JPS61143377A - シリビニン誘導体、その製法及びこれを含有する火傷、肝臓障害及びキノコ毒の治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規フラボリグナン紡導体、その製法及びこの
新規化合物を含有する医薬組成物に関する。

従来の技術 オオヒレアデミ（Ｓｉｌｙｂｕｍ　Ｍａｒｉａｎｕｍ　
（Ｌ、）Ｇａｅｒｔｎ、（０ａｒｄｕｕｓ　Ｍａｒｉａ
ｎｕｓ　Ｌ、）　）は１従来から公知の医療用植物であ
る。この植物の実中に生じるフラボリグナンから、Ｒ，
ミュンスター（Ｍｕｅｎｓｔｅｒ）はシリビンと称され
る成分を単離した〔Ｒ，ミュンスタ＝（ミュンヘン在）
の論文１９６６年、参照〕。この化合物の構造は、Ａ、
ペルター（Ｐｅ１ｔｅｒ　）及びＲ，ヘンゼル（Ｈａｅ
ｎｓｅｌ　）により解明された〔テトラへＶロンｅレタ
ース（Ｔｅｔｒａｈｅ４ｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、Ｌｏ
ｎｄｏｎ　）２５．２°９１１〜２９１６／１９６８参
照〕。

従来シリマリンエとも称されていたシリビンは、有用な
肝臓治療物質である〔西ドイツ特許第１７６７６６６号
明細書参照〕。シリビン（シリマリンエ）全製造する工
業的方法は、例えば西ドイツ特許第１９２！１０８２号
明酬曹に記載されている。

１９７４年に、Ｈ，ワグナ−（Ｗａｇｎｅｒ　）　、Ｐ
。

ディザ／ｌ／　（Ｄｉｅｓｅｌ）及びＭ、ディン（５ｅ
ｉｔＺ　）は、シリビンに関して２種の位雪異性体即ち
シ】】ビン及びインシリビンを仮定した〔了ルツナイミ
ツテルフオルシュング（Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏ
ｒｓｃｈｕｎｇ　）２４（４ＪＡ６６〜４７１〕。この
推測は、Ａ、アルノン（Ａｒｎｏｎｅ　）、Ｌ、メルリ
ニ（Ｍｅｒｌｉｎｉ　）及び２．デナロツテイ（Ｚａｎ
ａｒｏｔｔｉンにより実験的に研究され、硲認された〔
ジャーナル・オプＯデ・ケミカル−ソサエティ・ケミカ
ル・コミュニケーションズ（、Ｔ、Ｏｈｅｍ、Ｓｏａ、
（３ｈｅｍ、Ｏｏｍｎ、）１６．６９６〜６９７／１０
７９参照〕。これによれば、この公知シリビンは、２種
の異なる化合物、即ち次の構造式Ａ及びＢの化合物より
なる： Ｈ０ （Ａ）　　シリ♂ニン Ｈ０ （Ｂ）　　イソシリビン この構造から、これら化合物は位置異性体であることが
わかる。Ａ式の化合物には、最近、工ＮＮ命名で、シリ
ビニンが付与された。この名称をここではＡ式の化合物
に対して使用する。

シＩＪ　ヒンの治療上の使用で、このシリビンは実際に
水中に不溶であるという困難が生じ、従って、シリビン
含有注射浴液又は朝刊（この場合に、特定の水溶性が必
要）に製造できなかった。西ドイツ特許第１９６３６１
８号明細書中には、明らかに、特定の水溶性を有するシ
リビン訪導体が記載されているが、これらはコハク酸の
半エステルの非常に複雑な混合物である。

この混合物はシリビン中に５個のエステル化しうるヒド
ロキシル基七有し、このシリビンも前記の２種の位置異
性体をも有し、エステル化に使用するためのコハク酸は
モノエステルだけではな゛くジエステルをも形成するこ
とのできるジカルボン酸であるので、複雑なのである。

薬物学的目的には、非常に種々異なりかつ説明できない
予知不能な化合物よりなる生成物は使用できない。

発明が解決しようとする問題点 従って、本発明の目的は、医療の目的に好適であり、正
確に化学的に個々の化合物として特定される水溶性のシ
リビニン誘導体を得ることである。

問題を解決する手段 特定のアルカン及びアルキレンジカルボン酸のシリビニ
ン誘導体は、この要求を満たすことが判明した。

従って、本発明により、一般式： 〔式中・ｎ及びｍは相互に無関係に、０又は１を表わし
、Ａｒｋｌ及びＡ１に２は相互に無関係に、４個までの
炭素原子を有するアルキレン基又は２〜４個の炭素原子
を有するアルケニレン基を表わし、Ｍｌ及びＭ２は相互
に無関係に、水素原子又はアルカリ金属原子を表わす〕
のシリビニン誘棉体が得られる。

