JPS63107912A - 創傷治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 良泉上工■里方１ 本発明は、創傷治療剤及び化粧料並びに毛はえ薬、更に
詳しくはオポマクログロプリンを有効成分として含有す
ることを特徴とする創傷治療剤、化粧料、毛はえ薬に関
する。

従来の技術 創傷、例えば一般的な外傷、痔痩、褥創等やその程度が
身体の深部にまで及ぶ大手術による創傷等の治療にあっ
ては、その過程における損傷部の肉芽形成の促進及び表
皮形成の促進が重要な課題である。

現在、創傷治療に利用できる化合物としては、レチノー
ル酸、アラントイン、セリ科植物成分アジアティコシト
（ａｓｉａｔｉｃｏｓｉｄｅ）　、亜鉛等が知られてい
る。しかしながら之等の薬物は、いずれも尚充分に上記
肉芽形成等の促進作用を奏し得るものではない。また、
熱傷時等におけるステロイド系、非ステロイド系の抗炎
症剤の使用は、むしろ抵抗力を減退させることが知られ
ており、これらを投与する場合には一層抵抗力を賦活、
増強させ得る薬物との併用が必要とされる。

更に、最近創傷の治療に有効な薬物として、哺乳動物の
体液から単離され、分子量が約５３００で、５２個のア
ミノ酸からなるポリペプチド（特開昭５７−３８７１６
号公報）や必須アミノ酸を含む組成物（特開昭５７−８
０３１６号公報）等が提案されており、またヨウ素を３
００μ９以上の高濃度で含有する卵が創傷治療の促進及
び筋肉疾患の予防に有効であること（特開昭５９−１１
６２２５号公報）、乾燥卵白を皮膚化粧料用基剤として
配合してなる皮膚化粧料（特公昭６１−６８０１号公報
）も提案されているが、之等もなお創傷の治療に充分な
効果を奏し得るものではない。しかも上記仝卵や卵白等
は、防腐剤の存在下でも腐りやすいものでおり、之等を
含む製剤はその保存安定性に問題があり、また卵白はア
ルカリ性でなければ溶けず、創傷治療剤の一般的製剤形
態である軟膏剤や化粧料の構成原料との親和性が低く、
容易に蛋白質を含有する白色沈澱を生じる等の難点もお
る。

また、一方毛根に作用し、発毛を促進する養毛剤や、育
毛剤等の所謂毛はえ薬も種々提案されているが、いまだ
充分な効果を奏するものは得られていない。

発明が解決しようとする間　７１、 本発明の目的は、従来のこの種創傷治療等に利用できる
ことの知られている薬物に見られる欠点を解消し、特に
創傷治療段階における上皮細胞や繊維芽細胞の増殖促進
作用を有し、優れた創傷治癒促進効果を奏する新しい創
傷治療剤を提供することにある。

また、本発明の目的は、例えば日焼はヤ肌必れ等に対し
て優れた皮膚保護効果を有すると共に、皮膚に対するエ
モリエンシー（潤滑保証性）、トリートメント作用、優
れた親和性等を有する新規な化粧料を提供することにあ
る。

更に本発明は所謂毛はえ薬を提供することをも目的とし
ている。

本発明者らは、上記目的から鋭意研究を重ねた結果、オ
ボマクログロプリンが、上記目的に合致する優れた創傷
治癒促進効果及び皮膚保護効果等を有することを見出し
、ここに本発明を完成するに至った。

即ち、本発明はオボマクログロプリンを有効成分として
含有することを特徴とする創傷治療剤、化粧料、毛はえ
薬に係わる。

本発明の創傷治療剤には、例えばすり傷、切り傷、火傷
、熱傷、凍傷、皮膚潰瘍、皮膚乾燥、皮膚角化症、ひび
切れ、あか切れ、皮膚炎、水虫のただれ、手術傷、角膜
創傷等のほか、痔病、褥創等をも含めた各種の創傷の治
療剤として、またにきび、歯槽膿漏、日焼は等の炎症治
療剤が包含される。更に本発明の毛はえ薬は、養毛剤、
育毛剤等として有効でおる。

また本発明の化粧料は、例えば髭剃り後、脱毛クリーム
使用後、洗剤使用後等の肌に適用することにより、また
例えば日焼け、肌荒れ等の肌に適用することにより、優
れた皮膚保護効果、改善効果を発揮し、皮膚に対する刺
激性もなく、優れたしっとり感、すべすぺ感等を付与す
ると共に、皮膚に対するエモリエンシー、トリートメン
ト効果、親和性等を著しく改善できる。

更に本発明の創傷治療剤、化粧料、毛はえ薬は、その保
存安定性及び安全性に優れたものである。

本発明薬剤は、その有効成分としてオポマクログロプリ
ンを含有することを必須とする。ここでオボマクログロ
プリンとは、卵白中の高分子但糖蛋白質として知られて
いるものでおり、その調製法も既に公知でおる〔フイニ
ー（ｔ”ｅｅｎｅｙ　、　Ｒ。

