KR102213740B1 - 척수성 근위축증을 치료하기 위한 화합물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다. 또한, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물의 제조, 이를 포함하는 약학 조성물 및 약제로서 이의 용도에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure 112016122511069-pct00079

상기 식에서,
A, R1, R2 및 R3은 본원에 정의된 바와 같다.

Description

척수성 근위축증을 치료하기 위한 화합물{COMPOUNDS FOR TREATING SPINAL MUSCULAR ATROPHY}
본 발명은 SMN2 유전자 스플라이싱 조절인자인 화합물, 이의 제조, 이를 포함하는 약학 조성물 및 척수성 근위축증(SMA)의 치료를 위한 약제로서 이의 용도를 제공한다.
특히, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure 112016122511069-pct00001
상기 식에서,
A, R1, R2 및 R3은 본원에 기재된 바와 같다.
척수성 근위축증(SMA)은, 가장 넓은 의미에서, 척수 및 뇌간에서 점진적인 운동 뉴런을 손실하여 근육 약화 및 근위축을 특징으로 하는 선천성 및 후천성 중추신경계(CNS) 질병의 모음을 기술한다. SMA의 가장 흔한 형태는 생존 운동 뉴런(SMN) 유전자에서 돌연변이에 의해 야기되고 성인을 통해 영아에게 영향을 끼치는 광범위한 심각성을 나타낸다(문헌[Crawford and Pardo, Neurobiol. Dis., 1996, 3:97]).
영아 SMA는 이러한 신경퇴행성 질환의 가장 심각한 형태이다. 증상은 근육 약화, 불량한 근육 긴장, 약한 울음소리, 늘어짐 또는 주저앉는 경향, 빨기 또는 뱉기의 어려움, 폐 또는 인후에 분비물 축적, 수유 곤란, 및 기도 감염에 대한 증가된 민감성을 포함한다. 다리는 팔보다 더 약해지는 경향이 있고, 발육 이정표, 예컨대, 머리 들기 또는 바로 앉기를 성취할 수 없다. 일반적으로, 증상이 초기에 나타날수록, 수명은 더 짧아진다. 운동 뉴런 세포가 약화됨으로써, 증상은 곧 나타난다. 질병의 심각한 형태는 치명적이고 모든 형태는 알려진 치료법이 없다. SMA의 과정은 운동 뉴런 세포의 악화 속도 및 생성된 약점의 심각성과 직접 관련된다. 심각한 형태의 SMA를 갖는 영아는 호흡을 유지하는 근육의 약화로 인해 자주 호흡기 질병에 굴복한다. 가벼운 형태의 SMA를 갖는 어린이는 광범위한 의료 지원, 특히 스펙트럼의 더욱 심각한 끝에서 필요할 수 있을지라도, 더 오래 산다. SMA 질환의 임상적 스펙트럼은 하기 5개 군으로 세분되고 있다:
(a) 유형 0 SMA(태내 SMA)는 질병의 가장 심각한 형태이고 출산 전에 시작한다. 보통, 유형 0 SMA의 제 1 증상은 임신 30 내지 36주 사이에 첫 번째로 관찰될 수 있는 태아 운동의 감소이다. 출산 후, 이러한 신생아는 거의 움직이지 않고 연하 및 호흡에 어려움이 있다.
(b) 유형 1 SMA(영아 SMA 또는 베르드니히-호프만 병)는 0 내지 6 개월 사이에 증상을 나타낸다. SMA의 형태는 또한 매우 심각하다. 환자는 결코 앉는 능력을 성취하지 못하고, 통상의 호흡 장치 없이 처음 2년 이내에 사망한다.
(c) 유형 2 SMA(중간체 SMA)는 7 내지 18개월에 개시된다. 환자는 보조 없이 앉는 능력을 성취하지만, 도움없이 서거나 걸을 수 없다. 이러한 군에서 예후는 주로 호흡 관여도에 따른다.
(d) 유형 3 SMA(청소년 SMA 또는 쿠겔베르크-벨란데르 병)는 일반적으로 18개월 후 진단된다. 유형 3 SMA 개인은 그들의 질병 과정 동안 일부 시점에서 독립적으로 걸을 수 있지만 종종 청년기 또는 성인기 동안 휠체어 신세를 지게 된다.
(e) 유형 4 SMA(성인 개시 SMA). 청소년기 후반에 보통 혀, 손 또는 발에서 쇠약이 시작된 후, 신체의 다른 부위로 진행된다. 성인 SMA의 과정은 훨씬 더 느리고 기대 수명에 거의 영향을 끼치지 않거나 전혀 영향을 끼치지 않는다.
SMN 유전자는 염색체 5q에서 복합 영역에 대한 연결기 분석에 의해 맵핑되어 있다. 인간에서, 이러한 영역은 SMN 유전자의 2개의 거의 동일한 복제(copy)를 야기하는 약 50만개 염기 쌍(kb) 역전된 중복을 함유한다. SMA는 2개 염색체에서 유전자(SMN1)의 텔로머 복제의 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 SMN1 유전자 기능의 손실로 야기된다. 그러나, 모든 환자는 유전자(SMN2)의 센트로머 복제를 보유하고, SMA 환자에서 SMN2 유전자의 복제 수는 일반적으로 질병의 중증도와 역으로 관련되어 있고, 즉, 덜 심각한 SMA 환자는 SMN2의 더 많은 복제를 갖는다. 그럼에도 불구하고, SMN2는 엑손 7에서 번역적 사일런트 C-T 돌연변이에 의해 야기된 엑손 7의 교번 스플라이싱으로 인해 SMN1 기능의 상실을 완전히 보상할 수 없다. 결과적으로, 대부분의 전사인자는 SMN2 결핍 엑손 7(Δ7 SMN2)로부터 생성되고, 손상된 기능을 갖는 절두된(truncated) SMN 단백질을 암호화하고 신속하게 분해된다.
snRNP라 명명된 RNA-단백질 복합체의 특이적 부류의 조립을 매개하는 널리 특징된 기능을 갖는 SMN 단백질은, RNA 공정 및 대사작용에서 중요한 역할을 하는 것으로 간주된다. SMN은 운동 뉴런에서 다른 기능을 가질 수 있지만, 운동 뉴런의 선택적인 퇴행을 방지하는 이의 역할은 잘 수립되지 않았다.
대부분의 경우에, SMA는 임상적 증상에 기초하고 SMN1 유전자 시험의 1개 복제의 존재에 의해 진단된다. 그러나, 약 5%의 경우에서, SMA는 SMN1의 비활성화 이외에 일부는 공지되고 다른 것은 아직 정의되지 않은 유전자에서 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 경우에, SMN1 유전자 시험이 실현가능하지 않거나 임의의 이상을 나타내지 않을 때, 근점도 검사(EMG) 및 근육 생검과 같은 다른 시험을 나타낸다.
일부 경우에, SMA 1 유전자 시험이 실현가능하지 않거나, 임의의 이상을 나타내지 않을 때, 근점도 검사(EMG) 및 근육 생검과 같은 다른 시험이 지시될 수 있다.
현재 SMA 환자에 대한 의료 관리는 호흡, 영양 및 재활 관리를 비롯한 지지 요법으로 제한되고, 질병의 근본적인 원인을 설명하기 위해 알려진 약물은 없다. SMA에 대한 현재 치료는 만성 운동 단위 손실의 2차 효과의 예방 및 관리로 이루어진다. 유형 1 SMA에서 주요한 관리 문제는 대부분의 경우에 사망을 야기하는 폐 문제의 예방 및 초기 치료이다. SMA로 고통받는 일부 영아가 성인으로 성장하는 동안, 유형 1 SMA를 가진 이들은 2년 미만의 기대 수명을 갖는다.
SMA의 여러 마우스 모델이 개발되었다. 특히, SMN 델타 엑손 7(Δ7 SMN) 모델(문헌[Le et al., Hum. Mol. Genet., 2005, 14:845])은 SMN2 유전자 및 Δ7 SMN2 cDNA의 여러 복제 둘 다를 전달하고 유형 1 SMA의 많은 표현형 특징을 개괄한다. Δ7 SMN 모델은 SMN2 발현 연구, 및 운동 기능 및 생존의 평가 둘 다를 위해 사용될 수 있다. C/C-대립유전자 마우스 모델[잭슨 래보래토리(Jackson Laboratory) 균주 #008714, 더 잭슨 래보래토리(The Jackson Laboratory), 미국 마인주 바 하버 소재]은 SMN2 전장(FL SMN2) mRNA 및 SMN 단백질 둘 다의 수준이 감소된 마우스의 덜 심각한 SMA 질병 모델을 제공한다. C/C-대립유전자 마우스 표현형은 SMN2 유전자 및 교번 스플라이싱을 진행하지만 명백한 근육 약화를 갖지 않는 하이브리드 mSMN1-SMN2 유전자를 갖는다. C/C-대립유전자 마우스 모델은 SMN2 발현 연구를 위해 사용된다.
SMA의 유전적 기초 및 병리생리학의 개선된 이해의 결과로서, 치료를 위한 여러 전략이 분석되었지만, 어떤 것도 아직 임상에서 성공적으로 입증되지 않았다.
바이러스 전달 벡터를 사용하는 SMA1의 유전자 대체, 및 분화된 SMN1+/+ 줄기 세포를 사용하는 세포 대체는, SMA의 동물 모델에서 효능이 입증되었다. 이러한 접근이 인간에게 적용될 수 있기 전에 신생아 단계에서 안정성 및 면역 반응을 결정하고 치료 개시에 대한 요건을 설명하기 위해 많은 연구가 요구된다.
또한, 배양된 세포에서 SMN2의 교번 스플라이싱의 수정은 치료제로서 합성 핵산을 사용하여 성취되었다: (i) SMN2 pre-mRNA에서 서열 요소를 표적하고 전장 SMN2 mRNA의 생성에 대한 스플라이싱 반응의 결과를 바꾸는 안티센스 올리고뉴클레오티드(문헌[Passini et al., Sci. Transl. Med., 2011, 3:72ra18]; 및 [Hua et al., Nature, 2011, 478:123]), 및 (ii) 스플라이싱 동안 돌연변이체 단편을 대체하고 전장 SMN1 mRNA를 생성하는 완전 작용성 RNA 서열을 제공하는 트랜스-스플라이싱 RNA 분자(문헌[Coady and Lorson, J Neurosci., 2010, 30:126]).
