KR101931299B1

KR101931299B1 - 소포로리피드를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물

Info

Publication number: KR101931299B1
Application number: KR1020160159888A
Authority: KR
Inventors: 김춘식; 김승택; 김태명; 김혜문
Original assignee: 바이오인터체인지주식회사
Priority date: 2016-11-29
Filing date: 2016-11-29
Publication date: 2018-12-20
Also published as: JP2018087187A; CN108113896B; WO2018101717A1; JP6734250B2; CN108113896A; KR20180060421A

Abstract

본 발명은 소포로리피드를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따르면, 소포로리피드는 무독성 및 생분해성인 미생물 유래의 천연계면활성제로서 친환경적이며, 소포로리피드를 모유두 세포에 처리하였을 때, 모유두 세포의 성장 촉진효과를 나타낼 뿐만 아니라, 탈락 모발 개수를 현저하게 감소시키고, 발모 촉진효과를 나타내므로, 탈모 예방, 탈모 개선, 탈모 치료 또는 발모 촉진을 위한 화장료 또는 피부외용제로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

소포로리피드를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물{Composition for preventing hair loss or stimulating hair growth comprising sophorolipid as effective component}

본 발명은 소포로리피드를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에 관한 것이다.

인체의 모발은 약 10만~15만 개 정도이며, 각각의 모발은 서로 다른 모주기를 가지고 성장기(anagen), 퇴행기(catagen) 및 휴지기(telogen)를 반복하며 생성, 성장 및 탈락하는데, 그 결과 전체 모발의 약 15％에 해당하는 모발이 휴지기와 퇴행기에 놓여 있어 일일 평균 50∼100개의 모발이 정상적으로 탈락하고 재생산된다. 이러한 모발의 생장주기는 약 3∼6년을 사이클로 반복한다. 일반적으로, 탈모증이라 함은 모발의 주기의 성장기(anagen)에 해당하는 기간이 여러 원인으로 인해 짧아져 퇴행기와 휴지기 모발의 비율이 상대적으로 많아져 모발이 탈락하는 수가 평균치보다 많아지는 것을 말하며 원인으로는 유전적 안드로겐 호르몬의 작용, 국소혈류 장애에 의한 영양장애, 자율신경계 장애, 자가면역질환, 내분비장애가 있으나 현재까지 탈모에 관한 명확한 원인은 밝혀지지 않은 상태이며 전술한 원인이 복합적으로 작용하여 발생하는 것으로 알려져 있다. 모발이 자라는 모근의 뿌리부분은 모구(hair bulb)라고 하고, 그 아랫부분의 움푹 들어간 부분을 모유두라고 한다. 모유두는 모발의 발생에 있어 가장 중요한 부분으로, 모유두에는 혈관이나 신경이 있고, 바로 그 위에 있는 모모세포에 영양분을 공급하여 모발의 성장을 촉진하게 된다. 이러한 모유두의 수는 태어날 때 결정되는데, 모유두가 없어지고 그 수가 감소할수록 모발의 수도 감소하게 된다.

최근 식생활의 변화, 생활습관의 변화, 사회 환경에 의한 과한 스트레스의 증가 등으로 비정상적인 탈모를 유발하고 있는 인구가 점차 증가하는 추세이며 특히 청년 및 장년과 여성 탈모 인구가 증가하고 있는 상황이다. 한편, 머리카락이나 털이 어떤 원인에 의하여 정상보다 적거나 없는 상태를 의미하는 탈모는 모발이 휴지기 상태에서 빠지는 일반적인 탈모 현상(휴지기 탈모, telogen effluvium)과 비정상적인 탈모 현상인 성장기 탈모 현상(anagen effluvium)으로 구별할 수 있는 데, 일반적으로 탈모증이라 함은 후자를 일컫는다. 탈모증의 형태에는 원형 탈모증(alopecia areata), 조기 탈모증, 여성 탈모증(androgen alopecia in women), 매독성 탈모증, 장년성 탈모증(male pattern baldness) 등이 있다.

