KR100351713B1

KR100351713B1 - 백금(ii) 항종양제의 안정용액

Info

Publication number: KR100351713B1
Application number: KR1019940019811A
Authority: KR
Inventors: 머레이에이.카플란; 라완푸산티; 로버트케이.페른; 스코트알.스텐버그; 쉬람아가르카르; 죠셉비.보가더스
Original assignee: 브리스톨-마이어스스퀴브컴파니
Priority date: 1993-08-11
Filing date: 1994-08-11
Publication date: 2002-12-28
Also published as: RU94028650A; KR950005305A; HK115497A; AU6898294A; RU2142797C1; DK0642792T3; GR3024340T3; FI113618B; PL178689B1; DE69402931T2; EP0642792B1; FI943666A0; CY2021A; ES2102743T3; NZ264210A; IL110577A; HU9402307D0; NO942944D0; JPH0753368A; TW383224B

Abstract

pH 4-8에서 1,1-시클로부탄디카르복실산 또는 그의 염의 안정화량을 함유하는 카르보플라틴 및 기타 말로네이토 백금(II) 항종양제의 용액이 제조된다. 상기 안정화제는 허용될 수 없는 변색 및 침전을 억제한다. 이 용액들은 또한 담체를 공기 또는 산소로 정화시키고, 임의로 상부공간을 공기 또는 산소로 뒤덮는 처리 (블랑켓)함으로써 안정화시킬 수도 있다.

Description

백금(II) 항종양제의 안정용액

카르보플라틴, 즉 1,1-시클로부탄디카르복실 디암민 백금(II)은 백색 내지 회백색을 띄는 결정분말이다. 시스플라틴과 갈이, 이것은 세포독성 백금 배위화합물이다. 또한, 이것은 시스플라틴과 같이, 난소암을 포함, 포유동물에 있어서의 여러가지 악성질환을 치료하는데 유효한 세포변성 특성을 갖는다.

Cleare 등의 미국특허 제 4,140,707호 및 4,657,927호에는 카르보플라틴과 기타 말로네이토 백금 화합물의 제법 및 스탠다드 스크리닝 종양, 고상 육종 180을 치료하는 데 있으서의 이들의 용도가 개시되어 있다. 이 화합물군은 그 구조 내에 -(OOC)₂-C< 결합을 가지므로, "말로네이토 (malonato)"라 명명될 수 있을 것이다.

시스플라틴과 달리, 카르보플라틴은 일반적으로 신독성, 자기독성 및 신경독성과 같은 심각한 부작용을 초래하지 않는다. 카르보플라틴은 아쿠아화(aquation)에 대해 저항적인데, 이것이 바로 카르보플라틴의 독성이 더 낮은 한가지 이유가 된다. 카르보플라틴은 소형 세포 폐암, 비늘 세포암 및 고환암을 포함한 인간의 여러가지 암을 치료하는 데 사용되어왔다. U.S. Pharmacist, 1989년 9월, 제 62-63면참조.

카르보플라틴은 동결건조된 분말로서 판매되는데, 보통, 환자에게 정맥주사하기 직전에 물, 식염용액, 덱스트로스 용액 및/또는 기타 희석제로 희석시켜 사용한다. 그러나, 이것은 물에 비교적 잘 녹지 않기 때문에 (실온에서 14 mg/ml), 예컨대, 재조성(reconstitution)시 "스플래쉬 백 (splash back)"과 같은 문제점이 생길 수 있다. 즉, 모든, 항-신생조직 제제와 마찬가지로, 카르보플라틴은 정상적인 조직과 접촉할 때 바람직하지 못한 영향을 미칠 수 있다.

용이한 조작과 투여를 위해서는 농축된 즉석사용 (RTU: ready-to-use) 형태의 카르보플라틴 용액이 매우 소망된다 할 것이다. 그러나, 이 화합물은 간단한 수용액에서 장기간 보존시, 즉, 물 단독과 혼합시에도-물리적으로 안정하지 않다.

Nijkerk 등의 미국특허 제 5,104,896호에는 이러한 문제점을 해소하려는 시도가 개시되어 있다. 이들은 22mg/ml 이하의 카르보플라틴과 용액의 pH를 2 내지 6.5로 유지하기 위해 무기-완충제 0.01 - 0.1 몰을 함유하는 카르보플라틴 용액을 개시하고 있다.

A. Bosonquet은 Cancer Chemother Pharmacol, 23: 197-207 (1989)에서 카르보플라틴의 불안정성을 개시하고 이것의 안정한 용액을 제조하기위해 물과 염화나트륨을 사용할 것을 제안하고 있다. Levius 등은 E P.O. 공개 334,551호 (1989년 9월 21일 공개)에서 카르보플라틴 용액에 클로라이드 이온을 사용하지 말 것을 제안하고 있다(제3면 7행 이하 참조). 또한, 이들은 약물이 동결건조되지 않고, 물에 염이 함유되지 않는 경우라면 10 - 15 mg/ml의 약물을 함유하는 카르보플라틴 수용액은 안정하다고 개시하고 있다 (제 2면 22행 이하 참조).

본 발명은 안정한 카르보플라틴 조성물, 이것을 제조하는 방법 및 이들 조성물과 방법에 기초한 안정한 제품에 관한 것이다.

본 발명자들은 안정화 방법으로서 다음 중 한가지 이상을 사용함으로써 안정한, 카르보플라틴의 1,1-시클로부탄디카르복실산 (CBDCA) 완충용액을 제조할 수 있음을 발견하였다:

(1) 1,1-시클로부탄디카르복실산 (pH 4-8까지),

(2) 공기 또는 산소로 용액을 정화(purging)시키며,

(3) 공기 또는 산소로 바이알 또는 다른 용기의 상부 공간을 블랑켓 (blanket)시킨다.

