JPWO2003004149A1 - 新規な光学異性体分離用分離剤及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、溶剤を除去する工程、洗浄して分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。

Description

技術分野
本発明は、新規な光学異性体分離用分離剤、その製造方法及びそれを用いた光学異性体の分離方法、特にクロマトグラフィー法による光学異性体の分離方法に関するものであり、医薬品、食品、農薬、香料などの分析において、キラル化合物を高い分離係数をもって光学分割する光学異性体分離技術を提供するものである。
背景技術
多くの有機化合物には物理的、化学的性質が全く同一であるが、生理活性の点で差がみられる光学異性体が存在する。これは生物を構成するタンパク質や糖質自身がほとんどの場合、片方の光学異性体でできているためであり、そのため他の光学異性体に対する作用の仕方に差異が生じることで生理活性差が現れる。特に医薬品の光学異性体間でその薬効、毒性の点で顕著な差が見られる場合が往々にしてあり、医薬品分野においてはこの問題は大きな問題として捉えられている。厚生省においても医薬品製造指針で「当該薬物がラセミ体である場合には、それぞれの異性体について、吸収、分布、代謝、排泄動態を検討しておくことが望ましい。」と記載している。
先に述べたように光学異性体は、その物理的、化学的性質、例えば沸点、融点、溶解度といった物性は全く同一であるために、通常の分離手段では分析が行えない。そこで幅広い種類の光学異性体を簡便に、かつ精度良く分析する技術の研究が精力的に行われた。そしてこれら要求に応える分析手法として高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）による光学分割方法、特にＨＰＬＣ用光学異性体分離カラムによる光学分割方法が進歩してきた。ここで言う光学異性体分離カラムとは不斉識別剤そのもの、あるいは不斉識別剤を適当な担体上に担持させたキラル固定相が使用されている。
キラル固定相の例としては、光学活性ポリメタクリル酸トリフェニルメチル（特開昭５７−１５０４３２号公報参照）、セルロース、アミロース誘導体（特開昭６０−４０９５２号公報、特開昭６０−１０８７５１号公報、特開昭６０−１４２９３０号公報、特開昭６３−１７８１０１号公報参照）、タンパクであるオボムコイド（特開昭６３−３０７８２９号公報）などが開発されている。そして数あるこれらＨＰＬＣ用キラル固定相の中でも、セルロースあるいはアミロース誘導体をシリカゲル上に担持させた光学異性体分離用カラムは、極めて幅広い種類の化合物に対し、高い不斉識別能を有することが知られている（例えば、岡本ら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，１９９８，３７，１０２０）。
光学純度測定などの分析を目的としている場合には、なるべく少ない種類の光学異性体分離カラムにより、なるべく多数の不特定種の光学異性体化合物を分離できることが望まれたことから、上記セルロースあるいはアミロース誘導体をシリカゲル上に担持させた光学異性体分離用カラムは実用的な分離メディアとして受け入れられた。
近年ではＨＰＬＣ用キラル固定相と擬似移動床法を組み合わせた工業規模での光学活性体液体クロマト法分取の検討が進められており（Ｐｈｒａｍ Ｔｅｃｈ Ｊａｐａｎ，１２，４３（１９９６））、ここでは分析のみならず、分取、すなわち生産手段としてクロマト分離が注目を集めている。
この目的においては、単にベースライン分離するのみならずクロマト分取生産性を向上させ生産コストの低減を図るために、限定された特定の分取目的のターゲット化合物に対して、さらによく分ける、すなわち極大まで大きな分離係数α値をもったキラル固定相の開発が求められている。
一方、特定のターゲット化合物を特異的に識別する手法として分子鋳型手法が世の中に知られている。分子鋳型の一般的な作製方法はターゲット化合物（ゲスト）と非共有結合型相互作用を行うモノマーを試験管中で架橋剤などを用いて反応させて重合することで高分子化合物（ホスト）を得る手法が最も一般的な方法である。またゲストと重合体を混合し、相互作用状態で重合体を架橋反応させることによりホストを得る方法が知られている（例えば、Ｇ．ＷｕｌｆｆらＡｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，１９７２，８４，３６４）。
こういった分子鋳型法で得られたクロマト用充填剤は、ゲストに対して高い識別能力を有するものの、一般的にゲストに対する吸着度合いがあまりに強いため相当する溶出ピークが幅広く潰れてしまうことが知られており、クロマト効率としては満足すべきものではない。また分子鋳型法で得られた高分子化合物は、形成した鋳型が壊れてしまう溶解操作を行うことが出来ないため、粉砕などの処理によってクロマト用充填剤に調製されているが、分級などの操作が煩雑であり、かつ粒子径が不均一であるため、クロマト効率の低下をもたらしている。上記の理由により、分子鋳型法を用いた手法でのクロマト用充填剤は実用化に未だ至っていない。
本発明の目的は、分離対象となる化合物に対する分離性能が大幅に向上された光学異性体分離用分離剤を得ることができる、新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法を提供することである。
本発明の他の目的は、分離対象となる化合物に対する分離性能が大幅に向上されると共に、従来分離できなかった化合物も分離できるようになった光学異性体分離用分離剤を提供することである。
本発明の更に他の目的は、上記光学異性体分離用分離剤を用いたクロマトグラフィー用固定相又は連続式液体クロマト分取用固定相、更には上記光学異性体分離用分離剤を用いた光学異性体の分離方法を提供することである。
発明の開示
本発明者は、光学異性体分離用分離剤の分離能力を高める手法として従来汎用されている展開溶媒の選択使用に替えて、光学異性体分離用分離剤を改良すること、具体的には分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を使用して光学異性体分離用分離剤を改良することにより、分離能力が大幅に高められることを見出したものである。
即ち本発明は、光学活性な高分子化合物を担体に担持させる際に、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法を提供する。
更に本発明は、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、溶剤を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法を提供する。
更に本発明は、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、溶剤を除去する工程、洗浄して分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法を提供する。
