JPS63269056A - 免疫検定装置、方法、およびキット - Google Patents
免疫検定装置、方法、およびキットInfo
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- JPS63269056A JPS63269056A JP63086258A JP8625888A JPS63269056A JP S63269056 A JPS63269056 A JP S63269056A JP 63086258 A JP63086258 A JP 63086258A JP 8625888 A JP8625888 A JP 8625888A JP S63269056 A JPS63269056 A JP S63269056A
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
-
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- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
-
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- Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の背景〕
(発明の分野)
この発明は(免疫)検定方法の実施に用いる装置に関す
る。興味の対象である化合物の存在の検定において特定
化合物に指向したレセプターの使用が可能であるという
ことにより、診断検定研究は急成長を遂げた。何年にも
わたって、生物および工業流体における特定物質の迅速
な検出を目的とする多くの簡約化された試験システムが
開発されてきた。最も単純な形態の前記システムまたは
装置Jよ、普通、特定物質と特異的に反応して可視応答
を発生し得る試験試薬と前記試験試薬に適した担体との
組み合わせを含む。吸収紙は担体として最ら一般的に使
用されている材料である。担体の一部は普通1種または
それ以上の試験試薬で含浸または被覆されている。試験
試薬を含有する担体部分と特定物質を含有する試料とを
接触させる。
る。興味の対象である化合物の存在の検定において特定
化合物に指向したレセプターの使用が可能であるという
ことにより、診断検定研究は急成長を遂げた。何年にも
わたって、生物および工業流体における特定物質の迅速
な検出を目的とする多くの簡約化された試験システムが
開発されてきた。最も単純な形態の前記システムまたは
装置Jよ、普通、特定物質と特異的に反応して可視応答
を発生し得る試験試薬と前記試験試薬に適した担体との
組み合わせを含む。吸収紙は担体として最ら一般的に使
用されている材料である。担体の一部は普通1種または
それ以上の試験試薬で含浸または被覆されている。試験
試薬を含有する担体部分と特定物質を含有する試料とを
接触させる。
接触は試験試薬を含む担体部分を水性媒質中の試料に浸
すことにより行なわれ得るか、または水性試料を毛管現
象により試験試薬を含有する担体部分を通して吸収性担
体に浸透させることができる。
すことにより行なわれ得るか、または水性試料を毛管現
象により試験試薬を含有する担体部分を通して吸収性担
体に浸透させることができる。
試験ゾーンは最初に担体上に作られるか、または検出実
施中に作られ得る。
施中に作られ得る。
ヘテロジニアス・アッセイにおける濃縮ゾーン法は広い
適用性のあることが判った。この方法では特異的結合対
構成員が非拡散的に固定されている免疫吸着ゾーンを有
する装置を用いる。免疫吸着ゾーンは試料および試薬溶
液の人口としての役割を演じる。免疫吸着ゾーンを通し
て液体を引き出し、液体を貯える役割を演じる液体吸着
ゾーンは、免疫吸着ゾーンと直接的または間接的な液体
受容関係にあり、さらに免疫吸着ゾーンを通して液体か
引き出される速度を制御する役割も演じ得る。前記装置
を用いるこの方法では、特異的結合対構成員にコンジュ
ゲートしたシグナル標識成分を有するシグナル発生系が
使用される。免疫吸着ゾーンは、シグナル発生系成分の
拡散運動を容認または阻害する形でゾーンに結合してい
るシグナル発生系構成員の1種またはそれ以上を含み得
る。
適用性のあることが判った。この方法では特異的結合対
構成員が非拡散的に固定されている免疫吸着ゾーンを有
する装置を用いる。免疫吸着ゾーンは試料および試薬溶
液の人口としての役割を演じる。免疫吸着ゾーンを通し
て液体を引き出し、液体を貯える役割を演じる液体吸着
ゾーンは、免疫吸着ゾーンと直接的または間接的な液体
受容関係にあり、さらに免疫吸着ゾーンを通して液体か
引き出される速度を制御する役割も演じ得る。前記装置
を用いるこの方法では、特異的結合対構成員にコンジュ
ゲートしたシグナル標識成分を有するシグナル発生系が
使用される。免疫吸着ゾーンは、シグナル発生系成分の
拡散運動を容認または阻害する形でゾーンに結合してい
るシグナル発生系構成員の1種またはそれ以上を含み得
る。
この方法のプロトコルによると、免疫吸着ゾーンの検出
ゾーンに結合されたシグナル標識の量は、試料中の特定
物質の量に対応する。この方法では、シグナル発生系の
1種またはそれ以上の成分が加えられた可能性のある液
体試料と検定装置を接触させる。続いて装置を、シグナ
ル発生系の残りの成分を含有し、非特異的結合シグナル
標識を含まない免疫吸着ゾーンを洗浄する役割を演じる
1種またはそれ以上の溶液と接触させ得る。シグナル発
生系が提供する免疫吸着ゾーンにおける検出可能なシグ
ナルは、既知量のアナライトを含む標梨に基づいたシグ
ナル・レベルと比較され得る。
ゾーンに結合されたシグナル標識の量は、試料中の特定
物質の量に対応する。この方法では、シグナル発生系の
1種またはそれ以上の成分が加えられた可能性のある液
体試料と検定装置を接触させる。続いて装置を、シグナ
ル発生系の残りの成分を含有し、非特異的結合シグナル
標識を含まない免疫吸着ゾーンを洗浄する役割を演じる
1種またはそれ以上の溶液と接触させ得る。シグナル発
生系が提供する免疫吸着ゾーンにおける検出可能なシグ
ナルは、既知量のアナライトを含む標梨に基づいたシグ
ナル・レベルと比較され得る。
濃縮ゾーン方法の技術は幾つかの商品、例えばアイコン
(ICON、商標)装置()−イブリテツク・コーポレ
ーション)、テストパック(TESTPA CK)T
M装置(アボット・ラボラトリーズ)およびスッズ(S
UDS)TM装置(ムレツクス・コーポレーション)に
おいて適用されている。
(ICON、商標)装置()−イブリテツク・コーポレ
ーション)、テストパック(TESTPA CK)T
M装置(アボット・ラボラトリーズ)およびスッズ(S
UDS)TM装置(ムレツクス・コーポレーション)に
おいて適用されている。
アナライトの定性および/または定量検定を行うクロマ
トグラフィー技術も知られている。この検定は、吸収性
材料の一部と、アナライトおよび所望により標識特異的
結合対成分を含む他のシグナル発生系成分を含有する液
体媒質との接触を含む。吸収性材料は普通アナライトと
特異的に結合する1個またはそれ以上のゾーンを含む。
トグラフィー技術も知られている。この検定は、吸収性
材料の一部と、アナライトおよび所望により標識特異的
結合対成分を含む他のシグナル発生系成分を含有する液
体媒質との接触を含む。吸収性材料は普通アナライトと
特異的に結合する1個またはそれ以上のゾーンを含む。
また吸収性材料は1種またはそれ以上のシグナル発生系
成分を含み得る。液体媒質を毛管現象により吸収性材料
に浸透させ、吸収性材料をシグナル発生系の残りの成分
と接触させる。試料中のアナライトの存在は、吸収性材
料における各ゾーンのシグナルについて調べることによ
り測定され得、アナライトの量は、いずれか1つのゾー
ンにおけるシグナル領域および非シグナル領域間のボー
ダーの位置と試料中のアナライトの量との関係を調べる
か、またはシグナルを含むゾーンまたはシグナルを含ま
ないゾーンの数を数え、ゾーン数と試料中のアナライト
の徂との関係を調べることにより測定され得る。上記第
1方法による免疫クロマトグラフィー技術の例としては
アキュレベル(Acculevel)TM製品(シバ・
カンパニー)がある。
成分を含み得る。液体媒質を毛管現象により吸収性材料
に浸透させ、吸収性材料をシグナル発生系の残りの成分
と接触させる。試料中のアナライトの存在は、吸収性材
料における各ゾーンのシグナルについて調べることによ
り測定され得、アナライトの量は、いずれか1つのゾー
ンにおけるシグナル領域および非シグナル領域間のボー
ダーの位置と試料中のアナライトの量との関係を調べる
か、またはシグナルを含むゾーンまたはシグナルを含ま
ないゾーンの数を数え、ゾーン数と試料中のアナライト
の徂との関係を調べることにより測定され得る。上記第
1方法による免疫クロマトグラフィー技術の例としては
アキュレベル(Acculevel)TM製品(シバ・
カンパニー)がある。
また非熟練者が高性能な実験環境以外の環境でも行える
程度に簡単で、迅速で、正確で安全なヘテロジニアス・
アッセイの広い適用性を有する免疫検定法の提供が望ま
しい。かかる検定に用いる診断装置であって、試薬の全
部が含まれ、試験すべき試料をそれに加えるだけでよい
装置の提供も望ましい。かかる装置は便利であり、厳密
な追加工程の必要性を排除するものである。
程度に簡単で、迅速で、正確で安全なヘテロジニアス・
アッセイの広い適用性を有する免疫検定法の提供が望ま
しい。かかる検定に用いる診断装置であって、試薬の全
部が含まれ、試験すべき試料をそれに加えるだけでよい
装置の提供も望ましい。かかる装置は便利であり、厳密
な追加工程の必要性を排除するものである。
(関連技術の記載)
ヘテロジニアス免疫検定における濃縮ゾーン法は米国特
許第4366241号に記載されている。
許第4366241号に記載されている。
流体中における低濃度の物質の検出に用いる試験装置は
米国特許第3811840号に記載されている。改良さ
れたヘテロジニアス免疫検定法およびアセンブリーはヨ
ーロッパ出願公開第0141547号に記載されている
。米国特許第4517288号はリガンド検定用固相シ
ステムを開示している。化学分析用組込み物質およびこ
れを用いる方法は米国特許第4270920号に記載さ
れている。区画された容器における慣用の化学反応の実
施は米国特許第3825410号に記載されている。P
CT出願国際公開第WO36106488号は、試験実
施に必要な試薬を含む破壊可能な容器を有する診断用試
験キット装置について記載している。免疫拡散プレート
装置は米国特許第3645687号に記載されている。
米国特許第3811840号に記載されている。改良さ
れたヘテロジニアス免疫検定法およびアセンブリーはヨ
ーロッパ出願公開第0141547号に記載されている
。米国特許第4517288号はリガンド検定用固相シ
ステムを開示している。化学分析用組込み物質およびこ
れを用いる方法は米国特許第4270920号に記載さ
れている。区画された容器における慣用の化学反応の実
施は米国特許第3825410号に記載されている。P
CT出願国際公開第WO36106488号は、試験実
施に必要な試薬を含む破壊可能な容器を有する診断用試
験キット装置について記載している。免疫拡散プレート
装置は米国特許第3645687号に記載されている。
吸着マトリックス・パッド内での化学または生物反応の
実施は米国特許第3888629号に記載されている。
実施は米国特許第3888629号に記載されている。
予め定められた試薬の存在に関する液体試料の検定に用
いられろ試験装置は米国特許第4246339号に記載
されている。免疫検定用の固定化抗体または抗原は米国
特許第4407943号に開示されている。米国特許第
391.5647号は流体における物質濃度の測定に用
いられる装置を開示している。米国特許第463290
1号は免疫検定に用いられる方法および装置を記載して
いる。
いられろ試験装置は米国特許第4246339号に記載
されている。免疫検定用の固定化抗体または抗原は米国
特許第4407943号に開示されている。米国特許第
391.5647号は流体における物質濃度の測定に用
いられる装置を開示している。米国特許第463290
1号は免疫検定に用いられる方法および装置を記載して
いる。
この明細書に記載されている発明は検定法の実施に用い
られる装置である。この装置は、ハウジング、あるゾー
ンで特異的結合対の一員を捕獲し、毛管現象によって上
記ゾーンから液体を移動させるための上記ハウジングに
封入された手段を含む。
られる装置である。この装置は、ハウジング、あるゾー
ンで特異的結合対の一員を捕獲し、毛管現象によって上
記ゾーンから液体を移動させるための上記ハウジングに
封入された手段を含む。
1種またはそれ以上の自蔵液体試薬がハウジングに封入
されている。これらの試薬は、試料中のアナライトを測
定する検定法を行う場合に使用されるものである。また
ハウジングは、試料を装置に導入するための手段を備え
ている。好ましくは、自蔵試薬は破壊可能な容器に含ま
れた液体試薬である。自蔵試薬は、毛管現象により前記
試料の導入部位へ移動することが可能である。この発明
の装置は、アナライトを含有する疑のある試料における
アナライトの測定を目的とする検定方法において有用で
ある。さらにこの発明は検定の実施に用いられるキット
を含む。この発明の装置は、多様なアナライトの部位定
量試験用に都合良く考案されたコンパクトな試薬放出シ
ステムである。
されている。これらの試薬は、試料中のアナライトを測
定する検定法を行う場合に使用されるものである。また
ハウジングは、試料を装置に導入するための手段を備え
ている。好ましくは、自蔵試薬は破壊可能な容器に含ま
れた液体試薬である。自蔵試薬は、毛管現象により前記
試料の導入部位へ移動することが可能である。この発明
の装置は、アナライトを含有する疑のある試料における
アナライトの測定を目的とする検定方法において有用で
ある。さらにこの発明は検定の実施に用いられるキット
を含む。この発明の装置は、多様なアナライトの部位定
量試験用に都合良く考案されたコンパクトな試薬放出シ
ステムである。
第1図は、この発明による装置をやや側方から描いた上
方斜視図である。
方斜視図である。
第1A図は、第1図の装置の分解組立図である。
第2図は、第1図の装置の上平面図である。
第3図は、3−3線に沿って描いた第1図の装置の上半
分の断面図である。
分の断面図である。
第4図は、第1図の装置の下半分を上から見た図である
。
。
第5図は、5−5線に沿って描いた第1図の装置の断面
図である。
図である。
第6図は、この発明の装置の別の具体例をやや側方から
描いた上方斜視図である。
描いた上方斜視図である。
第6A図は、第6図の装置の組立分解図である。
第7図は、7−7線に沿って描いた第6図の装置の断面
図である。
図である。
この発明の一態様は、検定法の実施に用いられる装置に
関する。この装置は、ハウジング、およびあるゾーンで
特異的結合対の一員を捕獲し、毛管現象によって上記ゾ
ーンから液体を移動させるための上記ハウジングに封入
された手段を含む。
関する。この装置は、ハウジング、およびあるゾーンで
特異的結合対の一員を捕獲し、毛管現象によって上記ゾ
ーンから液体を移動させるための上記ハウジングに封入
された手段を含む。
1種またはそれ以上の自蔵液体試薬が、試料中のアナラ
イトを測定するための検定法を行う場合に使用されるハ
ウジングに封入されている。さらにハウジングは試料を
装置に導入するための手段を含む。好ましくは、自蔵試
薬は破壊可能な容器に含まれた液体試薬である。自蔵試
薬は、毛管現象により前記試料の導入部位へ移動するこ
とが可能である。この発明の装置は、アナライトを含有
する疑のある試料におけるアナライトの測定を目的とす
る検定方法において有用である。
イトを測定するための検定法を行う場合に使用されるハ
ウジングに封入されている。さらにハウジングは試料を
装置に導入するための手段を含む。好ましくは、自蔵試
薬は破壊可能な容器に含まれた液体試薬である。自蔵試
薬は、毛管現象により前記試料の導入部位へ移動するこ
とが可能である。この発明の装置は、アナライトを含有
する疑のある試料におけるアナライトの測定を目的とす
る検定方法において有用である。
この発明の装置は広範な適用性を有する。この装置は、
吸着性または吸収性材料が、吸着性材料と測定すべきア
ナライトを含有する媒質またはアナライト分析用試薬と
の接触部分から液体を流すために使用される幾つかの検
定において全て使用され得る。この発明の装置は使用が
簡単で、通常、液状の試料を装置に導入し、装置を操作
してその中の自蔵試薬を放出させるだけでよい。すなわ
ち、この発明の装置は操作者による誤りを減らすのに大
きく役立つことになる。
吸着性または吸収性材料が、吸着性材料と測定すべきア
ナライトを含有する媒質またはアナライト分析用試薬と
の接触部分から液体を流すために使用される幾つかの検
定において全て使用され得る。この発明の装置は使用が
簡単で、通常、液状の試料を装置に導入し、装置を操作
してその中の自蔵試薬を放出させるだけでよい。すなわ
ち、この発明の装置は操作者による誤りを減らすのに大
きく役立つことになる。
この発明の実施態様の記載をさらに進める前に、幾つか
の語の定義を行う。
の語の定義を行う。