매우 바람직한 구체예에서는, (1), (2) 및 (3)이 모두 사용된다. 결과적인 용액의 pH는 약 4 내지 약 8이며, 약 1 내지 약 15mg/ml의 카르보플라틴을 함유하고, 물을 함유하는 담체를 포함하며, 50 vo1.%의 상부공간을 갖는 바이알에 보관된다. 이 용액은 50℃에서 적어도 4개월간 이화학적으로 안정하다.

본 발명의 장점

본 발명의 조성물, 제품, 및 방법은 종래기술에 비해 몇가지 장점을 갖는다.

"스플래쉬 백" 및 카르보플라틴의 동결건조물 또는 다른 분말화된 형태를 사용하는 것과 관련한 기타 문제점들이 즉석(RTU) 주사가능한 조성물의 희석 용액을 사용함으로써 해소된다.

제조경비가 덜 비싼 RTU 조성은, 희석 외에 투여 전 부가적인 준비 또는 조작을 요구하지 않는다.

이 새로운 조성물의 안정성, 즉, 24℃에서 18개월 이상 보존가능 하다는 이 안정성은 종래의 조성물에서 요구되었던 유효기간 검토 및 자주 폐기처분해야 했던 문제가 더 이상 존재하지 않음을 의미하는 것이다.

온도 및 광 민감성과 관련한 최소의 주의만 기울이면, 본문에 개시된 카르보플라틴 용액은 사용 및 보관이 쉬운 것이다.

이들 및 기타 장점들은 다음 명세서 및 특허청구의 범위를 참고하면 더욱 명확해질 것이다.

달리 언급하지 않는 한, 본문에 개시된 모든 백분률은 총 조성중량에 기초한 중량 백분률이다.

언급된 모든 문헌은 본문에 참고적으로 삽입된 것이다.

본문의 모든 표에서, "맑음", "침전물들 없음" 및 "침전물 없음"은 모두 동일한 의미의 용어이다.

활성 성분

본문에서 사용된 활성 성분은 한가지 이상의 말로네이토 백금(II) 화합물이다.

명세서 전반에 걸쳐 "카르보플라틴"이라는 용어를 사용하였으나, 본 발명자들은 이 용어에 1,1-시클로알킬이카르복실산 잔기를 산생하는 두개의 한자리 암모니아 또는 아민 리간드 및 한개의 두자리 말로네이토 리간드를 함유하는 모든 배위 화합물을 포함시키는 것으로 의도한다.

일반식 I과 일치하는 적합한 화합물들:

식 중:

R과 R¹은 독립적으로 H, C_1-6알킬, C_1-6히드록시알킬, C_5-12아릴, C_5-12알크아릴, C_5-12아르알킬, C_1-6알콕시알킬, 및 C_5-12아미노산 잔기 중에서 선택되고;

n은 2 또는 3이며;

X는 시클릭 C_3-6알킬 또는 알케닐기이다.

R=R¹=H, n=3 그리고 X가 시클로알킬인 부분인 것이 바람직하다.

카르보플라틴 (다음 구조식 II)뿐 아니라 그의 이성질체 및 통상적인 유도체를 사용하는 것도 매우 바람직하다. 구조식 II는 다음과 같다:

식 중 "통상적인 유도체"라 함은, 용매화합물, 수화물, 기하 이성질체, 치환된 핵을 갖는 동족체등을 의미하는 것이다.

본 발명에서 유용한 시스플라틴과 그 밖의 약리적 화합물은 미국특허 제4,140,707호와 4,657,927호에 개시된 방법에 따라 제조할 수 있다.

개략적인 반응공정은 다음과 같다:

시스-[Pt ACl₂] + 2 AgNO₃+ 2 H₂O → 시스-[Pt A(H₂O)₂](NO₃)₂+ 2AgCl

시스-[Pt A(H₂O)₂](NO₃)₂+ X(COOH)₂→ [Pt A (OOC)₂-CH₂] + 2NO₂- +

2H₂O + 2H+

식 중, A는 한개의 두자리 아민 리간드 또는 두개의 한자리 아민 리간드이고 X는 상기 정의한 바와 같다.

항-신생조직 치료제로서 카르보플라틴을 사용하는 것은 잘 알려져 있다.

안정화 시스템

(1) 1,1-시클로부탄디카르복실산 (CBDCA) 및 염

산 CBBCA는 카르보플라틴의 바람직한 제조방법에 있어서 반응물질이다. 이것은 상기 화합물의 안정화되지 않은 용액의 수용성 구성성분이다.

CBDCA의 유용한 염들에는 알칼리 금속염이 포함된다. 나트륨염이 바람직하며, 특히 담체가 물 또는 한가지 이상의 폴리알킬렌 글리콜인 경우 바람직하다.

CBDCA와 그의 나트륨염은 이들이 약물과 매우 잘 섞이기 때문에 카르보플라틴용 완충액으로서 이미 연구된 바 있다. 그러나, 산 및 그의 염류는 이전에는 백금(II) 화합물에 대한 안정화제로서는 개시된바 없다.

몇몇 바람직한 구체예에서, 이 안정화제 시스템은 안정화제로서 CBDCA와 함께 pH 조절제(modifier)로서 이것의 나트륨염을 사용한다.