Ｅ、）ら、コンパラテイブ・バイオケミストリー・アン
ド・フイジオロジ−（Ｃｏｍｐ　、３　ｉｏｃｈｅｍ。

Ｐｈｙｓｉｏｌ、　＞、　５４Ａ、　２８１　（１９７
６＞　、猪狩ら、ジャーナル・オブ・バイオケミストリ
ー（Ｊ、３ｉｏｃｈｅｍ、＞、９２．１６７９〜１６８
２（１９８２）、同９３，１２１〜１２７（１９８３）
、及び長瀬ら、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケ
ミストリー（Ｊ、Ｂ、Ｃ，＞。

ｖｏｌ、２５８．Ｎｏ、１２．７４８１〜７４８９（１
９８３）等参照）。

上記オボマクログロプリンの調製原料としての卵白は、
特に制限はなく、各種動物のものをいずれも使用するこ
とができる。一般には容易に入手可能なニワトリ、アヒ
ル、ウズラ、七面鳥等の卵白か好ましい。上記卵白から
のオポマクログロプリンの調製法も特に制限はなく、蛋
白質成分の分離に一般に利用されている各種の方法に従
い、オボマクログロプリンの物理化学的性質等を利用す
る各種操作、例えば蛋白沈澱剤処理、分子ふるいクロマ
トグラフィー（ゲル濾過）、イオン交換クロマトグラフ
ィー、遠心分離、電気泳動、透析等を単独で又は組合せ
て行なうことができる。

例えば、卵白をトリス−塩酸緩衝液等の水溶性溶媒と混
合するか又はこれにポリエチレングリコール等を加えて
オボムシン等の不溶性蛋白質を除去した後、ゲル濾過に
付す方法を例示でき、これにより、分子量約６０〜８０
万の糖蛋白質として、オポマクログロプリンを得ること
ができる。

本発明の創傷治療剤は、上記のごとくして得られるオボ
マクログロプリンを有効成分として含有する一般的な医
薬製剤の形態で実用できる。該医薬製剤形態としては、
得られる製剤の使用目的に応じた各種の形態が適宜選択
できる。その例としては、例えば液状塗布剤、ローショ
ン剤、エアゾール剤、リニメント剤、軟膏剤、パップ剤
等の外用剤の他、坐剤、注射剤等を例示できる。之等各
種形態の調製には、通常使用されている各種の希釈剤、
賦形剤等が適宜使用できる。例えば外用剤としての軟膏
剤の調製に当っては、通常の疎水性もしくは親水性基剤
、例えば脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、パラフィ
ン、ロウ、グリコール類、高級アルコール類、グリセリ
ン、水等を使用できる。また上記外用剤には、必要に応
じて通常添加されることの知られている各種の添加剤、
例えば安定化剤、香料、着色剤等を添加することもでき
る。

本発明薬剤中に含有されるべき有効成分、即ちオボマク
ログロプリンの量は、特に制限されず広範囲から適宜選
択されるが、通常製剤中に約０．０００１〜３０重量％
の範囲で配合される。

また本発明治療剤の適用量及び方法は、該製剤の形態、
製剤中の有効成分量、これを適用される患者の年齢、性
別その他の条件、創傷の程度等に応じて決定することが
でき、例えば外用剤形態の本発明創傷治療剤は、これを
患部全体に充分に行き亘る量で、１日に１〜複数回、該
患部に散布、塗布等により適用することができる。他の
製剤形態の場合も上記と同様でおる。

本発明は、またオボマクログロプリンを有効成分とする
化粧料をも提供するものである。

該化粧料は、オボマクログロプリンを有効成分として含
有させる以外は、通常の化粧料と同様にして、各種の形
態に調製される。例えば皮膚に適用される化粧品として
の化粧水、クリーム、乳液、ファンデーション等の各種
形態及び例えばシャンプー、リンス、ヘアリキッド、セ
ットローション、ヘアトニック等の頭皮乃至毛髪に適用
される各種形態の毛髪用化粧料が挙げられる。之等各種
形態への調製は、常法に従って行なうことができ、その
際、公知の各種化粧料基剤及び必要に応じて各種の香料
、酸化防止剤、界面活性剤、防腐剤等の添加剤を使用さ
れることも同様である。

本発明化粧料中へのオボマクログロプリンの配合量は、
得られる化粧料の形態や所望の効果等に応じて、適当に
選択できるが、通常全組成物中に０．０００１〜３０重
量％程度、好ましくは約ｏ、ｏｏｏｉ〜０．１重量％程
度の範囲となる量とされるのが適当でおる。

かくして、得られる本発明創傷治療剤は、前述した通り
、優れた創傷治癒促進効果を奏するものであり、各種創
傷治療に卓越した効果を発揮できる。また本発明化粧料
は、同様に前記した通り、優れた皮膚乃至毛髪の保護効
果や改善効果を奏し得、従来のこの種化粧料に代替え使
用して、より有利なものでめる。

