JPS61109713A - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ この発明は、抗腫瘍剤に関する。

［従来技術］ 従来より、低分子の抗腫瘍剤としては合成化学物質や抗
生物質などが用いられているが、これらは一般に毒性が
強く、副作用を呈するという欠点があった。

２．７．１１−セングラトリエン−４，６−ジオール（
以下ＧＯＴと記載する）は、タバコ植物に特有の葉面樹
脂成分としてタバコ葉に多量含有され、タバコの品質や
喫煙時の香喫味の発現に関与していることはよく知られ
ている。しかしながら、この化合物の生理作用について
は、植物の生長抑制作用と、植物病原菌、特に、うどん
こ病に対して防除効果のあること（特開昭５８−１５７
７０４）が明らかにされているにすぎない。

［発明の目的］ この発明の目的は、優れた抗腫瘍効果を有し、かつ、正
常細胞に対する毒性が極めて低く、突然変異性も示さな
い、抗腫瘍剤を提供することである。

［発明の概要］ すなわち、この発明は、 で示される２、７．１１−セングラトリエン−４，６−
ジオールを有効成分とする抗腫瘍剤を提供する。

［発明の効果］ この発明の抗腫瘍剤は、高い抗ｌｌ！瘍効果を有し、正
常細胞に対する毒性が極めて低く、突然変異性も示さな
い。従って、ガンの発生が疑われる場合のガン予防効果
、ガンの存在が確認された場合の抗腫瘍効果、ガン組織
切除後のガン再発防止等を目的として長期間にわたって
安全に使用することができる。

［発明の詳細な説明］ この発明の抗腫瘍剤の有効成分は、下記式［１］　で表
わされる２、？ｊｌ−センブラトリエンー４．８−ジオ
ール（ＣＢＴ）である。

式［１１ 式［１１で表わされるＣＲＴには下記式［Ｉ［］　で表
わされるＩＳ、２Ｅ、４Ｓ、８Ｒ，７Ｅ、ＩＩＥ−２，
７，１１−センプラント’Ｊ　ｘン−４，８−シ；１ｒ
−ｊｌｚ　（ａ−ＣＢＴ）及び式　［ＩＩＩ］テ表わさ
れるＩｓ、２Ｅ、４Ｒ，８Ｒ，７Ｅ、ＩＩＥ−２，７，
１１−センブラントリエン−４，６−ジオール（β−Ｃ
ＯＴ）の２つの立体異性体が存在する。後の実施例にお
いて明らかにされるようにα−ＣＲＴ、β−ＣＯＴとも
抗腫瘍効果を有しているので、これらのうちの少なくと
もいずれか一方が含まれていればよい、また１式［ｍ、
［ＶＩ　で示されるように、　ＣＲＴはデュバトリエン
型で表示することも少なくない、従って、式［ＩＶｌ　
。

［ＶＩ　で表わされる４、８．１３−デュバトリエンー
１，３−ジオールを有効成分とする抗腫瘍剤も本願発明
の抗腫瘍剤に包含される。

式［Ｉ［］　　　　　式［ＩＩＩ］ Ｈ 式［ＩＶｌ　　　　　　　式［Ｖ］ 上記ＣＲＴは次のようにして得ることができる。タバコ
の生葉又は乾燥葉を有機溶媒、例えばヘキサン、エーテ
ル、クロロホルム、ジクロルメタン等に短時間浸漬し、
タバコ葉面樹脂成分を抽出する。これを濃縮後、シリカ
ゲルカラム法によりヘキサンと酢酸エチル又はエーテル
含有ヘキサンで順次溶出し、ＣＲＴ高含有画分を得る、
これをａｗｉ後、高速液体クロマトグラフィー又はアル
ミナによるカラムクロマトグラフィーによりα−ＣＢＴ
とβ−ＣＢＴを分離する。この方法により、例えばタバ
コ生葉１０ｋｇから非結晶性のα−ＣＢＴを６ｇ、結晶
性のβ−ＧＢＴを２ｇ得ることができる。

この発明の抗腫瘍剤の成人１日当りの投与量は、患者の
症状に応じて適宜定められるが、通常、体重ＩＫｇ当り
１ｍｇ　”　１０ｈｇである。

投与経路は、経口、皮下注射、静脈注射、局所的投与な
どが好ましい。

また、投与剤の形態は、製薬上許容し得る賦形剤又は溶
剤との混和により常法で製剤した散剤、顆粒、錠剤、カ
プセル、注射液、局所用剤などどのようなものであって
もよい。

