KR100870847B1

KR100870847B1 - Ｎ-(1(ｓ)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-ｌ-알라닌의정제 방법

Info

Publication number: KR100870847B1
Application number: KR1020027015617A
Authority: KR
Inventors: 마쯔모또아끼라; 노무라미찌오; 고가메요시까즈; 우에다야스요시
Original assignee: 카네카 코포레이션
Priority date: 2001-03-19
Filing date: 2002-03-19
Publication date: 2008-11-27
Also published as: ATE394364T1; CA2407681A1; DE60226382D1; HUP0303176A3; HUP0303176A2; CZ20024011A3; JP4094958B2; WO2002074728A1; KR20030058939A; US20030162991A1; HRP20030022A2; EP1284957A4; AR033048A1; TWI226881B; ES2305206T3; JP2004519501A; US7071349B2; EP1284957B1; EP1284957A1; SI21039A

Abstract

본 발명은 고품질의 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌을 공업적 규모의 적용에 적합할 만큼 높은 생산성을 가지고 우수한 수율로 수득하는 정제 방법을 제공하는 것이다. 불순물로 오염된 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌을 알콜/물 부피비가 1 ∼ 20 인 알콜과 물의 혼합 용매로부터 결정화시켜 오염 불순물을 모액중으로 제거하고 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정을 얻는다.

Description

Ｎ-(1(Ｓ)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-Ｌ-알라닌의 정제 방법 {PURIFICATION METHOD OF N-(1(S)-ETHOXYCARBONYL-3-PHENYLPROPYL)-L-ALANINE}

본 발명은 하기 화학식 1 로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 정제 방법에 관한 것이다:

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌은 제약물 제조용 중간체, 특히 에날라프릴(enalapril) 및 라미프릴(ramipril)과 같은 몇몇 항고혈압 약물 (안지오텐신 전환 효소 억제약물)의 제조용 중간체로서 매우 유용한 화합물이다.

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 지금까지 알려진 합성 방법으로는 다음이 포함된다:

(a) L-알라닌의 에틸 β-벤조일아크릴레이트로의 마이클(Michael) 첨가 반응 및 뒤이어 벤조일 부분 중 카르보닐기의 메틸렌기로의 변환을 위한 촉매적 환원을 수반하는 방법 (예컨대, JP-A-03-22867),

(b) L-알라닌 벤질 에스테르의 에틸 β-벤조일아크릴레이트로의 마이클 첨가 반응 및 뒤이어 벤질 에스테르의 분해와 동시 발생적인 벤조일 부분 중 카르보닐기의 메틸렌기로의 변환을 위한 촉매적 환원을 수반하는 방법 (예컨대, JP-A-58-103364),

(c) (S)-호모페닐알라닌 에틸 에스테르를, α-위치에 이탈기(할로겐 원자, 술포닐옥시기 등)를 갖는 (S)- 또는 (RS)-프로피온산과 반응시키는 것을 포함하는 방법 (예컨대, JP-A-63-174956),

(d) (S)-호모페닐알라닌 에틸 에스테르를, α-위치에 이탈기(할로겐 원자, 술포닐옥시기 등)를 갖는 (S)- 또는 (RS)-프로피온산 벤질 에스테르와 반응시킨 후, 상기 반응 생성물을 벤질 에스테르의 분해를 위한 촉매적 환원에 적용시키는 것을 포함하는 방법 (예컨대, JP-A-59-181247),

(e) α-위치에 이탈기(할로겐 원자, 술포닐옥시기 등)를 갖는 에틸 (R)- 또는 (RS)-페닐부티레이트를 L-알라닌 벤질 또는 t-부틸 에스테르와 반응시키고, 반응 생성물을 상기 벤질 또는 t-부틸 에스테르의 분해를 위한 촉매적 환원 또는 산 처리에 적용시키는 것을 포함하는 방법 (Chem. Pharm. Bull. 37(2), 280, 1989), 및

(f) 에틸 2-옥소-4-페닐부티레이트 및 L-알라닌 또는 L-알라닌 벤질 에스테르를 환원적 아민화에 적용시키는 것을 포함하는 방법 (예컨대, JP-A-05-201882) 등.

상기의 합성 방법에 있어서, 목적하는 화합물 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페 닐프로필)-L-알라닌의 제조는 구조적으로 유사한 각종의 불순물을 부산물 또는 잔류 오염물로서 형성시키거나 또는 존속시키는 것을 수반한다.

이와 같은 불순물로서, 광학 이성질체, 즉, 하기 화학식 2 로 표현되는 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌:

하기 화학식 3 으로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌:

및 하기 화학식 4 로 표현되는 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌:

시클로헥실 유도체, 즉, 하기의 화학식 5 로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보 닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌:

카르복시 유도체, 즉, 하기의 화학식 6 으로 표현되는 N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌:

에스테르 유도체, 즉, 하기 화학식 7 로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에스테르:

(식 중, R 은 알킬기 또는 아르알킬기를 나타낸다),

및 에틸 페닐부티레이트 등을 언급할 수 있다.