更に本発明者らの研究によれば、本発明において有効成
分として利用されるオボマクログロプリンは、後記試験
例に示される通り、優れた発毛促進作用を有しており、
養毛剤、育毛剤等の所謂毛はえ薬としての医薬品として
有効である。かかる医薬品は、通常のこの種医薬品と同
様にして、その有効量を含有する各種の投与製剤形態に
調製され、これに応じた投与方法、投与経路にて毛髪乃
至頭皮に適用することができる。その投与形態、投与量
、投与方法等は前記した本発明創傷治療剤のそれらと略
々同様のものとすることができ、この適用によれば、発
毛促進効果と共に、毛髪の保護、改善効果等を奏し得、
例えば毛髪の荒れを解消して、つや等を改善することが
できる。

友−一五一−１ 以下、本発明を更に詳しく説明するため有効成分とする
オボマクログロプリンの調製例、その効果の試験例及び
これを配合した本発明製剤の各種処方例を挙げる。

実施例１：オボマクログロプリンの調製卵白２０に！１
１を、これと等量の１％Ｎａ　Ｃ９を含む１０１１１Ｍ
トリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，７＞に懸濁させ、これに
ポリエチレングリコール（分子量−８５００、東京化成
社製）を２．５％濃度となるように加え、連続遠心分離
（１００００ｐｐｍ　）して、上清を採取した。得られ
た上清に更に上記と同一のポリエチレングリコールを１
０％濃度になるまでに加え、再び連続遠心分離（１００
００ｒｐｍ　）　シて沈澱部分を採取した。これを上記
１衝ＩＧｃＩ解し、更ニ遠心分＠（１００００ｒｐｍ、
１０分間）して、上清を採取し、これをセファロースＣ
Ｌ−６８（ファルマシア社製）のカラム（２５２Ｘ９０
０ｍｍ＞に付し、ＩＪ）１１ｊＨＦ、Ｒ’３Ｌ３．６Ｑ
／時間の速度で溶出させた。

溶出区分につき、カゼインを基質とするトリプシン阻害
活性を、キタモトらの方法（Ｔ。

Ｋｉｔａｍｏｔｏ　、　Ｍ、　Ｎａｋａｓｈｉｍａ、　
ａｎｄ　Ａ、　　Ｉ　ｋａｉ　。

Ｊ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、、９２．１６７９−１６８２（
１９８２））に従い測定して、トリプシン阻害活性画分
を集めた。

次いで得られた活性画分を、分子ふるい膜１０００００
の膜を装着したベリコンカセット（ミリポア社製）を用
いて濃縮しつつ、５　ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７
，７＞により緩衝液の交換を行なった。得られた試料を
、１０ｍＭＮａ　ＣＱを加えた１０ｍＭトリス−塩酸緩
衝液（ｐＨ７，７＞で平衡化したＤＥＡＥトリスアクリ
ルＭ　（ＴｒｉｓａｃｒｙｌＭ、　ＬＢＫ社製）カラム
（サイズ５０Ｘ８００ｍｍ）に付した。同緩衝液でカラ
ムを充分に洗浄後、５０ｍＭＮａＣＱを含む１０ｍＭト
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，７）６７５ｍｌ及び１５０
ｍＭ　　ＮａＣＱを含む１０ＩＩＩＭトリスー塩酸緩衝
液（ｐ　１−ｆ７．７）６７５ｍＧで各２．５時間、合
計５時間をかけて溶出させた。

この条件でトリプシン阻害活性区分は、食塩′ａ度７０
ｍＭ〜１２０ｍＭの間に溶出された。

上記トリプシン阻害活性画分を集め、１　　ｍＭリン酸
緩衝液（ｐ　Ｈ７，４＞に対して透析した。充分に透析
した後、透析内液を凍結乾燥機（ラボコーン社製）にて
凍結乾燥した。

上記により、単一なオボマクログロプリン精製試料５．
９〜７．１ｇを得た。

精製試料について、４Ｎメタンスルホン酸で、１１０℃
、２４時間加水分解（減圧封管中）後、アミノ酸アナラ
イザー（８３５−５０形、日立高速アミノ酸分析計、日
立製作所″’Ｉ）により分析した。

その結果は下記第１表の通りである。

第１表 試験例１ 火傷による血管透過性の抑制試験 この試験は、ラット皮膚に電気ゴテで火傷を生じさせた
後、該ラットに色素（エバンス・ブルー〉を投与し、火
傷個所に浸出する体液中の漏出色素量を定量することに
より、供試動物の血管透過性を指標として、本発明創傷
治療剤による創傷治療効果を調べたものでおる。

試験は次の方法により実施した。即ち、体重２００〜２
５０ｇのウィスター系雄性ラットを各群５匹からなる２
群に分けた。各群ラットの各々の背中の正中線に沿って
対象となる部位の毛を、バリカンで剃った後、その一方
に直径’１ｃｍの円形状態に電気ゴテ（目盛温度１００
〜１１０℃）を２０秒間押しあてて火傷部位を作成した
。他方は非火傷部位として残した。

１群の各ラットには、上記火傷作成直後及び２４時間後
に、火傷部位及び非火傷部位のそれぞれに生理食塩水０
．２ｍＱを皮肉注射して、生理食塩水投与群（対照群）
とした。他方の群の各ラットには、１０ｍＭｍＧ濃度の
オボマクログロプリン溶液０．２ｍｆ２を同様に皮肉投
与して、オボマクログロプリン投与群（実験群）とした
。

