JPS61271986A - リンパ系細胞用培地 - Google Patents
リンパ系細胞用培地Info
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- JPS61271986A JPS61271986A JP11228685A JP11228685A JPS61271986A JP S61271986 A JPS61271986 A JP S61271986A JP 11228685 A JP11228685 A JP 11228685A JP 11228685 A JP11228685 A JP 11228685A JP S61271986 A JPS61271986 A JP S61271986A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
に関する。
リンノ母系細胞を用いて有用な生理活性物質を得ること
を目的とし九研究が活発化しており、特にインターフェ
ロン（ＩＦＮ）やモノクロナール抗体の纏発については
、癌の予防、治療への可能性を秘めていることからその
進捗には著しいものがある。
を目的とし九研究が活発化しており、特にインターフェ
ロン（ＩＦＮ）やモノクロナール抗体の纏発については
、癌の予防、治療への可能性を秘めていることからその
進捗には著しいものがある。
しかしながら、細胞培養上清液から生理活性物質を大量
に得、それを精製して利用するためには技術的に大きな
問題がある。
に得、それを精製して利用するためには技術的に大きな
問題がある。
その一つは、細胞培養液に牛胎児血清（ＦＢＳ）などの
血清１ｉｏｓ程度添加する必要があることでおる。これ
らの血清は非常に高価であシ、かつ原因不明のロフト差
がある九め、大量に細胞を培養するには問題があった。
血清１ｉｏｓ程度添加する必要があることでおる。これ
らの血清は非常に高価であシ、かつ原因不明のロフト差
がある九め、大量に細胞を培養するには問題があった。
さらに、これらの血清は、多種類の異種蛋白を含むので
、有用活性物賞金精製する際に大変な不都合が生じる。
、有用活性物賞金精製する際に大変な不都合が生じる。
そこで血清を含まない培地として、これまでに、血清の
代替として、インシュリン、トランスフェリン、表皮性
細胞増殖因子などの各種α増殖因子や血清アルブミンな
どの性格が明らかな蛋白を含む培地が開発されてきた（
Ｄ、Ｂａｒｎａｓ、 Ｇ、）１．５ａｔｏ、 Ｃｅ１
ｌ、２２巻。
代替として、インシュリン、トランスフェリン、表皮性
細胞増殖因子などの各種α増殖因子や血清アルブミンな
どの性格が明らかな蛋白を含む培地が開発されてきた（
Ｄ、Ｂａｒｎａｓ、 Ｇ、）１．５ａｔｏ、 Ｃｅ１
ｌ、２２巻。
６４９頁、 １９８０年）。
ま九、細胞の増殖には血清の脂質成分が必要で６９、脂
質成分の担体としてサイクロデキストリン（ＣＤ ）が
有効でおることが知られている。
質成分の担体としてサイクロデキストリン（ＣＤ ）が
有効でおることが知られている。
さらに動物細胞の無血清培養においてα〜ＣＤと不飽和
脂肪酸との抱接化合物は、血清アルブミンの代替となる
ことが知られている（特開昭５６一８１６００ ）。
脂肪酸との抱接化合物は、血清アルブミンの代替となる
ことが知られている（特開昭５６一８１６００ ）。
いずれにしても従来知られているリンパ系細胞を培養す
る九めの培地は、必ずしも大量にかつ細）ｌｉｔ″高密
度で培養する九めには充分満足できるものではなかった
。
る九めの培地は、必ずしも大量にかつ細）ｌｉｔ″高密
度で培養する九めには充分満足できるものではなかった
。
従って、この発明の目的は、リン・９系細胞を大量かつ
高密度で培養できる培地を開発することにめる。