ＧＯＴの抗腫瘍効果は、ビタミンＡ酸とその関連化合物
の作用にみられるように、前ガン状態にある組織の正常
組織への分化の促進あるいは前ガン細胞の悪性細胞への
転換を阻止すること、さらには発ガンプロモーションの
抑制によって生じると考えられ、この点においてガンの
成立過程にある組織に対して治療効果を発揮する。また
、ＣＯＴは、一般に使用される抗ガン療法や放射線療法
によってもたらされるような免疫抑制を軽減すると同時
に、腫瘍細胞の増殖を抑■１することによって正常細胞
の４！［に特段の影響を及ぼすことなく、抗腫瘍効果を
生じるものと考えられる。

１凰■」 ＣＲＴの製造 発蕾期のタバコ生葉１０ｋｇを５１Ｊ　−／　）ルのジ
クロルメタンに３０秒間浸漬する操作を２回繰り返し、
タバコの葉面樹脂成分を抽出した。ジクロルメタン抽出
物中の不溶物をろ過除去後、４０℃以下で溶媒を減圧蒸
留した。得られた濃縮物に２０１水含有メタノール５０
０１　とヘキサン５００１　を加えて振盪抽出した。こ
の操作により、　ＣＲＴはメタノール層に移行した。こ
のメタノール層を４０℃以下で減圧濃縮し、ヘキサン−
酢酸エチル（８０：２０）溶媒１００ｗ１　に溶かし、
これにシリカゲル（Ｗａｋｏ　ｇｅｌ　Ｇ−２００）５
ｇを加えて４０℃以下で溶媒を減圧留去した０次に１５
０ｇのシリカゲルを充填したカラム（内径５ｃ＋ｗ　ｘ
高さ８５ｃ■）の上層部に、先に得た抽出物吸着シリカ
ゲルを載せ、ヘキサンに次いでヘキサン−酢酸エチル（
７０：３０マハ）で溶出した。

Ｃ８丁はヘキサン−酢酸エチルでほぼ完全に溶出される
。この溶出部を４０℃以下で減圧濃縮し、１３ｇの粗Ｃ
ＲＴ抽出部を得た。この抽出部０．５ｇを少量のアセト
ニトリル−水（８０：４０マ／マ）に溶かし。

ＪＬＢａｎｄａｐａｋ　Ｃ（ウォーターズ）を付した高
速液体クロマトグラフ装置によりアセトニトリル−水（
７０：３０）で溶出するとα−ＧＢＴとβ−ＣＢＴが完
全に分離して溶出した。この操作を繰り返すことにより
、１０ｋｇのタバコの生葉からα−ＣＢＴ　１３ｇとβ
−〇Ｂ７２ｇを得ることができた。

支１亘」 ＣＢＴの抗腫瘍効果 ６週令のｒｃＲ−ＪＣＬ雌マウマウス腔内にｓａｒｃｏ
ｍａ−１８０細胞を接種し、１週間後にそのガン細胞１
ｘｌＯ’個を他のマウスの腋下部皮下に移植した。上記
実施例１で得られたα−ＣＲＴとβ−ＣＲＴをそれぞれ
オリーブ油に溶かし、ガン細胞移植２４時間後から、隔
日に１０回、　１０ｍｇ／ｋｇ、　５０層ｇ／ｋｇ＋１
００ｍｇ／ｋｇの濃度で腹腔内投与した。また、対照群
に対しては、　ＣＲＴを含まないオリーブ油のみを投与
した。試験動物数は投与群、対照群とも各１０匹であっ
た。１０回目の投与２４時間後にＩＩ！瘍結節を摘出し
１次式により腫瘍抑制率を求めた。

（１−Ｂ／Ａ）ｘｔ００％ Ａ：対照群平均腫瘍重量 Ｂ：ＣＢ丁投与群平均腫瘍重量 結果をＳｔ表に示す、第１表より、α−ＣＲＴ及びβ−
ＣＥＩＴとも、５ａｒｃｏ＋１ａ−１８０゛に対して、
投与層に応じた顕著な抗腫瘍性を示した。

ｆ６Ｓ１表 ＣＯＴの５ａｒｃｏ＋５ａ−１８０に対する抗腫瘍効果
丈」ｕｌ】 ７週令のＩＣＲ−ＪＣＬ雌マウマウス中の毛を刈り取り
、この部位の皮膚に１００１Ｌｇのジメチルベンツアン
トラセン（ＤＭＢＡ）を含む０．１１の７七トン溶液を
１回塗布した。　ＤＮＢＡ塗布１週間後に同じ皮膚部位
に１２−〇−テトテデカノイルホルボールー１３−アセ
テート（ＴＰＡ）　０．５１Ｌｇを含む０．１ｍｌのア
セトン溶液を週２回、２５週にわたって塗布した。　（
１：ＢＴの腫瘍発生抑制効果をみるためには、上記ＴＰ
Ａの塗′１ａ４０分前にａ−ＣＲＴ　１ｍｇ又はβ−Ｃ
ＯＴ　１ｍｇを含む０．１１のアセトン溶液を塗布し、
２５週にわたって腫瘍の発生をａ察した。試験動物数は
、各投与群とも３０匹を使用した。腫瘍発生抑制率は次
式により求めた。