카르보플라틴 또는 기타 말로네이토 백금(II) 화합물의 용액에 최종 CBDCA농도가 pH 약 4 내지 약 8에서 약 0.25 내지 약 4 mg/ml가 되도록 하는 양으로 상기 산 또는 한가지 이상의 염을 첨가한다. 바람직한 양은 약 1 내지 약 2mg/ml이다.

(2) 공기 또는 산소 정화

공기 -- 즉, 실온에서 약 78% 질소와 약 21% 산소와의 기체상 혼합물 -- 또는 순수한 산소 (O₂)가 고려된다. 산소가 바람직한 정화제이다.

산소와 공기의 혼합물도 사용될 수 있다. 이러한 혼합물의 산소함량은 약 25% 내지 약 95%인 것이 바람직하다. 아르곤과 같은 비질소 가스 역시 사용될 수 있다.

정화 가스에 있어서는 질소의 농도가 약 78% 이상이 되지 않도록 해야한다.

"정화 (purging)"라 함은 대기압 하에서 소망되는 가스를 용액을 통해 통과시키거나 기포를 일으키게 하여(bubbling) 액체와 상부공간을 최적량의 산소로 포화시키는 것을 의미하는 것으로 한다.

정화단계의 기간은 그다지 중요하지 않다. 그러나, 일반적으로 약 1 내지 약 5 시간의 기간동안 약물을 함유하는 액체 용액을 정화시키는 것이 소망된다. 2시간이 일반적이다. 주변 온도, 또는 약 25 내지 30℃의 실온이 주로 이용된다.

정화기술이 사용되는 경우, 용기 중의 액체는 그의 총 부피의 50% 이하만을 채우는 것, 즉, 충전되지 않은 공기 산소 부피 또는 상부공간이 용기 총 부피 (액상 & 기상)의 50% 이상이 되는 것이 바람직하다 (반드시 요구되는 것은 아님).

(3) 공기 또는 산소에 의해 상부공간을 뒤덮는 것

상부공간, 즉, 용기 중 액체 윗부분의 공간을 공기나 산소로 충전하는 것은 또 다른 안정화 방법이다. "뒤덮는 것(blanketing)"이라는 기술 용어에는, 모든 주변 또는 대기 가스들을 바이알, 병 또는 기타 밀폐된 용기 중 액체 위의 공기나 산소로 포화된 상부 공간의 외부로 밀어내는 기술이 포함된다. 그 직후, 용기를 밀봉시킨다.

상부공간을 블랑켓시키는 시간은 대체로 약 1 내지 약 5시간이다. 약 2 내지 3시간이 바람직하다.

정화단계에서 상술한 바와 같이, 질소를 78% 이상 함유하는 가스를 사용하는 것은 피해야 한다.

카르보플라틴이나 말로네이토 결합을 갖는 기타 유사한 백금(II)약물을 함유하는 용액을 안정화시키기 위해서는 이들 세가지 기술을 각각 단독으로 사용할 수 있다. 그러나, (1)과 (2)의 기술을 함께 사용하거나 (2)와 (3)의 기술을 함께 사용하는 것이 바람직하다. 이들 세가지 기술을 모두 사용하는 것이 매우 바람직하다.

담체

백금(II) 화합물에 대한 용매로서 사용될 담체는 일반적으로 수분을 함유하는 것들이다. 순수한 물 (예컨대, 주사용 증류수)이 바람직하다.

물과 한가지 이상의 보조 담체, 에컨대, 특정의 폴리알킬렌 글리콜 및 설탕 용액과의 혼합물을 사용할 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 용액 중 최종 수분 함량은 예컨대 글리콜과 같은 담체를 약 10 내지 90중량%의 수준으로 사용한 경우 총담체 함량에 기초 할 때 약 0.5 내지 99.5% 범위가 될 것이다.

안정한 글리콜에는 분자량이 약 300 내지 900이고 C_1-6알킬기에 기초한 폴리알킬렌 글리콜이 포함된다. 따라서, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 폴리부틸렌 글리콜등 및 이들의 혼합물과 같은 폴리에테르 폴리올류가 사용될 수 있다.

폴리프로필렌 글리콜과 폴리에틸렌 글리콜 (PEG-400)이 바람직하다. 물 15 vol%와 PEG-400 85vol% 또는 프로필렌 글리콜 85vol%와의 혼합물이 매우 바람직하다.

"슈가 용액"이라 함은 약리적으로 허용되는 덱스트로스, 수크로스, 만노스 또는 기타 등장성을 조절해주는 제제들의 용액을 포함한다. 물 중 5% 덱스트로스 ("D5W")는 보조 담체의 매우 바람직한 한예이다.

본 발명의 용액은 수성 및 비수성 농축 RTU의 두가지 형태 모두로 공급될 수 있다. 따라서, 임의적으로 담체(들)을 적당량 사용할 수 있다. 백금 화합물의 유용성 또는 안정화제의 효과에 나쁜 영향을 미치지 않는 기타 담체들을 사용하여 상술한 담체(들)모두 또는 그 일부를 대체할 수 있다.

완충제

본 발명에서 사용된 백금(II) 화합물들은 (1), (2) 또는 (3)의 한가지 이상의 기술을 사용하기 때문에 여간해서는 환원적으로 분해되지 않는다. 그러나, 이들 화합물들의 용액 안정성은 용액의 pH를 최적 범위내에서 유지시키는, 따라서 완충제으로 작용하는 한가지 이상의 pH 조절제를 존재시킴으로써 더욱 개선될 수 있다.

용액의 pH는 일반적으로 약 4 내지 약 7의 범위인 것이 좋다.

