KR100756470B1

KR100756470B1 - 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트, 그 제법 및 용도

Info

Publication number: KR100756470B1
Application number: KR1020047017690A
Authority: KR
Inventors: 양징후아; 왕시아올리앙; 수쯔빈; 펑잉
Original assignee: 인스티튜드 오브 머테리아 메디카, 차이니스 아케데미 오브 메디컬 싸이언시스
Priority date: 2002-05-09
Filing date: 2002-05-09
Publication date: 2007-09-07
Also published as: CA2485479C; KR20040106457A; US7550507B2; EP2186792A1; US20050288263A1; CN1243541C; IL164845A0; IL164845A; JP5058439B2; US20090227809A1; EP2186792A8; EP1508561A4; DE60233825D1; WO2003095412A1; AU2002252949A1; CN1382682A; BR0215777B1; EP2186792B1; JP2005524715A; CA2485479A1

Abstract

본 발명은 신규한 화합물 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트, 그 제법 및 이 화합물을 활성 성분으로 이용하는 약학 조성물에 관한 것이며; 본 발명은 또한 심장허혈, 대뇌허혈 및 심장 또는 대뇌 동맥 색전증 등의 치료 및 예방을 위한 상기 화합물의 용도에 관한 것이다.

Description

2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트, 그 제법 및 용도 {2-(α-hydroxypentyl)benzoate and its preparation and use}

본 발명은 신규한 화학 합성 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트, 그 제법 및 활성 성분으로서 그 염을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 심장허혈(cardioischemia), 대뇌허혈(cerebroischemia), 심장 및 뇌 동맥 폐색증 등과 같은 질환의 치료 및 예방에 있어서의 상기 화합물의 용도에 관한 것이다.

급성 허혈성 뇌졸중은 발병률(만명 당 12-18명)이 높은 흔한 질환이면서 사망률(만명 당 6-12명)이 높아서 인간의 건강을 심각하게 위협하며, 생존자에게도 종종 후유증을 남겨서 환자의 가족 및 사회에 큰 부담을 안겨준다. 따라서, 이러한 질환의 치료 및 예방을 위한 약물을 개발하는 것은 매우 중요하다. 많은 연구자들이 1980년대부터 상기 질환(급성 허혈성 뇌졸중)의 메카니즘을 연구해 왔으며, 효과가 높고 독성이 낮은 약물의 개발을 위하여, 에너지 대사, 흥분성 독성, 산화적 손상, 칼슘 과부화 및 기타의 다수 이론들이 제안되어 왔다. 그러나, 이상적인 치료 약물은 여전히 개발 중에 있다. 칼슘 길항제, 흥분 수용체 길항제, 자유 라디칼 스캐빈저와 같은 약물이 임상적으로 사용되고 있으나, 그 효과는 뚜렷하지 않다. t-PA와 같은 혈전용해 약물을 이용하여 급성 허혈성 뇌졸중을 치료(발병 후 6 시간 이내)하고 있는데, 이는 효과적이지만 출혈의 위험성이 해결되지 않고 있다. 따라서, 허헐성 뇌졸중을 치료하기 위한 새로운 약물의 개발이 여전히 중요한 관심사가 되고 있다.

관상동맥 심질환 역시 인간의 건강을 위협하는 심각한 질환이다. 관상동맥 경화증 및 혈전의 형성으로 인하여, 허혈성 심근 손상이 유발된다. 이러한 이유로, 관상동맥 경화증의 예방 및 치료, 혈전 형성의 예방 및 관상 동맥의 확장을 위한 신규한 약물의 개발이 우선 과제가 되고 있다.

발명의 요약

본 발명의 목적은, 혈소판 응집을 현저히 억제할 수 있고, 대뇌의 미소순환을 개선시킬 수 있고, 심장허혈, 대뇌허혈, 심장 및 뇌 동맥 폐색증에 효과적인 신규한 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 합성 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은, 심장허혈, 대뇌허혈, 심장 및 뇌 동맥 폐색증을 예방 및 치료할 수 있는 약학 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 네 번째 목적은, 심장허혈, 대뇌허혈, 심장 및 뇌 동맥 폐색증의 예방 및 치료, 그리고 대뇌 미소순환의 개선을 위한 상기 화합물과 약학 조성물의 용도를 제공하는 것이다.

본 발명은 하기 화학식 (1)의 화합물을 제공한다:

상기 식 중, n=1,2; M은 K⁺, Na⁺, Li⁺와 같은 1가 금속 이온; Ca²⁺, Mg²⁺, Zn²⁺와 같은 2가 금속 이온; 또는 아닐리늄기, 벤질암모늄기, 몰폴리늄기, 및 디에틸암모늄기와 같은 유기 염기 작용기이다.

본 발명의 제조 방법은 다음과 같다:

1. M이 1가 금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조:

동량의 라세믹 3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온을 가수분해반응 및 개환 반응 용매 내에 용해하고, 동량의 또는 약간 과량의 1가 염기를 가한다. 그리고 난 후, 10-100℃의 온도 하에서 0.5 내지 6 시간 동안 가수분해 및 개환 반응을 수행하여, M이 1가 금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 생산한다.

가수분해 및 개환 반응의 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 이소프로판올, 물, 또는 H₂O-알콜(또는 케톤)의 혼합물 중 하나 일 수 있다.

