JPH04290961A - 迅速で簡単なマニュアルアッセイを行うためのデバイス - Google Patents
迅速で簡単なマニュアルアッセイを行うためのデバイスInfo
- Publication number
- JPH04290961A JPH04290961A JP3260835A JP26083591A JPH04290961A JP H04290961 A JPH04290961 A JP H04290961A JP 3260835 A JP3260835 A JP 3260835A JP 26083591 A JP26083591 A JP 26083591A JP H04290961 A JPH04290961 A JP H04290961A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- solid phase
- phase material
- analyte
- liquid
- reactant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000003556 assay Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 44
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 42
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 33
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 31
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims abstract description 13
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 17
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 8
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 8
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 3
- 230000004907 flux Effects 0.000 claims description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 claims 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 abstract description 17
- 239000004816 latex Substances 0.000 abstract description 10
- 229920000126 latex Polymers 0.000 abstract description 10
- 239000012528 membrane Substances 0.000 abstract description 9
- 239000000835 fiber Substances 0.000 abstract description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract description 8
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 abstract description 5
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 4
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 4
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 4
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 3
- 229920003124 powdered cellulose Polymers 0.000 description 3
- 235000019814 powdered cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical group OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003348 filter assay Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002972 Acrylic fiber Polymers 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004642 Polyimide Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000007274 generation of a signal involved in cell-cell signaling Effects 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000010324 immunological assay Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000011505 plaster Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001721 polyimide Polymers 0.000 description 1
- 239000013047 polymeric layer Substances 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 239000012780 transparent material Substances 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/975—Kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/805—Optical property
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/808—Automated or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
- Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【0001】本発明は、試験液体中の分析物を検出及び
/又は測定するためのデバイス及びその使用、並びに試
験液体中の分析物を検出及び/又は測定するための方法
に関する。
/又は測定するためのデバイス及びその使用、並びに試
験液体中の分析物を検出及び/又は測定するための方法
に関する。
【0002】特異結合アッセイの分野は、診断分野にお
けるその重要性が認識されるにつれて、大きく広がりつ
つある。特定化合物を検出し且つその化合物を定量的に
測定することができるという特性を利用して、各種薬物
の投与のモニタリング、各種のホルモン失調の測定、生
理活性蛋白質の定量及び病原体の存在の診断ができる。 分離ステップの要否、標識により発生する信号の種類、
溶液中又は表面上での信号の発生及び定量測定方法に応
じて技法が区分される。
けるその重要性が認識されるにつれて、大きく広がりつ