上記各投与の２３．５時間後に、各群ラットに０．５％
エバンス・ブルー色素液５ｍ１２／ｋｇを静脈内投与し
た。その３０分後、即ち火傷作成４８時間後に、各ラッ
トを放血致死させ、火傷部位及び非火傷部位の各皮を剥
ぎ、付着している脂肪を除去した後、１ｃｍ２角に切り
取った。

この１　ｃｍ２角の皮膚を、１Ｎ−ＫＯＨ溶液１鵬に浸
し、３７℃で２０時間放置して溶解させた。

次いで０．６Ｎ　　ＨＧ　ＰＯ４：アセトン（５：１３
）混液９鵬を加え、ミキサーで撹拌後、３０００　ｒｐ
ｍで２５分間遠心分離を行ない、上Ｗ−を採取した。

得られた上清の吸光度を、波長６２０止で、り光光度計
により測定した。測定された吸光度より、予め作成され
た標準曲線を利用して、漏出したエバンス・ブルーのμ
ｇｌを求めた。この数値は平均値上標準誤差で示した。

結果を下記第２表に示す。

第２表 上記第２表より、（火傷部位）−（非火傷部位）のエバ
ンス・ブルーの漏出闇値は、対照群（生理食塩水投与群
〉において２５．０±５．３２であったのに対し、実験
群（オボマクログロプリン投与群）では、１１．８±３
．５５でおり、オボマクログロプリン投与により、血管
透過性が顕著に抑制されることが判る。

試験例２ 脱毛クリームによる皮膚炎症回復試験 この試験には、体重２５〜３０ｇの３ａｌｂ　／Ｃ系雄
性マウス合計２０匹を使用した。

供試マウスの背面の毛をバリカンできれいに刈り取り、
脱毛クリーム（マウイ　へアーリムーバー、カネボウ社
製＞０．５ｇを、２．ＯＸ２．５ｃｍ大きさに均等に塗
布した。３０分放置後、塗布したクリームを温水で拭き
取り、皮膚炎症モデルを作成した。

上記モデルマウスを１群４匹の５群に分け、その内の４
群のマウスに、皮膚炎症作成当日、翌日、３日目及び６
日目の各日に合計４回、以下の軟合剤試料各０．３ｇを
塗布して、実験群１〜４とした。

実験群１：日本薬局方親水性軟膏（書出製薬社製）塗布 実験群２：上記軟膏にオポマクログロプリン０．０１％
を添加した軟膏塗布 実験群３：上記軟青にオボマクログロプリン０．００５
％を添加した軟膏塗布 実験群４：上記軟膏にオボマクログロプリン０．００１
％を添加した軟膏塗布 また、残りの１群は何らの処理も行なわない対照群とし
た。

上記各実験群の作成（軟膏塗布）後（対照群も含む）、
各群マウスの皮膚の状態を、毎日肉眼的及び組織学的に
観察した。組織学的観察は、ヘマトキシリン−エオシン
染色（ＨＥ未染色１麦に、顕微鏡下で行なった。

その結果、脱毛クリーム処置１臼目の対照群では、表皮
、真皮層に炎症が生じ、組織法、好中球等炎症性細胞が
集結し、特に表皮及びそれに続く真皮部に強い炎症が認
められ、エオシンに強く染色される物質が広がっていた
。また４日目には、表皮及びそれに続く真皮部分の組織
像が炎症像に置き代っており、炎症は毛包郡全体にも広
がっていた。

実験群１（親水性軟膏塗布群）では、上記対照群との間
に差は認められなかった。

これに対し、実験群２〜４（オボマクログロプリン添加
軟膏塗布群）は、上記対照群及び実験群１に比し、表皮
、真皮及び毛包部分の炎症がよく抑えられており、真皮
の組織像も良好に回復していると認められた。尚、オボ
マクログロプリンの配合量の低い群（実験群４）では、
上記効果はやや弱いようでめった。

実験群３（オボマクログロプリン０．００５％添加軟膏
塗布群）における脱毛クリーム処置８臼目の組織学的観
察結果より、この８日目には、上記４日目に比べて、組
織像も明確になり、皮下組織部に新しい毛包が成長して
いるのが確かめられた（参考写真１参照）。この傾向は
、実験群１（オボマクログロプリン無添加の親水性軟膏
塗布群）においてもほぼ同様であった（参考写真２参照
）。

また、正常マウスの表皮部分は凸凹と波打った形状をと
るのが本来の姿でおるが、本発明の実験群２〜４では、
炎症面の修復が進み、この正常表皮特有の凸凹の波打っ
た形状をとりはじめていると共に、毛の発育に関係する
細胞群の増殖、発育が著明であり、それに伴って、毛根
の再生が早く認められた（例えば、参考写真１参照）。

