JPS6122099A - 抗腫瘍性抗生物質化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の概要 本発明は本明細書にサンドラマイシン（ｓａｎｄｒａ−
ｍｙｃｉｎ）として指称される新規な環状デプシペプチ
ド抗腫瘍性抗生物質およびその新規微生物、ノカルジオ
イデス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ）種株Ｃ４９，００
９、ＡＴＣＣ３９，４１９、の発酵による製造、並びに
新規抗腫瘍性抗生物質を含む薬剤組成物および前記抗腫
瘍性抗生物質を抗菌および抗腫瘍剤として使用する方法
に関する。本発明はまたサンドラマイシンの発酵生産に
使用する新規微生物自体に関する。

情報開示の陳述 コシャマ他に対する１９８２年１１月２３日に発行され
た米国特許第４，３６０，４５８号中にＢＢＭ−９２８
と指称される抗腫瘍性抗菌性複合体およびその菌株Ｇ−
４５５−１０１（ＡＴＣＣ３１４９１）として指称され
るアクナノミセス類の新菌株の発酵による製造が開示さ
れ、前記菌株は後の属アクチノマズラ（Ａｃｔｉｎｏｍ
ａｄｕｒａ）の新種であると決定されアクチノマズラ　
ルゾネンシ皮　ノブ、スブ。

（八ｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｔｕｚｏｎｅｎｓｉｓ　
ｎｏｖ、　ｓｐ、）と指称された〔ジエ、アンチバイオ
ティックス（Ｊ、　Ａｎｔｉ−ｂｉｏｔｉｃｓ）、３３
　（１０）　、１０９８〜１１０２（１９８０）参照〕
。

ＢＢＭ−９２８成分の製造、単離、特性表示および抗腫
瘍活性は、ジエ、アンチバイオティ・７クス（Ｊ、Δｎ
ｔｉｂＬｏｔｉｃｓ）、３３　（１０）　、１０８７〜
１０９７　　（１９８０）に開示される。ＢＢＭ−９２
８複合体の主要成分であるＢＢＭ−９２８Ａ、Ｂ、Ｃお
よびＤ（現在それぞれルゾベプチン（ｌｕｚｏｏｐｅｐ
Ｈｎ）　Ａ　、　Ｂ　ＸＣおよびＤと称される）の構造
は１．１９８４年５月２９日に発行されたコシャマ他に
対する米国特許第４．４５１，４５６号に開示され、構
造式、 く内０口 八 蚕 トに一ζ τ ト 全 を有する。ルゾペプチンＡ、Ｂ、ＣおよびＤは３−ヒド
ロキシー６−メトキシキナルジン酸を発色団として、お
よび４−ヒドロキシ−２，３，４゜５−テトラヒドロピ
リダジン−３−カルボン酸を含み、３成分の間の構造の
差異は単にテトラヒドロピリダジン成分中のヒドロキシ
ル基のアセチル化の程度にある。

発明の詳細な説明 本発明は構造式、 ロ　　　　　　　　　　　　　　υ ○　　　　　　　　　　　　　１ を有し、ここにサンドラマイシンとして指称される新規
な環状デブシペプチド抗腫瘍性抗生物質、およびサンド
ラマイシンを製造し、単離し、実質上純粋な形態に精製
する方法に関する。

新規抗生物質、サンドラマイシンは、仮に属ノカルジオ
イデス（ＮｏｃａｒｄＬｏＬｄｅｓ）の種として分類し
た新規微生物の発酵、前記微生物により産生・されたサ
ンドラマイシンの蓄積および培養ブロスからの抗生物質
サンドラマイシンの捕集により得られる。好ましいサン
ドラマイシン産生微生物ＬＬＪキシコで捕集した土壌試
料から分離されたノカルジオイデススプ（Ｎｏｃａｒｄ
Ｌｏｉｄｅｓ　ｓｐ、）株Ｃ４９，００９およびその突
然変異体である。この菌株はアメリカン、タイプ、カル
チャ、コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ　ＴｙｐｅＣｕ
ｌｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌ
ｅＪａｒｙｌａｎｄ）にＡＴＣＣ３９，４１９として寄
託された。

微生物 以下は抗腫瘍性抗生物質サンドラマイシンを産生ずる好
ましい微生物の一般的説明である。

、診皿 株尚Ｃ４９，り０９は基体および気体菌糸体（幅０．４
μｍ）を形成し、基土菌糸体は長く、よく分枝し、１週
ｆ＆短いフィラメントまたは桿状体に分裂する。

株１１ｈｃ４９，００９は連続培養で気体菌糸体を形成
する能力を失う傾向がある。気体菌糸体の菌糸は希薄に
分枝する。顕微鏡観察は気体菌糸が初めに多少ジグザグ
形状であって、長い線状鎖の分節胞子様円柱状セグメン
ト（０，５Ｘ１ないし〜３μｍ）に発達し、後に半透明
菌糸で分離されることを示す。

胞子様セグメントの表面は滑らかである。株隘Ｃ４９，
００９はダラム陽性であり、抗酸性ではない。胞子嚢、
運動胞子君よび菌核は観察されない。

細胞　　　および全　胞　成分 株＆Ｃ４９，００９の細胞壁はビ、ベッケル（Ｂ、　Ｂ
ｅｃｋｅｒ）他、アプル、ミクロパイオル、　（Ａｐｐ
ｌｅ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ）１３．２３６〜２４３　（
１９６５）、およびティ。

ヤマグチ、ジェ、バタテリオル（Ｊ、ＲａｃｔｅｒＬｏ
ｌ、）８９．４４１〜４５３　（１９６５）により記載
された方法によれば細胞壁中の特性アミノ酸成分として
ＬＬ−ジアミノピメリン酸およびグリシンを含む。全細
胞氷解物はグルコース、マンノースおよびリボースの存
在を示すが、しかしエム、ピー。

レケハリール（Ｍ−Ｐ、Ｌｅｃｈｅｖａｌｉ’ｅｒ）他
によりパイオル、アクチノマイシーテス、リレーテッド
、オルガニズムズ（Ｂｉｏｌ、＾ｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔ
ｅｓ　ＲｅｌａｔｅｄＯｒｇａｎｉｓｍｓ）、１上、７
８〜９２　（１９７６）に示された手順により測定して
診断機を欠く。前記細胞壁組成および全細胞糖成分は株
＆Ｃ４９，００９が細胞壁タイプＩのアクナノミセス類
（ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ）の種であることを示す。

