JPS6183186A - 新規なテトラピロ−ル医薬用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、光線診断および光線治療、特に人間または動
物の腫瘍および癌組織の検出および治療に有用な新規な
医薬用組成物に関するものである。

［従来の技術Ｊ ヘマトポルフィリン誇導体を投与した後に、波長範囲６
２６〜８３８ナノメートルの強い光線を人間体内の腫瘍
および癌組織に照射して癌細胞を減少、時には破壊させ
ることは公知である（ｐａｔ発行明細ｆ１Ｍ’、’ｄＱ
　１１３／（１０８１１号を参５）、また公知のように
、ポルフィリン、特にプロトポルフィリンのナトリウム
塩は細胞の正常機能を維持または増進させ、悪性腫瘍の
発生、成長、転移および再発を防止するのに有用である
。特開昭５１−１２５７５７号には、腫瘍抑制剤として
ポルフィリンを使用することが述べられており、例とし
て、エチオポルフィリン、メンポルフィリン、プロトポ
ルフィリン、ジューテロポルフィリン、ヘマトポルフィ
リン、コブロボルフィリンおよびつａポルフィリンが挙
げられている。

テトラヘドロンレターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌ
ｅｔｔｅｒｓ）２３号、　１９７８年、２０１７〜２０
２０頁においては、主にマリン・エフロイド・バチルス
・ビリディス（ｍａｒｉｎｅｅｃｈｕｒａｉｄ　＆、ニ
アの体壁を抽出することにより得られた顔料ポネリン（
ｂｏｎｓｌｌｉｎ）のアミノモノカルボン酸アダクツの
ことが述べられている。これらのアダクツの構造は、ボ
ネリンの遊離カルボキシル基の一方とアミノモノカルボ
ン酸とから生成したアミドであると推測される。このア
ダクツを加水分解すると、バリン、インロイシン、ロイ
シンおよびアロイソロイシンの混合物を生じる。

この文献においては、これらアミノ酸アダクツの用途に
ついては何も述べていない。

動物体内においてテトラピロールが強い感光性を有する
ことは良く知られており、多数の文献に記載されテイル
。例えばＪ、　ｒｎｔｒ、　Ｓｃｉ、　Ｖｉｔａｍｉｎ
ａｌ。

２７．５２１〜５２７頁、１９８１年；アグリカルチュ
ラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリ−（Ａｇｒ
ｉｃ。

Ｂｉｏ、　Ｃｈｅｗ、）　　、　４Ｂ（９）、　２１８
３〜２１９３頁、　１９８２年；ケミカル・アブストラ
クッ（Ｃｈｅｆｌｌ、　Ａｂｓｔ、）、　　９８巻、２
７Ｇ頁、１９８３年、および８８＠、　８Ｆ１７８４ｍ
頁、１９２８年などがある。

［問題点を解決するための手段］ 本発明の医薬用組成物は、自然界に存在するテトラピロ
ールから種々の方法で得られる環式および非環式のテト
ラピロールを含む、環状テトラピロールハそれらの共通
の母体テトラピロールとしてウロポルフィリノーゲンを
有し、かつ次の環状構造を有する。

上記式において分子の各位置には１〜２０の番号が付さ
れており、各環はＡ、Ｂ、ＣおよびＤによって示されて
おり、これらの環には上記環構造のベルヒドロ−１例え
ばジヒドロ−およびテトラヒドロ誘導体１例えば二重結
合が１つ以上欠けている化合物も含まれる。この環状構
造には４つのピロール環が存在し、ピロール環はその環
のα−位置でメチン基、即ち一〇Ｈ−によって結合され
ている。

本発明の化合物は、この明細書において便宜的にテトラ
ピロールの誘導体として表されているが、理解されるよ
うに「テトラピロール」という用語は上記の特徴的な環
状構造を有する化合物、それに対応するペルヒドロ誘導
体、および通常胆汁色素として知られている線状テトラ
ピロールなどの非環状ピロールを包含する。

本発明において用いられるテトラピロールはすべて公知
であり１種々の手段および種々の方法により天然のテト
ラピロールから誘導される。天然のテトラピロールは共
通の原種としてウロポルフィリノーゲン■、即ち架橋結
合位置で還元したヘキサヒドロポルフィリンを含む０例
えば、参プロトポルフィリン■あるいはプロトポルフィ
リノーゲン■の合成あるいは生金成語導体または生成物
は周知である０例えば、ポルフィリンズ・アンド・メタ
ロポルフィリンズ（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｎｓ　ａｎｄ　Ｍ
ｅｔａｌｌｏ−ｐｏｒｐｈ７ｒｉｎｓ）　、ケイ、スミ
ス（Ｋ、　Ｓａ＋４ｔｈ）、エルシビア（Ｅｌｓｉｖｉ
ｅｒ）；ザ・ポルフィリンズ（Ｔｈｅ　Ｐｏｒ−ｐｈ７
ｒｉｎｓ）、　１〜７巻、ディー、ドルフィン（ｎ。

０ｏ１ｐｈｉｎ）、アカデミツク・プレス（Ａｃａｄｅ
ｍｉｃＰｒｅｓｓ）　；パイオシンセティック・パスウ
エイズ（Ｂｉｏｓ７ｎｔｈｅｔｉｃ　Ｐａｔｈｗａ７ｇ
）　、第ｍ巻、ビー、バーンハム（Ｂ、　Ｂｕｒｎｈａ
ｍ）による章、編者デ４−．エム。

グリ−７７＜−グ（Ｄ、　Ｍ、　Ｇｒｅｅｒ＋ｂｅｒｇ
）　、アカデミツク−プレス（Ａｃａｄｅａ＋ｉｃ　Ｐ
ｒｅｓＳ）。

非環状テトラピロールは胆汁色素として一般的に知られ
て・おり、ビリルビンおよびビリベルジンなどを含む、
これらのテトラピロールはプロトポルフィリンから、例
えば動物の代謝産物として生成する。

本発明の新規な医薬用組成物の他の特徴は、環状構造の
いずれかの番号の位置の置換基中に少な゛くとも１つの
アミド結合が存在することである。

これらは後記の他の置換基と共に新規な化合物中に存在
するものである。

従って本発明は、ポルフィリン、クロリン、バクテリオ
クロリン、および関連するポルフィリン化合物の発色団
を有する化合物のアミノ酸またはペプチド誘導体からな
る診断および治療用の組成物に係るものである。ペプチ
ド結合は発色団を有する化合物のカルボキシル基および
特定のアミノ酸の７ミノ基を伴っている６本発明の新規
な化合物は遊離のカルボキシル基を有するテトラピロー
ルの誘導体を包含している。これらの誘導体としては、
主な種類のテトラピロールのポルフィリン、即ち、当業
者にとって周知のカルボキシ含有ポルフィリン、クロリ
ンおよびバクテリオクロリンがある。

上記ペプチド結合を生成するために本発明において用い
られるアミノ酸はアミノジカルボン酸であり、この酸に
おけるアミ７′基は、当然ジカルボン酸の炭素原子上に
位置している。炭素原子鎖中におけるアミノ基の特定位
置は限定的ではないが、唯一の要件は、所定のポルフィ
リンのカルボキシル基と共に必須のペプチド結合を効果
的に生成することである。したがって本発明の組成物に
おいては種々のアミノジカルボン酸が有用であり、それ
らの例としては、α−７ミノコハク酸（アスパラキン酸
）、α−７ミノグルタル酸（グルタミン酸）、β−７ミ
ノグルタル酸、β−アミノセバシン酸、２．６−ピペリ
ジンジカルボン酸、２．５−ビワールジカルポン酸、２
−カルボキシピロール−５−酢酸、２−カルボキシピペ
リジン−６−プロピオン酸、α−７ミノアジビン酸、α
−アミノアゼライン酸等がある。これらのアミノ酸はメ
チル基およびエチル基のような有角アルキル基並びにペ
プチド結合を形成するアミノ基の性能に悪影響を及ぼす
ことのない他の基、例えばアルコキシ基またはアシルオ
キシ基で置換されていてもよく、さらにまた他の７ミノ
基を含んでいてもよい、好ましいアミノ酸は天然のα−
アミノ酸、グルタミン酸およびアスパラギン酸であり、
これらは容易に入手することができ、かつ現時点では最
良の結果を付与するものである。

テトラピロール類の化合物は：ｊＩｊ１表に例示されて
おり、この表においてはテトラピロール環構造の各位置
の番号が用いられ、記載されている各置換基の位置を示
している。環内における二重結合の不在に関しては１表
題「ジヒドロ」の下に二重結合の不存在箇所を示す各組
の数字（環の位置）で示す。

本発明の新規は医薬用組成物は、下記の構造式で表わさ
れ、かつアミノジカルボン酸と少なくとも１つのカルボ
キシル基を有するテトラピロールとのモノ−またはポリ
アミドからなるものである。

上式において、Ｚはアミノ基を除外したアミノジカルボ
ン酸残基、Ｘはカルボキシル基を除外したテトラピロー
ル残基、およびｎは１〜４までの整数である。

また、特に好ましい化合物は、アミノジカルボン酸と、
下記の構造式を有するテトラピロール化合物あるいは対
応するジ−またはテトラヒドロテトラピロールとの、蛍
光性モノ−またはポリアミド、あるいはそれらの塩であ
る。

Ｒ５はメチル基； Ｒ８は水素、　（：Ｈ２１１；）１２Ｃｏ２Ｈ，Ｃ）１
２０Ｈ２Ｇｏ２ＲまたはＧＯ２ＩＩ；Ｒハ水素、　Ｃ０
０）１．　ＣＨ０００）＋　ｔりはメチル基；であり２ す、かつＲ，、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ７およびＲ８が２
つの置換基を表わしている場合、あるいは２価で同一の
炭素に結合している場合には、結合しているピロール環
はジヒドロピロールであり； Ｒは低級アルキルまたはベンジル； かつＲ１からＲ９の少なくとも１つはＭ離カルボキシル
基である。

本発明の特に好ましい組成物は、下記の構造式２有する
テトラピロール化合物あるいは対応するジ−またはテト
ラヒドロテトラピロールのアミド、あるいはそれらの塩
であり、かっＲ１からＲ９は前記と同様である。

本発明の治療用組成物に特に好適な化合物を以下に例示
する。

ム二二二塁Ａ」 モノおよびジアスパルチルトランスメソクロリン■、モ
ノおよびジグルタミルトランスメソクロリン■、モノ、
ジおよびトリアスパルチルクロリンｅ６、モノ、ジおよ
びトリアスパルチルメソクロリンｅ６、モノ、ジおよび
トリグルタミルクロリンｅ６、モノ、ジおよびトリグル
タミルメソクロリンｅ６、モノおよびジアスパルチルク
ロリンｅ４、モ／８よびジアスパルチルメソクロリンｅ
４、モノおよびジアスパルチルイックロリンｅ４．モノ
およびジアスパルチルメンインクロリンｅ４、モノおよ
びジグルタミルクロリンｅ４、モノおよびジグルタミル
メソクロリンｅ４、モノおよびジグルタミルイソクロリ
ンｅ４、モノおよびジグルタミルメソイソクロリンｅ４
、モノアスパルチルピロフェオホーバイドＡ、モノグル
タミルピロ７エオホーバイドＡ、七ノアスバルチルフェ
オホーバイド３、モノグルタミルフェオホー／ヘイド３
．モノおよびジアスパルチルホトプロトポルフィリン■
、モノおよびジグルタミルホトプロトポルフィリン■、
モノおよびジ−Ｌ−α−７ミノアジビルトランスーメソ
クロリン■。

ボルフ　リン１゜ モノおよびジアスパルチルメソポルフィリン■、モノお
よびジグルタミルメソボルフィリン■、モノおよびノア
スバルチルプロトポルフィリン■、モノおよびジグルタ
ミルプロトポルフィリン■。

モノおよびジアスパルチルジューテロポルフィリン■、
モノおよびジグルタミルジューテロボルフィリン■、モ
ノ、ジ、トリおよびテトラアスバルチルコプロポルフィ
リン■（異性体混合物）、モノ、ジ、トリおよびテトラ
グルタミルコプロポルフィリンｍ、モノおよびジアスパ
ルチルヘマトポルフィリンＩＸ、モノおよびジグルタミ
ルへマドポルフィリン■。

バクテリオクロリン； モノおよびジアスパルチルバクテリオクロリンｅ４、モ
ノおよびジグルタミルバクテリオクロリンｅ４、モノお
よびジアスパルチルバクテリオイソクロリンｅ４、モノ
およびジグルタミルへクテリオインクロリンｅ４ｔ　モ
ノ、ジおよびトリアスパルチルバクテリオクロリンｅ６
．モノ、ジおよびトリグルタミルバクテリオクロリンｅ
６、七／アスパルチルピロバクテリオフェオホーへイド
Ａ、モノグルタミルビロバクテリオフェオホーバイド３
、モノアスパルチルバクテリオフェオホーバイドＡ、モ
ノグルタミルパクテリオフェオホーバイドＡ。

本発明の新規な化合物は酸または塩基と塩を生成する。

酸性塩は、塩基との塩である最終アミド生成物の精製お
よび／または分離に特に有用なものである、さらに塩基
性塩もここで述べる診断および治療用に特に好ましいも
のである。