남성의 형질발현에 있어서, 남성 성충동, 골격근 증가, 남성외부생식기 발달, 음낭성장, 정자형성 등은 테스토스테론이 관여하고, 여드름, 피지증가, 탈모 및 전립선비대증 등은 디하이드로테스토스테론이 해당 조직에서 관여하는 것으로 알려져 있다. 그 중 남성 호르몬 의존성 질환 중인 남성형 탈모는 미용을 중시하는 현대사회의 남성들에게 심각한 정신적 고통을 주고 있기 때문에, 탈모의 기전을 밝히고 이를 개선하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. 5알파-환원효소(5α-reductase)는 피지선, 모낭, 전립선 또는 부고환 등 남성호르몬 반응성 조직에 존재하며 정소에서 생합성되는 남성호르몬인 테스토스테론(testosterone)을 활성 남성 호르몬인 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone, DHT)으로 전환시키는 데 관여하는 환원효소로서, 이러한 전환과정에는 NADPH가 조효소로 이용되는 것으로 알려져 있다. 사춘기 이후 과량 분비된 디하이드로테스토스테론은 피지세포(sebocyte)에서 피지를 과잉생성하는 주된 원인 물질로 작용하여 여드름 및 남성형 탈모를 유발한다. 특히, 여러 모낭 세포에서도 테스토스테론에 비하여 디하이드로테스토스테론이 호르몬 수용체에 더욱 잘 결합하기 때문에 탈모를 일으키는 원인을 제공한다.

이에, 디하이드로테스토스테론의 생성을 촉진하는 5알파-환원효소의 활성 및 생성을 억제하는 물질을 개발하여 발모제 또는 탈모방지제로 이용하기 위한 연구들이 활발히 진행되고 있다. 남성형 탈모의 치료를 위해 종래에는 에스트로겐 등의 여성 호르몬을 이용해왔으나, 여성 호르몬제 등은 그 효과에 비하여 피부 염증 발생, 호르몬 투여에 따른 부작용 발생 등의 보고가 있어 현재는 사용을 중단하거나 아주 극미량을 사용하고 있는 실정이다. 최근, 미국의 머크사에서 5알파-환원효소의 작용을 저해하여 디하이드로테스토스테론의 생성을 억제하는 약제인 피나스테라이드(finasteride, proscar)를 합성하여 이를 경구투여용 발모제로 시판하고 있으나, 고가이고 두피 도포용으로 제조하여 직접 도포하는 경우 효과가 떨어지며 경구투여에 따른 기타 부작용이 발생하는 등 사용에 제한이 있는 실정이다. 또한 발모 촉진을 위해 지금까지 사용되고 있는 대표적인 발모 촉진용 약물로 업존사(Upjohn Co., Ltd.)의 미녹시딜(Minoxidil)이 있는데 미녹시딜은 항고혈압제로 사용되던 것으로 사용시 부작용으로 인체의 털이 증가하는 것에 착안하여 발모 촉진제화 한 것으로 모낭이 위치한 두피의 혈류를 증가시켜 발모를 촉진하는 것이다. 하지만 미녹시딜을 발모촉진제로 장기간 사용할 경우 그 효과가 반감하고 화학적 혈관 확장 작용으로 인한 부작용으로 무력증, 피지증가 등이 보고되고 있는 등의 문제점을 가지고 있다.

한편, 소포로리피드(Sophorolipid)는 캔디다 봄비콜라(Candida bombicola), 캔디다 아피콜라(C. apicola), 캔디다 바티스태(C. batistae), 위커라미엘라 도메리키애(Wickerhamiella domericqiae) 및 로도토룰라 보고리엔시스(Rhodotorula bogoriensis)와 같은 일부 효모 종에 의해 합성되는 글리코리피드(glycolipid) 형태의 계면활성(surface-active) 물질이다. 소포로리피드의 연간 소비량은 약 1000만 톤 정도로 추산되며, 주로 가정용/세탁용 세제로 사용되지만, 화학제품, 직물, 음식, 종이 및 화장품 산업에서도 몇 가지 잠재적인 적용성을 갖는다. 소포로리피드는 계면활성제 특성뿐만 아니라, 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 및 코리네박테리움 제로시스(Corynebacterium xerosis)에 대한 항균 활성과 낮은 세포 독성을 나타내기 때문에, 화장품 제형에서 다른 계면활성제보다 더 좋은 유화제가 된다. 또한, 소포로리피드의 항암, 진피 섬유아세포(dermal fibroblast) 대사 촉진, 자유 라디칼 제거, 표피층 박리 및 미백과 같은 다양한 장점들은 소포로리피드를 화장품 및 피부용 의약품(pharmacodermatological product)을 위한 매력적인 성분으로 만든다.