つある。特定化合物を検出し且つその化合物を定量的に
測定することができるという特性を利用して、各種薬物
の投与のモニタリング、各種のホルモン失調の測定、生
理活性蛋白質の定量及び病原体の存在の診断ができる。 分離ステップの要否、標識により発生する信号の種類、
溶液中又は表面上での信号の発生及び定量測定方法に応
じて技法が区分される。
【0003】アッセイを開発する場合、多くの要件を考
慮して試薬とプロトコルが創案される。1つの要件はア
ッセイを行う人の熟練の程度である。比較的未熟又は未
経験の人がアッセイを行っても妥当な定量結果を得るこ
とができるのが多くの場合望ましい。未熟な人が精巧な
器具を必要としないで迅速簡単な試験を用いて定量アッ
セイを行うことができることは特に望ましい。
慮して試薬とプロトコルが創案される。1つの要件はア
ッセイを行う人の熟練の程度である。比較的未熟又は未
経験の人がアッセイを行っても妥当な定量結果を得るこ
とができるのが多くの場合望ましい。未熟な人が精巧な
器具を必要としないで迅速簡単な試験を用いて定量アッ
セイを行うことができることは特に望ましい。
【0004】過去10年間に、多くの所謂ディップステ
ィック・フィルターアッセイが開発された。その小片は
、従来の小片より良い結果を求めて、種々の形のあらゆ
る種類の紙片に亘り、たとえば免疫化学成分を被覆した
プラスチック片も開発されている。
ィック・フィルターアッセイが開発された。その小片は
、従来の小片より良い結果を求めて、種々の形のあらゆ
る種類の紙片に亘り、たとえば免疫化学成分を被覆した
プラスチック片も開発されている。
【0005】たとえば、欧州特許出願 EP0,149
,168号は、ガラス毛管を利用して行うことができる
免疫アッセイを記載している。少くとも2つの領域に別
々の担体材料を充填する。免疫化学反応により、試験液
体中での存在又は濃度を測定したい物質と免疫複合体を
形成することができる標識物質を有する免疫反応性成分
を第1の担体材料に結合させる。続いて、前記複合体を
毛管作用により第2の担体材料まで輸送し、そこで第2
の担体材料と結合している第2の免疫反応成分に結合さ
せた後固定化させる。その後で、このようにして固定化
した免疫複合体の量を、使用した標識化物質に応じて公
知の検出方法により測定することができる。この欧州特
許出願で使用された標識化合物は放射性同位体、酵素又
は蛍光物質である。
,168号は、ガラス毛管を利用して行うことができる
免疫アッセイを記載している。少くとも2つの領域に別
々の担体材料を充填する。免疫化学反応により、試験液
体中での存在又は濃度を測定したい物質と免疫複合体を
形成することができる標識物質を有する免疫反応性成分
を第1の担体材料に結合させる。続いて、前記複合体を
毛管作用により第2の担体材料まで輸送し、そこで第2
の担体材料と結合している第2の免疫反応成分に結合さ
せた後固定化させる。その後で、このようにして固定化
した免疫複合体の量を、使用した標識化物質に応じて公
知の検出方法により測定することができる。この欧州特
許出願で使用された標識化合物は放射性同位体、酵素又
は蛍光物質である。
【0006】前記免疫アッセイの欠点は、免疫化学反応
の後に、未反応の反応物から結合した固相を分離するた
めに、「結合/遊離分離(bound/free se
paration)」として当業者に公知の幾つかの操
作を行なわなければならないことである。結合/遊離分
離の後試薬を添加する追加の作業ステップが必要とされ
、たとえば固相に結合した標識反応物を検出するために
ある物質を添加しなければならないこともある。アッセ
イ信号の増強を必要とする感受性の高いアッセイを行う
場合追加ステップは確かに必要になる。
の後に、未反応の反応物から結合した固相を分離するた
めに、「結合/遊離分離(bound/free se
paration)」として当業者に公知の幾つかの操
作を行なわなければならないことである。結合/遊離分
離の後試薬を添加する追加の作業ステップが必要とされ
、たとえば固相に結合した標識反応物を検出するために
ある物質を添加しなければならないこともある。アッセ
イ信号の増強を必要とする感受性の高いアッセイを行う
場合追加ステップは確かに必要になる。
【0007】今回、驚くべきことに、デバイスを試験液
体と洗浄流体に接触させる操作と、しばらくしてから、
正確さと信頼度を損うことなく結果を測定する操作を実
施するだけですむデバイスを知見した。このデバイスに
より、結合/遊離分離ステツプの数及び試薬添加とかそ
の順序を考えずに、唯2つの操作ステップだけで複雑な
アッセイ、たとえばELISAを行うことができる。
体と洗浄流体に接触させる操作と、しばらくしてから、
正確さと信頼度を損うことなく結果を測定する操作を実
施するだけですむデバイスを知見した。このデバイスに
より、結合/遊離分離ステツプの数及び試薬添加とかそ
の順序を考えずに、唯2つの操作ステップだけで複雑な
アッセイ、たとえばELISAを行うことができる。
【0008】従って、本発明は試験流体中の分析物(a
nalyte) を検出及び/又は測定するためのアッ
セイの実施用デバイスに係る。前記デバイスは、少くと
も部分的に半透性層と隣接する液体輸送用トラックを含
み、前記トラックには、アッセイ中に半透性層に沿って
、直接又は間接に分析物と結合し得る及び/又は直接又
は間接に分析物に対する反応物と結合し得るリガンドを
保有する可動性固相材料が輸送される。前記半透性層は
可動性固相材料を通過させることはできない。
nalyte) を検出及び/又は測定するためのアッ
セイの実施用デバイスに係る。前記デバイスは、少くと
も部分的に半透性層と隣接する液体輸送用トラックを含
み、前記トラックには、アッセイ中に半透性層に沿って
、直接又は間接に分析物と結合し得る及び/又は直接又
は間接に分析物に対する反応物と結合し得るリガンドを
保有する可動性固相材料が輸送される。前記半透性層は
可動性固相材料を通過させることはできない。
【0009】本発明は試験液体の分析物を検出及び/又
は測定する方法にも係る。前記方法は、本発明のデバイ
スを試験液体及び場合により輸送流体と接触させること
により、リガンドを有する可動性固相材料が、前記試験
液体及び同時に又は引続いて標識を有する反応物と接触
し、前記液体の1つ又は両方によりトラックを介して装
置の中で標識に対する検出系が置かれている位置に輸送
される。前記固相材料と直接又は間接に結合している標
識を検出して、結合の程度を直接又は間接に測定し、そ
の程度が測定又は検出される分析物の濃度の定性的又は
定量的な指標とされる。
は測定する方法にも係る。前記方法は、本発明のデバイ
スを試験液体及び場合により輸送流体と接触させること
により、リガンドを有する可動性固相材料が、前記試験
液体及び同時に又は引続いて標識を有する反応物と接触
し、前記液体の1つ又は両方によりトラックを介して装
置の中で標識に対する検出系が置かれている位置に輸送
される。前記固相材料と直接又は間接に結合している標
識を検出して、結合の程度を直接又は間接に測定し、そ
の程度が測定又は検出される分析物の濃度の定性的又は
定量的な指標とされる。
【0010】本発明は、本発明のデバイスを含み得る試
験用キットにも係る。場合により、試験用キットは、デ
バイスの中又はその外部に、標識とカップリングした免
疫化学試薬及びリガンドたとえば免疫化学試薬を保有す
る分散した又は分散し得る可動性固相材料を含有し得る
。別の態様としては、試験用キットは、デバイスの中又
はその外部に標識にカップリングした核酸配列及びリガ
ンドたとえば核酸配列を保有する分散した又は分散し得
る可動性固相材料を含有し得る。
験用キットにも係る。場合により、試験用キットは、デ
バイスの中又はその外部に、標識とカップリングした免
疫化学試薬及びリガンドたとえば免疫化学試薬を保有す
