FI69929B - Foerfarande och anordning foer avlaegsnande av grumlighet - Google Patents

Foerfarande och anordning foer avlaegsnande av grumlighet Download PDF

Info

Publication number
FI69929B
FI69929B FI791223A FI791223A FI69929B FI 69929 B FI69929 B FI 69929B FI 791223 A FI791223 A FI 791223A FI 791223 A FI791223 A FI 791223A FI 69929 B FI69929 B FI 69929B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
clarifier
clarifiers
process according
alkyl
complex
Prior art date
Application number
FI791223A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI69929C (fi
FI791223A7 (fi
Inventor
Sigmar Klose
Herbert Buschek
Helmut Schlumberger
Original Assignee
Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim Gmbh filed Critical Boehringer Mannheim Gmbh
Publication of FI791223A7 publication Critical patent/FI791223A7/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI69929B publication Critical patent/FI69929B/fi
Publication of FI69929C publication Critical patent/FI69929C/fi

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/96—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood or serum control standard
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/60—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving cholesterol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/62—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving uric acid
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/34—Purifying; Cleaning
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/02—Food
    • G01N33/04—Dairy products
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/25—Chemistry: analytical and immunological testing including sample preparation

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Description

fcgtt ΓΒ1 m/UULUTUSjULKAISU 69929 1¾¾¾¾ LBJ (11) utlAggningsskrift c Patentti r.;y."·nactty
(45> Patoit roJ-.:elat CC.C.CC
^ ^ (51) Kv.lk.>t.Cl.‘ G 01 N 1/28 SUOMI —FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansöknlng 791223 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 12.0^4.79 (FI) (23) Alkupäivä — Giltighctsdag 1 2 . θ4.79 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig 15.10.79
Patentti- ja rekisterihallitus Nähtäväksi panon ja kuul.julkaisun pvm.— 31.12.85
Patent- och registerstyrelsen ' ' AnsSkan utlagd och utl.skriften publicerad (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus—Begird prioritet 1 ^4.04.78
Saksan 1i i ttotasava1ta-Förbundsrepub1i ken Tyskland(DE) P 2816229.0 (71) Boehringer Mannheim GmbH., Sandhofer Strasse 112-132, 6800 Mannheim--Waldhof, Saksan 1iittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (72) Sigmar Klose, Berg, Herbert Buschek, Starberg,
Helmut Schlumberger, Polling, Saksan 1iittotasava1ta-Förbundsrepubl iken Tyskland(DE) (71*) Berggren Oy Ab (5*0 Menetelmä ja aine samentumien poistamiseksi - Förfarande och anordning för avlägsnande av grumlighet
Keksinnön kohteina ovat menetelmä ja reagenssi samentumien poistamiseksi koemateriaalin, varsinkin biologisen koemateriaalin, esim. ve-riheran tai plasman samentamista reaktioseoksista. Näitä käytetään muun muassa kliiniskemiallisessa analytiikassa, ravintokemiallisessa analytiikassa sekä vesi- ja jätevesianalytiikassa. Suuremman spesi-fiteetin saavuttamiseksi käytetään tällöin usein lisäaineina entsyymejä.
Fotometrisessä analyysissä tunnettu ongelma on koenesteen, kuten ve-riheran tai plasman samentumien vaikutus analyysitulokseen, kun mittaus tapahtuu ilman sokkokoearvon määritystä. Sokkokoearvon mittausta pyritään välttämään reagenssikulutuksen vähentämiseksi, mittaus-ja tulkintasuorituksen yksinkertaistamiseksi ja koetteiden käytön pienentämiseksi. Käytettäessä kertalisäysreagensseja, jotka sisältävät seoksena kaikki reaktioon osallistuvat komponentit, on sokkoar-von mittaus periaatteessa jopa mahdoton suorittaa. Tällaiset samen-tumat aiheutuvat eri syistä, tavallisesti johtuen suuresta trigly-seridipitoisuudesta.