이들 광학 이성질체들은 출발 화합물의 광학적 순도가 낮은 경우, 반응의 입체선택성이 불충분한 경우, 또는 출발 물질 또는 중간체 화합물의 라세미화로 인해 형성된다. 합성 방법에 따라 달라지기는 하지만, 통상적으로는 상기 화학식 2 의 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 및 상기 화학식 3 의 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌이 주요 부산물로서 형성된다.

시클로헥실 유도체는 촉매적 환원에서 벤젠 고리의 수소화로 인해 생성된다. 카르복시 유도체는 가수분해 또는 촉매적 환원에서 에스테르 부분의 분해로 인해 생성된다. 에스테르 유도체는 목적하는 화합물의 말단 카르복실기가 에스테르화된 화합물에 해당한다. 상기 유도체들의 형성은 불완전한 반응 또는 일부 부반응으로 인해, 남은 출발물질로부터 발생한다. 화학식 7 에 관하여, R 은 탄소수 1 내지 8 의 알킬기(특히, 탄소수 1 내지 4의 알킬기), 예컨대 에틸, t-부틸 등의 기, 또는 탄소수 7 내지 10의 아르알킬기, 예컨대 벤질 등의 기를 나타낸다. 에틸 페닐부티레이트는 에틸 β-벤조일아크릴레이트의 환원으로 인해 생성된다.

물론, 이와 같은 구조적으로 유사한 불순물로 인한 생성물 (N-(1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌)의 오염은 가능한 한 피해야 하는 것이고, 이와 같은 목적을 위해 효과적인 정제 기술이 요구된다.

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 지금까지 알려진 정제 방법으로는, 예를 들어 다음이 포함된다:

(1) 상기 광학 이성질체들, 특히 부분입체 이성질체를 에틸 아세테이트로부터의 결정화에 의해 제거하는 방법 (1S/1R 비 = 95/5 →1S/1R 비 = 99/1) (JP-A-03-22867),

(2) 상기 카르복시 유도체를 끓는 물로부터의 결정화에 의해 제거하는 방법 (AT402639B) 등.

N-(1-(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 단리 방법에 관하여, 예를 들어 JP-A-05-201882 는 추출된 유기 상의 증발 잔류물을 급냉된(chilled) 에탄올 또는 아세톤으로부터 결정화시키는 것을 포함하는 방법을 개시하고 있으나, 불순물 제거 효과에 대해 언급한 기재는 없다.

본 발명자들은 연구하였고, 그 결과, 상기의 결정화 방법은 종래에 보고된 바와 같은 (AT402639B, JP-A-09-301938 등) 불순물 제거 효과가 충분하지 못함이 밝혀졌다. 이에, 예를 들어, 에틸 아세테이트로부터의 결정화는 상기 카르복시 유도체를 거의 제거할 수 없으며, 물로의 결정화는 상기 시클로헥실 유도체, 에스테르 유도체, 및 극성이 낮은 에틸 페닐부티레이트를 거의 제거할 수 없었다.

또한, 통상의 정제 방법에 있어서, 물 또는 용매, 예컨대 에탄올 중에서 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 용해도가 낮아서 높은 농도 범위에서 결정화를 실행하는 것이 어렵게 되며, 이에 공업적 규모에서의 생산성 관점에서 문제점을 갖는다. 또한, 생성된 결정 슬러리의 물성(액체 거동) 및 생성된 결정의 물성(분말 특징)이 만족스럽다고 반드시 말할 수가 없으며, 결정이 결정화 탱크에서 쉽게 방출될 수 없고 건조가 용이하지 못하며 건조 단계에서 케이크가 형성되는 경향이 있는 문제점, 작은 벌크(bulk) 비중으로 인해 용량이 큰 용기가 포장하는데 필요하다는 문제점이 발견되었다.

이에, 통상의 정제 방법은 생성물 순도, 분말 특징, 수율, 생산성 등의 관점에서 충분히 바람직하지 못하다.

발명의 개요

상기한 당업계의 상황을 고려하여, 본 발명은 고품질, 즉, 고순도이고 바람직한 분말 특징을 가지는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌을 공업적 규모의 적용에 적합할 만큼 높은 생산성을 갖고 우수한 수율로 수득하는 정제 방법을 제공하는 것을 그의 목적으로 한다.

본 발명자들은 상기의 과제를 해결하기 위해 집중적으로 연구하였고, 그 결과, 알콜과 물의 혼합 용매를 사용하여 결정화를 수행함으로써, 모두 수율, 품질, 조작성, 및 생산성을 결정하는 파라미터인, 용해도, 불순물 제거 효과, 슬러리 거동, 및 분말 특징에 있어서 현저한 개선이 제공됨을 발견하였다. 본 발명은 이에 따라 전개되었다.

따라서, 본 발명은 하기 화학식 1 로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 정제 방법으로서:

[화학식 1]

불순물로 오염된 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌을 알콜/물 부피비가 1 ∼ 20 인 알콜과 물의 혼합 용매로부터 결정화시켜 오염 불순물을 모액중으로 제거하고 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정을 얻는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

또한, 본 발명은 상기한 정제 방법으로서, 오염 불순물이 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌, N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에스테르, 및 에틸 페닐부티레이트로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 화합물인 정제 방법에 관한 것이다.

