JPS638393A - 新規抗生物質ｓｆ−２４５７物質及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規抗生物質Ｓ　Ｆ−２４５７物質に関するも
のであり、さらにこの抗生物質の７カルデイア属に属す
る生産菌による製造法に関するものである。

従来の技術及び発明が解決しようとする問題点従来、数
多くの抗生物質が発明され、医薬品、動物用薬品、農薬
等の分野で実用化されている。

しかしながら、まだ有効な物質が見い出されないため解
決されていない医療あるいは産業分野が多く残されてい
る。

本発明者らは新規かつ有用な抗生物質の探索を目的とし
て、多数の微生物を土壌より分離し、その産生する抗生
物質を探索したところ、ある種の微生物が新規抗生物質
を生産していることを見出し、さらに詳細に検討したと
ころ、該抗生物質は新規物質であることを見い出した。

本発明は上記の知見に基づいて完成されたものである。

発明の構成 本発明にかかる抗生物質ＳＦ−２４５７物質は下記の理
化学的性状を示す。

１、外観　　　：無色の無定形粉末 ２、融点　　　：１７２〜１７４℃（分解）３、比旋光
度　：［α］６２＋９９．２’　（Ｃ１，０，ＭｅＯｆ
ｌ）４、元素分析値： Ｃ５４，５９％、１１６．２０％、　８１４．０２％５
、分子量　　：５９０（質量分析法）６、分子式　　：
Ｃ２７Ｈ３ＳＮ６Ｏ９７、紫外部吸収スペクトル：（第
１図参照）λ、’：’、’ｎｍ（Ｅ　ｊり　３０３（５
７３）λ０°ＩＮＨＣＬ−ＭｅＯＨｎ、ｎ（Ｅ　Ｆ）２
６０（ｓ、２６０）ｍａ× ３１７（４９３）。

３３０（ｓ、４０７） λ０．　ＩＮＮａＯＨ−ＭｅＯＨｎｍ（Ｅ　Ｆ）２７２
（３６０）。

＋ｎａｘ ８、赤外部吸収スペクトル：　（第２図参照）ｖＫＢｒ
ｃｍ−’　３３５０．１６５０．１６００．１５６０゜
ｎａＸ １４８０、１４０５．１３８０．１３３０゜１３００、
１２５０．１１９０．１０８０゜７９０゜ ９、ＩＨ核磁気共鳴スペクトル ：（第３図参照、４００ＭＨｚ、Ｄ２０）δｐｐ＋ｎ（
Ｊ　＝Ｈｚ）　　１．４０（ｄ　３ＨＪ　＝６．２）。

１．４３（ｃｌ　３ＨＪ　＝６．２）。

１．６７（ｄ３ＨＪ　＝７．２）。

１．８２（ｄｄｃｌ　ＩＨＪ＝比０．１１．３．１２．
８）。

２．３７（ｃｌｄｄ　ＩＨＪ＝２．１．５．０．１２．
８）。

２．８２（ｓ　　３Ｈ） 、　３．１３（ｄｄ　ＩＨＪ＝１０．３．１０．３）。

３．４０（ｄｄ　ＩＨＪ＝８．８．９．２）３．７４（
ｄｄ　ＩＨＪ＝４．０．９．５）。

３．７６（ｄｑ　ＩＨＪ　＝６．２．９．２）４．０４
（ｄｄ　ＩＨＪ＝９．５．１０．３）。

４．１０（ｃｌｄｄ　ＩＨＪ　＝５．０．８．Ｓ、　１
１．３）４．２７（ｄｑ　ＩＨＪ＝６．２．１０．３）
４．２９（ｑ　ＩＨＪ＝７．２） ５．４１（ｄ　ＩＨＪ＝４．０）。

５．７６（ｄｄ　ＩＨＪ　＝２．１．１１．０）７．３
１（ｄ　ＩＨＪ＝７．６）。

７．６３（ｄ　２ＨＪ　＝９．０） ７．８５（ｄ　２ＨＪ＝９．０）。

８．２３（ｄ　ＩＨＪ＝７．６） １０、　’３Ｃ核磁気共鳴スペクトル ：（第４図参照＋　１００ＭＨｚ、Ｄ、ｏ。

内部基準ジオキサン（δ値６，７４））δｐｐｍ　１７
．７（ｑＬ　１７．９（ｑ）ｙ　１８．７（ｑ）３０．
８（ｑ）、　３８．１（ｔ）、　５０．８（ｄ）、　６
３．７（ｄ）。

