JPWO2017022613A1 - 細胞構造体、非ヒトモデル動物、非ヒトモデル動物の製造方法、及び被験物質の評価方法 - Google Patents
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Abstract
Description
(1) 生体親和性高分子ブロックと、少なくともがん細胞および間葉系細胞とを含み、複数個の上記細胞間の隙間に複数個の上記生体親和性高分子ブロックが配置されている、細胞構造体。
(2) 非ヒトモデル動物の作製のために非ヒト動物に移植される、(1)に記載の細胞構造体。
(3) 上記がん細胞が株化されたがん細胞である、(1)又は(2)に記載の細胞構造体。
(4) 上記がん細胞が、膵臓がん細胞である、(1)から(3)の何れか一に記載の細胞構造体。
(5) 上記間葉系細胞が、間葉系幹細胞である、(1)から(4)の何れか一に記載の細胞構造体。
(7) リコンビナントゼラチンが、下記式で示される、(6)に記載の細胞構造体。
式:A−[(Gly−X−Y)n]m−B
式中、Aは任意のアミノ酸又はアミノ酸配列を示し、Bは任意のアミノ酸又はアミノ酸配列を示し、n個のXはそれぞれ独立にアミノ酸の何れかを示し、n個のYはそれぞれ独立にアミノ酸の何れかを示し、nは3〜100の整数を示し、mは2〜10の整数を示す。なお、n個のGly-X-Yはそれぞれ同一でも異なっていてもよい。
(8) リコンビナントゼラチンが、
配列番号1に記載のアミノ酸配列からなるペプチド;
配列番号1に記載のアミノ酸配列において1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ生体親和性を有するペプチド;又は
配列番号1に記載のアミノ酸配列と80%以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ生体親和性を有するペプチド;
の何れかである、(6)又は(7)に記載の細胞構造体。
(10) 上記がん細胞が株化されたがん細胞である、(9)に記載の非ヒトモデル動物。
(11) 上記がん細胞が、膵臓がん細胞であり、上記がん疾患が膵臓がんである、(9)又は(10)に記載の非ヒトモデル動物。
(12) 上記間葉系細胞が、間葉系幹細胞である、(9)から(11)の何れか一に記載の非ヒトモデル動物。
(13) 細胞構造体の移植部位が皮下である、(9)から(12)の何れか一に記載の非ヒトモデル動物。
(14) 免疫力が低下しているか、または免疫不全である、(9)から(13)の何れか一に記載の非ヒトモデル動物。
(16) (9)から(14)の何れか一に記載の非ヒトモデル動物に被験物質を投与することを含む、被験物質の評価方法。
本発明は、生体親和性高分子ブロックと、少なくともがん細胞および間葉系細胞とを含み、複数個の上記細胞間の隙間に複数個の上記生体親和性高分子ブロックが配置されている、細胞構造体に関する。さらに本発明は、上記細胞構造体を移植物として有するがん疾患に対する非ヒトモデル動物、上記非ヒトモデル動物を用いた被験物質の評価方法、及び上記非ヒトモデル動物の製造方法に関する。
なお、本発明の細胞構造体は、本明細書中において、モザイク細胞塊(モザイク状になっている細胞塊)と称する場合もある。
(1−1)生体性親和性高分子
生体性親和性とは、生体に接触した際に、長期的かつ慢性的な炎症反応などのような顕著な有害反応を惹起しないことを意味する。本発明で用いる生体親和性高分子は、生体に親和性を有するものであれば、生体内で分解されるか否かは特に限定されないが、生分解性高分子であることが好ましい。非生分解性材料として具体的には、ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)、ポリウレタン、ポリプロピレン、ポリエステル、塩化ビニル、ポリカーボネート、アクリル、ステンレス、チタン、シリコーン、及びMPC(2-メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン)などが挙げられる。生分解性材料としては、具体的にはリコンビナントペプチド又は化学合成ペプチドなどのポリペプチド(例えば、以下に説明するゼラチン等)、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸コポリマー(PLGA)、ヒアルロン酸、グリコサミノグリカン、プロテオグリカン、コンドロイチン、セルロース、アガロース、カルボキシメチルセルロース、キチン、及びキトサンなどが挙げられる。