酸性塩は、種々の酸例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸およ
び硫酸のような鉱酸、並びにトルエンスルホン酸および
ベンゼンスルホン酸のような有機酸によって生成する。

塩基性塩としては、例えばナトリウム、カリウム、カル
ンウム、マグネシウム、アンモニウム、トリエチルアン
モニウム、トリメチルアンモニウム、モルホリンおよび
ピペリジンの塩等がある。

酸性塩および塩基性塩は、酸または塩基の水溶液中に選
ばれたアミノ酸テトラピロールアミドを溶解し、この溶
液を蒸発乾固する簡単な方法によって生成する。アミド
に対して水混和性溶媒を使用すると、アミドを容易に溶
解することができる。

最終アミド生成物は、例えば金属塩との反応により金属
錯体に転化することもできる。マグネシウム錯体はアダ
クツ生成物と同じ目的のために有用なものである。マグ
ネシウム錯体並びに例えば鉄および亜鉛を含む他の金属
錯体は、アダクツ生成物の処理中に除去困難なニッケル
、コバルトおよび銅のような金属による汚染を防止する
のに有用である。亜鉛およびマグネシウムは、製造後最
終アダクツ生成物から容易に除去することができる。

多くの７ミノジカルポン酸はＤ−型およびし一型両方の
状態で存在する。また、Ｄ、　Ｌ型はもちろん、これら
の型を混合して用いてもよい、出発７ミノ融を選ぶこと
により、当然のこととして各異性体または異性体の混合
物が存在する生成物を製造することになる０本発明はそ
のようなすべての異性体の使用を意図するものであるが
、Ｌ−型のものは特に好ましい。

前記の化合物は、選ばれたアミノ酸と特定のテトラピロ
ールとのアミド生成反応を通常含む一般的なペプチド合
成方法により製造する。したがって、テトラピロールカ
ルボン酸のどのようなアミド生成誘導体も、上記の新規
なペプチドを生成する場合に使用することができ、その
ような誘導体の例としては低級アルキルエステル、無水
物および混合無水物がある。

好ましい生成方法においては、カルボン酸の混合無水物
またはカルポジイミＦが使用される。各反応体は適切な
溶媒中において単に接触させることにより反応する。こ
の場合、還流温度までの温度が用いられ、高い温度は単
に反応時間を短縮するにすぎない。しかしながら極度に
高い温度は、望ましくない副反応を引き起こす恐れがあ
るので好ましくない。

上記ペプチドを生成する方法は、この技術分野において
周知であり、後述の実施例において詳細に説明する。

選ばれたテトラピロールが２つ以上のカルボキシル基を
含む場合には、カルボキシル基の数および選定した反応
物の量によっても異なるが、異性モノペプチド生成物並
びにジ−およびトリ−またはそれ以上のペプチド生成物
さえも含む混合生成物が生成する。したがって、アミノ
酸とテトラピロールとの等モル混合物を反応させると、
モノペプチドのみならずジペプチドも得られる。ただし
この場合、モノペプチドの方が多量に生成する。

モル比が高い場合、生成物の性質はそれに応じて変化す
る。一般に公知のクロマトグラフィー技術を用いてモノ
ペプチドをそれよりも高位のペプチドから分離すること
は可能である。しかしながらそのような分離は不必要で
ある。なぜならば最終用途において混合ペプチドは通常
分離生成物と同等であるからである。したがって、同じ
テトラピロールのモノ−、ジ−およびトリ−ペプチドの
混合物を使用することは可能である。

通常未反応のテトラピロールは、精製中に１例えばクロ
マトグラフィー技術によって本発明のペプチド生成物か
ら分離する。

゛び 本発明の組成物は腫瘍、癌および悪性組Ｍ（以′下「腫
瘍」と称する）の光線診断および光線療法に有用である
。

腫瘍のある人間または動物に本発明の組成物を投与して
、適切な光線または電磁波を照射すると。

この化合物は光、即ち蛍光を発生する。これにより腫瘍
の存在、位置および大ささを測定できる。

即ちこれが光線診断である。

適切な波長および強度を有する光を腫瘍に照射すると、
上記化合物は活性化され、腫瘍に対して細胞死減作用を
及ぼす、これを「光線治療」という。

光線診断および光線治療を意図する化合物は、理想的に
は次の性質を有していなければならない：（ａ）光線に
よって活性化されない場合、および光線によって活性化
されるまでの開、正規の治療投与量において無毒である
こと： （ｂ）選択的に光線活性であること； （Ｃ）光線または電磁波を当てたとき、特異的な。

かつ測定可能な蛍光を発生すること； （ｄ）光線または電磁波を当てたとき、腫瘍に対して細
胞死減作用を及ぼす程度まで活性化すること；および （ｅ）治療後、容易に代謝または排出されること。

これまでの試験によると、本発明の新規な組成物に用い
る化合物は上記特性を宥すると共に、更に生理的Ｐ）ｌ
で生理食塩水中において適度な溶解性を特徴的に保有し
ている。

前記の化合物は、アミノモノカルボン酸、例えばアラニ
ンおよびイプシロンアミノカプロン酸によって生成され
たペプチドでさえ、対応する塩基性テトラピロールより
も腫瘍に対して大きな蛍光を発する。これらの化合物を
使用すると、腫瘍の周りの正常組織と比較して腫瘍部分
は最も対照的な差異を示す０本発明の化合物は６００〜
８００ナノメートルの好適な範囲内における光線治療用
活性エネルギーを吸収し、また好ましい化合物は８２０
〜７６０ナノメートルの範囲内における光線、即ち光線
治療目的のために腫瘍にエネルギーをより容易に浸透さ
せる長い波長の光線を吸収する。

この実験において、□本発明の化合物は、塩基性テトラ
ピロールよりも腫瘍全体にわたって均一に分布し、この
ため投与量をかなり少なくすることができる（塩基性テ
トラピロールの必要な正規投与量の約１／１Ｇまで）、
投与量を少なくできることは、もし上記化合物が排出さ
れなくても、宿主（ｈｏｓｔ）の光線感作を低下するこ
とになるので、意義のあることである。またこれら化合
物はより安定した蛍光を有するが、対応するテトラピロ
ールのいくつかは、ばらつきのある蛍光特性を示し、ま
たは蛍光が宿主内において日によって変化する。

本発明の化合物の特に有利な特性は、それらが宿主から
容易に排泄することができるという点である。一般的に
、静脈内投与または腹膜組織内投与から４８〜７２時間
後には、正常な筋肉組織内にほとんど存在せず、または
検出できないほどの量で存在するに過ぎない、前記化合
物は発色団がそのままの状態で注射投与後４８〜７２時
間以内に宿主の便から回収される。同じような状況のも
とにおいて、対応するテトラピロールはかなりの量が、
またモノカルボン酸によって生成されたペプチドは約２
０％以下の量が残存する。前記のような性質は宿主の光
線感作を減少させることができるので非常に重要である
。

本発明の組成物は広［囲にわたる腫瘍の診断および治療
に使用することができる。腫瘍の例としては、胃癌、ｎ
ｉ、肺癌、乳癌、子宮癌、食道癌。

卵巣癌、膵蔵癌、咽頭癌、肉腫、肝臓癌、膀胱癌、上顎
癌、胆管癌、苦痛、大脳腫瘍、皮膚癌、悪性甲状腺腫、
前立腺癌、耳下腺の癌、ホジキン病、多発性骨髄腫、腎
蔵癌、白血病および悪性リンパ細胞腫がある０診断に対
して唯一の要件は腫瘍が適切な光線にさらされた時、選
択的に蛍光を発することができることである。治療のた
めには、活性エネ；レギーがｐａ纂に浸透しなければな
らない。

診断の場合、短い波長の光線が用いられるが、治療目的
の場合、腫瘍組織への浸透を容易にするために長い波長
の光線が使用される。従って、テトラピロールの各特性
によるけれども、診断のためには゛３ｆｌＯ〜７８０ナ
ノメートルの光線が使用され、治療のためには８２０〜
７８０ナノメートルの光線が用いられる０本発明の新規
な化合物の吸収特性は原料たるテトラピロールと木質的
に同じである。

光線は化合物が診断用蛍光を発生し、かつ治療用の細胞
死減作用を及ぼすほど強いことが必要である。

光線診断用および光線治療用の照射源については限定し
ないが、レーザービームが好ましい、なぜならば、所望
の波長範囲内において強い光線を選択的に当てることが
できるからである０例えば光線診断の場合、本発明の化
合物は人間または動物の体内に投与され、一定の時間後
に検査すべき部位に光線を当てる。肺、咽頭食道、胃、
子宮、膀胱または直腸のような照射部位に内視鏡が用い
られると、その内視鏡を用いて照射が行われ、腫瘍部分
は選択的に蛍光を発生する。この部分は視覚によって観
察され、あるいはファイバースコープを通して目によっ
て観察され、もしくはＣＲＴスクリーン上に映し出され
る。

光線＃Ｉ！Ｊ！！の場合、化合物の投与後、レーザービ
ームを石英繊維の先端から照射する。腫瘍の表面を照射
すると共に、石英ｍ維の先端を腫瘍内に挿。

入して腫瘍の内部にも照射することができる。照射状態
は視覚により観察され、またはＣＲＴスクリーン上に映
し出される。

光線診断のためには、３８０から７８Ｏｎ−間の波長の
光線が本発明のテトラピロール化合物を活性化するのに
望ましい、当然のことながら、各化合物には特定の最適
活性化波長がある。光線診断のためには長い波長の光線
を放出する紫外線ランプが特に望ましい、処置を施した
腫瘍は、光線治療のところですでに述べた方法と同様に
して観察することができる。

本発明の新規な組成物に含まれる化合物の投与量は、所
望の効果、即ち診断のためか、または治療のためかによ
って異る０診断のためにはｌａｇ／ｋｇのわずかな量で
効果的であり、約７．５−ｇ／ｋｇまでの投与量が用い
られる。治療のための投与量は通常的０．５　ｍｇ／ｋ
ｇである。当然のことながら、診断′または治療に対す
る投与量は、本発明化合物のと記の有利な特性、例えば
その１つとして宿主から化合物を容易に排出することか
らみても広い範囲にわたっている。

本発明の化合物は診断または治療に用いられる投与量に
おいては明らかに無毒である。　２０　ｍｇ／ｋｇまで
の投与量を用いた実験において、実験動物は本発明の化
合物によって死亡するようなことはなかった。

診断および治療の両方に対して、本発明の化合物は、経
口的に、あるいは静脈内または筋肉内を経て投与するこ
とができる。これらは好ましくは墳墓性塩１例えばナト
リウム塩の形で凍結乾燥した無菌の、発熱物質を含まな
い化合物として製剤することができる。好ましい製剤形
態は注射可能な（等優性のある）溶液である。

本発明の化合物を含む腫瘍の治療に用いられる照射源と
しては、フィルターを通した強力な連続光源、励起した
色素または他のレーザーおよび送光システムがある。上
記照射源は次の制限内において実施することができる： すなわち、６２０〜７６０　ｎｍの波長において、２０
〜５００厘Ｗ／ｃｍ”の照射強度で、少なくとも５００
　ｍＷの全出力で行なう、現在市販されているいくつか
のレーザーはこれらの基準を満足するものである。

テトラピロールは文献にみられる種々の合成方法により
製造することができる０例えば、ニエ」」−二ニエｆ ウィルスタッタ−、アール、　（Ｗｉｌｌｓｔａｔｔｅ
ｒ、　Ｒ，）およびストール、ニー、　（Ｓｔａｌｌ、
　Ａ、）共著；インベスティゲイションズ・オン・クロ
ロフィル（Ｉｎｖｓｓヒｉｇａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　Ｃｈ
ｌａｒａｐｈｔｌｌ　：クロロ７４）しの研究）、〔訳
者：シェルツ、エフ、冒ム。

（ＳｃｈｅｒＬｚ、　Ｆ、　Ｍ、）およびメルツ、ニー
、アール。

（Ｍｅｒｚ、　Ａ、　Ｒ，）　）　、サイエンス・プリ
ンティング嗜プレス（Ｓｃｉｓｎｃｅ　Ｐｒｉｎｔｉｎ
ｇ　Ｐｒｅｓｓ）、ペンシル／＜ニア州ランカスター、
１９２８年、２４９頁。

ベニント７．　ｘｙ　、　シ＋、　（Ｐｅｎｎｉｎｇｔ
ｏｎ、　Ｆ、　Ｃ，）　。

ストレイン、エイチ、エイチ、　（Ｓｔｒａｉｎ、　Ｈ
，Ｈ，）、スベク、ダブリュ、エイ、　（Ｓずｅｃ、　
Ｗ、　Ａ、）およびカッツ、ジェイ、ジエイ、　（Ｋａ
ｔｚ、　Ｊ、　Ｊ、）　、　ジャーナル・才ブ・アメリ
カン・ケミカル・ソサエテ４　（Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｇ
ｈｅｔｓ、　Ｓａｃ、）　、　８８巻、１４１Ｂ頁、　
　ｌ！３６４年。

