KR100219964B1

KR100219964B1 - 방사성 약물의 제제,이들의 투여방법 및 제조방법

Info

Publication number: KR100219964B1
Application number: KR1019910010012A
Authority: KR
Inventors: 자임시몬; 조셉알.갈리크; 알.케이쓰프랭크; 켄네쓰맥밀란
Original assignee: 리챠드 지. 워터맨; 더 다우 케미칼 캄파니
Priority date: 1990-06-18
Filing date: 1991-06-17
Publication date: 1999-09-01
Also published as: PH30975A; AU651112B2; AU665911B2; EG19862A; DE69110554D1; AU6455994A; FI912933A; IL98536A; IL98536A0; GR3017430T3; CS184291A3; PL290717A1; ES2073678T3; JPH04230224A; KR920000334A; NO302510B1; PT97996B; HUT57994A; CA2044812A1; SA92120343B1

Abstract

본 발명은, 리간드와 착화된 적어도 하나의 방사성 핵종을 함유하는 착물 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염의 방사성 약물 제제, 특히¹⁵³사마륨-에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산에 관한 것으로서, 이 제제는 선택적으로 이가 금속 이온, 예를들면 칼슘을 함유하며, 동결 및 해동시킨후 주사에 의해 투여 한다. 달리는, 방사성 약물의 제제는 이가 금속을 함유해야 하며, 투여전의 시간이 리간드의 방사성 분해를 야기시킬 정도로 충분히 긴 경우에만 동결시킨다.

Description

방사성 약물의 제제, 이들의 투여방법 및 제조방법

제 1 도는 5%의 에탄올(EtOH ; +), 0.9%의 벤질알콜(BzOH ; ◇), 동결물(△) 및 대조물(■)의 존재하에 100mCi/mL 의¹⁵³Sm의 비활성(specific activity)을 갖는 EDTMP 의 방사선 분해를 도시하며,

제 2 도는¹⁵³Sm의 다른 비활성에서 억제되지 않은 키트로서의 EDTMP의 방사선 분해를 도시한다 : ■100mCi/ml ; + 50 mCi/ml ; ◇ 30 mCi/ml ; △ 30 mCi/ml.

본 발명은 방사성 약물의 제제, 이들의 투여방법 및 제조방법에 관한 것이다.

방사성 약물의 제제는 다양한 질병, 특히 암에 대한 동물의 치료 및/또는 진단에서의 여러가지 용도를 가지고 있다.

골 전이(bone metastasis) 발생은 암 환자에게 일반적이고 심각한 결과이다. 전이성 골 손상에 의한 통증, 병적 골절, 만성 신경결핍증 및 강박 만성뇌수종은 암환자의 삶의 질을 저하시킨다. 유방암, 폐암 또는 전립선암에 걸린 모든 환자의 거의 50% 가 결국 골 전이가 발생하기 때문에 전이성 질병에 걸린 환자의 수는 많다. 골 전이는 또한 신장암, 갑상선암, 방광암, 경부암 및 기타 종양을 갖는 환자에게서 나타나지만, 통틀어서 이러한 질병은 골 전이를 나타내는 환자의 20% 미만에서 나타난다. 전이성 골육암은 거의 생명에 위협을 주지 않으며 가끔 환자가 골 손상을 발견한 후 수 년을 산다. 초기에, 치료의 목적은 통증을 경감시켜서 마취 투약의 필요량을 감소시키며 외래통원을 증가시키는 것이 주를 이루었다. 몇몇 암은 분명히 치료될 수 있음이 기대된다.

본 발명의 제제에 사용된 방사성 약물은 금속-리간드 착물, 특히 미합중국 특허 제 4,898,724 호에 기재된 바와 같은 사마륨-153-에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산(¹⁵³Sm-EDTMP)시약으로서 제조되어 왔다. 특히 그의 약학적 제제로서¹⁵³Sm-EDTMP 는 골의 통증을 경감시키고, 석회형성의 종야을 치료하는데 사용되어 왔으며, 유용성 및 제조방법은 미합중국 특허 제 4,898,724 호, 캐나다 특허 제 1,243,603 호, 및 공개된 유럽 특허원 제 164,843 호에 제시되어 왔다. 골수 억압에 대한 방사성 약물의 추가의 용도는 미합중국 특허 제 4,853,209 호에 제시되어 있다. 이러한 모든 참고문헌에는 적합한 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 제제로서 본 발명의 방사성 약물, 특히¹⁵³Sm-EDTMP 의 용도가 기재되어 있다.

임의의 방사성 약물을 투여할때 염려되는 것중 하나는 방사성 동위원소의 생체 분포도를 변경시키거나 독성의 부산물을 생성할 수도 있는, 제제중에 존재하는 유기 분자의 방사성 분해능이다. 이러한 결과의 어느것도 바람직하지 않다. 많은 량의 방사능을 필요로 하는 경우, 방사선에 의한 유기 분자(예를들면 EDTMP)의 손상에 대한 잠재성은 증가한다. 이러한 손상은 높은 방사능 조사량을 전달하는 치료용 방사성 핵종(예를들면¹⁵³Sm)을 사용하는 경우 더욱 많이 발생하는 것 같다.

방사선 분해를 방지하기 위해 노력해온 방법중 하나는 유리 라디칼 억제제를 제제에 가하는 것이다. 그러나. 억제제 또는 이들의 분해 생성물은 독성이거나 또는 방사성 약물의 생체 분포를 방해할 수도 있다. 벤질 알콜과 같은 억제제의 용도는 아이케부치(H. Ikebuchi)등의 문헌[Radioisotopes 26(7), 451-7(1977)], 플로(B.J. Floor)등의 문헌[J. Pharm. Sci. 74(2), 197-200(1985), 및 레고(A. Rego)등의 문헌[J. Pharm. Sci. 71(11), 1219-23(1982)]에 기재되어 있다.

(미합중국 특허 제 4898,724 호 및 유럽 공개 공보 제 164,843 호에 제시된 바와 같은)방사성 약물 제제에 대해 또 달리 염려되는 것은 금속의 양과 비교할때 과몰량의 리간드(예를들면 EDTMP)를 사용할 수도 있다는 것이다. 따라서 다량의 금속 이온(예를들면 Sm⁺³)을 주사한 경우, 보다 많은량의 유리 킬레이트화제(예를들면 EDTMP)도 또한 주사한다. 존재하는 과량의 리간드는 혈류내에 금속 이온을 착화시킬 수도 있으며, 이는 환자에게 합병증을 유발시킬 수도 있다. 따라서 최소량의 유리 킬레이트화제를 함유하는 제제가 바람직하다.

