JPH0531552B2

JPH0531552B2 -

Info

Publication number: JPH0531552B2
Application number: JP58214669A
Authority: JP
Inventors: Kazutoshi Mizogami; Michio Yamagishi; Sadafumi Oomura; Nozomi Ootake; Haruo Seto
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1983-11-15
Filing date: 1983-11-15
Publication date: 1993-05-12
Also published as: JPS60105679A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規の抗生物質に関する。本発明の目的は、ある種のグラム陽性菌に対し
て増殖抑制作用を示す新規な抗性物質を提供する
にある。本発明の目的物を生産する菌株は、本発明者ら
が埼玉県浦和市の土壌から新たに分離した菌株で
あり、微生物の名称「ストレプトマイセスハイグ
ロスコピカス（Streptmyces hygroscopicus）
TM−582」および微生物寄託番号「微工研菌寄
第7246号（FERM Ｐ−7246）」として、工業技
術院微生物工業技術研究所に寄託されており、こ
の菌株を培養して得られる本発明の目的物を抗生
物質TM−582と命名した。この菌株の菌学的性状を以下に示す。形態本菌はグリセリン・アスパラギン寒天、イー
スト麦芽寒天およびオートミール寒天培地など
で良好な生育を示し、胞子形成も豊富である。
気中菌糸は豊富に形成され、肉眼的には粉状な
いしビロード状を呈する。胞子着成菌糸は気中菌糸上に着生し、その主
軸より単純分枝して側枝となり、その末端は螺
旋状を呈する。分生胞子は、通常10個以上連鎖
し、電子顕微鏡的に観察するとその形成は卵形
または円筒形で、大きさは0.8〜1.0×1.1〜1.3μ
であり、その表面はこぶ状である。鞭毛胞子、
胞子のう、菌核は認められない。培養上の諸性状１各種培地上で30℃、14日培養した場合の生
育状態を次表に示す。

【表】生理的性質 (1) 生育温度範囲グリセリン・アスパラギン寒天培地におい
て、25〜37℃の温度範囲で良好に生育する。
10℃以下、50℃以上の温度範囲では生育しな
い。 (2) 生化学的性状好気性、嫌気生の区別：好気性ゼラチンの液化：陽性脱脂牛乳の凝固：陰性脱脂牛乳のペプトン化：陽性スターチの加水分解：陽性メラニン様色素の生成：陰性 (3) 炭素源の利用性（プリドハム・ゴドリーブ寒天培地上）利用する。Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ
−グルコース、Ｄ−フラクトース、イノシ
トール、Ｌ−ラムノース、Ｄ−マンニツトわずかに利用する。シユクロース、ラフイノース以上の諸性状から本菌がストレプトマイセス属
に属する放線菌であることは明らかであり、上記
諸性状をワツクスマン著「ジ・アクチノミセテ
ス」第２巻（1961年）およびI.S.P.（ジ・インター
ナシヨナール・ストレプトマイセス・プロジエク
ト）に報告されている多くの既知菌株と比較検討
した結果、同菌株の種の同定上最も基本的かつ重
要な諸性状は、ストレプトマイセス・ハイグロス
コピカス・ワツクスマン・アンド・ヘンリツチ
（Streptomyces hygroscopicus Waksman and
Henrici）（1948年）の性状に極めてよく一致す
ることが認められた。従つて、本菌株はストレプ
トマイセス・ハイグロスコピカスと種を同じくす
る放線菌であると断定し、本菌株をストレプトマ
イセス・ハイグロスコピカスTM−582と命名し
た。抗生物質TM−582の生産は、大略、一般の抗
生物質を産生する場合に準じ、各種栄養物質を含
む培地でストレプトマイセス・ハイグロスコピカ
スTM−582を好気的条件下で培養することによ
り行なう。培地は主として液体培地を用い、1.00〜10.00
重量％の炭素源、0.10〜4.00重量％の窒素源およ
び0.01〜1.00重量％の無機成分からなり、必要が
あれば醗酵中の発泡を抑制するため1.00重量％以
下の消泡剤を添加することができる。最も望まし
い培地は2.0〜6.0重量％の炭素源と0.5〜3.0重量
％の窒素源を含有する。炭素源としては、たとえばグルコース、マルト
ース、シユクロース、スターチ、グリセリン、デ
キストリンなどを単独かまたは混合して用いる。窒素源としては、たとえばペプトン、肉エキ
ス、大豆粉、トリプトン、コーン・ステイプ・リ
カー、酵母エキス、オート・ミールなどを単独か
または混合して用いる。無機成分としては、たとえばマグネシウム、
鉄、マンガンなどのリン酸塩、硫酸塩、塩化物な
どを単独かまたは混合して用いる。消泡剤としては、たとえばアデカノール、シリ
コンなどを用いることができる。培養方法としては、振盪培養、通気撹拌培養な
どの好期的培養が適しており、PH5.5〜8.0、25〜
40℃で２〜５日間、望ましくはPH6.6〜7.0、28〜
35℃で４日間培養する。この培養により生産された抗生物質TM−582
を単離するには、醗酵生産物を採取する一般的な
方法に準じて行なうことができる。すなわち、培養終了後の培養物に低級アルコー
ル、アセトンなどの有機溶媒を加えて活性物質を
抽出し、この抽出液を濃縮後、酢酸エチル、ベン
ゼン、クロロホルムなどの非水溶性溶媒に転溶す
る。これを減圧濃縮してシロツプ状とし、このシ
ロツプ状液をベンゼン、アセトン、メタノールな
どの有機溶媒に溶解し、シリカゲル〔たとえば、
E.メルク社（西独）製キーゼルゲル60〕を用いた
カラムクロマトグラフイーおよびセフアデツクス
LH−20（フアルマシア社製）を用いたゲル過
に付することより精製することが可能であり、こ
れらの方法を適宜組合せて精製することにより純
度の高い抗生物質TM−582を得ることができる。
精製上または使用上、必要があればTM−582を
ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩など
に変換することもできる。本発明の目的物質である抗生物質TM−582は
下記の構造式（元素分析値；分子量；紫外線吸収
スペクトル、赤外線吸収スペクトル、¹H−NMR
スペクトル、¹³C−NMスペクトルの解析により決
定）、理化学的性質および抗菌作用を有する。（）構造式（）理化学的性質元素分析値 C₄₀H₆₈O₁₁として理論値（％）：C62.30、H9.39 実測値（％）：C62.03、H9.47 m.p. 80〜82℃ 分子量：724 SIMS ｍ／Ｚ 763（Ｍ＋Ｋ）⁺ 比旋光度：〔α〕²⁵ _D＝＋61.8° （Ｃ＝0.75、クロロホルム中）紫外線吸収スペクトルメタノール中で測定した結果、末端吸収が
認められた。赤外線吸収スペクトルクロロホルム中で測定した結果を第１図に
示す。 ¹H−NMRスペクトル重クロロホルム中、400MHzで測定した結
果を第２図に示す。 ¹³C−NMRスペクトル重クロロホルム中、100MHzで測定した結
果を第３図に示す。溶媒に対する溶解性水に不溶；メタノール、エタノール、アセトン、酢酸
エチル、クロロホルム、ベンゼンに可溶。呈色反応ヨード反応、過マンガン酸カリウムおよび
バニリン−硫酸との各反応：陽性ニンヒドリン、塩化第二鉄との各反応：陰
性塩基性、酸性、中性の区別：酸性物質の色：無色（）抗菌作用抗生物質TM−582はある種のグラム陽性菌
に対して増殖抑制作用を有するが、グラム陰性
菌、酵母に対して増殖抑制作用を有しない。ま
た抗生物質TM−582は他のポリエーテル抗生
物質と同様に原虫増殖抑制作用を有する。以上の抗生物質TM−582の諸性状と既知抗性
物質の諸性状とを比較検討した結果、抗生物質
TM−582はポリエーテル抗生物質群に属するこ
とが明らかになつたが、本群中には抗生物質TM
−582の構造と一致する抗生物質は存在しなかつ
たので、抗生物質TM−582は新規な抗生物質で
あることが確認された。本発明の目的物質である抗生物質TM−582は
ある種のグラム陽性菌、原虫に対して増殖抑制作
用を有するので、医薬、動物薬、消毒殺菌剤とし
て有用である。以下、試験例および実施例を挙げて本発明を具
体的に説明する。試験例細菌の培地としてはハートインフユージヨン寒
天を、真菌の培地としてはサブロー寒天を用い、
イノキユラム・サイズ10⁶CFU／mlで抗生物質
TM−582の各種菌に対するMIC（最小発育阻止濃
度）を測定し、その抗菌作用を示した。その結果を次表に示す。

