JPS60237989A - 細胞培養用添加剤 - Google Patents
細胞培養用添加剤Info
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- JPS60237989A JPS60237989A JP59094270A JP9427084A JPS60237989A JP S60237989 A JPS60237989 A JP S60237989A JP 59094270 A JP59094270 A JP 59094270A JP 9427084 A JP9427084 A JP 9427084A JP S60237989 A JPS60237989 A JP S60237989A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は細胞培養技術、災に詳細には、良好な細胞培養
条件を設定するための細胞培養用添加剤に関する。
条件を設定するための細胞培養用添加剤に関する。
背景技術
近年の生物工学の進歩に伴って、その基礎技術としての
細胞培養技術ｔａ、ますます重要性をましてきており、
就中特に細胞培養に適した培地についての多くの研究が
なされている。
細胞培養技術ｔａ、ますます重要性をましてきており、
就中特に細胞培養に適した培地についての多くの研究が
なされている。
現在、斯かる栄養培地（基礎培地）は種々市販されてい
るが、一般に細胞培養用培地には、血清、殊に片胎児血
ｆｆ（Ｆｅ２）ｔ″添加ることが必要なことが知られて
いる。
るが、一般に細胞培養用培地には、血清、殊に片胎児血
ｆｆ（Ｆｅ２）ｔ″添加ることが必要なことが知られて
いる。
しかしながら、これら血清は極めて多種類の成分からな
っているため、例えば細胞培養液から細胞が産生ずる有
用物質を単離採取することが極めて困難であり、ときに
は不可能なことさえある。
っているため、例えば細胞培養液から細胞が産生ずる有
用物質を単離採取することが極めて困難であり、ときに
は不可能なことさえある。
更にまた、血清は入手困難かつ高価であシ、しかも培養
に与える効果が不均一であるという欠点を有する。
に与える効果が不均一であるという欠点を有する。
発明の目的
本発明者らは、細胞の培養条件、特に上記血清に代わる
成分について鋭意研究を行った結果、卵白タンパク質の
オボマクログロブリンが優れた細胞増殖作用を有し、し
かも上記血清のような欠点を有さないことを見出し、本
発明を完成した。
成分について鋭意研究を行った結果、卵白タンパク質の
オボマクログロブリンが優れた細胞増殖作用を有し、し
かも上記血清のような欠点を有さないことを見出し、本
発明を完成した。
発明の構成
不発ｇｉＪハ、卵白タンパク質のオボマクログロブリン
を含有する細胞培養用添加剤を提供するものである。
を含有する細胞培養用添加剤を提供するものである。
オボマクログロブリンは培養細胞の機能を保持し、その
増殖性を極めて良好に促進する。そしてこれは単一物質
であるので、前記有用物質を単離採取する場合に障害と
ならず、また培養に与える効果も均一である。このこと
は、培養細胞を用いる薬剤等の細胞毒性試験等において
極めて有利である。
増殖性を極めて良好に促進する。そしてこれは単一物質
であるので、前記有用物質を単離採取する場合に障害と
ならず、また培養に与える効果も均一である。このこと
は、培養細胞を用いる薬剤等の細胞毒性試験等において
極めて有利である。
オボマクログロブリンは卵白中の高分子量糖蛋白質とし
て知られているものであり、その調製法もすでに公知で
ある［ Ｆｅｅｎｅｙ Ｒ、Ｅ 、 ｌ”） ： Ｃ０
ｍ１）。
て知られているものであり、その調製法もすでに公知で
ある［ Ｆｅｅｎｅｙ Ｒ、Ｅ 、 ｌ”） ： Ｃ０
ｍ１）。
Ｂｉｏｃｈｅｍ、 ｐｌｉｙｓｉｕｌ、、５４Ａ、２８
１（１９７６）、Ｉｋａｉ Ａら： Ｊ、 Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ、 ９２．１６７９−１６８２（１９８２）、同９
３．１２１〜１２７（１９８３）、及びＮａｇａｓｅ
、ｆ（、ｌ−、： Ｊ。
１（１９７６）、Ｉｋａｉ Ａら： Ｊ、 Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ、 ９２．１６７９−１６８２（１９８２）、同９