한편, 한국공개특허 제2004-0033376호는 소포로리피드를 포함하는 화장료 조성물을 개시하고 있으며, 한국등록특허 제1125189호는 항-염증성 소포로리피드의 생산방법을 개시하고 있다. 하지만, 본 발명의 소포로리피드를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에 대해 아직까지 개시된 바가 없다.

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명에서는 소포로리피드를 인간 모유두세포(human dermal papilla cell, hDPC)에 처리하였을 때, 모유두세포의 성장 촉진효과를 나타내었으며, C57BL/6 마우스에 소포로리피드를 경피투여한 경우, 모발 성장의 촉진효과를 나타내었다. 또한, 임상실험 결과, 탈락 모발 개수가 현저하게 감소되고 발모 현상이 육안으로 관찰되는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 소포로리피드(sophorolipid)를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 소포로리피드(sophorolipid)를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 피부외용제를 제공한다.

본 발명에 따르면, 소포로리피드는 무독성 및 생분해성인 미생물 유래의 천연계면활성제로서 친환경적이며, 소포로리피드를 모유두 세포에 처리하였을 때, 모유두 세포의 성장 촉진효과를 나타낼 뿐만 아니라, 임상실험 결과, 탈락 모발 개수를 현저하게 감소시키고 발모 촉진효과를 나타내므로, 탈모 예방, 탈모 개선, 탈모 치료 또는 발모 촉진을 위한 화장료 또는 피부외용제로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 소포로리피드를 C57BL/6 마우스에 경피 투여하였을 때, 모발 재성장 효과를 나타낸 사진이다. 미녹시딜은 양성대조군이며, SL은 소포로리피드를 의미하며, SHM은 시판 중인 탈모방지 샴푸를 의미한다.
도 2는 본 발명의 소포로리피드를 C57BL/6 마우스에 경피 투여하였을 때, 마우스 모낭의 형태학적 변화를 나타낸 사진이다.
도 3은 본 발명의 소포로리피드를 함유하는 모발샴푸 및 모발토닉을 13일(A), 28일(B) 및 65일(C) 동안 사용한 임상결과를 나타낸 사진이다.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 소포로리피드(sophorolipid)를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 구현 예에 따른 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물에서, 상기 소포로리피드는 식물성 오일 유래의 지방산을 함유하는 배지에서 효모를 배양하여 생산된 소포로리피드일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 상기 식물성 오일은 아르간 오일, 동백 오일, 호호바 오일, 아보카도 오일, 해바라기씨 오일, 평지씨 오일, 코코넛 오일, 팜 오일 및 포도씨 오일 중에서 선택된 하나 이상인 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 상기 효모는 캔디다 봄비콜라(Candida bombicola), 캔디다 아피콜라(C. apicola), 캔디다 바티스태(C. batistae), 위커라미엘라 도메리키애(Wickerhamiella domericqiae) 또는 로도토룰라 보고리엔시스(Rhodotorula bogoriensis)일 수 있으며, 바람직하게는 캔디다 봄비콜라일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 상기 효모를 배양하여 생산된 소포로리피드는 효모 배양액으로부터 정제하거나 정제하지 않은 소포로리피드일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 정제하지 않은 소포로리피드는 소포로리피드를 생산하는 효모 배양액을 포함할 수 있다.

본 발명의 소포로리피드는 정제 유무에 관계없이 탈모방지 및 발모촉진 효과에 대해 동일한 효과를 나타낸다.

상기 소포로리피드는 하기 화학식 1 내지 3으로 표시되는 소포로리피드 중 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

(식 중, R₁ 및 R₂는 각각 아세틸기 또는 수소기를 나타낸다.)

(식 중, R₁ 및 R₂는 각각 아세틸기 또는 수소기를 나타내고, R은 메틸기 또는 에틸기를 나타낸다.)

또한, 상기 조성물은 모유두 세포의 성장을 촉진시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 상기 화장료 조성물은 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어맛사지크림, 헤어왁스, 헤어에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 또는 헤어스프레이의 제형으로 제조되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 상기 화장료 조성물은 본 발명의 소포로리피드에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.