アナライト・・抗体と特異的に結合することが可能な、
測定すべき化合物または組成物、普通は抗原または薬剤
。
測定すべき化合物または組成物、普通は抗原または薬剤
。
抗原性および薬剤アナライトの正確な性質は、その多数
の例と共にリドマン等、米国特許第4299916号、
特に第16〜231II[Iおよび米国特許第4275
149号、第17〜18欄に開示されている。
の例と共にリドマン等、米国特許第4299916号、
特に第16〜231II[Iおよび米国特許第4275
149号、第17〜18欄に開示されている。
アナライトは単一結合部位(1価)または複数の結合部
位(多価)を存することを特徴とする。多価アナライト
は、通常、ポリ(アミノ酸)、すなわちポリペプチドお
よび蛋白質、多糖類、核酸類およびそれらの組み合わせ
である。かかる組み合せまたは集合体には、細菌、ウィ
ルス、染色体、遺伝子、ミトコンドリア、核、細胞膜等
がある。
位(多価)を存することを特徴とする。多価アナライト
は、通常、ポリ(アミノ酸)、すなわちポリペプチドお
よび蛋白質、多糖類、核酸類およびそれらの組み合わせ
である。かかる組み合せまたは集合体には、細菌、ウィ
ルス、染色体、遺伝子、ミトコンドリア、核、細胞膜等
がある。
広範な種類の蛋白質が、似た構造をもつ蛋白質、特定の
生物学的機能を有する蛋白質、特定の微生物、特に病因
となる微生物に関連した蛋白質等の種類について考えら
れ得る。微生物アナライトの例には、クラミジア、ヘル
ペス・ウィルス、肝炎ウィルス(A、B、または非A、
非B)、淋菌、ティー・パリデュム(T、pallid
um)等のような生物に由来するリボ多糖類、蛋白質お
よび核酸がある。
生物学的機能を有する蛋白質、特定の微生物、特に病因
となる微生物に関連した蛋白質等の種類について考えら
れ得る。微生物アナライトの例には、クラミジア、ヘル
ペス・ウィルス、肝炎ウィルス(A、B、または非A、
非B)、淋菌、ティー・パリデュム(T、pallid
um)等のような生物に由来するリボ多糖類、蛋白質お
よび核酸がある。
次のものは、構造上関連のある蛋白質の種類である。す
なわち、プロタミン、ヒストン、アルブミン、グロブリ
ン、硬蛋白質、りん蛋白質、ムコ蛋白質、色素蛋白質、
リボ蛋白質、核蛋白質、糖蛋白質、プロテオグリカン、
未分類蛋白質、例、ソマトトロフィン、プロラクチン、
インシュリン、ペプシン。
なわち、プロタミン、ヒストン、アルブミン、グロブリ
ン、硬蛋白質、りん蛋白質、ムコ蛋白質、色素蛋白質、
リボ蛋白質、核蛋白質、糖蛋白質、プロテオグリカン、
未分類蛋白質、例、ソマトトロフィン、プロラクチン、
インシュリン、ペプシン。
ひと血しょうで見出される幾つかの蛋白質は臨末的に重
要であり、プレアルブミン、アルブミン、α1−リボ蛋
白質、α1−酸糖蛋白質、α、−抗トリプシン、α1−
糖蛋白質、トランスコルチン、4.69−ボストアルブ
ミン、トリプトファン−不足α1−糖蛋白質、α1χ〜
糖蛋白質、ヂロキシン結合グロブリン、インター−α−
トリプシン阻害因子、Gc−グロブリン、ハプトグロブ
リン、セルロプラスミン、コリンエステラーゼ、α、−
リボ蛋白質(複数も可)、ミオグロビン、C−反応性プ
ロチイン、α、−マクログロブリン、αt H8〜糖
蛋白質、Zn−α、−糖蛋白質、α、−ノイラミノー糖
蛋白質、エリスロボエヂン、β−リボ蛋白質、トランス
フェリン、ヘモベキンン、フ、fブリノゲン、プラスミ
ノゲン、β、−糖蛋白質I、β2−糖蛋白質■が含まれ
る。
要であり、プレアルブミン、アルブミン、α1−リボ蛋
白質、α1−酸糖蛋白質、α、−抗トリプシン、α1−
糖蛋白質、トランスコルチン、4.69−ボストアルブ
ミン、トリプトファン−不足α1−糖蛋白質、α1χ〜
糖蛋白質、ヂロキシン結合グロブリン、インター−α−
トリプシン阻害因子、Gc−グロブリン、ハプトグロブ
リン、セルロプラスミン、コリンエステラーゼ、α、−
リボ蛋白質(複数も可)、ミオグロビン、C−反応性プ
ロチイン、α、−マクログロブリン、αt H8〜糖
蛋白質、Zn−α、−糖蛋白質、α、−ノイラミノー糖
蛋白質、エリスロボエヂン、β−リボ蛋白質、トランス
フェリン、ヘモベキンン、フ、fブリノゲン、プラスミ
ノゲン、β、−糖蛋白質I、β2−糖蛋白質■が含まれ
る。
補体因子および血液凝固因子はアナライトの例である。
重要な蛋白質ホルモン類、例えば副甲状腺ホルモン、チ
ロカルシトニン、インシュリン、グルカゴン、レラキシ
ン、エリスロボエチン、メラノトロピン、ソマトトロピ
ン、コルチコトロビン、ヂロトロピン、卵胞刺激ホルモ
ン、黄体形成ホルモン、乳汁分泌促進ホルモン、ゴナド
トロピン(じゅう上膜生殖腺刺激ホルモン)、組織ホル
モン類、例えばセクレチン、ガストリン、アンギオテン
シン■および■、ブラジキニン、ひと胎盤乳腺刺激ホル
モンはアナライトの例である。
ロカルシトニン、インシュリン、グルカゴン、レラキシ
ン、エリスロボエチン、メラノトロピン、ソマトトロピ
ン、コルチコトロビン、ヂロトロピン、卵胞刺激ホルモ
ン、黄体形成ホルモン、乳汁分泌促進ホルモン、ゴナド
トロピン(じゅう上膜生殖腺刺激ホルモン)、組織ホル
モン類、例えばセクレチン、ガストリン、アンギオテン
シン■および■、ブラジキニン、ひと胎盤乳腺刺激ホル
モンはアナライトの例である。
脳下垂体神経部由来のペプチドホルモン類、例えばオキ
シトシン、バソブレソン、放出因子(RF)CRF、L
RF、TRF、ソマトトロピン−RFSGRF、FSH
−1”(F、PIF、MIFはアナライトの例である。
シトシン、バソブレソン、放出因子(RF)CRF、L
RF、TRF、ソマトトロピン−RFSGRF、FSH
−1”(F、PIF、MIFはアナライトの例である。
モノエピトープ性リガンドアナライトは一般に約100
〜2000の分子量、さらに普通は125〜toooの
分子量である。興味あるアナライトには、薬剤、中間代
謝物、農薬、汚染物質等がある。興味ある薬剤にはアル
カロイド類が含まれろ。アルカロイド類には、モルヒネ
・アルカロイド類、例えばモルヒネ、コディン、ヘロイ
ン、デキストロメトルファン、それらの誘導体および中
間代謝物、コカイン・アルカロイド類、例えばコカイン
およびペンゾイルエクゴニン、それらの誘導体および中
間代謝物、麦角アルカロイド類、例えばリセルグ酸ノエ
チルアミド、ステロイド・アルカロイド類、イミナゾイ
ル・アルカロイド類、キナプリン・アルカロイド類、イ
ソキノリン・アルカロイド類、キノリン・アルカロイド
類、例えばキニンおよびキニジン、ジテルペン・アルカ
ロイド類、それらの誘導体および中間代謝物がある。
〜2000の分子量、さらに普通は125〜toooの
分子量である。興味あるアナライトには、薬剤、中間代
謝物、農薬、汚染物質等がある。興味ある薬剤にはアル
カロイド類が含まれろ。アルカロイド類には、モルヒネ
・アルカロイド類、例えばモルヒネ、コディン、ヘロイ
ン、デキストロメトルファン、それらの誘導体および中
間代謝物、コカイン・アルカロイド類、例えばコカイン
およびペンゾイルエクゴニン、それらの誘導体および中
間代謝物、麦角アルカロイド類、例えばリセルグ酸ノエ
チルアミド、ステロイド・アルカロイド類、イミナゾイ
ル・アルカロイド類、キナプリン・アルカロイド類、イ
ソキノリン・アルカロイド類、キノリン・アルカロイド
類、例えばキニンおよびキニジン、ジテルペン・アルカ
ロイド類、それらの誘導体および中間代謝物がある。
薬剤の群には、ステロイド類、例えばエストロゲン、ア
ンドロゲン、副腎皮質ステロイド、胆汁酸、心臓毒性グ
リコシドおよびアグリコン、例えばジゴキシンおよびジ
ゴキシゲニン、サポニンおよびサボゲニン、それらの誘
導体および中間代謝物か含まれる。またステロイド疑似
物質、例えばジエチルスチルベストールも含まれる。
ンドロゲン、副腎皮質ステロイド、胆汁酸、心臓毒性グ
リコシドおよびアグリコン、例えばジゴキシンおよびジ
ゴキシゲニン、サポニンおよびサボゲニン、それらの誘
導体および中間代謝物か含まれる。またステロイド疑似
物質、例えばジエチルスチルベストールも含まれる。
薬剤の別の群には、5〜6個の環溝成員を有するラクタ
ム類、例えばバルビッル酸塩、例、フエノバルビタール
およびセコバルビクール、ジフェニルヒダントニン、プ
リミドン、エトサクンミドおよびそれらの中間代謝物が
ある。
ム類、例えばバルビッル酸塩、例、フエノバルビタール
およびセコバルビクール、ジフェニルヒダントニン、プ
リミドン、エトサクンミドおよびそれらの中間代謝物が
ある。
薬剤の別の群には、2〜3個の炭素原子のアルキルを有
するアミノアルキルベンゼン類、例えば、アンフェタミ
ン、カテコールアミン、例えばエフェドリン、し−ドー
パ、エピネフリン、ナルシン、パパベリンおよびそれら
の中間代謝物がある。
するアミノアルキルベンゼン類、例えば、アンフェタミ
ン、カテコールアミン、例えばエフェドリン、し−ドー
パ、エピネフリン、ナルシン、パパベリンおよびそれら
の中間代謝物がある。
薬剤の別の群には、ベンズ複素環類、例えばオキサゼパ
ム、クロルプロマジン、テグレトール、イミブラミン、
それらの誘導体および中間代謝物があり、複素環の環は
、アゼピン、ジアゼピンおよびフェノチアジンである。
ム、クロルプロマジン、テグレトール、イミブラミン、
それらの誘導体および中間代謝物があり、複素環の環は
、アゼピン、ジアゼピンおよびフェノチアジンである。
薬剤の別の群には、プリン類、例えばテオフィリン、カ
フェイン、それらの中間代謝物および誘導体がある。
フェイン、それらの中間代謝物および誘導体がある。
薬剤の別の群には、マリファナ由来の薬剤、例えばカン
ナビノールおよびテトラヒドロカンナビノールが含まれ
る。
ナビノールおよびテトラヒドロカンナビノールが含まれ
る。
薬剤の別の群には、ビタミン類、例えばA、B。
例B11、C,D、 Eおよびに1葉酸およびヂアミン
が含まれる。
が含まれる。
薬剤の別の群には、ヒドロキシル化および不飽和の程度
および部位の点で異なるプロスタグランジン類がある。
および部位の点で異なるプロスタグランジン類がある。
薬剤の別の群には、抗生物質、例えばペニシリン、クロ
ロマイセチン、アクチノマイセチン、テトラサイクリン
、テラマイシン、それらの中間代謝物および誘導体が含
まれる。
ロマイセチン、アクチノマイセチン、テトラサイクリン
、テラマイシン、それらの中間代謝物および誘導体が含
まれる。
薬剤の別の群には、ヌクレオシド類およびヌクレオチド
類、例えばATPSNADSFMN、アデノシン、グア
ノシン、チミジンおよびシチジンがあり、それらは適当
な糖およびりん酸置換基を有している。
類、例えばATPSNADSFMN、アデノシン、グア
ノシン、チミジンおよびシチジンがあり、それらは適当
な糖およびりん酸置換基を有している。
薬剤の別の群には、多様な各薬剤、例えばメタトン、メ
プロバメート、セロトニン、メペリジン、アミトリブチ
リン、ノルトリブチリン、リドカイン、プロ力インアミ
ド、アセチルブロカインアミド、プロプラノロール、グ
リセオフルビン、パルプロ酸、ブチロフェノン類、抗ヒ
スタミン類、抗コリン作用薬、例えばアトロピン、それ
らの中間代謝物および誘導体がある。
プロバメート、セロトニン、メペリジン、アミトリブチ
リン、ノルトリブチリン、リドカイン、プロ力インアミ
ド、アセチルブロカインアミド、プロプラノロール、グ
リセオフルビン、パルプロ酸、ブチロフェノン類、抗ヒ
スタミン類、抗コリン作用薬、例えばアトロピン、それ
らの中間代謝物および誘導体がある。
疾病状態と関係のある中間代謝物には、スペルミン、ガ
ラクトース、フェニルピルビン酸およびポルフィリン1
型がある。
ラクトース、フェニルピルビン酸およびポルフィリン1
型がある。
薬剤の別の群には、アミノグリコシド類、例えばゲンタ
マイシン、カナマイシン、トブラマイシンおよびアミカ
シンがある。
マイシン、カナマイシン、トブラマイシンおよびアミカ
シンがある。
興味ある農薬には、ポリハロゲン化ビフェニール類、り
ん酸エステル類、チオホスフェート類、カルバメート類
、ポリハロゲン化スルフェンアミド類、それらの中間代
謝物および誘導体が含まれる。
ん酸エステル類、チオホスフェート類、カルバメート類
、ポリハロゲン化スルフェンアミド類、それらの中間代
謝物および誘導体が含まれる。
レセプター・アナライトの場合、分子量は一般に100
00〜2XlO”、さらに普通は10000〜106の
範囲である。免疫グロブリン類、IgA、IgG、Ig
EおよびIgMの場合、分子量は一般に約160000
〜約10”の範囲である。
00〜2XlO”、さらに普通は10000〜106の
範囲である。免疫グロブリン類、IgA、IgG、Ig
EおよびIgMの場合、分子量は一般に約160000
〜約10”の範囲である。
酵素は一般に約10000〜tooooooの範囲の分
子量である。天然レセプターの分子量は広い範囲にわた
るが、一般に少なくとも約25000であり、lO@ま
たはそれより多い場合もあり得、例えばアビジン、DN
A、RNA、チロキシン結合グロブリン、チロキシン結
合プレアルブミン、トランスコルチン等の物質が含まれ
る。
子量である。天然レセプターの分子量は広い範囲にわた
るが、一般に少なくとも約25000であり、lO@ま
たはそれより多い場合もあり得、例えばアビジン、DN
A、RNA、チロキシン結合グロブリン、チロキシン結
合プレアルブミン、トランスコルチン等の物質が含まれ
る。
特異的結合対の構成員(rsbp構成員」)・・・他方
の分子と特異的に結合するため、前記分子に固有の空間
的および極性的構成と相補的であると定義される表面上
の領域または空洞を有する異なった2つの分子のうちの
1つ。特異的結合対の要素はリガンドとレセプター(ア
ンチリガンド)として表わされる。これらは通常、抗原
−抗体のような免疫対の要素であるが、免疫対ではない
ビオチン−アビジン、ホルモン−ホルモン受容体、核酸
2本鎖分子、IgG−プロティンA、DNA−DNA。
の分子と特異的に結合するため、前記分子に固有の空間
的および極性的構成と相補的であると定義される表面上
の領域または空洞を有する異なった2つの分子のうちの
1つ。特異的結合対の要素はリガンドとレセプター(ア
ンチリガンド)として表わされる。これらは通常、抗原
−抗体のような免疫対の要素であるが、免疫対ではない
ビオチン−アビジン、ホルモン−ホルモン受容体、核酸
2本鎖分子、IgG−プロティンA、DNA−DNA。
DNA−RNA等のような他の特異的結合対の要素もこ
の定義に含まれる。
の定義に含まれる。
リガンド・・・レセプターが天然に存在するか、または
これを生成することができる任意の有機化合物。
これを生成することができる任意の有機化合物。
レセプター(アンチリガンド)・・・ある分子に固有の
空間的および極性的構成、例えばエビトビツク部位また
は決定部位を認識し得る任意の化合物または組成物。代
表的なレセプターの例としては、例えばチロキシン結合
グロブリン、抗体、酵素、Fab断片、レクチン類、核
酸類、プロティンA1補体成分CIQ等の天然のレセプ
ター等を挙げることができる。
空間的および極性的構成、例えばエビトビツク部位また
は決定部位を認識し得る任意の化合物または組成物。代
表的なレセプターの例としては、例えばチロキシン結合
グロブリン、抗体、酵素、Fab断片、レクチン類、核
酸類、プロティンA1補体成分CIQ等の天然のレセプ
ター等を挙げることができる。
標識sbp構成員・・・第1 sbp構成員に結合した
、一般に電気化学的検出もしくは吸収または電磁放射線
の放出が可能な標識、触媒、多くの場合は酵素。
、一般に電気化学的検出もしくは吸収または電磁放射線
の放出が可能な標識、触媒、多くの場合は酵素。
標識sbp構成員はシグナル発生系の一員であり、検定
における特定のプロトコルに従い第1 sbp措成員を
選択して第2sbp構成員に結合させる。
における特定のプロトコルに従い第1 sbp措成員を
選択して第2sbp構成員に結合させる。
抗体・・・他方の分子と特異的に結合するため、前記分
子に固有の空間的および極性的構成と相補的であると定
義される表面上の領域または空洞を有する、免疫グロブ
リンまたはその誘導体もしくはフラグメント。抗体はモ
ノクローナルまたはポリクローナルであり得、当業界で
よく知られている技術、例えば宿主の免疫化および血清
の収集またはハイブリッド・セルライン技術により製造
され得る。
子に固有の空間的および極性的構成と相補的であると定
義される表面上の領域または空洞を有する、免疫グロブ
リンまたはその誘導体もしくはフラグメント。抗体はモ
ノクローナルまたはポリクローナルであり得、当業界で
よく知られている技術、例えば宿主の免疫化および血清
の収集またはハイブリッド・セルライン技術により製造
され得る。
アナライトの抗体・・・アナライトに特異的な抗体。
吸収性材料・・・少なくとも0.1μ、好ましくは少な
くとも1.0μの孔を有する多孔質材料で、し管現象に
より水性媒質を浸透させやすい材料。
くとも1.0μの孔を有する多孔質材料で、し管現象に
より水性媒質を浸透させやすい材料。
かかる材料は一般に親水性であるか、または親水性とな
り得るものであり、無機粉末、例えばンリカ、硫酸マグ
ネシウムおよびアルミナ、天然ポリマー物質、特にセル
ロース性物質およびセルロースから誘導された物質、例
えば繊維含有紙、例えばろ紙、クロマトグラフィー用紙
等、合成または修飾天然ポリマー類、例えばニトロセル
