JPH0631234B2

JPH0631234B2 - 新規生理活性物質ナグスタチン及びその製造法

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Publication number: JPH0631234B2
Application number: JP63119257A
Authority: JP
Inventors: 富雄竹内; 高明青柳; 寛之須田; 雅浜田; 博長繩; 和道魚谷
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1988-05-18
Filing date: 1988-05-18
Publication date: 1994-04-27
Anticipated expiration: 2009-04-27
Also published as: JPH01290675A

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は抗Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼ活性を有す
る新規生理活性物質ナグスタチン及びその製造法に関す
るものである。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする問題点〕

これまで微生物培養液中より多くの生理活性物質が発見
されてきている。なかでも細胞膜に存在する酵素や細胞
膜上に結合している糖鎖を切断する酵素の阻害物質は免
疫調節作用を有する可能性があることが認められてい
る。また、癌、老化等の状態に免疫増強剤の投与が有効
であることは周知の事実であり、強力かつ有効な免疫増
強剤を提供することは常に要望されている。

本発明者らはこれらの点に着目し、細胞膜上に結合して
いる糖鎖をＮ−アセチルグルコサミンの位置で切断する
酵素、Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼの阻害物質とし
て作用する新規生理活性物質を提供することによつてこ
れを解決しようとするものである。

〔問題点を解決するための手段及び作用〕

本発明者らは上述の要望に応えるべくＮ−アセチルグル
コサミニダーゼに対する阻害活性を有する物質の探索を
続けていたところ、ストレプトミセス（Streptomyces）
属に属するある菌株の培養物中にＮ−アセチルグルコサ
ミニダーゼに対する強い阻害作用を有する物質が生産さ
れていることを見出し、有効物質ナグスタチンを単離し
てその理化学的性状及び生物学的特性を確定することに
より本発明を完成した。

したがつて第一の本発明は、下記の式を有する新規生理
活性物質ナグスタチンを提供するものである。

さらに第二の本発明は、ストレプトミセス属に属するナ
グスタチン生産菌を培養し、その培養物からナグスタチ
ンを採取することを特徴とする生理活性物質ナグスタチ
ンの製造法を提供するものである。

本発明に使用されるナグスタチン生産菌の一例として
は、本発明者らにより微生物化学研究所構内の土壌より
新たに分離されたMG 846−fF３株がある。MG 846−fF３
株の菌学的性状はつぎのとおりである。

１．形態 MG 846−fF３株は、顕微鏡下で分枝した基中菌糸よりか
ぎ状あるいはらせん状の気菌糸を形成し、輪生糸はみと
められない。成熟した胞子鎖は２０〜５０個あるいはそ
れ以上の胞子の連鎖をみとめ、胞子の大きさは0.5〜0.6
×0.7〜0.8ミクロン程度で、胞子の表面は平滑である。

２．各種培地における生育状態色の記載について〔〕内に示す標準は、コンテイナー
・コーポレーシヨン・オブ・アメリカのカラー・ハーモ
ニイ・マニユアル（Contaier Corporation of America
のColor harmony manual）を用いた。

(1)シユクロース・硝酸塩寒天培地（27℃培養）無色の
発育上に、明るい灰〔3fe,Silver Gray〕〜明るいオリ
ーブ灰〔 Olive〕の気菌糸をうっすらと着生し、溶解性色素はみ
とめられない。

(2)グルコース・アスパラギン寒天培地（27℃培養）発育は貧弱で、無色〜うす黄〔1ea,Canary Yellow〕を
呈し、白〜明るい灰〔15ba,Blue Yint〕の気菌糸をわず
かに着生する。溶解性色素はみとめられない。

(3)グリセリン・アスパラギン寒天培地（ISP−培地５，
27℃培養）うす黄〜うす茶〔 Antique Gold〕の発育上に、黄味灰〔2gc,Bamboo〕〜明
るい茶灰〔3fe,Silver Gray〕の気菌糸を着生し、溶解
性色素はわずかに茶色味をおびる程度である。

(4)スターチ・無機塩寒天培地（ISP−培地４，27℃培
養）うす黄の発育上に白〜明るい灰〔2fe,Covert Gray〕の
気菌糸を着生し、溶解性色素はわずかに黄色味をおびる
程度である。