조사 중인 다른 접근법은, SMN 수준을 증가시키거나, 잔여 SMN 기능을 강화시키거나, 이의 손실을 보상하는 약물에 대한 연구를 포함한다. 아미노글리코시드는 이상 정지 코돈의 번역 통독을 촉진하여 Δ7 SMN2 mRNA로부터 생성된 안정화된 SMN 단백질의 발현을 강화시키는 것으로 나타났지만, 불량한 중추신경계 침투를 갖고 반복 투여 후 독성이 있다. 화학치료제, 예컨대, 아클라루비신은 세포 배양시 SMN 단백질을 증가시키는 것으로 나타났지만, 이러한 약물의 독성 프로필은 SMA 환자에서 장기간 사용을 금지하였다. SMA의 치료를 위해 임상 조사 중인 일부 약물은 전사 활성제, 예컨대, 히스톤 데아세틸라제("HDAC") 억제제(예를 들면, 부티레이트, 발프로산 및 하이드록시우레아), 및 SMN2 유전자로부터 전사된 총 RNA의 양을 증가시키는 것이 목적인 mRNA 안정화제[레플리겐(Repligen)으로부터의 mRNA 외피제거(decapping) 억제제 RG3039]를 포함한다. 그러나, HDAC 억제제 또는 mRNA 안정화제의 사용은 SMA의 근본적인 원인을 설명하지 않고 인간에서 잠재적인 안전 문제와 함께 전사 및 유전자 발현시 전반적인 증가를 야기할 수 있다.
대안적인 접근법에서, 신경보호제, 예컨대, 올레속심(Olesoxime)은 조사를 위해 선택되었다. 상기 전략은 SMA의 치료를 위한 SMN을 목표로 하지 않지만, 대신에 신경퇴행으로부터 SMN-결핍 운동 뉴런을 보호하기 위해 조사되고 있다.
SMN의 엑손 7의 SMN2 유전자로부터 전사된 RNA로 포함을 증가시키는 화합물을 확인하기 위해 고안된 시스템 및 이로 확인된 특정한 벤조옥사졸 및 벤조이속사졸 화합물은 국제 특허 출원 WO 2009/151546 A1에 기재되어 있다. Δ7 SMN2 mRNA로부터 안정화된 SMN 단백질을 생성하기 위해 리보솜의 프레임시프트를 야기하는 화합물을 확인하기 위해 고안된 시스템 및 이로 확인된 특정한 이소인돌린온 화합물은 국제 특허 출원 WO 2010/019236 A1 및 WO 2013/119916 A2에 기재되어 있다.
SMA의 유전적 기초 및 병리생리학을 이해하는 과정에도 불구하고, 가장 충격적인 어린이 신경학적 질병 중 하나인 척수성 근위축증의 과정을 변경시키는 화합물을 확인하기 위한 요구가 남아 있다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 분야의 숙련자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있을지라도, 적합한 방법 및 물질이 후술된다.
본원에 언급된 모든 문헌, 특허 출원, 특허 및 다른 참고 문헌은 이의 전체가 참조로서 혼입된다.
본원에 사용된 명명법은, 달리 나타내지 않는 한, IUPAC 체계적 명명법에 기초한다.
본원의 구조에서 탄소, 산소, 황 또는 질소 원자를 표시하는 임의의 개방 원자가는, 달리 나타내지 않는 한, 수소의 존재를 나타낸다.
본원에 기재된 정의는 해당 용어가 단독으로 나타내든지 조합하여 나타내든지에 상관없이 적용된다. 본원에 기재된 정의는 화학적으로 관련한 조합, 예를 들면, "헤테로사이클로알킬아릴", "할로알킬헤테로아릴", "아릴알킬헤테로사이클로알킬" 또는 "알콕시알킬"을 형성하기 위해 첨부될 수 있음이 이해된다. 상기 조합의 마지막 구성원은 분자의 나머지에 결합하는 라디칼이다. 상기 조합의 다른 구성원은 일반적인 순서에 대하여 역순으로 결합 라디칼에 부착되고, 예를 들면, 조합 아미노-C1-7-알킬은 아미노에 의해 치환되는 C1 -7-알킬을 나타내거나, 예를 들면, 조합 아릴알킬헤테로사이클로알킬은 아릴에 의해 치환되는 알킬에 의해 치환되는 헤테로사이클로알킬-라디칼을 나타낸다.
용어 "잔기(moiety)"는 하나 이상의 화학 결합에 의해 또 다른 원자 또는 분자에 부착되어 분자의 일부를 형성하는 원자 또는 화학적으로 결합된 원자의 군을 나타낸다. 예를 들면, 화학식 I의 변수 A, R1, R2 및 R3은 공유 결합에 의해 화학식 I의 중심 구조에 부착되는 잔기를 나타낸다.
치환기의 수를 나타낼 때, 용어 "하나 이상"은 1개 치환기로부터 가능한 가장 많은 수의 치환 범위, 즉, 치환기에 의해 1개 수소 원자의 치환으로부터 모든 수소의 치환까지를 나타낸다.
용어 "임의적인" 또는 "임의적으로"는 후술된 사건 또는 상황이 발생할 필요는 없지만, 사건 또는 상황이 발생하는 경우 및 발생하지 않는 경우를 포함함을 나타낸다.
용어 "치환기"는 모 분자에서 수소 원자를 대체하는 원자 또는 원자의 군을 타나낸다.
용어 "치환된"은 명시된 기가 하나 이상의 치환기를 가짐을 나타낸다. 임의의 기가 다중 치환기를 전달할 수 있고 다양한 가능한 치환기가 제공되는 경우, 상기 치환기는 독립적으로 선택되고 동일할 필요는 없다. 용어 "비치환된"은 명시된 기가 치환기를 갖지 않음을 의미한다. 용어 "임의적으로 치환된"은 명시된 기가 가능한 치환기의 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되거나 비치환됨을 의미한다. 치환기의 수를 나타낼 때, 용어 "하나 이상"은 1개의 치환기로부터 가능한 가장 많은 수의 치환기, 즉, 치환기에 의해 1개 수소의 치환으로부터 모든 수소의 치환까지를 의미한다.
용어 "이 발명의 화합물" 및 "본 발명의 화합물"은 본원에 개시된 바와 같은 화합물 및 이의 입체이성질체, 호변이성질체, 용매화물 및 염(예를 들면, 약학적으로 허용되는 염)을 나타낸다. 본 발명의 화합물이 고체일 때, 이러한 화합물, 및 이의 용매화물 및 염은 상이한 고체 형태, 특히 상이한 결정형으로 존재할 수 있음이 당업자에 의해 이해되고, 이들 모두는 본 발명 및 명시된 화학식의 범주 내에서 의도된다.
용어 "약학적으로 허용되는 염"은 생물학적으로 또는 달리 바람직한 염을 나타낸다. 약학적으로 허용되는 염은 산 및 염기 부가 염 둘 다를 포함한다.
용어 "약학적으로 허용되는 산 부가 염"은 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 탄산, 인산과 같은 무기 산, 및 지방족, 지환족, 방향족, 비지방족, 헤테로사이클릭 및 카보사이클릭으로부터 선택된 유기산 및 유기산의 설폰 부류, 예컨대 포름산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 글루콘산, 락트산, 피루브산, 옥살산, 말산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 아스파르트산, 아스코르브산, 글루탐산, 안트라닐산, 벤조산, 신남산, 만델산, 엠본산, 페닐아세트산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 및 살리실산으로 형성된 약학적으로 허용되는 염을 나타낸다.
용어 "약학적으로 허용되는 염기 부가 염"은 유기 또는 무기 염기로 형성된 약학적으로 허용되는 염을 나타낸다. 허용되는 무기 염기의 예는 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간 및 알루미늄 염을 포함한다. 약학적으로 허용되는 유기 무독성 염기로부터 유도된 염은 1차, 2차 및 3차 아민, 자연 치환된 아민을 비롯한 치환된 아민, 사이클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대, 이소프로필아민, 트라이메틸아민, 다이에틸아민, 트라이에틸아민, 트라이프로필아민, 엔탄올아민, 2-다이에틸아미노에탄올, 트라이메타민, 다이사이클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 하이드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌다이아민, 글루코사민, 에틸글루카민, 테오브로민, 퓨린, 피페리진, 피페리딘, N-에틸피페리딘 및 폴리아민 수지의 염을 포함한다.
본원에 사용된 입체화학 정의 및 관례는 일반적으로 문헌[S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York]; 및 [Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994]을 따른다. 광학적으로 활성인 화합물을 기재하는 경우, 접두사 D 및 L, 또는 R 및 S는 이의 키랄 중심에 대한 분자의 절대 배열을 나타내기 위해 사용된다. 고려중인 키랄 중심에 부착된 치환기는 칸, 인골드 및 그렐로그의 순위 결정 규칙(Sequence Rule of Cahn, Ingold and Prelog)에 따라 등급을 매긴다(문헌[Cahn et al. Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511]). 접두사 D 및 L, 또는 (+) 및 (-)는 화합물에 의해 평면-편광의 회전 기호를 나타내기 위해 사용되고, (-) 또는 L은 화합물이 좌회전성임을 나타낸다. (+) 또는 D로 접두된 화합물은 우회전성이다.
용어 "키랄 중심"은 4개의 상이한 치환기에 결합된 탄소 원자를 나타낸다. 용어 "키랄"은 거울상과 비중첩성을 나타내지만, 용어 "아키랄"은 이의 거울상과 중첩성인 실시양태를 나타낸다. 키랄 분자는 광학적으로 활성이고, 즉, 이들은 평면-편광을 회전하는 능력을 갖는다.
본 발명의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 가질 수 있고 광학적으로 순수한 거울상이성질체, 거울상이성질체의 혼합물, 예를 들면, 라세미체, 광학적으로 순수한 부분입체이성질체, 부분입체이성질체의 혼합물, 부분입체이성질성 라세미체 또는 부분입체이성질성 라세미체의 혼합물의 형태로 존재할 수 있다. 키랄 중심이 화학 구조에 존재할 때마다, 모든 입체이성질체는 본 발명에 의해 포괄되는 키랄 중심과 회합됨이 의도된다.
용어 "할로", "할로겐" 및 "할라이드"는 본원에서 상호교환적으로 사용되고, 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도를 나타낸다. 할로겐의 일 특정한 예는 플루오로이다.
용어 "알킬"은 1 내지 12개의 탄소 원자의 1가 선형 또는 분지형 포화된 탄화수소 기를 나타낸다. 특정 실시양태에서, 알킬은 1 내지 7개의 탄소 원자를 갖고, 더욱 특정 실시양태에서 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는다. 알킬의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소-부틸, s-부틸 또는 t-부틸을 포함한다. 알킬에 대한 특정한 예는 메틸 및 에틸이다.
용어 "할로알킬"은 알킬 기의 하나 이상의 수소 원자가 동일하거나 상이한 할로겐 원자, 특히 플루오로 원자로 대체되는 알킬 기를 나타낸다. 할로알킬의 예는 모노플루오로-, 다이플루오로- 또는 트라이플루오로-메틸, -에틸 또는 -프로필, 예를 들면, 3,3,3-트라이플루오로프로필, 2-플루오로에틸, 2,2,2-트라이플루오로에틸, 플루오로메틸 또는 트라이플루오로메틸 등을 포함한다. 용어 "퍼할로알킬"은 알킬 기의 모든 수소 원자가 동일하거나 상이한 할로겐 원자로 대체되는 알킬 기를 나타낸다.