ロース、酢酸セルロース、ポリ(塩化ビニル)、ポリア
クリルアミド、架橋デキストラン、アガロース、ポリア
クリレート等をそのまま、または他の物質(セラミック
物質等)と組み合わせて用いたものが挙げられる。吸収
性材料は支持体に結合され得る。
り得るものであり、無機粉末、例えばンリカ、硫酸マグ
ネシウムおよびアルミナ、天然ポリマー物質、特にセル
ロース性物質およびセルロースから誘導された物質、例
えば繊維含有紙、例えばろ紙、クロマトグラフィー用紙
等、合成または修飾天然ポリマー類、例えばニトロセル
ロース、酢酸セルロース、ポリ(塩化ビニル)、ポリア
クリルアミド、架橋デキストラン、アガロース、ポリア
クリレート等をそのまま、または他の物質(セラミック
物質等)と組み合わせて用いたものが挙げられる。吸収
性材料は支持体に結合され得る。
他方、吸収性材料はそれ自体の支持体を提供し得る。吸
収性材料は、多官能性であり得るかまたは多官能化され
得ることにより、レセプターまたは抗体の共有結合を可
能にし、またシグナル発生系の一部を形成する他の化合
物の結合を可能にするものである。吸収性材料は標識に
コンジュゲートされた乾燥状水溶性sbp構成員をこれ
と接触状態で有し得る。
収性材料は、多官能性であり得るかまたは多官能化され
得ることにより、レセプターまたは抗体の共有結合を可
能にし、またシグナル発生系の一部を形成する他の化合
物の結合を可能にするものである。吸収性材料は標識に
コンジュゲートされた乾燥状水溶性sbp構成員をこれ
と接触状態で有し得る。
レセプターおよび抗体と吸収性材料の結合は、広く文献
によって知られる周知の技術により達成され得る。例え
ば、「インモビライズド・エンザイムズJ(I mmo
bil 1zed E nzymes)、イチロウ9
チバタ、ハルステッド・プレス、ニューヨーク(197
8年)およびクアトレカサス、「ジャーナル・オブ・バ
イオロジカル・ケミストリーJ(J 、 B io。
によって知られる周知の技術により達成され得る。例え
ば、「インモビライズド・エンザイムズJ(I mmo
bil 1zed E nzymes)、イチロウ9
チバタ、ハルステッド・プレス、ニューヨーク(197
8年)およびクアトレカサス、「ジャーナル・オブ・バ
イオロジカル・ケミストリーJ(J 、 B io。
Chem、)、245巻、3059頁(1970年)参
照。
照。
吸収性材料片は、ストリップに裁断されたシートのよう
な単一構造であり得るか、または幾つかのストリップま
たは例えば薄層クロマトグラフィーで見られるような支
持体もしくは固体表面に結合した粒状物質であり得、一
体的に、または液体接触部に吸着パッドを有し得る。吸
収性材料片はまた、表面(スポツティングによりレーン
形成を誘発し得る)にレーン有するシートであり得、各
レーンにおいて別々の検定を行うことができる。
な単一構造であり得るか、または幾つかのストリップま
たは例えば薄層クロマトグラフィーで見られるような支
持体もしくは固体表面に結合した粒状物質であり得、一
体的に、または液体接触部に吸着パッドを有し得る。吸
収性材料片はまた、表面(スポツティングによりレーン
形成を誘発し得る)にレーン有するシートであり得、各
レーンにおいて別々の検定を行うことができる。
吸収性材料片は、矩形、円形、長円形、トリアゴナル(
triagonal)形または他の形状を有し得るが、
ただしどの場合も毛管現象による試験溶液の浸透方向が
少なくとし1つは存在するものとする。例えば長円形ま
たは円形片においてその中央部に試験溶液が接触した場
合には他の浸透方向も生じ得る。しかしながら、主に、
予め定められた部位への流れが少なくとも一方向は存在
するものと考えられる。以下の記述では、例として吸収
性材料のストリップを記載するが、これに限定する訳で
はない。
triagonal)形または他の形状を有し得るが、
ただしどの場合も毛管現象による試験溶液の浸透方向が
少なくとし1つは存在するものとする。例えば長円形ま
たは円形片においてその中央部に試験溶液が接触した場
合には他の浸透方向も生じ得る。しかしながら、主に、
予め定められた部位への流れが少なくとも一方向は存在
するものと考えられる。以下の記述では、例として吸収
性材料のストリップを記載するが、これに限定する訳で
はない。
支持体が望ましいか、または必要な場合において、その
吸収性材料の支持体は、通常、水不溶性で非多孔質で堅
く、普通は吸収性ストリップと同じ長さおよび幅を有す
るが、それより大きいかまたは小さい場合もあり得る。
吸収性材料の支持体は、通常、水不溶性で非多孔質で堅
く、普通は吸収性ストリップと同じ長さおよび幅を有す
るが、それより大きいかまたは小さい場合もあり得る。
支持体が吸収性材料の毛管現象を妨げたり、検定成分と
非特異的に結合したり、シグナル発生系の機能を妨げた
りしない限り、天然および合成の両方を含む、広範な種
類の有機および無機物質およびそれらの組み合わせが使
用され得る。代表的なポリマー類は、ポリエチレン、ポ
リプロピレン、ポリ(4−メチルブテン)、ポリスチレ
ン、ポリメタクリレート、ポリ(エチレンテレフタレー
ト)、ナイロン、ポリ(ビニルブチレート)、ガラス、
セラミックス、金属等を含む。
非特異的に結合したり、シグナル発生系の機能を妨げた
りしない限り、天然および合成の両方を含む、広範な種
類の有機および無機物質およびそれらの組み合わせが使
用され得る。代表的なポリマー類は、ポリエチレン、ポ
リプロピレン、ポリ(4−メチルブテン)、ポリスチレ
ン、ポリメタクリレート、ポリ(エチレンテレフタレー
ト)、ナイロン、ポリ(ビニルブチレート)、ガラス、
セラミックス、金属等を含む。
標識・・・標識はシグナル発生に必要とされるsbp構
成員に結合した任意の分子であり得る。主発明において
、標識は不活性であり、単にシグナル発生手段の一員の
結合部位としての役割を有するのみであり得るか、また
は検出可能なシグナルを自発的に発生し得るか、または
シグナル発生手段と一緒になって検出可能なシグナルを
発生し得る。
成員に結合した任意の分子であり得る。主発明において
、標識は不活性であり、単にシグナル発生手段の一員の
結合部位としての役割を有するのみであり得るか、また
は検出可能なシグナルを自発的に発生し得るか、または
シグナル発生手段と一緒になって検出可能なシグナルを
発生し得る。
標識は同位体または非同位体、好ましくは非同位体であ
り得る。しかしながら、同位体標識は、写真フィルムに
よるラジオ−オートグラフィー検出法を用いるとき高感
度を達成する場合に好まれ得シグナル発生手段・・・標
識と相互作用することにより検出可能なシグナルを発生
し得る手段。そのような手段には、例えば、電磁放射、
加熱、化学試薬等がある。化学試薬を用いる場合、化学
試薬の中にはデベロッパー溶液の一部として含まれ得る
ものもある。化学試薬としては、基質、補酵素、エンハ
ンサ−1第2酵素、活性剤、コファクター、阻害剤、ス
カベンジャー、金属イオン、シグナル発生物質の結合に
必要な特異的結合物質等を挙げることができる。補酵素
、酵素生成物、他の酵素および触媒と反応する物質等の
ような化学試薬の中には吸収性材料と結合し得るものも
ある。
り得る。しかしながら、同位体標識は、写真フィルムに
よるラジオ−オートグラフィー検出法を用いるとき高感
度を達成する場合に好まれ得シグナル発生手段・・・標
識と相互作用することにより検出可能なシグナルを発生
し得る手段。そのような手段には、例えば、電磁放射、
加熱、化学試薬等がある。化学試薬を用いる場合、化学
試薬の中にはデベロッパー溶液の一部として含まれ得る
ものもある。化学試薬としては、基質、補酵素、エンハ
ンサ−1第2酵素、活性剤、コファクター、阻害剤、ス
カベンジャー、金属イオン、シグナル発生物質の結合に
必要な特異的結合物質等を挙げることができる。補酵素
、酵素生成物、他の酵素および触媒と反応する物質等の
ような化学試薬の中には吸収性材料と結合し得るものも
ある。
シグナル発生系・・・シグナル発生系は1種またはそれ
以上の成分を有し得るが、ただし少なくともl成分が標
識sbp構成員である。シグナル発生系は、標識と相互
作用してシグナルを発生し得るシグナル発生手段を含め
て測定可能なシグナルの生成に必要な試薬全てを含む。
以上の成分を有し得るが、ただし少なくともl成分が標
識sbp構成員である。シグナル発生系は、標識と相互
作用してシグナルを発生し得るシグナル発生手段を含め
て測定可能なシグナルの生成に必要な試薬全てを含む。
シグナル発生系は外部手段、通常電磁放射線の測定、望
ましくは可視的試験により検出可能なシグナルを提供す
る。殆どの場合、シグナル発生系は発光基質および酵素
を含む。この場合、発光基質は、紫外線もしくは可視光
線、りん光体または蛍光剤の光を吸収する色素に酵素変
換される。
ましくは可視的試験により検出可能なシグナルを提供す
る。殆どの場合、シグナル発生系は発光基質および酵素
を含む。この場合、発光基質は、紫外線もしくは可視光
線、りん光体または蛍光剤の光を吸収する色素に酵素変
換される。
シグナル発生系は、標識として少なくとも1種の触媒、
普通は少なくとも1つの酵素、および少なくとも1種の
基質を含み得、2種またはそれ以上の触媒および複数の
基質を含み得、酵素の組み合わ仕(ただし、一方の酵素
の基質は他方の酵素の生成物である)を含み得る。シグ
ナル発生系の作用は、予め定められた部位における標識
の存在に応じて、予め定められた部位において検出可能
なシグナルを提供する生成物を製造することである。
普通は少なくとも1つの酵素、および少なくとも1種の
基質を含み得、2種またはそれ以上の触媒および複数の
基質を含み得、酵素の組み合わ仕(ただし、一方の酵素
の基質は他方の酵素の生成物である)を含み得る。シグ
ナル発生系の作用は、予め定められた部位における標識
の存在に応じて、予め定められた部位において検出可能
なシグナルを提供する生成物を製造することである。
酵素および非酵素触媒または2種の酵素の組み合せであ
る2種の触媒が使用され得る。この場合、2種の触媒は
、一方の生成物が他方の基質であるという関係にある。
る2種の触媒が使用され得る。この場合、2種の触媒は
、一方の生成物が他方の基質であるという関係にある。
この系では、触媒により触媒される連続変化を被り得る
ただ1つの基質の存在を必要とし、その結果、検出可能
なシグナルの発生に関与する化合物が生成する。しかし
ながら、殆どの場合、通常、一連の第1酵素に対する基
質および第2化合物が存在し、後者はシグナルの生成に
関与する化合物の前駆体としての役割を果たし、通常シ
グナルを生成する化合物を提供する。
ただ1つの基質の存在を必要とし、その結果、検出可能
なシグナルの発生に関与する化合物が生成する。しかし
ながら、殆どの場合、通常、一連の第1酵素に対する基
質および第2化合物が存在し、後者はシグナルの生成に
関与する化合物の前駆体としての役割を果たし、通常シ
グナルを生成する化合物を提供する。
すなわち、第1酵素の生成物はシグナルを生成する化合
物の前駆体と反応してシグナルを発生する化合物を提供
する。
物の前駆体と反応してシグナルを発生する化合物を提供
する。
2種の酵素を使用する場合、伴う反応は、殆どの場合加
水分解またはレドックス反応である。加水分解の場合、
加水分解に対して不安定な結合を有する誘導体化された
色素前駆体、加水分解酵素および放出された色素前駆体
を触媒して色素変換生成物を生成する酵素が、代表的な
このタイプの系である。レドックス反応の場合、第1酵
素は第2酵素に対して必要な本質的酸化基質を製造し得
るが、この場合第2酵素は酸化基質および色素前駆体間
の反応を触媒する。
水分解またはレドックス反応である。加水分解の場合、
加水分解に対して不安定な結合を有する誘導体化された
色素前駆体、加水分解酵素および放出された色素前駆体
を触媒して色素変換生成物を生成する酵素が、代表的な
このタイプの系である。レドックス反応の場合、第1酵
素は第2酵素に対して必要な本質的酸化基質を製造し得
るが、この場合第2酵素は酸化基質および色素前駆体間
の反応を触媒する。
2種の酵素を使用する場合、第1酵素反応は、加水分解
的開裂またはレドックス反応により他方の酵素の基質で
ある生成物を提供し得る。第1の状況は、グルコース−
6−りん酸がアルカリ性ホスファターゼ触媒により加水
分解されてグルコース(ただし、グルコースはグルコー
スオキシダーゼの基質である)になるものとして説明さ
れ得る。
的開裂またはレドックス反応により他方の酵素の基質で
ある生成物を提供し得る。第1の状況は、グルコース−
6−りん酸がアルカリ性ホスファターゼ触媒により加水
分解されてグルコース(ただし、グルコースはグルコー
スオキシダーゼの基質である)になるものとして説明さ
れ得る。
第2の状況は、グルコースがグルコースオキシダーゼに
より酸化されて過酸化水素を生成し、これがロイコ色素
と酵素反応してシグナル発生物質を生成するものとして
説明され得る。
より酸化されて過酸化水素を生成し、これがロイコ色素
と酵素反応してシグナル発生物質を生成するものとして
説明され得る。
また酵素および非酵素から成るカップル触媒も使用され
得る。酵素は非酵素触媒により触媒された反応を被る反
応体を生成し得るか、または非酵素触媒は酵素に対する
基質(補酵素を含む)を生成し得る。使用され得る広い
範囲の非酵素触媒は米国特許第4160645号(19
79年7月10日)に記載されている。
得る。酵素は非酵素触媒により触媒された反応を被る反
応体を生成し得るか、または非酵素触媒は酵素に対する
基質(補酵素を含む)を生成し得る。使用され得る広い
範囲の非酵素触媒は米国特許第4160645号(19
79年7月10日)に記載されている。
酵素の様々な組み合わせを用いてシグナル発生化合物を
生成することができる。特に、ヒドロラーゼ類の組み合
わせを用いると、不溶性シグナル発生物質が生成され得
る。別法として、ヒドロラーゼおよびオキシドレダクタ
ーゼの組み合わせを用いてもシグナル発生物質が提供さ
れ得る。また、オキシドレダクターゼの組み合わせを用
いても、不溶性シグナル発生化合物が生成され得る。
生成することができる。特に、ヒドロラーゼ類の組み合
わせを用いると、不溶性シグナル発生物質が生成され得
る。別法として、ヒドロラーゼおよびオキシドレダクタ
ーゼの組み合わせを用いてもシグナル発生物質が提供さ
れ得る。また、オキシドレダクターゼの組み合わせを用
いても、不溶性シグナル発生化合物が生成され得る。
酵素の組み合わせにおいて、一方の酵素は吸収性材料に
非拡散結合し得、他方の酵素はアナライトにコンジュゲ
ートした標識である。さらに、シグナル発生系の1個ま
たはそれ以上の他の構成員は、選択された特定のシグナ
ル発生系または後続の特定プロトコルにより異なり得る
吸収性材料に結合し得る。
非拡散結合し得、他方の酵素はアナライトにコンジュゲ
ートした標識である。さらに、シグナル発生系の1個ま
たはそれ以上の他の構成員は、選択された特定のシグナ
ル発生系または後続の特定プロトコルにより異なり得る
吸収性材料に結合し得る。
検出可能なシグナルを得るためには、予定部位における
標識の存在により生成されたシグナルを増幅する手段の
使用が望ましい。したがって、普通、標識は好ましくは
触媒または発光性化合物または放射性同位元素であり、
最も好ましくは触媒である。好ましくは、触媒は、単一
標識から多数のシグナル発生分子を生成し得る酵素およ
び補酵素である。
標識の存在により生成されたシグナルを増幅する手段の
使用が望ましい。したがって、普通、標識は好ましくは
触媒または発光性化合物または放射性同位元素であり、
最も好ましくは触媒である。好ましくは、触媒は、単一
標識から多数のシグナル発生分子を生成し得る酵素およ
び補酵素である。
酵素または補酵素を用いることにより、光を吸収する生
成物、例、色素、または照射時に光を放出する生成物、
例、蛍光剤を生成して所望の増幅を達成する。別法とし
て、触媒反応は直接的光放出、例えば化学発光をもたら
し得る。そのような生成物を提供する多数の酵素および
補酵素が、米国特許第4275149号、19〜23欄
および米国特許第4318980号、lO〜14欄に示
されている。
成物、例、色素、または照射時に光を放出する生成物、
例、蛍光剤を生成して所望の増幅を達成する。別法とし
て、触媒反応は直接的光放出、例えば化学発光をもたら
し得る。そのような生成物を提供する多数の酵素および
補酵素が、米国特許第4275149号、19〜23欄
および米国特許第4318980号、lO〜14欄に示
されている。
幾つかの酵素組み合わせが米国特許第4275149号
、23〜28欄に記載されているが、これらの組み合わ
せはこの発明において使用され得る。
、23〜28欄に記載されているが、これらの組み合わ
せはこの発明において使用され得る。
特に興味深いものは、過酸化水素の生成および過酸化水
素を用いて色素前駆体を酸化することによる色素の生成
に関与する酵素である。特定の組み合わせとしては、サ
ツカリド・オキシダーゼ類、例、グルコースおよびガラ
クトースオキシダーゼ、または複素環オキシダーゼ類、
例、ウリカーゼおよびキサンヂンオキシダーゼと、過酸
化水素を用いて色素前駆体を酸化する酵素、すなわちペ
ルオキシダーゼ、例えばホース・ラディッシュ・ペルオ
キシダーゼ、ラクトペルオキシダーゼまたはミクロペル
オキシダーゼとを組み合わ仕たものが挙げられる。別の
酵素組み合わせについても引用して説明の一部とするこ