(5)チロシン寒天培地（ISP−培地７，27℃培養）うすオリーブ〔 Lt,Olive 〕〜うす茶の発育上に、明るいオリーブ灰〔 Putty〕の気菌糸を着生し、溶解生色素は黄色味をおび
る程度である。

(6)栄養寒天培地（27℃培養）うす茶の発育上に白の気菌糸をうっすらと着生し、溶解
生色素はみとめられない。

(7)イースト・麦芽寒天培地（ISP−培地２，27℃培養）うす黄〜暗い茶〔3po,Ebony〕の発育上に、白〜明るい
茶灰〔2ig,Slate Tan〕の気菌糸を着生し、溶解性色素
は黄色味をおびる程度である。

(8)オートミール寒天培地（ISP−培地３，27℃培養）うす黄の発育上に白〜明るい茶灰〔3ih,Beige Gray〕の
気菌糸をわずかに着生し、溶解性色素はほのかに黄色味
をおびる程度である。

(9)グリセリン・硝酸塩寒天培地（27゜培養）うす茶の発育上に白の気菌糸を着生し、溶解性色素はわ
ずかに茶色味をおびる程度である。

(10)スターチ寒天培地（27゜培養）無色〜うす黄の発育上に白〜明るい茶灰〔3fe,Silver G
ray〕の気菌糸を着生し、溶解性色素はわずかに黄色味
をおびる程度である。

(11)リンゴ酸石灰寒天培地（27゜培養）無色〜うす黄の発育上に白〜明るい茶灰〔3fe,Silver G
ray〕の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめられな
い。

(12)セルロース（紙片添加合成液，27℃培養）３週間観察したが、生育をみとめなかつた。

(13)ゼラチン穿刺培養単純ゼラチン培地（20゜培養）では、発育はうす黄、気
菌糸は着生せず、溶解性色素もみとめられない。

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地（27゜培養）で
は、発育はうす黄、気菌糸は着生せず、溶解性色素もみ
とめられない。

(14)脱脂牛乳（37℃培養）発育はうす黄、気菌糸は着生せず、溶解性色素もみとめ
られない。

３．生理的性質 (1)生育温度範囲イースト・スターチ寒天（Soluble starch（小宗化学
製）1.0％，Yeast extract（大五栄養化学製）0.2％，
糸寒天3.0％，pH7.0）を用い、20℃，24℃，27℃，30
℃，37℃，50℃の各温度で試験の結果、50℃を除いてそ
のいずれの温度でも発育した。しかし、37℃での発育は
著しく強く、24°〜30℃付近が最適温度と考えられる。

(2)ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン，20℃培養；
グルコース・ペプトン・ゼラチン，27℃培養）単純ゼラチン培地では、培養後３日目頃から液化が始ま
り、１４〜２１日目にほとんど完了した。その作用は強
い方である。

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地では、３週間観察
したが液化作用はみとめられなかつた。

(3)スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地及
びスターチ寒天培地、いずれも27℃培養）スターチ・無機塩寒天培地，スターチ寒天培地ともに培
養後３日目頃から水解性がみられ、その作用は強い方で
ある。

(4)脱脂牛乳の凝固、ペプトン化（脱脂牛乳，37℃培
養）培養後１０日目頃より凝固が始まり、直ちに完了し、ペ
プトン化が始まる。ペプトン化は培養後１８日目頃に完
了する。この作用はともに中等度〜強い方である。

(5)メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・ブ
ロス，ISP−培地１；ペプトン・イースト鉄寒天，ISP−
培地６；チロシン寒天，ISP−培地７；いずれも27℃培
養）トリプトン・イースト・ブロス培地，ペプトン・イース
ト・鉄寒天培地，チロシン寒天培地のいずれにおいて
も、はつきりしたメラニン様色素を観察できなかつた。

(6)炭素源の利用（プリドハム・ゴトリーブ寒天培地，I
SP−培地９；27℃培養）Ｄ−グルコース，Ｄ−キシロース，イノシトールを利用
して発育し、Ｌ−アラビノース，Ｄ−フラクトース，シ
ユクロース，Ｌ−ラムノース，ラフイノース，Ｄ−マン
ニトールを利用しない。