2 69929
Samentuma aikaansaa suuren orainaisekstinktion koete-reagenssi-seoksessa. Koska kokonaisekstinktio yhdistyy siitä väriosuudesta, joka on verrannollinen määritettävän aineosan pitoisuuteen, sekä samentuman osuudesta, saadaan tällöin välttämättä virheellisiä tuloksia.
On tunnettua kirkastaa tällaiset samentumat selkeyttimiä lisäämällä siinä määrin, että samentuman osuus kokonaisekstinktiossa voitiin jättää huomioonottamatta (saksalainen kuulutusjulkaisu 2 327 894) .
Tämän menetelmän eräänä olennaisena epäkohtana on, että tarvitaan erittäin suuria selkeytinmääriä. Vaadittavat suuret pitoisuudet ovat haitallisia, koska käytettyjen entsyymien aktiivisuus tällöin usein pienenee ja koska lisäksi tällaisia määriä ei enää voida sijoittaa kiinteäaineseoKsiin, joiden pitää olla kuivia ja valutus-kelpoisia. Tällä on erikoisesti merkitystä kertalisäysreagensseja käytettäessä.
Keksinnön tarkoituksena on välttää edellä selostetut haitat ja aikaansaada menetelmä ja reagenssi, jotka tekevät mahdolliseksi yllämainittujen samentumien poistamisen. Poistamisella tarkoitetaan keksinnön puitteissa tällöin myös tällaisten samentumien ehkäisemistä tai vähentämistä.
Tämä tavoite saavutetaan keksinnön mukaan käyttäen menetelmää kooma teriaalin reaktioseoksissa aiheuttamien samentumien poistamiseksi, erikoisesti fotometristä mittausta varten, selkeyttimiä lisäämällä, jolle menetelmälle on tunnusomaista, että roaktiosookseen lisätään a) yksi tai useampia pienmolekyylisiä orgaanisia yhdisteitä, ja b) yksi tai useampia sinänsä kirkkaana liukenevia selkeyttimiä, jocka lisäyksen a) kanssa muodostavat vähemmän liukenevan kompleksin, kompleksin saostumiseen riittävässä määrässä, ja sen jälkeen lisätään toista selkeytintä, kunnes saostunut kompleksi on jälleen liuennut.
Keksintö perustuu siihen yllättävään toteamukseen, että mainitut orgaaniset yhdisteet, jotka yksinään kirkkaassa vesiliuoksessa eivät osoita mitään tai osoittavat vain vähän kirkastavaa vaikutusta yllä mainittuihin samentumi in, vahvistavat erinomaisen tehokkaasti il 69929 aikaisemmin tunnettua selkeyttimien kirkastavaa vaikutusta. Tästä johtuu, että useimmissa tapauksissa ei vain kirkastus tule mahdolliseksi, vaan myös samentuma voidaan kokonaan poistaa, jolloin samalla myös tarvittava selkeytinmäärä pienenee ratkaisevasti. Esimerkkejä kohdassa a) käytettävistä yhdisteistä ovat: a) aromaattiset (kondensoidut ja kondensoimattomat) alkoholit ja amiinit, varsinkin sellaiset, jotka on substituoitu voimakkaasti sähkönegatiivisilla ryhmillä (sopivimpia sähkönegatiivisia substi-tuentteja ovat halogeenit), myös esimerkiksi bentsyylialkoholi, fenoli, mono-, di- ja trikloorifenolit, dibromi- ja tribromifenolit, kresolit, naftolit, dihydroksinaftolit, aniliini, kloorianiliini ja metyylianiliini; b) aryylihappojen ja alkyylihappojen esterit, esim. p-hydroksi-bentsoehappoetyyliesteri, etikkahappoetyyliesteri, etikkahappobutyy-liesteri, propionihappoetyyliesteri, trikloorietikkahappoetyyliesteri ja sentapaiset; c) suoraketjuiset ja sykliset sekä haaraketjuiset alifaattiset alkoholit, joissa on enemmän kuin 3 C-atomia, siis esim. amyylial-koholi, oktanoli, dodekanoli, sykloheksanoli ja sentapaiset; d) halogenoidut lyhytketjuiset alifaattiset yhdisteet, kuten esim. dikloorietaani, trikloorietyleeni, tetrakloorimetaani, diklooribu-teeni, tetraklooridifluorietaani ja sentapaiset; e) alifaattiset ketonit, kuten esim. butanoni-(2), sykloheksanoni ja sentapaiset; f) aldehydit, kuten esim. kanelialdehydi tai bentsaldehydi; g) karbonihapot, esim. oktaanihappo; h) eetterit, kuten esim. 2-metoksifenoli; i) bentseeni.