방사성 약물을 투여할때 또다른 염려는 주사 형태이다. 전형적으로, 이러한 모든 방사성 약물은 정맥(I.V.) 주사에 의해 투여한다. 환자는 정맥 주사로 인해 불편을 느낄 수 있으며, 때로는 환자의 이용가능한 적합한 정맥을 찾는 것이 어렵다.

결과적으로, 사용하기 전에 최소의 방사선 분해를 가지며, 여러가지 경로에 의해 주사할 수 있고, 과량의 유리(또는 비착화) 리간드의 사용을 피할 수 있는 방사성 약물의 제제가 이롭다.

놀랍게도, 방사성 약물, 특히¹⁵³Sm-EDTMP 의 투여를 위해 개선된 제제는 방사성 약물의 효능을 변경시키지 않고 EDTMP 의 방사성 분해를 감소시킨다고 밝혀져 왔다. 본 발명의 제제에 사용하기에 적합한 방사성 약물은 리간드와 착화된 하나 이상의 방사성 핵종을 함유한 착물 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 포함한다.

적합한 방사성 핵종의 실례는 사마륨-153(¹⁵³Sm), 홀뮴-166(¹⁵⁵Ho), 이테르븀-175(¹⁷⁵Yb), 루테튬-177(¹⁷⁷Lu), 이트륨-90(⁹⁰Y) 또는 가돌리늄-159(¹⁵⁹Gd)이다. 특히 바람직한 방사성 핵종은¹⁵³Sm 및¹⁶⁶Ho 이고,¹⁵³Sm이 가장 바람직하다.

적합한 리간드이 실례는 에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산( EDTMP), 디에틸렌트리아민펜타메틸렌포스폰산(DTPMP), 하이드록시에틸에틸렌디아민트리메틸렌포스폰산(HEEDTMP), 니트릴로트리메틸렌포스폰산(NTMP), 트리스(2-아미노에틸)아민 헥사메틸렌포스폰산(TTHMP), 1-카복시에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산(CEDTMP), 비스(아미노에틸피페라진)테트라메틸렌포스폰산(AEPTMP) 및 1,4,7,10-테트라아자사이클로도데칸 테트라메틸렌포스폰산(DOTMP), 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염이다. 특히 바람직한 리간드는 EDTMP, DTPMP, HEEDTMP, TTHMP, AEPTMP, CEDTMP 및 DOTMP 이며, EDTMP 가 특히 바람직하다. 본 발명에서 사용하기에 특히 바람직한 방사성 약물은¹⁵³Sm-EDTMP 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염이다.

본 발명의 제제는 또한 방사성 약물의 착물 형성을 방해하지 않는 리간드의 몰달 0.25 내지 5 몰의 이가 금속 이온을 함유할 수 있다. 방사성 핵종을 가하기전에 이가 금속 이온을 가하는 경우, 제제는 방사성 핵종을 가할때 까지는 동경을 필요로 하지 않으며, 방사성 약물 제제를 제조한후 상상한 시간이 경과한 후에 이 제제를 사용하는 경우에만 동결을 필요로 한다.

또한, 정맥(I.V.) 주사는 본 발명의 방사성 약물 제제를 사용한 경우 방사성 핵종의 목적하는 생체 분포도를 수득하는데 필요하지 않다고 밝혀졌다. 원하거나 또는 필요한 경우, 복강낸(I.P.), 피하(S.C.) 또는 근육내(I.M.) 주사는 유사한 생체 분포도를 제공한다.

이가 금속을 함유한 본 발명의 방사성 약물 제제는 포유동물의 혈류내로 주입되는 유리(또는 비착화) 리간드(예를들면 EDTMP)의 존재를 최소화한다. 이러한 이가 금속-리간드 착물은 리간드에 의해 혈액내의 다른 금속(예를들면 칼슘)의 킬레이트화를 감소시킨다. 따라서, 과량의 리간드의 유해한 효과가 감소된다. 그러나, 이가 금속은 방사성 약물의 착물(예를들면¹⁵³Sm-EDTMP)의 형성을 방해해서는 안된다. 적합한 이가 금속은 Fe⁺²이며, Mn⁺², 및 알칼리 토금속, 예를 들면 Mg⁺², Ca⁺², Sr⁺²및 Ba⁺²이며, Ca⁺²가 가장 바람직하다. 리간드의 몰당 0.25 내지 5 몰, 특히 0.5 내지 3 몰, 바람직하게는 0.5 내지 1몰, 더욱 바람직하게는 0.75 내지 1몰, 가장 바람직하게는 0.9 내지 1몰의 이가 금속이 존재하도록 방사성 약물의 제제를 제조한다.

이러한 이가 금속 방사성 약물 제제를 제조하는 방법은 여러가지 있다. 이 방법중의 하나(방법 A)는 방사성 금속-리간드 착물에 가해진 이가 금속 제제를 제조하는 것이다. 방사성 금속-리간드 착물은 임의의 동결시킬 수도 있으며, 이어서 해동시켜 이가 금속을 가하며, 경우에 따라 재동결시켜 사용하기 전에 해동시킨다. 제 2 방법(방법 B)은 이가 금속을 방사성 금속 이온 용액에 가하는 것이다. 리간드를 가하여 착물을 형성시킨 후, 경우에 따라 이 제제를 동결시킨다. 방사선 분해는 리간드를 가할 때까지 일어나지 않기 때문에, 사용하기 전에 시간이 경과하여 동결시키는 것이 바람직할 때에만 동결시킨다. 제 3 방법은 동결시킬 수도 있고 사용시 해동시킬 수도 있는 방사성 약물을 거의 동시에 환자에게 2 개의 별도의 정맥 주사를 통해 이가 금속 이온 용액, 예를들면 칼슘 글루코네이트와 함께 공동 투여하는 것이다. 제 4 방법, 즉 바람직한 방법(방법 D)은 염화물로서 또는 더욱 바람직하게 수산화물로서 이가 금속을 리간드에 가한 후, 예를들면 수산화나트륨(NaOH)을 가하므로써 pH를 조정하고, 임의로 용액을 동결-건조시켜 이가 금속-리간드 동결건조된 제제(키트)를 형성시키는 것이다. 방사성 금속 이온의 산성 용액을 키트를 재구성시키는데 사용하여 목적하는 pH에서 사용하기 적합한 방사성 약물 제제를 생성시킨다. 방사성 약물 제제를 형성시키는 임의의 방법에서 관심사 중의 하나는 사용한 방사성 핵종의 반감기이다(예를들면,¹⁵³Sm t1/2 = 약 46 시간). 또다른 관심사는 방사성 핵종이 리간드와 함께 용액이 되는 시간이다. 활성량, 및 방사성 핵종이 리간드와 용액이 되는 시간을 방사성 약물 제제를 동결시키는 바람직함의 정도를 결정할 것이다.