또한, 본 발명은 상기한 정제 방법으로서, 결정화가 0.1 kW/㎥ 이상의 조건으로의 강제적 유동 하에 수행되는 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 결정화가 20℃ 이상의 온도에서 수행되는 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 결정화가 총 결정 산출량의 50%/시간 이하의 결정화 속도로 수행되는 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 결정화가 pH 3 ∼ 6 에서 수행되는 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 결정화가 냉각에 의한 결정화 및 농축에 의한 결정화 중 하나 이상에 의해 수행되는 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 결정화가 냉각에 의한 결정화에 의해 수행되는 정제 방법; 및 상기한 정제 방법으로서, 냉각에 의한 결정화의 냉각 속도가 40℃/시간 이하인 정제 방법에 관한 것이다.

또한, 본 발명은 상기한 정제 방법으로서, 알콜이 탄소수 1 내지 8 의 1가 알콜인 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서 알콜이 탄소수 1 내지 4 의 1가 알콜인 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 알콜이 에탄올인 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 에탄올이 알콜 이외의 변성화제(denaturing agent)로 변성화된 것인 정제 방법; 상기한 정제 방법으로서, 흡착제로의 처리 후에 결정화가 수행되는 정제 방법; 및 상기한 정제 방법으로서, 흡착제가 활성탄인 정제 방법에 관한 것이다.

본 발명을 이제부터 상세히 기술한다.

본 발명에 있어서, 불순물로 오염된 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌으로부터 고품질, 즉, 고순도이고 바람직한 분말 특징을 가지는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌을 높은 생산성을 가지고 우수한 수율로 수득하기 위하여, 결정화가 알콜과 물의 혼합 용매로부터 수행된다.

상기의 알콜은 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어, 탄소수 1 내지 12 의 1가 알콜, 예컨대 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올, 1-부탄올, 2-부탄올, 이소부탄올, t-부탄올, 1-펜탄올, 2-펜탄올, 3-펜탄올, 2-메틸-1-부탄올, 이소펜틸 알콜, t-펜틸 알콜, 3-메틸-2-부탄올, 네오펜틸 알콜, 1-헥산올, 2-메틸-1-펜탄올, 4-메틸-2-펜탄올, 2-에틸-1-부탄올, 1-헵탄올, 2-헵탄올, 3-헵탄올, 1-옥탄올, 2-옥탄올, 2-에틸-1-헥산올, 1-노난올, 3,3,5-트리메틸-1-헥산올, 1-데칸올, 1-운데칸올, 1-도데칸올, 알릴 알콜, 프로파르길 알콜, 시클로헥산올, 1-메틸시클로헥산올, 2-메틸시클로헥산올, 3-메틸시클로헥산올, 4-메틸시클로헥산올, 벤질 알콜 등이 포함된다.

바람직한 것은 탄소수 1 내지 8 의 알콜이며, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올, 1-부탄올, 2-부탄올, 이소부탄올, t-부탄올, 1-펜탄올, 2-펜탄올, 3-펜탄올, 2-메틸-1-부탄올, 이소펜틸 알콜, t-펜틸 알콜, 3-메틸-2-부탄올, 네오펜틸 알콜, 1-헥산올, 2-메틸-1-펜탄올, 4-메틸-2-펜탄올, 2-에틸-1-부 탄올, 1-헵탄올, 2-헵탄올, 3-헵탄올, 1-옥탄올, 2-옥탄올, 2-에틸-1-헥산올, 알릴 알콜, 프로파르길 알콜, 시클로헥산올, 1-메틸시클로헥산올, 2-메틸시클로헥산올, 3-메틸시클로헥산올, 4-메틸시클로헥산올, 벤질 알콜 등이 포함된다.

생성물 품질, 수율, 및 생산성의 관점에서, 탄소수 1 내지 6 의 1가 알콜이 더욱 바람직하며, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올, 1-부탄올, 2-부탄올, 이소부탄올, t-부탄올, 1-펜탄올, 2-펜탄올, 3-펜탄올, 2-메틸-1-부탄올, 이소펜틸 알콜, t-펜틸 알콜, 3-메틸-2-부탄올, 네오펜틸 알콜, 1-헥산올, 2-메틸-1-펜탄올, 4-메틸-2-펜탄올, 2-에틸-1-부탄올, 알릴 알콜, 프로파르길 알콜, 시클로헥산올 등을 언급할 수 있다.

탄소수 1 내지 4 의 1가 알콜이 용해도 향상을 위해 적절히 가열될 수 있다는 점, 습윤된 결정으로부터의 용매 제거 및 결정화 여과물로부터의 용매 회수 모두가 용이하게 달성될 수 있다는 점, 실온 이하로의 온도로 냉각될 때 거의 고화되지 않는다는 점, 그의 낮은 점도로 인해 작업하기 용이하다는 점, 및 용매 비용 및 이용가능성의 관점에서 유리하다는 점에서 더더욱 바람직하다. 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올, 1-부탄올, 2-부탄올, 이소부탄올, t-부탄올, 알릴 알콜, 프로파르길 알콜 등을 언급할 수 있다.