본 발명의 탈모방지 또는 발모촉진용 피부외용제는 크림, 젤, 패취, 연고, 경고제, 로션제, 액제, 유탁액, 파우더제 또는 스프레이의 제형으로 제조되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 제형이 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 액제 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산에스테르가 있다.

이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.

제조예 1. 본 발명의 소포로리피드의 제조

1) 식물성 오일 혼합물을 이용한 지방산( 메틸에스테르화 )의 제조

메틸에스테르화된 지방산을 제조하기 위해, 통상 당업계의 일반적인 제조공정에 따라 탄소 길이가 각기 다른 지방산으로 해바라기씨 오일, 동백 오일 및 팜 오일 혼합물을 사용하였으며, 상기 혼합물(10g)에 500㎖의 메탄올 및 8.2㎖의 황산을 첨가한 후 멸균기를 이용하여 100℃ 및 고압상태(0.3kgf/cm²)에서 2시간 동안 반응시켰으며, 이후 메틸에스테르화된 지방산만을 얻기 위해, 헥산을 첨가하여 층을 분리한 후, 회전증발기를 이용하여 용매를 제거하여 메틸에스테르화된 기질을 수득하였다.

2) 코코넛 오일을 이용한 지방산( 메틸에스테르화 )의 제조

메틸에스테르화된 지방산을 제조하기 위해, 지방산으로 코코넛 오일을 사용하였으며, 코코넛 오일(10g)에 500㎖의 메탄올 및 8.2㎖의 황산을 첨가한 후 멸균기를 이용하여 100℃ 및 고압상태(0.3kgf/cm²)에서 2시간 동안 반응시켰으며, 이후 메틸에스테르화된 지방산만을 얻기 위해, 헥산을 첨가하여 층을 분리한 후, 회전증발기를 이용하여 용매를 제거하여 메틸에스테르화된 기질을 수득하였다.

3) 소포로리피드의 생산

캔디다 봄비콜라(Candida bombicola ATCC22214) 효모균을 YM 배지에서 25℃에서 200rpm으로 10일 동안 진탕배양기(shaking incubator)를 이용하여 전배양하였다. 상기 해바라기씨 오일, 동백 오일 및 팜 오일의 혼합물을 이용하여 제조한 지방산(메틸에스테르화 형태)과 코코넛 오일을 이용하여 제조한 지방산(메틸에스테르화 형태) 각각으로부터 소포로리피드를 생산하기 위해, 상기 배양 상등액 1.5%(w/v)을 1L의 효모 배양용 배지가 담긴 2.5L의 jar 발효기(Kobiotech, Korea)에 각각 접종한 후, 25℃에서 500rpm 및 호기성 조건으로 10일 동안 배양하였다. 상기 효모 배양용 배지의 구체적인 성분 및 함량은 하기 표 1에 나타내었다.

효모 배양용 배지(YM)의 성분 및 함량

성분	함량
글루코스	100g
지방산(메틸에스테르 형태)	100g
효모추출물	5g
KH₂PO₄	1g
MgSO₄·7H₂O	0.5g
CaCl₂·2H₂O	0.1g
Nacl	0.1g
펩톤	0.7g
증류수	최종 부피 1L에 맞춤

효모균의 배양이 끝난 후 해바라기씨 오일, 동백 오일 및 팜 오일의 혼합물 유래의 지방산을 이용한 효모 배양액과 코코넛 오일 유래의 지방산을 이용한 효모 배양액을 각각 에틸아세테이트로 3회 반복추출하고, 환류증발장치(rotary vaccum evaporator)를 이용하여 추출에 사용된 에틸아세테이트를 제거하여 각각의 미정제된 소포르리피드를 얻었다(하기 표 2의 1번 및 2번 샘플). 상기 미정제된 코코넛 오일을 이용하여 추출한 소포르리피드에 다시 헥산을 첨가하여 잔류 오일을 제거하고, 클로로포름으로 용액 중의 소포로리피드를 추출하여 최종적으로 정제된 소포르리피드를 수득하였다(하기 표 2의 3번 샘플).