(7)リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天，27℃培
養）培養後９日目頃から発育周辺のリンゴ酸石灰を溶解し、
その作用は中等度〜強い方である。

(8)硝酸塩の還元反応（0.1％硝酸カリ含有ペプトン水，
ISP−培地８；27℃培養）陰性である。

以上の性状を要約すると、MG 846−fF３株は、胞子のう
を持たず、気菌糸はかぎ状あるいはらせん状で輪生枝は
認められない。胞子の表面は平滑である。種々の培地で
無色〜うす茶あるいはうすオリーブの発育上に、白〜明
るいオリーブ灰あるいは明るい茶灰の気菌糸を着生し、
溶解性色素はみとめられないか、わずかに黄色味をおび
るものがある。メラニン様色素は陰性、蛋白分解力は中
等度〜強い方、スターチの水解性は強い方である。

なお、全菌体中に含まれる２，６−ジアミノピメリン酸
はＬＬ−型であつた。これらの性状より、MG 846−fF３
株はストレプトミセス（Streptomyces）属に属する放線
菌と考えられる。さらに、MG 846−fF３株に近縁の既知
菌種を検索すると、つぎの種があげられる。すなわち、
ストレプトミセス・アマクサエンシス（Streptomyces a
makusaensis，文献１） “International Journal of Systematic Bacteriolog
y”18巻，290頁，1968；文献２） Nagatsu etal,Studies on a new antibiotic,tuberin,I
V Taxonomic studies on the tuberin producing organ
isms,Streptomyces amakusaensis,"Joural of Antibiot
ics"SeriesA16巻，207−210頁，1963）である。この種
のISP菌株（当研究所保存）とMG 846−fF３株とを比較
試験し、その成績の大要をつぎに示す。

表から明らかなように、MG 846−fF３株とストレプトミ
セス・アマクサエンシスとは極めて近い性状を示してい
る。

アマクサエンシスの文献上の記載とは異なるが、実際に
比較してみて、両者が同じ結果を示したのが、ISP−培
地６でのメラニン様色素形成、単純ゼラチンの液化であ
る。比較試験で異なるのは、Ｄ−キシロースとイノシト
ールの利用であるが、文献の記載を照合して考慮すると
大きな相異点とは考えにくい。

これらのことから、MG 846−fF３株をストレプトミセス
・アマクサエンシス（Streptomyces amakusaensins）近
縁の種と同定した。

なお、MG 846−fF３株を工業技術院微生物工業技術研究
所に寄託申請し、昭和６０年２月１５日微工研菌寄第80
95号として受託された。

MG 846−fF３株は他の放線菌の場合に見られるようにそ
の性状が変化しやすい。MG 846−fF３株又はこの株に由
来する突然変異体、形質接合体又は遺伝子組換え体であ
つても、ナグスタチンを生産するものはすべて本発明に
使用できる。

本発明の方法では、前期の菌を通常の微生物が利用し得
る栄養物を含有する培地で培養する。栄養源としてはグ
ルコース、水あめ、デキストリン、シユクロース、でん
粉、糖みつ、動植物油等を使用できる。また窒素減とし
ては大豆粉、小麦はい芽、コーンステイープリカー、綿
実かす、肉エキス、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモ
ニウム、硝酸ソーダ、尿素等を使用できる。その他必要
に応じ、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシ
ウム、コバルト、塩素、燐酸、硫酸及びその他のイオン
を生成することができる無機塩類を添加することは有効
である。また菌の発育を助け、ナグスタチンの生産を促
進するような有機および無機物を適当に添加することが
できる。

培養法としては好気的条件での培養法、特に深部培養法
が最も適している。培養に適当な温度は１５−４０℃で
あるが、多くの場合２６〜３０℃附近で培養する。ナグ
スタチンの生産は培地や培養条件によつて異なるが、振
とう培養、タンク培養とも通常２〜１０日の間でその蓄
積が最高に達する。培養液中のナグスタチンの蓄積量が
最高になつた時に培養を停止し、培養液から目的物質を
単離、精製する。