Tällaisen yhdisteen (jota seuraavassa nimitetään apuaineeksi) kulloinkin sopiva määrä tiettyä tapausta varten voidaan määrittää esi-kokeilla. Yleensä on todettu, että välillä 0,5-300 mM, sopivimmin välillä 2-10 mM olevat pitoisuudet antavat hyviä tuloksia.
Yllä mainittujen apuaineitten kanssa vähän liukenevia komplekseja muodostavien selkeyttimien, jotka muuten yksinään liukenevat kirkkaina reaktioseokseen, joukossa ovat epäionogeenisten, ionogeenis-ten ja amfoteeristen selkeyttimien edustajia. Parhaimpina pidetään epäionogeenisiä polyetyleenioksidi-liitäntätuotteita.
4 69929
Erikoisen hyviä tuloksia saadaan polyetvleenioksidiglykolien alkyy- li-, aralkyyli- ja alkyylitioeettereillä sekä alkyyli- ja aralkyyli-estereillä. Näissä selkeyttimissä alkyyliryhmät sisältävät yleensä 8-22 C-atomia, aryyliryhmän ollessa sopivimmin fenyyliradikaali. Näiden selkeyttimien glykoliradikaalissa esiintyy yleensä 3-25 ety-leenioksidiyksikköä kondensoidussa muodossa. Tyypillisiä esimerkkejä tähän erikoisen edulliseen ryhmään kuuluvista selkeyttimistä ovat Thesit, Genapol, Tergitol, Triton X100, Lensodel ja Brij 35. Sitäpaitsi voidaan myös käyttää ionoituvia selkeyttimiä, erikoisesti alkyylidimetyylibentsyyli-ammoniumklorideja. Alkyyliryhmän suhteen pätee sama kuin mitä on mainittu polyetyleenioksidi-liitäntätuottei-den yhteydessä. Myös sekundaariset alkyylisulfaatit, joiden alkyyli-ryhmät ovat yllä olevan määritelmän mukaisia, osoittautuivat käyttökelpoisiksi. Amfoteerisistä selkeyttimistä osoittautui N-lauryyli-dietanoliamidi sopivaksi.
Kuten edellä on mainittu, tarvittava selkeytinmäärä pienenee keksinnön mukaan erittäin paljon tekniikan nykyiseen tasoon verrattuna. Yleensä riittävät määrät, jotka ovat välillä 0,05-1 %. Sopivimmin selkeyttimenlisäykset ovat välillä 0,2-0,8 %. Tietystikin voidaan käyttää myös suurempia pitoisuuksia, mutta tällöin lisääntyy käyttöönotettuihin entsyymeihin kohdistuvan negatiivisen vaikutuksen vaara. Sitävastoin yllämainitun saksalaisen kuulutusjulkaisun mukaan kirkastusta varten lisätään 10 tilavuus-% selkeytintä.
Erikoisen alhaisia selkeyttimenpitoisuuksia voidaan käyttää, jos suoritetaan selkeyttimen ja apuaineen muodostaman kompleksin liuotus lisäämällä selkeytintä, joka on erilainen kuin kompleksin sisä-tämä selkeytin. Toisin sanoen tässä keksinnön edullisessa sovellu-tusmuodossa käytetään vähintään kahta erilaista selkeytintä. Tällöin voidaan toisena selkeyttimenä käyttää myös sellaista selkeytintä, joka ei apuaineen kanssa pysty muodostamaan mitään vaikeasti liukenevaa kompleksia, mikä ilmenee samentumana.
Keksinnön toisena kohteena on selkeytintä sisältävä kirkastusaine koemateriaalin samentamia, analyysimenetelmiin, erikoisesti fotometriseen mittaukseen käytettäviä reaktioseoksia varten, jolle kirkas-tusaineelle on tunnusomaista, että se koostuu a) yhdestä tai useammasta pienimolekyylisestä orgaanisesta yhdisteestä,
II
69929 b) yhdestä tai useammasta samoin sinänsä kirkkaasta liukenevasta selkeyttimestä, joka aineosan a) kanssa muodostaa vähemmän liukenevan kompleksin, sekä mahdollisesti c) edelleen yhdestä tai useammasta selkeyttimestä, joka on erilainen kuin selkeytin b) ja jonka ei tarvitse aineosan a) kanssa muodostaa mitään vähän liukenevaa kompleksia, tai sisältää tällaisia yhdisteitä.
Tämän kirkastusaineen suhteen pätevät vastaavasti yllä olevat, käytettyjen selkeyttimien ja apuaineitten laatua ja määrää koskevat selvitykset.