立長および生理学的性 株Ｎｌｌ　Ｃ４９、００９は絶対好気性アクナノミセス
類であり、多くの記述培地中でよく成長する。気体菌糸
体はＩＳＰ培地尚３．５および７、並びにツアペック（
Ｃｚａｐｅｋ）のスクロース−ナイトレート寒天で豊富
または普通に、しかし富栄養有機培地例えばＩＳＰ培地
Ｎ１２および６、またはベンネット（Ｂｅｎｎｅｔｔ）
寒天上で希薄に形成される。気体菌糸体の色は白色であ
る。メラ゛ノイドおよび他の特殊な色素は今まで試験し
た記述培地のすべてに生じない。栄養菌子体（ｖｅｇｅ
ｔａｔｉｖｅ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ）の裏面色は単に帯黄
色である。それは２８℃で最適生育、１５℃および３７
℃で普通の生育を示すが、しかし５℃および４５℃で生
育・を示さない。ゼラチンおよびデンプンは分解される
。チロシナーゼ反応は陰性である。生育は７％ＮａＣβ
または０．０１％リゾチームの存在で抑制される。株ｍ
ｃ４９，００９の培養および生理的特性はそれぞれ表１
および２に示される。株Ｊ１ｈＣ４９，００９は多くの
糖を生育に利用し、炭素源の利用性は表３に示される。

トリプトン−酵母エキスブロス： （Ｉ　ＳＰ　　１ｋｌ） Ｇ−：並−毛状、弱黄色沈渣 Ｄ：なし スクロース−ナイトレート寒天： （ツアペック寒天） Ｇ：豊富 Ｒ：黄色（９２）”“ないし暗帯灰黄色（９１）Ａ：並
、白色（２６３） Ｄ：並、黄色（８７） グルコース−アスパラギン寒天二 Ｇ：貧 Ｒ：帯黄白色（９２）ないし淡黄色（８９）Ａ：貧、白
色（２６３） Ｄ：なし グリセリン−アスパラギン寒天： （ＩｓＰ　　猶５） Ｇ：並 Ｒ：明黄色（８６）ないし並黄色（８７）へ二並、白色
（２６３） Ｄ：なし 無機塩−デンプン寒天 ＣＩ　ＳＰ　　患４） Ｇ：並 Ｒ：淡黄色（８９）ないし並黄色（８７）Ａ：貧、白色
（２６３） Ｄ：なし チロシン寒天（ＩＳＰ　　Ｎａ７）： Ｇ：豊富 Ｒ：淡黄色（８９）ないし暗黄色（８８）Ａ：並、白色
（２６３） Ｄ：なし 普通寒天； Ｇ：並 Ｒ：淡黄色（８９） Ａ：並、白色（２６３） Ｄ：なし 酵母エキス−麦芽エキス寒天： （ＩＳＰ　　Ｎ１１１２−） Ｇ二豊富 Ｒ：淡黄色（８９）ないし並黄色（８７）Ａ：貧、白色
（２６３） 、Ｄ：なし オートミール寒天 （ＩＳＰ　　階３） Ｇ：並 Ｒ：帯黄白色（９２）ないし並黄色（Ｂ７）Ａ：並、白
色（２６３） Ｄ：なし ヘンネット寒天 Ｇ：並 Ｒ：淡黄色（８９）ないし暗黄色（８８）Ａ：僅少ない
し貧、白色（２６３） Ｄ：なし ペプトン−酵母エキス−鉄寒天 （ＩＳＰ　　隘６） Ｇ：貧 Ｒ：淡橙黄色（７３）ないし明橙黄色（７０）Ａ：僅少
、白色（２６３） Ｄ：なし ９　２８℃、３週間培養後測定 “１　　略語；Ｇ＝生育；Ｒ−裏面色；Ａ＝気気菌菌糸
体Ｄ＝＝散性色素 申傘中　　色および括弧内の数字は［ケリー他（Ｋｅｌ
ｌｙＪ、Ｄ−ａｎｄ　Ｄ−Ｂ、Ｊｕｄｄ）　ｓセントロ
イドカラー（ＣｅｎｔｒｏＬｄ　Ｃｏ１ｏｒｓ）で示さ
れたＩ　５ＣＣ−ＮＢＳ色名チャート、Ｕ、Ｓ。

Ｄｅｐｔ、’ｏｆ　Ｃｏｍａ、　Ｃｉｒ　、５５３．　
ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＤ、Ｃ，、Ｎｏｖ、　１９７５　
Ｊ中の色標準に従う。

Ｃｘ３Ｕ”ｒρ 表　　　３ グリセリン　　　　　　　　　　　　＋Ｄ（−）−アラ
ビノース　　　　　　　＋Ｌ（＋）−アラビノース　　
　　　　　−Ｄ−キシロース　　　　　　　　　　　＋
Ｄ−リポース　　　　　　　　　　　　＋Ｌ−ラムノー
ス　　　　　　　　　　　　＋Ｄ−グルコース　　　　
　　　　　　　＋Ｄ−ガラクトース　　　　　　　　　
　　＋Ｄ−フルクトース　　　　　　　　　　　＋Ｄ−
マンノース　　　　　　　　　　　　＋Ｌ−ソノνボー
ス　　　　　　　　　　　　−スクロース　　　　　　
　　　　　　　＋ラクトース　　　　　　　　　　　　
　士セロビオース　　　　　　　　　　　　＋メリヒ゛
オース　　　　　　　　　　　　　＋トレハロース　　
　　　　　　　　　　　＋ラフィノース　　　　　　　
　　　　　＋Ｄ（＋）−メレジトース　　　　　　　＋
性デンプン　　　　　　　　　　　　　＋セルロース　
　　　　　　　　　　　　　　−ズルシトール　　　　
　　　　　　　　−イノシトール　　　　　　　　　　
　　＋Ｄ−マンニトール　　　　　　　　　＋。