上記の中でも、リコンビナントペプチドが特に好ましい。これら生体親和性高分子には細胞接着性を高める工夫がなされていてもよい。具体的には、1.「基材表面に対する細胞接着基質(フィブロネクチン、ビトロネクチン、ラミニン)や細胞接着配列(アミノ酸一文字表記で現わされる、RGD配列、LDV配列、REDV配列、YIGSR配列、PDSGR配列、RYVVLPR配列、LGTIPG配列、RNIAEIIKDI配列、IKVAV配列、LRE配列、DGEA配列、及びHAV配列)ペプチドによるコーティング」、「基材表面のアミノ化、カチオン化」、又は「基材表面のプラズマ処理、コロナ放電による親水性処理」といった方法を使用できる。
リコンビナントゼラチンについては、本明細書中後記する。
本発明で用いる高分子のGRAVY値を上記範囲とすることにより、親水性が高く、かつ、吸水性が高くなることから、栄養成分の保持に有効に作用する。
本発明で用いる生体親和性高分子は、架橋されているものでもよいし、架橋されていないものでもよいが、架橋されているものが好ましい。架橋されている生体親和性高分子を使用することにより、培地中で培養する際及び生体に移植した際に瞬時に分解してしまうことを防ぐという効果が得られる。一般的な架橋方法としては、熱架橋、アルデヒド類(例えば、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒドなど)による架橋、縮合剤(カルボジイミド、シアナミドなど)による架橋、酵素架橋、光架橋、紫外線架橋、疎水性相互作用、水素結合、イオン性相互作用などが知られており、本発明においても上記の架橋方法を使用することができる。本発明で使用する架橋方法としては、さらに好ましくは熱架橋、紫外線架橋、又は酵素架橋であり、特に好ましくは熱架橋である。
本発明で言うリコンビナントゼラチンとは、遺伝子組み換え技術により作られたゼラチン類似のアミノ酸配列を有するポリペプチドもしくは蛋白様物質を意味する。本発明で用いることができるリコンビナントゼラチンは、コラーゲンに特徴的なGly−X−Yで示される配列(X及びYはそれぞれ独立にアミノ酸の何れかを示す)の繰り返しを有するものが好ましい。ここで、複数個のGly−X−Yはそれぞれ同一でも異なっていてもよい。好ましくは、細胞接着シグナルが一分子中に2配列以上含まれている。本発明で用いるリコンビナントゼラチンとしては、コラーゲンの部分アミノ酸配列に由来するアミノ酸配列を有するリコンビナントゼラチンを用いることができる。例えばEP1014176、US特許6992172号、国際公開WO2004/85473、国際公開WO2008/103041等に記載のものを用いることができるが、これらに限定されるものではない。本発明で用いるリコンビナントゼラチンとして好ましいものは、以下の態様のリコンビナントゼラチンである。
この最小アミノ酸配列の含有量は、細胞接着・増殖性の観点から、タンパク質1分子中3〜50個が好ましく、さらに好ましくは4〜30個、特に好ましくは5〜20個である。最も好ましくは12個である。
好ましくは、リコンビナントゼラチンはテロペプタイドを有さない。
好ましくは、リコンビナントゼラチンは、アミノ酸配列をコードする核酸により調製された実質的に純粋なポリペプチドである。
(1)配列番号1に記載のアミノ酸配列からなるペプチド;
(2)配列番号1に記載のアミノ酸配列において1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ生体親和性を有するペプチド;又は
(3)配列番号1に記載のアミノ酸配列と80%以上(さらに好ましくは90%以上、特に好ましくは95%以上、最も好ましくは98%以上)の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ生体親和性を有するペプチド;
の何れかである
本発明では、上記した生体親和性高分子からなるブロック(塊)を使用する。
本発明における生体親和性高分子ブロックの形状は特に限定されるものではない。例えば、不定形、球状、粒子状(顆粒)、粉状、多孔質状、繊維状、紡錘状、扁平状及びシート状であり、好ましくは、不定形、球状、粒子状(顆粒)、粉状及び多孔質状である。不定形とは、表面形状が均一でないもののことを示し、例えば、岩のような凹凸を有する物を示す。なお、上記の形状の例示はそれぞれ別個のものではなく、例えば、粒子状(顆粒)の下位概念の一例として不定形となる場合もある。