에탄올 이외의 임의 알콜이 사용되는 경우, 조건들에 따라서, 거의 제거되지 않는, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 에스테르교환으로 인한 부산물이 형성되는 경향이 있다(예컨대, N-(1(S)-메톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 및 N-(1(S)-메톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 메틸 에스테르). 따 라서, 에탄올을 사용하는 것이 가장 바람직하다.

에탄올이 사용되는 경우, 그 에탄올은 변성화제로 변성될 수 있다. 변성화제로서 사용가능한 것으로는 이소프로필 알콜, 메탄올, 에틸 아세테이트, 메틸 이소부틸 케톤, 지방족 탄화수소(예컨대, 헥산 및 헵탄), 및 방향족 탄화수소(예컨대, 톨루엔 및 벤젠) 등이 포함된다. 이들 중에서, 알콜 이외의 변성화제를 사용하는 것이 바람직하다. 더욱 바람직한 것은 지방족 탄화수소 및 방향족 탄화수소이고, 톨루엔이 특히 바람직하다. 변성화제의 첨가 수준은 통상적으로 에탄올 부피에 대해 10% 이하이다.

본 발명에 있어서, 보조 용매로서, 물이 상기의 알콜과 조합되어 사용된다. 물의 동시적 사용은 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 용해도를 적절한 수준으로 증가시키며, 수율과 생산성 뿐만 아니라 불순물 제거 효과, 슬러리 거동, 및 결정의 물성(분말 특징)도 개선되게 한다.

결정화를 위한 알콜 대 물의 부피비는 사용될 알콜의 종류에 의존하나, 알콜/물 부피비는 1 ∼ 20 일 것이 필요하다. 상한은 바람직하게는 18, 더욱 바람직하게는 16, 더더욱 바람직하게는 14, 특히 바람직하게는 10 이다. 품질면에서 고려하면, 더욱 바람직하게는 5, 더더욱 바람직하게는 4, 특히 바람직하게는 3 이다. 하한은 품질면을 고려하여, 바람직하게는 1.5, 더욱 바람직하게는 2 이다. 바람직한 범위는 1.5 ∼ 10, 더욱 바람직하게는 2 ∼ 5, 더더욱 바람직하게는 2 ∼ 4, 특히 바람직하게는 2 ∼ 3 이고, 이 조건에 의해 결정화가 적합하게 수행될 수 있다. 상기 비는 그 수율이 약 70% 이상, 바람직하게는 80% 이상, 더욱 바람직하 게는 90% 이상이 되도록 선택하는 것이 바람직하다.

본 발명에 있어서, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정화는 수율과 품질의 관점(부산 불순물의 형성 억제 포함)에서, 바람직하게는 결정 및 상기 혼합 용매로 이루어진 용액의 pH 3 ∼ 6, 더욱 바람직하게는 pH 4 ∼ 5 에서 수행된다. 용액의 pH 가 불순물의 존재 등으로 인하여 너무 낮거나 또는 너무 높은 경우, pH 는 예를 들어, 염산 또는 황산과 같은 산, 또는 알칼리, 예컨대 수산화나트륨 또는 수산화리튬과 같은 알칼리 금속 수산화물로 조정될 수 있다.

본 발명에 있어서, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정화는 바람직하게는 강제적 유동 하에 수행된다. 품질면을 고려하여, 단위 부피 당 교반력으로 환산한 유동이 바람직하게는 약 0.1 kW/㎥ 이상, 더욱 바람직하게는 약 0.2 kW/㎥ 이상, 더더욱 바람직하게는 약 0.3 kW/㎥ 이상이다. 상한은 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 약 20 kW/㎥ 이하, 더욱 바람직하게는 약 10 kW/㎥ 이하이다. 상기에 언급된 강제적 유동은 통상적으로는 교반 임펠러의 회전에 의해 행해지나, 항상 교반 임펠러를 이용하여 상기의 유동을 얻을 필요는 없다. 예를 들어, 용액의 순환을 이용하는 계가 활용될 수 있다.

품질면(생성물 순도, 분말 특징)을 고려하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정화는 바람직하게는 따뜻한 조건 하에서 수행되며, 바람직하게는 약 20℃ 이상, 더욱 바람직하게는 약 30℃ 이상의 온도에서 수행된다. 상한은 바람직하게는 약 80℃ 이하, 더욱 바람직하게는 약 70℃ 이하이다. 결정화는 적합하게는 약 20℃ ∼ 80℃ 에서 수행될 수 있다.

본 발명에 따른 결정화는 관행적인 결정화 기술, 다시 말해서 냉각에 의한 결정화, 중화에 의한 결정화, 및 농축에 의한 결정화와 같은 기술 (용매 교환에 의한 결정화 포함) 중의 임의의 하나 이상에 의해 수행될 수 있다. 냉각에 의한 결정화 및 농축에 의한 결정화 중 하나 이상을 사용하는 것이 바람직하며, 냉각에 의한 결정화를 사용하는 것이 특히 바람직하다.