Ｄ−ソルビトール　　　　　　　　　　−サリシン　　
　　　　　　　　　　　　−２８℃で３週間培養後観察
。

基礎培地：プリダアムーゴソトリーブ（Ｐｒ　ｉｄｈａ
ｍ−Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）無機培地 略　　語：＋：陽性利用、−二陰性利用分類法 株Ｎ１１Ｃ４９，００９はそのグラム陽性反応、非抗酸
性、基生菌糸体の分裂、白色気性菌糸体の形成、気性菌
糸体の全部分における分節胞子様分割細胞分裂および特
異色素形成能力の欠如により特性表示される。これらの
特性、並びにＬＬ−ジアミノピメリン酸およびグリシン
の存在、しかし細胞壁中の診断糖の欠如は株ＮＩＣ’４
９．００９を属ノカルジオイデス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉ
ｄｅｓ）に帰属させる〔エッチ、プラウザー（Ｈ，Ｐｒ
ａｕｓｅｒ）　、イントル、ジェ、シスト、バタテリオ
ル（Ｉｎｔｌ、　Ｊ、　５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｔｉｏ
ｌ）　、２６゜５８〜６５（１９７６））。株嵐Ｃ４９
，００９はノ′カルジオプシス　ダソンビルレイ（Ｎｏ
ｃａｒｄＬｏｐｓｉｓｄａｓｓｏｎｖｉｌｌｅｉ）　、
サツカロポリスポラ　ヒルスタ（Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏ
ｌｙｓｐｏｒａ　ｈｉｒｓｕｔａ）を含む気体菌糸体形
成ノカルジオ型アクチノミセス類および属ノカルジア（
Ｎｏｃａｒｄｉａ）の異一種構造種のすべてとは細胞壁
中の診断アミノ酸または糖およびアール、イー。

ゴルドン（Ｒ，Ｅ−Ｇｏｔｄｏｎ）他、ジェ、ジエン、
ミクロパイオル（Ｊ、Ｇｅｎ−Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ−）
　　１０　Ｌ　　６９〜７８（１９７８）により記載さ
れ、表４に示された診断的生理学的性質で織前される。

株Ｎ１１Ｃ４９，００９はさらに属ストレプトミセス（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）とはその胞子形成ノカルジ
ア型形態で識別され、例えば株＆Ｃ４９，００９の基生
菌糸は短いフィラメントまたは桿状体に分裂する。株１
１ｈｃ４９．ｏ０９の分節胞子様セグメントはストレプ
トミセス　（Ｓ　ｔｒｅｐ　ｔｏｍｙｃｅｓ）の胞子と
は形成部位、菌糸鞘の配列および特異胞子壁の欠如で識
別される。

抗酸生　　　　　　　　　　　　　　　　−分解： アデニン　　　　　　　　　　　　　　−カゼイン　　
　　　　　　　　　　　＋ヒボキサンチン　　　　　　
　　　　　−チロシン　　　　　　　　　　　　　　士
尿　　素　　　　　　　　　　　　　　　　　　−キサ
ンチン　　　　　　　　　　　　　−耐性： リソチーム　　　　　　　　　　　　　−リファムプシ
シ　　　　　　　　　　　＋加水分解： エスクリン　　　　　　　　　　　　　　＋馬尿酸エス
テル　　　　　　　　　　　＋デンプン　　　　　　　
　　　　　　　　十下記からの酸： Ｄ（−）−アラビノース　　　　　　　＋Ｌ（十）−ア
ラビノース　　　　　　　−エリトリトール　　　　　
　　　　　　　　−グルコース　　　　　　　　　　　
　　＋イノシトール　　　　　　　　　　　　＋ラクト
ース　　　　　　　　　　　　　＋Ｄ−メレジトース　
　　　　　　　　　　＋メリビオース　　　　　　　　
　　　　　＋メチルα−グルコシド　　　　　　　　−
ラフィノース　　　　　　　　　　　　十利用： 安息香酸エステル　　　　　　　　　　−クエン酸エス
テル　　　　　　　　　　＋ムチン酸エステル　　　　
　　　　　　−コハク酸エステル　　　　　　　　　　
＋酒石酸エステル　　　　　　　　　　　−硝酸塩から
亜硝酸塩　　　　　　　　　　−５０℃、８時間におけ
る生存　　　　　　−一連の分類群−特定ファージに対
する感受性プロフィルは属ノカルジオイ゛デス（Ｎｏｃ
ａｒｄｉｏｉｄｅｓ）株を関連属、例えばストレプトミ
セス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）またはノカルジアＣ
Ｎｏｃａｒｄｉａ）と識別する〔エッチ・プラウザ−（
Ｈ，Ｐｒａｕｓｅｒ　：　ｒノカルシアの生物学ｊノカ
ルジオ型生物における宿主−フアシ−関係０１ｏｓｔ−
ｐｈａｇｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ　ｉｎ　　ｎ
ｏｃａｒｄｉｏｆｏｒｍｏｒｇａｎｉｓｍ、　　”　Ｉ
ｎ　ｔｈｅ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎｏｃａ
ｒｄｉａｅ″）、コニム、グソドフェロウＣＭ、　Ｇｏ
ｏｄｆｅｌｌｏｗ）他編、ロンドン、ニューヨークおよ
びサンフランシスコ、アカデミツク、プレス（１９７６
）参照〕。これらのアクチノファージに対する株１ｋＣ
４９，００９の感受性はファージを入手できなかったの
で試験しなかった。培地および生物学的特性に基いて、
世界各地で収集した土壌試料から分離した属ノカルジオ
イデス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ）の１７菌株を一つ
の種ノカルジオイデス　アルプス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉ
ｄｅｓａｌｂｕｓ、）に帰属させた。株隘ｃ４９，００
９　　はそのＬ−アラビノースおよびイノシトールの利
用性でノカルジオイデス　アルプス（Ｎｏｃａｒｄｉｏ
ｉｄｅｓ　ａｌｂｕｓ−）と異なるが、しかし全体の培
地および生理学的特性で後者に類似する。従って、株Ｎ
ａＣ４９，００９は後に属ノカルジオイデス（Ｎｏｃａ
ｒｄｉｏｉｄｅｓ）の種として仮に分類された。

本発明は、特定の菌株ＮＩＣ４９，００９の使用または
前記説明に完全に一致する生物に限定されないことを理
解すべきである。殊にＸ線、紫外線、ナイトロンエンマ
スタード類による処理、ファージ暴露などのような公知
方法により前記生物から生ずることができる他のサンド
ラマイシン産生株または前記生物の突然変異体を含むも
のである。

抗生物質の製造 サンドラマイシンは通常の栄養培地中でノヵルジオイデ
ス　スプ（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ　ｓｐｊ株ＮａＣ
４９，００９（ＡＴＣＣ３９，４１９）またはその突然
変異体を培養することにより製造される。生物は公知栄
養源、すなわち、同化性炭素および窒素源に加えて場合
により無機塩および他の公知成長因子を含む栄養培地中
で生育させる。液内好気、性条件を多量：抗生物質の製
造に使用することが好ましいが、しかし、限定量の製造
には表面培養およびびんもまた使用できる。