更に本発明は、光学活性な高分子化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、更に前記担体に分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を担持させる工程、溶剤を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法を提供する。
更に本発明は、光学活性な高分子化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、更に前記担体に分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を担持させる工程、溶剤を除去する工程、洗浄して分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法を提供する。
また本発明は、担体に光学活性な高分子化合物が担持され、更に製造原料として添加され、担持されていた分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が除去されている光学異性体分離用分離剤を提供する。
また本発明は、上記の光学異性体分離用分離剤を用いたクロマトグラフィー用固定相又は光学異性体分離用分離剤を用いた連続式液体クロマト分取用固定相、上記の光学異性体分離用分離剤を用いた光学異性体の分離方法を提供する。
発明を実施するための最良の形態
本発明の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法について説明する。
本発明の製造方法は、光学活性な高分子化合物を担体に担持させる際に、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加する工程を含むものであり、前記工程を含む製造方法としては、下記の各工程を具備する製造方法を挙げることができる。
まず、最初の工程において、溶媒を用いて、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を、担体に担持させる。なお、本発明においては、光学活性な高分子化合物は担体に直接担持されているものであるが、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物は担体に直接担持しているのではなく、光学活性な高分子化合物に物理的に又は化学的に結合されることにより、間接的に担体に担持されているものである。
この工程においては、
（１）光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の溶媒溶液を調製した後、前記溶液中に担体を浸漬するか、又は前記溶液を担体に塗布するなどの方法により、前記溶液と担体を接触させ、担持させる方法；
（２）光学活性な高分子化合物の溶媒溶液を調製した後、前記溶液中に担体を浸漬する方法により、前記溶液と担体を接触担持させ、更に前記溶液中に分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を溶解させるか、又は分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の溶媒溶液を添加することにより、担体に接触担持させる方法；
などの処理方法を適用することができる。
本発明でいう「担持」とは、担体に、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が固定化されていることである。この固定化は、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物と担体との間の物理的吸着及び／又は化学的結合によりなされるものである。
物理的吸着は、担体の表面及び／又は担体が有する細孔内部において吸着されていることを意味する。
化学的結合は、担体と光学活性な高分子化合物との結合、担体に物理的吸着された一部の光学活性な高分子化合物と、残部の光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物との結合、架橋剤との反応、ラジカル発生剤との反応又は光照射（γ線などの放射線照射、マイクロ波などの電磁波の照射）による、担体と光学活性な高分子化合物との化学的結合などが含まれる。
なお、担体と光学活性な高分子化合物とを化学的結合させるときには、後工程の分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する工程の前又は後に化学的結合させることが望ましい。
本発明で用いる光学活性な高分子化合物としては、例えば光学活性な置換基を有していない（メタ）アクリル酸エステル又は（メタ）アクリルアミド、光学活性な置換基を有した（メタ）アクリル酸エステル又は（メタ）アクリルアミド、スチレン、アセチレンなどの重合体又は共重合体、多糖とその誘導体、ペプチド、タンパク質などを挙げることができる。
これらの中でも、分離対象化合物に対して不斉識別能力を有する高分子化合物が好ましく、特に不斉識別能力を有することで知られている（メタ）アクリル酸エステルや（メタ）アクリルアミドの重合体又は共重合体、多糖とその誘導体、タンパク質などが好ましく、側鎖に光学活性な置換基を有する（メタ）アクリルアミドや（メタ）アクリル酸エステルの重合体又は共重合体、多糖とその誘導体がより好ましく、特に多糖誘導体が好ましい。
なお、本明細書で（メタ）アクリル酸エステルとは、アクリル酸エステル又はメタクリル酸エステルを、（メタ）アクリルアミドとは、アクリルアミド又はメタクリルアミドを意味する。
多糖は、合成多糖、天然多糖及び天然物変成多糖のいずれかを問わず、光学活性であればいかなるものでもよいが、結合様式の規則性の高いものが好ましい。
このような多糖としては、β−１，４−グルカン（セルロース）、α−１，４−グルカン（アミロース、アミロペクチン）、α−１，６−グルカン（デキストラン）、β−１，６−グルカン（ブスツラン）、β−１，３−グルカン（例えばカードラン、シゾフィランなど）、α−１，３−グルカン、β−１，２−グルカン（Ｃｒｏｗｎ Ｇａｌｌ多糖）、β−１，４−ガラクタン、β−１，４−マンナン、α−１，６−マンナン、β−１，２−フラクタン（イヌリン）、β−２，６−フラクタン（レバン）、β−１，４−キシラン、β−１，３−キシラン、β−１，４−キトサン、α−１，４−Ｎ−アセチルキトサン（キチン）、プルラン、アガロース、アルギン酸などを挙げることができ、その他、アミロースを含有する澱粉も含まれる。
これらの中では、高純度の多糖を容易に入手できる観点から、セルロース、アミロース、β−１，４−キシラン、β−１，４−キトサン、キチン、β−１，４−マンナン、イヌリン、カードランなどが好ましく、特にセルロース、アミロースが好ましい。
