CN113966219A - Sma的新治疗方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于治疗脊髓性肌肉萎缩症(SMA)的7‑(4,7‑二氮杂螺[2.5]辛‑7‑基)‑2‑(2,8‑二甲基咪唑并[1,2‑b]哒嗪‑6‑基)吡啶并[1,2‑a]嘧啶‑4‑酮，其用于治疗SMA的药物组合物，其治疗SMA的方法。

Description

SMA的新治疗方法

本发明涉及用于治疗脊髓性肌肉萎缩症(SMA)的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮，其用于治疗SMA的药物组合物，其对SMA的治疗方法。

更具体地讲，本文所公开的发明基于以下惊人的发现：7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮(也称为利司扑兰)与作为CYP3A底物的分子(更特别地，其中该CYP3A底物是咪达唑仑)之间存在药物-药物相互作用。

脊髓性肌肉萎缩症(SMA)在其最广泛的意义上描述了遗传性和获得性中枢神经系统(CNS)疾病的集合，其特征在于脊髓和脑干中的进行性运动神经元损失，从而引起肌肉无力和肌肉萎缩。SMA的特征在于来自脊髓前角的α运动神经元退化，导致肌肉萎缩并引起麻痹。因此，这种α运动神经元退化实质上损害了患者的重要预后。在健康受试者中，这些神经元将信息从大脑传递到肌肉，从而引起肌肉收缩。在没有这种刺激的情况下，肌肉萎缩。随后，除了肌肉的全身性无力和萎缩，更特别地，躯干、上臂和大腿的肌肉的全身性无力和萎缩之外，这些疾病还可能伴有严重的呼吸问题。

婴儿SMA是这种神经退化性疾病的最严重形式。症状包括肌肉无力、肌张力差、哭泣微弱、跛行或有跌倒倾向、吮吸或吞咽困难、肺或咽喉中积聚分泌物、进食困难，以及对呼吸道感染的易感性增加。腿往往比手臂弱，并且不能到达发育里程碑，诸如抬头或坐起。一般来讲，症状出现得越早，寿命越短。当运动神经元细胞退化时，症状不久后出现。这种疾病的严重形式是致命的，并且所有形式都没有已知的治愈方法。SMA的病程与运动神经元细胞退化的速率和由此引起的无力的严重程度直接相关。由于支持呼吸的肌肉无力，患有严重形式SMA的婴儿常死于呼吸并发症。患有较温和形式的SMA的儿童存活时间长得多，尽管他们可能需要广泛的医学支持，尤其是在症状谱更严重的那一端的儿童。已将SMA疾病的临床症状谱分为以下五组：

1)0型SMA(子宫内SMA)是该疾病的最严重形式，并且在出生前开始。通常，0型SMA的第一症状是胎儿的运动减少，其可以在妊娠30周至36周之间首次观察到。出生后，这些新生儿很少活动，吞咽和呼吸困难，并且在出生后不久死亡。

2)I型SMA(婴儿SMA或沃尼克-霍夫曼症)在0至6个月之间出现症状；这种形式的SMA非常严重。患者从未获得坐立能力，并且死亡通常在前2年内发生。

3)II型SMA(中间型SMA)的发病年龄为7至18个月。患者能够无支撑地坐立，但永远不能独立地站立或行走。该组的预后很大程度上取决于呼吸受累的程度。

4)III型SMA(幼年性SMA或库格尔贝格-韦兰德病)通常在18个月后诊断。3型SMA个体在其疾病进程中的某些时候能够独立行走，但通常在青年或成年期变为坐轮椅。

5)IV型SMA(成年发作型SMA)。无力通常始于青春期晚期的舌、手或脚，然后发展到身体的其他区域。成人SMA的病程慢得多，对预期寿命几乎没有或完全没有影响。

所有形式的脊髓性肌肉萎缩症均伴有继发于脊髓前角神经元退化的进行性肌肉无力和萎缩。SMA目前构成婴儿死亡的最常见原因之一。它同样影响世界所有地区的女孩或男孩，患病率介于1/6000与1/10000之间。

目前还没有提供运动功能的稳定或改善的SMA口服治疗方法获得批准。目前正在非临床环境和临床环境中研究几种候选药物(Lewelt A等人，Curr Neurol NeurosciRep.2012；12:42-532；Arnold等人，Muscle Nerve.2015；51:157-67)。诺西那生钠是一种鞘内施用的反义寡核苷酸，其促进SMN2前mRNA中包含外显子7，已在美国、欧盟和其他管辖区获得批准。最近，索伐瑞韦(onasemnogene abeparvovac-xio)作为静脉内施用的基因疗法，已在美国获得批准。

尽管对SMA的遗传基础和病理生理学有了更好的理解，并且已经探索了几种治疗策略，但是在临床中还没有一种口服治疗方法证明获得成功。本发明旨在响应这种口服治疗需要。7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮目前处于临床II/III期研究阶段。

正在年龄为18至55岁的健康参与者中进行I期两部分开放标签研究，以调查研究在口服施用后多剂量的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮(也以其INN名称利司扑兰为人所知)的安全性和耐受性，以及利司扑兰对咪达唑仑的药代动力学的影响(BP41361)。

利司扑兰在体外未示出对CYP 1A2、2B6、2C8、2C9、2C19或2D6的任何明显的可逆或时间依赖性抑制，但令人惊讶地发现利司扑兰示出对CYP3A4/5的时间依赖性抑制。

利司扑兰对CYP3A4/5的时间依赖性抑制可能使患者接触过量的被CYP3A代谢的药物，诸如咪达唑仑。接触到高于被CYP3A代谢的这些药物的通常治疗暴露水平的药物的患者可能遇到不期望的不良事件，其在一些情况下可能导致严重的不良事件。特别地，过度接触咪达唑仑的不良事件可能导致镇静、嗜睡、精神错乱、协调受损、反射减弱、对生命体征的影响、呼吸抑制和呼吸停止、昏迷，并且在最坏的情况下导致死亡。

咪达唑仑在口服施用后被快速吸收，并且发生大量的肠道和肝脏首过代谢。咪达唑仑在肝脏和肠道中主要被人CYP3A代谢为其药理学活性代谢物1-OH-咪达唑仑。在随后的UDP-葡萄糖醛酸基转移酶介导的II期反应中，形成主要的尿代谢物1’-OH-咪达唑仑-葡糖苷酸；在24小时内发现63％至80％的剂量结合在尿中，而只有1％未改变地排泄。施用单次口服剂量后，咪达唑仑的平均t1/2在2.2小时至6.8小时的范围内。

口服咪达唑仑时与CYP3A抑制剂或诱导剂的PK相互作用相比静脉内给药时的程度更高，特别是因为CYP3A也存在于上胃肠道中，并且通过口服施用途径，全身清除率和生物利用度都发生变化，而通过胃肠外施用途径，仅全身清除率受到影响。

咪达唑仑及其代谢物的药效动力学特性包括镇静、抗焦虑、遗忘和催眠活性。苯二氮

的药理学作用似乎是由与中枢神经系统(CNS)中的γ-氨基丁酸苯二氮

受体(CNS中的主要抑制性神经递质)的可逆相互作用引起的。

附图说明

图1：CYP3A4(咪达唑仑)的剩余活性百分比。图A：利司扑兰(RO7034067)，图B：阳性对照抑制剂

图2：CYP3A4(睾酮)的剩余活性百分比。图A：利司扑兰(RO7034067)，图B：阳性对照抑制剂

图3：CYP3A4(咪达唑仑)的剩余活性百分比。图A：利司扑兰(RO7034067)加减NADPH，图B：具有NADPH的阳性对照抑制剂

图4：CYP3A4(睾酮)的剩余活性百分比。图A：利司扑兰(RO7034067)加减NADPH，图B：具有NADPH的阳性对照抑制剂

图5：用利司扑兰(RO7034067)将CYP3A4灭活。图A：残留活性的自然对数随时间的变化，图B：kob随浓度变化的图线

本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献均全文以引用方式并入。

除非另外指出，否则本申请中使用的命名法基于IPUAC系统命名法。

本文公开了本发明的各种特征和实施方案，然而，基于所提供的教导内容，本发明的其他特征、修改和等同方案对于相关领域的技术人员将是显而易见的。所描述的本发明不限于所提供的实施例和实施方案，本领域技术人员将会知道各种替代性等同方案。如本文所用，单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数，除非上下文另有明确规定。例如，“一个”个体也将包括“多个个体”。

除非另有说明，否则说明书和权利要求书中使用的以下术语具有以下给出的含义：

术语“FMO3”是指含黄素的单加氧酶3，也称为二甲基苯胺单加氧酶[N-氧化物形成]3和三甲胺单加氧酶，其酶学委员会编号(EC编号)为EC1.14.13.148，MGI参考号1100496，细胞遗传学位置：1q24.3，基因组坐标(GRCh38)：1:171,090,872-171,117,818

可互换使用的“个体”或“受试者”是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于驯养动物(例如乳牛、绵羊、猫、犬和马)、灵长类动物(例如人和非人灵长类动物，诸如猴)、兔，以及啮齿类动物(例如小鼠和大鼠)。在某些实施方案中，该个体或受试者是人。在本发明的一个具体实施方案中，该受试者是患有脊髓性肌肉萎缩症(SMA)的人。在另一个具体实施方案中，受试者是患有SMA的人，其中SMA是由两个染色体上的SMN1基因中的失活突变或缺失(其导致SMN1基因功能丧失)引起的。

如本文所用，术语“避免”及其变型被预期具有替代词，即术语“戒除”、“停止”、“克制”和“节制”，以及这些术语的变型。在一些情况下，这些替代术语将具有等同的含义。例如，“避免”意指“节制”。韦氏在线词典，第11版，2009年11月24日。如本文所用，术语“中断”及其变型被预期具有替代词，即术语“结束”、“停止”、“暂停”和“退出”。

术语“脊髓性肌肉萎缩症”(或SMA)涉及由两个染色体上的SMN1基因中的失活突变或缺失(其导致SMN1基因功能丧失)引起的疾病。SMA的症状(取决于SMA的类型)包括：肌肉无力、肌张力差、哭泣微弱、咳嗽微弱、跛行或有跌倒倾向、吮吸或吞咽困难、呼吸困难、肺或咽喉中积聚分泌物、汗手紧握拳头、舌头扑动/颤动、头部常向一侧倾斜(即便躺下时也是如此)、腿往往比手臂弱、腿频繁呈现“青蛙腿”姿势、进食困难、对呼吸道感染的易感性增加、肠/膀胱无力、低于正常重量、不能无支撑地坐立、不能行走、不能爬行和张力减退、无反射，以及与前角细胞损失相关联的先天性多发性挛缩(关节挛缩)。

