양성 계면활성제로서는, 예를 들어, 2-운데실-N,N,N-(하이드록시에틸카복시메틸)-2-이미다졸린 나트륨, 2-코코일-2-이미다졸리늄하이드록사이드-1-카복시에틸옥시 2나트륨 염 등의 이미다졸린계 양성계면활성제; 2-헵타데실-N-카복시메틸-N-하이드록시에틸이미다졸리늄 베타인, 라우릴디메틸아미노아세트산 베타인, 알킬베타인, 아미드베타인, 설포베타인 등의 베타인계 양성 계면활성제 등을 들 수 있다.

비이온 계면활성제로서는, 예를 들어, 솔비탄 모노올레에이트, 솔비탄 모노이소스테아레이트, 솔비탄 모노라울레이트, 솔비탄 모노팔미테이트, 솔비탄 모노스테아레이트, 솔비탄 세스퀴올레에이트, 솔비탄 트리올레에이트, 펜타-2-에틸헥실산 디글리세롤 솔비탄, 테트라-2-에틸헥실산 디글리세롤 솔비탄 등의 솔비탄 지방산 에스테르류; 모노면실유 지방산 글리세린, 모노엘카산 글리세린, 세스퀴올레인산 글리세린, 모노스테아린산 글리세린, α,α'-올레인산피로글루타민산 글리세린, 모노스테아린산 글리세린 사과산 등의 글리세린폴리글리세린 지방산류; 모노스테아린산 프로필렌 글리콜 등의 프로필렌 글리콜 지방산 에스테르류; 경화 피마자유 유도체, 글리세린 알킬 에테르, 폴리옥시에틸렌·메틸폴리실록산 공중합체 등의 친유성 비이온 계면활성제를 들 수 있다.

또한, POE 솔비탄 모노올레에이트, POE 솔비탄 모노스테아레이트, POE 솔비탄 모노올레이트, POE 솔비탄 테트라올레에이트 등의 POE 솔비탄 지방산 에스테르류; POE 솔비트 모노라울레이트, POE 솔비트 모노올레에이트, POE 솔비트 펜타올레에이트, POE 솔비트 모노스테아레이트 등의 POE 솔비트 지방산 에스테르류; POE 글리세린 모노스테아레이트, POE 글리세린 모노이소스테아레이트, POE 글리세린 트리이소스테아레이트 등의 POE 글리세린 지방산 에스테르류, POE 모노올레에이트, POE 디스테아레이트, POE 모노디올레에이트, 디스테아린산에틸렌 글리콜 등의 POE 지방산 에스테르류; POE 라우릴 에테르, POE 올레일 에테르, POE 스테아릴 에테르, POE 베헤닐 에테르, POE 2-옥틸도데실 에테르, POE 콜레스탄올 에테르 등의 POE 알킬 에테르류; POE 옥틸페닐 에테르, POE 노닐페닐 에테르, POE 디노닐페닐 에테르 등의 POE 알킬페닐 에테르류; 플루로닉 등의 플루알로닉형류, POE·폴리옥시프로필렌(이하 POP라 약기한다) 세틸 에테르, POE·POP2-데실테트라데실 에테르, POE·POP 모노부틸 에테르, POE·POP 수소첨가 라놀린, POE·POP 글리세린 에테르 등의 POE·POP 알킬 에테르류; 테트로닉 등의 테트라POE·테트라POP 에틸렌디아민 축합물류; POE 피마자유, POE 경화 피마자유, POE 경화 피마자유 모노이소스테아레이트, POE 경화 피마자유 트리이소스테아레이트, POE 경화 피마자유 모노피로글루타민산 모노이소스테아린산 디에스테르, POE 경화 피마자유 말레산 등의 POE 피마자유 또는 경화 피마자유 유도체; POE 솔비트 밀랍 등의 POE 밀랍 라놀린 유도체; 야자유 지방산 디에탄올아미드, 라우린산 모노에탄올아미드, 지방산 이소프로판올아미드 등의 알칸올아미드; POE 프로필렌 글리콜 지방산 에스테르, POE 알킬아민, POE 지방산 아미드, 자당 지방산 에스테르, POE 노닐페닐포름알데히드 축합물, 알킬에톡시디메틸아민옥사이드, 트리올레일 인산 등의 친수성 비이온 계면활성제 등을 예시할 수 있다.

방부제로서는, 예를 들어, 메틸 파라벤, 에틸 파라벤, 부틸 파라벤 등을 들 수 있다.

금속이온 봉쇄제로서는, 예를 들어, 에데트산, 에데트산나트륨 염 등의 에데트산 알칼리 금속염, 에데트산칼슘 염 등의 에데트산 알칼리 토금속 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는, 천연의 고분자, 반합성의 고분자, 합성의 고분자, 무기의 고분자의 어느 것도 본 발명 생산 촉진제 중에 배합할 수 있다.

천연의 수용성 고분자로서는, 예를 들어, 아라비아검, 트라가간트검, 가락탄, 캬로브검, 구아검, 카라야검, 카라기난, 펙틴, 한천, 쿠인스사이드(말멜로), 알케콜로이드(갈조 추출물), 전분(쌀, 옥수수, 감자, 밀) 등의 식물계 고분자; 덱스트란, 사크시노글루칸, 풀루란 등의 미생물계 고분자; 카복시메틸 전분, 메틸하이드록시프로필 전분 등의 전분계 고분자: 콜라겐, 카제인, 알부민, 젤라틴 등의 동물계 고분자 등을 들 수 있다.

반합성의 수용성 고분자로서는, 예를 들어, 메틸셀룰로즈, 니트로셀룰로즈, 에틸셀룰로즈, 메틸하이드록시프로필 셀룰로즈, 하이드록시에틸셀룰로즈, 셀룰로즈 황산나트륨, 하이드록시프로필 셀룰로즈, 카복시메틸셀룰로즈나트륨(CMC), 결정 셀룰로즈, 셀룰로즈 분말 등의 셀룰로즈계 고분자; 알긴산나트륨, 알긴산프로필렌 글리콜 에스테르 등의 알긴산계 고분자 등을 들 수 있다.