高密度で培養できる培地を開発することにめる。
我々は、以上のような問題点１踏まえ、鋭意検討し几結
果、実質的に血清を含まず、０．０５から２１１／１の
範囲の２−１６−シメチルーα−サイクロデ中ストリン
（ＤＭ−α−ＣＤ ）または２−１６−ジメチル−β−
サイクロデキストリン（ＤＭ−β−ＣＤ）（以下ＤＭ
−ＣＤ ） を含む培地が、リンパ系細胞の培養九適し
ていること全見出し友。
果、実質的に血清を含まず、０．０５から２１１／１の
範囲の２−１６−シメチルーα−サイクロデ中ストリン
（ＤＭ−α−ＣＤ ）または２−１６−ジメチル−β−
サイクロデキストリン（ＤＭ−β−ＣＤ）（以下ＤＭ
−ＣＤ ） を含む培地が、リンパ系細胞の培養九適し
ていること全見出し友。
本発明における実質的に血清含金まない培地と昧、 Ｒ
ＰＭＩ １６４０培地、ノ・ムＦ−１２培地、ダルベラ
：ｆ ＭＥＭ培地などの培地を単独ｉ九は混合し九培地
又はこれらの改変培地に、血清を含まず、インシュリン
、トランスフェリン、ステロイドホルモンなどの各種増
殖因子や、アルブミンなどの血清蛋白成分を含有せしめ
た培地、具体的には、イスコツ培地、ＢＩＴＣ８０−７
培地、ＲＩＴＣ５７−１培地、ＨＢＩＯＩ培地などが含
まれる。
ＰＭＩ １６４０培地、ノ・ムＦ−１２培地、ダルベラ
：ｆ ＭＥＭ培地などの培地を単独ｉ九は混合し九培地
又はこれらの改変培地に、血清を含まず、インシュリン
、トランスフェリン、ステロイドホルモンなどの各種増
殖因子や、アルブミンなどの血清蛋白成分を含有せしめ
た培地、具体的には、イスコツ培地、ＢＩＴＣ８０−７
培地、ＲＩＴＣ５７−１培地、ＨＢＩＯＩ培地などが含
まれる。
本発明のＤＭ −ＣＤとＦｉ、グルコース残基の２及び
、６位の水酸基がメチル化したグルコース単位が＃＠（
α）１ｆＩ−は７個（β）が環状になり九デキストリン
であり、その培地中濃度範囲は、０．０５から２９／１
．好ましくはＯ，ｌから１１／ｌでおる。この範囲以下
では、有意な効果が認められず。
、６位の水酸基がメチル化したグルコース単位が＃＠（
α）１ｆＩ−は７個（β）が環状になり九デキストリン
であり、その培地中濃度範囲は、０．０５から２９／１
．好ましくはＯ，ｌから１１／ｌでおる。この範囲以下
では、有意な効果が認められず。
これ以上では細胞に対する毒性が認められる。このＤＭ
−ＣＤは、例えは、他の培地成分と共にｍ解後濾過滅
菌して培地を調製すること４できるが。
−ＣＤは、例えは、他の培地成分と共にｍ解後濾過滅
菌して培地を調製すること４できるが。
ＤＭ −ＣＤの粉末もしくは高濃度ａｔ−蒸気加熱殺菌
後、無血清培地に所定１ｔ−添加して用いることもでき
る。
後、無血清培地に所定１ｔ−添加して用いることもでき
る。
本発明のリンパ系細胞としては、ヒト、マウス、ラット
、ウシ、ハムスターなどの哺乳動物のりンパ球または白
血病由来細胞であって、初代培養細胞、リンパ臘、白血
病、骨髄腫瘍由来の細胞株、リンパ球を片方の親細胞と
するハイプリドーマ。
、ウシ、ハムスターなどの哺乳動物のりンパ球または白
血病由来細胞であって、初代培養細胞、リンパ臘、白血
病、骨髄腫瘍由来の細胞株、リンパ球を片方の親細胞と
するハイプリドーマ。
並びにウィルス等で変異し九細施株が含まれる。
例えば、ヒト細胞では、ＢＡＬＬ −１細胞、υＭＣＩ
、細胞、ＡＴＬ −２細胞、ＣＣＲ−ＣＥＭ ｉ胞、Ｔ
ＡＬＬ −１細胞、しＰＭ１１７８８細胞、ＨＥ、−６
０細胞、 ＮＡＬＭ −１細胞などがあげられ、動物細
胞では、Ｘ−５５６３ａ胞、ＢＷ５１４７細胞、ＦＳ
−６細胞やＭＳ−１細胞、５Ｐ−１細胞などを親株とす
るマウス肺臓リンパ球のハイグリドーマなどがめげられ
る。
、細胞、ＡＴＬ −２細胞、ＣＣＲ−ＣＥＭ ｉ胞、Ｔ
