JPS62182651A - 混濁除去剤 - Google Patents

混濁除去剤

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JPS62182651A
JPS62182651A JP61236380A JP23638086A JPS62182651A JP S62182651 A JPS62182651 A JP S62182651A JP 61236380 A JP61236380 A JP 61236380A JP 23638086 A JP23638086 A JP 23638086A JP S62182651 A JPS62182651 A JP S62182651A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は試料物質、有利に生物学的試料物質、例えは血
清又は血漿により濁っている反応混合物中の混濁を除去
するための試薬に関する。これらは、符に臨床化学分析
に、食品化学分析に並ひに水及び下水分析に使用される
。商い特異性を達成するために、この除しはしは醇素が
便用される。
光度測定分析の公知の問題点は、空試験<Wなしで測定
を行なう時、分析結果に対する試料液の混濁物、例えば
血清又は血漿の影響である。
試料空試験値の測定の回避は、試薬消費散を減少させる
ため、測定増程及び評価過程を簡素化するため、又試料
便用承を減少させるためにも望ましい。それどころか、
すべての反応性成分を混合で含有する一浴試薬を使用す
る際、試料空試験値の測定は原理的にも不可能である。
この徨の混濁は柚々の原因により、しばしは高いトリグ
リセリド含汝によって生じる。
混濁は試料・試薬混合物中での固有吸光を高める。この
場合、総鉄光は、測定すべき基質の濃度に直接比例する
色成分と濁り成分とから構成されているので、必然的に
不正な結果が得られる。
そのような混濁を、清浄剤の添加によって、総鉄光にお
ける濁り成分を無視することができる程度に澄明にする
ことは公知である(西ドイツ国特許出願公告第2327
894号公報)。
この方法の主な欠点は、非常に高い清浄剤量を必似とす
ることにある。高濃度を必要とすることも欠点である。
それというのも、この際しばしば使用した酵素の活性が
涯少し、史に、このような混合物はもはや、乾燥し流動
性であるべき固体混合物に混入することはできない。符
に、このことは−浴試薬においてl要である。
本発明の[1は、前記欠点を除去し、前記混濁を除去で
きる試薬を提供することである。ここで6除去”とは、
この種の混濁の阻止又は減少をも意味する。
このvA題は、本発明によれは試料物質により濁ってい
る分析法、特に光度測定用の反応混合物に対する、清浄
剤を含有する泄明化剤であって、これが a)芳香族アルコール、芳香族アミン、アリール酸又は
アルキル酸のエステル、炭素原子数が6よりも大きい直
鎖状又は環状又は分枝鎖状脂肪族アルコール、短鎖のノ
ーロデン化脂肪族化合物、脂肪族ケトン、芳香族アルデ
ヒド、脂肪族カルがン酸、エーテル又はベンゾールの群
から選はれた1種以上の低分子有機化合物及びb)反応
混合物に自体澄明に可溶性であり、添加物a)と一緒に
なって催かに可溶性の鉛体を形成する1橿以上の清浄剤
及び C)成分a)と他かに可溶性の錯体を形成する必要のな
い、a)とは興なる他の清浄剤1種以上から成るか又は
これらを含有することを特徴とする混S除去剤によって
解決する。
不発明は、それ単独では透明な水浴液で前記混濁に対し
て全熱もしくは非常に僅かな透明化作用しか示さない前
記有機化合物が、それ自体既に公知の清浄剤の澄明化作
用を相乗的に非常に強化するという事実の驚異的確認に
基づく。
この事により、多くの場合に澄明化が可能となるだけで
なく、混〜を完全に除去することができるようになり、
この際同時にこのために必要な清浄剤量は急激に減少す
る。a)項の使用可能な化合物の例は仄のとおりである