栄養培地は１種以上の同化性炭素源、例えばグリセリン
、グルコース、スクロース、マンノース、フルクトース
、コーンスターチ、マルトース、マンニトール、糖みつ
などを精製または粗状態で含む。栄養培地はまた、例え
ば大豆粕、魚粉、麦芽エキス、酵母エキス、ペプトン、
グルテン粉、綿実胚粕、大豆粉、あまに粉、綿実粉、カ
ゼイン、氷解タンパク質物質、硝酸塩、アンモニウム塩
、尿素などのような１種以上の同化性窒素源を含む。

栄養性無機塩例えば塩化ナトリウム、リン酸カリウム、
硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、および痕跡量の重
金属塩例えば銅、亜鉛、マンガン、鉄などもまた栄養培
地に加えることができる。

発酵温度は１５〜約３７℃の範囲、好ましくは約２５〜
約３０℃の範囲である。発酵培地のｐＨは約５〜約１０
．５の範囲内にあり、好ましい範囲は約６〜約８．５で
ある。通常、サンドラマイシンの最適生産は温度により
約２〜９日で得られる。タンク発酵を行なうとき、ブロ
ス培地に斜面培養または土壌培養、あるいは凍結乾燥培
養の微生物を接種することにより栄養培地中に増殖型接
種材料（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ　ｉｎｏｃｕｌｍ　）を
生成させることが好ましい。このように活性接種材料を
得た後、それを発酵タンク培地に無菌的に移す、 サンドラマイシンの単離 醗酵が終ると、次の流れ図に例示した多段階手順により
培地からサンドラマイシンが回収され、実質上純粋な形
態に単離される。

流れ図について説明すると、ノカルジオイデススブ、　
（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ　ｓｐ、　）株Ｎｏ、Ｃ４
９，００９の発酵からの全ブロスを初めに水不混和性有
機溶媒で、好ましくは酢酸エチルで、抽出する。ダイカ
ライド（Ｄｉｃａｌｉｔｅ　、ブレフコ社（Ｇｒｅｆｃ
ｏ　Ｉｎｃ。

Ｔθｒｒａｎｃｅ＋　Ｃａ、　）のケイソウ土に対する
商品名）のような濾過助剤を抽出混合物に添加すること
が好ましく、次いで混合物を濾過して不溶解物を除去す
る。濾過後、有機相を抽出混合物濾液から分離し、蒸発
により濃縮すると前記抗生物質の粗抽出物が得られる。

粗抽出物を脂肪族炭化水素溶媒、例えばスケリソルブＢ
〔スケリ、オイル社（Ｓｋｅｌ　１ｙＯｉｌ　Ｃｏ、）
の異性体ヘキサン類に対する商品名）とメタノール中の
約１０％水との間に分配する。水性メタノール相を更に
水で希釈し、生じたメタノール中の約２５％水ｄ゛溶液
を有機溶媒例えば四塩化炭素で抽出する。水性メタノー
ル相をさらに水で希釈し、生じたメタノール中約３５％
水の溶液を有機溶媒例えばクロロホルムで抽出する。四
塩化炭素抽出物を一緒にして減圧で蒸発させると残留物
Ａが得られる。クロロホルム抽出物を一緒にして減圧で
蒸発させると残留物Ｂが得られる。残留物ＡとＢとを合
わせてケイソウ土、例えばダイカライドを含むカラムで
低〜高極性の有Ｉｍ、溶媒を用いてクロマトグラフィー
社かける。抗生物質を含む適当なフラクションを合せて
減圧で蒸発させると残留物Ｃが得られる。一層の精製は
残留物Ｃのシリカゲル低圧液体カラムクロマトグラフィ
ーにより、または実施例３、段階Ｃに記載されるように
残留物り、Ｄ’ＥおよびＥ′の、直線勾配変化のクロロ
ホルム−クロロホルム中の５％メタノールを溶離剤とし
て用いる中圧高速液体クロマトグラフィーにより達成す
ることができる。適当なフラクションを蒸発乾固すると
サンドラマイシンが得られ、適当な溶媒系から再結晶す
ると純結晶質サンドラマイシンが得られる。

サンドラマイシンの構造 サンドラマイシンは３−ヒドロキシキノリン核を発色団
として、およびピペコリン酸成分を含む環状デプシペプ
チド抗腫瘍性抗生物質である。スベクトルおよび化学分
析から、サンドラマイシンは構造式： を有すると決定された。

サンドラマイシンは２０８〜２１２℃の融点、Ｃ６゜）
Ｉ７６０．ｂＮ１□の分子式および１２２１．３３１−
２の分子量を有する白色結晶性固体である。それは炭分
析データは次のとおりである： 計算値（Ｃ６１１Ｈ？６０１６Ｎ＋２・８ＨｚＯ）：Ｃ
，５２，７８；ｌ（，６，７９；Ｎ、１２．３１　ｉｏ
（差による）、２８．１２ 測定（直：Ｃ，５２−５８：）Ｉ、　６．２７　、Ｎ。

１２．２９；Ｏ（差による）、２８−８６゜サンドラマ
イシンの高分解質量スペクトルはクレイトス（１（ｒａ
ｔｏｓ）ＭＳ　　５０分光計およびＦＡＢイオン化で決
定された。観測質量スペクトルは次のとおりである： 計算値（（Ｍ＋）ｌ）”イオン）　　：　１２２１．５
５７９測定値（（Ｍ＋Ｈ）　１イオン）　　：　１２２
１．５５７１゜サンドラマイシンの赤外吸収スペクトル
はＫＢｒ中でベレットにしたとき逆センチメートルで表
わした次の周波数に特性バンドを表わす；３５００、　
３３４０．　２９７０．　２９４０．　２８８０．　１
７４８．　１６６０゜１６４０、　１５９８．　１５２
０．　１４６８．１４４５．　１４２０．　１３３６゜
１２９０、　１２６５．　１２３５．　１１７２．　１
１３８．、１０９２．　１０５５゜１０１８、９２２．
８８５．８５５および８３８゜サンドラマイシンの紫外
吸収スペクトルをメタノール中（０，０１７９８ｇ／Ａ
）中性、酸性および塩基性条件下に測定した。観測吸収
最大値および吸収率は次のとおりである： λ１Ｉａｘ　　’　Ｌｎｌ（ａ） ＣＬ９１１中　：　３５６（８，１）、　２９６（７−
５）、　２２９（６２，８）。