ＡＬＬ −１細胞、しＰＭ１１７８８細胞、ＨＥ、−６
０細胞、 ＮＡＬＭ −１細胞などがあげられ、動物細
胞では、Ｘ−５５６３ａ胞、ＢＷ５１４７細胞、ＦＳ
−６細胞やＭＳ−１細胞、５Ｐ−１細胞などを親株とす
るマウス肺臓リンパ球のハイグリドーマなどがめげられ
る。
リンパ系細胞を培養する方法は、通常の浮遊細、胞培養
用の容器を九は装置を用いればよ＜、ｉ／ａ胞を増殖さ
せるための培養では、１〜５×１０ 個／−の細胞密度
で、３７℃、５９６Ｃ０２下、３〜５日間培養させる。
用の容器を九は装置を用いればよ＜、ｉ／ａ胞を増殖さ
せるための培養では、１〜５×１０ 個／−の細胞密度
で、３７℃、５９６Ｃ０２下、３〜５日間培養させる。
ｔ７ｔ、有用物質産生の効率的な培養法としては、連続
培養法かめる。また、培地を交換することによって、細
胞数５〜１０ Ｘ １０ ／ｄの高密度で培養するこ
とも可能でおる。
培養法かめる。また、培地を交換することによって、細
胞数５〜１０ Ｘ １０ ／ｄの高密度で培養するこ
とも可能でおる。
本発明による培地は、血清を含まないので、血清を含む
ことによる種々の不都合がなく、また。
ことによる種々の不都合がなく、また。
培地の保存安定性が高く、さらに、本発明の培地を用い
ることによシ５〜１０ Ｘ １０ ／ｄ以上の細胞密
度で培養する高密度培養において、細胞の維持率を有意
に高め、インターフェロン、抗体などの有用物質の産性
を３〜５倍に増加せしめることができる。
ることによシ５〜１０ Ｘ １０ ／ｄ以上の細胞密
度で培養する高密度培養において、細胞の維持率を有意
に高め、インターフェロン、抗体などの有用物質の産性
を３〜５倍に増加せしめることができる。
実施例１
表１に示すＲＩＴＣ５９−８培地に０．０５係ヒト血清
、アルブミン（ＩＳＡ） ｔ−添加した培地上基礎培地
とし、しれに各濃度のＤＭ−α−ＣＤ及びＤＭ−β−Ｃ
Ｄ ｉ添加し九後、０．２２μｍのメンプラン・フィル
ター（ミリポア社製）で濾過滅菌した。各々の培地２０
ｒＩＬｔ乏ファルコン社製３０２４フラスコに入れ、ヒ
ト贋慣血リンパ球ｆｔＥｐｓｔａｉｎ−Ｂａｒｒウィル
スで変異させ、’ｒ賀Ｆｔ高単位に自発産生するＵＭＣ
Ｌ細胞ｉ ３ ＸＩＯ３個／−の初発細胞濃度となるよ
う加え、５％ＣＯ□。
、アルブミン（ＩＳＡ） ｔ−添加した培地上基礎培地
とし、しれに各濃度のＤＭ−α−ＣＤ及びＤＭ−β−Ｃ
Ｄ ｉ添加し九後、０．２２μｍのメンプラン・フィル
ター（ミリポア社製）で濾過滅菌した。各々の培地２０
ｒＩＬｔ乏ファルコン社製３０２４フラスコに入れ、ヒ
ト贋慣血リンパ球ｆｔＥｐｓｔａｉｎ−Ｂａｒｒウィル
スで変異させ、’ｒ賀Ｆｔ高単位に自発産生するＵＭＣ
Ｌ細胞ｉ ３ ＸＩＯ３個／−の初発細胞濃度となるよ
う加え、５％ＣＯ□。
３７℃にて４日間培養した。培養後、各々の細胞密度を
エオシンＹ染色法と血球計算盤にて生細胞密度を計測し
九。培養後の細胞懸濁液の一部を遠心分離により培養上
清液を採取し、インターフェロン活性を測定した。
エオシンＹ染色法と血球計算盤にて生細胞密度を計測し
九。培養後の細胞懸濁液の一部を遠心分離により培養上
清液を採取し、インターフェロン活性を測定した。
インターフェロン活性の測定方法は、ＷＩＳＨ細胞とＶ
＊ｍ１ｃｕｌａｒ ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ Ｖｉｒｕｓ
ｆ用い、マイクロタイターグレートにおける細胞変性
阻止率を標準ヒトインターフェロン金基準として測定し
た。それらの結果を通常使用されている１０％のウシ胎
児血清（ＦＢＳ） ｔ−添加し九ＲＰＭＩ １６４０培
地を対照培地として用い九結果と比べて表２に示す。