とができる。単一酵素を標識として使用する場合、他の
酵素、例えばヒドロラーゼ、トランスフェラーゼおよび
オキシドレダクターゼ、好ましくはヒドロラーゼ例えば
アルカリ性ホスファターゼおよびβ−ガラクトンダーゼ
が使用され得る。別法として、ルシフェラーゼ、例えば
ホタル・ルシフェラーゼおよび細菌性ルシフェラーゼら
使用され得る。
素を用いて色素前駆体を酸化することによる色素の生成
に関与する酵素である。特定の組み合わせとしては、サ
ツカリド・オキシダーゼ類、例、グルコースおよびガラ
クトースオキシダーゼ、または複素環オキシダーゼ類、
例、ウリカーゼおよびキサンヂンオキシダーゼと、過酸
化水素を用いて色素前駆体を酸化する酵素、すなわちペ
ルオキシダーゼ、例えばホース・ラディッシュ・ペルオ
キシダーゼ、ラクトペルオキシダーゼまたはミクロペル
オキシダーゼとを組み合わ仕たものが挙げられる。別の
酵素組み合わせについても引用して説明の一部とするこ
とができる。単一酵素を標識として使用する場合、他の
酵素、例えばヒドロラーゼ、トランスフェラーゼおよび
オキシドレダクターゼ、好ましくはヒドロラーゼ例えば
アルカリ性ホスファターゼおよびβ−ガラクトンダーゼ
が使用され得る。別法として、ルシフェラーゼ、例えば
ホタル・ルシフェラーゼおよび細菌性ルシフェラーゼら
使用され得る。
使用される補酵素の例としては、NAD[H]、NAD
P[H]、ビリドキサルホスフェート、FAD[H]、
F M N [H]等があり、通常補酵素は閉環反応に
関与する。特に米国特許第4318980号参照。
P[H]、ビリドキサルホスフェート、FAD[H]、
F M N [H]等があり、通常補酵素は閉環反応に
関与する。特に米国特許第4318980号参照。
酵素反応の生成物は音通、色素または蛍光剤である。多
数の代表的な蛍光剤が米国特許第4275149号、3
0および31欄に示されている。
数の代表的な蛍光剤が米国特許第4275149号、3
0および31欄に示されている。
補助物質・・・この発明による検定では、様々な補助物
質を使用することが多い。例えば、緩衝剤は安定剤と同
様、通常検定媒質中に存在する。多くの場合、これらの
添加剤に加えてさらに蛋白質、例えばアルブミン、また
は界面活性剤、特に非イオン性界面活性剤、結合促進剤
、例、ポリアルキレングリコール類等も含まれ得る。
質を使用することが多い。例えば、緩衝剤は安定剤と同
様、通常検定媒質中に存在する。多くの場合、これらの
添加剤に加えてさらに蛋白質、例えばアルブミン、また
は界面活性剤、特に非イオン性界面活性剤、結合促進剤
、例、ポリアルキレングリコール類等も含まれ得る。
免疫濃縮(免疫集中、immunoconcentra
ting)アセンブリ・・・免疫濃縮アセンブリは、一
般に免疫吸着ゾーンおよび液体吸収ゾーンを有する。普
通、免疫吸着ゾーンおよび液体吸収ゾーンは、直接的ま
たは間接的に液体受容関係を形成している。免疫濃縮ア
センブリは1個またはそれ以上の免疫吸着ゾーンを含み
得る。免疫吸着ゾーンおよび液体吸収ゾーンは、例えば
1個またはそれ以上の免疫吸着ゾーンを何するストリッ
プのような1個の一体的単位を形成し得る。この意味で
は、吸収性材料は、(ストリップの)残りの部分とは異
なる孔サイズを有する部分を含むストリップであり得る
。
ting)アセンブリ・・・免疫濃縮アセンブリは、一
般に免疫吸着ゾーンおよび液体吸収ゾーンを有する。普
通、免疫吸着ゾーンおよび液体吸収ゾーンは、直接的ま
たは間接的に液体受容関係を形成している。免疫濃縮ア
センブリは1個またはそれ以上の免疫吸着ゾーンを含み
得る。免疫吸着ゾーンおよび液体吸収ゾーンは、例えば
1個またはそれ以上の免疫吸着ゾーンを何するストリッ
プのような1個の一体的単位を形成し得る。この意味で
は、吸収性材料は、(ストリップの)残りの部分とは異
なる孔サイズを有する部分を含むストリップであり得る
。
別法として、免疫吸着ゾーンおよび液体吸収ゾーンは別
個のものであり得る。例えば、免疫吸着ゾーンはsbp
構成員が結合している膜であり得る。
個のものであり得る。例えば、免疫吸着ゾーンはsbp
構成員が結合している膜であり得る。
液体吸収ゾーンは、免疫吸着ゾーンと液体受容関係にあ
って、ストリップ、パッド、プラグ、ウィック(wic
k)等の形態をした吸収性物質であり得る。
って、ストリップ、パッド、プラグ、ウィック(wic
k)等の形態をした吸収性物質であり得る。
液体吸収物質は、親水性吸収性物質、例えば紙、スポン
ジ、フェルト、多孔質ポリマー等から成るものであり得
る。
ジ、フェルト、多孔質ポリマー等から成るものであり得
る。
免疫吸着ゾーン・・・sbp構成員が非拡散結合してい
る、吸収性材料片の一部と接触していることが多い、吸
収性固体フィルム、層またはシート。免疫吸着ゾーンは
、多くの場合検定装置の全吸収力と比べて小さな流体吸
収力を有している。シグナル発生系の1個またはそれ以
上の構成員は、直接的または間接的に免疫吸着ゾーンに
結合され得る。
る、吸収性材料片の一部と接触していることが多い、吸
収性固体フィルム、層またはシート。免疫吸着ゾーンは
、多くの場合検定装置の全吸収力と比べて小さな流体吸
収力を有している。シグナル発生系の1個またはそれ以
上の構成員は、直接的または間接的に免疫吸着ゾーンに
結合され得る。
免疫吸着ゾーンは相補的sbp構成員に対する特異的結
合能を有する。sbpの一員の捕獲手段は免疫吸着ゾー
ンに非拡散結合した相補的sbpであり得る。
合能を有する。sbpの一員の捕獲手段は免疫吸着ゾー
ンに非拡散結合した相補的sbpであり得る。
液体吸収ゾーン・・・直接的または間接的に免疫吸着ゾ
ーンと液体受容関係にあり、免疫吸着ゾーンよりも実質
的に大きな液体容量を貯蔵し得るレザーバーまたは貯蔵
ゾーンとして作用する吸収性固体材料。液体吸収ゾーン
は、免疫吸着ゾーンを通してそこから液体をくみ出すポ
ンプとしての役割を演じる。液体吸収ゾーンは免疫吸着
ゾーンに浸透する流体の容量を制御する働きをする。液
体吸収ゾーンのさらに別の機能は、装置を通り抜ける液
体の量を測定することであり得る。免疫吸着ゾーンから
液体吸収ゾーンに沿って延びる連続位置に目盛りを記す
ことにより、溶媒フロントがある位置にきた時点を測定
することができる。溶解または溶媒フロントと接触する
と着色することにより、溶媒が装置に浸透したことを示
す色素を用いることができる。
ーンと液体受容関係にあり、免疫吸着ゾーンよりも実質
的に大きな液体容量を貯蔵し得るレザーバーまたは貯蔵
ゾーンとして作用する吸収性固体材料。液体吸収ゾーン
は、免疫吸着ゾーンを通してそこから液体をくみ出すポ
ンプとしての役割を演じる。液体吸収ゾーンは免疫吸着
ゾーンに浸透する流体の容量を制御する働きをする。液
体吸収ゾーンのさらに別の機能は、装置を通り抜ける液
体の量を測定することであり得る。免疫吸着ゾーンから
液体吸収ゾーンに沿って延びる連続位置に目盛りを記す
ことにより、溶媒フロントがある位置にきた時点を測定
することができる。溶解または溶媒フロントと接触する
と着色することにより、溶媒が装置に浸透したことを示
す色素を用いることができる。
自蔵(set r −contained)液体試薬(
複数も可)・・・この発明の装置を用いる検定方法の間
中、連続放出するように封入された、検定を行うための
1種またはそれ以上の液体試薬。試薬はこの発明の装置
内において自蔵である。試薬は、sbp構成員、シグナ
ル発生系の一員、補助試薬等であり得、普通水性媒質に
溶けた液体形態であり、この発明の装置における少なく
とも1個の破壊可能な容器に封入されている。容器は、
この装置のハウジングと一体であるか、または独立して
いるか、またはtlより多い自蔵試薬が用いられている
場合は両方であり得る。容器(複数も可)を破壊すると
、試薬は毛管現象によるこの検定装置で使用されている
吸収性材料への浸透が可能になり、前記吸収性材料の一
部と前記試薬(複数も可)が接触することになる。
複数も可)・・・この発明の装置を用いる検定方法の間
中、連続放出するように封入された、検定を行うための
1種またはそれ以上の液体試薬。試薬はこの発明の装置
内において自蔵である。試薬は、sbp構成員、シグナ
ル発生系の一員、補助試薬等であり得、普通水性媒質に
溶けた液体形態であり、この発明の装置における少なく
とも1個の破壊可能な容器に封入されている。容器は、
この装置のハウジングと一体であるか、または独立して
いるか、またはtlより多い自蔵試薬が用いられている
場合は両方であり得る。容器(複数も可)を破壊すると
、試薬は毛管現象によるこの検定装置で使用されている
吸収性材料への浸透が可能になり、前記吸収性材料の一
部と前記試薬(複数も可)が接触することになる。
容器は水に対して不浸透性であり、堅いかまたは可撓性
であり得、容器と装置のハウジング間のシールを押し潰
すか、切断するか、穿刺するか、溶かすか、破ること等
により破壊され得る。一般的材料としては、ガラス、プ
ラスチック、蝋、ポリマー膜等が挙げられる。通常、容
器の容量は、少なくとも装置における材料の流体吸収容
量に等しいが、これより多い場合も少ない場合もあり得
る。装置の流体吸収容量より小さい場合、2個以上の容
器を使用することが多い。容器の容量は普通0.1−1
5村、好ましくは0,3〜5酎であるが、例えば液体が
多くのマイクロカプセルに含まれている場合は5立方ミ
クロン程度のこともあり得る。容器はこの装置に適した
形であればいかなる形でもよく、例えば長円体、直方体
、球形等であり得る。
であり得、容器と装置のハウジング間のシールを押し潰
すか、切断するか、穿刺するか、溶かすか、破ること等
により破壊され得る。一般的材料としては、ガラス、プ
ラスチック、蝋、ポリマー膜等が挙げられる。通常、容
器の容量は、少なくとも装置における材料の流体吸収容
量に等しいが、これより多い場合も少ない場合もあり得
る。装置の流体吸収容量より小さい場合、2個以上の容
器を使用することが多い。容器の容量は普通0.1−1
5村、好ましくは0,3〜5酎であるが、例えば液体が
多くのマイクロカプセルに含まれている場合は5立方ミ
クロン程度のこともあり得る。容器はこの装置に適した
形であればいかなる形でもよく、例えば長円体、直方体
、球形等であり得る。
次に、添付図面を用いてこの発明の装置に関するさらに
詳細な記載を行う。ただし、以下の記載は例を示すもの
であって、限定を意図するものではないものとする。こ
の発明の様々な実施態様は、この記載に注目している当
技術分野の熟練者に示唆を与えるものである。かかる実
施態様はこの発明の範囲内に含まれるものとする。
詳細な記載を行う。ただし、以下の記載は例を示すもの
であって、限定を意図するものではないものとする。こ
の発明の様々な実施態様は、この記載に注目している当
技術分野の熟練者に示唆を与えるものである。かかる実
施態様はこの発明の範囲内に含まれるものとする。
第1図は装置10を描いたものである。この装置はハウ
ジング12を存する。このハウジングは実施される検定
の特定タイプに即した適当な形またはサイズを有し得る
。ハウジング12は実施される検定のタイプに適した任
意の材料から製作され得る。ハウジングの製作に使用さ
れる材料は、試料、試料媒質、またはシグナル発生系の
成分を含めて検定実施に使用される全ての試薬に妨害を
、与えてはならない。好ましくは、ハウジングは熱可塑
性材料等から製作される。一般に、ハウジングは、吸収
性材料表面の免疫吸着ゾーン(複数も可)を目で見るた
めの手段I4を有しているため、そこから検定の結果を
測定することができる。従って、ハウジング12の上部
16は完全に透明な熱可塑性材料で構成され得る。別法
として、免疫吸着ゾーン(複数も可)を見るための領域
のみが透明物質であり得るか、または単にこの領域が装
置IOの上部の開口部であり得る。また、ハウジングの
寸法は実施される特定の検定により異なる。
ジング12を存する。このハウジングは実施される検定
の特定タイプに即した適当な形またはサイズを有し得る
。ハウジング12は実施される検定のタイプに適した任
意の材料から製作され得る。ハウジングの製作に使用さ
れる材料は、試料、試料媒質、またはシグナル発生系の
成分を含めて検定実施に使用される全ての試薬に妨害を
、与えてはならない。好ましくは、ハウジングは熱可塑
性材料等から製作される。一般に、ハウジングは、吸収
性材料表面の免疫吸着ゾーン(複数も可)を目で見るた
めの手段I4を有しているため、そこから検定の結果を
測定することができる。従って、ハウジング12の上部
16は完全に透明な熱可塑性材料で構成され得る。別法
として、免疫吸着ゾーン(複数も可)を見るための領域
のみが透明物質であり得るか、または単にこの領域が装
置IOの上部の開口部であり得る。また、ハウジングの
寸法は実施される特定の検定により異なる。
さらに装置lOは、あるゾーンにおいて特異的結合対の
一員を捕獲し、そのゾーンから毛管現象により液体を移
動させるための、ハウジングに封入された手段を含む。
一員を捕獲し、そのゾーンから毛管現象により液体を移
動させるための、ハウジングに封入された手段を含む。
第1−5図に描かれノ述具体例では、前記手段は1個ま
たはそれ以上の免疫吸着ゾーンを有する吸収性材料片、
すなわち吸収性ストリップを含む。好ましくは、吸収性
ストリップは装置10に移動不可能な状態で閉じ込めら
れている。吸収性ストリップ18と液体受容関係にある
液体吸収物質20は、所望により装置1oに内包され、
好ましくは装置10に移動不可能な状態で閉じ込められ
得る。ストリップ18および吸収手段20の組み合わせ
は、あるゾーンにおいてsbp構成員を捕獲し、そのゾ
ーンから液体を毛管現象により移動させる働きをする。
たはそれ以上の免疫吸着ゾーンを有する吸収性材料片、
すなわち吸収性ストリップを含む。好ましくは、吸収性
ストリップは装置10に移動不可能な状態で閉じ込めら
れている。吸収性ストリップ18と液体受容関係にある
液体吸収物質20は、所望により装置1oに内包され、
好ましくは装置10に移動不可能な状態で閉じ込められ
得る。ストリップ18および吸収手段20の組み合わせ
は、あるゾーンにおいてsbp構成員を捕獲し、そのゾ
ーンから液体を毛管現象により移動させる働きをする。
液体吸収成分20は好都合には装置IOの窪んだ部分2
2に位置する。第1−5図の装置において窪んだ部分2
2は、装置10において自蔵液体試薬(30)を含む容
器32を破壊する手段42を有する端部とは反対側の端
部に位置する。これは単なる例にすぎない。当技術分野
に精通しておれば他の例の考案も可能である。例えば、
番号20は試料導入手段44の付近または遠位に位置し
得る。
2に位置する。第1−5図の装置において窪んだ部分2
2は、装置10において自蔵液体試薬(30)を含む容
器32を破壊する手段42を有する端部とは反対側の端
部に位置する。これは単なる例にすぎない。当技術分野
に精通しておれば他の例の考案も可能である。例えば、
番号20は試料導入手段44の付近または遠位に位置し
得る。
ハウジング12の内壁はハウジング中にストリップ18
を封入する支持手段24を含み得る。状況次第では、ス
トリップの毛管現象を本質的に一定とするために、スト
リップ18の旧都および後部をハウジングの内壁と接触
した状態から離すことが肝要な場合もある。さらに、液
体がストリップに浸透すると、ストリップは膨張する。
を封入する支持手段24を含み得る。状況次第では、ス
トリップの毛管現象を本質的に一定とするために、スト
リップ18の旧都および後部をハウジングの内壁と接触
した状態から離すことが肝要な場合もある。さらに、液
体がストリップに浸透すると、ストリップは膨張する。
例えば、手段24はハウジングI2の内壁26および2
8上に存在する突出部分24であり得る。
8上に存在する突出部分24であり得る。
構成成分24は一般にハウジング12の内壁と一体であ
り、円錐形、長方形、長円形、矩形、三角形等の柱状を
呈し得る。構成成分24の重要な特徴は、ストリップ1
8の毛管現象に著しい変化をもたらさないために、スト
リップ18との接触領域を最小限にすることである。「
著しい変化をもたらす」の語は、試験の正確さを減する
かまたは除くことにより免疫化学試験の遂行に昔しい影
響を与える程度にストリップ18の毛管現象が変えられ
ることを意味する。例えば、試料中のアナライトを正確
に測定するためには、十分な毛管現象を維持しなければ
ならない。
り、円錐形、長方形、長円形、矩形、三角形等の柱状を
呈し得る。構成成分24の重要な特徴は、ストリップ1
8の毛管現象に著しい変化をもたらさないために、スト
リップ18との接触領域を最小限にすることである。「
著しい変化をもたらす」の語は、試験の正確さを減する
かまたは除くことにより免疫化学試験の遂行に昔しい影
響を与える程度にストリップ18の毛管現象が変えられ
ることを意味する。例えば、試料中のアナライトを正確
に測定するためには、十分な毛管現象を維持しなければ
ならない。
第2−5図において、構成成分24および25はハウジ
ング12の縦サイドと平行して一列に4tんでいる。一
般に、成分24および25は、乾燥状態の場合にはハウ
ジング内でストリップを軽く上下に移動させ得、そして
ストリップが浸透してきた液体により湿ると前記移動を
抑え得る程度の6寸法を有する。ストリップが乾燥状態
である場合、普通、そのような移動範囲は01肩〜3.