바람직한 태양(방법 D)에서 리간드의 당량 당 약 1 당량의 이가 금속의 리간드 제제를 함유한 키트를 제조한다. 또한, 방서성 핵종의 용애과 함께 재구성될때 방사성 금속 이온과 함께 정량적 착물을 형성하며 pH 7 내지 8.5 를 갖는 이가 금속-리간드 용액이 동결-건조된다. 이가 금속 제제는 일반적으로 많은 투여량의 리간드, 특히 골수 제거에 사용되는 방사성 핵종을 보다 다량으로 사용할때 특히 바람직하다.

따라서, EDTMP와 같은 리간드를 함유하며, 선택적으로 이가 금속이 존재하는 키트는, 적합한 농도의 HCl(바람직하게 약 0.001 내지 1N HCl, 또는 더욱 바람직하게 0.01 내지 0.1N HCl)중의 예정된 양의 방사성 핵종 용액을 가하여 정량적 수율의 방사성 핵종-리간드 착물, 예를들면, Sm-ECTMP 가 생성되고 pH 7 내지 8.5가 되도록 하는 방식으로 동결-건조시키는 것이 바람직하다. 방사성 약물 제제¹⁵³Sm-ECTMP의 경우, EDTMP 의 경우, ECTMP의 바람직한 농도는 35mg/mL 이고, 바람직한 Sm 농도는 3x10^-4M 이다.(즉, 약 278 : 1 의 EDTMP : Sm).

이가 금속이 존재하거나 또는 존재하지 않은 본 발명의 방사성 약물 제제, 특히153Sm-EDTMP 제제는 리간드의 방사선 분해를 최소화하기 위해 동결시킨 후, 사용하기 전에 해동시킬 수 있다. 동결은 생성물의 멸균상태를 유지시키는 임의의 편리한 수단(예를들면 액상 질소 또는 드라이아이스)에 의해 행할 수 있으며, 이어서 제제를 사용하고자 하는 경우 해동시킬 수 있다.

본 발명의 제제의 투여 경로는 I.V.,IP.,S.C. 또는 I.M. 중에서 선택할 수도 있다. 생체분포의 결과는 모든 주사경로에 의한 본 발명의 방사성 약물 제제의 경우 비스하다.

방사성 약물, 특히¹⁵³Sm-EDTMP의 개선된 제조방법은 방사성 약물의 효능을 변경시키지 않고 리간드의 방사선 분해를 감소시킨다고 밝혀졌다. 본 발명의 제제에 사용하기 적합한 방사성 약물은 리간드 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과 착화된 하나 이상의 방사성 핵종을 함유하는 착물을 포함한다.

적합한 방사성 핵종의 실례른 사마륨-153(¹⁵³-Sm), 홀뮴-166(¹⁶⁶Ho), 이테르븀-175(¹⁷⁵Yb), 루테튬-177(¹⁷⁷Lu), 이트륨-90(⁹⁰Y) 또는 가돌리늄-159(¹⁵⁹Gd)이다. 특히

바람직한 방사성 핵종은¹⁵³Sm 및¹⁶⁶Ho 이고¹⁵³Sm이 가장 바람직하다.

적합한 리간드의 실례는 에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산(EDTMP), 디에틸렌트리아민펜타메틸렌포스폰산(DTPMP), 하이도록시에틸에틸렌디아민트리메틸렌포스폰산(HEEDTMP), 니트릴로트리메틸렌포스폰산(NTMP), 트리스(2-아미노에틸)아민헥사메틸렌포스폰산(TTHMP), 1-카복시에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산(CEDTMP), 비스(아미노에틸피페라진)테트라메틸렌포스폰산(AEPTMP), 1,4,7,10-테트라아자사이클로도데칸 테트라메틸렌포스폰산(DOTMP), 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염이다. 특히 바람직한 리간드는 EDTMP, DTPMP, HEEDTMP, TTHMP, AEPTMP, CEDTMP 및 DOTMP 이며, EDTMP 가 특히 바람직하다. 본 발명에서 사용하기에 특히 바람직한 방사성 약물은¹⁵³Sm과 EDTMP 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염의 착물이다. 적합한 생리학적으로 허용가능한 염은 미합중국 특허 제 4,898,724 호에 정의되어 있으며, 이 염에는, 사용한 리간드의 하나 이상의 산 그룹과의 염을 포함하며, 우수한 약물학적 수행과 일치하는 투여량을 동물에 투여할때 생리학적으로 유해한 심각한 작용을 일으키지 않는, 이들 염기의 산 부가염이 포함된다. 적합한 염기에는 예를들면 알칼리 금속 및 알칼리 토금속 수산화물, 탄산염, 및 중탄산염(예를들면 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘, 탄산칼륨, 중탄산나트륨, 탄산마그네슘, 암모니아, 1급 아민, 2급 아민 및 3급 아민)이 포함된다. 이러한 생리학적으로 허용가능한 염은 산을 적합한 염기와 접촉시키므로써 제조할 수도 있다.

정의

Sm = 모든 방사성 및 비방사성 동위원소 사마륨(본 발명의 다른 방사성 핵종과 유사함.)

¹⁵³Sm = 원자량 153 을 갖는 사마륨의 방사성 동위원소(본 발명의 다른 방사성 핵종과 유사함.)

EDTMP = 에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산.

¹⁵³Sm-EDTMP = 용액의 착물인¹⁵³사마륨- 에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산 ; 사마륨의 모든 방사성 및 비방사성 동위 원소를 포함한다.

스파이크(spike) = 0.5 내지 1 picoCi 의¹⁵³SmCl₃또는¹⁶⁶HoCl3 용액을 추적자(tracer)로서 첨가한다.

방사성 약물 = 진단 및/또는 치료를 위한 방사성 약물, 보통 수용액중의 유기 리간드(예를들면 EDTMP)에 부착된 방사성 금속 이온(예를들면¹⁵³Sm)을 포함한 용액.

키트 = 선택적으로 이가 금속 이온을 함유하는 고형의 리간드 제제를 포함하는 바이알(방사성 금속-리간드 착물을 형성시킬 목적으로 방사성 금속 이온의 용액을 가한다).

X-mL 키트 = 방사성 핵종-리간드 착물을 형성시킬 목적으로 X-mL의 방사성 금속 이온 용액을 수용하도록 설계된 키트.

재구성(reconstitute) = 방사성 핵종-리간드 착물을 형성시킬 목적으로 산성의 방사성 핵종 용액을 키트에 가함.

TBA = 테트라부틸암모늄 하이드록사이드

BzOH = 벤질 알콜

EtOH = 에탄올

% = 퍼센트

HCl = 염산

NaOH = 수산화나트륨

I.V. = 정맥 주사

I.P. = 복강내 주사

I.M. = 근육내 주사

S.C. = 피하 주사

MDP = 메틸렌디포스포네이트

일반실험

양이온 교환 크로마토그라피 분리법은 착물의 수율을 측정하기 위해 사용한다. 이 방법은 미합중국 특허 제 4,898,724 호에 기재되어 있다.