카르보플라틴 단독의 주변 pH는 약 6.5이다. CBDCA를 첨가하면 pH가 4 미만으로 되어 허용될 수 없을 정도로 저하된다. 따라서, 염기성 완충제나 pH 조절제를 사용하여 pH를 높이는 것이 필요하다.

일반적으로, 완충제는 그의 양이온 부분이 약리적으로 허용되는 단순한 무기 염기일 것이다. 따라서, 나트륨, 칼륨 및 칼슘의 산화물과 수산화물이 유용하다. 수산화나트륨이 바람직하다.

수산화나트륨이나 기타 완충제의 최적량은 안정 pH 약 4 내지 약 8, 바람직하게는 약 5 내지 약 7, 가장 바람직하게는 약 5.5내지 약 6.5가 될 때까지 CBDCA/백금(II) 화합물 혼합물을 적정함으로써 밝혀진다.

소망되는 용액의 pH에 도달하기 위해서는 염기성 첨가물과 CBDCA 의 두가지 모두가 존재해야 하기 때문에, CBDCA는 "완충제"로서 생각될 수 있을 것이다. 그러나, 본 발명자들의 시스템에 있어서 CBDCA의 일차 기능은 카르보플라틴이나 기타 백금(II) 화합물(들)을 안정화시키는 것이다.

투여

본 발명의 조성물이 일반적으로 사용되는 투여량은 일반적으로 건전한 의학적 소견 및 예컨대, Physician's Desk Reference와 같은 기타 안내 지침에 의해 따른다.

일반적으로, 이 용액은 암 치료를 위해 동물, 바람직하게는 인간에게 투여된다. 대개, 투여량은 약 1 내지 약 200 mg/kg/단위투여의 양으로 투여될 수 있으며, 주기적으로 약 1 내지 약 3회 투여된다.

이 용액은 정맥주사로 투여되기 위해 조정된다. 이들은 즉석사용 농축(RTU) 용액으로서 공급된다. 이 농축물은 주사하기에 앞서 물 또는 기타 적당한 희석제로 약 1 내지 60배 부피로 희석된다.

주사가 바람직한 투여 경로이긴 하지만, 예컨대, 경구투여와 같은 다른 경로도 고려될 수 있다.

보관

백금(II) 항암제의 장기간 안정성은 본 발명의 주요한 목적중 하나이다. 따라서, 이들 화합물의 분해를 조장하는 것으로 알려진 조건들을 피하여야만 한다. 과도한 광선, pH (4 미만) 및 고온이 이러한 세가지 조건이다.

약 60℃ 이하의 온도에서의 본 발명 조성물의 안정성을 이하에 설명한다. 샘플들을 시험한 결과 25℃에서는 수 주일 내지 약 1년까지 안정한 것으로 밝혀졌다.

스트레스가 많이 주어진 용액에서 일어나는 약간의 색상 변화는 대개 심각한 약효 감소나 안정성 또는 효율성 감소를 가리키는 것은 아니다. 그러나, 흐릿한 용액 또는 침전물 입자를 함유하는 용액은 피하는 것이 좋다. 이러한 입자는 정맥 투여를 방해할 수 있다.

실시예

다음 실시예를 들어 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

실시예 1: 1,1-시클로부탄디카르복실산(CBDCA)의 효과

수용액 안정성에 미치는 농도의 영향

카르보플라틴 안정성에 미치는 CBDCA 농도의 영향을 50℃ 내지 60℃에서 평가하였다. ~10mg/mL 카르보플라틴 수용액을 8, 4, 2, 1, 0.5, 0.25, 및 0 mg/mL 농도의 CBDCA를 이용하여 제조하였다.

CBDCA를 함유하는 각 용액의 pH를 NaOH를 이용하여 6.0으로 조절하였다. CBDCA가 없는 각 용액의 pH는 조정하지 않았다. 카르보플라틴의 주변 pH는 ~ 6.1이며 5.5 내지 7.0 사이에서 변화한다.

다음 용액들을 공기로 정화(버블링)시키고 10 mL 일회용 시린지와 Gelman #4192 멸균 0.2㎛ 필터를 이용하여, 세척된 #04515/00 Wheaton 6 mL 바이알로 여과하였다. 각 바이알에 용액 3 밀리리터를 함유시켰으며, 약 50% 공기 상부공간을 남겼다. 모든 테스트 바이알을 Daikyo #759 플루오레신 피복 스토퍼로 마개를 하여 Wheaton 20 mm 알루미늄 클로져로 밀봉하였다.

25℃ 및 40℃에서의 샘플들의 장기간 (8과 1/2개월 및 9개월) 안정성 시험을 수행하였다. 이들 샘플들의 데이타는 다음과 같다:

표 1: 25℃와 40℃에서의 카르보플라틴의 물리적 안정성

표 1A: pH 6에서 카르보플라틴의 10mg/mL수용액의 이화학적 안정성에 미치는 CBDCA의 여러 농도*와 상부공간 가스의 영향

CBDCA 실험 그룹 I: 25℃에서 8개월, 16일: 50% 공기 상부공간

그룹 II, 25℃에서 8개월, 16일: 다양한 상부공간 가스들

표 1B:

pH 6에서의 카르보플라틴 10mg/mL 수용액 ± CBDCA 1mg/mL의 25℃

이화학적 안정성에 미치는 바이알 충전 부피의 영향. 공기 상부공간* (공기 정화 용액)

그룹 III, 25℃에서 9개월, 3일: 여러가지 충전 부피

표 1C:

CBDCA 1mg/mL*를 함유하는 카르보플라틴 10mg/mL 수용액의 이화학적 안정성에 미치는 pH의 영향. 상부공간 공기로 충전x

표 1D:

40℃에서 6개월과 8주일 안정성에 미치는 CBDCA 농도의 영향

여러가지 농도의 시클로부탄디카르복실산 (CBDCA)과 함께 신선한 카르보플라틴을 사용하였다. NaOH를 이용하여 샘플의 pH를 조정하고 공기로 정화하였다. 각 샘플 바이알은 6 ml Type I 유리 바이알 중 카르보플라틴 용액 3.3 ml를 함유하였다. 바이알 상부공간은 공기로 충전시켰다.

