JPS6019498A - 発酵法によるｌ−フエニルアラニンの製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−フエニルアラニンの製造法Info
- Publication number
- JPS6019498A JPS6019498A JP12787683A JP12787683A JPS6019498A JP S6019498 A JPS6019498 A JP S6019498A JP 12787683 A JP12787683 A JP 12787683A JP 12787683 A JP12787683 A JP 12787683A JP S6019498 A JPS6019498 A JP S6019498A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- phenylalanine
- proteus
- fermentation
- cultured
- production
- Prior art date
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- Pending
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によりＬ−フェニルアラニンを製造する
方法に関するもので、よ抄詳しくはプロテウス属に属し
、Ｌ−フェニルアラニン生産能を有する微生物を培地中
で培養し、この培養物よゎＬ−フェニルアラニンを採取
することを特徴とすルＬ−：ｙエニル７ラニンの製造方
法に関するものである。
方法に関するもので、よ抄詳しくはプロテウス属に属し
、Ｌ−フェニルアラニン生産能を有する微生物を培地中
で培養し、この培養物よゎＬ−フェニルアラニンを採取
することを特徴とすルＬ−：ｙエニル７ラニンの製造方
法に関するものである。
Ｌ〜フェニルアラニンは人体蛋白質の構成成分で、かつ
必須アミノ酸の一種であり、また医薬品。
必須アミノ酸の一種であり、また医薬品。
化学薬品、おるいは食品添加物としても今後需要の増大
することが見込まれる重要な物質である。
することが見込まれる重要な物質である。
従来、Ｌ−フェニルアラニンの発酵による製造法として
はプンビパクテリウムあるいはコリネバクテリウムに属
する微生物を使用する方法が知られているが、本発明の
プロテウス属に属する微生物がＬ−フェニルアラニンを
生産した事実は未だ知られていない。
はプンビパクテリウムあるいはコリネバクテリウムに属
する微生物を使用する方法が知られているが、本発明の
プロテウス属に属する微生物がＬ−フェニルアラニンを
生産した事実は未だ知られていない。
本発明者らはプロテウス属に属する微生物を用いて糖類
からの直接発酵によりＬ−フェニルアラニンを製造する
方法を開発すべく研究を行った結果プロテウス・レトゲ
リの一栄養要求性変異株が炭素源、鼠素源、無機物およ
び該微生物の必要とする栄養素を含む培地に培養したと
ころ培養液中にＬ−フェニルアラニンが生成蓄積するこ
とを見い出し２Ｆ０ 本発明は上記知見に基づいて完成されたものでおる。
からの直接発酵によりＬ−フェニルアラニンを製造する
方法を開発すべく研究を行った結果プロテウス・レトゲ
リの一栄養要求性変異株が炭素源、鼠素源、無機物およ
び該微生物の必要とする栄養素を含む培地に培養したと
ころ培養液中にＬ−フェニルアラニンが生成蓄積するこ
とを見い出し２Ｆ０ 本発明は上記知見に基づいて完成されたものでおる。
本発明で使用する微生物はプロテウス属に属するＬ−フ
ェニルアラニン生成蓄積能を有する微生物で例えばプロ
テウス・レトゲＩＪ Ｎ Ｋ −８３００１（微工研菌
寄第７０６９号）などがあげられる。
ェニルアラニン生成蓄積能を有する微生物で例えばプロ
テウス・レトゲＩＪ Ｎ Ｋ −８３００１（微工研菌
寄第７０６９号）などがあげられる。
この微生物は親株プロテウス・レトゲリＡＴＣＣ２１１
８株にＸ線、紫外線、薬剤処理などの変異処理すること
により得られる栄養要求性変異株であり、トリプトファ
ンを要求する点およびＬ−フェニルアラニンを生成蓄積
する点で親株と具なる。
８株にＸ線、紫外線、薬剤処理などの変異処理すること
により得られる栄養要求性変異株であり、トリプトファ
ンを要求する点およびＬ−フェニルアラニンを生成蓄積
する点で親株と具なる。
具体的にはプロテウス・レトゲリＡＴＣＣ２１１８株を
Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンで
処理し、栄養寒天平板（培地、ディフコｎｏｏｋ；肉゛
エキス０，８％、ペプトン０．５チ食塩０．８係、アー
ガー１．５％）へ散布、培養（６０℃）し、コロニーを
形成させた後最小寒天平板（Ｍ−５６最小培地ｉ Ｎａ
２ＨＰ○４−７Ｈ２０８，２Ｆ 。
Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンで
処理し、栄養寒天平板（培地、ディフコｎｏｏｋ；肉゛
エキス０，８％、ペプトン０．５チ食塩０．８係、アー
ガー１．５％）へ散布、培養（６０℃）し、コロニーを
形成させた後最小寒天平板（Ｍ−５６最小培地ｉ Ｎａ
２ＨＰ○４−７Ｈ２０８，２Ｆ 。
ＫＨ２ＰＯ４，２，７Ｆ、（ＮＨ４）２Ｓｏ４１．Ｏｆ
、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２００，２５ｑｌ、ＭＷＦＪＯ４
，７Ｈ２００，１ｆ ％Ｃａ（、Ｎ０３）２５ ｍ？、
グルコース２２、Ｉ）Ｈ７，２）にレプリカ法により移
植し最小−太平板上で生育不能のコロニー中にＬ−７工
ニルアラニン分泌能を有する株を検索してＮＫ−８３０
０ｊ株を得たのである。
、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２００，２５ｑｌ、ＭＷＦＪＯ４