一般式（１）の有利な化合物は、式中のｍ及びｎが相互
に無関係に、０又は１を表わしＡｌｋｌ及びＡ１に２は
各々２個のａ−７ｔＢｔ子金有するアルキレン基を表わ
し、Ｍｌ及びＭ２は相互に無関係にアルカリ金属を表わ
すものであり、ｍとｎ１ＡｒｋｌとＡｌｋ２及びＭｌと
Ｍ２は各々場合に同じものを表わすのが有利である。

シリビニンーＣ！−２’、３−ジヒドロデンスクシネー
トの２す）　＋１ウム塩が殊に有利である。

本発明による化合物の場合に、ベンゼン核に結合してい
ないヒドロキシル基は、例えばシュウ酸、マロン酸、コ
ハク酸、アジピン酸、マレイン前又はフマル酸により部
分的又は完全にエステル化されている。シリビニンの２
個の非芳香性結合ヒドロキシル基は、Ｍ記カルボン酸の
１個により単純エステル化されているのが石利である。

本発明により、一般式（１）の新規化合物の製法が得ら
れ、ここで、前記（Ａ）式のシｌピニン約１Ｍ量部をぎ
りジン１〜２重訪部中に溶かし、攪拌しながら一般式： 〔式中Ａｒｋは前記Ａｌｋｌ及びＡｒｋ２の定義の１つ
と同じものｔ表わす〕のジカルボン酸無水物１〜６重量
部と反応させ、次いで均一混合物を得るまでエタノール
を１え、引続きこれと水を激しく攪拌しながら混合する
と芳香性結合したヒドロキシル基の存在エステルは加水
分解されるから、この加水分解が終了したら直ちに、こ
の反応混合物を酢酸エチルで稀釈し、酢酸エチルで飽和
された酸性水で洗浄し、酢酸エチル相を蒸発させ、残分
をエタノール中に入れ、アルカリ金属水酸化物のアルコ
ール性溶液で、この遊離のエステル化されていないカル
ボン酸残基の塩に変じる。

このジカルボン酸無水物との反応は、４０〜５０℃で実
施するのが有利である。酢酸エチル飽和酸性水の…は約
１．５〜２．４に保持するのが有利である。

これら化合物殊にシリ♂ニンー〇−２′，３−ジヒドロ
ゲンスクシネートの２ナトリウム堪は意外にも、火傷の
治療の際に優れた薬理作用を示す。更に前記誘導体にも
かかわらず、これらは、肝臓治療薬としての公知シリ♂
ンの完全な薬理効果を保持する。これらは殊に、肝硬変
及び毒性代謝性肝臓障害の治療に好適である。

意外にも、本発明の化合物は、キノコ養殊に、タマゴ９
テングダケ（Ａｍａｎｔｔａ　ｐｈａｌｌｏｉｄｅｇ　
）として公知のキノ゛コによる非常に危険な襠の治療ロ
ルエチレン、クロロホルム及び類似物による毒もこれで
意想外に良好に治療できる。予防的使用の場合には、本
発明による化合物は前記障害を予防する。

従って、本発明により、これら新規、化合物の少なくと
も１種全薬物学的に認容性の固体又は液体稀釈剤又は相
持剤と共に含有する医薬組成物も得られる。これらは、
通例、系統的に、例えば丸剤、カプセル、溶液及び類似
物の形で、慣用の相持剤中でかつ場合によっては慣用の
アジュバントと一緒に使用される。

大人に対する１日の適用量は、患者の状態及び疾病の重
症度に依り、約５０〜５００！ｎ９である。

シリビニンーＣ！−７，３−ジヒげロゲンスクシネート
の２ナトリウム塩（５ｉｌｉ−８ｕｅ−Ｎａ　）　ｔ−
火傷の場合の症状を、殊に熱的組織壊痕の形成による中
毒により起こさせた。重症の皮膚火傷の後の自己中饗症
状がその応答である証明は、禰々の方法で実施した。殊
に、火傷及び非火傷皮膚を健康なかつ火傷した受容動物
に交叉移植するのが説得力があり、この際、火傷皮膚の
非火傷受容体は死亡し、非火傷皮崩の火傷受容体は摺傷
作用を示さないことが明らかにされている（　Ｋ、Ｈ，
シュミット（Ｓｃｈｍｉｄｔ　）のニュー参アスペクツ
ψオプーオートイントキシケーション・アフター・シビ
ア・バーニングス（Ｎ０Ｗａｓｐｅｏｔｓ　ｏｆ　ａｕ
ｔｏｉｎｔｏｘｉｃａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｓｅｖｅ
ｒｅｂｕｒｎｉｎｇｓ　）　：デ・バーニング・ディシ
ーズ（Ｔｈｅ　ｂｕｒｎｉｎｇ　ｄｉｓｅａｓｅ　）　
；　Ｆ、Ｗ、アーン７エルド（ＡｈｎｏｆｅｌｅＬ）等
によるスゾリンガー＠７エルラーク、ベルリン（８ｐｒ
ｉｎｇｅｒ　Ｖｅｒｌａｇ。