실시예 1. 본 발명의 소포로리피드 처리에 따른 인간 모유두세포의 성장 촉진효과

상기 제조예 1에서 제조한 해바라기씨 오일, 동백 오일 및 팜 오일의 혼합물 유래의 지방산을 이용하여 배양한 효모 배양액으로부터 추출하고 정제하지 않은 소포로리피드와 코코넛 오일 유래의 지방산을 이용하여 배양한 효모 배양액으로부터 추출하고 정제하지 않은 소포로리피드 및 정제한 소포로리피드를 각각 배양된 인간 모유두세포(human dermal papilla cell, hDPC)에 48시간 동안 처리한 후 WST-1 분석(water-soluble tetrazolium salt-1 assay)을 이용하여 세포성장을 측정하였다. 정상군은 인간 모유두세포에 아무것도 처리하지 않은 것을 의미하며, 양성대조군으로는 현재 탈모방지 및 모발생장 효능이 입증되어 시판되고 있는 미녹시딜 성분을 사용하였다. 그 결과, 하기 표 2에 개시한 바와 같이 정제한 소포로리피드(3번 샘플)와 미정제한 소포로리피드(1번 및 2번 샘플) 모두 정상군에 대비하여 세포성장 촉진효과를 나타내었고, 양성대조군인 미녹시딜보다 우수한 효과를 나타내었으며, 2번 샘플을 하기 실시예 2 및 3에 사용하였다.

소포로리피드 처리에 따른 인간 모유두 세포의 성장 측정 결과

시험물질	정상군	미녹시딜	1번 샘플
농도(μM)	0	1	1	2	5	10
첫 번째 측정값	0.9982	1.1258	1.0369	1.0747	1.09759	1.119
두 번째 측정값	0.9644	1.1548	0.9831	0.9944	1.0402	1.0465
세 번째 측정값	0.9443	1.1473	0.9812	0.992	0.9972	1.0433
평균	0.9690	1.1426	1.0004	1.0204	1.0450	1.0696
첫 번째 측정값(%)	103.0170	116.1856	107.0109	110.9120	113.2743	115.4838
두 번째 측정값(%)	99.5287	119.1785	101.4586	102.6248	107.3515	108.0017
세 번째 측정값(%)	97.4543	118.4045	101.2625	102.3771	102.9138	107.6714
평균(%)	100	117.9229	103.2440	105.3046	107.8465	110.3856
오차율(%)	2.8111	1.5535	3.2637	4.8577	5.1980	4.4183
스튜던트 티-검증		0.0176	0.0389	0.0630	0.0298	0.0122
시험물질	정상군	미녹시딜	2번 샘플
농도(μM)	0	1	1	2	5	10
첫 번째 측정값	1.0269	1.1346	1.0361	1.0500	1.0650	1.2141
두 번째 측정값	0.9765	1.1401	1.0072	1.0290	1.0690	1.2163
세 번째 측정값	1.0062	1.0999	1.0314	1.0998	1.1180	1.1770
평균	1.0032	1.1249	1.0249	1.0596	1.0840	1.2025
첫 번째 측정값(%)	102.3631	113.0988	103.2802	104.6658	106.1610	121.0235
두 번째 측정값(%)	97.3372	113.6471	100.3994	102.5725	106.5597	121.2428
세 번째 측정값(%)	100.2997	109.6399	102.8117	109.6299	111.4441	117.3253
평균(%)	100	112.1286	102.1638	105.6227	108.0549	119.8639
오차율(%)	2.5263	2.1727	1.5458	3.6247	2.9419	2.2012
스튜던트 티-검증		0.0295	0.0782	0.1101	0.0671	0.0107
시험물질	정상군	미녹시딜	3번 샘플
농도(μM)	0	1	1	2	5	10
첫 번째 측정값	1.0120	1.1091	1.0114	1.0901	1.1000	1.1690
두 번째 측정값	0.9780	1.1152	0.9760	1.0129	1.1191	1.1748
세 번째 측정값	0.9942	1.1875	0.9910	1.0499	1.1000	1.1894
평균	0.9947	1.1373	0.9928	1.0510	1.1064	1.1777
첫 번째 측정값(%)	101.7358	111.4972	101.6755	109.5872	110.5824	117.5189
두 번째 측정값(%)	98.3178	112.1104	98.1167	101.8263	112.5035	118.1020
세 번째 측정값(%)	99.9464	119.3787	99.6247	105.5459	110.5824	119.5697
평균(%)	100	114.3288	99.8056	105.6531	111.2228	118.3969
오차율(%)	1.7096	4.3841	1.7863	3.8815	1.1092	1.0567
스튜던트 티-검증		0.0362	0.1236	0.0458	0.0190	0.0050

1번 샘플: 상기 제조예 1에서 해바라기씨 오일, 동백 오일 및 팜 오일의 혼합물 유래의 지방산을 이용하여 배양한 효모 배양액으로부터 추출하고 정제하지 않은 소포로리피드.