生体親和性高分子ブロックの製造方法は、特に限定されないが、例えば、生体親和性高分子を含有する固形物(生体親和性高分子の多孔質体など)を、粉砕機(ニューパワーミルなど)を用いて粉砕することにより、生体親和性高分子ブロックを得ることができる。生体親和性高分子を含有する固形物(多孔質体など)は、例えば、生体親和性高分子を含有する水溶液を凍結乾燥して得ることができる。
(a)溶液内で最も液温の高い部分の温度と溶液内で最も液温の低い部分の温度との差が2.5℃以下であり、かつ、溶液内で最も液温の高い部分の温度が溶媒の融点以下で、生体親和性高分子の溶液を、未凍結状態に冷却する工程、
(b)工程(a)で得られた生体親和性高分子の溶液を凍結する工程、及び
(c)工程(b)で得られた凍結した生体親和性高分子を凍結乾燥する工程
を含む方法を挙げることができる。
本発明の細胞構造体は、少なくともがん細胞および間葉系細胞とを含む。
がん細胞が由来するがんの具体例としては、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、消化器がん、肺がん、食道がん、胃がん、大腸がん、直腸がん、結腸がん、尿管腫瘍、胆嚢がん、胆管がん、胆道がん、乳がん、肝臓がん、膵臓がん、睾丸腫瘍、上顎がん、舌がん、口唇がん、口腔がん、咽頭がん、喉頭がん、卵巣がん、子宮がん、前立腺がん、甲状腺がん、脳腫瘍、カポジ肉腫、血管腫、白血病、真性多血症、神経芽腫、網膜芽腫、骨髄腫、膀胱腫、肉腫、骨肉腫、筋肉腫、皮膚がん、基底細胞がん、皮膚付属器がん、皮膚転移がんなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。がん細胞の一例としては、膵臓がん細胞が挙げられる。
株化されたがん細胞とは、生体より採取した細胞であって、適切な培養条件下で培養した場合にほぼ無限に増殖することができる状態の細胞である。ここでいう適切な培養条件とは、各細胞に応じた温度、栄養分、増殖因子、付着面などが提供される条件を言う。株化されていないがん細胞としては、生体から採取した組織や細胞を最初に播種して培養した細胞である初代培養細胞が挙げられる。
本発明で用いるがん細胞の種類は、1種類でも2種類以上でもよく、好ましくは1又は2種類、さらに好ましくは1種類である。
本発明で用いる間葉系細胞の種類は、1種類でも2種類以上でもよく、好ましくは1又は2種類、さらに好ましくは1種類である。
本発明の細胞構造体は、がん細胞および間葉系細胞以外に、その他の細胞を含んでいてもよい。その他の細胞としては、血管内皮細胞、胚性幹(ES)細胞、人工多能性幹(iPS)細胞、間質細胞、線維芽細胞、脂肪由来幹細胞及び臍帯由来幹細胞などが挙げられるが、特に限定されない。
本発明においては、生体親和性高分子ブロックと、がん細胞および間葉系細胞とを用いて、複数個の細胞間の隙間に複数個の生体親和性高分子ブロックをモザイク状に3次元的に配置させることによって細胞移植のために適した厚みを有することが可能となる。さらに、生体親和性高分子ブロックと細胞とがモザイク状に3次元に配置されることにより、構造体中で細胞が均一に存在する細胞構造体が形成され、外部から細胞構造体の内部への栄養送達が可能となる。
本発明の細胞構造体は、生体親和性高分子ブロックと、がん細胞および間葉系細胞とを混合することによって製造することができる。より具体的には、本発明の細胞構造体は、生体親和性高分子ブロックと、上記細胞とを交互に配置することにより製造できる。製造方法は特に限定されないが、好ましくは生体親和性高分子ブロックを形成したのち、細胞と生体親和性高分子ブロックとを混合する方法である。具体的には、生体親和性高分子ブロックと、がん細胞および間葉系細胞を含有する培養液との混合物をインキュベートすることによって、本発明の細胞構造体を製造することができる。がん細胞および間葉系細胞を含有する培養液におけるがん細胞と間葉系細胞との細胞数の比率は特に限定されないが、好ましくは10:1〜1:10であり、より好ましくは5:1〜1:5であり、さらに好ましくは2:1〜1:2である。
(a)別々に調製した細胞構造体(モザイク細胞塊)同士を融合させる、又は
(b)分化培地又は増殖培地下でボリュームアップさせる、
などの方法により所望の大きさの細胞構造体を製造してもよい。融合の方法、ボリュームアップの方法は特に限定されない。