３．１２１〜１２７（１９８３）、及びＮａｇａｓｅ
、ｆ（、ｌ−、： Ｊ。
Ｂ 、 Ｃ、、ｖｏ１２５８ 、Ｎｏ１２．７４８１〜
７４８９（１９８３）など〕。
７４８９（１９８３）など〕。
オボマクログロブリンの調製原料の卵白は特に制限はな
く、各種動物のものを使用することができるが、一般に
は容易に入手可能な、ニワトリ、アヒル、ウズラ、七面
鳥等の卵白が好ましい。
く、各種動物のものを使用することができるが、一般に
は容易に入手可能な、ニワトリ、アヒル、ウズラ、七面
鳥等の卵白が好ましい。
その調製法も特に制限はなく、タンパク質成分の分離に
一般に使用されている方法と同様にして、オボマクログ
ロブリンの物理化学的性質等を利用する各種処理操作、
例えば蛋白沈殿剤処理、分子篩クロマトグラフィー（ゲ
ル濾過）、イオン交換クロマトグラフィー、遠心分離、
電気泳動、透析等を単独又は組合せて行うことができる
。
一般に使用されている方法と同様にして、オボマクログ
ロブリンの物理化学的性質等を利用する各種処理操作、
例えば蛋白沈殿剤処理、分子篩クロマトグラフィー（ゲ
ル濾過）、イオン交換クロマトグラフィー、遠心分離、
電気泳動、透析等を単独又は組合せて行うことができる
。
例えば、卵白ｋ トＩＪスー塩酸緩衝液等の水溶性溶媒
に混合し、オボムシン等の不溶性タンパク質成分全除去
しｆｃ後、ゲル濾過に付すことにより分子量６０〜８０
万の糖タンパク質としてオボマクログロブリンを得るこ
とができる。
に混合し、オボムシン等の不溶性タンパク質成分全除去
しｆｃ後、ゲル濾過に付すことにより分子量６０〜８０
万の糖タンパク質としてオボマクログロブリンを得るこ
とができる。
本発明の細胞培養用添加剤は、オボマクログロブリンを
含有する各種の形態とすることができ、例えば水性溶媒
の溶液あるいは凍結乾燥品等として提供される。この細
胞培養用添加剤には、通常の希釈剤、栄養培地の成分、
公知の増殖支持成分、保存剤等を添加配合することがで
きる。
含有する各種の形態とすることができ、例えば水性溶媒
の溶液あるいは凍結乾燥品等として提供される。この細
胞培養用添加剤には、通常の希釈剤、栄養培地の成分、
公知の増殖支持成分、保存剤等を添加配合することがで
きる。
本発明の細胞培養用添加剤は、一般の基礎培地に添加し
て使用して、従来の方法と同様な条件下で細胞培養を行
うことができる。肖該基礎培地としては、例えばＣＥＭ
培地、ＣＭＲＬ−１０６６培地、ＤＭ−１６０培地、イ
ーグルの最小必須培地（Ｂａｇｌｅ′ｓ ＭＥＭ）、オ
ートクレーブ可能ＭＥＭ、フイシャーの培地（Ｆｉｓｈ
ｅｒ′ｓ Ｍｅｄｉｕｍ ） 、Ｆ −１０％Ｆ−１２
培地、Ｌ−１５培地、ＮＣＴＣ１０９培地、ＲＰＭＩ−
１６４０培地等が挙げられる。本発明細胞培養用添加剤
は、培地１ゴに対し、オボマクログロブリ／として０．
１μｆ〜１１ｑ１好ましくは１〜１００μｆ添加される
。
て使用して、従来の方法と同様な条件下で細胞培養を行
うことができる。肖該基礎培地としては、例えばＣＥＭ
培地、ＣＭＲＬ−１０６６培地、ＤＭ−１６０培地、イ
ーグルの最小必須培地（Ｂａｇｌｅ′ｓ ＭＥＭ）、オ
ートクレーブ可能ＭＥＭ、フイシャーの培地（Ｆｉｓｈ
ｅｒ′ｓ Ｍｅｄｉｕｍ ） 、Ｆ −１０％Ｆ−１２
培地、Ｌ−１５培地、ＮＣＴＣ１０９培地、ＲＰＭＩ−
１６４０培地等が挙げられる。本発明細胞培養用添加剤
は、培地１ゴに対し、オボマクログロブリ／として０．
１μｆ〜１１ｑ１好ましくは１〜１００μｆ添加される
。
このようにして本発明添加剤を加えた培地を用いてｐＨ
６〜８で、温度約３７℃で培養を行えは極めて良好な結
果が得られる。そしてこの培地は、動物由来の各種細胞
の培養に使用することができ、例えば、付着性細胞、浮
遊性細胞の何れでも、またすでに株化された細胞でも、
新鮮な悪性細胞、正常細胞等であってもよい。
６〜８で、温度約３７℃で培養を行えは極めて良好な結
果が得られる。そしてこの培地は、動物由来の各種細胞
の培養に使用することができ、例えば、付着性細胞、浮
遊性細胞の何れでも、またすでに株化された細胞でも、
新鮮な悪性細胞、正常細胞等であってもよい。
次に参考例、実施例及び試験例を挙げて説明する。
参考例
鶏卵２０個より分離した卵白を等量の１％ＮａＣＬＺｌ
ｌ］２５ｍＭトリス−塩酸緩衝液（声７．６）に懸濁し
