JPS6236332A - 医薬投与単位 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明は非経口投与用医薬組成物に関し、さらに詳しく
は、血栓溶解治療用医薬投与単位に関する。

発明の背景 ヒト組織プラスミノーゲンアクチベータ−（ＩＰＡ）は
約７００００ダルトンおよび５２７アミノ酸の糖蛋白質
である。ｔＰＡは種々のヒト組織に隠されており、本来
血漿中に存在する。ｔＰＡは、プラスミノーゲンをプラ
スミンに変換することにより血餅溶解の作用をする。ｔ
ＰＡはフィブリンに対し親和性を有し、フィブリンの存
在下により活性になる。したがって、ｔＰＡは深静脈血
栓症、急性心筋梗塞および肺塞栓症のような血栓形成に
関係した症状の治療に有用である。一般に、レイケンら
、バイオヒミカ・工・バイオロジカルＡｃｔａ）、５８
０ｍｌ４０（１９７９）、ペターレインら、ジャーナル
・オブ・バイオロジカル・ケミストリー　（Ｖｅｔｔｅ
ｒｌｅｉｎ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈ
ｅｍ＋）　。

２５４．５７５（１９７９）、レイケンら、ジャーナル
・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｂｉｊｋｅｎ
ａｔ　ａｌ、Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、　）　、　
２５６　、７０３５　（１ｇ８１）およびマツオら、ネ
イチャー（Ｍａｔｓｕｏ　ｅｔａｌ、、　Ｎａｔｕｒｅ
　）、　２９１　、５９０　（１９８１）参照。

ｔＰＡは、ボウズ（Ｂｏｗｅｍ　）メラノーマ細胞系を
含むある種の細胞系により過剰生産される。例えば、ウ
ィルソンら、キャンサー・リサーチ（Ｗｉｌ５０ｎ　ｅ
ｔ　ａｌ、、　Ｃａｎｃ、　Ｒｅｓ、　）　、　４Ｑ　
、　９３３（１９８０）参照。コレンら（Ｃｏ１１ｅｎ
　ｅｔ　ａｌ、）　、　Ｅｉ　−ロツバ特許出願１４）
７６６号はボウズメラノーマ由来ｔＰＡの精製を開示し
ている。ウィルソン（Ｗｉ　ｌ　５０ｎ　）、ヨーロッ
パ特許出願＠１１３３１９号は無血漿ボウズメラノーマ
細胞系を用いたｔＰＡの生産および精製を開示している
。

ｔＰＡは、また、組換えＤＮＡ技術により製造できる。

ｔＰＡのｍ　ＲＮ　Ａの分離は、例えば、オプデナツカ
ーら、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・バイオケミス
トリー（０ｐｄｅｎｓｚｋｋｅｒ　ｅｔ　ａｔ　、。

Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、）　、　１２１　、
２６９　（１９８２）により開示されている。ｔＰＡの
一部のｃＤＮＡの分離はエドルングら、プロシーディン
ゲス・オブ・ナショナル・アカデミ−・オブ・サイエン
シーズ・ニーｘスエ−（Ｅｄｌｕｎｇ　ｅｔ　ａｌｌＰ
ｒｏｃ、Ｎａｔｌ。

Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　）　、　８０　、３４９
　（１９８３）により開示されている。イー・コ！Ｊ　
（Ｅ、　ｃｏｌｉ　）中の（ＰＡのｃＤＮＡのクローニ
ングはペニカら、ネイチャー（Ｐｅｎｎ１ｃａ　ｅｔ　
ａｌ、、　Ｎａｔｕｒｅ）　、　３０１．２１４（１９
８３）により開示されている。イー・コリ（臥ｃｏｌｉ
　）およびチャイニーズ・ハムスター卵巣細胞中のｔＰ
ＡのｃＤＮＡのクローニングはボラチルら（Ｇｏｅｄｄ
ｅｌ　ｅｔ　ａｌ　、　）、ヨーロッパ特許出願第９３
６）９号およびレビンソンら（Ｌｅｖｉｎ５０ｎｅｔ　
ａｌ、　）　、　ヨーロッパ特許出願第１１７０５９号
により開示されている。

プロウティーボイエ、バイオ／テクノロジー（Ｂｒｏｕ
ｔｙ　−Ｂｏｙｅ　、　Ｂｉｏ　／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇ
ｙ　）、１９８４年１２月、１０５８頁はヒト初期肺細
胞にょるｔＰＡの生産を報告している。

ロピンソン、ｗｏｓ　４−０１７８６号ハ、ネイティブ
ＩＰＡに存在する炭水化物部分の全てまたは一部を欠く
修飾ｔＰＡを開示している。

ｔＰＡは水溶液に極めて溶解しにくい。ｐＨ７．０にお
けるｔＰＡの水への溶解性は約０ｍｌ岬／ｄである。し
たがって、ｔＰＡは一般に精製の間典型的な溶解剤で溶
解させる。これらは尿素およびチオシアネートのような
カオトロピック変性剤、洗剤のような界面活性剤、マン
ニトールのような炭水化物ならびにアルブミンおよびゼ
ラチンのような蛋白質を包含する。これらの薬剤は、明
らかに、ｔＰＡの水溶性を改善するが、得られたｔＰＡ
溶液は安定性が低下する傾向薯こあり、非経口投与に適
しているとは認められずまたは許容できないほどの多量
にて使用しなければならない。

ウィルソン（Ｗｉｌ５０ｎ）、ヨーロッパ特許出願第１
１３３１９号は容器表面への吸着を防止し、かつ、安定
性を改善するために非イオン性洗剤の添加を示唆してい
る。ウィルソン（Ｗｉ　ｌ　５０ｎ　）により開示され
た代表的医薬組成物は０．３Ｍ塩化ナトＩＪウムおよび
０．０１％ツイーン■８０中０．０７５噌／−のｔＰＡ
を含有している。