（１−Ｄ／Ｃ）　　ｘｌｏＯ％ Ｃ：　ＴＰＡ投与群の腫瘍発生数 Ｄ　：　ＴＰＡとＧＢＴ投与群の腫瘍発生数結果は第２
表に示した。α−ＣＢＴ及びβ−ＣＢＴともにＴＰＡに
よる腫瘍の発生促進に対する顕著な抑制効果が認められ
た。

第２表 １五 （１）急性毒性試験 ６週令のＩＣＲ−ＪＣＬマウス及びウィスターＪＣＬラ
ットを用いて腹腔内及び経口投与により急性毒性を調べ
た。α−ＣＯＴ又はβ−ＣＯＴをそれぞれオリーブ油に
溶かし、腹腔内には注射により、経口的には経口ゾンデ
により強制投与した。試験動物数はｌ用量につき１０匹
を用いた。投与後、７日飼育観察を続け、８日目に屠殺
解剖し、肉眼所見をとった。ＬＤ５゜値は、リー２チフ
ィールド・ウィルコクフン法により求めた。

解剖時の創見所見には特に異常は認められなかった。得
られたＬＤ、。値はｗＳ３表に示した。マウス、ラット
のいずれにおいてもＣＲＴのＬＤ、ｏ値は↓ｇ／ｋｇ以
上であり、ルーミスの分類によるところの「微弱毒性」
の範鴎に属する安全性の高い物質であると言える。

第３表 急性毒性試験（ＬＤｓＤ値） （２）亜急性毒性試験 ６週令のｌ１ｌｌ：Ｒ−ＪＣＬマウスに、オリーブ油に
溶かしたα−ＣＢＴ又はβ−ＣＢＴを１００■ｇ／ｋｇ
連日２０日間。

ゾンデを用いて強制経口投与した。対照は、オリーブ油
のみの投与とした。試験動物数は、各群１０匹とした。

最後の投与２４時間後に層殺し、血液学的検査、解剖所
見、ｉｉｔ器重量の測定、病理組織学的検査に付した。

結果を第４表及び第５表に示す。

！ｓ４表　　血液学的検査 第５表　　主要臓器重量（ｇ） 表かられかるように、血液学的検査並びに臓器重量にお
いて異常は認められなかった。また、体重増加、食餌摂
取量、肉眼的解剖所見及び病理組織学的検査においても
特に異常は認められなかった。

（３）変異原性試験 工−ムスの方法（ミューチージョンリサーチ、１１３巻
、１７３頁、　１９８３年）に従って、サルモネラ・チ
フィムリウム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉｍｕ
ｒｉｕｍ）ＴＡ１５３５．　ＴＡ１５３７．　ＴＡ９Ｂ
、　ＴＡＩＧＯの４菌株を用いて変異原性試験を行なっ
た。

予め４５℃に加温しておいた軟寒天（０，０５ｍにのヒ
スチジンとビオチンを含む）２■ｌに、Ｓａ１ｍｏｎｅ
ｌｌａ菌液０．１ｍ１（２ｘ　　１Ｇ　　菌数）　５９
ｍ１ｘ０．５■ｌ　　（ラット肝ホモジネートの９００
０ｇ遠心上清にニコチンアデニンジヌクレオチドを加え
たもの）、又はリン酸バッファーＯＪ履Ｉ、α−ＣＲＴ
又はβ−ＣＲＴのジメチルスルホキサイド溶液０．１１
を順次加え、攪拌後、寒天プレート上に注入して拡げた
。これを３７℃で２日間数ｊｔ後、寒天プレート上に生
じたコロニーを計測し、復帰突然変異数とした。

結果を第６表及び第７表に示す、５９ｗ１ｘの添加、無
添加の両条件下においてＴＡ１５３５．　ＴＡ１５３７
゜ＴＡ９８．　丁ＡＩＱＯのいずれの菌株においてもα
−ＧＢＴ及びβ−ＣＢＴの突然変異性は認められず、安
全性の高い化合物であることが示された。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式▲数式、化学式、表等があります▼ で示される２，７，１１−センブラトリエン−４，６−
   ジオールを有効成分とする抗腫瘍剤。