본 발명의 효과를 최대화하기 위하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정으로의 각종 불순물의 오염을 결정화 속도, 다시 말해서 단위 기간 당 결정 산출량을 제어함으로써 최소화하는 것이 바람직하다. 결정화 속도는 바람직하게는 총 결정 산출량의 약 50%/시간 이하, 더욱 바람직하게는 총 결정 산출량의 약 25%/시간 이하이다. 하한은 바람직하게는 총 결정 산출량의 1%/시간, 더욱 바람직하게는 총 결정 산출량의 2%/시간이다.

냉각에 의한 결정화의 경우, 냉각 속도는 품질면을 고려하여, 바람직하게는 약 40℃/시간 이하, 더욱 바람직하게는 약 20℃/시간 이하, 더더욱 바람직하게는 약 10℃/시간 이하, 특히 바람직하게는 5℃/시간 이하이다. 하한은 바람직하게는 약 1℃/시간 이상, 더욱 바람직하게는 약 2℃/시간 이상이다. 상기의 경우, 많은 과포화 생성 중의 붕괴를 수반하는 급속한 결정화는 품질면을 고려하여 바람직하지 못하기 때문에, 모결정을 첨가하여 필요한 곳에 평온한 핵화를 제공하는 것이 우수한 실시이다.

결정화 완료시의 결정 농도는 특별히 제한되지 않고, 이는 사용될 알콜의 종류에 또한 의존하나, 용매의 부피에 대한 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)- L-알라닌의 중량비는 바람직하게는 약 5 내지 40 w/v%, 더욱 바람직하게는 약 10 내지 35 w/v%, 더더욱 바람직하게는 20 내지 30 w/v% 이다.

본 발명의 정제 방법은 높은 불순물 제거 효과를 제공하며, 광학 이성질체들 {N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌 및 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌}, 시클로헥실 유도체 {N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌}, 카르복시 유도체 {N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌}, 에스테르 유도체 {N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에스테르}, 및 에틸 페닐부티레이트를 제거하는 데에 특히 효과적이다. 특히, 달리 제거하기 극히 어려운 시클로헥실 유도체를 제거하는데 매우 효과적이다. 또한, 상기 기술은 철 및 기타 무기 오염물도 마찬가지로 제거하는데 효과적이다.

불순물 제거를 조력하기 위하여, 기재를 흡착제, 바람직하게는 활성탄으로 처리한 후에 결정화하는 것이 효과적이다.

본 발명의 정제 방법에 의해 수득가능한 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정은 통상적인 고체-액체 분리/케이크 세척 절차 (원심분리, 압력 여과, 흡인 여과 등)에 의해 습윤 결정으로서 수득될 수 있고, 또한 상기 습윤 결정을 통상적 건조 절차(예컨대, 공기 건조, 감압 건조, 진공 건조 등)에 추가로 적용함으로써 건조 결정으로서 수득될 수도 있다. 고체-액체 분리를 수행하는데 있어서, 수율은 약 20℃ 이하, 바람직하게는 0 ∼ 10℃의 온도로 계를 냉각시킴으로써 최대화될 수 있다.

특별히 제한되지는 않을지라도, 본 발명의 정제 방법은 상기 언급된 임의의 공지된 제조 방법에 의해 합성된 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정, 특히 [배경 기술]에서의 (a) 또는 (b) 하에 지금까지 언급한 바와 같은 마이클 첨가 반응을 수반하는 방법에 의해 합성된 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정을 수득하기 위한 단리 방법 또는 재결정화 방법으로서 적합하게 사용될 수 있다.

본 발명의 효과는, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌을 알콜로 결정화시킬 때와 비교하여 알콜과 물의 혼합 용매로 결정화시키는 경우가 결정 내의 수 함량이 높다는 사실로부터 발생한다고 생각된다.

하기의 실시예들은 본 발명의 범주를 한정함이 없이 보다 상세히 본 발명을 묘사한다.

(제조예) N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 제조

에탄올 770 ㎖ 중 에틸 트랜스-β-벤조일아크릴레이트 25.9 g 의 용액에 에탄올 426 ㎖ 중 L-알라닌 리튬염 6.03 g 의 용액을 실온에서 30분에 걸쳐 첨가하였다. 첨가 완료 후, 혼합물을 추가 5분 동안 교반한 다음, 진한 염산 5.29 ㎖ 를 첨가하고, 이어서 빙수로 냉각시켰다. 모결정으로서, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-옥소-3-페닐프로필)-L-알라닌 679 mg 을 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 교반하였다. 분리된 결정을 여과로 수집하고, 에탄올로 세척하고, 건조하여, N-(1-에톡시카르보닐-3-옥소-3-페닐프로필)-L-알라닌 (1S/1R 비 = 95/5) 12.7 g 을 수득하였 다.