: a)芳香族(縮合又は非縮合の)アルコール及びアミン
、有利に強い電気陰性に換分(有利な電気陰性置換分は
)・ロデンである)を有するもの、例えはベンジルアル
コール、フェノール、モノクロルフェノール、ジクロル
フェノール及びトリクロルフェノール、ジブロムフェノ
ール及びトリブロムフェノール、クレゾール、ナフトー
ル、ジヒドロキシナフトール、アニリン及びクロルアニ
リン、メチルアニリン、 b)アリール酸及びアルキル酸のエステル、例えばp−
ヒドロキシ安息香酸エチルエステル、酢酸エチルエステ
ル、酢酸メチルエステル、プロピオン酸エチルエステル
、トリクロル酢酸エチルエステル並びに類似物、 C)炭素原子数が6よりも大きい直鎖状及び環状及び分
枝鎖状脂肪族アルコール、例えはアミルアルコール、オ
クタツール、ドデカノール、シクロヘキサノール及び類
似物; d)短鎖のハロゲン化脂肪族化会物、例えはゾクロルエ
タン、トリクロルエチレン、テトラクロルメタン、ジク
ロルブテン、テトラクロルジフルオルエタン及び類似物
; e)脂肪族ケトン、例えばブタノン−(2)、シクロヘ
キサノン及び類似物; f)アルデヒド、例えば桂皮アルデヒド又はベンズアル
デヒド、 g)カルボン酸、例えはオクタン酸、 h)エーテル、例えは、2−メトキシフェノール、 1)ベンゾール 特定の場合に対するこのような化合物(以後、助剤とば
α載)のそれぞれの景は、予備実験により求められる。
一般に、0.5〜600ミリモル、有利に2〜10ミリ
モルの間の濃度が良好な結果をもたらすことが判明した
前記助剤と価かに可溶性の錯体を形成する清浄剤(単独
では反応混合物中に透明に可溶)には非イオン性、イオ
ン性及び両a清浄剤の代表側が存在する。非イオン性の
ポリエチレンオキシド付加物が有利に使用される。特に
良好な結果は、ポリオキシエチレングリコールのアルキ
ルエーテル、アルアルキルエーテル及びアルキルチオエ
ーテル並びにアルキルエステル及びアルアルキルエステ
ルで得られる。該清浄剤において、アルキル基は一般に
炭素原子数8〜22個を有し、アリール基は有利にフェ
ニル基である。この清浄剤のグリコール残基中には、一
般にエチレンオキシド単位6〜25個が縮合した形で存
在する。この特にすぐれた清浄剤量の典型的な例は、テ
ジット(Thesit、 ) 、ジエナボール(Gen
apol )、ターゾトール(’rergizoL )
、トライトン(Triton ) X 100 、  
レンツデルメチルペンシルアンモニウムを使用すること
もできる。アルキル基には、ageポリエチレンオキシ
ド付加物の際に述べたことがあてはまる。
アルキル基が曲記定義に一致する第二アルキルサルフェ
ートも使用可能であることが判明した。
両性清浄剤のうち、N−ラウリルジェタノールアミドが
好適であることが判明した。
本発明においては、すでに述べたように、心安な清浄剤
量は技術水準に比して極めて減少する。一般に0.05
〜19Gの間の量で十分である。
0.2〜0.8−の間の清浄剤の添加景が有利である。
もちろん、より高い濃度を使用することもできるが、こ
の場合には使用した酵素が不利な影響を受ける危険が高
くなる。これに対し、前記西ドイツ国特許出願公告公報
によれば、澄明化のために清浄剤10容量チが使用され
る。
清浄剤と助剤とから成る錯体の溶解が、錯体中に含有さ
れる清浄剤とは異なる清浄剤の添加により行なわれる場
合には、特に低い清浄剤殴度を便用することができる。
換言すれば、この本発明のすぐれた実施形においては、
少なくとも2mの異なった清浄剤を使用する。この際、
2査目の清浄剤として、助剤と難酊性錯体を形成(これ
は混濁により酩めることができる)することのできない
清浄剤をも使用することができる。
本発明薬剤は、出現する混濁が測定の誤り又は妨害を生
じる、すべての種類の測定と関連して使用できる。こね
は特に、光度測定用の反応混合物である。この種の反応
混合物は一般に専門家には公知であり、多数の測定すべ