ムニＬヱｂ ウィルスタッタ−、アール、　（Ｗｉｌｌｓｔａｔｔｅ
ｒ、　Ｒ，）およびストール、ニー、　（Ｓｔａｌｌ、
　Ａ、）共著；インベスティゲイションズ・オン・クロ
ロフィル（Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　Ｃｈ
ｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　：クロロフィルのｌｅ）、ｕｎ：
シェルッ、エフ、エム。

（Ｓｃｈｅｒｔｚ、　Ｆ、　Ｍ、）および））Ｌｒッ、
　！　−、７−）Ｌｒ　。

（Ｍｅｒｚ、　Ａ、　Ｒ，）　）　、サイエンス・プリ
ンティング・プレス（Ｓｃｉｅｎｃｅρｒｉｎｔｉｎｇ
　Ｐｒｅｓｓ）、ペンシルバニア州ランカスター、　１
９２８年、１７Ｇ頁。

ウィルスタッタ−、アール、　（ＷｉｌｌｓｔａＨｅｒ
、　Ｒ，）およびアイスラー、エム、　（ｒｓｌｅｒ、
　Ｍ、）共著；アナレン・デル・ヘミ−（ＡｎＪｌ、　
Ｃｈｅｗ、）、３９０号、１９１２年、２６３頁。

フィッシャー、エイチ、　（Ｆｉｓｈｅｒ、　Ｈ，）お
よびハウムラ−、アー／Ｌ／　、　（Ｂａｕ＋ｗｌｅｒ
、　Ｒ，）共著；アナレン・デル・ヘミ−（Ａｎｎ、　
Ｃｈｅａｐ、）、４７４号、１９２３年、８５頁。

フィンシャー、エイチ、　（ＦｉＳｈｅｒ、　Ｈ，）お
よびシーヘル、　工４チ、　（Ｓｉｅｂｅｌ、　Ｈ，）
共著；アナレン・デル・・＼ミー（Ａｎｎ、　Ｃｈｅｗ
、）、４９！３号、１３３２年、８４頁。

コナント、ジェー、ビー、　（Ｃｏｎａｎｔ、　Ｊ、　
Ｂ、）およびメイヤー、ダブリュ、ダブリュ、（Ｍａ７
ｅｒ、　Ｗ、　Ｗ、）共著；ジャーナル・オン・アメリ
カン・ケミカル・ソサエテ４−（Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｃ
ｈｅｔｓ、　Ｓａｃ、）　、　５２号、１９３０年、　
３０１３頁。

Ｌニュヱ３ アイスラ＋　−、ｚ　４チ、　（Ｆｉｓｈｅｒ、　Ｈ，
）、ヘックメイヤー、ジェイ、（Ｈｅｃｋｍｅｉｅｒ、
　Ｊ、）およびプロッツ、イー、　（Ｐｌａｔｚ、　Ｅ
、）　、　Ｊｕｓｔｕｓ　Ｌｅｉｂｉｇｓ　Ａｎｎ。

Ｃｈａｔｓ、、　　５００．　２１５．　　Ｉ！？３３
　　午。

７４　ラシャ−（Ｆｉｓｈｅｒ）およびオース（Ｏｒｔ
ｈ）共著、「デス・ヘミ−・デス・ピロールＪ　（ＤＩ
！Ｓ　Ｃｈｅ囚１ｅｄｅｓ　Ｐ７ｒｒｏｌｅ　：　ピロ
ールの化学）、アカデミッシェ・フェルラツゲゼルシャ
フト（ＡｋａｄｅｔｒｊｓｃｈｅＶｅｒｌａｚｓｇｓｓ
ｅｌｌｓｃｈａｆｔ）、　ライプチヒ（Ｌｅｉｐｚｉｇ
）、■巻、２部、１９４０゜ ボルフ　リンについ　　−　・な 「ポルフィリンズ・アンド・メタロポルフィリンズＪ　
（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｎｓ　ａｎｄ　Ｍｅｔａｌｌｏｐｏ
ｒｐｈ７ｒｉｎｓ：ポルフィリンとメタロポルフィリン
）、ケビン・エム。

スミス（Ｋｅｖｉｎ　Ｍ、　Ｓａ＋ｉｔｈ）ｍ、Ｘ、）
Ｌｔザビア（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）１９７５、ニューヨー
ク。

本発明の化合物は選ばれた投与経路、即ち経口、静脈、
筋肉または皮下の経路から１種々の形で宿主に投与する
ことができる。

活性化合物は例えば不活性な希釈剤と共に、または同化
性可食キャリアーと共に経口投与してもよく、または硬
質もしくは軟質外被のゼラチンカプセルに封入してもよ
く、または錠剤状に圧縮してもよく、または食品に直接
混入してもよい、経口治療投与の場合、活性化合物は賦
形剤に混入することができ、かつ消化吸収可能な錠剤、
口腔袋、トローチ剤、カプセル剤、甘味チンキ剤、懸濁
剤、シロップ、ウェファ−等の形で使用することもでき
る。そのような組成物および製剤は少なくともＯ，ｔＸ
の活性化合物を含んでいなければならない。

組成物および製剤の含有割合は当然変化し、好都合な割
合は単位重量の約２〜約６０％の範囲内にある。そのよ
うな治療学的に有用な組成物中における活性化合物の量
は、所望の投与量を服用させるような量である０本発明
の好ましい組成物または製剤は、経口投与型単位製剤が
約５０〜３００ｅｇの活性化合物を含むように調製する
。

錠剤、トローチ剤、丸薬、カプセル剤等はざらに次のも
のを含むことができる。トラガカントゴム、アラビアゴ
ム、トウモロコシデンプンまたはゼラチンのような結合
剤；リン酸二カルシウムのような賦形剤；トウモロコシ
デンプン、ジャガイモデンプン、アルギンｍ等のような
崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような間層剤；お
よび蔗糖、ラクトースまたはサッカリンのような甘味料
を加えることができ、またはペパーミント、冬緑油また
はサクランボ香料のような香料も加えることができる。

投与製剤の単位形態がカプセルである時、それは上記原
料の外に液体キャリアーを含むことができる。剤皮物質
（コーティング剤）として、または投与製剤の物理的な
単位形態を変更するために、種々の他の原料を用いるこ
とができる０例えば、錠剤、丸薬またはカプセルはシェ
ランク、糖またはこれらの両方で被覆することができる
。シロップまたは甘味チンキ剤は活性化合物、甘味料と
してＭ糖、防腐剤としてメチルおよびプロピルパラベン
、染料およびサクランボまたはオレンジ香料のような香
料を含むことができる。当然のことながら、投与単位製
剤を製造する際に用いられる原料はいずれも薬学的に純
粋であり、使用量において実質的に無毒でなければなら
ない。

さらに活性化合物は持効性製剤および配合物に混入する
こともできる。

また、活性化合物は非経口的にまたは腹腔内に投与する
こともできる。遊離の塩基または薬学的に容認可能な塩
としての活性化合物の溶液は、水中においてヒドロキシ
プロピルセルロースのような界面活性剤と混合すること
により調製することができる０分散剤もまたグリセロー
ル、液体ポリエチレングリコールおよびこれらの混合物
並びにオイル中において調製することができる。貯蔵お
よび使用の際の一般的な条件の下にあっては、これら製
剤は微生物の成長を防止するために防腐剤を含んでいる
。

注射用の望ましい薬学的形態としては、無菌の水溶液ま
たは分散剤および無菌の注射可能溶液または分散剤の即
席用無菌散剤がある。あらゆる場合、製剤は無菌状態で
なければならず、また注射器に容易に適用できる程度ま
で流動性がなければならない、製剤は製造および貯蔵の
条件の下で安定でなければならず、かつ細菌およびカビ
のような微生物の汚染から保護しなければならない、キ
ャリヤーは１例えば水、エタノール、ポリオール（例え
ばグリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリ
エチレングリコール等）、それらの望ましい混合物およ
び植物油を含む溶媒または分散媒である。適切な流動性
は５例えばレシチンのような剤皮物質を使用することに
よって、分散剤の場合には所望の粒度を保持することに
よって。

および界面活性剤を使用することによって維持すること
ができる。微生物の作用は種々の抗菌剤おヨヒ防カビ剤
、例えばパラベンス、クロロブタノール、フェノール、
ソルビン酸、チメロサール等によって防止することがで
きる。多くの場合、等張剤、例えば糖または墳化ナトリ
ウ与を含むことが好ましい、注射可能組成物の吸収は組
成物中において吸収を遅らせる薬剤、例えばモノステア
リン酸アルミニウムおよびゼラチンを使用することによ
り長引かせることができる。

無菌の注射可能溶液は適当な溶媒中に上記のような種々
の他の成分と共に所定量の活性成分を混入し、さらに必
要があればシ濾過殺菌を行うことにより調製する。一般
的に、分散剤は墳墓性分散媒および上記成分のうちの必
要なものを含む無菌ビヒクルに種々の殺菌した活性成分
を混入することにより調製する。無菌の注射可能溶液を
調製するために用いる無菌散剤の好ましい調製方法は、
あらかじめ無菌、濾過した溶液から活性成分およびその
他の望ましい成分の粉末を生成する減圧乾燥および凍結
乾燥技術である。

本発明の新規な化合物は、宿主のＩｌ！瘍に対して、そ
れが内部に生じたものあるいは外部に生じたもののいず
れでも、局所性組成物として直接適用することかでさる
０例示的な組成物としては、＃媒。

特に水性溶媒、さらに好ましくは水を用いた新規化合物
の溶液がある。別な態様として、局所性組成物を特に皮
膚の腫瘍に用いる場合、本発明の新規な化合物は、この
目的のために一般的に使用される通常のクリームまたは
軟膏の形態に分散し、またはエアロゾルの製造において
一般的に使用される噴射剤を含むスプレー溶液またはｇ
ｙＢ液の形で使用できる。

本発明において用いられている「薬学的に容認可能なキ
ャリヤー」としては、すべての溶媒１分散媒、剤皮物質
、抗菌剤、防カビ剤、等張剤、吸収遅延剤等がある。薬
学的活性物質用のそのような媒質および薬剤の使用は、
この技術分野において周知である。従来のどんな媒質ま
たは薬剤でも、活性成分と配合禁忌である場合を除けば
、上記治療組成物中において使用することが可能である
。

補助活性成分もまた組成物に混入することができる。

容易にかつ均一に投与することができる形に非経口組成
物を調剤することは特に有益である。ここに用いられて
いる投与単位形態という用語は。

治療すべき哺乳動物に対する単位投与量としてふされし
い物理的に別々の単位製剤を指称する。各単位製剤は所
望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性
成分を必要な薬学的キャリヤーと共に含んでいるもので
ある０本発明の新規な化合物の投与単位製剤の形態は、 （ａ）活性成分の独特な特徴および達成すべき特別な治
療効果、および （ｂ）生物体の腫瘍を治療するための活性成分を配合す
る技術に固有の限定要件などによって定まり。

かつそれらにより直接左右されるものである。

実施例１ １４０　ｍｇのトランスメソクロリンおよび２００　ｒ
ａｇの（Ｄ、Ｌ）アスパラギン酸ジメチルエステルハイ
ドロクロライドを３０１のジメチルホルムアミド中に溶
解した。　３００　ｍｇのＮ、Ｎ’−ジシクロへキシル
カルボジイミドを添加した０反応物を１時間静置し。

次に他の３００−ｇのカルボジイミドを加えた。この操
作を２回繰り返し、反応混合物を１晩静置した。

ベンゼン／メタ／　−ル／８８％ギ酸＋７）　８．５／
１．５１０．１３Ｖ／Ｖ／Ｖ溶媒を使用して、シリカの
薄層クロマトグラフィにより反応を監視した。

二置換クロリンのＲ１値は最高であり、非置換クロリン
のＲ１値は最低であった。一方、−置換異性体はそのφ
間であり、分離しなかった。

−晩装置した後、反応混合物は少なくとも５（Ｈの二置
換クロリンを含んでいた。真空により溶媒を除去し、残
渣を５０１の３Ｎ　ＭＣＩに溶解した。

溶液を室温で４８時間静置しエステル基を加水分解し、
クロリン混合物をｐＨ２，５−３で沈澱させ。

それを収集し遠心分離機で水により洗浄した。

クロリン混合物を０．０５　Ｍ　Ｎ）１．ＯＨに溶解し
、逆相（ｃ−ｔｅシリカ）カラム２．５　ｃｍ　Ｘ　３
０　ａｍにより精製した。なお０．０１　ＭにＰ０４緩
衝−＊（ＰＨｆｌ、８５）中４０〜７０％メタノール（
全容量１皇）の直線傾斜溶離法により溶離した。

最初の緑色の帯域〔ジ〔口、Ｌ）アスパルチルトランス
メソクロリン■〕を収集し、メチルアルコールをフラッ
シュ蒸発により除去し、次に溶液をｐＨ２，５−３で沈
澱させ、沈澱を収集し遠心分離機を用いて稀酢酸で３回
洗浄した。生成物を次に真空中で乾燥した。ジ（Ｄ、ｌ
、）アスパルチルトランスメソクロリン■の収量は８７
　ｍｇであった。