2번 샘플: 상기 제조예 1에서 코코넛 오일 유래의 지방산을 이용하여 배양한 효모 배양액으로부터 추출하고 정제하지 않은 소포로리피드.

3번 샘플: 상기 제조예 1에서 코코넛 오일 유래의 지방산을 이용하여 배양한 효모 배양액으로부터 추출하고 정제한 소포로리피드.

실시예 2. 본 발명의 소포로리피드의 모발 성장효과에 대한 동물모델 실험

본 발명의 소포로리피드의 탈모 증상 개선 효과를 확인하기 위해, 동물모델로 많이 사용하는 자발적 탈모의 유전적 특성을 가진 6주령의 암컷 C57BL/6 마우스를 이용하였다. 암컷 C57BL/6 마우스를 대상으로 일렉트릭 클립퍼 커트(electric clipper cut)를 이용하여 1차 제모 후 쉐이빙 폼(shaving form)을 바르고, 면도날(shaving razor)을 이용하여 가로로 등쪽 경부에서 꼬리 기시부까지의 길이와 세로로 등쪽 정중선을 기준으로 좌우 각각 1cm 이상의 폭에 대하여 2차 제모를 실시하여 등쪽 피부색이 균질한 핑크색을 보이는 개체만을 선별하여 실험에 사용하였다. 제모 부위에 붓을 댄 후 시험물질 200㎕를 마이크로피펫(micropipette)을 이용하여 붓끝에 분주한 후 상하 방향으로 제모 부위 전체에 균질하게 1일 1회 21일간 도포하였다. 소포로리피드는 도포 후 1~2분간 방치한 다음 물로 샴푸하고, 종이 타월로 물기를 제거하였다.

모든 실험 결과는 평균치±표준편차로 표시하고 모든 데이터에 대해 분산의 동질성 비교분석은 터키 검증(Turkey test) 및 ANOVA(one-way analysis of variance)를 실시하였으며, 정상군과의 유의적 차이가 있는 실험군에 대해 두네트 티 검증(Dunnett's t-test)을 실시하였다.

(1) 양모면적 분석

본 발명의 소포로리피드를 암컷 C57BL/6 마우스에 경피 투여한 후 0, 7, 14 및 21일째 총 4회에 걸쳐 경시적인 모발 성장 주기(hair growth cycle)의 변화를 육안으로 확인하였다. 그 결과, 하기 표 3 및 도 1에 개시한 바와 같이 초기 7일부터 털이 꼬리 쪽 등 부위와 목 쪽 등 부위로 모발 성장을 나타내었으며, 14일부터 아무것도 처리하지 않은 정상군에 대비하여 양성대조군인 미녹시딜을 처리하였을 때, 시험물질들 중 가장 빠른 모발 재성장 효과를 보였으나, 21일째에 0.4% 및 0.8% 소포로리피드를 처리한 경우에도 양성대조군과 유사한 효과를 나타내었다.

탈모증 유도 C57BL/6 마우스에서 본 발명의 소포로리피드 처리에 따른 모발 재성장 촉진효과

	정상군	양성대조군 (minoxidil)	0.4% SL	0.8% SL	SHM+0.8% SL	SHM
0주	0	0	0	0	0	0
1주	9.4±17.7	12.5±26.9	11.8±29.3	12.6±±25.2	0.3±1.1	3.2±9.7
2주	60±29.7	96.5±2.2	65.9±32.2	72±±27.9	61.8±34.6	60.4±39.7
3주	96.7±2.6	99.5±1.2	99.4±1.3	99.4±±1.1	94.6±8.2	87.9±21.4

단위는 백분율(%)이며, SL은 소포로리피드이며, SHM은 시판 중인 탈모방지 샴푸이다.