き物質の例は、ベルグマイヤ−(H,U、Bergme
yer ) 著”メトーデン・デルーエンチマーテイッ
シェン・アナリューゼ(Met+hoden der 
enzymatischenAnalyse )″(V
erlag Chemie SWeinheim /B
ergsr、rasse )中に記載されている。従っ
て、この棟の反応混合物の詳細な説明はここでは割愛す
る。
例1〜13 混〜泄明化系 下記の本発明による組成物は、1分〜@高2時間以内に
系中の混濁の除去を生じた。
試験混合物2酎+脂肪分3.596の飲用ミルク20 
pi ’% N厚1cIIL、546nm、25°Ca
)助剤の変換 Mg80.−7H202%を有する肌1m)す助剤ニジ
クロヘキサノン(K2SO46,0%及びゾエナボール
0X−800,25 チを含有する)燐酸カリウム緩衝 剤0.5m中 助剤のa匿:6容量チ 清浄剤:ヒドロキシポリエトキシドデカ/(ナツト) 清浄剤濃度: 0.12 % 一値:8.0 b)清浄剤の変換 Mg5O,・7H202チ及び添加物として2゜4−ジ
クロルフェノール13mM/lを有する0、1 m )
リス/ HCj−緩衝剤(pH8,0)中で、次の系で
良好な置明化が得られた。
2)1)を参照 ルサルフエートの混合物(08〜C1Bを有する) 5)ツウイーン(Tween ) 20 = 20エト
キシ−ソルビタン−モノラウレート 6)ブリジ(BriJ) 35 =ポリオキシエチレン
ーラウリルエーテル 脂肪族アルコールポリグリコールエーテル処方 に4P207          0.05 Mol 
/ 1エタノール         10容量チHCj
 −c−p)18.5 Katej整NADP    
         1ダ/l1ltアルコールデヒドロ
デナーゼEC1,2,1,51単位/ ml カタラーゼEC1,11,1,6 1000単位/継 蓚酸Naz塩        0.05 % # / 
1ビ2ゾール        0.05モル/l所定測
定波長及び比較的高い試料所要量により、脂肪血症性混
濁試料物質においては測定が困難になるかもしくは不可
能になる。
この混濁の除去のために次の添加物を加えた:1)ゾク
四ルエタン        0.5%ヘキサノール  
       0.5 %ツェナボールX−80(イン
ドリデ カノール−ポリグリコールエーテル)0.5%ゾエナボ
ールX100 (イソトリデ カノールポリグリコールエーテル)  0.91ナツト
            0.6 %試験配合物: 試薬 2紅(添加物1) 試料 0.1μ ウリカーゼEC1,7,3,3,0,6単位で開始、2
5℃、340nmで終点を測定。
前記添加物は、脂肪血症で濁った試料物質により強く高
められた初期吸光を短時間でとりのぞく作用をする。
試料空試験値に対し、吸光的2.0の混濁は約10分間
以内に吸光的0.2の安定なレベルに減少する。これに
より補正が可能となり、次いで処方: KH2P0.           2,541 / 
IK2HP0.          31.601 /
 lNa2SO48& / 1 4−アミノアンチピリン    200■/1フエノー
ル          282〜/lpH7,90 パーオキシダーゼEC1,11,1,73単位/ m6
コレステリンー二ステラーゼ15c 3.1.1 .1
30.3単位/ ml コレステリン−オキシダーゼEC1,1,3,60,3
単位/1 該試薬は一浴混合物として予定されており、したがって
試料空試験値の測定なしに使用可能でなくてはならない
。この要求の満足は、強い脂肪血症性混濁試料物質にお
いても次の添加物により保証される: 混濁社明化添加物: 1)!1.4−ジクロルフェノール  8151R9/
jシエナボール0x−10049/ 1 デスオキシコール酸ナトリウム  ”+9712)  
p)17.0でK”/Na”−燐酸塩緩衝剤     
         80 mMパラヒドロキシ−安息香