결정화 용매는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 아세톤, 아세틸 아세테이트, 클로로포름, 에테르, 디클로로메탄, 벤젠, 톨루엔, 페트롤륨 에테르 또 는 이들 용매들 중 둘 또는 셋을 다른 비율로 혼합한 혼합물 중 하나일 수 있으며; 1가 염기는, 예를 들어 수산화나트륨, 수산화칼륨, 또는 수산화 리튬 등의 화학적으로 순수한 무기 염기와 같은 무기 염기; 또는 소듐(또는 칼륨) 메톡사이드, 소듐(또는 칼륨) 에톡사이드 등과 같은 화학적으로 순수한 유기 염기일 수 있다.

2. M이 2가 금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조:

M이 1가 금속 이온(예를 들어, 나트륨 또는 칼륨)인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 용매에 용해하고, 그리고 나서 동량의 또는 약간 과량의 화학적으로 순수한 2가 금속염을 가하고, 10-100℃의 온도에서 0.5 내지 10 시간 동안 이온-교환 반응을 행하여, M이 2가 금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 얻는다.

반응 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 이소프로판올, 물 또는 물-알콜(또는 케톤)의 혼합물이며; 2가 금속염은 염화 마그네슘, 염화 칼슘, 또는 염화 아연일 수 있으며; 결정화 용매는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 아세틸 아세테이트, 클로로포름, 에테르, 디클로로메탄, 또는 이들 용매 중 둘 또는 셋을 상이한 비율로 혼합한 혼합물일 수 있다.

3. M이 유기 염기인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조:

(1) M이 1가 금속 이온(예를 들어, 나트륨 또는 칼륨)인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 용매에 용해하고, 그리고 나서, -20-20℃, 바람직하게는 -20-0℃에서 무기산을 용액에 첨가하여 pH 값을 6.0-2.0로 조정하여, 2-(α-히 드록시펜틸)벤조에이트를 산화하여 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 얻는다.

(2) 상기 반응이 완결된 후, 유기 추출 용매를 상기 용액에 첨가하여, 유리산 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 -20-0℃의 온도에서 통상의 추출 방법으로 추출한다. 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 포함하는 유기 용액이 생성되면, 그 용액을 -20-10℃, 바람직하게는 -20-0℃의 온도에서 보관하여 사용한다.

(3) 상기 단계에서 얻어진 용액에, 2-(α-히드록시펜틸)벤조산과 동량의 또는 약간 과량의 1가 염기를 포함하는 용액, 예를 들면, 수산화 칼륨의 알콜 용액을 -10-0℃에서 첨가하여, M이 칼륨과 같은 1가 금속 이온인 본 발명의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 얻는다. 반응이 충분히 수행된 후, 제조 방법 1에서와 동일한 정제 방법으로써, 본 발명의 화합물, 즉, M이 1가 금속 이온인 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 제조한다.

(4) 단계 (2)에서 얻어진 용액에, 2-(α-히드록시펜틸)벤조산과 동량의 또는 약간 과량의 2가 염기 또는 2가 금속염을 포함하는 용액, 예를 들면, 수산화 칼슘의 알콜 용액을 -10-0℃의 온도에서 첨가하여, M이 칼슘과 같은 2가 금속 이온인 본 발명의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 얻는다. 반응이 충분히 수행된 후, 제조 방법 2에서와 동일한 정제 방법으로써, 본 발명의 화합물, 즉, M이 2가 금속 이온인 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 제조한다.

(5) 단계(2)에서 얻어진 용액에, 2-(α-히드록시펜틸)벤조산과 동량의 또는 약간 과량의 유기 염기를 포함하는 용액, 예를 들면 화학적으로 순수한 아닐린을 -10-0℃의 온도 하에서 첨가하여, M이 아닐린과 같은 유기 염기인 본 발명의 2-(α -히드록시펜틸)벤조에이트를 얻는다. 반응이 충분히 수행된 후, 제조 방법 2에서와 동일한 정제 방법으로써, 본 발명의 화합물, 즉, M이 2가 금속 이온인 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 제조한다.

반응물을 산화하는 데 이용되는 산은, 진한 또는 묽은 염산 또는 황산 중 어느 하나일 수 있으며; 온도는 -20-+20℃의 범위로 제어되어야 하며; 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 추출하기 위한 유기 용매는, 에테르, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 디클로로메탄, 벤젠, 톨루엔, 페트롤륨 에테르, n-헥산, 또는 시클로헥산 중 어느 하나일 수 있으며; 1가 염기는 수산화 칼륨, 수산화 나트륨, 수산화 리튬, 소듐(또는 칼륨) 메톡사이드, 또는 소듐(또는 칼륨) 에톡사이드로부터 선택되며; 2가 무기 금속염 또는 2가 무기 염기는, MgCl₂, MgCO₃, CaCl₂, CaCO₃, ZnCO₃, MgSO₄, Zn(OH)₂, Mg(OH)₂, 또는 Ca(OH)₂로부터 선택되며; 유기 염기는, 아닐린, 벤질 아민, 모르폴린 또는 디에틸아민으로부터 선택되며; M이 1가 금속염인 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 용해하는 용매는 H₂O, MeOH-H₂O, EtOH-H₂O, 아세톤-H ₂O, 이소프로판올-H₂O 중 어느 하나 일 수 있다.

본 화합물이 심장허혈 및 대뇌허혈의 예방 및 치료에 우수한 효과를 나타낸다는 것이 밝혀졌으며, 더 나아가, 본 화합물은 또한 항-혈소판 응집, 심장 및 뇌의 동맥 폐색증 치료 효과 및 대뇌 미소순환 개선 효과 등의 약리학적 효과를 갖는 것으로 밝혀졌다.

본 화합물은 동물 시험으로부터, 허혈성 심장 손상의 보호, 항-혈소판 응집 및 대뇌-동맥 폐색증으로 인한 손상의 완화에 탁월한 효과를 나타내었으며, 더 나아가, 흥분 또는 출혈과 같은 부작용을 나타내지 않았다.