합성의 수용성 고분자로서는, 예를 들어, 폴리비닐 알콜(PVA), 폴리비닐메틸 에테르(PVM), 폴리비닐메틸 에테르, 카복시비닐 중합체(CARBOPOL 등) 등의 비닐계 고분자; 폴리옥시에틸렌계 고분자; 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌 공중합체계 고분자; 폴리아크릴산나트륨, 폴리에틸 아크릴레이트, 폴리아크릴산아미드 등의 아크릴계 고분자; 폴리에틸렌이민, 양이온 중합체, 벤토나이트, 규산알루미늄마그네슘, 라포나이트, 헥토라이트, 무수 규산 등의 무기계 수용성 고분자 등을 들 수 있다.

증점제로서는, 상기한 수용성 고분자를 적극적으로 사용하는 것이 가능하고, 예를 들어, 카라기난, 카라야검, 트라가간트검, 캬로브검, 쿠인스사이드(말멜로), 카제인, 덱스트린, 젤라틴, 펙틴산나트륨, 알긴산나트륨, 메틸셀룰로즈, 에틸셀룰로즈, CMC, 하이드록시에틸셀룰로즈, 하이드록시프로필 셀룰로즈, PVA, PVM, 폴리비닐피롤리돈(PVP), 폴리아크릴산나트륨, 카복시비닐 중합체, 로카스트빈검, 구아검, 타마린드검, 디알킬디메틸암모늄 황산셀룰로즈, 크산탄검, 규산알루미늄마그네슘, 벤토나이트, 헥토라이트 등을 들 수 있다.

분말 성분으로서는, 예를 들어, 활석, 카올린, 운모, 비단운모(세크사이트), 백운모, 금운모, 홍운모, 흑운모, 리티아 운모, 버미큘라이트, 탄산마그네슘, 규산스트론튬, 규산바륨, 규산칼슘, 규산마그네슘, 텅스텐산금속염, 마그네슘, 실리카, 제올라이트, 황산바륨, 소성 황산칼슘(소성 석고), 인산칼슘, 불소 아파타이트, 하이드록시아파타이트, 세라믹 파우더, 금속비누(미리스틴산아연, 팔미틴산칼슘, 스테아린산알루미늄 등), 질화붕소 등의 무기 분말;

폴리아미드 수지 분말(나일론 분말 등), 폴리에틸렌 분말, 폴리메타크릴산메틸 분말, 폴리스티렌 분말, 스티렌과 아크릴산과의 공중합체 수지 분말, 벤조구아나민 수지 분말, 폴리사불화에틸렌 분말, 셀룰로즈 분말 등의 유기 분말;

이산화티타늄, 산화아연 등의 무기 백색 안료; 산화철(벤가라), 티타늄 철 등의 무기 적색계 안료; γ-산화철 등의 무기 갈색계 안료; 황산화철, 황토 등의 무기 황색계 안료; 흑산화철, 카본블랙, 저차 산화티탄 등의 무기 흑색계 안료; 망고바이올렛, 코발트바이올렛 등의 무기 보라색계 안료; 산화크롬, 수산화크롬, 티탄산코발트 등의 무기 녹색계 안료; 군청, 감청 등의 무기 청색계 안료; 산화티탄코텟드운모, 산화티탄코텟드옥시비스마스, 산화티탄코텟드탈크, 착색 산화티탄코텟드운모, 옥시 염화 비스마스, 어린박 등의 펄 안료; 알루미늄 파우더, 카파 파우더 등의 금속 분말 안료;

적색 201호, 적색 202호, 적색 204호, 적색 205호, 적색 220호, 적색 226호, 적색 228호, 적색 405호, 등색 203호, 등색 204호, 황색 205호, 황색 401호, 청색 404호 등의 유기 안료; 적색 3호, 적색 106호, 적색 227호, 적색 230호, 적색 401호, 적색 505호, 등색 205호, 황색 4호, 황색 5호, 황색 202호, 황색 203호, 녹색 3호, 청색 1호 등의 지르코늄, 바륨 또는 알루미늄 레이크 등의 유기 안료; 클로로필, β-카로틴 등의 천연 색소; 티타늄 옐로우, 카사민, 홍화적 등의 색제 등을 들 수 있다.

자외선 방어제(화학적으로 자외선을 흡수하는 물질인 「자외선 흡수제」와, 물리적 작용에 의해서 자외선을 산란 혹은 반사시키는 물질인 「자외선 차단제」의 쌍방을 포함하는 개념이다)로서는, 예를 들어, 파라아미노안식향산 등의 파라아미노안식향산계 자외선흡수제; 안트라닐산메틸 등의 안트라닐산계 자외선 흡수제; 살리실산 옥틸, 살리실산 페닐, 살리실산 호모멘틸 등의 살리실산계 자외선 흡수제; 파라메톡시계피산 이소프로필, 파라메톡시계피산 옥틸, 파라메톡시계피산-2-에틸헥실, 디파라메톡시계피산 모노-2-에틸헥산산 글리세릴, [4-비스(트리메틸실록시)메틸실릴-3-메틸부틸]-3,4,5-트리메톡시계피산 에스테르 등의 계피산계 자외선흡수제; 2,4-디하이드록시벤조페논, 2-하이드록시-4-메톡시벤조페논, 2-하이드록시-4-메톡시벤조페논-5-설폰산, 2-하이드록시-4-메톡시벤조페논-5-설폰산나트륨 등의 벤조페논계 자외선흡수제; 울로카닌산, 울로카닌산 에틸, 2-페닐-5-메틸벤조옥사졸, 2-(2'-하이드록시-5'-메틸페닐)벤조트리아졸, 4-3급-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄 등의 자외선흡수제를 들 수 있다.

또한, 상기 분말 성분과 중복하는 것도 있지만, 예를 들어, 산화티탄, 활석, 칼민, 벤토나이트, 카올린, 산화아연 등의 자외선 차단제를 들 수 있다.

보습제로서는, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 디프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 글리세린, 디글리세린, 키시리톨, 말티톨, 말토스, D-만니트, 물엿, 포도당, 과당, 유당, 콘드로이친 황산나트륨, 히알루론산나트륨, 아데노신 인산나트륨, 락트산나트륨, 담즙산염, 피롤리돈카복실산, 글루코사민, 사이클로덱스트린 등을 들 수 있다.