多糖の数平均重合度（１分子中に含まれるピラノースあるいはフラノース環の平均数）は、５以上、好ましくは１０以上であり、特に上限はないが、１０００以下であることが取り扱いの容易さの点で望ましい。
多糖誘導体とは、上記のような多糖の水酸基の一部又は全部が、水酸基と反応し得る官能基を有する化合物と、エステル結合、ウレタン結合又はエーテル結合などにより結合している化合物である。
ここで水酸基と反応しうる官能基を有する化合物としては、置換又は非置換の芳香族、脂肪族、脂環式のカルボン酸、酸ハロゲン化物、酸無水物、酸エステルなどのカルボン酸誘導体、置換又は非置換の芳香族、脂肪族、脂環式イソシアン酸誘導体、アルコール又はその他脱離基を有する化合物であればいかなるものでもよく、光学活性基を有していても有していなくても構わない。
多糖誘導体として好ましいのは、多糖のエステル誘導体、カルバメート誘導体であり、特に１グルコースユニットあたり０．１個以上のエステル結合又はウレタン結合を有する多糖のエステル誘導体又はカルバメート誘導体が好ましい。
光学活性な高分子化合物の使用量は、担体における担体質量に対する担持量が、好ましくは１〜１００質量％となる量、より好ましくは５〜６０質量％となる量、更に好ましくは１０〜４０質量％となる量である。
本発明で用いる分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物は、次の（Ｉ）及び（ＩＩ）のものを挙げることができる。
（Ｉ）光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物。ここで「類似構造化合物」とは、分離対象化合物に類似の官能基を有しており、メチレン鎖が増減している、置換基が増減している、官能基の位置が異なる、官能基の種類が異なることで、分子サイズが例えば炭素１〜５程度大きな、又は１〜５程度小さな構造を有した化合物であり、例示すれば、１−フェニル−２−プロパノールに対して、１−フェニルエタノール、２−フェニル−２−プロパノール、１−フェニル−２−ブタノール、２−フェニル−２−ブタノール、３−フェニル−２−ブタノール、１−置換フェニル−２−プロパノール、１−（１−ナフチル）−２−プロパノール、１−（２−ピリジル）−２−プロパノール、１−シクロヘキシル−２−プロパノールなど、１−（１−ナフチル）−エタノールに対して、１−（９−アントリル）−エタノールなどは類似構造化合物となる。
その他、「類似構造化合物」とは、不斉炭素近傍の環境が類似しているものも含む。
（ＩＩ）光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない化合物、好ましくは分子量が４０〜１０００、より好ましくは分子量が６０〜６００の環状構造を有する化合物である。
（Ｉ）及び（ＩＩ）の化合物は、水酸基、カルボニル基、アミノ基、カルボキシル基などのヘテロ原子団などの極性官能基、ベンゼン環などのπ電子相互作用に関与する官能基を有するもの、ラセミ体（±）、光学活性体（＋）又は（−）が好ましい。
（Ｉ）の化合物は、分子量が４０以上、好ましくは６０〜１０００、より好ましくは１００〜５００である。
分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の使用量は、担体に担持された光学活性な高分子化合物の質量に対して、好ましくは０．０１〜１０００質量％となる量、より好ましくは０．０１〜２００質量％となる量、更に好ましくは０．０１〜３０質量％となる量である。
本発明で用いる担体としては、多孔質有機担体又は多孔質無機担体を挙げることができ、好ましくは多孔質無機担体である。多孔質有機担体として適当なものは、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリアクリレートなどからなる高分子物質であり、多孔質無機担体として適当なものは、シリカ、アルミナ、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、ケイ酸塩、ヒドロキシアパタイトなどである。
特に好ましい担体はシリカゲルであり、シリカゲルの粒径は０．１μｍ〜１０ｍｍ、好ましくは１μｍ〜３００μｍ、更に好ましくは１〜１００μｍであり、平均孔径は１０Å〜１００μｍ、好ましくは５０〜５００００Åである。シリカゲルの表面は、残存シラノールの影響を排除するために表面処理が施されていることが望ましいが、全く表面処理が施されていなくても問題ない。
本発明で用いる溶剤は、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が溶解可能であれば、通常使用されている有機溶剤のいかなるものでも良い。
このような溶剤としては、アセトン、エチルメチルケトン、アセトフェノンなどのケトン系溶剤；酢酸エチル、酢酸メチル、酢酸プロピル、プロピオン酸メチル、酢酸フェニルなどのエステル系溶剤；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、アニソールなどのエーテル系溶剤；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどのアミド系溶剤、Ｎ，Ｎ−ジメチルイミダゾリジノンなどのイミド系溶剤；クロロホルム、塩化メチレン、四塩化炭素、１，２−ジクロロエタン、ペンタフルオロエタノールなどのハロゲン系溶剤；ペンタン、石油エーテル、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ベンゼン、トルエン、キシレン、メシチレンなどの炭化水素系溶剤；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール系溶剤、酢酸、トリフルオロ酢酸、ギ酸などの酸系溶剤；フェノール、カテコールなどのフェノール系溶剤、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、アニリンなどのアミン系溶剤を挙げることができる。
このような溶剤を用いて光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の溶液を調製するとき、溶液濃度は特に制限されるものではなく、担体との接触担持処理の容易さと、後工程における溶剤の除去処理を考慮して決定する。
次の工程において、担体に、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を担持させるために用いた溶剤を除去する。
この工程における溶剤の除去処理では、依然として光学活性な高分子化合物は担体に直接的に担持され、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物は担体に間接的に担持された状態を維持している。
次の工程において、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が担体に担持された状態で洗浄し、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する。