実施例２ ５０　ｒｓｇ　（（Ｊ、００００８７モル）のトランス
メソクロリン■を１００１のテトラヒドロフラン（ＴＨ
Ｆ）に溶解した。２１Ｏ終１　（０，００２モル）のト
リエチルアミンを撹拌しつつ添加した。　１０分後１９
５ルＩ　（０，００１７９モル）のクロロギ酸エチルを
加えた。　１０分間撹拌した後、　２５０　ｍｇ　（０
，００１６９モル）の（［、）グルタミン酸を含有する
５０　ｍｌ　（０，０１モル）の０．２　Ｍ　ＫＯＨを
、ＴＨＦ溶液に撹拌しながら滴下した。この混合物を室
温で６０分間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＧにかけて生成物を調べた。この場合。

ベンゼン／メタノール７８８％￥ｆｉ（８，５／１．５
１０．１３）を使用してクロマトグラムの展開を行った
。

生成物を調べた後、溶液をｐＨ７，５〜８．０に調整し
、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ　３０　ｃｍ
に導入した０反応混合物はｐＨ８，８５のＱ、Ｑ口ＫＰ
Ｏ４緩衝液中４０〜８０％メタノール（全容量ｌｉ）の
直線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクシ璽ンコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。溶離の順序はジ（Ｌ）
グルタミルトランスメソクロリン■、モノ（Ｌ）グルタ
ミルトランスメソクロリン■および非置換トランスメソ
クロリン■であった。

メタノールをフラッシュ蒸発し、　ｐ）１２．５〜３．
０で生成物を沈澱させた。沈澱は酢酸の接水溶液で３回
洗浄した０次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例３ ３１３．４■ｇのホトプロトポルフィリン■の異性体混
合物を１００１のテトラヒドロフラン（丁ＨＦ）に溶解
した。２１Ｏμｍのトリエチルアミンを撹拌しつつ加え
た。１０分後、２１０ｐｌのクロロギ酸エチルを加えた
。更に１０分撹拌した後、４５０　ｍｇの（Ｄ、Ｌ）ア
スパラギン酸を含有する５０腸１の０．２１’ｌ　ＫＯ
）ＩをＴ）ＩＦ温溶液加えた。混合物を室温で１時間撹
拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合。

ヘンセフ／　）　夕／　−ル／８ＨキｊＫＦ（８，５／
１．５１０．１３）を使用してクロマトグラムの展開を
行った。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、・逆相（Ｃ−１８シリカ）カラＡ　２．５Ｘ３０　
ａｍ　ニ導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０
１　Ｍ　ＫＰＯ４緩衝液中４０〜８ｏｚメタノール（全
容量１文）の直線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をクラクシ１ンコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐＨ３，０〜３．５で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の接水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

モノ（Ｄ、Ｌ）アスパルチルホトプロトポルフィリン■
の収量は５４　ｍｇ　、ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチルホト
プロトポルフィリン■の収量は２２７．８　ｍｇであっ
た。

実施例４ １００　ｍｇノプロトボルフイリンｆｌをｔｏｏ　１ｔ
（７）Ｐ−ジオキサンに溶解した。　　２１０ＪＪ、Ｉ
のトリエチルアミンを加えた。　１０分攪拌した後、５
００　ｔａｇの（Ｌ）アスパラギン酸を含む５０履ｌの
０．２にＫＯＨをジオキサン溶液に加えた。混合物を室
温で１時間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、へ７　セフ／
　）　夕／　−ル／８８％　！ｆｍ＜８．５／１．５１
０．１３）を使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ−ｔＳシリカ）カラム２．５Ｘ　３０　ｃ
ｔｓに導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１
１１１　ＫＰＯ。

緩衝液中４０〜７ｏｚメタノール（全容量ｔｉ）の直線
傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ＰＨ２，５〜３．０！
生我物を沈澱させた。沈澱は酢酸の接水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

モノ（Ｌ）アスパルチルプロトポルフィリン■の収量は
１２．３　ｍｇ　、ジ（Ｌ）アスパルチルプロトポルフ
ィリン■の収量は５４　ｍｇであった。

実施例５ ２００　ａ＋ｇのメンポルフィリン■を１００１のテト
ラヒドロフラン（Ｔ）ＩＦ）に溶解した。　　２１０ル
ｌのトリエチルアミンをＴ）ＩＦ温溶液加えた。　１０
分撹拌した後、　２１０ＪＬｌのクロロギ酸エチルを加
え、更に１０分撹拌した。５００　ｍｇの（Ｌ）アスパ
ラギン酸を含む５０ｍ１の０．２８　ＫＯＩ（をＴＨＦ
溶液に添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。

有機溶媒を７ラツシユ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、＜　ンｔ’　
ｙ／　）　タ／−ｋ１８８％ギ酸（１１，５／１．５１
０．１３）を使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．Ｑに調整
し、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３Ｑ　ｃｔ
ｓに導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１に
ＫＰＯ。

緩衝液中４０〜８０％メタノール（全容量１１）の直線
傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

メタノールをフラッシュ蒸発し、　ＰＨ３，０〜３．５
で生成物を沈澱させた。沈澱は酢酸の接水溶液で３回洗
浄した０次に生成物を真空中で乾燥した。

モノ（Ｌ）アスパルチルメソクロリンの収量は４１．５
月、ジ（Ｌ）アスパルチルメソクロリンの収量は１７５
．１　ｍｇであったー 実施例６ １０（ｌ　ｍｇのジューテコポルフィリン■を５０　ｍ
ｌ　のｐ−ジオキサンに溶解した。　　２１（ｌＩＬ＋
のトリエチルアミンを撹拌しつつ加えた。　１０分後２
１０ＩＬｌのクロロキ酸イソブチルを加えた。１０分撹
拌した擾。

５００　ｌａｇの（Ｌ）アスパラギン酸を含む５０ｍ１
　の０．２Ｍ　ＫＯＨをジオキサン溶液に加えた。この
混合物を室温で１時間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ１反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、ヘンセン／メ
タノール／８８ｚキ酸（８，５／１．５１０．１３）を
使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３Ｑ　ｃｍ
　ニ導入した１反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１　
Ｍ　ＫＰＯ４緩衝液中４０〜７０％メタノール（全容量
１文）の直線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクシ盲ンコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐＨ２，５〜３．０で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の槽水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

モノ（Ｌ）アスパルチルジューテロポルフィリン■の収
量は１０　Ｂであった。

実施Ｈ７ ８０腸ｇのどロアニオホーバイト！を１００１１のテト
ラヒドロフラン（ＴＨＦ）に溶解した。２１Ｑｈｌのト
リエチルアミンをＴＨＦ溶液に加えた。１０分撹拌した
後、　　２１０ＪＬＩのクロロギ酸エチルを加え、更に
１０分撹拌した。　５００　ｍｇの（Ｌ）アスパラギン
酸を含む５０１の０．２８　ＫＯＨをＴＨＦ溶液に加え
、混合物を室温で１時間撹拌した。

＃４機溶媒をフラッシュ蒸発させ１反応混合物をシリカ
ＴＬＧにかけて生成物を調べたにの場合。

ヘンｔ−’　７／　ｆｉ　タ／　−ル／８１１２　＄ｍ
（８，５／１．５１０．１３）を使用してクロマトグラ
ムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ’−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３０　ｃ
ｒｌに導入した。反応混合物はｐＨ１３，１１５のＱ、
ＱＩ　Ｍ　ＫＰＯ。

緩衝液中４０〜８ｏｚメタノール（全容量ＩＬ）の直線
傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクシ璽ンコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐＨ３，０〜３，５で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の槽水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

（Ｌ）アスパルチルピロフェオホー八イド３の収量は６
２ＩＩ１ｇであった。

実施例８ １５０　’　ｒｎｇのコブロポルフィリン■を１００　
ｍｌのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に溶解した。２１
０ｐｌのトリエチルアミンを加え撹拌を２０℃で１０分
間継続した。　　２１０ｕＬｌのクロロギ酸エチルを加
え更に１０分間撹拌した。

２５０　ｍｇの（Ｄ　、Ｌ）アスパラギン酸を含む５０
　ｌ１ｌｌの０．２　Ｍ　ＫＯ）［をＴ）ＩＦ　、溶液
に加え、その混合物を室温で１時間撹拌した。

有機溶媒を７ラツシユ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、ベンゼン／メ
タノール／８８ナギ＃（８，５／１．５１０．１３）を
使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のＰＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２−５Ｘ　３０　ｃ
ａに導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１　
Ｍ　ＫＰＯ４緩衝液中５〜５０％メタノール（全容量１
見）の直線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクシ□ンコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐＨ３，０〜３．５で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の槽水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

収ｌは次の通りであった。テトラ（Ｄ、Ｌ）アスパルチ
ルコブロボルフィリンｍ　８４　ｔａｇ、　　トリ（Ｄ
、Ｌ）アスバＪレチルコプロホルフィリンＩｌｌ　７７
．２　Ｂ、およびジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチルコプロポル
フィリン■２８．４　ｍｇｍ 実施例９ １７５　ｍｇ　（０，００１９５モル）のジューテロポ
ルフィリン■を２００１のテトラヒドロフラン（Ｔｌ（
Ｆ）に溶解した。　　２１０終＋　（０，００２モル）
のトリエチルアミンを撹拌しつつ加えた。

１０分撹拌した後、２１０ルｌ　（０，００１！３モル
）のクロロギ酸エチルを加えた。更に１０分撹拌した後
。

２００　ｍｇ　（０，００３モル）の（Ｄ、Ｌ）アスパ
ラギン酸を含む５０１（０，０１モル）の０．２　Ｍ　
ＫＯＨをＴＨＦ溶液に撹拌しつつ滴下した。この混合物
を室温で１時間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ１反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、＜　７−ｔ／
　７／　）　’）　／−）Ｉｉ／８８％ギ酸（８，５／
１．５１０．１３）を使用してクロマトグラムの展開を
行った。

生成物を調べた後混合物のＰＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（ｃ−ｉａシリカ）カラム２．５Ｘ　３０　ａ
ｍに導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１　
Ｍ　ＫＰＯ４緩衝液中４０−？　８５％メタノール（全
容量１文）の直線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をクラクシ１ンコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチルジューテロポ
ルフィリン■、モノ（＋）、Ｉ、）アスパルチルジュー
テロポルフィリン■および非置換ジューテロポルフィリ
ン■であった。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐＨ２，５〜３．０で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の接水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１０ ４００　＋＊ｇ　（０，０Ｇ５９モル）のヘマトポルフ
ィリン■を５０１のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に溶
解した。

３８０弘１　（０，００３４モル）のトリエチルアミン
を撹拌し°つつ加えた。　１０分後、　３４０ルＩ　（
０，００３１モル）のりσロギ酸エチルを加えた。　１
０分撹拌した後、６００邦（０，００４５モル）の（Ｄ
、Ｌ）アスパラギン酸を含む１０　ｍｌ　（０，０１モ
ル）のｌ　Ｍ　ＫＯ）ＩをＴ）ＩＦ溶液に加えた。この
混合物を室温で９０分間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、ベンゼン／メ
タノール／８８ｚギ酸（８，５／１．５１０．１３）を
使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃニー１８シリカ）カラム２．５Ｘ　３０　
Ｃｍに導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１
１４　ＫＰＯ４緩衝液中２０〜７０％メタノール（全容
量１文）の直線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液を２ラクシ迩ンコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチルヘマトポルフ
ィリン■、モノ（Ｄ　、Ｌ）アスパルチルヘマトポルフ
ィリン■および非置換へマドポルフィリン■であった。

メタノールをフラッシュ蒸発し、　ｐＨ２，５〜３．０
で生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の接水溶液で３回洗
浄した０次に生成物を真空中で乾５燥した。

実施例１１ ３００　ｍｇ　（０，０００５３％Ｊし）　ノブａトポ
ルフイリン■を１００　ｍｌのテトラヒドロフラン（Ｔ
Ｉ（Ｆ）に溶解した。２１０牌１　（０，００２モル）
のトリエチルアミンを撹拌しつつ加えた。　１０分後、
２１０ルＩ　（０，００１９モル）のクロロギ酸エチル
を加えた。１０分撹拌した後、４５０国ｇ　（０，００
３３モル）の（Ｄ　、Ｌ）アスパラギン酸を含む５０　
ｍｌ　（０，０１モル）の０．２　Ｍ　ＫＯＨをＴＨＦ
溶液に撹拌しつつ加えた。この混合物を室温で１時間撹
拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、へ７　セｙ　
／　ｆｉ　９　／　−ＪＬ／／　８８％ギ酸（８，５／
１．５７０．１３）を使用してクロマトグラムの展開を
行った。

生成物を調べた後、溶液のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｉｌｌニー１８シリカ）カラム２．５Ｘ３０
　ｃｍに導入した０反応混合物はｐＨｆｌ、ｌ１５の０
．０１　Ｎ　ＫＰＱ。

緩衝液中４０〜６５駕メタノール（全容１　ｔｉ）の直
線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジ（Ｄ、Ｌ）　７スバルチルプロトポル
フイリン■、モノ（Ｄ、Ｌ）アスパルチルプｅｆトホル
フィリン■および非置換プロトポルフィリンＩＸである
。