약효 성분으로서는, 우선 비타민류로서, 비타민 A 오일, 레티놀, 아세트산 레티놀, 팔미틴산 레티놀 등의 비타민 A류; 리보플라빈, 낙산리보플라빈, 프라빈아데닌뉴클레오티드 등의 비타민 B₂류, 피리독신염산 염, 피리독신디옥타노에이트 등의 비타민 B₆류; L-아스코르빈산, L-아스코르빈산 모노팔미틴산 에스테르, L-아스코르빈산 디팔미틴산 에스테르, L-아스코르빈산-2-황산나트륨, L-아스코르빈산 인산 에스테르, DL-α-토코페롤-L-아스코르빈산 인산 디에스테르 디칼륨, L-아스코르빈산 스테아린산 에스테르, L-아스코르빈산-2-글루코사이드 등의 비타민 C류; 판토텐산칼슘, D-판토테닐 알콜, 안토테닐에틸 에테르, 아세틸판토테닐에틸 에테르 등의 판토텐산류; 비타민 D₂(엘고칼시페롤), 코레칼시페롤 등의 비타민 D류; α-토코페롤, 아세트산 토코페롤, 니코틴산 DL-α-토코페롤, 호박산 DL-α-토코페롤 등의 비타민 E류; 비타민 P, 비오틴 등을 들 수 있다.

또한, 태반 추출물, 글루타치온, 유키노시타 추출물, 알부틴 등의 미백제; 로얄제리, 감광소 401호, 유소 혈액 추출물 등의 피부 부활제; 노닐산와레닐아미드, 니코틴산벤질 에스테르, 니코틴산 β-부톡시에틸 에스테르, 캅사이신, 딘게론, 칸타리스틴키, 이크타몰, 카페인, 탄닌산, α-볼네올, 이노시톨헥사니코티네이트, 시크란데레이트, 신나리딘, 토라졸린, 아세틸콜린, 베라파밀, 세파란틸, γ-올리자놀 등의 혈행 촉진제; 유황, 티안톨 등의 항누지제; 글리틸레틴산 유도체, 글리틸레틴산 유도체, 아즈렌, 살리실산 유도체, 히노키티올, 산화아연, 아란토인 등의 소염제; 에스트라디올, 에티닐에스트라디올 등의 여성 호르몬제; 알기닌, 아스파라긴산, 시스틴, 시스테인, 메티오닌, 세린, 류신, 트립토판 등의 아미노산류 등의 항염증제; 탄닌산, 구연산 등의 수렴제; L-멘톨, 캠퍼 등의 청량제; 염화리조팀 등을 들 수 있다.

또한, 다양한 약효를 갖는 각종의 추출물을 본 발명 생산 촉진제에 배합할 수 있다. 예를 들어, 포도 추출물, 삼백초 추출물, 전규, 비파 추출물, 황벽나무 추출물, 의이인 추출물, 쓴풀 추출물, 사프란 추출물, 천궁이 추출물, 아이리스 추출물, 황련 추출물, 메릴로트 추출물, 바치 추출물, 백합 추출물, 광대수염 추출물, 감초 추출물, 작약 추출물, 사본초 추출물, 오노니스 추출물, 수세미외 추출물, 고추 추출물, 키나 추출물, 당귀 추출물, 진피 추출물, 범의귀 추출물, 고삼 추출물, 개구리연 추출물, 회향 추출물, 앵초 추출물, 장미 추출물, 지황 추출물, 레몬 추출물, 마늘 추출물, 범부채 추출물, 자근 추출물, 알로에 추출물, 창포 뿌리 추출물, 유칼리 추출물, 로즈마리 추출물, 쇠뜨기 추출물, 세지 추출물, 타임 추출물, 차 추출물, 해초 추출물, 큐캄바 추출물, 정향 추출물, 나무딸기 추출물, 메릿사 추출물, 인삼 추출물, 마로니에 추출물, 복숭아 추출물, 도엽 추출물, 뽕나무 추출물, 수레국화 추출물, 하마메리스 추출물, 생강 추출물, 십육야 장미 추출물, 프라센타 추출물, 흉선 추출물, 실크 추출액 등을 들 수 있다.

또한, 이들의 약효 성분 중, 에스트라디올, 에티닐에스트라디올 등의 여성 호르몬제 또는 회선 추출물을, 본 발명 생산 촉진제 중에 배합하면, 상승적인 히알루론산 생산 촉진 효과가 확인된다.

또한, 이들의 약효 성분 중, L-아스코르빈산, L-아스코르빈산 모노팔미틴산에스테르, L-아스코르빈산 디팔미틴산 에스테르, L-아스코르빈산-2-황산나트륨, L-아스코르빈산 인산 에스테르, DL-α-토코페롤-L-아스코르빈산 인산 디에스테르 디칼륨, L-아스코르빈산 스테아린산 에스테르, L-아스코르빈산-2-글루코사이드 등의 비타민 C류를, 본 발명 생산 촉진제 중에 배합하면, 상승적인 콜라겐 생산 촉진 효과가 확인된다.

이하, 실시예 등을 사용하여 또한 본 발명에 관해서 설명한다. 단, 본 발명의 기술적 범위가 이들의 실시예 등에 의해서 한정되는 것은 아니다.

[참고예] 시료의 제조

(1) 시험 시료의 제조

미시마사이코의 건조 뿌리 500g을, 10배량의 50% 1,3-부틸렌 글리콜 수용액에 침지하여, 70℃로 1일간 추출한다. 이를 냉암소에서 정치·성숙시킨 후, 여과하여, 상기 건조 뿌리의 추출물(이하, 사이코 추출물이라 한다) 4700g을 수득한다.

이 사이코 추출물을 제조하는 과정에서 수득된 액을 합성 흡착제[다이어이온 HP-2(미쓰비시 화학 주식회사제)]의 컬럼에 통과시킨 후, 40% 염화 제2철 용액으로 사이코사포닌 a 및 사이코사포닌 d를 각각 사이코사포닌 b1 및 사이코사포닌 b2로 변환시킨다.

에탄올로 사이코사포닌을 용출한 후, 이 용출액을 감압농축, 건고시킨다. 이 건고물을 메탄올에 용해시킨 후, 실리카 겔 컬럼 분획 처리 및 고속 액체 크로마토그래피 처리를 하여, 사이코사포닌 b1(이하, SSb1이라고도 한다)을 수득한다.