る分散した又は分散し得る可動性固相材料を含有し得る
。別の態様としては、試験用キットは、デバイスの中又
はその外部に標識にカップリングした核酸配列及びリガ
ンドたとえば核酸配列を保有する分散した又は分散し得
る可動性固相材料を含有し得る。
【0011】本発明のデバイスのトラックは、前記トラ
ック中の液体フラックスの速度を制御する暫定物質(p
rovision) を含有し得る。このような暫定物
質はスクロースのように湿潤したときゆっくり溶解する
成分であり得る。
ック中の液体フラックスの速度を制御する暫定物質(p
rovision) を含有し得る。このような暫定物
質はスクロースのように湿潤したときゆっくり溶解する
成分であり得る。
【0012】デバイスの特定の実施態様は、トラックが
半透性であって少くとも部分的に吸収剤材料によって包
囲されている壁を有する毛細導管、たとえばポリエーテ
ルスルホン、ポリアミド、ポリイミド又は再生セルロー
スのような多孔性中空繊維であるデバイスであり、この
導管は可動性固相材料、たとえばリガンドで被覆した粒
子の含水懸濁液を毛管作用により前進させるため使用さ
れる。半透性壁は小孔を通して分子たとえば夾雑物や前
記被覆粒子より小さい粒子を通過させることができるが
、前記被覆粒子を通過させない。
半透性であって少くとも部分的に吸収剤材料によって包
囲されている壁を有する毛細導管、たとえばポリエーテ
ルスルホン、ポリアミド、ポリイミド又は再生セルロー
スのような多孔性中空繊維であるデバイスであり、この
導管は可動性固相材料、たとえばリガンドで被覆した粒
子の含水懸濁液を毛管作用により前進させるため使用さ
れる。半透性壁は小孔を通して分子たとえば夾雑物や前
記被覆粒子より小さい粒子を通過させることができるが
、前記被覆粒子を通過させない。
【0013】小孔はたとえば湾曲、平行又はほぼ垂直の
方向で半透性壁に存在し得る。
方向で半透性壁に存在し得る。
【0014】毛細導管は試薬を含有するステーションで
終るか、又はそこから離れている。前記試薬は前記懸濁
液、標識若しくは非標識の特定反応物又は標識反応物を
検出するための特定基質であり得る。
終るか、又はそこから離れている。前記試薬は前記懸濁
液、標識若しくは非標識の特定反応物又は標識反応物を
検出するための特定基質であり得る。
【0015】毛細導管はかようなステーション自体を含
有し得る。前記半透性壁は毛細導管の外部で試薬と接触
し得る。導管の外部の試薬は、たとえば湿潤したとき半
透性壁を横切って導管に浸透し得る。試薬は、試験液体
又は導管を介して輸送される輸送流体と接触して溶解又
は再懸濁する乾燥試薬であってもよい。
有し得る。前記半透性壁は毛細導管の外部で試薬と接触
し得る。導管の外部の試薬は、たとえば湿潤したとき半
透性壁を横切って導管に浸透し得る。試薬は、試験液体
又は導管を介して輸送される輸送流体と接触して溶解又
は再懸濁する乾燥試薬であってもよい。
【0016】結合/遊離分離を考慮して、毛細導管の半
透性壁が毛細導管外部の液体に対する吸収剤と接触し得
る。
透性壁が毛細導管外部の液体に対する吸収剤と接触し得
る。
【0017】しかしながら、半透性壁自体が吸収剤を不
必要にするに十分な吸収能力を有していてもよい。
必要にするに十分な吸収能力を有していてもよい。
【0018】一体の毛細導管よりもむしろ複数本の毛細
導管を使用し得る。
導管を使用し得る。
【0019】本発明の別の実施態様では、毛細導管の代
りに多孔性マトリックスを使用して前記のデバイスと同
様に構成し機能させることができるが、このマトリック
スは前記被覆粒子を輸送することが可能であり且つ前記
半透性層と少くとも部分的に並んで接触していなければ
ならない。本発明のデバイスは免疫学的核酸ハイブリダ
イゼーション又は核酸増幅アッセイ系における結合/遊
離分離のために使用し得る。
りに多孔性マトリックスを使用して前記のデバイスと同
様に構成し機能させることができるが、このマトリック
スは前記被覆粒子を輸送することが可能であり且つ前記
半透性層と少くとも部分的に並んで接触していなければ
ならない。本発明のデバイスは免疫学的核酸ハイブリダ
イゼーション又は核酸増幅アッセイ系における結合/遊
離分離のために使用し得る。
【0020】特定のデバイスについて図1を参照しなが
ら説明する。図1に示したデバイス1は管状の半透性膜
たとえば多孔性中空繊維2から成り、この中に乾燥した
分散性可動性固相材料、たとえば分析物に対するリガン
ドで被覆した凍結乾燥ポリスチレンラテックス粒子3が
充填されている。更に上方にさかのぼると、繊維毛管に
は乾燥した(たとえば凍結乾燥された)分析物に対する
標識反応物4が充填されている。多孔性中空繊維は、含
水液体を通過させない重合体層6により隔てられた吸収
剤材料5によって少くとも部分的に包囲されている。
ら説明する。図1に示したデバイス1は管状の半透性膜
たとえば多孔性中空繊維2から成り、この中に乾燥した
分散性可動性固相材料、たとえば分析物に対するリガン
ドで被覆した凍結乾燥ポリスチレンラテックス粒子3が
充填されている。更に上方にさかのぼると、繊維毛管に
は乾燥した(たとえば凍結乾燥された)分析物に対する
標識反応物4が充填されている。多孔性中空繊維は、含
水液体を通過させない重合体層6により隔てられた吸収
剤材料5によって少くとも部分的に包囲されている。
【0021】使用される標識に応じて、標識に対して反
応性のある乾燥基質7がデバイスの末端に置かれている
。この末端で、実施されるアッセイの検出及び/又は測
定が行なわれる。
応性のある乾燥基質7がデバイスの末端に置かれている
。この末端で、実施されるアッセイの検出及び/又は測
定が行なわれる。
【0022】場合により、吸収剤材料を用いて包囲され
た多孔性中空繊維は、長円若しくは円形の管のようなケ
ーシング8、又は正方形若しくは長方形のケーシングを
備えており、そのケーシングの開放端部A及びBをキャ
ップ10を用いて閉鎖してもよい。
た多孔性中空繊維は、長円若しくは円形の管のようなケ
ーシング8、又は正方形若しくは長方形のケーシングを
備えており、そのケーシングの開放端部A及びBをキャ
ップ10を用いて閉鎖してもよい。
【0023】ケーシングは、少くとも測定又は検出を行
う位置では、透明材料から製造される。ケーシングとキ
ャップに適当な材料はガラス又はプラスチック、たとえ
ばポリスチレン、ポリプロピレン、ナイロン、ポリカー
ボネート若しくはポリ塩化ビニルである。
う位置では、透明材料から製造される。ケーシングとキ
ャップに適当な材料はガラス又はプラスチック、たとえ
ばポリスチレン、ポリプロピレン、ナイロン、ポリカー
ボネート若しくはポリ塩化ビニルである。
【0024】可動性固相材料としては、ポリスチレンラ
テックス粒子3の代りに、液体フラックスにより輸送可
能であり且つリガンドで被覆可能である粒子が前記液体
中で分散液として存在することができ且つ半透性膜を通
過不能であるならば、それらを使用することができる。 本発明の可動性固相材料は分散された又は分散し得る固
相材料であり、分散し得る固相材料とは液体との接触に
より分散化するものである。前記粒子は微晶性セルロー
ス、ポリアクリルアミド球、安定化血球、試料自体の血
球、金属ゾル等である。かような粒子を、可動性固相材
料の輸送の際に、たとえば基質7が存在する位置への到
達を観察して試験が完了したことを確めるべく、ビルト
インの目に見える固有の対照として着色することもでき
る。
テックス粒子3の代りに、液体フラックスにより輸送可
能であり且つリガンドで被覆可能である粒子が前記液体
中で分散液として存在することができ且つ半透性膜を通
過不能であるならば、それらを使用することができる。 本発明の可動性固相材料は分散された又は分散し得る固
相材料であり、分散し得る固相材料とは液体との接触に
より分散化するものである。前記粒子は微晶性セルロー