メタノールをフラッシュ蒸発し、＄ｌＨ２，５〜３．０
で生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の接水溶液で３回洗
浄した０次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１２ １００　ｍｇ　（０，０００１８７モル）のピロフェオ
ホーバイトａを１００１のテトラヒドロフラン（Ｔ）Ｉ
Ｆ）に溶解した。　　２１０＃Ｌｌ　（０，０Ｏ２モル
）のトリエチルアミンを撹拌しつつ加えた。１０分後２
１０ＩＬｌ（Ｑ“、００１９モル）のクロロギ酸エチル
を加えた。　１０分撹拌した後、２００　Ｂ　（０，０
Ｑ１５モル）の（Ｄ、１．）アスパラギン酸を含む５０
■Ｉ　（０，０１モル）の（１，２Ｎ　ＫＯＨ４をＴＨ
Ｆ溶液に加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ１反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合。

ヘンゼｙ／　ｌ　Ｐ　／　−ｔｔｔ１８８１４′ｍ（８
，５／１．５１０．１３＞を使用してクロマトグラムの
展開を行った。

生成物を調べた後、溶液のＰＲを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ−ｔＯシリカ）カラム２．５Ｘ３０　ｃ■
に導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．Ｑｌ　ｌ
’ｌ　ＫＰＯ。

緩衝液中４０〜＄０３メタノール（全容量１文）の直線
傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、モノ（Ｄ、Ｌ）アスパルチルピロフェオ
ホーバイトａで１次に非置換ピロフェオホーバイトであ
った・ メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐｌ（２，５〜３．０
で生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の接水溶液で３回洗
浄した６次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１３　　　゛ ５００　Ｂ　（０，００００８７モル）のトランスメソ
クロリン■を１００１のテトラヒドロフラン（Ｔ）ＩＦ
）に溶解した。２１０濤１　（０，００２モル）のトリ
エチルアミンを撹拌しつつ加えた。１０分後、２１０牌
１　（０，００１９モル）のクロロギ酸エチルを加えた
。　１０分撹拌した後、２５Ｇ　＋ｓｇ　（０，００１
５５モル）のし−α−７ミノアジピン酸を含む５０　ｍ
ｌ　（０，０１モル）の０．２　Ｍ　ＫＯＨをＴ）ＩＦ
温溶液撹拌しつつ滴下した。この混合物を室温で１時間
撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＧにかけて生成物をｔｉｌへた。この場合、ベンゼン
／メタノール／８８ｔギ酸（８，５／１．５１０．１３
）を使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３Ｑ　ｃｍ
に導入した０反応混合物はｐＨ８，８５のＱ、０１　Ｍ
　ＫＰｏ。

１１液中４０〜ａｏ＄　メｐ　／−ル（全１１　ｔｌ　
）ａ線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジＬ−α−７ミノアジビルトランスメソ
クロリン■および非置換トランスメソクロリンＩＸであ
る。

メタノールをフラー２シュ蒸発し、ＰＨ２，５〜３．０
で生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の積木溶液で３回洗
浄した０次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１４ ２００層ｇ　（０，０００３５モル）のメソポルフィリ
ン■をＩ（１１ｍｌのテトラヒドロフラン（Ｔ）ＩＦ）
に溶解した。

２１Ｑｐ！　（０，００２モル）のトリエチルアミンを
撹拌しつつ加えた。　１０分後、２１０１Ｌｌ　（０，
００１９モル）のクロロギ酸エチルを加えた。　１０分
撹拌した後、５００　ａ＋ｇ　（０，００３８モル）の
（０）アスパラギン酸を含む５０　ｍｌ　（０，０１モ
ル）の０．２　Ｍ　ＫＯＨをＴＨＦ溶液に撹拌しつつ滴
下した。この混合物を室温で１時間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、ベンゼン／　
ｌ　タ／−に／８Ｂ％キ酸（８，５／１．５１０．１３
）を使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のＰ）Ｉを７．５〜８．０に調
整し、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３０　ｃ
ｍに導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１　
Ｍ　ＫＰＯ。

緩衝液中４０〜４８にメタノール（全容量１！Ｌ）の直
線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジ（Ｄ）アスパルチルメソポルフィリン
■、モノ（０）アスパルチルメンポルフィリン■および
非置換メンポルフィリン■であった。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐＨ２，５〜３．０で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の接水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１５ ４００鳳ｇ　（０，００７モル）のメンポルフィリン■
を５０１のテトラヒドロフラン（丁ＨＦ）に溶解した。

３６０ＪＬ　ｌ　（０，００３５モル）のトリエチルア
ミンを撹拌しつつ加えた。　１０分後、３４０μＩ　Ｃ
０，００３１モル）のクロロギ酸エチルを加えた。１ｏ
分撹拌した後、５４３−ｇ　（０，００３８９モル）の
（Ｌ）グルタミン酸を含む１０■ｌ　（０，ｏｔモル）
のｌ　Ｍ　ＫＯ）Ｉ　ＩＴ）ＩＦ溶液に加えた。この混
合物を室温で１時間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ１反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、ベンゼン／メ
タノ−／Ｉ／／　８Ｈギ酸（８，５／１．５１０．［）
を使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のＰＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３０　ｃｍ
に導入した０反応混合物はｐＨ８，８５の０．０１　Ｍ
　ＫＰＯ。

緩衝液中２５〜Ｂｏｚメタノール（全容量Ｉｆ）の直線
傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジ（Ｌ）グルタミルメソポルフィリン■
、モノ（Ｌ）グルタミルメンポルフィリン■および非置
換メンポル２イリン■であった。

メタノールを２ラッシュ蒸発し、ＰＨ２，５〜３．０で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢諌の接水溶液で３回洗浄
した０次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１６ ５０　ｔｓｇ　（０，００００８７モル）のトランスメ
ソクロリン■を５０１の１．４−ジオキサンに溶解した
。　　２１０．１　（０，００２モル）のトリエチルア
ミンを撹拌しつつ加えた。　１０分後２１０牌１　（０
，００１９モル）のクロロギ酸エチルを加えた。１０分
撹拌した後、５００　Ｂ（０，００３８％ｊＬ、）　＋
７）　（Ｄ）７スパラキン酸を含ム５０ｍ１（０，０１
モル）の０．２　Ｍ　ＫＯＨをＴＨＦ溶液に撹拌しっつ
加えた。この混合物を室温で１時１ｉＪＩ撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ１反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合、ヘンゼア／　
／ｌ　タンール／８８％ギ＠（８，５／１．５１０．１
３）を使用してクロマトグラムの展開を行った。

生成物を調べた後混合物のｐｌ（を７．５〜８．０に調
整し、逆相ＣＣ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３０　ｃ
ａｒに導入した０反応混合物はＰ）Ｉ　８．８５の０．
０１　Ｍ　ＫＰＯ。

緩衝液中４０〜８ｏｚメタノール（全容量１文）の直線
傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジ（Ｄ）７スパルチルトランスメソクロ
リン■、モノ（Ｄ）アスパルチルトランスメソクロリン
■および非置換トランスメンクロリン■であった。

メタノールをフラッシュ蒸発し、　ｐＨ２，５〜３．０
で生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の接水溶液で３回洗
浄した０次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１７ １３５　ｍｇ　（０，０Ｑ０２３モル）のトランスメン
クコリン■を１００１のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）
に溶解した。２１０鉢１　（０，０Ｑ２モル）のトリエ
チルアミンを撹拌しつつ加えた。１０分後２１０　ｈ　
ｌ　（０，００１８モルンのクロロギ酸エチルを加えた
。　１０分撹拌した後、７５０ｍｇ　（Ｑ、（１０５６
モル）の（Ｌ）アスパラギン酸を含む５０　ａ＋Ｉ　（
０，０１５モル）の０．３　Ｍ　ＫＯＨをＴ）ＩＦ溶液
に撹拌しつつ滴下した。この混合物を室温で１時間撹拌
した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、反応混合物をシリカＴ
ＬＣにかけて生成物を調べた。この場合。

ベンゼン／メタノ゛−ル／８８＄ギ＠（８，５／１．５
ＩＱ、Ｌ３）を使用してクロマトグラムの展開を行った
。

生成物を調べた後混合物のｐＨを７．５〜８．０に調整
し、逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５Ｘ３０　ａｍ
に導入した８反応混合物はｐ）Ｉ　Ｂ、８５の０．０１
　Ｍ　ＫＰＯ４緩衝液中４０〜８０ｇメタノール（全容
ｉｆ文）の直線傾斜溶離法により分離した。

カラムの溶出液をフラクションコレクターにより収集し
、管の内容物を成分毎に集めた。

溶離の順序は、ジ（Ｌ）アスパルチルトランスメソクロ
リン■、モノ（１，）アスパルチルトランスメソクロリ
ン■および非置換トランスメソクロリン■であった。

メタノールをフラッシュ蒸発し、ｐＨ２，５〜３．０で
生成物を沈澱させた。沈澱を酢酸の積木溶液で３回洗浄
した１次に生成物を真空中で乾燥した。

実施例１８ ５５　ＢのフェオホーバイトＡを１０１のジメチルホル
ムアミドに溶解した。　５Ｑ　ｒａｇの（Ｄ、Ｌ）アス
パラギン酸ジメチルエステルジハイドａクロライドを加
え、次に１００　ｍｇのＮ、Ｎ’−ジシクロへキシル−
カルボジイミドを加えた１反応混合物を暗室で室温にお
いて１時間静置した。

次に５０　ｒａｇのカルボジイミドを更に加えた。１時
間撹拌した後、５０　ｍｇのカルボジイミドを更に加え
、反応混合物を室温暗所で１２時間静置した。

溶媒を真空下で除去し、生成物を０．５１の水と共に５
０１の１１　ＫＯＨメタノール溶液に溶解し、室温暗所
で静置した。加水分解の進捗状態を薄層クロマトグラフ
ィ　（Ｃ−１８プレート、溶媒：　７５／２５のメタノ
ール１０．０１　Ｍ　ＫＰＯ４、ｐＨ８，８５緩衝液）
で追跡した。

エステル基の加水分解が実質的に完了したとき、数滴の
氷酢酸を加えて反応を停止した。メタノールを真空中で
除去し、生成物を２０　ｍｌの０．１１１ＮＨ４０Ｈに
溶解した。この溶液を逆相（Ｃ−ｔＢシリカ）カラム　
（１，５ｃ＋ｓＸ　３０　ｃｍ）に導入した。溶離はｐ
）１６．８５（１）０．０１　Ｍ　ＫＰＯ４緩衝液中５
０〜８０％　）　’）　／　−ル（全容量　１文）によ
る直線傾斜溶離法により行った。

最初の灰緑色の帯域は（Ｄ、Ｌ）７スバルチルフエオホ
ーパイー乍゛１を含んでおり、これを収集し、メチルア
ルコールをフラッシュ蒸発して、ＰＨ３で沈澱させた。

沈澱を集め、酢酸の積木溶液で３回洗浄した。乾燥生成
物の収量は２７　ｍｇであった。

実施例１９ １５０　ｔａｇのクロリンｅ６および２５０　ｍｇのＬ
−７スバラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−プチルエステルハイド
ロラロライドヲ２０ｍ１のジメチルホルムアミドに溶解
した。

１時間毎に合計３〜１００　ｍｇのＮ、Ｎ’−ジシクロ
へ午ジルカルボジイミドを加えた。４時間後１反応混合
物を３００　ｍｌのエーテルで希釈し、　２００　ｍｌ
の水で２回洗浄し、４０１のｌ　Ｍ　ＫＯ）Ｉで抽出し
た。このＫＯＨ溶液を一晩加水分解し、７０℃で１０分
間加熱した。

溶液のｐＨを７に２１！ｌＷ１シ、フラッシュ蒸発によ
り残留エーテルを除去した０次に溶液を逆相（Ｃ−１８
シリカ）カラム（１，５ｃ履ｘ　３０ｃｍ）に導入した
。生成物をメタノールおよびｐＨ８，８５の０．０１Ｍ
　ＫＰＯ４の緩衝液で段階的溶離法によりｊ＃製した。

望ましくない極性色素を除去するまで、５エメタノール
で溶離を行ない１次にモノアスバルチルクロリンｅ６を
６〜８χメタノールで溶離し、未反応のクロリンｅ６を
２５にメタノールで溶離した。

簡単にフラッシュ蒸発を行なってメタノールを除去した
後、ｐＨ３で生成物を沈澱させ、その後遠心分離機にお
いて希酢酸で３回洗浄した。

減圧下で生成物を乾燥した。モノ（Ｌ）−７スバルチル
クロリンーの収量は５０　ｔａｇであった。

実施例２０ Ｌ−グルタミルクロリンｅ　カルボジイミド１１０　ｍ
ｇのクロリフ　ｅ４および２２０　ｍｇノＬ−グルタミ
ン酸ジメチルエステルハイドロクロライドを１５１のジ
メチルホルムアミドに溶解した。８５１のＮ、Ｎ’−ジ
シクロへキシルカルボジイミドを次に加え、室温で１時
間撹拌した。　４２１１ｇのカルボジイミドを更に加え
、次に５０　ｔａｇのカルボジイミドを１時間おきに２
回追加した０反応混合物を１２時間静置し、５０　Ｂの
カルボジイミドを更に１回加え反応を更に３時間続けた
０反応の進捗状態を逆相薄層クロマトグラフィ（溶媒：
　８０＄メタノール、２０駕０．０１　Ｍ　ＫＰＯ４，
ＰＨ８，８５緩衝液）で追跡した。