HPLC=고성는 액체 크로마토그라피;

사용한 컬럼은 Hamilton^TMPRP-1 역상이고, 용출액은 0.1M의 아세트산 나트륨 및 0.005M 의 TBA 이다. 유속은 1mL/분이고; 검출은 일렬로 연결된 방사선 검출기와 U.V. 검출기(240nm)를 사용한다.

EDTMP 는 미합중국 특허 제 4,937,333 호 및 유럽 공개 공보 제 411,941 호에 기재된 방법에 의해 약물로서 사용하기에 적합한 정체 형태로 제조한다.

¹⁵³Sm은 미주리주 콜롬비아 소재의 미주리 대학에 있는 연구용 원자로에서 스득한다.

Barnstead NANOpure^TM물은 증류수로서 사용한다.

Ca(oh)₂는 MCB 또는 Aldrich 사로부터 구입한 95% 순도의 이수화물로서 사용한다.

달리 언급하지 않는 한 모든 시약은 표준 시약으로 구입하여 그대로 사용한다.

본 발명은, 본 발명을 단지 예지하고자 하는 하기 실시예를 참조하므로써 더 명백해질 것이다.

(실시예 1 : 방법 A, 칼슘을 첨가하지 않음)

Sm 의 농도가 3x10^-4M 인 3 mL 의 8x10^-2M EDTMP 용액을 제조한다.¹⁵³Sm의 비활성(specific activity)은 mL 당 100 mCi 이다. 3 개의 200㎕ 분취량(샘플, I, II 및 III)을 플라스틱 바이알에 놓고, 드라이 아이스-아세톤 욕을 사용하여 동결시킨다. 플라스틱 바이알을 동결기내에 유지시킨다. 또다른 500㎕의 분취량을 유리 바이알에 놓고, 4.3㎕의 벤질 알콜을 가하여 0.9%(중량/부피)의 용액(샘플 A)을 제조한다. 또다른 500㎕의 분취량을 유리 바이알에 놓고, 31.8㎕의 에탄올을 가하여 5%(중량/부피)의 용액(샘플 B)을 제조한다.

용액들을 HPLC 에 의해 분석하여, 분해능은 시간의 함수로서 모니터한다. 분해는 방사성 측정 크로마토그람중에 Sm-EDTMP 피크가 나타나지 않으므로써 증명된다. 이러한 조사를 위해, 하나의 동결 플라스틱 바이알을 주위온도에서 해동 시킨후 일부를 분석한다. 이 용액을 2 내지 4 시간동안 동결시키자 않고 정체시킨후 용액을 반복하여 분석한다. 나머지 2 개의 플라스틱 바이알은 유사한 방식으로 보다 큰 시간 간격을 두고 데이터를 얻기 위해 사용한다.

결과는, 동결된 샘플의 경우 60 시간에 걸쳐 목적하는 생성물에 상응하는 방사선 측정 피크 하나만을 나타낸다. 대조용 샘플(억제되진 않은 샘플), 및 벤질 알콜과 에탄올 샘플 둘다 여러가지 방사선 측정 피크를 나타낸다. 시간의 함수로서 목적하는 생성물에 상응하지 않는, 재구성물로부터의 방사율(percent radiation) 은 표 1에 나타나 있다.

[표 1]

A = 0.9% BzOH, 비교물

B = 5% EtOH, 비교물

I = 동결시칸후 8.25 시간째에 해동시켜 분석하고, 10.9 시간째까지 해동시킨 채로 방치하여 다시 분석한다.

II = 동결시키고, 21 시간째에 해동시키며, 22.6 시간 및 27 시간째에 분석한다.

III = 동결시키고, 48.2 시간째에 해동시키며, 분석하고, 재동결시킨후, 70.5 시간째에 다시 해동시켜 분석한다.

샘플 A 와 B 는 본 발명에 속하지 않으며 ; 샘플 I, II, III 은 본 발명에 속한다. 결과는 또한 제 1 도에 나타나 있다.

(실시예 A(비교물 : 대조물))

샘플들은,¹⁵³Sm 의 비활성이 30, 30, 및 50 mCi/mL (각각 샘플 D,D, 및 E) 이라는 것만을 제외하고, 실시예 1에 기재된 공정에 의해 제조한다. 결과는 표 A 에 제시되어 있다.

실시예 1 에서 제조한 대조물(100 mCi/mL)과 함께 이러한 결과들은 제 2도에 그래프로 나타나 있다. 이 그래프는 방사선 분해 속도가 방사성 핵종의 비활성과 비례함을 예시한다.

[표 A]

(실시예 2 : 방법 A, 칼슘을 첨가하지 않음)

27 mCi/mL의¹⁵³Sm 을 함유한다는 것을 제외하고, 2개의 용액을 실시예 1에 기재된 바와 같이 제조하고, 실시예 1과 동일한 방식으로 동결시킨다. 샘플을 드라이 아이스 분말이 채워진 용기내에 저장한다. 용액을 해동시킨후 샘플을 취하고, 이어서 용액을 재동결시킨다. 실시예 1의 HPLC 공정을 이용하여 샘플을 분석한다. 70 시간동안 동결된 후에 목적하는 생성물에 상응하는 방사선 측정 피크 이외의 다른 피크가 전혀 검출되지 않는다.

(실시예 3 : 방법 A)

70 mg/mL 의 EDTMP 용액 3 mL 를 피펫으로 비이커에 옮긴다. 이 용액의 pH를 50%(중량/중량)의 NaOH를 사용하여 약 10.26으로 맞춘다. 이 용액을 혈청 바이알내에 놓은 후, 물을 진공 오븐에서 제거한다. 이러한 바이알을 3 개 제조한다(EDTMP키트)

상기 공정에 의해 제조한 6.0mL 의 EDTMP 키트 3개를 0.1N HCl 중의 3x10^-4M HoCl₃로 재구성시킨다. 각각의 키트를 150㎕의 166 Ho 로 스파이크한다. 착물 용액의 pH 를 각각의 샘플에 대해 측정한 결과 7.6 내지 7.7 로 밝혀졌다. 하나의 샘플(샘플 IV)에 CaCl₂를 가하여 Ca:EDTMP 의 몰비가 1:1 이 되도록 한다. 또다른 샘플(샘플V)에 CaCl₂를 가하여 Ca:EDTMP 의 몰비가 2:1 이 되도록 한다. 3번째 샘플(CaCl₂를 가하지 않음)은 대조물이다.CaCl₂를 가할때 샘플 IV 는 pH 7.06 을 가지고 있으며, 이어서 50%(중량/중량)의 NaOH 를 사용하여 pH 7.5 로 맞춘다. CaCl₂를 가할때 샘플V 는 pH 6.6 을 가지고 있으며, 이어서 50%(중량/중량)의 NaOH 를 사용하여 pH 7.5 로 맞춘다. 착화율(percent complexation)은 3개의 샘플 모두에 대해 99%로 밝혀졌다.