ス、ポリアクリルアミド球、安定化血球、試料自体の血
球、金属ゾル等である。かような粒子を、可動性固相材
料の輸送の際に、たとえば基質7が存在する位置への到
達を観察して試験が完了したことを確めるべく、ビルト
インの目に見える固有の対照として着色することもでき
る。
【0025】図1の実施態様では、たとえば、ラテック
ス粒子を着色して、基質7が存在する位置への可動性固
相材料の到達を観察するようにし得る。前記リガンド、
即ち抗原若しくはその断片、抗体若しくはその断片又は
核酸配列を物理的吸着又は化学的結合、たとえば共有結
合のいずれかにより粒子に被覆することができる。
ス粒子を着色して、基質7が存在する位置への可動性固
相材料の到達を観察するようにし得る。前記リガンド、
即ち抗原若しくはその断片、抗体若しくはその断片又は
核酸配列を物理的吸着又は化学的結合、たとえば共有結
合のいずれかにより粒子に被覆することができる。
【0026】凍結乾燥標識反応物4は、標識抗原若しく
はその断片、標識抗体若しくはその断片、又は核酸配列
とすることができる。これらの反応物は毛細導管の中又
は外側に置くことができる。導管の外側の反応物は、こ
れらの反応物が湿潤したとき溶解して前記半透性膜を横
切って導管に進入するように配置する。
はその断片、標識抗体若しくはその断片、又は核酸配列
とすることができる。これらの反応物は毛細導管の中又
は外側に置くことができる。導管の外側の反応物は、こ
れらの反応物が湿潤したとき溶解して前記半透性膜を横
切って導管に進入するように配置する。
【0027】「標識」とは、前記の標識反応物が半透性
膜の孔を通過できる限り、酵素、染料ゾル粒子、金属ゾ
ル粒子又は他の有色分散粒子を意味するものと理解され
たい。
膜の孔を通過できる限り、酵素、染料ゾル粒子、金属ゾ
ル粒子又は他の有色分散粒子を意味するものと理解され
たい。
【0028】染料ゾル粒子、金属ゾル粒子又は他の有色
分散粒子は直接検出できる標識物質として機能する。酵
素を標識として選んだ場合、酵素に対して反応性のある
乾燥基質7はデバイスの末端の検出又は測定サイトに存
在する。基質に代えて又は基質に追加して、標識の存在
を直接又は間接に感受する電子センサーを存在させ得る
。
分散粒子は直接検出できる標識物質として機能する。酵
素を標識として選んだ場合、酵素に対して反応性のある
乾燥基質7はデバイスの末端の検出又は測定サイトに存
在する。基質に代えて又は基質に追加して、標識の存在
を直接又は間接に感受する電子センサーを存在させ得る
。
【0029】金属ゾル粒子を標識物質として使用する場
合、デバイスの未端7にたとえば結果の感受性を増強す
ることができる前記金属ゾルに対する強化物質を充填し
て、肉眼で見える又は比色計若しくは反射計により読取
り得る信号を得るようにすることができる。
合、デバイスの未端7にたとえば結果の感受性を増強す
ることができる前記金属ゾルに対する強化物質を充填し
て、肉眼で見える又は比色計若しくは反射計により読取
り得る信号を得るようにすることができる。
【0030】前記標識を免疫化学的活性物質にカップリ
ングする方法はそれ自体は公知である。カップリングは
直接又は間接であっても、化学的のたとえば共有結合に
よっても非化学的のたとえば吸着によるものであっても
よい。
ングする方法はそれ自体は公知である。カップリングは
直接又は間接であっても、化学的のたとえば共有結合に
よっても非化学的のたとえば吸着によるものであっても
よい。
【0031】ホースラディッシュペルオキシダーゼ(H
RP)酵素をしばしば適当な標識として使用する。この
HRPに対する基質は過酸化水素であって、それは色素
産生補基質、たとえば3,3′,5,5′−テトラメチ
ルベンジジン(TMB)と混合しなければならない。
RP)酵素をしばしば適当な標識として使用する。この
HRPに対する基質は過酸化水素であって、それは色素
産生補基質、たとえば3,3′,5,5′−テトラメチ
ルベンジジン(TMB)と混合しなければならない。
【0032】吸収剤材料5はセルロース、綿、羊毛、絹
、ガラス繊維、ナイロン繊維、アクリル繊維、ポリエチ
レン繊維、ポリエステル繊維若しくはセラミックのよう
な材料、又は石膏のような硬化性材料から成り得る。 吸収剤材料は、チョーク、活性炭(nont)又はシリ
カゲルのような粉末又は顆粒から成り得る。
、ガラス繊維、ナイロン繊維、アクリル繊維、ポリエチ
レン繊維、ポリエステル繊維若しくはセラミックのよう
な材料、又は石膏のような硬化性材料から成り得る。 吸収剤材料は、チョーク、活性炭(nont)又はシリ
カゲルのような粉末又は顆粒から成り得る。
【0033】場合により、吸収剤材料は、試験流体中の
夾雑成分に対する親和力を有する活性物質、たとえば免
疫化学活性物質を含有し得る。
夾雑成分に対する親和力を有する活性物質、たとえば免
疫化学活性物質を含有し得る。
【0034】本発明のデバイスを使用して、各種の分析
物、抗原若しくはその断片、抗体若しくはその断片、ハ
プテン及び核酸配列を前記デバイスを用いて測定するこ
とができる。
物、抗原若しくはその断片、抗体若しくはその断片、ハ
プテン及び核酸配列を前記デバイスを用いて測定するこ
とができる。
【0035】デバイスは尿、血清又は全血のような試験
液体中の分析物を測定するのに使用される。デバイスは
、所謂サンドイッチ反応、阻害又は競合又は阻止反応を
行うのに適当である。
液体中の分析物を測定するのに使用される。デバイスは
、所謂サンドイッチ反応、阻害又は競合又は阻止反応を
行うのに適当である。
【0036】試験液体中の免疫化学活性物質を検出する
免疫学的アッセイを行うための本発明デバイスの使用の
好ましい実施態様について、更に詳細に説明する。
免疫学的アッセイを行うための本発明デバイスの使用の
好ましい実施態様について、更に詳細に説明する。
【0037】本発明のデバイスを、その毛細導管の一端
を試験液体中に置くか又はこの端部を試験液体に浸漬し
、続いてそれを輸送液体中に置くことにより、試験液体
と接触させる。これによりアッセイ、たとえばELIA
(酵素結合免疫吸着アッセイ法)が自主的に行われる。 典型的アッセイ機序は次のようである。
を試験液体中に置くか又はこの端部を試験液体に浸漬し
、続いてそれを輸送液体中に置くことにより、試験液体
と接触させる。これによりアッセイ、たとえばELIA
(酵素結合免疫吸着アッセイ法)が自主的に行われる。 典型的アッセイ機序は次のようである。
【0038】−液体に可動性固相材料、たとえばリガン
ドで被覆した凍結乾燥粒子を再懸濁させる。
ドで被覆した凍結乾燥粒子を再懸濁させる。
【0039】−試験液体及び/又は輸送液体により毛細
導管を介して可動性固相材料を前進させる。
導管を介して可動性固相材料を前進させる。
【0040】−同時に又は引続いて、前記液体により標
識反応物を前記被覆粒子と接触できるようにする。
識反応物を前記被覆粒子と接触できるようにする。
【0041】−この結果として、分析物が試験液体中に
存在する場合は標識反応物が粒子に結合する。
存在する場合は標識反応物が粒子に結合する。
【0042】−非結合分析物、非結合標識反応物及び夾
雑物のような非結合物質を導管から除去し、こうして半
透性膜(導管の外部の吸収物と接触している)を介する
液体流により粒子と分離する。
雑物のような非結合物質を導管から除去し、こうして半
透性膜(導管の外部の吸収物と接触している)を介する
液体流により粒子と分離する。
【0043】−毛管を介して更に輸送することにより、
粒子を輸送する液体は、ELISAの場合、基質の成分
を溶解し、その結果この基質が粒子と接触する。
粒子を輸送する液体は、ELISAの場合、基質の成分
を溶解し、その結果この基質が粒子と接触する。
【0044】−この粒子に結合している標識は基質を変
化させて、肉眼で見えるか又は比色計若しくは屈折計で
計測できる反応生成物を生じる。