术语“治疗脊髓性肌肉萎缩症(SMA)”或“对脊髓性肌肉萎缩症(SMA)的治疗”包括以下效果中的一者或多者：(i)减轻或改善SMA的严重程度；(ii)延迟SMA发作；(iii)抑制SMA进展；(iv)减少受试者的住院次数；(v)缩短受试者的住院时间；(vi)增加受试者的生存率；(vii)改善受试者的生活质量；(viii)减少与SMA相关联的症状的数量；(ix)减轻或改善与SMA相关联的一种或多种症状的严重程度；(x)缩短与SMA相关联的症状的持续时间；(xi)预防与SMA相关联的症状的复发；(xii)抑制SMA症状的发展或发作；和/或(xiii)抑制与SMA相关联的症状的进展。更具体地讲，“治疗SMA”表示以下有益效果中的一者或多者：(i)肌肉力量损失减少；(ii)肌肉力量增加；(iii)肌肉萎缩减少；(iv)运动功能损失减少；(v)运动神经元增加；(vii)运动神经元损失减少；(viii)保护SMN缺陷型运动神经元免于退化；(ix)运动功能增加；(x)肺功能增加；和/或(xi)肺功能损失减少。

术语“伴随使用”应当理解为能够与同时施用或共同施用互换。因此，所述术语应当理解为涵盖同时或在不同时间且通过相同途径或通过不同途径施用，只要两种药剂以允许这两种药剂同时影响身体的方式给予。例如，伴随使用可以指伴随施用的药物，无论是由相同还是不同的从业者开处方，也不论是用于相同还是不同的适应症。更特别地，利司扑兰可以口服施用，而咪达唑仑可以口服施用、静脉内施用、经由注射到肌肉中施用、鼻内递送施用、直肠施用或通过面颊施用。

详细地讲，“治疗SMA”产生以下功能性能力或者有助于保持以下功能性能力：对于人类婴儿或人类幼儿，为独立地坐立；或者对于人类婴儿、人类幼儿、人类儿童或人类成人，为独立地站立、独立地行走、独立地奔跑、独立地呼吸、睡眠期间独立地翻身，或独立地吞咽。

术语“mg/kg”是指以每千克待治疗受试者体重所使用的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮的毫克数计的剂量。例如，0.25mg/kg意指剂量0.25毫克7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮/千克待治疗患者体重。

术语“患者”是指已被诊断患有SMA，特别地已被诊断患有SMA并且需要由CYP3A酶代谢的疗法，更特别地需要咪达唑仑的人(诸如男人或女人)。

术语“活性药物成分”(或“API”)表示药物组合物中具有特定生物活性的化合物或分子。

术语“药用赋形剂”、“药用载剂”和“治疗惰性赋形剂”可以互换使用，并且表示药物组合物中的以下任何药用成分：其不具有治疗活性并且对所施用的受试者无毒性，诸如用于配制药物产品的崩解剂、粘结剂、填充剂、溶剂、缓冲剂、张度剂、稳定剂、抗氧化剂、表面活性剂、载剂、稀释剂或润滑剂。

术语“药物组合物”是指一种制备物，该制备物的形式使得包含在其中的活性成分的生物活性有效，并且该制备物不含对将施用该组合物的受试者具有不可接受的毒性的附加组分。术语“药用”表示可用于制备药物组合物的物质的以下属性：通常安全、无毒性，既不是生物学上不期望的也不是其他方面不期望的，并且对于兽医药物用途以及人类药物用途是可接受的。

术语“缓冲剂”或“缓冲体系”表示药用赋形剂或赋形剂混合物，其使药物制备物的pH稳定。合适的缓冲剂是本领域熟知的，并且可以在文献中找到。特别的药用缓冲剂包括柠檬酸缓冲剂、苹果酸盐缓冲剂、马来酸盐缓冲剂或酒石酸盐缓冲剂，最特别地为酒石酸盐缓冲剂。本发明的特别缓冲体系是有机酸及其所选盐的组合，例如柠檬酸三钠和柠檬酸、苹果酸和苹果酸钠、酒石酸钾钠和酒石酸，或者酒石酸二钠和酒石酸，特别地为酒石酸钾钠和酒石酸。替代性地，有机酸(特别地为酒石酸)可以单独用作“酸化剂”，而不是酸和对应盐的组合。独立于所用的缓冲剂，可以用本领域已知的酸或碱来调节pH，例如盐酸、乙酸、磷酸、硫酸和柠檬酸、氢氧化钠和氢氧化钾。特别的酸化剂是酒石酸。

“药用载剂”是指药物组合物中除活性成分外的对受试者无毒性的成分。药用载剂包括但不限于缓冲剂或酸化剂、赋形剂、稳定剂或防腐剂。

术语“抗氧化剂”表示防止活性药物成分氧化的药用赋形剂。抗氧化剂包括抗坏血酸、谷胱甘肽、半胱氨酸、甲硫氨酸、柠檬酸、EDTA。

术语“表面活性剂”表示用于保护蛋白质组合物免受机械应力如搅拌和剪切的药用赋形剂。药用表面活性剂的示例包括泊洛沙姆、聚山梨醇酯、聚氧乙烯烷基醚

烷基苯基聚氧乙烯醚

或十二烷基硫酸钠(SDS)。

术语“泊洛沙姆”表示由中央疏水链聚(环氧丙烷)(PPO)和位于两侧的两条亲水链聚(环氧乙烷)(PEO)组成的非离子型三嵌段共聚物，每条PPO或PEO链均可以具有不同的分子量。泊洛沙姆也以商品名Pluronics为人所知。特别的泊洛沙姆是泊洛沙姆188，这是其中PPO链具有1800g/mol的分子量并且PEO具有80％(w/w)的含量的泊洛沙姆。

术语“聚山梨醇酯”表示山梨糖醇及其酸酐的油酸酯，通常与环氧乙烷共聚。特别的聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20(聚(环氧乙烷)(20)脱水山梨糖醇单月桂酸酯，

)或聚山梨醇酯80(聚(环氧乙烷)(80)脱水山梨糖醇单月桂酸酯，

)。

“亲水-亲脂平衡”(HLB)值表示非离子型表面活性剂的亲水性程度。HLB值由表面活性剂分子的亲水部分的分子质量与其总分子质量之间的比率确定，如通过GriffinW.C.,Journal of the Society of Cosmetic Chemists(1949)1:311所述。

术语“亲水性”表示分子或分子的一部分与极性溶剂，特别地与水，或者与由氢键、偶极-离子相互作用和/或偶极-偶极相互作用驱动的其他极性部分相互作用的能力。

术语“亲脂性”和“疏水性”可以互换使用，表示分子或分子的一部分溶解在非极性环境中的倾向，所述非极性环境诸如脂肪、油，以及由伦敦色散力驱动的非极性溶剂。

术语“C_max”(以ng/mL为单位表示)意指最大观测血浆浓度。

术语“T_max”(以小时为单位表示，或者作为研究群体中T_max的中值小时数表示)意指在施用药物后达到C_max的观察时间；如果其出现在多于一个时间点，则T_max被定义为具有该值的第一时间点。

术语“AUC_T0-24h”(以ng·h/mL为单位表示)意指血浆浓度时间曲线下面积(AUC)。

术语“sdOCT”是指谱域光学相干层析成像。

根据本发明的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮是指式(I)的化合物

也称为利司扑兰、RG7916、RO7034067、CAS号1825352-65-5，制备和使用该化合物的方法描述于EP3143025 A1中。制备和使用包含利司扑兰的药物组合物的方法描述于WO2017080967 A1中。

“CYP3A”是指细胞色素P450酶的最丰富且在临床上最重要的亚家族。CYP3A亚家族具有四种人同种型，3A4、3A5、3A7和3A43，CYP3A4最常与药物相互作用相关联。CYP3A同种型构成肝脏总细胞色素P450的大约50％，并且在整个胃肠道、肾和肺中广泛表达，因此最终负责大部分首过代谢。这很重要，因为首过代谢的增加或减少可以具有施用比通常小得多或大得多的剂量当量的药物的效果。超过150种药物是CYP3A4的已知底物，包括许多阿片类镇痛剂、类固醇、抗心律失常剂、三环抗抑郁药、钙通道阻滞剂和大环内酯抗生素。CYP3A底物是例如免疫抑制剂(即环孢素、他克莫司、西罗莫司)、化疗剂(即多西他赛、他莫昔芬、紫杉醇、环磷酰胺、多柔比星、埃罗替尼、依托泊苷、异环磷酰胺、替尼泊苷、长春碱、长春新碱、长春地辛、伊马替尼、伊立替康、索拉非尼、舒尼替尼、维莫非尼、替西罗莫司、阿那曲唑、吉非替尼)、唑类抗真菌剂(即酮康唑、伊曲康唑)、大环内酯类(克拉霉素、红霉素、泰利霉素)、抗抑郁药(即阿米替林、氯米帕明、丙咪嗪、环苯扎林、米氮平、奈法唑酮、瑞波西汀、文拉法辛、曲唑酮、维拉佐酮)、SSRI(西酞普兰、诺氟西汀、舍曲林)、抗精神病药(即氟哌啶醇、阿立哌唑、利培酮、齐拉西酮、匹莫齐特、喹硫平)、阿片类药物(即阿芬太尼、丁丙诺啡、可待因、芬太尼、氢可酮、美沙酮、左旋乙酰美沙醇、曲马多)、苯二氮

类(即阿普唑仑、咪达唑仑、三唑仑、地西泮、氯硝西泮)、催眠药(即佐匹克隆、扎来普隆、唑吡坦)、他汀类药物(即阿托伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、西立伐他汀)、钙通道阻滞剂(即地尔硫卓、非洛地平、硝苯地平、维拉帕米)、性激素激动剂和拮抗剂(即非那雄胺、雌二醇、孕酮、炔雌醇、睾酮、托瑞米芬、比卡鲁胺)、H1受体拮抗剂(即特非那定、阿司咪唑、氯苯那敏)、蛋白酶抑制剂(即茚地那韦、利托那韦、沙奎那韦、奈非那韦)和其他药物(即氨氯地平、乐卡地平、尼群地平、尼索地平、胺碘酮、决奈达隆、奎尼丁、西地那非、他达拉非、激肽、奈韦拉平、布地奈德、氢化可的松、地塞米松、阿苯达唑、西沙必利、阿瑞匹坦、咖啡因、西洛他唑、右美沙芬、多潘立酮、依普利酮、利多卡因、昂丹司琼、普萘洛尔、沙美特罗、华法林、氯吡格雷、奥美拉唑、那格列奈、美索他敏、孟鲁司特、维拉普生、洛沙坦)。

咪达唑仑也是已知的。8-氯-6-(2-氟苯基)-1-甲基-4H-咪唑并[1,5-a][1,4]是式(II)的二氮杂

咪达唑仑是具有镇静、抗焦虑、遗忘和催眠特性的被文献充分记载的产品。咪达唑仑可以其盐酸盐的形式商购获得，例如以基于甘油的糖浆剂的形式，该糖浆剂例如以商品名

销售，其含有2.5mg/ml咪达唑仑。咪达唑仑还以其马来酸盐的形式销售，例如以每片含7.5mg或15mg的片剂，该片剂例如以商标

销售。例如，配制用于经由口腔途径施用的产品是

咪达唑仑的口腔制剂也公开在EP1323422中。咪达唑仑是短效苯二氮

它只被CYP3A代谢。

术语“标准处方剂量”、“正常处方剂量”、“常用剂量”和“标准剂量”可以互换使用，是指根据散页说明书的标准和批准处方药物剂量。标准剂量可以根据施用药物的形式或途径而变化。例如，对于iv、im(肌肉内)和直肠使用，以1ml(5mg咪达唑仑)、3ml(15mg咪达唑仑)、5ml(5mg咪达唑仑)和10ml(50mg咪达唑仑)安瓿形式销售的咪达唑仑的“标准剂量”可以在表1中找到。在另一个示例中，作为7.5mg和15mg片剂形式的片剂销售的咪达唑仑的“标准”剂量，对于成人，该标准剂量为7.5mg至15mg，其中7.5mg是用于例如老年患者的常用剂量。