본 발명의 약학 조성물은, 유효 성분으로서 치료 유효량의 본 발명의 화합물과 약학적으로 허용가능한 담체를 포함한다.

본 발명의 화합물과 약학 조성물은, 심장허혈 및 대뇌허혈, 심장 및 뇌의 동맥 폐색증을 예방 및 치료하고, 심장-대뇌 미소순환의 개선을 가능하게 하는 약물의 제조에 사용될 수 있다.

상기 언급된 "약학적으로 허용가능한 담체"라 함은, 녹말, 당류와 같은 충진제, 희석제, 부형제와 같은 통상의 약물 담체; 세룰로스 유도체, 알기네이트, 젤라틴 및 폴리비닐피롤리돈과 같은 결합제; 글리세롤과 같은 습윤제; 아가, 탄산 칼슘 및 중탄산 나트륨과 같은 붕해제; 4급 암모늄 화합물과 같은 흡수 촉진제; 세틸 알콜과 같은 표면 활성제; 카올린 및 벤토나이트와 같은 흡착 담체; 탈크, 칼슘 또는 마그네슘 스테아레이트, 및 폴리에틸렌글리콜과 같은 윤활제를 의미하며, 더 나아가, 풍미제 및 감미료와 같은 기타의 보조성분들을 첨가할 수도 있다.

본 발명의 화합물은 상기 치료를 필요로 하는 환자에게, 약학적 제형의 형태로, 경구 및 정맥 내 투여할 수 있다. 경구 투여시에는, 정제, 입제 또는 캡슐제와 같은 복용형태로 투여될 수 있다. 또한 그것은 주사를 위한 유/수 현탁액 또는 용액 형태일 수 있다. 바람직한 투여 형태는 정제, 캡슐제 및 주사제이다.

본 약학 조성물의 투여 형태는 당업계의 통상의 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 담체와 혼합하여 원하는 투여 형 태로 만들 수 있다.

본 약학 조성물은 바람직하게는 3:2, 가장 바람직하게는 1:1의 중량비로 유효 성분을 포함한다.

본 화합물의 투여량은, 투여 경로, 치료하고자 하는 환자의 연령, 체중, 질환 유형 및 질환의 정도에 따라서 달라질 수 있다. 통상적인 일일 투여량은 50mg 내지 600mg/day, 바람직하게는 100-200mg/day일 수 있으며, 이것은 1회 또는 그 이상의 횟수로 투여할 수 있다.

하기하는 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 해석되어서는 안된다.

실시예 1 : 라세믹 칼륨 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트(이하, dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트, 또는 dl-PHPB라고도 함)의 제조

20ml 메탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (8.5g, 0.045mol)을 용해시키고, KOH (2.6g, 0.046mol)의 10ml 메탄올 용액을 가하였다. 상기 반응 용액을 1시간 동안 교반하며 환류시켰다. 이어서, TLC 분석(페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발물질이 소트되었음을 확인하였다. 상기 반응 용액을 감압하에 농축하여 점성 황색 잔사를 얻었으며, 20ml의 클로로포름을 가한 후 냉장시켜 결정화하였다. 조생성물을 MeOH-CHCl₃에서 재결정하여, 백색 과립 결정(10.07g, 수율=91.50%)을 얻었다.

실시예 2: 칼륨 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트

10ml 메탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (0.63g, 3.3mmol)을 용해시키고, KOH (0.19g, 3.4mmol)의 10ml 메탄올 용액을 가하였다. 상기 반응 용액을 1시간 동안 교반하며 환류시켰다. 이어서, TLC 분석(페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발물질이 소진되었음을 확인하였다. 상기 반응 용액을 감압하에 농축하여 점성 황색 잔사를 얻었으며, 5ml의 클로로포름을 가한 후 냉장시켜 결정화하였다. 조생성물을 MeOH-CHCl₃에서 재결정하여, 백색 과립 결정(0.6g, 수율=73.56%)을 얻었다.

실시예 3: 칼륨 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트

10ml H₂O에 소듐 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트 (1.96g, 8.5mmol)를 용해시키고, 상기 용액을 빙염욕(ice-salt bath)에서 약 0℃까지 냉각하였다. 1N HCl을 사용하여 pH를 2.0 내지 3.0으로 조절하고, 상기 용액을 차가운 에테르 (3 x 20ml)로 빠르게 추출하였다. 얻어진 에테르 추출물을 합하여, 낮은 온도에서 3시간 동안 무수 Na₂SO₄로 건조한 후, 저온하에서 빠르게 여과하였다. 상기 여과액에 무수 K₂CO₃ (0.58g, 4.2mmol)의 20ml 메탄올 용액을 가하고, 혼합물을 주변 온도에서 빠르게 교반하였다. 상기 에테르 용액에서 백색 고형분이 형성되었으며, 상기 용액을 24시간 이상 방치한 후, 백색 고형분을 여과 및 건조하였다 (1.4g, 수율=66.67%).

실시예 4: 칼륨 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트

약 10ml H₂O에 소듐 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트 (1.78g, 7.7mmol)를 용해시키고, 상기 용액을 빙염욕(ice-salt bath)에서 약 0℃까지 냉각하였다. 1N HCl을 사용하여 pH를 2.0 내지 3.0으로 조절하고, 상기 용액을 차가운 에테르 (3 x 20ml)로 빠르게 추출하였다. 얻어진 에테르 추출물을 합하여, 낮은 온도에서 2시간 동안 무수 Na₂SO₄로 건조한 후, 저온하에서 빠르게 여과하였다. 상기 여과액에 KOH (0.43g, 7.7mmol)의 20ml 메탄올 용액을 적가하고, 혼합물을 상기 빙염욕에서 주변 온도로 방치하였다. 감압 농축 후, 잔사를 MeOH-에테르로 재결정하였다. 백색 고형분을 얻었다 (1.3g, 수율=68.42%).