試験例３ 悲傷回復試訣 この試験には、体重２５〜３０ｇの１３８１ｂ　／Ｃ系
雄性マウス１群４匹からなる５群を使用した。

供試マウスの背面の毛をバリカンできれいに刈り取り、
脱毛クリームを塗布して５分間放置（炎症を起こさない
程度）した後、塗布したクリームを温水で拭き取った。

次いで１．５Ｘ２．５Ｃｍ”の範囲ニ亘ッテ、３５０〜
４００℃に設定した電気ゴテ（Ｔ−２７、パラフィン切
断溶融コテ、高島商店製）を約５秒間あてて熱傷を負わ
せた。

熱傷負荷翌日より３日間毎に、下記各供試軟膏を、熱傷
部に各々０．２ｇづつ塗布し、供試動物の体重変動、損
傷部の観察、組織学的観察を行なった。

実験群１：日本薬局方親水性軟膏（吉日製薬社製）塗布 実験群２：上記軟膏にオボマクログロプリン０．０１％
を添加した軟膏塗布 実験群３：上記軟膏にオボマクログロプリン０．００５
％を添加した軟膏塗布 実験群４：上記軟漕にオボマクログロプリン０．００１
％を添加した軟膏塗布 また、残りの１群は何らの処理も行なわない対照群とし
た。

上記試験における体重変化測定結果を、第１図に示す。

該図は、電気ゴテによる熱傷を与えた日を「０日」とし
て、４日までの毎日の各群における供試動物の体重変化
比（熱傷受傷前平均体重を「１」としてこれに対する体
重変化指数）を表示したものでおり、横軸は日数（日）
及び縦軸は体重変化比を示す。また図中（１）は実験群
４（オボマクログロプリン０．００１％を添加した軟膏
塗布群、（２）は実験群１（オボマクログロプリン無添
加の親水性軟膏塗布群）及び（３）は対照群を示してい
る。

上記体重変化は、熱傷の程度をよく反映している。即ち
、熱傷受傷後には、局所の炎症による血管透過性の亢進
や不感蒸泄不能状態により浮腫を生じ、それ故熱傷部面
積の大きさに応じて浮腫が大きくなり、体重が増加する
。

上記体重変化結果を示す第１図より、本発明のオポマク
ログロプリン塗布群（実験群４）では、無塗布の対照群
及びオボマクログロプリン無添加の親水性軟膏塗布群（
実験群１）に比し、浮腫が抑えられているために、体重
増加は認められないことがよく判る。

上記試験における肉眼的観察結果より、受傷６日後には
、対照群及び実験群１に比し、本発明の実験群２〜４で
はいずれも非常に良好な回復が認められた。このことは
参考写真３（実験群４の受傷６日日の受信部写真）及び
参考写真４（対照群の同写真）の対比からも明確でおる
。

ざらに、上記試験にあけるＨＥ未染色よる組織学的観察
を試験例２と同様にして行なった。

その結果、悲傷受傷４日後、対照群及び実験群１では、
表皮、真皮部分が、全て熱傷に特徴的なエオシン染色性
物質に置き代っており、毛包部分は形態として残存して
いたく熱傷受傷４日後の対照群における顕微鏡写真でお
る参考写真６参照）。

これに対し、本発明の創傷治療剤適用群（例えば実験群
３）では、真皮膚部分の皮下組織と接している部分から
組織修復が進み、真皮様組織を形成し始めており、毛根
形成が順調に進んでいることが確かめられた（熱傷受傷
４日後の実験群３、即ちオポマクログロプリン０．００
５％を添加した軟膏塗布群における顕微鏡写真である参
考写真５参照）。

上記結果より、本発明の創傷治療剤の適用によれば、熱
傷後の浮腫防止効果、損傷部の回復効果が肉眼的に確認
され、更に組織学的にも皮膚、体毛の修復効果（組織形
成促進効果）が明らかに認められた。

試験例４ 皮膚剥削創回復試験 家兎背部に、シルバーナイフで２５ｍｍｘ２５ｍｍ大、
深さ１．２ｍｍの分層皮膚欠損剤を５力所作成する。こ
の際、それぞれの創傷治癒機転の影響を排除するため、
各欠損創は、３Ｑｍｍ以上間隔を離して作成する。

上記で作成した各欠損創のそれぞれに下記各供試薬剤（
軟膏剤）を１日１回塗布し、塗布後、ガーゼ（２５ｍｍ
ｘ２５ｍｍ大）にて覆い、供試薬剤の混入を避けるため
、通気性ナイロンフィルム（「テガダーム」、スリーエ
ム社製）で閉鎖し、更に弾力包帯で全体を閉鎖する。こ
の処置は観察期間中継続して行なった。

く供試薬剤〉 実験区１：１ｉ！２水ワセリン軟青（親水ワセリン基剤
のみ） サラシミツロウ　　　　　　　　　　８ｇステアリルア
ルコール　　　　　　　３ｇコレステロール　　　　　
　　　　　３ｇ白色ワセリン　　　　　　　　　　８６
Ｃ］プロピルパラベン　　　　　０．０６２５ｇ実験区
２：１％オボマクログロプリン含有親水ワセリン軟膏 ５％オボマクログロプリン水溶液　２００（４０ｍｏメ
チルパラベン含有） 親水ワセリン基剤　　　　　　　　８０Ｃ７実験区３：
０．１％オボマクログロプリン含有親水ワセリン軟膏 ０．５％オボマクログロプリン水溶　２０ｇ液（４０１
１１ｇメチルパラベン含有）親水ワセリン基剤　　　　
　　　　　８０ｇ実験区４：０．０１％オボマクログロ
プリン含有親水ワセリン軟膏 ・０．０５％オボマクログロプリン水　２０Ｑ溶液（４
０ｍｇメチルパラベン含有） 親水ワセリン基剤　　　　　　　　　８０゜創傷治癒の
評価は、創傷作成直後並びに７日目、１４日目及び２１
日目に、以下の事項に関して肉眼観察した。