洗浄方法としては、アセトニトリル、アルコール、ヘキサン、又はヘキサンとアルコールの混合溶媒などを用いて、０℃から還流温度の何れかの温度下で還流する方法などを適用することができる。
還流法を適用した場合の溶媒の使用量は、光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が担持された担体の質量の３〜５０倍量程度である。
この工程の洗浄処理後における分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の残存量は、最終的に光学異性体分離用分離剤としたとき前記分離剤中において、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは２質量％以下、更に好ましくは０．５質量％以下であり、前記数値以下であれば、不純物として分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が含有されていてもよい。
また、工程の洗浄処理後における分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物は実質的に除去することもできる。
本発明の製造方法により得られた光学異性体分離用分離剤は、担体に光学活性な高分子化合物が担持され、更に製造原料として添加され、担持されていた分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が除去されているものである。
本発明の製造方法により得られた光学異性体分離用分離剤は、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、上記した（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物であり、前記光学異性体分離用分離剤を用いて光学異性体を分離するとき、
次式：
分離係数（α）＝（より強く保持される対掌体の保持係数）／（より弱く保持される対掌体の保持係数）
保持係数（ｋ’）＝［（対掌体の保持時間）−（デッドタイム）］／（デッドタイム）
〔このとき、デッドタイムはトリ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼンの溶出時間をデッドタイムとした。〕
により求められる分離係数（α）による分離性能が式（Ａ）又は式（Ｂ）で示されるものであることが望ましい。
（Ａ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＝１．００）
（Ｂ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＞１．００）
α_１：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加して得た光学異性体分離用分離剤の分離係数である。
α_２：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加しないで得た光学異性体分離用分離剤の分離係数であり、α_２＝１．００は全く分離されていなかったことを意味し、α_２＞１．００は分離されていたことを意味する。
式（Ａ）は、α_２＝１．００、即ち、製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加しないで得た光学異性体分離用分離剤を用いた場合は、全く分離しなかったものの分離性能が、本発明の光学異性体分離用分離剤では５％以上向上されたことを示すものである。
式（Ｂ）は、α_２＞１．００、即ち、製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加しないで得た光学異性体分離用分離剤を用いた場合における分離性能が、本発明の光学異性体分離用分離剤では５％以上向上されたことを示すものであり、本発明では、式（Ｂ）で規定される分離性能が好ましくは１０％以上、より好ましくは１５％以上、更に好ましくは２０％以上向上されたものである。
本発明の光学異性体分離用分離剤は、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、超臨界クロマトグラフィー、キャピラリー電気泳動などのクロマトグラフィー用の固定相として用いることができるが、特に液体クロマトグラフィー用キラル固定相として用いるのが好ましい。また、擬似移動床方式に代表される連続式液体クロマト分取用固定相としても好適に用いることができる。このような本発明の分離剤を用いて光学異性体を効率よく分離することができる。
産業上の利用の可能性
本発明によると、光学異性体分離用分離剤の分離性能を大きく向上させることができ、特にクロマトグラフィー用固定相、連続式液体クロマト分取用固定相として適している。
実施例
本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
以下における化合物表示は、次の化合物１〜１６から選ばれるいずれかの化合物であり、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物及び分離対象化合物については、立体配置（Ｓ，Ｒ）、旋光性（Ｄ，Ｌ）、ラセミ体の表示と各化合物番号を組み合わせ、例えば、化合物１のものがＳ配置であるときはＳ−１と表示し、ラセミ体であるときはラセミ体−１のように表示する。

実施例１
▲１▼担体（シリカゲル）の表面処理
多孔質シリカゲル（粒径７μｍ，微細孔１０００Å）を、公知の方法により３−アミノプロピルトリエトキシシランと反応させることにより、アミノプロピルシラン処理をした。
▲２▼光学活性な高分子化合物の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）１５０ｍｌに、絶乾状態の塩化リチウム１５．０ｇを溶解させ、ＤＭＡｃ／ＬｉＣｌ溶液を調製した。
窒素雰囲気下、セルロース１０．０ｇに、上記のＤＭＡｃ／ＬｉＣｌ溶液１５０ｍｌ及びピリジン１５０ｍｌを添加後、１００℃の油浴に浸漬し、２４時間攪拌した。その後、４−メチルベンゾイルクロリド５０ｇを添加し、１００℃で１６時間反応させた。
反応液を２Ｌのメタノール中に滴下し、再沈殿させ、遠心分離することにより、下記式で表される目的とするセルローストリス（４−メチルベンゾエート）を得た。

▲３▼光学異性体分離用分離剤の作製
上記▲２▼で得たセルロース（４−メチルベンゾエート）０．８ｇ及び化合物（Ｓ−１）５０６．０ｍｇ〔セルローストリス（４−メチルベンゾエート）のグルコースユニットに対して２倍モル当量）を塩化メチレンに溶解させてドープを調製し、このドープを上記▲１▼で得たシリカゲル３．２ｇに塗布した。塗布後、塩化メチレンを留去し、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た。この分離剤ｎ−ヘキサン／２−プロパノールの混合溶剤を加え、良く攪拌した後、濾過し、濾過液を濃縮し、４９５．６ｍｇの（Ｓ−１）を回収した。