3 마리의 Sprague-Dawley 래트 그룹 3개에 100㎕의 대조물, 샘플 IV 및 샘플 V 를 각각 정맥 주사한다. 2시간후에 생체분포도를 측정하고, 그 결과를 표 2에 나타낸다.

[표 2]

a 대퇴골중의 뼈(%) X 25에 의해 유도됨

b 체중의 43%로서 측정함

c 체중의 6.5%에서 측정함

d 래트 3 마리의 평균임

상기 데이타는 생체분포도가 3 개의 샘플 모두에 대해 유사함을 나타낸다.

(실시예 4 : 방법 D)

Ca-함유-키느(Ca-키트) (1:1 몰의 Ca:EDTMP)는 pH 1.97 에서 하기 시약을 교반하므로써 제조한다 :

[표 3]

pH는 0.1N NaOH 를 사용하여 조정한다. pH 1.97에서 용액을 등명한다. pH 2.8 내지 3 에서 용액을 흐리다. pH 약 5.8에서 용액을 등명한다. pH 약 10.5에서 용액을 등명한다.

Ca-키트의 바람직한 제조방법은 고형의 Ca(OH)₂및 EDTMP 를 칭량하여 비이커에 놓고 ; 물을 가한후 등명해질 때까지 교반하며 ; pH 6 이상으로 맞춘다.

pH 를 9.2로 조정한 후 동결-건조시켜 키트 형태의 목적하는 제제를 수들한다. Sm 용액을 키트에 가하여¹⁵³Sm-EDTMP 착물을 제조한 후 주사할 수 있다.

실시예 5 : 방법 D

¹⁵³Sm-EDTMP 제제는 실시예 4 로부터 수득한 3mL 의 Ca-키트(1:1 몰의 Ca:EDTMP)를 재구성하므로써 제조한다. 키트는¹⁵³Sm 으로 스파이크시키고 pH 7.8 에 맞춘 0.1N HCl 용액중의 3x10^-4M Sm (샘플VI)을 사용하여 재구성시킨다.¹⁵³Sm-EDTMP 제제(2:1의 Ca:EDTMP)는 실시예 4 의 공정을 변형시켜 제조한다. 키트는,¹⁵³Sm 으로 스파이크시키고 H 7.2 에 맞춘 0.1N HCl 용액중의 3x10^-4M Sm샘플VII)을 사용하여 재구성시킨다. 또한 Ca 이 없는 대조물로서 6 mL 의 키트는,¹⁵³Sm 으로 스파이크시키고 pH 7.5에 맞춘 0.1N HCl 용액중의 3x10^-4M Sm 6.0mL로 재구성시킨다. 착물로서의 Sm (모든 Sm 동위원소)의 %는 양이온 교환 크로마토그라피에 의해 99% 으로 측정되었다.

3마리의 Sprague-Dawley 래트에 100㎕의¹⁵³Sm-EDTMP 용액을 정맥주사 한다. 래트들은 주사후 2 시간째 죽었다. 여러가지 조직중의 활성의 양은 조직중의 갯수(NaI 감마선 계산기를 사용하여 측정함)와 100㎕ 부피의 표준 모액중의 갯수를 비교하므로써 측정하며, 표 4 에 결과가 나와 있다 :

[표 4]

a 대퇴골중의 뼈(%) X 25에 의해 유도됨

b 체중의 43%로서 측정함

c 체중의 6.5%에서 측정함

d 래트 3 마리의 평균임

(실시예 6 : 방법 D)

실시예 4 에서 제조한 바와 같이, 3 mL 의 Ca-키트는 0,1N HCl 중의 3x10^-4M SmCl₃3.0mL 로 재구성시킨다. 이 용액의 2 mL 를 colorpHast^TMpH 스트립에 의해 pH 에 대해 검사하여 7.0 내지 8.0으로 밝혀졌다. 이 용액을 추적자로서 1 내지 2㎕ 의 153 Sm 요액으로 스파이크시킨다. 유사한 방식으로, Na 를 갖는 대조용 키트(Ca는 없고, 실시예 3 에서와 같이 제조함)를 재구성시킨다. 또한 48.3 mCi/mL 의¹⁵³Sm을 함유하도록 재구성된 Ca-키트를 드라이 아이스에서 동결시킨다. 21 일후에 동결된 제제를 해동시켜 사용한다.

5 마리의 Sprague-Dawley 래트에 100㎕의 대조물 제제 용액을 정맥 주사하고, 5 마리의 Sprague-Dawley 래트에 21 일전에 제조되어 새롭게 해동시킨 Ca-키트 제제 100㎕를 주사하고, 4 마리의 Sprague-Dawley 래트에 100㎕의 Ca-키느 제제(추적자¹⁵³Sm 을 함유함) 용액을 주사한다.

래트들은 주사후 2시간째에 죽었다. 여러가지 조직에서 활성의 양은 조직중의 갯수(NaI 감마선 계산기를 사용하여 측정함)와 100㎕ 부피의 모액중으 갯수를 비교하므로써 측정한다. 여러가지 조직중이 투여량은 하기 표 5 에 나타나 있다.

[표 5]

a 대퇴골중의 뼈(%) X 25에 의해 유도됨

b 체중의 43% 로서 측정함

c 체중의 6.5% 에서 측정함

d 래트 5 마리의 평균임

e 래트 4 마리의 평균임

(실시예7 : 방법 D)

자석 교반기를 포함한 600mL 들이 비이커에 EDTMP 18.210g, Ca(OH)₂2.678g(36.140 mmol), 및 물 400mL를 가한다. 혼합물을 실온에서 1 시간동안 교반하고, 대부분의 고형물을 용해시킨다. pH는 50% 의 NaOH 용액을 사용하여 서서히 상승시키고, 계속 교반하여 모든 고형물을 용해시킨다. 혼합물이 일단 균질하게 되면, pH는 50% 의 NaOH 용액을 사용하여 9.2 까지 서서히 상승시킨다. (용액은 pH 3.6 에서 흐려지며, pH 5.8 에서 다시 균질하게 된다.) 용액을 500mL의 부피 플라스크로 옮기고, 물을 가하여 500mL 가 되게 하며; pH는 9.17 이다. 용액을 이어서 0.45μ의 필터에 여과시키고, 다수의 3, 6 및 18mL의 키트에 분배 시킨다. 키트들은 드라이아이스-아세톤 욕을 사용하여 동결시킨후 동결-건조기에 놓는다. 4일 후에 키트를 제거하고, 시일시키며, 진공시키고, 라벨시켜 저정한다.