용어 "바이사이클릭 고리 시스템"은 공통의 단일 또는 이중 결합을 통해(융합된 바이사이클릭 고리 시스템), 일련의 3개 이상의 공통의 원자를 통해(가교된 바이사이클릭 고리 시스템) 또는 공통의 단일 원자를 통해(스피로 바이사이클릭 고리 시스템) 서로 융합되는 2개의 고리를 나타낸다. 바이사이클릭 고리 시스템은 포화되거나, 부분적으로 불포화되거나, 불포화되거나, 방향족일 수 있다. 바이사이클릭 고리 시스템은 N, O 및 S로부터 선택된 헤테로 원자를 포함할 수 있다.
용어 "사이클로알킬"은 3 내지 10개의 고리 탄소 원자의 포화된 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 탄화수소 기를 나타낸다. 특정 실시양태에서, 사이클로알킬은 3 내지 8개의 고리 탄소 원자의 1가 포화된 모노사이클릭 탄화수소 기를 나타낸다. 바이사이클릭은 공동으로 하나 이상의 탄소 원자를 갖는 2개의 포화된 카보사이클로 이루어짐을 의미한다. 특정한 사이클로알킬 기는 모노사이클릭이다. 모노사이클릭 사이클로알킬의 예는 사이클로프로필, 사이클로부탄일, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로헵틸이다. 바이사이클릭 사이클로알킬에 대한 예는 바이사이클로[2.2.1]헵탄일 또는 바이사이클로[2.2.2]옥탄일이다. 사이클로알킬의 일 특정한 예는 사이클로프로필이다.
용어 "헤테로사이클로알킬"은 N, O 및 S로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로 원자를 포함하고 나머지 고리 원자가 탄소인, 3 내지 9개 고리 원자의 포화된 또는 부분적으로 불포화된 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 트라이사이클릭 고리 시스템을 나타낸다. 특정 실시양태에서, 헤테로사이클로알킬은 N, O 및 S로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로 원자를 포함하고 나머지 고리 원자가 탄소인, 4 내지 7개 고리 원자의 1가 포화된 모노사이클릭 고리 시스템이다. 모노사이클릭 포화된 헤테로사이클로알킬에 대한 예는 아지리딘일, 옥시란일, 아제티딘일, 옥세탄일, 피롤리딘일, 테트라하이드로푸란일, 테트라하이드로티엔일, 피라졸리딘일, 이미다졸리딘일, 옥사졸리딘일, 이속사졸리딘일, 티아졸리딘일, 피페리딘일, 테트라하이드로피란일, 테트라하이드로티오피란일, 피페라진일, 모폴린일, 티오모폴린일, 1,1-다이옥소-티오모폴린-4-일, 아제판일, 다이아제판일, 호모피페라진일 또는 옥사제판일이다. 바이사이클릭 포화된 헤테로사이클로알킬에 대한 예는 8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 퀴누클리딘일, 8-옥사-3-아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 9-아자-바이사이클로[3.3.1]논일, 3-옥사-9-아자-바이사이클로[3.3.1]논일 또는 3-티아-9-아자-바이사이클로[3.3.1]논일이다. 부분적으로 불포화된 헤테로사이클로알킬의 예는 다이하이드로푸릴, 이미다졸린일, 다이하이드로-옥사졸릴, 테트라하이드로-피리딘일 또는 다이하이드로피란일이다. 헤테로사이클로알킬의 특정한 예는 1,4-다이아제판일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일, 피페리딘일, 피페라진일 및 피롤리딘일이다. 헤테로사이클로알킬의 더욱 특정한 예는 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일 및 피페라진일이다.
용어 "N-헤테로사이클로알킬"은 하나 이상의 질소 고리 원자를 함유하는 헤테로사이클로알킬 라디칼을 나타내고, 분자의 나머지에 대한 헤테로사이클로알킬 라디칼의 부착점은 질소 고리 원자를 통한다. N-헤테로사이클로알킬의 특정한 예는 1,4-다이아제판일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일, 피페리딘일, 피페라진일 및 피롤리딘일이다. N-헤테로사이클로알킬의 더욱 특정한 예는 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일 및 피페라진일이다.
화합물에 관하여 용어 "염기도"는 짝산의 산도 상수의 음성 십진법 로그값에 의해 본원에 표시된다(pKa = -log Ka). 짝산의 pKa가 클수록, 염기는 더 강하다(pKa + pKb = 14). 이 경우, 원자 또는 작용기는, 양성자를 채택하기에 적합한 경우, 및 이의 짝산의 계산된 pKa가 7 이상인 경우, 더욱 특히 이의 짝산의 계산된 pKa가 7.8 이상인 경우, 더욱 특히 이의 짝산의 계산된 pKa가 8 이상인 경우, "염기성"을 나타낸다. pKa 값은 문헌[F. Milletti et al., J. Chem. Inf. Model(2007) 47:2172-2181]에 기재된 바와 같이 가상 실험(in - silico)으로 계산된다.
용어 "알킬렌"은 1 내지 7개의 탄소 원자의 2가 선형 포화된 탄화수소 기 또는 3 내지 7개의 탄소 원자의 2가 분지형 포화된 탄화수소 기를 나타낸다. 알킬렌 기의 예는 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 2-메틸프로필렌, 부틸렌, 2-에틸부틸렌, 펜틸렌, 헥실렌을 포함한다. 알킬렌에 대한 특정한 예는 에틸렌, 프로필렌 및 부틸렌이다.
용어 "아미노"는 화학식 -NR'R"(여기서, R' 및 R"은 독립적으로 수소, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴이거나, 본원에 기재된 바와 같다)의 기를 나타낸다. 다르게는, R' 및 R"은 이들이 부착된 질소와 함께 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있다. 용어 "1차 아미노"는 R' 및 R" 둘 다가 수소인 기를 나타낸다. 용어 "2차 아미노"는 R'이 수소이고, R"이 수소가 아닌 기인 기를 나타낸다. 용어 "3차 아미노"는 R' 및 R" 둘 다가 수소가 아닌 기를 나타낸다. 특정한 2차 및 3차 아민은 메틸아민, 에틸아민, 프로필아민, 이소프로필아민, 페닐아민, 벤질아민, 다이메틸아민, 다이에틸아민, 다이프로필아민 및 다이이소프로필아민이다.
용어 "활성 약학 성분"(또는 "API")는 특정한 생물학적 활성을 갖는 약학 조성물내 화합물 또는 분자를 나타낸다.
용어 "약학 조성물" 및 "약학 제형"(또는 "제형")은 상호교환적으로 사용되고, 이를 필요로 하는 포유동물, 예를 들면, 인간에게 투여되는 치료 효과량의 활성 약학 성분과 함께 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 혼합물 또는 용액을 나타낸다.
용어 "약학적으로 허용되는"은 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로 또는 달리 바람직한 약학 조성물을 제조하는데 유용하고, 수의학 및 인간 약학 용도에 허용되는 물질의 속성을 나타낸다.
용어 "약학적으로 허용되는 부형제", "약학적으로 허용되는 담체" 및 "치료 불활성인 부형제"는 상호교환적으로 사용될 수 있고, 치료 활성이 없고 투여된 대상체에게 무독성인 약학 조성물에서 임의의 약학적으로 허용되는 성분, 예컨대 약학 생성물을 제형화하는데 사용된 분해제, 결합제, 충전제, 용매, 완충제, 긴장제, 안정화제, 산화방지제, 계면활성제, 담체, 희석제 또는 활택제를 나타낸다.
용어 "개인" 또는 "대상체"는 포유동물을 나타낸다. 포유동물은, 비제한적으로, 가축(예를 들면, 소, 양, 고양이, 개 및 말), 영장류(예를 들면, 인간 및 비인간 영장류, 예컨대, 원숭이), 토끼 및 설치류(예를 들면, 마우스 및 래트)를 포함한다. 특정 실시양태에서, 개인 또는 대상체는 인간이다.
용어 "치료 효과량"은 대상체에 투여될 때, (i) 특정한 질병, 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하거나, (ii) 특정한 질병, 질환 또는 장애의 하나 이상의 증상을 약화시키거나 완화하거나 제거하거나, (iii) 본원에 기재된 특정한 질병, 질환 또는 장애의 하나 이상의 증상의 개시를 억제하거나 지연시키는, 본 발명의 화합물 또는 분자의 양을 나타낸다. 치료 효과량은 화합물, 치료되는 질병 상태, 치료된 질병의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적인 건강, 투여 경로 및 형태, 의사 또는 수의사의 판단, 및 다른 인자에 따라 달라진다.
용어 "치료하는" 또는 질병 상태의 "치료"는 질병 상태를 억제하는, 즉, 질병 상태 또는 이의 임상 증상의 발달을 저지하거나, 질병 상태를 완화하는, 즉, 질병 상태 또는 이의 임상 증상의 일시적 또는 영구적 회귀를 야기함을 포함한다.
용어 "척수성 근위축증"(또는 SMA)은 2개 염색체에서 SMN1 유전자의 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는 질병에 관한 것이다. SMA의 증상은 근육 약화, 불량한 근육 긴장, 약한 울음소리, 약한 기침, 늘어짐 또는 주저앉는 경향, 빨기 또는 뱉기의 어려움, 호흡 곤란, 폐 또는 인후에 분비물 축적, 땀에 젖은 손으로 주먹 쥐기, 혀의 깜빡거림/떨림, 종종, 심지어 누워 있을 때 한쪽으로 기울어지는 머리, 팔보다 더 약해지는 경향이 있는 다리, 종종 "개구리 다리" 자세로 추정되는 다리, 수유 곤란, 기도 감염에 대한 민감성 증가, 장/방광 약화, 정상보다 적은 체중, 지지 없이 앉기 불가능, 걷기 실패, 기어가기 실패, 및 긴장저하, 무반사, 및 앞쪽 소마 세포의 손실과 관련된 다발성 선천적 경축(관절구축)을 포함한다.