상기 실시예 1 내지 4의 공정에서 제조한 바와 같은 칼륨 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트는 백색 과립 결정이다.

실시예 5: 소듐 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트

20ml 메탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (4.6g, 0.024mol)을 용해시키고, NaOH (0.86g, 0.022몰)의 10ml 수용액을 가하였다. 상기 반응 용액을 2시간 동안 교반하며 환류시켰다. 이어서, TLC 분석(페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발물질이 소진되었음을 확인하였다. 상기 반응 용액을 감압하에 농축하여 점성 황색 잔사를 얻었으며, 클로로포름, 아세톤, 에테르 또는 메탄올 등과 같은 용매 내에서 결정을 형성하지 않았다. 소량의 잔사를 에틸-에틸 아세테이트(10:1)로 고형화시켜 백색 고형분을 얻었으며, 흡습성이 매우 컸고, 여과시 점성을 나타내었다. 상기 황색 잔사를 에테르로 수회 세척하고, 무수 벤젠으로 탈수시킨 후 감압하에 건조하여 백색 발포성 고형분 (3.67g, 수율=65.91%)을 얻었다.

실시예 6: 소듐 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트

20ml 메탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (7.6g, 0.04mol)을 용해시키고, 소듐 메톡사이드 (0.92g, Na의 0.04mol)의 정제 메탄올 용액 (20ml)을 가하였다. 상기 반응 용액을 2시간 동안 교반하며 환류시켰다. 이어서, TLC 분석(페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발물질이 소진되었음을 확인하였다. 상기 반응 용액을 감압하에 농축하여 점성 황색 잔사를 얻었으며, 클로로포름, 아세톤, 에테르 또는 메탄올 등과 같은 용매 내에서 결정을 형성하지 않았다. 상기 황색 잔사를 에테르로 수회 세척하고, 무수 벤젠으로 탈수시킨 후 감압하에 건조하여 백색 발포성 고형분 (6.4g, 수율=69.56%)을 얻었다.

실시예 7: 소듐 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조

10ml의 H₂O에 dl-PHPB (1.0g, 0.004mol)을 용해시킨 후, 빙염욕에서 약 0℃로 냉각하였다. 1N HCl을 사용하여 상기 pH를 2.0 내지 3.0으로 조절하고, 차가운 에테르 (3 x 20ml)로 빠르게 추출하였다. 상기 에테르 추출물을 합하여 무수 Na₂SO₄로 2시간 동안 저온에서 건조시킨 후 저온에서 빠르게 여과하였다. 상기 여과액에 무수 Na₂CO₃ (0.58g, 4.2mmol)의 20ml 메탄올 용액을 가하였더니, 상기 용액은 불투명해졌으며, 빙염욕에서 3시간 방치 후 투명한 상태가 되었다. 상기 반응 용액을 감압하에 농축하여 점성 황색 잔사를 얻었으며, 에테르로 수회 세척한 후 무수 벤젠으로 탈수하고 감압하에 건조하여 황색 발포성 고형분(0.4g, 수율=42.78%)을 얻었다.

실시예 8: dl-소듐-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조

20ml의 H₂O에 dl-PHPB (2.4g, 0.01mol)을 용해시키고, 상기 용액을 빙염욕에서 약 0℃로 냉각하였다. 1N HCl로 상기 pH를 2.0 내지 3.0으로 조절하고 용액을 차가운 에테르 (3 x 20ml)로 빠르게 추출하였다. 상기 에테르 추출물을 합한 후, NaOH (0.39g, 0.01mol)의 20ml 메탄올 용액을 가하여 얻어진 용액을 빙염욕에서 밤새 방치하였다. 감압하에 농축하여 점성 황색 잔사를 얻었으며, 상술한 바와 같이 처리하여 백색 발포성 고형분 (1.2g, 수율=53.48%)을 얻었다.

상기 실시예 5 내지 8에서 제조한 소듐 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트는 발포성 백색 고형분이다.

실시예 9: 리튬 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조

15ml 메탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (1.2g, 0.006mol)을 용해시키고, LiOH·H₂O (0.26g, 0.006mol)을 가하였다. 상기 반응 용액을 2시간 동안 환류하에 교반하였다. 다음으로 TLC 분석 (페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발 물질이 소진되었음을 확인하였다. 상기 반응용액을 감압하에 농축하여 백색 결정(1.1g, 수율=81.38%)을 얻었다.

실시예 10: 칼슘 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조

15ml 메탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (1.4g, 7.1mmol)을 용해시키고, NaOH (0.28g, 7.0mmol)의 20ml 수용액을 가하였다. 상기 반응용액을 2시간 동안 환류하에 교반하였다. 이어서, TLC 분석(페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발 물질이 소진되었음을 확인하였다. 칼슘 클로라이드 (0.4g, 4.5mmol)을 40ml의 H₂O에 용해하고, 이 용액을 상기 반응 용액에 적가하였다. 상기 반응은 2시간 동안 60℃ 수욕에서 수행하고, 1N HCl을 사용하여 pH를 약 7로 조절한 후 반응 용액을 여과하였다. 여과액을 감압하에 10ml로 농축하여 백색 고형분을 형성하였다. 상기 백색 고형분을 포함하는 용액을 30분간 방치한 후 여과하였다. 얻어진 필터 케이크를 염소 이온이 더 이상 검출되지 않을 때까지 물 및 H₂O-MeOH (1:1)로 각각 여러차례 세척하였다. 상기 필터 케이크를 가열하여 건조함으로써 백색 고형분(1.08g, 수율=33.23%)을 얻었다.