６４．７（ｄ）、　６７．６（ｄ）、　７１，６（ｄ）
、　７３．２（ｄ）。

７４．５（ｄ）、　８２．１（ｄ）、　８５．３（ｄ）
、　９９．１（ｄ）。

１００．７（ｄ）、　１２１．０（ｓ）、　１２３．８
（ｄＸ２）。

１３０．２（ｄＸ２）、　１４２．２（ｓ）、　１４７
，０（ｄ）。

１５５．２（ｓ）、　１６３．０（ｓ）、　１６８．４
（ｓ）。

１６９．８（ｓ） １１、゛塩基性、酸性、中性の区別　：　塩基性１２、
呈色反応：　陽性　ニンヒドリン試薬。

１０％硫酸試薬 陰性　塩化第二鉄試薬 １３、　溶Ｊｌ性　：　水、メタノール、エタノールに
溶けやすく、酢酸エチル、ベンゼン。

クロロホルムには溶けない。

上記の理化学的性状よｒ）　Ｓ　Ｆ　−２４５７物質の
化学構造は下記の構造式で表わされるものであると決定
した。

Ｓ　Ｆ−２４５７物質生産菌の一例としては本発明者ら
により三重県鳥羽市の土壌より新たに分離されたＳ　Ｆ
−２４５７株がある。Ｓ　Ｆ　−２４５７株の菌学的性
状は次の通りである。

１、形態学的性質 基生菌糸はよく伸長分岐し、しばしば分裂する。

イースト麦芽寒天やチロシン寒天培地上で気菌糸の着生
らさかんである。気菌糸の分岐は単純分岐で、車軸分岐
は認められない。気菌糸の先端は、しぼしぼジグザグ状
になり、培養が進むに従ってウィンナ−・ソーセージ様
に分断する。分裂した個々の断片は０．４〜０．５Ｘ１
．Ｏ−１，５ミクロンの桿菌状、表面は平滑で通常１０
〜５０ｇＪ程度連鎖する。胞子の運動性は認められない
。胞子のう、菌核などの特殊構造は基生菌糸、気菌糸の
いずれにも観察されない。

■、各種培地上の生育状態 ＳＦ　　２４５７株の各種培地上の生育状態は次表に示
す通りである。色の記載について（）内に示す標準はフ
ンティナー・コーポレーション・オブΦアメリカ（Ｃｏ
ｎｔａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐｏｒａｊｉｏｎ　ｏｆΔｍｅ
ｒｉｃａ）社製の「カラー・ハーモニイー・マニアル（
ＣｏｌｏｒＨａｒｍｏｎｙ　Ｍａｎｕａｌ）Ｊに記載の
ものを用いた６観察は２８℃で１４〜２１日培養後に行
った。

■、生理的性質 （１）生育温度範囲：１５〜３５℃の温度範囲で生育し
、２５〜３０℃で良好に生育する。

（２）ゼラチンの液化　　：陰性 （３）スターチの加水分解：陰性 （４）硝酸塩の還元　　　：陰性 （５）脱脂乳のペプトン化：陽性 脱脂乳の凝固　　　：陰性 （６）耐塩性　：３％ＮａＣｌ添加寒天培地上で生育す
るが、４％以上では生育しない。

（７）メラニン様色素の生ｆ＃、：陰性■、炭素源の利
用性 （１）利用する：Ｄ−グルフース、Ｄ−７ラクトース。

グリセロール、Ｄ−マンニトール。

ｉ−イノシトール （２）利用しない ＝Ｄ−キシロース、Ｌ−アラビ／−ス。

Ｄ−７ラビノース、ラフィノース。

Ｌ−ラムノース、シュークロース ■、細胞壁組成 全菌体加水分解中のアミノ酸として、メソ型ジアミ／ピ
メリン酸を有し、糖としてＭ量のアラビノース、〃ラク
トースが検出された。