Menetelmä on käyttökelpoinen kaikkien sellaisten mittausten yhteydessä, joissa esiintyvät samentumat voivat aiheuttaa häiriöitä tai virheellisiä tuloksia. Erikoisesti tämä koskee reaktioseoksia, jotka on tarkoitettu fotometristä mittausta varten. Tällaiset reaktio-seokset ovt ammattimiehelle yleisesti tunnettuja, ja niitä selostetaan useita määritettäviä aineita varten esimerkiksi kirjassa "Methoden der enzymatischen Analyse", H.U. Bergmeyer, Verlag Chemie Weinheim/Bergstrasse. Tällaisten reaktioseosten tarkempi selostus on sen vuoksi tässä yhteydessä tarpeeton.
Esimerkit 1-36
Samentumaa kirkastavat systeemit
Seuraavat keksinnön mukaiset yhdistelmät aikaansaivat samentuman poiston aikana, joka ulottui 1 minuutista enintään 2 tuntiin.
2 ml koeseosta + 20^,ul rasvapitoisuuden 3,5 % omaavaa maitoa, kerrospaksuuden ollessa 1 cm, mittausaallonpituuden 546 nm ja lämpötilan 2 5°C.
a) Apuaineen vaihtelu 0,1 m tris/HCl-puskurissa, joka sisälsi 2 % yhdistettä MgSC>4 · 7 H20
Esimerkki Aine Pitoisuus Selkeytin- pH
n:o pitoisuus 1) 1 2,4-dikloorifenoli 8; 6; 4 mM 5,6 o% 8,0 2 2,3-dikloorifenoli 8; 6; 4 mM 2,8 o% 8,0 3 2,4-dibromifenoli 8; 4 mM 7,3 o% 8,0 6 69929
Esimerkki Aine Pitoisuus Selkeytin- pH
n:o pitoisuus 1) 4 Fenoli 1 %; 0,5 % 3,3% 8,0 5 2,4,6-trikloori- 24; 12; 8 mM 7 o% 7,1 fenoli 6 1,7-dihydroksi- 8; 4 mM 4,5 o% 8,0 naftoli 7 2,7-dihydroksi- 8; 4 mM 3,5 o% 8,0 naftoli 8 1,5-dihydroksi- 8; 6; 4 mM 5,5 o% 8,0 naftoii 9 Hydrokinoni 2 % 30 o% 8,0 10 Aniliini 2; 1,5; 1 15 o% 8,0 tilavuus-% 11 2-kloorianiliini 0,8 tilav.-% 17 o% 8,0 12 o-toluidiini 1; 0,5 til.-% 16 o% 8,0 13 Pentanoli-(1) 2 tilav.-% 9 o% 8,0 14 Kloroformi 0,4 tilav.-% 4 o% 8,0 15 Bentsoli 0,75 til.-% 30 o% 8,0 16 Guajakoli 1 tilav.-% 7 o% 8,0 17 Bentsaldehydi 1 tilav.-% 1,4 o% 8,0 18 Kanelialdehydi 0,5 tilav.-% 20 o% 8,0 19 Sykloheksanoni 3 tilav.-% 1,2 o% 8,0 (sisältäen 6,0 % ja 2,5 o% Genapol Ox-80) 0,5 m kaliumfosfaattipuskurissa 20 Oktaanihapon 1 tilav.-% 2,5 o% 5,0
Na-suola 1) Hydroksipolyetoksidodekaani (Thesit) b) Selkeyttimien vaihtelu 0,1 m tris/HCl-puskurissa (pH 8,0), joka sisälsi 2 % yhdistettä MgSO4 7 H2O ja lisäyksenä 8 mM/Ι 2,4-dikloorifenolia, saavutettiin hyvä kirkastuminen seuraavia systeemejä käyttäen:
Esimerkki Selkeytin I Selkeytin II Pitoisuus n: o_____________ 21 Thesit 2) - 5,6 0% 22 Tergitol NPX 3) - 10 0% 23 Triton X100 4) - 17 0% 24 Pegosperse 5) - 15 0% 25 Thesit Brij 35 2 0% & 2 0% 11 7 69929
Esimerkki Selkeytin I Selkeytin II Pitoisuus n:o________ 26 Thesit Tween 20 2 o% & 1 o% 27 Thesit Bentsalkonium- 3,5 o% & 0,8 o% kloridi 28 Teepol 710 6) Brij 35 5 o% & 7 o% 29 Lensodel Ab6 7) Brij 35 5 o% & 12 o% 30 Thesit Setyylitrimetyyli- 4 o% & 1 o% ammoniumbroraidi 31 Tween 20 8) Lauriinihappo-bis- 8 o% & 2 o% (2-hydroksietyyli)-amiini 32 Brij 35 9) Lauriinihappo-bis- 10 o% & 2 o% (2-hydroksietyyli)-amiini 33 + Genapol 0x80 10) Dodekyylisulfaatti- 3 oi & 16 o%
Na-suola (K—ionien läsnäollessa) 34 Tween 20 Setyylitrimetyyli- 7,5 o% & 1 o% ammoniumbroraidi 35 Genapol 0x30 Tween 20 1 o% & 3,5 o% 36 * Genapol 0x100 11) Dodekyylisulfaat- 6 o% & 3 o% ti-Na-suola 2) Katso viitettä 1) 3) Tergitol NPX = 10,5 etoksi-nonyylifenoli 4) Triton X100 = 9-10 etoksi-oktyylifenoli 5) Pegosperse = polyetyleeniglykoli-lauryyliesteri 6) Teepol 710 Ί sekalaisia sekundaarisia alkyylisulfaatteja 7) Lensodel AB6 J (8-18 C-atomia) 8) Tween 20 = 20 etoksi-sorbitaani-monolauraatti 9) Brij 35 = polyoksietyleeni-lauryylieetteri 10) Genapol 0x80 Ί rasva-alkoholipolyglykolieettereitä 11) Genapol X100 J (suoraketjuisia, 12-15 C-atomia)
Esimerkki 37
Reagenssi virtsahapon määrittämiseksi veriherassa Koostumus: 0,05 moolia/1 K4P2O7 10 tilavuus-% etanolia saatettuna pH-arvoon 8,5 suolahapolla
1 mg/ml NADP
1 U/ml alkoholidehydigenaasia EC 1.2.1.5 1000 U/ml katalaasia EC 1.11.1.6 0,05 moolia/1 Na2~oksalaattia 0,05 moolia/1 pyratsolia 69929
Ennakolta määrätty mittausaallonpituus ja tarvittava suhteellisen suuri koetteen määrä aiheuttavat sen, että koemateriaalin ollessa rasvapitoisuuden vuoksi sameaa mittaus vaikeutuu tai tulee jopa mahdottomaksi.