表1：咪达唑仑安瓿的标准剂量

如本文所用，术语“治疗有效量”是指足以治疗、改善或预防所鉴定的疾病或病症，或者表现出可检测的治疗、预防或抑制作用的化合物的量。该作用可以通过例如临床状态的改善或症状的减轻来检测。受试者的精确有效量将取决于受试者的体重、体型和健康状况；病症的性质和程度；以及被选择用于施用的治疗剂或治疗剂组合。在药物已被美国食品和药物管理局(FDA)批准的情况下，“治疗有效量”是指FDA或其对应的外国机构批准用于治疗所鉴定的疾病或病症的剂量。

如本文所用，“需要利司扑兰疗法”的患者是将受益于施用利司扑兰的患者。该患者可能患有利司扑兰疗法可以用于改善其症状的任何疾病或病症。正在开发利司扑兰用于治疗脊髓性肌肉萎缩症。

如本文所用，需要“咪达唑仑疗法”的患者应当理解为需要镇静疗法、睡眠障碍或癫痫发作疗法的患者。

中断药物

在本文所述的任何实施方案中，包括但不限于提供用于治疗SMA的利司扑兰，利司扑兰在制造用于治疗SMA的药物中的用途，涉及建议、警告、中断、减少给药或剂量向下调整的治疗方法，包装和试剂盒，以及/或者制备或包装利司扑兰的方法，利司扑兰、用途、方法、包装、试剂盒、建议、警告、中断或剂量调整可以适用于作为CYP3A酶底物的任何药物。这些实施方案适用于作为CYP3A酶的底物的任何其他药物。在又一个具体实施方案中，CYP3A底物的剂量应当相对于CYP3A底物的正常处方剂量减少。在另一个具体实施方案中，CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准处方剂量相比减少10％、15％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或98％。

在一个方面，本发明涉及避免在使用任何CYP3A底物(特别地为任何剂量的咪达唑仑)的患者中伴随使用利司扑兰。应当理解，该患者需要利司扑兰疗法并且需要用CYP3A底物治疗，特别地需要镇静疗法，诸如由咪达唑仑提供的镇静疗法。在此类方法中，CYP3A底物(特别地为咪达唑仑)在利司扑兰施用期间被避免使用，反之亦然。在相关方法中，CYP3A底物(特别地为咪达唑仑)在利司扑兰施用期间被中断使用。

在此类方法的实施方案中，所述方法避免通过其他途径以相等剂量伴随施用利司扑兰和CYP3A底物(特别地为咪达唑仑)。例如，基于表1，每天静脉内(i.v)给药3.5mg至7.5mg的咪达唑仑，或以片剂的形式每天口服7.5mg至15mg。

在另一个实施方案中，由于咪达唑仑清除率降低的可能性，在利司扑兰疗法期间应当避免伴随施用任何剂量的咪达唑仑。所避免的咪达唑仑剂量可以在剂量范围内(例如但不限于，咪达唑仑标准剂量的10％至100％之间、咪达唑仑标准剂量的30％至100％之间，或者咪达唑仑标准剂量的40％至100％之间)。

选择替代药物

在涉及避免咪达唑仑标准剂量的方法的示例中，所述方法包括将治疗有效量的利司扑兰施用于患者，并且施用不是咪达唑仑且优选地不是CYP3A底物的替代性镇静疗法。

在一些实施方案中，以替代剂量(即，以低于标准剂量的剂量)向患者施用咪达唑仑。因此，在各种实施方案中，每天按为标准剂量的10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的剂量向患者施用咪达唑仑。

通过建议或提醒患者以改善利司扑兰的给药

在一些方面，本公开提供了一种将利司扑兰疗法施用于需要利司扑兰疗法的患者(例如患有SMA的患者)的方法，其涉及向该患者施用治疗有效量的利司扑兰，并且按以下方式中的任何一种、两种、三种或更多种告知患者信息：

a)告知患者应当避免或中断任何剂量(特别地为标准剂量)的咪达唑仑，

b)告知患者以标准剂量共同施用利司扑兰和咪达唑仑可以改变咪达唑仑的治疗效果或不良反应谱，

c)告知患者以标准剂量共同施用利司扑兰和咪达唑仑导致与咪达唑仑的暴露增加，并且/或者

d)告知患者在接受利司扑兰的患者中，由于咪达唑仑清除率降低和/或与咪达唑仑的暴露增加的可能性，应当慎用任何剂量的咪达唑仑。

给药和剂量修改

在本文所述方法的各种实施方案中，提供了同时施用利司扑兰和咪达唑仑的方法，其中按以下剂量向患者施用利司扑兰：对于介于2个月与2岁之间的患者，为0.2mg/kg；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为0.25mg/kg；对于体重超过或等于20kg的患者，为5mg，并且向患者口服给予或通过其他途径施用剂量减少的咪达唑仑(相对于未服用利司扑兰的患者减少，或者相对于患者先前施用的咪达唑仑剂量减少)。例如，咪达唑仑的剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％，特别地减少10％、15％、20％、25％或30％，更特别地减少10％或15％。

在一些实施方案中，咪达唑仑的剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。在具体实施方案中，咪达唑仑的剂量相对于先前施用的剂量减少约40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。在另外的实施方案中，咪达唑仑的剂量相对于先前施用的咪达唑仑剂量减少约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或更多，或者减少至先前施用剂量的约50％至约98％、或约60％至约90％范围内的剂量。

在更具体的实施方案中，咪达唑仑的剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％或30％，更特别地减少10％或15％。

如上所述，在本文所述的任何实施方案中，包括但不限于中断或剂量减少，包装和试剂盒，以及/或者制备或包装利司扑兰的方法，利司扑兰、用途、方法、包装、试剂盒、建议、警告、中断或剂量调整不仅可以适用于咪达唑仑的口服标准剂量(即7.5mg)，而且可以适用于通过另一种途径(例如咪达唑仑的静脉内(i.v.)给药)给予的任何其他等效剂量。

包装、试剂盒、包装方法和递送方法

在另一方面，提供了一种包装或试剂盒，其包括：利司扑兰，任选地位于容器中；和包装插页、包装标签、说明书或其他标贴，包括本文所公开的任何方法的说明书或指导。

包装插页、包装标签、说明书或其他标贴还可以包括通过按以下剂量施用利司扑兰治疗需要利司扑兰(例如患有SMA)的患者的指导：例如，对于介于2个月与2岁之间的患者，剂量为0.2mg/kg；或者对于超过2岁且体重小于20kg的患者，剂量为0.25mg/kg；并且对于体重超过或等于20kg的患者，剂量为5mg。

在一个相关方面，本公开提供了一种制备或包装利司扑兰药物的方法，其包括将利司扑兰连同包装插页或包装标签或本文所公开的任何方法的说明书一起包装，任选地一起包装在容器中。

在一些实施方案中，公开了一种治疗需要利司扑兰的患者的方法，其包括将本文所公开的任何试剂盒提供、销售或递送给医院、医师或患者。

在一些实施方案中，提供了一种以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％，特别地减少10％、15％、20％、25％或30％，更特别地减少10％或15％的剂量治疗需要咪达唑仑的患者的方法，其包括将包含咪达唑仑连同包装插页或包装标签或本文所公开的任何方法的说明书的试剂盒提供或递送给医院、医师或患者。

根据本文所述的发明，下面描述本发明的更具体的实施方案：

实施方案1.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案2.用于治疗SMA的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案3.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的正常处方剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案4.用于治疗SMA的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的正常处方剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案5.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的咪达唑仑的口服或静脉内标准剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案6.用于治疗SMA的利司扑兰，其中将咪达唑仑口服剂量或静脉内剂量的标准剂量施用于患者，其中在伴随施用利司扑兰期间，咪达唑仑与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案7.用于治疗需要利司扑兰疗法和CYP3A底物疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案8.用于治疗需要利司扑兰疗法和CYP3A底物疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的正常处方剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案9.用于治疗需要利司扑兰疗法和咪达唑仑疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的咪达唑仑的口服、静脉内、肌肉内、直肠、口腔或任何其他施用途径的标准剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案10.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的咪达唑仑口服剂量或静脉内剂量的标准剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案11.用于治疗SMA的利司扑兰，其中将咪达唑仑口服剂量或静脉内剂量的标准剂量施用于患者，其中在伴随施用利司扑兰期间，咪达唑仑与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案12.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中所述利司扑兰用于以治疗有效量施用于所述患者，并且避免以任何口服剂量或以任何静脉内(i.v.)剂量伴随施用咪达唑仑。

实施方案13.根据实施方案1至12中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰和咪达唑仑期间，咪达唑仑剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案14.根据实施方案1至13中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按以下总日剂量施用于所述患者：对于介于2个月与2岁之间的患者，为0.2mg/kg；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为0.25mg/kg；并且对于体重超过或等于20kg的患者，为5mg。

实施方案15.根据实施方案1至12中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按以下总日剂量口服施用于患者：对于介于2个月与2岁之间的患者，为0.2mg/kg；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为0.25mg/kg；并且对于体重超过或等于20kg的患者，为5mg。

实施方案16.根据实施方案1至15中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按总日剂量即0.2mg/kg的剂量口服施用于介于2个月与2岁之间的患者。

实施方案17.根据实施方案1至16中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按总日剂量即0.25mg利司扑兰/千克体重/天的剂量口服施用于超过2岁且体重小于20kg的患者。

实施方案18.根据实施方案1至16中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按总日剂量即5mg利司扑兰/天的剂量口服施用于体重超过或等于20kg的患者。

实施方案19.根据实施方案1至18中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述咪达唑仑以胶囊剂或片剂的单位剂型口服施用。

实施方案20.根据实施方案1至16中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述单位剂型中的咪达唑仑的量为7.5mg或15mg。

实施方案21.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，对于介于2个月与2岁之间的患者，将0.20mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者。

实施方案22.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，对于超过2岁且体重小于20kg的患者，将0.25mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者。

实施方案23.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，对于体重超过或等于20kg的患者，将5mg利司扑兰/天的剂量施用于所述患者。

实施方案24.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按0.20mg利司扑兰/千克体重/天的总日剂量施用于介于2个月与2岁之间的患者。

实施方案25.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按0.25mg利司扑兰/千克体重/天的总日剂量施用于超过2岁且体重小于20kg的患者。

实施方案26.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按5mg利司扑兰/天的总日剂量施用于体重超过或等于20kg的患者。

实施方案27.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按约0.20mg利司扑兰/千克体重/天的总日剂量施用于介于2个月与2岁之间的患者。

实施方案28.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按约0.25mg利司扑兰/千克体重/天的总日剂量施用于超过2岁且体重小于20kg的患者。

实施方案29.根据实施方案1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按约5mg利司扑兰/天的总日剂量施用于体重超过或等于20kg的患者。