0■である。一般に、ハウジング12の上部および底部
の各内壁には、それぞれ1前当たり約2〜15個の成分
24または25が存在し、長さは各々約0゜5〜4次屑
である。別の具体例では、成分24もしくは25または
それらの両方に対する必要性を無くすため、ストリップ
18は支持体に固定され得る。手段46は、ストリップ
18を装置10の底部分50の内側壁48と接触させな
いための手段である。かかる手段は壁48から突出して
いる成分46の形を呈し得る。成分24.25および4
6の各々は、全てまたは独立して矩形、長円形、三角形
、長方形、円錐形等の形状であり得る。一般に手段46
は手段24および25と同じ機能を有する。
ング12の縦サイドと平行して一列に4tんでいる。一
般に、成分24および25は、乾燥状態の場合にはハウ
ジング内でストリップを軽く上下に移動させ得、そして
ストリップが浸透してきた液体により湿ると前記移動を
抑え得る程度の6寸法を有する。ストリップが乾燥状態
である場合、普通、そのような移動範囲は01肩〜3.
0■である。一般に、ハウジング12の上部および底部
の各内壁には、それぞれ1前当たり約2〜15個の成分
24または25が存在し、長さは各々約0゜5〜4次屑
である。別の具体例では、成分24もしくは25または
それらの両方に対する必要性を無くすため、ストリップ
18は支持体に固定され得る。手段46は、ストリップ
18を装置10の底部分50の内側壁48と接触させな
いための手段である。かかる手段は壁48から突出して
いる成分46の形を呈し得る。成分24.25および4
6の各々は、全てまたは独立して矩形、長円形、三角形
、長方形、円錐形等の形状であり得る。一般に手段46
は手段24および25と同じ機能を有する。
液体吸収成分20は窪んだ領域22に封入されている。
成分20はハウジングの窪んだ部分22の壁と緊密な接
触状態であり得るか、またはそれらの壁は液体吸収成分
20を封入する支持手段を含み得る。いずれにせよ、成
分20をハウジング12の窪み22内に封入することに
より、ストリップ18との液体受容関係が維持される。
触状態であり得るか、またはそれらの壁は液体吸収成分
20を封入する支持手段を含み得る。いずれにせよ、成
分20をハウジング12の窪み22内に封入することに
より、ストリップ18との液体受容関係が維持される。
破壊可能な容器32に入れられた自蔵液体試薬30は、
ハウジング12に内包され、好ましくは移動不可能な状
態にされている。液体試薬は試料中におけるアナライト
の測定に使用される。液体試薬はシグナル発生系の成分
、例えば標識sbp成分等を含み得る。容器32につい
ては装置10の窪み34に位置している。容器32は好
都合には破壊可能な物質、例えばガラス、プラスチック
等により製造される。通常、容器32は、適時容易に破
壊される状態で手段36により支えられた形で窪み34
内に入れられている。手段36は壁であるか、または肩
、リブ、隆起等の形態を呈し得る。窪み34は、乾燥形
態または支持体に拡散的に結合した状態の検定用試薬を
内包し得る。容器(複数も可)を破壊すると、試薬は吸
収性材料と接触し得、毛管現象によりそれに浸透し得る
。
ハウジング12に内包され、好ましくは移動不可能な状
態にされている。液体試薬は試料中におけるアナライト
の測定に使用される。液体試薬はシグナル発生系の成分
、例えば標識sbp成分等を含み得る。容器32につい
ては装置10の窪み34に位置している。容器32は好
都合には破壊可能な物質、例えばガラス、プラスチック
等により製造される。通常、容器32は、適時容易に破
壊される状態で手段36により支えられた形で窪み34
内に入れられている。手段36は壁であるか、または肩
、リブ、隆起等の形態を呈し得る。窪み34は、乾燥形
態または支持体に拡散的に結合した状態の検定用試薬を
内包し得る。容器(複数も可)を破壊すると、試薬は吸
収性材料と接触し得、毛管現象によりそれに浸透し得る
。
さらにハウジング12は、容器32の破壊時に用いる補
助手段38を含む。好ましくは、手段38は、窪み領域
34の上方で横に広がる56により蝶番式に取り付けら
れた移動可能部分40を含む。手段38を操作すること
により、カプセル32を壊すことができる。さらに、手
段38はまた、容器32の向かい側に位置するボタン4
2を含み得る。移動可能な部分40を押し下げると、ボ
タン42が容器32に押しつけられ、容器32が破壊さ
れる。構成部材43は32の破壊を促すために設置され
得る。
助手段38を含む。好ましくは、手段38は、窪み領域
34の上方で横に広がる56により蝶番式に取り付けら
れた移動可能部分40を含む。手段38を操作すること
により、カプセル32を壊すことができる。さらに、手
段38はまた、容器32の向かい側に位置するボタン4
2を含み得る。移動可能な部分40を押し下げると、ボ
タン42が容器32に押しつけられ、容器32が破壊さ
れる。構成部材43は32の破壊を促すために設置され
得る。
さらにハウジング12は、試料を装置10に導入する手
段44を備える。第1−5図に描かれた装置において、
手段44は、ストリップ18上への試料滴下に使用され
得る開口である。カプセル32の破壊後に自蔵液体試薬
が装置IOから流出しさえしなければ、前記開口はいか
なる配置または形状でも使用され得る。開口は、円筒形
、円錐形、矩形、正方形等であり得る。別法として、手
段44は、エラストマー物質(例、ゴム、プラスチック
等)から成型された隔壁の形態を呈し得る。
段44を備える。第1−5図に描かれた装置において、
手段44は、ストリップ18上への試料滴下に使用され
得る開口である。カプセル32の破壊後に自蔵液体試薬
が装置IOから流出しさえしなければ、前記開口はいか
なる配置または形状でも使用され得る。開口は、円筒形
、円錐形、矩形、正方形等であり得る。別法として、手
段44は、エラストマー物質(例、ゴム、プラスチック
等)から成型された隔壁の形態を呈し得る。
分析すべき試料を内包するスポイト、注射針等により装
置lO中への放出が行なわれ得る。一般的に、吸収性材
料がストリップである場合、手段44は窪み領域34と
吸収成分20の位置の間に設置される。装置中へ試料が
放出された結果ストリップ18上に試料か滴下されるよ
うに手段44を設置する。当技術分野に精通しておれば
、装置中へ試料を導入する他の手段の考案も可能である
。
置lO中への放出が行なわれ得る。一般的に、吸収性材
料がストリップである場合、手段44は窪み領域34と
吸収成分20の位置の間に設置される。装置中へ試料が
放出された結果ストリップ18上に試料か滴下されるよ
うに手段44を設置する。当技術分野に精通しておれば
、装置中へ試料を導入する他の手段の考案も可能である
。
第1−5図ではこの発明の装置のアセンブリに関する好
ましい具体例が示されている。好都合にはこの装置は、
上半分または部材16および下半分または部材50とし
て図面上に描かれた2つの部材から形成される。部材1
6および50は、部材16上のエツジライン52および
部材50上のエツジライン54に沿って接合されている
。好都合には、前記の上半分および下半分は共にそれら
を連結する手段を含み得る。例えば、上半分16は、部
材50上の突出部受は入れ手段とぴったりスナップする
ように設計された突出部を有し得る。
ましい具体例が示されている。好都合にはこの装置は、
上半分または部材16および下半分または部材50とし
て図面上に描かれた2つの部材から形成される。部材1
6および50は、部材16上のエツジライン52および
部材50上のエツジライン54に沿って接合されている
。好都合には、前記の上半分および下半分は共にそれら
を連結する手段を含み得る。例えば、上半分16は、部
材50上の突出部受は入れ手段とぴったりスナップする
ように設計された突出部を有し得る。
部材50中にストリップ18、吸収成分20および容器
32を設置後、部材16および50をそれらの縁に沿っ
て接合する。常套技術に従い、音波エネルギー、接着剤
、加熱処理等を通用することにより、部材16および部
材50を合わせてシールしてハウジング12を製作する
ことができる。
32を設置後、部材16および50をそれらの縁に沿っ
て接合する。常套技術に従い、音波エネルギー、接着剤
、加熱処理等を通用することにより、部材16および部
材50を合わせてシールしてハウジング12を製作する
ことができる。
音波エネルギーを適用して音波溶接部を形成する技術が
好ましく、縁に適当なエネルギー・ディレクターを取り
付けることができる。この発明の装置のアセンブリにお
ける上部部材および下部部材の使用は単なる例にすぎな
い。当技術分野に熟練しておれば、この明細書の記載を
参考にしながらこの装置に関して選択された特定の配置
に応じてこの装置を形成する他の手段を考案することら
可能である。
好ましく、縁に適当なエネルギー・ディレクターを取り
付けることができる。この発明の装置のアセンブリにお
ける上部部材および下部部材の使用は単なる例にすぎな
い。当技術分野に熟練しておれば、この明細書の記載を
参考にしながらこの装置に関して選択された特定の配置
に応じてこの装置を形成する他の手段を考案することら
可能である。
装置10の上半分16は、試料中のアナライトの量を定
量する際の助けとなる目盛りをその表面に有し得る。例
えば、シグナル検出が観察される免疫吸着ゾーン内にお
ける長さの測定結果を定量する場合、指示手段(例、目
盛)は定量的結果を得る場合の助けとなる。
量する際の助けとなる目盛りをその表面に有し得る。例
えば、シグナル検出が観察される免疫吸着ゾーン内にお
ける長さの測定結果を定量する場合、指示手段(例、目
盛)は定量的結果を得る場合の助けとなる。
第1〜5図に描かれた装置以外の装置もこの発明に含ま
れる。例えば、多数の試料導入手段44、多数の容器3
0、多数の容器破壊手段38および/または多数の可視
化手段14が使用され得る。
れる。例えば、多数の試料導入手段44、多数の容器3
0、多数の容器破壊手段38および/または多数の可視
化手段14が使用され得る。
さらに、幾つかの前記装置を合わせることにより、幾つ
かの試料の検定が可能な単一装置とすることもできる。
かの試料の検定が可能な単一装置とすることもできる。
この発明による装置の別の具体例を第6および7図に示
す。装置60は、上部部材64、底部部材66および吸
収性部材68を全て内包するハウジング62を含む。上
部部材64は装置への試料導入手段70および検定結果
について吸収性材料68の少なくとも一部を見るための
手段72を有する。描かれた具体例では両手段は部材6
4における開口部である。装置60は、破壊可能または
破断可能なシール78により分離された2つの半球形容
器74および76を内包する。容器74および76は、
底部部材66と連結された上部部材64上の2つの一段
高い領域により形成される。
す。装置60は、上部部材64、底部部材66および吸
収性部材68を全て内包するハウジング62を含む。上
部部材64は装置への試料導入手段70および検定結果
について吸収性材料68の少なくとも一部を見るための
手段72を有する。描かれた具体例では両手段は部材6
4における開口部である。装置60は、破壊可能または
破断可能なシール78により分離された2つの半球形容
器74および76を内包する。容器74および76は、
底部部材66と連結された上部部材64上の2つの一段
高い領域により形成される。
容器74および76の形成材料は、装置全体または上部
部材64の材料と同一または異なるものであり得る。一
般的に、容器74および76は可撓性材料(例、プラス
チック、ゴム等)により製作される。シール78は、加
熱、接着等の手段により部材64および66間に形成さ
れ得る。シール78に関する第1の必要条件は、例えば
容器76を押さえることによりシール78が破壊される
まで、76内の液体試薬を74中へ通さないことである
。
部材64の材料と同一または異なるものであり得る。一
般的に、容器74および76は可撓性材料(例、プラス
チック、ゴム等)により製作される。シール78は、加
熱、接着等の手段により部材64および66間に形成さ
れ得る。シール78に関する第1の必要条件は、例えば
容器76を押さえることによりシール78が破壊される
まで、76内の液体試薬を74中へ通さないことである
。
他方、容器76が押されたときにシール78は容易に破
裂しなければならない。
裂しなければならない。
底部部材66は部材64と同一または異なる材。
料で製作され得る。好ましくは、部材66を剛性材料で
製作することにより、容器76を押さえた場合に抵抗を
示す堅い表面を形成させる。しかしながら、部材66を
非剛性材料により製作することもでき、容器76を使用
者の2本の指の間で押さえつけるか、または堅い表面に
押しつけることも可能である。
製作することにより、容器76を押さえた場合に抵抗を
示す堅い表面を形成させる。しかしながら、部材66を
非剛性材料により製作することもでき、容器76を使用
者の2本の指の間で押さえつけるか、または堅い表面に
押しつけることも可能である。
吸収性部材68は、部分的に容器74中へ延びるストリ
ップ部分80およびそれと反対側のパッド部分82を含
む。一般的に、ストリップ部分80は、通常全体的また
は部分的に手段72を通して見ることができる免疫吸着
ゾーン84を有する。
ップ部分80およびそれと反対側のパッド部分82を含
む。一般的に、ストリップ部分80は、通常全体的また
は部分的に手段72を通して見ることができる免疫吸着
ゾーン84を有する。
装置60は、上部部材64および底部部材66を材料6
8と適当な配置でまとめることにより製作され得る。加
熱、接着、音波エネルギー等により部材64および66
を合わせてシールすることができる。
8と適当な配置でまとめることにより製作され得る。加
熱、接着、音波エネルギー等により部材64および66
を合わせてシールすることができる。
第6および7図の具体例において、容器74は液体試薬
を含み、容器76は空の状態である。別法として、追加
の容器を破裂可能なシールにより分離された装置内に配
することができる。実施される検定において液体試薬の
使用が望ましい場合、同時に、または続いてシールを破
壊する。シールの破壊後、例えば可撓性容器を曲げるこ
とにより、1種またはそれ以上の試薬の混合を行うこと
ができる。
を含み、容器76は空の状態である。別法として、追加
の容器を破裂可能なシールにより分離された装置内に配
することができる。実施される検定において液体試薬の
使用が望ましい場合、同時に、または続いてシールを破
壊する。シールの破壊後、例えば可撓性容器を曲げるこ
とにより、1種またはそれ以上の試薬の混合を行うこと
ができる。
分析される試料の溶媒および自蔵試薬の溶媒は通常水性
媒質であり、他の極性溶媒、特に1〜6個、さらに普通
は1〜4個の炭素原子を有する酸素添加溶媒(例、アル
コール、エーテル等)の約40重量パーセント以下であ
り得る。普通、共溶媒は約20重量パーセント未満の割
合で存在する。
媒質であり、他の極性溶媒、特に1〜6個、さらに普通
は1〜4個の炭素原子を有する酸素添加溶媒(例、アル
コール、エーテル等)の約40重量パーセント以下であ
り得る。普通、共溶媒は約20重量パーセント未満の割
合で存在する。
試料の性質に応じた環境次第では水性媒質の一部または
全部が試料自体により提供され得る。
全部が試料自体により提供され得る。
媒質のpHは普通4−11、さらに普通は5−1O1お
よび好ましくは約6−9の範囲である。
よび好ましくは約6−9の範囲である。
pHは、結合成分の結合親和力を有する重要部位を維持
し、シグナル発生系によるシグナルの発生を最適化すべ
く選択される。所望のpHを達成し、検定中そのp)(
を維持するために様々な緩衝剤が使用され得る。例えば
、はう酸塩、りん酸塩、炭酸塩、トリス、バルビツール
等の緩衝剤が挙げられる。使用される特定の緩衝剤につ
いては厳密ではないが、ある緩衝剤が別の緩衝剤より好
ましい場合もあり得る。
し、シグナル発生系によるシグナルの発生を最適化すべ
く選択される。所望のpHを達成し、検定中そのp)(