Tällaisen sameuden poistamiseksi suoritettiin seuraavat lisäykset: 1) 2 % etikkahappobutyyliesteriä 1,5 % Thesit-selkeytintä 2) 0,5 % dikloorietaania 0,5 % heksanolia 5 o% selkeytintä Genapol X-80 Λ isotridekanoli- 5 o% selkeytintä Genapol X-100 j polyglykolieettereitä 6 o% Thesit-selkeytintä
Koe-erä: 2 ml reagenssia (lisäysten 1) tai 2) kera) 0,1 ml koetetta käynnistys käyttämällä 0,6 U urikaasia EC 1.7.3.3 Mittaus aallonpituudella 340 nm ja lämpötilassa 25°C päätepisteeseen saakka.
Edellä mainitut lisäykset aikaansaavat sen, että rasvapitoisuuden vuoksi samean koemateriaalin voimakkaasti suurentamat alkuekstink-tiot hyvin nopeasti pienenevät.
Samentuma, jonka aiheuttama ekstinktio on noin 2,0, vähenee noin 10 minuutissa pysyvään tasoon, jota vastaava ekstinktio on noin 0,2 rea-genssin sokkoarvoon verrattuna. Siten on mahdollista sovittaa reaktion käynnistäminen sen jälkeen.
Esimerkki 38
Reagenssi kolesterolin määrittämiseksi veriherassa Koostumus: 2,54 g/1 KH2P04 31,60 g/1 K2KP04 8 g/1 Na2S04 200 mg/1 4-aminoantipyriiniä 282 mg/1 fenolia pH 7,90 3 U/ml peroksidaasia EC 1.11.1.7 0,3 U/ml kolesteroli-esteraasia EC 3.1.1.13 0,3 U/ml kolesteroli-oksidaasia EC 1.1.3.6 69929 Tämä reagenssi toimii kertalisäysseoksena ja on sen vuoksi käytettävä ilman koesokkoarvon mittausta. Tämän ehdon täyttäminen varmistetaan myös rasvapitoisuuden vuoksi voimakkaasti samean koemateriaalin ollessa kyseessä seuraavien lisäysten avulla:
Samentumaa kirkastavat lisäykset: 1) * 815 mg/1 3,4-dikloorifenolia
4 g/1 selkeytintä Genapol Ox-lOO
3 g/1 natriumdesoksikolaattia 2) 2 g/1 heptanolia 8 g/1 Thesit-selkeytintä 3) 1 g/1 etikkahappoetyyliesteriä 7 g/1 Thesit-selkeytintä 4) pH-arvolla 7,0 ja 80 mM K+/Na+-fosfaattipuskurissa 1.5 g/1 parahydroksi-bentsoehappoetyyliesteriä 4 g/1 Thesit-selkeytintä 5) + pH-arvolla 7,50 ja 0,2 m kaliirfosfaattipuskurissa Värinmuodostukseen tarvittavan fenolipitoisuuden 3 millimoo-lia/1 lisäksi edelleen 35 millimoolia/1 fenolia 1.5 g/1 selkeytintä Genapol Ox-100 1.5 g/1 selkeytintä Tween 20 1,0 g/1 natriumkolaattia
Mittauserä: 2 ml reagenssia + 20^ul koetetta, mittausaallonpituus 546 nm, lämpötila 25°C.
Koemateriaalin aiheuttamat samentumat, joita vastaava ekstinktio on = 1,5, häviävät reaktioon tarvittavana aikana täydelleen tai heik-kenevät merkityksettömään määrään.
Esimerkki 39
Reagenssi glukoosin määrittämiseksi veriherassa Koostumus: 14,9 g/1 Na2HP0^ 13,2 g/1 KH2P04 8,0 g/1 Na2SC>4 30 U/ml glukoosioksidaasia EC 1.1.3.4 1,8 U/ml peroksidaasia EC 1.11.1.7 10 69929 0,2 U/ral esteraasia EC 3.1.1.13 470 mg/1 fenolia 156 mg/1 4-aminoantipyriiniä pH-arvolla 7,0
Samentumaa kirkastavat lisäykset: 1) φ 814 mg/1 3,4-dikloorifenolia 3,6 g/1 selkeytintä Genapol Ox-100 3.0 g/1 tauroglyko-koolihappoa 2) φ 814 mg/1 3,4-dikloorifenolia 2,5 g/1 Thesit-selkeytintä 3,9 g/1 tauroglyko-koolihappoa 3) φ 0,2 m kaliumfosfaattipuskurissa pH-arvolla 7,0 fenolimäärän 1,35 g lisäksi 489 mg/1 3,4-dikloorifenolia 3.0 g/1 selkeytintä Genapol Ox-100 2,8 g/1 natriumkolaattia
Mittaus suoritetaan aallonpituudella 578 nm. Samoin kuin esimerkissä 38 vaikuttavat lisäykset myös tässä tapauksessa siten, että koe-materiaalin mittauserään aiheuttamat samentumat häviävät tai heikke-nevät hyvin lyhyessä ajassa.
Esitetyt esimerkit käsittävät sellaisia, joissa käytetään a) yhtä tai useampaa sinänsä kirkkaana liukenevaa selkeytintä, joka lisäaineen kanssa voi muodostaa vähemmän liukenevan kompleksin, sekä sellaisia, joissa käytetään b) selkeyttimen tai selkeyttimien a) lisäksi vähintään yhtä selkeytintä, joka ei kykene reaktioseoksessa vallitsevissa olosuhteissa lisäaineen kanssa muodostamaan vähemmän liukenevaa kompleksia (merkitty merkillä φ ).
li