사이코게닌은, 어느 것이나 상기한 바와 같이 수득된 사이코사포닌을 상술한 통상 공지의 방법에 의한 당이탈 반응을 거쳐서 수득한다.

[시험예 A] 히알루론산 생산 시험 및 실사용 시험

(1) 사람 표피 세포의 히알루론산 생산능에 대한 작용의 평가

사람 포피 유래 표피 세포(쿠라보우 주식회사 제품: 이하, 표피 세포라고 한다.)를 사용하여, 표피 세포의 히알루론산 생산능에 대한 사이코 추출물 및 SSb1의 작용을 평가한다. 즉, KGM 배지(이하, 표피 세포용 배지라 한다: 구라시키방적주식회사제)에 현탁한 표피 세포(5×10⁴세포/구멍)를, 24개 구멍 배양용 플레이트(Falcon사 제품)에 접종하여, 컨플루언트로 될 때까지 배양한다(배양 조건: 37℃·5% CO₂). 계속해서, 사이코 추출물을 10.0㎍/㎖ 또는 SSb1를 0.1㎍/㎖ 함유시킨 상기 표피 세포용 배지에 교환하여(대조군에 있어서는, 이들의 시료를 첨가하지 않은 상기 표피 세포용 배지에 교환한다), 동일한 조건으로 48시간 동안 배양한다. 48시간 후에 배양 상청을 채취하여, 배양 상청 중의 히알루론산 양을 측정한다. 이 히알루론산 양은, 측정용 키트 『히알루론산플레이트「중외」』(중외제약제)를 사용하여 측정한다.

이 결과를 도 1에 나타낸다. 도 1에 있어서, 사이코 추출물을 포함하는 계 및 SSb1를 포함하는 계의 어느 쪽의 계에서도, 대조군의 경우에 비교하여 표피 세포가 생산하는 히알루론산 양이 증가하고 있다.

따라서, 사이코 추출물 및 SSb1의 어느 것에 관해서도, 사람 표피 세포의 히알루론산 생산을 항진하는 작용이 확인된다.

(2) 사람 피부 섬유아세포의 히알루론산 생산능에 대한 작용의 평가

사람 피부 유래 섬유아세포[외과수술로 수득된 피부로부터 체외이식조직법으로 수득되는 것: 이하, 섬유아세포라 한다]을 사용하고, 이 섬유아세포의 히알루론산 생산능에 대한 사이코 추출물 및 SSb1의 작용을 평가한다. 즉, 1% FBS/DMEM 배지[FBS 배지는 GIBCO사제. DMEM 배지는 닛수이제약주식회사제를 사용한다]에 현탁한 섬유아세포(1×10⁴세포/구멍)를 24개 구멍 배양용 플레이트(Falcon사 제품)에 접종하여, 컨플루언트가 될 때까지 배양한다(배양조건: 37℃·5% CO2). 계속해서, 각 시료를 함유시킨 시료 함유 섬유아세포용 배지로 교환한다. 사이코 추출물의 농도는 10.0㎍/ml, SSb1의 농도는 0.1㎍/ml로 하여(대조군에 있어서는, 이들의 시료를 첨가하지 않은 상기 표피 세포용 배지로 교환한다), 동일한 조건에서 48시간 동안 배양한다.

그리고, 48시간 후에 배양 상청액을 채취하여, 배양 상청액 중의 히알루론산 양을 측정한다. 이 히알루론산 양은, 측정용 키트 『히알루론산플레이트「중외」』(중외제약제)를 사용하여 측정한다.

결과를 도 2에 나타낸다. 도 2에 있어서, 사이코 추출물을 포함하는 계 및 SSb1을 포함하는 계의 어느 쪽의 계에서도, 대조군의 경우에 비교하여 섬유아세포가 생산하는 히알루론산 양이 증가하고 있다.

따라서, 사이코 추출물 및 SSb1의 어느 것에 관해서도, 사람 섬유아세포의 히알루론산 생산을 항진하는 작용이 확인된다.

(3) 실사용 시험

표 1A에 나타내는 처방의 실시예 1A, 실시예 2A 및 비교예 1A에서 수득된 약제에 관해서, 각각 이하에 나타내는 사용 시험을 실시한다. 또한, 배합량은 중량% 이다.

	실시예 1A	실시예 2A	비교예 1A
(1) 세토스테아릴 알콜	3.5	3.5	3.5
(2) 스쿠알란	40.0	40.0	40.0
(3) 밀랍	3.0	3.0	3.0
(4) 환원 라놀린	4.0	4.0	4.0
(5) 에틸 파라벤	0.3	0.3	0.3
(6) 폴리옥시에틸렌(20) 솔비탄 모노팔미틴산 에스테르	2.0	2.0	2.0
(7) 스테아린산 모노글리세라이드	3.0	3.0	3.0
(8) 사이코 추출물	3.0	-	-
(9) 사이코사포닌 b1	-	0.05	-
(10) N-스테아로일글루타민산나트륨	0.5	0.5	0.5
(11) 향료	0.03	0.03	0.03
(12) 1,3-부틸렌 글리콜	5.0	5.0	5.0
(13) 폴리에틸렌 글리콜 1500	5.0	5.0	5.0
(14) 정제수	잔여	잔여	잔여

〈제법〉 (1) 내지 (11)의 원료를 가열용해하여 유상을 제조한다. 한편, 정제수(14)에 (12) 및 (13)을 용해하여, 70℃로 유지하여 수상을 제조한다. 그리고, 이 수상에 상기 유상을 교반하면서 첨가한다. 이어서, 호모믹서 처리를 수행하여, 유화입자를 세분화한 후, 교반하면서 급냉하고, 목적하는 크림을 수득한다.

이 실사용 시험은, 무작위로 추출한 연령 30세로부터 71세의 건강한 성인여성을 피험자로 하여, 1군 30명으로서, 각 실시예 또는 비교예의 약제를 4주간 연속 사용하여 준 후, (가) 피부의 싱싱함에 대한 개선 효과, (나) 피부의 생기·늘어짐에 대한 개선 효과 및 (다) 주름·잔주름에 대한 개선 효과에 관해서 이하의 평점으로 판정하여, 30명의 평균점으로 평가한다.