２１７　（６３，７） ｃＨ３ｏＨ，ｎｃ　４中：　３５６（８−３）、　３０
６（８，１）、　２２８（５８，４）。

ＣＨｓＯＨ−ＮａＯＨ中：　３９５（９−２）、　３０
１（７，２）、、　２４６（５９，８）。

重水素化クロロホルムに溶解したサンドラマイシンのプ
ロトン核磁気共鳴スペクトルをプルカー（’　Ｂｒｕｋ
ｅｒ　）モデルＷＭ−３６０分光計で、３６０ＦＪＩＩ
ｚで操作し、テトラメチルシランを内部標準として用い
て測定した。観測した化学シフト（δ値）、結合定数（
Ｊ値、Ｈ２）および分裂形式は次のとおりである： １１．７５（ｓ、　２Ｈ，Ａｒ−０Ｊｉ）、　９．５８
（ｄ、　Ｊ＝６．３９．２Ｌ　５ｅｒＩｔｓ）、　８．
５５（ｂｓ、　２Ｈ，ｇｌｙ　Ｍル、　７．８２（ｂｓ
、　２Ｈ，Ａｒ−Ｂ”）。

７．７２（ｍ、　２■、　Ａｒ−ｕｓ）、　７．６３（
ｓ、　２Ｈ，Ａｒ４’）、　７．５２（Ｌ　４）１．　
Ａｒ−Ｈ”およびＡｒ−Ｈ’）、　５−６０（ｓ＋、　
２Ｌ　ｐｉｐαＩＩ）、　５．５６（ｄ、　Ｊ＝１７．
５８．２■ｓａｒ　αｃＨ）、　５．２８（ｍ。

２Ｈ，ｓｅｒ　αｃｆｌ）、　５．０１（ｄ、　Ｊ＝１
２．７！３＋　２Ｈ，ｓｅｒβＣＨ）　。

４．８８（ｄ、　Ｊ＝１２．７９．２ｔ［、ｖａｌαｃ
Ｈ）、　４．４５（ｂｄ、　Ｊ＝１２．７９．４Ｈ，ｓ
ｅｒβＣＨおよびｇｌｙ　αｃＨ）、　４．０７（Ｍ。

Ｊ−１５，９９，４）１　　ｐｉｐ　ｔ　Ｈおよびｇｔ
ｙαＣＨ）、　３．７６（ｂｄ。

Ｊ＝１２．７９．２）１．　ｐｉｐｇｆｌＬ　３．５８
（ｄ、　１７．５８．２Ｌ　５ａｒＣ１ｌ）、　３．１
４（ｓ、　６Ｈ，Ｎ−Ｃｌ１ｚ）、　２−９６（ｓ、　
６１．　Ｎ−ＣＬ）。

２．０６’（ｍ、　２Ｈ，ｖａｌ　βＣ１１）、　１．
８２（ｂｓ、　４Ｈ，ｐｉｐβＣ）Ｉ）　。

１．６８（ｂｍ、　４Ｈ，ｐｉｐｒｃＨ）、　１．５７
（ｂｍ、　４Ｈ，ｐｉｐδＣ１１）　。

０．９４（ｄ、　Ｊ＝６．３７．６Ｈ，ｖａｌ−ＣＨｓ
）、　０．８０（ｄ、　Ｊ＝６．３７゜６Ｌ　ｖａｌ−
ＣＬ）。

重水素化クロロホルム中に溶解したサンドラマイシンの
Ｃ−１３核磁気共鳴スペクトルはジェオル（Ｊｅｏｌ　
）モデルＦ、Ｘ　９０　Ｑ分光計で、２２．５　ＭＨｚ
で操作し、テトラメチルシランを内標準として用いて測
定した。観測された各化学シフトが２炭素原子を表わす
化学シフ）（ｐｐｍ値）および帰属は次のとおりである
： こ　（）−１−ン　こ　こ　Ｚ　七　（こ　（ト　リ　
　旬へ ｃｖ）　０００凶凶■Ｎω寸−００寸−ト寸■のω寸ト
ロロトー寸０閃−０ ４ｐ：　　ｏ３　　：　　ｃＡ　　ｃｒｉ　　ｍ　　４
　　＋：　　−％　　：　　ｃ６　４　　ｃ６ｃｏ　％
　１−１−へ寸寸の叩口寸Ｃ’Ｊ　＋Ｉ　Ｃ−Ｊ寸す−
ｏ：＋００−Ｎ匈寸のＱト（１）■〇−−−−へｃ′＋
３へへへへへへへヘリルゾベプチンＡ、ＢおよびＣと識
別するサンドラマイシンの鍵構造特徴は、３−ヒトーロ
キシー６−メトキシキナルジン酸および４−置換テトラ
ヒドロピリダジン−３−カルボン酸基の代りにそれぞれ
３−ヒドロキシキナルジン酸およびピペコリン酸成分が
存在することで、ある。

サンドラマイシンの生物学的活性 サンドラマイシンの抗菌活性を連続倍々寒天希釈法によ
り測定した。その結果はルゾペプチンＡおよびエキノマ
イシン（ｅｃｈｉｎｏｉｙｃｉｎ　）の活性と比較して
表５に示される。表５から認められるよびスタフィロコ
ッカスアウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕａｕｒ
ｅｕｓ　）、並びにストレブトコソ力スフエカーリス（
５ｔｒｅｐｔｐｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　）に
対して強い阻止性である。

サンドラマイシンはまた移植性マウス腫瘍Ｐ−３８８白
血病に対して試験し、結果は表６に示される。用いた方
法は一般にナショナル　カンサーインスチチュート（Ｎ
ａｔｉｏｎａｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ）
のプロトコル〔カンサー　ケモセラピー　レプ。

（Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　Ｒｅｐ、
）パート３．３．１〜１０３　（１９７２））に従った
。主要試験の詳細は表６の下に示される。２つの異なる
用量規制：第１日１回量および５日間毎日、で試験した
。両スケジュールで最適用量は約０．２■／ｋｇ／注入
であると思われる。

Ｆ 上記抗菌およびマウス腫瘍データにより示されるように
、サンドラマイシンは抗生物質と゛して、また哺乳動物
の悪性腫瘍例えばＰ−３８８白血病の阻止に対する抗腫
瘍剤として有用である。