Claims (11)

11 69929
1. Menetelmä samentumien poistamiseksi koemateriaalin samentamista reaktioseoksista, erikoisesti fotometristä mittausta varten, sel-keyttimiä lisäämällä, tunnettu siitä, että reaktioseokseen lisätään a) yksi tai useampia pienmolekyylisiä orgaanisia yhdisteitä ja b) yksi tai useampia samoin sinänsä kirkkaana liukenevia selkeytti-miä, jotka lisäyksen a) kanssa muodostavat vähemmän liukenevan kompleksin, kompleksin saostumiseen riittävässä määrässä, ja että sen jälkeen lisätään toista selkeytintä, kunnes saostunut kompleksi on jälleen liuennut.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että komponenttina a) käytetään aromaattisia alkoholeja tai amiineja, jotka sisältävät sähkönegatiivisia substituentteja.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään fenoleja tai naftoleja, jotka on substituoitu yhdellä tai useammalla halogeeniatomilla tai/ja hydroksyyliryhmillä.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään di- tai trihalogeenifenolia tahi dihydroksinaftolia.
5. Jonkin patenttivaatimuksista 1-4 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että selkeyttiminä käytetään ionoitumattomia polyetylee-nioksidiliitäntätuotteita tai kationisia selkeyttimiä.
6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, t u n n e t tu siitä, että käytetään polyetyleenioksidiglykolien alkyyli-, aralkyyli- tai alkyylitioeettereitä tahi alkyyli- tai aralkyyliestereitä, joissa on 8-22 C-atomia alkyyliryhmissä ja 5-25 etyleenioksidiyksikköä.
7. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään alkyylidimetyylibentsyyli-ammoniumkloridi-yhdisteitä, joissa on 8-22 C-atomia alkyyliryhmässä.
8. Jonkin edellisen patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että muodostuneen kompleksin liuottamiseksi lisätään selkeytin, joka on erilainen kuin saostuneen kompleksin sisältämä selkeytin. 12 69929
9. Kirkastusaine koemateriaalin samentamia, analyysimenetelmiin erikoisesti fotometriseen mittaukseen käytettäviä reaktioseoksia varten, joka kirkastusaine sisältää selkeytintä ja joka on tunne t t u siitä, että se koostuu a) yhdestä tai useammasta pienmolekyylisestä orgaanisesta yhdisteestä, b) yhdestä tai useammasta samoin sinänsä kirkkaana liukenevasta selkeyttimestä, joka aineosan a) kanssa muodostaa vähemmän liukenevan kompleksin, sekä mahdollisesti c) edelleen yhdestä tai useammasta selkeyttimestä, joka on erilainen kuin selkeytin b) ja jonka ei aineosan a) kanssa tarvitse muodostaa mitään vähän liukenevaa kompleksia, tai sisältää tällaisia yhdisteitä.
10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen kirkastusaine, tunnettu siitä, että se sisältää aromaattisia alkoholeja tai amiineja, joissa on sähkönegatiivisia substituentteja, tahi niiden seoksia.
11. Patenttivaatimuksen 9 tai 10 mukainen kirkastusaine, tunnettu siitä, että se selkeyttimenä sisältää polyetyleeni-oksidiglykolin alkyyli-, aralkyyli- tai alkyylitioeetterin tahi alkyyli- tai aralkyyliesterin tai/ja jonkin alkyylidimetyylibentsyy-li-ammoniumkloridin tahi niiden seoksia. 13 · · : >> · / " : 69929
FI791223A 1978-04-14 1979-04-12 Foerfarande och anordning foer avlaegsnande av grumlighet FI69929C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2816229A DE2816229C2 (de) 1978-04-14 1978-04-14 Verfahren und Mittel zur Beseitigung von Trübungen
DE2816229 1978-04-14