▲４▼ＨＰＬＣ用充填カラムの作製
長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムに、上記▲３▼で得た光学異性体分離用分離剤を、ｎ−ヘキサン／２−プロパノールの混合溶剤を用いたスラリー充填法により充填し、光学異性体用分離カラムを得た。
光学異性体分離用分離剤中のＳ−１残存量：５０６．０−４９５．６＝１０．４ｍｇ
Ｓ−１の溶出割合：４９５．６／５０６．０×１００＝９７．９％
光学異性体用分離カラムの分離剤中のＳ−１残存量：
（５０６．０−４９５．６）／４０００×１００＝０．２６％
実施例２
▲１▼担体（シリカゲル）の表面処理
実施例１と同様にして、アミノプロピルシラン処理をしたシリカゲルを得た。
▲２▼光学活性な高分子化合物の合成
窒素雰囲気下、ピリジン３００ｍｌにアミロース１０．０ｇを添加後、１００℃の油浴に浸漬し、これに（Ｓ）−フェニルエチルイソシアネート５０ｇを添加し、１００℃で４８時間反応させた。反応液を２Ｌのメタノール中に滴下し、再沈殿させ、遠心分離することにより、下記式で表される目的とするアミローストリス〔（Ｓ）−フェニルエチルカルバメート〕を得た。

▲３▼光学異性体分離用分離剤の作製
上記▲２▼で得たアミローストリス〔（Ｓ）−フェニルエチルカルバメート〕０．８ｇ及び（Ｓ−１）４３５．６５ｍｇ（アミローストリス〔（Ｓ）−フェニルエチルカルバメート〕のグルコースユニットに対して２倍モル当量）をＴＨＦに溶解させてドープを調製し、このドープを上記▲１▼で得たシリカゲル３．２ｇに塗布した。塗布後、ＴＨＦを留去し、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た。この分離剤ｎ−ヘキサン／２−プロパノールの混合溶剤を加え、良く攪拌した後、濾過し、濾過液を濃縮し、４１６．０ｍｇの（Ｓ−１）を回収した。
▲４▼ＨＰＬＣ用充填カラムの作製
実施例１と同様にして、光学異性体用分離カラムを得た。
光学異性体分離用分離剤中のＳ−１残存量：１９．６ｍｇ
Ｓ−１の溶出割合：９５．５％
光学異性体用分離カラムの分離剤中のＳ−１残存量：０．４９％
実施例３
▲１▼担体（シリカゲル）の表面処理
実施例１と同様にして、アミノプロピルシラン処理をしたシリカゲルを得た。
▲２▼光学活性な高分子化合物の合成
実施例２と同様にして、下記式で表される目的とするセルローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）を得た。

▲３▼光学異性体分離用分離剤の作製
上記▲２▼で得たセルローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）０．８ｇ及び（Ｓ−１）４３５．９ｍｇ〔セルローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）のグルコースユニットに対して２倍モル〕をアセトンに溶解させてドープを調製し、このドープを上記▲１▼で得たシリカゲル３．２ｇに塗布した。塗布後、アセトンを留去し、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た。この分離剤ｎ−ヘキサン／２−プロパノールの混合溶剤を加え、良く攪拌した後、濾過し、濾過液を濃縮し、４２０．６ｍｇの（Ｓ−１）を回収した。
▲４▼ＨＰＬＣ用充填カラムの作製
実施例１と同様にして、光学異性体用分離カラムを得た。
光学異性体分離用分離剤中のＳ−１残存量：１５．３ｍｇ
Ｓ−１の溶出割合：９６．５％
光学異性体用分離カラムの分離剤中のＳ−１残存量：０．３８％
実施例４
▲１▼担体（シリカゲル）の表面処理
実施例１と同様にして、アミノプロピルシラン処理をしたシリカゲルを得た。
▲２▼光学活性な高分子化合物の合成
実施例２と同様にして、下記式で表される目的とするアミローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）を得た。

▲３▼光学異性体分離用分離剤の作製
上記▲２▼で得たアミローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）０．８ｇ及び（Ｓ−１）４３６．３ｍｇを酢酸エチルに溶解させてドープを調製し、このドープを上記▲１▼で得たシリカゲル３．２ｇに塗布した。塗布後、酢酸エチルを留去し、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た。この分離剤ｎ−ヘキサン／２−プロパノールの混合溶剤を加え、良く攪拌した後、濾過し、濾過液を濃縮し、４２７．６ｍｇの（Ｓ−１）を回収した。
▲４▼ＨＰＬＣ用充填カラムの作製
実施例１と同様にして、光学異性体用分離カラムを得た。
光学異性体分離用分離剤中のＳ−１残存量：８．７ｍｇ
Ｓ−１の溶出割合：９８％
光学異性体用分離カラムの分離剤中のＳ−１残存量：０．２２％
実施例５〜２４
表１に示す分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を使用し、それぞれ実施例１〜３と同様の製造方法により、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た後、光学異性体用分離カラムを得た。

比較例１
実施例１と同様にして、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た後、光学異性体用分離カラムを得た。但し、（Ｓ−１）は添加しなかった。
比較例２
実施例２と同様にして、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た後、光学異性体用分離カラムを得た。但し、（Ｓ−１）は添加しなかった。
比較例３
実施例３と同様にして、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た後、光学異性体用分離カラムを得た。但し、（Ｓ−１）は添加しなかった。
比較例４
実施例４と同様にして、目的とする光学異性体分離用分離剤を得た後、光学異性体用分離カラムを得た。但し、（Ｓ−１）は添加しなかった。
応用例１〜４５
実施例１〜２４、比較例１〜４で得られた光学異性体用分離カラムを用い、液体クロマトグラフィー（日本分光社製の液体クロマトグラフ装置）により、α値を測定した。測定条件は、移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール＝９０／１０、流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、温度：２５℃、検出波長：２５４ｎｍである。結果を表２〜表４に示す。
表中の判定は、同一、類似又は非類似の判定であり、詳細は表の後に記載した。表中のα値の上昇率（％）は、次式：α_１−α_２／α_１×１００から求めた。α＝１．００は、不斉識別が全く行われず、１本のピークのみが観察された状態である。