표 1E: 제 6개월 40℃ 안정성에 미치는 충전 부피의 영향

각주 I : 시클로부탄디카르복실산(CBDCA) 1mg/ml가 함유된 신선한 10mg/ml용액. pH는 NaOH를 이용하여 6.2로 조정하였다. 모든 샘플은 공기 정화시켰고 표시된 부피까지 충전시켰다.

각주 II: 신선한 10mg/ml 카르보플라틴 용액 (CBDCA 함유하지 않음)

pH는 주변의 값임 (조정하지 않음). 모든 샘플들을 공기 정화시키고 표시된 부피로 충전시켰다.

표 1F: 40℃에서 6개월간 보관시 용액 안정성에 미치는 pH의 영향

신선한 10 mg/ml 카르보플라틴 용액을 시클로부탄디카르복실산(CDDCA) 1 mg/ml과 함께 준비하였다. pH는 각 샘플마다 달랐으며 NaOH를 이용하여 조정하였다. 모든 샘플들을 공기정화시키고 6 ml 타잎 I 유리제 바이알에 충전시켰다. 바이알의 상부공간은 공기로 채웠다. 샘플 번호는 출발 pH를 나타낸다. 모든 샘플에 1mg/ml CBDCA를 사용하였다.

모든 샘플들을 HPLC 분석하여 초기 카르보플라틴 농도를 측정하였다. 표시된 간격에서의 외관(즉, 육안 투명도, 침전물 존재 유무, 색상)과 각 안정 샘플의 pH를 기록하였다. 다음 샘플들을 카르보플라틴에 대해 검색하였다. 다음 초기 값에기초하여, 감 샘플에 있어서의 잔류 카르보플라틴 백분율을 산출하였다.

샘플들을 60℃에서 1, 2, 4 및 8주일간 보관하고 50℃에서 2, 4, 8 및 16주일간 보관하였다. 이들 샘플들에 대한 데이타를 표 3 및 4에 나타내었다.

표 3.

pH 6 50% 공기 상부공간에서의 10 mg/mL 카르보플라틴의 이화학적 안정성에여러가지 농도의 CBDCA*가 미치는 영향

* 1,1-시클로부탄디카르복실산:

6 cc 당 용액 3.3 mL 20 mm 테플론-페이스드 스토퍼가 구비된 타잎 1 유리제 바이알; NaOH로 용액의 pH를 6으로 조정함.

표 4

pH 6, 50% 공기 상부공간에서의 카르보플라틴 10 mg/mL 수용액의 이화학적안정성에 미치는 여러가지 농도의 CBDCA*의 영향

* 1,1-시클로부탄디카르복실산:

6 cc 당 3.3 mL 용액 20 mm 테플론-페이스드 스토퍼가 구비된 타잎 1 유리제 바이알. NaOH로 용액의 pH를 6으로 조정함.

카르보플라틴 10mg/mL 수용액에 CBDCA를 매우 소량으로 첨가하여도 높은 온도에서 용액의 안정성에 긍정적인 영향을 미치는 것으로 나타났다 (pH 약 6, ~50%, 공기 상부공간). 전기 표에 나타난 바와 같이, CBDCA가 첨가되지 않은 용액들은 60℃에서 4 내지 8주 또는 50℃에서 16주 경과후에 그 색상이 호박색 내지 갈색이었다. 갈색의 무정형 침전물이 관찰되었다. 이와 대조적으로, CBDCA가 첨가된 카르보플라틴 용액들은 그 색상이 훨씬 밝았으며 60℃에서 8주 또는 50℃에서 16주 경과한 후에도 침전물이 없었다.

가장 낮은 농도 (0.25mg/mL)로 CBDCA가 첨가된 경우에도 60℃에서 8주 또는 50℃에서 16주 보관하는 동안 육안으로 보일만한 침전물의 형성이 성공적으로 억제되었다.

표 3에 제시된 바와 같이 60℃에서 4 내지 8주일 및 표 4에 제시된 바와 같이 50℃에서 16주일간 보관되는 경우 CBDCA의 농도를 증가시키면 색상 형성의 강도에 점진적인 감소가 초래되었다.

두가지 온도 모두에서, 카르보플라틴의 화학적 안정성은 CBDCA 존재 농도에 의해 영향을 받는 것으로 보이지는 않았다. 표 1에 나타난 바와 같이, CBDCA가 첨가되지 않은 카르보플라틴 용액의 pH는 연구 기간 중 저하되는 경향이 있었다. 그러나, CBDCA를 함유하는 용액의 pH는 매우 안정한 상태로 유지되었다. 이는 CBDCA의 존재가 (NaOH를 이용하여 pH 조정) 완충 효과를 가짐을 시사하는 것이다.

실시예 2: 용액 안정성에 미치는 상부공간 가스 특성의 영향

(용액들은 표시된 가스들로 정화됨)

카르보플라틴 수용액의 안정성에 미치는 질소, 산소 및 공기의 영향을 50℃와 60℃에서 시험하였다. 카르보플라틴 용액을 1mg/mL로 첨가되는 CBDCA 10 mg/mL와 함께 제조하였다. pH를 10N 및 1 N NaoH 를 이용하여 6.0으로 조정하였다. 콘트롤 용액들을 10mg/mL농도로 조제하였다(CBDCA 무함유, 주변 pH ~6.4).