イ）創の上皮化 各時期における創の治癒過程を写真撮影して観察評価し
た。

口）組織学的観察 各時期において創面を生検し、）−ＩＥ染色標本にて、
肉芽組織中のコラーゲン線維量、形態及び形成された上
皮を観察した。

ハ）副作用の有無 正常組織への刺激性（発赤）、皮膚炎の発症の有無を観
察した。

上記の実験皮膚剥削創に対して、オボマクログロプリン
含有軟膏を用いた実験区２〜４では、いずれも、その塗
布７日目の創の大きさが、親水軟膏塗布区（実験区１）
と比較して若干縮少しており、組織学的初見でも、肉芽
粗織の形成が観察された。よだ創作酸１４８目には、オ
ボマクログロプリンによる創傷治癒効果が更に進み、創
の大きさは親水軟膏塗布区（実験区１）に比し明らかに
縮少した。この１４日目の観察では組織学的にも、上記
差が明確になり、肉芽組織の形成、コラーゲン線維量及
び上皮組織の増殖等に有意差が認められた。創傷作成２
１日目には、実験区２〜４では、実験区１に比して明ら
かな創傷治癒期間の短縮が認められた。これは組織学的
にも明白であり、肉芽形成の促進、コラーゲン線維量の
増加、上皮細胞の増殖促進が観察された。上記各効果は
、特に０．１％オボマクログロプリン含有親水ワセリン
軟膏使用区（実験区３）及び０．０１％オボマクログロ
プリン含有親水ワセリン軟膏使用区（実験区４）におい
て顕著であった。

これらの所見は、添附の参考写真７〜１２に示される通
りでおる。

参考写真７は、実験区１の兎の創作成７日日の創面の写
真である。

参考写真８は、同実験区１の兎の創作成２１日日の創面
の写真である。

参考写真９は、実験区３の兎の創作成７日日の創面の写
真である。

参考写真１０は、同実験区３の兎の創作成２１日日の創
面の写真でおる。

参考写真１１は、実験区４の兎の創作成７日日の創面の
写真でおる。

参考写真１２は、同実験区４の兎の創作成２１日日の創
面の写真でおる。

また、上記実験区２〜４に用いた各供試薬剤を、正常皮
膚に対して適用して、オポマクログロプリンの副作用を
観察した所、正常皮膚に発赤は認められず、皮膚炎の発
症も全く見られなかった。

試験例５ 角膜上皮細胞に対する伸展試験 この試験には、体重２．５〜３．０ｋｇの家兎を用いた
。予め供試兎ｄペンドパルビタール（ピットマン・ムー
ア社製＞３０ｍＭｋｇの静脈内投与により麻酔した後、
角膜を摘出し、２　Ｘ　４　ｍｍの短冊状角膜片を作成
した。

ＴＣ−１９９培養液にオボマクログロプリンを０．０５
μＣＪ／ｍＱ、　０．５μｇ／ｍ１２及び５ｔｌＣＪ／
鵬の各濃度に溶解させ、各培養液中で上記で得た角膜片
を２８時間培養した。培養後、組織片を５％氷酢酸−９
５％エタノールで固定し、パラフィンに包埋し、４μの
切片を作成した。これをＨＥ染色後、顕微鏡下で観察し
、伸展した角膜上皮細胞の長さを測定した。

結果を第２図に示す。図において横軸は角膜上皮細胞の
長さくｍμ）を、縦軸における（Ａ＞はＴＣ−１９９培
養液のみの対照群を、（Ｂ）は上記培養液にオボマクロ
グロプリン０．０５μｇ／鵬添加群を、（Ｃ）は同オボ
マクログロプリン０．５μｇ／ｍＱ添加群を、（Ｄ＞は
同オボマクログロプリン５μＣＩ／ｒｒｌｉ２添加群を
それぞれ示す。

上記第２図より、オボマクログロプリンは、容量依存的
に角膜上皮細胞の伸展を促進させ得ることが明らかであ
る。

試験例６ 歯周組織創傷回復試験 ■　１２週令のラットを用い、上顎左右第二臼歯口蓋側
の中央部付近に有鈎探針を挿入し、骨まで達したら数回
歯冠に沿って往復させ、剥離し創傷面を形成させる。そ
の後、左側第二臼歯の接触点直下に根管治療用にファイ
ル４０号を挿入して、頬側と口蓋側とを交通させ、絹糸
（ブレード　シルク）４−Ｏを第二臼歯周囲に一回巻き
つけ、結び目は頬側につける。止血を確認した後、供試
薬剤の塗布を行なう。上記操作はすべてケタラールの腹
腔内麻酔下で行なった。