ゴ”７　ｆ　／Ｌ／ら（Ｇｏｅｄｄｅｌ　ｅｔ　ａｌ、
　）、ヨーロッパ特許出願第９３６）９号は、ｔＰＡが
常法により処方できることを開示しており、かつ、例と
して、５−の水にて復元し、かつ、０．９％塩化ナトリ
ウムにて混合した２５０００国際単位のｔＰＡ、２５岬
のマンニトールおよび４５−１のＮａＣ７を含有スるバ
イアルを提案している。

コレンら（Ｃｏ１１ｅｎ　ｅｔ　ａｌ、　）、ヨーｏ　
ツバ特許出願第４）７６６号は、ｔＰＡが塩化ナトリウ
ム、グルコース、マンニトールおよびアルブミンのよう
な添加剤の存在下または非存在下に常法で処方できると
述べている。代表的医薬組成物は、リン酸塩緩衝生理食
塩水中ｔＰＡ、０．００１％ツイーン８０および０．０
１〜１％のアルブミンまたはマンニトールを含有する。

ヨシザキら（Ｙｏａｈｉｚａｋｉ　ｅｔ　ａｌ、　）、
ヨーロッパ特許出願第１１２９４０号はｔＰＡの安定剤
としてアルブミンの使用を開示している。

ムラカミら（Ｍｕｒａｋａｍｉ　＠ｔ　ａｌ　、　）、
Ｅｌ−ｏ”／パ特許出願第１２３３０４号はゼラチンの
添加によるＩＰＡの安定化を開示している。

クルイトフら、バイオケミカル・ジャーナル（Ｋｒｕｉ
ｔｈｏｆ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、）
　、　２２６　、６３１〜６３６（１９８５）は、なら
し培地を遠心分離し、該上清にツイーン８０およびＮａ
Ｎａを加え、６Ｍｋｉｃｔ　ｌｃテＰ）ＩＧ　４．５１
ｃｍ整し、該溶液をｓｐ−セファデックス■カラムに通
し、酢酸ナトリウム緩衝液（０，１Ｍ酢酸す）　！Ｊ　
ラム、０．２５ＭＮａＣｔ、０．０１％ツイーン８０．
０．０５　％ＮａＮ３　）中ＮａＣｚにて、ｐＨ４，５
において該ｔＰＡを溶出する工程を含む無血漿ボウスメ
ラノーマ細胞により製造したｔＰＡの精製法を開示して
いる。溶出フラクションラフ−）Ｌｔし、０．９３ｑ／
−１のｔ　ＰＡ（４２８００単位／ｄ）に濃縮し、酢酸
す）　ＩＪウム緩衝液（５０ｍＭ酢酸ナトリウム、０．
５Ｍ　Ｎａ０２％０．０１　％フイーン５０、ｏ、ｏｓ
％ＮａＮ３、ｐＨ４゜５）中セファデックスＧ−１００
のカラムに付した。該生成物を０．３８−ａｌｄＯ：Ｊ
ｔ　ＰＡ（３５０００単位／ｇＩりに濃縮し、−７０℃
にて貯蔵した。

アメリカン・ダイアグツステイカ・インコーボレーティ
ッド（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ、　
Ｉｎｃ、）は凍結乾燥ｔＰＡを販売している。該販売人
の復元用能書には、１°０ｍｌＭ酢酸／酢酸ナトリウム
緩衝液（ｐ）ｉ３．９）を用い、ついで所望するｐＨに
上げる？アルブミン１＃／−を添加すれば沈殿を避ける
ことができる。」とある。

本発明の目的は、カオトロピック剤、界面活性剤、蛋白
質剤右よび炭水化物のような代表的可溶化剤／安定剤を
必要とせずに高い溶解性、すなわち、０ｍｌ　Ｎ　／　
ｗ以上の水への溶解性を達成するｔＰＡの滅菌医薬投与
単位を製造する隔月いる医薬処方を製造することである
。

本発明のもう１つの目的は、ｔＰＡが室温で相対的に安
定であるｔＰＡの医薬処方を調製することである。

さらに本発明のもう１つの目的は、非経口投与に適した
ｔＰＡの医薬処方を調製することである。

本発明の前記のおよび他の目的の達成をつぎに詳記する
。

発明の要約 １つの態様において、本発明は、ｐＨ３，５〜５．５に
！：！ｉｉした医薬上許容される溶媒中のｃＰＡからな
ることを特徴とする非経口投与用ｔＰＡの滅菌医薬投与
単位である。

もう１つの態様において、本発明は、凍結乾燥形態のｔ
ＰＡの１または２以上の滅菌容器および復元用溶液の１
または２以上の他の滅菌容器からなり、緩衝液が該容器
の一方または両方に供給され、および該緩衝液、復元用
溶液ならびに該ｔＰＡの世および復元用溶液の工が選択
され、容器の含量を合した際、ｐ）Ｌａ、ｓ〜５．５に
緩衝した医薬上許容される溶媒中のｔＰＡ□、１〜１５
〜／　ｍｔからなる非経口投与用医薬投与単位である復
元製品を供給することを特徴とするキットである。

図面は、他に表示がある場合を除き、尿素または酢酸／
酢酸アンモニウム溶液中０．３（Ｊｖ／−のｔＰＡの初
期分解（活性の損失）率を表わすグラフである。

発明の詳説 可溶化剤／安定剤の非存在下、ｐＨ３，５〜５．５に緩
衝した場合にｔＰＡが非常Ｉこ可溶性であることを発見
した。例えば、ｐＨ４，０（０，１Ｍ酢酸アンモニウム
）にて、ｔＰＡの溶解度は約１５　’ｆ／ｅ／以上であ
り、ｐＨ５，０（０，１Ｍ酢酸アンモニウム）にて、ｔ
ＰＡの溶解度は約３■／ｄである。前記のように、ＰＨ
７，０にて水中へのｔＰＡの溶解性は約０ｍｌ岬／ｄで
ある。

ｐＨ４，Ｑにおける本発明の処方中のｔＰＡの溶解度は
、ｐＨ７，５にて２Ｍ尿素を用いて得られる溶解度に匹
敵する。しかし、本発明の処方においては、浸透圧性利
尿剤であり、ｔＰＡと共に投与した場合、望ましくない
副作用を生じつるそのような可溶化剤の存在は、高溶解
性を得るために必要としない。