Ｂｅｒｌｉｎ　）発行、４５〜５２頁参照］。

皮膚火傷の場合に、多くの化合物の発生又は新形成が起
こる。これらの多数の代りに、これら化合物のいくつか
の溝造を説明することができている。特に、皮膚火傷の
場合に生じる化合物は、脂質過酸化の際に生じる化合物
と顕像し【いる。これら物質の毒性作用に関しても類似
している。殊に、種々の長さの連鎖の飽和又は不飽和ア
ルデヒｒは、４性作用の形成が、脂質過酸化〔ペネデイ
ツテイ（Ｂｅｎｅｄｅｔｔｉ　）等によるアイデンティ
フィケーションＱオデａ４−ヒドロヤシノネナール１ア
ズ・ア・サイトドキシツク・プロダクト・オリシネ−テ
ィング・フロム拳デ・ベルオキシデーション・オプーリ
バー・ミクロソ−ム・リビズ（工ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔ
ｉｏｎｏｆ　４−　ｈｙｄｒｏｘ７ｎｏｎｅｎａ１ａｓ
　ａ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｐｒｏｄｕｃｔ　ｏｒｉｇｉ
ｎａｔｉｎｇ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｐｅｒｏｘｌｄａｔ
ｉｏｎｏｆ　１ｉｖｅｒ　ｍｉａｒｏｓｏｍａｌ　Ｌｉ
ｐｉｄｓ　）　、ビオキムΦビオフイズーアクタ（Ｂｉ
ｏａｈｉｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ）６２０．２
８１〜２９６頁（１９８０年）〕及び熱的組織損傷（Ｋ
、Ｈ，シュミット（日ｃｈｍｌｔ）等によるスタブイス
−オン・デ・ストラクチャノンイ ーアンド・ベオロジカル・エフェクト・オプ・ピロトキ
シンズ・ビュリファイド・フロム−パーンドースキン（
Ｓｔｕｄｉｓｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　５ｔｒｕｃｔｕｒｅａ
ｎｃＬ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ
　ｐｙｒｏｔｏｘｉｎｓｐｕｒｉｆｉｅｃｌ　ｆｒｏｍ
　ｂｕｒｎｅｄ　５ｋｉｎ　）ワールド・Ｊ＠ササ−ｍ
　（Ｗｏｒｌｄ　Ｊ、　Ｓｕｒｇ、）　５．３６１〜６
６５ｊｊ（１９７９年）〕の結果として、殊に印象的で
ある。従って、火傷は細胞構造の酸化性損傷をもたらす
と仮定さｒている。

従って、膜脂質の自己酸化性変化を、重度の火傷の後の
自己中戴症の結果として研究した。

特に膜脂質の脂肪酸組成の変化を研究した。更に、本発
明によるシリビン誘導体が膜脂質の脂肪酸組成の変化に
どの程度影會するかを試験した。

重度火傷の後の膜脂質の脂肪酸組成の変化平均体重３６
０ｇの雄ウィスターラッテ（Ｗｉｓｔ＠ｒ　ｒａｔｓ　
）　ｆ水及び乾燥飼料を自由に与えて３群に保持した。

この実験の開始までに、室温は２２℃であり、この実験
の開始の後には動物を３０℃で保持した。

′表面積２０鴎２の銅スタンプを用い、一定圧及び２５
０℃の温度゛で皮膚火傷を形成した。深部組織までの熱
的拶傷をさげるために、皮６？空冷中空スパーチル（ｅ
ｐａｔｕｌａ　）上に引きよせた。非常に正確な火傷が
、一定の生存率−を示すこの動物モデルで形成できる。

この実験の開始前に、動物ｔネンプタール（ｎｅｍｂｕ
ｔａｌ　）　５０１９／　！ｌ’Ｊｌで麻酔した。火傷
の後に、ショック予防のためにリンゲル・ラフチー）　
（Ｒｌｎｇｅｒ　１ａｃｔａｔｅ　）　２０　ｄ　ｆ腹
膜内に注射した。

５つの実験群を使用した： ａ）正常群：完全に損傷のない動物 ｂ）対照群１　：　１３１１．１−８ｕａ−Ｎａ　７５
，５　ＷＩｇで６日間シリビニン治療のみ Ｃ）対照群ｌ：偽−処理動物 ｄ）火傷動物群：２５１２５０℃、２０秒、［１，５ａ
ｔ。