(가) 피부의 싱싱함에 대한 개선 효과의 평점

대단히 개선되었다 3점

개선되었다 2점

약간 개선되었다 1점

개선 효과가 없다 0점

악화되었다 -1점

(나) 피부의 생기·늘어짐에 대한 개선 효과의 평점

대단히 개선되었다 3점

개선되었다 2점

약간 개선되었다 1점

개선 효과가 없다 0점

악화되었다 -1점

(다) 주름·잔주름에 대한 개선 효과의 평점

대단히 개선되었다 3점

개선되었다 2점

약간 개선되었다 1점

개선 효과가 없다 0점

악화되었다 -1점

이 실사용 시험의 결과를 표 2A에 나타낸다.

	싱싱함	탄력·늘어짐	주름·잔주름
실시예 1A	2.8	2.7	2.3
실시예 2A	2.5	2.4	2.0
비교예 1A	0.7	0.6	0.5

이 결과, 실시예 1A 또는 실시예 2A의 약제를 사용한 군에 있어서는, 어느 쪽의 평가 항목에 관해서도, 비교예 1A의 약제를 사용한 군에 비교하여 뛰어난 개선 효과가 확인되었다.

이상 3종류의 시험으로부터, 본 발명 생산 촉진제에 의해서, 세포외 매트릭스 성분의 하나인 히알루론산의 생산이 촉진되어, 또한 이 히알루론산의 생산 촉진에 의해, 세포외 매트릭스가 활성화되고, 또한 피부 조직도 정상화되어, 본 발명 생산 촉진제에는, 피부 노화를 방지하는 효과가 확인됨이 명백하다.

[시험예 B]

VII형 콜라겐 생산 시험 및 실사용 시험

(1) 사람 표피 세포의 VII형 콜라겐 생산능에 대한 작용의 평가

사람 포피 유래 표피 세포(쿠라보우 주식회사 제품: 이하, 표피 세포라 한다)를 사용하고, 표피 세포의 VII형 콜라겐 생산능은 사이코 추출물 및 SSb1의 작용을 평가한다. 즉, KGM 배지(이하, 표피 세포용 배지라 한다: 구라시키 방적 주식회사제)에 현탁한 표피 세포(5x10³세포/구멍)를, 슬라이드 챔버(Nunc사 제품)에 이식하여, 계속해서, 사이코 추출물을 10.0㎍/ml 또는 SSb1을 0.1㎍/ml 함유시킨 상기 표피 세포용 배지에 교환하여(대조군에 있어서는, 이들의 시료를 첨가하지 않은 상기 표피 세포용 배지로 교환한다), 37℃·5% C0₂하에서 48시간 동안 배양한다.

그리고, 계에서 표피 세포 배양용 배지를 제거한 후, 표피 세포를 파라포름알데히드로 고정하고, 이에 대하여 VII형 콜라겐에 대한 모노크로날 항체(Sakai, L. Y., et al., J. Cell. Biol., 103, 1577-1586, 986) 및 FITC 표지 2차 항체(Sigma사제)를 반응시켜, 형광현미경으로 관찰후, 사진촬영한다.

결과를 도 3A(대조군), 도 3B(SSb1를 포함하는 계) 및 도 3C(사이코 추출물을 포함하는 계)[도 3A 내지 도 3C는 모두 생물의 형태 사진이다]에 나타낸다. 이들의 사진에서 분명한 바와 같이, 사이코 추출물을 포함하는 계 및 SSb1을 포함하는 계의 어느 쪽의 계에서도, 대조군의 경우에 비교하여 형광라벨된 표피 세포수가 많고, VII형 콜라겐의 생산이 증가함이 명백하다.

(2) 사람 피부 섬유아세포의 VII형 콜라겐 생산능에 대한 작용의 평가

사람 피부 유래 섬유아세포[외과수술로 수득된 피부에서 체외이식조직법으로써 수득되는 것. 이하, 섬유아세포라고 한다.]를 사용하고, 이 섬유아세포의 VII형 콜라겐 생산능에 대한 사이코 추출물 및 SSb1의 작용을 평가한다. 즉, 1% FBS/DMEM 배지[FBS 배지: GIBC0사 제품. DMEM 배지: 닛수이제약 주식회사제: 이하, 섬유아세포용 배지라고 한다.]에 현탁한 섬유아세포(5x10³세포/구멍)를 전출의 슬라이드 챔버에 이식하여, 계속해서 각 시료를 함유시킨 시료 함유 섬유아세포용 배지로 교환한다. 사이코 추출물의 농도는 231.5㎍/ml, SSb1 농도는 0.1㎍/ml로 하고(대조군에 있어서는, 이들의 시료를 첨가하지 않은 상기 표피 세포용 배지로 교환한다), 37℃·5% CO₂하에서 48시간 동안 배양한다.

그리고, 계에서 표피 세포 배양용 배지를 제거한 후, 섬유아세포를, 파라포름알데히드로 고정하고, 이에 대하여 VII형 콜라겐에 대한 모노크로날 항체(Sakai, L. Y., et al., J. Cell. Biol., 103, 1577-1586, 1986) 및 FITC 표지 2차 항체(Sigma사 제품)를 반응시켜, 형광현미경으로 관찰 후, 사진촬영한다.

결과를 도 4A(대조군), 도 4B(SSb1을 포함하는 계) 및 도 4C(사이코 추출물을 포함하는 계)[도 4A 내지 도 4C는 모두 생물의 형태 사진이다]에 나타낸다. 이들의 사진에서 분명한 바와 같이, 사이코 추출물을 포함하는 계 및 SSb1를 포함하는 계의 어느 쪽의 계에서도, 대조군의 경우에 비교하여 형광라벨된 표피 세포수가 많고, VII형 콜라겐의 생산이 증가함이 명백하다.

(3) 시험관내 사람 피부 삼차원 모델계에서의 VII형 콜라겐 생산능에 대한 작용의 평가

사람 피부 유래의 섬유아세포와 표피 세포로 이루어진 삼차원 피부 모델계에서의 VII형 콜라겐 생산능에 대한 사이코 추출물 및 SSb1의 작용을 평가한다.