，７Ｈ２００，１ｆ ％Ｃａ（、Ｎ０３）２５ ｍ？、
グルコース２２、Ｉ）Ｈ７，２）にレプリカ法により移
植し最小−太平板上で生育不能のコロニー中にＬ−７工
ニルアラニン分泌能を有する株を検索してＮＫ−８３０
０ｊ株を得たのである。
本発明で使用される培地の炭素源としてはグルコース、
イノーシトール、マンノース、シュークロースなどが好
適であ銖窒素源としては尿素、硫安。
イノーシトール、マンノース、シュークロースなどが好
適であ銖窒素源としては尿素、硫安。
塩安、クエン酸アンモニウムなどが使用できる。
無機物としてはナトリウム、カリウム、カルシウム、マ
グネシウム、塩素、燐酸などの塩類が使用できる。また
生育に必要な栄養素としてトリプトファンまたはその含
有物が使用されるが含有物としてはコーンステープリカ
ー、ペプトン、肉エキ２、酵母エキスなどが好適である
。
グネシウム、塩素、燐酸などの塩類が使用できる。また
生育に必要な栄養素としてトリプトファンまたはその含
有物が使用されるが含有物としてはコーンステープリカ
ー、ペプトン、肉エキ２、酵母エキスなどが好適である
。
培養は振盪培養、通気攪拌培養など好気的条件下で行い
、培養中のｐＨは６．０〜Ｂ、０、温度は３０〜３７℃
が好適である。培養は通常２〜４日間行えばよく培養終
了液からのＬ−フェニルアラニンの分離は炭末吸着法、
イオン交換樹脂法など公知の方法で行うことができる。
、培養中のｐＨは６．０〜Ｂ、０、温度は３０〜３７℃
が好適である。培養は通常２〜４日間行えばよく培養終
了液からのＬ−フェニルアラニンの分離は炭末吸着法、
イオン交換樹脂法など公知の方法で行うことができる。
実施例
ペプトン１％、肉エキス１％、酵母エキス０．５チ、食
塩０．３チ、ｐＨ６，８よりなる培地にプロテウス・レ
トゲリＮＫ−８３００４％を接種し２４時間培養したも
のを種培養として使用する。別にグルコ−ス５％＋ ａ
安２％、コーンステープＩＪ カー１％、燐酸二カリ
ウムｏ、１％、硫酸マグネシウム０．０５％、炭酸カル
シウム２％、ｐＨ７よりなる培地５０ｒｄを５００ｉ＋
！容三角フラスコに分注し殺菌後裔フラスコに上記種培
養液２ ｒｒｔｌを接種し５０℃で５日間培養を行った
。
塩０．３チ、ｐＨ６，８よりなる培地にプロテウス・レ
トゲリＮＫ−８３００４％を接種し２４時間培養したも
のを種培養として使用する。別にグルコ−ス５％＋ ａ
安２％、コーンステープＩＪ カー１％、燐酸二カリ
ウムｏ、１％、硫酸マグネシウム０．０５％、炭酸カル
シウム２％、ｐＨ７よりなる培地５０ｒｄを５００ｉ＋
！容三角フラスコに分注し殺菌後裔フラスコに上記種培
養液２ ｒｒｔｌを接種し５０℃で５日間培養を行った
。
その結果各フラスコ培地中に平均して１．２？／ｌのＬ
−フェニルアラニンが蓄積した。培養液を集めて１ｔと
し遠心分離により菌体および不溶の炭酸カルシウムを除
去した。これをダウエックス５０■型（ダウ・ケミカル
社製、強酸性陽イオン交換樹脂）の樹脂塔を通過させて
Ｌ−フェニルアラニンを吸着し水洗後、１規定塩酸を溶
出剤としてＬ−フェニルアラニン含有区分を集め７’Ｃ
’ｏプール液を濃縮、乾固して塩酸を除去した後少量の
水に浴解しアンモニア水で中和してＬ−フェニルアラニ
ンの粗結晶０・６ｆを得た。粗結晶を水・エタノールよ
り再結晶芒せＬ−フェニルアラニン結晶５００■を得た
。
−フェニルアラニンが蓄積した。培養液を集めて１ｔと
し遠心分離により菌体および不溶の炭酸カルシウムを除
去した。これをダウエックス５０■型（ダウ・ケミカル
社製、強酸性陽イオン交換樹脂）の樹脂塔を通過させて
Ｌ−フェニルアラニンを吸着し水洗後、１規定塩酸を溶
出剤としてＬ−フェニルアラニン含有区分を集め７’Ｃ
’ｏプール液を濃縮、乾固して塩酸を除去した後少量の
水に浴解しアンモニア水で中和してＬ−フェニルアラニ
ンの粗結晶０・６ｆを得た。粗結晶を水・エタノールよ
り再結晶芒せＬ−フェニルアラニン結晶５００■を得た
。
特許出願人 日本化薬株式会社
Claims (1)
- （１） プロテウス属に属し、Ｌ−フェニルアラニン生
成蓄積能を有する微生物を培地中で培養してＬ−フェニ
ルアラニンを生成蓄積せしめ、ついでこの培養物からＬ
−フェニルアラニンを採取することを特徴とするＬ−フ
ェニルアラニンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12787683A JPS6019498A (ja) | 1983-07-15 | 1983-07-15 | 発酵法によるｌ−フエニルアラニンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12787683A JPS6019498A (ja) | 1983-07-15 | 1983-07-15 | 発酵法によるｌ−フエニルアラニンの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6019498A true JPS6019498A (ja) | 1985-01-31 |
Family
ID=14970823
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12787683A Pending JPS6019498A (ja) | 1983-07-15 | 1983-07-15 | 発酵法によるｌ−フエニルアラニンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6019498A (ja) |
-
1983
- 1983-07-15 JP JP12787683A patent/JPS6019498A/ja active Pending
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