ｅ）試験群二火傷後１日から開始してＳｉ；１−８ｕｅ
−Ｎａ　７５．５雫を６日間腹膜内に適用した動物 ミクロソームの単離のために、実験期間の終了後に、動
物から麻酔下に採血した。引続ぎ、肝臓を取り出し、重
量測定し、直ちに、氷冷１離媒体（サッカロース０．２
５　Ｍ％ＫＤＴＡ　１ｍＭ。

トリス、　ＨＣＪ　１０　ｍモル、ｐＨ７，２）中に移
した。

肝臓を切断し、媒体中でホモジエネートした。

ミクロソームフラクションを分画遠心法によりペレット
化した。このミクロソームを再懸濁させ、再び遠心した
。引続き、＠濁液を製造し、この際、懸濁液１ｄは肝臓
組織１１に相当した。

脂質’ｉ、Ｊ、７オルヒ（ｔｏｌｃｈ　）の方法で測定
シた〔アｅシンプル・メソッド・フォア・デーアイソレ
ーション−アンド・ぎウリフイケーション・オプ・トー
タル・′リビズ・フロム・ア＝−ｒル嗜テイシューズ（
Ａ　ｓｉｍｐｌｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒｔＭ　　１ｓ
ｏｌａｔｉｏｎ　　ａｎｄ　　ｐｕｒｉｆ’１ｏａｔｉ
ｏｎ　　Ｏｆ　　ｔｏｔａ：Ｌｌｌｐｌｓ　ｆｒｏｍ　
ａｎｉｍａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ　）、ジャーナルオプ・
ビオロジカル・ケミストリイ（Ｊ、ｂｉｏｘ。

ｏｈｅｍ、）　２２６．４９７〜５０８／１９５７プリ
イ及びデイヤーの変法ア・ラビド・メソツＶ・オプ・ト
ータル・りぎド・エクストラクション・アンド、ｆウリ
フイケーション（ｍｏｄｉ−ｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｏｆ　
Ｂｌｉｇｈ　ａｎｄ　Ｄｙｅｒ　；　Ａ　ｒａｐｉｄ　
ｍｅｔｈｏｄｏｆ　ｔｏｔａｌ　１１ｐｉ　ｅｘｔｒａ
ｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）、カ
ナディアン・ジャーナル嗜オプ・ビオケミストリイ・ア
ンド・フイジオロギイ（Ｏａｎ、Ｊ・Ｂｉｏｃｈｅｍ、
ｐｈｙｓｉｏｌ、）３７、９１１〜９１７／１９５９参
照〕 抽出され九ミクロンーム脂質を水酸化ナトリウム水溶液
で鹸化した。遊離脂肪酸ｉ　ＢＦ３−メタノールの添加
によりエステル化した。メタノールの蒸発及び親水性副
産物の除去の後に、脂肪酸エステルを定量的に測定した
。

非火傷動物群の場合に、脂肪酸型の注目に値する変化を
確かめることはできなかった。従って、麻酔及び僅かな
処置操作はミクロソーム脂質を変化しなかった。この理
由から、比較のために、正常群と対照群ｔ−１つの対照
群に一緒にした。

非火傷動物と火傷動物とをそれらのミクロソーム脂肪酸
型に関して比較すると、不飽和脂肪酸から飽和脂肪酸へ
の重大な転換は示さなかった。

添付の第１図は、ミクロソーム肝臓脂質中の脂肪酸分布
及び熱的皮膚損傷による変化を示している。パルミチン
酸（０１６）の割合は、火傷の後に、全脂肪酸の２５．
１から６４．４％に増加した。ステアリン！（０１８）
の場合は、火傷動物の場合の割合は４６．３　％で、対
照動物で得られた値より１３．２％高かった。オレイン
酸（（！１８：１）の場合、僅かな取るに足らぬ低下が
認められる。リルイン酸（ａ１８：２）の割合は、火傷
の後に当初値より約３分の１に低下した。最後に、アラ
キドン酸（０２０：４）の場合に、火傷の後に当初値の
３１％だけであることが認められた。

次表は火傷及び非火傷動物における脂肪酸の割合に対す
る８１１１−８ｕｅ−Ｎａの影響を示している：第１表 ラッテにおける火傷及び非火傷動物の８１１１−８ｕｃ
−Ｎａ治僚の後の肝臓のミクロソーム脂質の脂肪酸型 本発明によるシリ♂ニン誘導体による治療は、非処看動
物と比べて、非火傷対照動物の場合に重大な変化を起こ
させないことが判る。火傷動物の場合に、治療は不飽和
脂肪酸の消失を完全に除去した。