【表】実施例 (1) ５容ジヤーフアーメンター容器にグルコー
ス２％、オートミール２％、肉エキス0.3％、
塩化ナトリム0.3％、炭酸カルシウム0.3％、硫
酸第二鉄0.04％、塩化マンガン0.04％からなる
PH7.0の培地３をいれ、オートクレーブによ
り滅菌した。これと同じ組成の培地で30℃日間
振盪培養したストレプトマイセス・ハイグロス
コピカスTM−582菌溶液を２％接種し、30℃
で４日間撹拌、通気培養した。培養終了後、２
台分６の培養液に等量のアセトンを加えて抽
出した。この抽出液を過し、得られた液を
減圧下でアセトンを留去した後酢酸エチル３
で２回抽出した。この酢酸エチル抽出区分を合せ、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥後減圧濃縮した褐色のシロツプ
状液約15ｇを得た。このシロツプ状液をメタノ
ール200mlに溶解し、等量のｎ−ヘキサンで５
回抽出した。このｎ−ヘキサン抽出区分を合
せ、濃縮乾固して黄色の粉末約６ｇを得た。この粉末をクロロホルム50溶解し、クロロホ
ルムで調整したシリカゲル・カラム〔シリカゲ
ル：E.メルク社（西独）製、キーゼルゲル60；
150ml〕に吸着させた。クロロホルム300mlで洗
浄し、次いでクロロホルム−メタノール（99：
１）600ml、ｎ−ヘキサン200ml、ｎ−ヘキサン
−アセトン（４：１）300ml、ｎ−ヘキサン−
アセトン（３：１）300mlで順次溶出した。ｎ
−ヘキサン−アセトン（３：１）の区分を集
め、溶媒を留去して白色粗粉末として抗生物質
TM−582 61mgを得た。 (2) 前項(1)で得た白色粗粉末を少量のアセトンに
溶解し、セフアデツクスLH−20（商品名、フ
アルマシア社製）カラムを用いてアセトンでゲ
ル過を行なつた。得られた活性画分を集め、濃縮乾固して白色粉
末42mgを得た。この粉末を酢酸エチル50mlに溶解し、等量のPH
3.5の塩酸水、水で順次洗浄した後、この酢酸エ
チル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮乾固
して白色粉末として抗生物質TM−582 37mgを得
た。

【図面の簡単な説明】

第１図はクロロホルム中で測定した抗生物質
TM−582の赤外線吸収スペトルを示し、第２図
は重クロロホルム中、400MHzで測定した抗生物
質TM−582の¹H−NMRスペクトルを示し、第
３図は重クロロホルム中、100MHzで測定した¹³C
−NMRスペクトルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】１構造式で表わされる化合物およびその塩。