、ポリエチレングリコール（ＭＷ＝７５００、和光紬薬
社製）全２チ濃度になるように加え、遠心（１０，００
０ｒｐｍ Ｘ １０分）し、上清を採取する。これに上
記ポリエチレングリコールを１０チ濃度になるように加
え、遠心（１０，０００ｒｐｍ Ｘ １０分）して沈澱
部分を採取する。これを上記緩衝液に溶解し、更に遠心
（１０，０００ｒｐｍ Ｘ １０分）して、上清を採取
する。これ’ｅｃＬ−６Ｂ（ファルマシア社製）のカラ
ム（２ｔ）に伺し、同緩衝液で溶出し、サーモリシ／の
酵素阻害活性を有するオボマクログロブリン會得た。分
子量約７０万。
ｌ］２５ｍＭトリス−塩酸緩衝液（声７．６）に懸濁し
、ポリエチレングリコール（ＭＷ＝７５００、和光紬薬
社製）全２チ濃度になるように加え、遠心（１０，００
０ｒｐｍ Ｘ １０分）し、上清を採取する。これに上
記ポリエチレングリコールを１０チ濃度になるように加
え、遠心（１０，０００ｒｐｍ Ｘ １０分）して沈澱
部分を採取する。これを上記緩衝液に溶解し、更に遠心
（１０，０００ｒｐｍ Ｘ １０分）して、上清を採取
する。これ’ｅｃＬ−６Ｂ（ファルマシア社製）のカラ
ム（２ｔ）に伺し、同緩衝液で溶出し、サーモリシ／の
酵素阻害活性を有するオボマクログロブリン會得た。分
子量約７０万。
実施例１゜
■ 参考例で得たオボマクログロブリンｔ−１％Ｎａ
ＣＬ加２５ ｍＭ ）リス−塩酸緩衝液に対して透析し
、０．６〜蛋白−ｆｆｉ／ｄに調製し、４℃下に保存し
た。これを［添加剤Ｎａ１Ｊとする。
ＣＬ加２５ ｍＭ ）リス−塩酸緩衝液に対して透析し
、０．６〜蛋白−ｆｆｉ／ｄに調製し、４℃下に保存し
た。これを［添加剤Ｎａ１Ｊとする。
尚、蛋白量は、大塚アッセイ研究所製「トネインＴＰ■
」により測定した（以下同じ）０■ 参考例で得たオボ
マクログロブリンに０．０１モルリン酸塩緩衝液（ｐｌ
（＝７．４）に対して透析後、１η蛋白量／−に調製し
た。これを「添加剤随２」とする。
」により測定した（以下同じ）０■ 参考例で得たオボ
マクログロブリンに０．０１モルリン酸塩緩衝液（ｐｌ
（＝７．４）に対して透析後、１η蛋白量／−に調製し
た。これを「添加剤随２」とする。
■ 東京大学、猪狩教授よシ供与を受けたワニ卵自由来
のオボマクログロブリンＣＪ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ。
のオボマクログロブリンＣＪ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ。
９３．１２１−１２７（１９８３））を用い、上記■と
同様にして１．０η蛋白量／−にｆｉｌＡＩ＊した。
同様にして１．０η蛋白量／−にｆｉｌＡＩ＊した。
これを「添加剤随３」とする。
■ 上記■の添加剤を一部、凍結乾燥した。これを「添
〃■剤随４」とする。
〃■剤随４」とする。
試験例１゜
付着性細胞のＱＧ−９０〔ヒト肺癌細胞株；Ｃａｎｃｅ
ｒ Ｒｅｓ、、 ４２ 、６０１〜６０８（１９８２）
）ｋ用い、以下の培養試験を行った。
ｒ Ｒｅｓ、、 ４２ 、６０１〜６０８（１９８２）
）ｋ用い、以下の培養試験を行った。
（１）１０ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−ｘ−
ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を含有する
ＲＰＭＩ−１６４０培地（ギブコ社）にて、１．０Ｘ１
０’個／−に調製したＱＧ−９０の％１−を、２４ウエ
ルプレート（ヌンク社）にまき、３７℃下に５％炭酸ガ
スインキュベーター内で培養した。本発明の添加剤ＮＩ
Ｌ１ヲ各種濃度で加え、培養１８時間後及び４８時間後
の細胞増殖能ｋＭＴＴアッセイ〔医学のあゆみ、第１２
８巻、第１号、９−１０頁（１９８４）、ＩＩによシ測
定した。
ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を含有する
ＲＰＭＩ−１６４０培地（ギブコ社）にて、１．０Ｘ１
０’個／−に調製したＱＧ−９０の％１−を、２４ウエ
ルプレート（ヌンク社）にまき、３７℃下に５％炭酸ガ
スインキュベーター内で培養した。本発明の添加剤ＮＩ
Ｌ１ヲ各種濃度で加え、培養１８時間後及び４８時間後
の細胞増殖能ｋＭＴＴアッセイ〔医学のあゆみ、第１２
８巻、第１号、９−１０頁（１９８４）、ＩＩによシ測