要約すれば次のことが言える：火傷は、ミクロソーム脂
質の脂肪酸型を変える。これは、膜の酸化性損傷に依る
ものと思われる。これは、殊に、多不飽和脂肪酸の著る
しい減少により明らかである。

従って、本発明によるシリビニン誘導体は酸化性の細胞
損傷を阻止することができる。従って、これらは、殊に
重度の火傷の後の酸化性損傷機構を阻止するために有用
である。

既述のように、重度の火傷の後の自己中嵩反応は殊に酸
化性細胞損傷をもたらすと思われている。従つ【、標準
熱的外傷は、ラッテの牌屍更に、本発明によるシリビ；
ン銹導体は、重度火傷の後のリンパ球性機能妨害にいか
なる影響を及ぼすかを調査した。

ラッテの膵臓及び末梢血液からのＴ−ａｔ胞のＰＨＡ誘
起細胞分裂（ｂｌａｓｔｏｇｅｎｓｓｉｓ　）に対する
銅スタンｆ”を用いて火傷させた。対照群として、すべ
ての処置操作を行なったが火傷させな力）つた偽火傷動
物を用いた。火傷及び非火傷動物力）ら２．４．７及び
９日後に採血し、エーテル麻酔下に膵臓を取り出した。

リンパ球の単離のために、ヘパリン処理した血液全フィ
コルーハイバク溶液（Ｆｉｃｏｘｌ−Ｈｙｐａｑｕｅｓ
Ｏ’１ｕｔｉＯｎ　：比重１．０７７）に重層した。引
続き、これを遠心し、得られたリンパ球をその生命力に
関してトリジタンプルーを用いて試験した。膵臓リンパ
球の単離のために、組織を細砕し、篩に通し、ディゾ・
リシスｉｉ　（Ｇ＋Ｌ７’θ１ｙａ１ａ　５ｏｌｕｔｉ
ｏｎ　）　ｔ−用いて付随赤血球を除いた。

引続き、この細胞混合物を５チ熱−矢活胎生牛血清の存
在下に容器中で３０分間インキユペートシて、容器壁へ
の付着により懸濁液中の単核細胞の割合を減少させた（
５％）。計算のために、細胞を平底マイクロ滴定プレー
ト内に入れた。次いで２０饅胎生牛血清を導入した。こ
の方法で、自然の細胞分裂を、この細胞のＤＮＡ内に３
Ｈ−チミジン−（２０１／ｍＭ　）　’に導入する方法
で測定した。

先の実験で、最適ミトゲン刺激は、５μ〜／−のＰＨＡ
濃度（ミトゲン　フイトヘマ　グルチニン）の場合に起
こることがはっきりした。この細胞試験系の最適化のた
めのこの実験の場合に、ＤＮＡの新規合成の最大刺激は
７２時間後に行なわれたことが確かめられた。更に、最
大刺激を達成するための胎生中血清の最適濃度は２０％
であることが確かめられた。

前記のように、自然の細胞分裂は、３Ｈ−チミジン全細
胞のＤＮＡ中に導入する方法で測定した。３Ｈ−チミジ
ン添加後１８時間に細胞を集め、この際、この１８時間
に対する０点が最大刺激の時点と一致し【いる。

本発明によるシリビエン誘導体の作用の調査のために、
ラッテの１群をシリピニン紡導体で処理した。このため
に、５ｉｌｉ−ｃｕｓ−Ｎａ　７５．５　ｍ９を１日１
回腹膜内注射した。この治療は、火傷の日からその組織
が除かれた日まで（最大９日まで）実施した。

対照動物で得られた結果及び５ｉｌｉ−ｓｕＯ−Ｎａ処
置動物で得られた結果の評価のために、刺激指数を計算
した。この数値は、刺激試料の平均値と対照試料の平均
値との商を表わす。各実験動物の場合にこうして得られ
た刺激指数から、各動物群当りの平均刺激指数を計算し
た。得られた結果を指数Ｓ工で表現する。

添付の第２図は、リンパ球の細胞分裂に対する使用Ｂ１
ｎ１−ｓｕｃ−Ｎａの影ｖを示している。火傷動物の場
合に、細胞の低下された刺激能力はシリビニン銹導体に
より著るしく増大された。

ｓｉ：Ｌｉ−５ｕＣ−Ｎａ処置動物の場合に第２白目で
すでに、血液リンパ球のＰＨＡへの応答は約１０倍高い
ことが判明した。外傷治療第４８目に、処Ｒ＠物に関す
る血液リンパ球の場合の刺激指数値は８であり、非処Ｒ
’ｔｌＪＪ物の場合の相応する値は１．５であった。