本明細書に託示されているもう１つの発見は、示された
ｐＨ範囲にてｔＰＡが非常に安定であるということであ
る。そのような安定性の増大は、本発明の医薬投与単位
中、低濃度ならびに高濃度のｔＰＡにおいて明白である
。例えば、次表は、Ｓ−２２５１検定において尿素（２
Ｍ尿素、０．３Ｍ　ＮａＣｔ　、　２０　ｍＭ　ｌ−リ
ス−ｈｃ、および０．０１％ツイーン８０、ＰＨ７，５
）またはｐ）ｉａ、ｓ〜５．５における１００ｍＭ酢酸
アンモニウム中４０℃にて低濃度（他に表示がある場合
を除いて０．３９■／−）におけるｔＰＡの活性百分率
を示している。

該Ｓ−２２５１検定は、ワインバーブら、ジャーナル・
オブ・イムノロジカル・メソッズ（■ｅｉｎｂｅｒｇｅ
ｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｉｒｎｍｕｎｏ１９Ｍｅｔｈ、）　
、　７５　、２８９　（１９８４）に開示されている。

常法にて、活性の損失を促進するために高温を用いた。

×１．３　ｑ／ｄ　　　　　　蓑×９，８ｍｇ／ｍｌ前
記の結果は図においてグラフで示されている。

結果は、１００ｍＭ酢酸塩溶液中に貯蔵したｔＰＡの電
気泳動分析と一致する。４０℃にて３週間の間、１００
　ｍＭ酢酸アンモニウム溶液中のｔＰＡの分解は、ポリ
アクリルアミドゲル電気泳動により、ｐＨ４，０，４，
５，５，０および５．５にて検出されず、ｐ）１ａ、ｓ
、４０℃にて３週間後、１２ｍｌ６および２１キロダル
トンに対応する小さなバンドが現われた〇 本発明のもう１つの態様において、ｔＰＡはｐＨ約７以
下でほとんど不活性であるが、ｐＨ約７に戻すと活性が
回復することが判明した。したがって、血栓溶解治療を
必要とする患者に投与する際、本発明の投与単位中のｔ
ＰＡの環境をｐＨ７に変化させると、該ｔＰＡは活性に
なる。

本発明の医薬投与単位の安定性は低温で増加する。した
がって、室温、約２０〜２５℃以下で貯蔵するのが好ま
しい。本発明の処方中のｔＰＡは、低温、例えば、０〜
１５℃にてより安定であるが、本発明の医薬投与単位の
利点は、前記の結果により示されているように高温、例
えば、＞２０”Ｃにおけるその安定性にある。４℃にて
、２Ｍ尿素溶液（ＰＨ７，５）中のｔＰＡおよび１００
ｍＭ酢酸アンモニウム溶液（ＰＨ４，０）中のｔＰＡは
共に、数週間後実質的に全活性を保持した。室温（約２
２℃）にて、本発明の処方中のｃＰＡは数週間安定゛　
である。より長期間の貯蔵を所望する場合、適当なビヒ
クル中のｔＰＡを貯蔵のために凍結乾燥し、ついで復元
して即時に使用するためまたはより短期間貯蔵するため
の本発明の医薬投与単位を形成することができる。

前記の結果は、血漿存在下に成長した組換えチャイニー
ズ・ハムスター卵巣（ｃｈｏ）細胞により生産したｔＰ
Ａを用いて得られた。しかし、本発明は、血漿、メラノ
ーマ細胞、無血漿哺乳動物細胞、バクテリア、イースト
、昆虫細胞、植物細胞および他の哺乳動物細胞の組換え
型またはネイティブを含む他の源からのｔＰＡからなる
ことを特徴ξする医薬投与単位を含む本発明は、また、
例えば、−重鎖ｔＰＡ、変異体ｔＰＡ、すなわち、その
ような変異体ｔＰＡの活性、溶解性Ｓよび安定性に顕著
な影響を及ぼすことなく１または数個のアミノ酸を変換
したｔＰＡおよびグリコジル残基を修飾したｔＰＡを包
含するｔＰＡの他の形態にも適合する。

酢酸アンモニウムの他に、他の医薬上許容される緩衝剤
を本発明の医薬投与単位に用いることができる。有用な
緩衝剤として、っぎの酸、すなわち、酢酸、アジピン酸
、クエン酸、乳酸、酒石酸、アスパラギン酸右よびグル
タミン酸およびそれらの塩の混合物が挙げられる。所望
の範囲に緩衝する本発明に有用な他の酸としては、特に
、グルタル酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、ピメ
リン酸、ベータ・アラニンおよびエノール・ピルビ□ン
酸が挙げられる。好ましいアニオンはアセテートである
。好ましいカチオンはナトリウムおよびアンモニウムで
ある。

本発明の医薬投与単位の緩衝液の濃度はｐ）ｉａ、ｓ〜
５．５、好ましくは４．０〜５．０、さらに好ましくは
４．４〜４．８に維持するように選択する。代表的には
、緩衝液の濃度は約１０〜２００　ｍＭ、好ましくは、
２０〜１００　ｍＭの適当な酸のナトリウム塩またはア
ンモニウム塩である。該緩衝液は、常法、例えば、Ｎａ
ＯＨを水中の１００　ｍＭ酢酸に加えることにより製造
し、本発明に有用な範囲内の選択したｐＨにし、該緩衝
液が１００　ｍＭ酢酸ナトリウムである本発明の医薬投
与単位の製造に用いる。

好ましくは、本発明の医桑処方は水溶液である。

しかし、ある種の極性水相溶性非水溶媒を非経口処方に
用いることができる。ｔＰＡの活性および安定性が顕著
な悪影響を受けないならば、そのような溶媒を本発明に
用いることができる。そのような溶媒のどれが有用であ
るかは、通常の実験により決定できる。