实施方案30.根据实施方案1至29中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述患者患有SMA。

实施方案31.根据实施方案1至30中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述患者患有I型SMA、II型SMA或III型SMA。

实施方案32.根据实施方案1至31中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述患者患有II型SMA或III型SMA。

实施方案33.根据实施方案1至31中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述患者患有I型SMA。

实施方案34.根据实施方案1至31中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述患者患有II型SMA。

实施方案35.根据实施方案1至31中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述患者患有III型SMA。

实施方案36.用于在伴随施用利司扑兰期间治疗需要咪达唑仑疗法的患者，例如需要镇静疗法的患者，或者治疗睡眠障碍或癫痫发作的咪达唑仑，其中施用于所述患者的咪达唑仑的标准剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案37.用于在伴随施用利司扑兰期间治疗癫痫发作的咪达唑仑，其中施用于所述患者的咪达唑仑的标准剂量减少。

实施方案38.用于治疗癫痫发作的咪达唑仑，其中所述咪达唑仑用于以口服剂量或以静脉内(i.v.)剂量施用，其中在伴随施用利司扑兰期间避免施用咪达唑仑。

实施方案39.用于治疗需要咪达唑仑疗法的患者的咪达唑仑，其中所述咪达唑仑用于以口服剂量或以静脉内(i.v.)剂量施用，其中在伴随施用利司扑兰期间避免施用咪达唑仑。

实施方案40.根据实施方案36至39中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在施用利司扑兰期间，咪达唑仑剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

实施方案41.根据实施方案36至40中任一项所述使用的咪达唑仑，其中避免施用所述咪达唑仑，以避免咪达唑仑清除率降低的可能性或者与咪达唑仑的暴露增加的可能性。

实施方案42.根据实施方案36至41中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在伴随施用咪达唑仑期间，对于介于2个月与2岁之间的患者，将0.20mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，将0.25mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者；或者对于体重超过或等于20kg的患者，将5mg利司扑兰/天的剂量施用于所述患者。

实施方案43.根据实施方案36至42中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按以下总日剂量施用：对于介于2个月与2岁之间的患者，为0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，为5mg利司扑兰/天。

实施方案44.根据实施方案36至42中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按以下总日剂量施用：对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为约0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，为约5mg利司扑兰/天。

实施方案45.根据实施方案36至44中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有SMA。

实施方案46.根据实施方案36至45中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有I型SMA、II型SMA或III型SMA。

实施方案47.根据实施方案36至46中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有II型SMA或III型SMA。

实施方案48.根据实施方案36至46中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有I型SMA。

实施方案49.根据实施方案36至46中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有II型SMA。

实施方案50.根据实施方案36至46中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有III型SMA。

实施方案51.咪达唑仑在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量施用的用途，对于介于2个月与2岁之间的患者，使用剂量为约0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，使用剂量为约0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，使用剂量为约5mg利司扑兰/天。

实施方案52.咪达唑仑在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量施用的用途，对于介于2个月与2岁之间的患者，使用剂量为0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，使用剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，使用剂量为5mg利司扑兰/天。

实施方案53.咪达唑仑在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量使用的咪达唑仑，对于介于2个月与2岁之间的患者，使用剂量为0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，使用剂量为约0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，使用剂量为约5mg利司扑兰/天。

实施方案54.咪达唑仑在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量使用的咪达唑仑，对于超过2岁且体重小于20kg的患者，日剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，日剂量为5mg利司扑兰/天。

实施方案55.咪达唑仑的用途或根据实施方案51至54中任一项所述使用的咪达唑仑，其用于避免咪达唑仑清除率降低的可能性或者与咪达唑仑的暴露增加的可能性。

实施方案56.咪达唑仑的用途或根据实施方案51至55中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述咪达唑仑在一种或多种单位剂型中，所述单位剂型为胶囊剂或片剂。

实施方案57.咪达唑仑的用途或根据实施方案51至56中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述一种或多种单位剂型中的每一者中的咪达唑仑的量为7.5mg或15mg。

实施方案58.咪达唑仑的用途或根据实施方案51至57中任一项所述使用的咪达唑仑，其在患有SMA的患者中施用。

实施方案59.按以下总日剂量使用的用于治疗患者的SMA的利司扑兰：对于超过2岁且体重小于20kg的患者，总日剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，总日剂量为5mg利司扑兰/天，所述患者伴随接受与咪达唑仑的标准剂量相比剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的咪达唑仑。

实施方案60.利司扑兰按以下总日剂量用于治疗患者的SMA的用途：对于超过2岁且体重小于20kg的患者，总日剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，总日剂量为5mg利司扑兰/天，所述患者伴随接受与咪达唑仑的标准剂量相比剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的咪达唑仑。

实施方案61.利司扑兰的用途或根据实施方案59至60中任一项所述使用的利司扑兰，其中SMA选自由I型SMA、II型SMA或III型SMA组成的组。

实施方案62.一种用于治疗患者的SMA的药物组合物，其包含药用赋形剂和5mg利司扑兰，所述患者伴随接受与咪达唑仑的标准剂量相比剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的咪达唑仑。

实施方案63.一种包装或试剂盒，其包括：(a)利司扑兰，任选地位于容器中，和(b)包装插页、包装标签、说明书或其他标贴，其是关于根据权利要求1至25中任一项所述的用途或使用的利司扑兰。。

实施方案64.根据实施方案62所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含利司扑兰，所述利司扑兰通过以下方式被配制为口服水性溶液剂：将所述利司扑兰溶解在pH小于pH 4、特别地小于pH 3.8、更特别地小于pH3.6、最特别地为pH 3.0至3.2的缓冲体系中，以便提供足够高的药物浓度，所述缓冲体系例如柠檬酸缓冲体系、苹果酸盐缓冲体系、马来酸盐缓冲体系或酒石酸盐缓冲体系，最特别地为酒石酸盐缓冲体系。

实施方案65.根据实施方案62所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含用于构成口服溶液剂呈干燥散剂或颗粒剂形式的利司扑兰。

实施方案66.根据实施方案62所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含利司扑兰、稀释剂，诸如山梨糖醇、异麦芽酮糖醇，或特别地为甘露糖醇，以及它们的组合，其确保粉末共混物在构成所述口服溶液剂期间快速溶出。

实施方案67.根据实施方案62至66中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·利司扑兰；以及

·缓冲体系，其选自柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐或酒石酸盐，特别地为苹果酸盐或酒石酸盐，最特别地为酒石酸盐；或替代地，缓冲体系的对应的酸单独地作为酸化剂，特别地为酒石酸。

实施方案68.根据实施方案62至67中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮或其药用盐；

·缓冲体系，特别地为以下缓冲体系，其选自柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐或酒石酸盐，更特别地为苹果酸盐或酒石酸盐，最特别地为酒石酸盐；或替代地，缓冲体系的对应的酸单独地作为酸化剂，特别地为酒石酸；以及

·稀释剂，特别地为甘露糖醇或甘露糖醇和异麦芽酮糖醇的混合物，更特别地为甘露糖醇。

实施方案69.根据实施方案62至68中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·1重量％至10重量％的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮或其药用盐；

·5重量％至15重量％的缓冲体系，特别地为以下缓冲体系，其选自柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐或酒石酸盐，更特别地为苹果酸盐或酒石酸盐，最特别地为酒石酸盐；或替代地，缓冲体系的对应的酸单独地作为酸化剂，特别地为酒石酸；

·40重量％至70重量％的稀释剂，特别地为甘露糖醇或甘露糖醇和异麦芽酮糖醇的混合物，更特别地为甘露糖醇；

·1重量％至4重量％的抗氧化剂，特别地为抗坏血酸；

·0.5重量％至2重量％的稳定剂，特别地为依地酸二钠；

·0.5重量％至2重量％的润滑剂，特别地为PEG6000；

·0重量％至3重量％的甜味剂，特别地为三氯蔗糖或糖精钠，最特别地为三氯蔗糖；以及

·0重量％至20重量％的风味剂，特别地为草莓风味剂或香草风味剂；

其中各成分的总量不超过100重量％。

实施方案70.根据实施方案62至69中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·2重量％至6重量％的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮或其药用盐；

·9重量％至13重量％的酒石酸盐缓冲体系；

·45重量％至55重量％的作为第一稀释剂的甘露糖醇和8重量％至10重量％的作为第二稀释剂的异麦芽酮糖醇；

·1重量％至3重量％的作为抗氧化剂的抗坏血酸；

·0.5重量％至2重量％的作为稳定剂的依地酸二钠；

·0.5重量％至2重量％的作为润滑剂的PEG6000；

·1.5重量％至2重量％的作为甜味剂的三氯蔗糖；以及

·13重量％至17重量％的草莓风味剂；

其中各成分的总量不超过100重量％。

以下实施例仅旨在用于说明本发明的实践，而非以限制的方式提供。

在本申请中，使用以下缩写和定义：

实施例1：

评价利司扑兰对人肝脏微粒体中的细胞色素P450催化活性的抑制。

本研究的目的是在人肝脏微粒体测试系统中测定利司扑兰对细胞色素P450(CYP)同种型CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4/5的直接和时间依赖性抑制。

用高达12.5μM的利司扑兰测试浓度未检测到CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19或CYP2D6的显著的可逆或时间依赖性抑制。

利司扑兰证明引起CYP3A4/5(咪达唑仑1’-羟化酶和睾酮6β-羟化酶)直接抑制的可能性低。对于底物咪达唑仑和睾酮，所测试的高达12.5μM的利司扑兰分别表现出最大28％和55％的抑制。估计利司扑兰抑制睾酮代谢的IC50为11μM。(在该研究中，使用50μM的睾酮浓度)。

利司扑兰与HLM一起预温育时的结果表明利司扑兰可能是CYP3A4/5的时间依赖性抑制剂。KI值和kinact值分别估计为13μM和0.065min-1。然而，这些值存在一些不确定性，因为时间依赖性灭活效果由于溶解度限制而在所测试的利司扑兰浓度下未达到饱和。

利司扑兰的直接和时间依赖性抑制数据汇总在表2中。CYP3A4 KI和kinact参数汇总在表3中。

用于直接和时间依赖性抑制测定的阳性对照抑制剂证明了适当起作用的测试系统。

表2：利司扑兰对细胞色素P450酶的直接和时间依赖性抑制

NA–不适用

*IC50的倍数变化不适用于所有酶的时间依赖性抑制评价。这是因为抑制不足以计算IC50值。

表3：利司扑兰的CYP3A4灭活参数

探针底物	k<sub>inact</sub>(min-1)	K<sub>I</sub>(μM)
			咪达唑仑	0.065	13

目标

本研究的目的是使用模型底物和人肝脏微粒体来确定利司扑兰是否在体外抑制人细胞色素P450(CYP)催化活性。

合规性

这是根据研究方案和适用的Corning Life Sciences-Discovery Labware标准操作规程(SOP)进行的非GLP研究。

主要计算机系统协助：

本研究中所使用的主要计算机/软件系统包括Microsoft EXCEL和

软件v1.6.2(Applied Biosystems)，后者用于生成LC-MS/MS数据。

供试品

供试品利司扑兰由申办者提供。有关供试品的信息描述于下面的(表4)中。

表4供试品信息

供试品名称：	利司扑兰
		批次纯度：	99.92％
分子量(游离酸/碱)：	401.464
		所提供的物理状态(固体或溶液)：	固体
储备溶液溶剂：	乙醇:水(80％:20％)
		储存条件(固体)：	-20℃
储存条件(储备溶液)：	新鲜制备