本発明の細胞構造体は、非ヒトモデル動物の製造のために非ヒト動物に移植することができる。本発明の細胞構造体からなる、非ヒトモデル動物の製造のために移植物は、本発明に包含される。さらに本発明によれば、上記した本発明の細胞構造体を移植物として有する、がん疾患に対する非ヒトモデル動物が提供される。
がん疾患に対する非ヒトモデル動物とは、がんを有するモデル動物を意味する。
がん疾患は、好ましくはヒトがん疾患である。
細胞構造体を構成する生体親和性高分子ブロック、がん細胞及び間葉系細胞、並びに好ましい範囲は、本明細書中上記した通りである。
細胞構造体の移植方法としては、切開、注射、内視鏡などが使用可能である。
細胞構造体は、非ヒト動物1匹当たり1〜1000個、好ましくは1〜100個を移植することができる。
本発明の細胞構造体は、がん細胞を含むことから、本発明の細胞構造体を非ヒト動物に移植することによって、上記非ヒト動物にがんを形成することができる。
本発明によれば、上記した本発明の非ヒトモデル動物に被験物質を投与することを含む、被験物質の評価方法が提供される。被験物質として、抗がん剤などのがん治療薬の候補物質を使用する場合には、がん治療薬をスクリーニングすることができる。
また、非ヒトモデル動物におけるがんの病態の評価は、被験物質を投与しない非ヒトモデル動物を陰性対照として、評価することができる。
上記のようにして選択された被験物質は、がん治療薬の候補となりうる。
リコンビナントペプチド(リコンビナントゼラチン)として以下のCBE3を用意した(国際公開WO2008/103041号公報に記載)。
CBE3:
分子量:51.6kD
構造: GAP[(GXY)63]3G
アミノ酸数:571個
RGD配列:12個
イミノ酸含量:33%
ほぼ100%のアミノ酸がGXYの繰り返し構造である。CBE3のアミノ酸配列には、セリン、スレオニン、アスパラギン、チロシン及びシステインは含まれていない。CBE3はERGD配列を有している。
等電点:9.34
GRAVY値:−0.682
1/IOB値:0.323
アミノ酸配列(配列表の配列番号1)(国際公開WO2008/103041号公報の配列番号3と同じ。但し末尾のXは「P」に修正)
GAP(GAPGLQGAPGLQGMPGERGAAGLPGPKGERGDAGPKGADGAPGAPGLQGMPGERGAAGLPGPKGERGDAGPKGADGAPGKDGVRGLAGPIGPPGERGAAGLPGPKGERGDAGPKGADGAPGKDGVRGLAGPIGPPGPAGAPGAPGLQGMPGERGAAGLPGPKGERGDAGPKGADGAPGKDGVRGLAGPP)3G
[PTFE厚・円筒形容器]
底面厚さ3mm、直径51mm、側面厚さ8mm、高さ25mmのポリテトラフルオロエチレン(PTFE)製円筒カップ状容器を用意した。円筒カップは曲面を側面としたとき、側面は8mmのPTFEで閉鎖されており、底面(平板の円形状)も3mmのPTFEで閉鎖されている。一方、上面は開放された形をしている。よって、円筒カップの内径は43mmになっている。以後、この容器のことをPTFE厚・円筒形容器と呼称する。
厚さ1mm、直径47mmのアルミ製円筒カップ状容器を用意した。円筒カップは曲面を側面としたとき、側面は1mmのアルミで閉鎖されており、底面(平板の円形状)も1mmのアルミで閉鎖されている。一方、上面は開放された形をしている。また、側面の内部にのみ、肉厚1mmのテフロン(登録商標)を均一に敷き詰め、結果として円筒カップの内径は45mmになっている。また、この容器の底面にはアルミの外に2.2mmの硝子板を接合した状態にしておく。以後、この容器のことをアルミ硝子・円筒形容器と呼称する。
PTFE厚・円筒形容器、アルミ硝子板・円筒形容器、にCBE3水溶液を流し込み、真空凍結乾燥機(TF5−85ATNNN:宝製作所)内で冷却棚板を用いて底面からCBE3水溶液を冷却した。この際の容器、CBE3水溶液の最終濃度、液量、及び棚板温度の設定の組み合わせは、以下に記載の通りで用意した。
PTFE厚・円筒形容器、CBE3水溶液の最終濃度4質量%、水溶液量4mL。 棚板温度の設定は、−10℃になるまで冷却し、−10℃で1時間、その後−20℃で2時間、さらに−40℃で3時間、最後に−50℃で1時間凍結を行った。本凍結品はその後、棚板温度を−20℃設定に戻してから−20℃で24時間の真空乾燥を行い、24時間後にそのまま真空乾燥を続けた状態で棚板温度を20℃へ上昇させ、十分に真空度が下がる(1.9×105Pa)まで、さらに20℃で48時間の真空乾燥を実施した後に、真空凍結乾燥機から取り出した。それによって多孔質体を得た。