실시예 11: 칼슘 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조

20ml 무수 에탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (1.1g, 5.8mmol)을 용해시키고, NaOH (0.39g, 9.8mmol)의 10ml 수용액을 가하였다. 상기 반응 용액을 2시간 동안 환류하에 교반하였다. 이어서 TLC 분석(페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발 물질이 소진되었음을 확인하였다. 상기 반응용액을 빙염역에서 약 0℃로 냉각하고, 1N HCl을 사용하여 pH 5.0 내지 6.0으로 산성화시킨 후, 20ml 에탄올을 더 첨가하여 상기 침전된 백색 고형분을 용해하였다. 칼슘 카보네이트 분말 (0.33g, 3.3mmol)을 가하고, 반응 용액을 저온하에 격렬하게 교반하고, 밤새 방치하였다. 상기 반응 용액에서 백색 고형분이 형성된 후, 상기 반응 용액을 여과하였다. 얻어진 필터 케이크를 H₂O-MeOH로 수회 세척하였다. 상기 필터 케이크를 가열하여 건조함으로써 백색 고형분 (0.65g, 수율=24.73%)을 얻었다.

실시예 12: 칼슘 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트의 제조

염화 칼슘 (0.12g, 0.002mmol)을 20ml H₂O에 용해하고 약 60℃로 가열하였다. 이 용액에 dl-PHPB (0.5g, 0.001mol)의 10ml 수용액을 가하였다. 잠시 후, 백색 고형분이 형성되었고, 추가로 3시간을 더 반응시켰다. 이어서, 상기 반응 용액을 여과하여 얻어진 필터 케이크를 열수로 세척하고, 가열건조하여 백색 고형분 (0.21g)을 얻었다. 이어서 여과액을 감압하에 농축하고 열수로 세척한 후 가열건조하여 0.15g의 백색 고형분을 추가로 얻었다. 합한 전체 백색 고형분은 0.36g (수율=78.02%)이었다.

상술한 실시예 9 내지 12에서 제조한 칼슘 dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트는 백색 고형분이며, 252℃ 이상의 온도에서 분해한다.

실시예 13: dl-2-(α-히드록시펜틸)벤조산 벤질 아민염의 제조

15ml 메탄올에 dl-3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온 (1.4g, 7.1mmol)을 용해시키고, NaOH (0.28g, 7.0mmol)의 20ml 수용액을 가하였다. 상기 반응 혼합물을 2시간 동안 환류하에 계속적으로 교반하였다. 이어서 TLC 분석(페트롤륨 에테르-아세톤=10:1) 및 I₂ 증기 착색법을 통해 상기 출발물질이 소진되었음을 확인하였다. 상기 반용용액을 빙염욕에서 약 0℃로 냉각하고, 1N HCl을 사용하여 pH 3.0 내지 4.0으로 산성화시킨 후, 상기 용액을 차가운 에테르 (3 x 20ml)로 빠르게 추출하였다. 상기 에테르 추출물을 합하여 무수 Na₂SO₄로 저온에서 건조한 후 여과하였다. 벤질 아민 (0.9ml, 8.24mmol)을 상기 반응 용액에 가한 후 상기 반응 용액을 빙염욕에서 밤새 방치하였다. 감압하에 농축하여 황색 점성 잔사를 얻고, 페트롤륨 에테르-에테르를 첨가하여 백색 고형분 (1.07g)을 분리한 후, 에틸 아세테이트에서 재결정하여 백색 결정 (0.61g, 수율=26.28%)을 얻었다.

실시예 14: 약학적 조성물의 제조

정제

성분	함량 (mg/정)
활성 성분	50~200
의약용 녹말	20~50
미세결정성 셀룰로오스	15~35
마그네슘 스테아레이트	0.5
탈크	0.5~1
소듐 카르복시메틸 셀룰로오스	2~5

상기 활성 성분, 녹말, 미세결정성 셀룰로오스 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스를 분쇄 및 혼합하였다. 상기 혼합물을 균질하게 습윤처리하고 분말화시킨 후, 체로 거르고 건조한 후 다시 체로 걸렀다. 마그네슘 스테아레이트 및 탈크를 상기 혼합물과 혼합한 후 상기 혼합물을 정제로 압착시킨 후 상기 정제를 필름 코팅 (히드록시프로필메틸 셀룰로오스 등이 가능)으로 코팅하였다. 각 정제는 활성성분을 50 내지 200mg 포함한다.

실시예 15: 약학적 조성물의 제조

캡슐

성분	함량
활성 성분	50~200
의약용 녹말 또는 만니토스	20~50
메틸 셀룰로오스	3~4
가교된 PVP	0.5~1

상기 활성 성분 및 부형제를 혼합한 후 체로 걸렀다. 이와 같이 얻어진 혼합물을 위-가용성 경질 캡슐에 소정 함량으로 충진하였다. 각 캡슐은 50 내지 200mg의 활성 성분을 포함한다.

실시예 16: 약학적 조성물의 제조

정맥주입 용액

성분	함량
활성 성분	50~100mg/병
염화 나트륨	적절한 함량
주사용 물 또는 식염수	5~50ml

상기 활성 성분을 적절한 함량의 주사용 물 또는 등장성 식염수에 용해시킨 후 여과하였다. 적절한 함량의 NaOH를 사용하여 pH를 10.5 (9.0 내지 10.5로 변경 가능)로 조정하였다. 상기 정맥주입 용액을 멸균 조건하에 약병에 채웠다.