■　歯科用＃１２バードビークの替刃メスを用いて第三
臼歯の遠心から第一臼歯の近心まで切開し、有鈎探針を
挿入し、て往復させ歯肉を除去した。母面はＱ、５ｍｍ
程度露出させた。

■　供試薬剤としては、前記試験例４の実験区１に用い
たと同じ親水ワセリン軟膏（親水ワセリン基剤のみ）（
以下この使用区を「実験区１」と云う〉、前記試練例４
の実験区３に用いたと同じ０．１％オボマクログロプリ
ン含有親水ワセリン軟膏（以下この使用区を「実験区２
」と云う〉及び同様にして調製した下記組成の０．００
５％オボマクログロプリン含有親水ワセリン軟膏（以下
この使用区を「実験区３」と云う）をそれぞれ用いた。

実験区３使用供試薬剤組成： ０．０２５％オポマクログロプリン　２０Ｃｌ水溶液（
４０ｍｇメチルパラベン含有）・親水ワセリン基剤　　
　　　　　　　８０Ｃ１また、上記各供試薬剤は、ラッ
ト用トレーに賠リ、１日１回１５分間塗布して用いる。

その塗布量は、１回平均約０．３２’Ｑである。塗布量
、２時間は飲水を与えず、また第１回目の塗布は止血確
認後に行なった。上記の操作はすべてネンブタール（０
，１ｍＱ）の腹腔内麻酔下で行なった。

■　評価方法は次の通りである。即ち、実験開始し１日
目、２日目及び７日目にそれぞれ処置ラットを層殺し、
病変部を取り、ブアン固定し、トリクロロ酢酸脱灰及び
パラフィン包埋後、ＨＥ未染色はアザン（Ａ　５ａｎ）
染色し、炎症細胞数及びコラーゲン線維の変化を観察し
た。

■　得られた結果（組織学的所見）を次に示す。

炎症性細胞浸潤と組織内出血状態は、対照区（実験区１
）では、歯肉溝上皮から歯槽骨頂部までの歯肉固有層に
かけて、強い毛細血管の拡張、出血像があり、その周囲
にフィブリン層及び散在した好中球の浸潤が認められた
（実験区１の結果を示す組織写真である参考写真１３参
照）。

これに対し、実験区２及び実験区３では、固有層におけ
る毛細血管の拡張はあるものの、出血傾向はあまり強く
なく、固有層はすでにフィブリン層に覆われている傾向
にめった。また実験区１でみられた固有層内での好中球
の浸潤は少なかった。

しかし歯肉溝上皮、付着上皮部のフィブリン層表面には
、限局した強い好中球浸潤像が認められた。

実験区２と実験区３との対比では、実験区２の方が固有
層での毛細血管の拡張、出血像が少なく、しかも上皮部
での好中球浸潤が少ない傾向が認められた。

上記実験区３の結果を示す組織の写真を参考写真１４と
して示す。

また、コラーゲン線維の変化は、ＨＥ未染色結果、実験
区１では、創傷部付近及びその周辺のコラーゲン線維に
断裂、変性等が認められたのに対し、・実験区２及び３
では、創傷部付近のコラーゲン線維は断裂してはいるが
、周囲まで広がってはおらず、この傾向は実験区２の方
が実験区３よりも強かった。

試験例７ 本発明化粧料の官能試験 肌荒れを感じる女性１０名（２５〜３５才）を選び、後
記処方例１に示す本発明化粧料（スキンミルク）を、毎
日起床後と就寝前の２回、肌に塗布してもらい、２週間
後に、供試化粧料を塗布した肌につき下記３項目を評価
させた。

また、対照試験として、上記本発明化粧料試料に代えて
、オポマクログロプリンを配合しない以外は同様にして
調製した対照化粧料試料を用いて、別の肌荒れ感を感じ
る女性５名（同年齢）をパネラ−として、同一官能試験
を実施した。

上記官能試験結果を下記第３表に示す。表中、数値（分
子／分母〉は、（各評価項目につき良い乃至は有りと応
えたパネラ−数／全試験者数）を示す。

第３表 上記第３表より、本発明化粧料試料は、オボマクログロ
プリンの配合により、官能試験において優秀であること
が実証された。

以下、本発明製剤の調製処方例を示す。各側において部
とめるは重量部を示す。

処方例１：本発明化粧料処方 スキンミルクの調製 流動パラフィン（１００〜１　’ｌ　０ｃｐ）　　　７
部セチルアルコール　　　　　　　　　０．５部８５％
グリセリン　　　　　　　　　　７部オボマク口グロプ
リン　　　　　　０．０１部ジメチルアミンプロピルラ
ノリン 酸アマイドジサルフエート　　　　０．０３部防腐剤（
メチルパラベン）　　　　　０．２部香　　　料　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　適量水を加えて全量
を１００部とする。

上記組成に基づき、先ずオボマクログロプリン、ジメチ
ルアミノプロピルラノリン酸アマイドジサルフエート及
びグリセリンを混ぜ合せた後、撹拌下に７５℃で水を加
えて均一混合液を調製した。