応用例４、１８：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素がフェニル基の付け根にあり、また不斉炭素の近隣炭素（β位）は、いずれもカルボニル基を有しており、不斉炭素近傍の環境は類似している。
応用例５、８、１６、１９：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素が水酸基の付け根にあり、不斉炭素近傍の環境は類似している。
応用例６、７、９：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素が水酸基の付け根にあり、不斉炭素の隣接炭素（α位）は、いずれもカルボニル基であることから、不斉炭素近傍の環境は類似している。
応用例１０、１２、１４：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素が酸素原子の隣（α位）にあり、また不斉炭素の近隣炭素（β位）は、いずれもカルボニル基を有しており、不斉炭素近傍の環境は類似している。
応用例１１：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素が炭素原子に隣接し、分子内にカルボニル基を有することから、不斉炭素近傍の環境は類似している。
応用例１３：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素がトリハロゲノメチル置換基の付け根にあり、不斉炭素近傍の環境は類似している。
応用例１５、１７：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素が酸素原子の隣（α位）にあり、また不斉炭素の近隣には、いずれもカルボニル基を有しており、不斉炭素近傍の環境は類似している。

応用例４０：不斉構造化合物と分離対象化合物は、いずれも不斉炭素が水酸基の付け根にあり、分子全体の構造は、ナフチル基、アントラニル基と類似した縮合環を有していることから、不斉炭素近傍の環境は類似している。

Claims (49)

1. 光学活性な高分子化合物を担体に担持させる際に、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
2. 光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、溶剤を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
3. 光学活性な高分子化合物及び分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、溶剤を除去する工程、洗浄して分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
4. 光学活性な高分子化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、更に前記担体に分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を担持させる工程、溶剤を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
5. 光学活性な高分子化合物を、溶媒を用いて担体に担持させる工程、更に前記担体に分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を担持させる工程、溶剤を除去する工程、洗浄して分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する工程を具備することを特徴とする新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
6. 担体と光学活性な高分子化合物との担持が、物理的吸着によるものである請求項１〜５のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
7. 担体と光学活性な高分子化合物との担持が、化学的結合によるものである請求項１〜５のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
8. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する前又は後に、担体と光学活性な高分子化合物とを化学的結合させる請求項７記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
9. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を除去する前又は後に、架橋剤との反応、ラジカル発生剤との反応又は光照射により、担体と光学活性な高分子化合物とを化学的結合させる請求項７記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
10. 光学活性な高分子化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物に対して不斉識別能力を有するものである請求項１〜９のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
11. 光学活性な高分子化合物が、多糖誘導体である請求項１〜１０のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
12. 光学活性な高分子化合物が、多糖のエステル誘導体又はカルバメート誘導体である請求項１〜１１のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
13. 光学活性な高分子化合物が、セルロース又はアミロースの誘導体である請求項１〜１２のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
14. 光学活性な高分子化合物が、側鎖に光学活性な置換基を有するアクリルアミド、メタクリルアミド、アクリル酸エステル又はメタクリル酸エステルの重合体又は共重合体である請求項１〜１０のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
15. 担体における光学活性な高分子化合物の担持量が、担体質量に対して１〜１００質量％となる量である請求項１〜１４のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
16. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物である請求項１〜１５のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
17. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない請求項１〜１５のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
18. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない、分子量が４０〜１０００の環状構造を有する化合物である請求項１７記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
19. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、ラセミ体及び／又は光学活性体である請求項１〜１８のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
20. 担体における分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の担持量が、光学活性な高分子化合物の質量に対して０．０１〜１０００質量％となる量である請求項１〜１９のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
21. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の残存量が、光学異性体分離用分離剤中において１０質量％以下である請求項１〜２０のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
22. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が実質的に除去されている請求項１〜２０のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
23. 請求項１〜２２のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法であり、
    分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物であり、得られた光学異性体分離用分離剤を用いて光学異性体を分離するとき、
    次式：
    分離係数（α）＝（より強く保持される対掌体の保持係数）／（より弱く保持される対掌体の保持係数）
    保持係数（ｋ’）＝［（対掌体の保持時間）−（デッドタイム）］／（デッドタイム）
    により求められる分離係数（α）による分離性能が式（Ａ）又は式（Ｂ）で示されるものである、新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
    （Ａ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＝１．００）
    （Ｂ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＞１．００）
    α_１：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加して得た光学異性体分離用分離剤の分離係数である。
    α_２：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加しないで得た光学異性体分離用分離剤の分離係数であり、α_２＝１．００は全く分離されていなかったことを意味し、α_２＞１．００は分離されていたことを意味する。
24. 請求項１〜２２のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法であり、
    分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない化合物であり、得られた光学異性体分離用分離剤を用いて光学異性体を分離するとき、
    次式：
    分離係数（α）＝（より強く保持される対掌体の保持係数）／（より弱く保持される対掌体の保持係数）
    保持係数（ｋ’）＝［（対掌体の保持時間）−（デッドタイム）］／（デッドタイム）
    により求められる分離係数（α）による分離性能が式（Ａ）又は式（Ｂ）で示されるものである、新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
    （Ａ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＝１．００）
    （Ｂ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＞１．００）
    α_１：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加して得た光学異性体分離用分離剤の分離係数である。
    α_２：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加しないで得た光学異性体分離用分離剤の分離係数であり、α_２＝１．００は全く分離されていなかったことを意味し、α_２＞１．００は分離されていたことを意味する。
25. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない、分子量が４０〜１０００の環状構造を有する化合物である請求項２４記載の新規な光学異性体分離用分離剤の製造方法。
26. 担体に光学活性な高分子化合物が担持され、更に製造原料として添加され、担持されていた分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が除去されている光学異性体分離用分離剤。
27. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の残存量が、光学異性体分離用分離剤中において１０質量％以下である請求項２６記載の光学異性体分離用分離剤。
28. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が実質的に除去されている請求項２６又は２７記載の新規な光学異性体分離用分離剤。
29. 担体と光学活性な高分子化合物との担持が、物理的吸着によるものである請求項２６〜２８のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤。
30. 担体と光学活性な高分子化合物との担持が、化学的結合によるものである請求項２６〜２８のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤。
31. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が除去される前又は後に、担体と光学活性な高分子化合物とが化学的結合されている請求項３０記載の新規な光学異性体分離用分離剤。
32. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が除去される前又は後に、架橋剤との反応、ラジカル発生剤との反応又は光照射により、担体と光学活性な高分子化合物とが化学的結合されている請求項３０記載の新規な光学異性体分離用分離剤。