本発明はその範囲内に、サンドラマイシンの有効抗菌ま
たは腫瘍阻止量を不活性の製剤に許容されるキャリヤー
または希釈剤と組合せて含む薬剤組成物を含む。そのよ
うな組成物はまた他の活性抗菌または抗腫瘍剤を含むこ
とができ、所望の投与経路に適する薬剤形態に仕上げる
ことができる。

そのような組成物の例には経口投与用固体組成物例えば
錠剤、カプセル、丸薬、粉末および顆粒、経口投与用液
体組成物例えば溶液、懸濁液、シロップまたはエリシキ
ル、並びに非経口用薬剤例えば無菌の溶液、懸濁液また
は乳濁液が含まれる。

それらはまた使用直前に無菌の水、生理的食塩水゛また
は他の無菌の注入可能媒質中に溶解できる無菌固体組成
物の形態に製造することができる。

抗菌剤としての使用には、サンドラマイシンまたはその
薬剤組成物は活性成分の濃度が処置される個々の生物に
対する最小阻止濃度より大きいように投与される。抗腫
瘍剤としての使用には所与哺乳動物患者に対するサンド
ラマイシンの最適投薬および規制は当業者により容易に
確認することができる。もちろん、用いるサンドラマイ
シンの実際の用量は配合した個々の組成物、適用方式並
びに治療される個々の位置、患者および疾患により変動
することが認められよう６年令、体重、性、食事、投与
時間、投与経路、排泄速度、患者の状態、薬物組合せ、
反応感受性および疾患の状態を含む薬物の作用を変動さ
せる多くの因子が考慮されよう。

以下の実施例は単に本発明の例示目的に提供され、その
範囲を限定するものではない。スケリソルブＢは異性体
ヘキサンを含み６０〜６９℃の沸点を有する市販石油溶
剤〔スケリ、オイル社（Ｓｋｅｌｌｙ　ＯＨＣｏ、）で
ある、ダイカライドはブレフコ社（Ｇｒｅｆｃｏ＋Ｉｎ
ｃ、４ｏｒｒａｎｃｅ、Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａ）により
製造されたケイソウ土である。他に示さなければ以下の
温度はすべて摂氏度である。

実施例１ サンドラマイシンの発酵 Ａ、振とうフラスコ発酵 ノカルジオイデス・スプ＋　（Ｎｏｃａｒｄｉ’ｏｉｄ
ｅｓ　ｓｐ、）株先ｃ４９，００９　、ＡＴＣＣ３９４
１９、を培養試験管中酵母−麦芽エキス寒天の寒天斜面
培地上に維持して移した。この培地は脱イオン水で１β
にしたグルコース４．０ｇ、酵母エキス４．０ｇ、麦芽
エキス１０−０ｇおよび寒天２．０．０　ｇからなる。

各移動で寒天斜面培養を２７“Ｃで７日間培養した。生
産相に対する接種材料を調製するために、斜面培養から
菌糸体成長物を、グ千コース３０．０ｇ、大豆粉１０．
０ｇ、綿実胚粕１０．　ＯｇおよびＣａＣＯ５３，Ｏｇ
からなり脱イオン水で１１にした無菌培地１００ｍ＃を
含む５００ｍ１！、三角フラスコに移した。この増殖型
培養（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ）は、５
＋１ＣＩ１１直径で円を画く２１０回転／分に設定した
シャイψトリティア（Ｇｙｒｏｔｏｒｙ　ｔｉｅｒ）振
とう機〔モデルＧ５３、ニュー、ブランスウィンク、サ
イエンティフインク社（Ｎｅｗ　Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ　
５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｃｏ＋、Ｉｎｃ、）上で４８時
間２７℃で培養した。増殖型培養４　ｍ　１２　資スク
ロース２０．０　ｇ、大豆粉１０．０ｇ、あまに粉１．
０．０ｇおよびＣａＣＯ５５，０ｇからなり脱イオン水
で１βにした無菌生産培地１００ｍ１を含む５００ｍｊ
２三角フラスコに移した。生産培養を２５０回転／分に
設定した増殖型培養に用いたような振とう機上で２７℃
で培養した。９６時間で生産培養をサンドラマイシンの
単離のために収穫した。

Ｂ、卓上発酵 卓上発酵装置においてサンドラマイシンを製造するため
に、実施例ＩＡに記載した増殖型培養４００　ｍ　ｉｔ
を、コーンスターチ４０ｇ、あまに粕２０、０　ｇ、（
ＮＬ）　ｚｓＯａ　　ｌ　ｇおよびＣａＣＯ５５ｇ毎ｌ
脱イオン水からなる生産培地ｌＯｅを有する発酵装置〔
ミクロゲン（Ｍｉｃｒｏｇｅｎ）モデル５Ｆ−１１６、
ニュー、プランスウィック、サイエンティフィンク社〕
に移した。温度は２７℃に維持し、攪拌速度は３００回
転２分であり、空気流量は１１／分であった。培養２０
２時間後サンドラマイシンを培養から単離した。

Ｃ，タンク発酵 サンドラマイシンをパイロットプラントで生産するため
増殖型培養（実施例Ｉへの一般手順により製造）２βを
、コーンスターチ４０ｇ１あまに粉２０ｇ、（ＮＩ１４
）２Ｓ０４１　ｇおよびＣａＣ０：＋　５　ｇ毎ｌ脱イ
オン水からなる生産培地３（ｌを入れた発酵装置に移し
た。培養温度は２６．５℃であり、空気流量は８０ｊ２
／分であり、かくはん速度は３７５回転／分であり、背
圧は１気圧であった。１８３時間後タンク発酵物をサン
ドラマイシンの単離のために収穫した。

実施例２ サンドラマイシンの単離および精製 段階Ａ：油抽 出発酵全ブロス（〜８Ｉｔ）を、底にコックを脩えた２
０ｊ２ポリエチレンタンク（上部直径４８ｃｍ、下部直
径４４ｃｍ、高さ５５０）に移した。酢酸エチル等容量
を加えた。混合物を空気駆動かくはん機で良好な混合速
度で３０分間かきまぜた。ダイカライド約５ｆｆｉ（２
ｋｇ）を加えて混合した。混合物を嵐１２°ブフナー漏
斗中に保持したダイカライドパッドで濾過した６濾液を
真空分岐を備えた１９ｊ２の溶液びんに捕集した。マッ
トを酢酸エチル２Ｉ！で洗浄した。濾液を２０７β分液
漏斗に移し、相を分離させた。酢酸エチル抽出物を取出
し、連続フィードを備えた研究室規模ガラス循環蒸発器
中で約ｉｌに濃縮した。濃縮物をさらに回転蒸発器中で
、減圧で粘性油状物質に濃縮すると粗抽出物１．９４　
ｇが得られた。