1% (v/v) 황산-에탄올 110 ㎖ 에, 상기에서 수득한 N-(1-에톡시카르보닐-3-옥소-3-페닐프로필)-L-알라닌 (1S/1R 비 = 95/5) 2.0 g 을 용해시키고, 이어서 10% Pd/C 0.5 g 을 첨가하고, 촉매적 환원을 대기압 하에 실온에서 수행하였다. 반응 후, 촉매를 흡입 여과에 의해 제거하고, 여과물을 에탄올로 세척하고, 수득된 용액을 농축하였다. 물과 수산화나트륨을 첨가하여 농축물을 중화시키고, 분리된 결정을 여과로 수집하고, 물로 세척하고, 건조하여, N-(1-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 (1S/1R 비 = 99/1) 1.5 g 을 얻었다. 결정의 평균 입경 (D_p ⁵⁰) 은 30 ㎛ 이고, 성긴 충진(loose packing) 벌크 비중은 약 0.3 이고, 결정의 유동성은 만족스럽지 못하였다.

(실시예 1)

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 (순도 96.7%; 포함된 불순물: N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 0.8%, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 0.84%, N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌 0.2%, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에틸 에스테르 0.5%, 및 에틸 페닐부티레이트 0.15%) 5 g 을 에탄올과 물의 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 7) 20 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해시켰다. 상기 용액을 결정화를 위해 교반 하에 2시간에 걸쳐 20℃로 냉각하였다(결정화 동안의 pH 4 ∼ 5). 그 후, 교반 하에, 계를 10℃ 로 추가 냉각하고, 생성된 결정을 여과하여 수집하고, 에탄올과 물의 차가운 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 7)로 세척하고, 진공 하에 건조 (40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 수득하였다. 수율 84%, 순도 100.0%. 어떠한 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에틸 에스테르, 및 에틸 페닐부티레이트도 검출되지 않았으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 함량은 0.40% (제거율 52%) 였다. 결정의 평균 입경 (D_p ⁵⁰)은 170 ㎛ 이고, 성긴 충진 벌크 비중은 약 0.5 이고, 결정의 유동성은 만족스러웠다.

(실시예 2)

실시예 1 에서 사용한 것과 동일한 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 5 g 을 이소부탄올과 물의 혼합 용매 (이소부탄올/물 부피비 10) 28 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해하였다. 상기 용액을 결정화를 위해 교반 하에 2시간에 걸쳐 20℃로 냉각하였다(결정화 동안의 pH 4 ∼ 5). 결정을 여과하여 수집하고, 이소부탄올과 물의 차가운 혼합 용매 (이소부탄올/물 부피비 10)로 세척하고, 진공 하에 건조 (40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 81%, 순도 99.9%. 어떠한 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에틸 에스테르, 및 에틸 페닐부티레이트도 검출되지 않았으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L- 알라닌 함량은 0.27% (제거율 68%) 였다. 결정의 평균 입경 (D_p ⁵⁰)은 130 ㎛ 이고, 성긴 충진 벌크 비중은 약 0.5 이고, 결정의 유동성은 만족스러웠다.

(실시예 3)

실시예 1 에서 사용한 것과 동일한 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 5 g 을 1-프로판올과 물의 혼합 용매 (1-프로판올/물 부피비 10) 20 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해하였다. 상기 용액을 결정화를 위해 교반 하에 2시간에 걸쳐 20℃로 냉각하였다(결정화 동안의 pH 4 ∼ 5). 결정을 여과하여 수집하고, 1-프로판올과 물의 차가운 혼합 용매 (1-프로판올/물 부피비 10)로 세척하고, 진공 하에 건조 (40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 85%, 순도 99.7%. 어떠한 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에틸 에스테르, 및 에틸 페닐부티레이트도 검출되지 않았으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 함량은 0.38% (제거율 55%) 였다. 결정의 평균 입경 (D_p ⁵⁰)은 120 ㎛ 이고, 성긴 충진 벌크 비중은 약 0.5 이고, 결정의 유동성은 만족스러웠다.

(비교예 1)

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌(불순물로서, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 0.84% 를 함유함) 5 g 을 이소부탄올 50 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해하였다. 상기 용액을 결정화를 위해 교반 하에 2시간에 걸쳐 20℃로 냉각하였을 때, 고화되어 케이크가 형성되었다. 결정을 여과하여 수집하고, 차가운 이소부탄올로 세척하고, 진공 하에 건조 (40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 63%, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 함량은 0.40% 였다 (제거율 52%).

(비교예 2)

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌(불순물로서, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 0.84%를 함유함) 5 g 을 에탄올 30 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해하였다. 상기 용액을 결정화를 위해 교반 하에 2시간에 걸쳐 20℃로 냉각하였을 때, 고화되어 케이크가 형성되었다. 결정을 여과하여 수집하고, 차가운 에탄올로 세척하고, 진공 하에 건조 (40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 67%, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 함량은 0.47% 였다 (제거율 44%).

(비교예 3)

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌(불순물로서, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 0.84%를 함유함) 5 g 을 에탄올과 시클로헥산의 혼합 용매 (에탄올/시클로헥산 부피비 2) 32 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해하였다. 상기 용액을 결정화를 위해 교반 하에 2시간에 걸쳐 20℃로 냉각하 였다. 결정을 여과하여 수집하고, 에탄올과 시클로헥산의 차가운 혼합 용매 (에탄올/시클로헥산 부피비 2)로 세척하고, 진공 하에 건조 (40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 70%. N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 함량은 0.48% 였다 (제거율 43%).