실시예 17: 약학적 조성물의 제조

동결건조한 정맥주입 주사제

성분	함량
활성 성분	50~100mg/병
염화 나트륨	적절한 함량

상기 활성 성분을 적절한 함량의 주사용 물에 용해시키고, NaOH를 사용하여 pH를 9.0 내지 10.0으로 조절하였다. 상기 용액을 여과하고 동결건조하여 케이크 또는 분말을 얻었다. 동결건조된 주사제를 주사용 0.9% NaCl 용액 또는 5% 글루코 스 주사액에 용해시킨 후 주사하거나 정맥내 혈관 주사할 수 있다.

실험예 1: 래트에서 국소 대뇌 허혈 후 경색증 영역에 미치는 본 화합물의 효과

(1) 재료 및 방법

동물: Wistar 수컷 래트 (250-280g), the Animal Center of the Chinese Academy of Medical Sciences에서 구입 가능

약물:

dl-PHPB를 2회 증류한 물에 용해하였다.

2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드(TTC)를 베이징 케미칼 플랜트에서 구입하였다.

방법: 중뇌 동맥 폐색증(MCAO): 트리클로로아세트알데히드 모노하이드레이트(350mg/kg, ip)로 래트를 마취시켰다. 남은 CCA를 중간목 절개를 통하여 노출시키고, 주위 신경을 건드리지 않게 조심스럽게 해부하였다. ICA 및 ECA를 분리하였다. 그리고 나서 길이 4cm 직경 0.26mm의 나일론 봉합재를 기부 ECA를 통하여 분기점으로부터 2.0mm 길이로 ICA로 삽입하였다. 상처를 봉합하고, 래트를 풀어주었다. 시험 동안 실온은 24-25℃로 유지하였다.

군:

동물을 2개의 군으로 나누었다: 1) 투여군: dl-PHPB (200mg/kg) 및 HCl (pH 1.6) 0.5ml (인간 위의 산성 조건을 형성하기 위함)을 허혈 30분 전에 경구(per os; p.o)투여하였다; 2) 대조군: 2회 증류한 물 HCl (pH 1.6) 0.5ml를 허혈 30분 전에 경구 투여하였다.

경색증 측정:

마취한 동물을 MCAO 24 시간 후에 참수하였다. 각 뇌를 신속하게 제거하고, 얼음-냉 식염수(0-4℃) 안에 보관하였다. 10분 후, 후구, 소뇌 및 저뇌간을 제거한 후, 관상봉합 단면을 5 조각으로 슬라이스하였다. 절단시, 첫 번째 절단은 시신경 교차와 대뇌 전극의 연결선의 중앙점에서, 두 번째 절단은 시신경 교차 부위에서, 세 번째는 누두경 부위에서, 네 번째는 누두경과 후엽의 꼬리쪽 끝(caudal pole) 사이에서 한다. 슬라이스한 뇌를 TTC (4%) 및 K₂HPO₄(1M) 용액 5ml 내에 두고, 광선을 차단하여 37℃에서 30 분간 인큐베이션 하였다. 인큐베이션 동안, 슬라이스는 매 7-8분마다 뒤집어 주었다. 염색 후, 정상 대뇌 조직은 장미빛을 나타내는 반면, 경색된 조직은 흰색을 나타내었다. 경색된 조직을 정상 조직으로부터 분리하여 중량을 측정하였다. 경색증 영역은 총 대뇌 조직에 대한 경색 조직의 중량 백분율로부터 계산한다.

(2) 결과

영구 MCAO의 래트에서 대뇌 경색증 영역에 미치는 dl-PHBP의 효과

표 1은 경색증 영역을 나타내며, dl-PHBP 처리된 군의 영역은 19.83±3.53%이며, 대조군의 경우는 26.99±3.51%이다. 상기 경색증은 대조군에 비하여 치료군의 경우 현저히 감소하였다 (P<0.01).

	대조군(%)	치료군(%)
	30.50 27.08 27.92 30.64 24.87 27.44 20.46	26.01 20.24 18.24 22.74 16.84 15.93 18.79
X ± SD	26.99 ± 3.51	19.83 ± 3.53^**

^** p < 0.01 vs 대조군

(3) 결론:

칼륨 2-(α-히드록시펜틸)-벤조에이트, dl-PHPB)는 MCAO에 유발되는 대뇌 조직 손상을 현저히 줄였으며, 경색증 영역을 감소시켰다.

실험예 2: 혈소판 응집에 대한 본 발명의 화합물의 효과

(1) 재료 및 방법

동물: Wistar 수컷 래트 (260-280g), the Animal Center of the Chinese Academy of Medical Sciences에서 입수

약물:

칼륨 2-(1-히드록시펜틸)-벤조에이트, dl-PHPB),

ADP, Shanghai Institute of Biochemistry, Acedemia Sinica에서 입수

장비: 혈소판 응집기 (종류: PAT-4A MEGURO-KU, TOKYO, JAPAN)

군: 동물을 4개의 군으로 나누었다:

1) 대조군: 2회 증류한 물 (400mg/kg)을 혈액 채취 30분 전에 경구(per os; p.o) 투여하였다.

2) Dl-PHPB (400mg/kg)을 혈액 채취 30분 전에 경구 투여하였다.

3) Dl-PHPB (400mg/kg)을 혈액 채취 60분 전에 경구 투여하였다.

4) Dl-PHPB (200mg/kg)을 혈액 채취 30분 전에 경구 투여하였다.