ｔＰＡおよび緩衝液の他に、本発明の医薬投与単位は、
例えば、チメロサール、クロロブタノールまたはメチル
パラベンのような保存剤および塩化ナトリウム、デキス
トロースまたはマンニトールのような張度ｔＪｉＪ整剤
のような非経口投与に適した少址の他の薬剤を含有する
ことができる。本発明の医薬投与単位は、好ましくは、
等張（２５０〜３１０　ｍ０５Ｍ／Ｋｐ　）である。ウ
オングら、ジャーナル・オブ・バレンチラル・ドラッグ
・アンシ’Ｌ−ショア　（Ｗａｎｇ　ｅｔ　ａｌ、、　
Ｊ、Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ　ＤｒｕｇＡｓｍｏｃ、　）
　、　３４　、４５２　（１９８０）は、非経口処方に
用いられる賦形剤を報告している。さらに、本発明の医
薬投与単位は、線維素溶解剤、強心剤、抗不整脈剤また
は血圧降下剤のような他の医薬活性剤を包含しうる。

本発明の医薬投与単位中のｔＰＡの医薬安定性は、ヒド
ロキシアルキルセルロース、ゼラチン、アカシアガム、
ポリビニルピロリドン（例えば、分子＋Ａ１００００〜
６００ｏｏ）およびポリエチレングリコール（例えば、
分子ｆｉｔ４０００〜４゜０００）のようなポリアルキ
レングリコールのような親水性重合凍結防止剤をその中
に含有することによりさらに増強できる。そのような薬
剤を用いると凍結乾燥および凍結乾燥後の復元の際、溶
液中の安定性（すなわち、活性の損失および蛋白質の分
解を最少限にする）を増大させる。好ましくは、そのよ
うな薬剤は２００００〜５００００の分子量を有するポ
リビニルピロリドン（ｐｖｐ）である。

そのような薬剤は、溶液形態または粉末形態にてｔＰＡ
処方に加えることができる。好ましくは、そのような薬
剤は、凍結乾燥前に本発明のｔＰＡ処方に加えることが
でき、復元の際、最終復元投与単位中の該薬剤の址が安
全かつ有効な量とする。

分子ｆｆ１４００００のポリビニルピロリドン（プラス
トンＣ−３０）の場合、そのような量はｔＰＡｌｇＩＩ
につきＰＶＰ約１〜１５岬、好ましくは４〜１０岬であ
る。ゼラチンの場合、安定性を増大させるためにはより
多重が好ましく、例えば、ｔＰＡ１岬につきゼラチン１
０〜１０００町である。

本発明の医薬投与単位は、０ｍｌ〜１５ｑ／ｍ、好まし
くは、０．５〜１０岬／ｗｄのｔＰＡを含有する。該医
薬投与単位は常法により製造される。例えば、凍結乾燥
ｔＰＡは適当な緩衝液で復元でき、ｔＰＡの溶液はその
ような適当な緩衝液で透析でき、またはｔＰＡ溶液のｐ
Ｈは酸、塩または緩衝液で調整できる。したがって、本
発明の医薬投与単位は凍結乾燥したそのような投与単位
を包含し、そのため水性溶媒で復元した場合、溶液形態
の本発明の医薬投与単位が達成される。好都合には、ｔ
ＰＡ精製の最終工程は、ｐ）ｌａ、ｓ〜５．５にて適当
な緩衝水溶液中で行なうことができる。

本発明の医薬投与単位は製造され、血栓溶解治療を必要
とする患者、特にヒト患者に非経口的に、特に、静脈内
、歯冠内あるいは動脈内にｔＰＡの有効値を送達する。

該投与単位中のｔＰＡの正確な濃度ならびに所定の医薬
投与単位の正確な容積は、症状の徴候および重篤度によ
る。所定の投与単位の最適化は標準医薬手法により行な
うことができる。急性心筋梗塞（急性Ｍｌ）に対して、
典型的には、患者は一１０〜１８０分間、好ましくは、
約３０〜９０分間に全体で２５〜２００岬、好ましくは
約７０〜１５０岬の用量を投与される。例えば、コレン
ら、サーキュレーショ７　（Ｃｏ１１ｅｎ　ｅｔ　ａｌ
、。

Ｃ４ｒｃｕｌａｔｉｏｎ）　、７Ｑ　、　１０１２（１
９８４）は、３０〜１２０分間にわたる０．５〜０．７
５　Ｍ／　ＫＦ　（または３５〜５３岬／７〜１０００
ｍｌヒト）の静脈点滴により心筋梗塞に罹患している患
者を治療することを報告している。コレンら（Ｃｏ１１
ｅｎ　ｅｔ　ａｌ、　）により報告された処方は、それ
ぞれｔＰＡＱ、５ｍｇ／ｍｌを含有する１〜１０００ｍ
ｌバイアルに充填された。ソベルら、”Ｐ−＋ニレージ
ョン（５ｏｂｅｌ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｃ４ｒｃｕｌａｔ
ｉｏｎ）。

６９．９８３（１９８４）は、心筋梗塞に罹患している
患者に対する２００〜４００Ｘ１０　国際単位（ＩＵ）
のｔＰＡの注入を報告している。ヴアン・ド・ベルフら
、ニュー・イングランド・ジャーナ７Ｌ／−オブ・メデ
イシ７　（Ｖａｎ　ｄｅ　Ｗｅｒｆ　ｅｔ　ａｌ　、　
。

Ｎ、　Ｅｎｇｌ、　Ｊ、　Ｍｅｄ、　）　、　３１０　
、６（１１）　（１９８４）は、ｉ、ｖ、　）および歯
冠内（ｉ、ｃ、　）投与を報告している。

ｏ　ヒフ　７７　（Ｒｏｂｉｏ５０ｎ　）、ＷＯ３４−
０１７８６号は、８用量までの注入により、−該ネイテ
ィブ分子の炭水化物部分の少なくとも一部を欠く修飾ｔ
ＰＡの０ｍｌ０〜１．Ｏｑ／Ｉｆを投与することによる
中型血栓の治療を開示している。

急性心筋梗塞に罹患している患者に対する代表的な医薬
投与単位は、迅速投与のため１〜１５岬／ｄの濃度のｔ
ＰＡＩＱ＊Ｃまでを含有する火剤または注射形態、例え
ば、薬袋、アンプル、バイアルまたはシリンジである。