アルミ・硝子板・円筒形容器、CBE3水溶液の最終濃度4質量%、水溶液量4mL。 棚板温度の設定は、−10℃になるまで冷却し、−10℃で1時間、その後−20℃で2時間、さらに−40℃で3時間、最後に−50℃で1時間凍結を行った。本凍結品はその後、棚板温度を−20℃設定に戻してから−20℃で24時間の真空乾燥を行い、24時間後にそのまま真空乾燥を続けた状態で棚板温度を20℃へ上昇させ、十分に真空度が下がる(1.9×105Pa)まで、さらに20℃で48時間の真空乾燥を実施した後に、真空凍結乾燥機から取り出した。それによって多孔質体を得た。
PTFE厚・円筒形容器、CBE3水溶液の最終濃度4質量%、水溶液量10mL。 棚板温度の設定は、−10℃になるまで冷却し、−10℃で1時間、その後−20℃で2時間、さらに−40℃で3時間、最後に−50℃で1時間凍結を行った。本凍結品はその後、棚板温度を−20℃設定に戻してから−20℃で24時間の真空乾燥を行い、24時間後にそのまま真空乾燥を続けた状態で棚板温度を20℃へ上昇させ、十分に真空度が下がる(1.9×105Pa)まで、さらに20℃で48時間の真空乾燥を実施した後に、真空凍結乾燥機から取り出した。それによって多孔質体を得た。
条件A〜条件Cのそれぞれについて、溶液内で冷却側から最も遠い場所の液温(非冷却面液温)として容器内の円中心部の水表面液温を、また、溶液内で冷却側に最も近い液温(冷却面液温)として容器内の底部の液温を測定した。
その結果、それぞれの温度とその温度差のプロファイルは図1〜図3の通りとなった。
非冷却面液温が融点(0℃)になった時の温度差:1.1℃
−10℃から−20℃へ下げる直前の温度差:0.2℃
凝固熱発生直前の温度差:1.1℃
非冷却面液温が融点(0℃)になった時の温度差:1.0℃
−10℃から−20℃へ下げる直前の温度差:0.1℃
凝固熱発生直前の温度差:0.9℃
非冷却面液温が融点(0℃)になった時の温度差:1.8℃
−10℃から−20℃へ下げる直前の温度差:1.1℃
凝固熱発生直前の温度差:2.1℃
実施例2で得られた条件A及び条件BのCBE3多孔質体をニューパワーミル(大阪ケミカル、ニューパワーミルPM−2005)で粉砕した。粉砕は、最大回転数で1分間×5回、計5分間の粉砕で行った。得られた粉砕物について、ステンレス製ふるいでサイズ分けし、25〜53μm、53〜106μm、106〜180μmの未架橋ブロックを得た。その後、減圧下160℃で熱架橋(架橋時間は8時間、16時間、24時間、48時間、72時間、96時間の6種類を実施した)を施して、生体親和性高分子ブロック(CBE3ブロック)を得た。
ヒト骨髄由来間葉系幹細胞(hMSC:human mesenchymal stem cell、Lonza社より購入)が終濃度4x105cells/mL、及び株化されたヒト膵・腺がん細胞(Capan-1、ATCCより購入)が終濃度4x105cells/mLとなるように、MSCGM BulletKitTM培地(会社名:Lonza Japan、製品名MSCGMTM Mesenchymal Stem Cell Growth Medium BulletKitTM)で調整した細胞懸濁液を用意し、25μLずつ混和した。その細胞懸濁液に実施例3で作製した生体親和性高分子ブロック(サイズ53〜106μm)を0.1mg/mLとなるように添加した。得られた混合物200μLをスミロンセルタイトX96Uプレート(住友ベークライト、底がU字型)に播種し、卓上プレート遠心機で遠心(600g、5分)し、24時間静置し、直径1mm又は直径1.3mm程度の球状の、生体親和性高分子ブロックとCapan-1とhMSCからなるモザイク細胞塊を作製した(細胞1個当たり0.001μgのブロック)。得られたモザイク細胞塊16個を96Uプレートの1ウェルに集め、更に24時間静置しモザイク細胞塊が集合した組織を調製した。
また、比較例として、生体親和性高分子ブロックを添加しないで細胞塊(hMSCとCapan-1)を作製した。
生体親和性高分子ブロックを添加しない場合、細胞塊内部ではhMSCの壊死が観察され、相対的にCapan-1細胞が多く見られた。残ったhMSCは未分化なままであり、線維芽細胞への分化は弱かった。
生体親和性高分子ブロックを添加した場合、細胞塊内部でもhMSCは壊死せず、Capan-1細胞とほぼ1:1の割合で生存していた。hMSCは不完全ながら線維芽細胞への分化が観察された。