かく生産されるナグスタチンは後述する理化学的性状を
有するので、その性状に従つて溶媒物から抽出、精製す
ることが可能であるが、特に以下の方法により効率的に
抽出、精製することができる。

すなわち、有効成分を含む培養物から固形物を別した
液に活性炭もしくは合成吸着剤を加え、メタノール等
の水と自由に混和する溶媒を加えて攪拌し、有効成分を
抽出する。抽出液の溶媒を留去して得た油状物質を少量
の水に溶解し、イオン交換樹脂、セルロースパウダー、
ゲル過剤等の担体を使用したクロマトグラフイーを適
宜組み合わせてナグスタチンを単離する。ナグスタチンの理化学的性状形状：無色の粉末元素分析：炭素48.58％、水素5.80％、窒素13.96％、
酸素31.99％分子量：299 分子式：C₁₂H₇N₃O₆ 融点：190−195℃ 紫外部吸収：225nmに吸収極大赤外部吸収スペクトル：第１図に示す。

核磁気共鳴スペクトル：重水中のプロトンNMR スペクトルを第１表に、^１３Ｃ−NMRスペクトルを第
２表に示す。

ナグスタチンは各種スペクトルを検討した結果、前記の
式の構造を有することが決定された。この構造に一致す
る既知物質は報告されていないのでナグスタチンは新規
生理活性物質であると決定した。

ナグスタチンの生物学的性質ナグスタチンのＮ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニダ
ーゼに対する阻害活性の測定は“Method in Enzymolog
y”，28,772-776(1952)記載のTarentinoらの方法に従
い、β−ニトロフエニル−Ｎ−アルチル−β−Ｄ−グル
コサミナイドから遊離されるＰ−ニトロフエノールの40
0nmにおける吸光度を測定して阻害物質を定量した。す
なわち、反応液の組成は0.1Ｍクエン酸緩衝駅（pH4.5）
0.5ml、0.025Ｍｐ−ニトロフエニル−Ｎ−アセチル−β
−Ｄ−グルコサミナイド0.05ml、蒸留水0.44mlであつ
て、0.01mlの酵素液の添加により反応を開始させ、３７
℃において３０分の反応の後、１m1の0.4Ｍグリシン−
苛性ソーダ緩衝液（pH１0.5）を添加することにより反
応を停止させ、室温に１０分間放置後、400nmにおける
吸光度(a)を測定した。

同時にナグスタチンを含まない緩衝液のみを用いた盲検
の吸光度(b)を測定し、Ｎ−アルチル−β−Ｄ−グルコ
サミニダーゼ阻害率を〔(b-a)／ｂ〕×100の算式により
計算した。この定量方法でナグスタチンは0.0012μｇ／
m1の濃度でＮ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニダーゼ
を５０％阻害(IC₅₀)した。また、正常マウスにおける細
胞性免疫に及ぼす効果を、羊赤血球（SRBCと略称）を抗
原としてマウス足蹠に接種して得られる遅延型過敏症
（DD.T.Hと略）を指標（参考文献“J.Exp.Med.”139，1
529〜1539，1974）として検討した。

すなわち、SRBC 10⁸個を0.05mlの生理食塩水に浮遊させ
た懸濁液をCDF₁（雌性８週令）マウスの足蹠皮下に接種
し、これと同時に、ナグスタチン５０mg／kg，５mg／k
g，0.5mg／kg又は0.05mg／kgを含有する水溶液を１回腹
腔内投与した。投与４日後、他の一方の足蹠に、SRBC10
⁸個を0.05mlの生理食塩に浮遊させた懸濁液を皮下投与
して二次感作させた。その２４時間後、その足蹠にみら
れる腫脹度（足蹠の厚さの増加）をキヤリパスで測定し
た。供試化合物を投与しないでSRBC及び生理食塩水の皮
下注射を受けた対照動物の足蹠肥厚度を１００％と評価
し、これと処理した供試動物の足蹠肥厚度を比較するこ
とにより供試化合物の細胞性免疫増強効果を判定した。
試験結果を第３表に示す。