용어 "척수성 근위축증(SMA)을 치료하는" 또는 "척수성 근위축증(SMA)의 치료"는 하기 효과 중 하나 이상을 포함한다: (i) SMA 중증도의 감소 또는 개선; (ii) SMA 개시의 지연; (iii) SMA 진행의 억제; (iv) 대상체 입원 감소; (v) 대상체의 입원 기간 감소; (vi) 대상체 생존 증가; (vii) 대상체 삶의 질 개선; (viii) SMA와 관련된 증상 수 감소; (ix) SMA와 관련된 하나 이상의 증상의 중증도 감소 또는 이의 개선; (x) SMA와 관련된 증상의 지속 감소; (xi) SMA와 관련된 증상의 재발 억제; (xii) SMA의 증상 발달 또는 이의 개시 억제; 및/또는 (xiii) SMA와 관련된 증상 진행 억제. 더욱 특히, 용어 "SMA를 치료하는"은 하기 유리한 효과 중 하나 이상을 나타낸다: (i) 근육 강도 손실의 감소; (ii) 근육 강도 증가; (iii) 근위축 감소; (iv) 운동 기능 손실의 감소; (v) 운동 뉴런 증가; (vi) 운동 뉴런 손실의 감소; (vii) 퇴행으로부터 SMN 결핍 운동 뉴런의 보호; (viii) 운동 기능 증가; (ix) 폐 기능 증가; 및/또는 (x) 폐 기능 손실의 감소. 더욱 상세하게, 용어 "SMA를 치료하는"은 도움받지 않고 앉기 위한 인간 영아 또는 인간 유아를 위한, 또는 도움받지 않고 서거나, 도움받지 걷거나, 도움받지 않고 달리거나, 도움받지 않고 호흡하거나, 도움받지 않고 취침 동안 돌거나, 도움받지 않고 삼키기 위한 인간 영아, 인간 유아, 인간 어린이 또는 인간 성인을 위한, 기능적 능력 또는 이의 유지를 나타낸다.
용어 "전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도"(또는 "EC1 .5x 꼬마유전자")는 비히클-처리된 세포의 양과 비교하여 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 양을 1.5배 이상 수준으로 증가시키는데 효과적인 시험 화합물의 농도로서 정의된다.
용어 "SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도"(또는 "EC1 .5x SMN 단백질")는 비히클 대조군으로부터 생성된 양과 비교하여 SMA 환자 섬유아 세포에서 SMN 단백질의 양을 1.5배 생성하는데 효과적인 시험 화합물의 농도로서 정의된다.
더욱 상세히, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure 112016122511069-pct00002
상기 식에서,
R1은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R2는 수소, 시아노, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
R3은 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
A는 N-헤테로사이클로알킬 또는 NR12R13이되, N-헤테로사이클로알킬은 1 또는 2개의 질소 고리 원자를 포함하고 R14로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환되고;
R12는 1개의 질소 고리 원자를 포함하고 R14로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 헤테로사이클로알킬이고;
R13은 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
R14는 수소, C1 -7-알킬, 아미노, 아미노-C1 -7-알킬, C3 -8-사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 R14는 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하되,
A가 오직 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 N-헤테로사이클로알킬인 경우, 하나 이상의 R14 치환기는 아미노 또는 아미노-C1 -7-알킬이다.
본 발명의 특정 실시양태는 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염이다.
또한, 본원에 개시된 바와 같은 특정한 A, R1, R2 또는 R3에 관한 모든 실시양태는 본원에 개시된 바와 같은 또 다른 A, R1, R2 또는 R3과 관련한 임의의 다른 실시양태와 조합될 수 있음이 이해되어야 한다.
본 발명의 특정 실시양태는,
R1이 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R2가 수소, 시아노, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
R3이 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
A가, 1 또는 2개의 질소 고리 원자를 포함하고 R14로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 N-헤테로사이클로알킬이고;
R14가 수소, C1 -7-알킬, 아미노, 아미노-C1 -7-알킬, C3 -8-사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 R14는 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하되,
A가 오직 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 N-헤테로사이클로알킬인 경우, 하나 이상의 R14 치환기는 아미노 또는 아미노-C1 -7-알킬인, 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R1이 C1 -7-알킬, 특히 메틸인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R2가 수소 또는 C1 -7-알킬, 특히 수소 또는 메틸인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R3이 수소 또는 C1 -7-알킬, 특히 수소 또는 메틸인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R12가 R14로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 피페리딘일인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다
본 발명의 특정 실시양태는 R13이 수소 또는 C1 -7-알킬, 특히 수소 또는 메틸인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R14가 C1 -7-알킬 및 헤테로사이클로알킬로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 R14는 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R14가 메틸, 에틸 및 피롤리딘일로부터 독립적으로 선택되거나, 2개의 R14는 함께 에틸렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가 1 또는 2개 질소 원자를 포함하고 R14로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된, 포화된 모노사이클릭- 또는 바이사이클릭 N-헤테로사이클로알킬인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 본원에 정의된 바와 같이 A에서 N-헤테로사이클로알킬 또는 R12에서 헤테로사이클로알킬이 R14로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기로 치환된 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 본원에 정의된 바와 같이 A에서 N-헤테로사이클로알킬이, 1개 고리 질소 원자가 염기성임을 추가 특징으로 하는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는
A가
Figure 112019064818461-pct00003
또는
Figure 112019064818461-pct00004
이고;
X가 N 또는 CH이고;
R4가 수소, C1 -7-알킬 또는 -(CH2)m-NR9R10이고;
R5가 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R6이 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R7이 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R8이 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R9 및 R10이 독립적으로 수소, C1 -7-알킬 및 C3 -8-사이클로알킬로부터 선택되고;
R13이 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
n이 0, 1 또는 2이고;
m이 0, 1, 2 또는 3이거나;
R4 및 R5가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R4 및 R7이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R5 및 R6이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하거나;
R5 및 R7이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R5 및 R9가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R7 및 R8이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하거나;
R7 및 R9가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R9 및 R10이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하되,
X가 CH인 경우, R4는 -(CH2)m-NR9R10이고;
X가 N이고, R4가 -(CH2)m-NR9R10인 경우, m은 2 또는 3인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는
A가
Figure 112019064818461-pct00005
이고;
X가 N 또는 CH이고;
R4가 수소, C1 -7-알킬 또는 -(CH2)m-NR9R10이고;
R5가 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R6이 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R7이 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R8이 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R9 및 R10이 독립적으로 수소, C1 -7-알킬 및 C3 -8-사이클로알킬로부터 선택되고;
n이 0, 1 또는 2이고;
m이 0, 1, 2 또는 3이거나;
R4 및 R5가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R4 및 R7이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R5 및 R6이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하거나;
R5 및 R7이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R5 및 R9가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R7 및 R8이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하거나;
R7 및 R9가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
R9 및 R10이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하되,
X가 CH인 경우, R4는 -(CH2)m-NR9R10이고;
X가 N이고, R4가 -(CH2)m-NR9R10인 경우, m은 2 또는 3인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
뇌 침투는, R4, R5, R6, R7 및 R8 중 하나 이상이 수소가 아닐 때 개선됨이 밝혀졌다.
본 발명의 특정 실시양태에서, R4, R5, R6, R7 및 R8 중 하나 이상은 수소가 아니다.
본 발명의 특정 실시양태는 X가 N인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 n이 1인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R4가 수소, 메틸 또는 -(CH2)m-NR9R10, 더욱 특히 수소인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R5가 수소, 메틸 또는 에틸, 더욱 특히 메틸인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R6이 수소 또는 메틸, 더욱 특히 수소인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R7이 수소 또는 메틸인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R8이 수소인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 m이 0인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R4 및 R5가 함께 프로필렌을 형성하는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R5 및 R6이 함께 에틸렌을 형성하는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 R9 및 R10이 함께 부틸렌을 형성하는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure 112019064818461-pct00080
상기 식에서,
R4, R5, R6, R7, R8 및 R13은 본원에 정의된 바와 같고;
R11은 수소 또는 C1 -7-알킬이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure 112016122511069-pct00007
상기 식에서,
R4, R5, R6, R7 및 R8은 본원에 정의된 바와 같고;
R11은 수소 또는 C1 -7-알킬이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가, 각각이 본원에 정의된 바와 같이 R14로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된, 피페라진일, 다이아제판일, 피롤리딘일 및 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가, 각각이 본원에 정의된 바와 같이 R14로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의적으로 치환된, 피페라진-1-일, 1,4-다이아제판-1-일, 피롤리딘-1-일 및 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가 NR12R13이고, R12 및 R13은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가
Figure 112019064818461-pct00008
이고, R4, R5, R6, R7, R8 및 R13은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가
Figure 112019064818461-pct00009
이고, R13은 수소 또는 메틸인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 A가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure 112016122511069-pct00010
본 발명의 특정 실시양태는 A가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure 112016122511069-pct00011
.
본 발명의 특정 실시양태는 R1이 메틸이고, R2가 수소 또는 메틸이고, R3이 수소이고, A가
Figure 112016122511069-pct00012
인 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 화학식 I의 특정한 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염이다:
2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-(4-메틸피페라진-1-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aS)-8a-메틸-1,3,4,6,7,8-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aR)-8a-메틸-1,3,4,6,7,8-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(1,4-다이아제판-1-일)-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(1,4-다이아제판-1-일)-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aS)-8a-메틸-1,3,4,6,7,8-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aR)-8a-메틸-1,3,4,6,7,8-헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-9-메틸-7-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-9-메틸-7-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(3S,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(3S,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온; 및
7-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온.
본 발명의 화학식 I의 특정한 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염이다:
7-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-9-메틸-7-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온; 및
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온.
화학식 VI의 화합물은 화학식 I의 화합물의 제조에서 중간체로서 적합하다.
본 발명의 또 다른 실시양태는 하기 화학식 VI의 화합물 및 이의 염에 관한 것이다:
[화학식 VI]
Figure 112016122511069-pct00013
상기 식에서,
R1, R2 및 R3은 본원에 기재된 바와 같고;
Y는 할로겐 또는 트라이플루오로메탄설포네이트이다.
본 발명의 특정 실시양태는 Y가 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도 또는 트라이플루오로메탄설포네이트, 특히 플루오로인 화학식 VI의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정한 화학식 VI의 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 및 이의 염이다:
7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온;
7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온; 및
2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온.
제조 방법
상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 당해 분야에 공지된 표준 방법에 따라 제조될 수 있다.
반응식 1에 도시된 바와 같이, 시판중인 화학식 II의 아미노-피리딘을 말론산 에스터와 반응시켜 화학식 III(이때 Y 및 R3은 본원에 기재된 바와 같고, R은 C1-2-알킬, 특히 메틸이다)의 중간체를 수득할 수 있다. 이어서, 화학식 III의 화합물을 염소화제(예컨대, POCl3 등)로 처리하여 화학식 IV의 화합물을 수득한다. 이어서, 화학식 IV의 화합물을 촉매[예컨대, (1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센)팔라듐(II) 다이클로라이드(Pd(dppf)Cl2) 등] 및 염기(예컨대, K2CO3 등)의 존재 하에 적합한 용매(예컨대, DMF 등) 중에서 화학식 V(여기서, R1 및 R2는 본원에 기재된 바와 같고, Z는 B(OH)2 또는 C1 -7-알킬 보론산 에스터, 예컨대, 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일이다)의 화합물과 스즈키 교차-커플링 반응시켜 화학식 VI의 화합물을 수득한다. 최종적으로, 화학식 VI의 화합물을 용매[예를 들면, 다이메틸 설폭사이드(DMSO), N-메틸피롤리돈(NMP), 또는 다이메틸포름아미드(DMF)] 중에서 화합물 M-A와 하기 (a) 또는 (b)로 반응시켜 화학식 I(여기서, A는 본원에 정의된 바와 같고, M은 수소, 나트륨 또는 칼륨, 특히 수소이고 A의 질소 원자를 통해 A에 연결된다)의 화합물을 수득한다:
a) 80℃ 내지 200℃의 온도에서 가열하여 방향족 친핵성 치환 반응(특히 Y가 플루오로인 경우); 또는
b) 20℃ 내지 100℃의 온도에서 가열하여 팔라듐 촉매[예를 들면, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(Pd(PPh3)4) 또는 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(Pd(dba)2]의 존재 하에 부흐발트-하르트비크(Buchwald-Hartwig) 아미노화 반응.