更に５０　ｔａｇのカルボジイミドを撹拌しながら加え
たが反応はそれ以上進まなかった。

２００１のエーテルを反応混合物に加え、エーテル溶液
を約１００　ｍｌの水で４回洗浄した０次にエーテルを
フラッシュ蒸発で除去し、生成物を約２５ｏ　１の３　
Ｎ　ＨＧＩに溶解した。室温にて４８時間装いた後ＮＨ
４０）１で溶液のｐＨを３に調節し、沈澱を集めて遠心
分ａ機で洗浄した。生成物は少量のＮＨ，ＯＨを含む２
０％メタノール水溶液に溶解し、逆相クロマトグラフカ
ラム（Ｃ−ｔ８シリカ、　　１．５Ｘ３０ｃ■）に導入
シタ、溶ａ　ハ２０％　７　タ／　　／ｌ／　（１）　
ＫＰ　０４　ＩＩＩ衝液（Ｑ、０１Ｍ、ｐｔＩ　８．８
５）で行なった。この操作により生成物（Ｌ−グルタミ
ルクロリンｅ４）を溶離した。未反応クロリンｅ４を溶
離するためにメタノール濃度を高くした。

メタノールが実質的に除去されるまでフラッシュ蒸発を
行ない、次にＭＣＩを加えてｐＨ３で生成物を沈澱させ
、これを収集し、稀酢酸を用いて遠心分離機で洗浄し、
真空中で乾燥した。モノ−し−グルタミルクロリンｅ４
の収量は２１　ｒｓｇで回収したクロリンｅ４の収量は
５９　ｔａｇであった。

実施例２１ モノ　Ｌ−グルタミルクロリンｅ　カルボジイミド直上 １３０　ｍｇのクロ９〉・ｅ６および２８０１ｇのＬグ
ルタミン酸ジメチルエステルハイドロクロライドを１８
ｍ１のジメチルホルムアミドに溶解した。　１００　ｍ
ｇのＮ、Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドを加え
。

反応混合物を　１時間撹拌した０次に、さらに５０ｍｇ
のカルボジイミドを加えた。１時間後、逆相ＴＬＣ（７
０！（７）　ＭｅＯＨオ、ｊ：、び３０＄　（７）Ｏ，
Ｏ１ｌ’ｌ　ＫＰＯ４，ｐＨ８，８５ヲ含むＣ−１８プ
レート）により１反応混合物は７５〜８ｏｚのモノ置換
生成物を含んでいることが解った。

２００１のジエチルエーテルを加え、１００　ｍｌの水
で２回洗浄し、その後３０　ｍｌのＩ　Ｍ　ＫＯＨで抽
出した。

生成物を暗所においてＫＯＨ溶液中で１２時間加水分解
し、その後７０°Ｃで１０分間加熱してエステル基の加
水分解を完結させた０次に生成物を逆相カラムクロマト
グラフィー（Ｃ−１８逆相シリカ、１．５　ｃｔａｘ３
Ｑｃｍ）により、段階的勾配溶離法を用いてｐ）Ｉ６．
８５（７）０．０１　Ｍ　ＫＰＯ，ｌ衝液中ノメタ、ｔ
−ルテ分１１！した。　５％メタノールで極性不純物を
除去した。その後６〜８ｚのメタノールでモノグルタミ
ルクロリンｅｓ　’Ｆｔ　溶ｅｌｋし゛た。更に２５％
メタノールでクロリンｅ６をカラムから溶離した。フラ
ッシュ蒸発によりメタノールを除去し、ｐＨ３でモノ（
Ｌ）−グルタミルクロリンｅ６を沈澱させ、収集し、さ
らに遠心分離機において希酢酸で３回洗浄し、その後減
圧の下で乾燥した。収量は４０■ｇであった。

実施例２２ ４００　ｒａｇのクロリンｅ６および１ｇのＬ−アス、
くラギン酸ベンジルエステルＰ−トシレートを７５　ｍ
ｇのジメチルホルムアミドに溶解した。溶液の温度は撹
拌しながら６５〜７０℃に保持し、ｔｏｏ　ｓｇのＮ　
、Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミドを加えた（２
時間おきに全部で３回添加した）、溶液をこの温度で合
計２０時間撹拌し、その後７０％のメタノールおよび３
０％　（７）０．０１　Ｍ　ＫＰＯ４ヲ含ｔ／ｐＨ８，
８５ノＷｉＪ衝液を含有するＴＬＣ（逆相）の（Ｃ−ｆ
ｉｌｌシリカ）プレートにより検査した。　ＴＬＣによ
り、５ｏｚを越える一置換化合物および少量の二置換化
合物が存在することが解った。

次に１５０　ｍｇのエーテルを加え、さらに１００１の
水および数滴の氷酢酸を添加し撹拌した。その後エーテ
ル相を分離し、水相を１００　ｍｌのエーテルで数回抽
出した。各エーテル抽出物を混合し、水（１００ｆｆ１
ｌ）で４回洗浄しジメチルホルムアミドを除去した。

次に７スバルチルクロリンｅ６エステルを１００■Ｉの
ｌ　Ｍ　ＫＯＨ中に抽出した（２５１ずつ４回抽出）。

さらにＫＯＨ溶液を室温で２４時間放置し加水分解した
。溶液をｐＨ７に中和し１次に逆相（Ｃ−１８シリカ）
カラム　（１，５ｃ＋５Ｘ３０　ｃｍ）に導入して、各
成分を分離した。メタノールを３０％〜８ｏｚの勾配で
含むｐＨ６，８５のＱ、ｌ　ＩＩＩ　Ｋｐｏ４１ｉ衝液
夏ｌを用いて溶離を行った。各留分を収集しＴＬＧによ
り特性を調べた。

溶離順序はジ（Ｌ）アスパルチルクロリン−、モノ（Ｌ
）アスパルチルクロリンｅ６およびクロリンｅ６であっ
た。メタ／−ルをフラッシュ蒸発で除去し、ＨＣｌ　を
用いてｐＨ３で各成分を沈澱させた。

生成物を遠心分離により収集し、次に非常に為薄な酢酸
で数回洗浄し、さらに減圧の下で乾燥した。収量２３．
８　ｍｇであった。

代表的化合物の物理的特性（相対極性）は標準クロマト
グラフシステムによって測定した。

ＴＬＣプレート：ベーカ−３ｉ−０１８粒度２０終鵬コ
ーテイングの厚さ２００　ｐ−ｍ 溶媒システムニア５ｚのメタノール、２５Ｘの０．０１
　ＭＫＰＯ，緩衝液、　ｐＨ８，８５ 化　　合　　物　　　　　　銹　導　　体　　　　　　
　　Ｒｆメソ　　　　　　　　　　　　　　　　　　０
．３２ポルフイリン■ 〃　　　　　モノ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　ｏ、５３〃
　　　　　ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　　０．６７〃　
　　　　ジ（Ｄ）７スパルチル　　　０．６６／／　　
　　　　モノ（１，）アスパルチル　　０．５５／Ｉ　
　　　　　ジ（Ｌ）７スパルチル　　　０．８８７／　
　　　　モノ（Ｄ、Ｌ）グルタミル　　０．５５メソ　
　　　　　　ジ（Ｄ、Ｌ）グルタミル　　　０．７２ポ
ルフイリン■ トランス−０，２８ メンクロリン■ ／／　　　　　モノ（０）アスパルチル　　０．５２／
／　　　　　　　シ（ロ）アスパルチル　　　０．８４
／ｆ　　　　　　モノ（Ｌ）アスパルチル　　０，５３
１／　　　　　ジ（Ｌ）アスパルチル　　　０．８４へ
マド　　　　　　　　　　　　　　　　　０，７Ｂポル
フイリン■ ／ｌ　　　　　モノＣＤ、Ｌ）アスパルチル　０．８８
／／　　　　　　　ン（Ｅｌ、Ｌ）アスパルチル　　０
．８３クロリンｅ６　　　　　　　　　　　　　　　０
　、８８１／　　　　　モノ（Ｌ）アスパルチル　　０
．７７／／　　　　　　ジ（Ｌ）アスパルチル　　　０
．８４７！　　　　　モノ（Ｌ）グルタミル　　　０．
７３クロリンｅ４　　　　　　　　　　　　　　　０　
、５７／Ｉ　　　　　　モノ（Ｌ）グルタミル　　　０
．７４トランス−−− メンクロリン■ ｌ〆　　　　　ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　　０、Ｂ７
、、ｘ−ｔ／ＩＩＮ’＋ｌ−ヒＴ？＋１、トランス−ジ
（Ｌ）グルタミル　　　　０．７２メソクロリン■ ジューテロ　　　　　　　　　　　　　　　０．５５ポ
ルフイリン■ ／／　　　　　　モノ（Ｄ、ｌ、）アスパルチル　０．
７５〃　　　　　ジ（Ｅｌ、Ｌ）アスパルチル　　０．
８５〃　　　　　モノ（Ｌ）アスパルチル　　０．７５
〃　　　　　ジ（Ｌ）アスパルチル　　　０．８４プロ
ト　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３３ポル
フイリン■ ／Ｉ　　　　　モノ（Ｌ）アスパルチル　　０．５８／
／　　　　　　ジ（Ｌ）７スパルチル　　　０．７３ホ
トプロト　　　　　　　　　　　　　　　　０．５８ポ
ルフイリン■（異性体混合物） 〃　　　　　モノ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　０．７８／
ｆ　　　　　　ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　　０．８５
／ｌ　　　　　　モノ（Ｌ）アスパルチル　　０．７６
１／　　　　　ジ（Ｌ）アスパルチル　　　０．８５ピ
ロフエオ　　　　　　−　−０，０７ホーバイドＡ ｔｔ　　　　　　（０，１，）　７スパルチル　　　０
．２２〃（Ｌ）アスパルチル　　　　０．２３メソ　　
　　　　　　　−− ポルフィリン■ ！ｆ　　　　　　ジ（Ｌ）グルタミル　　　　０．６８
〃　　　　　モノ（Ｌ）グルタミル　　　０．５５プロ
ト　　　　　　　　　−　− ポルフィリン■ ／ｌ　　　　　ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　　０．７０
／／　　　　　　モノ（０，Ｌ）アスパルチル　０．５
７コブロ　　　　　　　　　　　　　　　　　０．９１
ポルフイリン■ ／／　　　　　　モノ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　０．９
２１／　　　　　ジ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　　０．３
３１１トリ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル　０．３５１！　　
　　　テトラ（Ｄ、Ｌ）アスパルチル０，３７すべての
７ミノジ力ルポン酸誘導体に対するピリジン中の可視吸
収スペクトルは、母体のポルフィリン、クロリンまたは
バクテリオクロリンと一致した。

活性成分、すなわち上記実施例１〜２２において生成し
たアミノ酸ポルフィリンアダクツを投与するための医薬
製剤は次の通り調製した：実施例２３ 次の成分を下記の重量割合で配合し１錠剤を製造した。

ダラム ５［、ＵＳＰ（米国薬局法）　　　　　８０．３タピオ
カデンプン　　　　　　１３．２ステアリン酸マグネシ
ウム　　　４．４この基剤に、充分なアミノ酸ポルフィ
リンアダクツを配合し、それぞれ１００　ｒｓｇの活性
成分を含む錠剤を製造した。

実施例２４ 次の成分を含有する混合物を調製した。

ダラム リン酸カルシウム　　　　　　　　１７．８リン酸二カ
ルシウム　　　　　　　１８．８三ケイ酸マグネシウム
、ＵＳＰ　　　　５．２ラクトース、ＵＳＰ　　　　　
　　　　　５．２ジヤガイモデンプン　　　　　　　５
．２ステアリン酸マグネシウムＡ　　　　Ｏ，８ステア
リノ酸マグネシウムＢ　　　　Ｏ，３２ポルフイリンア
ミノ酸アダクツ　　２０この配合物を分割し、カプセル
状に成形した。

各カプセルは２５ｍｇの活性成分を含んでいた。

実施例２５ 市販のキイチゴの香料を添加した糖シロップに１１当り
アミノ酸ポルフィリンアダクツ４０　Ｂ相当量を加え、
得られた混合物をホモジナイザーにより均質化した。こ
の混合物は２００　Ｈの活性成分を含んでおり、特に経
口投与に適したものであった一 実施例２６ 次の組成物の無菌溶液を調製した。　２００　ｍｇのア
ミノ酸ポルフィリンアダクツのナトリウム塩を、最終濃
度が２０　ｍｇ／＋＊ｌになるようニ０．９Ｘ　Ｎａ１
ｌ中に溶解した。