そのような火剤型注射は０ｍｌ〜１５ｍ＃／＊のｔＰＡ
を含有する静脈点滴で行なうことができる。他の徴候、
例えば、進行性心筋梗塞、深静脈血栓症（ＤＶＴ）４よ
び肺塞栓症（ＰＥ）に対して、代表的な医薬投与単位は
、例えば、静脈カニユーレに都合よく接続できるｉ、ｖ
、バッグまたはボトルのような静脈点滴形態である。

したがって、好ましい医薬投与単位は、緊急時に迅速に
用いるためのバイアル、薬袋、アンプルまたはシリンジ
に貯蔵できる先刻形態である。

そのような投与単位は、好ましくは約１〜１０岬／ｄ、
さらに好ましくは２〜６ｑ／ｙのｔＰＡを好ましくは約
１〜１〜１０００ｍｌ１さらに好ましくは２〜６ｍｌ含
有する。そのような火剤型投与単位を処方して、単−注
射投与用にｔＰＡを２〜５〜１０００ｍｌｖ、好ましく
は５〜３０岬、さらに好ましくは１０〜２０岬含有させ
る。もう１つの好ましい医薬投与単位は大型容器（１０
０〜１０００ａｆ）に貯蔵できる静脈点滴形態である。

そのような単位は、好ましくは約０ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍ
ｌ１さらに好ましくは０．５〜５　岬／　ｄのｔＰＡを
含有し、そのため、単一注入容器中に１０〜５−ＯＯ，
岬、好ましくは５０〜２．．０Ｏ−ｑのｔＰＡを含有す
ることができる。本発明の第３の好ましい具体例は、例
えば、バイアル、シリンジまたは導管のような注入形態
に接続される他の火剤型容器などの２つの特徴を合する
。

凍結乾燥ｔＰＡは医薬上許容される緩衝液を凍結乾燥形
態で含有し、最終的に非緩衝溶液中で復元でき、または
該凍結乾燥ビヒクルが酢酸アンモニウムである場合、該
凍結乾燥製品は緩衝溶液中で復元できる。いずれの場合
にも、該凍結乾燥製品は、復元用溶液の滅菌容器を不要
にし、注射または注入により最終的にまたは直接静脈内
投与するための滅菌アンプルまたは他の容器に貯蔵でき
る。したがって、第４の好ましい具体例において、本発
明は、凍結乾燥形態のｔＰＡの１または２以上の滅菌容
器および復元用溶液の１または２以上の別々の滅菌容器
からなることを特徴とするキットである。単一キット中
の復元用溶液、ｔＰＡの量および復元用溶液の量が選択
され、本発明の選択したｐＨにて０ｍｌ〜１５−ｗ／−
を有する最終復元製品を供給する。好ましい復元用溶液
は水中の５％デキストロース溶液である。好ましくは、
【ＰＡの量および復元用溶液が選択され、前記の好まし
い液体注射または注入形態と同様の最終復元製品または
投与単位を供給する。したがって・好ましい丸剤形態製
造用キットは１または２以上の滅菌容器中の２〜５０呵
、好ましくは５〜３０＃のｔＰＡおよび１または２以上
の別の容器中の１〜１０／、好ましくは２〜５　ａｔの
復元用溶液からなり、該２つの容器の含量を合した際、
得られる製品は１〜１０　ｑ　／　ｄ、好ましくは２〜
６　Ｎ　／　ｄの濃度のｔＰＡからなる。好ましい注入
形態製造用キットは１または２以上の滅菌容器中の１０
〜５００・岬、好ましくは５０〜２００岬のｔＰＡおよ
び１または２以上の別の滅菌容器中の１００〜１００〜
１０００ｍｌの復元用溶液からなり、該容器の含量を合
した際、得られる製品は０ｍｌ〜１０岬／ｍ、好ましく
は０．５〜５ｍｇ／ｍｌの濃度のｔＰＡからなる。好ま
しくは、１投与単位の全ｔＰＡを単一容器に含有し、そ
のような投与単位の全復元用溶液を第２の単一容器に含
有する。本発明の医薬投与単位製造用キットは、滅菌複
数区−容器、例えば、２つの区画容器からなり、一方の
区画が凍結乾燥ｔＰＡを含有し、第２の区画が復元用溶
液を含有し、該２つの区画が破壊できる障壁で分離され
ており、それぞれの含量は該障壁が破壊されることによ
り無菌的に混合しつる容器からなることができる。その
ようなキットの例としては、ユニバイアル■（Ｕｎｉｖ
ｉλｌ■）滅菌２区画バイアル（アボット・ラボラトリ
ーズ、ノース・シカゴ、イリノイ　（Ａｂｂｏｔ　　　
Ｌａｂｏｒｓｈｔｏｒｉｅｓ、　　Ｎｏｒｔｈ　　Ｃｈ
ｉｃａｇ。

１１１ｉｎｏｉｓ　）　）およびハイパツク・リファイ
／ドライＴＭ（Ｈｙｐａｋ　Ｌｉｑｕｉ　／Ｄｒｙ　Ｔ
Ｍ）　シリンジ（ベクトン・デイキンソン、ラザフオー
ド、ニュー・シャーシー（Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎ
５０ｎ、　Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ、　ＮｅｗＪｅｒｓｅ
γ））が挙げられる。ｔＰＡおよび復元用溶液の品質を
表示するラベルまたは挿入説明書および投与方法を包含
しうる。

実施例 つぎに実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。

実施例１ ｔＰＡ　　　　　　　　　　　　　　　　　５９１００
ｍＭ酢酸／酢酸アンモニウム　　５−ＮａＣｌ・０．５
％ （等張に調整） ｐＨ４，０ の滅菌溶液を滅菌シリンジに充填する。

実施例２ ｔ　ＰＡ　　　　　　　　　　　　　　　　５０■５Ｑ
ｍＭ酢酸／酢酸アンモニウム　　　５−デキストロース
　　　　　　　　　　　　３％（等張に調整） クロロブタノール　　　　　　　　　　０．５％ｐＨ３
，５ の滅菌溶液を滅菌シリンジに充填する。