定した。
結果を第１図に示す。第１図中、
に：１８時間後に測定した、５７Ｑｎｍにおける吸光度
、 １１１１１： ４８時間後に測定シタ、５７０ｎｍにお
ける吸光度、 全夫々示す。
、 １１１１１： ４８時間後に測定シタ、５７０ｎｍにお
ける吸光度、 全夫々示す。
ＭＴＴアッセイは、活動性ミトコンドリアを反映し、第
１図より、本発明添加剤の添加により、極めて良好な培
養条件が設定されることが判る。
１図より、本発明添加剤の添加により、極めて良好な培
養条件が設定されることが判る。
（２）上記（１）と同様にして、種々の？＃腋の［添加
剤＋１ａ２Ｊ會添加したＲＰＭＩ−１６４０培地を用い
て、ＱＧ−９０を３７Ｃ下に５日間培養した。結果を第
２〜６図に示す。尚、 第２図；無添加（コントロール） 第３図；０．１■蛋白量／ ｍｅ添加 第４図： ０．０５ ｔｔ 第５図； ０．０２５ ｔｔ 第６図；０．０１３１１ｖ蛋白量／−添加を夫々示す。
剤＋１ａ２Ｊ會添加したＲＰＭＩ−１６４０培地を用い
て、ＱＧ−９０を３７Ｃ下に５日間培養した。結果を第
２〜６図に示す。尚、 第２図；無添加（コントロール） 第３図；０．１■蛋白量／ ｍｅ添加 第４図： ０．０５ ｔｔ 第５図； ０．０２５ ｔｔ 第６図；０．０１３１１ｖ蛋白量／−添加を夫々示す。
Ｎ２〜６図より、本発明の添加剤の添加群は、極めて良
好な増殖を示すことが判る。
好な増殖を示すことが判る。
試験例２゜
浮遊性細胞の１（ａｊｉ（ヒトバーキットリンフオーマ
細胞株： Ｊ、 Ｎａｔ、 Ｃａｎｃｅｒ Ｊｎｓｔ、
３４．２３１ （１９６５））を用い、以下の培養試
験全行った。
細胞株： Ｊ、 Ｎａｔ、 Ｃａｎｃｅｒ Ｊｎｓｔ、
３４．２３１ （１９６５））を用い、以下の培養試
験全行った。
（１）各種濃度の「添加剤ＮＩＬ１． Ｊを添加したＰ
ＲＭＩ−１６４０培地にて、１０榮１０’個／−に調製
したＲａｊｉの各１ｄ′ｆｒ２４ウエルプレートにまき
、３７℃で、５チ炭酸ガスインキユベーター内で培養し
た。培養２４時間後の細胞増殖能’ｋＭＴＴアッセイに
よシ測、定した。結果を第７図に示す。
ＲＭＩ−１６４０培地にて、１０榮１０’個／−に調製
したＲａｊｉの各１ｄ′ｆｒ２４ウエルプレートにまき
、３７℃で、５チ炭酸ガスインキユベーター内で培養し
た。培養２４時間後の細胞増殖能’ｋＭＴＴアッセイに
よシ測、定した。結果を第７図に示す。
（２） 上記（１）において、培養２４時間後に各ウェ
ルをピペッティングした後、各々１００μｔ（７）細胞
浮遊液をとｐ、１００μｔの０．２ ％ トリパンブル
ー含有リン酸塩緩衝液を混合し、これをピケチュルク計
算盤に入れ、顕微鏡下に、未染色の生細胞数を計測した
。結果を第８図に示す。
ルをピペッティングした後、各々１００μｔ（７）細胞
浮遊液をとｐ、１００μｔの０．２ ％ トリパンブル
ー含有リン酸塩緩衝液を混合し、これをピケチュルク計
算盤に入れ、顕微鏡下に、未染色の生細胞数を計測した
。結果を第８図に示す。
（３） 上記（１）において、ＲＰＭＩ−１６４０培地
を０１Ｍ培地（スコツト社製）に代えて、同様に試験し
、はぼ同様の結果を得た。
を０１Ｍ培地（スコツト社製）に代えて、同様に試験し
、はぼ同様の結果を得た。
試験例３゜
各種濃度の［添加剤Ｎ１５Ｊを添加した１０ｍＭＨＥＰ
ＥＳ含有ＲＰＭＩ−１６４０培ｊｔｌｉ＆？：て、１．
０Ｘ１０’個／−に調製した、血清要求性の強いＤａｕ
ｄｉ （：ヒトバーキットリンフオーマ細胞株； Ｅｕ
ｒ 、Ｊ、 Ｄｎｍｕｎｏｌ・６、（１２）、９１３′
−９１６１１９７６）〕 の各１−を２４ウエルプレー
トにまき、３７Ｃで、５チ炭酸ガスインキユベーター内
で培養し、３日後の細胞数を前記試験例２−（２）と同
様にして測定した０結果を下記ｌ！１表に示す。
ＥＳ含有ＲＰＭＩ−１６４０培ｊｔｌｉ＆？：て、１．
０Ｘ１０’個／−に調製した、血清要求性の強いＤａｕ
ｄｉ （：ヒトバーキットリンフオーマ細胞株； Ｅｕ
ｒ 、Ｊ、 Ｄｎｍｕｎｏｌ・６、（１２）、９１３′
−９１６１１９７６）〕 の各１−を２４ウエルプレー
トにまき、３７Ｃで、５チ炭酸ガスインキユベーター内
で培養し、３日後の細胞数を前記試験例２−（２）と同
様にして測定した０結果を下記ｌ！１表に示す。
以下余白
第 １ 表
第１図は不発ＢＡ細胞培養用添加剤１の添加による付層
性細胞の増殖効果を示す図面、第２図はＲＰＭＩ−１６