细胞色素P450酶催化活性的抑制是基于代谢的药物相互作用的主要机制。测定 IC50变化或KI/kinact值(对于时间依赖性和NADPH依赖性抑制)有助于预测基于代谢的药 物-药物相互作用⁽¹-3)。

测试系统描述

使用Corning UltraPool HLM 150^TM混合人肝脏微粒体(Corning目录号452117)进行该研究。所使用的HLM制备物的批次数据表存在于表5中。

表5

表5

表5：批次数据表

·用NADPH产生系统(1.3mM NADP、3.3mM葡萄糖6-磷酸和0.4U/ml葡萄糖6-磷酸脱氢酶)、3.3mM MgCl2以0.8mg/ml蛋白质(除CYP3A4外，其为0.5mg/ml)进行所有的细胞色素P450测定，并且温育20分钟或10分钟(CYP2C8、CYP2C9、CYP3A4和CYP4A)。所有P450酶均使用0.1M磷酸钾缓冲液(pH 7.4)，CYP2B6、CYP2C8和CYP2C19(0.05M)以及CYP2A6、CYP2C9和CYP4A除外，它们使用0.1M Tris(pH7.5)。用相同的NADPH产生系统、3.3mM MgCl2、1.2mM二亚乙基三胺五乙酸、0.5mg/ml Triton X-100在0.05M甘氨酸缓冲液(pH 9.5)中以相同的体积和蛋白质浓度进行FMO测定，并且温育10分钟。UGT葡萄糖醛酸化测定在50mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.5)中含有以下浓度的蛋白质：对于UGT1A1和1A4，为0.5mg/m1；对于1A6，为0.1mg/ml；对于1A9，为0.15mg/ml；并且对于2B7，为0.8mg/m1，连同2mM UDPGA、10mM MgCl2、25ug/ml丙甲甘肽。将UGT1A1温育30分钟，将1A4温育20分钟，将1A6温育15分钟，将1A9温育10分钟，并且将2B7温育25分钟。活性表示为pmol产物/(mg蛋白质x min)，细胞色素c还原酶除外，其表示为hmol产物/(mg蛋白质x min)。

·使用标准方案进行蛋白质印迹测定。SDS凝胶电泳通过Laemmli的方法进行(Laemmli，U.K，1970，Nature，227：680-685)。使用来源于重组P450同种型的可靠标准品定量HLM中的CYP蛋白质丰度。

·该库由每个供体相等毫克的微粒体组成。

·危害警告：该微粒体制备物由新鲜冷冻的人组织制备。所有供体组织均已通过PCR，针对以下各项被检测为病原体阴性：HIV I/TI、HTLV I/II、CMV、HBV和HCV，然而，我们建议这种材料被认为是潜在的生物危害。

·CMV血清学阳性的供体在供体人口统计表中用单星号标识。CMV血清学未知的供体用双星号标识。CMV血清学阴性的供体

Discovery Labware，lnc.，6Henshaw Street，Woburn，MA 01801，Tel：1.978.442.2200(U.S.)

CLSTechServ@Corning.com www.corning.com/lifesciences

CORNING仅用于研究用途。不用于诊断或治疗过程。

有关商标清单，请访问www.corning.com/lifesciences/trademarks

2013Corning Incorporated

实验：CYP450抑制

研究设计：

酶/底物对和温育条件

进行IC50测定和IC50变化测定，以评价供试品引起的直接和时间依赖性酶抑制。酶/底物对和温育条件列于表6和表7中。对于所有浓度的供试品，温育物中的最终有机溶剂浓度是恒定的。

直接抑制测定

反应混合物(400μL)在100mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中含有七种非零浓度的供试品(0、0.1、0.2、0.5、1.3、3.2、8.0和12.5μM)、微粒体蛋白质、NADPH再生系统(1.3mM NADP+、3.3mM葡萄糖-6-磷酸、0.4U/mL葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、3.3mM氯化镁)和一种浓度的探针底物(表6)。通过添加稀释的HLM蛋白质来引发反应，并且在37℃下温育指定的时间(表6)。通过添加100μL终止溶液(0.1％甲酸的乙腈溶液，含有稳定同位素标记的内标)并且置于冰上来终止反应。

表6：酶/底物对(直接抑制)

时间依赖性抑制测定(IC₅₀变化)

预温育反应混合物在100mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中含有七种非零浓度的供试品(0、0.1、0.2、0.5、1.3、3.2、8.0和12.5μM)和微粒体蛋白质，具有或不具有NADPH再生系统(1.3mM NADP+、3.3mM葡萄糖-6-磷酸、0.4U/mL葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和3.3mM氯化镁)。没有NADPH再生系统的温育在其位置具有水。通过HLM引发反应并且在37℃下温育。

在30min的预温育时间之后，将40μL(或者仅对于CYP2C19，为80μL)等分试样转移到预热的第二反应混合物(400μL最终体积)中，该第二反应混合物在100mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中含有NADPH再生系统和一种浓度的探针底物(表7)。将反应在37℃下温育表7中指定的时间，并且通过添加100μL终止溶液(0.1％甲酸的乙腈溶液，含有稳定同位素标记的内标)并且置于冰上来终止反应。

表7：酶/底物对(时间依赖性抑制，IC50变化)

¹HLM浓度用于预温育，并且第二HLM浓度与表6中的相同。

时间依赖性抑制(CYP3A4 K_I和K_inact)

预温育反应混合物在100mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中含有八种非零浓度的供试品(0、0.1、0.2、0.5、1.3、3.2、8.0和12.5μM)、微粒体蛋白质和NADPH再生系统(1.3mM NADP+、3.3mM葡萄糖-6-磷酸、0.4U/mL葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和3.3mM氯化镁)。通过添加稀释的HLM蛋白质来引发反应，并且在37℃下温育。在六段不同的预温育时间(表8)之后，将二次温育的40μL等分试样转移到预热的第二反应混合物(400μL最终体积)中，该第二反应混合物在100mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中含有NADPH再生系统和作为探针底物的咪达唑仑。将反应在37℃下温育，并且通过将反应混合物的等分试样(200μL)与终止溶液(50μL，0.1％甲酸的乙腈溶液，含有稳定同位素标记的内标)混合并且置于冰上来终止反应。

表8：酶/底物对(时间依赖性抑制，CYP3A4-K_I和k_inact)

¹HLM浓度用于预温育，并且第二HLM浓度与表6中的相同。

重复测定

所有温育均一式两份地进行。

分析

对样品进行离心，以将沉淀的蛋白质压缩成粒料。将上清液储存在-20℃下，用于随后通过LC/MS/MS分析。通过LC/MS/MS分析探针底物代谢物(表9)³。使用每种代谢物的标准曲线，基于峰面积比(分析物/内标)计算催化活性。

表9：用于分析P450探针底物代谢物的LC/MS/MS方法

阳性对照

根据上述方法，使用30min预温育时间点，在针对IC50变化测定使用或不使用NADPH的情况下，使用以下阳性对照CYP抑制剂来进行IC50测定(表10)和IC50变化测定(表11)。

对于KI/kinact测定，使用与供试品相同的预温育时间点，以单一浓度(0.8μM)包括阳性对照时间依赖性抑制剂。

表10：用于直接抑制的阳性对照抑制剂、接受标准和获得的结果

表11：用于时间依赖性抑制的阳性对照抑制剂、接受标准和获得的结果

¹ 30min预温育后的IC50值基于二次温育中的抑制剂浓度计算。

计算：

剩余活性百分比

％剩余＝(C_+I/C^-I)*100

其中：

C_+I 在抑制剂存在下形成的探针底物代谢物的浓度

C-_I 在不存在抑制剂的情况下形成的探针底物代谢物的浓度

IC₅₀

IC₅₀值通过非线性回归，使用XLfit(模型205，四参数逻辑拟合)确定；最大值和最小值固定在100％和0％。

Fit＝A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))

其中：

A 是最小y值

B 是最大y值

C 是IC₅₀并且是与50％抑制相关联的抑制剂浓度

D 是斜率因子

IC₅₀变化

IC₅₀变化＝IC₅₀(-NADPH)/IC₅₀(+NADPH)

其中：

IC₅₀(-NADPH)是在不存在NADPH的情况下预温育后获得的IC₅₀值IC₅₀(+NADPH)是在NADPH存在下预温育后获得的IC₅₀值

K_I和k_inact

为了测定k_inact值和K_I值，对于每种供试品浓度，将残留活性的自然对数(针对在不存在抑制剂的情况下随时间推移观察到的任何活性损失进行校正)相对于预温育时间作图。由曲线的线性部分的斜率估计灭活的一级速率常数(λ或k_obs)。使用非线性回归，利用GraphPad Prism软件6.01版如下测定灭活动力学参数(k_inact和K_I)：

其中，

λ或kobs是根据LN(残留活性)随预温育时间变化的图线的斜率估计的灭活一级速率常数

[I] 是抑制剂浓度

k_inact 是酶灭活的最大速率[min^-1]

K_I 是导致50％的最大酶灭活的抑制剂浓度

因为时间依赖性灭活效果由于供试品溶解度的限制而在利司扑兰浓度下未达到饱和，所以基于kobs随测试浓度变化的线性拟合的斜率(y＝斜率·x)来估计kinact/KI比。

结果和讨论：

CYP同种型的直接抑制

利司扑兰直接抑制CYP同种型的结果汇总在表2中。用高达12.5μM的利司扑兰测试浓度未检测到CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19或CYP2D6的显著的可逆抑制。利司扑兰证明引起CYP3A4/5直接抑制的可能性低，其中对于底物咪达唑仑和睾酮，分别观察到最大28％和55％的抑制。估计抑制CYP3A4/5介导的睾酮6β羟基化的IC50为11μM。此处采用50μM的底物浓度，低于65μM的Km浓度。采用利司扑兰的个体CYP3A4抑制数据列于表12和表13中。剩余活性百分比随利司扑兰或阳性对照浓度的变化以图形形式呈现在图1和图2中。所有阳性对照抑制剂均符合接受标准(参见表10)，因此证明测试系统功能正常。

表12：利司扑兰对CYP3A4-咪达唑仑活性的影响

表13：利司扑兰对CYP3A4-睾酮活性的影响

CYP同种型的时间依赖性抑制

利司扑兰对CYP同种型的时间依赖性抑制的结果汇总在表2中。用高达12.5μM的利司扑兰测试浓度未检测到CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19或CYP2D6的显著的时间依赖性抑制。当在NADPH存在下用HLM预温育利司扑兰时，观察到利司扑兰在咪达唑仑和睾酮羟化酶抑制中的表观效力增加，IC50变化>2。这些结果表明利司扑兰可能是CYP3A4/5的时间依赖性抑制剂。

采用利司扑兰和阳性对照的个体CYP3A4时间依赖性抑制数据列于表14、表15、表16和表17中。数据以图形形式呈现在图3和图4中。所有阳性对照抑制剂均符合接受标准(参见表11)，因此证明测试系统功能正常。