膵臓の場合に、火傷した非処置動物の刺激指数はすべて
明らかに１より下であった。シリピ二ン誘導体の適用は
、すべての調査日において着るしく改良され、最大は、
外傷治療第７白目に′認められている。

健康な動物の場合に５ｉｌｉ−ｓｕｅ−Ｎａ　Ｍｍ独は
、膵臓及び末梢血液からのＴ−リンパ球のＰＨＡ−誘起
細胞分裂の刺激能力に顕著な変化が生じなかったことを
示した比較実験も実施した。

従って、本発明によるシリビニン訪導体は、火傷動物の
リンパ球の細胞分裂を著るしく刺激する。

本発明によるシリビニン誘導体で処理した動物の場合、
熱的外傷の後に動物は再び迅速に体重が増加するので、
一般的な異化作用は低かったことも確かめられた。

中ノコ毒 拷キノコ（タマデテングダケＡｍａｎ　ｉ　ｔａｐｈａ
ｌｌｏｉｄｅ、ｓ　）による毒は医学上置も鳳大なもの
に属する。すべてのキノコ毒の１０〜３０％がタマイテ
ングダケにより起こされているが、このキノコの福は、
危険性の故に、医学上常に注目すべき大きな関心を有す
る。古い文献中にはその死亡率は３０〜５０％であると
言われている。近代の漸進的な医学により、フレーシャ
イン（Ｆｌｏｅｒｓｈｅｉｍ　）等による患者２０５人
での収集研究によれば、この値は平均２２．４％まで低
下されている。

タマデテングダケからの毒アマニチン （ａｍａｎｉｔｉｎ　）は、７ダのＪｌ（この雪量はこ
の生キノコ約５ｏＩ中に存在する）で、大人に対して致
命的であり得る。

成馬のみこまれた一連の動物実験の後に、活性物質５ｉ
ｌｉ−ｓｕｅ−Ｎａ　ｆタマ♂テングダケによる毒の治
療に使用した。

タマゴテングダケ中毒患者２５人で、慣用の治療に加え
て、ａｉｌｉ−ｓｕｅ−Ｎａでの治療を行なった。この
２８人の患者のうち、このキノコを自殺の目的で比較的
多量摂取した１人だけが死亡した。この結果は、この分
野における非常な治療上の進歩を示した。

西ドイツ特許第１９２３０８２号明細書によるシリマリ
ン含分的７０％及びシリビン／シリジアニン／シリクリ
スチンの異性体比的３：１：１でシリビン含量がインシ
リビンの約３分の１である生成物５ｏｏｙｔメタノール
２ゆ（約２．５３））中に懸濁させた懸濁液を攪拌しな
がら１５分間加熱沸騰させる。この時間の後に、このよ
うにして得た溶液から、いくらかのシリビニンは沈殿析
出することができる。引続きメタノールの０．７５〜１
，２５ゆ（約０．９６〜１．５８））ｔ−真空中で除去
し、残分を室温で１０〜２８日放置する。沈殿し九シリ
ビニンを濾過し、冷メタノール５０ｇ／で２回洗浄した
。真空中４０℃で乾燥の後に、単離された粗製シリピニ
ンを更に、次の方法で精製する： 粗製シリビニン６０１を加熱下に工業用酢酸エチル３ノ
中に゛溶かす。引続き、これに活性炭２０ＪＦを加え、
混合物を還流下に更に２時間加熱し、その間攪拌する。

その後濾過により泄明化し、溶液を減圧下に５０℃で蒸
発させ、約２５０ｄとし念。この濃縮物をウルトラータ
ラツクス装置（ｔｌｒｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ　ａｐｐ
ａｒａｔｕｓ　）　ｆ用いて、１５分間攪拌し、攪拌の
間にメタノール２５ｄと混合する。引続き、混合物を室
温で１夜放置する。吸引濾過の前に、この際に沈殿した
シリビンを再びウルトラータラツクス装置で５分間攪拌
する。吸引濾過した沈殿を酢酸エチル５０ｔＪで２回洗
浄し、４０℃で真空乾燥箱中で１夜乾燥させる。得られ
る生成物を引続き磨砕し、更に同じ条件下で４８時間乾
燥させる。

実施例 次の実施例は本発明全説明するためのものである： 例１ シリピニンーａ−２′，３−ジヒドロｒンスクシリビニ
ン５０１１ｔ４５℃でピリジン７０４中に溶かし、これ
に無水コハク酸５０．９？添加し、混合物’？４５℃で
約８時間攪拌し、これにエタノール３０ｄＹｒ：添加し
、更に混合物を、均一混合物が形成されるまで攪拌する
。引続き、これに、酢酸フェニルの鹸化のために、激し
い攪拌下に、約３０分かかって水６０ｄ’Ｃ添加する。