麻酔下のNOD−SCID(非肥満糖尿病−重度複合免疫不全症)マウス 6週齢メスの皮下に、スパーテル(PPミクロスパーテル アズワン #1-9404-01)を用いて、実施例4で作製したモザイク細胞塊(生体親和性高分子ブロックを添加したもの)又は細胞塊(生体親和性高分子ブロックを添加しないもの)を移入後、挿入部を縫合した。
細胞塊を移植した場合、hMSC由来と考えられる間葉系組織の中に,Capan-1由来と考えられる腺管構造を呈した細胞が島状に存在していた。モザイク細胞塊を移植したものに比し,線維状組織は乏しかった (図5の左図)。
上記の通り、Capan-1とhMSCをモザイク細胞塊にして移植した場合に、in vivoで豊富な線維化・間質形成が認められ、ヒト膵臓がんの病態に近いモデルを構築することができた。
Claims (16)
- 生体親和性高分子ブロックと、少なくともがん細胞および間葉系細胞とを含み、複数個の前記細胞間の隙間に複数個の前記生体親和性高分子ブロックが配置されている、細胞構造体。
- 非ヒトモデル動物の作製のために非ヒト動物に移植される、請求項1に記載の細胞構造体。
- 前記がん細胞が株化されたがん細胞である、請求項1又は2に記載の細胞構造体。
- 前記がん細胞が、膵臓がん細胞である、請求項1から3の何れか一項に記載の細胞構造体。
- 前記間葉系細胞が、間葉系幹細胞である、請求項1から4の何れか一項に記載の細胞構造体。
- 生体親和性高分子が、リコンビナントゼラチンである、請求項1から5の何れか一項に記載の細胞構造体。
- リコンビナントゼラチンが、下記式で示される、請求項6に記載の細胞構造体。
式:A−[(Gly−X−Y)n]m−B
式中、Aは任意のアミノ酸又はアミノ酸配列を示し、Bは任意のアミノ酸又はアミノ酸配列を示し、n個のXはそれぞれ独立にアミノ酸の何れかを示し、n個のYはそれぞれ独立にアミノ酸の何れかを示し、nは3〜100の整数を示し、mは2〜10の整数を示す。なお、n個のGly-X-Yはそれぞれ同一でも異なっていてもよい。 - リコンビナントゼラチンが、
配列番号1に記載のアミノ酸配列からなるペプチド;
配列番号1に記載のアミノ酸配列において1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ生体親和性を有するペプチド;又は
配列番号1に記載のアミノ酸配列と80%以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ生体親和性を有するペプチド;
の何れかである、請求項6又は7に記載の細胞構造体。 - 生体親和性高分子ブロックと、少なくともがん細胞および間葉系細胞とを含み、複数個の前記細胞間の隙間に複数個の前記生体親和性高分子ブロックが配置されている細胞構造体を移植物として有する、がん疾患に対する非ヒトモデル動物。
- 前記がん細胞が株化されたがん細胞である、請求項9に記載の非ヒトモデル動物。
- 前記がん細胞が、膵臓がん細胞であり、前記がん疾患が膵臓がんである、請求項9又は10に記載の非ヒトモデル動物。
- 前記間葉系細胞が、間葉系幹細胞である、請求項9から11の何れか一項に記載の非ヒトモデル動物。
- 細胞構造体の移植部位が皮下である、請求項9から12の何れか一項に記載の非ヒトモデル動物。
- 免疫力が低下しているか、または免疫不全である、請求項9から13の何れか一項に記載の非ヒトモデル動物。
- 請求項1から8の何れか一項に記載の細胞構造体を、非ヒト動物に移植することを含む、がん疾患に対する非ヒトモデル動物の製造方法。
- 請求項9から14の何れか一項に記載の非ヒトモデル動物に被験物質を投与することを含む、被験物質の評価方法。
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JPWO2023042875A1 (ja) * | 2021-09-16 | 2023-03-23 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04501657A (ja) * | 1988-09-08 | 1992-03-26 | マロウ―テク インコーポレーテッド | 細胞および組織の三次元培養系 |
JP2001520011A (ja) * | 1997-09-26 | 2001-10-30 | コリクサ コーポレイション | ヒトガンについてのマウスモデル |
WO2006088029A1 (ja) * | 2005-02-15 | 2006-08-24 | School Juridical Person Kitasato Gakuen | 高密度培養組織の製造方法及び高密度培養組織 |