＊ｍ１ｃｕｌａｒ ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ Ｖｉｒｕｓ
ｆ用い、マイクロタイターグレートにおける細胞変性
阻止率を標準ヒトインターフェロン金基準として測定し
た。それらの結果を通常使用されている１０％のウシ胎
児血清（ＦＢＳ） ｔ−添加し九ＲＰＭＩ １６４０培
地を対照培地として用い九結果と比べて表２に示す。
これらの結果から、ＤＭ−α−ＣＤ ＦｉＵＭＣＬ Ｉ
Ｉａ胞の増殖とＩＦＮの自発産生を増大せしめることが
認められる。
Ｉａ胞の増殖とＩＦＮの自発産生を増大せしめることが
認められる。
表 ２
０ ６．３ ０．５ＤＭ−α−ＣＤ
３０ ７．８ ０．７６
０ １０．２ １．７１２５ １７
．８ ２．９２５０ １６．３
３．０５００ １３．８ ２
．１１０００ １１．２ ２．０２０
００ ５．８ １．５ＤＭ−β−Ｃ
Ｄ ３０ ８．２ ０．８
６０ １０．８ １．３１２５ １
６．２ ２．Ｌ）２５０ １１．２
２．５５００ ８．２
２．０１０００ ６．７ １．１
２０００ ３．１ ０．９実施例２ 実施例１に示す培地ｔｖ４製し、各々１００−を用いて
ＢＡＬＬ −１細胞ｔ−５Ｘ１０ 個／−の初発細胞
濃度となるように、ベルコ社製１００−用 スピンナー
・フラスコに播き、５ｓｃｏ□、３７℃下１回転数８
Ｏｒ−ｐ−ｒｒｌ−で５日間培養した。培養後、実施例
１と同様に生細胞密度を計測し、培養後の細胞懸濁液の
一部を低速遠心分離によｐ培養上清液を採取し、ヒト免
疫グロブリンＭ （ＩｇＭ） ｔ−ノ４４第５ド社製イ
ムノフロー・キットにより測定し次。その結果を１通常
使用されている１０囁のＦＢＳ ｉ添加しｆｅ、ＲＰＭ
Ｉ １６４０培地を対照培地として用い九結果と比べて
、表３に示す。
３０ ７．８ ０．７６
０ １０．２ １．７１２５ １７
．８ ２．９２５０ １６．３
３．０５００ １３．８ ２
．１１０００ １１．２ ２．０２０
００ ５．８ １．５ＤＭ−β−Ｃ
Ｄ ３０ ８．２ ０．８
６０ １０．８ １．３１２５ １
６．２ ２．Ｌ）２５０ １１．２
２．５５００ ８．２
２．０１０００ ６．７ １．１
２０００ ３．１ ０．９実施例２ 実施例１に示す培地ｔｖ４製し、各々１００−を用いて
ＢＡＬＬ −１細胞ｔ−５Ｘ１０ 個／−の初発細胞
濃度となるように、ベルコ社製１００−用 スピンナー
・フラスコに播き、５ｓｃｏ□、３７℃下１回転数８
Ｏｒ−ｐ−ｒｒｌ−で５日間培養した。培養後、実施例
１と同様に生細胞密度を計測し、培養後の細胞懸濁液の
一部を低速遠心分離によｐ培養上清液を採取し、ヒト免
疫グロブリンＭ （ＩｇＭ） ｔ−ノ４４第５ド社製イ
ムノフロー・キットにより測定し次。その結果を１通常
使用されている１０囁のＦＢＳ ｉ添加しｆｅ、ＲＰＭ
Ｉ １６４０培地を対照培地として用い九結果と比べて
、表３に示す。
これらの結果から、 ＤＭ−α−ＣＤまｍはＤＭ−β−
ＣＤはＢＡＬＬ −１細胞の細胞増殖とＩｇＭ産生を増
大ぜしめることが認められる。
ＣＤはＢＡＬＬ −１細胞の細胞増殖とＩｇＭ産生を増
大ぜしめることが認められる。
表 ３
ＤＭ−α−ＣＤ ５０ ８．３
０．６１００ １６．２ １．２２０
０ ２０．２ １．８４００ １
５．８ １．７８００ ８．２
１．０１６００ ２．１ ０．３
ＤＭ−β−ＣＤ ５０ １０．１
０．８１００ １？、４ １．２２００
２２．３ １．９４００ ２Ｑ
、７ １．８８００ １２．２
１．５１６００ ５．２ ０．７実施
例３ 実施例１に示す培地ｔ−１１１製し、各々２０−を用い
てマウス白血病細胞Ｘ ５５６３細胞ｋｌＸ１０個／−
の初発細胞濃度となるようにファルコン社製ド０２４フ
ラスコに入れ、５憾ＣＯ２，３７℃下、４日間培養した
。培養後、実施例１と同様に生細胞密度ｔ−ｔｔ測した