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI791223A7 FI791223A7 (fi) 1979-10-15
FI69929B true FI69929B (fi) 1985-12-31
FI69929C FI69929C (fi) 1986-05-26

Family

ID=6036990

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI791223A FI69929C (fi) 1978-04-14 1979-04-12 Foerfarande och anordning foer avlaegsnande av grumlighet

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4282001A (fi)
EP (1) EP0004857A3 (fi)
JP (2) JPS54138493A (fi)
AT (1) AT363613B (fi)
BE (1) BE85T1 (fi)
CA (1) CA1131097A (fi)
CH (1) CH651137A5 (fi)
DE (1) DE2816229C2 (fi)
FI (1) FI69929C (fi)
FR (1) FR2473713A1 (fi)
GB (1) GB2055784B (fi)
IE (1) IE48273B1 (fi)
IT (1) IT1148235B (fi)
NL (1) NL184080C (fi)
SE (1) SE456370B (fi)
SU (1) SU1443816A3 (fi)
YU (1) YU87379A (fi)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2816229C2 (de) * 1978-04-14 1983-11-10 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und Mittel zur Beseitigung von Trübungen
DE2911284C2 (de) * 1979-03-22 1982-01-28 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und Reagenz zur Aktivierung der Cholesterinesterase
US4273867A (en) * 1979-04-05 1981-06-16 Mallinckrodt, Inc. Method and reagent for counteracting lipemic interference
US4319882A (en) * 1980-02-21 1982-03-16 Yash Sharma Method for detecting immunological agglutination and biochemical agent therefor
DE3021457A1 (de) * 1980-06-06 1982-01-07 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und mittel zur aufloesung von chylomikronen in waessrigem mediums
US4503146A (en) * 1980-10-01 1985-03-05 Technicon Instruments Corporation Method for eliminating turbidity in a biological fluid and reagent therefor
CA1163908A (en) * 1980-10-01 1984-03-20 Shyun-Long Yun Method for eliminating turbidity in a biological fluid and reagent therefor
DE3046241A1 (de) * 1980-12-08 1982-07-15 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und reagenz zur bestimmung von cholesterin
DE3107060A1 (de) * 1981-02-25 1982-09-09 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Kontroll- oder eichserum und verfahren zu seiner herstellung
EP0061541A1 (en) * 1981-03-27 1982-10-06 Biospecia Limited Immunological analysis and a biochemical agent therefor
US5250418A (en) * 1981-10-06 1993-10-05 Boehringer Mannheim Gmbh Process and reagent for determining the activity of chymotrypsin and trypsin in feces
US4404286A (en) * 1982-02-22 1983-09-13 The Dow Chemical Company Bilirubin assay
US5047327A (en) * 1982-04-02 1991-09-10 Ivan E. Modrovich Time-stable liquid cholesterol assay compositions
ATE25464T1 (de) * 1982-04-02 1987-02-15 Ivan Endre Modrovich Zeitstabile fluessige zusammensetzung fuer den cholesterinnachweis.
EP0100217B1 (en) * 1982-07-23 1987-10-07 Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Process for quantitative determination of substrate treated with oxidase
DE3303098A1 (de) * 1983-01-31 1984-08-02 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und reagenz zur glucosebestimmung im haemolysierten blut
JPS59162454A (ja) * 1983-03-08 1984-09-13 Kainosu:Kk 体液中の濁りを除去する方法
DE3323949A1 (de) * 1983-07-02 1985-01-03 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und mittel zur raschen und vollstaendigen beseitigung einer truebung in einer biologischen fluessigkeit
EP0141879A1 (en) * 1983-10-18 1985-05-22 Victor A. Bernstam Surfactant compositions and methods for clarifying and partitioning aqueous lipid-containing specimens
US4816411A (en) * 1984-07-06 1989-03-28 Technicon Instruments Corporation Method for eliminating turbidity in a biological fluid and reagent therefor
JPS6195247A (ja) * 1984-10-16 1986-05-14 Yatoron:Kk 血液試料の濁りを減らす方法
FR2599149B1 (fr) * 1986-05-21 1988-08-26 Univ Nancy Reactif pour la transparisation de milieux biologiques et ses applications analytiques.
DE3620817A1 (de) * 1986-06-21 1987-12-23 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur spezifischen bestimmung des serumfructosamingehalts sowie hierfuer geeignetes reagenzgemisch
DE3743405A1 (de) * 1987-05-14 1988-11-24 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur bestimmung von fructosamin
DE3717402A1 (de) * 1987-05-23 1988-12-08 Behringwerke Ag Verfahren zur bestimmung von proteinen und mittel dazu
DE3732688A1 (de) * 1987-09-29 1989-04-13 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur spezifischen bestimmung des serumfructosamingehalts sowie hierfuer geeignetes reagenzgemisch
JP2711332B2 (ja) * 1988-04-15 1998-02-10 株式会社ヤトロン 非水溶性物質の透明な水溶液が得られる凍結乾燥品の製造方法
DE3920364A1 (de) * 1989-06-22 1991-01-10 Technicon Gmbh Verfahren und reagenz zur verhinderung von truebungen
DE4018502A1 (de) * 1990-06-09 1991-12-12 Merck Patent Gmbh Verfahren und mittel zur beseitigung von truebungen in biologischen fluessigkeiten
US5334503A (en) * 1991-10-08 1994-08-02 Eastman Kodak Company Test kit and method for the detection of microorganisms associated with periodontal diseases using surfactant mixture as extraction composition
DE4218555A1 (de) * 1992-06-05 1993-12-09 Elemer Dipl Chem Dr Faltusz Verfahren zur Solubilisierung der Milch für Untersuchungszwecke
DE4228021A1 (de) * 1992-08-24 1994-03-03 Henkel Kgaa Waschverfahren
DE19850074A1 (de) * 1998-10-30 2000-05-04 Dade Behring Marburg Gmbh Stabilisierung von biologischen Flüssigkeiten durch Zusatz von Sterinestern
EP1233269B1 (en) * 2001-02-19 2003-11-19 Olympus Diagnostica GmbH Agent for the removal of turbidity in biological samples
US6472216B1 (en) * 2001-07-24 2002-10-29 Ann-Shyn Chiang Aqueous tissue clearing solution
EP2177622B1 (de) * 2005-12-12 2013-01-16 Roche Diagnostics GmbH Chromogene Tests in Gegenwart von Zellen
DE102006044795A1 (de) * 2006-09-13 2008-03-27 Schweigert, Florian, Prof. Dr.med.vet. Bestimmung von Inhaltsstoffen aus biologischen Materialien
RU2429462C2 (ru) * 2009-10-14 2011-09-20 Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт нормальной физиологии имени П.К. Анохина РАМН Способ оптического просветления образцов биологических тканей
FR3019299B1 (fr) * 2014-03-31 2016-05-06 Spectralys Innovation Procede d'estimation des proteines seriques denaturees dans un lait.