表14：利司扑兰对CYP3A4-咪达唑仑灭活(加NADPH)的影响

表15：利司扑兰对CYP3A4-咪达唑仑灭活(减NADPH)的影响

表16：利司扑兰对CYP3A4-睾酮灭活(加NADPH)的影响

表17：利司扑兰对CYP3A4-睾酮灭活(减NADPH)的影响

测定K_I和k_inact

利司扑兰抑制CYP3A4/5的K_I和k_inact测定结果汇总在表3中。K_I值和k_inact值分别估计为13μM和0.065min^-1。然而，这些值存在一些不确定性，因为时间依赖性灭活效果由于溶解度限制而在所测试的利司扑兰浓度下未达到饱和。采用利司扑兰和阳性对照的个体剩余活性百分比数据列于表18中。灭活图线和kobs随浓度变化的图线示于图5中。

表18：以咪达唑仑为底物时的剩余CYP3A4活性百分比

结论

总而言之，利司扑兰证明引起CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP2D6的直接抑制或时间依赖性抑制的可能性低。

利司扑兰在测试浓度下示出对CYP3A4/5的一些抑制。此外，利司扑兰证明引起除CYP3A4/5之外的所有同种型的时间依赖性抑制的可能性低。随后的CYP3A4/5失活动力学测定分别产生13μM和0.065min^-1的K_I估计值和k_inact估计值。

实施例2：

正在进行I期两部分开放标签研究，以研究调查在健康参与者中口服施用后，多剂量利司扑兰的安全性、耐受性和药代动力学，以及利司扑兰对咪达唑仑的药代动力学的影响。

本研究的第1部分调查研究了向健康参与者每天一次(QD)施用且持续14天的多个口服剂量的利司扑兰的安全性、耐受性和药代动力学(PK)。第1部分收集的PK和安全性数据将用于限定剂量并且使得能够开始本研究的第2部分。

本研究的第2部分评估了在向健康参与者施用后多个口服剂量的利司扑兰对咪达唑仑PK的影响，以检查利司扑兰与细胞色素P450 3A底物的药物-药物相互作用。

研究设计

这将是I期两部分开放标签非随机研究，用于调查研究在健康成年男性和女性参与者中口服施用后，多剂量利司扑兰的安全性、耐受性和PK(第1部分)，以及利司扑兰对咪达唑仑PK的影响(第2部分)。

治疗组和持续时间

注：第2部分将基于第1部分的数据限定。

研究时长

每个参与者的研究总持续时间将长达约8周，划分如下：

·筛选：长达27天(第-28天至第-2天)。

·诊所内医疗服务阶段：第-1天至第16天(第1部分)或第-1天至第18天(第2部分)。

·非住院访视：第18天和第20天(第1部分)或第20天和第22天(第2部分)。

·安全性随访(研究后)：第1部分和第2部分中研究药物最后一剂施用后10±2天。

研究终点

本研究的终点被定义为对最后一个参与者进行最后一次访视的日期。

参与者群体

本研究的参与者将是介于18岁与55岁之间(含端值)的健康女性和男性志愿者，其满足所有给出的合格标准。

纳入/排除标准

纳入标准

只有当满足所有下列标准时，参与者才有资格被纳入研究中：

1)有提供参与临床试验的书面同意书的意愿和能力。

2)健康的参与者。

健康状态由研究者基于对病史和手术史、体格检查结果、生命体征、12导联ECG和实验室评估(血液学、凝血、血液化学、血清学和尿分析)的详细回顾来定义。

3)筛选时年龄为18岁至55岁(含端值)的男性和女性参与者。

女性参与者：如果女性参与者是不具有生育潜能的女性(WONCBP)，则她有资格参与。

4)在筛选时，体重指数(BMI)为18.0kg/m2至32.0kg/m2(含端值)。

5)在治疗期期间使用适当的避孕方法，直到最后一次施用研究药物后4个月为止。在该同一时期，男性必须避免供给精子。

被认为是该研究可接受的男性参与者的避孕方法：

·对于非怀孕的女性伴侣，使用避孕措施，诸如带杀精子剂的避孕套，加上额外的避孕方法，对于为具有生育潜能的女性的伴侣，这些措施结合起来所产生的年失败率低于1％。额外的避孕方法必须是下列之一：与杀精子剂结合的隔膜、宫内避孕器、可注射或可植入避孕药、口服激素类避孕药(例如，“仅含孕酮的药丸(progesterone only pill)”、片剂、贴剂，或者具有雌激素和孕酮两者的阴道环)。在治疗期期间需要避孕，并且在最后一剂利司扑兰后需要避孕至少4个月。

·对于怀孕的女性伴侣，使用避孕措施诸如避孕套，以避免在治疗期期间和最后一剂利司扑兰后至少28天接触胚胎。

禁欲(包括那些作为其常态和优选生活方式的一部分实行禁欲的人、周期性禁欲，例如日历法、排卵法、症状体温法或排卵后方法)和体外射精是本研究中不可接受的避孕方法。注意，只有WONCBP和男性才有资格参与本研究。

6)有完成本研究所有方面的意愿和能力。

排除标准

如果满足下列标准中的任何一个，则将参与者从该研究排除：

1)任何临床上显著的胃肠道疾病、肾脏疾病、肝脏疾病、支气管-肺部疾病、神经疾病、精神疾病、心血管疾病、内分泌疾病、血液疾病或变态反应性疾病、代谢紊乱、癌症或肝硬化的病史。

2)可能干扰或对其进行的治疗可能干扰本研究的开展、或者在研究者看来会对本研究的参与者带来不可接受的风险的伴随疾病或病症，包括但不限于下列各项：

·筛选前1个月内的任何重大疾病，或者筛选前1周内并且直到首次施用研究药物期间的任何发热性疾病。

3)任何可能改变药物的吸收、代谢或消除的医学病症的病史或证据。

4)影响胃动力或改变胃肠道的胃肠道手术史(不复杂的阑尾切除术和疝修补术除外)(排除胆囊切除术)。

5)临床上显著的ECG异常的病史或存在(基于3次连续测量的平均值[如果第一次测量超出范围，则再完成2次测量并取平均值])(例如，PQ/PR间期>210ms，使用Fridericia公式校正心率的QT间期[QTcF]，男性>450ms，女性QTcF>470ms)，或者心血管疾病的病史或存在(例如，心功能不全、冠状动脉疾病、心肌病、充血性心力衰竭、先天性长QT综合征家族史、猝死家族史)。

6)过去5年中的恶性肿瘤史。

7)仅在筛选时确认(基于3次连续测量的平均值[如果第一次测量超出范围，则再完成2次测量并取平均值])收缩压>140或<90mmHg，并且舒张压>90或<50mmHg。

8)仅在筛选时确认(基于3次连续测量的平均值)静息脉搏率(PR)>100或<40bmp。

9)实验室测试结果(包括血液学、血生化检查和尿分析)中的临床上显著的异常(由研究者判断)。如果结果不确定或可疑，则可以在第-1天重复筛选期间进行的测试以确认合格性。

10)在筛选时有关人类免疫缺陷病毒(HIV)-1、HIV-2、乙肝病毒或丙肝病毒(血清学)测试的阳性结果。

11)在施用研究药物或筛选时进行的阳性药物筛选测试之前2年内的任何疑似酒精滥用或酒精滥用史，以及/或者滥用药物的任何定期消费/成瘾史或者疑似定期消费/成瘾。

12)从筛选前1个月直到随访为止，对含烟草产品的任何消费(包括但不限于以下：吸烟、吸雪茄等)。

13)在首次施用研究药物前3个月内和本研究持续期间捐献血液或输血用血液产品超过500mL。

14)在筛选前90天内参与试验药物医药产品或医疗器械研究。

15)使用禁忌药物或草药疗法。

16)自发性的或施用研究药物后，或者暴露于食物或环境因子后，任何临床上显著的超敏反应史或变态反应史。

17)对研究药物制剂中的任何赋形剂的超敏反应史。

18)对咪达唑仑或者任何其他苯二氮

或其制剂成分的超敏反应史(这仅适用于第2部分中的参与者)。

19)对于第2部分参与者：急性闭角型青光眼病史。

20)研究者判断存在自杀风险的参与者，或者有尝试自杀或杀人史的任何参与者。

21)处于司法监督、监护或管理下的参与者。

22)在研究者看来不应当参与本研究的参与者。

参与者人数

本研究最多可以总计入选40名参与者，如下所示：

·第1部分：将入选8名参与者，以获得6名可评价参与者。

·第2部分：将入选28名参与者，以获得至少26名可评价参与者。

在第2部分中的脱落率高于预期的情况下，增加4名参与者，以获得26名可评价参与者。

在第1部分中，参与者将连续14天每天一次接受5mg剂量的利司扑兰。5mg利司扑兰剂量已显示在SMA患者中超过1年的治疗是安全的和耐受良好的。在审阅了所有可获得的安全性和耐受性数据后，将作出进行到本研究的第2部分的决定，这些数据包括来自第1部分的最少4名参与者的最后一次施用研究药物后最长48小时(包括48小时在内)收集的AE、ECG、生命体征、实验室安全性测试结果(即血液学、临床化学和尿分析)以及最后一次施用研究药物后最长24小时(包括24小时在内)可获得的血浆PK数据。将基于在第1部分中获得的PK和安全性数据确定第2部分中的利司扑兰剂量，目标是在第2部分中实现2000ng.h/mL的平均暴露(在稳态下在给药间隔[AUCtau]内的平均AUC)(即，在SMA患者中观察到的治疗暴露)。

将在第2部分开始之前召开剂量递增会议，以便评价第1部分的数据并且选择将在本研究的第2部分中施用的利司扑兰剂量。

在第2部分中，所有研究参与者将在第1天接受单个口服剂量的2mg咪达唑仑。在第3天，将开始使用利司扑兰的14天QD治疗期(以稳态下2000ng.h/mL的平均AUCtau为目标；精确剂量将基于第1部分的结果)，且在第15天(在第13剂利司扑兰后1小时)再次施用单剂量2mg咪达唑仑。

在两个研究部分中，PK血液样品将在表19中规定的时间点采集。将在本研究的整个过程中进行安全性监测，如稍后所述。

第1部分和第2部分的活动时间表(SoA)在表19中提供。

伴随用药

不允许伴随用药，对乙酰氨基酚、用于绝经后妇女的激素替代疗法和治疗AE的药物除外。

参与者在从筛选前30天直到随访为止所使用的任何药物或疫苗(包括非处方药[OTC]或处方药、批准的膳食和草药补充剂、营养补充剂)和任何非药物干预(例如，个体心理疗法、认知行为疗法、戒烟疗法和康复疗法)都必须连同使用原因、施用日期(包括开始日期和结束日期)和剂量信息(包括剂量和频率)一起记录。

允许的疗法

使用激素替代疗法的参与者应当继续使用。

如果需要，允许使用对乙酰氨基酚，剂量≤2g/天。研究者可以根据具体情况考虑治疗AE所需的其他伴随用药。

禁止的疗法

筛选后30天内服用的所有药物(处方药和OTC)都将记录在适当的eCRF上。

作为一般规则，除对乙酰氨基酚、用于绝经后妇女的激素替代疗法和治疗AE的药物外，将不允许伴随用药，除非例外的基本原理在研究者与申办者之间进行了讨论并清楚地记载，并且被存档在研究中心的文件中。