酸エチ ルエステル          1.5fl/1テジト
           4g/13)”0.2m燐酸カ
リウム緩衝剤中−7,50で色素形成に必較なフェノー
ル 3ミリモル/1に付加的に史に フェノール65ミリモル/l ジエナボール0x−1001,5g/lツウイーン20
        1.5&/1コール酸ナトリウム  
    1.0g/l配合物: 試薬2ah十試料20 til 、 546 nm 、
  25°C試料物質による吸光≧1.5の混濁は、反
応に心象な時間以内に完全に又は無視可能な程度に消処
方: Na2HPO414−9g / I IG(2PO4115,2,9/ l Na2SO48−011/ ’ グルコースオキシダーゼEC1,1,3,460単位/
mシ バーオキシダーゼTf、CI 、11.1.71.8単
位/継 エステラーゼEC3,1,1,130,2単位/継フェ
ノール          470〜/14−アミノア
ンチピリン    156mq/1pH7,0 混1@泄明化付加物: 1)*3.4−ジクロルフェノール8141nQ/lゾ
エナボールOx−1005,3、!i’ / lタウロ
グリコ−コール酸    3.0 # / 12)” 
3 、4−ジクロルフェノール  814〜/gテジト
            2.5.9 / lタウログ
リコ−コール’#R6,9&/16)燐酸カリウム−緩
衡剤(pH7,0) 0.2 m中付加的にフェノール
     1.6511/13.4−ジクロルフェノー
ル489rng/71ゾエナボールox−1003,0
g/ 1コール酸ナトリウム      2.8 !i
/ 1加物は、試料物質により生じた試験配合物中の混
濁を非常に短時間に除去する作用をする。
記載した例は、 a)添加物とより僅かに可溶性の錯体を形成することが
でき、それ自体僚明に可溶性の1種以上の清浄剤、及び b)  a)に対し付加的に、反応混合物中での条件下
に混和物とより僅かに可溶性の錯f4−を形成すること
のない少なくとも1棟の清浄剤(*で示した)を使用す
るようなものを含む。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1、試料物質により濁つている分析法、特に光度測定用
    の反応混合物に対する、清浄剤を含有する澄明化剤にお
    いて、これが a)芳香族アルコール、芳香族アミン、アリール酸又は
    アルキル酸のエステル、炭素原子数が3よりも大きい直
    鎖状又は環状又は分枝鎖状脂肪族アルコール、短鎖のハ
    ロゲン化脂肪族化合物、脂肪族ケトン、芳香族アルデヒ
    ド、脂肪族カルボン酸、エーテル又はベンゾールの群か
    ら選ばれた1種以上の低分子有機化合物及び b)反応混合物に自体澄明に可溶性であり、添加物a)
    と一緒になつて僅かに可溶性の錯体を形成する1種以上
    の清浄剤及び c)成分a)と僅かに可溶性の錯体を形成する必要のな
    い、b)とは異なる他の清浄剤1種以上から成るか又は
    これらを含有することを特徴とする混濁除去剤。 2、電気陰性置換分を有する芳香族アルコール又は芳香
    族アミン又はこれらの混合物を含有する、特許請求の範
    囲第1項記載の混濁除去剤。 3、清浄剤としてポリオキシエチレングリコールのアル
    キルエーテル、アルアルキルエーテル又はアルキルチオ
    エーテル又はアルキルエステル又はアルアルキルエステ
    ル及び/又は塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウ
    ム又はこれらの混合物を含有する、特許請求の範囲第1
    項又は第2項記載の混濁除去剤。
JP61236380A 1978-04-14 1986-10-06 混濁除去剤 Granted JPS62182651A (ja)

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