용액 분취액들을 산소, 공기 또는 질소를 이용, 이들 가스들을 용액 내로 1시간 동안 버블링시킴으로써 포화시켰다. 정화된 용액들을 Gelmn #4192 aufrbs 0.2 ㎛ 필터를 이용하여, 세정된 #04515/00 Wheaton 6 mL 바이알 (바이알 당 3mL, 50% 충전 부피)내로 충전시켰다. 충전 후, 남아있는 상부공간을 각각의 정화 가스로 충전시켰다. 바이알들을 즉시 Daikyo #759 플루오레신 피복 스토퍼로 막아 상부공간 가스의 손실 또는 오염을 방지하였다. 다음 모든 바이알들을 Wheaton 20mm 알루미늄 덮개로 밀봉하였다. 샘플들을 60℃에서 1, 2 4, 및 8주일간 보관하고 50℃에서 2, 4, 8, 및 16주일 동안 보관하였다.

이들 샘플들에 대한 데이타를 다음 표 5 및 6에 실었다.

표 5

pH 6, ± 1 mg/mL CBDCA, 60℃에서 카르보플라틴 10mg/mL 수용액의 이화학적안정성에 미치는 상부공간 가스의 영향

* 1, 1-시클로부탄디카르복실산;

6cc 당 3.3mL 용액 20mm #759 테플론-페이스드 스토퍼가 구비된 타잎 I(#45145) 유리제 바이알; NaOH를 이용, 용액의 pH를 6으로 조정함.

표 6

pH 6, ± 1 mg/mL CBDCA*, 50℃에서 카르보플라틴 10mg/mL 수용액의 이화학적 안정성에 미치는 상부공간 가스의 영향

* 1,1-시클로부탄디카르복실산;

6cc 당 3.3mL 용액 20mm #759 테플론-페이스드 스토퍼가 구비된 타잎 I(#4515) 유리제 바이알; NaOH를 이용, 용액의 pH를 6으로 조정함.

표 5와 6은 수용액 중의 카르보플라틴의 이화학적 안정성에 바이알의 상부공간 가스가 커다란 영향을 미침을 강력히 시사하는 것이다. 샘플의 질소 정화에 의해 만들어진 환원산소:카르보플라틴 비율은 60℃에서 1 내지 2주 사이 (표 5), 그리고 50℃에서 4 내지 16주 사이 (표 6)의 침전물의 외관(불용성 분해/전환 생성물)을 결정지었다.

질소로 정화되고 높은 온도에서 보관된, CBDCA를 함유하는 용액에 있어서는 일반적으로 카르보플라틴의 효능 손실이 많았으며 잔류 상등액은 무색이었다 (침전물에 기인함). 이들은 백금 산화물에 특징적인 진한 암흑색 침전물을 함유하였으므로, 백금 산화물을 암시하는 것이다.

CBDCA가 첨가되지 않고 질소 (산소 없이)로 유사하게 정화된 용액들은 대개 ~ 18개월 이상 저온 (즉, 4-30℃)에서 보관된 용액에서 관찰되는 올리고머 혼합물로서 동정된 물질과 유사한 모폴로지를 갖는 미세한 갈색의 무정형 침전물을 나타내었다. 표 4에 나타난 바와같이 CBDCA가 첨가되지 않은채 50℃에서 16주일동안 보관된 질소-정화된 (산소 없이)용액들은 백금 산화물과 금속성 백금의 특성인 흑색 및 은색 침전물을 나타내었다.

50℃와 60℃에서 상부공간이 공기로 충전되어있는 (~50% 바이알 충전 부피, CBDCA 존재 또는 부재) 카르보플라틴 용액은 질소-정화된(산소 없이) 경우보다 침전물 형성이 훨씬 적었으며 따라서 카르보플라틴 효능이 훨씬 높게 유지된 것으로 입증되었다. 또한, 상부 공간이 공기로 충전되고 1 mg/mL CBDCA를 함유하는 카르보플라틴 용액은 CBDCA 농도 효과 측정 실험시 관찰되었듯이 색상에 있어서 동일한 리덕션을 보이고 침전물이 방지되었다.

산소로 정화된 샘플들은 CBDCA가 존재하건 부재하건 간에 관계없이 10 mg/mL 카르보플라틴 수용액의 물리적 안정성에 이로운 영향을 미쳤다. 이것은 표 3과 표4의 데이타에 의해 입증되는데 60℃에서 8주일간 50℃에서 16주일의 보관기간을 통해 어떠한 침전물 형성도 억제되고 미미한 색상 (즉 "담황색")만이 나타났기 때문이다. 카르보플라틴의 효능 유지는 1 mg/mL CBDCA가 존재하건 부재하건, 공기로 정화된 용액과 산소로 정화된 용액의 경우 서로 필적할 만한 것으로 보였다.

실시예 3: 용액 안정성에 미치는 바이알 충전 부피의 효과

카르보플라틴 수용액의 안정성에 미치는 바이알 충전 부피 (즉, 미충전 상부공간)의 효과 역시 50℃와 60℃에서 분석하였다. 카르보플라틴 용액을 10 mg/mL로 조제하였다 (각각 CBDCA 1mg/mL함유). pH를 10N 및 1 N NaOH를 이용하여 6.0으로 조정하였다. 콘트롤 용액을 10 mg/mL으로 조제하였다 (CBDCA 무함유, 주변 pH ∼ 5.7).