参与者必须在研究治疗开始前14天或5个半衰期(以较长者为准)内直到完成随访为止放弃服用处方药或非处方药(包括维生素和膳食或草药补充剂)，除非在研究者和申办者看来该药物不会干扰本研究。

明确禁止以下药物：

·任何CYP3A4抑制剂(例如，酮康唑、咪康唑、伊曲康唑、氟康唑、红霉素、克拉霉素、雷尼替丁、西咪替丁)。

·任何CYP3A4诱导剂(例如，利福平、利福布汀、糖皮质激素、卡马西平、苯妥英、苯巴比妥、圣约翰草)。

·任何有机阳离子转运蛋白2和MATE底物(例如，金刚烷胺、西咪替丁、美金刚、阿米洛利、法莫替丁、二甲双胍、吲哚洛尔、雷尼替丁、普鲁卡因酰胺、伐尼克兰、阿昔洛韦、更昔洛韦、奥沙利铂、头孢氨苄、头孢拉定、非索非那丁)。

·具有已知或潜在的视网膜毒性的药物(例如，氯喹和羟氯喹、硫利达嗪、瑞替加滨、氨己烯酸、去铁胺、托吡酯、拉坦前列素、烟酸、罗格列酮、他莫昔芬、斑蝥黄、西地那非、干扰素、长期使用的米诺环素)。

活动时间表

活动时间表在表19中提供

表19：活动时间表

缩写：ECG＝心电图；PK＝药代动力学。

注：标称时间点是指施用利司扑兰剂量的时间点，第1天的咪达唑仑PK采样、生命体征和ECG除外，后者是指施用咪达唑仑剂量的时间点。给药后1小时的咪达唑仑PK样品对应于一天内与利司扑兰样品给药后2小时相同的时间。

a收缩压和舒张压、脉搏率和口腔体温(仅仅是筛选时和第1天给药前的口腔体温)。

剂量决定标准

在审阅了第1部分中来自最少4名参与者的最后一次施用研究药物后最长48小时收集的所有安全性和耐受性信息(包括AE、ECG、生命体征和临床实验室测试结果)以及最后一次施用研究药物后最长24小时(包括24小时)收集的所有PK数据之后，将作出进行到第2部分的决定。将选择将在第2部分中施用的利司扑兰的剂量，目标是在稳态下实现2000ng.h/mL的平均AUCtau(在SMA患者中观察到的治疗暴露)。如果在第1部分中测试的5mg利司扑兰剂量是安全的和耐受良好的并且不满足停止规则，则将在第2部分中施用的剂量可能仅大于在第1部分中施用的剂量。

进行到第2部分的决定将由申办者临床药理学家和研究者以及他们认为有必要协助作出该决定的任何其他人员共同作出。

第2部分的最大可能剂量是18mg利司扑兰，在任何情况下都不会超过该剂量。

停止规则标准

如果在第1部分中用5mg利司扑兰治疗的参与者中出现以下情况中的一种，则第2部分中的利司扑兰剂量不会增加超过5mg，除非显然该情况的出现与施用利司扑兰无关。

·≥50％的参与者中出现相同类型的严重AE。

·≥50％的参与者中出现相同类型的临床上显著的实验室异常。

·≥50％的参与者中出现相同类型的临床上显著的ECG改变。

·申办者临床药理学家和研究者共同判断，其他发现表明不应当增加第2部分中的剂量。

个人停止规则

如果与基线(如果适用的话)相比，出现以下情况中的一种，则将在给定的个体参与者中停止给药，除非显然该情况的出现与施用利司扑兰无关。

·SAE。

·丙氨酸转氨酶(ALT)升高到3倍正常值上限(ULN)，伴随胆红素增加到2倍ULN，并且天冬氨酸转氨酶(AST)2倍ULN，不存在替代性的解释。

·申办者临床药理学家和研究者共同判断，其他发现表明应当停止给药。

生活方式考虑

膳食和饮食限制

尽管局限于临床研究单位，但是参与者将在不与其他研究相关活动相冲突的计划时间接受标准化饮食。参与者在采集血液样品以进行临床实验室评价前将禁食过夜(至少8小时)。

参与者将在第1天(第1部分)和第1、3和15天(第2部分)给药前禁食过夜(至少8小时)，并且从给药前1小时直到给药后2小时为止将避免饮水，给药时的饮水量除外。从给药后4小时开始允许进食。在本研究期间的所有其他时间，参与者可以随意饮水。

从签到(第-1天)前7天开始以及在本研究的整个过程中(直到随访之后为止)将不允许食用含有罂粟籽的食品和饮料。

从施用研究药物(第1天)前14天开始以及在本研究的整个过程中(直到随访之后为止)将不允许食用含有葡萄柚/葡萄柚汁或酸橙的食品和饮料。

从签到(第-1天)前48小时开始直到第14天出院为止，将不允许食用含有咖啡因的食品和饮料。

从签到(第-1天)前48小时开始直到随访为止，将不允许饮酒。

运动

要求参与者从签到(第-1天)前7天开始直到随访为止避免剧烈运动，并且在此时间期间将另外维持他们的正常体力活动水平(即，将不会开始新的运动计划，也不会参与任何异常剧烈的体力活动)。

参与者可以在研究期间参加轻松的娱乐活动(例如，看电视、阅读)。

安全性评估

所有安全性评估的计划时间点在SoA(表19)中提供。

安全性评估将包括：监测和记录AE，包括特别感兴趣的SAE和AE(AESI)；方案规定的安全性实验室评估、生命体征和ECG的测量；以及被认为对于本研究的安全性评价至关重要的其他方案规定的测试。

体格检查

·除了头部、眼睛、耳朵、鼻子、咽喉、颈部和淋巴结之外，全面的体格检查将至少包括对心血管系统、呼吸系统、GI系统、皮肤系统和肌肉骨骼系统的评估。还将在规定的时间计算并记录身高、体重和BMI。如果出现诱发症状，则可以根据研究者的判断对其他身体系统进行进一步检查。

·简单的体格检查将至少包括对皮肤、肺部、心血管系统和腹部(肝和脾)的评估。

·研究者应当特别注意与既往严重疾病相关的临床体征。

体格检查将不包括骨盆、直肠或乳房检查。

在基线处识别的任何异常均应当记录在一般病史和基线状况eCRF上。

根据临床指征，应当进行有限的、症状导向的体格检查。应当在参与者的备注中记录基线异常的变化。新的或恶化的临床上显著的异常应当记录为不良事件eCRF上的AE。

生命体征

体温、PR以及收缩压和舒张压将如SoA(表19)中所概述那样评估。

血压和脉搏测量值将使用全自动装置在仰卧位评估。只有在自动装置不可用时才将使用手动技术。在可能时，应当使用相同的手臂和装置来进行所有的血压测量。

参与者在测量血压和脉搏之前，应当在没有分心事物(例如，电视、手机)的安静环境中休息至少5分钟。

心电图

单个12导联ECG将使用ECG机器如SoA(表19)中所概述那样获得，该ECG机器自动计算心率并测量PR、QRS、QT和QTc间期。

为了使可变性最小化，重要的是参与者在每次ECG评价前处于静止位置

≥10分钟。每次ECG评价均应当始终保持仰卧体位，以防止心率变化。在ECG前休息期期间和ECG记录期间应当避免环境分心事物(例如，电视、收音机、交谈)。心电图检查应当在任何安排的生命体征测量和抽血之前进行。

临床安全性实验室评估

将要进行的临床实验室测试清单在表20中提供，并且这些评估必须根据SoA(表19)进行。

表20：方案要求的安全性实验室评估

a阿片类、安非他明类、大麻素类、苯二氮

类、可卡因、巴比妥类、美沙酮、可替宁和酒精。

b仅女性。

c仅在筛选时分析。

d仅绝经后女性。

药代动力学

将收集强制性血液样品以评价研究治疗(及其代谢物(如果有的话))的浓度。收集每个样品的日期和时间将记录在eCRF中。利司扑兰和咪达唑仑(仅第2部分)的水平将通过使用仅验证的测定进行分析。PK样品将如活动时间表(参见表20)中所概述那样采集。在研究过程期间，PK采样时间点可以基于新出现的数据进行修改，以确保研究治疗的PK能够被充分表征。代谢物可以通过特异性验证的采用串联质谱测定的液相色谱或者适当时其他符合目的的方法来测量。

PK血液样品将在最终临床研究报告的日期之后或在研究管理团队批准样品销毁之后被销毁。有关采样程序、样品储存和运输的详细信息在样品文档中给出。

PK时间点的任何计时变化或增加必须由相关研究团队成员记载和批准，然后存档在申办者和研究中心的研究文件中，但这不会构成方案修改。

统计分析统计分析

安全性分析

所有安全性分析均将基于安全性分析人群。安全性分析详见表21。

表21：安全性统计分析方法

药代动力学分析

将对PK分析人群进行分析。所有PK参数都将通过列表和描述性汇总统计数据(算术平均值、标准偏差、几何平均值、几何变异系数、中值、最小值和最大值)呈现。对于Tmax，将仅呈现中值、最小值和最大值。

药代动力学参数将直接从血浆浓度-时间曲线读取，或者使用标准非房室方法计算。

适当时将计算利司扑兰及其代谢物并且适当时将计算咪达唑仑及其代谢物的以下PK参数。适当时还可以计算其他PK参数。

·Tmax最大观测血浆浓度的时间

·Cmax最大观测血浆浓度

·Ctrough 最小观测血浆浓度

·AUCtau 给药间隔内的血浆浓度-时间曲线下面积

·AUClast 从0时刻到最后一个可量化浓度的时刻的血浆浓度-时间曲线下面积(tlast)

·AUCinf 外推至无穷大的血浆浓度-时间曲线下面积

·z 表观终末消除速率常数

·t1/2 表观血浆终末消除半衰期

·CLss/F 稳态下的表观总血浆清除率

·ARAUC AUC累积比

·ARCmax C_max累积比

在第2部分中，将使用应用于对数变换的PK参数C_max和AUC_inf(或者，如果不能适当地估计AUC_inf，则为AUC_last或者从零时刻到常见给药后时刻的供选择的部分AUC，AUC_0-t)的方差分析来探究多个口服剂量的利司扑兰对单个口服剂量的咪达唑仑(适当时，及其代谢物)的PK的影响。该模型将包括作为固定效果的治疗和作为随机效果的受试者。根据模型估计值，几何平均比率(单独的咪达唑仑相比咪达唑仑与利司扑兰的组合)将与相应的双侧90％置信区间一起得到。

参考文献

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2)Obach RS,Walsky RL and Venkatakrishnan K(2007)Mechanism-basedinactivation of human cytochrome P450 enzymes and the prediction of drug-druginteractions.Drug Metab Dispos 35:246

3)Perloff ES,Mason AK,Dehal SS,Blanchard AP,Morgan L,Ho T,DandeneauA,Crocker RM,Chandler CM,Boily N,Crespi CL,and Stresser DM(2009)Validation ofCytochrome P450 Time Dependent Inhibition Assays:ATwo Time Point IC50 ShiftApproach Facilitates kinact Assay Design.Xenobiotica 39:99。

Claims (56)