一方、流動パラフィン、セチルアルコール及びメチルパ
ラベンを撹拌下、７５℃加温下に混合して均一混合液を
調製し、同温度に保持しつつこれに上記で調製した均一
混合液を徐々に加えて撹拌混合し、室温まで放冷した。

かくして調製された液に最終的に香料を撹拌混合して本
発明のスキンミルクを得た。

処方例２：本発明化粧料処方 スキンクリームの調製 流動パラフィン（１００〜１１０ｃｐ）　　　５部イソ
プロピルミリステート　　　　　　１０部ステアリン酸
　　　　　　　　　　　　　３部セタノール　　　　　
　　　　　　　　　２部８５％グリセリン　　　　　　
　　　　１０部ポリオキシエチレン（ＥＯ＝４）ス テアレート　　　　　　　　　　　　　　１部オボマク
ログロプリン　　　　　０．００１部ジメチルアミンプ
ロピルラノリン 酸アマイドジサルフエート　　　　０．０４１防腐剤（
メチルパラベン）　　　　　０．２部香　　　料　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　適量水を加えて全量
を１００部とする。

上記組成に基づいて処方例１と同様にして本発明スキン
クリームを調製した。

処方例３：本発明化粧料処方 スキンローションの調製 ９５％エチルアルコール　　　　　　　２０部８５％グ
リセリン　　　　　　　　　　　５部ポリオキシエチレ
ン（ＥＯ＝２０＞ ソルビタンラウリン酸モノエステル　０．５部オボマク
ログロプリン　　　　　０．００５部ジメチルアミノプ
ロピルラノリン 酸アマイドジサルフエート　　　　０．０４部防腐剤（
メチルパラベン）　　　　　０．２部香料及び色素　　
　　　　　　　　　　適量水を加えて全量を１００部と
する。

上記組成に基づいて、まずオボマクログロプリン、ジメ
チルアミノプロピルラノリン酸アマイドジサルフエート
及びグリセリンをよく混ぜ合せた後、水を加えて均一混
合液を調製した。一方、エチルアルコールに香料、色素
及び防腐剤を溶かした後、ポリオキシエチレンソルビタ
ンラウリン酸モエステルを添加して均一混合液を調製し
、これに上記で調製した均一混合液を強撹拌下に添加し
、濾過した。かくして本発明のスキンローションを得た
。

処方例４：本発明化粧料処方 スキンローションの調製 処方例３において、オボマクログロプリンの添加量を０
．０００１部に代えた以外は同様にして、本発明スキン
ローションを得た。

処方例５：本発明創傷治療剤処方 オボマクログロプリン　　　　　０．０１ｇ防腐剤　　
　　　適量 香　　　　料　　　　　　　　　　　　　　　適　間然
留水を加えて全量を１００ｍＱとする。

上記オポマクログロプリン、防腐剤及び香料に蒸沼水を
加えて全量を１００ｍＱとした後、滅菌し、スプレー用
溶液形態の本発明創傷治療剤を調製した。

処方例６：本発明創傷治療剤処方 オボマクログロプリン　　　　　０．０５゜防腐剤　　
　　　適量 香　　　　料　　　　　　　　　　　　　　適　量蒸留
水を加えて全量を１００ｍＱとする。

処方例５と同様にして、上記組成のスプレー用溶液形態
の本発明創傷治療剤を調製した。

処方例７：本発明創傷治療剤処方 親水性軟膏の調製 オボマクログロプリン　　　　　　０．５ｇ白色ワセリ
ン　　　　　　　　　　２５０（Ｊステアリルアルコー
ル　　　　　　２２００プロピレングリコール　　　　
　　１２０ｇラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　１５
ｇパラオキシ安息香酸エチル又は パラオキシ安息香酸メチル　　　０．２５ｇパラオキシ
安息香酸プロピル　　０．１５ｇ精　　　製　　　水　
　　　　　　　　　　　　　適　量全　　　　　　　量
　　　　　　　　　　　１０００（］上記成分を配合し
て、オボマクログロプリンを含有する本発明の親水性軟
膏形態の創傷治療剤を調製した。

処方例８〜１１：本発明創傷治療剤処方親水性軟膏の調
製 処方例７において、オボマクログロプリンの配合量を０
．０１ｇ、０．０５ｇ、Ｏ，ＨＪ及び１ｇに代え、同様
にして本発明の親水性軟膏形態の創傷治療剤を調製した
。

【図面の簡単な説明】

第１図は、悲傷受傷マウスを用いた悲傷回復試験におけ
る供試マウスの体重変化を調べたグラフである。 第２図は、試験例５における角膜上皮細胞の伸展に対す
る本発明薬剤の影響を示すグラフである。 （以　上） 第１図 り 日　委ケ　（日） 第２図 【 ｍμ

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）オボマクログロブリンを有効成分として含有する
   ことを特徴とする創傷治療剤又は化粧料。
2. （２）オボマクログロブリンを有効成分として含有する
   ことを特徴とする毛はえ薬。