。七の結果ｔ−１０％のＦＢＳ ｉ添加し、ｑ ＲＰＭ
Ｉ １６４０培地を対照培地として用いた結果と比べて
表４に示す。
０．６１００ １６．２ １．２２０
０ ２０．２ １．８４００ １
５．８ １．７８００ ８．２
１．０１６００ ２．１ ０．３
ＤＭ−β−ＣＤ ５０ １０．１
０．８１００ １？、４ １．２２００
２２．３ １．９４００ ２Ｑ
、７ １．８８００ １２．２
１．５１６００ ５．２ ０．７実施
例３ 実施例１に示す培地ｔ−１１１製し、各々２０−を用い
てマウス白血病細胞Ｘ ５５６３細胞ｋｌＸ１０個／−
の初発細胞濃度となるようにファルコン社製ド０２４フ
ラスコに入れ、５憾ＣＯ２，３７℃下、４日間培養した
。培養後、実施例１と同様に生細胞密度ｔ−ｔｔ測した
。七の結果ｔ−１０％のＦＢＳ ｉ添加し、ｑ ＲＰＭ
Ｉ １６４０培地を対照培地として用いた結果と比べて
表４に示す。
これらの結果から、ＤＭ−α−ＣＤま九はＤＭ−β−Ｃ
ＤはＸ５５６３細胞の増殖を増大６せること及び血清ア
ルブミンの必要量を低下せしめることが認められる。
ＤはＸ５５６３細胞の増殖を増大６せること及び血清ア
ルブミンの必要量を低下せしめることが認められる。
表 ４
ＢＳＡ ５０ ６．０
７．９１００ ７．１ ９．２５
００ ８．５ １１．２１０００
１０．１ １２．０５０００ １３．２
１３．３―−−――−−＋−−−−−−−−−
−−嘩−―ＲＰＭ１１６４０ １４．２ ＋１０暢ＦＢＳ 実施例４ ＢＩＴｏ ５９−８ ＋ ０．０１囁Ｈ８Ａ培地を基礎
培地とし、ＤＭ−α−ＣＤを添加し九培地を調製し九。
７．９１００ ７．１ ９．２５
００ ８．５ １１．２１０００
１０．１ １２．０５０００ １３．２
１３．３―−−――−−＋−−−−−−−−−
−−嘩−―ＲＰＭ１１６４０ １４．２ ＋１０暢ＦＢＳ 実施例４ ＢＩＴｏ ５９−８ ＋ ０．０１囁Ｈ８Ａ培地を基礎
培地とし、ＤＭ−α−ＣＤを添加し九培地を調製し九。
各々の培地２０１ＲｔＫ Ｔ、ＴＭＣＬ細胞及びＢＡＬ
Ｌ−１細胞ｔ−１，５れ０７個／ｌＩｔに懸濁し、５１
Ｃｏ□濃度の検温器中に設置Ｌ７ｔベルコ社製ロッキ
ングプレートにて１５回／分の速度で、ＵＭＣＬＭＣ上
４０時間、 ＢＡＬＬ、−１細胞は７２時間揺動培養し
た。培養後、各々の生細胞密度及びＩＦＮ産生並びにＩ
ｇＭ産生産生側定し丸。
Ｌ−１細胞ｔ−１，５れ０７個／ｌＩｔに懸濁し、５１
Ｃｏ□濃度の検温器中に設置Ｌ７ｔベルコ社製ロッキ
ングプレートにて１５回／分の速度で、ＵＭＣＬＭＣ上
４０時間、 ＢＡＬＬ、−１細胞は７２時間揺動培養し
た。培養後、各々の生細胞密度及びＩＦＮ産生並びにＩ
ｇＭ産生産生側定し丸。
これらの結果全基礎培地に１０及び２０％ＦＢＳを添加
し几培地金対照培地として用い几結果と比較して我５に
示す。
し几培地金対照培地として用い几結果と比較して我５に
示す。
これらの結果からＤＭ−α−ＣＤまたはＤＭ−β−ＣＤ
が細胞高密度培養における生細胞維持率と物質産生１ｒ
：有意に増大せしめることが認められる。
が細胞高密度培養における生細胞維持率と物質産生１ｒ
：有意に増大せしめることが認められる。
ヘ一ののへ１へ の
ぽ
ｃＱ （ＯＫ） Ｖ２ ％ ｌ ＣＱ
、−１−＋ｍ ｐ−１ｅ−Ｉ Ｆ−１１
ｐ−１−■
、−１−＋ｍ ｐ−１ｅ−Ｉ Ｆ−１１
ｐ−１−■
Claims (1)
- 血清を実質的に含まず、０．０５から２ｇ／ｌの範囲の
２−，６−ジメチル−α−または−β−サイクロデキス