방법:

dl-PHPB의 경구 투여 후, 30 분 및 60 분 후의 각각의 시점에서 래트의 경동맥으로부터 혈액을 뽑았다. 혈소판 농축 혈장(PRP) 및 혈소판 결핍 혈장(PPP)을 통상의 방법에 따라서 제조하였다. Born에 의해 기술된 방법에 따라, PRP(200㎕)를 혈소판 응집기(Platelet Aggregometer)에 놓고, 37℃에서 5분간 예비-인큐베이션한 뒤, 최종 농도가 5μmol/L인 ADP를 첨가하여 혈소판 응집을 유도하였다. ADP 첨가하고 5분 후 최대 응집을 측정하였다.

(2) 결과

표 2는 ADP에 의해 유발되는 혈소판 응집에 대한 억제 효과를 나타낸다.

군	N	혈소판의 응집속도(%)	억제 속도(%)
대조군	7	0.5556±0.0287	-
dl-PHPB (400mg/kg 30분)	7	0.4483±0.0610^**	19.31
dl-PHPB (400mg/kg 60분)	9	0.4989±0.0562^*	10.21
dl-PHPB (200mg/kg 30분)	8	0.5021±0.0622	6.62

^** P<0.01, ^*P<0.05 vs 대조군

(3) 결론:

칼륨 2-(1-히드록시펜틸)-벤조에이트, dl-PHPB)는 대조군과 비교하여 혈소판 응집을 현저하게 억제한다.

실험예 3: 래트의 분리한 심장에서 허혈-재관류에 의해 유도되는 심장 부정맥에 대한 dl-PHPB의 보호 효과

(1) 재료 및 방법

동물: Wistar 수컷 래트, 250-300g, the Animal Center of the Chinese Academy of Medical Sciences에서 입수, 무작위로 군을 형성

약물:

dl-PHPB,

NaCl, Beijing Chemical Reagent Factory No. 2에서 입수

KCl 및 MgSO₄, Beijing Shuanghuan Chemical Reagents Factory

KH₂PO₄, Beijing Yili Fine Chemicals Co., Ltd.

NaHCO₃, Beijing Chemical Reagents Company

글루코스, Beijing Guohua Chemical Reagents Factory

CaCl₂, Sigma.

장비:

란겐도프(Langendoff) 관류 시스템;

XD-7100 ECG, Shanghai Medical Electronic Devices Factory

방법:

(1) 참수 후 래트 심장을 신속하게 제거하고, 그것을 4℃에서 K-H 용액 내에 놓고, 대동맥을 관류계에 고정시킨다;

(2) 약 60 mmH₂O의 압력 하에서, 37±0.5℃에서, 6-8ml/min으로 심장을 K-H 용액으로 관류시킨다;

(3) 두 개의 구리 전극을 심장 선단과 우심방 바닥에 연결하고 심박 곡선을 기록한다;

(4) 관상 동맥의 좌측 앞쪽의 내려가는 가지 밑에 3/0 라인으로 구멍을 뚫는다;

(5) 10분 동안 심장을 관류시키고 정상 심박 곡선을 기록한다;

(6) 관상 동맥의 좌축 앞쪽의 내려가는 가지를 연결하여 15분 동안 심근 허혈을 만든다;

(7) 라인을 집어서 관류를 재개하고, 30분 동안 심박 곡선의 변화를 기록한다(주로 VF 및 경련성 VT에서);

(8) dl-PHPB를 pH 1.5에서 원하는 농도로 용해시키고, 이것을 K-H 용액에 가하여 실험을 행한다.

(2) 결과:

표 3은 래트의 분리된 심장에서 허혈-재관류에 의해 유발되는 심장 부정맥에 대한 dl-PHPB의 보호 효과를 나타낸다.

군	N	부정맥의 지속시간 (분)	VT		경련성 VT	VF	VE
군	N	부정맥의 지속시간 (분)	발병률(%)	지속시간 (분)	발병률(%)	발병률(%)	발병률(%)
대조군	12	22.5±9.5	100	8.2±7.9	66.7	33.3	83.3
dl-PHPB(10^-5mol/L)	6	23.3±5.8	100	5.0±6.5	50	33.3	66.7
dl-PHPB(10^-4mol/L)	7	1.7±0.6^***	100	1.1±0.6^**	0^*	0	42.9

VT: 심실 빠른맥

VF: 심실 세동

VE: 심실 딴곳 박동

^*P<0.05, ^**P<0.01, ^***P<0.001 대조군과 비교

(3) 결론:

dl-PHPB는 래트의 분리된 심장에서 허혈-재관류에 의해 유발된 VT 및 부정맥의 지속시간을 현저히 단축시킬 수 있으며, 경련성 심실 빠른맥의 accidence를 감소시킨다.

신규한 2-(α-히드록시펜틸) 벤조에이트류는 약학적 조성물의 제조를 위해 사용될 수 있으며, 심장 및 뇌 등의 심장 허혈, 대뇌 허혈, 동맥 폐색증 (막힘)과 같은 질환의 예방 및 치료를 위해 사용된다.