모든 용액들을 공기를 이용하여 1시간동안 정화 (버블링)시킴으로써 공기로 포화시켰다. 정화 후, Gelman # 4192 멸균 0.2 ㎛ 필터를 이용하여 용액들을 세정된 #04514/00 Wheaton 10 mL 바이알 (총 용량은 14 mL)에 충전시켰다. 바이알 충전 부피 (즉, 총 액체 부피)는 2, 4, 6, 8, 10 및 12 밀리리터로 하였다. 바이알 내의 나머지 상부공간은 공기로 충전시켰다. 바이알들을 Daikyo #759 플루오레신 피복 스토퍼로 덮고 Wheaton 20 mm 알루미늄 씨일로 밀봉하였다. 샘플들을 60℃에서 1,2, 4, 및 8주; 및 50℃에서 16주 보관시킨 후 분석하였다.

표 7 및 표 8에 데이타를 제시하였다. 장기간 안정한 샘플들을 저온 (4, 25, 40℃)에 놓았다. 초기 및 안정성 샘플들을 이화학적으로 분석하였다.

표 7

pH 6, ± 1 mg/mL CBDCA*, 60℃에서 카르보플라틴 10mg/mL 수용액의 이화학적 안정성에 미치는 바이알 충전부피의 영향 공기 상부공간x (공기 정화된 용액)

CBDCA = 1,1-시클로부탄디카르복실산

* 10cc 중 용액. 20mm 테플론-페이스드 스토퍼가 구비된 타잎 I 유리제 바이알. NaOH를 이용, 용액의 pH를 6으로 조정함.

표 8

pH 6, ± 1 mg/mL CBDCA*, 50℃에서 카르보플라틴 10mg/mL 수용액의 이화학적 안정성에 미치는 바이알 충전부피의 영향. 공기 상부공간x

* 1,1-시클로부탄디카르복실산

x 20mm 테플론-페이스드 스토퍼가 구비된 10cc 타입 I 유리제 바이알 중 용액. pH 는 NaOH를 이용하여 6으로 조정함. 총 바이알 부피는 14mL.

50℃ 및 60℃에서 10 mg/mL 카르보플라틴 수용액 (CBDCA 무첨가, 초기 pH ~5.7) 중에 형성된 침전물의 양은 10 cc 바이알 (실제 최대 충전용량 ~ 14mL)에 충전된 용액의 부피와 직접적으로 연관이 있었다. 충전 부피가 증가 할 수록(따라서 산소:카르보플라틴 비율은 감소), 색상 강도와 침전물의 양은 모두 증가하였다. 이는 카르보플라틴의 안정성이 용존 산소의 양 (비율)과 관련이 있음을 시사하는 것이며 안정성에 미치는 상부공간 가스의 영향을 입증하는 것이다.

표 6의 데이타는 10-12mL 정도로 용액 (CBDCA 무첨가)을 많이 충전시키면 (산소 이용성은 저하됨) 60℃에서 8주일 후 흑색과 은색의 침전물이 형성되면서 (백금 산화물과 금속 백금을 시사함)효능이 크게 저하됨을 보여준다.

50℃ 및 60℃에서 보관된 CBDCA가 첨가되지 않은 카르보플라틴 용액은 모든 충전 부피에서 침전물을 나타내지 않았다 (침전물 형성시기는 조금 빨랐으며 침전물의 양은 온도 또는 충전부피가 증가하면 더 많아진다). 충전부피가 매우 큰 (즉, 10-12mL) 바이알을 제외하고, 50℃ 및 60℃에서 형성된 침전물은 대부분 갈색, 무정형 타잎의 전형적인 올리고머 혼합물이었다. 분해된 많은 샘플에서 구형의 "말타 십자"형 결정들도 소량 관찰되었다.

실시예 4: 용액 안정성에 미치는 pH의 영향(공기 정화된 용액)

10 mg/mL 카르보플라틴 수용액의 안정성에 미치는 pH의 영향을 50℃와 60℃에서 연구하였다. 각 용액에 1 mg/mL 농도의 CBDCA를 첨가하였다. 용액의 pH를 1N 및 10N NaOH를 이용하여 4, 5, 6, 7, 및 8로 조정하였다. CBDCA가 첨가되지 않은 용액에 있어서의 pH의 영향은 시험하지 않았는데 이는 카르보플라틴을 다른 화합물들로 전환시킴이 없이 pH를 조정하는 것이 어렵기 때문이었다(예컨대, 첨가 HCl 이 시스플라틴을 전환시킬 수 있음).

각 용액을 1시간 동안 공기로 버블링시킴으로써 정화한 다음 Gelman #4192 0.2㎛ 멸균 필터를 이용하여, 세정된 #04515/00 Wheaton 6mL 바이알을 통해 여과시켰다. 각 바이알에 카르보플라틴 용액 3 밀리리터 (50% 충전 부피)를 충전시켰다.나머지 바이알의 상부공간은 공기였다.

바이알을 Daikyo # 759 플루오레신 피복 스토퍼로 막고 Wheaton 20 mm 알루미늄 클로져로 밀봉하였다. 샘플들을 60℃에서 1, 2, 4, 및 8 주일 그리고 50℃에서 2, 4, 8 및 16주일간 보관하였다. 이들 샘플들에 대한 데이타를 다음 표 9에 나타내었다.

표 9:

1mg/mL CBDCA를 함유하는 카르보플라틴 10mg/mL 수용액의 이화학적 안정성에미치는 pH의 영향. 공기 상부공간임x

* W=주일(들)

6cc 당 용액 3 mL. 20 mm 테플론-페이스드 스토퍼가 구비된 타잎 I 유리제 바이알, 용액의 pH는 NaOH에 의해 조정함.