さらに、担癌マウスにおける細胞性免疫に及ぼすナグス
タチンの影響についてつぎのとおり検討した。

すなわち、腹水性ザルコーマ180腫瘍の担癌マウスにお
ける塩化ピクリルを抗原としたD.T.H反応による細胞性
免疫に及ぼすナグスタチンの効果を下記の試験法で検討
した。

腹水性ザルコーマ180腫瘍の細胞の10⁴個をCDF₁（雌性１
２週令）マウス（６匹／群）の腹腔内に移植（０日）
し、１日後に２５mm×１５mmに剃毛した腹部に６％塩化
ピクリルエタノール液を２０mm×２０mm×２mmのカツト
脱脂綿に0.6ml含ませて感作する。８日後に両耳をダイ
アル式厚さ計で測定し、その値を前値(a)とする。その
後１０mm×４mm×１mmのカツト脱脂綿に１％塩化ピクリ
ルオリーブ液を含ませて両耳を感作し、９日後にその両
耳の腫脹度をダイヤル式厚さ計で測定し、この測定値
(b)から前値(a)を差し引いてこの耳厚増加度（ｂ−ａ）
を算定して、これを対照群(c)とする。他方、生理食塩
水にとかしたナグスタチンを５０mg／kg，５mg／kg，0.
5mg／kg又は0.05mg／kgの量で、ザルコーマ180接種の１
日後から８日後までに連日６回／日腹腔内投与しかつ対
照群と同様に塩化ピクリルで感作をして耳厚増加度
（ｂ′−ａ′）を測定して、これを処理群(T)とする。
対照に対する耳厚増加率（Ｔ／Ｃ×100）を算出し、細
胞免疫賦活性の程度とした。試験結果を第４表に示す。

以上の結果より、ナグスタチンは正常動物の細胞性免疫
能を増強しかつ担癌により低下した細胞性免疫を賦活す
る物質であることが認められ、その効力は免疫増強剤と
して知られているベスタチンに匹敵するものである。

〔実施例〕

つぎに本発明を実施例により説明するが、本発明はこれ
に限定されるものではない。

実施例１ストレプトミセス・アマクサエンシスに近縁の種MG 846
-fF３株（微工研菌寄第8095号）の１白金耳ずつを２本
の５００m1の回転培養用フラスコ中のＳ培地１１０m1に
植菌し、２７℃において２日間培養し、種培養液とし
た。Ｓ培地の組成はガラクトース２％、デキストリン２
％、パクトソイトン（米国DIFCO社）１％、コーン・ス
テイープ・リカー（味の素社）0.5％、硫酸アンモニウ
ム0.2％、炭酸カルシウム0.2％、消泡剤１滴（pH7.4）
である。種培養液１m1ずつを同じくＳ培地１１０m1ずつ
を分注した５００m1の回転培養用フラスコ１３６本（培
地１５分）に植菌し、２７℃において４日間、毎分１
８０回転の回転振盪培養を行つた。培養液を過するこ
とにより１４．５の培養液を得た（IC₅₀＝0.02μ／
m1）。

培養液１４．５に活性炭粉末（和光純薬工業）２９
０ｇを添加し、室温で時々攪拌しながら３０分間放置
し、過を行つた。５の脱イオン水で活性炭を洗浄
後、活性炭を容器にあけ、５のメタノールを添加し、
２規定塩酸を持ち手pHを2.0としたのち、過によりメ
タノール液を得た。さらに４のメタノールで洗浄
し、合わせて９のメタノール溶出液を得た。メタノー
ル液を減圧下に濃縮乾固することにより１３９ｇの阻害
活性を有する物質を粗物質として得た（IC₅₀＝0.2μｇ
／m1）。

この粗物質１３８ｇを脱イオン水1.5に溶解して、ダ
ウエツクス（米国ダウケミカル社）５０−１００メツシ
ユ（Ｈ^＋型）のカラム（６×３５cm）にかけ、２の脱
イオン水で洗浄液、0.5Ｍピリジン−酢酸緩衝液（pH4.7
５）を用いて阻害活性を示す物質の溶出を行つた。１フ
ラクシヨン１５ｇで分画溶出すると、フラクシヨン１６
１番から３５０番にかけて阻害活性のピークが見られた
もので、この分画を合わせて減圧下に濃縮乾固し、３7.
8ｇの粗物質を得た（IC₅₀＝0.12μｇ／m1）。