33. 光学活性な高分子化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物に対して不斉識別能力を有するものである請求項２６〜３２のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
34. 光学活性な高分子化合物が、多糖誘導体である請求項２６〜３３のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
35. 光学活性な高分子化合物が、多糖のエステル誘導体又はカルバメート誘導体である請求項２６〜３４のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
36. 光学活性な高分子化合物が、セルロース又はアミロースの誘導体である請求項２６〜３５のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
37. 光学活性な高分子化合物が、側鎖に光学活性な置換基を有するアクリルアミド、メタクリルアミド、アクリル酸エステル又はメタクリル酸エステルの重合体あるいは共重合体である請求項２６〜３３のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
38. 担体における光学活性な高分子化合物の担持量が、担体質量に対して１〜１００質量％となる量である請求項２６〜３７のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
39. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物である請求項２６〜３８のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
40. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない請求項２６〜３８のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
41. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない、分子量が４０〜１０００の環状構造を有する化合物である請求項４０記載の新規な光学異性体分離用分離剤。
42. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、ラセミ体及び／又は光学活性体である請求項２６〜４１のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤。
43. 担体における分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物の担持量が、光学活性な高分子化合物の質量に対して０．０１〜１０００質量％となる量である請求項２６〜４２のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤。
44. 請求項２６〜４３のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤であり、
    分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物であり、前記光学異性体分離用分離剤を用いて光学異性体を分離するとき、
    次式：
    分離係数（α）＝（より強く保持される対掌体の保持係数）／（より弱く保持される対掌体の保持係数）
    保持係数（ｋ’）＝［（対掌体の保持時間）−（デッドタイム）］／（デッドタイム）
    により求められる分離係数（α）による分離性能が式（Ａ）又は式（Ｂ）で示されるものである、光学異性体分離用分離剤。
    （Ａ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＝１．００）
    （Ｂ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＞１．００）
    α_１：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加して得た光学異性体分離用分離剤の分離係数である。
    α_２：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加しないで得た光学異性体分離用分離剤の分離係数であり、α_２＝１．００は全く分離されていなかったことを意味し、α_２＞１．００は分離されていたことを意味する。
45. 請求項２６〜４３のいずれかに記載の新規な光学異性体分離用分離剤であり、
    分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない化合物であり、前記光学異性体分離用分離剤を用いて光学異性体を分離するとき、
    次式：
    分離係数（α）＝（より強く保持される対掌体の保持係数）／（より弱く保持される対掌体の保持係数）
    保持係数（ｋ’）＝［（対掌体の保持時間）−（デッドタイム）］／（デッドタイム）
    により求められる分離係数（α）による分離性能が式（Ａ）又は式（Ｂ）で示されるものである、光学異性体分離用分離剤。
    （Ａ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＝１．００）
    （Ｂ）α_１／α_２≧１．０５（但し、α_２＞１．００）
    α_１：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加して得た光学異性体分離用分離剤の分離係数である。
    α_２：製造工程において、分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物を添加しないで得た光学異性体分離用分離剤の分離係数であり、α_２＝１．００は全く分離されていなかったことを意味し、α_２＞１．００は分離されていたことを意味する。
46. 分子量が１０００以下の不斉構造を有する化合物が、光学異性体分離用分離剤とした場合における分離対象化合物又はその類似構造化合物ではない、分子量が４０〜１０００の環状構造を有する化合物である請求項４５記載の光学異性体分離用分離剤。
47. 請求項２６〜４６のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤を用いたクロマトグラフィー用固定相。
48. 請求項２６〜４６のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤を用いた連続式液体クロマト分取用固定相。
49. 請求項２６〜４６のいずれかに記載の光学異性体分離用分離剤を用いた光学異性体の分離方法。