段階Ｂ：粗抽出物の液−液分配 段階Ａから粗抽出物（・１−９４ｇ）をメタノール２０
０　ｍ　ｉｔとスケリソルブＢ２００ｍ１との混合物に
溶解した。二相状溶液を１７℃分液漏斗に移し、水２２
ｍＡで希釈した。混合物をふりまぜ、生じた相を分離さ
せた。水性メタノール（下相）を第２の１１分液漏斗に
移し、２００　ｍ　７β部のスケリソルブＢでさらに２
回抽出した。スケリソルブＢは予めメタノール中の１０
％水等容量で飽和した。

水性メタノール相を水４４ｍＪで希釈し、２００ｍ１１
部の四塩化炭素で３回抽出した。四塩化炭素は予めメタ
ノール中の２５％水等容量で飽和した。

水性メタノール相を水４１ｍｊ！で希釈し、２００ｍ７
！部のクロロホルムで３回抽出した。クロロホルムは予
めメタノニル中の３５％水等容量で飽和した。四塩化炭
素抽出物を一緒にして回転蒸発器中で、減圧で蒸発乾固
すると残留物Ａ、５９５■が得られた。クロロホルム抽
出物を一緒にして回転蒸発器中で、減圧で蒸発乾固する
と残留物Ｂ、４５８ｒｒｇが得られた。

段階Ｃ；残留物ＡおよびＢのトリチュレーション段階Ｂ
で得られた残留物Ａ（５４７ｍ）および残留物Ｂ（３８
９■）を−緒にしてクロロホルム２部−メタノール１部
の混合物３０ｍｌ１に溶解した。ダイカライド（’１７
．４ｇ）を溶液に加え、次いでスケリソルブＢ　２００
　ｍ　ｊ＋を加えることによりスラリーが生じた。溶媒
を回転蒸発器で、減圧で蒸発させた。残留粉末をトルエ
ン５００ｍｊ！中にスラリーにし、４．１　ｃｍ内径×
４５．７ｃＩ１１のフラッシュクロマトグラフィーカラ
ムに充てんした。ダイカライドを加圧（Ｎ２−５．７ｐ
ｓｉ　）流で床に充てんさせた。充てん溶媒が床表面に
達したとき流れを止め、カラムの圧を抜いた。オノタワ
（Ｏｔｔｏｗａ）砂の層（〜２ｃ＋ｓ）を表面に加えた
。次いでカラムを加圧窒素を用いて次の溶離剤で溶離し
た：トルｘン（５００ｍＪ）；ジエチルエーテル（５０
０ｍｊり　　；塩化メチレン（５００ｍｊｌり’；クロ
ロホルム（５００ｍ６）；酢酸エチル（５００ｍ７り；
アセトニトリル（５０９ｍβ）；テトラヒドロフラン（
５００ｍβ）およびメタノール（５００ｍ　Ａ　）。ト
ルエン溶離液および充てん物源■液を合せ（〜１ｊ２）
、回転蒸発器で減圧で蒸発乾固すると残留物Ｃ，０，６
９９ｇが得られた。

段階Ｄ：残留物Ｃのカラムクロマトグラフィー２、０　
ｃｍ内径Ｘ３Ｑｃｍグレンコ（Ｇｌｅｎｃｏ）カラムに
クロロホルム中でウエルム（Ｗｏｅｌｍ）シリカゲル−
（０，０６０〜０．２００寵、７２〜２３０メソシユ）
３’１ｇをスラリー充てんした。段階Ｃからの残留物Ｃ
（０，６９’９　ｇ＞をクロロホルム５ｍｌに溶解して
カラムの上部に加えた。試料を充てん床中へ浸透させた
。カラム上部とシリカゲル床との間の間隙は標準オノタ
ワ砂を充た■した。カラムをグレンコ勾配溶離装置に連
結し、クロロホルム−クロロホルム中の５％メタノール
の２１直線勾配で溶離を開始し、２０Ｘ１００ｍｊ！フ
ラクションを捕集した。各フラクションを回転蒸発器中
で減圧で蒸発乾固した。残留物をクロロホルム２部−メ
タノール１部の混合物３ｍｌに溶解した。各フラクショ
ンのアリコート（２μりをアナルテク（Ａｎａ　］　ｅ
ｅｃｈ）シリカゲルＧＨＬＦ薄層クロマトグラフィー（
’Ｔ　Ｌ　Ｃ’）プレート上にスポットした。プレート
をクロロホルム中の５％メタノールで溶離し、２５４韻
および３６６韻紫外光で可視化した。

フラクション６が同質と判断された。フラクション６か
らの結晶性残留物をクロロホルム−メタノールから再結
晶するとサンドラマイシン２１５■が得られた。この物
質をクロロホルム−メタノールから再結晶すると純サン
ドラマイシン１８８■が得られた、融点２０８〜２１２
℃。

元素分析、計算値（Ｃ６゜Ｈ”ｒｂｏＩｂＬｔ　８Ｈｘ
Ｏ）：Ｃ，５２，７８；）１，６．７９；珪、　１２−
３１測定値：　Ｃ，５２，５８；ＩＩ、６．２９；Ｌ１
２．２９実施例３　サンドラマイシンのより大きい規模
の単離および精製 段階Ａ：粗抽出物の抽出および液体分配実施例２、段階
ＡおよびＢに記載した一般単離手順を繰返して全発酵ブ
ロス（〜８１から残留物Ａ、１．１２　ｇおよび残留物
Ｂ、３−０３ｇが得られた。

段階Ｂ：残留物ＡおよびＢのトリチュレーション段階Ａ
で得られた残留物Ａ（１，１２ｇ）をクロロホルム２部
−メタノール１部の混合物約３００ｍ１！に溶解した。

ダイカライド（２０ｇ）を溶液に加えた。溶媒を回転蒸
発器中で減圧で蒸発乾固した。残留物をトルエン３００
　ｍ　ｅ中にスラリーにして再び蒸発乾固した。これを
もう１度繰返した。生じた残留物をスケリソルブＢ、３
００　ｍ　ｌ中にスラリーにし、回転蒸発器中で蒸発乾
固した。