[반응식 1]
Figure 112016122511069-pct00014
일 실시양태에서, 본 발명은 화학식 VI의 화합물을 용매(예를 들면, 다이메틸 설폭사이드(DMSO), N-메틸피롤리돈(NMP), 또는 다이메틸포름아미드(DMF)) 중에서 화합물 M-A와 하기 (a) 또는 (b)로 반응시키는 단계를 포함하는, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I(여기서 A, Y, R1, R2 및 R3은 본원에 정의된 바와 같고, M은 수소, 나트륨 또는 칼륨, 특히 수소이고 A의 질소 원자를 통해 A에 연결된다)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 제조 방법에 관한 것이다:
a) 80℃ 내지 200℃의 온도에서 가열하여 방향족 친핵성 치환 반응(특히 Y가 플루오로인 경우); 또는
b) 20℃ 내지 100℃의 온도에서 가열하여 팔라듐 촉매[예를 들면, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(Pd(PPh3)4) 또는 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(Pd(dba)2]의 존재 하에 부흐발트-하르트비크(Buchwald-Hartwig) 아미노화 반응.
Figure 112016122511069-pct00015
본 발명의 특정 실시양태는 상기 기재된 화학식 VI의 화합물을 화학식 M-A의 화합물과 용매 중에서 가열하여 방향족 친핵성 치환 반응시킴을 포함하는, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I(여기서 A, R1, R2, R3 및 Y는 상기 정의된 바와 같고, M은 수소, 나트륨 또는 칼륨이고 A의 질소 원자를 통해 A에 연결된다)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 방향족 친핵성 치환 반응을 80℃ 내지 200℃의 온도에서 수행하는, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 방향족 친핵성 치환 반응의 용매가 다이메틸 설폭사이드(DMSO), N-메틸피롤리돈(NMP) 및 다이메틸포름아미드(DMF)로부터 선택되는, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 M이 수소인, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 제조 방법에 관한 것이다.
특히, 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 본원의 실시예에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다.
약학 조성물
또 다른 실시양태는 본 발명의 화합물 및 치료 불활성인 담체, 희석제 또는 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물 또는 약제, 및 상기 조성물 및 약제의 제조를 위한 본 발명의 화합물의 사용 방법을 제공한다.
조성물은 우수한 의료 실시와 일치하는 방식으로 제형화되고 복용되고 투여된다. 이와 관련한 고려 요건은, 치료되고 있는 특정한 질환, 치료되고 있는 특정한 포유동물, 개인 환자의 임상 상태, 질환의 원인, 제제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 일정 및 의사에게 공지된 다른 인자를 포함한다.
본 발명의 화합물은, 경구, 국소(구강 및 설하 포함), 직장, 질, 경피 패치, 비경구, 피하, 복강내, 폐내, 피내, 척추강내, 경막외 및 비강내를 비롯한 임의의 적합한 방식으로 투여될 수 있고, 국소 치료가 바람직한 경우, 병변 내 투여될 수 있다. 비경구 투입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복강내 또는 피하 투여를 포함한다.
본 발명의 화합물은 임의의 편리한 투여 형태, 예를 들면, 정제, 분말, 캡슐, 용액, 분산액, 현탁액, 시럽, 스프레이, 좌제, 젤, 에멀젼, 패치 등으로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 약학 제조에서 통상적인 성분, 예를 들면, 희석제, 담체, pH 개질제, 보존제, 용해제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미료, 착색제, 향미료, 삼투압을 변화시키는 염, 완충제, 차폐제, 산화방지제 및 추가 활성제를 포함할 수 있다. 상기 조성물은 또한 여전히 다른 치료 가치있는 물질을 포함한다.
전형적인 제형은, 본 발명의 화합물 및 담체 또는 부형제를 혼합하여 제조된다. 적합한 담체 및 부형제는 당업자에게 널리 공지되어 있고, 예를 들면, 문헌[Ansel H.C. et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (2004) Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia]; [Gennaro A.R. et al., Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2000) Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia]; 및 [Rowe R.C, Handbook of Pharmaceutical Epicient (2005) Pharmaceutical Press, Chicago]에 상세히 기재되어 있다. 또한, 제형은 하나 이상의 완충제, 안정화제, 계면활성제, 습윤제, 활택제, 유화제, 현탁제, 보존제, 산화방지제, 불투명화제, 활주제, 가공보조제, 착색제, 감미료, 방향제, 향미제, 희석제 및 약물(즉, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물)의 우아한 제시를 제공하거나 약학 생성물(즉, 약제)의 제조에 도움을 주기 위한 다른 공지된 첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물이 투여될 수 있는 투여량은 광범위한 제한 내에서 달라질 수 있고, 물론 각각의 특정한 경우에 개인 요건에 맞출 것이다. 일반적으로, 경구 투여의 경우에, 필요한 경우 상한치가 초과될 수 있을지라도, 1 인당 약 0.01 내지 100 mg의 화학식 I의 화합물의 일일 투여량이 적합할 수 있다.
적합한 경구 투여 형태의 예는 약 30 내지 90 mg의 무수 락토스, 약 5 내지 40 mg의 나트륨 크로스카멜로스, 약 5 내지 30 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP) K30 및 약 1 내지 10 mg의 마그네슘 스테아레이트로 제형화된 본 발명의 화합물을 약 100 mg 내지 500 mg 포함하는 정제이다. 분말화된 성분을 먼저 함께 혼합한 후 PVP의 용액과 혼합한다. 생성된 조성물을 건조하고 과립화하고 마그네슘 스테아레이트와 혼합하고 통상의 기기를 사용하여 정제로 압축할 수 있다.
에어로졸 제형의 예는, 적합한 완충 용액, 예를 들면 포스페이트 완충액 중에 예를 들면 10 내지 100 mg의 본 발명의 화합물을 용해하고, 바람직한 경우 긴장제, 예를 들면 염, 예컨대 나트륨 클로라이드를 첨가하여 제조될 수 있다. 상기 용액은 예를 들면, 0.2 μm 필터를 사용하여 여과하여 불순물 및 오염물이 제거될 수 있다.
용도
상기 기재된 바와 같이, 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 가치있는 약리 특성을 갖고, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA 내에 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 포함을 강화함으로써, 이를 필요로 하는 인간 대상체에서 SMN 단백질의 발현을 증가시킴이 밝혀졌다.
본 발명의 화합물은, 단독으로 또는 다른 약물과 조합하여, SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위해 사용될 수 있다. 이러한 질병은 비제한적으로 척수성 근위축증(SMA)을 포함한다.
본 발명의 특정 실시양태는 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용되는 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 SMA의 치료 또는 예방을 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용되는 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 치료 활성 물질로서 사용하기 위한, 특히 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용된 염에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 대상체에게 투여함을 포함하는, SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한 방법에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조를 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다. 상기 약제는 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함한다.
실시예
본 발명은 하기 실시예를 참조하여 더욱 완전히 이해될 것이다. 그러나 실시예는 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
사용된 약어
ACN: 아세토니트릴;
CH2Cl2: 다이클로로메탄(DCM);
DIPEA: 다이이소프로필 에틸아민;
DMA: 다이메틸 아세트아미드;
TEA: 트라이에틸아민;
RT: 실온;
B2(pin)2: 비스(피나콜레이토)다이보론;
Pd(dppf)Cl2: (1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센)팔라듐(II) 다이클로라이드;
PPTS: 피리디늄 p-톨루엔설포네이트.
중간체 1
7- 플루오로 -2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
a) 2-클로로-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00016
2-아미노-5-플루오로피리딘(11.20 g, 0.10 mol) 및 다이메틸 말로네이트(57.0 mL, 0.50 mol)의 혼합물을 230℃에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 침전물을 여과하고, ACN으로 3회 세척하여 암색 고체로서 7-플루오로-2-하이드록시-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(14 g)을 수득하고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS m/z 181.3 [M+H]+.
POCl3(50 mL) 및 DIPEA(13.3 mL, 77 mmol) 중 조질 7-플루오로-2-하이드록시-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(14 g, 약 77 mmol)의 암색 혼합물을 110℃에서 15 시간 동안 가열하였다. 용매를 제거하고, 암색 잔사를 빙수로 처리하고, 물로 3회 세척하고 건조하여 갈색 고체를 수득하였다. 조질 갈색 고체를 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)하여 황색 고체로서 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(9.84 g, 50%, 2 단계)을 수득하였다. MS m/z 199.2 [M+H]+.
b) 2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진
Figure 112016122511069-pct00017
다이옥산(50 mL) 중 6-클로로-2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진(900 mg, 5.37 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.36 g, 5.37 mmol, 1.0 당량), KOAc(1.05 g, 10.7 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(393 mg, 0.54 mmol)의 혼합물을 탈기하고 N2 하에 95℃에서 가열하였다. 15 시간 후, 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 진공에서 농축하여 2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진을 수득하고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
c) 7- 플루오로 -2- (2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일) 피리도[1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00018
ACN(36 mL) 중 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(750 mg, 3.78 mmol)의 용액에 2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진(1.17 g, 4.53 mmol, 1.2 당량), Pd(Ph3P)4(218 mg, 0.189 mmol, 0.05 당량), 및 K2CO3(3.78 mL, 7.55 mmol, 2.0 당량)의 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 아르곤 하에 105℃에서 밤새 가열하였다. 반응 생성물을 실온에서 냉각하고, 여과하였다. 침전물을 Et2O로 세척한 후 물로 세척하고, 진공에서 건조하여 연갈색 고체로서 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(250 mg, 22%)을 수득하였다. MS m/z 296.1 [M+H]+.