WO2011078301A1 (ja) * | 2009-12-25 | 2011-06-30 | ファーマロジカルズ・リサーチ プライベート リミテッド | Nog樹立癌細胞株が移植された非ヒト動物モデルを用いた抗癌剤ターゲット探索及びスクリーニング法 |
JP2012000058A (ja) * | 2010-06-17 | 2012-01-05 | Japan Science & Technology Agency | 腫瘍組織モデルの製造方法 |
WO2015017626A1 (en) * | 2013-08-02 | 2015-02-05 | University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) | Three dimensional fibrous scaffolds for cell culture |
JP2015047078A (ja) * | 2013-08-30 | 2015-03-16 | 学校法人順天堂 | 強転移性ヒト癌細胞株 |
WO2015046216A1 (ja) * | 2013-09-25 | 2015-04-02 | 富士フイルム株式会社 | 生体親和性高分子多孔質体の製造方法、生体親和性高分子多孔質体、生体親和性高分子ブロック並びに細胞構造体 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2486548A1 (en) * | 2002-05-30 | 2003-12-11 | Raven Biotechnologies, Inc. | Animal model for toxicology and dose prediction |
WO2006110950A1 (en) * | 2005-04-18 | 2006-10-26 | Peter Maccallum Cancer Institute | In vivo model for preclinical drug development |
JP4565189B2 (ja) * | 2005-08-10 | 2010-10-20 | 国立大学法人 筑波大学 | がんモデル動物の作製方法 |
US20070283453A1 (en) * | 2006-05-31 | 2007-12-06 | Juan Carlos Rodriguez Cimadevilla | Animal models of tumor metastasis and toxicity |
CN101185764A (zh) * | 2007-10-17 | 2008-05-28 | 南京大学 | 一种原位移植性小鼠肝癌模型及其制备方法和应用 |
JP5850416B2 (ja) * | 2009-06-19 | 2016-02-03 | 国立大学法人九州大学 | 細胞組織体の製造方法 |
SG10201403707QA (en) * | 2009-06-29 | 2014-10-30 | Ilya B Leskov | Non-human mammal model of human hematopoietic cancer |
KR20130005279A (ko) * | 2010-03-01 | 2013-01-15 | 후지필름 가부시키가이샤 | 생체 친화성을 갖는 고분자 블록과 세포로 이루어지는 세포 구조체 |
CA2796744A1 (en) * | 2010-04-17 | 2011-10-20 | Bayer Healthcare Llc | Synthetic metabolites of fluoro substituted omega-carboxyaryl diphenyl urea for the treatment and prevention of diseases and conditions |
CN102906249A (zh) * | 2010-05-25 | 2013-01-30 | 独立行政法人国立癌症研究中心 | 能够在体外自我复制的诱导性前癌干细胞或诱导性恶性干细胞,这些细胞的制备方法,及这些细胞的应用 |
JP5876787B2 (ja) * | 2011-08-31 | 2016-03-02 | 富士フイルム株式会社 | 細胞移植用細胞構造体および細胞移植用細胞集合体 |