以上の菌学的性状からＳ　Ｆ　−２４５７株は放線菌の
中で、メカルディア属に所属すると判定した。

従って本発明者らは本菌株をノカルディア・エスピー（
Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｓｐ、　）Ｓ　Ｆ−２４５７と称す
ることとした。　なお本菌株は工業技術院微生物工業技
術研究所に昭和６１年３月１７日以来寄託されており、
その寄託番号は微工研菌寄第８７０１号（ＦＥＲＭ　　
Ｐ−８７０１）である。

Ｓ　Ｆ−２４５７株は他の放線菌の場合に見られるよう
に、その性状が変化しやすい。例えば、ＳＦ−２４５７
株の、またはこの株に由来する突然変異株（自然発生ま
たは誘発性）、形質接合体または遺伝子組換え体であっ
ても、抗生物質Ｓ　Ｆ−２４５７物質を生産するものは
、全て本発明に使用出来る。本発明の方法では、前記の
菌を通常の微生物が利用しうる栄養物を含有する培地で
培養する。栄を源としては、グルコース、水あめ、デキ
ストリン、シュクロース、澱粉、糖みつ、勤・植物油等
を使用できる。また窒素源として大豆粉、小麦はい芽、
コーンステイープリカー、綿実かす、肉エキス、ペプト
ン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソーダ、尿素
等を使用できる。その池、必要に応じ、ナトリウム、カ
リウム、カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩素、
燐酸、硫酸、及びその他のイオンを生成することができ
る黒磯塩類を添加することは有効である。また菌の発育
を助け、抗生物質Ｓ　Ｆ−２４５７物質の生産を促進す
るような有（幾及び無機物をＭ当に添加することができ
る。

培養法としては、好気的条件での培養法、特に深部培養
法か最も適している。培養に適当な温度は１５〜３５゛
Ｃであるが、多くの場合、２５〜２Ｓ’Ｃ付近で培養す
る。抗生物質Ｓ　Ｆ−２４５７物質の生産は、培地や培
養条件により異なるが、振盪培養、タンク培養とも通常
２〜１０日の間でその蓄積が最高に達する。培養物中の
抗生物質Ｓ　Ｆ　−２４５７物質の蓄積量が最高になっ
った時に培養を停止し、培養物から目的物質を単離精製
する。Ｓ　Ｆ−２４５７物質を培養物から採取するには
、通常発酵生産物を培養物から分離採取する方法に準す
る。

°　例えば、濾過、遠心分離、各種活性吸着剤による吸
脱着やクロマトグラフィー、各種有機溶媒による抽出な
どを適宜組合せて行なうとよい。

次に本発明の実施例を示すが、これらは単なる一例であ
って本発明を限定するものではない。ここに例示しなか
った多くの変法あるいは（ｌ飾手段を用いうろことは勿
論のことである。

実施例１ （１）種培地として、スターチ２．０％、グルコース１
．０％、小麦胚芽０．６％、ポリペプ）ン０．５％、酵
母エキス０．３％、大豆粉０．２％、炭酸カルシウム０
．１％を含む培地を用いた。また、生産培地として、グ
リセリン４．０％、綿実粕１．３％、小麦胚芽２゜０％
、コーンステイープリカー１．３％、炭酸カルシウム０
．２％、塩化コバルト（６水塩）０．００１％を含む培
地を泪いた。なお、殺菌前ｐＨはすべてｐｌｉ７．０に
調製して使用した。

前記種培地２０ｍｊ！を分注したｌｏｏｍρ容三角フラ
スコを１２０℃で３０分間殺菌し、これに７カルデイア
・エスピー・Ｓ　Ｆ　−２４５７（Ｆ　Ｅ　ＲＭ　Ｐ−
８７０１）の斜面培養の１〜２白金耳を接種し、２８℃
で４日問振盪培養し、第１種培養とした。ついで種培地
８０＋ｎρを分注した５００社容三角フラスコを１２０
℃で３０分間殺菌し、前記第１種培養４ｍｌを接種し、
２８℃で２日問振盪培養し、これを第２種培養とした。

さらに種培地Ｉｌを分注した５１容三角フラスコを１２
０℃で３０分間殺菌し、第２種培養５０社を接種し、２
８℃２日間振盪培養し、これを第３種培養とした。

予め１２０’Ｃ１３０分間殺菌した３５１の生産培地を
含む５０１容ジヤー７アーメンター４基に前記の第２種
培養５０づつ接種し、２８℃、４日間通気（２０１７分
）、攪拌（３００ｒｐｍ）　シて培養した。培養終了後
、濾過助剤として珪藻土を加えて濾過し濾液１００Ｎと
菌体を含む固型物２０ｋｇを得た。