중간체 2
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7- 플루오로 - 피리도[1,2-a]피리미딘 -4-온
a) 2,8-다이메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진
Figure 112016122511069-pct00019
밀봉된 플라스크 내에서, 3,6-다이클로로-4-메틸피리다진(27 g, 161 mmol)을 수성 암모니아(25%, 300 mL)에 현탁하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 48 시간 동안 가열하였다(1 시간 후 용액으로 돌아옴). 실온으로 냉각한 후, 반응 생성물을 CH2Cl2에 붓고, 유기 상을 분리하고, Na2SO4로 건조하고 진공하에 농축하여 구조이성질체의 혼합물(22.4 g)로서 6-클로로-4-메틸-피라진-3-아민 및 6-클로로-5-메틸-피라진-3-아민을 수득하고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
구조이성질체의 혼합물인 6-클로로-4-메틸-피라진-3-아민 및 6-클로로-5-메틸-피라진-3-아민(22.4 g)을 2-프로판올(300 mL)에 현탁하였다. 1-브로모-2,2-다이메톡시프로판(36.0 g, 26.6 mL, 193 mmol, 1.2 당량) 및 PPTS(2.96 g, 11.6 mmol, 0.0725 당량)를 첨가하고, 생성된 용액을 105℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 진공에서 제거하고, 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3으로 세척하였다. 유기 상을 Na2SO4에 건조하고, 진공에서 농축하고, 조질 연갈색 고체를 크로마토그래피(EtOAc/헵탄 = 1/2 내지 1/1)하여 각각 백색 고체로서 6-클로로-2,8-다이메틸-이미다조[1,2-b]피리다진(6.1 g, 21%, MS m/z 182.1 [M+H]+) 및 백색 고체로서 6-클로로-2,7-다이메틸-이미다조[1,2-b]피리다진(5.9 g, 20%, MS m/z 182.1 [M+H]+)을 수득하였다.
다이옥산(50 mL) 중 6-클로로-2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진(0.9 g, 4.96 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(1.26 g, 4.96 mmol, 1.0 당량), KOAc(0.97 g, 9.91 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(363 mg, 0.49 mmol)의 혼합물을 탈기하고 N2 하에 110℃에서 가열하였다. 15 시간 후, 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 진공에서 농축하여 2,8-다이메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진을 수득하고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
b) 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00020
ACN(36 mL) 중 2-클로로-7-플루오로-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(750 mg, 3.78 mmol, 본원에 상기 기재됨)의 용액에 2,8-다이메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진(1.24 g, 4.53 mmol, 1.2 당량), Pd(Ph3P)4(218 mg, 0.189 mmol, 0.05 당량), 및 K2CO3(3.78 mL, 7.55 mmol, 2.0 당량)의 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 아르곤 하에 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 실온에서 냉각하고, 여과하였다. 침전물을 Et2O로 세척한 후 물로 세척하고, 진공에서 건조하여 연갈색 고체로서 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(700 mg, 60%)을 수득하였다. MS m/z 310.1 [M+H]+.
중간체 3
7- 플루오로 -9- 메틸 -2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
a) 2- 클로로 -7- 플루오로 -9- 메틸 - 피리도[1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00021
5-플루오로-3-메틸피리딘-2-아민(3.3 g, 26.2 mmol) 및 다이메틸 말로네이트(15.0 mL, 0.13 mol, 5.0 당량)의 혼합물을 210℃에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 침전물을 여과하고, ACN으로 3회 세척하여 암색 고체로서 7-플루오로-2-하이드록시-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.3 g)을 수득하고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS m/z 195.1 [M+H]+.
POCl3(7.7 mL, 82.9 mmol) 및 DIEA(2.07 mL, 11.8 mmol) 중 조질 7-플루오로-2-하이드록시-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.3 g, 11.8 mmol)의 혼합물을 110℃에서 15 시간 동안 가열하였다. 용매를 제거하고, 잔사를 빙수로 처리하고, 물로 3회 세척하고 건조하여 갈색 고체를 수득하였다. 조질 갈색 고체를 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)하여 황색 고체로서 2-클로로-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.77 g, 2 단계에 걸쳐서 70%)을 수득하였다. MS m/z 213.1 [M+H]+.
b) 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00022
ACN(80 mL) 중 2-클로로-7-플루오로-9-메틸-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(2.2 g, 10.3 mmol)의 용액에 2-메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진(3.22 g, 12.4 mmol, 1.2 당량, 본원에 상기 기재됨), Pd(Ph3P)4(1.20 g, 1.03 mmol, 0.1 당량), 및 K2CO3(10.3 mL, 20.7 mmol, 2.0 당량)의 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 아르곤 하에 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 실온에서 냉각하고, 여과하였다. 침전물을 Et2O로 세척한 후 물로 세척하고, 진공에서 건조하여 연갈색 고체로서 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(1.80 g, 56%)을 수득하였다. MS m/z 310.1 [M+H]+.
중간체 4
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7- 플루오로 -9- 메틸 - 피리도[1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00023
ACN(50 mL) 중 2-클로로-7-플루오로-9-메틸-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.98 g, 4.61 mmol, 본원에 상기 기재됨)의 용액에 2,8-다이메틸-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)이미다조[1,2-b]피리다진(1.51 g, 5.53 mmol, 1.2 당량, 본원에 상기 기재됨), Pd(Ph3P)4(0.32 g, 0.277 mmol, 0.06 당량), 및 K2CO3(4.61 mL, 9.22 mmol, 2.0 당량)의 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, 아르곤 하에 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 반응 생성물을 실온에서 냉각하고, 여과하였다. 침전물을 Et2O 및 물로 세적한 후, 진공에서 건조하여 연갈색 고체로서 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(0.89 g, 60%)을 수득하였다. MS m/z 324.4 [M+H]+.
실시예 1
2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-(4- 메틸피페라진 -1-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00024
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 35 mg, 0.119 mmol) 및 1-메틸피페라진(47.5 mg, 0.474 mmol, 4 당량)을 DMSO(1 mL) 중에서 120℃에서 밤새 교반하였다. LC-MS는 전체 전환을 나타내었다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 조질 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 9/1)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(25 mg, 56%)을 수득하였다. MS m/z 376.3 [M+H+].
실시예 2
7-[(8 aR )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2- 메 틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00025
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 125 mg, 0.426 mmol) 및 (R)-옥타하이드로피롤로-[1,2-a]피라진(160 mg, 1.27 mmol, 3 당량)을 DMSO(5 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2 중에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 포화 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 98/2 내지 95/5)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(65 mg, 38%)을 수득하였다. MS m/z 402.5 [M+H+].
실시예 3
7-[(8 aS )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00026
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 200 mg, 0.647 mmol) 및 (S)-옥타하이드로피롤로-[1,2-a]피라진(286 mg, 2.26 mmol, 3.5 당량)을 DMSO(5 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 98/2 내지 95/5)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(115 mg, 43%)을 수득하였다. MS m/z 416.3 [M+H+].
실시예 4
7-[(8 aR )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00027
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 200 mg, 0.647 mmol), DIPEA(0.113 mL, 0.67 mmol, 1 당량) 및 (R)-옥타하이드로피롤로-[1,2-a]피라진(245 mg, 1.95 mmol, 3.0 당량)을 DMSO(2.5 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 98/2 내지 95/5)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(132 mg, 49%)을 수득하였다. MS m/z 416.3 [M+H+].
실시예 5
7-[(8 aS )-8a- 메틸 -1,3,4,6,7,8- 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2,8-다 이메틸이미다조[1,2-b]피리 다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00028
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 90 mg, 0.291 mmol), DIPEA(0.05 mL, 0.29 mmol, 1 당량) 및 (S)-8a-메틸옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진(81 mg, 0.58 mmol, 2.0 당량)을 DMSO(2.5 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(55 mg, 44%)을 수득하였다. MS m/z 430.3 [M+H+].
실시예 6
7-[(8 aR )-8a- 메틸 -1,3,4,6,7,8- 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2,8-다 이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00029
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 90 mg, 0.291 mmol), DIPEA(0.05 mL, 0.29 mmol, 1 당량) 및 (R)-8a-메틸옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진(81 mg, 0.58 mmol, 2.0 당량)을 DMSO(2.5 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(50 mg, 40%)을 수득하였다. MS m/z 430.4 [M+H+].
실시예 7
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3S,5R)-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00030
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 50 mg, 0.162 mmol) 및 시스-2,6-다이메틸피페라진(74 mg, 0.647 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(1.5 mL) 중에서 110℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(32 mg, 49%)을 수득하였다. MS m/z 404.4 [M+H+].
실시예 8
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3S)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[ 1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00031
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 33 mg, 0.107 mmol) 및 (S)-2-메틸피페라진(43 mg, 0.427 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 120℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(18 mg, 43%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 9
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3R)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[ 1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00032
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 85 mg, 0.275 mmol) 및 (R)-2-메틸피페라진(110 mg, 1.10 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(5 mL) 중에서 120℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(35 mg, 33%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 10
7-(1,4- 다이아제판 -1-일)-2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[ 1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00033
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 33 mg, 0.107 mmol) 및 1,4-다이아제판(32 mg, 0.320 mmol, 3.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 120℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(20 mg, 48%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 11
2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3S)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[ 1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00034
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 50 mg, 0.169 mmol) 및 (S)-2-메틸피페라진(68 mg, 0.677 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 110℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(40 mg, 63%)을 수득하였다. MS m/z 376.2 [M+H+].
실시예 12
2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3R)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[ 1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00035
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 50 mg, 0.169 mmol) 및 (R)-2-메틸피페라진(68 mg, 0.677 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 110℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(48 mg, 75%)을 수득하였다. MS m/z 376.3 [M+H+].
실시예 13
7-(1,4- 다이아제판 -1-일)-2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00036
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 50 mg, 0.169 mmol) 및 1,4-다이아제판(68 mg, 0.677 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 110℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(41 mg, 65%)을 수득하였다. MS m/z 376.2 [M+H+].
실시예 14
7-[(3R,5S)-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]-2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00037
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 50 mg, 0.169 mmol) 및 시스-2,6-다이메틸피페라진(77 mg, 0.677 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 110℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(41 mg, 62%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 15
7-[(8 aS )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00038
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 50 mg, 0.169 mmol) 및 (S)-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진(85 mg, 0.677 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(36 mg, 53%)을 수득하였다. MS m/z 402.3 [M+H+].
실시예 16
7-[(8 aS )-8a- 메틸 -1,3,4,6,7,8- 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2-메 틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00039
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 50 mg, 0.169 mmol) 및 (S)-8a-메틸옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진(95 mg, 0.677 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(45 mg, 64%)을 수득하였다. MS m/z 416.3 [M+H+].
실시예 17
7-[(8 aR )-8a- 메틸 -1,3,4,6,7,8- 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2-(2-메 틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00040
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 100 mg, 0.339 mmol) 및 (R)-8a-메틸옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진(190 mg, 1.35 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(4 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(45 mg, 64%)을 수득하였다. MS m/z 416.3 [M+H+].
실시예 18
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3R)-3- 피롤리딘 -1- 일피롤리딘 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00041
마이크로파 반응기 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 45 mg, 0.145 mmol), (R)-1,3'-바이피롤리딘 다이하이드로클로라이드(62 mg, 0.291 mmol, 2.0 당량) 및 DIPEA(0.20 mL, 1.16 mmol, 8 당량)를 NMP(3 mL) 중에서 220℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 98/2 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(25 mg, 40%)을 수득하였다. MS m/z 430.3 [M+H+].