대조물(Na) 키트와 함께 상기로부터 수득한 3mL 의 Ca-키트는 미량(1 내지 2㎕)의¹⁵³Sm으로 스파이크시킨 0.1M HCl 중의 3x10-14M의 Sm 3mL 를 사용하여 각각 재구성시킨다. 착화율은 양이온 교환 크로마토그라피에 의해 각각 99% 으로 측정되었다. 상기 모두의 pH 는 7 내지 8 이다. 각각의 키트로부터 수득한 3개의 100㎕ 분취량은 표준물로서 사용한다.

5 마리의 Sprague-Dawley 래트(150 내지 200g)에 100㎕의 재구성된 Ca-키트를 정맥주사하고, 4 마리의 Sprague-Dawley 래트에 100㎕의 재구성된 대조물 키트를 주사한다. 2 시간후에 래트는 희생되며, 조직의 샘플을 취한다. 조직의 샘플은 표준물과 함께 갯수를 세며, 생체분포도를측정한다. 결과는 표 6 에 나와 있다.

[표 6]

a 래트 5 마리의 균

b 래트 4 마리의 평균

c 우리(cage)내의 페이퍼에서 측정함

2개의 제제는 같은 생체분포도를 나타내었다.

실시예 8 및 비교 실시예 B : 방법 D

Ca-키트 제제를 Na-키트 제제와 비교하는 경우 (이들 제제 둘다는 신속한 정맥주사에 의해 Sprague-Dawley 래트에 투여함), Ca-키트보다 3.5 배 큰 LD₅₀을 갖는다. 상기 키트는 둘다 실시예 5 의 공정에 의해 제조한다. 키트의 생체분포도 결과는 유사하다. 증가된 LD₅₀때문에, Ca-키트는 증가된 안전계수를 제공한다.

(실시예 9 : 방법 D)

¹⁵³Sm-EDTMP 제제는 실시예 3 의 공정에 의해 제조한 3mL의 키트를 재구성하므로써 제조한다. 키트는 0.1M HCl 중의¹⁵³Sm 용액 3mL 를 가하므로써 재구성시킨다. 재구성된 키트는 3x10^-4M의 Sm 및 35mg/mL 의 EDTMP를 함유한다.

착물로서의 Sm 의 %는 양이온 교환 크로마토그라피에 의해 99% 으로 측정되었다. 2마리의 Sprague-Dawley 래트의 오른쪽 대퇴부에 근육내 주사하고, 다른 2 마리의 래트의 목부위에 있는 쇄골에 피하주사한다. 각각의 래트에 100㎕의¹⁵³Sm-EDTMP 용액을 투여한다.

래트들은 주사후 2 시간째에 죽었다. 여러가지 조직에서 활성의 양은 조직 중의 갯수(NAI 감마선 계산기를 사용하여 측정함)와 100㎕ 부피의 표준 모액중의 갯수를 비교하므로써 측정한다. 여러가지 조직중의 투여량은 하기 표 7에 나타나 있으며, 유사하게 정맥주사 투여량과 비교한다.

[표 7]

a 대퇴골중의 뼈(%) X 25 에 의해 유도됨

b 체중의 43% 로서 측정함

c 체중의 6.5% 에서 측정함

d 래트 2 마리의 평균임

표 7 의 결과는 생체분포도가 투여 방식과 무관하게 유사하다고 나타내었다.

(실시예 10)

실시예 4 의 공정에 의해 제조한 5 개의 3mL EDTMP 키트를 표 8 에 나타난 용액으로 재구성시키고, pH를 측정한다.

[표 8]

3x10^-4M의 총 Sm 농도 및 약 1mCi/mL 의¹⁵³Sm 을 함유하는, 용액은 각각의 샘플에 대해 상기 표에 기재된 Ca 함량을 가지며, 착물 수율은 각각의 샘플에 대해 99% 로 측정되었다.

표 8 에 기재된 Ca 함유 산 용액은, 최종 pH 에서 재구성시키는데 사용한 용액의 부피의 효과를 연구하기 위해 3.0mL 의 DETMP 키트를 적정하는데 사용한다. 각각 2 mL 의 용액을 각각의 키트에 가하여 pH 를 측정한다. 또다른 2.0mL 의 용액을 200㎕의 분취량에 가한후 pH를 측정한다. 그 결과는, 모든 용액의 경우 pH 7.0 이하로 떨어뜨리지 않고 3.6mL 이하를 3.0 mL의 키트에 가할 수 있음을 나타낸다.

재구성된 키트의 삼투압몰 농도에 대한 첨가한 Ca 의 효과를 측정한다. 표 8 의 용액들은 3.0 mL 의 EDTMP 키트를 재구성하는데 사용한다. 재구성한 다음, 용액 pH 를 측정하고, 삼투압몰 농도는 응결점 저하에 의해 측정한다. 결과는 표 9 에 나타나 있다.

[표 9]

표 9 의 데이타는 제형화된 키트가 고장성(高張性)이며, 키트를 재구성하는데 사용한 방사성 핵종 용액에 Ca 를 첨가하면 고장성이 약간 증가함을 나타낸다. 약제 투여의 경로에 대한 제제의 영향을 연구하는데 있어서, 정맥 주사 용액을 사용할때 등장도(isotonicity)는 혈액내에서 희석되거나 조정되도록 충분히 서서히 투여하는 한은 그다지 중요하지 않음이 공지되었다(예를들면, 델루카(P.P DeLuca) 및 보일란( J.C. Boylan)의 논문[Formulation of Small Volume Parenterals in Pharmaceutical Dosage Forms, Parenteral Medications Vol. 1, pg. 140, eds. K.E. Avis. L. Lachman, and H.A, Lieberman, pub. Marcel Dekker Inc., N.Y.(1984)]를 참조하시오.)

(실시예 11 : 방법 D)

비글종( Beagle) 개에 정맥주사한 직후에 즉시 심장 박동수 및 맥박, 및 혈청의 칼슘 양에 대한¹⁵³Sm-EDTMP 및¹⁵³Sm-(Ca/Na)-EDTMP의 민감한 효과를 시험하기 위해 하기 실험을 수행한다. 주사 속도의 효과도 또한 측정한다.

¹⁵³Sm-Na-EDTMP, 즉 샘플 VIII 은 동결건조되고 멸균된 EDTMP 630mg 및 NaOH 414mg 으로부터 제조한 후 0.1N HCl 중의 멸균된 Sm-3x10^-4M 로 재구성시킨다.¹⁵³

Sm-(Ca/Na)-EDTMP, 즉 샘플 IX 는 동결건조되고 멸균된 EDTMP 630mg, NaOH 245mg 및 Ca(OH)₂95mg 으로부터 제조한 후 0.01M HCl 중의 멸균된 Sm 3x10^-4M 로 재구성시킨다.