５０℃で１時間攪拌の後に、フェニルエステルは定量的
に加水分解される。加水分解の完全度は）ｉＰＬｏを用
いて試駆する。こうして得た反応混合物に酢酸エチル１
．７ノを迅速に添加することにより加水分解を停止させ
る。

過剰のコハク酸及びぎリジンを分離するために、酢酸エ
チルで稀釈した反応溶液を、酢酸エチルで飽和され、ｐ
Ｈ１，８５の水（稀塩酸で調節）５ノで向流により２回
抽出する。この際、酢酸エチルで飽和され、酸性にされ
た洗浄水を、稀釈された反応溶液に対して向流でポンプ
循環させ、引続き、稀塩酸の添加により、酢酸エチル通
過の後にそのμ値が残るようになるまでｐ）Ｉｆｔ１！
ｔ−１，８５に保持する。

引続き、過剰の塩酸の洗出のために、酢酸エチル相を、
酢酸エチルで飽和された水６．４ノで向流により２回抽
出する。洗浄水の…値が４．５より大きくなったら直ち
に有機相を定量的に分離し、真空中、４０〜５０℃で蒸
発させ、当初量の１２分の１（約０．２））にし、次い
でエタノール１２５ｄで稀釈する。

表題化合物は、エタノール／水からの再沈殿及び真空中
、５０℃で１５時間乾燥することにより得られる。

分析試料を製造するために、表題化合物をエタノール／
水から３回再沈殿させ、引続き、真空中、５０℃で１５
時間乾燥させる。

ＦＤ質量スペクトルで、分子ピークは、６８２の予想分
子量の所に現れる。

工Ｒスペクトル株、ａｏＨ子価振動の領域内に２個の重
複吸収帯を示し、その１万はシリビニンの場合と同様に
１６３５ｃＩＩＩ−″３の波長でピロン環のカルボニル
官能基と関連している。第２の吸収帯は１７３［］ｍ−
’の所にあり、２個のエステル性カルボニル官能基に基
因する。

ＩＨ−ＮＭＲスペクトルで、２個のエステル化が起って
いることが確認される。従って、芳香性プロトン対コハ
ク酸残基のメチレンプロトンとの比（積分により測定）
は８　：　８　（ｐｐｍ範囲５．９−２′，１　）にな
る。このメチレンプロトン（２，６ｐｐｍンとメトキシ
基のメチルプロトン（３，８ｐｐｍ　）との比は８．６
になり、従って、これと一致する。

１３０一研究の場合の化学変位は、２個のアルコール性
ヒドロキシル基のエステル化カ行すわれたことを示して
いる、即ち、この化学変位は０１１０所及び隣接炭素原
子０１２〜０１４の所で、同様にＣ２〜Ｃ４の所で最も
強く変化している。

元素分析 Ｃ３３Ｈ３００１４（分子量６８２．６０　）計算値　
Ｃ５８，０７チ　Ｈ４，４ｑｂ　　　Ｏ！；２′，５０
％実測＃　　　５８．０５チ　　４．５７　％　　　３
２′，３１チ例２ シリピニンー０−２’、　３−ジヒドロゲンスクシネー
トの２ナトリウム塩の製造 例１により得られたエタノール溶液に、攪拌及び外から
の一５〜９℃での冷却下に、６チ水酸化ナトリウムエタ
ノール溶液（このエタノール溶液の固体含分の測定に基
づ＜）ｔ−ａ加する。

懸濁液を更に室温で１時間攪拌し、ベージュ色の沈殿固
体を吸引により濾過し、タラックス金用いて、エタノー
ル１５０ｄ中に２回各々５〜１０分間懸濁させ、再び吸
引濾過する。残留酢酸エチルの除去のために、引続き、
生成物を室温でエタノール２８０Ｗｔｌ中に１４時間懸
濁させ、再び吸引濾過し、次いでエタノール７０−で洗
浄し、真空乾燥箱中、４０〜４５℃で１５時間乾燥させ
る。この予め乾燥された生成物を引続き磨砕し、篩を通
して０．２Ｈより／トさい粒子寸法にし、再び真空中、
４０〜４５℃で４８時間乾燥させる。

こうして表題化合物５２ｙ（理論量の６９％）が得られ
る。

この表題化合物は明確な融点を有しない。約８０℃で焼
結しはじめ、約１００℃で泡形成下に融解する。

メタノール中でのＵＶスペクトル： λｍ、工＝２８８ｎｍ　　　　ｆ−１，７３ｘ１０’こ
の表題化合物の分子量は７２６．５６である。

この化合物は僅かにベージュ色の、無臭で塩様の味を有
する微晶粉末である□。これは水中に易溶性で、エタノ
ール中に僅かに可溶であり、アセトン、ジエチルエーテ
ル及びクロロホルム中には実際に不溶である。