(실시예 4)

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 (순도 96.4%; 다음의 불순물 함유: N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 0.10% 및 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 0.11%) 30 g 을 에탄올과 물의 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 2.96) 100 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해하였다. 상기 용액을 1시간 동안 50% 함수 활성탄 3 g 으로 처리한 다음, 혼합물을 뜨거울 때 여과하고, 에탄올과 물의 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 16.9) 10 ㎖ 로 세척하였다. 생성된 용액을 격렬한 교반(0.3 kW/㎥) 하에 20℃로 급속히 냉각하고(냉각 속도 40℃/시간), 추가로 2시간 동안 교반하였다 (결정화 동안의 pH 4 ∼ 5). 결정을 여과하여 수집하고, 에탄올과 물의 차가운 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 16.9)로 세척하고, 진공 하에 건조하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 85%; N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌은 검출되지 않았으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌의 함량은 0.050% (제거율 55%)였다.

(실시예 5)

결정화를 10℃/시간의 냉각 속도로 수행한 것을 제외하고는, 실시예 4 의 절차를 반복하였다. 수율 85%; N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌은 검출되지 않았으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌의 함량은 0.044% (제거율 60%)였다.

(실시예 6)

결정화를 5℃/시간의 냉각 속도로 수행한 것을 제외하고는, 실시예 4 의 절차를 반복하였다. 수율 85%; N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌은 검출되지 않았으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌의 함량은 0.035% (제거율 68%)였다.

(실시예 7)

N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 (순도 96.7%; 다음의 불순물 함유: N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 0.8%, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 0.84%, N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌 0.2%, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에틸 에스테르 0.5%, 및 에틸 페닐부티레이트 0.15%) 5 g 을 에탄올과 물의 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 2.3) 17 ㎖ 에 가온(약 65℃) 하에 용해하였다. 상기 용액을 10분 동안 50% 함수 활성탄 1 g 으로 처리한 다음, 혼합물을 뜨거울 때 여과하고, 에탄올과 물의 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 2.3) 3 ㎖ 로 세척하였다. 이에 수득된 여과물을 결정화를 위해 교반(0.2 kW/㎥) 하에 2시간에 걸쳐 20℃로 냉각하였다 (결정화 동안의 pH 4 ∼ 5). 슬러리를 교반(0.2 kW/㎥) 하에 10℃로 추가 냉각한 후, 결정을 여과하여 수집하고, 에탄올과 물의 차가운 혼합 용매 (에탄올/물 부피비 16.9)로 세척하고, 진공 하에 건조(40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 83%, 순도 99.9%. 어떠한 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에틸 에스테르, 및 에틸 페닐부티레이트도 검출되지 않았으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 함량은 0.40% (제거율 52%) 였고, 철 함량은 0.5 ppm 이었다. 결정의 평균 입경(D_p ⁵⁰)은 160 ㎛ 이고, 성긴 충진 벌크 비중은 약 0.5 이고, 결정의 유동성은 만족스러웠다.

(비교예 4)

실시예 7 에서 사용한 것과 동일한 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 5 g 을 물 55 ㎖ 에 첨가하고, 진한 염산 1.9 ㎖ 를 첨가하여 용해시켰다. 상기 용액을 10분 동안 50% 함수 활성탄 1 g 으로 처리한 다음, 혼합물을 여과하고, 물 5 ㎖로 세척하였다. 상기 여과물에 1시간에 걸쳐 교반(0.2 kW/㎥) 하에 25 ∼ 28℃ 에서 수산화나트륨 30% 수용액 1 ㎖ 를 첨가하여, 용액의 pH 를 4.7 로 조정하였다. 상기 용액을 1시간 동안 22℃ 에서 교반하고, 결정을 여과하여 수집하고, 물 5 ㎖ 로 세척하고, 진공 하에 건조(40∼60℃, 하룻밤동안)하여, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 건조 결정을 얻었다. 수율 86%, 순도 99.1%; N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌이나 에틸 페닐부티레이트는 검출되지 않았다. N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 함량은 0.1% 였고, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에틸 에스테르 함량은 0.2% 였으며, N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌 함량은 0.84% (제거율 0%) 였고, 철 함량은 30 ppm 이었다. 결정의 평균 입경(D_p ⁵⁰)은 70 ㎛ 이고, 성긴 충진 벌크 비중은 약 0.3 이고, 결정의 유동성은 목적하는 바만큼 우수하지 못하였다.

상기에서 나타낸 바와 같은 실시예 각각에 따른 정제 방법에서, 고품질, 즉 바람직한 분말 특징 (특히, 평균 입경이 100 ∼ 1000 ㎛의 바람직한 범위 내이고, 성긴 충진 벌크 비중이 0.4 ∼ 0.7 의 바람직한 범위 내이며, 결정의 유동성이 만족스러웠음)을 가지는 고순도의 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌이 정제될 수 있었으며, 높은 생산성을 가지고 우수한 수율로 수득되었다.