４０培地で付着性細胞を培養したときの細胞の増殖状態
を示す写真、第３〜６図は同添加剤２添加ＲＰＭＩ−１
６４０培地で付着性細胞全培養したときの細胞の増殖状
態を示す写真、第７図は同添加剤１の添加による浮遊性
細胞の増殖効果を示す一曲、第８図は同添加剤１の添加
量と浮遊性細胞の細胞数との関係を示す図面である。 以上 （１１〕 図面の浄書（内容に変更なし） 第４図 第５図 図面の浄書（内容に変更なし） 第６図 手続補正書（方式） 昭和５９年８月２３日 １％２．”！ １庁長官 志 賀 学 殿 １、 事件の表示 昭和５９年特許願第９４２７０号 ２、発明の名称 細胞培養用添加剤 ３、補正をする者 事件との関係 出願人 住 所 群馬県高崎市栄町１７査５号 名 称 株式会社 日本抗体研究所 代表者 足 立 正 − 住 所 東京都千代田区神田司町２丁目９番地名 称
大塚製薬株式会社 代ｅ、＠大塚明彦 ４、代理人 住 所 東京都中央区日本橋人形町１丁目３番６号（〒
１０３）５、補正命令の日付 昭和５９年７月３１日（発送） ６、 補正の対象 明細書の「図面の簡単な説明」の欄及び図面 ７、 補正の内容 （１）明細書中、第１１頁下から第８行ないし第４行 「第２図は一一一一一示す写真、」とあるを［第２図は
ＲＰＭＩ −１６４０培地で付着性細胞を培養したとき
の細胞の増殖状態を示す図面、第３〜６図は同添加剤２
添加ＲｐＭＩ −１６４０培地で付着性細胞を培養した
ときの細胞の増殖状Ｎｔ−示す図面、」と訂正する。 （２） 別紙のとおり第２図ないし第６図を提出する。 ２−
性細胞の増殖効果を示す図面、第２図はＲＰＭＩ−１６
４０培地で付着性細胞を培養したときの細胞の増殖状態
を示す写真、第３〜６図は同添加剤２添加ＲＰＭＩ−１
６４０培地で付着性細胞全培養したときの細胞の増殖状
態を示す写真、第７図は同添加剤１の添加による浮遊性
細胞の増殖効果を示す一曲、第８図は同添加剤１の添加
量と浮遊性細胞の細胞数との関係を示す図面である。 以上 （１１〕 図面の浄書（内容に変更なし） 第４図 第５図 図面の浄書（内容に変更なし） 第６図 手続補正書（方式） 昭和５９年８月２３日 １％２．”！ １庁長官 志 賀 学 殿 １、 事件の表示 昭和５９年特許願第９４２７０号 ２、発明の名称 細胞培養用添加剤 ３、補正をする者 事件との関係 出願人 住 所 群馬県高崎市栄町１７査５号 名 称 株式会社 日本抗体研究所 代表者 足 立 正 − 住 所 東京都千代田区神田司町２丁目９番地名 称
大塚製薬株式会社 代ｅ、＠大塚明彦 ４、代理人 住 所 東京都中央区日本橋人形町１丁目３番６号（〒
１０３）５、補正命令の日付 昭和５９年７月３１日（発送） ６、 補正の対象 明細書の「図面の簡単な説明」の欄及び図面 ７、 補正の内容 （１）明細書中、第１１頁下から第８行ないし第４行 「第２図は一一一一一示す写真、」とあるを［第２図は
ＲＰＭＩ −１６４０培地で付着性細胞を培養したとき
の細胞の増殖状態を示す図面、第３〜６図は同添加剤２
添加ＲｐＭＩ −１６４０培地で付着性細胞を培養した
ときの細胞の増殖状Ｎｔ−示す図面、」と訂正する。 （２） 別紙のとおり第２図ないし第６図を提出する。 ２−
Claims (1)
- １ 卵白タンパク質のオボマクログロブリンヲ含有する
細胞培養用添加剤。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59094270A JPS60237989A (ja) | 1984-05-11 | 1984-05-11 | 細胞培養用添加剤 |
| EP19850105514 EP0166130A3 (en) | 1984-05-11 | 1985-05-06 | Additives for use in cell culture, culture medium for non-serum cultivation and method of cell culture using them |
| IL7511885A IL75118A (en) | 1984-05-11 | 1985-05-07 | Additives for use in cell culture,containing ovomacroglobulin culture medium for non-serum cultivation and method of cell culture using them |