この溶液は静脈内投与および筋肉内投与に望ましいもの
であった・ 実施例２７ アミノ酸ポルフィリンアダクツのナトリウム塩を、最終
濃度が５　ｍｇ／ｍｌ　となるように０．９％のＮａＣ
ｌ溶液中に溶解した。炭化水素噴霧剤を入れたエアロツ
ルディスペンサーに上記溶液を入れた。この生成物は局
所性用途にふされしいものである。

実施例２８ １監豊豆１】 等モルの水酸化ナトリウムを含有する水にポルフィリン
のアミノ酸アダクツを添加し、得られた混合物を凍結乾
燥することにより上記アダクツのナトリウム塩を調製し
た。

このようにして、カリウム塩、カルシウム塩、およびリ
チウム塩などの他の金属塩も調製した。

１１皇二１】 上記実施例において述べたアミノ酸ポルフィリンアダク
ツを、同当量の酸、例えば塩酸を含む水溶液中に溶解す
ることにより酸性塩たとえば塩酸塩に転化し、この溶液
を蒸発乾固して固体の塩を得た。別な態様において、酸
性水溶液の代りに、エタノール中に溶解した塩化水素ガ
ス、すなわちアルコール溶液を使用することができ、溶
媒を蒸発するか、あるいは例えば非溶媒の添加によりア
ルコールから結晶化することによって酸性塩を得る。

次に、ラットの腫瘍を治療する場合における本発明のこ
れら新規の化合物の利用方法について述べる。

実施例２９ モノ−（Ｌ）−アスパルチルクロリンｅ６を用いて、光
線力学的治療実験を行なった。バッファロー（Ｂｕｆｆ
ａｌｏ）ラットにおける２種の移植可能な＠瘍うイン、
モリス・ヘパトー？　（Ｍａｒｒｉｓ　Ｈｅｐａｔｏａ
＋ａ）７７７７およびモリス・ヘパトーマ５１２３ｔｃ
ｉ　用イｆ−。

腫瘍を大腿の外側皮下に移植した。治療中、腫瘍の大き
さは直径１〜２．５　ａｌｌの範囲であった。

一般的な治療方法は次の通りである０次のように生成し
たクロリンの溶液をラットに注射する＝２０　ａ＋ｇの
クロリンのナトリウム塩を１１の０．９ｚＮａＣｌ中に
溶解した１次にラットをエーテル麻酔している間に、外
側頚部を通してクロリン溶液を静脈注射した。注射した
溶液の容量はラットの体重に基づいて計算し、投与量は
この特別の実験の場合、重量対重量に基づいて算出した
。所定時間の経過後、光線治療を行なった。

ラットの光線治療は麻酔せずに行なった。ラットを抑え
つけて治療部位の毛を除去し、クーパー・オーロラ（Ｃ
ｏｏｐｅｒ　Ａｕｒｏｒａ）アルゴン励起波長可変色素
レーザーからのレーザー光線により治療した。

Ｅ記し−ザーには、カリフォルニア州すンタ・バーパラ
（Ｓａｎｔａ　Ｂａｒｂａｒａ）　、＋１．　Ｒ，Ｄ、
：ｘ　７サルテイング頁ｃｏｌ１５ｕ　Ｉ目ｎｇ）のダ
ニエルトイロン博士（Ｏｒ、　Ｄａｎｉｅｌ　Ｄｏｉｒ
ｏｎ）によって開発されたマイクロレンズに連結した光
学ａｍ光線電送システムが備えられていた。

上記レンズは、レーザービームを分散させ。

入射光束領域全体にわたって光度の均一な光線を環状に
分布させる。光線の波長はハートリッジ（Ｈａｒｔｒｉ
ｄｇｅ）反転分光器を用いて：Ａ箇した。光度はイエロ
ー・スプリングス・インストルメント（Ｙｅｌｌｏｗ　
ＳｐｒＩｎｇｓ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）のモデル８５
Ａの線量計を用いて測定した。

上記マイクロレンズは照射直径が１．５ｃｍになるよう
にラットの皮膚から離して配置し、光束はレーザーの出
力を制御することにより変化させた。

照射後ラットを檻にもどし２４時間後に２５０ＪＬ１の
Ｑ、９＄　Ｎａ１ｌに溶解した１４　ｍｇのエバンス・
ブルー（Ｅｖａｎｓ　Ｂｌｕｅ）色素を外側頚静脈内に
投与した。

注射して２時間後に、ラットを殺し、腫瘍を横断切開し
た。腫瘍壊死の範囲は色素の取り込みＣＭ、　Ｃ，８ｅ
ｒｅａｂａｃｕ＋、プ！ｊ　テ４　ッシュ”　’；　＋
　−ｆ−ル・オブ・キャンサー（ａｔ、　Ｊ、　Ｃａｎ
ｃｅｒ）　、　４５巻。

１８８２年、５７１頁］がないことにより決定し、腫瘍
の壊死横断面の深さはミリメートルの単位で記録した。

第１表は腫瘍に対するこれら薬剤の効果が要約されてお
り、かつ波長の範囲、投与量、光度および治療時間が記
載されている。この治療時間は上記新規な薬剤を用いて
光線治療を行なう！＆適条件を確定するために必要なも
のであった。第「表に記載されている条件の下で、腫瘍
に対して、測定可能なかなりの抑制効果が得られた。

注釈された事例を除く全ての場合、エバンス・ブルー法
の効力検定によれば、組織の損傷は腫瘍組織に対して選
択的に起り、正常な皮膚が腫瘍の上にかぶざっている場
合、および治療領域が正常な筋肉組織のかなりの領域ま
で広がっている場合など、はとんど全ての場合において
、組織の損傷が選択的に行なわれた。

第［１表には光線力学的治療のデータが示されている。

第２ＪＩＡには、　１ｃｍ２当りのジュールに換算した
光線全投与量が示されている。第３欄には、ラントの体
ｆｆｉ　ｌｋ、当りのミリグラムに換算したモノ（Ｌ）
アスパルチルクロリンｅ６の投与量が示されている。１
４１（１には薬剤投与とレーザー光線による治療との間
の経過特開が示されている。第５欄には治療光線の波長
がナノメートルの単位で示されている。第６欄には治療
光線の光度が１ｃｍ’当りのミリワットの準位で示され
ている。第７欄には、Ｍ瘍組織の壊死の平均的深さＸ、
即ち皮膚に隣接している腫瘍の壊死先端部より皮膚から
醇も離れた腫瘍の壊死端縁部までの距離がミリメートル
の単位で示されている。

ｓ、ｄ、はＸの標準偏差である。

（ｒ＋）はこの実験に関与した腫瘍すなわち脚部の数で
ある。

第８欄には各群ごとの壊死の深さの範囲がミリメートル
の単位で示されている。

第！Ｉ表注 注１：２４時間接の評価において、５匹は処置箇所の皮
膚に色素の取込みの多少の増加を示した。

注２＝２４時間後の評価において、６匹は処置箇所の皮
膚に色素の取込みの多少の増加を示した。

注３＝１４日後の評価において、いずれも皮膚または腫
瘍の壊死の徴候を示さず、毛は正常に再度生育した。

注４：１４日後の評価において、１匹のラットの１本の
脚が筋肉の壊死の徴候を示した。

すべてのラットの皮膚は正常であり、また毛は正常に再
度生育した。

実施例３０ モノ−し一７スバルチルクロリンｅ６四ナトリウム塩に
よる光線力学治療（ＰＯＴ）を他の動物および腫瘍の関
連において評価した。

Ｄ８Ａ／２　Ｈａ　ＲＯＳ　Ｄ＋Ｈａ　マウスの肩およ
び肋骨部分（片側のみ）に腫瘍５ＩＴ−Ｆを皮下に移植
した。腫瘍が長さ約１．５〜２Ｃ厘、幅１　ｃｍおよび
深さ０．７〜１　ｃｔｍの大きさに達した時（移植して
から約７〜８日後）治療を開始した。薬剤を４１ｇ／ｍ
ｌの濃度で腹膜組織内に注射し投与した。特定のパラメ
ータおよび結果は次の表に示されている。評価は、光線
治療の後２４時間目に生体染料エバンス・ブルー（Ｅｖ
ａｎｓ　Ｂｌｕｅ）を用いて行ない、この評価方法はマ
ウス　１匹当り５　ｔａｇの投与量で染料を腹膜組織内
に注入したことのみを除いて、上記バッファローラット
の腫瘍壊死の評価と同様の手順で進めた。各欄の表題は
上記ラットの場合と同様である。

ジュール／　ａ　ｍ”　　　　　　　　　　４０薬剤投
与量　　　　ｍｇ／ｋｇ　　　　４０投与から照射まで
　時間　　　　２４ 波　　長　　　　　　　　　　ｎｍ　　　　　　　８８
５光強度　　　　　　ｄ／ｃｒｒＩ２１００Ｘ　　　　
　　　　（履ｍ）　　　　　［ｉ、８ｓ、ｄ・　　　　
　　　　　　　　上２゜０（ｎ）７ Ｄ　　　　　　　　　　　　　Ｃａｍ）　　　　　　　
１０．３ｓ、ｄ・　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　±　３，２正常組ｗＡ（筋肉または皮ｒｔｉ）の
壊死はみられなかった。同様にあらかじめ処置したマウ
スに実施例　１〜２２の化合物を投与した時、同様の結
果が得られた。

実施例３１ 薬剤としてモノーＬ−グルタミルクロリンｅ６四ナトリ
ウム塩を用いて、各後脚部の外側皮下にモリス・ヘパト
ーマ７７７７を移植した／ヘツファローラノトに光線力
学治療を施した。

実験方法は上記モノ−し−７スバルチルグロリンｅ６の
試験に用いた方法と同じである。特定のパラメータおよ
び結果を次の表に示す。

この実験のいくつかの症例において、直径１．５ｃａ＋
の光線治療部位が正常組織上に拡がったが、エバンスブ
ルー法の評価によれば、腫瘍を覆っている皮膚または腫
瘍を取り巻く正常筋肉組織に対する損傷は視覚上観察さ
れなかった。

次の表の第１欄においては、１平方センチメートル当り
のジュールに換算した光線の全投与量を示す、第２ｍに
は、ラットの体重１キログラム当りのミリグラムに換算
した薬剤クロリンの投与量を示す、第３ｍには薬剤の投
与とレーザー光線による治療との間との経過時間を示す
。

第４欄には治療光線の波長をナノメートルの単位で示す
、第５欄には平方センチメートル当りの治療光線の光強
度をミリワットの単位で示す、第６欄には、腫瘍組織の
壊死の平均的深さｋ、即ち皮膚に隣接している腫瘍の壊
死先端部より皮膚から最も離れた腫瘍の壊死端縁部まで
の距離をミリメートルの単位で示すｍ５−ｄ、はｋの標
準偏差であり、（ｎ）は本実験に関与した腫瘍または脚
部の数である。Ｄは腫瘍壊死の平均直径であり、その次
に記載されているｓ、ｄ、は上記りに対する標準偏差で
ある。

ジュール／ＣｒＩ７２２０ 薬剤投与量　　　　ｍｇ／ｋｇ　　　　２０投与から照
射まで　時間　　　　２４ 波　　長　　　　　　　　　　ｎｍ　　　　　　　６６
５光強度　　　　　　ｍＷ／ｃｒｒｒ２１００Ｘ　　　
　　　　　　（ｍｍ）　　　　　３．４ｓ、ｄ、　　　
　　　　　　　　　　±　１．３（ｎ）　　　　　　　
　　　　　　　　１７Ｄ　　　　　　　　　　　　　　
　　　（ｍ履）８．８ｓ、ｄ、　　　　　　　　　　　
　　±３．θ同様に処置したラットに上記実施例１〜２
２の化合物を投与した場合にも同様の結果が得られた。

実施例３２ マウスＤＢＡ／２　Ｈａ　ＲＯＳ　Ｄ−Ｈａに腫瘍５Ｉ
Ｔ−Ｆを移植し、モノ゛−Ｌ−グルタミルクロリンｅ６
四ナトリウム塩の光線力学治療効果について試験を行っ
た。

試験法はモノ−し一７スバルチルクロリンｅ６について
の実験と同様であり、表の見出しはラットについての実
験の場合と同様である。

ジュール／　ｃ　ｍ”　　　　　　　　　　４０薬剤投
与量　　　　履ｇ／ｋｇ　　　　４０投与から照射まで
　時間　　　　２４ 波　　長　　　　　　　　　　ｎｍ　　　　　　８８５
光強度　　　　　　ｍＷ／ｃｍ２１００Ｘ　　　　　　
　　　（！ｌ１１）　　　　　７．８ｓ、ｄ・　　　　
　　　　　　　　上２゜９（ｎ）　　　　　　　　　　
　　　　　８Ｄ　　　　　　　　　（ａｍ）　　　　　
１３．９ｓ、ｄ・　　　　　　　　　　　　±３．５実
施例３３ 人間の細胞（ＨｅＬａ、　０９８／ＡＨ２株）を２５　
ａｒｒ？のプラスチック製培養フラスコ中で２４時間培
養し付着させた０次にそれらを洗浄し、ポルフィリンを
含有するハムピー１２培養基（Ｈａｍ’ｓ　Ｆ−１２ｍ
ｅｄｉｕｍ）中で１０分間培養し、ポルフィリンを含ま
ないハムＦ−１２培養基中で５分間再度洗浄し、次に種
々の時間照射し、完全媒体中で３７℃で２４時間培養し
た。生存細胞の一部を採り、位相差顕微鏡で細胞数を測
定した。使用した広帯域白熱光源を、照射光量が５Ｘ［
ＯｚルグＣ１−’５ｅｃ−’になるように調整した。