주사에 사용한 각각의 착물은 18.0mL 의 Sm 용액을 각각의 동결건조된 EDTMP 제제에 가하므로써 제조한다. 상기 제제에서 최종 농도는 Sm-EDTMP 착물이 35mg/mL 이다. 분석을 위해 잔류하는 동결 용액과 함께 제조할때 상기 제제는 15분 이내에 사용한다. 주사에 사용된 제제를 분석한 결과 목표하는 농도에서 주사되었음이 확인되었다.

생후 33 주 되고 체중이 8.1 내지 10.9kg 인, 성숙한 수컷의 Beagle 개를 사용한다. 개들은 수의사에 의해 완전히 신체 검사시키고, 30일 이상동안 실험실 환경에 순응시키며, Adenoimmune^TM-7-L (Tech America, Biologics Corp. 사에서 제조함)을 사용하여 디스템퍼 즉, 아데노비루스 타입의 2 가지 간염 파라인플루엔자 및 파보비루스에 대한 왁진을 접종한다. 개들은 공급자에 의해 귀에 문신이 새겨진 독특한 숫자에 의해 개별적으로 동정한다. 개들은 American Association for the Accreditation of Laboratory Animal Care 에 의해 확립된 공정하에 유지시킨다. 시험에 사용된 실험실은 승인된 것이다.

무작위로 선택된, 내성이 강한 하나의 수컷 개에 요측 피정맥내에 삽입된 카테테르를 통해 샘플 VIII 또는 IX 중 어느 하나를 체중 kg 당 30mg 의 투여량으로 정맥 주사한다. 주사 위치는 카테테르를 삽입하기 전에 방부제 용액을 사용하여 면도시켜 준비한다. 주사는 약 4 분 걸리도록 약 2.0 mL/분(70mg/분)의 속도로 수행한다.

추가의 수컷 Beagle 개 2 마리에 가능한 신속하게, 즉 약 15mL/분의 속도로 동일한 투여량의 샘플 VIII 또는 IX 중 어느 하나를 투여한다. 주입 방법은 상기와 같다. 주입의 속도에 관하여 상기 보고된 결과를 확인하기 위하여 첫번째 주사한 후 약 2 주째에 주입한다.

혈청의 칼슘 및 총 단백질을 분석하기 위해 주사하기 바로 전에 혈액 샘플을 경정맥으로부터 수득하고, 주사한 후 약 5, 15, 30, 45 분, 1, 2 및 4 시간째에 또한 수득한다. 상기와 같이 방부제 용액을 사용하여 복측경을 면도시켜 준비한다. 상기 시간동안 임상 효과에 대해 개를 모니터하고, 심장 박동수 및 맥박을 각각의 상기 시간에서 기록한다.

개들은 개별적으로 그들의 치료식 섭생을 가지므로, 종합적인 섭생표는 적합하지 않은 것 같다. 그러나 체중 kg 당 30mg 의 투여량의 샘플 VIII 또는 IX 중 어느 하나를 2.0mL/분(Sm-EDTMP 착물의 70mg/분)의 속도로 서서히 정맥주사하면 임의의 임상적 징후가 나타나지 않는다. 심장 박동수는 각각의 제제에 대해 7 내지 10% 증가하지만; 이 결과는 개의 심장 박동수가 주위 자극에 응하여 뚜렷하게 변할 수 있기 때문에 단지 흥분에 대한 응답을 나타낸다고 생각된다. 형청중 총 칼슘의 변화가 최소일지라도, 이러한 변화의 원인을 치료에 돌리기에는 어렵다.

주사의 속도가 샐행할 수 있을 정도로 빠르게 증가하는 경우(약 15mL/분), 임상적 징후는 각각의 샘플에서 인지된다. 호흡이 빨라지고 낑낑대면서 불수의근운동, 주로 모든 근육의 미세한 진전은 샘프 VIII 를 투여한 개에게서 인지된다. 이러한 효과는 주사를 시작한지 약 20 초째에 처음으로 인지되며 약 2 분동안 지속된다. 개는 주사한지 약 5분후에 정상적으로 보인다. 심장 박동수는 동일한 시간동안 50% 까지 증가한다. 혈청의 총 칼슘의 양은 이러한 시간동안 감소하지만; 이러한 감소량은 비교적 미량이며, 혈청의 총 단백질에 유사한 변화가 수반된다. 이러한 변화의 원인을 주사로 인한 총 칼슘에 대한 한정된 효과에 돌리는 것은 불가능하다.

샘플 IX 를 투여시킨 개가 또한 임상적 징후를 나타내었지만 이것이 불수의적인 운동인지는 불확실한데, 이는 샘플 VIII 를 투여한 개의 경우에 나타난 바와 같은 상기 운동을 억제에 대한 저항의 특징적인 운동이기 때문이다. 개의 이러한 증가된 활동 기간은 단지 약 30 초이며, 주사한지 약 100 초후에 개는 정상적으로 보인다. 심장 박동수는 약 13% 만이 증가한다. 혈청의 칼슘 양은 주사후에 증가하지만, 총 단백질의 부수적인 변화는 이러한 결과를 설명하는데 어렵게 한다.

요약하면, 30 mg/kg 의 샘플 VIII 또는 IX 중 어느 하나를 서서히 정맥주사하여 투여시킨 개는 주사로 인한 효과를 나타내지 않는다. 신속한 농축괴(bolus) 주사에 의해 주사한 경우, 임상적 징후는 각각의 샘플에서 인지된다. 이러한 효과는 샘플 IX 보다 샘플 VIII 에서 더욱 뚜렷하다.

본 발명의 다른 태양은 본 명세서에 기재된 본 발명의 명세서 또는 수행을 고려하므로써 본 분야의 숙련된자에게 명백할 것이다. 명세서 및 실시예는 단지 예시로서 간주되며, 본 발명의 진의 및 범주는 하기 특허청구범위에 기재되어 있다.