化させて、肉眼で見えるか又は比色計若しくは屈折計で
計測できる反応生成物を生じる。
【0045】前記の典型的なアッセイ機序は、標識とし
て酵素の代りに金属ゾル又は染料ゾルを用いても同様に
機能し得る。標識として金属ゾル又は染料ゾルを使用す
る場合、基質は不要であり得る。
て酵素の代りに金属ゾル又は染料ゾルを用いても同様に
機能し得る。標識として金属ゾル又は染料ゾルを使用す
る場合、基質は不要であり得る。
【0046】デバイスは従来のディップスティック・フ
ィルターアッセイに比較して多くの利点を有する。分散
固相材料、たとえば抗体で被覆したラテックス粒子は懸
濁されたままであるので、反応成分の間で常に最適な相
互作用が得られ、これにより更に高い感受性が得られ、
及び/又はインキュベーション時間を短縮できる。
ィルターアッセイに比較して多くの利点を有する。分散
固相材料、たとえば抗体で被覆したラテックス粒子は懸
濁されたままであるので、反応成分の間で常に最適な相
互作用が得られ、これにより更に高い感受性が得られ、
及び/又はインキュベーション時間を短縮できる。
【0047】慣用の固相フィルター手法を使用すると、
固相フィルター材料と非特異的な相互作用が生じる。本
発明のデバイスを使用すると、半透性膜と相互作用する
夾雑成分が最終の検出過程を干渉することはあり得ない
。
固相フィルター材料と非特異的な相互作用が生じる。本
発明のデバイスを使用すると、半透性膜と相互作用する
夾雑成分が最終の検出過程を干渉することはあり得ない
。
【0048】デバイスは、ヒト又は動物の起源のあらゆ
る種類の液体の生物試料に対して簡単で迅速なマニュア
ルアッセイとして使用することができる。体液、排泄物
、組織標本、唾液等又はそれらの液体抽出物を試料とす
ることができる。
る種類の液体の生物試料に対して簡単で迅速なマニュア
ルアッセイとして使用することができる。体液、排泄物
、組織標本、唾液等又はそれらの液体抽出物を試料とす
ることができる。
【0049】
【実施例】本発明について次に実施例を引用して説明す
る。
る。
【0050】実施例1
800nm のポリスチレンラテックス粒子の表面上に
、抗−HBS(B型肝炎表面抗原(HBsAg)に対す
る抗体)をFritz 及びRivers(1972年
,J. Immunology 108 , 108〜
111)の記載した方法により物理的吸着によりカップ
リングした。HRPをWilson及びNakane(
1978)に従って抗−HBSに接合させた。 310
μmの内径を有し、 200から500mm までの小
孔を有する厚さ75μmの管状ポリアミド膜から成るポ
リアミド多孔性中空繊維(PHF)の10cmピースの
一端(A)に、1cmの長さにわたって前記のように製
造した抗−HBsを負荷したラテックス粒子の懸濁液を
充填した。端部(A)から約5から6cmのところには
、約1cmの長さにわたって抗−HBs/HRP接合体
を充填した。10cmのピースを2つに切り、各半片の
一端に1cmの長さにわたって液体試薬を充填し、液体
試薬を含む繊維を続いて凍結乾燥して、2つの半片をソ
ケットによって一緒にした。
、抗−HBS(B型肝炎表面抗原(HBsAg)に対す
る抗体)をFritz 及びRivers(1972年
,J. Immunology 108 , 108〜
111)の記載した方法により物理的吸着によりカップ
リングした。HRPをWilson及びNakane(
1978)に従って抗−HBSに接合させた。 310
μmの内径を有し、 200から500mm までの小
孔を有する厚さ75μmの管状ポリアミド膜から成るポ
リアミド多孔性中空繊維(PHF)の10cmピースの
一端(A)に、1cmの長さにわたって前記のように製
造した抗−HBsを負荷したラテックス粒子の懸濁液を
充填した。端部(A)から約5から6cmのところには
、約1cmの長さにわたって抗−HBs/HRP接合体
を充填した。10cmのピースを2つに切り、各半片の
一端に1cmの長さにわたって液体試薬を充填し、液体
試薬を含む繊維を続いて凍結乾燥して、2つの半片をソ
ケットによって一緒にした。
【0051】HBsAgに対する試験デバイスを組立て
るには、引続いて、内径 0.5cm、長さ約11cm
の管状の透明容器のほぼ中心に前記繊維を入れた。管状
容器の、中空繊維の端部Aに対応する1端は、1cmの
長さにわたって円錐形であり、穴を有しており、それを
通って中空繊維の端が終りになるようにした。プラスチ
ック容器中の繊維の周辺の空間には粉末セルロースが充
填され、これは以下に示す順序で含水液体を通さない薄
い重合体層により隔離されている。
るには、引続いて、内径 0.5cm、長さ約11cm
の管状の透明容器のほぼ中心に前記繊維を入れた。管状
容器の、中空繊維の端部Aに対応する1端は、1cmの
長さにわたって円錐形であり、穴を有しており、それを
通って中空繊維の端が終りになるようにした。プラスチ
ック容器中の繊維の周辺の空間には粉末セルロースが充
填され、これは以下に示す順序で含水液体を通さない薄
い重合体層により隔離されている。
【0052】毛管内の材料の順序
下端A起点として
1cm 凍結乾燥ラテックス(3)
4cm 空白
容器内に毛管周辺の材料の順序
下端A起点として
2.0cm 重合体(9)
6×0.45cm 粉末セルロース(5)6×0.0
5cm 重合体(6) 2.0cm 重合体(9) 6×0.45cm 粉末セルロース(5)6×0.0
5cm 重合体(6) 容器内の端部B付近の毛管の頂部 1cm 基質ステーション(7) 基質ステーションは、セラミック片に適宜の緩衝系中の
過酸素水素とTMBの混合物を含浸し、続いて18〜2
5℃で真空下にセラミック片を乾燥することにより形成
される。
5cm 重合体(6) 2.0cm 重合体(9) 6×0.45cm 粉末セルロース(5)6×0.0
5cm 重合体(6) 容器内の端部B付近の毛管の頂部 1cm 基質ステーション(7) 基質ステーションは、セラミック片に適宜の緩衝系中の
過酸素水素とTMBの混合物を含浸し、続いて18〜2
5℃で真空下にセラミック片を乾燥することにより形成
される。
【0053】端部Aと反対側の端部Bでは、繊維の開放
端をこの基質ステーションを用いて覆う。セラミックス
はラテックス球を通過させ得る。
端をこの基質ステーションを用いて覆う。セラミックス
はラテックス球を通過させ得る。
【0054】デバイスの端部Aと端部Bとを、プラスチ
ックキャップ10を用いて閉じる。
ックキャップ10を用いて閉じる。
【0055】試験は、10分間の合計試験時間を要し、
前記のようにして構築されたデバイスを使用して行った
。 キャップ10をデバイスからはずした。
前記のようにして構築されたデバイスを使用して行った
。 キャップ10をデバイスからはずした。
【0056】ほぼ垂直の位置で、デバイスの端部Aを血
清試料中に30秒間浸漬し、試料を約2cmの長さに至
るまで導管に浸透させた。
清試料中に30秒間浸漬し、試料を約2cmの長さに至
るまで導管に浸透させた。
【0057】続いてデバイスの端部Aを15°の角度(
水平線からの偏り)で脱塩水に入れ、そのまま10分間
置いた。続いて基質ステーションに発生した色を肉眼で
観察した。血清中のHBsAgの希釈系列について前記
デバイスを用いて試験した。
水平線からの偏り)で脱塩水に入れ、そのまま10分間
置いた。続いて基質ステーションに発生した色を肉眼で
観察した。血清中のHBsAgの希釈系列について前記
デバイスを用いて試験した。
【0058】
これにより、本発明方法がHBsAgの迅速で簡単
なマニュアルアッセイ(rapid single m
anual assay) として妥当であることが明
らかである。
なマニュアルアッセイ(rapid single m
anual assay) として妥当であることが明
らかである。
【0059】実施例2