CBDCA 1 mg/mL를 함유하는 카르보플라틴 10 mg/mL 수용액 (공기상부공간으로서 ~50% 바이알 충전 부피)의 이화학적 특성에 미치는 pH의 효과를 표 7에 나타내었다. 출발 pH (즉, pH 4-8)와 관계없이, 모든 용액들은 60℃에서 8주일 동안 또는 50℃에서 16주일 동안 맑은 상태로 유지되었고 침전물이 없었으며, 이는 물리적 안정성에 미치는 CBDCA의 긍정적인 효과를 확인해준다.

높은 온도에서 보관된 용액들의 색상은 연구된 것 중 가장 낮은 초기 pH (pH 4)에서 가장 진하였다.

화학적 안정성 (카르보플라틴 효능 유지)은 pH가 4에서 8로 증가함에 따라 약간 감소하는 것으로 나타났다 (50℃에서 16주일 데이타, 60℃에서 8주일 데이타에서 가장 뚜렷). 초기 pH 4-7 용액의 경우, 분해된 샘플들의 pH는 비교적 불변인채 남아있었다 (즉, < 0.5 pH 유닛 변화). 이들 예비연구로부터 얻어진 이화학적 데이타에 기초할때, 조성물 pH 4 내지 7은 전체적인 이화학적 안정성에 가장 적합한 것으로 보여진다.

전체적인 결과

본문에 제시된 데이타는 CBDCA와 공기 또는 산소에 의한 정화 및 용기 상부공간에 공기나 산소를 유지하는 것 (즉, 10 볼륨 % 내지 50 볼륨 % 또는 그 이상)에 의해 만족스런 이화학적 안정성을 갖는 안정한 카르보플라틴 용액을 생산할 수 있음을 증명해준다. 이들의 안정성은 이 용액들이 최소한의 색상을 형성하고 (일반적으로, 맑은 호박색, 황색 또는 녹색) 고체상 침전물은 전혀 또는 조금 생성된다는 사실에 의해서 입증된다.

수산화나트륨에 의한 완충, 또는 pH 유지, 임의로 CBDCA는 유익하다. 카르보플라틴에 대해 5 내지 40%의 CBDCA 농도는 색상과 침전물의 형성을 억제한다.

본 발명이 속한 기술분야의 숙련가들은, 본 발명의 범위를 벗어나지 않고도, 합리적인 변화를 만들어 낼 수 있음을 이해할 것이다.

Claims

(a) 백금 (II) 화합물의 항종양 유효량,

(b) 1,1-시클로부탄디카르복실산 또는 그의 알칼리금속염의 안정화량,

(c) pH를 4 내지 7로 유지하는 데 충분한 pH 조절제, 및

(d) 약리적으로 허용되는 담체

로 이루어진 말로네이토 백금(II) 화합물의 안정한 주사용 조성물.
제 1항에 있어서, pH 조절제가 1,1-시클로부탄디카르복실산의 나트륨염인 것이 특징인 조성물.
제 2항에 있어서, (a)의 양이 1 내지 20 mg/mL인 것이 특징인 조성물.
제 2항에 있어서, (b)의 양이 0.25 내지 4 mg/mL인 것이 특징인 조성물.
제 3항에 있어서, (d)가 물, C_1-6알킬기를 함유하는 폴리알킬렌 글리콜류, 덱스트로스 수용액 및 이들의 혼합물 중에서 선택되는 것이 특징인 조성물.
제 2항에 있어서, (d)가 물인 것이 특징인 조성물.
제 5항에 있어서, (a)가 카르보플라틴인 것이 특징인 조성물.
제 1항에 있어서, 용액 혼합 후 공기 또는 산소로 정화된 것이 특징인 조성물.
(1) 말로네이토 백금 (II) 화합물 용액에 1,1-시클로부탄디카르복실산 또는 그의 알칼리 금속염의 안정화량을 첨가하고,

(2) pH를 4 내지 7로 조정하여 이 pH 범위로 유지하는 것으로 됨을 특징으로 하는 말로네이토 백금 (II) 화합물 용액을 안정화 시키는 방법.
제 9항에 있어서, 1,1-시클로부탄디카르복실산 또는 그의 염의 사용량이 0.25 내지 20 mg/mL인 것이 특징인 방법.
제 9항에 있어서, 산 또는 그의 염의 존재량이 1 내지 20 mg/mL 인 것이 특징인 방법.
제 10항에 있어서, 용액 혼합후 공기 또는 산소로 정화시키는 것이 특징인 방법.
제 11항에 있어서, 상부공간 부피가 50% 이상인 밀봉된 용기에서 최종 용액을 보관하는 것이 특징인 방법.
제 13항에 있어서, 용기를 밀봉하기 전에 상부공간을 공기 또는 산소로 뒤덮는 것이 특징인 방법.
제 11항에 있어서, 부가적인 단계로서, (3) 용액을 공기나 산소로 정화시키는 단계가 추가되는 것이 특징인 방법.
(1) 백금 화합물을 담체에 용해시킨 다음 pH를 4 내지 7로 조정하고,

(2) (1)단계의 생성물을 공기 및 산소 가스 중 어느 하나 또는 모두로 정화시킨 다음,

(3) 정화된 용액을 용기에 옮겨 50 부피% 이상이 액체로 충전되지 않고, 공기나 산소로 포화되도록 하는 단계로 이루어짐을 특징으로 하는 말로네이토 백금 (II) 화합물 용액을 안정화시키는 방법.