を維持するために様々な緩衝剤が使用され得る。例えば
、はう酸塩、りん酸塩、炭酸塩、トリス、バルビツール
等の緩衝剤が挙げられる。使用される特定の緩衝剤につ
いては厳密ではないが、ある緩衝剤が別の緩衝剤より好
ましい場合もあり得る。
望ましくは、約0,05〜0.5重量パーセントの非イ
オン性デタージェントが試料内に含まれる。
オン性デタージェントが試料内に含まれる。
約200〜20000ダルトンの様々なポリオキシアル
キレン化合物が使用され得る。
キレン化合物が使用され得る。
検定の実施には、中程度の、望ましくは一定温度が通常
用いられる。検定および検出可能なシグナルの発生に適
した温度は、一般的に約4°−50℃の範囲、さらに普
通はlO°〜40℃の範囲であり、多(の場合周囲温度
、すなわち約I5゜−25℃である。
用いられる。検定および検出可能なシグナルの発生に適
した温度は、一般的に約4°−50℃の範囲、さらに普
通はlO°〜40℃の範囲であり、多(の場合周囲温度
、すなわち約I5゜−25℃である。
検定され得るアナライトの試験水溶液中における濃度は
、一般的に約10−4〜約10J5モル、さらに普通は
約l0−6〜10−14モルの範囲で変化する。例えば
興味の対象であるアナライトの濃度およびプロトコルを
考慮に入れて通常能の試薬の濃度を決定する。
、一般的に約10−4〜約10J5モル、さらに普通は
約l0−6〜10−14モルの範囲で変化する。例えば
興味の対象であるアナライトの濃度およびプロトコルを
考慮に入れて通常能の試薬の濃度を決定する。
試料および試薬溶液における多くの様々な試薬の濃度は
一般的にアナライトの特定濃度範囲により決定されるが
、通常各試薬の最終濃度は、特定範囲にわたって検定の
感度を最適化すべく経験的に決定される。あるプロトコ
ルの場合、個々の試薬は検定感度に不利な影響を与えな
い程度の実質的過剰量で使用され得る。
一般的にアナライトの特定濃度範囲により決定されるが
、通常各試薬の最終濃度は、特定範囲にわたって検定の
感度を最適化すべく経験的に決定される。あるプロトコ
ルの場合、個々の試薬は検定感度に不利な影響を与えな
い程度の実質的過剰量で使用され得る。
自蔵液体試薬は標準技術に従い容器に閉じ込められ得る
。閉じ込める場合、閉じ込められた試薬に不利な影響を
与えないことが肝要である。閉じ込める方法の例として
は、カプセル中への封入がある。
。閉じ込める場合、閉じ込められた試薬に不利な影響を
与えないことが肝要である。閉じ込める方法の例として
は、カプセル中への封入がある。
吸収性材料がストリップである場合、ストリップ18の
サイズは幾つかの考慮すべき条件により異なる。第1に
、1種またはそれ以上のアナライトか試験溶液中に存在
する場合、十分な量の1種またはそれ以上のsbp成分
を免疫吸着ゾーンへ移動させて高感度で正確な検定の達
成に十分なシグナルを発生させることである。液体吸収
材料20が含まれない場合、ストリップの長さおよび厚
さによりストリップに浸透し得る溶液の蛍を制御する。
サイズは幾つかの考慮すべき条件により異なる。第1に
、1種またはそれ以上のアナライトか試験溶液中に存在
する場合、十分な量の1種またはそれ以上のsbp成分
を免疫吸着ゾーンへ移動させて高感度で正確な検定の達
成に十分なシグナルを発生させることである。液体吸収
材料20が含まれない場合、ストリップの長さおよび厚
さによりストリップに浸透し得る溶液の蛍を制御する。
大量の試験溶液の移動が望ましい場合、免疫吸着ゾーン
上のストリップの流体受容力は、所望の容量の受は入れ
に十分なものでなければならない。液体吸収材料20を
使用する場合、この容量要件は要求されない。一般に、
液体吸収材料20を用いない場合、流体保有容量は普通
20μeより大きく、好ましくは少なくとも50−20
0μQである。液体吸収材料20を使用する場合、2−
20μe程度の低いストリップ保有容量が使用され得る
が、20−200μσの容量が好ましい。
上のストリップの流体受容力は、所望の容量の受は入れ
に十分なものでなければならない。液体吸収材料20を
使用する場合、この容量要件は要求されない。一般に、
液体吸収材料20を用いない場合、流体保有容量は普通
20μeより大きく、好ましくは少なくとも50−20
0μQである。液体吸収材料20を使用する場合、2−
20μe程度の低いストリップ保有容量が使用され得る
が、20−200μσの容量が好ましい。
ストリップの厚さは厳密ではなく、通常0.1−2xj
I、普通0.15−fix、好ましくは0.2−〇 、
7 ytMである。一般的に、最小限の厚さは材料の
強さおよび容易に検出可能なシグナルの発生に関する必
要性より決定されるが、最大限の幅は操作の便利さおよ
び試薬の費用により決定される。
I、普通0.15−fix、好ましくは0.2−〇 、
7 ytMである。一般的に、最小限の厚さは材料の
強さおよび容易に検出可能なシグナルの発生に関する必
要性より決定されるが、最大限の幅は操作の便利さおよ
び試薬の費用により決定される。
試薬の維持を可能にし、限られたサイズの試料を供給す
るためには、ストリップの幅は一般的に比較的狭く、普
通20n未満、好ましくは1o111N未満である。一
般的に、ストリップの幅は約1゜011肩未満であり、
普通的2次次〜12龍、好ましくは約411R〜8RR
の範囲である。
るためには、ストリップの幅は一般的に比較的狭く、普
通20n未満、好ましくは1o111N未満である。一
般的に、ストリップの幅は約1゜011肩未満であり、
普通的2次次〜12龍、好ましくは約411R〜8RR
の範囲である。
ストリップの横断面の大きさについては、説明するため
に前述の記載事項においては矩形として記載したが、こ
れに限定する訳ではない。前述した通り、円形、トリア
ゴナル(triagonal)、長円形等のような他の
横断面の形状の場合も同様にこの発明の範囲内に含まれ
る。当技術分野に熟練しておれば、この明細書の記載を
参考にしてそれらの形状を決定することができる。
に前述の記載事項においては矩形として記載したが、こ
れに限定する訳ではない。前述した通り、円形、トリア
ゴナル(triagonal)、長円形等のような他の
横断面の形状の場合も同様にこの発明の範囲内に含まれ
る。当技術分野に熟練しておれば、この明細書の記載を
参考にしてそれらの形状を決定することができる。
ストリップの長さは、(1)吸収性成分20を使用する
か否か、(2)1種またはそれ以上のアナライトの濃度
および(3)装置10の操作の容易さに関する実際的要
件により異なり、約tCx〜40cm。
か否か、(2)1種またはそれ以上のアナライトの濃度
および(3)装置10の操作の容易さに関する実際的要
件により異なり、約tCx〜40cm。
普通約20X〜25c肩、好ましくは約4〜20c肩で
あるが、実用的な長さであれば任意の長さでよい。
あるが、実用的な長さであれば任意の長さでよい。
ストリップの構造は広範に変化し得、微細、やや微細、
中程度、やや粗大、粗大なものを含む。一般的に、孔の
サイズが小さく、材料が細かいと、毛管の流れは緩慢に
なり、ストリップ表面に結合したコンジュゲートの捕獲
は効果的になる。多孔質材料のきめが粗くなると、流れ
は速くなるが捕獲効率は低下する。材料の孔のきめは所
定の検定に用いる成分の結合速度に従い選択される。
中程度、やや粗大、粗大なものを含む。一般的に、孔の
サイズが小さく、材料が細かいと、毛管の流れは緩慢に
なり、ストリップ表面に結合したコンジュゲートの捕獲
は効果的になる。多孔質材料のきめが粗くなると、流れ
は速くなるが捕獲効率は低下する。材料の孔のきめは所
定の検定に用いる成分の結合速度に従い選択される。
吸収成分20はストリップ18と同一または異なる吸収
性物質により構成され得る。成分20はストリップ、パ
ッド、シリンダーまたは他の好都合な形態を呈し得る。
性物質により構成され得る。成分20はストリップ、パ
ッド、シリンダーまたは他の好都合な形態を呈し得る。
成分20の大きさは、ストリップ18の大きさに関する
場合と同じ因子の幾つかにより決定される。第1に、成
分20は、試料溶媒、検定試薬および必要な洗浄液があ
ればそれも含めて検定に必要とされる液体の最小容量を
吸収し得ることが肝要である。装置10の大きさは普通
長さ約2−30c肩、好ましくは4−15exである。
場合と同じ因子の幾つかにより決定される。第1に、成
分20は、試料溶媒、検定試薬および必要な洗浄液があ
ればそれも含めて検定に必要とされる液体の最小容量を
吸収し得ることが肝要である。装置10の大きさは普通
長さ約2−30c肩、好ましくは4−15exである。
装置の横断面は普通矩形であるが、エリソイド(eli
psoid)または他の何等かの形状の場合もあり得、
普通少なくとも1つの面について平面状である。横断面
の大きさの範囲は0.5〜5C肩、好ましくは1.0〜
3cxであるが、2個以上の装置の成分が単一ユニット
上に含まれる場合はこれより大きいこともあり得る。
psoid)または他の何等かの形状の場合もあり得、
普通少なくとも1つの面について平面状である。横断面
の大きさの範囲は0.5〜5C肩、好ましくは1.0〜
3cxであるが、2個以上の装置の成分が単一ユニット
上に含まれる場合はこれより大きいこともあり得る。
またこの装置は、非拡散的に結合した状態で特異的結合
対(sbp)の一員を有するハウジングに閉じ込められ
た吸収性材料のパッド、前記ハウジングに閉じ込められ
た吸着吸収性材料のパッドおよび前記パッド間に液体受
容関係をもたらす前記ハウジングに閉じ込められた吸収
性材料のストリップを含み得る。
対(sbp)の一員を有するハウジングに閉じ込められ
た吸収性材料のパッド、前記ハウジングに閉じ込められ
た吸着吸収性材料のパッドおよび前記パッド間に液体受
容関係をもたらす前記ハウジングに閉じ込められた吸収
性材料のストリップを含み得る。
開口44、自蔵液体試薬30および吸収性材料20に関
する免疫吸着ゾーン(複数も可)の位置は、この発明の
装置を採用する、使用された特定の検定の基本的原理に
より決定される。接触部分からの最小距離は、介在する
吸収性材料が第2sbp構成員を非拡散結合させる能力
により決定される。
する免疫吸着ゾーン(複数も可)の位置は、この発明の
装置を採用する、使用された特定の検定の基本的原理に
より決定される。接触部分からの最小距離は、介在する
吸収性材料が第2sbp構成員を非拡散結合させる能力
により決定される。
望ましくは、免疫吸着ゾーン58(第4図)の位置は、
開口44と反対側の接触部分から少なくとも5肩取好ま
しくは少なくとも1(]+iであることを要する。試験
溶液が毛管現象によりこれを通過し得る場合はそれより
長い距離をおくこともあり得る。こうして、免疫吸着ゾ
ーンは接触部分から「分離」される。この接触部分はス
トリップの液体吸い上げ端部と吸収性材料20の間に存
する。
開口44と反対側の接触部分から少なくとも5肩取好ま
しくは少なくとも1(]+iであることを要する。試験
溶液が毛管現象によりこれを通過し得る場合はそれより
長い距離をおくこともあり得る。こうして、免疫吸着ゾ
ーンは接触部分から「分離」される。この接触部分はス
トリップの液体吸い上げ端部と吸収性材料20の間に存
する。
自蔵試薬、通常はsbp成分、シグナル発生系の成分ま
たは洗浄液(必要ならば)は、特定の検定プロトコルお
よびジグチル発生におけるそれらの役割に応じて広い範
囲の濃度で使用され得る。sbp成分の量は、試験溶液
中に存するアナライトの予定最小測定可能量に基づいて
選択される。免疫吸着ゾーンと接触する各sbp成分の
量は、好ましくは免疫吸着ゾーンと接触する試験溶液中
の対応するアナライト量と等しいかまたはそれより多い
。
たは洗浄液(必要ならば)は、特定の検定プロトコルお
よびジグチル発生におけるそれらの役割に応じて広い範
囲の濃度で使用され得る。sbp成分の量は、試験溶液
中に存するアナライトの予定最小測定可能量に基づいて
選択される。免疫吸着ゾーンと接触する各sbp成分の
量は、好ましくは免疫吸着ゾーンと接触する試験溶液中
の対応するアナライト量と等しいかまたはそれより多い
。
しかしながら、sbp成分の量は免疫吸着ゾーンと接触
する対応するアナライト量と比べて100倍またはそれ
以上低いこともあり得る。
する対応するアナライト量と比べて100倍またはそれ
以上低いこともあり得る。
1個またはそれ以上のsbp成分およびシグナル発生系
成分は、ストリップ上の免疫吸着ゾーンと実質的に均一
結合し得る。結合した各々のsbp成分およびシグナル
発生系成分の量は使用される特定の検定プロトコルによ
り異なる。
成分は、ストリップ上の免疫吸着ゾーンと実質的に均一
結合し得る。結合した各々のsbp成分およびシグナル
発生系成分の量は使用される特定の検定プロトコルによ
り異なる。
この装置を使用する検定を行う場合、通常プロトコルは
、水性媒質中に、アナライトを含有する疑いのある試料
および選択された検定プロトコルに必要とされる他の試
薬を合わせて試験溶液を調製する工程を含む。試験溶液
が試料自体である場合もある。試料は、広い範囲の多様
な供給源、例えば生理学的流体(例、唾液、血液、血清
、血しょう、尿、眼のレンズ液、髄液等)、食品(ミル
クおよびワイン)、化学処理流水、食物排水等から採取
され得る。
、水性媒質中に、アナライトを含有する疑いのある試料
および選択された検定プロトコルに必要とされる他の試
薬を合わせて試験溶液を調製する工程を含む。試験溶液
が試料自体である場合もある。試料は、広い範囲の多様
な供給源、例えば生理学的流体(例、唾液、血液、血清
、血しょう、尿、眼のレンズ液、髄液等)、食品(ミル
クおよびワイン)、化学処理流水、食物排水等から採取
され得る。
第1−5図により説明すると、試験溶液を手段44によ
り装置IO中に導入してストリップ18の一部と接触さ
せる。試験溶液は毛管現象により接触部分からストリッ
プ18に沿って浸透する。
り装置IO中に導入してストリップ18の一部と接触さ
せる。試験溶液は毛管現象により接触部分からストリッ
プ18に沿って浸透する。
次に、手段38を押し下げると容器32が破壊され、自
蔵液体検定試薬30が窪み34中に放出される。前述し
た通り、接触部分はまた免疫吸着ゾーンとしての役割も
果たし得、独立した免疫吸着ゾーンは選択された特定の
検定プロトコルに従い使用され得る。普通、毛管現象に
よりストリップを浸し続けて充分量の検定試薬を通過さ
せるか、または場合により免疫吸着ゾーンでの結合をも
たらす。
蔵液体検定試薬30が窪み34中に放出される。前述し
た通り、接触部分はまた免疫吸着ゾーンとしての役割も
果たし得、独立した免疫吸着ゾーンは選択された特定の
検定プロトコルに従い使用され得る。普通、毛管現象に
よりストリップを浸し続けて充分量の検定試薬を通過さ
せるか、または場合により免疫吸着ゾーンでの結合をも
たらす。
殆どの場合、溶液がストリップに浸透する所要時間は比
較的短い。普通、ストリップへの溶液の浸透は、少なく
とも30秒で1時間以下、さらに普通は約1分〜30分
を要する。シグナル発生手段に酵素を用いる場合、シグ
ナルの発生には一般的に30秒〜30分、さらに普通は
約30秒〜5分を要する。
較的短い。普通、ストリップへの溶液の浸透は、少なく
とも30秒で1時間以下、さらに普通は約1分〜30分
を要する。シグナル発生手段に酵素を用いる場合、シグ
ナルの発生には一般的に30秒〜30分、さらに普通は
約30秒〜5分を要する。
液体がストリップに浸透後、手段14を通じて免疫吸着
ゾーンにおける検出可能なシグナルの存在について検査
する。化学薬剤が標識を含めてシグナル発生手段の一部
を構成する場合、ディベロツバ−溶液中にこれらの試薬
を含む追加の破壊可能な容器が、装置10における容器
32と同じかまたは独立した窪みに設置され得る。この
容器の中身は容器を破壊することにより適時放出され得
る。
ゾーンにおける検出可能なシグナルの存在について検査
する。化学薬剤が標識を含めてシグナル発生手段の一部
を構成する場合、ディベロツバ−溶液中にこれらの試薬
を含む追加の破壊可能な容器が、装置10における容器