位置２１！Ｉ整装置によって、異なる時間に各フラスコ
の５つの部分を照射するようにした。Ｌつの部分は照射
せずに未照射の対照とした。すなわち、１つのフラスコ
から４種の照射に対する生存曲線が得られる。従ってこ
の方法によれば、多数の光感浄剤を迅速かつ経済的にス
クリーニングすることができる。この実験の結果を第ｍ
表に示す。

光感浄剤の４Ｘ１０’Ｍ溶液（または懸濁液）を０２ｆ
ｆ１１とり　１．８　ｍｌのハム溶媒（Ｈａｍ’ｓ　ａ
＋ｅｄｉｕｍ）と混合し実験を行なった。即ち細胞を４
Ｘ　１０−５Ｍの光感浄剤で処理したことになる。細胞
を光感浄剤の存在下に１０分間培養し、光感浄剤を含ま
ないハム溶媒で５分間洗浄した０次に、上記の時間ハム
溶媒中で照射した。

実施例３４ ハンファローラットの２種類の移植可能な腫瘍ライン、
モリスへパトーマ７７７７およびモリスへバトーマ　５
１２３ｔｃを使用した。腫瘍をラットの大腿部後部の筋
肉内に移植した。１０から１４日後に腫瘍が適当な大き
さになったとき、２　ｍｇ　（０，５ｉｆ）のアミノ酸
ポルフィリンアダクツ溶液をラットの腹膜内に注射した
。アミノ酸ポルフィリンアダクツ溶液は次のようにして
調製した：４ｍｇのアミノ酸ポルフィリンを０．Ｉ　Ｍ
　ＮａＯＨに溶解し、１ＭＩＪｌ’ｍ＋　　　−１出　
１１１　’？　＋’＃　ｎｕ　Ｌｊ　　４百乾！　　ｆ
−注射後２４時間目にラットを殺し、腫瘍をそのまま切
開した。一定強度の紫外線光源）でポルフィリンの蛍光
を測定した。

第■表から第■表に試験したポルフィリン誘導体を示す
。

１時間」の欄の次に試験したＩｔ！瘍の総数を示す。

「ＡＪＪＩＡは次のようにして計算した＝　１人の検査
者により一定強度の紫外線光源下で、Ｏ１＋＆、１．２
．３．４の段階で、腫瘍内のポルフィリンの蛍光を肉眼
で評定した。この数値に、蛍光を発生している腫瘍の百
分率を掛けた０例えば。

（−Ｈ）　（８０％）　＋　（＋１）　（ｌｏ＄）　＝
　５０表のＡの値は、大抵は別途に行った一連の実験の
平均値を示している。

各ｌｌｌ１瘍に対する「Ｃ」の値はｒＡＪの値を腫瘍の
平均直径（ａｍ）で割った数値である。

腫瘍のいくつかのものについては１２〜７２時間の時間
に対する検討も行った。　１　ｍｇのアミノ酸アダクツ
を使用したこと以外は上記と同様の方法で行った。その
結果をやはり第■表に示す。

手続補正書 昭和６０年８月２２日

Claims (41)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記の構造式で表され、かつアミノジカルボン酸
   と、少なくとの１つのカルボキシル基を有するテトラピ
   ロールとの蛍光性モノ−またはポリアミドおよび医薬用
   担体を含有する、腫瘍を診断および／または治療するた
   めの医薬用組成物、▲数式、化学式、表等があります▼ 上式において、Ｚはアミノ基を除外したアミノジカルボ
   ン酸残基、Ｘはカルボキシル基を除外したテトラピロー
   ル酸基、およびｎは１から４までの整数である。
2. （２）前記のアミノ酸はα−アミノジカルボン酸である
   特許請求の範囲第１項記載の医薬用組成物。
3. （３）アミノジカルボン酸と、下記の構造式を有するテ
   トラピロール化合物あるいは対応するジ−またはテトラ
   ヒドロテトラピロールとの、蛍光性モノ−またはポリア
   ミド、あるいはそれらの塩、および医薬用担体からなる
   特許請求の範囲第１項記載の医薬用組成物、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｒ＿１はメチル基、｛−Ｈ、−ＣＨ＿３｝または
   ｛−ＯＨ、−ＣＨ＿３｝；Ｒ＿２は水素、ビニル基、エ
   チル基、▲数式、化学式、表等があります▼、アセチル
   基、｛−Ｈ、−ｅｔｈｙｌ｝、▲数式、化学式、表等が
   あります▼、ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈまたは＝ＣＨ
   ＣＨＯ；Ｒ＿３はメチル基、｛−Ｈ、−ＣＨ＿３｝また
   は｛−ＣＨ＿３、−ＯＨ｝；Ｒ＿４は水素、ビニル基、
   エチル基、▲数式、化学式、表等があります▼ＣＨ＿２
   ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、＝ＣＨＣＨＯまたは｛−Ｈ、−ｅ
   ｔｈｙｌ｝；Ｒ＿５はメチル基； Ｒ＿６は水素、ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、ＣＨ＿２
   ＣＨ＿２ＣＯ＿２ＲまたはＣＯ＿２Ｈ；Ｒ＿７はＣＨ＿
   ２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｒま
   たは｛−ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、−Ｈ｝；Ｒ＿８
   はメチル基または｛−ＣＨ＿３、−Ｈ｝；Ｒ＿９は水素
   、ＣＯＯＨ、ＣＨ＿２ＣＯＯＨまたはメチル基；であり
   、かつＲ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿７および
   Ｒ＿８が２つの置換基を表わしている場合、あるいは２
   価で同一の炭素に結合している場合には、結合している
   ピロール環はジヒドロピロールであり； Ｒは低級アルキルまたはベンジル； Ｒ＿６とＲ＿９が一体化して▲数式、化学式、表等があ
   ります▼または▲数式、化学式、表等があります▼であ
   り、かつＲ＿１からＲ＿９の少なくとも１つは遊離カル
   ボキシル基である。
4. （４）アミノジカルボン酸と、下記の構造式を有するテ
   トラピロール化合物あるいは対応するジ−またはテトラ
   ヒドロテトラピロールとの、蛍光性モノ−またはポリア
   ミド、あるいはそれらの塩、および医薬用担体からなる
   特許請求の範囲第１項記載の医薬用組成物、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｒ＿１はメチル基、｛−Ｈ、−ＣＨ＿３｝または
   ｛−ＯＨ、−ＣＨ＿３｝；Ｒ＿２は水素、ビニル基、エ
   チル基、▲数式、化学式、表等があります▼、アセチル
   基、｛−Ｈ、−ｅｔｈｙｌ｝、▲数式、化学式、表等が
   あります▼、ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈまたは＝ＣＨ
   ＣＨＯ；Ｒ＿３はメチル基、｛−Ｈ、−ＣＨ＿３｝また
   は｛−ＣＨ＿３、−ＯＨ｝；Ｒ＿４は水素、ビニル基、
   エチル基、▲数式、化学式、表等があります▼ＣＨ＿２
   ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、＝ＣＨＣＨＯまたは｛−Ｈ、−ｅ
   ｔｈｙｌ｝；Ｒ＿５はメチル基； Ｒ＿６は水素、ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、ＣＨ＿２
   ＣＨ＿２ＣＯ＿２ＲまたはＣＯ＿２Ｈ；Ｒ＿７はＣＨ＿
   ２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｒま
   たは｛−ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＯ＿２Ｈ、−Ｈ｝；Ｒ＿８
   はメチル基または｛−ＣＨ＿３、−Ｈ｝；Ｒ＿９は水素
   、ＣＯＯＨ、ＣＨ＿２ＣＯＯＨまたはメチル基；であり
   、かつＲ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４、Ｒ＿７および
   Ｒ＿８が２つの置換基を表わしている場合、あるいは２
   価で同一の炭素に結合している場合には、結合している
   ピロール環はジヒドロピロールであり； Ｒは低級アルキルまたはベンジル； Ｒ＿６とＲ＿９が一体化して▲数式、化学式、表等があ
   ります▼または▲数式、化学式、表等があります▼であ
   り、かつＲ＿１からＲ＿９の少なくとも１つは遊離カル
   ボキシル基である。
5. （５）前記テトラピロールはポルフィリンである特許請
   求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
6. （６）前記テトラピロールはクロリンである特許請求の
   範囲第４項記載の医薬用組成物。
7. （７）前記テトラピロールはバクテリオクロリンである
   特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
8. （８）前記アミノ酸はα−アミノジカルボン酸である特
   許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
9. （９）前記アミノ酸はアスパラギン酸である特許請求の
   範囲第４項記載の医薬用組成物。
10. （１０）前記アミノ酸はグルタミン酸である特許請求の
    範囲第４項記載の医薬用組成物。
11. （１１）前記アミドはモノアスパルチルトランス−メソ
    クロリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組
    成物。
12. （１２）前記アミドはジアスパルチルトランス−メソク
    ロリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成
    物。
13. （１３）前記アミドはモノグルタミルトランス−メソク
    ロリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成
    物。
14. （１４）前記アミドはジグルタミルトランス−メソクロ
    リンIXである特許請求の範囲第４記載の医薬用組成物。
15. （１５）前記アミドはモノアスパルチルクロリンｅ＿６
    である特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
16. （１６）前記アミドはジアスパルチルクロリンｅ＿６で
    ある特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
17. （１７）前記アミドはトリアスパルチルクロリンｅ＿６
    である特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
18. （１８）前記アミドはモノグルタミルクロリンｅ＿６で
    ある特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
19. （１９）前記アミドはジグルタミルプロトポルフィリン
    IXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
20. （２０）前記アミドはモノアスパルチルメソクロリンｅ
    ＿６である特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
21. （２１）前記アミドはモノグルタミルプロトポルフィリ
    ンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
22. （２２）前記アミドはモノアスパルチルメソポルフィリ
    ンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
23. （２３）前記アミドはジアスパルチルメソポルフィリン
    IXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
24. （２４）前記アミドはジグルタミルメソポルフィリンI
    Xである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
25. （２５）前記アミドはジアスパルチルプロトポルフィリ
    ンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物。
26. （２６）前記アミドはモノアスパルチルバクテリオクロ
    リンｅ＿４である特許請求の範囲第４項記載の医薬用組
    成物。
27. （２７）前記アミドはジアスパルチルジューテロポルフ
    ィリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成
    物。
28. （２８）前記アミドはモノアスパルチルジューテロポル
    フィリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組
    成物。
29. （２９）前記アミドはモノグルタミルバクテリオイソク
    ロリンｅ＿４である特許請求の範囲第４項記載の医薬用
    組成物。
30. （３０）前記アミドはジグルタミルジューテロポルフィ
    リンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成物
    。
31. （３１）前記アミドはモノ−またはジアスパルチルホト
    プロトポルフィリンIXである特許請求の範囲第４項記載
    の医薬用組成物。
32. （３２）前記アミドはモノ−またはジグルタミルホトプ
    ロトポルフィリンIXである特許請求の範囲第４項記載の
    医薬用組成物。
33. （３３）前記アミドはモノ−、ジ−、トリ−またはテト
    ラグルタミルコプロポルフィリンIIIである特許請求の
    範囲第４項記載の医薬用組成物。
34. （３４）前記アミドはモノ−またはジアスパルチルヘマ
    トポルフィリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医
    薬用組成物。
35. （３５）前記アミドはモノ−またはジグルタミルヘマト
    ポルフィリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬
    用組成物。
36. （３６）前記アミドはモノ−またはジグルタミルクロリ
    ンｅ＿４である特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成
    物。
37. （３７）前記アミドはモノ−またはジグルタミルメソク
    ロリンｅ＿４である特許請求の範囲第４項記載の医薬用
    組成物。
38. （３８）前記アミドはモノ−またはジアスパルチルクロ
    リンｅ＿４である特許請求の範囲第４項記載の医薬用組
    成物。
39. （３９）前記アミドはモノグルタミルジューテロポルフ
    ィリンIXである特許請求の範囲第４項記載の医薬用組成
    物。
40. （４０）特許請求の範囲第１項記載の化合物の少なくと
    も１種の有効量を宿主（ｈｏｓｔ）に投与し、光線また
    は電磁波を腫瘍の部位に照射し、腫瘍内で前記化合物に
    蛍光を発生させて該蛍光を検出し、あるいは所望の波長
    および強度の光線を処置すべき腫瘍に照射して腫瘍に細
    胞殺滅作用を加えるために使用する、腫瘍の光線診断お
    よび／または光線治療のための特許請求の範囲第１項記
    載の組成物。
41. （４１）前記化合物は注射によって宿主に投与するもの
    である特許請求の範囲第１項記載の組成物。