Claims

하기 화학식 (1)의 화합물:

상기 식 중, M은 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온, 아연 이온, 또는 아닐리늄기, 벤질암모늄기, 몰폴리늄기, 및 디에틸암모늄기로부터 선택된 유기 염기 작용기이며,

n은 1 또는 2이다.
삭제
제 1 항에 있어서, M은 칼륨 이온, 나트륨 이온 또는 리튬 이온인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1 항에 있어서, M은 칼슘 이온, 마그네슘 이온, 또는 아연 이온인 것을 특징으로 하는 화합물.
삭제
M이 알칼리 금속 이온인 것을 특징으로 하는 제 1 항에 따른 화학식 (1)의 화합물의 제조 방법으로서,

동량의 라세믹 3-n-부틸-이소벤조퓨란-1-(3H)-온을 가수분해 및 개환 반응 용매에 용해시키고, 동량의 또는 약간 과량의 각각의 금속 염기를 첨가하고, 10-100℃의 온도 하에서 가수분해 및 개환 반응을 수행하여, M이 알칼리 금속 이온인 것을 특징으로 하는 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 생산하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
제 6 항에 있어서, 상기 가수분해 및 개환 반응용 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 이소프로판올, 물, 물-알콜의 혼합물, 또는 물-케톤의 혼합물로부터 선택된 용매이며,

상기 각각의 금속 염기는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 또는 수산화리튬으로부터 선택된 무기 염기, 또는 소듐 메톡사이드, 칼륨 메톡사이드, 소듐 에톡사이드, 또는 칼륨 에톡사이드로부터 선택된 유기 염기인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
M이 알칼리 토금속 이온인 제 1 항에 따른 화학식 (1)의 화합물의 제조 방법으로서,

M이 알칼리 금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 용매에 용해시키고, 동량의 또는 약간 과량의 알칼리 토금속 염을 첨가하고, 10-100℃의 온도 하에서 이온-교환 반응을 수행하여, M이 알칼리 토금속 이온인 것을 특징으로 하는 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 생산하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
제 8 항에 있어서, 상기 반응 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 이소프로판올, 물, 물-알콜의 혼합물, 또는 물-케톤의 혼합물로부터 선택된 용매이며; 알칼리 토금속 염은 염화칼슘인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
M이 알칼리 금속 이온 또는 알칼리 토금속 이온인 제 1 항에 따른 화학식 (1)의 화합물의 제조 방법으로서,

(1) M이 생성물과 다른 알칼리 금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 용매에 용해시키고, 이 용액에 무기산을 첨가하여 pH 값을 6.0 ~ 2.0으로 조정하고, -20 ~ 20℃의 온도에서 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 산과 반응시켜 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 생성하는 단계;

(2) 상기와 같이 얻어진 벤조산 용액에 유기 추출 용매를 첨가하여 유리 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 추출함으로써, 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 포함하는 유기 용액을 얻은 후, 이 용액을 이후의 사용을 위해 -20 ~ 10℃의 온도에서 보관하는 단계;

(3) 이전 단계에서 얻어진 2-(α-히드록시펜틸)벤조산 용액에, 동량의 또는 약간 과량의 금속 양이온이 출발물질의 그것과 다른 알칼리 금속 염기를 포함하는 용액을 -10 ~ 0℃의 온도 하에서 첨가하여, M이 알칼리 금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 얻는 단계; 또는

단계 (2)에서 얻어진 2-(α-히드록시펜틸)벤조산 용액에, 동량의 또는 약간 과량의 알칼리 토금속 이온 또는 알칼리 토금속 염을 함유하는 염기를 포함하는 용액을 -10 ~ 0℃의 온도 하에서 첨가하여, M이 알칼리 토금속 이온인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 얻는 단계; 또는

단계 (2)에서 얻어진 2-(α-히드록시펜틸)벤조산 용액에, 동량의 또는 약간 과량의 아닐리늄기, 벤질암모늄기, 몰폴리늄기, 및 디에틸암모늄기로부터 선택된 기에 해당하는 유기 염기를 포함하는 용액을 -10 ~ 0℃의 온도 하에서 첨가하여, M이 아닐리늄기, 벤질 암모늄기, 몰폴리늄기, 및 디에틸암모늄기로부터 선택된 유기 염기 기인 화학식 (1)의 2-(α-히드록시펜틸)벤조에이트를 얻는 단계를 포함하는 방법.
제 10 항에 있어서, 단계 (1) 동안 진한 염산, 묽은 염산, 또는 황산이 사용되며; 단계 (2)에서 2-(α-히드록시펜틸)벤조산을 추출하기 위한 유기 용매로서 에테르, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 디클로로메탄, 벤젠, 톨루엔, 페트롤륨 에테르, n-헥산, 또는 시클로헥산로부터 선택된 용매를 사용하며; 단계 (2)에서 각각의 알칼리 금속의 염기는 수산화 나트륨, 수산화 칼륨, 수산화 리튬, 소듐 메톡사이드, 칼륨 메톡사이드, 소듐 에톡사이드 또는 칼륨 에톡사이드로부터 선택된 염기이며; 알칼리 토금속의 염은 탄산칼슘 또는 염화칼슘이고; 알칼리 토금속의 이온을 포함하는 염기는 수산화 칼슘이며; 단계 (1)의 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 이소프로판올, 물, 물-알콜의 혼합물, 물-케톤의 혼합물, 에테르, 아세틸 아세테이트, 클로로포름, 디클로로메탄, 벤젠, 톨루엔, 페트롤륨 에테르, n-헥산, 또는 시클로헥산으로부터 선택된 용매인 것을 특징으로 하는 방법.
유효량의 제 1 항에 따른 화학식 (1)의 화합물과 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 심장허혈, 대뇌허혈, 대뇌 동맥 폐색증의 치료 및 예방, 또는 뇌의 미소순환의 개선을 위한 약학 조성물.
삭제
제 12 항에 있어서, 상기 화합물은 정제, 캡슐제, 주사제, 또는 동결건조 주사제로 제조될 수 있는 것임을 특징으로 하는 약학 조성물.
제 12 항에 있어서, M은 나트륨 이온 또는 칼륨 이온인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
제 10 항에 있어서, 단계 (1)에서의 반응을 수행하는 온도 및 단계 (2)에서 용액을 유지하는 온도는 -20 ~ 0℃인 것을 특징으로 하는 방법.