実施例1に記載した方法と同様にして、抗−hCG(ヒ
ト繊毛性ゴナドトロピン(hCG)に対する抗体)を8
00nm のラテックス粒子にカップリングして、HR
Pを抗−βhCG(hCGのβサブユニット上に位置す
るエピトープと反応する抗体)に接合させた。デバイス
を実施例1に記載したように構築した。ただし、HBs
Ag特異的試薬の代りに前記hCG特異的試薬を用いた
。
ト繊毛性ゴナドトロピン(hCG)に対する抗体)を8
00nm のラテックス粒子にカップリングして、HR
Pを抗−βhCG(hCGのβサブユニット上に位置す
るエピトープと反応する抗体)に接合させた。デバイス
を実施例1に記載したように構築した。ただし、HBs
Ag特異的試薬の代りに前記hCG特異的試薬を用いた
。
【0060】妊性空胎婦人の尿標本の混合物から成る希
釈剤を使用して、hCGの系統的希釈系列を作った。こ
の希釈系列について、前記のデバイスを使用し実施例1
に記載した試験操作と同様にして試験した。
釈剤を使用して、hCGの系統的希釈系列を作った。こ
の希釈系列について、前記のデバイスを使用し実施例1
に記載した試験操作と同様にして試験した。
【0061】
このことは、デバイスを使用して尿試料中のhCG
の検出のための迅速で簡単なマニュアルアッセイを行う
ことができ、従って妊娠試験に非常に適していることを
示している。
の検出のための迅速で簡単なマニュアルアッセイを行う
ことができ、従って妊娠試験に非常に適していることを
示している。
【図1】本発明のデバイスの断面図である。
1 デバイス本体
2 半透性膜
3 可動性固相材料
4 標識反応物
5 吸収剤材料
6 重合体層
7 乾燥基質
8 ケーシング
9 重合体
10 キャップ
A及びB 容器端部
Claims (10)
- 【請求項1】 少くとも部分的に半透性層に隣接する
液体輸送用トラックを含む試験液体中の分析物を検出及
び/又は測定するためのアッセイの実施用デバイスであ
って、前記トラックにはアッセイ中半透性層に沿って、
分析物と直接又は間接に結合し得る及び/又は分析物に
対する反応物と直接又は間接に結合し得るリガンドを保
有する可動性固相材料が輸送され、前記半透性層は可動
性固相材料を通過させることが不可能であることを特徴
とする、前記デバイス。 - 【請求項2】 少くとも部分的に半透性層に隣接する
トラックが多孔性中空繊維であることを特徴とする、請
求項1に記載のデバイス。 - 【請求項3】 トラックが液体フラックスにより可動
性固相材料を輸送することが可能なマトリックスである
ことを特徴とする、請求項1に記載のデバイス。 - 【請求項4】 半透性層が吸収剤と接触していること
を特徴とする、請求項1、2又は3に記載のデバイス。 - 【請求項5】 リガンド及び/又は分析物に対する反
応物が免疫化学試薬であることを特徴とする、請求項1
〜4のいずれか1項に記載のデバイス。 - 【請求項6】 可動性固相材料が重合体粒子であるこ
とを特徴とする、請求項1〜5のいずれか1項に記載の
デバイス。 - 【請求項7】 反応物が酵素にカップリングした抗体
又は抗原を含有する酵素接合体であることを特徴とする
、請求項6に記載のデバイス。 - 【請求項8】 反応物が免疫化学試薬を被覆した金属
ゾル粒子であることを特徴とする、請求項6に記載のデ
バイス。 - 【請求項9】 リガンドを有する可動性固相材料が試
験液体と接触し、同時に又は引続いて標識を有する反応
物と接触し、前記液体の1つ又は両方によりトラックを
介してデバイス中の標識に対する検出系が置かれている
位置に輸送されるように、請求項1に記載のデバイスを
試験液体及び場合により輸送液体と接触させ、前記固相
材料と直接又は間接に結合している標識を検出し、結合
の程度を直接又は間接に測定し、その程度を測定又は検
出される分析物の濃度の定性的又は定量的な指標とする
ことを特徴とする、試験液体の分析物の検出及び/又は
測定方法。 - 【請求項10】 請求項1に記載のデバイスを含む試
験用キット。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
NL90202666.5 | 1990-10-08 | ||
EP90202666 | 1990-10-08 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH04290961A true JPH04290961A (ja) | 1992-10-15 |
Family
ID=8205140
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP3260835A Pending JPH04290961A (ja) | 1990-10-08 | 1991-10-08 | 迅速で簡単なマニュアルアッセイを行うためのデバイス |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5474902A (ja) |
EP (1) | EP0480497B1 (ja) |
JP (1) | JPH04290961A (ja) |
KR (1) | KR0163791B1 (ja) |
AT (1) | ATE144623T1 (ja) |
AU (1) | AU635161B2 (ja) |
DE (1) | DE69122832T2 (ja) |
DK (1) | DK0480497T3 (ja) |
ES (1) | ES2097180T3 (ja) |
FI (1) | FI914711A (ja) |
GR (1) | GR3022018T3 (ja) |
IE (1) | IE75720B1 (ja) |
ZA (1) | ZA917629B (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009139331A (ja) * | 2007-12-10 | 2009-06-25 | Fyuuensu:Kk | マイクロ流体チップ構成単位、マイクロ流体チップ、およびその製造方法 |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3070764B2 (ja) * | 1990-03-12 | 2000-07-31 | バイオサイト・ダイアグノスティックス・インコーポレイテッド | 生物学的検定装置及びそれを用いた検定方法 |
WO1994014068A1 (en) * | 1992-12-15 | 1994-06-23 | Empyrean Diagnostics Inc. | Hiv analysis method and device |
ATE238410T1 (de) * | 1993-10-29 | 2003-05-15 | Unisearch Ltd | Vorrichtung zur zelltrennung |
CA2143365A1 (en) * | 1994-03-14 | 1995-09-15 | Hugh V. Cottingham | Nucleic acid amplification method and apparatus |
US5725831A (en) * | 1994-03-14 | 1998-03-10 | Becton Dickinson And Company | Nucleic acid amplification apparatus |
GB9426251D0 (en) * | 1994-12-24 | 1995-02-22 | Fsm Technologies Ltd | Device |
US5753429A (en) * | 1996-08-09 | 1998-05-19 | Lifescan, Inc. | Analyte concentration measurement using a hollow frustum |