使用例 静脈適用のための凍結乾燥物の製造 マンニット　　　　　　　　　　　　　１　（Ｊ、　Ｏ
Ｉｒａｐ注射用水　　　　　　　　　　　全ｉｔ　　１
．５ｄ溶液１．５　ｄ　ｋ容量５ｄの尖ったアンプル中
に入れ、公知方法で凍結乾燥させる。貯蔵の目的で、最
終凍結乾燥物を含有するアンプルを常法で閉じる。使用
のために、この凍結乾燥物を無菌の生理食塩水ＳＲ１中
に浴かして澄明溶液とする。

【図面の簡単な説明】

第１図は、ラッテにおけるミクロソーム肝脂質中の脂肪
酸分ｙ＋ａ及び熱的皮膚障害により惹起される変化を示
すグラフ、第２図ａ）は血Ｋ　リンパ球の細胞分裂刺激
指数を示すグラフ、第２図ｂ）は；岸側リンパ球の細胞
分裂刺激指数全示すグラフである。 第１図 Ｃ１０Ｃ１０Ｃ１０：Ｉ　　Ｃ１０：２　　Ｃ２０：４
第２図（ａ）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ｎ及びｍは相互に無関係に、０又は１を表わし、
   Ａｌｋ＿１及びＡｌｋ＿２は相互に無関係に、４個まで
   の炭素原子を有するアルキレン基、２〜４個の炭素原子
   を有するアルケニレン基を表わし、Ｍ＿１及びＭ＿２は
   相互に無関係に、水素原子又はアルカリ金属原子を表わ
   す〕のシリビニン誘導体。 ２、式中のｎ及びｍは相互に無関係に、０又は１を表わ
   し、Ａｌｋ＿１及びＡｌｋ＿２は各々２個の炭素原子数
   を有するアルキレン基を表わし、Ｍ＿１とＭ＿２は相互
   に無関係にアルカリ金属原子を表わす、特許請求の範囲
   第１項記載の化合物。 ３、式中のｎとｍ、Ａｌｋ＿１とＡｌｋ＿２並びにＭ＿
   １とＭ＿２は同じものを表わす、特許請求の範囲第１項
   記載の化合物。 ４、シリビニン−Ｃ−２′，３−ジヒドロゲンスクシネ
   ートの２ナトリウム塩である、特許請求の範囲第１項記
   載の化合物。 ５、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ｎ及びｍは相互に無関係に、０又は１を表わし、
   Ａｌｋ＿１及びＡｌＫ＿２は相互に無関係に、４個まで
   の炭素原子を有するアルキレン基、２〜４個の炭素原子
   を有するアルケニレン基を表わし、Ｍ＿１及びＭ＿２は
   相互に無関係に水素原子又はアルカリ金属原子を表わす
   〕のシリビニン誘導体を製造するため、 式： ▲数式、化学式、表等があります▼ のシリビニン１重量部をピリジン１〜２重量部中に溶か
   し、撹拌しながら、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ＡｌｋはＡｌｋ＿１又はＡｌｋ＿２と同じものを
   表わす〕のジカルボン酸無水物１〜３重量部と反応させ
   、次いでこれに均一混合物が生じるまでエタノールを加
   え、引続きこれに激しい撹拌下に水を添加し、この際に
   存在する芳香性結合ヒドロキシル基のエステルを加水分
   解させ、この加水分解が完結したら直ちに混合物を酢酸
   エチルで稀釈し、酢酸エチルで飽和された酸性水で洗浄
   し、酢酸エチル層を蒸発させ、残分をエタノール中に入
   れ、アルカリ金属水酸化物アルコール浴液を用いて遊離
   のカルボン酸残基の塩に変じることを特徴とする、シリ
   ビニン誘導体の製法。 ６、無水ジカルボン酸との反応を約４０〜５０℃の温度
   で実施する、特許請求の範囲第５項記載の方法。 ７、酢酸エチル飽和され、酸性にされた水を約１．５〜
   ２．４のｐＨ値に保持する、特許請求の範囲第５項又は
   第６項に記載の方法。 ８、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ｎ及びｍは相互に無関係に、０又は１を表わし、
   Ａｌｋ＿１及びＡｌｋ＿２は相互に無関係に、４個まで
   の炭素原子を有するアルキレン基、２〜４個の炭素原子
   を有するアルケニレン基を表わし、Ｍ＿１及びＭ＿２は
   相互に無関係に水素原子又はアルカリ金属原子を表わす
   〕のシリビニン誘導体少なくとも１種を固体又は液体の
   薬剤稀釈剤又は担持剤と混合して含有することを特徴と
   する、火傷、肝臓障害及びキノコ毒を治療する薬剤。