これをもう１度繰返した。ダイカライド残留物をスケリ
ソルブＢ、３００ｍＪ中にスラリーにし、４、１　ｃｍ
内径Ｘ４５．７ＣＩ＋のフラノシュクロマトグラフィー
カラムに充てんした。ダイカライドを加１圧（Ｎ２−５
．７ｐｓｉ　）流で床に充てんした。オソタワ砂の層（
〜２ｃＩｍ）を床上に充てんした。溶離を加圧窒素流を
用い、次の溶離列で開始した：スケリソルブＢ　（５０
０ｍｊり；　トルエン（５００ｍ＋２）　　；ジエチル
エーテル（５００ｍＡり　　；塩化メチレン（５００ｍ
β）；クロロホルム（５００ｍＡ）；酢酸エチル（５０
０ｍｊり　　；アセトニトリル（５００ｍｊり；テトラ
ヒドロフラン（５００ｍ　Ｉ！　）およびメタノール（
５００ｍｊり。トルエン溶離液を回転蒸発器中で減圧で
蒸発乾固すると残留物Ｄ、９１２．７■が得られた６ 用いた残留物への代りに残留物Ｂ、３．０３　ｇを用い
て上記一般手順を繰返し、それによりトルエン溶離液か
ら残留物Ｅ、７６６−７■が得られた。

実施例３、段階ＡおよびＢに記載した一般手順を繰返し
、得られて用いた残留物ＡおよびＢの代りに残留物Ａ′
およびＢ′、それぞれ１．５ｇおよび１．９７　’ｇを
用い、それにより残留物Ｄ′、９９３、９■および残留
物Ｅ′、６９３■がそれぞれトルエン溶離液から得られ
た。

段階Ｃ：残留物りおよびＥのカラムクロマトグラフィー ２．０ｃｍ内径Ｘ３０ＣＩｌのグレコカラムにクロロホ
ルム中でウェルムシリカゲル（０，０６３〜０．２００
　ｍ、７０〜２３０メツシユ）４０ｇをスラリー充てん
した。カラムを中圧）ＩＰＬＣ系に挿入し、クロ９ホル
ムで平衡させた。段階Ｂからの残留物り、Ｄ’Ｅ、Ｅ’
を一緒番こしく約３．３６６ｇ）、クロロホルム６ｍｊ
！に溶解した。溶液を１５ｍ＃試料ループに吸入させた
。試料ループを中圧ＨＰＬＣ系に挿入して試料をクロロ
ホルム２００ｍｌでカラム上に送った。溶離を、クロロ
ホルム−クロロホルム中の５％メタノールの２に直線勾
配で開始して１７Ｘ１１７ｍＡフラクションを捕集した
。各フラクションのアリコート（６μｌ）をＴＬＣによ
り、クロロホルム中の５％メタノールを溶離剤として用
い、３６６ｍｍ光で可視化して検定した。フラクション
５および６を一緒にして蒸発乾固すると残留物Ｆ、２．
１６６ｇが得られた。フラクション７〜１２を一緒にし
て回転蒸発器で減圧で濃縮乾固した。残留物（９５３■
）をクロロホルム６ｍ７！に溶解し、クロロホルム−ク
ロロホルム中の１．５％メタノールの２β直線勾配を用
いて上記のように再びクロマトグラフィーにかけ２０Ｘ
１００ｍ！！フラクションを捕集した。フラクション９
〜２０を一緒にして回転蒸発器中で蒸発乾固すると残留
物Ｇ、８６０■が得られた。

残留物ＦｉＢよびＧを合せてクロロホルム−メタノール
から再結晶すると、実施例２で単離した生成物と同等の
純サンドラマイシン１．９８５ｇが得られた。

手続補正書 特許庁長官　　宇　賀　道一部　　殿　　　　　　　Ｑ
ｌ、事件の表示　　　昭和６０年特許願第１１６３３８
号２、発明の名称　　　抗腫瘍性抗生物質化合物３、補
正をする者 事件との関係　　出　願　人 名　称　　　ブリストルーマイアーズ　コムパニー４、
代理人 ５、補正命令の日付　　自　発 を有する抗腫瘍性抗生物質、サンドラマイシン。

（２）抗腫瘍性抗生物質サンドラマイシンの製造方法で
あって、ＡＴＣＣ３９，４１９の同定特性を有するノカ
ルジオイデスｓｐ、　ｎｏｖ、またはその変種のサンド
ラマイシン産生株を、同化性の炭素および窒素源を含む
培地中で深部好気性条件のもとで実質量のサンドラマイ
シンが生産されて培地中に蓄積されるまで培養すること
を含む方法。

（３）　　さらに、培地からサンドラマイシンを単離す
る段階を含む、特許請求の範囲第（２）項記載の方法？ （４）　　サンドラマイシンの有効抗菌量を薬剤キャリ
ヤーまたは希釈剤と組合せて含む抗菌剤。

（５）　　サンドラマイシンの有効腫瘍阻止量を薬剤キ
ャリヤーまたは希釈剤と組合せて含む抗腫瘍剤。

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. （１）構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する抗腫瘍性抗生物質、サンドラマイシン。
2. （２）抗腫瘍性抗生物質サンドラマイシンの製造方法で
   あって、ＡＴＣＣ３９，４１９の同定特性を有するノカ
   ルジオイデスｓｐ．ｎｏｖ．またはその変種のサンドラ
   マイシン産生株を、同化性の炭素および窒素源を含む培
   地中で深部好気性条件のもとで実質量のサンドラマイシ
   ンが生産されて培地中に蓄積されるまで培養することを
   含む方法。
3. （３）さらに、培地からサンドラマイシンを単離する段
   階を含む、特許請求の範囲第（２）項記載の方法。
4. （４）同化性炭素および窒素源を含む培地中で深部好気
   性条件下の培養で抗腫瘍性抗生物質サンドラマイシンを
   回収可能量産生できる微生物、ノカルジオイデスｓｐ．
   ＡＴＣＣＮｏ．３９，４１９の生物学的純粋培養菌。
5. （５）細菌感染により冒された動物患者にサンドラマイ
   シンを有効抗菌量投与することを含む前記患者を治療的
   に処置する方法。
6. （６）サンドラマイシン感受性の悪性腫瘍により冒され
   た動物患者にサンドラマイシンを腫瘍阻止量投与するこ
   とを含む、前記患者を治療的に処置する方法。
7. （７）サンドラマイシンの有効抗菌量を薬剤キャリヤー
   または希釈剤と組合せて含む薬剤組成物。
8. （８）サンドラマイシンの有効腫瘍阻止量を薬剤キャリ
   ヤーまたは希釈剤と組合せて含む薬剤組成物。