（２）工程（１）て得られた菌体を含む固型物２０ｋｇ
に５０％アセトン水溶液４０１を加え、３０分間攪拌し
有効成分を抽出した。この抽出液を減圧下で濃縮し、ア
セトンを除去し２０１とした。これを濾液と合せ１２０
１とし、ダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化成社！！り６
１のカラムに通し、有効成分を吸着させた。

これを水洗したのち、５０％アセトン水溶液で溶離し、
有効成分を含む溶離液１８１を得た。この溶離液を減圧
下で濃縮しアセトンを除去したのちアン＋ パーライトＣＧ−５０（Ｈ）（ローム・アンド・ハース
社？り５００ｍＮのカラムを通し有効成分を吸着させた
。これを水洗したのち、Ｏ，ＩＮ塩酸で溶出し１５ｇず
つ分画するクロマトグラフィーを行った。分画Ｎｏ、６
５〜２５０に有効成分が存在することがらこれらを集め
ＩＮ苛性ソーダで中和した。これを再度、ダイヤイオン
ＨＰ−２０３００−のカラムを通し、有効成分を吸着さ
せた。これを水洗したのち、５０％アセトン水溶液で溶
離し、有効成分を含む溶離液１．５ρを得た。これを減
圧下で濃縮しアセトンを十 除去したのち、ＣＭ−セファデックスＣ−２５（Ｈａ　
）（ファルマシア社製）５００ｍＮのカラムを通し、有
効成分を吸着させた。これを水洗したのち０．５Ｍ食塩
水で溶出し１０８ずつ分画し、クロマトグラフィーを行
った。分画Ｎｏ、　５３０〜７５０に有効成分が存在す
ることから集め、ダイヤイオンＨＰ−２０のカラム（１
５０Ｊりを通し有効成分を吸着させｊこ。これを水洗し
たのち、５０％アセトン水溶液で溶離し、得られた溶離
液を凍結乾燥し、約７００ｆｆ１ｇのＳ’Ｆ　−２４５
７物質の白色粉末を得た。