실시예 19
7-(4,7- 다이아자스피로[2.5]옥탄 -7-일)-2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00042
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 50 mg, 0.169 mmol), DIPEA(0.24 mL, 1.35 mmol, 8 당량) 및 4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄 다이하이드로클로라이드(62.7 mg, 0.339 mmol, 2.0 당량)를 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 2 일 동안 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(22 mg, 33%)을 수득하였다. MS m/z 388.3 [M+H+].
실시예 20
7-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00043
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 50 mg, 0.162 mmol), DIPEA(0.22 mL, 1.29 mmol, 4 당량) 및 4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄 다이하이드로클로라이드(32 mg, 0.320 mmol, 3.0 당량)를 DMSO(2 mL) 중에서 130℃에서 48 시간 동안 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 98/2 내지 95/5)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(12 mg, 18%)을 수득하였다. MS m/z 402.3 [M+H+].
실시예 21
2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3R)-3- 피롤리딘 -1- 일피롤리딘 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00044
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 40 mg, 0.135 mmol), DIPEA(0.19 mL, 1.08 mmol, 8 당량) 및 (R)-1,3'-바이피롤리딘 다이하이드로클로라이드(58 mg, 0.271 mmol, 2.0 당량)를 DMSO(4 mL) 중에서 교반하고 220℃에서 40 분 동안 마이크로파로 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 98/2 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(30 mg, 53%)을 수득하였다. MS m/z 416.3 [M+H+].
실시예 22
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-(3,3- 다이메틸피페라진 -1-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00045
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 40 mg, 0.129 mmol) 및 2,2-다이메틸피페라진(59 mg, 0.517 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(1.6 mL) 130℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 9/1)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(29 mg, 55%)을 수득하였다. MS m/z 404.3 [M+H+].
실시예 23
7-(3,3- 다이메틸피페라진 -1-일)-2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[ 1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00046
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 40 mg, 0.135 mmol) 및 2,2-다이메틸피페라진(62 mg, 0.542 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 130℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(26 mg, 49%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 24
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-9- 메틸 -7-[(3S)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00047
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 4; 50 mg, 0.155 mmol) 및 (S)-2-메틸피페라진(62 mg, 0.619 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(45 mg, 72%)을 수득하였다. MS m/z 404.3 [M+H+].
실시예 25
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-9- 메틸 -7-[(3R)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00048
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 4; 50 mg, 0.155 mmol) 및 (R)-2-메틸피페라진(62 mg, 0.619 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(40 mg, 70%)을 수득하였다. MS m/z 404.3 [M+H+].
실시예 26
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3R,5S)-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]-9- 메틸 - 피리도[1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00049
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 4; 50 mg, 0.155 mmol) 및 시스-2,6-다이메틸피페라진(70 mg, 0.619 mmol, 4.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(26 mg, 40%)을 수득하였다. MS m/z 418.3 [M+H+].
실시예 27
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-(3,3- 다이메틸피페라진 -1-일)-9- 메틸 - 피리도[1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00050
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 4; 50 mg, 0.155 mmol) 및 2,2-다이메틸피페라진(35 mg, 0.309 mmol, 2.0 당량)을 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(36 mg, 56%)을 수득하였다. MS m/z 418.3 [M+H+].
실시예 28
7-(4,7- 다이아자스피로[2.5]옥탄 -7-일)-2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-9- 메틸 - 피리도[1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00051
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-9-메틸-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 4; 50 mg, 0.155 mmol), DIPEA(0.21 mL, 1.24 mmol, 8 당량) 및 4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄 다이하이드로클로라이드(57 mg, 0.309 mmol, 2.0 당량)를 DMSO(2 mL) 중에서 125℃에서 2 일 동안 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(17 mg, 26%)을 수득하였다. MS m/z 416.3 [M+H+].
실시예 29
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3S,5S)-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00052
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 50 mg, 0.162 mmol), TEA(0.18 mL, 1.29 mmol, 8 당량) 및 (2S,6S)-2,6-다이메틸피페라진 다이하이드로클로라이드(90 mg, 0.485 mmol, 3.0 당량)를 DMSO(2 mL) 중에서 140℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 9/1)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(20 mg, 30%)을 수득하였다. MS m/z 404.3 [M+H+].
실시예 30
2-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3S)-3- 피롤리딘 -1- 일피롤리딘 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00053
밀봉관 내에서, 2-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-7-플루오로-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 2; 50 mg, 0.162 mmol), DIPEA(0.22 mL, 1.29 mmol, 8 당량) 및 (S)-1,3'-바이피롤리딘 다이하이드로클로라이드(103 mg, 0.485 mmol, 3.0 당량)를 NMP(2 mL) 중에서 140℃에서 밤새 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 9/1)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(22 mg, 32%)을 수득하였다. MS m/z 430.3 [M+H+].
실시예 31
2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3S)-3- 피롤리딘 -1- 일피롤리딘 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00054
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 75 mg, 0.254 mmol), TEA(0.28 mL, 2.03 mmol, 8 당량) 및 (S)-1,3'-바이피롤리딘 다이하이드로클로라이드(162 mg, 0.762 mmol, 3.0 당량)를 NMP(4 mL) 중에서 교반하고, 220℃에서 1 시간 동안 마이크로파로 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(12 mg, 11%)을 수득하였다. MS m/z 416.2 [M+H+].
실시예 32
7-[(3S,5S)-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]-2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00055
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 75 mg, 0.254 mmol), TEA(0.28 mL, 2.03 mmol, 8 당량) 및 (2S,6S)-2,6-다이메틸피페라진 다이하이드로클로라이드(143 mg, 0.762 mmol, 3.0 당량)를 DMSO(3 mL) 중에서 교반하고, 140℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(10 mg, 10%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 33
9- 메틸 -2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3S)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00056
밀봉관 내에서, 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 3; 250 mg, 0.808 mmol) 및 (S)-2-메틸피페라진(405 mg, 4.04 mmol, 5.0 당량)을 DMSO(6 mL) 중에서 교반하고, 130℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 85/15)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(135 mg, 43%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 34
9- 메틸 -2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)-7-[(3R)-3- 메틸피페라진 -1-일]피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00057
밀봉관 내에서, 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 3; 250 mg, 0.808 mmol) 및 (R)-2-메틸피페라진(405 mg, 4.04 mmol, 5.0 당량)을 DMSO(6 mL) 중에서 교반하고, 130℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 85/15)로 정제하여 표제 생성물(100 mg, 32%)을 수득하였다. MS m/z 390.3 [M+H+].
실시예 35
7-[(3R,5S)-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]-9- 메틸 -2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00058
밀봉관 내에서, 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 3; 250 mg, 0.808 mmol) 및 (2S,6R)-2,6-다이메틸피페라진(461 mg, 4.04 mmol, 5.0 당량)을 DMSO(6 mL) 중에서 교반하고, 130℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 85/15)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(101 mg, 31%)을 생성하였다. MS m/z 404.3 [M+H+].
실시예 36
7-(3,3- 다이메틸피페라진 -1-일)-9- 메틸 -2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00059
밀봉관 내에서, 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 3; 250 mg, 0.808 mmol) 및 2,2-다이메틸피페라진(461 mg, 4.04 mmol, 5.0 당량)을 DMSO(6 mL) 중에서 교반하고, 130℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 85/15)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(120 mg, 36%)을 수득하였다. MS m/z 404.3 [M+H+].
실시예 37
7-(4,7- 다이아자스피로[2.5]옥탄 -7-일)-9- 메틸 -2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00060
밀봉관 내에서, 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 3; 125 mg, 0.404 mmol), K2CO3(223 mg, 1.62 mmol, 4 당량) 및 4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄 다이하이드로클로라이드(112 mg, 0.606 mmol, 1.5 당량)를 DMA(2 mL) 중에서 교반하고, 130℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(75 mg, 46%)을 수득하였다. MS m/z 402.2 [M+H+].
실시예 38
7-[( 3S,5S )-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]-9- 메틸 -2- (2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온
Figure 112016122511069-pct00061
밀봉관 내에서, 7-플루오로-9-메틸-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 3; 125 mg, 0.404 mmol), K2CO3(223 mg, 1.62 mmol, 4 당량) 및 (2S,6S)-2,6-다이메틸피페라진 다이하이드로클로라이드(113 mg, 0.606 mmol, 1.5 당량)를 DMA(2 mL) 중에서 교반하고, 130℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 잔사를 CH2Cl2에서 취하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4에서 건조하고, 진공에서 농축하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 90/10)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(50 mg, 31%)을 수득하였다. MS m/z 404.3 [M+H+].
실시예 39
7-[(3R)-3- 에틸피페라진 -1-일]-2-(2- 메틸이미다조[1,2-b]피리다진 -6-일)피리도[ 1,2-a]피리미딘 -4-온
Figure 112016122511069-pct00062
밀봉관 내에서, 7-플루오로-2-(2-메틸이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-4-온(중간체 1; 200 mg, 0.677 mmol), K2CO3(374 mg, 2.71 mmol, 4 당량) 및 (R)-2-에틸피페라진 다이하이드로클로라이드(238 mg, 0.606 mmol, 1.5 당량)를 DMA(3 mL) 중에서 100℃에서 4 일 동안 교반하였다. 용매를 고진공 하에 제거하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2/MeOH = 95/5 내지 8/2)로 정제하여 연황색 고체로서 표제 생성물(168 mg, 64%)을 수득하였다. MS m/z 390.2 [M+H+].
생물학적 분석
본원을 더욱 상세히 기술하고 이해를 돕기 위해, 하기 비제한적인 생물학적 실시예를 제공하여 본원의 범주를 더욱 완전히 예시하지만, 이의 범주를 구체적으로 제한하는 것으로서 간주되지 않아야 한다. 당업자의 범위 내에서 이해될 수 있는, 현재 공지되거나 나중에 개발될 수 있는 본원의 이러한 변형은, 본원의 범주 및 후술된 청구범위 내에서 포함되는 것으로 간주된다. 이러한 실시예는 시험관내에서 및/또는 생체내에서 본원에 기재된 특정 화합물의 시험을 예시하고, SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN2의 엑손 7의 포함을 강화시킴으로써 SMA를 치료하기 위한 화합물의 유용성을 입증한다. 화학식 I의 화합물은 SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN2의 엑손 7의 포함을 강화하고, SMN2 유전자로부터 생성된 SMN 단백질 수준을 증가시킴으로써, SMA 치료를 필요로 하는 인간 대상체에서 SMA를 치료하는데 사용될 수 있다. 이러한 실시예는 또한 시험관내에서 및/또는 생체내에서 본원에 기재된 특정 화합물의 시험을 예시하고, SMN1 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN1의 엑손 7의 포함을 강화하기 위한 화합물의 유용성을 입증한다. 따라서, 화학식 I의 화합물은 또한 SMN1 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN1의 엑손 7의 포함을 강화하고, SMN1 유전자로부터 생성된 SMN 단백질 수준을 증가시킨다.