1.用于治疗SMA的利司扑兰，其特征在于所述治疗包括避免、禁忌或中断CYP3A底物的伴随使用。

2.根据权利要求1所述的用于治疗患者、特别是有需要的患者的SMA的利司扑兰，特别地其中所述患者是人(诸如男人或女人)。

3.用于治疗SMA的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

4.根据权利要求3所述的用于治疗SMA的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％或15％。

5.根据权利要求3所述的用于治疗SMA的利司扑兰，其中所述CYP3A底物是咪达唑仑。

6.根据权利要求3至4中任一项所述的用于治疗SMA的利司扑兰，其中咪达唑仑以口服剂量、静脉内、肌肉内或直肠给药施用。

7.根据权利要求3至5中任一项所述的用于治疗SMA的利司扑兰，其中将利司扑兰按以下总日剂量施用于所述患者：对于介于2个月与2岁之间的患者，为0.2mg/kg；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为0.25mg/kg；并且对于体重超过或等于20kg的患者，为5mg。

8.根据权利要求3至6中任一项所述的用于治疗SMA的利司扑兰，其中所述患者患有I型SMA、II型SMA或III型SMA。

9.用于在伴随施用利司扑兰期间治疗需要咪达唑仑疗法的患者，例如需要镇静疗法的患者，或者治疗睡眠障碍或癫痫发作的咪达唑仑，其中施用于所述患者的咪达唑仑的标准剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

10.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

11.用于治疗SMA的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

12.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的正常处方剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

13.用于治疗SMA的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的CYP3A底物的正常处方剂量与CYP3A底物的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

14.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰期间，施用于患者的咪达唑仑的口服或静脉内标准剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

15.用于治疗需要利司扑兰疗法的患者的利司扑兰，其中所述利司扑兰用于以治疗有效量施用于所述患者，并且避免以任何口服剂量或以任何静脉内(i.v.)剂量伴随施用咪达唑仑。

16.根据权利要求1至15中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰和咪达唑仑期间，咪达唑仑剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

17.根据权利要求1至16中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用利司扑兰和咪达唑仑期间，咪达唑仑剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％或15％。

18.根据权利要求1至16中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按以下总日剂量口服施用于患者：对于介于2个月与2岁之间的患者，为0.2mg/kg；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为0.25mg/kg；并且对于体重超过或等于20kg的患者，为5mg。

19.根据权利要求1至18中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按总日剂量即0.2mg/kg的剂量口服施用于介于2个月与2岁之间的患者。

20.根据权利要求1至19中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按总日剂量即0.25mg利司扑兰/千克体重/天的剂量口服施用于超过2岁且体重小于20kg的患者。

21.根据权利要求1至20中任一项所述使用的利司扑兰，其中将利司扑兰按总日剂量即5mg利司扑兰/天的剂量口服施用于体重超过或等于20kg的患者。

22.根据权利要求1至21中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述咪达唑仑以胶囊剂或片剂的单位剂型口服施用。

23.根据权利要求1至22中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述单位剂型中的咪达唑仑的量为7.5mg或15mg。

24.根据权利要求1至23中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，对于介于2个月与2岁之间的患者，将0.20mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者。

25.根据权利要求1至24中任一项所述使用的利司扑兰，其中在伴随施用咪达唑仑期间，对于超过2岁且体重小于20kg的患者，将0.25mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者。

26.根据权利要求1至25中任一项所述使用的利司扑兰，其中所述患者患有II型SMA或III型SMA。

27.用于在伴随施用利司扑兰期间治疗需要咪达唑仑疗法的患者，例如需要镇静疗法的患者，或者治疗睡眠障碍或癫痫发作的咪达唑仑，其中施用于所述患者的咪达唑仑的标准剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

28.根据权利要求27所述的用于治疗需要咪达唑仑疗法的患者的咪达唑仑，其中施用于所述患者的咪达唑仑的标准剂量减少10％或15％。

29.用于在伴随施用利司扑兰期间治疗癫痫发作的咪达唑仑，其中施用于所述患者的咪达唑仑的标准剂量减少。

30.用于治疗癫痫发作的咪达唑仑，其中所述咪达唑仑用于以口服剂量或以静脉内(i.v.)剂量施用，其中在伴随施用利司扑兰期间避免施用咪达唑仑。

31.用于治疗需要咪达唑仑疗法的患者的咪达唑仑，其中所述咪达唑仑用于以口服剂量或以静脉内(i.v.)剂量施用，其中在伴随施用利司扑兰期间避免施用咪达唑仑。

32.根据权利要求27至31中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在施用利司扑兰期间，咪达唑仑剂量与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％。

33.根据权利要求27至32中任一项所述使用的咪达唑仑，其中避免施用所述咪达唑仑，以避免咪达唑仑清除率降低的可能性或者与咪达唑仑的暴露增加的可能性。

34.根据权利要求27至33中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在伴随施用咪达唑仑期间，对于介于2个月与2岁之间的患者，将0.20mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，将0.25mg利司扑兰/千克体重/天的剂量施用于所述患者；或者对于体重超过或等于20kg的患者，将5mg利司扑兰/天的剂量施用于所述患者。

35.根据权利要求27至34中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按以下总日剂量施用：对于介于2个月与2岁之间的患者，为0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，为5mg利司扑兰/天。

36.根据权利要求27至35中任一项所述使用的咪达唑仑，其中在伴随施用咪达唑仑期间，将所述利司扑兰按以下总日剂量施用：对于超过2岁且体重小于20kg的患者，为约0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，为约5mg利司扑兰/天。

37.根据权利要求27至36中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有SMA。

38.根据权利要求27至37中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有I型SMA、II型SMA或III型SMA。

39.根据权利要求27至38中任一项所述使用的咪达唑仑，其中所述患者患有II型SMA或III型SMA。

40.咪达唑仑在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量施用的用途，对于介于2个月与2岁之间的患者，使用剂量为约0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，使用剂量为约0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，使用剂量为约5mg利司扑兰/天。

41.咪达唑仑在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量施用的用途，对于介于2个月与2岁之间的患者，使用剂量为0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，使用剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，使用剂量为5mg利司扑兰/天。

42.在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量使用的咪达唑仑，对于介于2个月与2岁之间的患者，使用剂量为0.20mg利司扑兰/千克体重/天；对于超过2岁且体重小于20kg的患者，使用剂量为约0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，使用剂量为约5mg利司扑兰/天。

43.在伴随使用利司扑兰期间以与咪达唑仑的标准剂量相比减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的总日剂量使用的咪达唑仑，对于超过2岁且体重小于20kg的患者，日剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，日剂量为5mg利司扑兰/天。

44.利司扑兰按以下总日剂量用于治疗患者的SMA的用途：对于超过2岁且体重小于20kg的患者，总日剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，总日剂量为5mg利司扑兰/天，所述患者伴随接受与咪达唑仑的标准剂量相比剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的咪达唑仑。

45.按以下总日剂量使用的用于治疗患者的SMA的利司扑兰：对于超过2岁且体重小于20kg的患者，总日剂量为0.25mg利司扑兰/千克体重/天；或者对于体重超过或等于20kg的患者，总日剂量为5mg利司扑兰/天，所述患者伴随接受与咪达唑仑的标准剂量相比剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的咪达唑仑。

46.一种用于治疗患者的SMA的药物组合物，其包含药用赋形剂和5mg利司扑兰，所述患者伴随接受与咪达唑仑的标准剂量相比剂量减少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％的咪达唑仑。

47.根据权利要求46所述的药物组合物，伴随接受与咪达唑仑的标准剂量相比剂量减少10％或15％的咪达唑仑。

48.一种包装或试剂盒，其包括：(a)利司扑兰，其任选地位于容器中，和(b)包装插页、包装标签、说明书或其他标贴，其是关于根据权利要求1至25中任一项所述的用途或使用的利司扑兰。

49.根据权利要求46所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含利司扑兰，所述利司扑兰通过以下方式被配制为口服水性溶液剂：将所述利司扑兰溶解在pH小于pH 4、特别地小于pH 3.8、更特别地小于pH 3.6、最特别地为pH 3.0至3.2的缓冲体系中，以便提供足够高的药物浓度，所述缓冲体系例如柠檬酸缓冲体系、苹果酸盐缓冲体系、马来酸盐缓冲体系或酒石酸盐缓冲体系，最特别地为酒石酸盐缓冲体系。

50.根据权利要求46所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含用于构成口服溶液剂呈干燥散剂或颗粒剂形式的利司扑兰。

51.根据权利要求46所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含利司扑兰、稀释剂，诸如山梨糖醇、异麦芽酮糖醇，或特别地为甘露糖醇，以及它们的组合，其确保粉末共混物在构成所述口服溶液剂期间快速溶出。

52.根据权利要求46至51中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·利司扑兰；以及

·缓冲体系，其选自柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐或酒石酸盐，特别地为苹果酸盐或酒石酸盐，最特别地为酒石酸盐；或替代地，缓冲体系的对应的酸单独地作为酸化剂，特别地为酒石酸。

53.根据权利要求46至52中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮或其药用盐；

·缓冲体系，特别地为以下缓冲体系，其选自柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐或酒石酸盐，更特别地为苹果酸盐或酒石酸盐，最特别地为酒石酸盐；或替代地，缓冲体系的对应的酸单独地作为酸化剂，特别地为酒石酸；以及

·稀释剂，特别地为甘露糖醇或甘露糖醇和异麦芽酮糖醇的混合物，更特别地为甘露糖醇。

54.根据权利要求46至53中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·1重量％至10重量％的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮或其药用盐；

·5重量％至15重量％的缓冲体系，特别地为以下缓冲体系，其选自柠檬酸盐、苹果酸盐、马来酸盐或酒石酸盐，更特别地为苹果酸盐或酒石酸盐，最特别地为酒石酸盐；或替代地，缓冲体系的对应的酸单独地作为酸化剂，特别地为酒石酸；

·40重量％至70重量％的稀释剂，特别地为甘露糖醇或甘露糖醇和异麦芽酮糖醇的混合物，更特别地为甘露糖醇；

·1重量％至4重量％的抗氧化剂，特别地为抗坏血酸；

·0.5重量％至2重量％的稳定剂，特别地为依地酸二钠；

·0.5重量％至2重量％的润滑剂，特别地为PEG6000；

·0重量％至3重量％的甜味剂，特别地为三氯蔗糖或糖精钠，最特别地为三氯蔗糖；以及

·0重量％至20重量％的风味剂，特别地为草莓风味剂或香草风味剂；

其中各成分的总量不超过100重量％。

55.根据权利要求46至54中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含：

·2重量％至6重量％的7-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮或其药用盐；

·9重量％至13重量％的酒石酸盐缓冲体系；

·45重量％至55重量％的作为第一稀释剂的甘露糖醇和8重量％至10重量％的作为第二稀释剂的异麦芽酮糖醇；

·1重量％至3重量％的作为抗氧化剂的抗坏血酸；

·0.5重量％至2重量％的作为稳定剂的依地酸二钠；

·0.5重量％至2重量％的作为润滑剂的PEG6000；

·1.5重量％至2重量％的作为甜味剂的三氯蔗糖；以及

·13重量％至17重量％的草莓风味剂；

其中各成分的总量不超过100重量％。

56.如前所述的发明。

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