灸肌＠処釆 ＳＦ　　２４５７物質の微生物に対する抗菌活性を第１
表に示す。

第１表に示されるように本発明にががる抗生物質ＳＦ　
−２４５７物質はダラム陽性菌及びダラム陰性菌に活性
を示し、医療用及び動物用の抗菌剤として使用しうる。

【図面の簡単な説明】

第１図はＳＦ　−２４５７物質の紫外部吸収スペクトル
を示し、実ｍ（−）は１５ｍｃＨ／ｍｌノメタノール溶
液、破線（−ｍ＝→は１５…ｃｇ／ｍｌのＯ，ＩＮ塩酸
−メタノール溶液、鎖線（−−−）は１５ｍＢ／ｍ　ｌ
の０．　ＩＮ苛性ソーダ・メタノール溶液である。 第２図はＳＦ　−２４５７物質の臭化カリウム錠での赤
外部吸収スペクトルを示す。 第３図はＳＦ　　２４５７物質の重水中での４００Ｍ）
Ｉｚの水素核磁気共鳴スペクトルを示す。 第４図はＳＦ−２４５７物質の重水中での１００ＭＨｚ
の炭素核磁気共鳴スペクトルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）下記の理化学性状を示す新規抗生物質ＳＦ−２４
   ５７物質。 １、外観：無色の無定形粉末 ２、融点：１７２〜１７４℃（分解） ３、比旋光度：［α］＾２＾２＿Ｄ＋９９．２゜（ｃ１
   ．０、ＭｅＯＨ）４、元素分析値： Ｃ５４．５９％、Ｈ６．２０％、Ｎ１４．０２％５、分
   子量：５９０（質量分析法） ６、分子式：Ｃ＿２＿７Ｈ＿３＿ＳＮ＿６Ｏ＿９７、紫
   外部吸収スペクトル：（第１図参照）λ＾Ｍ＾ｅ＾Ｏ＾
   Ｈ＿ｍ＿ａ＿ｘｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ）３０３
   （５７３）λ＾０＾．＾１＾Ｎ＾Ｈ＾Ｃ＾Ｌ＾−＾Ｍ＾
   ｅ＾Ｏ＾＿ｍ＿ａ＿ｘｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ）
   ２６０（ｓ、２６０）３１７（４９３）、 ３３０（ｓ、４０７） λ＾０＾．＾１＾Ｎ＾ａ＾Ｏ＾Ｈ＿ｍ＿ａ＿ｘｎｍ（Ｅ
   ＾１＾％＾１＾ｃ＾ｍ）２７２（３６０）、３２５（５
   ００） ８、赤外部吸収スペクトル：（第２図参照）ν＾Ｋ＾Ｂ
   ＾ｒ＿ｍ＿ａ＿ｘｃｍ＾−＾１３３５０、１６５０、１
   ６００、１５６０、１４８０、１４０５、１３８０、１
   ３３０、１３００、１２５０、１１９０、１０８０、７
   ９０、 ９、＾１Ｈ核磁気共鳴スペクトル ：（第３図参照、４００ＭＨｚ、Ｄ＿２Ｏ）δｐｐｍ（
   Ｊ＝Ｈｚ）１．４０（ｄ３ＨＪ＝６．２）、１．４３（
   ｄ３ＨＪ＝６．２）、 １．６７（ｄ３ＨＪ＝７．２）、 １．８２（ｄｄｄ１ＨＪ＝１１．０、１１．３、１２．
   ８）、２．３７（ｄｄｄ１ＨＪ＝２．１、５．０、１２
   ．８）、２．８２（ｓ３Ｈ） ３．１３（ｄｄ１ＨＪ＝１０．３、１０．３）、３．４
   ０（ｄｄ１ＨＪ＝８．８、９．２） ３．７４（ｄｄ１ＨＪ＝４．０、９．５）、３．７６（
   ｄｑ１ＨＪ＝６．２、９．２） ４．０４（ｄｄ１ＨＪ＝９．５、１０．３）、４．１０
   （ｄｄｄ１ＨＪ＝５．０、８．８、１１．３）４．２７
   （ｄｑ１ＨＪ＝６．２、１０．３）４．２９（ｑ１ＨＪ
   ＝７．２） ５．４１（ｄ１ＨＪ＝４．０）、 ５．７６（ｄｄ１ＨＪ＝２．１、１１．０）７．３１（
   ｄ１ＨＪ＝７．６）、 ７．６３（ｄ２ＨＪ＝９．０） ７．８５（ｄ２ＨＪ＝９．０）、 ８．２３（ｄ１ＨＪ＝７．６） １０、＾１＾３Ｃ核磁気共鳴スペクトル ：（第４図参照、１００ＭＨｚ、Ｄ＿２Ｏ、内部基準ジ
   オキサン（δ値６．７４）） δｐｐｍ１７．７（ｑ）、１７．９（ｑ）、１８．７（
   ｑ）３０．８（ｑ）、３８．１（ｔ）、５０．８（ｄ）
   、６３．７（ｄ）、６４．７（ｄ）、６７．６（ｄ）、
   ７１．６（ｄ）、７３．２（ｄ）、７４．５（ｄ）、８
   ２．１（ｄ）、８５．３（ｄ）、９９．１（ｄ）、１０
   ０．７（ｄ）、１２１．０（ｓ）、１２８．８（ｄ×２
   ）、１３０．２（ｄ×２）、１４２．２（ｓ）、１４７
   ．０（ｄ）、１５５．２（ｓ）、１６３．０（ｓ）、１
   ６８．４（ｓ）、１６９．８（ｓ） １１、塩基性、酸性、中性の区別：塩基性 １２、呈色反応：陽性ニンヒドリン試薬、 １０％硫酸試薬 陰性塩化第二鉄試薬 １３、溶解性：水、メタノール、エタノールに溶けやす
   く、酢酸エチル、ベンゼン、 クロロホルムには溶けない。 （２）ノカルディア属に属するＳＦ−２４５７物質生産
   菌を培養し、培養液からＳＦ−２４５７物質を単離する
   ことを特徴とする新規抗生物質ＳＦ−２４５７物質の製
   造法。