Claims

동결된 후 사용전에 해동된, 사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 핵종과 리간드인 에틸렌디아민테트라메틸렌포스폰산(EDTMP) 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 포함하는 방사성 약물의 제제.
제 1 항에 있어서, 상기 방사성 핵종이 사마륨-153인 방사성 약물의 제제.
제 1 항에 있어서,¹⁶⁶홀뮴과 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 포함하는 방사성 약물의 제제.
제 1 항에 있어서, 액상 질소, 드라이 아이스 또는 아세톤-드라이 아이스에 의해 동결되는 방사성 약물의 제제.
제 1 항에 있어서, 동결되기 전에 Ca⁺²가 첨가되는 방사성 약물의 제제.
사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선태된 방사성 핵종과 리간드인 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물 및 Ca⁺²를 포함하는 동결된 방사성 약물의 제제.
제 5 항에 있어서, Ca⁺²대EDTMP의 몰빅 0.25 대 1 인 방사성 약물의 제제.
제 7 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.5 대 1 인 방사성 약물의 제제.
제 8 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.75 대 1 인 방사성 약물의 제제.
제 9 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.9 대 1 인 방사성 약물의 제제.
제 1 항에 따른 방사성 약물의 제제를, 이 제제가 동경된 후에는 해동시킨 다음, 인간을 제외한 동물에게 정맥주사, 복강내주사, 근육내주사 또는 피하주사함을 포함하는, 상기 제제를 상기 동물에게 투여하는 방법.
¹⁵³사마륨과 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 포함하는 방사성 약물의 제제를 동결시키고 해동시킨 다음 인간을 제외한 동물에게 정맥주사함을 포함하는, 상기 제제를 상기 동물에게 투여하는 방법.
사마륨과 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물 및 Ca⁺²포함하는 방사성 약물의 제제를 동결시키고 해동시킨 다음 재구성하여 인간을 제외한 동물에게 정맥주사함을 포함하는, 상기 제제를 상기 동물에게 투여하는 방법.
Ca⁺²및¹⁵³사마륨-EDTMP를 포함하는 방사성 약물의 제제를 인간을 제외한 동물에게 정맥주사함을 포함하는, 상기 제제를 상기 동물에게 투여하는 방법.
사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 핵종과 리간드인 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 착화시키고, 이 착물을 동결시킨 후, 사용전에 착물에 해동시킴을 포함하는, 제 1 항, 제 2 항, 제 3 항, 제 4 항 중 어느 한 항에 따른 방사성 약물의 제제를 제조하는 방법.
제 15 항에 있어서, 액상 질소, 드라이 아이스 또는 아세톤-드라이 아이스를 사용하여 동결시키는 방법.
사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 금속과 리간드인 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 제조하고,

(b) (a) 단계의 착물을 동결 및 해동 시키고,

(c) (b) 단계의 착물에 Ca⁺²를 첨가하고,

(d) (c) 단계의 제제를 재동결시키는 것을 포함하는,

제 14 항에 따른 동결된 Ca⁺²방사성 약물의 제제를 제조하는 방법.
제 17 항에 있어서, 액상 질소, 드라이 아이스 또는 아세톤-드라이 아이스를 사용하여 동결시키는 방법.
제 17 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP의 몰비가 0.25 대 1인 방법.
제 19 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.5 대 1 인 방법.
제 19 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.75 대 1 인 방법.
제 19 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.9 대 1 인 방법.
제 6 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.25 대 1 인 동결된 방사성 약물의 제제.
제 6 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.9 대 1 인 동결된 방사성 약물의 제제.
(a) 사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 금속과 리간드인 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 제조하고,

(b) (a) 단계의 착물에 Ca⁺²를 첨가하고,

(c) (b) 단계의 제제를 동결시키는 것을 포함하는,

데 14 항에 따른 동결된 Ca⁺²방사성 약물의 제제를 제조하는 방법.
제 25 항에 있어서, 액상 질소, 드라이 아이스 또는 아세톤-드라이 아이스를 사용하여 동결시키는 방법.
제 25 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.25 대 1 인 방법.
제 27 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.5 대 1 인 방법.
제 27 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.75 대 1 인 방법.
제 27 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.9 대 1 인 방법.
제 6 항에 따른 동결된 방사성 약물의 제제를 해동시킨 다음, 인간을 제외한 동물에게 정맥주사, 복강내주사, 근육내주사 또는 피하주사함을 포함하는, 상기 제제를 상기 동물에게 투여하는 방법.
(a) 사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 금속의 이온 용액에 Ca⁺²를 첨가한 다음, EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 리간드로서 첨가하여 착물을 형성하고,

(b) 임의적으로 (a) 단계의 착물을 동결시킨 후 사용전에 해동하는 것을 포함하는,

Ca⁺²방사성 약물의 제제를 제조하는 방법.
제 32 항에 있어서, 액상 질소, 드라이 아이스 또는 아세톤-드라이 아이스를 사용하여 동결시키는 방법.
제 32 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.25 대 1 인 방법.
제 34 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.5 대 1 인 방법.
제 34 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.75 대 1 인 방법.
제 34 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.9 대 1 인 방법.
사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 핵종과 리간드인 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 포함하는 방사성 약물의 제제 및 Ca⁺²용액을 2개의 별도의 주사를 이용하여 인간을 제외한 동물에게 거의 동시에 투여함을 포함하는,

Ca⁺²방사성 약물의 제제를 상기 동물에게 투여하는 방법.
제 38 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.25 대 1 인 방법.
제 39 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.5 대 1 인 방법.
제 39 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.75 대 1 인 방법.
제 39 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.9 대 1 인 방법.
(a) Ca⁺²을 염화물 또는 수산화물로서 리간드인 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염에 첨가한 후 염기를 사용하여 pH 를 조정하고, (b) 임의적으로 (a) 단계의 용액을 동결 건조시켜서 Ca⁺²-EDTMP 동결 건도된 제제를 형성시키고, 사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 금속의 이온을 함유한 산성 용액을 사용하여 상기 제제를 재구성 시키고,

(c) 임의적으로 (b) 단계의 착물을 동결시킨 후 사용전에 해동시킴을 포함하는,

Ca⁺²방사성 약물의 제제를 제조하는 방법.
제 43 항에 있어서, 액상 질소, 드라이 아이스 또는 아세톤-드라이 아이스를 사용하여 동결시키는 방법.
제 43 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP의 몰비가 0.25 대 1 인 방법.
제 45 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.5 대 1 인 방법.
제 45 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.75 대 1 인 방법.
제 45 항에 있어서, Ca⁺²대 EDTMP 의 몰비가 0.9 대 1 인 방법.
제 43 항에 있어서, (b) 단계의 산성 용액이 0.001 내지 1N 농도의 염산인 방법.
제 49 항에 있어서, 산성 용액이 0.01 내지 1N 농도의 염산인 방법.
사마륨-153 및 홀뮴-166으로 이루어진 군으로부터 선택된 방사성 핵종과 라간드인 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 포함하는 동결된 방사성 약물의 제제.
제 51 항에 있어서, 상기 방사성 핵종이 사마륨-153인 동결돤 방사성 약물의 제제.
제 51 항에 있어서,¹⁶⁶홀뮴과 EDTMP 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염과의 착물을 포함하는 동결된 방사성 약물의 제제.
제 51 항에 있어서, 동결되기 전에 Ca⁺²이 첨가된 동결된 방사성 약물의 제제.