実施例３ ｔＰＡ　　　　　　　　　　　　　　　　５岬１００ｍ
Ｍクエン酸／クエン酸ナトリウム　１〇−ＮＩＩＣ／　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　０ｍｌ３％（等
張に調整） メチルパラベン　　　　　　　　　　　０ｍｌ％ｐ）１
　　　　　　　　　　　　　　　　　５．５の滅菌溶液
を滅菌シリンジに充填する。

実施例４ ｔＰＡ　　　　　　　　　　　　　　　　５＊１００ｍ
Ｍクエン酸／クエン酸ナトリウム　１０ｍマンニトール
　　　　　　　　　　　　０．８％（等張に調整） メチルパラベン　　　　　　　　　　　０ｍｌ％ｐＨ５
，５ の滅菌溶液を滅菌シリンジに充填する。

実施例５ ｔＰＡ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０
０＃５０ｍＭグルタミン酸／グルタミン酸ナトリウム０
０Ｑ− ＮａＣｚ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｏ
−７％（等張に調整） ｐ）１　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４．５
の滅菌溶液を静脈注入に有用な滅菌容器に充填する。

実施例６ ｔＰＡ　　　　　　　　　　　　　　　　５００岬５Ｑ
ｍＭアジピン酸／アジピン酸ナトリウム　５０〇−チ、
＋１０サー、、Ｏ，ＯＯ５％ ＮａＣｚ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｏ，
７％（等張に調整） ｐＨ４，０ の滅菌溶液を静脈注入に有用な滅菌容器に充填する。

実施例７ ｔＰＡ　　　　　　　　　　　　　　　　１０１０００
ｖ１００酢酸／酢酸アンモニウム　　　１００．／デキ
ストロース　　　　　　　　　　　　３％（等張に調整
） ｐＨ４，０ の滅菌溶液を静脈注入に有用な滅菌容器に充填する。

実施例８ ｔｌｌｌｏｏｍＭ酢酸７　：／％ニウム（ｐＨ４）およ
び３０％マンニトール中のｔ　ＰＡ（ｌＱｍｇ／ｍｌ）
からなるビヒクルに凍結乾燥したｔ　ＰＡＩ　Ｑ■含有
滅菌バイアルおよび ＋２１１００ｆｎＭ酢酸７７％二ｆｔ　Ａ　（ｐＨ４，
０）１０ｄである復元用溶液含有滅菌バイアル からなるキットを包装する。

実施例９ ！１）１００ｍＭ酢酸アンモニウム（ｐＨ４）　オよび
１９％グリシン中のｔＰＡ（１５ｑ／劇ｆ）からなるビ
ヒクルに凍結乾燥したｔＰ　Ａ　１０００　呵含有滅菌
バイアルおよび ｔ２１１００ｍＭ酢酸７７モ：−ラム（ｐＨ４，０）１
００〜１０００ｍｌである復元用溶液含有 滅菌ボトルからなるキットを包装する。

実施例１０ ０ｍｌＭ酢酸アンモニウム中のｔ　ＰＡＩ　Ｑ呵／−含
有溶液１１／を２〇−凍結乾燥パイアル中の２つの賦形
剤溶液４−のそれぞれに加え、以下の処方ＡおよびＢを
製造した。

※ｐＨは水酸化す）　ＩＩウムで調整した。

該処方は以下のとおり凍結乾燥した。該バイアルを一５
０℃で一夜凍結させた。乾燥サイクルは、＋１１−２５
℃、１００　ｕｍＨｇ　（１３ＭＰａ　）、８４時間・ （２）０℃、１００　ｕｍＨｇ　（１３ＭＰａ　）、８
時間およ＋３１２５℃、１０〜３０　ｕｍＨｇ　（１，
３〜３．９ＭＰａ）、２４時間 であった。

ｔＰＡ（０，１Ｍ酢酸アンモニウム中１．０ｍｇ／ｍｌ
）の対照溶液を５℃にて貯蔵した。第１実験試料（Ｉ）
を−１５℃にて２３日間凍結乾燥形態で貯蔵し、ついで
復元し、２４時間後、５℃、２５℃および４０℃にてＳ
−２２５１検定により検定した。−１５℃における凍結
乾燥した小片の保存および５℃における復元した溶液の
保存はＯ８目条件、すなわち凍結乾燥後直ちに行なう復
元および検定をシュミレートするものである。第２実験
試料（Ｉ［）を４０℃にて２３日間凍結乾燥形態で貯蔵
し、ついで復元し、２４時間後、４℃および２５℃にて
Ｓ−２２５１検定により検定した。第３実験試料（ＩＩ
Ｉ）を４０℃にて３力月間凍結乾燥形態で貯蔵し、つい
で復元し、復元時および２４時間後、４℃および２５℃
にてＳ−２２５１検定により検定した。

全ての実験試料を５％デキストロースで１．０　呵７ｔ
ｌに復元した。２３日目（４０℃）に復元した処方のｐ
）ｉは、Ａ　：　ｐ）１４．５およびＢ　：　ＰＨ４・
３であった。それらの処方のオスモル濃度は、Ａ　：２
９８ｍＱ１ｍおよび”　：　２７４ｍ０５ｍであった。

対照の百分率として試料の活性を次表に示す。

１）　６．８７’ｘ　１０’　ＩＵ７岬２）６．０８Ｘ
１０’　ＩＵ／噌 ３）　５．６７　Ｘ　１０’　Ｉ　Ｕ／ｑ実施例１１ 実質的に前記と同様にして調製した２つのｔＰＡ処方の
一部を５ｄバイアルに入れた結果、それぞれのバイアル
は次の組成となった。

※ｐＨは水酸化ナトリウムで調整した。

実質的に前記と同様にして該バイアルを凍結乾燥した。

ついで、１組を０日目条件、すなわち凍結乾燥後直ちに
行なう復元および検定をシュミレートするために凍結乾
燥後７日目まで一１５℃にて保存し、復元時および復元
後２４時間目に室温（２０〜２５℃）にて検定を行なっ
た（０日目）。