トリンを含有するリンパ系細胞用培地。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11228685A JPS61271986A (ja) | 1985-05-27 | 1985-05-27 | リンパ系細胞用培地 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11228685A JPS61271986A (ja) | 1985-05-27 | 1985-05-27 | リンパ系細胞用培地 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61271986A true JPS61271986A (ja) | 1986-12-02 |
| JPS6321469B2 JPS6321469B2 (ja) | 1988-05-07 |
Family
ID=14582889
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11228685A Granted JPS61271986A (ja) | 1985-05-27 | 1985-05-27 | リンパ系細胞用培地 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61271986A (ja) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57138385A (en) * | 1981-02-18 | 1982-08-26 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Multiplying agent of lactobacillus bifidus |
| JPS57194787A (en) * | 1981-05-28 | 1982-11-30 | Ajinomoto Co Inc | Culture medium for animal cell |
| JPS5867188A (ja) * | 1981-10-15 | 1983-04-21 | Teijin Ltd | 生物学的活性物質の製法 |
| JPS5867182A (ja) * | 1981-10-15 | 1983-04-21 | Teijin Ltd | 培養方法及び培地 |
| JPS58179496A (ja) * | 1982-04-12 | 1983-10-20 | Takeda Chem Ind Ltd | ランカシジンの改良製造法 |
| JPS59184132A (ja) * | 1983-04-02 | 1984-10-19 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 百日ぜきワクチンの製造方法 |
-
1985
- 1985-05-27 JP JP11228685A patent/JPS61271986A/ja active Granted
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57138385A (en) * | 1981-02-18 | 1982-08-26 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Multiplying agent of lactobacillus bifidus |
| JPS57194787A (en) * | 1981-05-28 | 1982-11-30 | Ajinomoto Co Inc | Culture medium for animal cell |
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6321469B2 (ja) | 1988-05-07 |
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