즉, 섬유아세포(1×10⁵세포/ml) 현탁 콜라겐 용액(콜라겐은 고연주식회사제의 I-PA를 사용한다)를 얼음위에서 제조 후, 37℃에서 콜라겐을 겔화시킨다. 다음, 샤레 벽면으로부터 겔을 박리하고, 다음, 섬유아세포용 배지 중에서 배양하여 콜라겐 겔을 수축시켜, 진피 모델을 제조한다.

이 진피 모델상에 2×10⁵세포/㎠의 진피 세포를 이식하고, 5% FBS/DMEM-KGM 배지(FBS 배지: GIBSO사 제품, DMEM 배지: 닛수이제약 주식회사제, KGM 배지, 창부방적사 제품)에서 배양하고, 피부 모델을 제조한다. 피부 모델의 제조 후, 1주 동안 시료를 첨가한 배지로 교환한다. 또한, 사이코 추출물의 농도는 231.5㎍/ml, SSb1의 농도는 0.1㎍/ml로 하고(대조군에 있어서는, 이들의 시료를 첨가하지 않은 상기 표피 세포용 배지로 교환한다), 37℃·5% CO₂하에서 2주간 배양한다.

피부 모델은, 액체 질소중에서 고정 처리하고, 절편을 제조한 후, 이에 대하여 VII형 콜라겐에 대한 모노크로날 항체(Sakai. L. Y., et al., J. Cell. Biol., 103, 1577-1586) 및 FITC 표지 2차 항체(Sigma사제)를 반응시켜, 형광현미경으로 관찰후, 사진 촬영을 수행한다(도면 생략).

이 결과, 사이코 추출물 및 SSb1의 어느 계에서도, 대조군의 경우에 비하여 형광라벨된 표피 세포수가 많고, VII형 콜라겐의 생산이 증가함이 명백하다.

(4) 실사용 시험

표 1B에 나타내는 처방의 실시예 1B, 실시예 2B 및 비교예 1B에서 수득된 약제에 대하여, 각각 이하에 나타내는 실사용 시험을 실시한다. 또한, 배합량은 중량%이다.

	실시예 1B	실시예 2B	비교예 1B
(1) 세토스테아릴 알콜	3.5	3.5	3.5
(2) 스쿠알란	40.0	40.0	40.0
(3) 밀랍	3.0	3.0	3.0
(4) 환원 라놀린	4.0	4.0	4.0
(5) 에틸 파라벤	0.3	0.3	0.3
(6) 폴리옥시에틸렌(20)의 솔비탄 모노팔미틴산 에스테르	2.0	2.0	2.0
(7) 스테아린산 모노글리세라이드	3.0	3.0	3.0
(8) 사이코 추출물	0.5	-	-
(9) 사이코사포닌 b1	-	0.1	-
(10) N-스테아로일글루타민산나트륨	0.5	0.5	0.5
(11) 향료	0.03	0.03	0.03
(12) 1,3-부틸렌 글리콜	5.0	5.0	5.0
(13) 폴리에틸렌 글리콜 1500	5.0	5.0	5.0
(14)정제수	잔여	잔여	잔여

〈제법〉 (1) 내지 (11)의 원료를 가열용해하여 유상을 제조한다. 한편, 정제수(14)에 (12) 및 (13)을 용해하여, 70℃로 유지하여 수상을 제조한다. 그리고, 이 수상에 상기 유상을 교반하면서 첨가한다. 이어서, 호모믹서 처리를 하여, 유화 입자를 세분화한 후, 교반하면서 급냉하여, 목적하는 크림을 수득한다.

이 실사용 시험은, 무작위로 추출한 연령 36세 내지 69세의 건강한 성인 여성을 피험자로 하여, 1군 30명으로서, 각 실시예 또는 비교예의 약제를 4주간 연속 사용하여 준 후, (가) 피부의 탄력·늘어짐에 대한 개선효과 및 (나) 주름·잔주름에 대한 개선 효과에 관해서 이하의 평점으로 판정하여, 30명의 평균점으로 평가하였다.

(가) 피부의 탄력·늘어짐에 대한 개선 효과의 평점

대단히 개선되었다 3 점

개선되었다 2 점

약간 개선되었다 1 점

개선 효과가 없다 0 점

악화되었다 -1 점

(나) 주름·잔주름에 대한 개선 효과의 평점

대단히 개선되었다 3 점

개선되었다 2 점

약간 개선되었다 1 점

개선 효과가 없다 0 점

악화되었다 -1 점

이 실사용 시험의 결과를 표 2B에 나타낸다.

	탄력·늘어짐	얼룩·잔주름
실시예 1B	2.6	2.3
실시예 2B	2.7	2.2
비교예 1B	0.5	0.6

이 결과, 실시예 1B 또는 실시예 2B의 약제를 사용한 군에 있어서는, 어느 쪽의 평가 항목에 관해서도, 비교예 1B의 약제를 사용한 군에 비교하여 뛰어난 개선 효과가 확인되었다.

이상, 4종류의 시험으로부터, 본 발명 생산 촉진제에 의해서, 세포외 매트릭스 성분의 하나인 VII형 콜라겐의 생산이 촉진되어, 또한 이 VII형 콜라겐의 생산 촉진에 의해, 세포외 매트릭스가 활성화되고, 또한 피부 조직도 정상화되어, 또한 피부와 진피 사이에서의 결합력이 강화됨으로써, 본 발명 생산 촉진제는, 피부 노화를 방지하는 효과가 뛰어남이 명백하다.

이하, 여러가지의 처방의 본 발명 생산 촉진제를 처방예로서 개시하지만, 이들의 어느 쪽의 생산 촉진제도, 상기의 실사용 시험에 있어서, 상기 실시예와 동 등의 「피부의 싱싱함을 유지하고」, 「피부의 탄력·늘어짐를 방지하고」, 또한 「피부의 시미 ·잔주름을 방지」한다, 라는 결과가 수득된다.