これを1.8９の0.0２Ｍピリジン−酢酸緩衝液（pH3.1
０）に溶解し、酢酸でpHを3.1０に修正した後、あらか
じめ0.0２Ｍピリジン−酢酸緩衝液（pH3.1０）にて平衡
化しておいたダウエツクス５０のカラム（３×４３cm）
にかけ、活性物質を吸着させ、0.0２Ｍピリジン−酢酸
緩衝液（pH3.1０）１と0.5Ｍピリジン−酢酸緩衝液
（pH4.7２）１とを用いて直線的濃度勾配溶出方によ
り活性物質を溶出した。１フラクシヨン１５ｇで分画す
ることによりフラクシヨン４３番から６５番にかけて阻
害活性を示すピークが得られたので、この分画を減圧下
に濃縮乾固し、4.0６ｇの粗物質を得た（IC₅₀＝0.014μ
ｇ／m1）。

ついでアビセル（フナコシ薬品）のカラム（３×４３c
m）にかけ、酢酸ｎ−ブチル−ブタノール−酢酸−水
（３：４：１：１）の混合溶媒にて溶出し、１フラクシ
ヨン１５ｇで分画するとフラクシヨン１５１番より３９
６番にかけて阻害物質のピークが得られたのでこの分画
を減圧下に濃縮乾固することにより４８０m1の粉末を得
た（IC₅₀＝0.0018μｇ／m1）。

この粉末を1.5mlのメタノールに溶解し、セフアデツク
スLH−20（フアルマシア社）のカラム（1.6×１５０cm
にかけメタノール−水（８：２）で溶出し、１フラクシ
ヨン５ｇで分画するとフラクシヨン３３番から３５番に
かけて活性物質が溶出されたので、この分画を減圧下に
濃縮乾固することにより、ナグスタチンの白色粉末２０
７mgを得た（IC₅₀＝0.0012μｇ／m1）。

実施例２実施例１に述べた菌株、培地を用い、６００容のタン
クで培養を行つた。培養液を過助剤を用いて過し、
液３００を得た。この液を強酸性イオン交換樹脂
SK−104Ｓ（Ｈ型）（三菱化成工業製）４５を充填し
たカラムに通し、活性成分を吸着させた。カラムを水洗
液、１規定のアンモニア水で溶離して活性画分５８を
得た。これを濃縮後、ダイヤイオンHP−20（三菱化成工
業製）１５のカラムにかけ、水で溶離した。活性画分
４３をダウエツクス５０Ｗ×２（Ｈ型）（ダウケミカ
ル社製）５に吸着させた。水洗後、0.0４規定塩酸で
溶離した活性画分２０を濃縮乾固し、アビセル（フナ
コシ薬品）1100mlを充填したカラムにかけた。酢酸ブチ
ル−ブタノール−酢酸−水（３：４：１：１）で、次い
で同様の混合溶媒系（１：４：１：１）で展開した。活
性画分を濃縮乾固して粗粉末２６ｇを得た。これをつい
でトヨパールHW−40（東ソー製）2.4にかけ、メタノ
ールで展開した。活性画分を濃縮乾固して粗粉末１４ｇ
（IC₅₀＝0.004μｇ／m1）を得た。最後にCM−セフアデ
ツクスＣ−２５（フアルマシア社製）３７０m1のカラム
にかけ、水で展開し、活性画分を濃縮することによりナ
グスタチンの白色粉末5.4ｇを得た。

〔発明の効果〕

第３表及び第４表の試験結果から明らかなとおり、新規
生理活性物質ナグスタチンは免疫増強作用を示し、制癌
効果を有する。

【図面の簡単な説明】

第１図はナグスタチンの赤外吸収スペクトル図（KBr
錠）である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者魚谷和道神奈川県鎌倉市笛田483―７

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次式：で表わされる抗Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼ活性を
有する新規生理活性物質ナグスタチン。
【請求項２】ストレプトミセス属に属するナグスタチン
生産菌を培養し、その培養物から生理活性物質ナグスタ
チンを採取することを特徴とする生理活性物質ナグスタ
チンの製造法。