32と同じかまたは独立した窪みに設置され得る。この
容器の中身は容器を破壊することにより適時放出され得
る。
こうしてストリップの液体受容端部がディベロツバ−溶
液と接触することにより、前記溶液はストリップに沿っ
て免疫吸着ゾーンへ運ばれる。
液と接触することにより、前記溶液はストリップに沿っ
て免疫吸着ゾーンへ運ばれる。
標識として酵素を用いる場合、基質は通常速度を制限し
ない程度にディベロツバ−溶液中充分な濃度(Kmより
高い濃度)で存在する。普通ディベロツバ−溶液は好適
には酵素系に対して緩衝状態である。
ない程度にディベロツバ−溶液中充分な濃度(Kmより
高い濃度)で存在する。普通ディベロツバ−溶液は好適
には酵素系に対して緩衝状態である。
シグナルの測定前に充分な時間を経過させてングナル発
生化合物を生成させる。一旦検出可能なシグナルの発生
機会が与えられると、試料中に少なくとも1種のアナラ
イトが予定最小検出可能量またはそれ以上の量で存在す
るか否かが判る。
生化合物を生成させる。一旦検出可能なシグナルの発生
機会が与えられると、試料中に少なくとも1種のアナラ
イトが予定最小検出可能量またはそれ以上の量で存在す
るか否かが判る。
ストリップは、優れた特性を得るための多様な物質で被
覆され得る。コーティングには、蛋白質コーティング、
多糖類コーティング、合成ポリマー、砂糖等が含まれ得
、これらは特にストリップにコンジュゲートされた物質
の安定性を高めるために使用される。またこれらの化合
物は物質の結合(例、抗体結合等)の改良に使用され得
る。
覆され得る。コーティングには、蛋白質コーティング、
多糖類コーティング、合成ポリマー、砂糖等が含まれ得
、これらは特にストリップにコンジュゲートされた物質
の安定性を高めるために使用される。またこれらの化合
物は物質の結合(例、抗体結合等)の改良に使用され得
る。
ストリップを反応性官能基で活性化することにより、ス
トリップにコンジュゲートした有機物質(米国特許第4
168146号に記載されている)の共有結合が提供さ
れ得る。
トリップにコンジュゲートした有機物質(米国特許第4
168146号に記載されている)の共有結合が提供さ
れ得る。
sbp成分および所望によりシグナル発生系成分は、共
有結合以外に吸着により吸収性材料片またはストリップ
と結合し得る。かかる結合は、検定プロトコルがストリ
ップに沿った前記成分の移動を必要とするか否かにより
、非拡散的または拡散的であり得る。これは、吸収性材
料とストリップに結合される物質を含む溶液とを接触さ
せ、ストリップを乾燥させる工程を伴う。結合が非拡散
的である場合、蛋白質、デタージェント、多糖類または
非特異的結合部位をブロックし得る他の物質による後処
理が必要となり得る。また吸収性材料はsbp成分によ
り被覆されたビーズを捕らえることもできる。
有結合以外に吸着により吸収性材料片またはストリップ
と結合し得る。かかる結合は、検定プロトコルがストリ
ップに沿った前記成分の移動を必要とするか否かにより
、非拡散的または拡散的であり得る。これは、吸収性材
料とストリップに結合される物質を含む溶液とを接触さ
せ、ストリップを乾燥させる工程を伴う。結合が非拡散
的である場合、蛋白質、デタージェント、多糖類または
非特異的結合部位をブロックし得る他の物質による後処
理が必要となり得る。また吸収性材料はsbp成分によ
り被覆されたビーズを捕らえることもできる。
この発明の装置は広範な種類の検定法およびプロトコル
で使用され得る。
で使用され得る。
一般に、この検定法は下記の工程を含む。
(a)試料を含有する試験溶液を請求項1記載の装置に
導入し、 (b)試験溶液を上記捕獲手段の少なくとも一部に浸透
させ、 (c)上記自蔵液体試薬を放出させ、 (d)放出された試薬を捕獲手段の少なくとも一部に少
なくとも上記ゾーンを通じて浸透させ、(e)試料中に
おけるアナライトの存在に対応するシグナルの存在につ
いて上記ゾーンを観察する。
導入し、 (b)試験溶液を上記捕獲手段の少なくとも一部に浸透
させ、 (c)上記自蔵液体試薬を放出させ、 (d)放出された試薬を捕獲手段の少なくとも一部に少
なくとも上記ゾーンを通じて浸透させ、(e)試料中に
おけるアナライトの存在に対応するシグナルの存在につ
いて上記ゾーンを観察する。
以下、単なる例として実施例を記載するが、限定する意
図は無い。
図は無い。
米国特許第4366241号はsbp成分の測定に関す
る検定方法を記載している。装置は、sbp成分が拡散
運動に対して固定されている免疫吸着ゾーンを有する。
る検定方法を記載している。装置は、sbp成分が拡散
運動に対して固定されている免疫吸着ゾーンを有する。
一般に免疫吸着ゾーンは試料溶液の入り口と反対側に位
置する。液体吸収ゾーンは免疫吸着ゾーンと液体受容関
係にある。
置する。液体吸収ゾーンは免疫吸着ゾーンと液体受容関
係にある。
この方法では、破壊可能なカプセルに封入された水性媒
質中にsbp成分とコンジュゲートしたシグナル標識成
分を有するシグナル発生系が装置と組み合わせて使用さ
れる。免疫吸着ゾーンは、シグナル発生系成分の拡散運
動を放置または阻害する状態で、ゾーンに結合している
1種またはそれ以上のシグナル発生系を含み得る。この
方法のプロトコルによると、検出ゾーンに結合したシグ
ナル標識の量は試料中のアナライトの量に対応している
。
質中にsbp成分とコンジュゲートしたシグナル標識成
分を有するシグナル発生系が装置と組み合わせて使用さ
れる。免疫吸着ゾーンは、シグナル発生系成分の拡散運
動を放置または阻害する状態で、ゾーンに結合している
1種またはそれ以上のシグナル発生系を含み得る。この
方法のプロトコルによると、検出ゾーンに結合したシグ
ナル標識の量は試料中のアナライトの量に対応している
。
この方法は、検定装置と、シグナル発生系の1種または
それ以上の要素が加えられた液体試料との接触工程を含
む。この発明による破壊可能な容器に入れられた1種ま
たはそれ以上の溶液が使用され得る。そのような自蔵液
体試薬はシグナル発生系の任意の残存成分であり得、さ
らに非特異的結合シグナル標識を含まない免疫吸着ゾー
ンの洗浄に使用され得る。シグナル発生系は免疫吸着ゾ
ーンにおいて検出可能なシグナルを供給する。このシグ
ナルは、既知量のアナライトを含む標準または免疫吸着
ゾーン以外の吸収性材料部分との比較に基づいたシグナ
ルレベルと比較され得る。
それ以上の要素が加えられた液体試料との接触工程を含
む。この発明による破壊可能な容器に入れられた1種ま
たはそれ以上の溶液が使用され得る。そのような自蔵液
体試薬はシグナル発生系の任意の残存成分であり得、さ
らに非特異的結合シグナル標識を含まない免疫吸着ゾー
ンの洗浄に使用され得る。シグナル発生系は免疫吸着ゾ
ーンにおいて検出可能なシグナルを供給する。このシグ
ナルは、既知量のアナライトを含む標準または免疫吸着
ゾーン以外の吸収性材料部分との比較に基づいたシグナ
ルレベルと比較され得る。
米国特許第4366241号の方法の実施態様は米国特
許第4632901号に記載されている。
許第4632901号に記載されている。
後者の特許は免疫検定実施用の装置および方法を開示し
ている。この装置は、抗体、一般的にはモノクローナル
抗体が結合している膜またはフィルターである第1成分
を含む。前記の抗体が結合した膜は免疫吸着ゾーンに相
当する。さらにこの方法は、流体試料が加えられた場合
、第1成分との接触後に(第1成分を通して)流れを誘
導する役割を演じる吸着性材料から成る第2成分を使用
する。
ている。この装置は、抗体、一般的にはモノクローナル
抗体が結合している膜またはフィルターである第1成分
を含む。前記の抗体が結合した膜は免疫吸着ゾーンに相
当する。さらにこの方法は、流体試料が加えられた場合
、第1成分との接触後に(第1成分を通して)流れを誘
導する役割を演じる吸着性材料から成る第2成分を使用
する。
この免疫検定は、手段44を通じて試料を第1成分の上
部表面に適用して結合させることにより行なわれる(例
、抗体により試料中の抗原を第1成分に固定)。試料を
加えた後、抗原に対する標識抗体を加え、非結合標識抗
体を除去するための洗浄工程を行う。この発明によると
、標識抗体溶液および洗浄溶液は破壊可能なカプセルに
封入され得る。洗浄後における第1成分上の標識抗体の
存在は検定試料における抗原の存在を示すものである。
部表面に適用して結合させることにより行なわれる(例
、抗体により試料中の抗原を第1成分に固定)。試料を
加えた後、抗原に対する標識抗体を加え、非結合標識抗
体を除去するための洗浄工程を行う。この発明によると
、標識抗体溶液および洗浄溶液は破壊可能なカプセルに
封入され得る。洗浄後における第1成分上の標識抗体の
存在は検定試料における抗原の存在を示すものである。
この装置が使用され得る検定方法の別の例が米国特許出
願第701464号(ヨーロッパ特許出頼公開第191
640号に対応)に記載されている。これはアナライト
を含有する疑いのある試料におけるアナライトの存在を
測定する方法である。
願第701464号(ヨーロッパ特許出頼公開第191
640号に対応)に記載されている。これはアナライト
を含有する疑いのある試料におけるアナライトの存在を
測定する方法である。
この方法では、試料および第1 sbp成分を含有する
試験溶液を、毛管現象により試験溶液を浸透させ得る吸
収性材料ストリップの一部分と接触させる。第1 sb
p成分はアナライトと結合することができる。ストリッ
プは、小部位またはストリップの接触部分から離れたス
トリップ上の免疫吸着ゾーンに第1sbp成分を集めて
非拡散的に結合させる第2 sbp成分を一体として含
む。検出可能なシグナルは試験溶液におけるアナライト
の存在に応じて発生される。試験溶液が吸収性材料に浸
透すると、試験溶液は免疫吸着ゾーンに到達する。試験
溶液がストリップの少なくとも一部に浸透した後、シグ
ナル発生系成分を含有するディベロツバ−溶液とストリ
ップを接触させる。かかるディベロツバ−溶液はこの発
明の装置のカプセルに内包され得る。中身はカプセルを
破壊することにより放出され得る。必要ならば、次にシ
グナル発生系の残りの成分(があれば)の溶液を含有す
る別のカプセルを破壊することにより、ストリップを前
記成分と接触させることができる。次いで、免疫吸着ゾ
ーンで発せられた検出可能なシグナルを免疫吸着ゾーン
以外のストリップ部分で検出され得るシグナルと比較す
る、ことにより、試料中のアナライトを測定する。アナ
ライトが試験溶液中に存在する場合、免疫吸着ゾーンで
発せられたシグナルは鋭い独特のパターンを有し得、ス
トリップ上の隣接部位で発生されるシグナルとは明確な
対照をなす。
試験溶液を、毛管現象により試験溶液を浸透させ得る吸
収性材料ストリップの一部分と接触させる。第1 sb
p成分はアナライトと結合することができる。ストリッ
プは、小部位またはストリップの接触部分から離れたス
トリップ上の免疫吸着ゾーンに第1sbp成分を集めて
非拡散的に結合させる第2 sbp成分を一体として含
む。検出可能なシグナルは試験溶液におけるアナライト
の存在に応じて発生される。試験溶液が吸収性材料に浸
透すると、試験溶液は免疫吸着ゾーンに到達する。試験
溶液がストリップの少なくとも一部に浸透した後、シグ
ナル発生系成分を含有するディベロツバ−溶液とストリ
ップを接触させる。かかるディベロツバ−溶液はこの発
明の装置のカプセルに内包され得る。中身はカプセルを
破壊することにより放出され得る。必要ならば、次にシ
グナル発生系の残りの成分(があれば)の溶液を含有す
る別のカプセルを破壊することにより、ストリップを前
記成分と接触させることができる。次いで、免疫吸着ゾ
ーンで発せられた検出可能なシグナルを免疫吸着ゾーン
以外のストリップ部分で検出され得るシグナルと比較す
る、ことにより、試料中のアナライトを測定する。アナ
ライトが試験溶液中に存在する場合、免疫吸着ゾーンで
発せられたシグナルは鋭い独特のパターンを有し得、ス
トリップ上の隣接部位で発生されるシグナルとは明確な
対照をなす。
この装置が使用され得る検定方法の他の例が米国特許出
願第904597号(ヨーロッパ特許出願第87307
776.2号に対応)に記載されている。この方法は、
アナライトを含有する疑のある試料におけるアナライト
の存在の測定を目的とする。この方法では、試料、アナ
ライトの抗体並びにアナライトおよび標識のコンジュゲ
ートを含有する試験溶液と、毛管現象により試験溶液を
少なくとも一方向に浸透させ得る吸収性材料片の接触部
分とを接触させる。吸収性材料は、接触部分から離れた
吸収性材料部分に非拡散結合したコンジュゲートに結合
し得る第2レセプターを有する免疫吸着ゾーンを含む。
願第904597号(ヨーロッパ特許出願第87307
776.2号に対応)に記載されている。この方法は、
アナライトを含有する疑のある試料におけるアナライト
の存在の測定を目的とする。この方法では、試料、アナ
ライトの抗体並びにアナライトおよび標識のコンジュゲ
ートを含有する試験溶液と、毛管現象により試験溶液を
少なくとも一方向に浸透させ得る吸収性材料片の接触部
分とを接触させる。吸収性材料は、接触部分から離れた
吸収性材料部分に非拡散結合したコンジュゲートに結合
し得る第2レセプターを有する免疫吸着ゾーンを含む。
さらに吸収性材料は、免疫吸着ゾーンおよび接触部分間
でアナライトに抗体を結合させ得る第2レセプターを含
む。第2レセプターは吸収性材料に非拡散結合している
。試験溶液の少なくとも一部が毛管現象により吸収性材
料に浸透することにより、免疫吸着ゾーンと接触する。
でアナライトに抗体を結合させ得る第2レセプターを含
む。第2レセプターは吸収性材料に非拡散結合している
。試験溶液の少なくとも一部が毛管現象により吸収性材
料に浸透することにより、免疫吸着ゾーンと接触する。
このゾーンをコンジュゲートの存在について検蛋する。
このため、標識と相互作用し得るシグナル発生手段にス
トリップを曝すことにより、試験溶液中のアナライトの
量に応じてシグナルを発生させ得る。シグナル発生手段
はこの発明の装置内の破壊可能なカプセルに含まれ得る
。カプセルを破壊すると、シグナル発生手段が放出され
てストリップと接触する。次いで、免疫吸着ゾーンで発
生されたシグナルを検出する。
トリップを曝すことにより、試験溶液中のアナライトの
量に応じてシグナルを発生させ得る。シグナル発生手段
はこの発明の装置内の破壊可能なカプセルに含まれ得る
。カプセルを破壊すると、シグナル発生手段が放出され
てストリップと接触する。次いで、免疫吸着ゾーンで発
生されたシグナルを検出する。
この装置が使用され得る検定法の他の例が米国特許出願
第928233号(ヨーロッパ特許出願第873097
23.2号14対応)に記載されている。この方法では
、アナライトを含有する疑のある試料における1種また
はそれ以上のアナライトの予定最小検出可能量の存在が
測定される。各アナライトはsbp成分である。この方
法では、試料および2種またはそれ以上の複数の第1
sbp成分(各々アナライトのiつに類似)の予定量を
含有する試験溶液を、毛管現象により試験溶液を少なく
とも一方向に浸透させ得る吸収性材料片の接触部分と接
触させる。吸収性材料は、各々アナライトおよび対応す
る第1sbp成分の1つと結合し得る2種またはそれ以
上の複数の第2sbp成分の予定量を含む。第2 sb
p成分は、少なくとも接触部分および接触部分から離れ
た吸収性材料片上の予定部位または免疫吸着ゾーン間で
吸収性材料と非拡散的に結合しているため、1種または
それ以上のアナライトの予定量が存在している場合、類
似第1sbp成分は少なくとも吸収性材料片上の予定部
位に移動する。次に、試験溶液の少なくとも一部が毛管
現象により吸収性材料に浸透する。予め定められた部位
を1種またはそれ以上の第1 sbp成分の存在(普通
、検出可能なシグナルの存在により示される)について
検査する。第1sbp成分と相互作用して試料中の1種
またはそれ以上のアナライトの里に応じて予定部位で検
出可能なシグナルを発生させるシグナル発生手段に予定
部位を曝し得る。かかるシグナル発生手段は、この発明