(참고예 1)

실시예 7 에서와 동일한 방식으로 수득한 결정의 분말 특징을 Hosokawa Micron의 분말 시험기를 사용하여 시험하였다. 그 결과를 하기에 나타낸다.

겉보기 비중 (성긴): 0.47

겉보기 비중 (충진된): 0.55

치밀도 (%): 15

치밀도 (지수): 20

안식(repose)각 (도): 43

안식각 (지수): 16

스패툴라(spatula)각 (도): 46

스패툴라각 (지수): 17

균일도 (단위): 2.1

균일도 (지수): 23

유동성 지수: 76

유동성 정도: 상당히 우수함

상기 결과로부터, 상기 결정의 분말 특징은 탁월함이 발견되었다.

(참고예 2)

비교예 4 에서와 동일한 방식으로 수득한 결정의 분말 특징을 Hosokawa Micron의 분말 시험기를 사용하여 시험하였다. 그 결과를 하기에 나타낸다.

겉보기 비중 (성긴): 0.24

겉보기 비중 (충진된): 0.39

치밀도 (%): 39

치밀도 (지수): 2

안식각 (도): 50

안식각 (지수): 12

스패툴라각 (도): 66

스패툴라각 (지수): 12

균일도 (단위): 1.6

균일도 (지수): 24

유동성 지수: 50

유동성 정도: 목적하는 바만큼 우수하지 못함

상기에 나타낸 결과로부터, 상기 결정의 분말 특징이 참고예 1 에서와 비교하여 열등함이 발견되었다.

(참고예 3)

소정의 부피비로의 에탄올과 물의 혼합용매 각각 100 ㎖ 를 소정의 온도로 각각 조정하고, 각 용매를 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 순수한 생성물이 더이상 용해되지 않을 때까지 첨가하였다. 30분 동안 방치한 후, 상청액을 취하고, 건조까지 농축후의 중량/용액의 중량에 따라 용해도(중량%)를 결정하였다. 그 결과를 표 1 에 나타낸다.

에탄올/물 부피비 및 용해도 (중량%)

부피비		0.43	1.00	2.33	4.00	5.67	15.7	249
용해도	65℃	9	21	42	45	42	26	17
	20℃	-	3	4	5	5	4	3
	10℃	1	2	3	4	3	3	2

상기에 나타낸 바와 같이, 에탄올/물 부피비가 1 ∼ 20일 때에, 용해도는 온도에 고도로 의존하며, 따라서 결정화 용매로서 혼합 용매를 사용함으로써 수율과 생산성 (결정화 농도)의 개선이 기대된다.

본 발명의 정제 방법에 의해, 고품질, 즉 고순도이고 바람직한 분말 특징을 가지는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌이 높은 생산성을 가지고 고수율로 정제 및 수득될 수 있다.

Claims

하기 화학식 1 로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 정제 방법으로서:

[화학식 1]

불순물로 오염된 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌을 알콜/물 부피비가 1 ∼ 20 인 알콜과 물의 혼합 용매로부터 결정화시켜 오염 불순물을 모액중으로 제거하고 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌의 결정을 얻는 것을 포함하는 방법.
제 1 항에 있어서, 오염 불순물이 하기 화학식 2 로 표현되는 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌:

[화학식 2]

하기 화학식 3 으로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라 닌:

[화학식 3]

하기 화학식 4 로 표현되는 N-(1(R)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-D-알라닌:

[화학식 4]

하기 화학식 5 로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-시클로헥실프로필)-L-알라닌:

[화학식 5]

하기 화학식 6 으로 표현되는 N-(1(S)-카르복시-3-페닐프로필)-L-알라닌:

[화학식 6]

하기 화학식 7 로 표현되는 N-(1(S)-에톡시카르보닐-3-페닐프로필)-L-알라닌 에스테르:

[화학식 7]

(식 중, R 은 알킬기 또는 아르알킬기를 나타냄), 및

에틸 페닐부티레이트로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 화합물인 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 결정화가 0.1 kW/㎥ 이상의 조건으로의 강제적 유동 하에 수행되는 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 결정화가 20℃ 이상의 온도에서 수행되는 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 결정화가 총 결정 산출량의 50%/시간 이하의 결정화 속도로 수행되는 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 결정화가 pH 3 ∼ 6 에서 수행되는 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 결정화가 냉각에 의한 결정화 및 농축에 의한 결정화 중 하나 이상에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 7 항에 있어서, 결정화가 냉각에 의한 결정화로 수행되는 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 8 항에 있어서, 냉각에 의한 결정화를 위한 냉각 속도가 40℃/시간 이하인 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 알콜이 탄소수 1 내지 8 의 1가 알콜인 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 10 항에 있어서, 알콜이 탄소수 1 내지 4 의 1가 알콜인 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 11 항에 있어서, 알콜이 에탄올인 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 12 항에 있어서, 에탄올이 알콜 이외의 변성화제(denaturing agent)로 변성화된 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 흡착제로의 처리를 수행한 후 결정화하는 것을 특징으로 하는 정제 방법.
제 14 항에 있어서, 흡착제가 활성탄인 것을 특징으로 하는 정제 방법.