AU6208998A (en) * | 1997-01-14 | 1998-08-07 | Akzo Nobel N.V. | Device for detecting an analyte and an analytical method |
US5989924A (en) * | 1997-09-30 | 1999-11-23 | Becton, Dickinson And Company | Device for determining an analyte in a sample |
US6756019B1 (en) * | 1998-02-24 | 2004-06-29 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic devices and systems incorporating cover layers |
TW580376B (en) * | 2002-10-24 | 2004-03-21 | Oncoprobe Biotech Inc | Test pen |
ATE516498T1 (de) * | 2004-05-20 | 2011-07-15 | Wako Pure Chem Ind Ltd | Verfahren zum testen von hyaluronsäure mit hyaluronsäure-bindungsprotein |
US7442557B1 (en) | 2004-10-22 | 2008-10-28 | Idexx Laboratories, Inc. | Bi-directional flow assay device with reagent bridge |
KR100728230B1 (ko) * | 2004-11-05 | 2007-06-13 | (주)지오그린21 | 시료채취장비 및 이를 이용한 시료채취방법 |
WO2006098804A2 (en) | 2005-03-11 | 2006-09-21 | Chembio Diagnostic Systems, Inc. | Dual path immunoassay device |
US7189522B2 (en) | 2005-03-11 | 2007-03-13 | Chembio Diagnostic Systems, Inc. | Dual path immunoassay device |
US7547557B2 (en) * | 2006-06-13 | 2009-06-16 | Quantum Design, Inc. | Directed-flow assay device |
US20100022916A1 (en) | 2008-07-24 | 2010-01-28 | Javanbakhsh Esfandiari | Method and Apparatus for Collecting and Preparing Biological Samples for Testing |
US8012770B2 (en) | 2009-07-31 | 2011-09-06 | Invisible Sentinel, Inc. | Device for detection of antigens and uses thereof |
MX2012004105A (es) | 2009-10-09 | 2012-09-07 | Invisible Sentinel Inc | Dispositivo para deteccion de antigenos y usos del mismo. |
GB2474306A (en) * | 2009-10-12 | 2011-04-13 | Bioproducts Ltd | Methods and device for detecting an analyte |
EP2668501B1 (en) | 2011-01-27 | 2019-06-12 | Invisible Sentinel, Inc. | Analyte detection devices, multiplex and tabletop devices for detection of analytes, and uses thereof |
US8603835B2 (en) | 2011-02-10 | 2013-12-10 | Chembio Diagnostic Systems, Inc. | Reduced step dual path immunoassay device and method |
CN104919055B (zh) | 2012-03-09 | 2018-06-19 | 因威瑟堡善迪诺有限公司 | 用单一信号检测多种分析物的方法和组合物 |
EP3126486B1 (en) | 2014-04-02 | 2019-07-03 | Chembio Diagnostic Systems, Inc. | Immunoassay utilizing trapping conjugate |
US20160116466A1 (en) | 2014-10-27 | 2016-04-28 | Chembio Diagnostic Systems, Inc. | Rapid Screening Assay for Qualitative Detection of Multiple Febrile Illnesses |
US10408825B2 (en) * | 2015-05-19 | 2019-09-10 | Electronics And Telecommunications Research Institute | Biosensor |
DE102016201181B3 (de) * | 2016-01-27 | 2017-05-04 | Albert-Ludwigs-Universität Freiburg | Röhre mit einer mikrofluidischen Struktur |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01501819A (ja) * | 1986-11-13 | 1989-06-22 | ジェネ ラブス,インコーポレイティド | 血液親和性診断方法 |
US4920046A (en) * | 1987-02-20 | 1990-04-24 | Becton, Dickinson And Company | Process, test device, and test kit for a rapid assay having a visible readout |
DE3706728A1 (de) * | 1987-03-02 | 1988-09-15 | Schubert & Salzer Maschinen | Verfahren und vorrichtung zum anspinnen einer mit einem pneumatischen drallorgan arbeitenden spinnvorrichtung |
ATE195022T1 (de) * | 1987-04-27 | 2000-08-15 | Unilever Nv | Spezifische bindungstestverfahren |
US4943522A (en) * | 1987-06-01 | 1990-07-24 | Quidel | Lateral flow, non-bibulous membrane assay protocols |
CA1313616C (en) * | 1987-06-01 | 1993-02-16 | Robert B. Sargeant | Lateral flow, non-bibulous membrane protocols |