の装置内の破壊可能なカプセル中に内包され、カプセル
破壊後に放出されて吸収性材料と接触し得る。
第928233号(ヨーロッパ特許出願第873097
23.2号14対応)に記載されている。この方法では
、アナライトを含有する疑のある試料における1種また
はそれ以上のアナライトの予定最小検出可能量の存在が
測定される。各アナライトはsbp成分である。この方
法では、試料および2種またはそれ以上の複数の第1
sbp成分(各々アナライトのiつに類似)の予定量を
含有する試験溶液を、毛管現象により試験溶液を少なく
とも一方向に浸透させ得る吸収性材料片の接触部分と接
触させる。吸収性材料は、各々アナライトおよび対応す
る第1sbp成分の1つと結合し得る2種またはそれ以
上の複数の第2sbp成分の予定量を含む。第2 sb
p成分は、少なくとも接触部分および接触部分から離れ
た吸収性材料片上の予定部位または免疫吸着ゾーン間で
吸収性材料と非拡散的に結合しているため、1種または
それ以上のアナライトの予定量が存在している場合、類
似第1sbp成分は少なくとも吸収性材料片上の予定部
位に移動する。次に、試験溶液の少なくとも一部が毛管
現象により吸収性材料に浸透する。予め定められた部位
を1種またはそれ以上の第1 sbp成分の存在(普通
、検出可能なシグナルの存在により示される)について
検査する。第1sbp成分と相互作用して試料中の1種
またはそれ以上のアナライトの里に応じて予定部位で検
出可能なシグナルを発生させるシグナル発生手段に予定
部位を曝し得る。かかるシグナル発生手段は、この発明
の装置内の破壊可能なカプセル中に内包され、カプセル
破壊後に放出されて吸収性材料と接触し得る。
この装置が使用され得る検定技術の別の例は、米国特許
出願第928771号(ヨーロッパ特許出願第8730
9724.0号に対応)に記載されている。この方法で
は、アナライトを含有する疑のある試料におけるアナラ
イトの存在が測定される。アナライトはsbp成分であ
る。この方法では、試料およびアナライトに類似した第
1sbp成分を含有する試験溶液を、毛管現象により試
験溶液を少な(とも一方向に浸透させ得る吸収性材料片
の接触部分と接触させる。吸収性材料はアナライトおよ
び第1 sbp成分を結合し得る第2sbp成分を含む
。第2sb、p成分は、接触部分および接触部分から離
れた片上の小部位または免疫吸着ゾーン間の少なくとも
その一部分で吸収性材料と非拡散結合している。旧記部
位の表面積は実質的に吸収性材料片の面積よりも小さい
。前記部位は第25bl)成分と結合してい伺い第1
sbp成分と結合し得る。
出願第928771号(ヨーロッパ特許出願第8730
9724.0号に対応)に記載されている。この方法で
は、アナライトを含有する疑のある試料におけるアナラ
イトの存在が測定される。アナライトはsbp成分であ
る。この方法では、試料およびアナライトに類似した第
1sbp成分を含有する試験溶液を、毛管現象により試
験溶液を少な(とも一方向に浸透させ得る吸収性材料片
の接触部分と接触させる。吸収性材料はアナライトおよ
び第1 sbp成分を結合し得る第2sbp成分を含む
。第2sb、p成分は、接触部分および接触部分から離
れた片上の小部位または免疫吸着ゾーン間の少なくとも
その一部分で吸収性材料と非拡散結合している。旧記部
位の表面積は実質的に吸収性材料片の面積よりも小さい
。前記部位は第25bl)成分と結合してい伺い第1
sbp成分と結合し得る。
次に、毛管現象により試験溶液の少なくとも一部が吸収
性材料に浸透することにより、前記部位と接触する。前
記部位における第1 sbp成分の存在(普通、検出可
能なシグナルの存在により示される)について前記部位
を検査する。第1sbp成分との相互作用により試料中
のアナライトの量に応じて前記部位で検出可能なシグナ
ルを発生し得るシグナル発生手段に前記部位を曝すこと
により、前記シグナルは発生され得る。シグナル発生手
段はこの発明の装置内の破壊可能なカプセルに封入され
た液体媒質中に存在し得る。カプセルを破壊して放出さ
れたその中身は毛管現象により前記部位を通って吸収性
材料に浸透する。前記部位におけるシグナルは前記部位
以外の吸収性材料部分で検出され得るシグナルと識別可
能である。
性材料に浸透することにより、前記部位と接触する。前
記部位における第1 sbp成分の存在(普通、検出可
能なシグナルの存在により示される)について前記部位
を検査する。第1sbp成分との相互作用により試料中
のアナライトの量に応じて前記部位で検出可能なシグナ
ルを発生し得るシグナル発生手段に前記部位を曝すこと
により、前記シグナルは発生され得る。シグナル発生手
段はこの発明の装置内の破壊可能なカプセルに封入され
た液体媒質中に存在し得る。カプセルを破壊して放出さ
れたその中身は毛管現象により前記部位を通って吸収性
材料に浸透する。前記部位におけるシグナルは前記部位
以外の吸収性材料部分で検出され得るシグナルと識別可
能である。
この装置が使用され得る検定方法のさらに別の例は、米
国特許第4552839号に記載されており、その変形
は米国特許第46.23461号に記載されている。米
国特許第4552839号は粒子含有媒質中におけるア
ナライトの存在の測定に用いる方法および組成物を開示
しており、その開示において興味あるアナライトは試料
中の粒子と結合または非結合状態であり得る。検定媒質
を吸収性材料と液体空気界面で接触させることにより、
界面付近に粒子の小部位、普通は細い帯または集合点を
得ることができ、前記部位は試料中のアナライトの存在
に対応し得るシグナルを提供する。粒子には、合成粒子
、細胞および免疫複合体アグリゲートがある。粒子のサ
イズおよび性質推びに水性媒質の性質を利用して小部位
の形成を調節することかでさる。この方法の幾つかの具
体例では、次に液体媒質中の1種またはそれ以上のシグ
ナル発生系成分を吸収性材料と接触させる。液体媒質は
この発明による装置内の破壊可能なカプセルに内包され
得る。
国特許第4552839号に記載されており、その変形
は米国特許第46.23461号に記載されている。米
国特許第4552839号は粒子含有媒質中におけるア
ナライトの存在の測定に用いる方法および組成物を開示
しており、その開示において興味あるアナライトは試料
中の粒子と結合または非結合状態であり得る。検定媒質
を吸収性材料と液体空気界面で接触させることにより、
界面付近に粒子の小部位、普通は細い帯または集合点を
得ることができ、前記部位は試料中のアナライトの存在
に対応し得るシグナルを提供する。粒子には、合成粒子
、細胞および免疫複合体アグリゲートがある。粒子のサ
イズおよび性質推びに水性媒質の性質を利用して小部位
の形成を調節することかでさる。この方法の幾つかの具
体例では、次に液体媒質中の1種またはそれ以上のシグ
ナル発生系成分を吸収性材料と接触させる。液体媒質は
この発明による装置内の破壊可能なカプセルに内包され
得る。
この発明の一実施態様において、蛋白質、例えばひとし
ゅう上膜生殖腺刺激ホルモン(HCG)に対する抗体は
、第2図の手段14を通して観察され得る部位に非拡散
結合している。I−1CGに対する酵素標識抗体は、試
料導入手段44と反対側または手段44および手段14
の間のストリップ18」二に拡散的に結合している。水
を含む破壊可能容器は窪み34内にある。酵素の基質お
よび緩衝液は前記水に溶けているか、または乾燥形態で
ストリップ18または窪み34に存在する。この方法は
、HCGを含有する疑のある尿または血清試料を手段4
4によりストリップ18に適用し、手段38により容器
を破壊し、液体が手段14を通って浸透するのを待ち、
蛋白質の存在に応じた前記部位における酵素生成物の形
成を観察することにより行なわれる。
ゅう上膜生殖腺刺激ホルモン(HCG)に対する抗体は
、第2図の手段14を通して観察され得る部位に非拡散
結合している。I−1CGに対する酵素標識抗体は、試
料導入手段44と反対側または手段44および手段14
の間のストリップ18」二に拡散的に結合している。水
を含む破壊可能容器は窪み34内にある。酵素の基質お
よび緩衝液は前記水に溶けているか、または乾燥形態で
ストリップ18または窪み34に存在する。この方法は
、HCGを含有する疑のある尿または血清試料を手段4
4によりストリップ18に適用し、手段38により容器
を破壊し、液体が手段14を通って浸透するのを待ち、
蛋白質の存在に応じた前記部位における酵素生成物の形
成を観察することにより行なわれる。
便宜上、この発明の装置は、アナライトの検定に使用さ
れる予め定められた量の試薬とパッケージにして組み合
わせたキットの形で提供され得る。
れる予め定められた量の試薬とパッケージにして組み合
わせたキットの形で提供され得る。
関がする特定の検定法次第で、試薬は、酵素標識sbp
成分、酵素基質、緩衝剤、酵素により必要とされる任意
の追加の酵素基質およびコファクター、色素前駆体等を
含み得る。さらに、他の添加剤、例えば安定剤、緩衝剤
等も含有され得る。種々の試薬の相対晴は、検定感度を
実質的に最適化する試薬の溶液濃度を達成すべく広範に
変えられ得る。
成分、酵素基質、緩衝剤、酵素により必要とされる任意
の追加の酵素基質およびコファクター、色素前駆体等を
含み得る。さらに、他の添加剤、例えば安定剤、緩衝剤
等も含有され得る。種々の試薬の相対晴は、検定感度を
実質的に最適化する試薬の溶液濃度を達成すべく広範に
変えられ得る。
適宜、この発明の装置を気密パッケージに包装すること
により、任意の免疫化学薬剤の活性をa持させることが
できる。
により、任意の免疫化学薬剤の活性をa持させることが
できる。
明確さおよび理解を目的として、引例および実例により
この発明についである程度詳細に記載したが、特許請求
の範囲内である種の変形または修正が実施され得ること
は明らかである。
この発明についである程度詳細に記載したが、特許請求
の範囲内である種の変形または修正が実施され得ること
は明らかである。
第1図は、この発明による装置をやや側方から描いた上
方斜視図である。 第1A図は、第1図の装置の分解組立図である。 第2図は、第1図の装置の上平面図である。 第3図は、3−3線に沿って描いた第1図の装置の上半
分の断面図である。 第4図は、第1図の装置の下半分を上から見た図である
。 第5図は、5−5線に沿って描いた第1図の装置の断面
図である。 第6図は、この発明の装置の別の具体例をやや側方から
描いた上方斜視図である。 第6A図は、第6図の装置の組立分解図である。 第7図は、7−7線に沿って描いた第6図の装置の断面
図である。 特許出願人 シンテックス(ニー・ニス・エイ)インコ
ーホレイテッド
方斜視図である。 第1A図は、第1図の装置の分解組立図である。 第2図は、第1図の装置の上平面図である。 第3図は、3−3線に沿って描いた第1図の装置の上半
分の断面図である。 第4図は、第1図の装置の下半分を上から見た図である
。 第5図は、5−5線に沿って描いた第1図の装置の断面
図である。 第6図は、この発明の装置の別の具体例をやや側方から
描いた上方斜視図である。 第6A図は、第6図の装置の組立分解図である。 第7図は、7−7線に沿って描いた第6図の装置の断面
図である。 特許出願人 シンテックス(ニー・ニス・エイ)インコ
ーホレイテッド
Claims (10)
- (1)試料中のアナライトの測定に用いる検定方法を行
うための装置であって、 (a)ハウジング、 (b)あるゾーンで特異的結合対の一員を捕獲し、毛管
現象によって上記ゾーンから液体を移動させるための上
記ハウジングに収納された手段、(c)試料中のアナラ
イトの測定に用いる検定方法を行うための上記ハウジン
グに収納された1種またはそれ以上の自蔵液体試薬、お
よび (d)試料を装置に導入するための上記ハウジングにお
ける手段 で構成され、上記液体試薬(複数も可)が毛管現象によ
り上記試料と上記手段(b)との接触部位へ移動するこ
とを特徴とする装置。 - (2)(b)における手段が免疫吸着性であるかまたは
免疫吸着性になり得る吸収性材料を含む、請求項1記載
の装置。 - (3)吸収性材料がそこに結合している特異的結合対(
sbp)の一員を有し、好ましくはsbp構成員が抗体
または抗原である、請求項2記載の装置。 - (4)吸収性材料の第2片が上記吸収性材料と液体受容
関係にある、請求項2記載の装置。 - (5)1種またはそれ以上の液体試薬が、試料中のアナ
ライトの量に応じてシグナルを発生することができるシ
グナル発生系の成分を含む、請求項1記載の装置。 - (6)第1吸収性材料がそこに非拡散的に結合している
特異的結合対(sbp)の一員を有し、第2吸収性材料
が上記第1吸収性材料と液体受容関係にあり、 上記手段(d)が上記ハウジングにおける開口部であり
、 装置がさらに容器を破壊させるハウジングと一体化した
手段を含む、 請求項4記載の装置。 - (7)液体試薬の1つが酵素基質を含んでいる、請求項
6記載の装置。 - (8)蛋白質を含有する疑いのある試料中において蛋白
質検定を行うための装置であって、さらに上記ハウジン
グの内部を調べるための手段、ハウジングの内部を調べ
るための第1手段と反対側の吸収性材料上の部位に非拡
散的に結合している蛋白質に対する特異的結合対(sb
p)の成分を有し、さらに試料を装置に導入するための
第2手段と反対側または上記第1および第2手段の間の
吸収性材料部分に拡散的に付着している蛋白質に対する
標識sbp構成員を有する上記ハウジングに収納された
上記吸収性材料 を含み、 上記液体試薬容器が破壊可能であり、水性試薬をそこに
含んでいる、請求項2記載の装置。 - (9)パッケージされた組み合わせとして請求項1記載
の装置を含む、検定方法を行うためのキット。 - (10)試料中に存在する疑のあるアナライトの検定方
法であって、 (a)試料を含有する試験溶液を請求項1記載の装置に
導入し、 (b)試験溶液を上記捕獲手段の少なくとも一部に浸透
させ、 (c)上記自蔵液体試薬を放出させ、 (d)放出された試薬を捕獲手段の少なくとも一部に少
なくとも上記ゾーンを通じて浸透させ、(e)試料中に
おけるアナライトの存在に応じたシグナルの存在につい
て上記ゾーンを観察することを含む方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US07/035,562 US4857453A (en) | 1987-04-07 | 1987-04-07 | Immunoassay device |
US035,562 | 1987-04-07 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS63269056A true JPS63269056A (ja) | 1988-11-07 |
JP2702498B2 JP2702498B2 (ja) | 1998-01-21 |
Family
ID=21883461
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP63086258A Expired - Lifetime JP2702498B2 (ja) | 1987-04-07 | 1988-04-06 | 免疫検定装置、方法、およびキット |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4857453A (ja) |
EP (1) | EP0286371B1 (ja) |
JP (1) | JP2702498B2 (ja) |
AU (1) | AU625170B2 (ja) |
CA (1) | CA1303491C (ja) |
DE (1) | DE3851772T2 (ja) |
DK (1) | DK186288A (ja) |
ES (1) | ES2065334T3 (ja) |
IL (1) | IL85997A (ja) |
NO (1) | NO881480L (ja) |
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