분석 1
배양된 세포에서 SMN2 꼬마유전자 mRNA 스플라이싱 RT - qPCR 분석
역 전사-정량적 PCR(RT-qPCR) 분석을 사용하여 SMN2 꼬마유전자로 안정하게 형질감염되고 시험 화합물로 처리된 HEK293H 세포주에서 SMN2 엑손 7을 함유하는 전장 SMN2 꼬마유전자(용어 "FL SMN2미니"로 본원에서 지칭됨) mRNA 수준을 정량화하였다. 사용된 물질 및 각각의 공급처를 하기 표 1에 열거하였다.
[표 1]
배양된 세포에서 SMN2 꼬마유전자 mRNA 스플라이싱 RT-qPCR 분석에 사용된 물질 및 이의 각각의 공급처
Figure 112016122511069-pct00063
SMN2-A 꼬마유전자 구성물을 국제특허출원공개 WO 2009/151546 A1의 145쪽, 단락 [00400] 내지 147쪽, 단락 [00412](이의 도 1 및 도 3 포함)에 기재된 바와 같이 제조하였다.
SMN2-A 꼬마유전자 구성물(10,000 세포/웰)로 안정하게 형질감염된 HEK293H 세포를 96-웰 평편-바닥 플레이트 중에서 세포 배양 배지(200 ㎍/mL 하이그로마이신을 함유하는 DMEM + 10% PBS)(200 ㎕)에 시딩하고, 상기 플레이트를 즉시 교반하여 세포의 적절한 분산 및 심지어 세포의 단층 형성을 보장하였다. 세포를 6 시간 동안 부착하도록 하였다. 시험 화합물을 100% DMSO 중에서 3.16-배 연속으로 희석하여 7-점 농도 곡선을 생성하였다. 시험 화합물의 용액(1 ㎕, DMSO 중 200x)을 각각의 세포-함유 웰에 첨가하고, 플레이트를 24 시간 동안 세포 배양 항온처리기(37℃, 5% C02, 100% 상대 습도)에서 항온처리하였다. 각각의 시험 화합물 농도에 대하여 2회 반복검정을 수행하였다. 이어서, 상기 세포를 세포-대-Ct 용해 완충액 중에서 용해하고, 용해물을 -80℃에서 저장하였다.
전장 SMN2-A 꼬마유전자 및 GAPDH mRNA를 하기 표 2에 나타낸 프라이머 및 프로브를 사용하여 정량화하였다. SMN 정방향 프라이머 A(서열번호 1)를 엑손 7의 뉴클레오티드 서열(뉴클레오티드 22 내지 뉴클레오티드 40)로 하이브리드화하고, SMN 역방향 프라이머 A(서열번호 2)를 파이어플라이(Firefly) 루시퍼라제의 암호화 서열 중에서 뉴클레오티드 서열로 하이브리드화하고, SMN 프로브 A(서열번호 3)를 엑손 7의 뉴클레오티드 서열(뉴클레오티드 50 내지 뉴클레오티드 54) 및 엑손 8의 뉴클레오티드 서열(뉴클레오티드 1 내지 뉴클레오티드 21)로 하이브리드화하였다. 이러한 3개의 올리고뉴클레오티드의 조합은 SMN1 또는 SMN2 꼬마유전자에서만 검출되고(RT-qPCR) 내인성 SMN1 또는 SMN2 유전자에서는 검출되지 않을 것이다.
[표 2]
Figure 112016122511069-pct00064
SMN 정방향 및 역방향 프라이머를 0.4 μM의 최종 농도로 사용하였다. SMN 프로브를 0.15 μM의 최종 농도로 사용하였다. GAPDH 프라이머를 0.2 μM의 최종 농도로 사용하고 프로브를 0.15 μM의 최종 농도로 사용하였다.
2x RT-PCR 완충액(7.5 ㎕), 25x RT-PCR 효소 믹스(0.4 ㎕), 20x GAPDH 프라이머-프로브 믹스(0.75 ㎕), 물(4.0075 ㎕), 10-배 희석된 세포 용해물(2 ㎕), 100 μM SMN 정방향 프라이머(0.06 ㎕), 100 μM SMN 역방향 프라이머(0.06 ㎕) 및 100 μM SMN 프로브(0.225 ㎕)를 합하여 SMN2-꼬마유전자 GAPDH 믹스(15 ㎕ 총 부피)를 제조하였다.
PCR을 지시된 시간 동안 하기 온도로 수행하였다: 단계 1: 48℃(15 분); 단계 2: 95℃(10 분); 단계 3: 95℃(15 초); 단계 4: 60℃(1 분); 이어서 총 40 주기로 단계 3 및 4 반복.
각각의 반응 혼합물은 SMN2-A 꼬마유전자 및 GAPDH 프라이머/프로브 세트(멀티플렉스 디자인) 둘 다를 함유하고, 2개 전사체의 수준 측정을 동시에 수행하였다.
비히클 대조군으로 처리된 세포에 관한 FL SMN2미니 mRNA의 존재비(abundance)에서 증가를 변형된 ΔΔCt 방법(문헌[Livak and Schmittgen , Methods, 2001, 25:402-8]에 기재됨)을 사용하여 실시간 PCR 데이터로부터 측정하였다. 증폭 효율(E)을 FL SMN2미니 및 GAPDH 각각에 대한 증폭 곡선의 기울기로부터 계산하였다. 이어서, FL SMN2미니 및 GAPDH mRNA의 존재비를 (1 + E)- Ct로서 계산하였고, 이때, Ct는 각각의 앰플리콘에 대한 역치 값이다. FL SMN2미니 mRNA의 존재비는 GAPDH mRNA 존재비에 대하여 정규화되었다. 이어서, 시험 화합물-처리된 샘플로부터 정규화된 FL SMN2미니 mRNA 존재비를 비히클-처리된 세포로부터 정규화된 FL SMN2미니 mRNA 존재비로 나누어 비히클 대조군에 관한 FL SMN2미니 mRNA 수준을 측정하였다.
표 3은 본 발명의 특정한 화합물에 대하여 상기 방법에 따라 생성된 7-점 농도 데이터로부터 수득된 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 제공한다.
본 발명의 특정한 화합물은 1 μM 이하의 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 더욱 특정한 화합물은 0.1 μM 이하의 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 가장 특정한 화합물은 0.02 μM 이하의 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
[표 3]
전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도
Figure 112016122511069-pct00065
분석 2
배양된 세포에서 SMN 단백질 분석
SMN HTRF(균일 시간 분해 형광) 분석을 사용하여 시험 화합물로 처리된 SMA 모 섬유아 세포에서 SMN 단백질 수준을 정량화하였다. 사용된 물질 및 각각의 공급처를 하기 표 4에 열거하였다.
[표 4]
배양된 세포에서 SMN 단백질 분석에 사용된 물질 및 이의 각각의 공급처
Figure 112016122511069-pct00066
세포를 녹이고, DMEM-10% FBS 중에서 72 시간 동안 배양하였다. 세포를 트립신 처리하고, 카운팅하고, DMEM-10% FBS 중에서 25,000 세포/mL의 농도로 재현탁하였다. 상기 세포 현탁액을 96-웰 마이크로역가 플레이트 중에서 웰 당 5,000 세포로 플레이팅하고, 3 내지 5 시간 동안 항온처리하였다. 시험 화합물을 100% DMSO 중에서 3.16-배로 연속 희석하여 7-점 농도 곡선을 생성하였다. 시험 화합물 용액(1 ㎕)을 세포-함유 웰로 옮기고, 세포를 48 시간 동안 세포 배양 항온처리기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 항온처리하였다. 각각의 시험 화합물 농도에 대하여 3회 반복검정 샘플을 설정하였다. 48 시간 후, 상청액을 웰로부터 제거하고, 프로테아제 억제제를 함유하는 RIPA 용해 완충액(25 ㎕)를 웰에 첨가하고, 진탕하면서 실온에서 1 시간 동안 항온처리하였다. 희석액(25 ㎕)을 첨가한 후, 생성된 용해물(35 ㎕)을 384-웰 플레이트로 옮겼고, 이때 각각의 웰은 항체 용액(SMN 재구성 완충액 중 항-SMN d2 및 항-SMN 크립테이트의 1:100 희석)(5 ㎕)을 함유하였다. 상기 플레이트를 1 분 동안 원심분리하여 웰의 바닥에 용액을 모은 후, 실온에서 밤새 항온처리하였다. 665 nm 및 620 nm에서 플레이트의 각각의 웰에 대한 형광을 엔비젼(EnVision) 멀티라벨 플레이트 판독기(퍼킨 엘머)로 측정하였다.
665 nm에서의 신호를 620 nm의 신호로 나누어 각각의 샘플, 블랭크 및 비히클 대조군 웰에 대한 정규화된 형광 신호를 계산하였다. 신호 정규화는 용해물의 기질 효과로 인해 급랭하는 가능한 형광을 설명한다. 각각의 샘플 웰에 대한 ΔF 값(% 값으로서 SMN 단백질 존재비의 측정)은, 각각의 샘플 웰에 대한 정규화된 형광값으로 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광값을 뺀 후, 이 차이를 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광값으로 나누고 100을 곱하여 계산하였다. 각각의 샘플 웰에 대한 ΔF 값은 시험 화합물-처리된 샘플로부터 SMN 단백질 존재비를 나타낸다. 각각의 샘플 웰에 대한 ΔF 값을 비히클 대조군 웰에 대한 ΔF 값으로 나눠 비히클 대조군에 관한 SMN 단백질 존재비의 배수 증가를 계산하였다. 표 5는 본 발명의 특정한 화합물에 대하여 상기 방법에 따라 생성된 7-점 농도 데이터로부터 수득된 SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도를 제공한다.
본 발명의 특정한 화합물은 1 μM 이하의 SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 더욱 특정한 화합물은 100 nM 이하의 SMN 단백질 발현을 위한 EC1.5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 가장 특정한 화합물은 30 nM 이하의 SMN 단백질 발현을 위한 EC1.5x 농도를 나타낸다.
표 6은 본 발명의 특정한 화합물에 대하여 상기 방법에 따라 생성된 7-점 농도 데이터로부터 수득된 SMN 단백질의 최대 배수 증가를 제공한다.
본 발명의 특정한 화합물은 1.5 초과의 최대 배수 증가를 나타낸다.
본 발명의 더욱 특정한 화합물은 1.7 초과의 최대 배수 증가를 나타낸다.
본 발명의 가장 특정한 화합물은 1.8 초과의 최대 배수 증가를 나타낸다.
[표 5]
SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도
Figure 112016122511069-pct00067
[표 6]
SMN 단백질의 최대 배수 증가
Figure 112016122511069-pct00068

Claims (58)

  1. 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:
    Figure 112020116067513-pct00081
    .
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