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3853465A (en) * 1972-06-09 1974-12-10 Technicon Instr Turbidity reduction in serum and plasma samples using polyoxyethylated lauric acid compounds
US3958939A (en) * 1975-01-08 1976-05-25 Coulter Electronics, Inc. Method for clarification of lipemic serum
US4148869A (en) * 1975-03-06 1979-04-10 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Immunological reagent and method of using same
US4011045A (en) * 1975-02-14 1977-03-08 Bonderman Dean P Turbidity reduction in triglyceride standards
DE2612725C3 (de) * 1976-03-25 1979-05-03 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin
US4154706A (en) * 1976-07-23 1979-05-15 Colgate-Palmolive Company Nonionic shampoo
DE2724757C2 (de) * 1977-06-01 1979-08-23 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel zur Beseitigung von Trübungen in Serum und Verfahren zu seiner Herstellung
DE2816229C2 (de) * 1978-04-14 1983-11-10 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und Mittel zur Beseitigung von Trübungen

Also Published As

Publication number Publication date
IE790779L (en) 1979-10-14
SE456370B (sv) 1988-09-26
GB2055784B (en) 1982-08-25
EP0004857A2 (de) 1979-10-31
EP0004857A3 (de) 1980-04-02
ATA122479A (de) 1981-01-15
NL7915054A (nl) 1980-11-28
FR2473713B1 (fi) 1983-11-18
GB2055784A (en) 1981-03-11
FR2473713A1 (fr) 1981-07-17
NL184080C (nl) 1989-04-03
JPS6345065B2 (fi) 1988-09-07
CH651137A5 (de) 1985-08-30
IT1148235B (it) 1986-11-26
US4282001A (en) 1981-08-04
JPS6211307B2 (fi) 1987-03-11
AT363613B (de) 1981-08-25
SU1443816A3 (ru) 1988-12-07
JPS54138493A (en) 1979-10-26
IT8086284A0 (it) 1980-10-30
SE8008598L (sv) 1980-12-08
YU87379A (en) 1983-01-21
NL184080B (nl) 1988-11-01
IE48273B1 (en) 1984-11-28
FI69929C (fi) 1986-05-26
BE85T1 (fr) 1980-11-07
DE2816229B1 (de) 1979-06-28
FI791223A7 (fi) 1979-10-15
JPS62182651A (ja) 1987-08-11
CA1131097A (en) 1982-09-07
DE2816229C2 (de) 1983-11-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI69929B (fi) Foerfarande och anordning foer avlaegsnande av grumlighet
US5094943A (en) Process and reagent for the improved quantitative colorimetic determination of hydrogen peroxide
US4543326A (en) Stabilization of oxidase
FI83975B (fi) Foerfarande och reagens foer specifik bestaemning av hdl-kolesterolhalt i serum.
KR20010075176A (ko) 리포단백질 중의 콜레스테롤의 분별 정량 방법 및 정량용시약
WO2004035816A1 (ja) 高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法および試薬
EP1342792A1 (en) Test piece for assaying high density lipoprotein (hdl) cholesterol
CA2869998C (en) Method for measuring component to be measured in specimen
US4503144A (en) Method and composition for the determination of cholesterol
DK145234B (da) Fremgangsmaade og reagens til kvantitativ bestemmelse af cholesterol
KR20020026446A (ko) 콜레스테롤 정량용 시료의 전처리 방법 및 이를 이용한특정의 리포단백 중의 콜레스테롤 정량법
EP0686849B1 (en) Method for measuring bilirubin
WO2007037419A1 (ja) 生体試料中の２項目の測定対象物の同時分別定量方法
CA2559908A1 (en) Method of stabilizing oxidizable color-assuming reagent
US5559003A (en) Assay method for biological components
US5258315A (en) Process and composition for the removal of turbidity from biological fluids
JP3601648B2 (ja) 生体成分測定用試薬および測定方法
US4695539A (en) Process for quantitative determination of substrate treated with oxidase
FI70044C (fi) Foerfarande och reagens foer aktivering av kolesterinesteras
KR19980086568A (ko) Ldl -콜레스테롤의 측정
JPH04200396A (ja) 過酸化水素の酵素学的高感度測定法及びそのための試薬
Luhman et al. Simple enzymatic assay for determining cholesterol concentrations in bile
JP2663257B2 (ja) 生体成分測定用試薬の安定化方法
JPS63246665A (ja) 生体成分測定用試薬の安定化法
JPH0365159B2 (fi)

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: BOEHRINGER MANNHEIM GMBH