| KR1019850003174A KR890003081B1 (ko) | 1984-05-11 | 1985-05-10 | 세포배양에 사용하기 위한 첨가물, 무혈청 배양용 배지 및 그것들을 사용하는 세포배양법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59094270A JPS60237989A (ja) | 1984-05-11 | 1984-05-11 | 細胞培養用添加剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60237989A true JPS60237989A (ja) | 1985-11-26 |
Family
ID=14105579
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59094270A Pending JPS60237989A (ja) | 1984-05-11 | 1984-05-11 | 細胞培養用添加剤 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0166130A3 (ja) |
| JP (1) | JPS60237989A (ja) |
| KR (1) | KR890003081B1 (ja) |
| IL (1) | IL75118A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5190916A (en) * | 1986-06-13 | 1993-03-02 | Japan Immuno Research Laboratories Co., Ltd. | Use of ovomacroglobulin as an agent for treating wound and inflammation |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116574683B (zh) * | 2023-07-12 | 2023-09-29 | 中国农业大学 | 一种细胞生长促进剂及其应用 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB983489A (en) * | 1960-03-04 | 1965-02-17 | Ustav Ser A Ockovacich Latek P | A tissue culture medium and a method of preparing same |
-
1984
- 1984-05-11 JP JP59094270A patent/JPS60237989A/ja active Pending
-
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- 1985-05-10 KR KR1019850003174A patent/KR890003081B1/ko not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5190916A (en) * | 1986-06-13 | 1993-03-02 | Japan Immuno Research Laboratories Co., Ltd. | Use of ovomacroglobulin as an agent for treating wound and inflammation |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0166130A2 (en) | 1986-01-02 |
| KR850008183A (ko) | 1985-12-13 |
| EP0166130A3 (en) | 1988-01-27 |
| IL75118A (en) | 1988-07-31 |
| IL75118A0 (en) | 1985-09-29 |
| KR890003081B1 (ko) | 1989-08-21 |
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