もう１組のバイアルを４０℃にて貯蔵し、ついで同様に
復元し、凍結乾燥後７日目、３週間口および１力月目に
検定した。全凍結乾燥小片を水でｐＨ４，２〜４．６に
復元した。それぞれの時点における活性を５℃にて貯蔵
した０、１Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ４，０）中
ｔ　ＰＡ１■／−含有対照処方の活性と比較した。結果
を対照の百分率として以下に示す。

実施例１２ ゼラチン　　　　　　　　　　　　　　　５岬Ｌ−グル
タミン酸モノナトリウム　　　　　　５町マンニトール
　　　　　　　　　　　　１５岬塩化ナトリウム　　　
　　　　　　　　１．７■ｔＰＡ　　　　　　　　　　
　　　　　　Ｏ，１■全容積／バイアル　　　　　　　
　　　１．２−実質的に前記実施例１０および１１と同
様にして以上の成分を含有する１０．／バイアルを製造
した。

該バイアルを凍結乾燥し、０ｍｌＭ酢酸アンモニウム（
ｐＨ４）ｌｓｚにて復元し、０日月（シュミ　。

レート）に検定した。４０℃にて貯蔵したバイアルを１
０日目、１６日目および１力月目に検定した。対照処方
（０，１Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液、ｐＨ４，５℃）の
活性と比較し、対照の活性の百分率として以下に示す。

実施例１３ ＰＶＰ　（７’ラスＦ７Ｃ−３０）　　　　　６．４４
Ｌ−グルタミン酸モノナトリウム　　　　　１．６■ア
ジピン酸　　　　　　　　　　　　　０．４呵ｔＰＡ　
　　　　　　　　　　　　　　　１．〜１０００ｍｌｗ
ｐＨ（ナトリウムバル ク）４．４全容積／バイアル　　　　　　　　　　０．
５ｄ実質的に前記実施例１０および１１と同様にして以
上の成分を含有する５−バイアルを製造した。

該バイアルを凍結乾燥し、０ｍｌＭ酢酸アンモニウム（
ｐＨ４）ｌ＊ｌこて復元し、０日月（シュミレート）に
検定した。４０℃にて貯蔵したバイアルを８日日および
１力月目に検定した。対照処方（０，１Ｍ酢酸アンモニ
ウム緩衝液中、ｔＰＡｌｑ／ｖｔ、ｐＨ４，０，５℃）
の活性と比較し、対照の活性の百分率として以下に示す
。

前記実施例１０ｍｌ１ｍｌ２および１３は、凍結乾燥に
よりおよび重合凍結防止剤、特に、ポリビニルピロリド
ンおよびゼラチン含有ｔＰＡ処方の復元の際の安定性の
増大を示している。

【図面の簡単な説明】

図面は、他に表示がある場合を除き、尿素または酢酸／
酢酸アンモニウム溶液中０．３９ｍｇ／ｍｌのｔＰＡの
初期分解（活性の損失）率を表わすグラフである。 図面中、○・・・・・○、・−６、口・・・・・・口、
■−■、△・・・・・△およびトムは酢酸塩溶液ならび
に◇・・・・・・◇２よび←−邊は尿素浴Ｒ七表わす。 待計出シロ人　スミスクライン・ベツグマン・コーポレ
イション

Claims (37)