(2) 조직병리학적 분석

암컷 C57BL/6 마우스 모낭의 형태학적인 변화를 확인하기 위해, 경피투여 21일째에 채취한 피부조직을 헤마톡실린-에오신(hematoxylin-eosin)으로 염색하여 광학현미경으로 관찰하였다. 그 결과, 도 2에 개시한 바와 같이 아무것도 처리하지 않은 정상군에서 제모 후 14일째에 모낭이 형성되었지만 다른 실험군에 비해 상피조직층으로 많이 자라나지 못한 상태였으며, 그 이후에야 모근이 성장하여 피부 밖으로 돌출되어 나오는 것을 확인할 수 있었다. 반면에, 본 발명의 소포로리피드를 처리하였을 때, 14일째에 정상군에 대비하여 피부의 두께가 두껍고, 모낭의 수가 증가하였으며, 모낭조직의 길이가 길어지면서 피모가 피부표면으로 자라나온 것을 확인할 수 있었으며, 양성대조군과 유사한 효과를 나타내었다.

또한, 21일째 피부조직에서 휴지기에 있는 모낭 수를 측정한 결과, 정상군(6.8±0.8)에 비해 본 발명의 0.4% SL 처리군(7.8±0.8) 및 0.8% SL 처리군(8.8±2.8)에서 많았으며, 양성대조군과 유사한 결과를 나타내었다. 이는 0.4% 및 0.8% SL 처리를 통해 모발 성장 주기(hair growth cycle)를 앞당기는 것으로 판단된다(표 4).

탈모증 유도 C57BL/6 마우스에서 본 발명의 소포로리피드 처리에 따른 휴지기 모낭의 수 측정

실험군	휴지기 모낭의 수(Telogen number)
정상군	6.8±0.8
양성대조군(minoxidil)	9.8±1.3
0.4% SL	7.8±0.8
0.8% SL	8.8±2.8
SHM+0.8% SL	6.6±0.9
SHM	7.8±1.3

실시예 3. 본 발명의 소포로리피드 처리에 따른 탈모방지 및 발모촉진 효과에 대한 임상시험

본 실시예 3에서는 우수한 모발 성장 효과를 나타낸 0.8%의 소포로리피드를 함유하는 화장료 조성물을 모발샴푸 및 모발토닉 제형으로 제조하여 탈모방지 및 발모촉진효과를 임상에서 확인하였다. 시험대상자는 원형탈모증 및 남성형 탈모증을 나타내는 40세 이상 성인 남녀 10명을 대상으로 실시하였으며, 0.8%의 소포로리피드를 함유하는 모발샴푸를 3㎖로 1일 1회 1분간 모발 및 두피를 마사지하고 약 2분간 방치한 후 헹군 다음 완전히 건조하여 0.8%의 소포로리피드를 함유하는 1㎖의 모발토닉을 모발에 골고루 분사하였다. 샴푸 사용 이전에 탈모상태를 사진촬영하고 사용일로부터 1주일 간격으로 2개월 동안 동일한 부위를 사진촬영하여 탈모진행 및 발모상태를 육안으로 비교하여 소포로리피드의 효과를 확인하였다. 그 결과, 도 3에 개시한 바와 같이 본 발명의 0.8%의 소포로리피드를 함유하는 모발샴푸 및 모발토닉을 사용한 후, 사용 전의 탈락한 모발 개수가 109개에서 점차 감소하여 2개월 사용 후 평균 30개 정도로 현저하게 감소되었으며, 발모촉진 효과를 육안으로 확인할 수 있었다.

Claims

코코넛 오일 유래의 지방산을 함유하는 배지에서 캔디다 봄비콜라(Candida bombicola)를 배양하여 생산되는 소포로리피드(sophorolipid)를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
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제1항에 있어서, 상기 캔디다 봄비콜라(Candida bombicola)를 배양하여 생산된 소포로리피드는 효모 배양액으로부터 정제하거나 정제하지 않은 소포로리피드인 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
삭제
제1항에 있어서, 상기 조성물은 모유두 세포의 성장을 촉진하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어맛사지크림, 헤어왁스, 헤어 에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 또는 헤어스프레이의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
코코넛 오일 유래의 지방산을 함유하는 배지에서 캔디다 봄비콜라(Candida bombicola)를 배양하여 생산되는 소포로리피드(sophorolipid)를 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 피부외용제.
제9항에 있어서, 상기 피부외용제는 크림, 젤, 패취, 연고, 경고제, 로션제, 액제, 유탁액, 파우더제 또는 스프레이의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 피부외용제.