[처방예 1-1] 유액(1)

배합량(중량%)

스테아린산 6.0

솔비탄 모노스테아린산 에스테르 2.0

폴리옥시에틸렌(20mol) 솔비탄 모노스테아린산 에스테르 1.5

2-(2'-하이드록시-5'-메틸페닐)벤조트리아졸 8.0

프로필렌 글리콜 10.0

사이코 추출물 10.0

방부제·산화방지제 적량

향료 적량

정제수 잔량

〈제법〉

정제수에 프로필렌 글리콜을 가하여, 가열하여 70℃로 유지한다(수상). 한편, 다른 성분을 혼합하여 가열용융하여, 70℃로 유지한다(유상). 상기 수상에, 유상을 교반하면서 첨가하여 예비 유화시킨다. 이어서, 호모믹서로 계의 유화 입자를 세분화하고, 또한 균일화한 후, 잘 교반하면서 급냉하여, 유액을 수득한다.

[처방예 1-2] 유액(2)

배합량(중량%)

스테아린산 6.0

솔비탄 모노스테아린산 에스테르 2.0

폴리옥시에틸렌(20mol) 솔비탄 모노스테아린산 에스테르 1.5

2-(2'-하이드록시-5'-메틸페닐)벤조트리아졸 8.0

프로필렌 글리콜 10.0

사이코사포닌 b2 1.0

방부제·산화방지제 적량

향료 적량

정제수 잔량

〈제법〉

처방예 1-1과 동일하게 제조한다.

[처방예 2-1] 크림(1)

배합량(중량%)

폴리옥시에틸렌(20mol) 세틸 알콜 에테르 1.0

메틸페닐폴리실록산(20cs) 2.0

유동 파라핀 3.0

2-하이드록시-4-메톡시벤조페논 5.0

사이코사포닌 d 0.3

프로필렌 글리콜 5.0

글리세린 2.0

에틸 알콜 15.0

카복시비닐 중합체 0.3

하이드록시프로필 셀룰로즈 0.1

2-아미노메틸프로판올 0.1

방부제 적량

향료 적량

정제수 적량

〈제법〉

정제수에 프로필렌 글리콜을 가하여, 가열하여 70℃로 유지한다(수상). 한편, 다른 성분을 혼합하여 가열용융하여, 70℃로 유지한다(유상). 상기 수상에, 유상을 교반하면서 첨가하여 예비 유화시킨다. 이어서, 호모믹서로 계의 유화입자를 세분화하고, 또한 균일화한 후, 잘 교반하면서 급냉하여, 크림을 수득한다.

[처방예 2-2] 크림(2)

배합량(중량%)

폴리옥시에틸렌(20mol) 세틸 알콜 에테르 1.0

메틸페닐폴리실록산(20cs) 2.0

유동 파라핀 3.0

2-하이드록시-4-메톡시벤조페논 5.0

사이코사포닌 d 0.5

프로필렌 글리콜 5.0

글리세린 2.0

에틸 알콜 15.0

카복시비닐 중합체 0.3

하이드록시프로필 셀룰로즈 0.1

2-아미노메틸프로판올 0.1

방부제 적량

향료 적량

정제수 적량

〈제법〉

처방예 2-1과 동일하게 제조한다.

[처방예 3-1] 일소방지용 미용액(1)

배합량(중량%)

스테아린산 3.0

세틸 알콜 1.0

라놀린 유도체 2.0

유동 파라핀 2.0

2-에틸헥실스테아레이트 2.0

1,3-부틸렌 글리콜 6.0

폴리옥시에틸렌(10mol) 모노올레인산 에스테르 2.0

글리세린 모노스테아린산 에스테르 2.0

트리에탄올아민 1.0

2-하이드록시-4-메톡시벤조페논 3.0

옥틸 p-메톡시 신나메이트 2.0

사이코사포닌 a 0.05

향료 적량

정제수 잔량

〈제법〉

정제수에, 1,3-부틸렌 글리콜 및 트리에탄올아민를 용해하여, 이를 가열하여 70℃로 유지한다(수상). 한편, 다른 성분을 혼합하여, 가열용해하여 70℃로 유지한다(유상). 상기 수상에, 유상을 교반하면서 첨가하여 예비 유화시킨다. 이어서, 호모믹서로 계의 유화입자를 세분화하고, 또한 균일화한 후, 잘 교반하면서 급냉하여, 일소방지용 미용액을 수득한다.

[3-2] 일소방지용 미용액(2)

배합량(중량%)

스테아린산 3.0

세틸 알콜 1.0

라놀린 유도체 2.0

유동 파라핀 2.0

2-에틸헥실스테아레이트 2.0

1,3-부틸렌 글리콜 6.0

폴리옥시에틸렌(10mol) 모노올레인산 에스테르 2.0

글리세린 모노스테아린산 에스테르 2.0

트리에탄올아민 1.0

2-하이드록시-4-메톡시벤조페논 3.0

옥틸 p-메톡시 신나메이트 2.0

사이코사포닌 a 0.001

향료 적량

정제수 잔량

〈제법〉

처방예 3-1과 동일하게 제조한다.

[처방예 4-1] 유화형 화장기초제(W/0 유화형)(1)

배합량(중량%)

유기 변성 몬모릴로나이트 0.5

세틸이소옥타네이트 2.0

옥타메틸사이클로테트라실록산 2.0

데카메틸사이클로펜타실록산 5.0

디메틸폴리실록산(6cs) 5.0

유동 파라핀 3.0

디옥타데실디메틸암모늄 클로라이드 0.2

폴리옥시알킬렌 변성 오가노폴리실록산 5.0

4-3급-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄 0.3

글리세릴 모노-2-에틸헥사노일디파라메톡시 신나메이트 1.0

미립자 산화티탄 5.0

올레일 알콜 0.5

스테아린산 0.5

솔비탄 디이소스테아레이트 4.0

산화방지제 적량

향료 적량

활석 1.5

나일론 파우더 1.0

정제수 잔량

구연산나트륨 0.5

1,3-부틸렌 글리콜 5.0

사이코사포닌 b2 0.5

〈제법〉

정제수에, 구연산나트륨, 1,3-부틸렌 글리콜, 사이코사포닌 b2 및 산화방지제를 가하여, 70℃로 가열 교반한다(수상). 미립자 산화티탄, 활석 및 나일론 파우더를 충분히 혼합 분쇄한다(분말부). 다른 성분을 혼합하여, 가열융해하여 70℃로 유지한다(유상). 상기 수상에 분말부를 첨가하여, 70℃로 호모믹서 처리한다. 또한 유상을 가하여, 호모믹서로 유화 입자를 잘게 균일화한 후, 잘 교반하면서 급냉하여, 유화형 화장기초를 수득한다.