【特許請求の範囲】
1. （１）ｐＨ３．５〜５．５に緩衝した医薬上許容される
   水溶液中のｔＰＡ０．１〜１５ｍｇ／ｍｌからなること
   を特徴とする非経口投与用ｔＰＡの滅菌医薬投与単位。
2. （２）１〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度かつ２〜５０ｍｇの量
   のｔＰＡ１〜１０ｍｌを含有する容器中の丸剤形態であ
   る前記第（１）項の医薬投与単位。
3. （３）２〜６ｍｇ／ｍｌの濃度かつ５〜３０ｍｇの量の
   ｔＰＡ２〜６ｍｌを含有する容器中の丸剤形態である前
   記第（１）項の医薬投与単位。
4. （４）０．１〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度かつ１０〜５００
   ｍｇの量のｔＰＡ１００〜１０００ｍｌを含有する容器
   中の注入形態である前記第（１）項の医薬投与単位。
5. （５）０．５〜５ｍｇ／ｍｌの濃度かつ５０〜２００ｍ
   ｇの量のｔＰＡ１００〜１０００ｍｌを含有する容器中
   の注入形態である前記第（１）項の医薬投与単位。
6. （６）さらに、該ｔＰＡの安定化に安全かつ有効な量の
   凍結防止剤からなることを特徴とする前記第（１）項の
   医薬投与単位。
7. （７）該凍結防止剤がゼラチンまたはポリビニルピロリ
   ドンである前記第（８）項の医薬投与単位。
8. （８）該凍結防止剤がｔＰＡ１ｍｌにつき１〜１５ｍｇ
   の量の分子量４００００のポリビニルピロリドンである
   前記第（７）項の医薬投与単位。
9. （９）４．０〜５．０のｐＨを有する前記第（１）項、
   第（２）項、第（４）項、第（６）項、第（７）項また
   は第（８）項の医薬投与単位。
10. （１０）酢酸、アジピン酸、コハク酸、クエン酸、乳酸
    、酒石酸、アスパラギン酸またはグルタミン酸の医薬上
    許容される塩にてｐＨ４．０〜５．０に緩衝されている
    前記第（１）項、第（２）項、第（４）項、第（６）項
    、第（７）項または第（８）項の医薬投与単位。
11. （１１）該塩中のカチオンがナトリウムまたはアンモニ
    ウムである前記第（１０）項の医薬投与単位。
12. （１２）酢酸ナトリウムまたは酢酸アンモニウムで緩衝
    した前記第（１０）項の医薬投与単位。
13. （１３）ｔＰＡ１ｍｇにつき分子量４００００のポリビ
    ニルピロリドン４〜１０ｍｇからなりかつ該溶液がアジ
    ピン酸にてｐＨ４．４〜４．８に緩衝されていることを
    特徴とする前記第（１）項、第（２）項または第（４）
    項の医薬投与単位。
14. （１４）凍結乾燥形態のｔＰＡの１または２以上の滅菌
    容器および復元用溶液の１または２以上の他の滅菌容器
    からなり、緩衝液が該容器の一方または両方に供給され
    、および該緩衝液、復元用溶液ならびに該ｔＰＡの量お
    よび復元用溶液の量が選択され、容器の含量を合した際
    、ｐＨ３．５〜５．５に緩衝した医薬上許容される溶媒
    中のｔＰＡ０．１〜１５ｍｇ／ｍｌからなる非経口投与
    用医薬投与単位である復元製品を供給することを特徴と
    するキット。
15. （１５）１または２以上の滅菌容器中の２〜５０ｍｇの
    ｔＰＡおよび１または２以上の滅菌容器中の１〜１０ｍ
    ｌの復元用溶液からなることを特徴とする前記第（１１
    ）項のキット。
16. （１６）または２以上の滅菌容器中の５〜３０ｍｇのｔ
    ＰＡおよび１または２以上の第２の滅菌容器中の２〜１
    ０ｍｌの復元用溶液からなることを特徴とする前記第（
    １１）項のキット。
17. （１７）１または２以上の滅菌容器中の１０〜５００ｍ
    ｇのｔＰＡおよび１または２以上の第２の滅菌容器中の
    １００〜１０００ｍｌの復元用溶液からなることを特徴
    とする前記第（１１）項のキット。
18. （１８）１または２以上の滅菌容器中の５０〜２００ｍ
    ｇのｔＰＡおよび１または２以上の第２の滅菌容器中の
    １００〜１０００ｍｌの復元用溶液からなることを特徴
    とする前記第（１１）項のキット。
19. （１９）ｔＰＡの１または２以上の容器中もしくは復元
    用溶液の１または２以上の容器中またはその両方中に凍
    結防止剤を含有し、そのため該復元製品がｔＰＡの安定
    化に安全かつ有効な量の凍結防止剤を含有することを特
    徴とする前記第（１４）項のキット。
20. （２０）該凍結防止剤がゼラチンまたはポリビニルピロ
    リドンである前記第（１９）項のキット。
21. （２１）該凍結防止剤がｔＰＡ１ｍｇにつき１〜１５ｍ
    ｇの量の分子量４００００のポリビニルピロリドンであ
    る前記第（２０）項のキット。
22. （２２）該復元製品が４．０〜５．０のｐＨを有する前
    記第（１４）項、第（１５）項、第（１７）項、第（１
    ９）項、第（２０）項または第（２１）項のキット。
23. （２３）該緩衝剤が酢酸、アジピン酸、コハク酸、クエ
    ン酸、乳酸、酒石酸、アスパラギン酸またはグルタミン
    酸の医薬上許容される塩であり、該復元製品をｐＨ４．
    ０〜５．０に緩衝した前記第（１４）項、第（１５）項
    、第（１７）項、第（１９）項、第（２０）項または第
    （２１）項のキット。
24. （２４）該緩衝剤中のカチオンがナトリウムまたはアン
    モニウムである前記第（２３）項のキット。
25. （２５）該緩衝剤が酢酸ナトリウムまたは酢酸アンモニ
    ウムである前記第（２３）項のキット。
26. （２６）ｔＰＡの１または２以上の容器がｔＰＡおよび
    アジピン酸１ｍｇにつき分子量４００００のポリビニル
    ピロリドンを４〜１０ｍｇ含有し、そのため復元の際、
    該復元製品のｐＨが４．４〜４．８である前記第（１４
    ）項、第（１５）項または第（１７）項のキット。
27. （２７）前記第（１）項〜第（１３）項のいずれか１つ
    の医薬投与単位を患者に非経口投与することを特徴とす
    る血栓溶解治療を必要とする患者の治療法。
28. （２８）ｐＨ３．５〜５．５にて、医薬上許容される水
    性溶媒１ｍｌにつきｔＰＡ０．１〜１５ｍｇの濃度にｔ
    ＰＡを該溶媒に溶解することを特徴とするｔＰＡの非経
    口投与用滅菌医薬投与単位の製造法。
29. （２９）該ｔＰＡ溶液に凍結防止剤を加えることを特徴
    とする前記第１項の製造法。
30. （３０）有機酸およびその塩にてｐＨ３．５〜５．５に
    緩衝されたｔＰＡ０．１〜１５ｍｇ／ｍｌおよび凍結防
    止剤を含有する水性処方バルクを凍結乾燥し、ついで、
    該凍結乾燥処方を非経口投与上許容できる水性溶媒にて
    復元し、該処方のｐＨが３．５〜５．５の範囲内にある
    ことを特徴とする前記第（２９）項の製造法。
31. （３１）該投与単位がアジピン酸、グルタミン酸、クエ
    ン酸、酢酸、コハク酸、乳酸、酒石酸およびアスパラギ
    ン酸ならびにその塩の１種または２種以上にてｐＨ４．
    ０〜５．０に緩衝され、および該凍結防止剤がポリビニ
    ルピロリドンまたはゼラチンである前記第（２８）項、
    第（２９）または第（３０）項の製造法。
32. （３２）該投与単位がアジピン酸、コハク酸または酢酸
    およびその塩で緩衝されている前記第（３１）項の製造
    法。
33. （３３）前記第（２８）項、第（２９）項、第（３０）
    項、第（３１）項または第（３２）項のいずれか１つの
    製造法により非経口投与用に製造されたｔＰＡの医薬投
    与単位。
34. （３４）凍結乾燥形匠のｔＰＡおよび医薬上許容される
    緩衝剤からなることを特徴とする凍結乾燥品。
35. （３５）復元した際に前記第（１）項〜第（１２）項の
    いずれか１つの医薬上許容される投与単位を与える、凍
    結乾燥形態のｔＰＡおよび医薬上許容される緩衝剤から
    なることを特徴とする凍結乾燥品。
36. （３６）中性ｐＨにて水により復元した際に前記第（１
    ）項〜第（１２）項のいずれか１つの医薬上許容される
    投与単位を与える前記第（３５）項の凍結乾燥品。
37. （３７）該緩衝剤がアジピン酸およびその医薬上許容さ
    れる塩である前記第（３６）項の凍結乾燥品。