AU2684488A (en) * | 1988-06-27 | 1990-01-04 | Carter-Wallace, Inc. | Test device and method for colored particle immunoassay |
-
1991
- 1991-09-24 ZA ZA917629A patent/ZA917629B/xx unknown
- 1991-09-24 IE IE335391A patent/IE75720B1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-09-25 AT AT91202482T patent/ATE144623T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-09-25 ES ES91202482T patent/ES2097180T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-25 EP EP91202482A patent/EP0480497B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-25 DE DE69122832T patent/DE69122832T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-09-25 DK DK91202482.5T patent/DK0480497T3/da active
- 1991-10-03 AU AU85605/91A patent/AU635161B2/en not_active Ceased
- 1991-10-07 FI FI914711A patent/FI914711A/fi unknown
- 1991-10-07 KR KR1019910017648A patent/KR0163791B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-10-08 JP JP3260835A patent/JPH04290961A/ja active Pending
-
1994
- 1994-02-02 US US08/190,699 patent/US5474902A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-12-12 GR GR960403434T patent/GR3022018T3/el unknown
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009139331A (ja) * | 2007-12-10 | 2009-06-25 | Fyuuensu:Kk | マイクロ流体チップ構成単位、マイクロ流体チップ、およびその製造方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FI914711A0 (fi) | 1991-10-07 |
EP0480497B1 (en) | 1996-10-23 |
EP0480497A1 (en) | 1992-04-15 |
ATE144623T1 (de) | 1996-11-15 |
IE913353A1 (en) | 1992-04-08 |
US5474902A (en) | 1995-12-12 |
GR3022018T3 (en) | 1997-03-31 |
AU8560591A (en) | 1992-04-09 |
DE69122832D1 (de) | 1996-11-28 |
IE75720B1 (en) | 1997-09-24 |
ZA917629B (en) | 1992-06-24 |
ES2097180T3 (es) | 1997-04-01 |
AU635161B2 (en) | 1993-03-11 |
KR0163791B1 (ko) | 1999-03-30 |
DE69122832T2 (de) | 1997-03-20 |
DK0480497T3 (da) | 1997-04-21 |
FI914711A (fi) | 1992-04-09 |
KR920008487A (ko) | 1992-05-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPH04290961A (ja) | 迅速で簡単なマニュアルアッセイを行うためのデバイス | |
US7344893B2 (en) | Immuno-gold lateral flow assay | |
EP0335244B1 (en) | Solid-phase analytical device and method for using same | |
EP0138826B1 (en) | Detection of human chorionic gonadotropin | |
CA1309654C (en) | Membrane assay using focused sample application | |
EP0389003B1 (en) | Solid-phase analytical device and method for using same | |
JP3358737B2 (ja) | 改良された投与量応答曲線を有するアッセイ | |
US7910381B2 (en) | Immuno gold lateral flow assay | |
AU709403B2 (en) | Diagnostic detection device and method | |
US5147780A (en) | Multiwell stat test | |
US6689317B1 (en) | Immunoassay apparatus for diagnosis | |
MX2007011116A (es) | Dispositivo de inmunoanalisis de trayecto dual. | |
CA2396116A1 (en) | Immunochromatographic assay devices with separators | |
JPH11507125A (ja) | 競合イムノアッセイ装置 | |
WO1994002850A1 (en) | Transparent assay test devices and methods | |
EP1879028B1 (en) | Use of albumin, bovine, p-aminophenyl n-acetyl ß-d glucosaminide as a positive control line in an immunoassay device | |
WO1987007384A1 (en) | Enzyme immunoassay device | |
JP3493544B2 (ja) | 抗体アッセイ装置 | |
JPS63210664A (ja) | 酸素要求検出系を用いる装置のための乾燥試験片及び被検流体中の分析成分の検出方法 | |
EP0439917B1 (en) | Apparatus for detection and semi-quantitative measurement of analytes | |
JP3713178B2 (ja) | 梅毒抗体検出用免疫分析装置 | |
CA2052909A1 (en) | Device for performing a rapid single manual assay | |
WO1992018869A1 (en) | Colorfast reference device for immunoassays | |
JP2004177321A (ja) | 微量検出方法及び装置 | |
JPH02201265A (ja) | 酵素定量ウィッキングアッセイ |