[처방예 4-2] 유화형 화장기초제(W/O 유화형)(2)

배합량(중량%)

유기 변성 몬모릴로나이트 0.5

세틸이소옥타네이트 2.0

옥타메틸사이클로테트라실록산 2.0

데카메틸사이클로펜타실록산 5.0

디메틸폴리실록산(6cs) 5.0

유동 파라핀 3.0

디옥타데실디메틸암모늄 클로라이드 0.2

폴리옥시알킬렌 변성 오가노폴리실록산 5.0

4-3급-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄 0.3

글리세릴 모노-2-에틸헥사노일디파라메톡시 신나메이트 1.0

미립자 산화티탄 5.0

올레일 알콜 0.5

스테아린산 0.5

솔비탄 디이소스테아레이트 4.0

산화방지제 적량

향료 적량

활석 1.5

나일론 파우다 1.0

정제수 잔량

구연산나트륨 0.5

1,3-부틸렌 글리콜 5.0

사이코 추출물 5.0

〈제법〉

처방예 4-1과 동일하게 제조한다.

[처방예 5-1] 파우더 파운데이션(1)

배합량(중량%)

미립자 산화티탄 7.0

활석 40.0

운모 잔량

나일론 파우다 10.0

적산화철 1.0

황산화철 2.0

흑산화철 0.2

디메틸폴리실록산 1.0

팔미틴산-2-에틸헥실 9.0

세스퀴올레인산 솔비탄 1.0

N,N-디메틸 PABA 옥틸 에스테르 0.3

사이코게닌 A 0.2

방부제 적량

산화방지제 적량

향료 적량

〈제법〉

미립자 산화티탄, 활석, 운모, 나일론 파우더, 적산화철, 황산화철, 흑산화철 및 사이코게닌 A를 블라인더로 충분히 분쇄 혼합한다(분말부). 이 분말부에 디메틸폴리실록산, 팔미틴산-2-에틸헥실, 세스퀴올레인산솔비탄, N,N-디메틸 PABA 옥틸 에스테르, 방부제 및 산화방지제를 가한 후, 향료를 분무하여 균일하게 혼합한다. 이를 분쇄기로 분쇄한 후, 용기에 충전, 성형하여, 파우더 파운데이션을 수득한다.

[처방예 5-2] 파우더 파운데이션(2)

배합량(중량%)

미립자 산화티탄 7.0

활석 40.0

운모 잔량

나일론 파우더 10.0

적산화철 1.0

황산화철 2.0

흑산화철 0.2

디메틸폴리실록산 1.0

팔미틴산-2-에틸헥실 9.0

세스퀴올레인산 솔비탄 1.0

N,N-디메틸 PABA 옥틸 에스테르 0.3

사이코게닌 A 5.0

방부제 적량

산화방지제 적량

향료 적량

〈제법〉

처방예 5-1과 동일하게 제조한다.

[처방예 6-1] 유성 파운데이션(1)

배합량(중량%)

미립자 산화티탄 10.0

운모 22.4

카올린 10.0

나일론 파우더 5.0

적산화철 0.5

황산화철 0.5

흑산화철 0.1

유동 파라핀 잔량

디메틸폴리실록산 10.0

세스퀴올레인산 솔비탄 2.0

옥틸메톡시 신나메이트 5.0

사이코게닌 D 0.01

향료 적량

미정질 왁스 6.0

카르나우바 왁스 3.0

〈제법〉

미립자 산화티탄, 운모, 카올린, 나일론 파우다, 적산화철, 황산화철 및 흑산화철을 블라인더로 충분히 혼합 분쇄한다(분말부). 향료 이외의 다른 성분을 혼합하여, 85℃로 가열 융해시킨다(유상). 유상에 상기 분말을 교반하면서 첨가한다. 이어서 향료를 첨가하여, 잘 마쇄 분산한 후, 이를 용기에 충전, 성형하여, 유성 파운데이션을 수득한다.

[처방예 6-2] 유성 파운데이션(2)

배합량(중량%)

미립자 산화티탄 10.0

운모 22.4

카올린 10.0

나일론 파우더 5.0

적산화철 0.5

황산화철 2.0

흑산화철 0.1

유동 파라핀 잔량

디메틸폴리실록산 10.0

세스퀴올레인산 솔비탄 2.0

옥틸메톡시 신나메이트 5.0

사이코게닌 D 0.005

향료 적량

미정질 왁스 6.0

카르나우바 왁스 3.0

〈제법〉

처방예 6-1과 동일하게 제조한다.

본 발명 생산 촉진제는, 세포외 매트릭스, 보다 구체적으로는, 히알루론산 등의 산성 무코다당과, 콜라겐 등의 섬유성 단백질의 생산을 촉진하고, 세포외 매트릭스의 활성화와 피부 조직의 정상화, 또는 표피와 진피 사이의 결합력의 강화에 의한 뛰어난 피부 노화 방지 효과를 발휘할 수 있다.

Claims (10)

1. 부플레우룸(Bupleurum) 속에 속하는 식물로부터의 추출물을 유효 성분으로 하는, 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
2. 제1항에 있어서, 부플레우룸 속에 속하는 식물로부터의 추출물의 원료가 상기 식물의 뿌리부임을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 부플레우룸 속에 속하는 식물이 미시마사이코임을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
4. 사이코사포닌 및/또는 사이코게닌을 유효 성분으로 함을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
5. 제1항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 있어서, 피부외용제임을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
6. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 산성 무코다당 및 섬유성 단백질의 생산을 촉진시킴을 특징으로 하는 세포외 매트릭스 생산 촉진제.
7. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 산성 무코다당의 생산을 촉진시킴을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
8. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 섬유성 단백질의 생산을 촉진시킴을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
9. 제6항 또는 제7항에 있어서, 산성 무코다당이 히알루론산임을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.
10. 제6항 또는 제8항에 있어서, 섬유성 단백질이 콜라겐임을 특징으로 하는 세포외 매트릭스의 생산 촉진제.