CN102988416A (zh) * | 2011-09-09 | 2013-03-27 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 一种反应前列腺癌发生带性功能差异的肿瘤模型及其建立方法 |
WO2013102118A2 (en) * | 2011-12-30 | 2013-07-04 | Anticancer, Inc. | Imageable patient tumors in mice |
CN103911342B (zh) * | 2013-01-08 | 2016-07-06 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种人骨巨细胞瘤小鼠动物模型及其构建方法 |
JP6130903B2 (ja) * | 2013-02-27 | 2017-05-17 | 富士フイルム株式会社 | 細胞移植用細胞構造体、生体親和性高分子ブロック及びそれらの製造方法 |
CN103239479B (zh) * | 2013-03-19 | 2014-07-02 | 邱启裕 | 一种人原发性皮肤鳞状上皮细胞癌肿瘤干细胞的动物模型建立方法 |
EP3202409A4 (en) * | 2014-09-30 | 2017-11-22 | Fujifilm Corporation | Composition, cell construct, islet transplant kit, islet cell transplant therapeutic agent and blood sugar reducing agent, composition including islets, kit including islets, and islet transplant therapeutic agent and blood sugar reducing agent |
EP3320925B1 (en) * | 2015-07-10 | 2024-02-28 | FUJIFILM Corporation | Cell structure and method for producing cell structure |
-
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Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04501657A (ja) * | 1988-09-08 | 1992-03-26 | マロウ―テク インコーポレーテッド | 細胞および組織の三次元培養系 |
JP2001520011A (ja) * | 1997-09-26 | 2001-10-30 | コリクサ コーポレイション | ヒトガンについてのマウスモデル |
WO2006088029A1 (ja) * | 2005-02-15 | 2006-08-24 | School Juridical Person Kitasato Gakuen | 高密度培養組織の製造方法及び高密度培養組織 |
WO2011078301A1 (ja) * | 2009-12-25 | 2011-06-30 | ファーマロジカルズ・リサーチ プライベート リミテッド | Nog樹立癌細胞株が移植された非ヒト動物モデルを用いた抗癌剤ターゲット探索及びスクリーニング法 |
JP2012000058A (ja) * | 2010-06-17 | 2012-01-05 | Japan Science & Technology Agency | 腫瘍組織モデルの製造方法 |
WO2015017626A1 (en) * | 2013-08-02 | 2015-02-05 | University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) | Three dimensional fibrous scaffolds for cell culture |
JP2015047078A (ja) * | 2013-08-30 | 2015-03-16 | 学校法人順天堂 | 強転移性ヒト癌細胞株 |
WO2015046216A1 (ja) * | 2013-09-25 | 2015-04-02 | 富士フイルム株式会社 | 生体親和性高分子多孔質体の製造方法、生体親和性高分子多孔質体、生体親和性高分子ブロック並びに細胞構造体 |
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